JP5327218B2 - 万能殺菌消毒液 - Google Patents
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Description
(1)抗菌スペクトルの範囲が広い
(2)短時間の接触で殺菌しえる(速効性)
(3)安定性が高く殺菌作用が持続する
(4)有機物の存在下でも効力の低下が少ない
(5)生体に対して害が少ない(低毒性)
(6)水に溶けやすく使用方法が簡便である
(7)浸透性が強い
(8)不快臭がない
(9)安価である
(10)保存性がよい
(11)廃棄しやすい
(12)使用対象物を損傷しない、これらに加えて
(13)耐性菌を作らせない
が挙げられる。
翻って21世紀に至り、社会全般がまた国民の目線からも「安心と安全」が何よりも重要視され最優先される時代に移り変わって来た。
該殺菌液は食品添加物としても使用認可の数種類の化合物から構成され低毒性にも関らず結核菌やピロリ菌の撲滅に複数の薬剤を併用するのと同じ原理で耐性菌の出現を押さえ込む。それに加えて抗菌スペクトルが広く芽胞にも有効である等優れた特質を有している。しかしながら、前記鉄イオン含有殺菌液について本発明者らがさらに研究を進めたところ、主成分であるFe3+イオンの影響で殺菌液そのものも使用対照物も漸次着色すること(放置の場合)並びに殺菌液の臭気と味の点、また消毒目的で作物に撒布した場合、その成長に一部弊害が生じる等、使用者にとって必ずしも100%満足しえる殺菌液ではないことが判明してきた。また、前記鉄イオン含有殺菌液は、種々の病原菌に対しての殺菌力に優れているものの、ウイルスに対する殺傷力がまだ満足のいくものではなかった。
本発明者らはこれらの知見を踏まえて、生命の基本物質で生体に親和性の高いアミノ酸、ビタミン及びミネラルを主成分とし、それに日常生活の必需品で長年の使用実績で安全性が確立している界面活性剤等の微量を組合せることで人及び動植物にはほぼ無毒でありながらその相乗効果で広範囲にわたる病原微生物に対して高い殺菌力を示し、殆どあらゆる対象物に使用可能な従来の概念にはなかった理想的な万能殺菌消毒液の開発に成功した。
[1]抗菌作用を有する金属イオンの1種又は2種以上とL−システイン並びにL−アスコルビン酸を主成分として、この主成分に非イオン系を除く界面活性剤20〜100ppmを含有することを特徴とする殺菌消毒液、
[2]抗菌作用を有する金属イオンが(III)価の鉄イオン(Fe3+)、(II)価の鉄イオン(Fe2+)、亜鉛イオン(Zn2+)、銅イオン(Cu2+)、コバルトイオン(Co2+)、ニッケルイオン(Ni2+)又は銀イオン(Ag+)である前記[1]に記載の殺菌消毒液、
[3]抗菌作用を有する金属イオンの濃度が(III)価の鉄イオンでは50〜200ppm、(II)価の鉄イオンでは110〜400ppm、亜鉛イオンでは7.5〜125ppm、銅イオンでは15〜60ppm、コバルトイオンでは180〜300ppm、ニッケルイオンでは85〜175ppm及び銀イオンでは1〜3ppmである前記[2]に記載の殺菌消毒液、
[4]L−システインの濃度が100〜1000ppm及びL−アスコルビン酸の濃度が100〜500ppmである前記[1]乃至[3]のいずれか1項に記載の殺菌消毒液、
[5]非イオン系を除く界面活性剤がアルキルベンゼンスルホン酸塩、直鎖アルキルベンゼンスルホン酸塩、ポリオキシエチレンアルキルエーテル硫酸塩、高級アルコール硫酸エステル塩、ラウリル硫酸ナトリウム、ラウロイルサルコシンナトリウム、塩化ステアリルジメチルベンゼンアンモニウム、塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼントニウム、塩酸アルキルジアミノエチルグリシン及び塩酸アルキルポリアミノエチルグリシンからなる群より選ばれる1種以上である前記[1]乃至[4]のいずれか1項に記載の殺菌消毒液、
[6]ソルビン酸、ソルビン酸塩、安息香酸、安息香酸塩並びにパラオキシ安息香酸エステルからなる群より選ばれる1種以上をさらに含有した前記[1]〜[5]のいずれか1項に記載の殺菌消毒液、
[7]ソルビン酸、ソルビン酸塩、安息香酸、安息香酸塩及びパラオキシン安息香酸エステルの濃度が50〜100ppmである前記[6]に記載の殺菌消毒液、
[8]pHが2.5乃至4.0に調整された前記[1]乃至[7]のいずれか1項に記載の殺菌消毒液、
[9]前記[1]乃至[8]のいずれか1項に記載の殺菌消毒液を処理対象物に接触させる殺菌方法であって、
前記処理対象物が、環境、器具、動物体、植物体又は有機物であることを特徴とする殺菌方法、
に関する。
(1)金属イオンの再検討(ミネラル成分の検証、検討)
ミネラルは5大栄養素の一つであり、生体内で様々な生理作用を担い生命の根源たる酵素の中核となり又触媒として機能している。
尚、後述の本明細書でのデータ等では「ミネラルイオン」を一般的な慣用語の「金属イオン」に統一して記載する。
下記に示す標準生菌数測定用培地に夫々の金属イオンを濃度を変えて添加して、ついで供試菌の懸濁液(1×109cells/生食水ml)を1重量%接種後、常法に従い経時的に生菌数を測定し、その消長から各金属イオンと抗菌活性との相関関係を観察し第1表にまとめた。
○供試菌:グラム陽性の代表としてS.aureus 209P
:グラム陰性の代表としてE.coli 0−157
○標準生菌数測定用培地:酵母エキス2.5g、ペプトン5g、ブドウ糖1g、寒天15g、pH7.2
例えばCu2+の場合、増殖抑制作用は10〜50ppmで静菌作用は40〜150ppmの範囲内で発現し150ppm以上になれば殺菌作用として働く。
尚上表では夫々の金属イオンの代表的な化合物のみを記載したが水に可溶し、イオンとなる他の化合物、例えばFe3+イオンについては塩化第二鉄、硝酸第二鉄・六水和物、硝酸第二鉄・九水和物、硝酸第二鉄・n水和物、リン酸第二鉄・n水和物、クエン酸第二鉄・n水和物等、Fe2+イオンについては塩化鉄・四水和物、グルコン酸鉄、クエン酸鉄、蓚酸鉄等、Zn2+についてはクエン酸亜鉛・二水和物、グルコン酸亜鉛等、Cu2+については塩化銅・二水和物、塩化二アンモニウム銅・二水和物、硝酸銅・三水和物等、Co2+についてはグルコン酸コバルト三水和物、水酸化コバルト、クエン酸コバルト等、Ni2+については硝酸ニッケル等並びにAg+については硫酸銀、リン酸銀等についても類似の成績を示した。
(2)第1表(1)、(2)の結果を踏まえて、次に各金属イオンを溶解せしめた水溶液(精製水28℃)に供試菌懸濁液(1×109cells/水1ml)を1重量%添加、接触せしめて経時的に0.2mlずつ採取、直ちに常法に従い生菌数を計測し、死滅率を計測することにより、金蔵イオンの濃度と抗菌活性との相関関係を推察した。尚供試菌としてStaphylococcus aureus 209PとEscherichia coli 0−157とを採用したが2株とも類似の成績を示したのでその平均値を以下の第2表に示した。
上記第1表、第2表に於ける金属イオンに関する試験データから、
<1>培地に金属イオンを添加し、菌の増殖が抑制されれば、その濃度でも殺菌作用へのルートが連がっていること。
<2>短い接触での殺菌を期待する場合は菌の増殖抑制作用が明瞭に示される濃度から静菌作用が明瞭に現れる濃度の範囲内で充分なこと(図1の斜線の部分)、
<3>すなわち殺菌作用を示す濃度で菌を接触せしめても極だった殺傷能力は期待出来ないこと、
<4>従って安全性の事も勘案して<2>で示した濃度の範囲内に止めて、それで不充分な点を補完する事により強い殺菌作用を最大限引き出す方が理にかなっていること
が推察されるに到った。
次に、特許文献1ではFe3+イオンの殺菌効果を強化し、確かなものとする目的で食品保存剤を添加している。
そこで、本発明者らはこれ等の事柄について精査した。
ソルビン酸、ソルビン酸塩、安息香酸、安息香酸塩、及びパラオキシ安息香酸エステル類等の食品保存剤は殺菌性は乏しく静菌性として作用する。微生物の脱水素酵素系の作用を阻害してその発育に障害を与えるとされている。
前記の金属イオンに引き続き同様の試験を行い下記第3表に食品保存剤の濃度とa)菌の増殖抑制作用並びにb)静菌作用との相関関係についてまとめた。
上記第3表の成績を踏まえて金属イオンの場合と同様の試験を行なった。尚、酸性側で効力が増大される為、pH3.0に調整した。
濃度の異なる7種の金属イオンと濃度の異なる5種の食品保存剤との組み合わせテストは膨大な量に及んだが結論として前記増殖抑制作用と静菌作用にまたがる濃度の金属イオン水に食品保存剤を添加する場合、その添加量を200ppm以上にすれば鉄イオンFe3+、Fe2+を除いて他の金属イオンはその殺菌効果はむしろ弱化する事、そして微量添加(50〜100ppm)で始めて相加的な効果が生じる事が明らかとなった。(図2を参照)
次にL−アスコルビン酸について若干触れる事とする。
L−アスコルビン酸(ビタミンC)は生体に必須であり生体組織に馴染みよく少量を添加する事で細胞組織への親和性が増大する。本発明者らが検討したところ、L−アスコルビン酸の水溶液そのものの抗菌作用は無きに等しいが強い抗酸化作用で金属イオンと食品保存剤の安定化と活性の維持、持続に寄与、同時に細菌等の有機物に接触すると金属イオンの抗菌作用を増幅し病原体に強い障害をもたらすことが判明した。
但しL−アスコルビン酸の添加量が多いケースでは逆に抗菌効果を滅衰せしめる事も明らかとなった。
例えば、Fe3+イオン500ppm以上使用するケースでは500〜2000ppmの濃度が推奨されるが本発明の金属イオンの極微作用を充分に引き出す目的にはそれ以下の濃度すなわち100〜500ppmが好ましいこと、尚後記するL−システインや界面活性剤等の使用とその添加量によっては必ずしも必須としないことも確認された。
さらに増強物質の食品保存剤の一定量以上の添加がその着色化を一層促進させている事も確認された。(酸化反応)
すなわちFe3+イオンを始めとする構成成分の多寡、濃度が上記様々な問題を引き起こす要因となっている事がわかった。
従ってこれら問題点を一挙に解消するべく鋭意検討した結果、今回Fe3+だけでなく極微作用を有するFe2+、Zn2+、Cu2+、Co2+、Ni2+、Ag+各イオンを採用し、動植物や環境に対する安全性を考慮しその使用量を最小限に抑えつつ、その作用を最大限引き出す事、食品保存剤は金属イオンの濃度が低い時は相加作用が小さい為基本的には使用しない事。(使用する時は微量)
さらにL−アスコルビン酸も上記成分の添加量が少ないため少量添加で充分であること、これ等を基本線にして(A)上記抗菌作用を有する金属イオン成分に加えてさらなる殺菌力の強化に寄与せしむる化合物の検索と(B)それ等を素速く病原体内部に浸透せしむる方法を模索することとした。つまり、前記(A)と(B)とを組み合わせることで、抗菌作用を有する金属イオンの極微作用を極限まで引き出すことが可能になると考えた。
以下、本発明の殺菌消毒液について説明する。
本発明の殺菌消毒液は、抗菌作用を有する金属イオンとL−システイン並びにL−アスコルビン酸を主成分として、この主成分に非イオン系を除く界面活性剤を含有することを特徴とする。
抗菌作用を有する金属イオンとしては、前記〔I〕項で検証した各種の金属イオンであればよく、(III)価の鉄イオン(Fe3+)、(II)価の鉄イオン(Fe2+)、亜鉛イオン(Zn2+)、銅イオン(Cu2+)、コバルトイオン(Co2+)、ニッケルイオン(Ni2+)又は銀イオン(Ag+)が挙げられる。これらの金属イオンは単独でも併用してもよい。
本発明の殺菌消毒液中の前記金属イオンの量としては、所望の殺菌力が得られるように適宜調整すればよいが、例えば、鉄イオンでは50〜200ppm、(II)価の鉄イオンでは110〜400ppm、亜鉛イオンでは7.5〜125ppm、銅イオンでは15〜60ppm、コバルトイオンでは180〜300ppm、ニッケルイオンでは85〜175ppm及び銀イオンでは1〜3ppmであることが好ましい。
L−システインは含硫アミノ酸の一種で皮膚の代謝に不可欠な成分でコラーゲンの生成を助けL−アスコルビン酸と協働してメラニンの発生を抑制する。皮膚、爪、髪の主要構成成分で体内に広く分布している。そして意外にもL−システインそのものも用い方次第で抗菌作用を発現するのみならず、分子構造中にSH基(硫黄と水素の結合したチオール基)と抗菌性の金属イオンとが結合、活性を増幅して強い殺菌性を発現、DNA阻害、酵素の失活、代謝機能の阻害、蛋白の変性またフリーラジカルの発生により菌体破壊を促進せしめる。強い抗酸化作用と還元作用で構成成分の安定性に寄与し、生体親和性が高く病原体に強く付着してひいては浸透性を助長しうる役割を担う。その至適濃度は含有する金属イオンの種類とその濃度により若干異なるが、イオン濃度の数倍程度が好ましい。例えば、本発明の殺菌消毒液中におけるL−システインの含有量は、100〜1000ppmが好ましい。
L−アスコルビン酸の作用については前記の通りである。本発明の殺菌消毒液中におけるL−アスコルビン酸の含有量は、100〜500ppmであることが好ましい。
界面活性剤の基本構造は油になじみやすい親油基と水になじみやすい親水基から成り立ち、その作用は湿潤、吸湿、浸透、可溶性、乳化、分散、起泡、潤滑、洗浄、帯電防止、吸着、皮膜形成、抗菌、細胞膜撹乱、防錆、等幅広い。主用途は合成洗剤、台所洗剤、歯磨、リンス、乳化剤、柔軟剤等我々の日常生活の中にすっかり溶け込み、今やなくてはならないものとして認知されている。
界面活性剤の多くは上記作用を多少なりとも持ち合わせてはいるが「殺菌消毒」という視点と目途から鑑みて本発明に使用して優れた効果を発揮しうる非イオン系を除く界面活性剤としては、以下の陰イオン系界面活性剤、陽イオン系界面活性剤、両性界面活性剤が挙げられる。
(陰イオン系界面活性剤)
アルキルベンゼンスルホン酸塩(ABS系)、直鎖アルキルベンゼンスルホン酸塩(LAS系)、ポリオキシエチレンアルキルエーテル硫酸塩(AES系)、ラウリル硫酸ナトリウム、ラウロイルサルコシンナトリウム、高級アルコール硫酸エステル塩(AS)
(陽イオン系界面活性剤)
塩化ステアリルジメチルベンジルアンモニウム、塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼントニウム
(両性界面活性剤)
塩酸アルキルジアミノエチルグリシン、塩酸アルキルポリアミノエチルグリシン
前記非イオン系を除く界面活性剤は、1種又は2種以上を組み合わせて用いてもよい。
本発明の殺菌消毒液は、ソルビン酸、ソルビン酸塩、安息香酸、安息香酸塩、及びパラオキシ安息香酸エステル類からなる群より選ばれる1種以上を含有することで、殺菌力を向上することが可能になる。
前記ソルビン酸塩としては、ソルビン酸カリウム、ソルビン酸ナトリウムが挙げられる。また、安息香酸塩としては、安息香酸カリウム、安息香酸ナトリウム、安息香酸カルシウム、安息香酸アンモニウム、安息香酸亜鉛が挙げられる。
前記ソルビン酸、ソルビン酸カリウム、安息香酸、安息香酸ナトリウム、及びパラオキシ安息香酸エステル類の殺菌消毒液中の濃度は、50〜100ppmが好ましい。
また、本発明の殺菌消毒液では、酸性に調整とすることで、殺菌消毒液の構成成分の力価の維持と安定性に貢献すると同時に、病原体内部への浸透をサポートする。本発明の殺菌消毒液のpHは2.5〜4.0であることが好ましい。なお、pHの調整には、公知のpH調整剤を使用することができる。
濃度の異なる溶液が半透膜で仕切られている時、濃度の薄い溶液が高い方へと浸み込む現象を浸透といいその強さを浸透圧という。本発明の殺菌消毒液を構成する前記の主要成分は何れも細胞組織への親和性が高い。従ってその構成成分を可能な限り少量にする事により(濃度が薄い)濃度の高いほうへ(菌体内部)浸透する力が加わって即効性のある殺菌消毒液へと変容を遂げる。
殺菌消毒液に限らず高い濃度のものの方が効き目が強いとの神話は一般的な知識として根強い。これに対して、本発明の殺菌消毒液のように主要成分の量が微量でも十分な殺菌作用が生じえる現象は、低い濃度、又濃度が低ければ低いほど、より有効となる点で、経済性に加えて、安全性に優れた点でも顕著な利点がある。
尚、金属イオンの至適濃度はL−システイン等他の物質の添加量によって多少変動する事は言うまでもない。
芽胞はその形成段階により1分〜120分で崩壊せしめた。(詳細は後述の実施例12)
ウイルスの場合、エンベローブを有する鳥インフルエンザH5N3型は5分の接触で、エンベローブのないノロウイルスでは30分の接触でほぼ失活せしめた。(詳細は後述の実施例13)
また、本発明でいうウイルスとは、鳥インフルエンザウイルス、ノロウイルス、肝炎ウイルス、エイズウイルス、ロタウイルス等を例示することができる。
また、前記環境には、上記の環境に存在している家具類、道具類、器具類、遊具類、装置類等も含まれる。
また、空気中への噴霧を行った場合には、空気の殺菌も行うことができる。
基本的な製造方法は金属イオンを含有する溶液Aと金属イオン以外の成分を含有する溶液Bとを別個に製造し、両者を混和するという方法が好ましい。(溶液A+溶液B=各成分の設定濃度)溶液Aと溶液Bの夫々の容量は等量ずつでもよいが好ましくは1:9又は2:8程度が成分の析出等のトラブルを防ぐ事が出来る。尚、付記するに析出した時はそれを濾過する事で殺菌能力に殆ど影響なく清澄になる。またpHの調整には混和後希塩酸又は希硫酸又は希硝酸を使用するのが好ましい。
溶液A:塩化第二鉄・六水和物0.96gを精製水200mlに溶解する。
溶液B:L−システイン1g、L−アスコルビン酸0.1gソルビン酸カリウム0.05g、ラウリル硫酸ナトリウム0.5gを精製水800mlに溶解する。
次に溶液Aと溶液Bとを混和せしめ、3規定の塩酸1mlを添加して、以下の構成成分から成る殺菌消毒液を作製した。
構成成分:Fe3+イオン200ppm、L−システイン1000ppm、L−アスコルビン酸100ppm、ソルビン酸カリウム50ppm、ラウリル硫酸ナトリウム100ppm(pH3.0)
以下同様の製造方法で各種の本発明殺菌消毒液を作製し製造例2〜10として一覧表(第8表(1)(2))にまとめた。
汎用の殺菌消毒液は有機物の存在下でしばしばその効力が減少する。次亜塩素酸ナトリウム、4級アンモニウム塩やビグアナイド系ではそれが顕著に現われる。本発明殺菌消毒液に対する影響について、製造例1で作製した液で試験した。
クロレラ抽出エキス(CGF)及び市販の合わせ味噌の夫々0.1%並びに1%液を作りそれ等を本殺菌消毒液の1%量並びに5%量を別個に添加した。次に供試菌としてS.aureus(MRSA)及びE.coli0−157の懸濁液(1×109cells/生食水)をそれぞれ1重量%接種した。経時的に100μL採取し、培地に接種37℃で培養し、菌の発育の有無で殺菌効果を観察し、第9表に記載した。
自然環境で細菌が旺盛に増殖するケースは食中毒の例を見る迄もなく栄養豊かな食物の中で生じる。このようなケースに於いても本発明殺菌消毒液は有効に機能しえるのか否かを観察する事にした。これは実施例1の有機物存在下での試験の究極の姿といえよう。
調理後のかやくご飯(ニンジン、薄アゲ、ゴボウ、鶏肉、ひじき入り)、冷やっこ、ダシ巻き、イカの刺身及びカボチャの煮つけのそれぞれを23℃にて24時間放置、その後各調理品の表面に製造例9で作製した本殺菌消毒液を万遍なく噴霧し、その直後から24時間にわたり夫々の一部をサンプリングしてホモゲナイザーで均一にして食物1g中の生菌数を常法に従い計測し第10表に記した。
尚、比較対照としては水及びヒビテン液(グルコン酸クロルヘキシジン0.1%液)を噴霧した。
本試験でのかやくご飯については調理24時間後に2×106個/gの生菌数が48時間後には2.5×108個/gに増殖していた。
同様に冷やっこについては24時間後に1×108個/gに、48時間後には1.5×109個/gに増加し、僅かに腐敗臭を呈していた。
ダシ巻きでは調理24時間後5×106個/g、48時間後には1×108個/gに増加したが官能テストでは特に異常が認められなかった。
イカ刺しに於いては24時間後3×108個/gですでにかなりの腐敗臭を呈し、48時間後には菌数は10倍増(5×109個/g)に増えたに過ぎなかったが強い腐臭を放っていた。
カボチャの煮つけの場合、調理24時間後5×106個/gの生菌数が48時間後8×107個/gに増えてはいたが官能テストでは調理直後と殆ど変らないように見えた。
(以上何れも水のみ噴霧)
上記のように腐敗が少々進行した状態で消毒液を噴霧した場合、本殺菌消毒液では噴霧直後生菌数は1/1000〜1/1万に、1時間後1/1万〜1/100万、5時間後1/10万〜1/1000万に急減し、24時間後には1/100万〜1/1億にまで減少しダシ巻き以外は完全殺菌には到らなかったがこのような極だった腐敗過程に於いても、充分な殺菌効果を示したといっても過言ではなかった。
これに対してヒビテン液の場合、噴霧直後生菌数は1/10〜1/1000に減少、1時間後も減少傾向は続くも5時間後には止まり、それ以降は増加し始め、24時間後にはかなりの菌数に増え、真の意味で殺菌効果は認められなかった。
汎用の消毒液には排泄物(検体)に対し、無効か又はあっても有効性に乏しく使用不適との表示が多い。従って本殺菌消毒液の有効性についてテストする事とした。尚、比較対照として70%エタノール、次亜塩素酸ナトリウム溶液(有効塩素量400ppm)及びヒビテン液を使用した。
5人から喀痰を採取し、混和した後喀痰溶解剤スプラゾルにて前処理しその一部を採取し常法に従い生菌数を計測した。残りの検体に2倍量の各種殺菌消毒液を夫々加え、経時的に検体中の生菌数を計測した。尚本殺菌消毒液は製造例5で作製した液を使用した。(以下の検体の糞便並びに膿に対しても同じ液を使用)
採取した糞便には測定可能な腸内細菌が1.5×1011個/g生息していた。糞便の5倍量の各種殺菌消毒液を加え、よく撹拌、経時的に糞便中の生菌数を嫌気培養法にて計測した。
褥瘡患者からその原因が抗生物質耐性のMRSA主体の膿及び緑膿菌(MDRP)主体の膿を採取し、膿1g当りの生菌数を測定した。次いで2倍量の殺菌消毒液を添加、経時的に検体中の生菌数を常法に従い計測した。
以上(1)(2)(3)の検体に対する殺菌効果については第11表に示した。
これに対して70%エタノールの場合は60分後でも1/1000の減少に止まり5×106個/gも生存していた。次亜塩素酸ナトリウムでは添加後は急激に減少したが以降ほぼその状態で経過し60分後にも5×103個/g生存していた。ヒビテンでも次亜塩とよく似た傾向を示し60分後でも8×104個/gの生存が認められた。
次に糞便中の測定可能な生菌数は1.5×1011個/g存在していたが本殺菌消毒液を5倍量添加した場合5分後おおよそ1/100に15分後1/200万にと減少はしたが60分後でも完全死滅には到らず150個/g程度の生存が確認されたがほぼ完全殺菌しえたといっても過言ではなかった。
これに対して70%エタノール並びにヒビテンでは菌は僅かに減少するだけで無効が実証された。次亜塩では60分後1/1万程度に減少した。(1×107個/g)無効ではないが有効とも言い難い成績であった。
膿の場合、MRSA主体のものとMDRP主体のものとの有為の差は認められず、テストした何れかの殺菌消毒液も有効であった。
すなわち、本発明殺菌消毒液では30分後完全死滅、汎用のものでは60分接触しても完全に死滅には到らなかったが1×102〜5×104個/gにまで激減した。
次にうがいに使用した時、その有効性についてテストした。夫々3名のうがい前の唾液1ml中の生菌数を計測し、次いで製造例6で作製した本発明殺菌消毒液で1回20秒のうがいを3回、すなわち1分間のうがいを行いその直後と15分後、30分後、60分後の唾液を採取、唾液1ml中に含まれる生菌数を計測しうがいの効果を観察した。尚、うがいの前の生菌数を100とした数値で表した。
対照として夫々2名ずつが水道水と1000ppmのポピドンヨードを使用して同様の方法でうがいを行なった。これらの結果を第12表に示す。
対してうがい薬として推奨されるポピドンヨードの場合、直後こそ2%まで減少、以降は徐々に増加、60分後には30〜40%のレベルまで復し、水道水のうがいと大差のない結果となった。
これ等に対して本発明殺菌消毒液を使用した時は直後1〜2%15分後2〜5%、30分後8〜12%、60分後に於いても15〜20%の水準に保って、うがいの効果が長時間持続する事が明らかとなった。尚、本液でのうがいを長期にわたって続ける内に慢性化していた歯肉炎や歯周病が軽減又は完治したという報告にも接した。
手の皮膚面に広く殺菌消毒液を塗布して殺菌効果を見た。
製造例3で作製した殺菌消毒液を塗布直後に滅菌生食水に浸した滅菌ガーゼで10cm2の範囲を拭き取り付着した菌数を測定した。(スワプ法)次に塗布した範囲内を15分後、30分後、60分後に夫々移動しながら10cm2ずつ拭き取り皮膚に付着の菌の消長を観察した。尚比較対照として水道水及び70%エタノールを使用した。消毒液塗布前の菌数を100とした数値で表した。これらの結果を第13表に示す。
これらに対して、本発明殺菌消毒液では直後菌の検出はなく30分後も0.01%の検出率で60分後でも0.04%の検出率に過ぎず有効性が持続する事を確認した。
不特定多数の人々が触れて細菌や真菌に汚染されるドアのノブ(ステンレス製)及び小便用衛生陶器に於ける有効性を病院内の施設にて試験した。清拭直後から通常通り利用し、その後の付着菌の消長と汚染状態を経時的に観察しその結果を第14表に示した。
尚本発明殺菌消毒液は製造例7で作製した液を使用し対照は水道水を使用した。
これに対して水道水では直後こそ1/1000に迄除菌されるが以降付着菌数は増加の一方で24時間後には元の約1/2に48時間後には清拭前の状態に戻った。
小便器のテストでは栄養の補給(尿)もあってかノブに対するほどの有効性は示さなかったが、24時間後でも清拭前の1/10、48時間後でも1/5の菌数に止まっていた。水道水ではノブのケースと同じ傾向を示し、48時間後には元の状態に戻った。
汚れの目立つ床面(P−タイル)に製造例8で作製した本殺菌消毒液を噴霧し時間毎に100cm2ずつを移動しながら濡れた滅菌ガーゼで拭き取り菌数を測定し、その消長を第15表に示した。尚対照には水道水を使用した。
この事は床面が消毒液で濡れている状態では菌が付着しても直ちに殺菌される事を意味している。
約8畳の密閉された室内の空気を容量100mlのシリンジで採取、空気中に含まれる微生物を一般細菌、芽胞並びに真菌類に分類しそれぞれの生息数を測定した。
次に市販のミクロフォガー(アクアマイド社製の超音波噴霧装置UV−200SP)のタンクに製造例9で作製した本発明殺菌消毒液を注入、20ml/分あたり噴霧し(粒子25μm)経時的に100mlのシリンジで定点ポイントで空気を採取、含まれる微生物の生菌数を調べその割合を以下第16表に表した。
真菌の生存率は稼動後5分で35%、30分後8%に減少し60分後には全て死滅した。これに対して芽胞は5分では全く影響を受けなかったがその後は徐々に崩壊減少し120分後にはほぼ崩壊した。(生存率1%)
この事実は開放系の室内でなければ本殺菌消毒液の微粒子の連続噴霧で室内はほぼ無菌状態にしうる事を意味しており、新しいタイプの高性能殺菌空気清浄機(細菌、ウイルスフリー)の開発の可能性を物語っていた。
(1)食中毒の原因食材として野菜類が約30%を占めている事は案外知られていない。残留農薬の問題もあり生食時には流水中で充分に洗浄する事は食中毒を予防する上でも大切なことである。今回、製造例2で作製した本殺菌消毒液の中に野菜(キャベツ、貝割れ、レタス)を2分間浸漬し、次いで水道水で15秒間ゆすいだ後、野菜の単価面積当りに付着の生菌数を経時的に計測した。対照としては上記の野菜を流水中のみで15秒間洗浄したものを使用した。これらの結果を第17表に示す。
(2)魚は表面のみならず鱗の内部に多数生息している病原菌や腐敗菌により腐敗が比較的早く食中毒の代表的な原因食材として周知されている。特に我々日本人は生食を好み、この種の事件は後を絶たない。今回腐敗の進行が殊の他早い、サバとイワシについて調査した。製造例5で作製した本殺菌消毒液を容器に入れそこに魚体を1分間浸漬し、その後流水中で20秒間魚体表面を軽くこすり洗いし室温で放置せしめた。(23℃)
尚、流水中のみで20秒間洗浄したものを対照とした。
検出した菌は魚に比較的縁の深いビブリオ属とその他の菌とに分類して洗浄前の生菌数と洗浄後の生菌数とを経時的に測定しその結果を第18表にまとめた。
これらに対して本殺菌消毒液に浸漬し1分間後引き揚げた直後は一般細菌、ビブリオとも検出されず、6時間後でも洗浄前の菌数の1/20〜1/500のレベルを保っていた。(検出の菌は主として落下細菌による)
すなわち野菜と同様その殺菌効果が長く続くことを意味し、魚による食中毒の防止に貢献しうるものと思われる。尚上記消毒液によって野菜や魚の風味や味の変化は全くなく本来の旨味をそのまま保っていた。
家庭で飼育しているペットの内、モルモット並びに室内犬テリアの夫々2匹に対する洗浄効果を観察した。35℃に温めた水道水及び製造例4で作製した本殺菌消毒液に体全体を3分間浸し、その間軽くブラッシングしながら洗った。洗浄後ドライヤーにて体毛を乾燥せしめた。その直後と24時間後の体表面の細菌数を測定しさらには毛並みや体臭をもチェックした。
その結果、モルモットの場合、洗浄後1×106個/cm2付着していた菌が水道水で洗浄した時は5×104個/cm2にすなわち1/20にまで除菌しえたが24時間後には菌数も体臭も洗浄前のレベルに復してしまった。
これに対して本殺菌消毒液を使用した時は2×102個/cm2、すなわち1/5000に減少、その後菌数は次第に復するも24時間後でも洗浄前の1/250のレベル(4×103個/cm2)を維持していた。体毛も艶やかで起毛し体臭も僅かに臭う程度であった。
室内犬の場合、体表面に付着の菌数はモルモットの約1/10の水準であったが本殺菌消毒液で洗浄した場合、上記モルモットの成績に類似の傾向を示したが、体臭は24時間経過しても殆ど臭わずその効果は72時間(3日間)続いた。
(1)治験例その1
趾間型、水泡型及び角化型の白癬症(水虫)患者8名と爪白癬症患者2名に対して3ヶ月間治験を行った。
治験方法は樹脂容器に入れた製造例10で作製した本殺菌消毒液に患部を15分間浸し、その後患部を流水で洗い流すという方法を採用した。
水虫は根治が困難で特に爪水虫の場合は難渋するものとして専門家の間でも認識されている。以下第19表に治験者の白癬症の症状と患部より採取した皮膚及び爪の鏡検とその部を水酸化カリで前処理しての培養検査の結果を記した。
しかし3ヵ月後の白癬菌の培養所見では爪水虫のケースを除いてはほぼ陰性となった。治療をさらに継続する事により根治する可能性を示坊していた。
慢性副鼻腔炎に羅患している有志の5名に対し、製造例1で作製した本殺菌消毒液で毎日1回鼻洗浄を3ヶ月間行なった。自覚症状ならびに病理学的所見により診断した所、5人全員1ヶ月を過ぎた頃から症状の軽減が現れ3ヵ月後には病理学的検査でもレントゲン検査でもそれが確認された。6ヶ月続けた治験者の1人から完治したとの報告を受けた。
胃潰瘍、十二指腸潰瘍の原因菌として知られ、炎症が長年続いた場合、胃ガンのリスクのあるヘリコバクターピロリ菌の除菌に抗生物質三剤の1週間の投与が推奨される。現在耐性菌の増加により除菌率は80〜85%程度になりその撲滅も次第に難しくなる事も予想され、生命の基本物質たるアミノ酸、ビタミン及びミネラルを主成分とする本発明殺菌消毒液の投与が有効であるや否やをピロリ菌陽性の本発明者らの内の一人が治験した。
1日1回No1で作製した液16mlを3倍に薄め約50ml服用する事を1週間続け、1ヶ月間の間隔を開けて尿素呼気試験を再検査した結果、陰性となり今後のピロリ菌除菌の実用性を秘めている事を確認した。
公園の砂場の砂と川原より土壌を採取し、それ等を混和して80〜90℃の熱風で6時間乾燥せしめその内の1gを水に添加、直ちにフィルターでろ過した。そのろ過水の一部をスライドグラスに塗布し、常法に従って芽胞染色し染色された芽胞の数を数え土壌1g中に含有される芽胞数を計測した。同時に好気性───(Bacillus属が発育)並びに嫌気性───(Clostridium属が発育)で培養し、両者の比率を測定した。
次いで供試殺菌消毒液10mlに上記の乾燥土壌1gを添加、経時的に一部採取して好気性と嫌気性で培養し、生育しているコロニーを計測する事により芽胞の崩壊率を調査した。これらの結果を第20表に示す。
これに対して70%エタノールは芽胞に対して全くの無効で、次亜塩(有効塩素量400ppm)では60分以上の接触で100%崩壊する。但し接触時間が短ければ崩壊に至らない事が多いし、土壌によっては次亜塩の失活が早く、有効性を示さない場合もしばしばあった。
エンベローブを有する鳥インフルエンザウイルスに対する試験を行なった。
鳥インフルエンザウイルス5株───H3N2、H4N6、H5N3、H6N6、H7H7を使用し、夫々をSPF発育鶏卵で培養せしめたウイルス液0.1mlを製造例10で作製した本発明殺菌消毒液0.5mlに混和せしめた。室温で10分間放置後、この混和液を燐酸緩衝液(pH7.2)で10段階希釈を行い各希釈に5個の10日目のSPF発育鶏卵の尿腔に0.2mlずつ接種した。37℃でふ卵を3日間続行した。4℃に一晩置いた後、尿液の鶏赤血球凝集性を調べることによりウイルスの力価を測定した。対照としては燐酸緩衝液(pH7.2)を用いた。
その結果何れのウイルスについてもその力価は元の1/10万〜1/100万に低下し、本液は該ウイルスに対し非常に強い失活作用を示すことが確認された。
またエンベローブのないノロウイルスのテストではウイルスに感染しているカキ並びに感染者の便をその10倍量の本殺菌消毒液に30分間浸漬後ウイルスが破壊されているや否や専門機関に調査依頼した結果ウイルス反応は陰性となった。
以上、実施例の一部を紹介したが最後に毒性テストのついて触れることとする。
製造例10で作製した本発明殺菌消毒液の毒性はマウスに於けるLD50は経口投与1ml>、腹腔投与4mlまた動物細胞に対する障害性(細胞増殖抑制度)は供試細胞(サル腎CV−1細胞及び人リンパ球)により若干異なるが10倍希釈でも約半数の細胞は障害を受けず増殖しえた。そして1000倍〜10000倍の希釈で全く障害は認められなかった。
これに対してヒビテン液(クロロヘキシジングルコネート0.1%)では10000倍の希釈では未だ強い障害性が残っていた。
他の製造例で作製した本発明殺菌消毒液も上記と類似の低毒性であり従来にはない極めて安全性の高い殺菌消毒液であることが証明された。
中でも、本発明殺菌消毒液は、殺菌力について、ウイルスに対する殺傷力を有するために抗菌スペクトルの範囲が広く、殺菌力の持続性に優れ、有機物の存在下での殺菌力に優れるという顕著な効果が奏される。また、本発明殺菌消毒液は、接触した物質、特に微生物細胞等への浸透性に優れ、不快臭がせず、保存性に優れ、対象物への損傷が少ないという点で取り扱い易く、しかも安全性にも優れる。
本発明の範囲が添付の請求の範囲に述べられている文言により限定されることは勿論である。
Claims (9)
- 抗菌作用を有する金属イオンとL−システイン並びにL−アスコルビン酸を主成分として、この主成分に非イオン系を除く界面活性剤20〜100ppmを含有することを特徴とする殺菌消毒液。
- 抗菌作用を有する金属イオンが(III)価の鉄イオン(Fe3+)、(II)価の鉄イオン(Fe2+)、亜鉛イオン(Zn2+)、銅イオン(Cu2+)、コバルトイオン(Co2+)、ニッケルイオン(Ni2+)又は銀イオン(Ag+)である請求項1に記載の殺菌消毒液。
- 抗菌作用を有する金属イオンの濃度が(III)価の鉄イオンでは50〜200ppm、(II)価の鉄イオンでは110〜400ppm、亜鉛イオンでは7.5〜125ppm、銅イオンでは15〜60ppm、コバルトイオンでは180〜300ppm、ニッケルイオンでは85〜175ppm及び銀イオンでは1〜3ppmである請求項2に記載の殺菌消毒液。
- L−システインの濃度が100〜1000ppm及びL−アスコルビン酸の濃度が100〜500ppmである請求項1乃至3のいずれか1項に記載の殺菌消毒液。
- 非イオン系を除く界面活性剤がアルキルベンゼンスルホン酸塩、直鎖アルキルベンゼンスルホン酸塩、ポリオキシエチレンアルキルエーテル硫酸塩、高級アルコール硫酸エステル塩、ラウリル硫酸ナトリウム、ラウロイルサルコシンナトリウム、塩化ステアリルジメチルベンゼンアンモニウム、塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼントニウム、塩酸アルキルジアミノエチルグリシン及び塩酸アルキルポリアミノエチルグリシンからなる群より選ばれる1種以上である請求項1乃至4のいずれか1項に記載の殺菌消毒液。
- ソルビン酸、ソルビン酸塩、安息香酸、安息香酸塩並びにパラオキシ安息香酸エステルからなる群より選ばれる1種以上をさらに含有した請求項1乃至5のいずれか1項に記載の殺菌消毒液。
- ソルビン酸、ソルビン酸塩、安息香酸、安息香酸塩及びパラオキシン安息香酸エステルの濃度が50〜100ppmである請求項6に記載の殺菌消毒液。
- pHが2.5乃至4.0に調整された請求項1乃至7のいずれか1項に記載の殺菌消毒液。
- 請求項1乃至8のいずれか1項に記載の殺菌消毒液を処理対象物に接触させる殺菌方法であって、
前記処理対象物が、環境、器具、動物体、植物体又は有機物であることを特徴とする殺菌方法。
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