JP5205723B2 - 微生物の検出方法及びその装置 - Google Patents
微生物の検出方法及びその装置 Download PDFInfo
- Publication number
- JP5205723B2 JP5205723B2 JP2006208704A JP2006208704A JP5205723B2 JP 5205723 B2 JP5205723 B2 JP 5205723B2 JP 2006208704 A JP2006208704 A JP 2006208704A JP 2006208704 A JP2006208704 A JP 2006208704A JP 5205723 B2 JP5205723 B2 JP 5205723B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- microorganism
- filter
- sample
- cell wall
- fish
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
Images
Landscapes
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Description
65℃で5分間熱処理したフィルターサンプルに対して以下のせん断力付加装置で10回以上位置をずらしながらはさみ、せん断力を与えた。
C:せん断処理+タンパク分解酵素
Bと同様の処理後に、アクロモペプチダーゼ液中につけて室温で30分反応させ、水洗、エタノールによる脱水、乾燥をした。その後、各サンプルは0.0015%H2O2を含むメタノール中に30分つけた。
20 サンプルフィルター
21 微生物
Claims (6)
- シュードムレイン又はメタノコンドロイチンを主成分とする細胞壁を持つ微生物を検出する方法において、前記微生物を化学固定した後、フィルターでろ過して微生物をフィルター上に固定し、そのフィルター上の微生物をフィルターごと挟んで微生物にせん断力を付与してその細胞壁に、FISH法のプローブが透過できる隙間を形成し、しかる後FISH法により蛍光染色させて前記微生物を定量することを特徴とする微生物の検出方法。
- シュードムレインやメタノコンドロイチンからなる細胞壁を有する微生物の細胞壁に、隙間を形成した後、微生物にタンパク分解酵素を加え、しかる後FISH法により蛍光染色させて微生物を定量する請求項1記載の微生物の検出方法。
- メタノサルシナ属微生物或いはメタノバクテリウム属微生物が含まれたサンプルをパラホルムアルデヒド水溶液につけて化学固定を行った後、超音波などによる分散化処理を行い、これをフィルターでろ過して微生物をフィルター上に固定し、寒天で表面をカバーしてフィルターサンプルとし、そのフィルターサンプルを挟んで微生物にせん断力を付与してその細胞壁に、FISH法のプローブが透過できる隙間を形成し、しかる後、ハイブリダイゼーションを行って微生物を定量する請求項1記載の微生物の検出方法。
- シュードムレイン又はメタノコンドロイチンを主成分とする細胞壁を持つ微生物が含まれたサンプルをパラホルムアルデヒド水溶液につけて化学固定を行った後、超音波などによる分散化処理、これをフィルターでろ過して微生物をフィルター上に固定し、寒天で表面をカバーしてフィルターサンプルとし、そのフィルターサンプル中の微生物をFISH法により検出する装置において、フィルターサンプルをせん断力付加装置で挟んで、フィルターサンプル上の微生物にせん断力を付与してその細胞壁に、FISH法のプローブが透過できる隙間を形成することを特徴とする微生物の検出装置。
- せん断力付加装置は、先の広いピンセットからなり、フィルターサンプルを1kg/cm2の圧力をかけながら横方向に位置をずらしながらせん断力を付与する請求項4記載の微生物の検出装置。
- せん断力付加装置は、フィルターサンプルを上下から所定の圧力で挟む一対の金属片と、その金属片のいずれか一方にその金属片を横方向にずらす力を与えるハンマーとからなる請求項4記載の微生物の検出装置。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2006208704A JP5205723B2 (ja) | 2006-07-31 | 2006-07-31 | 微生物の検出方法及びその装置 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2006208704A JP5205723B2 (ja) | 2006-07-31 | 2006-07-31 | 微生物の検出方法及びその装置 |
Related Child Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2012284734A Division JP5565455B2 (ja) | 2012-12-27 | 2012-12-27 | 微生物の検出方法及びその装置 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2008029294A JP2008029294A (ja) | 2008-02-14 |
JP5205723B2 true JP5205723B2 (ja) | 2013-06-05 |
Family
ID=39119354
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2006208704A Expired - Fee Related JP5205723B2 (ja) | 2006-07-31 | 2006-07-31 | 微生物の検出方法及びその装置 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
JP (1) | JP5205723B2 (ja) |
Families Citing this family (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP5768319B2 (ja) * | 2010-01-22 | 2015-08-26 | 株式会社Ihi | 微生物検出方法 |
JP5779837B2 (ja) * | 2010-02-24 | 2015-09-16 | 株式会社Ihi | 微生物検出方法 |
CN110804648A (zh) * | 2019-10-23 | 2020-02-18 | 同济大学 | 检测黑茶发酵过程中微生物结构变化的方法 |
-
2006
- 2006-07-31 JP JP2006208704A patent/JP5205723B2/ja not_active Expired - Fee Related
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
JP2008029294A (ja) | 2008-02-14 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Rodrigues et al. | Assessment of the microbiological quality of recreational waters: indicators and methods | |
Quintero-Betancourt et al. | Cryptosporidium parvum and Cyclospora cayetanensis: a review of laboratory methods for detection of these waterborne parasites | |
Schauer et al. | Rapid and sensitive quantification of Vibrio cholerae and Vibrio mimicus cells in water samples by use of catalyzed reporter deposition fluorescence in situ hybridization combined with solid-phase cytometry | |
Wang et al. | Integrated silica membrane–based nucleic acid purification, amplification, and visualization platform for low-cost, rapid detection of foodborne pathogens | |
Briciu-Burghina et al. | Protocol for the recovery and detection of Escherichia coli in environmental water samples | |
Manti et al. | Experimental improvements in combining CARD-FISH and flow cytometry for bacterial cell quantification | |
CN103436608B (zh) | 基于核酸适体的快速检测方法及试剂盒 | |
Tabraiz et al. | Temperature and immigration effects on quorum sensing in the biofilms of anaerobic membrane bioreactors | |
JP5205723B2 (ja) | 微生物の検出方法及びその装置 | |
WO2017027956A1 (en) | Method and apparatus for detecting total coliform and e. coli in potable water | |
Jia et al. | Optimizing the hybridization chain reaction-fluorescence in situ hybridization (HCR-FISH) protocol for detection of microbes in sediments | |
JP5565455B2 (ja) | 微生物の検出方法及びその装置 | |
Seder-Colomina et al. | Moderate oxygen depletion as a factor favouring the filamentous growth of Sphaerotilus natans | |
Maheux et al. | Abilities of the mCP agar method and CRENAME alpha toxin-specific real-time PCR assay to detect Clostridium perfringens spores in drinking water | |
Liu et al. | Removal of polymerase chain reaction inhibitors by electromembrane extraction | |
Wadhawan et al. | A new method to determine initial viability of entrapped cells using fluorescent nucleic acid staining | |
Sun et al. | Using a safe and effective fixative to improve the immunofluorescence staining of bacteria | |
Goel et al. | Molecular biological methods in environmental engineering | |
JP4323740B2 (ja) | 汚染環境および環境試料の分子遺伝学的解析・評価法 | |
Chapman et al. | Detection methods for faecal contamination events: The gap for Australia | |
Bachoon et al. | Comparison of four polymerase chain reaction methods for the rapid detection of human fecal pollution in marine and inland waters | |
JP2005525804A (ja) | insituハイブリダイゼーションおよびフローサイトメトリーを用いる微生物の同定方法 | |
JP2013255455A (ja) | 細胞壁穿孔方法、および微生物検出方法 | |
Örmeci et al. | Development of a fluorescence in situ hybridization protocol for the identification of micro-organisms associated with wastewater particles and flocs | |
Ongerth et al. | Multiplex LAMP for Simplified Monitoring Cryptosporidium and Giardia in Surface Water |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20090529 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20111227 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20120222 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20121106 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20121227 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20130122 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20130204 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20160301 Year of fee payment: 3 |
|
R151 | Written notification of patent or utility model registration |
Ref document number: 5205723 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R151 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20160301 Year of fee payment: 3 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |