JP2008029294A - メタノサルシナ等の微生物の検出方法及びその装置 - Google Patents
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Abstract
【課題】メタノサルシナ属など、メタノコンドロイチンなどからなる硬い細胞壁を持つ微生物を、CARD−FISH法等を用いて検出することができるメタノサルシナ等の微生物の検出方法及びその装置を提供する。
【解決手段】 メタノサルシナ属など硬い細胞壁をもつ微生物を検出する方法において、微生物21を化学固定した後、その微生物21にせん断力を付与し、しかる後FISH法により蛍光染色させて微生物21を定量する。
【選択図】図2
Description
65℃で5分間熱処理したフィルターサンプルに対して以下のせん断力付加装置で10回以上位置をずらしながらはさみ、せん断力を与えた。
C:せん断処理+タンパク分解酵素
Bと同様の処理後に、アクロモペプチダーゼ液中につけて室温で30分反応させ、水洗、エタノールによる脱水、乾燥をした。その後、各サンプルは0.0015%H2O2を含むメタノール中に30分つけた。
20 サンプルフィルター
21 微生物
Claims (6)
- メタノサルシナ属など硬い細胞壁をもつ微生物を検出する方法において、微生物を化学固定した後、その微生物にせん断力を付与し、しかる後FISH法により蛍光染色させて微生物を定量することを特徴とするメタノサルシナ等の微生物の検出方法。
- 微生物にせん断力を付与した後、微生物にタンパク分解酵素を加え、しかる後FISH法により蛍光染色させて微生物を定量する請求項1記載のメタノサルシナ等の微生物の検出方法。
- メタノサルシナ属などの微生物が含まれたサンプルをパラホルムアルデヒド水溶液につけて化学固定を行った後、超音波などによる分散化処理を行い、これをフィルターでろ過して微生物をフィルターに乗せ、寒天で表面をカバーしてフィルターサンプルとし、そのフィルターサンプルにせん断力を付与し、しかる後、ハイブリダイゼーションを行って微生物を定量する請求項1記載のメタノサルシナ等の微生物の検出方法。
- メタノサルシナ属など硬い細胞壁をもつ微生物が含まれたサンプルをパラホルムアルデヒド水溶液につけて化学固定を行った後、超音波などによる分散化処理、これをフィルターでろ過して微生物をフィルターに乗せ、寒天で表面をカバーしてフィルターサンプルとし、そのフィルターサンプル中の微生物をFISH法により検出する装置において、フィルターサンプルをせん断力付加装置で挟んで、フィルターサンプル上の微生物にせん断力を付与することを特徴とするメタノサルシナ等の微生物の検出装置。
- せん断力付加装置は、先の広いピンセットからなり、フィルターサンプルを約1kg/cm2 の圧力をかけながら横方向に位置をずらしながらせん断力を付与する請求項4記載のメタノサルシナ等の微生物の検出装置。
- せん断力付加装置は、フィルターサンプルを上下から所定の圧力で挟む一対の金属片と、その金属片のいずれか一方にその金属片を横方向にずらす力を与えるハンマーとからなる請求項4記載のメタノサルシナ等の微生物の検出装置。
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