JP5156677B2 - 免疫学的測定試薬および免疫学的測定方法 - Google Patents
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Description
ここで、本実施形態の免疫学的測定方法について説明する。本実施形態の免疫学的測定方法は、遊離型抗原に対する反応性が、遊離型抗原と遊離型抗原に結合する別の抗原とで形成される複合型抗原に対する反応性より高い検出用抗体の反応性を等価に補正する補助抗体を用い、遊離型抗原とも複合型抗原とも結合し、遊離型抗原との反応性が複合型抗原との反応性よりも高い補助抗体を添加し、続いて検出用抗体を用いて補助抗体を添加後の遊離型抗原と複合型抗原を含む溶液の濃度を測定する方法である。本実施形態の免疫学的測定方法では、遊離型抗原の濃度の低下率は、複合型抗原の濃度の低下率よりも高くなっている。
F−PSAとの反応性がPSA−ACTとの反応性よりも強い補助抗体の取得を行った。本実施例では、まず以下の手順により、F−PSAに対するモノクローナル抗体(補助抗体)を得た。
40%以上(強く反応する場合): +++
20〜40%(中程度に反応する場合):++
5〜20%(弱く反応する場合): +
5%未満(全く反応しない場合): −
実験1で得られた、F−PSAと強く反応しPSA−ACTとも弱く反応する実施例の抗体(PA05)を補助抗体として使用した。また、F−PSAに特異的な補助抗体である比較例1の抗体(PA08)も、比較のために使用した。これらの補助抗体を補正用の第1試薬に添加し、F−PSA(10ng/mL)及びPSA−ACT(10ng/mL)の各抗原と反応させた。次に、2つの抗PSAモノクローナル抗体(検出用抗体)を感作したラテックス試薬である測定用の第2試薬を用いて、生化学自動分析装置でF−PSA(10ng/mL)及びPSA−ACT(10ng/mL)の濃度を測定した。対照として、補助抗体が添加されていない第1試薬に関しても測定を行い(比較例2)、それらの測定値を比較した。
Claims (7)
- 遊離型抗原に対する反応性が、前記遊離型抗原と前記遊離型抗原に結合する別の抗原とで形成される複合型抗原に対する反応性より高い検出用抗体の反応性を等価に補正する補助抗体を含む免疫学的測定試薬であって、
前記補助抗体は前記遊離型抗原と前記複合型抗原の両方に結合可能であり、かつ
前記遊離型抗原と前記補助抗体との反応性が前記複合型抗原と前記補助抗体との反応性よりも高く、
前記検出用抗体が加えられた場合に、前記遊離型抗原と前記検出用抗体との反応が前記複合型抗原と前記検出用抗体との反応よりも強く抑制されることを特徴とする免疫学的測定試薬。 - 前記抗原が前立腺特異抗原であることを特徴とする請求項1に記載の免疫学的測定試薬。
- 遊離型抗原に対する反応性が、前記遊離型抗原と前記遊離型抗原に結合する別の抗原とで形成される複合型抗原に対する反応性より高い検出用抗体とをさらに含むことを特徴とする請求項1または2に記載の免疫学的測定試薬。
- 遊離型抗原に対する反応性が、前記遊離型抗原と前記遊離型抗原に結合する別の抗原とで形成される複合型抗原に対する反応性より高い検出用抗体の反応性を等価に補正する補助抗体を用いた免疫学的測定方法において、
前記遊離型抗原とも前記複合型抗原とも結合し、前記遊離型抗原との反応性が前記複合型抗原との反応性よりも高い前記補助抗体を添加し、
続いて検出用抗体を用いて前記補助抗体を添加後の前記遊離型抗原と前記複合型抗原を含む溶液の濃度を測定する場合に、前記遊離型抗原の濃度の低下率を前記複合型抗原の濃度の低下率よりも高くしたことを特徴とする免疫学的測定方法。 - 前記抗原が前立腺特異抗原であることを特徴とする請求項4に記載の方法。
- 前記濃度が吸光度を測定することにより算出されるものであることを特徴とする請求項4に記載の方法。
- 不溶性担体粒子に結合した前記検出用抗体を抗原と反応させ、抗原抗体反応によって生じる不溶性担体粒子の凝集を観察することによって抗原を検出または測定することを特徴とする請求項4乃至6のいずれかに記載の方法。
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