JP5131095B2 - 免疫測定法 - Google Patents
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Description
抗PIVKAII抗体を結合した0.025% (v/v)磁性粒子(富士レビオ社製)250μLに対し、非特異検体液(「非特異検体」は、ALPの非特異反応性物質を多く含み、標識酵素としてALPを用いたEIAにおいて測定結果が偽高値となることがわかっているヒト血清検体である)20μLを加え、37℃で10分間反応させた。磁性粒子を洗浄緩衝液(富士レビオ製)で洗浄後、評価蛋白質(ムチン、フェチュイン、ラクトフェリン、BSA)を下記表1に示す濃度で含有した、0.5μg/mL ALP標識抗PIVKA II抗体混合溶液250μLを当該磁性粒子に加え、37℃10分間反応させた。磁性粒子を洗浄緩衝液で洗浄後、当該磁性粒子に0.2mg/mLの発光基質AMPPD(3-(2'-スピロアダマンタン)-4-メトキシ-4-(3''-ホスホリルオキシ)フェニル-1,2-ジオキセタン・2ナトリウム塩、パーキンエルマ社製)250μLを加えた。37℃で5分間反応させた後、フォトンカウンターで発光量を測定した。
Claims (11)
- 糖鎖を有するアルカリ性フォスファターゼで標識された測定試薬が用いられる酵素免疫測定法において非特異反応を減じるための非特異吸収剤であって、非特異反応を減じる効果を有する、前記糖鎖とは異なる由来の糖鎖を有する非特異吸収剤。
- 前記測定試薬が、固相成分、測定対象物に特異的に結合する固相化結合体、標準品、標識体、測定対象物に特異的に結合する標識結合体である請求項1記載の非特異吸収剤。
- 糖、糖蛋白質、糖脂質及び糖鎖含有ポリペプチドから成る群より選ばれる少なくとも1種である請求項1又は2記載の非特異吸収剤。
- 前記非特異吸収剤が有する糖鎖が細胞間、細胞膜間若しくは蛋白質間の接触、接着又は相互作用あるいは細胞の保護に関わる、請求項1記載の非特異吸収剤。
- 前記非特異吸収剤が有する糖鎖がアスパラギン結合型でConA(タチナタマメレクチン)及び/又はLCA(レンズマメレクチン)に結合する、請求項4記載の非特異吸収剤。
- 前記糖蛋白質が、PHA-E4(タチナタマメレクチン)、RCA120(ヒママメレクチン)、WGA(小麦胚芽レクチン)の少なくともいずれかに結合する、請求項5記載の非特異吸収剤。
- 前記糖蛋白質がフェチュイン、ラクトフェリン又はアルファ1酸性糖蛋白、あるいはそれらの分解物又は変性物である請求項6の非特異吸収剤。
- 前記非特異吸収剤が有する糖鎖が、セリン又はスレオニン結合型で膜結合型である、請求項4記載の非特異吸収剤。
- 前記糖蛋白質がムチン、あるいはその分解物又は変性物である請求項8記載の非特異吸収剤。
- 前記ムチンが、牛ムチン、豚ムチンII型、豚ムチンIII型、クラゲムチン又はウナギムチンである請求項9記載の非特異吸収剤。
- 糖鎖を有するアルカリ性フォスファターゼで標識された測定試薬が用いられる酵素免疫測定法において、請求項1ないし10のいずれか1項に記載の非特異吸収剤を共存させて行うことを特徴とする免疫測定方法。
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