JP5011313B2 - ポリメチンマーカー色素を使用したタンパク質分解方法およびキット - Google Patents
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Description
チップへ試料を注入することであって、当該チップが試料を受け取るための少なくとも1つのウェル、及び当該少なくとも1つのウェルに連結され且つ種々の化合物を分離するように適応されている分離チャネルを含む、チップへ試料を注入すること、及び
上記チャネルにわたって電界を印加することであって、それにより当該チャネルを通って上記試料を移動させる、印加すること。
−200mM TAPS(N−トリス(ヒドロキシメチル)メチル−3−アミノプロパンスルホン酸)、pH7.5(Sigma, Deisenhofen, Germany)
−染色マーカー色素としての6μM 色素V02−04064(Dyomics, Jena, Deutschland)
−較正用の下端マーカーとしての1μMAlexa700(Invitrogen-Molecular Probes, USA)
−較正用の上端マーカーとしての1μM 色素676(Dyomics)
−0.15mM SDS(ドデシル硫酸ナトリウム)(Sigma)
−2%PDMA 12164(Polysciences; USA;ロット番号:537426)
−200mM TAPS(N−トリス(ヒドロキシメチル)メチル−3−アミノプロパンスルホン酸、pH7.5(Sigma)
−0.15mM SDS(Sigma)
−検出器の焦点を合わせるための色素としての0.15μM 色素V02−04064(Dyomics)
・12個の異なるヒト血清試料1μLを採取して、色素を含有する試料緩衝液それぞれ49μLと混合する。
・血清標準物質1μLを採取して、色素を含有する試料緩衝液それぞれ49μLと混合する。
・プライマーステーション上にチップを配置する。
・各チップを標識する。
・2%ゲルマトリックス10μLをゲルウェルへ添加する。
・ウェルを1分間加圧する。
・他の2つのゲルウェルにゲルマトリックス10μLを充填する。
・試料緩衝液中の希釈血清標準物質10μLを標準物質ウェルへ添加する。
・試料緩衝液中の各希釈試料7μLを12個の試料ウェルそれぞれへ添加する。
・チップを機器へ配置して、実行を開始する。
Claims (13)
- 前記分離チャネルは、電気泳動的に、クロマトグラフィ的に又は電気クロマトグラフィ的に種々の化合物を分離するように適応されている、請求項1に記載のキット。
- 分離ゲルをさらに含む、請求項1または2のいずれか1項に記載のキット。
- 較正試料をさらに含む、請求項1ないし3のいずれか1項に記載のキット。
- 前記分離は、電気泳動的に、クロマトグラフィ的に又は電気クロマトグラフィ的に実施される、請求項5に記載の方法。
- 前記電気泳動的分離は、SDSポリアクリルアミド電気泳動(SDS−PAGE)、キャピラリー電気泳動及びマイクロチャネル/微小流体チャネル電気泳動から成る群から選択される、請求項6に記載の方法。
- 前記分離は、7〜8の範囲のpHで実施される、請求項5ないし7のいずれか1項に記載の方法。
- 前記分離は、7.3〜7.7の範囲のpHで実施される、請求項8に記載の方法。
- 前記分離は、7.5のpHで実施される、請求項9に記載の方法。
- 試料中のリポタンパク質クラス分布を分析するための請求項5に記載の方法。
- 試料中のHDLサブクラスパターン及び/又はLDLサブクラスパターンを分析するための請求項5に記載の方法。
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