JP4896022B2 - チトクロムcの免疫化学的測定方法及び測定キット - Google Patents
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Description
[1]体液中のチトクロムcを免疫化学的に測定する方法であって、抗体とチトクロムcの反応を酸性領域の緩衝液中で行うことを特徴とする方法。
[2]酸性領域がpH 3.5からpH 5.0である[1]に記載の方法。
[3]体液が血液である[1]又は[2]に記載の方法。
[4]体液中のチトクロムcを免疫化学的に測定するキットであって、抗体とチトクロムcの反応を酸性領域の緩衝液中で行うための測定キット。
[5]酸性領域がpH 3.5からpH 5.0である[4]に記載の測定キット。
[6]少なくとも、
(1)チトクロムcと反応する抗体及び
(2)酸性領域で反応させる緩衝液
を含む、[4]又は[5]に記載の測定キット。
[7]チトクロムcと反応する抗体が、固相化した抗体及び/又は標識した抗体である、[6]に記載の測定キット。
[8]体液が血液である[4]〜[7]のいずれか一項に記載の測定キット。
2.体液存在下での添加回収試験における回収率が70%以上、好ましくは80%以上、更に好ましくは90%以上得られる。
必要によりBSA等の適当な蛋白質、NaCl等の適当な塩類、必要により適当な界面活性剤他を含むpH 3〜pH 7.5の緩衝液に、チトクロムcを1〜1000 ng/mLに希釈する。
免疫化学的測定法に用いる検体に対応した体液、例えば血清中のチトクロムcを測定するのであれば血清に、既知量のチトクロムcを添加する。チトクロムcを添加した血清、及び添加しなかった血清中のチトクロムc量を、当該免疫化学的な方法により測定し、理論値に対する測定値の比率を回収率とする。
(1).測定値(C)/理論値(AとBの加重平均)、
(2).チトクロムc添加による測定値の上昇値(C−B)/添加量(A)、
の何れでも計算できる。
本発明の方法は、第1反応で酸性領域の緩衝液を用いる方法に限られるものではない。
ラットチトクロムc(シグマ社製)をウサギに免疫し、チトクロムcに対する抗血清を得た。その抗血清に最終濃度2 Mになるように硫酸アンモニウムを添加し、室温(20-30℃)で5時間撹拌した。撹拌した溶液を10000回転で30分遠心し上清を捨て、沈殿物に0.1 Mリン酸緩衝液pH 7.2を加え溶解後、0.1 Mリン酸緩衝液pH 7.2にて透析した。
精製した抗チトクロムcIgGを0.1 M酢酸緩衝液pH 4.2で透析し、ペプシン(シグマ社)を蛋白質濃度比で20:1の割合になるように加え、37℃で16時間反応させた。1 N NaOHを加えpHを7.5に調整し、0.15 M NaClを含む0.01 Mトリス塩酸緩衝液pH 7.5で平衡化したSephacryl S-200(GEヘルスケアバイオサイエンス社)カラムに流しゲル濾過を行った。フラクションの第一ピークを集め、濃縮し、抗チトクロムcIgG F(ab’)2ポリクローナル抗体とした。
ヒトチトクロムc(R&D Systems社)110μg/100μLと65 mMリン酸緩衝液pH 7.5に溶解した2 mg/mLオブアルブミン55μLを混合して、そこへ65 mMリン酸緩衝液pH 7.5で希釈した1 mMグルタルアルデヒド42μLを加え、室温で2時間撹拌した。次に、0.15 M NaClで4℃において48時間透析し、等量のFCAとアジュバントを作製し、BALB/Cマウス腹腔に0.1 mL免疫した。2週間おきに合計3回同様に免疫した。3回目の免疫の2週間後、マウスに生理食塩水に溶解したヒトチトクロムc50μg/100μLを尾静脈より静注した。3日後マウスから脾臓を摘出して、常法に従い、脾臓リンパ球をポリエチレングリコール法によりミエローマ細胞P3X63 Ag8U.1と細胞融合した。ヒトチトクロムcを抗原としてスクリーニングを行い、ヒトチトクロムcに対するモノクローナル抗体産生ハイブリドーマ(clone:3G7および27G9)を樹立した。
抗チトクロムcモノクローナル抗体(clone:2B5F8(R&D Systems社)またはclone:6H2.B4(BectonDickinson社))を、0.15M NaClを含む0.1 M酢酸緩衝液(pH 4.2)で透析し、OD 280 nmが0.56になるよう0.15M NaClを含む0.1 M酢酸緩衝液(pH 4.2)で希釈した。希釈した抗体1.67 mLを、あらかじめ磁石を用いて0.15M NaClを含む0.1 M酢酸緩衝液(pH 4.2)3 mLで3回洗浄したビーズ(DynabeadsR M-450 Epoxy, Dynal社)3.36 mL分と混合し、室温で17時間撹拌した。次にビーズをブロッキングバッファー(50 mM Tris・HCl, 1% BSA, 0.15 M NaCl, 0.1% NaN3, pH7.5)3 mLで懸濁し、室温で7時間撹拌してビーズをブロッキングした。ブロッキングされたビーズを使用時に濃度を調整して測定に用いた。
参考例3で作製した抗チトクロムcモノクローナル抗体(3G7抗体または27G9抗体)あるいは参考例2で作製した抗チトクロムcIgG F(ab’)2ポリクローナル抗体をPBSで透析し、抗体濃度を0.5 mg/mLから2 mg/mLの範囲に調製する。抗体1 mLに、ジメチルスルホキシドに10mg/mL濃度で溶解したルテニウム錯体(ruthenium(II) tris(bipyridyl) - N-hydroxysuccinimide, IGEN Corp. USA)を12.2μL加え室温で30分撹拌した。次に2 M グリシンを50μL加え、室温で10分撹拌した。それを、PBS-3(10 mMリン酸カリウム, 0.15M NaCl, 0.05% NaN3, pH 6.0)であらかじめ平衡化したSephadex G-25(GEヘルスケアバイオサイエンス社)カラム(1.5 cmφ x 30 cm)にアプライしてPBS-3で溶出し、1 mLでフラクション分取した。各フラクションのOD 280 nmを測定し、第1ピークのフラクションを集めルテニウム錯体標識抗チトクロムc抗体とした。抗体濃度をMicro BCA protein Assay kit(PIERCE社)を用いて測定した。
チトクロムc標準抗原は、ヒトチトクロムc(R&D Systems社)を5% BSA、0.15 M NaCl, 0.1% NaN3を含む0.15 Mリン酸ナトリウム緩衝液pH 7.4で1000 ng/mL, 500 ng/mL, 100 ng/mL, 50 ng/mL, 10 ng/mLに希釈して作製した。
緩衝液に30、100、500、1000 ng/mLとなるように希釈したヒトチトクロムc(抗原1、抗原2、抗原3、抗原4)、血清1、血清2及び血清3の20μLを、酸性検体希釈液(0.15M NaCl, 15mM EDTA, 5% N102(日本油脂社製), 0.1% NaN3を含む0.1 Mクエン酸リン酸緩衝液pH 4.0)、または中性検体希釈液(0.15M NaCl, 15mM EDTA, 5% N102(日本油脂社製), 0.1% NaN3を含む0.1Mクエン酸リン酸緩衝液pH 7.5)200μLに加えた。
クエン酸リン酸緩衝液に代えてこはく酸緩衝液を用いてヒト血清中のチトクロムcの測定を行った。
(1)ヒト血清のゲルろ過
ヒト血清2mLを、PBSを溶出液としてSephacryl S-200(GEヘルスケアバイオサイエンス社)カラムゲルクロマトグラフィー(サイズφ2.5cm × 120cm)によりゲルろ過し、1フラクション約7 mLで分取した。各フラクション0.5 mLに、ヒトチトクロムc(R&D Systems社)を10μg/mLの濃度に精製水で溶解したものを 50μL加えて混合し、その50μLを反応用溶液(0.15 M PBS, 15 mMEDTA, 1% BSA, 0.1% NaN3, pH 7.5)50μLで希釈した。これを、電気化学発光免疫自動測定機ピコルミR8220(三光純薬社)を用い、参考例で作製した抗チトクロムc抗体(2B5F8)結合ビーズ、1% BSA, 0.3% スクロース, 0.01容量% Tween20, 0.1% NaN3を含む0.15M PBS, pH7.5で2μg/mLに希釈した参考例で作製したルテニウム錯体標識抗チトクロムc抗体(3G7)、ピコルミR発光電解液(三光純薬社)、ピコルミR BF洗浄液(三光純薬社)、ピコルミRセルクリーナー液(三光純薬社)、ピコルミRノズルリンス液(三光純薬社)をセットし、抗チトクロムc抗体結合ビーズ分注量25μL、ルテニウム標識抗チトクロムc抗体分注量100μL、ピコルミR発光電解液分注量300μL、1ステップ、反応時間26分の条件で測定した。
Hiroyuki Katayama et al., Optimization of in-gel protein digestion system in combination with thin-gel separation and negative staining in 96-well plate format : Rapid Commun. in Mass Spectrom. 2003; 17 : 1071-1078に記載されている方法を参考にして、妨害物質が含まれるフラクションを2次元電気泳動で分離し、各スポットを質量分析により同定した(プロテオーム技術)。
同定された蛋白質のうち、アルブミンを除く市販されていて入手可能なものについて、蛋白質をチトクロムcの測定系に添加して、チトクロムc測定を行い、妨害活性があるか調べた。
2).ヒトα1酸性糖蛋白質(Athens Research&Technology社)1 mgを0.5 mLのPBS-1で溶解し、α1酸性糖蛋白質溶液とした。
3).ヒトα1アンチトリプシン(CALBIOCHEM社)1 mgを0.33 mLの精製水で溶解し、α1アンチトリプシン溶液とした。
4).ヒトトランスチレチン(プレアルブミン)(Sigma社)1 mgを0.3 mLの0.15 M NaClを含む50mM リン酸緩衝液pH 7.5で溶解しトランスチレチン溶液とした。
5).ヒトビタミンD結合蛋白質(Gc-グロブリン)(CALBIOCHEM社)1 mgを0.5 mLの精製水で溶解し、ビタミンD結合蛋白質溶液とした。
反応条件を以下に示す酸性条件、または、中性条件で、測定方法に従って測定した。
1)酸性条件
・酸性反応用溶液(0.05 M クエン酸, 1% BSA, 0.15 M NaCl, 15 mM EDTA, pH 4.0)
・ルテニウム希釈液(0.05 M クエン酸, 1% BSA, 0.15M NaCl, 0.3% スクロース, 0.01% Tween20, pH 4.0)
2)中性条件
・中性反応用溶液(0.15 M PBS, 15 mM EDTA, 1% BSA, 0.1% NaN3, pH7.5)
・ルテニウム希釈液(0.15 M PBS, 1% BSA, 0.3% スクロース, 0.01% Tween20, 0.1% NaN3, pH 7.5)
反応用溶液100μLに、妨害活性の認められた蛋白質の溶液であるα1酸性糖蛋白質液(2mg/mL)またはα1アンチトリプシン液(3mg/mL)10μL、及び、ヒトチトクロムc(R&D Systems社)を10μg/mLの濃度に精製水で溶解したもの1μLを加えて混合した。これを、電気化学発光免疫自動測定機ピコルミR8220(三光純薬社)を用い、参考例で作製した抗チトクロムc抗体(2B5F8)結合ビーズ、ルテニウム希釈液で希釈した参考例で作製したルテニウム標識抗チトクロムc抗体(3G7)、ピコルミR発光電解液(三光純薬社)、ピコルミR BF洗浄液(三光純薬社)、ピコルミRセルクリーナー液(三光純薬社)、ピコルミRノズルリンス液(三光純薬社)をセットし、抗チトクロムc抗体結合ビーズ分注量25μL、ルテニウム標識抗チトクロムc抗体分注量100μL、ピコルミR発光電解液分注量300μL、1ステップ、反応時間26分の条件で測定した。
Claims (7)
- 体液中のチトクロムcを免疫化学的に測定する方法であって、抗体とチトクロムcの反応を酸性領域の緩衝液中で行うことを特徴とする方法。
- 酸性領域がpH 3.5からpH 5.0である請求項1に記載の方法。
- 体液が血液である請求項1又は2に記載の方法。
- 体液中のチトクロムcを免疫化学的に測定するキットであって、少なくとも、
(1)チトクロムcと反応する抗体及び(2)酸性領域で反応させる緩衝液を含む、抗体とチトクロムcの反応を酸性領域の緩衝液中で行うための測定キット。 - 酸性領域がpH 3.5からpH 5.0である請求項4に記載の測定キット。
- チトクロムcと反応する抗体が、固相化した抗体及び/又は標識した抗体である、請求項4又は5に記載の測定キット。
- 体液が血液である請求項4から6のいずれか一項に記載の測定キット。
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Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH03257367A (ja) * | 1990-03-08 | 1991-11-15 | Morinaga & Co Ltd | 血清診断法 |
WO1998002579A1 (en) * | 1996-07-12 | 1998-01-22 | Emory University | Regulation of apoptosis and in vitro model for studies thereof |
WO2001035093A1 (fr) * | 1999-11-08 | 2001-05-17 | Eisai Co. Ltd. | Methode de detection de la mort cellulaire, et reactif de detection |
JP2003028860A (ja) * | 2001-05-09 | 2003-01-29 | Eisai Co Ltd | チトクロムc測定によるsirsにおける多臓器不全の検査試薬 |
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Patent Citations (4)
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---|---|---|---|---|
JPH03257367A (ja) * | 1990-03-08 | 1991-11-15 | Morinaga & Co Ltd | 血清診断法 |
WO1998002579A1 (en) * | 1996-07-12 | 1998-01-22 | Emory University | Regulation of apoptosis and in vitro model for studies thereof |
WO2001035093A1 (fr) * | 1999-11-08 | 2001-05-17 | Eisai Co. Ltd. | Methode de detection de la mort cellulaire, et reactif de detection |
JP2003028860A (ja) * | 2001-05-09 | 2003-01-29 | Eisai Co Ltd | チトクロムc測定によるsirsにおける多臓器不全の検査試薬 |
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