JP4875367B2 - 硝化細菌固定化膜の保存液 - Google Patents
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Description
上記硝化細菌固定化膜は、一般的にバイオセンサに用いられ、該バイオセンサは、水質計測器に利用される。
上記硝化細菌は、アンモニア酸化細菌及び亜硝酸酸化細菌からなる群から選択される少なくとも一の硝化細菌であることが好ましい。
上記硝化細菌が、アンモニア酸化細菌の場合には、上記基質としてアンモニウムイオンを含むことが好ましい。また、上記硝化細菌が、亜硝酸酸化細菌の場合には、上記基質として亜硝酸イオンを含むことが好ましい。
本発明に係る保存液は、一般的には、四ホウ酸ナトリウム十水和物を含む。
図1及び図2は、バイオセンサ及び硝化細菌固定化膜の一実施の形態を示す。
フローセル12には試料液の流路12aが設けられている。硝化細菌固定化膜20には、硝化細菌が固定化されている。固定化される硝化細菌としては、アンモニア酸化細菌及び亜硝酸酸化細菌などを挙げることができる。
そして、硝化細菌固定化膜20の一方の面は、流路12a中の試料液と接し、もう一方の面は溶存酸素電極11と接するように配置されている。
菌体固定化部24の菌体固定化量は、2.5×106〜1.0×109個/mm2となるように調製することが好ましく、この範囲内に調整することにより、固定化膜の保存性の均質化を図ることができる
また、バイオセンサは、水質計測器に用いられ、このような水質計測器は、計測対象水中の化学物質を計測するために用いられる。計測対象水は、一般的には、流水であり、水道原水、下水、排水のいずれかである。
回収した菌体に1.0%アルギン酸ナトリウム水溶液を適量加えて懸濁し、所定の生菌個数濃度に調整した菌体濃縮液を得た。
そして、図2について説明したようなセルロース膜22の中心部に、菌体濃縮液を滴下して菌体固定化量を4×107個/mm2となるように調整し、余剰のアルギン酸ナトリウム水溶液を吸引除去した。
さらに、塩化カルシウム水溶液(30g/L)を適量滴下して、余剰の塩化カルシウム水溶液を吸引除去し、菌体を固定化した側を内側にして、ドーナツ状の両面テープ23を介してセルロース膜21と貼り合わせた。
そして、最後に塩化カルシウム水溶液(30g/L)に15分間浸漬し、アルギン酸ナトリウムを完全にゲル化させて菌体を固定化させた。
硝化細菌固定化膜の保存性良否判定では、任意の期間、冷蔵保存後の硝化細菌固定化膜をバイオセンサに装着し、センサ立上り時間(評価開始時点からセンサ出力が0.35mV以下になるまでの経過時間)が24時間以内の場合を「良」とし、24時間以上の場合を「不良」としていた。
表2に保存液組成とセンサ立上り時間との関係を示す。
11 溶存酸素電極
12 フローセル
12a 試料液流路
20 硝化細菌固定化膜
21 セルロース膜
22 セルロース膜
23 ドーナツ状両面テープ
24 菌体固定化部
Claims (10)
- 硝化細菌固定化膜の保存液であって、固定化された硝化細菌の基質及び必須栄養素、並びにオキサル酢酸を含有したホウ酸緩衝液から成ることを特徴とする硝化細菌固定化膜の保存液。
- 上記硝化細菌固定化膜がバイオセンサに用いられるものであり、該バイオセンサが水質計測器に利用されるものであることを特徴とする請求項1に記載の硝化細菌固定化膜の保存液。
- 上記水質計測器の計測対象水が流水であり、水道原水、下水、排水のいずれかであることを特徴とする請求項2に記載の硝化細菌固定化膜の保存液。
- 上記硝化細菌が、アンモニア酸化細菌及び亜硝酸酸化細菌からなる群から選択される少なくとも一の硝化細菌であることを特徴とする請求項1〜3のいずれか一に記載の硝化細菌固定化膜の保存液。
- 上記硝化細菌が、アンモニア酸化細菌であり、上記基質としてアンモニウムイオンを含むことを特徴とする請求項1〜4のいずれか一に記載の硝化細菌固定化膜の保存液。
- 上記硝化細菌が、亜硝酸酸化細菌であり、上記基質として亜硝酸イオンを含む請求項1〜4のいずれか一に記載の硝化細菌固定化膜の保存液。
- 上記アンモニウムイオン源として、塩化アンモニウム及び硫酸アンモニウムのいずれか少なくとも一を含むことを特徴とする請求項5に記載の硝化細菌固定化膜の保存液。
- 上記亜硝酸イオン源として、亜硝酸ナトリウム及び亜硝酸カリウムのいずれか少なくとも一を含むことを特徴とする請求項6に記載の硝化細菌固定化膜の保存液。
- 四ホウ酸ナトリウム十水和物を含むことを特徴とする請求項1〜8のいずれか一に記載の硝化細菌固定化膜の保存液。
- ホウ酸イオン濃度が、1.25mMであることを特徴とする請求項1〜9のいずれか一に記載の硝化細菌固定化膜の保存液。
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