JP4824677B2 - シリンジでの大きな細胞塊の送出、および細胞を凍結保存する関連の方法 - Google Patents
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- 細胞を保存および送出するための装置であって、前記細胞は、装置内で凍結保存され、前記装置が、
開いた第1の端部および開いた第2の端部を有する本体と、
開いた第1の端部へと着脱可能に取り付けられるように構成された第1のキャップと、
開いた第2の端部へと着脱可能に取り付けられるように構成された第2のキャップと、
本体内に収容され、前記開いた端部のうちの一方に隣接するプランジャ部と、
プランジャ部へと接続されるように構成されたプランジャ棒と、
を備え、
少なくともその一部が生物学的適合性を有する材料で作られる、装置。 - プランジャ部が、外周に少なくとも1つのリブを含む、請求項1に記載の装置。
- 第1および第2のキャップが、ねじ山によって本体に着脱可能に取り付けられるように構成される、請求項1に記載の装置。
- 細胞を迅速に凍結させる方法であって、
凍結保存のための所望の量の細胞を取得することと、
取得した細胞を、浸透性の凍結防止剤を含有しており、0℃〜4℃の温度に冷却されている凍結媒体へと懸濁させることと、
細胞および凍結媒体を、細胞を保存および送出するように構成された請求項1から3のいずれか一項に記載の装置に配置することと、
細胞および冷却済みの凍結媒体を含む装置を、8℃/分の速度で−130℃以下の温度まで迅速に冷却することと、
を含む、方法。 - 浸透性の凍結防止剤が、DMSOである、請求項4に記載の方法。
- 凍結媒体が、15%〜25%のDMSOを含有する、請求項5に記載の方法。
- 凍結保存された細胞を迅速に解凍する方法であって、
−130℃以下の温度を有する凍結媒体および細胞を含む請求項1から3のいずれか一項に記載の保存装置を取り出すことと、
凍結媒体および細胞を保存装置から37℃の温度の成長培地を含む解凍容器へと移動させて、細胞を解凍することと、
を含む、方法。 - 細胞を凍結保存するための方法であって、
凍結保存のための所望の量の細胞を取得することと、
取得した細胞を、浸透性の凍結防止剤を含有する冷却済みの凍結媒体に配置することと、
細胞および凍結媒体を、細胞を保存および送出するように構成された請求項1から3のいずれか一項に記載の装置に保存し、前記細胞は、装置内で凍結保存されることと、
装置を−130℃以下の温度まで冷却することと、
を含む、方法。 - 浸透性の凍結防止剤が、DMSOである、請求項8に記載の方法。
- 凍結媒体が、15%〜25%のDMSOを含有する、請求項9に記載の方法。
- 細胞および凍結媒体を保存することが、1.5×108個/mlよりも大きい細胞密度で細胞および凍結媒体を保存することを含む、請求項8に記載の方法。
- 凍結媒体が動物の血清を含んでおらず、細胞および凍結媒体を保存することが、3.0×107個/ml〜5.0×108個/mlの細胞密度で細胞および凍結媒体を保存することを含む、請求項8に記載の方法。
- 凍結保存された細胞でバイオリアクタを接種するための方法であって、
凍結保存のための所望の量の細胞を取得することと、
取得した細胞を、浸透性の凍結防止剤を含有する冷却済みの凍結媒体に配置することと、
細胞および凍結媒体を、細胞を保存および送出するように構成された請求項1から3のいずれか一項に記載の装置に保存され、前記細胞は、装置内で凍結保存されることと、
装置を−130℃以下の温度まで冷却することと、
装置を−130℃以下の温度まで冷却することの後で、凍結媒体および細胞を、装置から実質的に0℃よりも温かい温度の成長培地を含む解凍容器へと移動させることと、
解凍容器からの細胞でバイオリアクタを接種することと、
を含む、方法。 - 浸透性の凍結防止剤が、DMSOである、請求項13に記載の方法。
- 凍結媒体が、15%〜25%のDMSOを含有する、請求項14に記載の方法。
- 細胞および凍結媒体を保存することが、1.5×108個/mlよりも大きい細胞密度で細胞および凍結媒体を保存することを含む、請求項13に記載の方法。
- 凍結媒体が動物の血清を含んでおらず、細胞および凍結媒体を保存することが、3.0×107個/ml〜5.0×108個/mlの細胞密度で細胞および凍結媒体を保存することを含む、請求項13に記載の方法。
- 大きな細胞塊を高い密度で凍結させる方法であって、
大きな細胞塊を、浸透性の凍結防止剤を1.5×108個/mlよりも大きい密度での細胞の保存を可能にするために十分な濃度で含む凍結媒体に、懸濁させることと、
細胞および凍結媒体を請求項1から3のいずれか一項に記載の保存装置に配置することと、
細胞および凍結媒体を−130℃以下の温度まで冷却することと、
を含む、方法。 - 凍結媒体が動物の血清を含む、請求項18に記載の方法。
- 浸透性の凍結防止剤がDMSOである、請求項18に記載の方法。
- DMSOの濃度が、15%〜25%である、請求項20に記載の方法。
- 細胞および凍結媒体を冷却することが、細胞を1.5×108個/ml〜5.0×108個/mlの密度で保存することを含む、請求項18に記載の方法。
- 細胞および凍結媒体を冷却することが、細胞を3.0×108個/mlの密度で保存することを含む、請求項18に記載の方法。
- 凍結防止剤の濃度が、少なくとも3.0×108個/mlの密度での細胞の保存を可能にするために十分である、請求項18に記載の方法。
- 大きな凍結済みの細胞塊を迅速に解凍する方法であって、
凍結した細胞塊および凍結媒体を含む請求項1から3のいずれか一項に記載の保存装置を取り出すことと、
凍結した細胞塊および凍結媒体を、保存装置から37℃の温度の成長培地を含む解凍容器へと移動させて、細胞を解凍することと、
を含む、方法。 - 大きな細胞塊を高い密度で凍結させる方法であって、
大きな細胞塊を、20%のDMSOを含み、動物の血清を含んでおらず、DMSOの濃度が3.0×107個/mlよりも大きい密度での細胞の保存を可能にするために十分である凍結媒体に、懸濁させることと、
細胞および凍結媒体を請求項1から3のいずれか一項に記載の保存装置に配置することと、
細胞および凍結媒体を−130℃以下の温度まで冷却することと、
を含む、方法。
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