JP4740858B2 - ポリペプチドの使用 - Google Patents
ポリペプチドの使用 Download PDFInfo
- Publication number
- JP4740858B2 JP4740858B2 JP2006529715A JP2006529715A JP4740858B2 JP 4740858 B2 JP4740858 B2 JP 4740858B2 JP 2006529715 A JP2006529715 A JP 2006529715A JP 2006529715 A JP2006529715 A JP 2006529715A JP 4740858 B2 JP4740858 B2 JP 4740858B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- polypeptide
- irs
- kinase
- enzyme
- derivative
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/48—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving transferase
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/46—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates
- C07K14/47—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
- A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/48—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving transferase
- C12Q1/485—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving transferase involving kinase
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2500/00—Screening for compounds of potential therapeutic value
- G01N2500/04—Screening involving studying the effect of compounds C directly on molecule A (e.g. C are potential ligands for a receptor A, or potential substrates for an enzyme A)
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Zoology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Emergency Medicine (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Pain & Pain Management (AREA)
- Obesity (AREA)
- Hematology (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Description
のリン酸化の修飾を調べるには様々なペプチドが必要である。またこれにより、コストの増加も招き、HTS様式の方法へは条件付の適用性があるだけである。
a)適切な反応混合液中で、酵素または機能的フラグメントもしくは誘導体と、ビオチン化ポリペプチドとを接触させ、リン酸化反応を開始させる工程、
b)前記反応混合液を、キャリアーにカップリングし及びビオチン化ポリペプチドに結合可能な手段と接触させる工程、
c)前記手段に結合したポリペプチドのリン酸化状態を測定する工程。
a)適切な反応混合液中で、酵素または機能的フラグメントもしくは誘導体と、少なくとも1つのリン酸残基を有するビオチン化ポリペプチドとを接触させ、リン酸化反応を開始させる工程、
b)前記反応混合液を、キャリアーにカップリングし及びビオチン化ポリペプチドに結合可能な手段と接触させる工程、
c)前記手段に結合したポリペプチドのリン酸化状態を測定する工程。
a)上述の本発明の方法のいずれか1つに従って、試験しようとする物質を反応混合液に添加しないで、酵素またはそれらの機能的フラグメントもしくは誘導体が、上記ポリペプチドのリン酸化状態を調節する能力を測定すること、
b)本発明の上述の方法のいずれか1つに従って、試験しようとする物質を反応混合液に添加して、酵素またはそれらの機能的フラグメントもしくは誘導体が、上記ポリペプチドのリン酸化状態を調節する能力を測定すること、
c)a)による能力とb)による能力を比較すること。
用いられるIRS−1フラグメント
インスリンシグナル経路からのポリペプチド基質をビオチン化することと、それが本発明の使用および方法で使用可能であることを実証するために、ヒトIRS−1由来の、中央部の可能性のあるチロシン(太字)とセリンリン酸化部位(下線)をコードする大きさが262個のアミノ酸からなるフラグメントを選択した(aa516〜aa777)(Siemeister等,J.Biol.Chem.1995年)。このフラグメントは、5個の可能性のあるチロシンリン酸化部位を含み、これらは図3で強調されており、以下、それらのモチーフと共に太字で示される。
hIRS−1−p30のクローニングおよびビオチン化
調べるために、まず、Siemeister等,1995年に記載されているように、ヒトIRS−1の、長さが262個のアミノ酸のドメインD516−P777(hIRS−1−p30)をE.coliで発現させた。この場合、発現ベクターを、慣用的な方法で、配列番号10に示される配列(hIRS−1−p30のcDNA配列)を有するポリヌクレオチドを、プラスミドpET3d(ノバジェン(Novagen)から注文番号69421で市販されている)に挿入することによって製造した。この目的のために、まず、空のベクターを、標準的な条件下で、酵素NcoI(ロシュ・ダイアグノスティックスGmbHマンハイム(Roche Diagnostics GmbH Mannheim)から注文番号835315で市販されている)、および、BamHI(ロシュ・ダイアグノスティックスGmbHマンハイムから注文番号656275で市販されている)で消化し、スピンカラム(キアゲン(Qiagen,ヒルデン)から注文番号28104で市販されている)を用いて精製した。
アルファスクリーン TM :小麦胚芽レクチンのアフィニティーで精製されたラット肝臓のインスリン受容体による、ビオチン化したIRS-1フラグメントのリン酸化
図4に結果が示された実験において、小麦胚芽レクチンのアフィニティークロマトグラフィーで精製されたラット肝臓のインスリン受容体(WGA−IR、配列登録番号NP_058767、または、シグマ(Sigma)から注文番号70543で市販されている)を、様々な濃度のヒトインスリン(例えばシグマから注文番号I−9266で市販されている)、および、85nMのビオチン化IRSフラグメントを、50mMのトリス緩衝液(pH7.4)、8mMのMgCl2、2mMのMnCl2中で、4℃で10分間インキュベートし、続いて、ATPを添加した後(最終濃度50μM)、30℃で30分間インキュベートした。次に、EDTAを最終濃度20mMまで添加することによって反応を止め、IRS−1のリン酸化を、アクセプターp−Tyrに直接カップリングした特異的抗体(パーキン・エルマー・ライフサイエンスから注文番号6760601Cで市販されている)を用いて検出したところ、図4に示された読み出しの結果を得た。この方法を用いて、インスリンに関するEC50を10nMと決定することができた。
アルファスクリーン TM :PKCおよび組換えインスリン受容体キナーゼによるビオチン化したIRS−1フラグメントのリン酸化
パーキン・エルマー・ライフサイエンス製のアルファスクリーンTMにより、リン酸化されたIRS−1フラグメントと、リン酸化されたセリンまたはチロシン残基を認識する抗体(p−Ser/p−Tyr抗体)との相互作用を検出することが可能になる。この場合、ビオチン化したIRS−1は、ストレプトアビジンドナーに結合した状態であり、抗体は、アクセプターがカップリングしたプロテインA、または、アクセプターに結合した適切な第二の抗体によって結合される。相互作用が生じる場合、アクセプターは、ドナーのすぐ近辺に到達し、そこに保持され、そうすることによって、ドナーによって発生した一重項酸素原子が拡散によってアクセプタービーズ中の化学発光基に到達し、最終的に検出可能な光の発光が起こる。
図1:IRS1〜IRS4のタンパク質配列(配列番号1〜4)である。4つのファミリーメンバーの配列の登録番号(NCBIタンパク質データベース)は、NM_005544(IRS−1hs):M:007095(IRS−2hs)、NM:032074(IRS−3rat)、NM_003604(IRS−4hs)である。
図2:IRS1〜IRS4をコードするDNA配列(配列番号5〜8)である。4つのファミリーメンバーの配列の登録番号(NCBIヌクレオチドデータベース)は、NM_005544(IRS−1hs),:M:007095(IRS−2hs)、NM:032074(IRS−3rat)、NM_003604(IRS−4hs)である。
図3:本発明の研究に用いられた、IRS−1タンパク質(hIRS−1−p30)の262個のアミノ酸を含むドメインである。セリン612、632、662および731は、下線で示される。YXXMチロシンリン酸化モチーフは、太字で示される。
図4:小麦胚芽レクチンのアフィニティークロマトグラフィーで精製されたインスリン受容体を用いたアルファスクリーンの結果である。
図5:アルファスクリーンTMの結果である。
図6:インスリン受容体、IRS−1およびセリンキナーゼの相互作用を要約した図である。
図7:阻害剤作用を有するセリンリン酸化の考えられる分子メカニズムを要約した図である。
White, M. F. (2002)
IRS proteins and the common path to diabetes.
Am. J. Physiol. Endocrinol. Metab. 283, E413-422
Thirone AC, Carvalho CR, Saad MJ.(1999)
Growth hormone stimulates the tyrosine kinase activity of JAK2 and induces tyrosine phosphorylation of insulin receptor substrates and Shc in rat tissues.
Endocrinology 140, 55-62
Schmitz-Peiffer C, Craig DL, Biden TJ. (2002)
Ceramide generation is sufficient to account for the inhibition of the insulin-stimulated PKB pathway in C2C12 skeletal muscle cells pretreated with palmitate.
Ann. N. Y. Acad. Sci. 967, 146-157
Gao Z, Hwang D, Bataille F, Lefevre M, York D, Quon MJ, Ye J. (2002)
Serine phosphorylation of insulin receptor substrate 1 by inhibitor kappa B kinase complex.
J. Biol. Chem. 277, 48115-48121
Aguirre V, Werner ED, Giraud J, Lee YH, Shoelson SE, White MF. (2000)
Phosphorylation of Ser307 in insulin receptor substrate-1 blocks interactions with the insulin receptor and inhibits insulin action.
J. Biol. Chem. 275, 9047-9054
Sun XJ, Rothenberg P, Kahn CR, Backer JM, Araki E, Wilden PA, Cahill DA, Goldstein BJ, White MF. (1991)
Structure of the insulin receptor substrate IRS-1 defines a unique signal transduction protein.
Nature 352, 73-77
Mothe I, Van Obberghen E. (1996)
Phosphorylation of insulin receptor substrate-1 on multiple serine residues, 612, 632, 662, and 731, modulates insulin action.
J. Biol. Chem. 271, 11222-11227
Tanasijevic MJ, Myers MG Jr, Thoma RS, Crimmins DL, White MF, Sacks DB. (1993)
Phosphorylation of the insulin receptor substrate IRS-1 by casein kinase II.
J. Biol. Chem. 268, 18157-18166
Paz K, Liu YF, Shorer H, Hemi R, LeRoith D, Quan M, Kanety H, Seger R, Zick Y. (1999)
Phosphorylation of insulin receptor substrate-1 (IRS-1) by protein kinase B positively regulates IRS-1 function.
J. Biol. Chem. 274, 28816-28822
Eldar-Finkelman H, Krebs EG. (1997)
Phosphorylation of insulin receptor substrate 1 by glycogen synthase kinase 3 impairs insulin action.
Proc. Natl. Acad. Sci. U S A 94, 9660-9664
Jakobsen SN, Hardie DG, Morrice N, Tornqvist HE. (2001)
5'-AMP-activated protein kinase phosphorylates IRS-1 on Ser-789 in mouse C2C12 myotubes in response to 5-aminoimidazole-4-carboxamide riboside.
J. Biol. Chem. 276, 46912-46916
Freund GG, Wittig JG, Mooney RA. (1995)
The PI3-kinase serine kinase phosphorylates its p85 subunit and IRS-1 in PI3-kinase/IRS-1 complexes.
Biochem Biophys Res Commun 206, 272-278
Le Marchand-Brustel Y. (1999)
Molecular mechanisms of insulin action in normal and insulin-resistant states.
Exp. Clin. Endocrinol. Diabetes 107, 126-132
Araki E, Sun XJ, Haag BL 3rd, Chuang LM, Zhang Y, Yang-Feng TL, White MF, Kahn CR. (1993)
Human skeletal muscle insulin receptor substrate-1. Characterization of the cDNA, gene, and chromosomal localization.
Diabetes 42, 1041-1044
Siemeister G, al-Hasani H, Klein HW, Kellner S, Streicher R, Krone W, Muller-Wieland D. (1995)
Recombinant human insulin receptor substrate-1 protein. Tyrosine phosphorylation
and in vitro binding of insulin receptor kinase.
J. Biol. Chem. 270, 4870-4874
Araki E, Lipes MA, Patti ME, Bruning JC, Haag B 3rd, Johnson RS, Kahn CR. (1994)Alternative pathway of insulin signalling in mice with targeted disruption of the IRS-1 gene.
Nature 372, 186-190.
Lavan BE, Lane WS, Lienhard GE. (1997)
The 60-kDa phosphotyrosine protein in insulin-treated adipocytes is a new member
of the insulin receptor substrate family.
J. Biol. Chem. 272, 11439-11443
Lavan BE, Lane WS, Lienhard GE. (1997)
A novel 160-kDa phosphotyrosine protein in insulin-treated embryonic kidney cells is a new member of the insulin receptor substrate family.
J. Biol. Chem. 272, 21403-21407
De Fea K, Roth RA. (1997)
Protein kinase C modulation of insulin receptor substrate-1 tyrosine phosphorylation requires serine 612
Biochemistry 36, 12939-12947
Standard literature for laboratory methods
Sambrook et al. (1989) Molecular Cloning: A Laboratory Manual. Second edition. Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY. 545 pp;
Current Protocols in Molecular Biology; regularly updated, e.g. Volume 2000; Wiley & Sons, Inc; Editors: Fred M. Ausubel, Roger Brent, Robert Eg. Kingston, David D. Moore, J.G. Seidman, John A. Smith, Kevin Struhl.
Current Protocols in Human Genetics; regularly uptdated; Wiley & Sons, Inc; Editors: Nicholas C. Dracopoli, Honathan L. Haines, Bruce R. Korf, Cynthia C. Morton, Christine E. Seidman, J.G. Seigman, Douglas R. Smith.
Current Protocols in Protein Science; regularly updated; Wiley & Sons, Inc; Editors: John E. Coligan, Ben M. Dunn, Hidde L. Ploegh, David W. Speicher, Paul T. Wingfield.
Molecular Biology of the Cell; third edition; Alberts, B., Bray, D., Lewis, J.,
Raff, M., Roberts, K., Watson, J.D.; Garland Publishing, Inc. New York & London,
1994;
Short Protocols in Molecular Biology, 5th edition, by Frederick M. Ansubel (Editor), Roger Brent (Editor), Robert E. Kingston (Editor), David D. Moore (Editor),
J.G. Seidman (Editor), John A. Smith (Editor), Kevin Struhl (Editor), October 2002, John Wiley & Sons, Inc., New York“
特に指定がない限り、上述の方法は、当業者既知の標準的な方法であり、例えば、上述の文献、特に、標準的な方法における文献(また、本明細書において標準的な文献ともいう)で参照できる。
アミノ酸(また、一般的にはAAと略記される)には、3文字または1文字コードを用いた(示された標準的な文献も参照);ヌクレオチドには、一般的に、習慣的な1文字略語をに用いた(示された標準的な文献も参照)。
Claims (11)
- 酵素、それらの機能的フラグメントまたは誘導体がポリペプチドをリン酸化する能力を測定する方法であって、
a.適切な反応混合液中で、酵素または機能的フラグメントもしくは誘導体と、ビオチン化ポリペプチドとを接触させ、そしてリン酸化反応を開始させる工程、
b.反応混合液を、ストレプトアビジンがカップリングした第一のキャリアーと接触させる工程、
c.上記ポリペプチドを、リン酸化ポリペプチドに特異的に結合できる抗体を含む第二のキャリアーにカップリングする工程、
d.上記キャリアーに結合したポリペプチドのリン酸化状態を測定する工程、
を含み、
前記ポリペプチドが50個またはそれ以上のアミノ酸の長さを有するインスリン受容体基質1(IRS−1)、または、それらの機能的フラグメントもしくは誘導体であり、
第一のキャリアーは第一のシグナル発生体を含み、第二のキャリアーは第二のシグナル発生体を含み、これら2つのシグナル発生体は互いに直接隣り合った状態になると、検出可能なシグナルを発生させることができ、そしてリン酸化状態の測定は、シグナルが発生しているかどうかを測定することによってなされる、方法。 - ポリペプチドが、アミノ酸が50〜300個の長さを有する、請求項1に記載の方法。
- 酵素が、キナーゼである、請求項1または2に記載の方法。
- キナーゼが、チロシンキナーゼである、請求項3に記載の方法。
- ポリペプチドが、酵素の天然の基質である、請求項1〜4のいずれか一項に記載の方法。
- IRS−1が、配列番号1で示される配列を有するヒトIRS−1であるか、または、
配列番号5で示される配列によってコードされる、請求項1に記載の方法。 - IRS−1フラグメントが、配列番号9に示されるアミノ酸配列からなる、請求項1〜5のいずれか一項に記載の方法。
- 酵素が、以下のキナーゼ:インスリン受容体、IGF−1受容体、trK受容体、EGF受容体、カゼインキナーゼII、タンパク質キナーゼC、タンパク質キナーゼB/Akt、マイトジェン活性化タンパク質キナーゼ(MAPキナーゼ)、GSK−3、ERKまたはJNKのいずれか一つ、または、それらの機能的フラグメントもしくは誘導体である、請求項1〜7のいずれか一項に記載の方法。
- 酵素またはそれらの機能的フラグメントもしくは誘導体が、ポリペプチドをリン酸化する能力を修飾する物質を同定するための、請求項1〜8のいずれか一項に記載の方法。
- a.請求項1〜9のいずれか一項に記載の方法によって、試験しようとする物質を反応混合液に添加しないで、酵素またはそれらの機能的フラグメントもしくは誘導体が、ポリペプチドをリン酸化する能力を測定する工程、
b.請求項1〜9のいずれか一項に記載の方法によって、試験しようとする物質を反応混合液に添加して、酵素またはそれらの機能的フラグメントもしくは誘導体が、ポリペプチドをリン酸化する能力を測定する工程、
c.a)による能力とb)による能力とを比較する工程、
を含む、酵素またはそれらの機能的フラグメントもしくは誘導体が、ポリペプチドをリン酸化する能力を修飾する物質を同定する方法。 - 非インスリン依存性糖尿病(NIDDM)を治療するための薬理学的に活性な物質を同定するための、請求項9または10に記載の方法。
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
DE10323081A DE10323081A1 (de) | 2003-05-22 | 2003-05-22 | Verwendung eines Polypeptides |
DE10323081.5 | 2003-05-22 | ||
PCT/EP2004/004428 WO2004104220A2 (de) | 2003-05-22 | 2004-04-27 | Verwendung eines biotinylierten polypeptides zur bestimmung der aktivität von protein-phosphorylierenden enzymen |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2007512802A JP2007512802A (ja) | 2007-05-24 |
JP4740858B2 true JP4740858B2 (ja) | 2011-08-03 |
Family
ID=33441119
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2006529715A Expired - Fee Related JP4740858B2 (ja) | 2003-05-22 | 2004-04-27 | ポリペプチドの使用 |
Country Status (15)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US7732151B2 (ja) |
EP (1) | EP1627073A2 (ja) |
JP (1) | JP4740858B2 (ja) |
KR (1) | KR20060015290A (ja) |
CN (1) | CN100560732C (ja) |
AU (1) | AU2004241327B2 (ja) |
BR (1) | BRPI0410783A (ja) |
CA (1) | CA2526697A1 (ja) |
DE (1) | DE10323081A1 (ja) |
HK (1) | HK1092840A1 (ja) |
IL (1) | IL172008A (ja) |
MX (1) | MXPA05012521A (ja) |
NO (1) | NO20055990L (ja) |
RU (1) | RU2395813C2 (ja) |
WO (1) | WO2004104220A2 (ja) |
Families Citing this family (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20170165230A1 (en) | 2014-04-09 | 2017-06-15 | Christopher Rudd | Use of gsk-3 inhibitors or activators which modulate pd-1 or t-bet expression to modulate t cell immunity |
CN113933463B (zh) * | 2021-10-14 | 2024-04-02 | 丽江英煌集生物工程有限公司 | 一种玛咖多肽活性的快速分检装置及分检方法 |
Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO1998009169A1 (en) * | 1996-08-26 | 1998-03-05 | Tularik, Inc. | Method for detecting kinase activity |
Family Cites Families (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CA2166871A1 (en) * | 1993-07-29 | 1995-02-09 | Neill A. Giese | Receptor function assays |
US5763198A (en) * | 1994-07-22 | 1998-06-09 | Sugen, Inc. | Screening assays for compounds |
AU5965896A (en) * | 1995-06-07 | 1996-12-30 | Sugen, Inc. | Screening assays for compounds |
JP2002512685A (ja) * | 1997-01-15 | 2002-04-23 | テリック・インコーポレイテッド | インスリン受容体活性のモジュレーター |
WO2000075167A2 (en) * | 1999-06-09 | 2000-12-14 | Ljl Biosystems, Inc. | Phosphorylation assays |
US6203994B1 (en) * | 1997-12-05 | 2001-03-20 | Pharmacia & Upjohn Company | Fluorescence-based high throughput sereening assays for protein kinases and phosphatases |
-
2003
- 2003-05-22 DE DE10323081A patent/DE10323081A1/de not_active Ceased
-
2004
- 2004-04-27 JP JP2006529715A patent/JP4740858B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 2004-04-27 AU AU2004241327A patent/AU2004241327B2/en not_active Ceased
- 2004-04-27 WO PCT/EP2004/004428 patent/WO2004104220A2/de active Application Filing
- 2004-04-27 BR BRPI0410783-7A patent/BRPI0410783A/pt not_active Application Discontinuation
- 2004-04-27 EP EP04729646A patent/EP1627073A2/de not_active Withdrawn
- 2004-04-27 CA CA002526697A patent/CA2526697A1/en not_active Withdrawn
- 2004-04-27 RU RU2005140091/13A patent/RU2395813C2/ru not_active IP Right Cessation
- 2004-04-27 KR KR1020057022317A patent/KR20060015290A/ko not_active IP Right Cessation
- 2004-04-27 MX MXPA05012521A patent/MXPA05012521A/es active IP Right Grant
- 2004-04-27 CN CNB2004800140923A patent/CN100560732C/zh not_active Expired - Fee Related
- 2004-05-19 US US10/849,424 patent/US7732151B2/en not_active Expired - Fee Related
-
2005
- 2005-11-16 IL IL172008A patent/IL172008A/en unknown
- 2005-12-16 NO NO20055990A patent/NO20055990L/no unknown
-
2006
- 2006-12-06 HK HK06113389.6A patent/HK1092840A1/xx not_active IP Right Cessation
Patent Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO1998009169A1 (en) * | 1996-08-26 | 1998-03-05 | Tularik, Inc. | Method for detecting kinase activity |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
NO20055990L (no) | 2006-02-14 |
KR20060015290A (ko) | 2006-02-16 |
BRPI0410783A (pt) | 2006-06-20 |
CN100560732C (zh) | 2009-11-18 |
US7732151B2 (en) | 2010-06-08 |
AU2004241327A1 (en) | 2004-12-02 |
RU2005140091A (ru) | 2006-05-10 |
CN1795273A (zh) | 2006-06-28 |
EP1627073A2 (de) | 2006-02-22 |
DE10323081A1 (de) | 2004-12-16 |
JP2007512802A (ja) | 2007-05-24 |
IL172008A (en) | 2011-12-29 |
WO2004104220A2 (de) | 2004-12-02 |
CA2526697A1 (en) | 2004-12-02 |
MXPA05012521A (es) | 2006-05-25 |
US20080020399A1 (en) | 2008-01-24 |
WO2004104220A3 (de) | 2005-06-09 |
RU2395813C2 (ru) | 2010-07-27 |
HK1092840A1 (en) | 2007-02-16 |
AU2004241327B2 (en) | 2010-03-25 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Alvarez et al. | Pro-Leu-Ser/Thr-Pro is a consensus primary sequence for substrate protein phosphorylation. Characterization of the phosphorylation of c-myc and c-jun proteins by an epidermal growth factor receptor threonine 669 protein kinase | |
US20040248323A1 (en) | Methods for conducting assays for enzyme activity on protein microarrays | |
US20090035796A1 (en) | Enzyme sensors including environmentally sensitive or fluorescent labels and uses thereof | |
US7727950B2 (en) | Methods and reagents for assaying protein kinase activity | |
US20070036793A1 (en) | Methods for use of an lkb1/strad7mo25 complex | |
Ek et al. | Phosphohistidine phosphatase 1 (PHPT1) also dephosphorylates phospholysine of chemically phosphorylated histone H1 and polylysine | |
WO2006138445A9 (en) | Methods and substrates for conducting assays | |
US20150185215A1 (en) | Cell-Based Assays For Post-Translational Enzyme Activity | |
JP2008104356A (ja) | リン酸化−脱リン酸化反応検出用基質群およびそれを用いた検出方法 | |
US7279286B2 (en) | High-throughput-assay with high sensitivity for measuring of the activity of β-adrenergic receptor kinase and for determining the impact of test substances on such activity | |
US20130059314A1 (en) | Fret-based method for the determination of protein phosphatase and kinase activity | |
JP4740858B2 (ja) | ポリペプチドの使用 | |
CA2484397C (en) | Methods for measuring protein kinase and phosphatase activity | |
US20100029507A1 (en) | The biochip for the detection of phosphorylation and the detection method using the same | |
US20100129815A1 (en) | Identification of cardiac specific myosin light chain kinase | |
US7314729B2 (en) | Methods and kits for transferases | |
EP1960543A1 (en) | Method for the diagnosis and treatment of cardiovascular diseases | |
US20040082021A1 (en) | Method for assaying compounds or agents for ability to decrease the activity of microsomal prostaglandin E synthase or hematopoietic prostaglandin D synthase | |
Sharif | The use of Peptide Microarrays in the study of O-GlcNAcylation, Phosphorylation and their Crosstalk | |
US7794964B2 (en) | Biochip for the detection of phosphorylation and the detection method using the same | |
EP1664333A2 (en) | High-throughput-assay with high sensitivity for measuring of the activity of beta-adrenergic receptor kinase and for determining the impact of test substances on such activity | |
MX2008006671A (en) | Method for the diagnosis and treatment of cardiovascular diseases |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20070425 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20100119 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20100416 |
|
A02 | Decision of refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 Effective date: 20100706 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20101105 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A821 Effective date: 20101222 |
|
A911 | Transfer to examiner for re-examination before appeal (zenchi) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A911 Effective date: 20110119 |
|
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20110405 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20110502 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20140513 Year of fee payment: 3 |
|
LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |