JP4718328B2 - Ｃ８連結したピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−アクリドン／アクリジン・ハイブリッド - Google Patents

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Description

発明の分野
本発明は、抗腫瘍物質として有用な、新規ピロロ-[２,１-ｃ][１,４]ベンゾジアゼピン・ハイブリッドを提供するものである。本発明はさらに、抗腫瘍物質としての、新たなピロロ-[２,１-ｃ][１,４]ベンゾジアゼピンハイブリッドの製造方法を提供する。さらに詳細には、本発明は、脂肪族鎖長の異なる７-メトキシ-８-[ｎ'-(４"-アクリドニルカルボキサミド)アルキル]-オキシ-(１１ａＳ)-１,２,３,１１ａ-テトラヒドロ-５Ｈ-ピロロ[２,１-ｃ][１,４]ベンゾジアゼピン-５-オン及び７-メトキシ-８-[ｎ'-(４"-アクリジニルカルボキサミド)アルキル]-オキシ-(１１ａＳ)-１,２,３,１１ａ-テトラヒドロ-５Ｈ-ピロロ[２,１-ｃ][１,４]ベンゾジアゼピン-５-オンの製造方法を提供し、本発明はまた、ＤＮＡ結合、抗癌(抗腫瘍)活性を記載している。本発明に係る新規ピロロ[２,１-ｃ]-[１,４]ベンゾジアゼピン類の構造式を下に示す：
Figure 0004718328
発明の背景
ピロロ[２,１-ｃ][１,４]ベンゾジアゼピン抗腫瘍抗生物質は一般にアントラマイシン類の化合物として知られている。この数年間、新たなピロロ[２,１-ｃ][１,４]ベンゾジアゼピン(ＰＢＤ)類の開発に関心の高まりが示されている。これらの抗生物質は、ＤＮＡと共有結合的反応をしてＮ２-グアニン付加生成物を形成し、それは、Ｎ１０-Ｃ１１位の親電子イミンとの酸不安定性アミノ結合を介してＤＮＡ二本鎖の副溝内に位置する(Kunimoto, S.; Masuda, T.; Kanbayashi, N.; Hamada, M.; Naganawa, H.; Miyamoto, M.; Takeuchi, T.; and Unezawa, H., J. Antibiot., 1980, 33, 665;Kohn, K. W. and Speous, C. L., J. Mol. Biol., 1970, 51, 551;Hurley, L. H.; Gairpla, C. and Zmijewski, M., Biochem. Biophys. Acta., 1977, 475, 521;Kaplan, D. J. and Hurley, L. H., Biochemistry, 1981, 20, 7572)。この分子は右向きの回転を持ち、その事が、３個の塩基対に跨るＢ型二本鎖ＤＮＡの副溝の弯曲に該分子を従わせる。近年の開発は、２個のＰＢＤユニットを、そのＣ-８位を介して結合して、ＤＮＡを架橋できる二官能性のアルキル化剤を与えることであった。(Thurston, D. E.; Bose, D. S.; Thomson, A. S.; Howard, P. W.; Leoni, A.; Croker, S. J.; Jenkins, T. C.; Neidle, S. and Hurley, L. H., J. Org. Chem., 1996, 61, 8141)。
Figure 0004718328
近年、不活性なプロパンジオキシ・リンカーを介してＣ-８位で結合させた２個のＣ２-エキソ-メチレン置換ＤＣ-８１サブユニットを含むＰＢＤ二量体が開発された(Gregson, S. J.; Howard, P. W.; Hartely, J. A.; Brooks, N. A.; Adams, L. J.; Jenkins, T. C.; Kelland, L. R. and Thurston, D. E., J. Med. Chem., 2001, 44, 737)。近年、顕著なＤＮＡ結合能と強力な抗腫瘍活性を有する非架橋混合イミン-アミドＰＢＤ二量体が合成された(Kamal, A.; Ramesh, G.; Laxman, N.; Ramulu, P.; Srinivas, O.; Neelima, K.; Kondapi, A. K.; Srinu, V. B.; Nagarajaram, H. M. J., Med. Chem., 2002, 45, 4679)。
天然のピロロ[２,１-ｃ][１,４]ベンゾジアゼピン類はStreptomyces種から誘導される抗腫瘍抗生物質の群に属している。ＰＢＤ系は特定のＤＮＡ配列を認識しそれに結合できることから、近年ＰＢＤ系のための大きな推進力がある。天然に存在するＰＢＤの例には、アントラマイシン、ＤＣ-８１、トマイマイシン、シビロマイシン及びネオトラマイシンがある。
しかしながら、これらの抗生物質の臨床的有効性は、低い水溶性、心臓毒性、薬物耐性の出現及び代謝による不活性化といった幾つかの制限によって障害されている。
発明の目的
本発明の主たる目的は、抗腫瘍物質として有用な新たなピロロ[２,１-ｃ][１,４]ベンゾジアゼピンハイブリッドを提供する事である。
本発明のもう一つの目的は、抗腫瘍物質として有用な新規なピロロ[２,１-ｃ][１,４]ベンゾジアゼピンハイブリッドの製造方法を提供する事である。
発明の要約
したがって本発明は、式ＩＶ又はＶＩＩ：
Figure 0004718328
 で示される新規なピロロ[２,１-ｃ][１,４]ベンゾジアゼピンハイブリッドを提供する。
本発明の或る態様では、本発明化合物は、７-メトキシ-８-[２'-(４"-アクリドニルカルボキサミド)エチル]-オキシ-(１１ａＳ)１,２,３,１１ａ-テトラヒドロ-５Ｈ-ピロロ[２,１-ｃ][１,４]ベンゾジアゼピン-５-オン；７-メトキシ-８-[２'-(４"-アクリドニルカルボキサミド)エチル]-オキシ-(４Ｒ)-ヒドロキシ-(１１ａＳ)１,２,３,１１ａ-テトラヒドロ-５Ｈ-ピロロ[２,１-ｃ][１,４]ベンゾジアゼピン-５-オン；７-メトキシ-８-[３'-(４"-アクリドニルカルボキサミド)プロピル]-オキシ-(１１ａＳ)１,２,３,１１ａ-テトラヒドロ-５Ｈ-ピロロ[２,１-ｃ][１,４]ベンゾジアゼピン-５-オン；７-メトキシ-８-[３'-(４"-アクリドニルカルボキサミド)プロピル]-オキシ-(４Ｒ)-ヒドロキシ-(１１ａＳ)１,２,３,１１ａ-テトラヒドロ-５Ｈ-ピロロ[２,１-ｃ][１,４]ベンゾジアゼピン-５-オン；７-メトキシ-８-[２'-(４"-アクリジニルカルボキサミド)エチル]-オキシ-(１１ａＳ)１,２,３,１１ａ-テトラヒドロ-５Ｈ-ピロロ[２,１-ｃ][１,４]ベンゾジアゼピン-５-オン；７-メトキシ-８-[２'-(４"-アクリジニルカルボキサミド)エチル]-オキシ-(４Ｒ)-ヒドロキシ-(１１ａＳ)１,２,３,１１ａ-テトラヒドロ-５Ｈ-ピロロ[２,１-ｃ][１,４]ベンゾジアゼピン-５-オン；７-メトキシ-８-[３'-(４"-アクリジニルカルボキサミド)プロピル]-オキシ-(１１ａＳ)１,２,３,１１ａ-テトラヒドロ-５Ｈ-ピロロ[２,１-ｃ][１,４]ベンゾジアゼピン-５-オン及び７-メトキシ-８-[３'-(４"-アクリジニルカルボキサミド)プロピル]-オキシ-(４Ｒ)-ヒドロキシ-(１１ａＳ)１,２,３,１１ａ-テトラヒドロ-５Ｈ-ピロロ[２,１-ｃ][１,４]ベンゾジアゼピン-５-オンより成る群から選ばれる。
本発明はさらに、以下の式ＩＶ又はＶＩＩ：
Figure 0004718328
 [式中、Ｒ＝Ｈ、ＯＨであり、そしてｎは２〜３である]
で示されるピロロ[２,１-ｃ][１,４]ベンゾジアゼピンハイブリッドの製造方法であって、
アクリドン又はアクリジン酸を、有機溶媒中ＥＤＣＩ及びＨＯＢｔの存在下で、以下の式Ｉ：
Figure 0004718328
 で示される(２Ｓ)-Ｎ-[４-(ｎ'-アミノアルキルオキシ)-５-メトキシ-２-ニトロベンゾイル]-ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタールと２４時間反応させて、以下の：
Figure 0004718328
 [式中、ｎは２〜３である]
で表される(２Ｓ)-Ｎ-｛４-[ｎ'-(４"-アクリドニルカルボキサミド)-アルキル]-オキシ-５-メトキシ-２-ニトロベンゾイル｝ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタール(式ＩＩ)／(２Ｓ)-Ｎ-｛４-[ｎ'-(４"-アクリジニルカルボキサミド)-アルキル]-オキシ-５-メトキシ-２-ニトロベンゾイル｝ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタール(式Ｖ)を得て、当該式ＩＩ／式Ｖの化合物を単離し、次いでこの式ＩＩ／式Ｖの化合物を、還流温度以下で有機溶媒の存在下にＳｎＣｌ2・２Ｈ2Ｏで還元し、以下の：
Figure 0004718328
Figure 0004718328
 [式中、ｎは２〜３である]
で表される(２Ｓ)-Ｎ-｛４-[ｎ'-(４"-アクリドニルカルボキサミド)-アルキル]-オキシ-５-メトキシ-２-アミノベンゾイル｝ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタール(式ＩＩＩ)／(２Ｓ)-Ｎ-｛４-[ｎ'-(４"-アクリジニルカルボキサミド)-アルキル]-オキシ-５-メトキシ-２-アミノベンゾイル｝ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタール(式ＶＩ)を既知の方法で単離し、式ＩＩＩ／式ＶＩの化合物を常法により既知の脱保護剤と反応させて、式ＩＶ／式ＶＩＩで示される新規なピロロ[２,１-ｃ][１,４]ベンゾジアゼピンハイブリッド[式中、ｎ及びＲは上記の通りである]を得る事を含む方法を提供する。
本発明の或る態様では、アクリドン／アクリジン酸と式Ｉの化合物の反応に使用する有機溶媒はジメチルフランを含む。
本発明の別の態様では、式ＩＩ／式Ｖの化合物を、飽和ＮａＨＣＯ3、塩類溶液による洗浄、乾燥及び溶媒の蒸発によって単離する。
本発明の別の態様では、式ＩＩ／式Ｖの化合物の還元の際に使用する有機溶媒はメタノールを含む。
本発明のさらなる態様では、式ＩＩＩ／式Ｖの化合物を、飽和ＮａＨＣＯ3で反応混合物のｐＨを約ｐＨ８に調節し、酢酸エチルで希釈し、セライトで濾過し、そして有機相を抽出しその有機相をＮａ2ＳＯ4で乾燥することにより単離する。
本発明の別の態様では、式ＩＶ／式ＶＩＩの化合物の取得に使用する脱保護剤は、ＭｅＣＮ-水(４：１)中のＨｇＣｌ2及びＣａＣＯ3を含む。
本発明は、式ＩＶ又はＶＩＩ[式中、Ｒ＝Ｈ、ＯＨであり、ｎは２〜３である]で示される新規なピロロ-[２,１-ｃ][１,４]ベンゾジアゼピンハイブリッドを提供し、さらにその製造方法を提供するものである。
本発明に係る方法は、アクリドン又はアクリジン酸を、有機溶媒中ＥＤＣＩ及びＨＯＢｔの存在下で、式Ｉ：
Figure 0004718328
 で示される(２Ｓ)-Ｎ-[４-(ｎ'-アミノアルキルオキシ)-５-メトキシ-２-ニトロベンゾイル]-ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタールと２４時間反応させて、以下の：
Figure 0004718328
 [式中、ｎは２〜３である]
で表される(２Ｓ)-Ｎ-｛４-[ｎ'-(４"-アクリドニルカルボキサミド)-アルキル]-オキシ-５-メトキシ-２-ニトロベンゾイル｝ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタール(式ＩＩ)／(２Ｓ)-Ｎ-｛４-[ｎ'-(４"-アクリジニルカルボキサミド)-アルキル]-オキシ-５-メトキシ-２-ニトロベンゾイル｝ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタール(式Ｖ)を得る事を含む。
式ＩＩ／式Ｖの化合物を単離し、次いでこの式ＩＩ／式Ｖの化合物を、還流温度以下で、メタノールのような有機溶媒の存在下にＳｎＣｌ2・２Ｈ2Ｏで還元して、(２Ｓ)-Ｎ-｛４-[ｎ'-(４"-アクリドニルカルボキサミド)-アルキル]-オキシ-５-メトキシ-２-アミノベンゾイル｝ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタール(式ＩＩＩ)／(２Ｓ)-Ｎ-｛４-[ｎ'-(４"-アクリジニルカルボキサミド)-アルキル]-オキシ-５-メトキシ-２-アミノベンゾイル｝ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタール(式ＶＩ)[式中、ｎは２〜３である]を得る。次いで以下の式ＩＩＩ／式ＶＩ：
Figure 0004718328
Figure 0004718328
 で表される化合物を常法で単離する。
式ＩＩＩ／式ＶＩの化合物を常法により既知の脱保護剤と反応させて、式ＩＶ／式ＶＩＩで示される新規なピロロ[２,１-ｃ][１,４]ベンゾジアゼピンハイブリッド[式中、ｎ及びＲは上記の通りである]を得る：
Figure 0004718328
アクリドン／アクリジン酸と式Ｉの化合物の反応に使用する有機溶媒はジメチルフランを含み、式ＩＩ／式Ｖの化合物は、飽和ＮａＨＣＯ3、塩類溶液による洗浄、乾燥及び溶媒の蒸発によって単離する。式ＩＩ／式Ｖの化合物の還元の際に使用する有機溶媒はメタノールを含み、式ＩＩＩ／式Ｖの化合物は、飽和ＮａＨＣＯ3溶液で反応混合物のｐＨを約ｐＨ８に調節し、酢酸エチルで希釈し、セライトで濾過し、そして有機相を抽出しその有機相をＮａ2ＳＯ4で乾燥することにより単離する。
式ＩＶ／式ＶＩＩの化合物の取得に使用する脱保護剤は、ＭｅＣＮ-水(４：１)中のＨｇＣｌ2及びＣａＣＯ3を含む。
前駆体であるアクリドン酸(Atwell, G. J.; Cain, B. F.; Baguley, B. C.; Finlay, G. J.; Denny, W. A., J. Med. Chem., 1984, 27, 1481)、アクリジン酸(Atwell, G. J.; Rewcastle, G. W.; Baguley, B. C.; Denny, W. A., J. Med. Chem., 1987, 30, 664)及び式Ｉで示される(２Ｓ)-Ｎ-[４-(ｎ'-アミノアルキルオキシ)-５-メトキシ-２-ニトロベンゾイル]ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタール(Thurston, D. E.; Morris, S. J.; Hartley, J. A., Chem. Commun., 1996, 563-565)は文献に記載の方法によって製造した。
本発明に係る式ＩＶ／式ＶＩＩで示される幾つかの代表化合物を下に記載する。
１. ７-メトキシ-８-[２'-(４"-アクリドニルカルボキサミド)エチル]-オキシ-(１１ａＳ)１,２,３,１１ａ-テトラヒドロ-５Ｈ-ピロロ[２,１-ｃ][１,４]ベンゾジアゼピン-５-オン、
２. ７-メトキシ-８-[２'-(４"-アクリドニルカルボキサミド)エチル]-オキシ-(４Ｒ)-ヒドロキシ-(１１ａＳ)１,２,３,１１ａ-テトラヒドロ-５Ｈ-ピロロ[２,１-ｃ][１,４]ベンゾジアゼピン-５-オン、
３. ７-メトキシ-８-[３'-(４"-アクリドニルカルボキサミド)プロピル]-オキシ-(１１ａＳ)１,２,３,１１ａ-テトラヒドロ-５Ｈ-ピロロ[２,１-ｃ][１,４]ベンゾジアゼピン-５-オン、
４. ７-メトキシ-８-[３'-(４"-アクリドニルカルボキサミド)プロピル]-オキシ-(４Ｒ)-ヒドロキシ-(１１ａＳ)１,２,３,１１ａ-テトラヒドロ-５Ｈ-ピロロ[２,１-ｃ][１,４]ベンゾジアゼピン-５-オン、
５. ７-メトキシ-８-[２'-(４"-アクリジニルカルボキサミド)エチル]-オキシ-(１１ａＳ)１,２,３,１１ａ-テトラヒドロ-５Ｈ-ピロロ[２,１-ｃ][１,４]ベンゾジアゼピン-５-オン、
６. ７-メトキシ-８-[２'-(４"-アクリジニルカルボキサミド)エチル]-オキシ-(４Ｒ)-ヒドロキシ-(１１ａＳ)１,２,３,１１ａ-テトラヒドロ-５Ｈ-ピロロ[２,１-ｃ][１,４]ベンゾジアゼピン-５-オン、
７. ７-メトキシ-８-[３'-(４"-アクリジニルカルボキサミド)プロピル]-オキシ-(１１ａＳ)１,２,３,１１ａ-テトラヒドロ-５Ｈ-ピロロ[２,１-ｃ][１,４]ベンゾジアゼピン-５-オン、
８. ７-メトキシ-８-[３'-(４"-アクリジニルカルボキサミド)プロピル]-オキシ-(４Ｒ)-ヒドロキシ-(１１ａＳ)１,２,３,１１ａ-テトラヒドロ-５Ｈ-ピロロ[２,１-ｃ][１,４]ベンゾジアゼピン-５-オン。
Ｃ-８位で結合されたこれら新たなピロロ[２,１-ｃ][１,４]ベンゾジアゼピンハイブリッドの類似体は、種々の細胞系列において有望なＤＮＡ結合活性及び有効な抗癌活性を示した。合成されたこれらの分子は、潜在的な配列選択的ＤＮＡ結合性と共に計り知れない生物学的重要性を有する。その結果、スキーム１／スキーム２で示される新たな同族体の設計と合成がなされたが、それは、
１. ＤＣ-８１中間体のＣ-８位における、アクリドン／アクリジン環部分とのエーテル結合、
２. 反応混合物を還流温度以下で１２-４８時間加熱、
３. Ｃ-８で結合されたＰＢＤ抗腫瘍抗生物質ハイブリッドイミンの合成、
４. 酢酸エチル、ヘキサン、ジクロロメタン及びメタノールといった種々の溶媒を用いたカラムクロマトグラフィーによる精製、
を含む。
反応スキームを下に示すが、これらは本発明に係る方法の代表例である。
Figure 0004718328
Figure 0004718328
以下の実施例は例示のために記載するものであり、故に本発明の範囲の限定を示すと解釈してはならない。
実施例１
化合物アクリドン酸(０.２３９ｇ、１ｍｍｏｌ)を乾燥ＤＭＦ(１０ｍＬ)に溶解し、ＥＤＣＩ(０.２０３ｇ、１.５ｍｍｏｌ)及びＨＯＢｔ(０.２８８ｇ、１.５ｍｍｏｌ)を加え、混合物を０-５℃に冷却し、３０分間攪拌した。ここに式Ｉで示される(２Ｓ)-Ｎ-[４-(２'-アミノエチル)-オキシ-５-メトキシ-２-ニトロベンゾイル]ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタール(０.４４３ｇ、１ｍｍｏｌ)のＤＭＦ溶液を同じ温度で加え、溶液を室温で一晩攪拌した。混合物を飽和ＮａＨＣＯ3(５０ｍＬ)、塩類溶液で洗浄し、乾燥し、溶媒を蒸発させた。この粗製物質を、酢酸エチル／ヘキサン(８：２)溶媒を用いてシリカゲルクロマトグラフィーに付すと、黄色液体の化合物(２Ｓ)-Ｎ-｛４-[２'-(４"-アクリドニルカルボキサミド)-エチル]-オキシ-５-メトキシ-２-ニトロベンゾイル｝ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタール(式ＩＩ)が得られた。
化合物(２Ｓ)-Ｎ-｛４-[２'-(４"-アクリドニルカルボキサミド)-エチル]-オキシ-５-メトキシ-２-ニトロベンゾイル｝ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタール(式ＩＩ)(０.６６４ｇ、１ｍｍｏｌ)をメタノール(１５ｍＬ)に溶解し、添加したＳｎＣｌ2・２Ｈ2Ｏ(１.１２８ｇ、５ｍｍｏｌ)を２時間、又はＴＬＣが反応の完結を示すまで還流した。次に反応混合物を飽和ＮａＨＣＯ3溶液で注意深くｐＨ８に調節し、酢酸エチルで希釈し、セライトで濾過し抽出した。合わせた有機相をＮａ2ＳＯ4で乾燥し、減圧で蒸発させて、粗製化合物(２Ｓ)-Ｎ-｛４-[２'-(４"-アクリドニルカルボキサミド)-エチル]-オキシ-５-メトキシ-２-アミノベンゾイル｝ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタール(式ＩＩＩ)を得た。
ＭｅＣＮ-水(４：１)に入れた、化合物(２Ｓ)-Ｎ-｛４-[２'-(４"-アクリドニルカルボキサミド)-エチル]-オキシ-５-メトキシ-２-アミノベンゾイル｝ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタール(式ＩＩＩ)(０.６３４ｇ、１ｍｍｏｌ)、ＨｇＣｌ2(０.８１４５ｇ、３ｍｍｏｌ)及びＣａＣＯ3(０.３ｇ、３ｍｍｏｌ)の溶液を、ＴＬＣが出発物質の完全な喪失を示すまで室温でゆっくりと攪拌した。反応混合物をＥｔＯＡｃ(３０ｍＬ)で希釈し、セライト層で濾過した。この透明な黄色有機上清を飽和５％ＮａＨＣＯ3(２０ｍＬ)、塩類溶液(２０ｍＬ)で抽出し、合わせた有機相を乾燥する(Ｎａ2ＳＯ4)。有機相を減圧で蒸発させ、カラムクロマトグラフィー(９０％ＣＨ2Ｃｌ2-ＭｅＯＨ)で精製して、化合物７-メトキシ-８-[２'-(４"-アクリドニルカルボキサミド)エチル]-オキシ-(１１ａＳ)１,２,３,１１ａ-テトラヒドロ-５Ｈ-ピロロ[２,１-ｃ][１,４]ベンゾジアゼピン-５-オンが得られた。
実施例２
化合物アクリドン酸(０.２３９ｇ、１ｍｍｏｌ)を乾燥ＤＭＦ(１０ｍＬ)に溶解し、ＥＤＣＩ(０.２０３ｇ、１.５ｍｍｏｌ)及びＨＯＢｔ(０.２８８ｇ、１.５ｍｍｏｌ)を加え、混合物を０-５℃に冷却し、３０分間攪拌した。ここに式Ｉで示される(４Ｒ)-ヒドロキシ-(２Ｓ)-Ｎ-[４-(２'-アミノエチル)-オキシ-５-メトキシ-２-ニトロベンゾイル]ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタール(０.４５９ｇ、１ｍｍｏｌ)のＤＭＦ溶液を同じ温度で加え、溶液を室温で一晩攪拌した。混合物を飽和ＮａＨＣＯ3(５０ｍＬ)、塩類溶液で洗浄し、乾燥し、溶媒を蒸発させた。この粗製物質を、酢酸エチル／ヘキサン(８：２)溶媒を用いてシリカゲルクロマトグラフィーに付すと、黄色液体の(４Ｒ)-ヒドロキシ-(２Ｓ)-Ｎ-｛４-[２'-(４"-アクリドニルカルボキサミド)-エチル]-オキシ-５-メトキシ-２-ニトロベンゾイル｝ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタール(式ＩＩ)が得られた。
化合物(４Ｒ)-ヒドロキシ-(２Ｓ)-Ｎ-｛４-[２'-(４"-アクリドニルカルボキサミド)-エチル]-オキシ-５-メトキシ-２-ニトロベンゾイル｝ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタール(式ＩＩ)(０.６８０ｇ、１ｍｍｏｌ)をメタノール(１５ｍＬ)に溶解し、添加したＳｎＣｌ2・２Ｈ2Ｏ(１.１２８ｇ、５ｍｍｏｌ)を２時間、又はＴＬＣが反応の完結を示すまで還流した。次に反応混合物を飽和ＮａＨＣＯ3溶液で注意深くｐＨ８に調節し、酢酸エチルで希釈し、セライトで濾過し抽出した。合わせた有機相をＮａ2ＳＯ4で乾燥し、減圧で蒸発させて、粗製化合物(４Ｒ)-ヒドロキシ-(２Ｓ)-Ｎ-｛４-[２'-(４"-アクリドニルカルボキサミド)-エチル]-オキシ-５-メトキシ-２-アミノベンゾイル｝-ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタール(式ＩＩＩ)を得た。
ＭｅＣＮ-水(４：１)に入れた、化合物(４Ｒ)-ヒドロキシ-(２Ｓ)-Ｎ-｛４-[２'-(４"-アクリドニルカルボキサミド)-エチル]-オキシ-５-メトキシ-２-アミノベンゾイル｝ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタール(式ＩＩＩ)(０.６５０ｇ、１ｍｍｏｌ)、ＨｇＣｌ2(０.８１４５ｇ、３ｍｍｏｌ)及びＣａＣＯ3(０.３ｇ、３ｍｍｏｌ)の溶液を、ＴＬＣが出発物質の完全な喪失を示すまで室温でゆっくりと攪拌した。反応混合物をＥｔＯＡｃ(３０ｍＬ)で希釈し、セライト層で濾過した。この透明な黄色有機上清を飽和５％ＮａＨＣＯ3(２０ｍＬ)、塩類溶液(２０ｍＬ)で抽出し、合わせた有機相を乾燥する(Ｎａ2ＳＯ4)。有機相を減圧で蒸発させ、カラムクロマトグラフィー(９０％ＣＨ2Ｃｌ2-ＭｅＯＨ)で精製して、化合物７-メトキシ-８-[２'-(４"-アクリドニルカルボキサミド)-エチル]-オキシ-(４Ｒ)-ヒドロキシ-(１１ａＳ)１,２,３,１１ａ-テトラヒドロ-５Ｈ-ピロロ[２,１-ｃ][１,４]ベンゾジアゼピン-５-オンが得られた。
実施例３
化合物アクリドン酸(０.２３９ｇ、１ｍｍｏｌ)を乾燥ＤＭＦ(１０ｍＬ)に溶解し、ＥＤＣＩ(０.２０３ｇ、１.５ｍｍｏｌ)及びＨＯＢｔ(０.２８８ｇ、１.５ｍｍｏｌ)を加え、混合物を０-５℃に冷却し、３０分間攪拌した。ここに式Ｉで示される(２Ｓ)-Ｎ-[４-(３'-アミノプロピル)-オキシ-５-メトキシ-２-ニトロベンゾイル]ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタール(０.４５７ｇ、１ｍｍｏｌ)のＤＭＦ溶液を同じ温度で加え、溶液を室温で一晩攪拌した。混合物を飽和ＮａＨＣＯ3(５０ｍＬ)、塩類溶液で洗浄し、乾燥し、溶媒を蒸発させた。この粗製物質を、酢酸エチル／ヘキサン(８：２)溶媒を用いてシリカゲルクロマトグラフィーに付すと、黄色液体の化合物(２Ｓ)-Ｎ-｛４-[３'-(４"-アクリドニルカルボキサミド)-プロピル]-オキシ-５-メトキシ-２-ニトロベンゾイル｝ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタール(式ＩＩ)が得られた。
Figure 0004718328
化合物(２Ｓ)-Ｎ-｛４-[３'-(４"-アクリドニルカルボキサミド)-プロピル]-オキシ-５-メトキシ-２-ニトロベンゾイル｝ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタール(式ＩＩ)(０.６７８ｇ、１ｍｍｏｌ)をメタノール(１５ｍＬ)に溶解し、添加したＳｎＣｌ2・２Ｈ2Ｏ(１.１２８ｇ、５ｍｍｏｌ)を２時間、又はＴＬＣが反応の完結を示すまで還流した。次に反応混合物を飽和ＮａＨＣＯ3溶液で注意深くｐＨ８に調節し、酢酸エチルで希釈し、セライトで濾過し抽出した。合わせた有機相をＮａ2ＳＯ4で乾燥し、減圧で蒸発させて、粗製の(２Ｓ)-Ｎ-｛４-[３'-(４"-アクリドニルカルボキサミド)-プロピル]-オキシ-５-メトキシ-２-アミノベンゾイル｝ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタール(式ＩＩＩ)を得た。
Figure 0004718328
ＭｅＣＮ-水(４：１)に入れた、化合物(２Ｓ)-Ｎ-｛４-[３'-(４"-アクリドニルカルボキサミド)-プロピル]-オキシ-５-メトキシ-２-アミノベンゾイル｝ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタール(式ＩＩＩ)(０.６４８ｇ、１ｍｍｏｌ)、ＨｇＣｌ2(０.８１４５ｇ、３ｍｍｏｌ)及びＣａＣＯ3(０.３ｇ、３ｍｍｏｌ)の溶液を、ＴＬＣが出発物質の完全な喪失を示すまで室温でゆっくりと攪拌した。反応混合物をＥｔＯＡｃ(３０ｍＬ)で希釈し、セライト層で濾過した。この透明な黄色有機上清を飽和５％ＮａＨＣＯ3(２０ｍＬ)、塩類溶液(２０ｍＬ)で抽出し、合わせた有機相を乾燥する(Ｎａ2ＳＯ4)。有機相を減圧で蒸発させ、カラムクロマトグラフィー(９０％ＣＨ2Ｃｌ2-ＭｅＯＨ)で精製して、化合物７-メトキシ-８-[３'-(４"-アクリドニルカルボキサミド)プロピル]-オキシ-(１１ａＳ)１,２,３,１１ａ-テトラヒドロ-５Ｈ-ピロロ[２,１-ｃ][１,４]ベンゾジアゼピン-５-オンが得られた。
Figure 0004718328
実施例４
化合物アクリドン酸(０.２３９ｇ、１ｍｍｏｌ)を乾燥ＤＭＦ(１０ｍＬ)に溶解し、ＥＤＣＩ(０.２０３ｇ、１.５ｍｍｏｌ)及びＨＯＢｔ(０.２８８ｇ、１.５ｍｍｏｌ)を加え、混合物を０-５℃に冷却し、３０分間攪拌した。ここに式Ｉで示される(４Ｒ)-ヒドロキシ-(２Ｓ)-Ｎ-[４-(３'-アミノプロピル)-オキシ-５-メトキシ-２-ニトロベンゾイル]ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタール(０.４７３ｇ、５ｍｍｏｌ)のＤＭＦ溶液を同じ温度で加え、溶液を室温で一晩攪拌した。混合物を飽和ＮａＨＣＯ3(５０ｍＬ)、塩類溶液で洗浄し、乾燥し、溶媒を蒸発させた。この粗製物質を、酢酸エチル／ヘキサン(８：２)溶媒を用いてシリカゲルクロマトグラフィーに付すと、黄色液体の(４Ｒ)-ヒドロキシ-(２Ｓ)-Ｎ-｛４-[３'-(４"-アクリドニルカルボキサミド)-プロピル]-オキシ-５-メトキシ-２-ニトロベンゾイル｝ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタール(式ＩＩ)が得られた。
化合物(４Ｒ)-ヒドロキシ-(２Ｓ)-Ｎ-｛４-[３'-(４"-アクリドニルカルボキサミド)-プロピル]-オキシ-５-メトキシ-２-ニトロベンゾイル｝ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタール(式ＩＩ)(０.６９４ｇ、１ｍｍｏｌ)をメタノール(１５ｍＬ)に溶解し、添加したＳｎＣｌ2・２Ｈ2Ｏ(１.１２８ｇ、５ｍｍｏｌ)を２時間、又はＴＬＣが反応の完結を示すまで還流した。次に反応混合物を飽和ＮａＨＣＯ3溶液で注意深くｐＨ８に調節し、酢酸エチルで希釈し、セライトで濾過し抽出した。合わせた有機相をＮａ2ＳＯ4で乾燥し、減圧で蒸発させて、粗製化合物(４Ｒ)-ヒドロキシ-(２Ｓ)-Ｎ-｛４-[３'-(４"-アクリドニルカルボキサミド)-プロピル]-オキシ-５-メトキシ-２-アミノベンゾイル｝ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタール(式ＩＩＩ)を得た。
ＭｅＣＮ-水(４：１)に入れた、化合物(４Ｒ)-ヒドロキシ-(２Ｓ)-Ｎ-｛４-[３'-(４"-アクリドニルカルボキサミド)-プロピル]-オキシ-５-メトキシ-２-アミノベンゾイル｝ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタール(式ＩＩＩ)(０.６６４ｇ、１ｍｍｏｌ)、ＨｇＣｌ2(０.８１４５ｇ、３ｍｍｏｌ)及びＣａＣＯ3(０.３ｇ、３ｍｍｏｌ)の溶液を、ＴＬＣが出発物質の完全な喪失を示すまで室温でゆっくりと攪拌した。反応混合物をＥｔＯＡｃ(３０ｍＬ)で希釈し、セライト層で濾過した。この透明な黄色有機上清を飽和５％ＮａＨＣＯ3(２０ｍＬ)、塩類溶液(２０ｍＬ)で抽出し、合わせた有機相を乾燥する(Ｎａ2ＳＯ4)。有機相を減圧で蒸発させ、カラムクロマトグラフィー(９０％ＣＨ2Ｃｌ2-ＭｅＯＨ)で精製して、化合物７-メトキシ-８-[３'-(４"-アクリドニルカルボキサミド)プロピル]-オキシ-(４Ｒ)-ヒドロキシ-(１１ａＳ)１,２,３,１１ａ-テトラヒドロ-５Ｈ-ピロロ[２,１-ｃ][１,４]ベンゾジアゼピン-５-オンが得られた。
実施例５
化合物アクリジン酸(０.２２３ｇ、１ｍｍｏｌ)を乾燥ＤＭＦ(１０ｍＬ)に溶解し、ＥＤＣＩ(０.２０３ｇ、１.５ｍｍｏｌ)及びＨＯＢｔ(０.２８８ｇ、１.５ｍｍｏｌ)を加え、混合物を０-５℃に冷却し、３０分間攪拌した。ここに式Ｉで示される(２Ｓ)-Ｎ-[４-(２'-アミノエチル)-オキシ-５-メトキシ-２-ニトロベンゾイル]ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタール(０.４４３ｇ、１ｍｍｏｌ)のＤＭＦ溶液を同じ温度で加え、溶液を室温で一晩攪拌した。混合物を飽和ＮａＨＣＯ3(５０ｍＬ)、塩類溶液で洗浄し、乾燥し、溶媒を蒸発させた。この粗製物質を、酢酸エチル／ヘキサン(８：２)溶媒を用いてシリカゲルクロマトグラフィーに付して、黄色液体の化合物(２Ｓ)-Ｎ-｛４-[２'-(４"-アクリジニルカルボキサミド)-エチル]-オキシ-５-メトキシ-２-ニトロベンゾイル｝ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタール(式ＩＩ)が得られた。
化合物(２Ｓ)-Ｎ-｛４-[２'-(４"-アクリジニルカルボキサミド)-エチル]-オキシ-５-メトキシ-２-ニトロベンゾイル｝ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタール(式ＩＩ)(０.６４８ｇ、１ｍｍｏｌ)をメタノール(１５ｍＬ)に溶解し、添加したＳｎＣｌ2・２Ｈ2Ｏ(１.１２８ｇ、５ｍｍｏｌ)を２時間、又はＴＬＣが反応の完結を示すまで還流した。次に反応混合物を飽和ＮａＨＣＯ3溶液で注意深くｐＨ８に調節し、酢酸エチルで希釈し、セライトで濾過し抽出した。合わせた有機相をＮａ2ＳＯ4で乾燥し、減圧で蒸発させて、粗製化合物(２Ｓ)-Ｎ-｛４-[２'-(４"-アクリジニルカルボキサミド)-エチル]-オキシ-５-メトキシ-２-アミノベンゾイル｝ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタール(式ＩＩＩ)を得た。
ＭｅＣＮ-水(４：１)に入れた、化合物(２Ｓ)-Ｎ-｛４-[２'-(４"-アクリジニルカルボキサミド)-エチル]-オキシ-５-メトキシ-２-アミノベンゾイル｝ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタール(式ＩＩＩ)(０.６１８ｇ、１ｍｍｏｌ)、ＨｇＣｌ2(０.８１４５ｇ、３ｍｍｏｌ)及びＣａＣＯ3(０.３ｇ、３ｍｍｏｌ)の溶液を、ＴＬＣが出発物質の完全な喪失を示すまで室温でゆっくりと攪拌した。反応混合物をＥｔＯＡｃ(３０ｍＬ)で希釈し、セライト層で濾過した。この透明な黄色有機上清を飽和５％ＮａＨＣＯ3(２０ｍＬ)、塩類溶液(２０ｍＬ)で抽出し、合わせた有機相を乾燥する(Ｎａ2ＳＯ4)。有機相を減圧で蒸発させ、カラムクロマトグラフィー(９０％ＣＨ2Ｃｌ2-ＭｅＯＨ)で精製して、化合物７-メトキシ-８-[２'-(４"-アクリジニルカルボキサミド)エチル]-オキシ-(１１ａＳ)１,２,３,１１ａ-テトラヒドロ-５Ｈ-ピロロ[２,１-ｃ][１,４]ベンゾジアゼピン-５-オンが得られた。
実施例６
化合物アクリジン酸(０.２２３ｇ、１ｍｍｏｌ)を乾燥ＤＭＦ(１０ｍＬ)に溶解し、ＥＤＣＩ(０.２０３ｇ、１.５ｍｍｏｌ)及びＨＯＢｔ(０.２８８ｇ、１.５ｍｍｏｌ)を加え、混合物を０-５℃に冷却し、３０分間攪拌した。ここに式Ｉで示される(４Ｒ)-ヒドロキシ-(２Ｓ)-Ｎ-[４-(２'-アミノエチル)-オキシ-５-メトキシ-２-ニトロベンゾイル]ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタール(０.４５９ｇ、１ｍｍｏｌ)のＤＭＦ溶液を同じ温度で加え、溶液を室温で一晩攪拌した。混合物を飽和ＮａＨＣＯ3(５０ｍＬ)、塩類溶液で洗浄し、乾燥し、溶媒を蒸発させた。この粗製物質を、酢酸エチル／ヘキサン(８：２)溶媒を用いてシリカゲルクロマトグラフィーに付すと、黄色液体の(４Ｒ)-ヒドロキシ-(２Ｓ)-Ｎ-｛４-[２'-(４"-アクリジニルカルボキサミド)-エチル]-オキシ-５-メトキシ-２-ニトロベンゾイル｝ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタール(式ＩＩ)が得られた。
化合物(４Ｒ)-ヒドロキシ-(２Ｓ)-Ｎ-｛４-[２'-(４"-アクリジニルカルボキサミド)-エチル]-オキシ-５-メトキシ-２-ニトロベンゾイル｝ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタール(式ＩＩ)(０.６６４ｇ、１ｍｍｏｌ)をメタノール(１５ｍＬ)に溶解し、添加したＳｎＣｌ2・２Ｈ2Ｏ(１.１２８ｇ、５ｍｍｏｌ)を２時間、又はＴＬＣが反応の完結を示すまで還流した。次に反応混合物を飽和ＮａＨＣＯ3溶液で注意深くｐＨ８に調節し、酢酸エチルで希釈し、セライトで濾過し抽出した。合わせた有機相をＮａ2ＳＯ4で乾燥し、減圧で蒸発させて、粗製化合物(４Ｒ)-ヒドロキシ-(２Ｓ)-Ｎ-｛４-[２'-(４"-アクリジニルカルボキサミド)-エチル]-オキシ-５-メトキシ-２-アミノベンゾイル｝ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタール(式ＩＩＩ)を得た。
ＭｅＣＮ-水(４：１)に入れた、化合物(４Ｒ)-ヒドロキシ-(２Ｓ)-Ｎ-｛４-[２'-(４"-アクリジニルカルボキサミド)-エチル]-オキシ-５-メトキシ-２-アミノベンゾイル｝ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタール(式ＩＩＩ)(０.６３４ｇ、１ｍｍｏｌ)、ＨｇＣｌ2(０.８１４５ｇ、３ｍｍｏｌ)及びＣａＣＯ3(０.３ｇ、３ｍｍｏｌ)の溶液を、ＴＬＣが出発物質の完全な喪失を示すまで室温でゆっくりと攪拌した。反応混合物をＥｔＯＡｃ(３０ｍＬ)で希釈し、セライト層で濾過した。この透明な黄色有機上清を飽和５％ＮａＨＣＯ3(２０ｍＬ)、塩類溶液(２０ｍＬ)で抽出し、合わせた有機相を乾燥する(Ｎａ2ＳＯ4)。有機相を減圧で蒸発させ、カラムクロマトグラフィー(９０％ＣＨ2Ｃｌ2-ＭｅＯＨ)で精製して、化合物７-メトキシ-８-[２'-(４"-アクリジニルカルボキサミド)-エチル]-オキシ-(４Ｒ)-ヒドロキシ-(１１ａＳ)１,２,３,１１ａ-テトラヒドロ-５Ｈ-ピロロ[２,１-ｃ][１,４]ベンゾジアゼピン-５-オンが得られた。
実施例７
化合物アクリジン酸(０.２２３ｇ、１ｍｍｏｌ)を乾燥ＤＭＦ(１０ｍＬ)に溶解し、ＥＤＣＩ(０.２０３ｇ、１.５ｍｍｏｌ)及びＨＯＢｔ(０.２８８ｇ、１.５ｍｍｏｌ)を加え、混合物を０-５℃に冷却し、３０分間攪拌した。ここに式Ｉで示される(２Ｓ)-Ｎ-[４-(３'-アミノプロピル)-オキシ-５-メトキシ-２-ニトロベンゾイル]ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタール(０.４５７ｇ、１ｍｍｏｌ)のＤＭＦ溶液を同じ温度で加え、溶液を室温で一晩攪拌した。混合物を飽和ＮａＨＣＯ3(５０ｍＬ)、塩類溶液で洗浄し、乾燥し、溶媒を蒸発させた。この粗製物質を、酢酸エチル／ヘキサン(８：２)溶媒を用いてシリカゲルクロマトグラフィーに付して、黄色液体の化合物(２Ｓ)-Ｎ-｛４-[２'-(４"-アクリジニルカルボキサミド)-プロピル]-オキシ-５-メトキシ-２-ニトロベンゾイル｝ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタール(式ＩＩ)が得られた。
Figure 0004718328
化合物(２Ｓ)-Ｎ-｛４-[３'-(４"-アクリジニルカルボキサミド)-プロピル]-オキシ-５-メトキシ-２-ニトロベンゾイル｝ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタール(式ＩＩ)(０.６６２ｇ、１ｍｍｏｌ)をメタノール(１５ｍＬ)に溶解し、添加したＳｎＣｌ2・２Ｈ2Ｏ(１.１２８ｇ、５ｍｍｏｌ)を２時間、又はＴＬＣが反応の完結を示すまで還流した。次に反応混合物を飽和ＮａＨＣＯ3溶液で注意深くｐＨ８に調節し、酢酸エチルで希釈し、セライトで濾過し抽出した。合わせた有機相をＮａ2ＳＯ4で乾燥し、減圧で蒸発させて、粗製化合物(２Ｓ)-Ｎ-｛４-[３'-(４"-アクリジニルカルボキサミド)-プロピル]-オキシ-５-メトキシ-２-アミノベンゾイル｝ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタール(式ＩＩＩ)を得た。
Figure 0004718328
ＭｅＣＮ-水(４：１)に入れた、化合物(２Ｓ)-Ｎ-｛４-[３-(４"-アクリジニルカルボキサミド)-プロピル]-オキシ-５-メトキシ-２-アミノベンゾイル｝ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタール(式ＩＩＩ)(０.６３２ｇ、１ｍｍｏｌ)、ＨｇＣｌ2(０.８１４５ｇ、３ｍｍｏｌ)及びＣａＣＯ3(０.３ｇ、３ｍｍｏｌ)の溶液を、ＴＬＣが出発物質の完全な喪失を示すまで室温でゆっくりと攪拌した。反応混合物をＥｔＯＡｃ(３０ｍＬ)で希釈し、セライト層で濾過した。この透明な黄色有機上清を飽和５％ＮａＨＣＯ3(２０ｍＬ)、塩類溶液(２０ｍＬ)で抽出し、合わせた有機相を乾燥する(Ｎａ2ＳＯ4)。有機相を減圧で蒸発させ、カラムクロマトグラフィー(９０％ＣＨ2Ｃｌ2-ＭｅＯＨ)で精製して、化合物７-メトキシ-８-[３'-(４"-アクリジニルカルボキサミド)プロピル]-オキシ-(１１ａＳ)１,２,３,１１ａ-テトラヒドロ-５Ｈ-ピロロ[２,１-ｃ][１,４]ベンゾジアゼピン-５-オンが得られた。
Figure 0004718328
実施例８
化合物アクリジン酸(０.２２３ｇ、１ｍｍｏｌ)を乾燥ＤＭＦ(１０ｍＬ)に溶解し、ＥＤＣＩ(０.２０３ｇ、１.５ｍｍｏｌ)及びＨＯＢｔ(０.２８８ｇ、１.５ｍｍｏｌ)を加え、混合物を０-５℃に冷却し、３０分間攪拌した。ここに式Ｉで示される(４Ｒ)-ヒドロキシ-(２Ｓ)-Ｎ-[４-(３'-アミノプロピル)-オキシ-５-メトキシ-２-ニトロベンゾイル]ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタール(０.４７３ｇ、５ｍｍｏｌ)のＤＭＦ溶液を同じ温度で加え、溶液を室温で一晩攪拌した。混合物を飽和ＮａＨＣＯ3(５０ｍＬ)、塩類溶液で洗浄し、乾燥し、溶媒を蒸発させた。この粗製物質を、酢酸エチル／ヘキサン(８：２)溶媒を用いてシリカゲルクロマトグラフィーに付して、黄色液体の化合物(４Ｒ)-ヒドロキシ-(２Ｓ)-Ｎ-｛４-[３'-(４"-アクリジニルカルボキサミド)-プロピル]-オキシ-５-メトキシ-２-ニトロベンゾイル｝ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタール(式ＩＩ)が得られた。
化合物(４Ｒ)-ヒドロキシ-(２Ｓ)-Ｎ-｛４-[３'-(４"-アクリジニルカルボキサミド)-プロピル]-オキシ-５-メトキシ-２-ニトロベンゾイル｝ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタール(式ＩＩ)(０.６７８ｇ、１ｍｍｏｌ)をメタノール(１５ｍＬ)に溶解し、添加したＳｎＣｌ2・２Ｈ2Ｏ(１.１２８ｇ、５ｍｍｏｌ)を２時間、又はＴＬＣが反応の完結を示すまで還流した。次に反応混合物を飽和ＮａＨＣＯ3溶液で注意深くｐＨ８に調節し、酢酸エチルで希釈し、セライトで濾過し抽出した。合わせた有機相をＮａ2ＳＯ4で乾燥し、減圧で蒸発させて、粗製化合物(４Ｒ)-ヒドロキシ-(２Ｓ)-Ｎ-｛４-[３'-(４"-アクリジニルカルボキサミド)-プロピル]-オキシ-５-メトキシ-２-アミノベンゾイル｝ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタール(式ＩＩＩ)を得た。
ＭｅＣＮ-水(４：１)に入れた、化合物(４Ｒ)-ヒドロキシ-(２Ｓ)-Ｎ-｛４-[３'-(４"-アクリジニルカルボキサミド)-プロピル]-オキシ-５-メトキシ-２-アミノベンゾイル｝ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタール(式ＩＩＩ)(０.６４８ｇ、１ｍｍｏｌ)、ＨｇＣｌ2(０.８１４５ｇ、３ｍｍｏｌ)及びＣａＣＯ3(０.３ｇ、３ｍｍｏｌ)の溶液を、ＴＬＣが出発物質の完全な喪失を示すまで室温でゆっくりと攪拌した。反応混合物をＥｔＯＡｃ(３０ｍＬ)で希釈し、セライト層で濾過した。この透明な黄色有機上清を飽和５％ＮａＨＣＯ3(２０ｍＬ)、塩類溶液(２０ｍＬ)で抽出し、合わせた有機相を乾燥する(Ｎａ2ＳＯ4)。有機相を減圧で蒸発させ、カラムクロマトグラフィー(９０％ＣＨ2Ｃｌ2-ＭｅＯＨ)で精製して、化合物７-メトキシ-８-[３'-(４"-アクリジニルカルボキサミド)プロピル]-オキシ-(４Ｒ)-ヒドロキシ-(１１ａＳ)１,２,３,１１ａ-テトラヒドロ-５Ｈ-ピロロ[２,１-ｃ][１,４]ベンゾジアゼピン-５-オンが得られた。
生物活性：National Cancer Institute(USA)でインビトロ生物活性試験を実施した。
細胞毒性：式ＩＶで示される７-メトキシ-８-[３'-(４"-アクリドニルカルボキサミド)プロピル]-オキシ-(１１ａＳ)１,２,３,１１ａ-テトラヒドロ-５Ｈ-ピロロ[２,１-ｃ][１,４]ベンゾジアゼピン-５-オンを、原発性抗癌活性(表１)について、及び９種類の癌(白血病、非小細胞癌、肺癌、結腸癌、ＣＮＳ癌、メラノーマ、卵巣癌、前立腺癌、及び乳癌)から派生された６０のヒト腫瘍細胞に対してインビトロで評価した。各々の化合物について、１０倍希釈で最低５種類の濃度で、各細胞系列についての用量反応曲線を作製した。４８時間の連続薬物暴露のプロトコルを使用し、スルホローダミンＢ(ＳＲＢ)蛋白検定を使用して細胞の生存性又は増殖を評価した。対照と比較して５０％の細胞増殖阻害(ＧＩ５０)、完全な細胞増殖阻害(total cell growth inhibition)(TGI ０％増殖)及び５０％細胞死(ＬＣ５０、-５０％増殖)を惹起する濃度を算出した。ＩＶについてのｌｏｇ10ＴＧＩ及びｌｏｇ10ＬＣ５０ならびにｌｏｇ10ＧＩ５０の平均グラフ中点値を表２に列挙する。平均グラフ自身を表４に示す。平均グラフパターンで立証されるように、化合物ＩＶは種々の細胞系列について興味深い活性及び選択性のプロファイルを示す。ｌｏｇ10ＴＧＩ及びｌｏｇ10ＬＣ５０の平均グラフ中点はｌｏｇ10ＧＩ５０平均グラフ中点と類似のパターンを示した。
Figure 0004718328
式ＩＶで示される新規なピロロベンゾジアゼピンハイブリッド ７-メトキシ-８-[３'-(４"-アクリドニルカルボキサミド)プロピル]-オキシ-(１１ａＳ)１,２,３,１１ａ-テトラヒドロ-５Ｈ-ピロロ[２,１-ｃ][１,４]ベンゾジアゼピン-５-オンは、一つのメラノーマ癌(ＵＡＣＣ-６２)に対して１０ナノモル未満の力価(ＬＣ50レベルにおいて)を持ち、結腸癌(ＨＣＣ-２９９８)、ＣＮＳ癌(ＳＮＢ-７５)、乳癌(ＭＤＡ-ＭＢ-４３５)に対して０.１マイクロモル力価を持ち、そしてまた、二つのメラノーマ癌細胞系列(ＬＯＸＩＭＶＩ、Ｍ１４)及び一つの腎臓癌(ＳＮ１２Ｃ)に対して１０マイクロモル未満の力価を持つ事を示した。９種の癌に対する、式ＩＶで示される化合物７-メトキシ-８-[３'-(４"-アクリドニルカルボキサミド)プロピル]-オキシ-(１１ａＳ)１,２,３,１１ａ-テトラヒドロ-５Ｈ-ピロロ[２,１-ｃ][１,４]ベンゾジアゼピン-５-オンのＬＣ50値(６〜９個の癌細胞系列の平均)を表３に列挙する。
Figure 0004718328
Figure 0004718328
Figure 0004718328

Claims (20)

  1. 以下の式：
    Figure 0004718328
     [式中、
    Ｒは、Ｈ又はＯＨであり、
    ｎは、２〜３であり、そして
    Ｒ'は、
    Figure 0004718328
     である]
    で表される、アクリジン又はアクリドン結合ピロロ[２,１-ｃ][１,４]ベンゾジアゼピン。
  2. 以下の構造：
    Figure 0004718328
     で表される、請求項１に記載のアクリドン結合ピロロベンゾジアゼピン。
  3. 以下の構造：
    Figure 0004718328
     で表される、請求項１に記載のアクリドン結合ピロロベンゾジアゼピン。
  4. 以下の構造：
    Figure 0004718328
     で表される、請求項１に記載のアクリドン結合ピロロベンゾジアゼピン。
  5. 以下の構造：
    Figure 0004718328
     で表される、請求項１に記載のアクリドン結合ピロロベンゾジアゼピン。
  6. 以下の構造：
    Figure 0004718328
     で表される、請求項１に記載のアクリジン結合ピロロベンゾジアゼピン。
  7. 以下の構造：
    Figure 0004718328
     で表される、請求項１に記載のアクリジン結合ピロロベンゾジアゼピン。
  8. 以下の構造：
    Figure 0004718328
     で表される、請求項１に記載のアクリジン結合ピロロベンゾジアゼピン。
  9. 以下の構造：
    Figure 0004718328
     で表される、請求項１に記載のアクリジン結合ピロロベンゾジアゼピン。
  10. 以下の式：
    Figure 0004718328
     [式中、
    Ｒは、Ｈ又はＯＨであり、
    ｎは、２〜３であり、そして
    Ｒ'は、
    Figure 0004718328
     である]
    で表される化合物の製造方法であって、アクリドン又はアクリジン酸を、有機溶媒中ＥＤＣＩ及びＨＯＢｔの存在下で、以下の式Ｉ：
    Figure 0004718328
     で表される(２Ｓ)-Ｎ-[４-(ｎ'-アミノアルキルオキシ)-５-メトキシ-２-ニトロベンゾイル]-ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタールと２４時間反応させて、以下の：
    Figure 0004718328
     [式中、ｎは２〜３である]
    で表される(２Ｓ)-Ｎ-｛４-[ｎ'-(４"-アクリドニルカルボキサミド)-アルキル]-オキシ-５-メトキシ-２-ニトロベンゾイル｝ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタール(式ＩＩ)／(２Ｓ)-Ｎ-｛４-[ｎ'-(４"-アクリジニルカルボキサミド)-アルキル]-オキシ-５-メトキシ-２-ニトロベンゾイル｝ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタール(式Ｖ)を得て、当該式ＩＩ／式Ｖの化合物を単離し、次いでこの式ＩＩ／式Ｖの化合物を、還流温度以下にて有機溶媒の存在下においてＳｎＣｌ2・２Ｈ2Ｏで還元して、以下の：
    Figure 0004718328
     [式中、ｎは２〜３である]
    で表される(２Ｓ)-Ｎ-｛４-[ｎ'-(４"-アクリドニルカルボキサミド)-アルキル]-オキシ-５-メトキシ-２-アミノベンゾイル｝ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタール(式ＩＩＩ)／(２Ｓ)-Ｎ-｛４-[ｎ'-(４"-アクリジニルカルボキサミド)-アルキル]-オキシ-５-メトキシ-２-アミノベンゾイル｝ピロリジン-２-カルボキシアルデヒド・ジエチルチオアセタール(式ＶＩ)を単離し、式ＩＩＩ／式ＶＩの化合物を、ＭｅＣＮ-水(４：１)中にＨｇＣｌ 2 及びＣａＣＯ 3 を含む脱保護剤と反応させて、所望のピロロ[２,１-ｃ][１,４]ベンゾジアゼピンを得る事を含む、前記方法。
  11. アクリドン／アクリジン酸と式Ｉの化合物の反応に使用する有機溶媒がジメチルフランを含む、請求項１０に記載の方法。
  12. 式ＩＩ／式Ｖの化合物を、飽和ＮａＨＣＯ3、塩類溶液により洗浄し、乾燥し、そして溶媒を蒸発することによって単離する、請求項１０に記載の方法。
  13. 式ＩＩ／式Ｖの化合物の還元の際に使用する有機溶媒がメタノールを含む、請求項１０に記載の方法。
  14. 式ＩＩＩ／式ＶＩの化合物を、飽和ＮａＨＣＯ3溶液で反応混合物のｐＨを約ｐＨ８に調節し、酢酸エチルで希釈し、セライトで濾過し、有機相を抽出し、そしてこの有機相をＮａ2ＳＯ4で乾燥することによって単離する、請求項１０に記載の方法。
  15. 以下の式：
    Figure 0004718328
     [式中、
    Ｒは、Ｈ又はＯＨであり、
    ｎは、２〜３であり、そして
    Ｒ'は、
    Figure 0004718328
     である]
    で表される化合物の医薬としての有効量及び医薬として許容し得る添加物を含む、医薬組成物。
  16. 癌を患う対象における癌を治療するための医薬組成物であって、以下の式：
    Figure 0004718328
     [式中、
    Ｒは、Ｈ又はＯＨであり、
    ｎは、２〜３であり、そして
    Ｒ'は、
    Figure 0004718328
     である]
    で表される化合物の医薬としての有効量を含む、前記医薬組成物。
  17. 前記対象が哺乳動物である、請求項１６に記載の医薬組成物。
  18. 前記哺乳動物がヒトである、請求項１６に記載の医薬組成物。
  19. 前記癌が、白血病、非小細胞癌、肺癌、結腸癌、ＣＮＳ癌、メラノーマ、卵巣癌、腎臓癌、前立腺癌、及び乳癌より成る群から選ばれる、請求項１６に記載の医薬組成物。
  20. 白血病、非小細胞癌、肺癌、結腸癌、ＣＮＳ癌、メラノーマ、卵巣癌、腎臓癌、前立腺癌、及び乳癌より成る群から選ばれる癌を治療するための医薬組成物であって、以下の式：
    Figure 0004718328
     [式中、
    ｎは、２〜３であり
    Ｒは、Ｈ又はＯＨであり、そして
    Ｒ'は、
    Figure 0004718328
     である]
    で表される化合物を含む、医薬組成物。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
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JPS597171A (ja) * 1982-06-25 1984-01-14 デベロツプメント・フアイナンス・コ−ポレ−シヨン・オブ・ニユ−ジ−ランド 新規アクリジン誘導体
JP2001503399A (ja) * 1996-10-18 2001-03-13 ゼノバ リミテッド 抗腫瘍剤としてのビス（アクリジンカルボキサミド）及びビス（フェナジンカルボキサミド）

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