JP4669922B2 - 植物にストレス耐性を付与する新規ジテルペノイド化合物 - Google Patents

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Description

技術分野
本発明は、新規ジテルペノイド化合物に関する。より詳細には、植物にストレス耐性を付与する新規ジテルペノイド化合物、その使用および合成のための方法に関する。
背景技術
植物などの生物はその生存過程において、種々のストレス（例えば、傷害、虫害、病害など）に晒され、自己防禦する必要に迫られる。通常自由に移動できない植物にとっては、このようなストレスは、とりわけ植物においては、動物など移動可能な生物に比べて、はるかに生存を脅かす可能性の高い障害である。
傷害とは、切断、摩擦、圧迫、または昆虫もしくは草食動物による摂食によって傷つけられ、その傷の箇所またはより広範囲な箇所の生理機能が乱れることをいう。昆虫のような虫に起因するものは、虫害とも呼ばれる。このような物理的刺激に起因する傷害のほか、傷害としては、大気汚染物質またはアルカリ、酸、重金属などの化学的要因、および細菌、真菌、ウイルスなどの病原体の感染による生物学的要因によるものが挙げられる。ウイルス、細菌、真菌などの微生物によるものは、特に、病害とも呼ばれる。このような物理学的、化学的および生物学的要因による傷害に対し、植物のような生物はその生活環境に応じ一定の防禦機構を有している。
例えば、傷ついた植物は、直ちに傷口を治癒し、水分などを根から根の上部に吸い上げる力を回復させ、傷口からの病原菌に侵入を防がねばならない。組織が傷つけられると、数分以内に過酸化水素が発生し、リグニン化、スベリン化、細胞壁成分のヒドロキシプロリンリッチタンパク質の酸化的架橋が開始し、細胞壁の修復および強化が行われる（Ｂｒａｄｌｅｙ、Ｄ．ｅｔ ａｌ．Ｃｅｌｌ，７９，２１−３０，１９９２）。このことにより、傷口からの水の蒸散が防がれ、病原菌の侵入に対する物理的障壁としての役割も果たされる。傷害により、フェニルプロパノイドの律速酵素であるフェニルアラニンアンモニアリアーゼの酵素活性が上昇し、抗菌性を有するポリフェノール類およびリグニンの材料物質の生産が増強される。病原体に感染した植物は、感染特異的タンパク質（ＰＲタンパク質とも呼ばれる）と呼ばれる一連のタンパク質群を新たに生産することが知られている。ＰＲタンパク質のひとつにキチナーゼおよびβ−１，３−グルカナーゼは傷害でも生産が誘導される。これらは、菌類の細胞壁成分であるキチンおよびグルカンをそれぞれ分解することで菌類の生育を阻害し、傷口から病原体感染を防いでいると考えられる。
昆虫の摂食に対する植物の防禦にプロテアーゼインヒビターの生産がある。プロテアーゼインヒビターは、タンパク質分解活性を有する酵素であるプロテアーゼを阻害する物質の総称で、病原体感染でもその生産が誘導される。トマトおよびジャガイモの葉は、ある昆虫の虫害を受けるとプロテアーゼインヒビターＩＩの生産を誘導する。プロテアーゼインヒビターＩＩを多量に含む組織を昆虫が摂食すると、消化不良を起こし、成長が阻害される。このほか、植物は、天敵の誘引などにより虫害から防禦している。植物は、傷害に対しては、防禦のほか、光合成の阻害により傷害からの回復への資源の集中を図ったり、切断後に再生を行うため細胞分裂を促進するなど、種々の活動を行う。また、生長が進行の程度、傷の程度、光強度の程度のような因子に応じて傷害に対する応答が異なることもわかっている。
このように、傷害を受けた植物は、種々の応答を行うが、この大半は種々の遺伝子発現を誘導することにより生理的応答を惹起することが明らかになっている。この中で、ジャスモン酸（ＪＡ）が傷害応答のシグナル伝達系に関与していることが知られてきている。ＪＡ処理は、多くの傷害応答性遺伝子の発現を誘導することから、ＪＡが傷害応答のシグナル伝達物質であると考えられている（Ｃｒｅｅｌｍａｎ，Ｒ．Ａ．ｅｔ ａｌ．Ｐｌａｎｔ Ｃｅｌｌ ９：１２１１−１２２３，１９９７）。傷害により膜から遊離したリノレイン酸がリポキシゲナーゼによる酸化などを経てＪＡが合成される。動物において炎症反応にはプロスタグランジンおよびロイコトリエンなどのアラキドン酸代謝物質は、ＪＡおよびその関連物質に類似しており、膜からホスホリパーゼＡ２により遊離したアラキドン酸から合成される。したがって、植物の場合もリノレイン酸の遊離はホスホリパーゼＡ２の関与が示唆されている。
傷害により膜リン脂質であるホスファチジン酸が膜から遊離し、傷害応答性遺伝子の発現が誘導される。この遊離現象は、上昇した細胞内Ｃａ２＋によって細胞質から膜へと移動したホスホリパーゼＤの膜成分のリン脂質を加水分解した結果生じたものと考えられている。
細胞壁が傷つけられると、細胞壁中層の主成分であるペクチンが分解されオリゴガラクツロン酸が生成される。ペクチン分解酵素もまた、傷害によって誘導されることが知られている。
セリン・スレオニン型プロテインキナーゼであるＭＡＰキナーゼには傷害により活性化されるものがあることが知られている。この活性化はリン酸化によるものであることがわかっている。傷害で活性化されるＭＡＰキナーゼとしては、転写レベルで活性化されるＷＩＰＫ（ｗｏｕｎｄ−ｉｎｄｕｃｅｄ ｐｒｏｔｅｉｎ ｋｉｎａｓｅ）および転写制御を受けないＳＩＰＫ（ｓａｌｉｃｙｌｉｃ ａｃｉｄ−ｉｎｄｕｃｅｄ ｐｒｏｔｅｉｎ ｋｉｎａｓｅ）の２つが知られている。タバコのＷＩＰＫはＪＡ合成の制御因子であることも知られている（Ｓｅｏ、Ｓ．ｅｔ ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２７０，１９８８−１９９２，１９９５）。動物の炎症反応において、ＭＡＰキナーゼは細胞質ホスホリパーゼＡ２（ｃＰＬＡ２）の活性化に関わることが知られていることから、ＷＩＰＫはｃＰＬＡ２の活性化によりＪＡ合成を制御しているとも考えられている。
植物ホルモンであるエチレンおよびアブシジン酸（ＡＢＡ）は、傷害によりその生産が高まること、ならびにこれらの物質で植物を処理すると、傷害応答性遺伝子の発現が誘導されることから、これらの植物ホルモンは、傷害応答のシグナル因子であると考えられている。エチレンは、ＪＡの上流およびＪＡと協同で作用し、ＡＢＡは、ＪＡの上流で作用すると報告されている（Ｄｏｎｇ，Ｘ：Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｐｌａｎｔ Ｂｉｏｌ．１：３１６−３２２，１９９８；Ｐｅｌｉａ−Ｃｏｒｔｅｓ，Ｈ．ｅｔ ａｌ．Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ、９２：３１０６−３１１４，１９９５）。また、エチレンは、果実の成熟を促進する効果があり、成熟ホルモンであると考えられている。そして茎・根などの伸長成長、花芽の形成を抑制し、一方、茎・根の肥大成長、根毛の形成、ある種の植物の茎の成長、ある種の種子の発芽、上偏成長などを促進することが知られている。ＪＡはまた、種々の細胞制御機能を有するユビキチン−プロテアソーム系への関与も示唆されている。
傷害応答は、全身性であることが特徴である。例えば、葉に傷を与えると、植物は、傷葉のみならず、同じ植物体の無傷葉でも同様の傷害応答が誘導されることが知られている。この全身性傷害応答には、トマトにおいてシステミンというタンパク質が関与していると考えられる。システミンは、前駆体であるプロシステミンから傷害に応じて切り出され、篩管を通って全身に送達されＪＡの合成を誘導する。
ＪＡは、過敏感反応（ｈｙｐｅｒｓｅｎｓｉｔｉｖｅ ｒｅａｃｔｉｏｎ；ＨＲ）に関連することも示唆されている。過敏感反応とは、病原体に感染した植物細胞が能動的に死ぬことによって病原体をそこに封じ込め、さらなる増殖および全身への移行を阻止する反応（結果として病斑ができる）をいう。過敏感反応は、病害抵抗性反応の一種であると考えられる。過敏感反応の結果、サリチル酸（ＳＡ）のみならず、ＪＡおよびエチレンの生産も高まる。したがって、過敏感細胞死は、傷害ストレスであることを意味する。過敏感反応により感染特異的タンパク質が誘導される。感染特異的タンパク質は、等電点の違いにより酸性型および塩基性型に分類され、前者は主にサリチル酸で生産が誘導され、後者は主にＪＡで生産が誘導される。酸性感染特異的タンパク質は、切断および摩擦などの物理的刺激ではあまり誘導されない。
動物の炎症反応にかかわるプロスタグランジン合成は、サリチル酸またはそのアセチル体であるアセチルサリチル酸（アスピリンとしても知られる）で阻害されることは周知の事実である。植物でもＪＡとＳＡとが互いに相手の合成および働きを阻害することが明らかとなった（Ｎｉｋｉ ｅｔ ａｌ．（１９９８）Ｐｌａｎｔ Ｃｅｌｌ Ｐｈｙｓｉｏｌ． ３９：５００−５０７）。拮抗作用を示すＳＡとＪＡとが過敏感反応によって生産されるという事実は、これら２つの物質が微妙に傷害反応のシグナル伝達を調節していることを示唆する。
このようにＪＡおよびＳＡは、種々の傷害のようなストレスのシグナル伝達に関連していることが知られており、その活性制御を行うことによって、傷害のようなストレスに対する抵抗性を調節することができることが予測される。
傷害応答性遺伝子は多数単離されている。これらの遺伝子の発現は主に転写レベルで調節されている。これらの遺伝子には、合成酵素、代謝酵素、制御タンパク質、防禦タンパク質などが含まれる。
傷を与えてから傷害応答性遺伝子が発現するまでの機構は遺伝子間で大きく異なっている。例えば、ＷＩＰＫ遺伝子およびエチレン合成にかかわる１−アミノシクロプロパン−ｔ−カルボン酸（ＡＣＣ）合成酵素をコードする遺伝子は傷害後数分〜十数分後にその転写産物の蓄積が観察される。他方、プロテインインヒビターＩＩおよび塩基性感染特異的タンパク質の遺伝子の転写産物の蓄積は、傷害後数時間で顕著となる。ＪＡ、エチレン、ＡＢＡの傷害後の蓄積は数十分以内に起こる。このように、ＷＩＰＫ遺伝子などの発現誘導には、他の因子が関与している可能性が示唆されている。また、ＷＩＰＫ遺伝子などの発現誘導には、ＪＡを介する経路以外にその他の経路も考えられている。
従って、ＷＩＰＫおよびＳＩＰＫの調節を担っている因子を同定することにより、植物のような生物の傷害応答の調節、ひいてはストレス耐性を付与することを効率よく行うことができる可能性がある。しかし、従来は、そのような因子は同定されていない。従って、そのような因子を探索することが当該分野において渇望されている。
（発明が解決しようとする課題）
従って、本発明は、ＷＩＰＫおよび／またはＳＩＰＫに関連する因子を単離し、合成することによって、植物、動物のような生物に対して、傷害のようなストレスに対して耐性を付与することを課題とする。
発明の要旨
上記課題は、以下の構造（化学式Ｉ）：
を有し、式中、
Ｘは、ヒドロキシ、置換されたヒドロキシ、ハロゲン、チオールおよび置換されたチオールからなる群より選択され、
Ｙ１およびＹ２は、一方は水素またはアルキルであり、他方は、Ｚ−Ｗであり、ここでＺは単結合、またはアルカンもしくは置換されたアルカンから水素が２つ取れた２価基であり、Ｗはヒドロキシ、置換されたヒドロキシ、アルデヒド、カルボキシル基または置換されたカルボキシル基であり、
Ｒ１〜Ｒ２４は、独立して、水素、アルキルおよび置換されたアルキルからなる群より選択される、
ラブダン型ジテルペノイド化合物を単離および合成することによって解決された。
本発明は、さらに、上記に加え以下を提供する。
項目１．以下の構造：
（ＷＡＦ）
を有し、式中、
Ｘは、ヒドロキシ、置換されたヒドロキシ、ハロゲン、チオールおよび置換されたチオールからなる群より選択され、
Ｙ１およびＹ２は、一方は水素またはアルキルであり、他方は、Ｚ−Ｗであり、ここでＺは単結合、またはアルカンもしくは置換されたアルカンから水素が２つ取れた２価基であり、Ｗはヒドロキシ、置換されたヒドロキシ、アルデヒド、カルボキシル基または置換されたカルボキシル基であり、
Ｒ１〜Ｒ２４は、独立して、水素、アルキルおよび置換されたアルキルからなる群より選択される、
化合物。
項目２．Ｙ１およびＹ２は、他方が水素であり、一方がメチロール、置換されたメチロール、Ｃ１アルデヒド、Ｃ１カルボキシル基またはＣ１の置換されたカルボキシル基である、項目１に記載の化合物。
項目３．Ｒ１〜Ｒ２４は、すべて水素である、項目１に記載の化合物。
項目４．Ｘは、ヒドロキシである、項目１に記載の化合物。
項目５．下記構造式：
（ＷＡＦ−１）
を有する、項目１に記載の化合物。
項目６．以下の構造：
（ＷＡＦ）
を有し、式中、
Ｘは、ヒドロキシ、置換されたヒドロキシ、ハロゲン、チオールおよび置換されたチオールからなる群より選択され、
Ｙ１およびＹ２は、一方は水素またはアルキルであり、他方は、Ｚ−Ｗであり、ここでＺは単結合、またはアルカンもしくは置換されたアルカンから水素が２つ取れた２価基であり、Ｗはヒドロキシ、置換されたヒドロキシ、アルデヒド、カルボキシル基または置換されたカルボキシル基であり、
Ｒ１〜Ｒ２４は、独立して、水素、アルキルおよび置換されたアルキルからなる群より選択される、
化合物を含む、組成物。
項目７．植物にストレス耐性を付与または増強するための組成物であって、
以下の構造：
（ＷＡＦ）
を有し、式中、
Ｘは、ヒドロキシ、置換されたヒドロキシ、ハロゲン、チオールおよび置換されたチオールからなる群より選択され、
Ｙ１およびＹ２は、一方は水素またはアルキルであり、他方は、Ｚ−Ｗであり、ここでＺは単結合、またはアルカンもしくは置換されたアルカンから水素が２つ取れた２価基であり、Ｗはヒドロキシ、置換されたヒドロキシ、アルデヒド、カルボキシル基または置換されたカルボキシル基であり、
Ｒ１〜Ｒ２４は、独立して、水素、アルキルおよび置換されたアルキルからなる群より選択される、
化合物を含む、組成物。
項目８．前記ストレス耐性が、傷害抵抗性、虫害抵抗性、病害抵抗性および過敏感細胞死に対する抵抗性からなる群より選択される少なくとも１つの抵抗性である、項目７に記載の組成物。
項目９．前記ストレス耐性の付与または増強は、傷誘導性プロテインキナーゼ、サリチル酸誘導プロテインキナーゼ、感染特異的タンパク質および１−アミノ−シクロプロパン−ｔ−カルボン酸合成酵素からなる群より選択される少なくとも１つのタンパク質の活性を制御することにより達成される、項目７に記載の組成物。
項目１０．前記ストレス耐性の付与または増強は、ジャスモン酸シグナル伝達系およびサリチル酸シグナル伝達系からなる群より選択される少なくとも１つのシグナル伝達系を制御することにより達成される、項目７に記載の組成物。
項目１１．植物にストレス耐性を付与または増強するための方法であって、該方法は以下の工程：
ａ）以下の構造：
（ＷＡＦ）
を有し、式中、
Ｘは、ヒドロキシ、置換されたヒドロキシ、ハロゲン、チオールおよび置換されたチオールからなる群より選択され、
Ｙ１およびＹ２は、一方は水素またはアルキルであり、他方は、Ｚ−Ｗであり、ここでＺは単結合、またはアルカンもしくは置換されたアルカンから水素が２つ取れた２価基であり、Ｗはヒドロキシ、置換されたヒドロキシ、アルデヒド、カルボキシル基または置換されたカルボキシル基であり、
Ｒ１〜Ｒ２４は、独立して、水素、アルキルおよび置換されたアルキルからなる群より選択される、
化合物を該植物に提供する工程、
を包含する、方法。
項目１２．前記ストレス耐性が、傷害抵抗性、虫害抵抗性、病害抵抗性および過敏感細胞死に対する抵抗性からなる群より選択される少なくとも１つの抵抗性である、項目１１に記載の方法。
項目１３．前記ストレス耐性の付与または増強は、傷誘導性プロテインキナーゼ、サリチル酸誘導プロテインキナーゼ、感染特異的タンパク質および１−アミノ−シクロプロパン−ｔ−カルボン酸合成酵素からなる群より選択される少なくとも１つのタンパク質の活性を制御することにより達成される、項目１１に記載の方法。
項目１４．前記ストレス耐性の付与または増強は、ジャスモン酸シグナル伝達系およびサリチル酸シグナル伝達系からなる群より選択される少なくとも１つのシグナル伝達系を制御することにより達成される、項目１１に記載の方法。
項目１５．ストレス耐性植物を生産するための方法であって、該方法は：
ａ）以下の構造：
（ＷＡＦ）
を有し、式中、
Ｘは、ヒドロキシ、置換されたヒドロキシ、ハロゲン、チオールおよび置換されたチオールからなる群より選択され、
Ｙ１およびＹ２は、一方は水素またはアルキルであり、他方は、Ｚ−Ｗであり、ここでＺは単結合、またはアルカンもしくは置換されたアルカンから水素が２つ取れた２価基であり、Ｗはヒドロキシ、置換されたヒドロキシ、アルデヒド、カルボキシル基または置換されたカルボキシル基であり、
Ｒ１〜Ｒ２４は、独立して、水素、アルキルおよび置換されたアルキルからなる群より選択される、
化合物を該植物に提供する工程、
を包含する、方法。
項目１６．項目１５に記載の方法で得られた、植物。
項目１７．ストレス耐性の植物組織を生産するための方法であって、該方法は：
ａ）以下の構造：
（ＷＡＦ）
を有し、式中、
Ｘは、ヒドロキシ、置換されたヒドロキシ、ハロゲン、チオールおよび置換されたチオールからなる群より選択され、
Ｙ１およびＹ２は、一方は水素またはアルキルであり、他方は、Ｚ−Ｗであり、ここでＺは単結合、またはアルカンもしくは置換されたアルカンから水素が２つ取れた２価基であり、Ｗはヒドロキシ、置換されたヒドロキシ、アルデヒド、カルボキシル基または置換されたカルボキシル基であり、
Ｒ１〜Ｒ２４は、独立して、水素、アルキルおよび置換されたアルキルからなる群より選択される、
化合物を該植物組織に提供する工程、
を包含する、方法。
項目１８．項目１７に記載の方法で得られた、植物組織。
項目１９．ストレス耐性の植物細胞を生産するための方法であって、該方法は：
ａ）以下の構造：
（ＷＡＦ）
を有し、式中、
Ｘは、ヒドロキシ、置換されたヒドロキシ、ハロゲン、チオールおよび置換されたチオールからなる群より選択され、
Ｙ１およびＹ２は、一方は水素またはアルキルであり、他方は、Ｚ−Ｗであり、ここでＺは単結合、またはアルカンもしくは置換されたアルカンから水素が２つ取れた２価基であり、Ｗはヒドロキシ、置換されたヒドロキシ、アルデヒド、カルボキシル基または置換されたカルボキシル基であり、
Ｒ１〜Ｒ２４は、独立して、水素、アルキルおよび置換されたアルキルからなる群より選択される、
化合物を該植物細胞に提供する工程、
を包含する、方法。
項目２０． 項目１９に記載の方法で得られた、植物細胞。
項目２１． ストレス耐性植物の種子を生産するための方法であって、該方法は：
ａ）以下の構造：
（ＷＡＦ）
を有し、式中、
Ｘは、ヒドロキシ、置換されたヒドロキシ、ハロゲン、チオールおよび置換されたチオールからなる群より選択され、
Ｙ１およびＹ２は、一方は水素またはアルキルであり、他方は、Ｚ−Ｗであり、ここでＺは単結合、またはアルカンもしくは置換されたアルカンから水素が２つ取れた２価基であり、Ｗはヒドロキシ、置換されたヒドロキシ、アルデヒド、カルボキシル基または置換されたカルボキシル基であり、
Ｒ１〜Ｒ２４は、独立して、水素、アルキルおよび置換されたアルキルからなる群より選択される、
化合物を該植物に提供する工程；および
ｂ）該植物から種子を得る工程、
を包含する、方法。
項目２２．項目２１に記載の方法で得られた、種子。
項目２３．
（ＷＡＦ）
を有し、式中、
Ｘは、ヒドロキシ、置換されたヒドロキシ、ハロゲン、チオールおよび置換されたチオールからなる群より選択され、
Ｙ１およびＹ２は、一方は水素またはアルキルであり、他方は、Ｚ−Ｗであり、ここでＺは単結合、またはアルカンもしくは置換されたアルカンから水素が２つ取れた２価基であり、Ｗはヒドロキシ、置換されたヒドロキシ、アルデヒド、カルボキシル基または置換されたカルボキシル基であり、
Ｒ１〜Ｒ２４は、独立して、水素、アルキルおよび置換されたアルキルからなる群より選択される、
化合物を合成する方法であって、該方法は以下の工程：
ａ）
（中間体１）
を有し、式中、
Ｒ５〜Ｒ２４は、独立して、水素、アルキルおよび置換されたアルキルからなる群より選択され、かつ、ＷＡＦにおけるＲ１〜Ｒ２４と同一である、化合物と、アルキルリチウムとを反応させて、（中間体２）を得る工程；
（中間体２）
ｂ）ａ）で得られた生成物と、ｍ−クロロ過安息香酸とを混合して反応させた後１０％水酸化カリウムのメタノール溶液と反応させて、（中間体４）を得る工程；
（中間体４）
ｃ）ｂ）で得られた生成物と、過ルテニウム酸テトラプロピルアンモニウムの存在下でＮ−メチルモルホリンＮ−オキシドと反応させて（中間体５）を得る工程、
（中間体５）
を得る工程；
ｄ）工程ｃ）で得られた該中間体５に、
Ｖ１およびＶ２は、一方が水素またはアルキルであり、他方がＺ−Ｖであり、ここで、（ＣＨ２）ｎ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−であり、Ｖはアルキルであり、ｎは０以上の整数であり、Ｒはアルキルである、化合物を有機溶媒中でＮａＮＨ２存在下で加えて
中間体（６）
を得る工程；
ｅ）工程ｄ）で得られた中間体（６）を有機溶媒中でジイソブチルアルミニウムヒドリドを加えて、
であって、ここで、Ｘは、ヒドロキシ、置換されたヒドロキシ、ハロゲン、チオールおよび置換されたチオールからなる群より選択され、
Ｕ１およびＵ２は、一方は水素またはアルキルであり、他方は、Ｚ−Ｕであり、ここでＺは単結合、またはアルカンもしくは置換されたアルカンから水素が２つ取れた２価基であり、Ｕはヒドロキシであり、
Ｒ１〜Ｒ２４は、独立して、水素、アルキルおよび置換されたアルキルからなる群より選択される、
を得る工程；およびＹ１がヒドロキシ以外の場合、必要に応じて、さらなる酸化または置換工程を包含する、
方法。
項目２４．項目２３に記載の方法であって、
前記Ｘはヒドロキシであり、
前記Ｙ１およびＹ２は、一方は水素であり、他方はメチロールであり、
Ｒ１〜Ｒ２４は、すべて水素であり、
前記有機溶媒は、ＴＨＦであり、
前記工程１）におけるアルキルリチウムはメチルリチウムであり、
前記Ｕ１およびＵ２は、一方は水素であり、そして他方は、Ｚ−Ｕであり、ここでＺは、−ＣＨ２−であり、Ｕはヒドロキシであり；
前記Ｖ１およびＶ２は、一方は水素であり、他方は−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−ＣＨ２ＣＨ３である、
方法。
項目２５．以下の構造：
（ＷＡＦ）
を有し、式中、
Ｘは、ヒドロキシ、置換されたヒドロキシ、ハロゲン、チオールおよび置換されたチオールからなる群より選択され、
Ｙ１およびＹ２は、一方は水素またはアルキルであり、他方は、Ｚ−Ｗであり、ここでＺは単結合、またはアルカンもしくは置換されたアルカンから水素が２つ取れた２価基であり、Ｗはヒドロキシ、置換されたヒドロキシ、アルデヒド、カルボキシル基または置換されたカルボキシル基であり、
Ｒ１〜Ｒ２４は、独立して、水素、アルキルおよび置換されたアルキルからなる群より選択される、
化合物を定量する方法であって、
１）サンプルを提供する工程；
２）該化合物の立体異性体の既知量を該サンプルに添加する工程；
３）該サンプルを逆相カラムクロマトグラフィーで分離する工程；および
４）分離された該立体異性体から該化合物の量を算出する工程、
を包含する、方法。
項目２６．前記化合物は、下記構造式：
（ＷＡＦ−１）
を有し、
前記立体異性体は、下記構造式：
（ラブダンａ）
を有する、項目２５に記載の方法。
項目２７．前記サンプルは、前記逆相カラムクロマトグラフィーでの分離の前に、メタノール抽出され、続いて酢酸エチル抽出される、項目２５に記載の方法。
項目２８．前記逆相カラムクロマトグラフィーでの分離は、
Ｃ１８逆相カラムクロマトグラフィーによる分離を包含し、該分離は、８０％：２０％（ｖ／ｖ）メタノール：水での第一の分離、および９：８（ｖ／ｖ）アセトニトリル：水での分離を包含する、項目２５に記載の方法。
項目２９．前記算出は、回収率による損失に対する補正を包含する、項目２５に記載の方法。
項目３０．ＷＲＫＹファミリーに属する遺伝子の蓄積を必要とする状態にある植物に、該ＷＲＫＹファミリーに属する遺伝子の迅速な蓄積を誘導させるための組成物であって、
以下の構造：
（ＷＡＦ）
を有し、式中、
Ｘは、ヒドロキシ、置換されたヒドロキシ、ハロゲン、チオールおよび置換されたチオールからなる群より選択され、
Ｙ１およびＹ２は、一方は水素またはアルキルであり、他方は、Ｚ−Ｗであり、ここでＺは単結合、またはアルカンもしくは置換されたアルカンから水素が２つ取れた２価基であり、Ｗはヒドロキシ、置換されたヒドロキシ、アルデヒド、カルボキシル基または置換されたカルボキシル基であり、
Ｒ１〜Ｒ２４は、独立して、水素、アルキルおよび置換されたアルキルからなる群より選択される、
化合物、
を含む、組成物。
項目３１．前記化合物は、下記構造式：
（ＷＡＦ−１）
を有する、項目３０に記載の組成物。
項目３２．前記ＷＲＫＹファミリーに属する遺伝子の蓄積を必要とする状態は、ストレスに対する迅速応答を必要とする状態である、項目３０に記載の組成物。
項目３３．前記ＷＲＫＹファミリーに属する遺伝子の迅速な蓄積を誘導させることにより、傷害抵抗性、虫害抵抗性、病害抵抗性および過敏感細胞死に対する抵抗性が前記植物に付与される、項目３０に記載の組成物。
項目３４．前記ＷＲＫＹファミリーに属する遺伝子は、ＷＩＺＺまたはＴＩＺＺである、項目３０に記載の組成物。
項目３５．ＷＲＫＹファミリーに属する遺伝子の発現を調節するための組成物であって、
以下の構造：
（ＷＡＦ）
を有し、式中、
Ｘは、ヒドロキシ、置換されたヒドロキシ、ハロゲン、チオールおよび置換されたチオールからなる群より選択され、
Ｙ１およびＹ２は、一方は水素またはアルキルであり、他方は、Ｚ−Ｗであり、ここでＺは単結合、またはアルカンもしくは置換されたアルカンから水素が２つ取れた２価基であり、Ｗはヒドロキシ、置換されたヒドロキシ、アルデヒド、カルボキシル基または置換されたカルボキシル基であり、
Ｒ１〜Ｒ２４は、独立して、水素、アルキルおよび置換されたアルキルからなる群より選択される、
化合物、
を含む、組成物。
項目３６．ＷＲＫＹファミリーに属する遺伝子の蓄積を必要とする状態にある植物に、該ＷＲＫＹファミリーに属する遺伝子の迅速な蓄積を誘導させる方法であって、
ａ）以下の構造：
（ＷＡＦ）
を有し、式中、
Ｘは、ヒドロキシ、置換されたヒドロキシ、ハロゲン、チオールおよび置換されたチオールからなる群より選択され、
Ｙ１およびＹ２は、一方は水素またはアルキルであり、他方は、Ｚ−Ｗであり、ここでＺは単結合、またはアルカンもしくは置換されたアルカンから水素が２つ取れた２価基であり、Ｗはヒドロキシ、置換されたヒドロキシ、アルデヒド、カルボキシル基または置換されたカルボキシル基であり、
Ｒ１〜Ｒ２４は、独立して、水素、アルキルおよび置換されたアルキルからなる群より選択される、
化合物を該植物に提供する工程、
を包含する、方法。
項目３７．前記化合物は、下記構造式：
（ＷＡＦ−１）
を有する、項目３６に記載の方法。
項目３８．前記ＷＲＫＹファミリーに属する遺伝子の蓄積を必要とする状態は、ストレスに対する迅速応答を必要とする状態である、項目３６に記載の方法。
項目３９．前記ＷＲＫＹファミリーに属する遺伝子の迅速な蓄積を誘導させることにより、傷害抵抗性、虫害抵抗性、病害抵抗性および過敏感細胞死に対する抵抗性が前記植物に付与される、項目３６に記載の方法。
項目４０．前記ＷＲＫＹファミリーに属する遺伝子は、ＷＩＺＺまたはＴＩＺＺである、項目３６に記載の方法。
項目４１．前記化合物は、前記ＷＲＫＹファミリーに属する遺伝子の蓄積が必要な状態になった直後に前記植物に付与される、項目３６に記載の方法。
項目４２．ＷＲＫＹファミリーに属する遺伝子の発現を調節するための組成物であって、
項目１に記載の化合物、
を含む、組成物。
項目４３．以下の構造：
（ＷＡＦ）
を有し、式中、
Ｘは、ヒドロキシ、置換されたヒドロキシ、ハロゲン、チオールおよび置換されたチオールからなる群より選択され、
Ｙ１およびＹ２は、一方は水素またはアルキルであり、他方は、Ｚ−Ｗであり、ここでＺは単結合、またはアルカンもしくは置換されたアルカンから水素が２つ取れた２価基であり、Ｗはヒドロキシ、置換されたヒドロキシ、アルデヒド、カルボキシル基または置換されたカルボキシル基であり、
Ｒ１〜Ｒ２４は、独立して、水素、アルキルおよび置換されたアルキルからなる群より選択される、
化合物の、植物にストレス耐性を付与または増強するための使用。
項目４４．以下の構造：
（ＷＡＦ）
を有し、式中、
Ｘは、ヒドロキシ、置換されたヒドロキシ、ハロゲン、チオールおよび置換されたチオールからなる群より選択され、
Ｙ１およびＹ２は、一方は水素またはアルキルであり、他方は、Ｚ−Ｗであり、ここでＺは単結合、またはアルカンもしくは置換されたアルカンから水素が２つ取れた２価基であり、Ｗはヒドロキシ、置換されたヒドロキシ、アルデヒド、カルボキシル基または置換されたカルボキシル基であり、
Ｒ１〜Ｒ２４は、独立して、水素、アルキルおよび置換されたアルキルからなる群より選択される、
化合物の、ストレス耐性植物を生産するための使用。
項目４５．以下の構造：
（ＷＡＦ）
を有し、式中、
Ｘは、ヒドロキシ、置換されたヒドロキシ、ハロゲン、チオールおよび置換されたチオールからなる群より選択され、
Ｙ１およびＹ２は、一方は水素またはアルキルであり、他方は、Ｚ−Ｗであり、ここでＺは単結合、またはアルカンもしくは置換されたアルカンから水素が２つ取れた２価基であり、Ｗはヒドロキシ、置換されたヒドロキシ、アルデヒド、カルボキシル基または置換されたカルボキシル基であり、
Ｒ１〜Ｒ２４は、独立して、水素、アルキルおよび置換されたアルキルからなる群より選択される、
化合物の、ストレス耐性の植物組織を生産するための使用。
項目４６．以下の構造：
（ＷＡＦ）
を有し、式中、
Ｘは、ヒドロキシ、置換されたヒドロキシ、ハロゲン、チオールおよび置換されたチオールからなる群より選択され、
Ｙ１およびＹ２は、一方は水素またはアルキルであり、他方は、Ｚ−Ｗであり、ここでＺは単結合、またはアルカンもしくは置換されたアルカンから水素が２つ取れた２価基であり、Ｗはヒドロキシ、置換されたヒドロキシ、アルデヒド、カルボキシル基または置換されたカルボキシル基であり、
Ｒ１〜Ｒ２４は、独立して、水素、アルキルおよび置換されたアルキルからなる群より選択される、
化合物の、ストレス耐性の植物細胞を生産するための使用。
項目４７．以下の構造：
（ＷＡＦ）
を有し、式中、
Ｘは、ヒドロキシ、置換されたヒドロキシ、ハロゲン、チオールおよび置換されたチオールからなる群より選択され、
Ｙ１およびＹ２は、一方は水素またはアルキルであり、他方は、Ｚ−Ｗであり、ここでＺは単結合、またはアルカンもしくは置換されたアルカンから水素が２つ取れた２価基であり、Ｗはヒドロキシ、置換されたヒドロキシ、アルデヒド、カルボキシル基または置換されたカルボキシル基であり、
Ｒ１〜Ｒ２４は、独立して、水素、アルキルおよび置換されたアルキルからなる群より選択される、
化合物の、ストレス耐性の植物種子を生産するための使用。
項目４８．以下の構造：
（ＷＡＦ）
を有し、式中、
Ｘは、ヒドロキシ、置換されたヒドロキシ、ハロゲン、チオールおよび置換されたチオールからなる群より選択され、
Ｙ１およびＹ２は、一方は水素またはアルキルであり、他方は、Ｚ−Ｗであり、ここでＺは単結合、またはアルカンもしくは置換されたアルカンから水素が２つ取れた２価基であり、Ｗはヒドロキシ、置換されたヒドロキシ、アルデヒド、カルボキシル基または置換されたカルボキシル基であり、
Ｒ１〜Ｒ２４は、独立して、水素、アルキルおよび置換されたアルキルからなる群より選択される、
化合物の、ＷＲＫＹファミリーに属する遺伝子の蓄積を必要とする状態にある植物に、該ＷＲＫＹファミリーに属する遺伝子の迅速な蓄積を誘導させるための使用。
項目４９．以下の構造：
（ＷＡＦ）
を有し、式中、
Ｘは、ヒドロキシ、置換されたヒドロキシ、ハロゲン、チオールおよび置換されたチオールからなる群より選択され、
Ｙ１およびＹ２は、一方は水素またはアルキルであり、他方は、Ｚ−Ｗであり、ここでＺは単結合、またはアルカンもしくは置換されたアルカンから水素が２つ取れた２価基であり、Ｗはヒドロキシ、置換されたヒドロキシ、アルデヒド、カルボキシル基または置換されたカルボキシル基であり、
Ｒ１〜Ｒ２４は、独立して、水素、アルキルおよび置換されたアルキルからなる群より選択される、
化合物の、ＷＲＫＹファミリーに属する遺伝子の発現を調節するための使用。
項目５０．植物の伸長成長または肥大成長を促進するため、伸長成長を阻害するため、植物組織の成熟を促進するため、または植物の開花を調節するための組成物であって、
以下の構造：
（ＷＡＦ）
を有し、式中、
Ｘは、ヒドロキシ、置換されたヒドロキシ、ハロゲン、チオールおよび置換されたチオールからなる群より選択され、
Ｙ１およびＹ２は、一方は水素またはアルキルであり、他方は、Ｚ−Ｗであり、ここでＺは単結合、またはアルカンもしくは置換されたアルカンから水素が２つ取れた２価基であり、Ｗはヒドロキシ、置換されたヒドロキシ、アルデヒド、カルボキシル基または置換されたカルボキシル基であり、
Ｒ１〜Ｒ２４は、独立して、水素、アルキルおよび置換されたアルキルからなる群より選択される、
化合物を含む、組成物。
項目５１．植物の伸長成長または肥大成長を促進するため、伸長成長を阻害するため、植物組織の成熟を促進するため、または植物の開花を調節するための方法であって、
ａ）以下の構造：
（ＷＡＦ）
を有し、式中、
Ｘは、ヒドロキシ、置換されたヒドロキシ、ハロゲン、チオールおよび置換されたチオールからなる群より選択され、
Ｙ１およびＹ２は、一方は水素またはアルキルであり、他方は、Ｚ−Ｗであり、ここでＺは単結合、またはアルカンもしくは置換されたアルカンから水素が２つ取れた２価基であり、Ｗはヒドロキシ、置換されたヒドロキシ、アルデヒド、カルボキシル基または置換されたカルボキシル基であり、
Ｒ１〜Ｒ２４は、独立して、水素、アルキルおよび置換されたアルキルからなる群より選択される、
化合物を該植物に提供する工程、
を包含する、方法。
項目５２．項目５１に記載の方法により得られた、植物。
項目５３．以下の構造：
（ＷＡＦ）
を有し、式中、
Ｘは、ヒドロキシ、置換されたヒドロキシ、ハロゲン、チオールおよび置換されたチオールからなる群より選択され、
Ｙ１およびＹ２は、一方は水素またはアルキルであり、他方は、Ｚ−Ｗであり、ここでＺは単結合、またはアルカンもしくは置換されたアルカンから水素が２つ取れた２価基であり、Ｗはヒドロキシ、置換されたヒドロキシ、アルデヒド、カルボキシル基または置換されたカルボキシル基であり、
Ｒ１〜Ｒ２４は、独立して、水素、アルキルおよび置換されたアルキルからなる群より選択される、
化合物の、植物の伸長成長または肥大成長を促進するため、伸長成長を阻害するため、植物組織の成熟を促進するため、または植物の開花を調節するための使用。
発明の実施の形態
以下、本発明を説明する。本明細書の全体にわたり、単数形の表現は、特に言及しない限り、その複数形の概念をも含むことが理解されるべきである。従って、単数形の冠詞（例えば、英語の場合は「ａ」、「ａｎ」、「ｔｈｅ」など、独語の場合の「ｅｉｎ」、「ｄｅｒ」、「ｄａｓ」、「ｄｉｅ」などおよびその格変化形、仏語の場合の「ｕｎ」、「ｕｎｅ」、「ｌｅ」、「ｌａ」など、スペイン語における「ｕｎ」、「ｕｎａ」、「ｅｌ」、「ｌａ」など、他の言語における対応する冠詞、形容詞など）は、特に言及しない限り、その複数形の概念をも含むことが理解されるべきである。また、本明細書において使用される用語は、特に言及しない限り、当該分野で通常用いられる意味で用いられることが理解されるべきである。
（用語）
以下に本明細書において特に使用される用語の定義を列挙する。
本明細書において用いられる「生物」とは、当該分野における最も広義に用いられ、生命現象を営むものをいい、代表的には、細胞構造、増殖（自己再生産）、成長、調節性、物質代謝、修復能力など種々の特性を有し、通常、核酸のつかさどる遺伝と、タンパク質のつかさどる代謝の関与する増殖を基本的な属性として有する。生物には、原核生物、真核生物（植物、動物など）などが包含される。
本明細書において用いられる「植物」とは、植物界に属する生物の総称であり、クロロフィル、かたい細胞壁、豊富な永続性の胚的組織の存在，および運動する能力がない生物により特徴付けられる。代表的には、植物は、細胞壁の形成・クロロフィルによる同化作用をもつ顕花植物をいう。「植物」は、単子葉植物および双子葉植物のいずれも含む。好ましい植物としては、例えば、コムギ、トウモロコシ、イネ、オオムギ、ソルガムなどのイネ科に属する単子葉植物が挙げられる。好ましい植物のほかの例としては、タバコ、ピーマン、ナス、メロン、トマト、サツマイモ、キャベツ、ネギ、ブロッコリー、ニンジン、キウリ、柑橘類、白菜、レタス、モモ、ジャガイモおよびリンゴが挙げられる。好ましい植物は作物に限られず、花、樹木、芝生、雑草なども含まれる。特に他で示さない限り、植物は、植物体、植物器官、植物組織、植物細胞、および種子のいずれをも意味する。植物器官の例としては、根、葉、茎、および花などが挙げられる。植物細胞の例としては、カルスおよび懸濁培養細胞が挙げられる。
別の実施形態において、本発明において使用され得る植物種の例としては、ナス科、イネ科、アブラナ科、バラ科、マメ科、ウリ科、シソ科、ユリ科、アカザ科、セリ科の植物が挙げられる。
ナス科の植物の例としては、Ｎｉｃｏｔｉａｎａ、Ｓｏｌａｎｕｍ、Ｄａｔｕｒａ、Ｌｙｃｏｐｅｒｓｉｏｎ、またはＰｅｔｕｎｉａに属する植物が挙げられ、例えば、タバコ、ナス、ジャガイモ、トマト、トウガラシ、ペチュニアなどを含む。
イネ科の植物の例としては、Ｏｒｙｚａ、Ｈｏｒｄｅｎｕｍ、Ｓｅｃａｌｅ、Ｓｃｃｃｈａｒｕｍ、Ｅｃｈｉｎｏｃｈｌｏａ、またはＺｅａに属する植物が挙げられ、例えば、イネ、オオムギ、ライムギ、ヒエ、モロコシ、トウモロコシなどを含む。
アブラナ科の植物の例としては、Ｒａｐｈａｎｕｓ、Ｂｒａｓｓｉｃａ、Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ、Ｗａｓａｂｉａ、またはＣａｐｓｅｌｌａに属する植物が挙げられ、例えば、大根、アブラナ、シロイヌナズナ、ワサビ、ナズナなどを含む。
バラ科の植物の例としては、Ｏｒｕｎｕｓ、Ｍａｌｕｓ、Ｐｙｎｕｓ、Ｆｒａｇａｒｉａ、またはＲｏｓａに属する植物が挙げられ、例えば、ウメ、モモ、リンゴ、ナシ、オランダイチゴ、バラなどを含む。
マメ科の植物の例としては、Ｇｌｙｃｉｎｅ、Ｖｉｇｎａ、Ｐｈａｓｅｏｌｕｓ、Ｐｉｓｕｍ、Ｖｉｃｉａ、Ａｒａｃｈｉｓ、Ｔｒｉｆｏｌｌｕｍ、Ａｌｐｈａｌｆａ、またはＭｅｄｉｃａｇｏに属する植物が挙げられ、例えば、ダイズ、アズキ、インゲンマメ、エンドウ、ソラマメ、ラッカセイ、クローバ、ウマゴヤシなどを含む。
ウリ科の植物の例としては、Ｌｕｆｆａ、Ｃｕｃｕｒｂｉｔａ、またはＣｕｃｕｍｉｓに属する植物が挙げられ、例えば、ヘチマ、カボチャ、キュウリ、メロンなどを含む。
シソ科の植物の例としては、Ｌａｖａｎｄｕｌａ、Ｍｅｎｔｈａ、またはＰｅｒｉｌｌａに属する植物が挙げられ、例えば、ラベンダー、ハッカ、シソなどを含む。
ユリ科に属する植物の例としては、Ａｌｌｉｕｍ、Ｌｉｌｉｕｍ、またはＴｕｌｉｐａに属する植物が挙げられ、例えば、ネギ、ニンニク、ユリ、チューリップなどを含む。
アカザ科の植物の例としては、Ｓｐｉｎａｃｉａに属する植物が挙げられ、例えば、ホウレンソウを含む。
セリ科の植物の例としては、Ａｎｇｅｌｉｃａ、Ｄａｕｃｕｓ、Ｃｒｙｐｔｏｔａｅｎｉａ、またはＡｐｉｔｕｍに属する植物が挙げられ、例えば、シシウド、ニンジン、ミツバ、セロリなどを含む。
本発明の生産方法に用いられる植物は、好ましくはタバコ、トマト、ジャガイモ、イネ、トウモロコシ、ダイコン、ダイズ、エンドウ、ウマゴヤシ、およびホウレンソウであり、より好ましくは、タバコ、トマト、ジャガイモ、トウモロコシ、およびダイズである。
本発明の因子は、植物のほかに、動物を含む種々の生物のストレス耐性を付与するに有効であり得る。本明細書において「動物」は、当該分野において最も広義で用いられ、脊椎動物および無脊椎動物を含む。動物としては、哺乳綱、鳥綱、爬虫綱、両生綱、魚綱、昆虫綱、蠕虫綱などが挙げられるがそれらに限定されない。従って、本明細書における生物および動物には、ストレスを受け得るものすべてが含まれる。
本明細書において「ストレス」とは、植物のような生物に対して、物理的、化学的、生物学的に加えられ得る、その生物の正常な生（成）長／増殖を妨げる因子のことをいう。ストレスとしては、例えば、物理的ストレス（光、熱、冷却、凍結、紫外線、Ｘ線、切断、摩擦など）、化学的ストレス（酸素ストレス、化学物質、生理活性物質など）、生物学的なストレス（ウイルス、病原体（例えば、植物の場合のイモチ病菌）感染など）などが挙げられる。ストレスに関連する遺伝子を含む遺伝子の発現に関する性質は、植物のような生物の任意の部分からＲＮＡを抽出してノーザンブロット分析で発現量を分析することまたは発現されたタンパク質をウェスタンブロットにより定量することにより決定することができる。
従って、本明細書では、「ストレス耐性」とは、植物のような生物が、あるストレスを受けたときに、通常であればその生物が弱まる反応が、遅延するか、停止するか、回復するか、またはそのような弱まる反応が起きなくなることをいう。従って、ストレス耐性が付与または増強された生物は、それではない生物に比べて、生存度が高くなる。本明細書において、「ストレス耐性が付与される」とは、野生型ではあるストレスが与えられるとほぼまたは完全に死滅する生物に対して、処置後の同一の生物がそのストレスに対して生存することができるようになることをいう。そのような生存は、当該分野において周知の技術を用いて判定することができる。例えば、生存は肉眼または顕微鏡において判定することができる。本明細書において、「ストレス耐性が増強される」とは、野生型ではあるストレスが与えられるとある程度の耐性を示す生物に対して、処置後の同一の生物がそのストレスに対する耐性が増えることをいう。本明細書においては、ストレス耐性の付与および増強は、ときに、重複する意味を有し得ることから、本明細書では、互換的に使用され得る。
本明細書において「傷害抵抗性」とは、植物のような生物の性質についていい、傷害の程度を減少させ得る能力をいう。本明細書において「病害抵抗性」とは、植物のような生物の性質についていい、発病程度を減少させ得る能力をいう。本明細書において「虫害抵抗性」とは、植物のような生物の性質についていい、食害程度を減少させ得る能力をいう。従って、「傷害抵抗性」「虫害抵抗性」および「病害抵抗性」は、本明細書において、「ストレス耐性」に包含される。
本発明の因子（ａｇｅｎｔ）、化合物、組成物および方法は、単子葉植物だけでなく双子葉植物および動物を含む他の生物において機能することが企図される。これは、両植物間でストレス応答調節の基本的な機構が類似していること、および動物においても炎症反応が類似の機構（アラキドン酸代謝経路）を有していることから説明される。
本明細書において「伸長成長」とは、先端成長、介在成長などをいう。「先端成長」とは、茎頂や根端の成長点によって行われ、茎・根などの軸性器官が形成されることをいう。「介在成長」とは、伸長するときに、各部分で均等に生じずに、ある程度成長した部分（例えば、成長が止まった器官または組織）と部分との間が成長帯となって生じる成長をいい、節間成長ともよばれる。
本明細書において「肥大成長」とは、植物体、植物組織または植物細胞の体積が増加して成長することをいう。植物の組織または器官では、植物細胞の増加によってもまた肥大が生じる。
本明細書において「成熟」とは、植物体または植物組織の生殖細胞の成熟、子実体の成長期を完了したときから完熟期にいたる過程をいう。
本明細書において「開花の調節」とは、花芽の形成から実際の開花の期間を変化させることをいう。
本明細書では、植物の栽培は当該分野において公知の任意の方法により行うことができる。植物の栽培方法は、例えば、モデル植物の実験プロトコール−イネ・シロイヌナズナ編−」：細胞工学別冊植物細胞工学シリーズ４；イネの栽培法（奥野員敏）ｐｐ．２８−３２、およびアラビドプシスの栽培法（丹羽康夫）ｐｐ．３３−４０（監修 島本功、岡田清孝）に例示されており、当業者であれば容易に実施することができることから本明細書では詳述する必要はない。例えば、シロイヌナズナの栽培は土耕、ロックウール耕、水耕いずれでも行うことができる。白色蛍光灯（６０００ルクス程度）の下、恒明条件で栽培すれば播種後４週間程度で最初の花が咲き、開花後１６日程度で種子が完熟する。１さやで４０〜５０粒の種子が得られ、播種後２〜３ケ月で枯死するまでの間に１００００粒程度の種子が得られる。種子の休眠期間は短く、完熟種子は１週間程度乾燥させれば吸水後２〜３日で発芽する。ただし、吸水・播種後２〜４日間４℃で低温処理を行うと発芽が斉一化される。イネの栽培は主に土耕で行い、１００００ルクス以上の光条件下で生育させる。播種後４０日程度以後に短日条件とすることで出穂が誘導され、出穂誘導後３０日程度で開花し、開花後４０日程度で完熟種子が得られる。
植物細胞の培養、分化および再生のためには、当該分野で公知の手法および培地が用いられる。このような培地には、例えば、Ｍｕｒａｓｈｉｇｅ−Ｓｋｏｏｇ（ＭＳ）培地、ＧａＭｂｏｒｇ Ｂ５（Ｂ）培地、Ｗｈｉｔｅ培地、Ｎｉｔｓｃｈ＆Ｎｉｔｓｃｈ（Ｎｉｔｓｃｈ）培地などが含まれるが、これらに限定されるわけではない。これらの培地は、通常、植物生長調節物質（植物ホルモン）などが適当量添加されて用いられる。好ましくは、本発明の因子は、これらの培地に添加されて用いられ、植物体、植物組織もしくは器官、または植物細胞の成長（増殖）、分化および再生のための調節物質として働き得る。また、本発明の因子は、培地に添加されるのみならず、後述するように、種々の形態（例えば、固形肥料、液状の栄養剤などのような農学的組成物）で含まれ得る。
本発明の因子によるＷＩＰＫまたはＳＩＰＫ関連遺伝子などの発現調節の解析は、ＤＮＡアレイを用いた遺伝子解析方法によっても行われ得る。ＤＮＡアレイについては、（秀潤社編、細胞工学別冊「ＤＮＡマイクロアレイと最新ＰＣＲ法」）に広く概説されている。また、ＤＮＡアレイを用いた植物の解析についても最近行われるようになっている（Ｓｃｈｅｎｋ ＰＭら （２０００） Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．（ＵＳＡ） ９７：１１６５５−１１６６０）。以下、ＤＮＡアレイおよびそれを使用する遺伝子分析方法を簡単に説明する。
「ＤＮＡアレイ」とは、ＤＮＡを基板上に整列（ａｒｒａｙ）させて、固定させたデバイスをいう。ＤＮＡアレイは、基盤の大きさまたは載せるＤＮＡの密度によって、ＤＮＡマクロアレイおよびＤＮＡマイクロアレイなどに分けられる。
マクロとマイクロとの境界は厳密に決まっているわけではないが、一般に、「ＤＮＡマクロアレイ」とは、メンブレン上にＤＮＡをスポットした高密度フィルター（ｈｉｇｈ ｄｅｎｓｉｔｙ ｆｉｌｔｅｒ）をいい、「ＤＮＡマイクロアレイ」とは、ガラス、シリコンなどの基板表面にＤＮＡを載せたものをいう。載せる種類によって、ｃＤＮＡアレイ、オリゴＤＮＡアレイなどがある。
高密度オリゴＤＮＡアレイのうち、半導体集積回路製造のための光リソグラフィー（ｐｈｏｔｏｌｉｔｈｏｇｒａｐｈｙ）技術を応用し、基板上で一度に複数種のオリゴＤＮＡを合成することで作製されたものを、半導体チップになぞらえて、特に「ＤＮＡチップ（ｃｈｉｐ）」という。この方法を用いて作製されたものとしては、ＧｅｎｅＣｈｉｐ（登録商標）（Ａｆｆｉｍｅｔｒｉｘ、ＣＡ）などが挙げられる（Ｍａｒｓｈａｌｌ Ａら、（１９９８） Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．１６：２７−３１およびＲａｍｓａｙ Ｇら、（１９９８） Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．１６ ４０−４４を参照のこと）。好ましくは、本発明におけるマイクロアレイを用いた遺伝子解析においては、このＧｅｎｅＣｈｉｐ（登録商標）が用いられ得る。ＤＮＡチップは、狭義には上記のように定義されるが、ＤＮＡアレイまたはＤＮＡマイクロアレイ全体をいうこともある。
ＤＮＡマイクロアレイは、このように、ガラス基板上に数千〜数万またはそれを超える遺伝子ＤＮＡを高密度に配列したデバイスであることから、ｃＤＮＡ、ｃＲＮＡまたはゲノムＤＮＡとのハイブリダイゼーションによって、遺伝子発現のプロファイルまたは遺伝子多型をゲノムスケールで解析することが可能となっている。この手法により、シグナル伝達系および／または転写制御経路の解析（Ｆａｍｂｒｏｕｇｈ Ｄら（１９９９），Ｃｅｌｌ ９７，７２７−７４１）、組織修復の機構の解析（Ｉｙｅｒ ＶＲら、（１９９９），Ｓｃｉｅｎｃｅ ２８３：８３−８７）、医薬品の作用機構（Ｍａｒｔｏｎ ＭＪ、（１９９９），Ｎａｔ．Ｍｅｄ．４：１２９３−１３０１）、発生・分化の過程における遺伝子発現変動の広汎な解析、病態に伴って発現変動する遺伝子群の同定、またはシグナル伝達系もしくは転写制御に関与する新たな遺伝子の発見などが可能となってきた。また、遺伝子多型についても、多数のＳＮＰを１つのＤＮＡマイクロアレイで解析することが可能となっている（Ｃａｒｇｉｌｌ Ｍら、（１９９９），Ｎａｔ．Ｇｅｎｅｔ．２２：２３１−２３８）。
合成型ＤＮＡアレイにおける標識方法としては、例えば、二蛍光標識法が挙げられる。この方法では、２つの異なるｍＲＮＡサンプルをそれぞれ異なる蛍光で標識し、同一マイクロアレイ上で競合的ハイブリダイゼーションを行って、両方の蛍光を測定し、それを比較することで遺伝子発現の相違を検出する。蛍光色素としては、例えば、Ｃｙ５およびＣｙ３などが最も用いられているが、それらに限定されない。Ｃｙ３およびＣｙ５の利点は、蛍光波長の重なりが殆どないという点である。二蛍光標識法は、遺伝子発現の相違のみならず、変異または多型性を検出するためにも使用され得る。
ＤＮＡアレイを用いたアッセイにおいては、ＤＮＡマイクロアレイ上でハイブリダイズした蛍光シグナルを蛍光検出器等で検出する。このような検出器は、現在までに種々の検出器が利用可能である。例えば、スタンフォード大学のグループは、オリジナルスキャナを開発しており、このスキャナは、蛍光顕微鏡と稼動ステージとを組み合わせたものである（ｈｔｔｐ：／／ｃｍｇｍ．ｓｔａｎｆｏｒｄ．ｅｄｕ／ｐｂｒｏｗｎを参照のこと）。従来型のゲル用蛍光イメージアナライザであるＦＭＢＩＯ（日立ソフトウェアエンジニアリング）、Ｓｔｏｒｍ（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｄｙｎａｍｉｃｓ）などでも、スポットがそれほど高密度でなければ、ＤＮＡマイクロアレイの読み取りを行い得る。その他に利用可能な検出器としては、ＳｃａｎＡｒｒａｙ ４０００、同５０００（ＧｅｎｅｒａｌＳｃａｎｎｉｎｇ；スキャン型（共焦点型））、ＧＭＳ４１８ Ａｒｒａｙ Ｓｃａｎｎｅｒ（宝酒造；スキャン型（共焦点型））、Ｇｅｎｅ Ｔｉｐ Ｓｃａｎｎｅｒ（日本レーザ電子；スキャン型（非共焦点型））、Ｇｅｎｅ Ｔａｃ２０００（Ｇｅｎｏｍｉｃ Ｓｏｌｕｔｉｏｎｓ；ＣＣＤカメラ型））などが挙げられる。
ＤＮＡマイクロアレイから得られるデータは膨大であることから、クローンとスポットとの対応の管理、データ解析などを行うためのデータ解析ソフトウェアが重要である。そのようなソフトウェアとしては、各種検出システムに付属のソフトウェアが利用可能である（Ｅｒｍｏｌａｅｖａ Ｏら（１９９８）Ｎａｔ．Ｇｅｎｅｔ．２０：１９−２３）。また、データベースのフォーマットとしては、例えば、Ａｆｆｙｍｅｔｒｉｘが提唱しているＧＡＴＣ（ｇｅｎｅｔｉｃ ａｎａｌｙｓｉｓ ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ｃｏｎｓｏｒｔｉｕｍ）と呼ばれる形式が挙げられる。
本発明の因子、化合物または組成物によるＷＩＰＫおよびＳＩＰＫ関連遺伝子ならびにその下流遺伝子などの発現の調節はまた、ディファレンシャルディスプレイ（ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌ ｄｉｓｐｌａｙ）技術を用いた遺伝子解析でも解析することができる。
本明細書において「ディファレンシャルディスプレイ（技術）」とは、発現変動する遺伝子を検出または同定するための方法である。この方法では、２つ以上のサンプルからｃＤＮＡをそれぞれ作製し、任意のプライマーセットを用いてＰＣＲにより増幅し、その後、生成された複数のＰＣＲ産物をゲル電気泳動により分離し、パターン化した後、各バンドの相対的なシグナル強度変化をもとに、発現変動遺伝子がクローニングされる。
このように、本発明の化合物または物質によって調節されるシグナル伝達経路の下流または上流にある遺伝子発現の調節を行う技術は周知である。
本発明の化合物は、当該分野における周知技術により構造決定することができる。そのような構造決定の方法としては、ＮＭＲ、Ｘ線構造解析、赤外線（ＩＲ）分析、質量分析などの物理学的分析方法、フェーリング反応のように特定の置換基との特異的化学反応を用いる方法のような化学的分析方法、アルデヒドデヒドロゲナーゼのように特定の置換基に特異的に反応する特定の酵素を用いた生化学的分析方法、微生物を用いた生物学的分析方法などが挙げられるがそれらに限定されない。好ましくは、ＮＭＲのような物理学的分析方法が利用される。
（有機化学）
本明細書において、任意の化合物は、その任意の異性体（例えば、構造異性と、構造式は同じだが原子の立体配置、立体配座が異なる立体異性（幾何異性、回転異性、光学異性など）を有する異性体、シス−トランス異性体（例えば、（Ｅ，Ｅ）、（Ｅ，Ｚ）、（Ｚ，Ｅ）、（Ｚ，Ｚ）など）、ラセミ体、鏡像体など）を含むことが理解される。本明細書において、１つの実施形態では、本発明の化合物は単一の異性体であり得るが、２種以上の異性体の混合物であってもよい。 本明細書において、「ジテルペノイド」とは、テルペンが２つ連なった構造を有する化合物をいう。テルペンとは種々の植物（まれに動物）から得られる有機化合物のうち、炭素数が５の倍数５ｎ（ｎ≧２）で，生合成的見地からはｎ個のイソプレンあるいはイソペンタンから構成される前駆物質に由来すると考えられる物質の総称である。テルペンは、テルペノイド（ｔｅｒｐｅｎｏｉｄ）ともいう。テルペンに属する種々の炭化水素、アルコール、ケトン、アルデヒド、カルボン酸、ラクトンなどが知られている。テルペンはその炭素数によりつぎのように分類される。このうち、ｎ＝４のものをジテルペン（炭素数２０個からなる）という。
本明細書において、「ラブダン型」とは、下記
（ラブダン、ｌａｂｄａｎｅ）の構造を有する化合物をいう。
本発明のラブダン型化合物は、任意の置換基を有し得る。置換基としては、水素、アルキル、置換されたアルキル、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、シクロアルケニル、置換されたシクロアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、アルコキシ、置換されたアルコキシ、炭素環基、置換された炭素環基、ヘテロ環基、置換されたヘテロ環基、ハロゲン、ヒドロキシ、置換されたヒドロキシ、チオール、置換されたチオール、シアノ、ニトロ、アミノ、置換されたアミノ、カルボキシ、置換されたカルボキシ、アシル、置換されたアシル、チオカルボキシ、置換されたチオカルボキシ、アミド、置換されたアミド、置換されたカルボニル、置換されたチオカルボニル、置換されたスルホニルおよび置換されたスルフィニルからなる群より選択される任意の置換基が挙げられるが、親水性、極性などにあまり影響を与えない程度の置換基が好ましい。そのような置換基としては、水素、アルキルおよび置換されたアルキルからなる群より選択される置換基が挙げられる。好ましくは、アルキルはＣ１−Ｃ６アルキル、より好ましくはＣ１−Ｃ５アルキル、Ｃ１−Ｃ４アルキル、Ｃ１−Ｃ３アルキル、Ｃ１−Ｃ２アルキル、メチルなどであり得る。上記置換されたアルキルが置換基として選択される場合は、好ましくは、置換される部分は、親水性、極性などにあまり影響を与えない程度の置換基であり得る。
上記置換基は、本発明の本質的な機能に影響しない限り、ハロゲン、アルコキシ、置換されたアルコキシ、アミノ、置換されたアミノ、アルキルチオ、置換されたアルキルチオ、アリールチオ、置換されたアリールチオ、ニトロ、カルボキシ、置換されたカルボキシ、アシル、置換されたアシルおよび置換されたスルホニルからなる群より選択される置換基でもあり得る。
本明細書において「アルキル」とは、メタン、エタン、プロパンのような脂肪族炭化水素（アルカン）から水素原子が一つ失われて生ずる１価の基をいい、一般にＣｎＨ２ｎ＋１−で表される（ここで、ｎは正の整数である）。アルキルは、直鎖または分枝鎖であり得る。本明細書において「置換されたアルキル」とは、以下に規定する置換基によってアルキルのＨが置換されたアルキルをいう。これらの具体例は、Ｃ１〜Ｃ２アルキル、Ｃ１〜Ｃ３アルキル、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ１〜Ｃ５アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ７アルキル、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ９アルキル、Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、Ｃ１〜Ｃ１１アルキルまたはＣ１〜Ｃ１２アルキル、Ｃ１〜Ｃ２置換されたアルキル、Ｃ１〜Ｃ３置換されたアルキル、Ｃ１〜Ｃ４置換されたアルキル、Ｃ１〜Ｃ５置換されたアルキル、Ｃ１〜Ｃ６置換されたアルキル、Ｃ１〜Ｃ７置換されたアルキル、Ｃ１〜Ｃ８置換されたアルキル、Ｃ１〜Ｃ９置換されたアルキル、Ｃ１〜Ｃ１０置換されたアルキル、Ｃ１〜Ｃ１１置換されたアルキルまたはＣ１〜Ｃ１２置換されたアルキルであり得る。ここで、例えばＣ１〜Ｃ１０アルキルとは、炭素原子を１〜１０個有する直鎖または分枝状のアルキルを意味し、メチル（ＣＨ３−）、エチル（Ｃ２Ｈ５−）、ｎ−プロピル（ＣＨ３ＣＨ２ＣＨ２−）、イソプロピル（（ＣＨ３）２ＣＨ−）、ｎ−ブチル（ＣＨ３ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−）、ｎ−ペンチル（ＣＨ３ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−）、ｎ−ヘキシル（ＣＨ３ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−）、ｎ−ヘプチル（ＣＨ３ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−）、ｎ−オクチル（ＣＨ３ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−）、ｎ−ノニル（ＣＨ３ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−）、ｎ−デシル（ＣＨ３ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−）、−Ｃ（ＣＨ３）２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）２、−ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）２などが例示される。また、例えば、Ｃ１〜Ｃ１０置換されたアルキルとは、Ｃ１〜Ｃ１０アルキルであって、そのうち１または複数の水素原子が置換基により置換されているものをいう。
本明細書において「アルカン」とは、一般式 ＣｎＨ２ｎ＋２で表される脂肪族飽和炭化水素をいう。アルカンとしては、メタン、エタン、プロパンなどが挙げられる。アルカンは、直鎖または分枝鎖であり得る。本明細書において「置換されたアルカン」とは、以下に規定する置換基によってアルカンのＨが置換されたアルキルをいう。これらの具体例は、Ｃ１〜Ｃ２アルカン、Ｃ１〜Ｃ３アルカン、Ｃ１〜Ｃ４アルカン、Ｃ１〜Ｃ５アルカン、Ｃ１〜Ｃ６アルカン、Ｃ１〜Ｃ７アルカン、Ｃ１〜Ｃ８アルカン、Ｃ１〜Ｃ９アルカン、Ｃ１〜Ｃ１０アルカン、Ｃ１〜Ｃ１１アルカンまたはＣ１〜Ｃ１２アルカン、Ｃ１〜Ｃ２置換されたアルカン、Ｃ１〜Ｃ３置換されたアルカン、Ｃ１〜Ｃ４置換されたアルカン、Ｃ１〜Ｃ５置換されたアルカン、Ｃ１〜Ｃ６置換されたアルカン、Ｃ１〜Ｃ７置換されたアルカン、Ｃ１〜Ｃ８置換されたアルカン、Ｃ１〜Ｃ９置換されたアルカン、Ｃ１〜Ｃ１０置換されたアルカン、Ｃ１〜Ｃ１１置換されたアルカンまたはＣ１〜Ｃ１２置換されたアルカンであり得る。ここで、例えばＣ１〜Ｃ１０アルカンとは、炭素原子を１〜１０個有する直鎖または分枝状のアルカンを意味し、メタン（ＣＨ４）、エタン（Ｃ２Ｈ６）、ｎ−プロパン（ＣＨ３ＣＨ２ＣＨ３）、イソプロパン（（ＣＨ３）２ＣＨ２）、ｎ−ブタン（ＣＨ３ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３）、ｎ−ペンタン（ＣＨ３ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３）、ｎ−ヘキサン（ＣＨ３ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３）、ｎ−ヘプタン（ＣＨ３ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３）、ｎ−オクタン（ＣＨ３ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３）、ｎ−ノナン（ＣＨ３ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３）、ｎ−デカン（ＣＨ３ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３）、ＣＨ（ＣＨ３）２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）２、ＣＨ３ＣＨ（ＣＨ３）２などが例示される。また、例えば、Ｃ１〜Ｃ１０置換されたアルカンとは、Ｃ１〜Ｃ１０アルカンであって、そのうち１または複数の水素原子が置換基により置換されているものをいう。従って、本明細書において「アルカンもしくは置換されたアルカンから水素が２つ取れた２価基」とは、上記のようなアルカンまたは置換されたアルカンから任意の水素を２つ取り去ることによりできる２価基をいう。この置換基はアルキレン基とも呼ばれる。そのような置換基としては、例えば、トリメチレン（−（ＣＨ２）３−）、テトラメチレン（−（ＣＨ２）４−）、ペンタメチレン（−（ＣＨ２）５−）などが挙げられるがそれらに限定されない。
本明細書において「シクロアルキル」とは、環式構造を有するアルキルをいう。「置換されたシクロアルキル」とは、以下に規定する置換基によってシクロアルキルのＨが置換されたシクロアルキルをいう。具体例としては、Ｃ３〜Ｃ４シクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ５シクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ９シクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ１１シクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ１２シクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ４置換されたシクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ５置換されたシクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ６置換されたシクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ７置換されたシクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ８置換されたシクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ９置換されたシクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ１０置換されたシクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ１１置換されたシクロアルキルまたはＣ３〜Ｃ１２置換されたシクロアルキルであり得る。例えば、シクロアルキルとしては、シクロプロピル、シクロヘキシルなどが例示される。
本明細書において「アルケニル」とは、エチレン、プロピレンのような、分子内に二重結合を一つ有する脂肪族炭化水素から水素原子が一つ失われて生ずる１価の基をいい、一般にＣｎＨ２ｎ−１−で表される（ここで、ｎは２以上の正の整数である）。「置換されたアルケニル」とは、以下に規定する置換基によってアルケニルのＨが置換されたアルケニルをいう。具体例としては、Ｃ２〜Ｃ３アルケニル、Ｃ２〜Ｃ４アルケニル、Ｃ２〜Ｃ５アルケニル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、Ｃ２〜Ｃ７アルケニル、Ｃ２〜Ｃ８アルケニル、Ｃ２〜Ｃ９アルケニル、Ｃ２〜Ｃ１０アルケニル、Ｃ２〜Ｃ１１アルケニルまたはＣ２〜Ｃ１２アルケニル、Ｃ２〜Ｃ３置換されたアルケニル、Ｃ２〜Ｃ４置換されたアルケニル、Ｃ２〜Ｃ５置換されたアルケニル、Ｃ２〜Ｃ６置換されたアルケニル、Ｃ２〜Ｃ７置換されたアルケニル、Ｃ２〜Ｃ８置換されたアルケニル、Ｃ２〜Ｃ９置換されたアルケニル、Ｃ２〜Ｃ１０置換されたアルケニル、Ｃ２〜Ｃ１１置換されたアルケニルまたはＣ２〜Ｃ１２置換されたアルケニルであり得る。ここで、例えばＣ２〜Ｃ１０アルキルとは、炭素原子を２〜１０個含む直鎖または分枝状のアルケニルを意味し、ビニル（ＣＨ２＝ＣＨ−）、アリル（ＣＨ２＝ＣＨＣＨ２−）、ＣＨ３ＣＨ＝ＣＨ−などが例示される。また、例えば、Ｃ２〜Ｃ１０置換されたアルケニルとは、Ｃ２〜Ｃ１０アルケニルであって、そのうち１または複数の水素原子が置換基により置換されているものをいう。
本明細書において「シクロアルケニル」とは、環式構造を有するアルケニルをいう。「置換されたシクロアルケニル」とは、以下に規定する置換基によってシクロアルケニルのＨが置換されたシクロアルケニルをいう。具体例としては、Ｃ３〜Ｃ４シクロアルケニル、Ｃ３〜Ｃ５シクロアルケニル、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルケニル、Ｃ３〜Ｃ７シクロアルケニル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルケニル、Ｃ３〜Ｃ９シクロアルケニル、Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルケニル、Ｃ３〜Ｃ１１シクロアルケニル、Ｃ３〜Ｃ１２シクロアルケニル、Ｃ３〜Ｃ４置換されたシクロアルケニル、Ｃ３〜Ｃ５置換されたシクロアルケニル、Ｃ３〜Ｃ６置換されたシクロアルケニル、Ｃ３〜Ｃ７置換されたシクロアルケニル、Ｃ３〜Ｃ８置換されたシクロアルケニル、Ｃ３〜Ｃ９置換されたシクロアルケニル、Ｃ３〜Ｃ１０置換されたシクロアルケニル、Ｃ３〜Ｃ１１置換されたシクロアルケニルまたはＣ３〜Ｃ１２置換されたシクロアルケニルであり得る。例えば、好ましいシクロアルケニルとしては、１−シクロペンテニル、２−シクロヘキセニルなどが例示される。
本明細書において「アルキニル」とは、アセチレンのような、分子内に三重結合を一つ有する脂肪族炭化水素から水素原子が一つ失われて生ずる１価の基をいい、一般にＣｎＨ２ｎ−３−で表される（ここで、ｎは２以上の正の整数である）。「置換されたアルキニル」とは、以下に規定する置換基によってアルキニルのＨが置換されたアルキニルをいう。具体例としては、Ｃ２〜Ｃ３アルキニル、Ｃ２〜Ｃ４アルキニル、Ｃ２〜Ｃ５アルキニル、Ｃ２〜Ｃ６アルキニル、Ｃ２〜Ｃ７アルキニル、Ｃ２〜Ｃ８アルキニル、Ｃ２〜Ｃ９アルキニル、Ｃ２〜Ｃ１０アルキニル、Ｃ２〜Ｃ１１アルキニル、Ｃ２〜Ｃ１２アルキニル、Ｃ２〜Ｃ３置換されたアルキニル、Ｃ２〜Ｃ４置換されたアルキニル、Ｃ２〜Ｃ５置換されたアルキニル、Ｃ２〜Ｃ６置換されたアルキニル、Ｃ２〜Ｃ７置換されたアルキニル、Ｃ２〜Ｃ８置換されたアルキニル、Ｃ２〜Ｃ９置換されたアルキニル、Ｃ２〜Ｃ１０置換されたアルキニル、Ｃ２〜Ｃ１１置換されたアルキニルまたはＣ２〜Ｃ１２置換されたアルキニルであり得る。ここで、例えば、Ｃ２〜Ｃ１０アルキニルとは、例えば炭素原子を２〜１０個含む直鎖または分枝状のアルキニルを意味し、エチニル（ＣＨ≡Ｃ−）、１−プロピニル（ＣＨ３Ｃ≡Ｃ−）などが例示される。また、例えば、Ｃ２〜Ｃ１０置換されたアルキニルとは、Ｃ２〜Ｃ１０アルキニルであって、そのうち１または複数の水素原子が置換基により置換されているものをいう。
本明細書において「アルコキシ」とは、アルコール類のヒドロキシ基の水素原子が失われて生ずる１価の基をいい、一般にＣｎＨ２ｎ＋１Ｏ−で表される（ここで、ｎは１以上の整数である）。「置換されたアルコキシ」とは、以下に規定する置換基によってアルコキシのＨが置換されたアルコキシをいう。具体例としては、Ｃ１〜Ｃ２アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ３アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ４アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ５アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ７アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ８アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ９アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ１１アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ１２アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ２置換されたアルコキシ、Ｃ１〜Ｃ３置換されたアルコキシ、Ｃ１〜Ｃ４置換されたアルコキシ、Ｃ１〜Ｃ５置換されたアルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６置換されたアルコキシ、Ｃ１〜Ｃ７置換されたアルコキシ、Ｃ１〜Ｃ８置換されたアルコキシ、Ｃ１〜Ｃ９置換されたアルコキシ、Ｃ１〜Ｃ１０置換されたアルコキシ、Ｃ１〜Ｃ１１置換されたアルコキシまたはＣ１〜Ｃ１２置換されたアルコキシであり得る。ここで、例えば、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシとは、炭素原子を１〜１０個含む直鎖または分枝状のアルコキシを意味し、メトキシ（ＣＨ３Ｏ−）、エトキシ（Ｃ２Ｈ５Ｏ−）、ｎ−プロポキシ（ＣＨ３ＣＨ２ＣＨ２Ｏ−）などが例示される。
本明細書において「炭素環基」とは、炭素のみを含む環状構造を含む基であって、前記の「シクロアルキル」、「置換されたシクロアルキル」、「シクロアルケニル」、「置換されたシクロアルケニル」以外の基をいう。炭素環基は芳香族系または非芳香族系であり得、そして単環式または多環式であり得る。「置換された炭素環基」とは、以下に規定する置換基によって炭素環基のＨが置換された炭素環基をいう。具体例としては、Ｃ３〜Ｃ４炭素環基、Ｃ３〜Ｃ５炭素環基、Ｃ３〜Ｃ６炭素環基、Ｃ３〜Ｃ７炭素環基、Ｃ３〜Ｃ８炭素環基、Ｃ３〜Ｃ９炭素環基、Ｃ３〜Ｃ１０炭素環基、Ｃ３〜Ｃ１１炭素環基、Ｃ３〜Ｃ１２炭素環基、Ｃ３〜Ｃ４置換された炭素環基、Ｃ３〜Ｃ５置換された炭素環基、Ｃ３〜Ｃ６置換された炭素環基、Ｃ３〜Ｃ７置換された炭素環基、Ｃ３〜Ｃ８置換された炭素環基、Ｃ３〜Ｃ９置換された炭素環基、Ｃ３〜Ｃ１０置換された炭素環基、Ｃ３〜Ｃ１１置換された炭素環基またはＣ３〜Ｃ１２置換された炭素環基であり得る。炭素環基はまた、Ｃ４〜Ｃ７炭素環基またはＣ４〜Ｃ７置換された炭素環基であり得る。炭素環基としては、フェニル基から水素原子が１個欠失したものが例示される。ここで、水素の欠失位置は、化学的に可能な任意の位置であり得、芳香環上であってもよく、非芳香環上であってもよい。
本明細書において「ヘテロ環基」とは、炭素およびヘテロ原子をも含む環状構造を有する基をいう。ここで，ヘテロ原子は、Ｏ、ＳおよびＮからなる群より選択され、同一であっても異なっていてもよく、１つ含まれていても２以上含まれていてもよい。ヘテロ環基は、芳香族系または非芳香族系であり得、そして単環式または多環式であり得る。「置換されたヘテロ環基」とは、以下に規定する置換基によってヘテロ環基のＨが置換されたヘテロ環基をいう。具体例としては、Ｃ３〜Ｃ４炭素環基、Ｃ３〜Ｃ５炭素環基、Ｃ３〜Ｃ６炭素環基、Ｃ３〜Ｃ７炭素環基、Ｃ３〜Ｃ８炭素環基、Ｃ３〜Ｃ９炭素環基、Ｃ３〜Ｃ１０炭素環基、Ｃ３〜Ｃ１１炭素環基、Ｃ３〜Ｃ１２炭素環基、Ｃ３〜Ｃ４置換された炭素環基、Ｃ３〜Ｃ５置換された炭素環基、Ｃ３〜Ｃ６置換された炭素環基、Ｃ３〜Ｃ７置換された炭素環基、Ｃ３〜Ｃ８置換された炭素環基、Ｃ３〜Ｃ９置換された炭素環基、Ｃ３〜Ｃ１０置換された炭素環基、Ｃ３〜Ｃ１１置換された炭素環基またはＣ３〜Ｃ１２置換された炭素環基の１つ以上の炭素原子をヘテロ原子で置換したものであり得る。ヘテロ環基はまた、Ｃ４〜Ｃ７炭素環基またはＣ４〜Ｃ７置換された炭素環基の炭素原子を１つ以上ヘテロ原子で置換したものであり得る。ヘテロ環基としては、チエニル基、ピロリル基、フリル基、イミダゾリル基、ピリジル基などが例示される。水素の欠失位置は、化学的に可能な任意の位置であり得、芳香環上であってもよく、非芳香環上であってもよい。
本明細書において、炭素環基またはヘテロ環基は、下記に定義されるように１価の置換基で置換され得ることに加えて、２価の置換基で置換され得る。そのような二価の置換は、オキソ置換（＝Ｏ）またはチオキソ置換（＝Ｓ）であり得る。
本明細書において「ハロゲン」とは、周期表７Ｂ族に属するフッ素（Ｆ）、塩素（Ｃｌ）、臭素（Ｂｒ）、ヨウ素（Ｉ）などの元素の１価の基をいう。
本明細書において「ヒドロキシ」とは、−ＯＨで表される基をいう。「置換されたヒドロキシ」とは、ヒドロキシのＨが下記で定義される置換基で置換されているものをいう。
本明細書において「チオール」とは、ヒドロキシ基の酸素原子を硫黄原子で置換した基（メルカプト基）であり、−ＳＨで表される。「置換されたチオール」とは、メルカプトのＨが下記で定義される置換基で置換されている基をいう。
本明細書において「シアノ」とは、−ＣＮで表される基をいう。「ニトロ」とは、−ＮＯ２で表される基をいう。「アミノ」とは、−ＮＨ２で表される基をいう。「置換されたアミノ」とは、アミノのＨが以下で定義される置換基で置換されたものをいう。
本明細書において「カルボキシ」とは、−ＣＯＯＨで表される基をいう。「置換されたカルボキシ」とは、カルボキシのＨが以下に定義される置換基で置換されたものをいう。
本明細書において「チオカルボキシ」とは、カルボキシ基の酸素原子を硫黄原子で置換した基をいい、−Ｃ（＝Ｓ）ＯＨ、−Ｃ（＝Ｏ）ＳＨまたは−ＣＳＳＨで表され得る。「置換されたチオカルボキシ」とは、チオカルボキシのＨが以下に定義される置換基で置換されたものをいう。
本明細書において「アシル」とは、カルボン酸からＯＨを除いてできる１価の基をいう。アシル基の代表例としては、アセチル（ＣＨ３ＣＯ−）、ベンゾイル（Ｃ６Ｈ５ＣＯ−）などが挙げられる。「置換されたアシル」とは、アシルの水素を以下に定義される置換基で置換したものをいう。
本明細書において「アミド」とは、アンモニアの水素を酸基（アシル基）で置換した基であり、好ましくは、−ＣＯＮＨ２で表される。「置換されたアミド」とは、アミドが置換されたものをいう。
本明細書において「カルボニル」とは、アルデヒドおよびケトンの特性基である−（Ｃ＝Ｏ）−を含むものを総称したものをいう。「置換されたカルボニル」は、下記において選択される置換基で置換されているカルボニル基を意味する。
本明細書において「チオカルボニル」とは、カルボニルにおける酸素原子を硫黄原子に置換した基であり、特性基−（Ｃ＝Ｓ）−を含む。チオカルボニルには、チオケトンおよびチオアルデヒドが含まれる。「置換されたチオカルボニル」とは、下記において選択される置換基で置換されたチオカルボニルを意味する。
本明細書において「スルホニル」とは、特性基である−ＳＯ２−を含むものを総称したものをいう。「置換されたスルホニル」とは、下記において選択される置換基で置換されたスルホニルを意味する。
本明細書において「スルフィニル」とは、特性基である−ＳＯ−を含むものを総称したものをいう。「置換されたスルフィニル」とは、下記において選択される置換基で置換されているスルフィニルを意味する。
本明細書において「アルキルチオ」とは、アルキル基に硫黄原子が結合した基をいい、一般に−Ｓ−Ｒで表される（ここで、Ｒはアルキルから水素が１個欠失した基である）。
本明細書において「アリールチオ」とは、アリール基に硫黄原子が結合した基をいい、一般に−Ｓ−Ｒで表される（ここで、Ｒはアリールから水素が１個欠失した基である）。
本明細書において「アリール」とは、芳香族炭化水素の環に結合する水素原子が１個離脱して生ずる基をいい、本明細書において、炭素環基に包含される。
本明細書においては、特に言及がない限り、置換は、ある有機化合物または置換基中の１または２以上の水素原子を他の原子または原子団で置き換えることをいう。水素原子を１つ除去して１価の置換基に置換することも可能であり、そして水素原子を２つ除去して２価の置換基に置換することも可能である。本明細書における置換基は、好ましくは、以下のように定義される。
ある置換基Ｒが置換されている場合、
Ｒは、ＲＡ−（ＲＢ）ｎで表され、ここで、ＲＡはＲからｎ個の水素が脱離した（ｎ＋１）価の基であり；
ＲＢは、アルキル、置換されたアルキル、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、シクロアルケニル、置換されたシクロアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、アルコキシ、置換されたアルコキシ、炭素環基、置換された炭素環基、ヘテロ環基、置換されたヘテロ環基、ハロゲン、ヒドロキシ、置換されたヒドロキシ、チオール、置換されたチオール、シアノ、ニトロ、アミノ、置換されたアミノ、カルボキシ、置換されたカルボキシ、アシル、置換されたアシル、チオカルボキシ、置換されたチオカルボキシ、アミド、置換されたアミド、置換されたカルボニル、置換されたチオカルボニル、置換されたスルホニルおよび置換されたスルフィニルからなる群より選択され得る。
ＲＢが置換されている場合、
ＲＢは、ＲＣ−（ＲＤ）ｎで表され、ここで、ＲＣはＲＢからｎ個の水素が脱離した（ｎ＋１）価の基であり；
ＲＤは、アルキル、置換されたアルキル、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、シクロアルケニル、置換されたシクロアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、アルコキシ、置換されたアルコキシ、炭素環基、置換された炭素環基、ヘテロ環基、置換されたヘテロ環基、ハロゲン、ヒドロキシ、置換されたヒドロキシ、チオール、置換されたチオール、シアノ、ニトロ、アミノ、置換されたアミノ、カルボキシ、置換されたカルボキシ、アシル、置換されたアシル、チオカルボキシ、置換されたチオカルボキシ、アミド、置換されたアミド、置換されたカルボニル、置換されたチオカルボニル、置換されたスルホニルおよび置換されたスルフィニルからなる群より選択され得る。
ＲＤが置換されている場合、
ＲＤは、ＲＥ−（ＲＦ）ｎで表され、ここで、ＲＥはＲＤからｎ個の水素が脱離した（ｎ＋１）価の基であり；
ＲＦは、アルキル、置換されたアルキル、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、シクロアルケニル、置換されたシクロアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、アルコキシ、置換されたアルコキシ、炭素環基、置換された炭素環基、ヘテロ環基、置換されたヘテロ環基、ハロゲン、ヒドロキシ、置換されたヒドロキシ、チオール、置換されたチオール、シアノ、ニトロ、アミノ、置換されたアミノ、カルボキシ、置換されたカルボキシ、アシル、置換されたアシル、チオカルボキシ、置換されたチオカルボキシ、アミド、置換されたアミド、置換されたカルボニル、置換されたチオカルボニル、置換されたスルホニルおよび置換されたスルフィニルからなる群より選択され得る。
ここで、ＲＦが置換されている場合は、
ＲＦは、ＲＧ−（ＲＨ）ｎで表され、ここで、ＲＧは、ＲＦからｎ個の水素が脱離した（ｎ＋１）価の基であり；
Ｒ１ＨまたはＲ２Ｈは、アルキル、置換されたアルキル、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、シクロアルケニル、置換されたシクロアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、アルコキシ、置換されたアルコキシ、炭素環基、置換された炭素環基、ヘテロ環基、置換されたヘテロ環基、ハロゲン、ヒドロキシ、置換されたヒドロキシ、チオール、置換されたチオール、シアノ、ニトロ、アミノ、置換されたアミノ、カルボキシ、置換されたカルボキシ、アシル、置換されたアシル、チオカルボキシ、置換されたチオカルボキシ、アミド、置換されたアミド、置換されたカルボニル、置換されたチオカルボニル、置換されたスルホニルおよび置換されたスルフィニルからなる群より選択され得る。
ここで、ＲＨが置換されている場合は、ＲＦについての置換と同様に置換され得、その後の置換基についても同様に置換され得る。
なお、いうまでもなく、上述した置換基の数ｎは、正の整数であり、同一であっても異なっていてもよく、それぞれ独立して選択され得る。ｎが２以上の場合、（）ｎで示される各置換基は同一であってもよく、異なっていてもよい。
本明細書において、Ｃ１、Ｃ２、、、Ｃｍは、炭素数を表す。従って、Ｃ１は炭素数１個の置換基を表すために使用される。
本明細書において、「光学異性体」とは、結晶または分子の構造が鏡像関係にあって、重ねあわせることのできない一対の化合物の一方またはその組をいう。立体異性体の一形態であり、他の性質は同じであるにもかかわらず、旋光性のみが異なる。本明細書において用いられる光学異性体は、サンプル中に天然には存在しないものが好ましい。
（サンプル分析）
本明細書において、「サンプル」は、種々の起源から入手され得る。そのような起源としては、生物（例えば、植物）の全部または一部（例えば、器官、組織、細胞など）を直接使用するものまたは間接的に（他の処理などを経て）使用するものなどが挙げられる。
本明細書において、「逆相カラム（クロマトグラフィー）」とは、通常のクロマトグラフィーとは逆に，移動相よりも小さな極性をもつ固定相を用いる、液体クロマトグラフィーをいう。通常、逆相カラムクロマトグラフィーにおいては、疎水性の小さなものから順次溶出される。好ましくは、逆相カラムクロマトグラフィーは、Ｃ１８逆相カラムクロマトグラフィーであり得る。本明細書において、「Ｃ１８逆相カラム（クロマトグラフィー）」とは、炭素数が１８の固定相（オクタデシルシリルなど）を担体（例えば、シルカゲル担体）に化学結合した充填剤が詰められた逆相クロマトグラフィーをいう。「溶離液」または「移動相」とは、クロマトグラフィーにおいて溶出のために使用される液体をいう。
本明細書において、クロマトグラムからの「算出」は、測定の標準として用いられた物質の物質量と吸光度との関係示した曲線および測定すべき物質とその標準との関係を用いて、実測値から外挿することによって行うことができる。
本明細書において、「メタノール抽出」とは、溶媒としてメタノールを含むものを用いた有機化学的抽出をいう。好ましくは、メタノール抽出は、メタノール：水＝８０％：２０％（ｖ／ｖ）を用いた抽出であり得る。
本明細書において、「酢酸エチル抽出」とは、溶媒として酢酸エチルを含むものを用いた有機化学的抽出をいう。好ましくは、酢酸エチル抽出は、約１００％の酢酸エチルを用いた抽出であり得る。
本明細書において「ＷＲＫＹファミリー」、「ＷＲＫＹスーパーファミリー」または「ＷＲＫＹ型転写因子」とは、植物に特有のジンクフィンガーモチーフを含むＷＲＫＹ領域を有する転写因子群である。ＷＲＫＹ領域は、共通アミノ酸配列（ＷＲＫＹＣＱＫ）によって特徴付けられる（例えば、Ｔｒｅｎｄｓ Ｐｌａｎｔ Ｓｃｉ ２０００ Ｍａｙ；５（５）：１９９−２０６を参照のこと）。ＷＲＫＹファミリーには、即時初期型の一過的に活性化されるストレス応答性の性質を有するものが多い。ＷＲＫＹファミリーには、ＴＩＺＺおよびＷＩＺＺが含まれる。なお、アミノ酸は、その一般に公知の３文字記号か、またはＩＵＰＡＣ−ＩＵＢ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ Ｎｏｍｅｎｃｌａｔｕｒｅ Ｃｏｍｍｉｓｓｉｏｎにより推奨される１文字記号のいずれかにより、本明細書中で言及され得る。ヌクレオチドも同様に、一般に認知された１文字コードにより言及され得る。
本明細書において、「ＷＩＺＺ」（傷誘導性ロイシンジッパージンクフィンガー（ｗｏｕｎｄ−ｉｎｄｕｃｅｄ ｌｅｕｃｉｎｅ ｚｉｐｐｅｒ ｚｉｎｃｆｉｎｇｅｒ））とは、即時初期型の一過的に活性化されるストレス（例えば、傷）応答性の遺伝子であり（Ｈａｒａ ｅｔ ａｌ．、Ｍｏｌ．Ｇｅｎ．Ｇｅｎｅｔ．（２０００），２６３：３０−３７を参照のこと）、ＷＲＫＹファミリーに属し、その中でもグループＩＩサブファミリーに属する。このグループＩＩサブファミリーは、一つのＷＲＫＹ領域とそのＮ末端側にロイシンジッパー領域を含む（Ｔｒｅｎｄｓ Ｐｌａｎｔ Ｓｃｉ ２０００ Ｍａｙ；５（５）：１９９−２０６）。
本明細書において、「ＴＩＺＺ」とは、タバコから見つかった「ＷＩＺＺ」に類似する遺伝子であり、即時初期型の一過的に活性化される傷応答性の遺伝子であり（Ｙｏｄａ ｅｔ ａｌ．、Ｍｏｌ．Ｇｅｎｅｔ．Ｇｅｎｎｏｍｉｃｓ．（２００２），２６７：１５２−１６１を参照のこと）、ＷＩＺＺと同じくＷＲＫＹのグループＩＩサブファミリーに属する。このグループＩＩサブファミリーは、一つのＷＲＫＹ領域とそのＮ末端側にロイシンジッパー領域を含む（Ｔｒｅｎｄｓ Ｐｌａｎｔ Ｓｃｉ ２０００ Ｍａｙ；５（５）：１９９−２０６）。
本明細書において、「迅速な応答」とは、生物において、ある刺激を受けてからその刺激に対する応答が即座（例えば、１時間以内、好ましくは３０分以内、より好ましくは１５分以内）に起こる現象をいう。迅速な応答には、遺伝子発現（転写、翻訳および翻訳後修飾を含む）の迅速な活性化が関与する。
本明細書において、「遺伝子」とは、遺伝形質を規定する因子をいう。通常染色体上に一定の順序に配列している。タンパク質の一次構造を規定する構造遺伝子といい、その発現を左右する調節遺伝子という。本明細書では、「遺伝子」は、「ポリヌクレオチド」、「オリゴヌクレオチド」および「核酸」ならびに／あるいは「タンパク質」「ポリペプチド」、「オリゴペプチド」および「ペプチド」をさすことがある。
本明細書において遺伝子、ポリヌクレオチド、ポリペプチドなどの「発現」とは、その遺伝子などがインビボで一定の作用を受けて、別の形態になることをいう。好ましくは、遺伝子、ポリヌクレオチドなどが、転写および翻訳されて、ポリペプチドの形態になることをいうが、転写されてｍＲＮＡが作製されることもまた発現の一態様であり得る。より好ましくは、そのようなポリペプチドの形態は、翻訳後プロセシングを受けたものであり得る。本明細書において、遺伝子の発現の「調節」には、遺伝子発現の増強、減少、誘導、消失、遅延化、早期化などが挙げられるがそれらに限定されない。
本明細書において、「スクリーニング」とは、目的とするある特定の性質をもつ物質または生物などを、特定の操作および／または評価方法で多数の候補から選抜することをいう。スクリーニングは、インビトロ、インビボなど実在物質を用いた系を使用してもよく、インシリコ（コンピュータを用いた系）の系を用いてもよい。本発明では、スクリーニングによって得られた化合物も、本発明の活性のうち少なくともひとつを有する限り、本発明の範囲内に包含されることが理解される。
したがって、本発明では、本発明の開示をもとに、コンピュータモデリングによる薬物が提供されることも企図される。
本発明は、他の実施形態において、本発明の化合物に対する調節活性についての有効性のスクリーニングの道具として、コンピュータによる定量的構造活性相関（ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ＝ＱＳＡＲ）モデル化技術を使用して得られる化合物を包含する。ここで、コンピューター技術は、いくつかのコンピュータによって作成した基質鋳型、ファーマコフォア、ならびに本発明の活性部位の相同モデルの作製などを包含する。一般に、インビトロで得られたデータから、ある物質に対する相互作用物質の通常の特性基をモデル化することに対する方法は、最近ＣＡＴＡＬＹＳＴＴＭ ファーマコフォア法（Ｅｋｉｎｓ ｅｔ ａｌ．、Ｐｈａｒｍａｃｏｇｅｎｅｔｉｃｓ，９：４７７〜４８９，１９９９；Ｅｋｉｎｓ ｅｔ ａｌ．、Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．＆ Ｅｘｐ．Ｔｈｅｒ．，２８８：２１〜２９，１９９９；Ｅｋｉｎｓ ｅｔ ａｌ．、Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．＆ Ｅｘｐ．Ｔｈｅｒ．，２９０：４２９〜４３８，１９９９；Ｅｋｉｎｓ ｅｔ ａｌ．、Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．＆ Ｅｘｐ．Ｔｈｅｒ．，２９１：４２４〜４３３，１９９９）および比較分子電界分析（ｃｏｍｐａｒａｔｉｖｅ ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｆｉｅｌｄ ａｎａｌｙｓｉｓ；ＣｏＭＦＡ）（Ｊｏｎｅｓ ｅｔ ａｌ．、Ｄｒｕｇ Ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ ＆ Ｄｉｓｐｏｓｉｔｉｏｎ，２４：１〜６，１９９６）などを使用して示されている。本発明において、コンピュータモデリングは、分子モデル化ソフトウェア（例えば、ＣＡＴＡＬＹＳＴＴＭバージョン４（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｓｉｍｕｌａｔｉｏｎｓ，Ｉｎｃ．，Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ）など）を使用して行われ得る。
活性部位に対する化合物のフィッティングは、当該分野で公知の種々のコンピュータモデリング技術のいずれかを使用してで行うことができる。視覚による検査および活性部位に対する化合物のマニュアルによる操作は、ＱＵＡＮＴＡ（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｓｉｍｕｌａｔｉｏｎｓ，Ｂｕｒｌｉｎｇｔｏｎ，ＭＡ，１９９２）、ＳＹＢＹＬ（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｍｏｄｅｌｉｎｇ Ｓｏｆｔｗａｒｅ，Ｔｒｉｐｏｓ Ａｓｓｏｃｉａｔｅｓ，Ｉｎｃ．，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ，１９９２）、ＡＭＢＥＲ（Ｗｅｉｎｅｒ ｅｔ ａｌ．、Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，１０６：７６５−７８４，１９８４）、ＣＨＡＲＭＭ（Ｂｒｏｏｋｓ ｅｔ ａｌ．、Ｊ．Ｃｏｍｐ．Ｃｈｅｍ．，４：１８７〜２１７，１９８３）などのようなプログラムを使用して行うことができる。これに加え、ＣＨＡＲＭＭ、ＡＭＢＥＲなどのような標準的な力の場を使用してエネルギーの最小化を行うこともできる。他のさらに特殊化されたコンピュータモデリングは、ＧＲＩＤ（Ｇｏｏｄｆｏｒｄ ｅｔ ａｌ．、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，２８：８４９〜８５７，１９８５）、ＭＣＳＳ（Ｍｉｒａｎｋｅｒ ａｎｄ Ｋａｒｐｌｕｓ，Ｆｕｎｃｔｉｏｎ ａｎｄ Ｇｅｎｅｔｉｃｓ，１１：２９〜３４，１９９１）、ＡＵＴＯＤＯＣＫ（Ｇｏｏｄｓｅｌｌ ａｎｄ Ｏｌｓｅｎ，Ｐｒｏｔｅｉｎｓ：Ｓ ｔｒｕｃｔｕｒｅ，Ｆｕｎｃｔｉｏｎ ａｎｄ Ｇｅｎｅｔｉｃｓ，８：１９５〜２０２，１９９０）、ＤＯＣＫ（Ｋｕｎｔｚ ｅｔ ａｌ．、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，１６１：２６９〜２８８，（１９８２））などを含む。さらなる構造の化合物は、空白の活性部位、既知の低分子化合物における活性部位などに、ＬＵＤＩ（Ｂｏｈｍ，Ｊ．Ｃｏｍｐ．Ａｉｄ．Ｍｏｌｅｃ．Ｄｅｓｉｇｎ，６：６１〜７８，１９９２）、ＬＥＧＥＮＤ（Ｎｉｓｈｉｂａｔａ ａｎｄ Ｉｔａｉ，Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ，４７：８９８５，１９９１）、ＬｅａｐＦｒｏｇ（Ｔｒｉｐｏｓ Ａｓｓｏｃｉａｔｅｓ，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ）などのようなコンピュータープログラムを使用して新規に構築することもできる。このようなモデリングは、当該分野において周知慣用されており、当業者は、本明細書の開示に従って、適宜本発明の範囲に入る化合物を設計することができる。
ＷＩＺＺは、傷（Ｍｏｌ．Ｇｅｎ．Ｇｅｎｅｔ，２０００：２６３．３０−３７）および病原体感染（Ｍｏｌ．Ｇｅｎｅｔ．Ｇｅｎｏｍｉｃ．２００２ ２６７．１５４−１６１）によって極めて速くその転写産物が蓄積する病傷害応答性ＷＲＫＹ転写因子である。あるタイプのＷＲＫＹ型転写因子は、病原体感染により活性化されると、ターゲット遺伝子である感染特異的タンパク質遺伝子の発現を誘導し、その結果として病原体感染に対する防禦応答にかかわることが示されている（Ｇｅｎｅｓ＆Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ２００２，１６，１１３９−１１４９）。このように植物においてＷＲＫＹ型転写因子の活性化が生体内生理反応の引き金になることが実際に証明されている。したがって、本化合物によって、ＷＩＺＺが活性化されると、ターゲットになる下流の防禦関連遺伝子（群）の発現が誘導され、病傷害ストレスに対する抵抗性反応が引き起こされることになる。
（発明を実施するための最良の形態）
本発明は、以下の構造を有する化合物を提供する。
（ＷＡＦ−１＝ＷＩＰＫ ａｃｔｉｖａｔｉｎｇ ｆａｃｔｏｒ）
を有し、式中、
Ｘは、ヒドロキシ、置換されたヒドロキシ、ハロゲン、チオールおよび置換されたチオールからなる群より選択される。好ましくは、Ｘは、ヒドロキシまたは置換されたヒドロキシであり得る。より好ましくはヒドロキシまたはアルキル置換されたヒドロキシであり得る。さらにより好ましくはヒドロキシであり得る。
Ｙ１およびＹ２は、一方は水素またはアルキルであり、他方は、Ｚ−Ｗであり、ここでＺは単結合、またはアルカンもしくは置換されたアルカンから水素が２つ取れた２価基であり、Ｗはヒドロキシ、置換されたヒドロキシ、アルデヒド、カルボキシル基または置換されたカルボキシル基であり得るが、Ｙ１およびＹ２の両方がＺ−Ｗであり、ここでＺは単結合、またはアルカンもしくは置換されたアルカンから水素が２つ取れた２価基であり、Ｗはヒドロキシ、置換されたヒドロキシ、アルデヒド、カルボキシル基または置換されたカルボキシル基であってもよい。好ましくは、Ｙ１およびＹ２は、他方が水素であり、一方がメチロール、置換されたメチロール、Ｃ１アルデヒド、Ｃ１カルボキシル基またはＣ１の置換されたカルボキシル基であり得る。より好ましくは、Ｙ１およびＹ２は、他方が水素であり、一方がメチロール、アルキル置換されたメチロール、Ｃ１アルデヒド、Ｃ１カルボキシル基またはＣ１のアルキル置換されたカルボキシル基であり得る。さらにより好ましくは、Ｙ１およびＹ２は、他方が水素であり、一方がメチロール、メチルまたはエチル置換されたメチロール、Ｃ１アルデヒド、Ｃ１カルボキシル基またはＣ１のメチルまたはエチル置換されたカルボキシル基であり得る。
Ｒ１〜Ｒ２４は、独立して、水素、アルキル、置換されたアルキル、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、シクロアルケニル、置換されたシクロアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、アルコキシ、置換されたアルコキシ、炭素環基、置換された炭素環基、ヘテロ環基、置換されたヘテロ環基、ハロゲン、ヒドロキシ、置換されたヒドロキシ、チオール、置換されたチオール、シアノ、ニトロ、アミノ、置換されたアミノ、カルボキシ、置換されたカルボキシ、アシル、置換されたアシル、チオカルボキシ、置換されたチオカルボキシ、アミド、置換されたアミド、置換されたカルボニル、置換されたチオカルボニル、置換されたスルホニルおよび置換されたスルフィニルからなる群より選択される。好ましくは、Ｒ１〜Ｒ２４は、独立して、水素、アルキルおよび置換されたアルキルからなる群より選択され得る。より好ましくは、独立して、水素およびＣ１〜Ｃ６アルキルからなる群より選択され得る。Ｒ１〜Ｒ２４は、すべてが水素以外の置換基を有していても良いが、好ましくは、少なくとも１つの水素、より好ましくは、２つの水素、３つの水素、４つの水素、５つの水素、６つの水素、７つの水素、８つの水素、９つの水素、１０の水素、１１の水素、１２の水素、１３の水素、１４の水素、１５の水素、１６の水素、１７の水素、１８の水素、１９の水素、２０の水素、２１の水素、２２の水素、２２３の水素を有し得る。Ｒ１〜Ｒ２４の置換基のうち水素の数が多いことが好ましくあり得る。大きな置換基は本発明の効果に障害を有し得るからである。従って、水素以外の置換基としては、好ましくは、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ５アルキル、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ１〜Ｃ３アルキル、Ｃ１〜Ｃ２アルキル、メチルなどであり得る。ただし、本発明の効果を増強し得ることもあることから、大きな置換基を有することもまた好ましくあり得る。さらにより好ましくはＲ１〜Ｒ２４のすべてが水素であり得る。
１つの好ましい実施形態では、本発明は、下記構造式：
（ＷＡＦ−１）
を有する化合物を提供する。この化合物は、ラブダン型ジテルペン化合物であり、（１１Ｅ，１３Ｅ）−ラブダ−１１，１３−ジエン−８α，１５−ジオールである。
本発明の化合物は、当該分野において公知の任意の方法を用いて合成することができる。そのような合成例を以下に記載するが本発明の合成方法はこの方法に限定されない。
１つの局面において、本発明の合成方法は、以下の工程を包含する：
１）
（中間体１）
を有し、式中、
Ｒ５〜Ｒ２４は、独立して、水素、アルキルおよび置換されたアルキルからなる群より選択され、かつ、ＷＡＦにおけるＲ１〜Ｒ２４と同一である、化合物と、アルキルリチウムとを反応させて、（中間体２）を得る工程；
（中間体２）
ここで、中間体１は、無水Ｅｔ２Ｏ（ジエチルエーテル）に溶解され得、上記アルキルリチウムは、メチルリチウムであり得る。アルキルリチウムは、Ｅｔ２Ｏ中に溶解され得る。アルキルリチウムは、窒素気流中氷冷して攪拌しながら滴下することができる。反応後は、酸性（例えば、１０％Ｈ２ＳＯ４）条件下で例えば５分間抽出してＥｔ２Ｏ層に出すことができる。生成物は、シリカゲルカラムクロマトグラフィーで、適切な溶媒（例えばヘキサン−Ｅｔ２Ｏ）で溶出することができる。生成物は、ＮＭＲまたはＭＳなどで物性を測定して適切な構造式を有していることを確認し得る。
２）１）で得られた生成物と、ｍ−クロロ過安息香酸とを混合して反応させた後１０％水酸化カリウムのメタノール溶液と反応させて、（中間体４）を得る工程；
（中間体４）
ここで、中間体４になる前に、アセチル中間体を経由し得る。ここで、上記混合は、窒素気流中氷冷攪拌下で行うことができる。残渣は、アルカリ（例えば、１０％ＫＯＨ）のメタノール溶液に溶解することができる。反応混合物は、Ｅｔ２Ｏ抽出することができる。この抽出物は、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液、水、飽和食塩水で洗浄することができる。また必要に応じて、Ｎａ２ＳＯ４で観想させることができる。残渣は、フラッシュクロマトグラフィーでヘキサン−ＡｃＯＥｔ（３：１）で溶出され得る。
３）２）で得られた生成物と、Ｎ−メチルモルホリンＮ−オキシドと反応させて（中間体５）を得る工程、
（中間体５）
を得る工程、
ここで、Ｎ−メチルモルホリンＮ−オキシドは４Åモレキュラーシーブを無水ＣＨ２Ｃｌ２に懸濁することができる。これらの反応は、窒素気流中氷冷攪拌下で行うことができる。これに、過ルテニウム酸テトラプロピルアンモニウムを加え反応させ得る。この反応混合物にＥｔ２Ｏを加えて攪拌し、シリカゲルで濾過することができる。濾液は、濃縮し、フラッシュクロマトグラフィーにかけることができ、生成物がヘキサン−Ｅｔ２Ｏ溶出部に溶出され得る；
（４）工程（３）で得られた該中間体５に、
Ｖ１およびＶ２は、一方が水素またはアルキルであり、他方がＺ−Ｖであり、ここで、（ＣＨ２）ｎ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−であり、Ｖはアルキルであり、ｎは０以上の整数であり、Ｒはアルキルである（ここで、Ｒは、好ましくは、低級アルキルであり、より好ましくはメチルであり得る）、化合物を有機溶媒中でＮａＮＨ２存在下で加えて
中間体（６）
を得る工程、
ここで、ＮａＮＨ２は無水ＴＨＦに懸濁し、窒素気流中氷冷攪拌で化２８の化合物を加えることができる。この反応混合物は−７８℃に冷却し得、その後上記中間体５を滴下することができる。生成物はＥｔ２Ｏで抽出することができる。生成物は、Ｎａ２ＳＯ４で適宜乾燥することができる。これをフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン−ＡｃＯＥｔ）で単離し得る。光学異性体は、さらに、高速液体クロマトグラフィーで溶媒としてヘキサン−ＡｃＯＥｔなどを使用して溶出することができる；
（５）工程（４）で得られた中間体（６）を有機溶媒中でジイソブチルアルミニウムヒドリドを加えて、
であって、ここで、Ｘは、ヒドロキシ、置換されたヒドロキシ、ハロゲン、チオールおよび置換されたチオールからなる群より選択され、
Ｕ１およびＵ２は、一方は水素またはアルキルであり、他方は、Ｚ−Ｕであり、ここでＺは単結合、またはアルカンもしくは置換されたアルカンから水素が２つ取れた２価基であり、Ｕはヒドロキシであり、
Ｒ１〜Ｒ２４は、独立して、水素、アルキルおよび置換されたアルキルからなる群より選択される、
を得る工程、
ここで、ジイソブチルアルミニウムヒドリドは、ＣＨ２Ｃｌ２に溶解させることができ（好ましくは窒素気流中）、その後室温に戻すことができる。ＡｃＯＥｔ、ＣＨ２Ｃｌ２、酒石酸カリウムナトリウムなどを加え、ＡｃＯＥｔで生成物を抽出することができる。これらは適宜乾燥することができる。これはフラッシュクロマトグラフィーでヘキサン−ＡｃＯＥｔ（１：１）で溶出され得る；および
Ｙ１がヒドロキシ以外の場合、必要に応じて、さらなる酸化または置換工程を包含する。
上記合成方法において、Ｙ１がヒドロキシ以外の場合、以下の方法により置換基が変換され得る。
ヒドロキシからアルデヒドへの変換：［ＭｎＯ２，ペンタン，２５℃］：Ｎ．Ｌ．Ｗｅｎｄｌｅｒｅｔａｌ．，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，Ｖｏｌ．７３，７１９（１９５１）；［ＣｒＯ３，ピリジン，２５℃］：Ｊ．Ｒ．Ｈｏｌｕｍ，Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，Ｖｏｌ．２６，４８１４（１９６１）。
ヒドロキシから置換メチロールへの変換：［ＮａＨ，ＭｅＩ，ＴＨＦ，２５。Ｃ］：Ｃ．Ａ．Ｂｒｏｗｎｅｔａｌ．，Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，１９７４，４３４。
ヒドロキシからカルボキシル基への変換：［ＮｉＯ２，１Ｎ ＮａＯＨ水溶液，５０℃］：Ｋ．Ｎａｋａｇａｗａｅｔａｌ．，Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，Ｖｏｌ．２７，１５９７（１９６２）。。
上記工程１）における原料物質の例としては、構造式：
を有する化合物（スクラレオリド（ｓｃｌａｒｅｏｌｉｄｅ））が挙げられる。スクラレオリドは市販されているか、または以下のようにして合成することができる。
従って、
（中間体１）
は、上記スクラレオリドの合成例を参酌して、当業者であれば容易に合成することができる。
上記代表例を出発物質にした場合の反応スキームを以下に示す。
（薬学的組成物・農薬組成物）
他の局面において、本発明は、本発明の化合物を含む組成物を提供する。そのような組成物は、薬学的組成物または農学的（農薬）組成物であり得る。
本発明の因子または化合物が農薬組成物または薬学的組成物として処方される場合、そのような組成物には、農学的または薬学的に受容可能なキャリアが含有され得る。そのようなキャリアとしては、当該分野において公知の任意の物質が挙げられる。
そのような適切な農学的または薬学的に受容可能な因子としては、以下が挙げられるがそれらに限定されない：抗酸化剤、保存剤、着色料、風味料、および希釈剤、乳化剤、懸濁化剤、溶媒、フィラー、増量剤、緩衝剤、送達ビヒクル、希釈剤、賦形剤および／または農学的もしくは薬学的アジュバント。代表的には、本発明の農薬組成物または薬学的組成物は、本発明のラブダン型ジテルペノイド化合物を、１つ以上の生理的に受容可能なキャリア、賦形剤または希釈剤とともに組成物の形態で投与され得る。薬学的組成物の場合、例えば、適切なビヒクルは、注射用水、生理的溶液、または人工脳脊髄液であり得、これらには、非経口送達のための組成物に一般的な他の物質を補充することが可能である。農薬組成物の場合は、農薬投与に適切な水などであり得る。
例示の適切なキャリアとしては、中性緩衝化生理食塩水、または血清アルブミンと混合された生理食塩水が挙げられる。好ましくは、その生成物は、適切な賦形剤（例えば、スクロース）を用いて凍結乾燥剤として処方される。他の標準的なキャリア、希釈剤および賦形剤は所望に応じて含まれ得る。他の例示的な組成物は、ｐＨ７．０−８．５のＴｒｉｓ緩衝剤またはｐＨ４．０−５．５の酢酸緩衝剤を含み、これらは、さらに、ソルビトールまたはその適切な代替物を含み得る。その溶液のｐＨはまた、種々のｐＨにおいて、本発明の因子の相対的溶解度に基づいて選択されるべきである。
組成物における溶媒は、水性または非水性のいずれかの性質を有し得る。さらに、そのビヒクルは、処方物の、ｐＨ、容量オスモル濃度、粘性、明澄性、色、滅菌性、安定性、等張性、崩壊速度、または臭いを改変または維持するための他の処方物材料を含み得る。同様に、本発明の組成物は、有効成分の放出速度を改変または維持するため、または有効成分の吸収もしくは透過を促進するための他の処方物材料を含み得る。
本発明は、薬学的組成物として処方される場合、非経口的に投与され得る。あるいは、その組成物は、静脈内または皮下で投与され得る。全身投与されるとき、本発明における使用のための治療組成物は、発熱物質を含まない、経口的に受容可能な水溶液の形態であり得る。そのような薬学的に受容可能なタンパク質溶液の調製は、ｐＨ、等張性、安定性などに相当な注意を払うことを条件として、当業者の技術範囲内である。
本発明は、薬学的組成物として処方される場合、必要に応じて生理学的に受容可能なキャリア、賦型剤または安定化剤（日本薬局方、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，１８ｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ａ．Ｒ．Ｇｅｎｎａｒｏ，ｅｄ．，Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏｍｐａｎｙ，１９９０などを参照）と、所望の程度の純度を有する選択された組成物とを混合することによって、凍結乾燥されたケーキまたは水溶液の形態で、保存のために調製され得る。
本発明の組成物は、農薬組成物として処方される場合、必要に応じて、農学的に受容可能なキャリア、賦型剤または安定化剤などを含み得る。
受容可能なキャリア、賦形剤または安定化剤は、レシピエントに対して非毒性であり、そして好ましくは、使用される投薬量および濃度において不活性であり、そして以下が挙げられる：リン酸塩、クエン酸塩、または他の有機酸；抗酸化剤（例えば、アスコルビン酸）；低分子量ポリペプチド；タンパク質（例えば、血清アルブミン、ゼラチンまたは免疫グロブリン）；親水性ポリマー（例えば、ポリビニルピロリドン）；アミノ酸（例えば、グリシン、グルタミン、アスパラギン、アルギニンまたはリジン）；モノサッカリド、ジサッカリドおよび他の炭水化物（グルコース、マンノース、またはデキストリンを含む）；キレート剤（例えば、ＥＤＴＡ）；糖アルコール（例えば、マンニトールまたはソルビトール）；塩形成対イオン（例えば、ナトリウム）；ならびに／あるいは非イオン性表面活性化剤（例えば、Ｔｗｅｅｎ、プルロニック（ｐｌｕｒｏｎｉｃ）またはポリエチレングリコール（ＰＥＧ））。
本発明の組成物が、農薬として使用される場合は、以下のような農薬活性成分もまた同時に含有され得る：
（除草剤）ピラゾレート、ダイムロン、ブロモブチド、メフェナセット、ＭＣＰ、ＭＣＰＢ、トリクロピル、ナプロアニリド、ＣＮＰ、クロメトキシニル、ビフェノックス、ＭＣＣ、ピリブチカルブ、ＤＣＰＡ、ナプロパミド、ジフェナミド、ピロピザミド、アシュラム、ＤＣＭＵ、リニュロン、メチルダイムロン、テブチウロン、ベンスルフロンメチル、シマジン、アトラジン、シメトリン、アメトリン、プロメトリン、ジメタメトリン、メトリブジン、ベンタゾン、オキサジアゾン、ピラゾレート、ベンゾフェナップ、グリホサート、ビアラホス、アロキシジム、イマゾスルフロン、アジムスルフロン、ピラゾスルフロンエチル、シノスルフロン。
（殺虫・殺ダニ剤）ダイアジノン、フェンチオン、イソキサチオン、ピリダフェンチオン、フェニトロチオン、ジメトエート、ＰＭＰ、ジメチルビンホス、アセフェート、ＤＥＰ、ＮＡＣ、ＭＴＭＣ、ＭＩＰＣ、ＰＨＣ、ＭＰＭＣ、ＸＭＣ、ＢＰＭＣ、ベンダイオカルブ、ピリミカルブ、メソミル、オキサミル、チオジカルブ、シペルメトリン、カルタップ塩酸塩、チオシクラム、ベンスルタップ、ピリプロキシフェン、フェノキシカルブ、メトプレン、ジフルベンズロン、テフルベンズロン、クロルフルアズロン、ブプロフェジン、ヘキシチアゾクス、ピリダベン、クロフェンテジン、ニテンピラム。
（殺菌剤）プロベナゾール、イソプロチオラン、ピロキロン、フルトラニル、メトミノストロビン、ジラム、チウラム、キャプタン、ＴＰＮ、フサライド、トルクロホスメチル、ホセチル、チオファネートメチル、ベノミル、カルベンタゾール、チアベンタゾール、ジエトフェンカルブ、イプロジオン、ビンクロゾリン、プロシミドン、フルオルイミド、オキシカルボキシン、メプロニル、フルトラニル、ペンシクロン、メタラキシル、オキサジキシル、トリアジメホン、ヘキサコナゾール、トリホリン、ブラストサイジンＳ、カスガマイシン、ポリオキシン、バリダマイシンＡ、ミルディオマイシン、ＰＣＮＢ、ヒドロキシイソキサゾール、ダゾメット、ジメチリモール、ジクロメジン、トリアジン、フェリムゾン、トリシクラゾール、オキソリニックなどが例示されるが、好ましくはメトミノストロビンなどのストロビルリン系化合物である。
本発明の農薬組成物には、例えば、殺ダニ剤（例、クロルベンジレートなど）、植物生長調整剤（例、パクロブトラゾールなど）、殺線虫剤（例、ベノミルなど）、共力剤（例、ピペロニルブトキサイドなど）、誘引剤（例、オイゲノールなど）、忌避剤（例、クレオソートなど）、色素（例、食用青色１号など）、肥料（例、尿素など）などもまた必要に応じて混合され得る。
本発明の組成物が薬学的組成物として用いられる場合は、さらなる医薬成分として、例えば、以下が挙げられるがそれらに限定されない成分がその薬学的組成物に含有され得る：
中枢神経系用薬（例えば、全身麻酔剤、催眠鎮静剤、抗不安剤、抗てんかん剤、解熱鎮痛消炎剤、興奮剤、覚せい剤、抗パーキンソン剤、精神神経用剤、総合感冒剤、その他の中枢神経系用薬など）；
末梢神経用剤（例えば、局所麻酔剤、骨格筋弛緩剤、自律神経剤、鎮けい剤など）；
感覚器官用薬（例えば、眼科用剤、耳鼻科用剤、鎮暈剤など）；
循環器官用薬（例えば、、強心剤、不整脈用剤、利尿剤、血圧降下剤、血管収縮剤、血管拡張剤、高脂血症用剤、その他の循環器官用薬など）；
呼吸器官用薬（例えば、呼吸促進剤、鎮咳剤、去痰剤、鎮咳去痰剤、気管支拡張剤、含嗽剤など）；
消化器官用薬（例えば、止瀉剤、整腸剤、消化性潰瘍用剤、健胃消化剤、制酸剤、下剤、浣腸剤、利胆剤、その他の消化器官用薬など）；
ホルモン剤（例えば、脳下垂体ホルモン剤、唾液腺ホルモン剤、甲状腺、副甲状腺ホルモン剤、蛋白同化ステロイド剤、副腎ホルモン剤、男性ホルモン剤、卵胞、．黄体ホルモン剤、混合ホルモン剤、その他のホルモン剤など）；
泌尿生殖器官および肛門用薬（例えば、泌尿器官用剤、生殖器官用剤、子宮収縮剤、痔疾用剤、他の泌尿生殖器管、肛門用薬など）；
外皮用薬（例えば、外皮用殺菌消毒剤、創傷保護剤、化膿性疾患用剤、鎮痛．鎮痒．収斂．消炎剤、寄生性皮膚疾患用剤、皮膚軟化剤、毛髪用剤、その他の外皮用剤など）；
歯科口腔用剤；
その他の個々の器官系用薬；
ビタミン剤（例えば、ビタミンＡ剤、ビタミンＤ剤、ビタミンＢ剤、ビタミンＢ剤、ビタミンＣ剤、ビタミンＥ剤、ビタミンＫ剤、混合ビタミン剤、その他のビタミン剤など）；
滋養強壮薬（例えば、カルシウム剤、無機質製剤、糖類剤、蛋白アミノ酸製剤臓器製剤、乳幼児用剤、その他の滋養強壮剤など）；
血液および体液用薬（例えば、血液代用剤、止血剤、血液凝固阻止剤、その他の血液．体液用剤など）；
人工透析用薬（例えば、人工腎臓透析用剤、腹膜透析用剤など）；
その他の代謝性医薬品（例えば、臓疾患用剤、解毒剤、習慣性中毒用剤、痛風治療剤、酵素製剤、糖尿病用剤、他に分類されない代謝性薬など）；
細胞賦活用剤（例えば、クロロフィル製剤、色素製剤、その他の細胞賦活用剤など）；
腫瘍用薬（例えば、アルキル化剤、代謝拮抗剤、抗腫瘍性抗生物質製剤、抗腫瘍性植物成分製剤、その他の腫瘍用剤など）；
放射性医薬品；
アレルギー用薬（例えば、抗ヒスタミン剤、刺激療法剤、非特異性免疫原製剤、その他のアレルギー用薬、生薬および漢方処方に基づく医薬品、生薬、漢方製剤、その他の生薬漢方処方に基づく製剤など）；
抗生物質製剤（例えば、グラム陽性菌に作用する、グラム陰性菌に作用する、グラム陽、．陰性菌に作用、グラム陽性菌マイコプラズマ作用、グラム陽性陰性．リケッチアに作用、抗酸菌に作用するもの、カビに作用するもの、その他の抗生物質製剤など）；
化学療法剤（例えば、サルファ剤、抗結核剤、合成抗菌剤、抗ウィルス剤、その他の化学療法剤など）；
生物学的製剤（例えば、ワクチン類、毒素．トキソイド類、抗毒素．抗レプトスピラ血清、血液製剤類、生物学的試験用製剤類、その他の生物学的製剤、抗原虫剤、駆虫剤など）；
調剤用薬（例えば、賦形剤、軟膏基剤、溶解剤、矯味．矯臭．着色剤、その他の調剤用剤など）；
診断用薬（例えば、Ｘ腺造影剤、機能検査用試薬、その他の診断用薬）；
公衆衛生用薬（例えば、防腐剤）；
体外診断用医薬品（例えば、細菌学的検査用薬など）；
分類されない治療を主目的としない薬剤；ならびに
麻薬（例えば、あへんアルカロイド系麻薬、コカアルカロイド系製剤、合成麻薬など）。
以下に本発明の好ましい局面である植物について詳細な説明がなされるが、本発明は、動物のような他の生物においても適用されることが理解される。
１つの実施形態において、本発明の組成物は、植物にストレス耐性を付与または増強するために提供される。好ましくは、このストレス耐性は、傷害抵抗性、虫害抵抗性、病害抵抗性および過敏感細胞死に対する抵抗性からなる群より選択される少なくとも１つの抵抗性を包含する。
ある実施形態において、本発明で生物に対してなされるストレス耐性の付与または増強は、傷誘導性プロテインキナーゼおよびサリチル酸誘導プロテインキナーゼからなる群より選択される少なくとも１つのタンパク質の活性を制御することにより達成され得る。傷誘導性プロテインキナーゼおよびサリチル酸誘導プロテインキナーゼは、当該分野において公知である。
別の実施形態において、本発明で生物に対してなされるストレス耐性の付与または増強は、ジャスモン酸シグナル伝達系およびサリチル酸シグナル伝達系からなる群より選択される少なくとも１つのシグナル伝達系を制御することにより達成され得る。ジャスモン酸シグナル伝達系は、細胞工学別冊、植物細胞工学シリーズ１０、植物ホルモンのシグナル伝達−生合成から生理機能へ−（監修 福田裕豊ら）、第６章（ジャスモン酸の生理機能、生合成、情報伝達、１９０〜１９８頁）などに、サリチル酸シグナル伝達系は、Ｔｈｅ Ｐｌａｎｔ Ｃｅｌｌ，Ｖｏｌ．１３，１８７７−１８８９，２００１などに概説されている。
別の局面において、本発明は、植物のような生物にストレス耐性を付与または増強するための方法を提供する。この方法は以下の工程：
１）本発明の化合物または組成物を上記該植物に提供する工程、を包含する。好ましい実施形態では、上記化合物は、本明細書において上記に説明される好ましい置換基を有する化合物であり得る。上記化合物は、本明細書の好ましい実施形態において、組成物の形態（例えば、農学的組成物）を採り得る。
１つの好ましい実施形態では、上記ストレス耐性は、傷害抵抗性、虫害抵抗性、病害抵抗性および過敏感細胞死に対する抵抗性からなる群より選択される少なくとも１つの抵抗性であり得る。
別の好ましい実施形態では、上記ストレス耐性の付与または増強は、傷誘導性プロテインキナーゼおよびサリチル酸誘導プロテインキナーゼからなる群より選択される少なくとも１つのタンパク質の活性を制御することにより達成され得る。
別の好ましい実施形態では、上記ストレス耐性の付与または増強は、ジャスモン酸シグナル伝達系およびサリチル酸シグナル伝達系からなる群より選択される少なくとも１つのシグナル伝達系を制御することにより達成され得る。
別の局面において、本発明は、ストレス耐性植物を生産するための方法を提供する。この方法は：
１）本発明の化合物または組成物を上記植物に提供する工程、を包含する。好ましい実施形態では、上記化合物は、本明細書において上記に説明される好ましい置換基を有する化合物であり得る。上記化合物は、本明細書の好ましい実施形態において、生理学的に受容可能な組成物の形態（例えば、農学的組成物）を採り得る。本発明はまた、このような方法で得られた植物にも関する。そのような植物は当該分野において周知の技術により得ることができる。例えば、そのような植物は、本発明の組成物をある植物にスプレーなどで付与することにより得ることができる。
別の局面において、本発明は、ストレス耐性の植物組織を生産するための方法を提供する。この方法は：
１）本発明の化合物または組成物を上記植物組織に提供する工程、を包含する。好ましい実施形態では、上記化合物は、本明細書において上記に説明される好ましい置換基を有する化合物であり得る。上記化合物は、本明細書の好ましい実施形態において、生理学的に受容可能な組成物の形態（例えば、農学的組成物）を採り得る。本発明はまた、そのような方法により得られた植物組織に関する。そのような植物組織を得る方法は当該分野において周知である。例えば、そのような植物組織は、カルス、茎、葉、花、種子などの植物器官の組織であり得、その場合、植物組織を単離し、単離された植物組織に対して本発明の化合物または組成物を塗布などにより付与することにより作製することができる。
別の局面において、本発明は、ストレス耐性の植物細胞を生産するための方法を提供する。この方法は：
１）本発明の化合物または組成物を該植物細胞に提供する工程、を包含する。好ましい実施形態では、上記化合物は、本明細書において上記に説明される好ましい置換基を有する化合物であり得る。上記化合物は、本明細書の好ましい実施形態において、生理学的に受容可能な組成物の形態（例えば、農学的組成物）を採り得る。本発明はまた、そのような方法によって得られた植物細胞にも関する。
別の局面において、本発明は、ストレス耐性植物の種子を生産するための方法を提供する。この方法は：
１）本発明の化合物または組成物を上記植物に提供する工程；および上記植物から種子を得る工程、を包含する。好ましい実施形態では、上記化合物は、本明細書において上記に説明される好ましい置換基を有する化合物であり得る。上記化合物は、本明細書の好ましい実施形態において、生理学的に受容可能な組成物の形態（例えば、農学的組成物）を採り得る。本発明はまた、そのような方法により得られた種子に関する。種子を得る方法は当該分野において周知であり、例えば、顕花植物であれば、当該分野において周知の任意の技術を用いて受精させることにより種子を得ることができる。
別の局面において、本発明は、本発明の化合物を定量する方法を提供する。この方法は、１）サンプルを提供する工程；２）定量されるべき化合物の立体異性体の既知量をこのサンプルに添加する工程；３）このサンプルを逆相カラムクロマトグラフィーで分離する工程；および４）分離された該立体異性体から該化合物の量を算出する工程、を包含する。好ましい実施形態において、上記定量されるべき化合物は、下記構造式：
（ＷＡＦ−１）
を有し、
前記立体異性体は、下記構造式：
（ラブダンａ）
を有する。
好ましくは、上記サンプルは、前記逆相カラムクロマトグラフィーでの分離の前に、メタノール抽出され、続いて酢酸エチル抽出される。メタノール抽出によって、本発明の化合物の酵素反応による代謝・分解の抑制が期待され、酢酸エチルによって、抽出効率の上昇が期待されることから、本発明の測定されるべき化合物の測定に好都合だからである。これら複数の溶媒の各々の比率は、サンプルの状態によって変動し得る。したがって、メタノール抽出は、エタノールなど他の低級アルコール（好ましくは、Ｃ１からＣ６）での抽出であり得る。好ましくは、メタノール抽出は、メタノール：水＝８０％：２０％（ｖ／ｖ）を用いた抽出であり得るが、他の比率のものも用いることができる。好ましくは、酢酸エチル抽出は、約１００％の酢酸エチルを用いた抽出であり得るが、他の溶媒（例えば、クロロホルム）を含むものも用いることができる。
好ましくは、上記逆相カラムクロマトグラフィーによる分離は、Ｃ１８逆相カラムクロマトグラフィーによる分離を包含し、該分離は、８０％：２０％（ｖ／ｖ）メタノール：水での第一の分離、および９：８（ｖ／ｖ）アセトニトリル：水での分離を包含する。これら複数の溶媒の各々の比率は、サンプルの状態および測定対象の化合物の種類によって変動し得る。したがって、水／２−プロパノール、水／エタノールのような溶媒系も用いることができる。
好ましくは、上記算出は、回収率による損失に対する補正を包含する。回収率における損失は、例えば、実際の測定値をＹ、回収率１００％における量をＸ，実際の回収率をＺ％とする場合、Ｘ＝Ｙ・１００／Ｚで求めることができる。
別の局面において、本発明は、ＷＲＫＹファミリーに属する遺伝子の蓄積を必要とする状態にある植物に、該ＷＲＫＹファミリーに属する遺伝子の迅速な蓄積を誘導させるための組成物を提供する。この組成物は、本発明の化合物、を含む。この組成物はさらに、農学的に受容可能な物質（例えば、賦形剤など）を含むことができる。この組成物はまた、他の農学的に活性な薬剤を含んでいてもよい。
好ましい実施形態において、上記化合物は、下記構造式：
（ＷＡＦ−１）
を有する。
好ましい実施形態では、上記ＷＲＫＹファミリーに属する遺伝子の蓄積を必要とする状態は、ストレスに対する迅速応答を必要とする状態であり得る。
好ましくは、上記ＷＲＫＹファミリーに属する遺伝子の迅速な（例えば、３０分以内、より好ましくは１５分以内の）蓄積を誘導させることにより、傷害抵抗性、虫害抵抗性、病害抵抗性および過敏感細胞死に対する抵抗性が前記植物に付与され得る。
好ましくは、上記ＷＲＫＹファミリーに属する遺伝子は、ＷＩＺＺまたはＴＩＺＺであり得る。
別の局面において、本発明は、ＷＲＫＹファミリーに属する遺伝子の発現を調節するための組成物を提供する。この組成物は、本発明に記載の化合物を含有する。この組成物はさらに、農学的に受容可能な物質（例えば、賦形剤など）を含むことができる。この組成物はまた、他の農学的に活性な薬剤を含んでいてもよい。
他の局面において、本発明は、ＷＲＫＹファミリーに属する遺伝子の蓄積を必要とする状態にある植物に、そのＷＲＫＹファミリーに属する遺伝子の迅速な蓄積を誘導させる方法を提供する。この方法は、１）上記植物に本発明の化合物を提供する工程、を包含する。
好ましくは、上記化合物は、下記構造式：
（ＷＡＦ−１）
を有する。
好ましい実施形態において、上記ＷＲＫＹファミリーに属する遺伝子の蓄積を必要とする状態は、ストレスに対する迅速な（例えば、３０分以内、より好ましくは１５分以内の）応答を必要とする状態であり得る。
好ましい実施形態において、上記ＷＲＫＹファミリーに属する遺伝子の迅速な蓄積を誘導させることにより、傷害抵抗性、虫害抵抗性、病害抵抗性および過敏感細胞死に対する抵抗性が上記植物に付与され得る。
上記方法において、好ましくは、ＷＲＫＹファミリーに属する遺伝子は、ＷＩＺＺまたはＴＩＺＺであり得る。好ましい遺伝子は、処置される植物種によって変動し得る。
好ましくは、本発明の化合物は、ＷＲＫＹファミリーに属する遺伝子の蓄積が必要な状態になった直後に前記植物に付与される。付与の方法は、種々の方法が考えられ、例えば、直接噴霧などが挙げられる。
別の局面において、本発明は、ＷＲＫＹファミリーに属する遺伝子の発現を調節するための組成物を提供する。この組成物は、本発明の化合物を含有する。この組成物はさらに、農学的に受容可能な物質（例えば、賦形剤など）を含むことができる。この組成物はまた、他の農学的に活性な薬剤を含んでいてもよい。
さらに別の局面において、本発明は、植物の伸長成長または肥大成長を促進するための組成物を提供する。
なお別の局面において、本発明は、植物の伸長成長を阻害するための組成物を提供する。
さらなる局面において、本発明は、植物組織の成熟を促進するための組成物を提供する。
なおさらなる局面において、本発明は、植物の開花を調節するための組成物を提供する。
好ましい実施形態において、これらの組成物は、本発明の化合物を含有する。この組成物はさらに、農学的に受容可能な物質（例えば、賦形剤など）を含むことができる。この組成物はまた、他の農学的に活性な薬剤を含んでいてもよい。
好ましくは、本発明の化合物は、ＡＣＯ遺伝子の迅速な蓄積、ひいてはエチレンの迅速な蓄積を誘導することにより、植物組織の伸長成長または肥大成長の促進、伸長成長の阻害、植物組織の成熟、植物の開花の調節が上記植物に付与され得る。付与の方法は、種々の方法が考えられ、直接噴霧、散布などが挙げられる。
他の局面において、本発明は、植物の伸長成長または肥大成長を促進するための方法を提供する。この方法は、１）上記植物に本発明の化合物を提供する工程、を包含する。
別の局面において、本発明は、植物の伸長成長を阻害するための方法を提供する。この方法は、１）上記植物に本発明の化合物を提供する工程、を包含する。
なお別の局面において、本発明は、植物組織の成熟を促進するための方法を提供する。この方法は、１）上記植物に本発明の化合物を提供する工程、を包含する。
さらに別の局面において、本発明は、植物の開花を調節するための方法を提供する。この方法は、１）上記植物に本発明の化合物を提供する工程、を包含する。
好ましい実施形態では、上記化合物は、本明細書において上記に説明される好ましい置換基を有する化合物であり得る。上記化合物は、本明細書の好ましい実施形態において、生理学的に受容可能な組成物の形態（例えば、農学的組成物）を採り得る。本発明はまた、このような方法で得られた植物にも関する。そのような植物は当該分野において周知の技術により得ることができる。例えば、そのような植物は、本発明の組成物をある植物にスプレーなどで付与することにより得ることができる。
１つの局面において、本発明は、植物体、植物器官もしくは植物組織、または植物細胞の成長（増殖）、分化または再生を調節するための培地を提供する。この培地は、本発明の化合物を含有する。この培地はさらに、他の通常の細胞培養、植物組織培養などにおいて用いられる成分を含むことができる。この培地はまた、農学的に受容可能な物質（例えば、賦形剤など）を含んでいてもよい。
以下に、実施例に基づいて本発明を説明するが、以下の実施例は、例示の目的のみに提供される。従って、本発明の範囲は、実施例のみに限定されるものではなく、請求の範囲によってのみ限定される。
実施例
（実施例１：タバコにおけるＷＩＰＫ活性化因子の単離および精製）
（植物材料）
タバコモザイクウイルス（ＴＭＶ）に感染したタバコ葉を本実施例では材料として用いてＷＩＰＫ活性化因子の単離を行った。ＷＩＰＫがＴＭＶ感染したタバコ葉において劇的に活性化されることが知られていたからである。
二ヶ月齢のタバコ（Ｎｉｃｏｔｉａｎａ ｔａｂａｃｕｍ ｃｖ．Ｓａｍｓｕｎ ＮＮ）植物体の上位健全葉を切り取り、その表皮に炭化珪素粉末（商品名カーボランダム、Ｋｉｓｈｉｄａ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｃｏ．、Ｏｓａｋａ，Ｊａｐａｎ）を塗布し、その上から１０μｇ／ｍｌ ＴＭＶを含む１０ｍＭリン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ７．０）を擦り付けることによってＴＭＶを接種した。感染を成立させるために室温でこの健全葉を３０分間静置後、水道水でカーボランダムを洗い除き、風乾後、湿った濾紙を敷いた透明プラスチック箱に入れ、３０℃で４０時間培養し、その後２０℃で６時間培養した。
培養中の光条件は、白色蛍光灯（約６０００ルクス）の連続照射であった。培養後の接種葉は、液体窒素で凍結させ、直ちに精製の材料として使用した。
（ＷＩＰＫ活性化因子の精製）
植物材料を粉砕器（商品名Ｐｏｌｙｔｒｏｎ，Ｋｉｎｅｍａｔｉｃａ，Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）に入れ、４倍量（すなわち、１ｇの材料に対して４ｍｌ）の冷８０％（ｖ／ｖ）アセトンとともに、細かくなるまで磨砕し、磨砕液を４℃で２時間静置することにより抽出した。抽出液を濾紙（Ｔｏｙｏ Ｒｏｓｈｉ Ｋａｉｓｈａ，Ｌｔｄ．Ｊａｐａｎ）を通して濾過した。濾過後の残渣を少量の８０％（ｖ／ｖ）アセトンで洗い、先の濾液と併せて減圧下で３５℃にて水相になるまで濃縮した。得られた水相を塩酸でｐＨ３．０に調整し、等量の酢酸エチルで３回抽出した。得られた酢酸エチル相を等量の５％（ｗ／ｖ）重炭酸ナトリウムで２回抽出した後に、上層の酢酸エチル相を無水硫酸ナトリウムで脱水し、減圧下で３５℃にて乾固するまで濃縮した。
乾固物を少量の１０％（ｖ／ｖ）酢酸エチルを含むヘキサンに溶解し、溶解物をシリカゲル（Ｗａｋｏｇｅｌ Ｃ−２００、Ｗａｋｏ Ｐｕｒｅ Ｃｈｅｍｉｃａｌ，Ｏｓａｋａ，Ｊａｐａｎ）を充填したカラム（３ｃｍ内径、長さ５０ｃｍ）に添加した。溶媒系は酢酸エチル／ヘキサンの混合液を使用し、最初にヘキサン・酢酸エチル混合液中の酢酸エチル濃度が１０％（ｖ／ｖ）の混合液を流し、次に酢酸エチル濃度が２０％（ｖ／ｖ）を流し、以降酢酸エチル濃度を１０％ずつ段階的に上昇させた。１回につき９００ｍｌの混合液を流した。得られた各々の溶出画分を減圧下で３５℃にて乾固するまで濃縮し、各々の乾固物を１０ｍｌの酢酸エチルに溶解させ、そのうちの一部（３μｌ、３０μｌ、１００μｌ、および３００μｌ）をＷＩＰＫの誘導活性アッセイに供した。
ＷＩＰＫ誘導活性アッセイは、以下のように行った。内径３ｃｍのガラス製ペトリ皿に濾紙を敷き、その上にアッセイに供する試験液を添加し窒素ガス流下で有機溶媒を留去した後、１ｍｌの１０ｍＭ Ｍｅｓ−ＮａＯＨ（ｐＨ５．６）を加え、その上からタバコ葉から打ち抜いたリーフディスク（直径９ｍｍ）を一枚のペトリ皿あたり３枚載せ、２４℃で培養した。２時間後、ディスクを回収し、直ちに液体窒素で凍結し、ＷＩＰＫ活性測定に用いた。ＷＩＰＫの活性測定は、Ｓｅｏ ｅｔ ａｌ．（１９９９）Ｐｌａｎｔ Ｃｅｌｌ １１，２８９−２９１に従って行った。簡潔には、以下のとおりである。
５０μｇの粗タンパク質と抗ＷＩＰＫ抗体とを反応させ、得られた免疫複合体中のＷＩＰＫのミエリン塩基性タンパク質リン酸化活性を測定した。
ヘキサン中の酢酸エチル濃度が６０％（ｖ／ｖ）から８０％（ｖ／ｖ）の画分にＷＩＰＫ活性が検出されたことから、これらの画分を併せ、減圧下で３５℃にて乾固するまで濃縮した。得られた乾固物を少量の１０％（ｖ／ｖ）メタノールを含む水に溶解し、溶解物を逆相型の固相抽出カラムカートリッジ（Ｃ１８ Ｓｅｐ−Ｐａｋ、Ｗａｔｅｒｓ，ＵＳＡ）に添加した。溶媒系はメタノール／水の混合液を使用し、最初に水中のメタノール溶液が１０％（ｖ／ｖ）の混合液を流し、次いで、メタノールが２０％の溶液を流し、以降、メタノール濃度を１０％（ｖ／ｖ）ずつ段階的に上昇させて溶出した。１回につき、１０ｍｌの混合液を流した。得られた各々の溶出画分を減圧下で３５℃にて乾固するまで濃縮し、各々の乾固物を１０ｍｌのメタノールに溶解させ、そのうちの一部（３μｌ、３０μｌ、１００μｌおよび３００μｌ）をＷＩＰＫ誘導活性アッセイに供した。アッセイ手順は上記のとおりであった。
水・メタノールの混合液中のメタノール濃度が８０％（ｖ／ｖ）画分に活性が検出されたことから、この画分を減圧下で３５℃にて乾固するまで濃縮した。得られた乾固物を少量の移動相（メタノール：水＝４：１、ｖ／ｖ）に溶解し、溶解物を逆相高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）カラム（ＬｉＣｈｒｏｓｐｈｅｒ１００ＲＰ−１８，５μｍ ｐａｒｔｉｃｌｅ ｓｉｚｅ、４ｍｍ ＩＤ ｂｙ ２５−ｃｍ ｌｏｎｇ、Ｈｅｗｌｅｔｔ Ｐａｃｋａｒｄ）を装着したＨＰＬＣに注入した。溶媒系は先の移動相を用い、流速１ｍｌ／分で流し、２５４ｎｍの固定波長で紫外吸収をモニター測定した。注入後０．１分から溶出液を３ｍｌずつ合計９０画分採取した。各々の画分を減圧下で３５℃にて乾固するまで濃縮し、各々の乾固物を１０ｍｌのメタノールに溶解させ、そのうちの一部（３μｌ、３０μｌ、１００μｌおよび３００μｌ）をＷＩＰＫ誘導活性アッセイに供した。アッセイ手順は上記のとおりであった。
１２．１分から１５．１分に溶出されてきた画分に活性が検出されたことから、この画分をさらに先のＨＰＬＣカラムで分画した。溶媒系はアセトニトリル：水＝３：２（ｖ／ｖ）を用い、流速１ｍｌ／ｍｉｎで流し、２５４ｎｍの固定波長で紫外吸収をモニター測定した。保持時間１４．６分のピークに活性が見出されたことから、このピークを回収した（図１）。
このピークを単離されたＷＩＰＫ活性化因子として以後のアッセイに用いた。
（実施例２：単離物質の生物学的活性アッセイ）
単離した物質は、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）に溶解し、適切な濃度になるように１０ｍＭ Ｍｅｓ−ＮａＯＨ（ｐＨ５．６）で希釈した。アッセイにおいて用いた場合、ＤＭＳＯ濃度が０．１％を超えないようにした。５０日齢のタバコ（Ｎｉｃｏｔｉａｎａ ｔａｂａｃｕｍ ｃｖ．Ｓａｍｓｕｎ ＮＮ）植物体の上位健全葉を葉柄部から切り取り、直ちに各濃度の単離された活性物質を含む１０ｍＭ Ｍｅｓ−ＮａＯＨ（ｐＨ５．６）溶液を加えた試験管に置き、２４℃で培養した。対照区として、活性物質を含まない１０ｍＭ Ｍｅｓ−ＮａＯＨ（ｐＨ５．６）のみを用いた。一定時間後、葉を回収し、直ちに液体窒素で凍結し、ＷＩＰＫ活性測定を行ったか、またはノーザンブロット分析のためにＲＮＡ抽出を行った。ＷＩＰＫ活性測定、ＲＮＡ抽出およびノーザンブロット分析は、Ｓｅｏ ｅｔ ａｌ．（１９９９）Ｐｌａｎｔ Ｃｅｌｌ １１，２８９−２９１に従って行った。ＷＩＰＫ活性については、葉の葉柄部から示される濃度の単離された化合物を被験体に吸わせ、１５分後にＷＩＰＫ活性を測定した。対照区として緩衝液のみを吸わせた。また、別の対照区（健全葉）として、タバコ植物体から葉を切り取り、直ちにＷＩＰＫ活性測定に供した。プロテイナーゼインヒビターＩＩ（ＰＩ−ＩＩ）、塩基性ＰＲ−１、塩基性ＰＲ−２およびＡＣＯについては、葉の葉柄部から示される濃度の単離された化合物を被験体に吸わせ、一定時間後にＰＩ−ＩＩ遺伝子、塩基性ＰＲ−１遺伝子、塩基性ＰＲ−２遺伝子およびＡＣＯをコードする遺伝子の転写産物量を測定した。対照区として緩衝液のみを吸わせた。簡潔には、以下のとおりである。
２０μｇの全ＲＮＡを含むナイロン膜と、タバコＰＩ−ＩＩ遺伝子、塩基性ＰＲ−１遺伝子、塩基性ＰＲ−２遺伝子およびＡＣＯをコードする遺伝子の３２Ｐで放射標識したｃＤＮＡとの間で核酸雑種形成反応を行った。反応後の膜は、洗浄後Ｘ線フィルムに露光させた。
（単離物質のＪＡおよびＳＡ蓄積に対する効果）
合成物質による塩基性感染特異的タンパク質遺伝子（ＰＲ−１およびＰＲ−２）およびプロテインインヒビターＩＩ遺伝子の誘導が、ＪＡまたはＳＡを介して生じるかどうかを評価するために、１００ｎＭまたは１μＭのＷＡＦ−１、水を葉柄部からタバコリーフに吸わせ、２４℃で培養し、ＪＡの内的レベルを測定した。
（合成物質のエチレン蓄積に対する効果）
エチレンは、タバコ植物の塩基性ＰＲタンパク質の誘導においてシグナルとして働くことから、合成物質のエチレン蓄積に対する効果を評価するために、上記と同様に外的にＷＡＦ−１をタバコリーフに与え、エチレンの放出を測定した。
（結果）
（ＷＩＰＫ活性の誘導に対する単離物質の効果）
図２Ａに示す各濃度の単離物質を葉柄部から葉にわたって与え、１５分後のＷＩＰＫ活性を測定したところ、いずれの濃度処理においても、ＷＩＰＫ活性の誘導が観察された。対照区処理においては、活性はほとんど観察されなかった。
次に、ある濃度（１ｎＭ、５ｎＭおよび１０ｎＭ）の天然の単離物質またはコントロールとしての水を上述のように葉柄部から葉にわたって与え、５分後、１５分後および３０分後のＷＩＰＫ活性（ＭＢＰリン酸化活性）を測定した。その結果、図２Ｂに示すように、ＷＩＰＫ活性の誘導は、５分後にすでに観察され、１５分後にすでに最大に活性化され、３０分後においても最大の活性が保持されていることが分かった。
（プロテイナーゼインヒビターＩＩ遺伝子、塩基性ＰＲ−１遺伝子、塩基性ＰＲ−２遺伝子およびＡＣＯをコードする遺伝子の発現誘導に対する単離物質の効果）
図３に示す濃度の単離物質を葉柄部から葉にわたって与え、２、６および１６時間後のプロテイナーゼインヒビターＩＩ遺伝子の転写産物の蓄積を調べたところ、１６時間の処理において、転写産物の蓄積が検出された。この量は、対照区における蓄積に比較して顕著に多かった。プロテイナーゼインヒビターＩＩ、塩基性ＰＲ−１、塩基性ＰＲ−２およびＡＣＯの蓄積は、この活性物質が傷害誘導の１つのシグナル伝達物質として作用することを示唆する。
（単離物質のＪＡおよびＳＡ蓄積に対する効果）
１００ｎＭのＷＡＦ−１または１μＭのＷＡＦ−１で処理したリーフ中のＪＡの量およびＳＡの量は、３、６、１２または２４時間培養しても、水で処理したリーフ中のＪＡのレベルおよびＳＡのレベルと等しかった（データは示さず）。このことにより、外的なＷＡＦ−１は、内的なＪＡの増加も、ＳＡの増加も誘導しないことが示唆された。
（単離物質のエチレン蓄積に対する効果）
これらの結果、１００ｎＭのＷＡＦ−１および１μＭのＷＡＦ−１で処理したリーフから放出されたエチレンのレベルは、水で処理したリーフと比較して、それぞれ１．２倍および１．４倍高かった。結果を図１１に示す。
（実施例３：ＷＩＰＫ活性化因子の同定）
上記ＷＩＰＫ活性化因子をＮＭＲおよびＭＳを用いて解析した。ＮＭＲには、ＪＥＯＬ ＪＮＭ−Ａ６００（日本電子、東京、日本）を用いた。ＭＳ分析は、Ａｕｔｏｍａｓｓ ＪＭＳ−ＡＭ ＳＵＮ（日本電子、東京、日本）にてＥＩモード（７０ｅＶ）で行った。
１Ｈおよび１３Ｃ ＮＭＲを、ＰＦＧ−ＤＱＦＣＯＳＹ、ＰＦＧ−ＨＭＱＣおよびＰＦＧ−ＨＭＢＣのスペクトルデータの解析により帰属した。サンプルの量が少なかったことから、１３Ｃ ＮＭＲスペクトルは測定できなかった。従って、１３Ｃ ＮＭＲの化学シフト値は、２Ｄスペクトルデータより判定し、ＰＦＧ−ＨＭＢＣスペクトルデータおよび関連するラブダンジテルペノイドについて報告されたデータとの比較により帰属した（「第４版 実験化学講座６ ＮＭＲ」日本化学会編、丸善、ｐｐ９９−１７６、Ｐｈｙｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ４０，１２１３，１９９５、Ｐｈｙｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ２７，６２４，１９８８）。
結果を以下の表に表す。
上記の結果、本発明において単離された活性物質の構造は、
（ＷＡＦ−１）
であると推定された。
（実施例４：ＳＩＰＫ活性化活性の確認）
上記のＷＩＰＫ活性化因子を用いてサリチル酸誘導プロテインキナーゼ（ＳＩＰＫ）が活性化されるかどうかを検討した。
活性物質として、実施例１で単離した物質を標品として用いた。単離した物質は、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）に溶解し、適切な濃度（０．３ｎｇ／ｍｌ、１．５ｎｇ／ｍｌおよび３ｎｇ／ｍｌ）になるように１０ｍＭ Ｍｅｓ−ＮａＯＨ（ｐＨ５．６）で希釈した。アッセイにおいて用いた場合、ＤＭＳＯ濃度が０．１％を超えないようにした。５０日齢のタバコ（Ｎｉｃｏｔｉａｎａ ｔａｂａｃｕｍ ｃｖ．Ｓａｍｓｕｎ ＮＮ）植物体の上位健全葉を葉柄部から切り取り、直ちに各濃度の単離された活性物質を含む１０ｍＭ Ｍｅｓ−ＮａＯＨ（ｐＨ５．６）溶液を加えた試験管に置き、２４℃で培養した。対照区として、活性物質を含まない１０ｍＭ Ｍｅｓ−ＮａＯＨ（ｐＨ５．６）のみを用いた。一定時間後、葉を回収し、直ちに液体窒素で凍結し、ＳＩＰＫ活性測定を行った。ＳＩＰＫ活性測定は、以下のように行った。
５０μｇの粗タンパク質と抗ＳＩＰＫ抗体とを反応させ、得られた免疫複合体中のＳＩＰＫのミエリン塩基性タンパク質（ＭＢＰ）リン酸化活性を測定した。
（結果）
（ＳＩＰＫ活性の誘導に対する単離物質の効果）
図４に示す各濃度の単離物質を葉柄部から葉にわたって与え、１５分後のＳＩＰＫ活性を測定したところ、いずれの濃度処理においても、ＳＩＰＫ活性の誘導が観察された。対照区処理においては、活性はほとんど観察されなかった。
従って、ＷＩＰＫ活性を誘導する単離物質は、ＳＩＰＫ活性をも誘導する活性を有することが明らかになった。
次に、ある濃度（１ｎＭ、５ｎＭおよび１０ｎＭ）の天然の単離物質またはコントロールとしての水を上述のように葉柄部から葉にわたって与え、５分後、１５分後および３０分後のＳＩＰＫ活性（ＭＢＰリン酸化活性）を測定した。その結果、図２Ｂに示すように、ＳＩＰＫ活性の誘導もまたＷＩＰＫ活性の誘導と同様、１５分後にすでに最大に活性化されていることが分かった。
従って、ＷＩＰＫ活性を誘導する単離物質は、非常に迅速な機構でおそらく共通の機構でＷＩＰＫ活性を誘導する活性とＳＩＰＫ活性を誘導する活性とを有することが示された。
（実施例５：ＷＩＰＫ活性化因子の合成および合成物質の効果の確認）
次に、上で構造式を有する物質がＷＩＰＫ活性化活性を有するかどうかを確認するために、同じ構造を有する化合物を合成した。合成スキームを以下に示す。
（中間体２Ａ）
以下の構造式を有する市販のスクラレオリド（ｓｃｌａｒｅｏｌｉｄｅ：
（５．０ｇ ２０．０ｍｍｏｌ）を無水Ｅｔ２Ｏ（１５０ｍＬ）に溶解し、ＭｅＬｉの１．１４Ｍ Ｅｔ２Ｏ溶液（１９．３ｍＬ，２２．０ｍｍｏｌ）を、窒素気流中氷冷攪拌下、１０−１５分かけて滴下する。同温にて３０分間攪拌後、１０％Ｈ２ＳＯ４（２５ｍＬ）を加えて５分間撹拌し、反応混合物をＥｔ２Ｏで抽出する。有機層を１％ＮａＯＨ水溶液、水、飽和食塩水で順次洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥する。減圧下溶媒を留去、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーに付し、ヘキサン−Ｅｔ２Ｏ（３：２）溶出部より中間体２Ａ（４．８ｇ，９０％）を得た（無色針状晶であり、ｍｐ（融点）６４−６５℃（ヘキサン））。
１Ｈ−ＮＭＲ δＨ（３００ＭＨｚ）０．７９（２ｘ３Ｈ，ｓ），０．８８（３Ｈ，ｓ），１．１１（３Ｈ，ｓ，＞Ｃ（ＯＨ）ＣＨ３），２．２０（３Ｈ，ｓ，−Ｃ（Ｏ）ＣＨ３），２．４４（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１７．５ ａｎｄ ４．４Ｈｚ，１１−Ｈ），２．５４（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１７．５ ａｎｄ ５．６Ｈｚ，１１−Ｈ）。
１３Ｃ−ＮＭＲ δＣ（７５ＭＨｚ）１５．６２，１８．３３，２０．５５，２１．３５，２３．０６，３０．２３，３３．１８，３３．２８，３８．２６，３９．５３，４１．６９，４４．５６，５５．８０，５５．８９，７３．０８，２１０．２０。
（中間体２Ａ）
（中間体４Ａ）
中間体２Ａ（１．００ｇ，３．７５ｍｍｏｌ）を無水ＣＨ２Ｃｌ２（２０ｍＬ）に溶解し、窒素気流中氷冷攪拌下、ｍ−クロロ過安息香酸（１．４３ｇ，８．２７ｍｍｏｌ）を加え、同温にて１時間、更に、室温で５日間撹拌する。溶媒留去後、残渣を１０％ＫＯＨのＭｅＯＨ溶液（１２ｍＬ）に溶解し、室温にて２４時間撹拌する。反応混合物をＥｔ２Ｏで抽出、Ｅｔ２Ｏ層を飽和ＮａＨＣＯ３水溶液、水、飽和食塩水で順次洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥する。減圧下溶媒を留去、残渣をフラシュクロマトグラフィーに付し、ヘキサン−ＡｃＯＥｔ（３：１）溶出部より中間体４Ａ（４９３ｍｇ，５５％）を得た（無色針状晶、ｍｐ１１８−１１９℃（Ｅｔ２Ｏ−ヘキサン））。
１Ｈ−ＮＭＲ δＨ（３００ＭＨｚ）０．７９（２ｘ３Ｈ，ｓ），０．８８（３Ｈ，ｓ），１．３５（３Ｈ，ｓ，＞Ｃ（ＯＨ）ＣＨ３），３．９１（２Ｈ，−ＣＨ２−）。
１３Ｃ−ＮＭＲ
δＣ（７５ＭＨｚ）１５．０３，１８．６０，２０．１８，２１．６２，２４．２９，３３．２７，３３．５５，３７．５２．４０．００，４１．６９，４４．４５，５５．９２，６０．５０，６１．１０，７５．０７。
（中間体４Ａ）
（中間体５Ａ）
中間体４Ａ（１９９ｍｇ，０．８２９ｍｍｏｌ）、Ｎ−メチルモルホリンＮ−オキシド（２９２ｍｇ，２．５０ｍｍｏｌ）、および４Åモレキュラーシーブ（５２４ｍｇ）を無水ＣＨ２Ｃｌ２（５ｍＬ）に懸濁し、窒素気流中氷冷攪拌下、過ルテニウム酸テトラプロピルアンモニウム（２９ｍｇ，０．０８３ｍｍｏｌ）を加え、同温にて１０分間、更に室温で２５分間撹拌する。反応混合物にＥｔ２Ｏ（２０ｍＬ）を加えて攪拌後、シリカゲルにて濾過する。濾液を濃縮後、フラシュクロマトグラフィーに付し、ヘキサン−Ｅｔ２Ｏ（１０：１）溶出部より中間体５Ａ（１２６ｍｇ，６４％）を得た（無色ワックス状固体）。
１Ｈ−ＮＭＲ δＨ（３００ＭＨｚ）０．８４（３Ｈ，ｓ），０．９０（３Ｈ，ｓ），１．１２（３Ｈ，ｓ），１．３９（３Ｈ，ｓ，＞Ｃ（ＯＨ）ＣＨ３），２．０８（１Ｈ，ｄ，Ｊ１．４Ｈｚ，９−Ｈ），１０．０３（１Ｈ，ｄ，Ｊ１．４Ｈｚ，−ＣＨＯ）。
１３Ｃ−ＮＭＲ δＣ（７５ＭＨｚ）１７．５３，１８．１４，１９．８５，２１．３３，２５．２８，３３．２２，３３．３０，３７．３４，３９．７７，４１．５９，４２．６７，５５．１４，７１．２６，７２．７７，２０８．１６。
（中間体５Ａ）
を得た。
（中間体６Ａ）
ＮａＮＨ２（３０．５ｍｇ，０．７８１ｍｍｏｌ）を無水ＴＨＦ（４．１ｍＬ）に懸濁し、窒素気流中氷冷攪拌下、３−エトキシカルボニル−２−メチル−プロプ−２−エニルホスホネート（０．２０ｍＬ，０．８２４ｍｍｏｌ）を滴下、
同温にて２０分間撹拌する。反応混合物を−７８℃に冷却後、中間体５Ａ（６１．１ｍｇ，０．２５６ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（４．１ｍＬ）溶液を滴下、−５０℃にて４１時間撹拌後室温に戻し、水を加え、Ｅｔ２Ｏで抽出する。Ｅｔ２Ｏ層を、水、飽和食塩水で順次洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥する。減圧下溶媒を留去、残渣をフラシュクロマトグラフィーに付し、ヘキサン−ＡｃＯＥｔ（１０：１）溶出部より６Ａｃと６Ａｄとの混合物（２４ｍｇ）、および中間体６Ａａと６Ａｂとの混合物（６４ｍｇ）を得た。中間体６Ａａと６Ａｂとの混合物については高速液体クロマトグラフィー［溶出溶媒：ヘキサン−ＡｃＯＥｔ（５：１）、溶出速度：１０ｍＬ／分］に付し、中間体６Ａａ（８．９ｍｇ，１０％）および６Ａｂ（５２ｍｇ，５９％）を得た。一方、６Ａｃと６Ａｄとの混合物については、さらにフラシュクロマトグラフィーに付し、ヘキサン−ＡｃＯＥｔ（１０：１）溶出部より６Ａｄ（４．７ｍｇ，５．３％）と６Ａｃ（１７ｍｇ，１９％）を得た。
以下に６Ａａ〜６Ａｄの各中間体についての測定データを示す。
（中間体６Ａａ）
無色ワックス状固体
１Ｈ−ＮＭＲ δＨ（３００ＭＨｚ）０．８４（３Ｈ，ｓ），０．８９（３Ｈ，ｓ），０．９６（３Ｈ，ｓ），１．２３（３Ｈ，ｓ，１７−Ｈ３），１．２８（３Ｈ，ｔ，Ｊ７．１Ｈｚ，−ＯＣＨ２−ＣＨ３），２．３０（３Ｈ，ｄ，Ｊ１．０Ｈｚ，１６−Ｈ３），４．１７（２Ｈ，ｑ，Ｊ７．１Ｈｚ，−ＯＣＨ２−ＣＨ３），５．７４（１Ｈ，ｓ，１４−Ｈ），６．１２（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ１５．４ａｎｄ９．５Ｈｚ，１１−Ｈ），６．２２（１Ｈ，ｄ，Ｊ１５．４Ｈｚ，１２−Ｈ）。
１３Ｃ−ＮＭＲ δＣ（７５ＭＨｚ）１４．０７，１４．３３，１５．９８，２１．５９，２５．２３ ａｎｄ ３３．３８（Ｃ−１６，−１７，−１８，−１９ ａｎｄ −２０，ａｎｄ−ＯＣＨ２−ＣＨ３），１８．４０，２０．０９，４０．９６，４１．８８ａｎｄ４２．３３（Ｃ−１，−２，−３，−６ ａｎｄ −７），３３．３２ ａｎｄ ３７．８４（Ｃ−４ ａｎｄ −１０），５５．７４ ａｎｄ ６６．４８（Ｃ−５ ａｎｄ −９），５９．７２（−ＯＣＨ２−ＣＨ３），７２．２１（Ｃ−８），１１９．０７，１３３．０２ ａｎｄ １３８．７７（Ｃ−１１，−１２ ａｎｄ −１４），１５１．３５（Ｃ−１３），１６７．１１（Ｃ−１５）。
（中間体６Ａｂ）
無色粘稠油状物
１Ｈ−ＮＭＲ δＨ（３００ＭＨｚ）０．８２（３Ｈ，ｓ），０．８９（３Ｈ，ｓ），０．９５（３Ｈ，ｓ），１．２２（３Ｈ，ｓ，１７−Ｈ３），１．２７（３Ｈ，ｔ，Ｊ７．１Ｈｚ，−ＯＣＨ２−ＣＨ３），２．０２（３Ｈ，ｄ，Ｊ１．０Ｈｚ，１６−Ｈ３），４．１６（２Ｈ，ｑ，Ｊ７．１Ｈｚ，−ＯＣＨ２−ＣＨ３），５．６６（１Ｈ，ｓ，１４−Ｈ），６．１０（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ１５．７ ａｎｄ １０．３Ｈｚ，１１−Ｈ），７．５８（１Ｈ，ｄ，Ｊ１５．７Ｈｚ，１２−Ｈ）。
１３Ｃ−ＮＭＲ δＣ（７５ＭＨｚ）１４．３２，１６．０２，２１．３３，２１．５９，２５．０１ ａｎｄ ３３．３９（Ｃ−１６，−１７，−１８，−１９ａｎｄ−２０，ａｎｄ−ＯＣＨ２−ＣＨ３），１８．４０，２０．１４，４０．９１，４１．８９ ａｎｄ ４２．６４（Ｃ−１，−２，−３，−６ ａｎｄ−７），３３．３１ ａｎｄ ３７．８２（Ｃ−４ ａｎｄ −１０），５５．６９ａｎｄ６６．６２（Ｃ−５ ａｎｄ −９），５９．７３（−ＯＣＨ２−ＣＨ３），７２．２１（Ｃ−８），１１７．０１，１３２．９３ ａｎｄ １３４．２９（Ｃ−１１，−１２ ａｎｄ −１４），１５０．０７（Ｃ−１３），１６６．１５（Ｃ−１５）。
（中間体６Ａｃ）
無色針状晶 ｍｐ １２３−１２６℃（ヘキサン）
１Ｈ−ＮＭＲ δＨ（３００ＭＨｚ）０．８６（３Ｈ，ｓ），０．８９（３Ｈ，ｓ），１．０４（３Ｈ，ｓ），１．０７（３Ｈ，ｓ），１．２８（３Ｈ，ｔ，Ｊ７．１Ｈｚ，−ＯＣＨ２−ＣＨ３），２．３１（３Ｈ，ｄ，Ｊ１．０Ｈｚ，１６−Ｈ３），４．１７（２Ｈ，ｑ，Ｊ７．１Ｈｚ，−ＯＣＨ２−ＣＨ３），５．７１（１Ｈ，ｓ，１４−Ｈ），６．０５（１Ｈ，ｄ，Ｊ１５．６Ｈｚ，１２−Ｈ），６．２８（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ１５．６ ａｎｄ １０．０Ｈｚ，１１−Ｈ）。 １３Ｃ−ＮＭＲ δＣ（７５ＭＨｚ）１４．１１，１４．３５，１６．０１，２１．８０，３１．６２ ａｎｄ ３３．５３（Ｃ−１６，−１７，−１８，−１９ａｎｄ−２０，ａｎｄ−ＯＣＨ２−ＣＨ３），１８．２０，１８．３１，４０．７５，４２．０１ ａｎｄ ４２．３９（Ｃ−１，−２，−３，−６ ａｎｄ −７），３３．４３ ａｎｄ ３８．２５（Ｃ−４ ａｎｄ −１０），５５．５７ ａｎｄ ６３．６５（Ｃ−５ ａｎｄ −９），５９．６１（−ＯＣＨ２−ＣＨ３），７２．２７（Ｃ−８），１１８．０８，１３４．６６ ａｎｄ １３７．３８（Ｃ−１１，−１２ ａｎｄ −１４），１５２．２６（Ｃ−１３），１６７．２７（Ｃ−１５）。
（中間体６Ａｄ）
無色針状晶 ｍｐ１１５−１１７℃（ヘキサン）
１Ｈ−ＮＭＲ δＨ（３００ＭＨｚ）０．８６（３Ｈ，ｓ），０．８８（３Ｈ，ｓ），１．０６（３Ｈ，ｓ），１．０７（３Ｈ，ｓ），１．２８（３Ｈ，ｔ，Ｊ７．１Ｈｚ，−ＯＣＨ２−ＣＨ３），２．０３（３Ｈ，ｄ，Ｊ１．１Ｈｚ，１６−Ｈ３），４．１６（２Ｈ，ｑ，Ｊ７．１Ｈｚ，−ＯＣＨ２−ＣＨ３），５．６３（１Ｈ，ｓ，１４−Ｈ），６．２８（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ１５．９ａｎｄ１０．１Ｈｚ，１１−Ｈ），７．５２（１Ｈ，ｄ，Ｊ１５．９Ｈｚ，１２−Ｈ）。
１３Ｃ−ＮＭＲ δＣ（７５ＭＨｚ）１４．３３，１６．０７，２１．３０，２１．７９，３１．６９ ａｎｄ ３３．５２（Ｃ−１６，−１７，−１８，−１９ａｎｄ−２０，ａｎｄ−ＯＣＨ２−ＣＨ３），１８．２０，１８．３２，４０．６３，４１．９８ａｎｄ４２．４１（Ｃ−１，−２，−３，−６ ａｎｄ −７），３３．４１ ａｎｄ ３８．１４（Ｃ−４ ａｎｄ −１０），５５．５０ ａｎｄ ６３．６７（Ｃ−５ ａｎｄ −９），５９．５６（−ＯＣＨ２−ＣＨ３），７２．３８（Ｃ−８），１１５．９７，１３１．５７ ａｎｄ １３６．１７（Ｃ−１１，−１２ ａｎｄ −１４），１５１．０３（Ｃ−１３），１６６．４０（Ｃ−１５）。
（ＷＡＦ−１の合成）
次に、上記の化合物のうち、
（中間体６Ａａ）
（１０ｍｇ，０．０２９ｍｍｏｌ）を無水ＣＨ２Ｃｌ２（０．５ｍＬ）に溶解し、窒素気流中−７８℃にて攪拌下、ジイソブチルアルミニウムヒドリドの１．０ＭＣＨ２Ｃｌ２溶液（０．２０ｍＬ，０．２０ｍｍｏｌ）を滴下する。同温にて３０分間攪拌後、冷媒を取り去り、室温に戻しつつ３０分間攪拌する。氷冷下、反応混合物にＡｃＯＥｔ（０．５ｍＬ）、ＣＨ２Ｃｌ２（５ｍＬ）、酒石酸カリウムナトリウムの０．５Ｍ水溶液（１．１ｍＬ）加え、室温にて１５分間攪拌し、Ｅｔで抽出する。有機層を、水、飽和食塩水で順次洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥する。減圧下溶媒を留去、残渣をフラシュクロマトグラフィーに付し、ヘキサン−ＡｃＯＥｔ（１：１）溶出部よりＷＡＦ−１（９．０ｍｇ，１００％）を得る（無色粘稠油状物）。
１Ｈ−ＮＭＲ δＨ（６００ＭＨｚ）０．８２（３Ｈ，ｓ，１９−Ｈ３），０．８５（１Ｈ，ｍ，１ａ−Ｈ），０．８８（３Ｈ，ｓ，１８−Ｈ３），０．９３（１Ｈ，ｍ，５−Ｈ），０．９４（３Ｈ，ｓ，２０−Ｈ３），１．１３（１Ｈ，ｍ，３ａ−Ｈ），１．２０（３Ｈ，ｓ，１７−Ｈ３），１．３２（１Ｈ，ｍ，６ｂ−Ｈ），１．３８（１Ｈ，ｍ，１ｂ−Ｈ），１．３８（１Ｈ，ｍ，２ａ−Ｈ），１．３８（１Ｈ，ｍ，３ｂ−Ｈ），１．４８（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ１２．７，１２．７ ａｎｄ ３．３Ｈｚ，７ａ−Ｈ），１．５６（１Ｈ，ｍ，２ｂ−Ｈ），１．６９（１Ｈ，ｍ，６ａ−Ｈ），１．８３（１Ｈ，ｄ，Ｊ１０．３Ｈｚ，９−Ｈ），１．８３（３Ｈ，ｓ，１６−Ｈ３），１．９２（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ１２．７，３．１ａｎｄ３．１Ｈｚ，７ａ−Ｈ），４．２９（２Ｈ，ｄ，Ｊ６．８Ｈｚ，１５−Ｈ２），５．６４（１Ｈ，ｔ，Ｊ６．８Ｈｚ，１４−Ｈ），５．６９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ１５．６ ａｎｄ １０．３Ｈｚ，１１−Ｈ），６．１９（１Ｈ，ｄ，Ｊ１５．６Ｈｚ，１２−Ｈ）。
１３Ｃ−ＮＭＲ δＣ（１５０ＭＨｚ）１２．８５（Ｃ−１６），１５．９２（Ｃ−２０），１８．４４（Ｃ−２），２０．０７（Ｃ−６），２１．６０（Ｃ−１９），２５．２３（Ｃ−１７），３３．３２（Ｃ−４），３３．４０（Ｃ−１８），３７．６６（Ｃ−１０），４０．９１（Ｃ−１），４１．９５（Ｃ−３），４２．０３（Ｃ−７），５５．８４（Ｃ−５），５９．３１（Ｃ−１５），６６．３８（Ｃ−９），７２．００（Ｃ−８），１２５．７１（Ｃ−１１），１２９．４６（Ｃ−１４），１３５．９４（Ｃ−１３），１３９．４４（Ｃ−１２）。
ＥＩ−ＭＳ ｍ／ｚ２８８（Ｍ＋−Ｈ２Ｏ，６８％），１７７（１００），１３３（６０），１０９（６８），９５（６６），８１（７３），６９（９７），４３（６３）．ＨＲ−ＥＩ−ＭＳｍ／ｚ［Ｍ−Ｈ２Ｏ］＋：測定値，２８８．２４５３．Ｃ２０Ｈ３２Ｏについての計算値，２８８．２４５５。
（ＷＡＦ−１）
ここで、この化合物は、天然物と同じ構造を有していることが確認された。
（合成物質のＷＩＰＫ活性化活性の確認）
このようにして合成した合成物質を用いて、実施例１に記載されるようなＷＩＰＫ活性測定試験を行った。結果を図５に示す。
（合成物質のＳＩＰＫ活性化活性の確認）
このようにして合成した合成物質を用いて、実施例４に記載されるようなＳＩＰＫ活性測定試験を行った。結果を図６に示す。
（天然物質のＷＩＰＫおよびＳＩＰＫ活性の確認）
天然の単離物質を用いて１０ｐＭ、１００ｐＭ、１ｎＭおよび１００ｎＭの濃度の標品を調製し、これらの天然品または水をタバコリーフディスクに浸透させ、処理後３０分後にサンプリングして、上述と同様のＷＩＰＫおよびＳＩＰＫのＭＢＰリン酸化活性測定を行った。結果を図７に示す。
（結果）
これらの結果、天然の単離物質は、１０ｐＭより高い濃度でＷＩＰＫおよびＳＩＰＫの活性化が顕著になり、１００ｐＭと１ｎＭとの間の濃度で最大に達するようである。合成のＷＡＦ−１も同様の様相を示した。
従って、効果を奏する濃度の面からも合成品が天然の単離物質と同一であることが確認された。
（実施例６：ＴＭＶ感染後および傷害後の活性物質の内生量の蓄積）
次に、ＴＭＶ感染後および傷害後の本発明の活性物質の内生量の蓄積を確かめた。
（活性物質の定量法）
２ｇの葉組織を２０ｍｌの冷８０％（ｖ／ｖ）メタノールでポリトロン中で摩砕し、４℃で１時間静置することで抽出した。抽出液を１０，０００×ｇで１０分間遠心分離した。沈殿物を１０ｍｌの冷８０％（ｖ／ｖ）メタノールに懸濁し、さらに１０，０００×ｇで１０分間遠心分離し、上清を回収した。得られた２つの上清を回収し、３５℃で減圧下でロータリーエバポレーターを用いて水相になるまで濃縮した。得られた水相を１Ｍのリン酸緩衝液でｐＨ７．５に調整し、等量の酢酸エチルで３回分画した。上清の酢酸エチル層を無水硫酸ナトリウムで脱水後、３５℃で減圧下でロータリーエバポレーターを用いて乾固するまで濃縮した。乾固物を３ｍｌの８０％（ｖ／ｖ）メタノールに溶解し、予め８０％（ｖ／ｖ）メタノールで平衡化させたＣ１８ Ｓｅｐ−Ｐａｋカートリッジカラム（Ｗａｔｅｒｓ、米国）に通した。素通り画分を回収し、３５℃で減圧下でロータリーエバポレーターを用いて乾固するまで濃縮した。濃縮した残渣を８０％（ｖ／ｖ）に溶解し、溶液を高速液体クロマトグラフィー（ＬｉＣｈｒｏｓｐｈｅｒ １００ＲＰ−１８，５−μｍ粒子径、４ｍｍ内径、２５ｃｍ長、ＨｅｗｌｅｔｔＰａｃｋａｒｄ）にかけた。溶出をメタノール溶液（メタノール：水＝４：１）（ｖ／ｖ）で流速１ｍｌ／分で行った。保持時間で１１分から１６．５分の間に溶出してきた液を回収した。この溶出液を乾固するまで濃縮し、得られた残渣を２００μｌのアセトニトリル溶液（アセトニトリル：水＝９：８（ｖ／ｖ））に溶解し、その１０分の１量を、上述した高速液体クロマトグラフィーカラムにかけた。溶出は、アセトニトリル溶液（アセトニトリル：水＝９：８（ｖ／ｖ））で流速１ｍｌ／分で行った。また、２３８ｎｍの一定波長で紫外線吸収をモニターしてＷＡＦ−１を検出した。抽出および精製操作における活性物質の回収率を求めるために、内部標準物質として３００ｎｇのラブダンａ（ｌａｂｄａｎｅ ａ）を抽出操作の最初の過程で加えた。
活性物質およびラブダンａの保持時間は、それぞれ、２４．５分および２９．５分であった。活性物質の内生量は、既知量の活性物質から作成した検量線から算出した。すべてのデータは、抽出および精製操作における活性物質の回収率（６５％〜７５％）に基づいた損失に対して補正して求めた。
なお、ラブダンａは、以下のように生成した。具体的には、中間体６Ａｃをジイソブチルアルミニウムヒドリドで還元して得た。
図７にタバコから単離した本発明の化合物の検量線作成のためのデータを示す。上述したように、検量線作成のための実験では、タバコのリーフディスクを水または各濃度の天然品を浸透させ、処理後３０分でサンプリングし、ＷＩＰＫおよびＳＩＰＫのＭＢＰリン酸化活性測定を上記のように行った。
なお、ラブダンａは活性物質の合成過程で得られた産物であり、活性物質と非常に良く似たクロマトグラフィー挙動を示す。また、ラブダンａは、タバコ植物体には存在しない。これらのことから、ラブダンａを内部標準物質として使用した。
（２０℃から３０℃に移した後の本発明の活性物質の内生量蓄積）
タバコ葉にＴＭＶ（１０μｇ／ｍｌ）または緩衝液（擬似接種（ｍｏｃｋ））を接種した。接種後、接種葉から直径３ｃｍのリーフディスクを打ち抜き、蒸留水で湿らせた濾紙を敷いた透明プラスチック箱に置き、その箱を３０℃の恒温装置で４８時間培養した後、過敏感反応を誘導するために２０℃の恒温装置に移し変えて、経時的にディスクをサンプリングし、活性物質の定量に用いた。
図８Ａに結果を示す。単位は、葉１ｇ新鮮重あたりのｎｇ（ナノグラム）活性物質を表した。各データは３つのサンプルを用いた３連の測定の平均±標準偏差を示す。
（２０℃で培養開始後の本発明の活性物質の内生量蓄積）
タバコ葉にＴＭＶ（２μｇ／ｍｌ）または緩衝液（擬似接種）を接種した。接種後、接種葉から直径３ｃｍのリーフディスクを打ち抜き、蒸留水で湿らせた濾紙を敷いた透明プラスチック箱に置き、その箱を２０℃の恒温装置で培養し、経時的にディスクをサンプリングし、活性物質の定量に用いた。図８Ｂに結果を示す。単位は、葉１ｇ新鮮重あたりのｎｇ（ナノグラム）活性物質を表した。各データは３つのサンプルを用いた３連の測定の平均±標準偏差を示す。
（傷害後の活性物質の内生量の蓄積）
タバコ葉を剃刀を使って約５ｍｍ角の大きさに切断した。切断後、経時的に葉片をサンプリングし、活性物質の定量に用いた。図９に結果を示す。単位は、葉１ｇ新鮮重あたりのｎｇ（ナノグラム）活性物質を表した。各データは３つのサンプルを用いた３連の測定の平均±標準偏差を示す。
（結果および考察）
ＷＩＰＫ活性化物質は、過敏感反応が誘導されているタバコ葉から単離された物質である。過敏感反応は、病原体に感染した植物の感染部位が積極的に死ぬことによって病原体を封じ込め、結果として壊死病斑ができ、未感染部位への感染の拡散を阻止する、植物の病害抵抗性反応の典型例である。この過敏感反応には、植物が病原体に対応する抵抗性遺伝子の関与が示唆されており、例えば、タバコのＴＭＶに対する抵抗性の場合、そのような例としてはＴＭＶ抵抗性遺伝子Ｎが挙げられる。
ＷＩＰＫは、ＴＭＶ感染に対する過敏感反応の初期に活性化されることが知られている。そこで、過敏感反応において、本発明のＷＩＰＫ活性化物質の含量が変化するかどうかを調べた。Ｎ遺伝子を有するタバコのＴＭＶ感染に対する過敏感反応は温度感受性であり、２８℃以上の温度ではＮ遺伝子が働かないので過敏感反応が起きない。他方、温度を２４℃以下にすると、Ｎ遺伝子が働きだし、過敏感反応が生じる。この性質を利用して、本実施例においてＳａｍｓｕｎ ＮＮタバコ（Ｎ遺伝子を有する）のＴＭＶ感染葉を３０℃で培養した後、２０℃に移してやることで過敏感反応を誘導させた。
３０℃で４８時間培養したＴＭＶ接種葉を２０℃に移すと、ＷＩＰＫ活性化物質の含量は移して図８Ａに示すように３時間目から増加し始め、２４時間目に最大に達した。この物質の含量は、０時間目には４３±９ｎｇ／ｇ新鮮重量（ＦＷ）であったが、２４時間目には、１８９±４５ｎｇ／ｇＦＷであった。この最初の増加は、ＷＩＰＫの活性化（２０℃へ移して４時間目に起こり始める）と壊死病斑の出現（２０℃に移して８時間目に起きる）の前に起こった。擬似接種葉ではそのような増加は生じなかった（図８Ａ）。
ＴＭＶ接種葉を接種直後から２０℃で培養し続けた場合も同様に、ＷＩＰＫ活性化物質の含量の増加が観察された（図８Ｂ；接種直後で２６±６ｎｇ／ｇＦＷであり、４８時間後には１２６±２２ｎｇ／ｇＦＷであった）。含量の増加は、壊死病斑が現れる３０から３２時間後よりも早い２４時間目に見られた。また、ＷＩＰＫ活性化物質の含量の一過的な増加が２０℃で培養し続けた擬似接種葉で観察された。これは、物理的傷が本発明の物質の生体内含量の増加を引き起こすことを示す。
そこで、傷によってＷＩＰＫ活性化物質の増加が起こるのかどうかを確かめるために葉に物理的に傷つけ、その後のその物質の量的変動をモニターした。その結果、図９に示されるように、ＷＩＰＫ活性化物質の含量は、傷後３０分で１．３倍（健常植物の葉では２４ｎｇ／ｇＦＷであり、３０分後には３２±４ｎｇ／ｇＦＷであった）になり、１８０分で約３倍近く（６０±７ｎｇ／ｇＦＷ）に増加した。このことは、ＷＩＰＫ活性化物質が物理的なストレスにも即時に応答することを示す。
（実施例７：ＷＡＦ−１の転写因子調節）
次に、ＨＲシグナル伝達経路および傷シグナル伝達経路におけるＷＡＦ−１の役割をさらに明らかにするために、ＨＲおよび傷で誘導される遺伝子のセットの発現に対するＷＡＦ−１の効果を調べた。
その結果、本発明者らは、ＷＲＫＹ型転写因子をコードするタバコのＷＩＺＺ遺伝子をＷＡＦ−１が活性化することを見出した。その結果を以下に示す。
ＷＩＺＺは、その発現が傷を受けた１０分後に誘導される因子であり（Ｈａｒａ Ｋ．，ｅｔ ａｌ．，ＭＧＧ，２６３，３０（２０００））、ＴＭＶ壊死病斑が現れる前に現れることが知られる（Ｙｏｄａ Ｈ，ｅｔ ａｌ．ＭＧＧ ２６７，１５４（２００２））。
ＷＩＺＺの転写物の発現の、本発明のＷＡＦ−１での刺激後の推移を、以下の方法を用いて確認した。タバコ葉から打ち抜いたリーフディスクに１ｎＭのＷＡＦ−１液あるいは水を浸透させ、浸透後３０分でそのディスクを回収し、全ＲＮＡ抽出に用いた。全ＲＮＡ抽出は、Ｓｅｏ ｅｔ ａｌ．Ｐｌａｎｔ Ｃｅｌｌ１９９９，１１，２８９−２９９に記載されている方法に従った。単離した全ＲＮＡを上記の文献に従ってＲＮＡゲルブロッティング分析に供した。プローブとして、ＷＩＺＺ ｃＤＮＡの８７７から１２１１に相当する配列（３３５ｂｐ）を増幅した断片を用いた。また、内部標準プローブとして、アクチンｃＤＮＡ（Ｓｅｏ ｅｔ ａｌ．２０００ １２，９１７−９３２に記載）を用いた。ＲＮＡゲルブロット膜は、１レーンあたり２０μｇの全ＲＮＡを含む。
その結果、図１０に示されるように、ＷＩＺＺ転写物のレベルは、ＷＡＦ−１をしみこませたリーフディスクの方が、水をしみこませたリーフディスクよりも高かった。このことは、外的に供給されたＷＡＦ−１によって、ＷＩＺＺの発現が増強したことを示す。したがって、本発明のＷＡＦ−１は、ストレス後すぐの迅速な応答を調節する役割を有することが示された。
内的なＷＡＦ−１のレベルが、壊死病斑の出現前に増加するという事実は、ＷＡＦ−１の蓄積が、ＴＭＶ感染タバコにおける過敏感細胞死の初期事象であることを示す。ＷＩＺＺ遺伝子発現のＷＡＦ−１による誘導は、ＷＩＰＫおよびＳＩＰＫの活性化により媒介されるようである。実際、ＡｔＭＰＫ３およびＡｔＭＰＫ６は、ＡｒａｂｉｄｏｐｓｉｓのＷＩＰＫおよびＳＩＰＫのそれぞれのオルソログにあたるが、それらのそれぞれの活性化は、ＷＰＫＹ転写因子をコードする遺伝子のセットの発現に関与していることが報告されている（Ａｓａｉ Ｔ．ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ ４１５，９７７（２００２））。従って、ＷＡＦ−１は、ＨＲシグナルおよび傷シグナルの伝達経路の活性化のためのシグナル化合物であるようである。
ラブダン型ジテルペンは、植物界に広汎に存在するようであるが、その生物学的はほとんど分かっていない。スクラレオール（ｓｃｌａｒｅｏｌ）は、以下の構造を有し
（ｓｃｌａｒｅｏｌ）
植物に存在する主要なラブダン型ジテルペンである。スクラレオールは上述のように、ＷＡＦ−１の化学合成の出発物質であるスクラレオリドの密接なアナログであり、本明細書において記載される本発明と関連すると意味で関心がある。
スクラレオールは、種々の薬理学的活性を有する。そのような活性としては、例えば、アポトーシス（Ｄｉｍａｓ Ｋ．，Ｌｅｕｋｅｍｉａ Ｒｅｓ．２５：４４９（２００１））、真菌増殖阻害（Ｂａｉｌｅｙ，Ｊ．Ａ．ｅｔ ａｌ．Ｎａｔｕｒｅ ２５５，３２８（１９７５））、および植物生長阻害（Ｃｕｔｌｅｒ Ｈ．Ｇ．，ｅｔ ａｌ．，Ｐｌａｎｔ Ｃｅｌｌ Ｐｈｙｓｉｏｌ．１８，７１１（１９７７））などが挙げられる。スクラレオールはまた、毒性薬物の分泌・排出に関与する、ＡＢＣトランスポーターをコードするタバコ遺伝子の発現を誘導する（Ｊａｓｉｎｓｋｉ ｅｔ ａｌ．Ｐｌａｎｔ Ｃｅｌｌ １３，１０９５（２００１））。
興味深いことに、スクラレオールは、Ｎｉｃｏｔｉａｎａ ｇｌｕｔｉｎｏｓａの葉の表面浸出物の１０％を構成する（Ｂａｉｌｅｙ，Ｊ．Ａ．ｅｔ ａｌ．Ｊ．Ｇｅｎ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．８５、５７（１９７４））。
本発明者らは、次に、タバコ葉を減圧下に置き次いで常圧にもどし、水が浸潤した後に遠心分離を行い、その後上清を回収し、定法に従ってＷＡＦ−１の組織内局在を調べた。その結果、傷を受けたタバコ葉の細胞間隙から回収された。従って、このことは、ＷＡＦ−１が傷を受けた後に細胞間隙に蓄積することを示す。従って、低分子量化合物であるスクラレオールおよびＷＡＦ−１は、協同して働き、植物の葉の表面および細胞間隙における天然の防禦機構として働いているようである。
（実施例８：ラブダン型ジテルペノイドによる植物の傷害抵抗性増強の実証）
本発明で得られた活性物質は、昆虫の消化酵素の阻害物質であるプロテイナーゼインヒビターＩＩをコードする遺伝子の発現を制御することが示された。従って、植物にこの物質を投与し、投与された植物に害虫を与える実験を行った。本実施例では、イネを標的に用いた。この物質をイネに投与した場合、投与していないイネに与えた場合と比べて、生長が抑えられる。
（実施例９：ストレスからの防禦）
本発明で得られた活性物質は、過敏感反応が誘導されたＴＭＶ感染タバコから単離された物質であることから、過敏感反応は、植物の感染細胞が積極的に死ぬことによって病原体を封じ込め、病原体の増殖を阻止する、病害抵抗性反応の典型的な例である。上述の実験において、ＴＭＶで誘導される過敏感反応において、本発明の物質の内生量は、その反応の初期に増加し始めることが示された。このことは、本発明の物質が過敏感反応に重要な役割を果たしていることを示唆する。
そこで、本実施例では、ＴＭＶに感染していないタバコを標的として、本発明の物質を投与した。その後、図１２に示された濃度の本発明の物質を投与した植物と、投与していない植物とに、実施例１と同様の条件でＴＭＶ刺激を与え、壊死病斑の大きさおよびＴＭＶのコートタンパク質の量を測定した。結果を図１２に示す。
（結果）
これらの結果により、本発明の物質を投与した植物は、１００ｐＭより高い濃度で壊死病斑の大きさが減少し、用量依存的であることが示された。ＴＭＶコートタンパク質の量もまた、減少することが示された。このことは、本発明の物質で処理したタバコリーフにおいてＴＭＶの複製が抑制されたことを示唆する。従って、本発明の物質を投与した植物は、投与していない物質よりもＴＭＶに対して抵抗性が増加していることが示された。従って、本発明の物質は、植物にストレス耐性を付与することが実証された。
（実施例１０：ＷＡＦ−１による植物の肥大成長の促進）
本発明の化合物を与えると、ＡＣＯが蓄積されることから、本発明の化合物の肥大成長に対する効果を調べた。
（植物材料）
本実施例では１５日齢のシロイヌナズナ（Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ ｔｈａｌｉａｎａ）、一ヶ月齢のタバコ（Ｎｉｃｏｔｉａｎａ ｔａｂａｃｕｍ ｃｖ．Ｓａｍｓｕｎ ＮＮ）または２０日齢のイネ（Ｏｒｙｚａ ｓａｔｉｖａ）を植物体を材料として用いた。本発明の化合物は、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）に溶解し、適切な濃度（３００ｎｇ／ｍｌ、１００ｎｇ／ｍｌおよび３０ｎｇ／ｍｌ）になるように１０ｍＭ Ｍｅｓ−ＮａＯＨ（ｐＨ５．６）で希釈した。タバコ植物体およびイネ植物体に、示された濃度で本発明の化合物を含む１０ｍＭ Ｍｅｓ−ＮａＯＨをスプレーで与え、２４℃で培養した。対照区として、本発明の化合物を含まない１０ｍＭ Ｍｅｓ−ＮａＯＨ（ｐＨ５．６）のみを用いた。一定時間後、イネ、シロイヌナズナおよびタバコ植物体の茎部の周囲および地上部の高さを測定した。
（結果）
これらの結果、対照区と比較して、シロイヌナズナやタバコ植物体においては茎部の肥大成長および伸長成長の遅れが、およびイネ植物体においては地上部の伸長が認められた。このことは、本発明の化合物が植物体の肥大成長および伸長成長に関与し、植物体成長の調節に有用であることを示す。
（実施例１１：ＷＡＦ−１の開花に対する影響）
本発明の化合物を与えると、植物組織にエチレンが蓄積されることから、本発明の化合物の開花に対する効果を調べた。
（植物材料）
本実施例では一ヶ月齢のペチュニア植物体を材料として用いた。本発明の化合物は、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）に溶解し、適切な濃度（３００ｎｇ／ｍｌ、１００ｎｇ／ｍｌ、および３０ｎｇ／ｍｌ）になるように１０ｍＭ Ｍｅｓ−ＮａＯＨ（ｐＨ５．６）で希釈した。ペチュニア植物体に、示された濃度で本発明の化合物を含む１０ｍＭ Ｍｅｓ−ＮａＯＨをスプレーで与え、２４℃で培養した。対照区として、本発明の化合物を含まない１０ｍＭ Ｍｅｓ−ＮａＯＨ（ｐＨ５．６）のみを用いた。一定時間後、植物体の開花を肉眼で観察した。その後、植物に本発明の化合物を与えるのを中止し、緩衝液のみをスプレーで与えたところ、開花が観察された。
（結果）
これらの結果、対照区と比較して、本発明の化合物を与えたペチュニア植物体において開花の遅れが認められ、化合物の投与を中止したところ、開花が認められた。このことは、本発明の化合物が植物体の開花の調節に有用であることを示す。
以上のように、本発明の好ましい実施形態を用いて本発明を例示してきたが、本発明は、特許請求の範囲によってのみその範囲が解釈されるべきであることが理解される。本明細書において引用した特許、特許出願および文献は、その内容自体が具体的に本明細書に記載されているのと同様にその内容が本明細書に対する参考として援用されるべきであることが理解される。
【図面の簡単な説明】
図１は、本発明の化合物の単離の際のクロマトグラムを示す。
図２において、図２Ａは、ＷＩＰＫ活性の誘導に対する本発明の化合物の効果を示す。葉の葉柄部から示される濃度の単離された化合物を被験体に吸わせ、１５分後にＷＩＰＫ活性を測定した。対照区として緩衝液のみを吸わせた。また、別の対照区（健全葉）として、タバコ植物体から葉を切り取り、直ちにＷＩＰＫ活性測定に供した。図２Ｂは、ある濃度（１ｎＭ、５ｎＭおよび１０ｎＭ）の天然の単離物質またはコントロールとしての水を葉柄部から葉にわたって与え、５分後、１５分後および３０分後のＷＩＰＫ活性（ＭＢＰリン酸化活性）を測定した結果を示す。ＷＩＰＫ活性の誘導は、５分後にすでに観察され、１５分後にすでに最大に活性化され、３０分後においても最大の活性が保持されていることが分かった。
図３は、ＰＩ−ＩＩ遺伝子の発現誘導に対する本発明の化合物の効果を示す。葉の葉柄部から示される濃度の単離された化合物を被験体に吸わせ、一定時間後にＰＩ−ＩＩ遺伝子の転写産物量を測定した。対照区として緩衝液のみを吸わせた。
図４は、ＳＩＰＫ活性の誘導に対する本発明の化合物の効果を示す。葉の葉柄部から各濃度の単離された化合物を被験体に吸わせ、１５分後にＳＩＰＫ活性を測定した。対照区として緩衝液のみを吸わせた。また、別の対象区（健全葉）として、タバコ植物体から葉を切り取り、直ちにＳＩＰＫ活性測定に供した。
図５は、ＷＩＰＫ活性の誘導に対する本発明の合成化合物の効果を示す。ＭＢＰは、ＭＢＰリン酸化の強度を示す。
図６は、ＳＩＰＫ活性の誘導に対する本発明の合成化合物の効果を示す。ＭＢＰは、ＭＢＰリン酸化の強度を示す。
図７は、天然の活性物質のＷＩＰＫおよびＳＩＰＫの活性の検定を示す図である。
図８において、図８Ａは、２０℃から３０℃に移した後の本発明の活性物質の内生量蓄積を示す。図８Ｂは、２０℃で培養開始後の本発明の活性物質の内生量蓄積を示す。
図９は、傷害後の活性物質の内生量の蓄積を示す。
図１０は、本発明の化合物によるＷＩＺＺ転写物のレベルの誘導を示す図である。ＷＩＺＺは、本発明の化合物によるＷＩＺＺの誘導を示すものであり、Ａｃｔｉｎは、コントロールとしてアクチンを用いたものを示す。０分でのコントロールと、水またはＷＡＦ−１での処理後３０分での状況を示す。
図１１は、本発明の化合物を与えたタバコリーフのエチレン放出のレベルを示す。
図１２において、図１２Ａは、１０ｐＭ〜１００ｎＭの濃度の本発明の化合物または水をタバコリーフに与えた場合の、壊死病斑の大きさにより示されるＴＭＶ感染の防禦に対する効果を示す。図１２Ｂは、１００ｎＭの濃度の本発明の化合物または水を与えた場合のタバコリーフのＴＭＶ感染の防禦を示す写真である。図１２Ｃは、１００ｐＭまたは１００ｎＭの濃度の本発明の化合物または水を与えた場合のＴＭＶコートタンパク質の量の比較を示す。

Claims (47)

  1. 以下の構造：
    （ＷＡＦ）
    を有し、式中、
    Ｘは、ヒドロキシ；アルキル、シクロアルキル、アルケニル、シクロアルケニル、アルキニル、アシルおよびチオカルボキシからなる群より選択された基で置換されたヒドロキシ；ハロゲン；チオール；ならびにアルキル、シクロアルキル、アルケニル、シクロアルケニル、アルキニル、アシルおよびチオカルボキシからなる群より選択された基で置換されたチオールからなる群より選択され、
    Ｙ１およびＹ２は、一方は水素またはアルキルであり、他方は、メチロール、１または２つの水素がアルキルで置換されたメチロール、アルデヒド、カルボキシル基、またはアルキルで置換されたカルボキシル基であり、
    Ｒ１〜Ｒ２４は、独立して、水素およびアルキルからなる群より選択される、
    化合物。
  2. Ｙ１およびＹ２は、他方が水素であり、一方がメチロール、１または２つの水素がアルキルで置換されたメチロール、アルデヒド、カルボキシル基、またはアルキルで置換されたカルボキシル基である、請求項１に記載の化合物。
  3. Ｒ１〜Ｒ２４は、すべて水素である、請求項１に記載の化合物。
  4. Ｘは、ヒドロキシである、請求項１に記載の化合物。
  5. 下記構造式：
    （ＷＡＦ−１）
    を有する、請求項１に記載の化合物。
  6. 植物にストレス耐性を付与または増強するための組成物であって、
    請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物を含む、組成物。
  7. 前記ストレス耐性が、傷害抵抗性、虫害抵抗性、病害抵抗性および過敏感細胞死に対する抵抗性からなる群より選択される少なくとも１つの抵抗性である、請求項６に記載の組成物。
  8. 前記ストレス耐性の付与または増強は、傷誘導性プロテインキナーゼ、サリチル酸誘導プロテインキナーゼ、感染特異的タンパク質および１−アミノ−シクロプロパン−ｔ−カルボン酸合成酵素からなる群より選択される少なくとも１つのタンパク質の活性を制御することにより達成される、請求項６に記載の組成物。
  9. 前記ストレス耐性の付与または増強は、ジャスモン酸シグナル伝達系およびサリチル酸シグナル伝達系からなる群より選択される少なくとも１つのシグナル伝達系を制御することにより達成される、請求項６に記載の組成物。
  10. 植物にストレス耐性を付与または増強するための方法であって、該方法は以下の工程：
    ａ）請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物を該植物に提供する工程、
    を包含する、方法。
  11. 前記ストレス耐性が、傷害抵抗性、虫害抵抗性、病害抵抗性および過敏感細胞死に対する抵抗性からなる群より選択される少なくとも１つの抵抗性である、請求項１０に記載の方法。
  12. 前記ストレス耐性の付与または増強は、傷誘導性プロテインキナーゼ、サリチル酸誘導プロテインキナーゼ、感染特異的タンパク質および１−アミノ−シクロプロパン−ｔ−カルボン酸合成酵素からなる群より選択される少なくとも１つのタンパク質の活性を制御することにより達成される、請求項１０に記載の方法。
  13. 前記ストレス耐性の付与または増強は、ジャスモン酸シグナル伝達系およびサリチル酸シグナル伝達系からなる群より選択される少なくとも１つのシグナル伝達系を制御することにより達成される、請求項１０に記載の方法。
  14. ストレス耐性植物を生産するための方法であって、該方法は：
    ａ）請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物を該植物に提供する工程、
    を包含する、方法。
  15. ストレス耐性の植物組織を生産するための方法であって、該方法は：
    ａ）請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物を該植物組織に提供する工程、
    を包含する、方法。
  16. ストレス耐性の植物細胞を生産するための方法であって、該方法は：
    ａ）請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物を該植物細胞に提供する工程、
    を包含する、方法。
  17. ストレス耐性植物の種子を生産するための方法であって、該方法は：
    ａ）請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物を該植物に提供する工程；および
    ｂ）該植物から種子を得る工程、
    を包含する、方法。
  18. 請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物を合成する方法であって、該方法は以下の工程：
    ａ）
    （中間体１）
    を有し、式中、
    Ｒ５〜Ｒ２４は、独立して、請求項１〜５のいずれか１項において定義されたとおりである、化合物と、アルキルリチウムとを反応させて、（中間体２）を得る工程；
    （中間体２）
    ｂ）ａ）で得られた生成物と、ｍ−クロロ過安息香酸とを混合して反応させた後１０％水酸化カリウムのメタノール溶液と反応させて、（中間体４）を得る工程；
    （中間体４）
    ｃ）ｂ）で得られた生成物と、過ルテニウム酸テトラプロピルアンモニウムの存在下でＮ−メチルモルホリンＮ−オキシドと反応させて（中間体５）を得る工程、
    （中間体５）
    を得る工程；
    ｄ）工程ｃ）で得られた該中間体５に、化合物
    （式中、Ｒ１〜Ｒ２およびR4は、独立して、請求項１〜５のいずれか１項において定義されたとおりであり、Ｖ１およびＶ２は、一方が水素またはアルキルであり、他方がＺ’−Ｖであり、ここで、Ｚ’はＣ（＝Ｏ）−Ｏ−であり、Ｖはアルキルであり、Ｒはアルキルである）を有機溶媒中でＮａＮＨ２存在下で加えて
    中間体（６）
    を得る工程；
    ｅ）工程ｄ）で得られた中間体（６）を有機溶媒中でジイソブチルアルミニウムヒドリドを加えて、化合物
    （式中、Ｕ１およびＵ２は、一方は水素またはアルキルであり、他方は、ＣＨ２ＯＨであり、Ｒ１〜Ｒ２４は、請求項１〜５のいずれか１項において定義されたとおりである）を得る工程；
    および必要に応じて、さらなる酸化または置換を行って、請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物を生成させる工程
    を包含する、
    方法。
  19. 請求項１８に記載の方法であって、
    前記Ｘはヒドロキシであり、
    前記Ｙ１およびＹ２は、一方は水素であり、他方はメチロールであり、
    Ｒ１〜Ｒ２４は、すべて水素であり、
    前記有機溶媒は、ＴＨＦであり、
    前記工程１）におけるアルキルリチウムはメチルリチウムであり、
    前記Ｕ１およびＵ２は、一方は水素であり、そして他方は、Ｚ−Ｕであり、ここでＺは、−ＣＨ２−であり、Ｕはヒドロキシであり；
    前記Ｖ１およびＶ２は、一方は水素であり、他方は−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−ＣＨ２ＣＨ３である、
    方法。
  20. 請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物を定量する方法であって、
    １）サンプルを提供する工程；
    ２）該化合物の立体異性体の既知量を該サンプルに添加する工程；
    ３）該サンプルを逆相カラムクロマトグラフィーで分離する工程；および
    ４）分離された該立体異性体から該化合物の量を算出する工程、
    を包含する、方法。
  21. 前記化合物は、下記構造式：
    （ＷＡＦ−１）
    を有し、
    前記立体異性体は、下記構造式：
    （ラブダンａ）
    を有する、請求項２０に記載の方法。
  22. 前記サンプルは、前記逆相カラムクロマトグラフィーでの分離の前に、メタノール抽出され、続いて酢酸エチル抽出される、請求項２０に記載の方法。
  23. 前記逆相カラムクロマトグラフィーでの分離は、
    Ｃ１８逆相カラムクロマトグラフィーによる分離を包含し、該分離は、８０％：２０％（ｖ／ｖ）メタノール：水での第一の分離、および９：８（ｖ／ｖ）アセトニトリル：水での分離を包含する、請求項２０に記載の方法。
  24. 前記算出は、回収率による損失に対する補正を包含する、請求項２０に記載の方法。
  25. ＷＲＫＹファミリーに属する遺伝子の蓄積を必要とする状態にある植物に、該ＷＲＫＹファミリーに属する遺伝子の迅速な蓄積を誘導させるための組成物であって、
    請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物、
    を含む、組成物。
  26. 前記化合物は、下記構造式：
    （ＷＡＦ−１）
    を有する、請求項２５に記載の組成物。
  27. 前記ＷＲＫＹファミリーに属する遺伝子の蓄積を必要とする状態は、ストレスに対する迅速応答を必要とする状態である、請求項２５に記載の組成物。
  28. 前記ＷＲＫＹファミリーに属する遺伝子の迅速な蓄積を誘導させることにより、傷害抵抗性、虫害抵抗性、病害抵抗性および過敏感細胞死に対する抵抗性が前記植物に付与される、請求項２５に記載の組成物。
  29. 前記ＷＲＫＹファミリーに属する遺伝子は、ＷＩＺＺまたはＴＩＺＺである、請求項２５に記載の組成物。
  30. ＷＲＫＹファミリーに属する遺伝子の発現を調節するための組成物であって、
    請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物、
    を含む、組成物。
  31. ＷＲＫＹファミリーに属する遺伝子の蓄積を必要とする状態にある植物に、該ＷＲＫＹファミリーに属する遺伝子の迅速な蓄積を誘導させる方法であって、
    ａ）請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物を該植物に提供する工程、
    を包含する、方法。
  32. 前記化合物は、下記構造式：
    （ＷＡＦ−１）
    を有する、請求項３１に記載の方法。
  33. 前記ＷＲＫＹファミリーに属する遺伝子の蓄積を必要とする状態は、ストレスに対する迅速応答を必要とする状態である、請求項３１に記載の方法。
  34. 前記ＷＲＫＹファミリーに属する遺伝子の迅速な蓄積を誘導させることにより、傷害抵抗性、虫害抵抗性、病害抵抗性および過敏感細胞死に対する抵抗性が前記植物に付与される、請求項３１に記載の方法。
  35. 前記ＷＲＫＹファミリーに属する遺伝子は、ＷＩＺＺまたはＴＩＺＺである、請求項３１に記載の方法。
  36. 前記化合物は、前記ＷＲＫＹファミリーに属する遺伝子の蓄積が必要な状態になった直後に前記植物に付与される、請求項３１に記載の方法。
  37. ＷＲＫＹファミリーに属する遺伝子の発現を調節するための組成物であって、
    請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物、
    を含む、組成物。
  38. 請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物の、植物にストレス耐性を付与または増強するための使用。
  39. 請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物の、ストレス耐性植物を生産するための使用。
  40. 請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物の、ストレス耐性の植物組織を生産するための使用。
  41. 請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物の、ストレス耐性の植物細胞を生産するための使用。
  42. 請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物の、ストレス耐性の植物種子を生産するための使用。
  43. 請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物の、ＷＲＫＹファミリーに属する遺伝子の蓄積を必要とする状態にある植物に、該ＷＲＫＹファミリーに属する遺伝子の迅速な蓄積を誘導させるための使用。
  44. 請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物の、ＷＲＫＹファミリーに属する遺伝子の発現を調節するための使用。
  45. 植物の伸長成長または肥大成長を促進するため、伸長成長を阻害するため、植物組織の成熟を促進するため、または植物の開花を調節するための組成物であって、
    請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物を含む、組成物。
  46. 植物の伸長成長または肥大成長を促進するため、伸長成長を阻害するため、植物組織の成熟を促進するため、または植物の開花を調節するための方法であって、
    ａ）請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物を該植物に提供する工程、
    を包含する、方法。
  47. 請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物の、植物の伸長成長または肥大成長を促進するため、伸長成長を阻害するため、植物組織の成熟を促進するため、または植物の開花を調節するための使用。
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Citations (2)

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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH04342507A (ja) * 1991-05-17 1992-11-30 Meiji Seika Kaisha Ltd 植物生長調節剤ならびに植物のストレス抵抗性を増強する方法
WO1998047362A1 (en) * 1997-04-22 1998-10-29 Biorex Kutató és Fejlesztó Rt. Use of hydroxylamine derivatives, and method and preparations for increasing the tolerance of field crops against weather stresses

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