JP4520359B2 - 粒子捕捉装置、並びに粒子配列方法及び粒子配列装置 - Google Patents
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Description
まず、図1を用いて、表面に生体分子を固定した粒子の調製方法について説明する。m×n個の収納部1を有する粒子収納プレート2と、粒子群と、粒子3を修飾する複数種のDNA、RNA又はタンパク質等の生体分子プローブとを用意する。用意する粒子収納プレート2上の収納部1は、x方向に第1の中心間隔で等間隔に配置されており、x方向と直交するy方向に第2の間隔で等間隔に配置されている。収納部1は円形の上部開口を持ち、z方向に平行な中心軸を持ち、底部を持つ円柱、又は円錐の形状をしている。このような複数の収納部1を有する粒子収納プレート2としては、例えば市販の384穴マイクロタイタープレートを用いることができる。粒子3のサイズは、ガラスキャピラリを粒子捕捉に用いる場合、好適には直径10μm以上の球状のものを使用するのが好ましいが、半導体のエッチング技術で微細加工した専用の粒子捕捉ノズルを使用すれば、直径数μmの粒子も使用できる。
図6は、振動周波数と捕捉された粒子3の個数との関係を示した図である。図5Cのx軸方向に振動させる周波数及び振幅を変化させた時の粒子の捕捉状況を示したものである。実験では、直径0.1mmの粒子を用い、内径0.05mm、外径0.4mmの粒子捕捉ノズル8を用いた。また、収納部1としては、開口部の直径が3.5mmの384穴マイクロタイタープレートのウェルを用いた。収納部1には、薬さじで粒子3を3mg導入し、純水14を60μL加えた。周波数ごとに粒子を補足する操作を10回繰り返し、捕捉された粒子数の平均を算出してグラフ化した。
図9A、図9Bは本発明による単一粒子捕捉装置を具備した粒子アレイ作製装置の構成を示す模式図であり、図9Aは斜視図、図9Bは断面図である。板状の基台18には、本発明の単一粒子捕捉装置を構成する、振動発生機7、粒子収納プレート用ステージ6が設けられ、その上方には、粒子捕捉ノズル保持部材11に保持された粒子捕捉ノズル8が配置されている。粒子捕捉ノズル8は、吸引加圧ポンプ23に接続されている。また、粒子捕捉ノズル保持部材11は、第1の電動アクチュエータ12と第2の電動アクチュエータ13によって駆動される。基台18には移動補助貫通孔19が設けられ、第1の画像センサ20、第2の画像センサ21、粒子導入用吸引ポンプ22が設けられている。24は制御用コンピュータである。
(配列1)5’-thiol-ATCTGACT・・・GCTCCTC-3’
(配列2)5’-thiol-CTACCTGC・・・CTGGACG-3’
(配列3)5’-Cy3-GAGGAGCC・・・GTCAGAT-3’
(配列4)5’-TexasRed-CGTCCAGG・・・CAGGTAG-3’
生体分子プローブを固定するガラス粒子やプラスティック粒子は、大きさにばらつきがあるものが多い。また、遺伝子検査のアッセイ系の違いにより、使用する粒子の大きさが異なる。ここでは、1種類の粒子捕捉ノズル8で、粒子捕捉ノズルの先端孔径よりも大きく、粒子捕捉ノズル8の外径以下である様々な粒子を操作したモデル実験について説明する。
Claims (8)
- 複数の粒子の入った溶液を収納する容器と、
前記容器を振動させるための振動発生機と、
先端に前記粒子の直径より小さい孔が開口し、先端の外径が前記粒子の直径より大きい粒子捕捉ノズルと、
前記粒子捕捉ノズルに連結した吸引機と、
前記粒子捕捉ノズルの先端部を前記容器中の溶液に挿入し、前記先端に1個の粒子を捕捉した状態で引き上げるためのアクチュエータと、
内部を負圧にした前記粒子捕捉ノズルの先端を前記溶液に挿入させた後、前記振動発生機を制御して前記溶液が入った容器を振動させる制御部と
を有することを特徴とする粒子捕捉装置。 - 請求項1記載の粒子捕捉装置において、前記振動発生機は周波数20Hz以上の振動を発生することを特徴とする粒子捕捉装置。
- 請求項2記載の粒子捕捉装置において、前記振動発生機が発生する振動の振幅は0.1mm以上であることを特徴とする粒子捕捉装置。
- 請求項1記載の粒子捕捉装置において、前記振動発生機は、前記容器を前記粒子捕捉ノズルの軸方向に対して垂直な方向に振動させることを特徴とする粒子捕捉装置。
- 請求項1記載の粒子捕捉装置において、前記振動発生機は、前記容器の中心が前記粒子捕捉ノズルの軸方向に垂直な面内で回転するような振動を発生することを特徴とする粒子捕捉装置。
- 生体分子プローブを表面に固定した粒子が複数入った溶液中に挿入される粒子捕捉ノズルの内部を負圧にする工程と、
内部を負圧にした前記粒子捕捉ノズルの先端を、生体分子プローブを表面に固定した粒子が複数入った溶液中に挿入する工程と、
前記容器を振動させる工程と、
先端に1個の粒子を吸引保持した前記粒子捕捉ノズルを前記容器の溶液から引き出す工程と、
前記粒子捕捉ノズルの先端に吸引保持している粒子を粒子配列容器に導入する工程とを有することを特徴とする粒子配列方法。 - 請求項6記載の粒子配列方法において、前記粒子配列容器中に、異なる生体分子プロー
ブを固定した粒子を複数種類、順番を制御して1列に配列することを特徴とする粒子配列
方法。 - それぞれ複数の粒子が入った溶液を収納する複数の容器を保持するステージと、
先端に前記粒子の直径より小さい孔が開口し、先端の外径が前記粒子の直径より大きい
粒子捕捉ノズルと、
前記粒子捕捉ノズルを駆動するアクチュエータと、
前記粒子捕捉ノズルの先端に正又は負の圧力を発生させる吸引加圧手段と、
前記ステージを振動させる手段と、
粒子を収容する粒子配列容器を保持する粒子配列容器保持部と、
制御部とを備え、
前記制御部は、前記アクチュエータを制御して、振動している前記ステージ上の容器に
前記粒子補足ノズルを挿入し、前記吸引加圧手段を制御して前記粒子捕捉ノズルの先端に
負の圧力を発生させて先端に1個の粒子を捕捉した状態で、前記アクチュエータを制御し
て前記粒子捕捉ノズルを前記容器から引き上げ、次に、前記アクチュエータを制御して、
先端に1個の粒子を捕捉した前記粒子補足ノズルを前記粒子配列容器の位置に移動させ、
前記吸引加圧手段を制御して前記先端に正の圧力を発生させて捕捉した粒子を前記粒子配
列容器に導入することを特徴とする粒子配列装置。
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