JP4508638B2 - 子宮内器具、該器具の作成方法、および子宮腔内に活性要素を挿入する方法 - Google Patents
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Description
2つ以上の卵母細胞を確実に成熟させるため、実際の受精手順の前に女性にホルモン処理を行う。通常は、脳(視床下部および下垂体)と卵巣との間の正常なホルモン制御信号を阻害する要素(GnRHアゴニスト)を14〜21日間投与する。その後、比較的多量のFSH(卵胞刺激ホルモン)を卵巣の反応に応じて10〜20日間投与する。FSHによって、それぞれ卵母細胞を1個含む多数の卵胞の成熟が促される。卵母細胞が排卵可能な状態になったら、ヒト絨毛性ゴナドトロピン(hCG)を投与することにより卵母細胞を最終的に成熟させる。
インビボで成熟させた卵母細胞を、超音波ガイド下卵胞穿刺によって女性の卵巣から採取する。
体外受精は、精子を卵母細胞に加える(体外受精(IVF))、または成熟した各卵母細胞に精子を1つずつマイクロインジェクトする(細胞質内精子注入(ICSI))ことによって行う。受精させた卵母細胞を生殖管外のIVF培地で2〜5日間培養する。
胚を2〜5日間インビトロで培養した後、数個の胚を選択し、細いカテーテルを使用して女性の子宮に移植する。体外受精および胚培養の最終的な目的は、正常に発育を続け出産に至ることができる、質の高い胚を提供することである。
ほぼ20年間にわたってIVFによる治療が行われており、且つ、最近では細胞質内精子注入(ICSI)による治療が行われているにもかかわらず、移植胚1つあたりの着床率は低いままにとどまっており、平均約20%である。
・非生分解性
・半透性
・高分子材料(すなわち、ポリエーテルスルフォンまたはPES。供給者=Akzo Nobel Faser AG(ドイツ、Wuppertal))の中空繊維(ポリアクリラート(共重合体を含む)、ポリビニリデン、ポリウレタンなど)
・細孔:子宮液中に存在する低分子〜高分子の透過性に関して最適な環境の質をもつよう適合されている必要がある
・細孔のサイズ:0.005μm以上=分子量カットオフ値150〜280 kDa
・細孔の構造:ミクロ細孔または任意の適切な構造
・外径=子宮用カテーテルに入れて子宮頸を通過させるのに最適なサイズに適合させる(すなわち、700μm)
・内径=卵子もしくは胚のサイズに適合させるか(すなわち、500μm)、卵子もしくは胚のサイズの約5倍とするか(放射冠を有する卵子のサイズ=ヒトで200μm)、または、送達する分子のサイズに適合させる
・長さは子宮腔に適合させ、これにより、子宮拡張による子宮内膜病変および有害要因、ならびに、排出を回避する(すなわち、約1.5 cm)
・円筒形、または上記の事項を考慮した、子宮腔に適合した任意の形状。
・アクリラートベースの接着剤(Luxtrack LCM 23(米国、Ablestik社))またはキャップなど他の任意のシステムにより閉鎖された遠位部(A)、および、中空であり、且つ、1センス方向(内側)のバルブにより開放可能である近位部(B)
・ゾーンA支持部は、材料が支持部と同様の材料または他の材料であり子宮内で該器具を安定的に配置させるような、2つの羽または他の任意の器具を含む(液体接触時に厚みを増す薄い親水性の材料で覆われた、支持部と同様の材料の非対称な羽を含んでいてもよい)
・ゾーンB支持部は、該器具を回収するための除去用糸を取り付けるためのシリコーン製つなぎを含む
・該要素をカプセル化に適した形式で提供する段階
・カプセル化した要素の収容に適した回収可能な子宮内器具を提供する段階
・該器具に該要素を装填する段階。
・回収可能な子宮内器具を提供する段階
・該器具を既定の期間にわたって子宮腔内に埋植する段階。
調整した精子および採取した卵母細胞を、子宮内に埋植するためカプセル化器具に注入する。インビボ且つ子宮内における既定且つ制御されたインキュベーション時間(例えば2時間)の経過後、カプセル化した精子および卵母細胞を回収し、接合子および/または受精していない卵母細胞を単純な洗浄手順後に収集する。低温保存用の接合子を選別するか、または3日目に移植するため残りの胚をインビトロ培養する。
調整した精子および採取した卵母細胞を、従来法で体外受精させる。異なる発育段階(すなわち6〜8細胞期)の胚数個を細胞カプセル化器具に注入し、これにより、制御された時間(すなわち48時間)にわたる子宮腔内への埋植を可能にする。子宮からカプセル化システム器具を取り出した後、胚盤胞段階の胚を器具から洗い流し、従来の移植用カテーテルを使用して子宮腔内に移植するか、または凍結後にさらなるサイクルにおいて後に使用する。
最近、インビトロプログラムでよく研究および記述された胚盤胞のハッチングプロセスが、齧歯目における自然の事象であると誤って受け入れられていることが示された(Gonzalesら、2001)。事実、ハムスター種では、子宮から分泌されるプロテイナーゼからなる、透明帯からの胚盤胞の脱出に対するインビボでの子宮の寄与が、子宮内の透明帯消失に関する主要な機序であり、インビトロでみられる溶解作用は栄養外胚葉の侵襲的挙動により生じる副次的な機序であると考えられる。
本実験は、改良した半透性の中空繊維をカプセルとしてマウスモデルで使用し、インビボ且つ子宮内で着床前の胚発育を行う能力を評価することを目的として実施した。
マウスエリトロポイエチン(Epo)を分泌するマウスC2C12細胞を、改良および発明したようにカプセル化し、これを使用して子宮内へEpoを送達すると、子宮内膜のアポトーシスが減少し、且つ血中ヘマトクリット値が上昇する。このことは、Epoが付近の子宮内膜組織に直接作用を及ぼすこと、ならびに、子宮から送達されたEpoが全身に作用を及ぼすことを示唆している。
Claims (11)
- 胚、雄性および/または雌性配偶子、受精卵母細胞、未受精卵、ならびにこれらの任意の組み合わせを含む群より選択される1つ以上の要素が装填されたカプセルと、
前記カプセルに充填された前記要素に、子宮腔から十分な栄養素を移送することを可能にするために、適合孔サイズを有する選択的透過性膜を含む手段を含む、完全に回収可能な子宮内器具。 - 膜がポリエーテルスルフォンから構成される、請求項1記載の回収可能な子宮内器具。
- 子宮内で器具を安定に位置づけることを可能にする手段を含む、請求項1〜2のいずれか一項記載の回収可能な子宮内器具。
- 50,000以上の分子量カットオフ値を有する、請求項1〜3のいずれか一項記載の回収可能な子宮内器具。
- 100万を超える分子量カットオフ値を有する、請求項1〜4のいずれか一項記載の回収可能な子宮内器具。
- カプセルが、生体高分子材料、例えば、ポリエーテルスルフォン、中空繊維、例えば、ポリアクリレートおよびアクリレートコポリマー、ポリビニリデン、ならびにポリウレタンから構成される、請求項1〜5のいずれか一項記載の回収可能な子宮内器具。
- カプセルが150kDa〜280kDaの孔サイズを有する、請求項1〜6のいずれか一項記載の回収可能な子宮内器具。
- 胚が装填される、請求項1〜7のいずれか一項記載の回収可能な子宮内器具。
- ヒトの子宮腔内に配置することが可能な、請求項1〜8のいずれか一項記載の回収可能な子宮内器具。
- 以下の段階を含む、回収可能な子宮内器具を準備する方法:
・胚、雄性および/または雌性配偶子、受精卵母細胞、未受精卵、ならびにこれらの任意の組み合わせを含む群より選択される1つ以上の要素を提供する段階、
・完全に回収可能な子宮内器具を提供する段階であって、前記子宮内器具が、カプセルと、該カプセルにおける前記要素に、子宮腔から十分な栄養素を移送することを可能にするために、適合孔サイズを有する選択的透過性膜を含む手段とを提供する子宮内器具である前記段階、ならびに
・前記器具内の前記カプセルに前記要素を装填する段階。 - 要素が、雄性および/または雌性配偶子を含む群より選択される、請求項10記載の方法。
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