JP4484149B2 - 酵素活性測定方法 - Google Patents

Description

本発明は、酵素の活性の測定に用いられる酵素活性測定方法に係り、特に、転写された検体によって変化する試験紙の色を測定することによって、検体に含まれる酵素の活性を測定する酵素活性測定方法に関する。

唾液に含まれるアミラーゼ（酵素の一種）の活性を測定することにより、被検者のストレスの程度や、疾患を有無の判定が可能であることが知られている。

アミラーゼは、唾液のみならず、血液などの検体にも含まれているため、血液に含まれるアミラーゼの活性を測定することによっても、被検者のストレスの程度をなど測定することができる。しかしながら、血液の採取は、一般的に、被検者の苦痛を伴うことがあるなど、唾液の採取と比較して簡便な方法ではない。

一方、唾液の採取は容易である。但し、唾液に含まれるアミラーゼの活性は、血液に含まれるアミラーゼの活性よりも高い。このため、アミラーゼの活性値を測定する試薬紙（試薬含有部材）に唾液を直接浸潤させると、試薬紙に含まれる試薬の反応がすぐに進行して終了するため、試薬紙が同様に変色してしまい、アミラーゼの活性の差（違い）を測定することが困難となる。

そこで、使用者が、唾液（検体）が浸潤している不織布などの検体含有部材と、試薬紙などの試薬含有部材とを指で挟んで、唾液を試薬含有部材に所定の時間転写させ、唾液が転写した試薬含有部材の色の濃度を検出することによって、唾液に含まれるアミラーゼの活性値を測定する方法が提案されている。（例えば、特許文献１）。
特開２００４−１２１２１４号公報

しかしながら、アミラーゼ（唾液）の量、具体的には、唾液に反応する基質を含む試薬紙に転写された唾液の量、及び転写からの経過時間によって、試薬紙の変色に大きな違いが現われる。特に、転写からの経過時間の違いによって、試薬紙の色が大きく変化する。

上述したように、従来技術では、使用者が、試薬紙と唾液が含まれている不織布とを指で挟むことによって、試薬紙へ唾液を転写しているため、不織布が試薬紙に押し付けられる力がばらつき、試験紙に転写される唾液の量が一定とはならないといった問題があった。

また、従来技術では、試薬紙に唾液を転写した後、当該試薬紙を測定装置に挿入し、試薬紙の色の濃度を検出しているが、唾液の転写を開始した時刻から試薬紙の色を測定する時刻との間隔が一定とはならないといった問題もあった。

すなわち、従来技術では、アミラーゼの活性値を正確に測定することができないという問題があった。なお、この問題は、アミラーゼ以外の酵素、唾液以外の検体においても発生する。

そこで、本発明は、このような問題点に鑑みてなされたものであり、酵素の活性を測定する酵素活性測定試薬を用いて酵素の活性値を測定する場合において、酵素の活性値をより正確に測定することができる酵素活性測定方法を提供することを目的とする。

上述した問題を解決するため、本発明は、次のような特徴を有している。本発明の特徴は、酵素（例えば、アミラーゼ）の活性を測定する酵素活性測定試薬を含んだ試薬含有部材（試薬含有部材１３）と、検体含有部材（唾液採取シート１５）に含まれた検体（例えば、唾液）とを離隔して配置する試薬・検体配置ステップと、前記試薬・検体配置ステップにおいて配置された前記試薬含有部材と前記検体とを接触させ、前記試薬含有部材に所定量の前記検体を転写する検体転写ステップと、前記検体が転写されたときから所定の時間が経過したときに、前記試薬含有部材に含まれる試薬の色の濃度を測定する濃度測定ステップと、前記濃度測定ステップにおいて測定された前記濃度に基づいて、前記検体に含まれる酵素の活性値を検出する酵素活性検出ステップとを備え、前記試薬・検体配置ステップでは、前記試薬含有部材の平面部分である試薬含有部材平面と、前記検体含有部材の平面部分である検体含有部材平面とが略平行になるように対向させて弾性を有するホルダー（ホルダー１７）に配置され、前記検体転写ステップでは、前記ホルダーを押圧する押圧面（押圧面２３７ｐｐ）、及び前記押圧面に対向するカム当接面（カム当接面２３７ｃｐ）を有し、前記ホルダーを押圧する押圧方向に沿って移動可能な可動部材（可動部材２３７）と、回動軸（回動軸２３４）からの距離が他の部分よりも長い外周面の一部に平面部分（平面部分２３１ｐ）を有するカムと、第１の方向に回動することによって、前記平面部分を前記カム当接面と当接させる転写レバー（転写レバー２３２）と、前記カムを前記第１の方向と反対方向である第２の方向に回動するように付勢する第１の付勢部材（コイルバネ２３３）と、前記可動部材を前記カムの方向に付勢する第２の付勢部材（コイルバネ２３９）とを具備する検体転写部（検体転写部２００）により、前記平面部分が前記カム当接面に押し当てられ、前記押圧方向に沿って前記可動部材が移動し、前記押圧面によって前記ホルダーが押圧させられることによって前記ホルダーが撓ませられた状態で、前記試薬含有部材平面と前記検体含有部材平面とが所定の圧力で所定の時間に渡って接触させられる酵素活性測定方法であることを要旨とする。

本発明の特徴によれば、酵素の活性を測定する酵素活性測定試薬を用いて酵素の活性値を測定する場合において、酵素の活性値をより正確に測定することができる酵素活性測定方法を提供することができる。

［第１実施形態］
本発明に係る酵素活性測定装置の第１実施形態について説明する。図１は、本発明の第１実施形態に係る酵素活性測定装置１の概略構成を示す斜視図である。図２は、図１に示すＦ２方向からの酵素活性測定装置１の斜視図である。

なお、図１では、カバー３が開いている状態が示されており、図２では、カバー３が閉じられている状態が示されている。

酵素活性測定装置１は、酵素活性測定試薬を用いて酵素の活性を測定するものである。なお、以下の説明では、唾液（ヒトの唾液）を検体の例として、アミラーゼを酵素の例として説明するが、本発明は、唾液、アミラーゼに限定されるものではない。

酵素活性測定装置１は、酵素活性測定試薬のひとつであるアミラーゼ活性測定試薬を含んだ試薬含有部材１３と、唾液を含んだ唾液採取シート１５とを離隔して配置する試薬・検体配置部５を備えている。

また、酵素活性測定装置１は、配置されている試薬含有部材１３と唾液（唾液採取シート１５）とを接触させ、試薬含有部材１３に所定量の唾液を転写する検体転写部７を備えている。

さらに、酵素活性測定装置１は、唾液が転写されたときから所定の時間が経過したときに、試薬含有部材１３に含まれる試薬の色の濃度を測定する濃度測定部９を備えている。なお、検出したアミラーゼの活性値は、ＬＣＤパネル１１７Ａ（図２参照）に表示される。

ここで、アミラーゼについて説明する。代表的なアミラーゼとして、主にヒトの唾液腺や膵腺より分泌されるα−アミラーゼがある。アミラーゼは、デンプン、アミロースなどの多糖類を加水分解する分子量５４，０００〜６２，０００の消化酵素である。

唾液中のアミラーゼの活性値は、体調による変動や、個人差が非常に大きいことが知られている。正常値は数万ＩＬ／Ｕ程度であるが、体調や体質によっては、健常人においても１０万ＩＬ／Ｕを超える場合がある。

本実施形態において用いられるアミラーゼの活性値を測定するための試薬の基質には、修飾オリゴ糖が使用される。修飾とは、オリゴ糖の末端、還元末端に識別標識化合物が結合されていることを意味し、アミラーゼまたは共役酵素によって遊離され得る。修飾オリゴ糖の糖数はＧ２〜Ｇ７であり、好ましくはＧ２〜Ｇ５である。

修飾化合物は、色原体といわれるものが一般的に使用でき、好適な基としては、例えば、４−ニトロフェノール（ＰＮＰ）、２−クロロ−４−ニトロフェノール（ＣＮＰ）、２，４−ジクロロフェノール（Ｃｌ２Ｐ）がある。

このような色原体で修飾された修飾オリゴ糖の具体例としては、２−クロロ−４−ニトロフェノール−４−Ｏ−β−Ｄ−ガラクトピラノシルマルトサイド（以下 ＧＡＬ−Ｇ２−ＣＮＰ）、ＧＡＬ−Ｇ−４−ＣＮＰ、ＧＡＬ−Ｇ５−ＣＮＰ、Ｇ５−ＣＮＰ（２−クロロ−４−ニトロフェニル−マルトペンタオース）、Ｇ７−ＣＮＰ、Ｇ５−ＰＮＰ（ｐ−ニトロフェニル−マルトペンタオース）、Ｇ６−ＣＮＰ（２−クロロ−ｐ−ニトロフェニルマルトテトラオース）、Ｇ７−ＰＮＰがあげられる。

これらの修飾オリゴ糖のうち、特に、アミラーゼによる加水分解時の切断箇所が１箇所に限定されるＧＡＬ２−Ｇ２−ＣＮＰやＧＡＬ−Ｇ４−ＣＮＰなどが好ましい。修飾オリゴ糖を一般式で表すと以下になる。

式中のＲ１、Ｒ２はそれぞれ水素原子あるいは保護基を意味する。保護基は格別限定されるものではないが、非置換または置換の低級アルキル基、低級アルコキシル基またはフェニル基、アジド基、ハロゲン原子、Ｎ−モノアルキルカルバモイルオキシ基、アルキル若しくはアリールスルホニルオキシ基またはアルキルオキシ基、α−グルコシル基、α−マルトシル基、β−ガラクトシル基などである。また、Ｒ１、Ｒ２は互いに架橋していてもよく、この架橋基にさらに置換基を有していてもよい。

Ｒ３はシグナル発生基、例えば光学的にシグナルを検出可能な基（好適には発色性芳香族基）であり、ｎは０〜５である。上記式では、−ＯＲ３は、還元性末端グルコースの一部にβ−が結合したものであるが、α−が結合したものであってもよい。

本実施形態に係るアミラーゼ活性測定試薬（試薬含有部材１３）では、基質が支持体（ろ紙などの試薬紙）に担持されている。

なお、“支持体に担持”とは、水不溶性の有機または無機担体に、基質と競合阻害剤とが固定化またはトラップされている状態をいう。支持体の形状は、薄膜であることが好ましく、支持対の厚さは、厚さ１００μｍ〜５００μｍ、好ましくは１５０μｍ〜４００μｍである。

また、薄膜は、白色であることが好ましい。薄膜の材質は、ニトロセルロース、多孔性ガラス、または紙が好ましいが、これに限定されず、上述した基質を効率的に担持できるものであれば広く利用可能である。なお、本実施形態では、試薬が紙以外の材料（上述したニトロセルロースなど）の支持体に担持されている場合でも、適宜「試薬紙」と記載するが、「試薬紙」には、当該紙以外の材料も含むものとする。

支持体による修飾オリゴ糖の担持量は、一定に調整されることが好ましい。簡便な方法としては、修飾オリゴ糖基質を２〜５００ｍｍｏｌ／Ｌを含有する溶液中に支持体を約１〜５分間含浸させ、それを乾燥させて得る方法がある。

本実施形態におけるアミラーゼの活性値の測定では、基質の修飾物質であるＣＮＰやＰＮＰなどの色原体の遊離による、試薬支持体の発色による吸光度の変化に基づいて、アミラーゼの活性値が決定される。例えば、ＣＮＰは、４０５ｎｍの吸光度で測定される。

通常、この色原体の遊離は、大過剰のアミラーゼの作用のみによって可能である。また、アミラーゼの加水分解反応後に、アミラーゼとα−グルコシタ−ゼ、β−グルコシターゼなどによって色原体を遊離させる反応を含んだ共役酵素法が、必要によって用いられる。この場合、追加の酵素を試薬として添加する手段の導入が必要となる。また、反応促進のため、公知のα−アミラーゼの活性剤を用いてもよい。

当該測定における反応温度は、特に限定されないが、好ましくは概ね摂氏２５度〜４０度である。反応時間は、１〜１０数分であるが、基質及び共役酵素の種類に依存する。

発色による変化の測定には、後述するＬＥＤ２１、フォトダイオード２３などが用いられれ、支持体の発色による吸光度の変化は、反射光又は透過光によって測定することができる。

測定用の光源としては、発光ダイオード（図５に示すＬＥＤ２１）の他に、レーザ、ハロゲンランプ、タングステンランプなどを用いることができる。なお、光源は、これらに限定されるものではない。

試薬含有部材１３は、シート状の部材である。また、唾液採取シート１５もシート状の部材（例えば不織布）によって構成されている。

試薬・検体配置部５は、試薬含有部材１３の平面部分である平面状部１３Ａ（試薬含有部材平面）と、唾液を含んだ唾液採取シート１５の平面部分である平面状部１５Ａ（検体含有部材平面）とが略平行になるように対向させて配置するものである。

また、試薬・検体配置部５は、試薬含有部材１３と検体（唾液）を含んだ唾液採取シート１５とを保持するホルダー１７を用いて、試薬含有部材１３と検体を含んだ唾液採取シート１５と離隔して配置する。

検体転写部７は、試薬含有部材１３の平面状部１３Ａと唾液採取シート１５の平面状部１５Ａとを、所定の圧力で所定の時間に渡って接触させるものである。

具体的には、検体転写部７は、後述するカム４１によって、ホルダー１７を押圧し、平面状部１３Ａと、平面状部１５Ａとを接触させる。より具体的には、検体転写部７は、試薬含有部材１３が保持されている試薬保持部分１７Ａと、試薬保持部分１７Ａの近傍とを所定量変形させ、平面状部１３Ａと平面状部１５Ａとを接触させるようになっている。

なお、試薬含有部材１３が保持されている試薬保持部分１７Ａと試薬保持部分１７Ａの近傍とに代えて、唾液採取シート１５が保持されている部分と、当該部分の近傍を変形させてもよい。すなわち、試薬含有部材１３が保持されている試薬保持部分１７Ａまたは唾液採取シート１５が保持されている部分（近傍を含む）の少なくとも一方を所定量変形させ、平面状部１３Ａと、平面状部１５Ａとを互いに接触させるようにしてもよい。

濃度測定部９は、上述したように、試薬含有部材１３に含まれる試薬の色の濃度を測定するものである。

具体的には、図５に示すように、濃度測定部９は、ＬＥＤ２１によって、平面状部１３Ａに対して略直角に光を照射し、平面状部１３Ａから反射する反射光を、平面状部１３Ａに対して斜め方向から、フォトダイオード２３（以下、ＰＤ２３）を用いて測定することによって、試薬含有部材１３（平面状部１３Ａ）の色の濃度を測定する。

また、ＰＤ２３は、光ファイバ２５を介して、平面状部１３Ａからの反射光を受光する。酵素活性測定装置１は、濃度測定部９へ外乱光が侵入することを抑制するカバー３を備えている。なお、カバー３が閉じられると、ホルダー１７が台座２９に固定される。

さらに、検体転写部７はカバー３に設けられており、カバー３が閉じられると、ホルダー１７の試薬保持部分１７Ａを変形させて、平面状部１３Ａと平面状部１５Ａとを接触させることができるように構成されている。

ここで、試薬・検体配置部５及び検体転写部７について、詳細に説明する。図３は、図２に示したＦ３−Ｆ３方向の断面図である。同図では、試薬・検体配置部５によって、試薬含有部材１３と唾液採取シート１５とが配置されている。また、同図では、検体転写部７によって、試薬含有部材１３と唾液採取シート１５とが接触している状態が示されている。

図４は、図３に示したＦ４方向の断面図である。図４では、理解を容易にするため、試薬含有部材１３、試薬含有部材１３が保持されている試薬保持部分１７Ａ、唾液採取シート１５、及び検体転写部７の一部が示されている。なお、試薬保持部分１７Ａは、ホルダー１７の内面側に設けられている。

また、図１に示すように、唾液採取シート１５は、長い板状の基材２７（例えば、白色の合成樹脂）の一端部の片面に設けられている。ホルダー１７は直方体状であり、ホルダー１７の内部に基材２７を挿入することができるように構成されている。

また、試薬含有部材１３が保持される試薬保持部分１７Ａは、ホルダー１７の上面に位置し、試薬保持部分１７Ａは、ホルダー１７の長手方向に略平行に延びた切込み１７Ｂによって、板バネとして機能する。

さらに、図４に示すように、試薬保持部分１７Ａの長手方向の両端部には、円弧状の円弧部分１７Ｃが形成されており、試薬保持部分１７Ａが容易に撓むように構成されている。

唾液採取シート１５が設けられた基材２７を、ＡＲ１方向（図１参照）からホルダー１７に挿入し、唾液採取シート１５が破線で示す位置Ｐとなるようにホルダー１７を台座２９にセットすると、試薬含有部材１３（平面状部１３Ａ）と、唾液採取シート１５（平面状部１５Ａ）とが、離隔して配置される。

台座２９は、酵素活性測定装置１の上面に設けられており、酵素活性測定装置１の長さ方向に延び、溝状の形状を有している。また、台座２９を含む酵素活性測定装置１の筐体１Ａは、黒色の合成樹脂によって構成されている。

ホルダー１７が台座２９にセットされた場合、試薬保持部分１７Ａと対向するホルダー１７の底面１７Ｄと、台座２９の底面２９Ａとが面接触する。さらに、ホルダー１７の端面１７Ｅと、台座２９の端面２９Ｂとが面接触するとともに、ホルダー１７の側面１７Ｆと、台座２９の側面２９Ｃとが面接触する。

また、ホルダー１７の側面に設けられた突起１７Ｇと、台座２９の側面２９Ｃに設けられた切欠き２９Ｄとが接触する。このようにホルダー１７が台座２９にセットされるため、ホルダー１７は、酵素活性測定装置１の上側方向以外の方向に移動できないようになる。

また、ホルダー１７は、上面、下面及び各側面の形状が異なるため、容易かつ精度良くホルダー１７を台座２９へセットすることができる。また、ホルダー１７は、正しい向き以外では台座２９へセットすることができず、使用者の操作ミスを防止することができる。

次に、検体転写部７について説明する。図３に示すように、検体転写部７は、箱状のカバー３の内面３Ａに垂直に立設する円柱状のガイド部３１と係合し、内面３Ａに接近したり、離隔したりする板状の可動部３３を有している。なお、可動部３３の平面状部３３Ａ、３３Ｂは、内面３Ａと略平行である。なお、カバー３及び可動部３３は、本実施形態では、黒色の合成樹脂によって構成されている。

また、内面３Ａには、内面３Ａに垂直に立設する円柱状のガイド部３５が設けられている。ガイド部３５の先端部３５Ａには、ガイド部３５の外径よりも大きな外径を有するバネ保持部３７が設けられている。

さらに、バネ保持部３７と、可動部３３との間には、コイルバネ３９が設けられている。すなわち、可動部３３は、コイルバネ３９によって、内面３Ａの方向に付勢されている。

また、可動部３３の平面状部３３Ｂ（内面３Ａ側）には、カム４１が当接し、カム４１の回動に応じて、可動部３３が移動するようになっている。カム４１は、回動軸４１ｒを中心として回動可能であり、カム４１の一端部には、使用者がカム４１を回動させるための転写レバー４１Ａが設けられている。

なお、図３及び図４では、試薬含有部材１３と唾液採取シート１５とが、接触した状態が示されている。一方、図４において、二点鎖線で示すように（または図２において二点鎖線で示す状態から実線で示す状態に）、カム４１を回動させると、コイルバネ３９によって、可動部３３がＡＲ３の方向（図３参照）、つまり、内面３Ａの方向に移動し、試薬含有部材１３と唾液採取シート１５とが離隔させられる。

なお、カム４１は、酵素活性測定装置１の使用者が、手動で操作するが、カム４１に代えて、後述するＣＰＵ１０１の制御によって、ホルダー１７を押圧するソレノイドなどを作動させてもよい。また、カム４１が試薬含有部材１３と唾液採取シート１５とを接触させている状態では、カム４１の位置は保持され、勝手に回動してしまうことはない。

可動部３３の平面状部３３Ａには、試薬保持部分１７Ａを押圧する直方体状の転写パッド４３（押圧部材）が設けられている。転写パッド４３は、例えば、金属などの硬質な部材によって構成されている。

カバー３は、ヒンジ３Ｇ（回動軸、図１参照）を中心に回動する。図２に示すように、ヒンジ３Ｇを中心としてカバー３を回動させることによって、カバー３を閉じることができる。カバー３が閉じられると、フック４５を用いて、カバー３が開放しないように固定することができる。

転写レバー４１Ａを回動させて、可動部３３をホルダー１７の方向に移動させると、試薬保持部分１７Ａは、転写パッド４３によって押されて変形し、試薬含有部材１３と唾液採取シート１５とが所定の圧力で接触する。

なお、図１に示すように、内面３Ａにはリブ３Ｂが設けられており、カバー３が閉じられると、リブ３Ｂの端面３Ｃが、ホルダー１７の上面部分１７Ｈと接触して、上面部分１７Ｈを僅かに付勢する。このため、ホルダー１７は、上方向に移動できないように固定される。

また、内面３Ａには、突起３Ｄが設けられており、カバー３が閉じられると、突起３Ｄが、筐体１Ａに設けられている孔１Ｂに挿入される。

孔１Ｂに挿入された突起３Ｄは、筐体１Ａの内部に設けられているリミットスイッチ（不図示）を作動させ、カバー３が閉じられたことが検出される。

また、上述したように、カバー３が閉じられると、台座２９などへの光の到達は遮断される。カバー３が閉じられると、カバー３の開口部周辺の端面３Ｅと、台座２９の周辺の平面状部１Ｃとが接触する。当該接触した部分の上下方向の位置と、台座２９の底面２９Ａ（具体的には、ＰＤ２３が設けられている基板４７の上面４７Ａ、図５参照）とでは、底面２９Ａが、当該接触した部分よりも上側に位置している。

この理由は、外乱光による測定への悪影響を防止するためである。すなわち、外乱光（太陽光や電燈の光）は、通常の状態では、上方向から下方向に降り注ぐため、上述したように、底面２９Ａを、当該接触した部分よりも上側に位置させれば、外乱光による測定への悪影響を防止することができる。

可動部３３には、突起３３Ｃが設けられており、カバー３が閉じられると、突起３３Ｃが、筐体１Ａに設けられている孔１Ｄに挿入される。

可動部３３がホルダー１７を押圧する状態（図３や図４に示す状態）に移動すると、孔１Ｄに挿入された突起３３Ｃによって、筐体１Ａの内部に設けられているリミットスイッチ（不図示）が作動し、試薬含有部材１３への唾液の転写が検出される。

検体転写部７によれば、可動部３３及び転写パッド４３が平行移動するため、ホルダー１７に均一な荷重を掛けられる。このため、ムラのない均一な唾液の転写を実現することができる。また、転写レバー４１Ａが用いられるため、ホルダー１７に過大な荷重が掛かることが防止される。

また、カバー３に検体転写部７が設けられているため、酵素活性測定装置１を小型化することができる。さらに、カバー３によって容易に暗室状態を作り出すことができ、測定への悪影響の原因となる外乱光を効果的に遮断することができる。

また、上述したように、試薬含有部材１３の発色の変化を測定する場合、試薬含有部材１３と唾液採取シート１５とを接触させる時間の精密な管理が必要である。検体転写部７によれば、可動部３３の動作に応じて作動するリミットスイッチが設けられているため、試薬含有部材１３と唾液採取シート１５とが接触している時間、つまり、唾液の転写時間を正確に検出することができる。

また、転写パッド４３が、金属などの硬質部材で構成されているため、転写パッド４３の磨耗を防ぐことができる。また、転写パッド４３が、可動部３３とは別部材で構成されているので、転写パッド４３の形状、材質、硬さなどの仕様変更に容易に対応することができる。

さらに、転写レバー４１Ａを回動させるだけで唾液の転写を行えるため、従来技術と比較して、容易かつ確実な唾液の転写を実現することができる。

次に、濃度測定部９について、詳細に説明する。図５は、濃度測定部９の概略断面図である。

上述したように、濃度測定部９は、試薬含有部材１３（平面状部１３Ａ）の色の濃度を測定するものである。

濃度測定部９は、検体転写部７によって唾液の転写が開始されてから所定の時間が経過したときに、試薬含有部材１３（平面状部１３Ａ）の色の濃度を測定する。

また、濃度測定部９による色の濃度の測定時には、基材２７はホルダー１７から抜き取れられる。つまり、ＬＥＤ２１（光ファイバ２５），ＰＤ２３と、試薬含有部材１３（平面状部１３Ａ）との間には、何も介在しない状態となる。なお、基材２７は、図２に示すように、カバー３が閉じられていても、カバー３に設けられた切欠き部３Ｆを介して抜き取ることができる。

ＬＥＤ２１、ＰＤ２３及び光ファイバ２５は、黒色の合成樹脂で構成された基板４７に設けられており、基板４７の上面４７Ａは、台座２９の底面２９Ａと略同一の高さに位置している。また、上面４７Ａと、平面状部１３Ａとは、略平行になるように配置されている。

また、ＬＥＤ２１と平面状部１３Ａの中心部とを結ぶ直線ＣＬ１は、平面状部１３Ａに対して略直角であり、ＰＤ２３と平面状部１３Ａの中心部とを結ぶ直線ＣＬ３は、平面状部１３Ａに対して斜めになっている。

平面状部１３Ａからの反射光をＰＤ２３で計測する場合、試薬含有部材１３（試験紙）の発色部位（平面状部１３Ａ）との角度（角度θ）は、０〜５０度、好ましくは１０〜４５度、より好ましくは１０度〜３０度である。

また、平面状部１３ＡとＰＤ２３との距離は、１０〜３０ｍｍ、好ましくは１５ｍｍ〜２５ｍｍ、より好ましくは１８ｍｍ〜２２ｍｍである。さらに、試薬スポット径（光が照射された部分の径）が１ｍｍ〜５ｍｍ、好ましくは２ｍｍ〜４ｍｍ、より好ましくは２．５ｍｍ〜３．５ｍｍである。

なお、濃度測定部９では、試薬含有部材１３の色の濃度を測定しているが、試薬含有部材１３に含まれる試薬の反応の程度（試薬の濃度）を検出することが可能であれば、他の方法を用いてもよい。

次に、アミラーゼによる試薬の基質の分解について説明する。図６は、基質とアミラーゼとが接触した場合における酵素反応の程度と経過時間との関係を示すグラフである。ここで、同図に示すグラフＧ１は、アミラーゼの活性が低い場合を示しており、グラフＧ３は、アミラーゼの活性が中程度の場合を示している。また、グラフＧ５は、アミラーゼの活性が高い場合を示している。

同図に示すように、アミラーゼの活性が高いほうが、酵素反応がより早く進行する。なお、酵素反応は、基質が分解されてなくなるまで行われる。酵素反応が行われるにしたがって、試薬含有部材１３は、黄色が濃くなるように発色する。

図７は、ＰＤ２３によって検出された反射光に基づいて変換された出力電圧と、経過時間との関係を示すグラフである。図７に示すグラフＧ７は、アミラーゼの活性が低い場合を示しており、グラフＧ９は、アミラーゼの活性が中程度の場合を示している。また、グラフＧ１１は、アミラーゼの活性が高い場合を示している。

図８は、基質とアミラーゼとが接触した場合における基質の濃度と、経過時間との関係を示すグラフである。図８に示すグラフＧ１３は、アミラーゼの活性が低い場合を示しており、グラフＧ１５は、アミラーゼの活性が中程度の場合を示している。また、グラフＧ１７は、アミラーゼの活性が高い場合を示している。

図８に示すように、アミラーゼの活性が高いほうが、短時間により多くの酵素反応が起こり、基質の濃度が低下する。

上述したように、唾液が含まれている唾液採取シート１５と試薬含有部材１３（試験紙）とが接触した時点から酵素反応（アミラーゼによる基質の分解反応）が始まる。唾液採取シート１５から試薬含有部材１３（試験紙）全体へ唾液が浸潤していく間にも、接触表面部分では反応が進行する。酵素反応が始まる時点は、試薬含有部材１３の色の濃度を測定するための基準となるため、上述したように、当該時点を正確に検出することができるようなっている。

なお、唾液の転写に要する時間は、唾液採取シート１５に含まれている唾液が試薬含有部材１３（試験紙）全体に浸潤できる時間であればよい。但し、必要以上に転写を継続すると、溶解した基質が唾液採取シート１５へと逆転写してしまい測定の誤差の原因となるので、適切な時間で転写を終了させることが好ましい。

唾液の転写は、上述したように、転写レバー４１Ａを二点鎖線で示す位置から実線で示す位置に回動することによって終了させる（図２参照）。換言すれば、転写レバー４１Ａを戻すという簡単な操作によって、唾液の転写を終了させる。

転写レバー４１Ａを戻すことによって、平面状部１３Ａと平面状部１５Ａとが互いに離隔し、唾液の転写が終了する。

また、使用者が手動で転写レバー４１Ａを戻すようにしているが、転写レバー４１Ａを戻すタイミングは、例えば、酵素活性測定装置１に設けられているブザーを鳴動させることによって、使用者に通知される。なお、ブザーを鳴動させるタイミングは、突起３３Ｃによってリミットスイッチが作動させられてから所定の時間（例えば、１０秒）が経過したときに設定される。

唾液の転写が終了すると、使用者によって、基材２７が酵素活性測定装置１から抜き取られ、濃度測定部９による測定が遅滞なく行われる。

アミラーゼの活性値の測定は、上述したように、酵素反応が終了してしまう前に行う必要がある。また、測定値は、酵素反応の開始時点からの経過時間によって変化する。そこで、唾液の転写の開始時点からの経過時間がリアルタイムクロックＩＣ（図９に示すＣＰＵ１０１）によって計測され、予め設定された時間が経過すると、自動で測定が行われる。

以上説明した本実施形態に係る酵素活性測定装置１によれば、次の作用・効果を得ることができる。

まず、それほど精度が必要ではない転写や転写の解除操作を手動としたことで、検体転写部７の部品点数が削減でき構成を簡素にすることができる。

また、ＣＰＵ１０１を用いて、唾液の転写時間を計測することによって、唾液の転写開始からの経過時間を正確に管理することができる。また、所定時間が経過した場合、ブザーが鳴動するため、必要以上に唾液の転写が継続されてしまうことが防止される。

次に、試薬含有部材１３に含まれている試薬の発色について詳細に説明する。試薬の発色は、酵素反応によって発色物質の濃度が増加することであるが、発色の程度を肉眼で定量的に把握することは一般的に困難である。

そこで、発色の程度を定量化するために、発色する色の波長に応じた波長を有する光をＬＥＤ２１から試薬含有部材１３（試験紙）に照射し、照射した光の反射光や散乱光の輝度をＰＤ２３が測定する。

上述したように、ＬＥＤ２１、ＰＤ２３及び光ファイバ２５は、基板４７にすべて装着される。本実施形態では、ＬＥＤ２１として、ピーク波長４３０ｎｍのダイオードが用いられ、ＰＤ２３として、波長４３０〜４５０ｎｍに感度を有するフォトダイオードが用いられている。

また、光ファイバ２５として、単芯タイプのセンサー用光ファイバが用いられている。さらに、台座２９の底面２９Ａと、基板４７とは、艶消しの黒色が着色されている。

ＬＥＤ２１から照射された光は、絞り部（不図示）によって所定のスポット径に絞られ、当該絞られた光が、試薬含有部材１３（平面状部１３Ａ）に照射される。ここで、当該照射された光は、透過、散乱または反射を起こし、一部の光が光ファイバ２５を介してＰＤ２３に到達する。ＰＤ２３は、光ファイバ２５を介して到達した光の照度に応じた電圧（具体的には、ＰＤ２３から出力された電流値に基づいて変換された電圧値）を図７に示したように出力する。

また、底面２９Ａと基板４７とは艶消しの黒色に着色されているため、ＬＥＤ２１から漏れた光や侵入してきた光の乱反射が防止される。さらに、スポット径を試薬含有部材１３（平面状部１３Ａ）の大きさに合わせることによって、平面状部１３Ａ以外への光の照射を防ぎ、誤差の原因となる乱反射を小さくすることができる。

また、ＬＥＤ２１から照射される光の焦点をぼかすことによって、平面状部１３Ａを均一照射することができ、平面状部１３Ａ（試薬）の色の濃度を安定して測定することができる。

また、発色した試薬の色の吸光度は、波長の帯域が４２０〜４５０ｎｍにおいて、変化が最も著しい。このため、当該波長に合わせたＬＥＤ２１を用いることで、感度良く発色した試薬の色の濃度（発色の程度）を検出できる。

さらに、４３０〜４５０ｎｍに感度を有するＰＤ２３を用いることによって、余分な外乱光の影響を低減でき、Ｓ／Ｎ比のよい出力電圧を得ることができる。

また、光ファイバ２５が用いられるため、反射光の減衰を抑制することができ、高感度な照度の検出が可能となる。さらに、試薬含有部材１３とＰＤ２３とが同じ雰囲気にない（つまり、離隔されている）ため、ＰＤ２３の干渉フィルター（不図示）に対する湿気（唾液による湿気）の影響を少なくすることができる。

また、ＬＥＤ２１とＰＤ２３とが、基板４７の同一面上に取り付けられるため、効率的に基板４７（濃度測定部９）を組み立てることができる。

次に、アミラーゼの活性値の測定結果などを表示する動作などについて説明する。濃度測定部９によって測定された光の照度は、ＰＤ２３の電流値として出力される。したがって、当該電流値をアミラーゼの活性値に変換する必要がある。

そこで、酵素活性測定装置１に搭載される電子回路基板は、検量線を記憶し、アミラーゼの活性値、もしくは目的とする指標に換算する機能を有している。

当該電子回路基板は、測定手順を案内する機能や、リアルタイムクロックなどの機能も有している。

図９は、ＣＰＵ基板１００のブロック構成を、図１０は、センサー基板１２１のブロック構成を示している。ＣＰＵ１０１は、２５６ｋＢフラッシュロムを内蔵し、プログラムの書き換えに対応している。発振部１０３は、ＣＰＵ１０１にクロック信号を供給する。なお、本実施形態では、ＣＰＵ１０１は、唾液に含まれるアミラーゼの活性値を検出する酵素活性検出部を構成する。

通信部１０５は、ＲＳ２３２Ｃドライバなどによって構成されており、測定データを出力したり、書き換え用プログラムをダウンロードするために用いられる。クロック部１０７は、リアルタイムクロックＩＣからなり、正確なタイミング信号を生成する。

記憶部１０９には、測定時間や測定結果に関するデータなどを記憶させておくことができ、要求に応じて当該データを出力させることができる。ブザー出力部１１１は、エラーの発生時や、使用者に操作（例えば、唾液の転写を終了させる操作）を促すときなどに、可聴音を発生する回路である。

電源部１１３は、筐体１Ａの内部に装填される電池の電圧を所望の電圧に変換し、ＣＰＵ１０１などへ供給する回路などによって構成されている。バックアップ電源部１１５は、記憶部１０９やクロック部１０７に記憶されているデータをバックアップするために用いられる。

液晶表示部１１７は、操作メニューや操作案内、測定結果などを表示するものである。スイッチ部１１９は、電源スイッチや、カーソルスイッチなどと、当該スイッチの動作を検出する回路によって構成されている。

センサー基板１２１は、図１０に示すように、Ａ−Ｄ変換において用いられる基準電圧を生成するリファレンス電圧生成部１２３、ＬＥＤ２１へ定電流を供給するＬＥＤ駆動部１２５、ＰＤ２３によって出力される電流値を電圧値へ変換して増幅するＰＤアンプ部１２７、及び温度検出部１２９から構成されている。

また、センサー基板１２１には、カバースイッチ（突起３Ｄによって作動するリミットスイッチ）、及び転写開始スイッチ（突起３３Ｃによって作動するリミットスイッチ）の作動を検出するスイッチ作動検出部１３１が設けられている。

次に、酵素活性測定装置１を用いて、アミラーゼの活性値を測定する動作について説明する。

上述したように、酵素活性測定装置１は、試薬含有部材１３と、唾液が含まれている唾液採取シート１５とを離隔させて配置する。次いで、酵素活性測定装置１は、配置されている試薬含有部材１３と唾液採取シート１５とを接触させ、試薬含有部材１３に所定量の唾液を転写させる。

さらに、酵素活性測定装置１は、唾液の転写が開始されたときから所定の時間が経過したときに、試薬含有部材１３における試薬の濃度（色の濃度）を測定し、当該測定した濃度に基づいて、唾液に含まれているアミラーゼの活性値を演算する。

図１１〜１３は、酵素活性測定装置１を用いて、アミラーゼの活性値を測定する動作を示している。

まず、ステップＳ１において、使用者は、酵素活性測定装置１の電源スイッチを投入する。

電源スイッチが投入されると、ステップＳ３において、基板４７に設けられているＬＥＤ２１が点灯する。さらに、ステップＳ５において、ＣＰＵ１０１が初期化され、ステップＳ７において、バックアップされたデータのエラーチェックが行われる。

ステップＳ９において、ＬＣＤパネル１１７Ａにタイトルが表示され、ステップＳ１１において、操作メニューが表示される。

次いで、ステップＳ１３において、カバースイッチの作動状態が検出され、ステップＳ１５において、カバー３が開いているか否かが判定される。カバー３が閉じられていることが検出された場合（ステップＳ１５のＹｅｓ）、ステップＳ１７において、ＬＣＤパネル１１７Ａに「ＯＰＥＮ ＣＯＶＥＲ」の文字が表示され、ステップＳ１３の処理に戻る。

一方、カバー３が開いていることが検出された場合（ステップＳ１５のＮｏ）、ステップＳ１９において、ＬＣＤパネル１１７Ａに「ＳＥＴ ＵＮＩＴ ＣＯＶＥＲ ＣＬＯＳＥ」の文字が表示され、ステップＳ２１において、カバー３が閉じられたか否かが検出される。

なお、「ＳＥＴ ＵＮＩＴ ＣＯＶＥＲ ＣＬＯＳＥ」の表示に応じて、使用者は、唾液採取シート１５が設けられた基材２７をホルダー１７に挿入し、基材２７が挿入されたホルダー１７を、台座２９の所定の位置にセットする。次いで、使用者は、カバー３を閉じ、フック４５に用いて、カバー３を固定する。

カバー３が閉じられた場合（ステップＳ２１のＹｅｓ）、ステップＳ２３及びＳ２５において、ＬＣＤパネル１１７Ａに「ＣＡＬＩＢＲＡＴＩＮＧ」の文字が表示され、酵素活性測定装置１は、出力が安定（例えば、３秒）するまで待機する。

ステップＳ２７において、酵素活性測定装置１は、基材２７の白色の部分（唾液採取シート１５が設けられている部分の裏側）に、ＬＥＤ２１から光を照射し、ＰＤ２３の出力電流値を測定し、当該電流値を電圧値に変換する。

電圧値が４Ｖよりも高い場合（ステップＳ２９のＮｏ）、ステップＳ３１において、ＬＣＤパネル１１７Ａにエラーの文字が表示されるともに、ビープ音が鳴動する。

一方、出力電圧が４Ｖ以下の場合（ステップＳ２９のＹｅｓ）、ステップＳ３３において、酵素活性測定装置１は、測定した電圧値を基準電圧として記憶部１０９に格納する。さらに、ステップＳ３５において、ＬＣＤパネル１１７Ａに「ＰＵＬＬ ＵＰ ＴＨＥ ＬＥＶＥＲ」の、文字が表示される。

ステップＳ３５における表示に基づいて、使用者は、転写レバー４１Ａを回動させること（図２において二点鎖線で示す位置まで回動させる）によって、唾液の転写が開始される。

ステップＳ３７及びＳ３９において、酵素活性測定装置１は、唾液の転写が開始されたか否か（及び唾液の転写が途中であるか否か）を、突起３３Ｃによって作動したリミットスイッチによって検出する。

転写レバー４１Ａが回動されていない場合、つまり、唾液の転写開始が検出できない場合（ステップＳ３９のＮｏ）、酵素活性測定装置１は、ステップＳ３５からの処理を繰り返す。

一方、唾液の転写開始が検出された場合（ステップＳ３９のＹｅｓ）、ステップＳ４１において、酵素活性測定装置１は、転写時間の測定を開始（Ｔ０をセット）する。また、ステップＳ４３において、ＬＣＤパネル１１７Ａに「ＴＲＡＮＳＣＲＩＰＴＩＮＧ」の文字が表示される。

ステップＳ４５において、酵素活性測定装置１は、転写の開始から１０秒（Ｔ１）が経過したか否かを検出する。

転写の開始から１０秒が経過していない場合（ステップＳ４５のＮｏ）、酵素活性測定装置１は、ステップＳ４３からの処理を繰り返す。

一方、転写の開始から１０秒が経過した場合（ステップＳ４５のＹｅｓ）、ステップＳ４７においてビープ音が鳴動する。さらに、ステップＳ４９において、ＬＣＤパネル１１７Ａに「ＰＵＳＨ ＲＥＬＥＡＳＥ ＢＵＴＴＯＮ ＳＬＩＤＥ ＴＨＥ ＳＨＥＥＴ」の文字が表示される。

ステップＳ４７におけるビープ音や、ステップＳ４９における表示に応じて、使用者は、転写レバー４１Ａを回動させるとともに、基材２７をホルダー１７（酵素活性測定装置１）から抜き取り、唾液の転写を終了させる。

ステップＳ５１及びＳ５３において、酵素活性測定装置１は、測定を開始する。すなわち、酵素活性測定装置１は、ＬＥＤ２１を発光させて、試薬含有部材１３を照射するとともに、ＰＤ２３によって反射光を測定する。

ステップＳ５５において、酵素活性測定装置１は、測定した反射光に関するデータを記憶部１０９に格納する。

ステップＳ５７において、酵素活性測定装置１は、図２において実線で示す位置に転写レバー４１Ａが戻っているか否かを検出する。転写レバー４１Ａが戻っていない場合（ステップＳ５７のＮｏ）、ステップＳ６１において、ＬＣＤパネル１１７Ａに「ＰＵＳＨ ＲＥＬＥＡＳＥ ＢＵＴＴＯＮ ＳＬＩＤＥ ＴＨＥ ＳＨＥＥＴ」の文字が表示される。

一方、転写レバー４１Ａが図２において実線で示す位置に戻っていることを検出した場合（ステップＳ５７のＹｅｓ）、ステップＳ５９において、ＬＣＤパネル１１７Ａに、ＰＤ２３による測定に基づく測定値（アミラーゼの活性値）と電圧値とが表示される。

ステップＳ６３において、酵素活性測定装置１は、唾液の転写が開始された時刻（時刻Ｔ０）から、所定の時間（Ｔ２）が経過したか否かを判定する。

所定の時間が経過していない場合（ステップＳ６３のＮｏ）、酵素活性測定装置１は、ステップＳ５３からの処理を繰り返す。

一方、所定の時間が経過した場合（ステップＳ６３のＹｅｓ）、ステップＳ６５において、ビープ音が鳴動し、ステップＳ６７において、ＬＣＤパネル１１７Ａに「ＭＥＡＳＵＲＥ ＣＯＭＰＬＥＴＥ」の文字が表示される。

さらに、ステップＳ６９において、ＬＣＤパネル１１７Ａに測定データの一覧が表示される。なお、測定データとは、アミラーゼの活性値に関するデータであり、ステップＳ２７において測定された電圧値と、ステップＳ５３において測定された電圧値とに基づいて演算される試薬の濃度（色の濃度もしくは発色の程度）に関するデータである。

ステップＳ７１において、酵素活性測定装置１は、ＭＯＤＥボタン（不図示）が押下されたか否かを検出する。ＭＯＤＥボタンが押下された場合、ステップＳ７３において、ＬＣＤパネル１１７Ａに再び操作メニューが表示される。

（作用・効果）
以上説明した本発明の第１実施形態に係る酵素活性測定装置１によれば、試薬含有部材１３に唾液を所定量正確に転写することができるとともに、唾液が転写されたときから所定の時間が経過したときに、試薬含有部材１３における試薬の濃度（試薬の発色の程度）が測定されるため、唾液に含まれるアミラーゼの活性値を正確に検出することができる。

また、酵素活性測定装置１によれば、試薬含有部材１３の平面状部１３Ａと、唾液採取シート１５の平面状部１５Ａとが略平行になるように対向させて配置され、平面状部１３Ａと平面状部１５Ａとが、所定の圧力で所定の時間だけ接触させられるため、試薬含有部材１３への唾液の転写量を略一定にすることができる。

また、酵素活性測定装置１によれば、ホルダー１７を用いることによって、試薬含有部材１３と唾液採取シート１５とが離隔して配置される。さらに、ホルダー１７を所定量変形させることによって唾液の転写が行われるため、唾液を転写する操作、すなわち、アミラーゼの活性値を測定する操作が簡素化される。

さらに、酵素活性測定装置１によれば、試薬の色の濃度を測定することにより、試薬含有部材１３に含まれる試薬の濃度を検出することができるので、試薬の濃度を容易に測定することができる。

また、酵素活性測定装置１によれば、濃度測定部９へ外乱光が侵入することを抑制する開閉可能なカバー３が設けられているため、カバー３が開いているときには、酵素活性測定装置１への試薬含有部材１３やホルダー１７などのセットが容易である。

さらに、カバー３が閉じられたときには、外乱光を遮断して試薬含有部材１３の色を正確に検出することができる。また、カバー３がホルダー１７を固定する形態であるため、酵素活性測定装置１の構成が簡素である。

また、酵素活性測定装置１の濃度測定部９によれば、ＬＥＤ２１が試薬含有部材１３に光を均一に照射し、ＰＤ２３が試薬含有部材１３に対して斜め方向から反射光を受光する。このため、ＰＤ２３は、平均化された安定した反射光を受光することができ、試薬含有部材１３の色を正確に測定することができる。

また、酵素活性測定装置１の濃度測定部９によれば、ＰＤ２３が、光ファイバ２５を介して反射光を受光して測定するため、ＰＤ２３の設置位置を柔軟に設定できる。さらに、ＰＤ２３の先端に設けられているフィルター（不図示）を、試薬含有部材１３から離隔して設けることができるため、水分に弱いフィルターが損傷することが回避される。

また、酵素活性測定装置１によれば、検体として唾液が用いられるため、検体として血液や尿を用いる場合と比較して、容易に（例えば、被検者に苦痛を与えることなく）検体を採取することができる。

さらに、ヒトの唾液に含まれるアミラーゼの活性値を簡便に測定することを可能とする酵素活性測定装置１によれば、被験者のストレスレベルを検出する簡便かつ効果的な手段を提供することができる。

具体的には、被験者（使用者）は、安静時に採取した唾液に含まれるアミラーゼの活性値を測定し、測定した活性値を酵素活性測定装置１に基準値として記憶する。

その後、被験者は、所定の状態（例えば、ストレスを受けている状態）におけるアミラーゼの活性値を測定し、測定した活性値と基準値と比較する。基準値より測定した活性値が大きければ、不快なストレス（ｄｉｓｔｒｅｓｓ）を受けていると判定でき、小さければ、快適なストレス（ｅｕｓｔｒｅｓｓ）を受けていると判定できる。

また、基準値と測定した活性値との差が大きいほど、受けているストレスも大きいと判断でき、身体的または精神的に受けているストレスの程度も判定できる。

さらに、アミラーゼの活性値を継続して測定することによって、経時的なストレスの変化を捉えることができる。不快なストレス（ｄｉｓｔｒｅｓｓ）を受けた場合、唾液に含まれるアミラーゼの活性値が上昇する。この場合、正の時間勾配の大きさによって、ｄｉｓｔｒｅｓｓの大きさの程度を判定することができる。

一方、快適なストレス（ｅｕｓｔｒｅｓｓ）を受けた場合、アミラーゼの活性値が低下するため、負の時間勾配の大きさによって、ｅｕｓｔｒｅｓｓの大きさの程度も判定できる。

さらに、アミラーゼの活性値を継続して測定することによって、被験者に特定のストレスを加える前後におけるアミラーゼの活性値の変化を捉え、当該ストレスを加える前の活性値（基準値）に戻るまでの時間・変化の大きさからストレスの大きさの程度を判定することもできる。

［第２実施形態］
（酵素活性測定装置の概略構成）
次に、本発明に係る酵素活性測定装置の第２実施形態について説明する。図１４は、本発明の第２実施形態に係る酵素活性測定装置２００の斜視図である。酵素活性測定装置２００は、上述した本発明の第１実施形態に係る酵素活性測定装置１を改良したものである。

そこで、以下、酵素活性測定装置１と異なる部分について主に説明し、酵素活性測定装置１と同様の構成や機能については、その説明を適宜省略する。

図１４に示すように、酵素活性測定装置２００の筐体２２０の表面には、カバー開放ボタン２５０、ＬＣＤパネル２７０及びスイッチ部２８０が設けられている。酵素活性測定装置２００は、内部に装填される単４型乾電池４本、またはＡＣ電源を接続することに作動する。

なお、ＬＣＤパネル２７０は、上述した酵素活性測定装置１のＬＣＤパネル１１７Ａ（図２参照）と同様の機能を有している。また、スイッチ部２８０は、酵素活性測定装置１のスイッチ部１１９（図９参照）と同様に、ＣＰＵ１０１に接続されている。

また、酵素活性測定装置２００のカバー２１０には、筐体２２０内に設けられている台座２２９（図１４において不図示、図１６参照）にセット可能なホルダー１７（図１参照）を押圧する検体転写部２３０が設けられている。

図１５は、酵素活性測定装置２００の平面図である。図１５に示すように、カバー２１０は、ヒンジ２１５（回動軸）を中心として開閉するように構成されている。図１６は、ヒンジ２１５を中心としてカバー２１０を開放した状態を示している。

図１６に示すように、本実施形態に係る検体転写部２３０は、カバー２１０に設けられている。また、検体転写部２３０には、本実施形態に係る試薬・検体配置部を構成する台座２２９にセットされるホルダー１７を押圧する金属製の転写パッド２４０（押圧部材）が設けられている。なお、台座２２９は、上述した酵素活性測定装置１の台座２９と同様の形状を有している。さらに、本実施形態では、台座２２９の下方に、台座２２９にセットされるホルダー１７が保持する検体を所定温度（例えば、摂氏２０度）に温めるヒータ２６０が設けられている。

また、酵素活性測定装置２００（筐体２２０）には、一対のフック２５７（端部２５７ｅ）が設けられている。さらに、カバー２１０には、カバー２１０が閉じられた状態でフック２５７が挿入される一対の挿入孔２１０ａが設けられている。

フック２５７は、挿入孔２１０ａへの挿入方向に付勢されており、カバー開放ボタン２５０が押下されると、筐体２２０内部の方向に引き込まれるように構成されている。すなわち、フック２５７によって、カバー２１０が閉じられた状態で固定される。

また、カバー２１０を閉じると、カバー２１０の上端部２１０ｔｅは、インナーカバー２２５の上端部２２５ｔｅに当接するように構成されている。同様に、カバー２１０の下端部２１０ｂｅは、インナーカバー２２５の下端部２２５ｂｅと当接するように構成されている。

（カバー開閉機構）
次に、図１７及び図１８を参照して、酵素活性測定装置２００が具備するカバー開閉機構について説明する。図１７は、図１５に示したＦ１７−Ｆ１７方向の断面図である。また、図１８は、当該カバー開閉機構の動作を説明するための説明図である。

同図に示すように、筐体２２０には、カバー開放ボタン２５０、コイルバネ２５１、プッシュロッド２５２、レバー２５３、回動軸２５４、連結ピン２５５、支持軸２５６及びフック２５７が設けられている。

カバー開放ボタン２５０は、カバー２１０を開放する場合に押下されるボタンである。すなわち、唾液採取シート１５が挿入されたホルダー１７を台座２２９にセットする場合や、測定が完了したホルダー１７を台座２２９から取り外す場合、カバー開放ボタン２５０が押下される。

また、カバー開放ボタン２５０は、コイルバネ２５１に挿通されたプッシュロッド２５２に連結されており、押下されることによって、レバー２５３を押圧し、レバー２５３を回動させる。本実施形態では、カバー開放ボタン２５０とプッシュロッド２５２とによって、カバー開放ボタン部を構成する。

また、同図に示すように、カバー２１０の上端部２１０ｔｅは凸状であり、インナーカバー２２５の上端部２２５ｔｅは凹状である。すなわち、凸状の上端部２１０ｔｅは、凹状の上端部２２５ｔｅに嵌まるように構成されている。

さらに、インナーカバー２２５の下端部２２５ｂｅは、筐体２２０よりも少し隆起しており、
カバー２１０の下端部２１０ｂｅと当接するように構成されている。

レバー２５３は、フック２５７と係合され、回動軸２５４を中心として回動する。レバー２５３は、フック２５７を挿入孔２１０ａの挿入方向、及び挿入方向と反対方向に移動させるものであり、本実施形態では、突起部材移動レバーを構成する。

また、レバー２５３の上縁には、レバー２５３とフック２５７とを連結する連結ピン２５５が挿通されている。なお、レバー２５３は、内部に設けられたバネによって、フック２５７を挿入孔２１０ａの挿入方向に付勢している。なお、本実施形態では、強度を確保するため、回動軸２５４、支持軸２５６及びフック２５７は、金属を用いて構成されている。

フック２５７は、支持軸２５６によって支持されており、カバー２１０が閉じられた状態において、検体転写部２３０がホルダー１７を押圧するＡＲ１０の方向（押圧方向）と略直交する直交方向に移動できるように構成されている。

具体的には、図１８に示すように、カバー開放ボタン２５０が、ＡＲ１１の方向に押下されると、レバー２５３が回動軸２５４を中心として、ＡＲ１２の方向に回動する。さらに、連結ピン２５５によってレバー２５３に連結されているフック２５７は、ＡＲ１３の方向（挿入孔２１０ａの挿入方向と反対方向）に移動させられる。

フック２５７がＡＲ１３の方向に移動させられると、フック２５７の端部２５７ｅは、挿入孔２１０ａから引き出される。挿入孔２１０ａからフック２５７が引き出されると、ヒンジ２１５の内部に設けられているバネによって、カバー２１０は、ＡＲ１４の方向に回動する。

（検体転写部）
次に、図１９及び図２０を参照して、酵素活性測定装置２００が具備する検体転写部２３０について説明する。図１９は、図１５に示したＦ１９方向から捉えた検体転写部２３０の側面図である。また、図２０は、検体転写部２３０の動作を説明するための説明図である。

同図に示すように、検体転写部２３０は、カム２３１、転写レバー２３２、可動部材２３７、転写パッド２４０、及びベース板２４１を有している。検体転写部２３０は、ユニットとして組み立てられ、組み立てられた検体転写部２３０が、ビスを用いてカバー２１０に取り付けられる。

可動部材２３７は、試薬含有部材１３及び唾液採取シート１５を保持するホルダー１７を押圧する転写パッド２４０と接合される押圧面２３７ｐｐと、押圧面２３７ｐｐと対向するカム当接面２３７ｃｐとを有し、ホルダー１７を押圧する押圧方向に沿って移動可能に構成されている。

カム２３１は、回動軸２３４を中心として回動するカムであり、回動軸２３４からの距離が他の部分よりも長い外周面の一部に平面部分２３１ｐを有している。

転写レバー２３２は、図２０に示すように、ＡＲ１５の方向（第１の方向）に回動することによって、カム２３１の平面部分２３１ｐを可動部材２３７のカム当接面２３７ｃｐと当接させるものである。

具体的には、転写レバー２３２は、カム２３１と同様に、回動軸２３４を中心として回動できるように構成されている。転写レバー２３２がＡＲ１５の方向に回動すると、転写レバー２３２に隣接するカム２３１は、回動軸２３４を中心として回動させられ、平面部分２３１ｐが可動部材２３７のカム当接面２３７ｃｐに当接する。

ガイド棒２３８は、可動部材２３７が可動できるように、ベース板２４１に取り付けられている。また、ガイド棒２３８は、可動部材２３７をカム２３１の方向に付勢するコイルバネ２３９（第２の付勢部材）に挿通されている。

ベース板２４１は、係止突起２４１ａ、係止突起２４１ｃ及び回動軸支持部分２４１ｅを有している。

係止突起２４１ａには、係止孔２４１ｂが設けられており、係止孔２４１ｂと、カム２３１に設けられている係止孔２３１ａとには、カム２３１をＡＲ１５の方向（第１の方向）と反対方向であるＡＲ１７の方向（第２の方向）に回動するように付勢するコイルバネ２３３（第１の付勢部材）が取り付けられている。

また、係止突起２４１ｃには、係止孔２４１ｄが設けられており、係止孔２４１ｄと、転写レバー２３２に設けられている係止孔２３２ａとには、転写レバー２３２をＡＲ１７の方向（第２の方向）に回動するように付勢するコイルバネ２３５（第３の付勢部材）が取り付けられている。

回動軸支持部分２４１ｅは、回動軸２３４の両端を回動可能に支持するものである。

次に、図２０を参照して、検体転写部２３０の動作について説明する。使用者によって転写レバー２３２がＡＲ１５の方向に回動させられると、カム２３１は、回動軸２３４を中心として回動させられ、平面部分２３１ｐがカム当接面２３７ｃｐに当接する。

平面部分２３１ｐは、回動軸２３４からの距離が他の部分よりも長い外周面に設けられているため、可動部材２３７は下方に移動させられる。

可動部材２３７が下方に移動させられると、可動部材２３７の押圧面２３７ｐｐに接合されている転写パッド２４０が、ホルダー１７を押圧して変形させる。ホルダー１７が変形すると、ホルダー１７によって保持されている試薬含有部材１３（平面状部１３Ａ）と、唾液採取シート１５（平面状部１５Ａ）とが接触し、唾液採取シート１５に含まれている唾液の転写が開始される。

ここで、可動部材２３７（及び転写パッド２４０）は、押圧して変形させられているホルダー１７及びコイルバネ２３９の反力によって、カム２３１の方向に荷重が掛かる。このため、平面部分２３１ｐと押圧面２３７ｐｐとが当接した状態で保持され、試薬含有部材１３と唾液採取シート１５とが接触した状態、すなわち、“唾液の転写状態”が保持される。

つまり、転写レバー２３２は、Ｐ_２の位置で保持される。なお、転写レバー２３２は、Ｐ_１の位置から、転写レバー２３２の端部２３２ｅが可動部材２３７と接触するＰ_３の位置の間において、自由に回動することができる。

“唾液の転写状態”は、使用者が、Ｐ_２に位置する転写レバー２３２を下方（Ｐ_１方向）に軽く押すことによって解除される。具体的には、転写レバー２３２は、コイルバネ２３５によって、ＡＲ１７の方向に回動するように付勢されている。また、カム２３１は、コイルバネ２３３によって、ＡＲ１７の方向に回動するように付勢されている。

したがって、転写レバー２３２を軽く押すことによって、転写レバー２３２及びカム２３１がＡＲ１７の方向に回動させられ、“唾液の転写状態”が解除される。

なお、カバー２１０（図１６参照）が閉じられていない場合、可動部材２３７（及び転写パッド２４０）は、ホルダー１７からの反力を得ることができない。また、カム２３１は、コイルバネ２３３によって、ＡＲ１７の方向に回動するように付勢されている。すなわち、検体転写部２３０は、カバー２１０が閉じられていない場合、平面部分２３１ｐと押圧面２３７ｐｐとが当接した状態で保持されることが回避できるように構成されている。

（検体温度補償機構）
次に、酵素活性測定装置２００が具備する検体温度補償機構について説明する。酵素活性測定装置２００は、上述した本発明の第１実施形態に係る酵素活性測定装置１と概ね同様のＣＰＵ基板１００及びセンサー基板１２１（図９及び図１０参照）を有している。

酵素活性測定装置２００が具備する検体温度補償機構とは、（１）検出したアミラーゼの活性値を補正する機能、及び（２）検体を保温する機能を有している。

（１）アミラーゼの活性値の補正
酵素活性測定装置２００の温度検出部１２９（図１０参照）は、検体、すなわち、唾液が転写された試薬含有部材１３の温度である検体温度を検出するものである。

具体的には、温度検出部１２９には、赤外線を検出するフォトダイオード２６（以下、ＰＤ２６）が接続されている。

図２１は、酵素活性測定装置２００に設けられる濃度測定部９’の概略構成図である。濃度測定部９’は、上述した酵素活性測定装置１の濃度測定部９（図５参照）に、ＰＤ２６が追加されている。

ＰＤ２６は、唾液が転写された試薬含有部材１３から放射される赤外線の強度を検出する。ＰＤ２６に接続されている温度検出部１２９は、検出された赤外線の強度に基づいて、試薬含有部材１３の放射温度を演算することによって、検体温度を検出する。

また、酵素活性測定装置２００の記憶部１０９（図９参照）は、温度検出部１２９によって検出された検体温度と、ＣＰＵ基板１００によって検出されたアミラーゼの活性値を補正する補正割合とが対応付けられた検体温度補正データも記憶することができ、本実施形態では、検体温度補正データ記憶部を構成する。

図２２（ａ）は、検体温度と、当該検体に含まれているアミラーゼの活性割合との関係（温度特性）を示すグラフである。同図（ａ）では、摂氏３７度（ヒトの体温）におけるアミラーゼの活性値が１００％で示されている。

同図（ａ）に示すように、例えば、検体温度が摂氏１０度まで低下すると、アミラーゼの活性値は、摂氏３７度における活性値の約２０％程度まで低下（実測値）する。つまり、検体（唾液）に含まれるアミラーゼの活性は、温度に大きく依存するのである。

すなわち、測定時の温度によって測定の誤差が大きくなる。そこで、本実施形態では、図２２（ｂ）に示す検体温度補正データが用いられる。

図２２（ｂ）は、図２２（ａ）に示した温度特性に基づいて決定された検体温度の補正曲線を示している。当該補正曲線は、一般的な室内の温度、及び検量線が摂氏２５度を基準として設定されていることを考慮して、摂氏２５度を基準として決定されている。なお、基準とする温度は、２５度以外であってもよい。

また、酵素活性測定装置２００のＣＰＵ１０１（図９参照）は、温度検出部１２９によって検出された検体温度と、記憶部１０９に記憶されている検体温度補正データとに基づいて、検出したアミラーゼの活性値を補正することができ、本実施形態では、活性値補正部を構成する。

具体的には、図２３に示す処理フローによって、検出したアミラーゼの活性値が補正される。図２３は、酵素活性測定装置１の動作フローにおけるステップＳ５３と、ステップＳ５５との間（図１３参照）において実行される動作フローを示している。

図２３に示すように、ステップＳ５４ａにおいて、酵素活性測定装置２００は、試薬含有部材１３からの反射光を測定するＰＤ２３が出力する電流値が変換された電圧値である出力電圧の値を、アミラーゼの活性値に換算する。

また、ステップＳ５４ｂにおいて、酵素活性測定装置２００は、唾液が転写された試薬含有部材１３の温度（検体温度）を検出する。具体的には、酵素活性測定装置２００は、上述したように、ＰＤ２６によって、試薬含有部材１３（試験紙）から放射される赤外線の強度を検出する。

ステップＳ５４ｃにおいて、酵素活性測定装置２００は、ステップＳ５４ｂにおいて検出した検体温度と、記憶されている検体温度補正データ（図２２（ｂ）参照）に基づいて、アミラーゼの活性値の補正割合を演算する。

なお、ステップＳ５４ｂ及びＳ５４ｃの処理は、ステップＳ５４ａの処理と並行して、またはステップＳ５４ａの処理に先立って実行することができる。

ステップＳ５４ｄにおいて、酵素活性測定装置２００は、ステップＳ５４ｃにおいて演算した補正割合を用いて、ステップＳ５４ａにおいて換算したアミラーゼの活性値を補正する。

ステップＳ５４ｅにおいて、酵素活性測定装置２００は、補正したアミラーゼの活性値をＬＣＤパネル２７０に表示する。

（２）検体の保温
上述したアミラーゼの活性値の補正によって、測定時の温度による測定の誤差を抑制することができる。しかしながら、測定時の温度が低温（摂氏１０度以下）の場合、図２２（ａ）に示したように、アミラーゼの活性は大きく低下する。

アミラーゼの活性が大きく低下すると、アミラーゼが含まれているにもかかわらず、試薬含有部材１３に含まれている試薬が反応しない場合がある。この場合、上述した補正を適用することもできない。

そこで、酵素活性測定装置２００は、上述したように、台座２２９にセットされる検体（唾液）を所定温度（例えば、摂氏２０度）に温めるヒータ２６０が設けられている。

具体的には、図２４に示すように、台座２２９の下方に、電熱線を用いて構成されるヒータ２６０が設けられている。また、ヒータ２６０が発した熱を効率的に試薬含有部材１３に伝導させるため、台座２２９は、熱伝導率が良好なアルミニウム合金によって構成されている。

また、酵素活性測定装置２００のＣＰＵ１０１（図９及び図１０参照）は、検体温度が、所定温度に到達したことを検出した場合、ヒータ２６０の作動を停止することができ、本実施形態では、ヒータ制御部を構成する。

さらに、ヒータ２６０を具備したことによって、酵素活性測定装置２００の消費電力が増大するため、酵素活性測定装置２００には、別体式のバッテリパックを接続できるようになっている。

（作用・効果）
以上説明した酵素活性測定装置２００に設けられるカバー開閉機構によれば、検体転写部２３０がホルダー１７を押圧するＡＲ１０の方向（押圧方向）と略直交する直交方向に移動できるようにフック２５７が構成されている。

このため、ホルダー１７の押圧に伴う荷重がフック２５７に掛かった場合でも、カバー２１０（挿入孔２１０ａ）がフック２５７から外れ、カバー２１０が開いてしまうことを防止することができる。

すなわち、酵素活性測定装置１では、ホルダー１７を押圧する押圧方向と、フック４５に荷重が掛かる方向とが同様であったため、転写レバー４１Ａを回動させてホルダー１７を押圧すると、フック４５が外れて、カバー３が開いてしまう場合があった。酵素活性測定装置２００では、ホルダー１７の押圧に伴ってカバー２１０が開いてしまうことが確実に防止できる。

さらに、当該カバー開閉機構によれば、カバー開放ボタン２５０が設けられているため、使用者は、カバー開放ボタン２５０を押すだけで、容易にカバー２１０を開放することができる。

また、当該カバー開閉機構によれば、カバー２１０（上端部２１０ｔｅ，下端部２１０ｂｅ）及びインナーカバー２２５（上端部２２５ｔｅ，下端部２２５ｂｅ）の形状によって、外乱光が侵入することが抑制されるため、試薬含有部材１３の色の変化を精度よく測定することができる。

酵素活性測定装置２００に設けられる検体転写部２３０によれば、ホルダー１７が台座２２９にセットされ、カバー２１０が閉じられた状態以外では、転写レバー２３２を回動させても、カム２３１及び転写パッド２４０（及び可動部材２３７）が回動前の位置に引き戻される。

このため、ホルダー１７が台座２２９にセットされ、カバー２１０が閉じられた状態以外の状態（例えば、カバー２１０が開放されている状態）において、ホルダー１７が押圧され、唾液の転写が開始されることを防止することができる。

すなわち、酵素活性測定装置１では、カバー３が閉じられていない状態においても転写レバー４１Ａを回動させてホルダー１７を押圧することができるため、予期しないタイミングで唾液の転写が開始される場合があった。酵素活性測定装置２００では、予期しないタイミングで唾液の転写が開始されることが確実に防止できる。

また、検体転写部２３０は、ユニットとして組み立てられ、組み立てられた検体転写部２３０が、ビスを用いてカバー２１０に取り付けられるため、各部品を個別にカバー３に取り付ける酵素活性測定装置１と比較して、検体転写部２３０の組立て及びカバー２１０の取付を効率的に行うことができる。

さらに、検体転写部２３０によれば、使用者が転写レバー２３２を軽く押すことによって、転写レバー２３２及びカム２３１がＡＲ１７の方向に回動させられ、“唾液の転写状態”が解除されるため、転写レバー２３２を戻す動作がとても簡便となる。

酵素活性測定装置２００に設けられる検体温度補償機構によれば、検出したアミラーゼの活性値が、検体温度補正データによって補正されるため、測定時の温度にかかわらず、測定誤差の少ない活性値を求めることができる。

また、当該検体温度補償機構によれば、ヒータ２６０が設けられているため、測定環境（例えば、屋外）によらず、様々な温度環境において酵素活性測定装置２００を利用することができる。

上述したように、本発明の第１及び第２実施形態を通じて本発明の内容を開示したが、この開示の一部をなす論述及び図面は、本発明を限定するものであると理解すべきではない。この開示から当業者には様々な代替実施の形態が明らかとなろう。

例えば、上述した検体転写部７，検体転写部２３０は、単体の検体転写装置として、濃度測定部９，濃度測定部９’は、単体の色測定装置として提供することができる。

このように、本発明は、ここでは記載していない様々な実施の形態などを含むことは勿論である。したがって、本発明の技術的範囲は、上述の説明から妥当な特許請求の範囲に係る発明特定事項によってのみ定められるものである。

本発明の第１実施形態に係る酵素活性測定装置の概略構成を示す斜視図である。 図１に示したＦ２方向からの酵素活性測定装置の斜視図である。 図２に示したＦ３−Ｆ３方向における断面図である。 図３示したＦ４方向における断面図である。 本発明の第１実施形態に係る酵素活性測定装置の濃度測定部の概略断面図である。 基質とアミラーゼとが接触した場合における酵素反応の程度と経過時間の関係を示すグラフである。 反射光に基づいて変換された出力電圧と、経過時間との関係を示すグラフである。 基質とアミラーゼとが接触した場合における基質の濃度と、経過時間との関係を示すグラフである。 本発明の実施形態に係る酵素活性測定装置に設けられるＣＰＵ基板のブロック構成図である。 本発明の実施形態に係る酵素活性測定装置に設けられるセンサー基板のブロック構成を示す図である。 酵素活性測定装置を用いて、アミラーゼの活性値を測定する動作を示すフローチャートである。 酵素活性測定装置を用いて、アミラーゼの活性値を測定する動作を示すフローチャートである。 酵素活性測定装置を用いて、アミラーゼの活性値を測定する動作を示すフローチャートである。 本発明の第２実施形態に係る酵素活性測定装置の斜視図である。 本発明の第２実施形態に係る酵素活性測定装置の平面図である。 本発明の第２実施形態に係る酵素活性測定装置の平面図（カバー開放状態）である。 図１５に示したＦ１７−Ｆ１７方向の断面図である。 本発明の第２実施形態に係る酵素活性測定装置に設けられるカバー開閉機構の動作を説明するための説明図である。 図１５に示したＦ１９方向から捉えた検体転写部の側面図である。 本発明の第２実施形態に係る酵素活性測定装置に設けられる検体転写部の動作を説明するための説明図である。 本発明の第２実施形態に係る酵素活性測定装置に設けられる濃度測定部の概略構成図である。 検体温度と当該検体に含まれているアミラーゼの活性割合との関係（温度特性）を示すグラフ、及び当該温度特性に基づいて決定された検体温度の補正曲線を示す図である。 本発明の第２実施形態に係る酵素活性測定装置において実行される動作の一部を示すフローチャートである。 本発明の第２実施形態に係る台座とヒータとの概略構成図である。

符号の説明

１…酵素活性測定装置、３…カバー、５…試薬・検体配置部、７…検体転写部、９，９’…濃度測定部、１３…試薬含有部材、１３Ａ…平面状部、１５…唾液採取シート、１５Ａ…平面状部、１７…ホルダー、２１…ＬＥＤ、２３…ＰＤ、２５…光ファイバ、２６…ＰＤ、２７…基材、２９…台座、２９Ａ…底面、３１…ガイド部、３３…可動部、３５…ガイド部、３７…バネ保持部、３９…コイルバネ、４１…カム、４１Ａ…転写レバー、４１ｒ…回動軸、４３…転写パッド、４５…フック、４７…基板、１００…ＣＰＵ基板、１０１…ＣＰＵ、１０３…発振部、１０５…通信部、１０７…クロック部、１０９…記憶部、１１１…ブザー出力部、１１３…電源部、１１５…バックアップ電源部、１１７…液晶表示部、１１７Ａ…ＬＣＤパネル、１１９…スイッチ部、１２１…センサー基板、１２３…リファレンス電圧生成部、１２５…ＬＥＤ駆動部、１２７…ＰＤアンプ部、１２９…温度検出部、１３１…スイッチ作動検出部、２００…酵素活性測定装置、２１０…カバー、２１０ａ…挿入孔、２１５…ヒンジ、２２０…筐体、２２５…インナーカバー、２２９…台座、２３０…検体転写部、２３１…カム、２３１ｐ…平面部分、２３２…転写レバー、２３３…コイルバネ、２３４…回動軸、２３５…コイルバネ、２３７…可動部材、２３７ｃｐ…カム当接面、２３７ｐｐ…押圧面、２３８…ガイド棒、２３９…コイルバネ、２４０…転写パッド、２４１…ベース板、２５０…カバー開放ボタン、２５１…コイルバネ、２５２…プッシュロッド、２５３…レバー、２５４…回動軸、２５５…連結ピン、２５６…支持軸、２５７…フック、２５７ｅ…端部、２６０…ヒータ、２７０…ＬＣＤパネル、２８０…スイッチ部

Claims (1)

1. 酵素の活性を測定する酵素活性測定試薬を含んだ試薬含有部材と、検体含有部材に含まれた検体とを離隔して配置する試薬・検体配置ステップと、
   前記試薬・検体配置ステップにおいて配置された前記試薬含有部材と前記検体とを接触させ、前記試薬含有部材に所定量の前記検体を転写する検体転写ステップと、
   前記検体が転写されたときから所定の時間が経過したときに、前記試薬含有部材に含まれる試薬の色の濃度を測定する濃度測定ステップと、
   前記濃度測定ステップにおいて測定された前記濃度に基づいて、前記検体に含まれる酵素の活性値を検出する酵素活性検出ステップと
   を備え、
   前記試薬・検体配置ステップでは、
   前記試薬含有部材の平面部分である試薬含有部材平面と、前記検体含有部材の平面部分である検体含有部材平面とが略平行になるように対向させて弾性を有するホルダーに配置され、
   前記検体転写ステップでは、
   前記ホルダーを押圧する押圧面及び前記押圧面に対向するカム当接面を有し、前記ホルダーを押圧する押圧方向に沿って移動可能な可動部材と、
   回動軸からの距離が他の部分よりも長い外周面の一部に平面部分を有するカムと、
   第１の方向に回動することによって、前記平面部分を前記カム当接面と当接させる転写レバーと、
   前記カムを前記第１の方向と反対方向である第２の方向に回動するように付勢する第１の付勢部材と、
   前記可動部材を前記カムの方向に付勢する第２の付勢部材と
   を具備する検体転写部により、
   前記平面部分が前記カム当接面に押し当てられ、前記押圧方向に沿って前記可動部材が移動し、前記押圧面によって前記ホルダーが押圧させられることによって前記ホルダーが撓ませられた状態で、前記試薬含有部材平面と前記検体含有部材平面とが所定の圧力で所定の時間に渡って接触させられる
   ことを特徴とする酵素活性測定方法。

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