JP4478713B2

JP4478713B2 - レインのエステル誘導体およびそれらの治療的使用

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Publication number: JP4478713B2
Application number: JP2007501352A
Authority: JP
Inventors: バクスター，アンドリュー・ダグラス; ウォルムスレー，アンドレア
Original assignee: ソセイ・アール・アンド・ディー・リミテッド
Priority date: 2004-03-04
Filing date: 2005-03-04
Publication date: 2010-06-09
Anticipated expiration: 2025-03-04
Also published as: US7728035B2; AU2005219642B2; CA2558082A1; GB0404953D0; IL177752A0; ZA200607386B; JP2007526293A; EP1723097A1; US20070185036A1; MXPA06010058A; AU2005219642A1; CN1938258A; BRPI0508352A; NO20064031L; WO2005085170A1; KR20070010142A

Description

本発明は、レインのエステル誘導体である新規なジヒドロキシアントラキノン類およびそれらの治療的使用に関する。

Ｔリンパ球は、関節リウマチを含めた多数の炎症性疾患および自己免疫疾患の病因において中心的役割を果たすことが知られている。抗原提示細胞によるＴ細胞の活性化は、炎症過程の開始における主要イベントであり、引き続き、それが他の炎症性細胞の活性化をもたらし、そして順次、炎症誘発性サイトカイン、走化性物質およびマトリックス分解性酵素の放出をもたらす。

多発性硬化症は、中枢神経系の慢性脱髄性炎症性疾患である。Ｔ細胞増殖は、炎症誘発性サイトカイン（主として、ＩＬ−２およびＩＦＮ−γ）の放出および白血球（マクロファージを含めた）の動員をもたらし、それが、炎症性反応を編成（orchestrate）する。

慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）では、ＣＤ８＋Ｔ細胞を増殖させることによる好中球およびマクロファージの活性化は、炎症誘発性サイトカインおよびエラスチン分解性酵素の放出をもたらし、それが、慢性および進行性の肺組織分解を引き起こし、そして最終的には、呼吸機能の低下を引き起こす。

クローン病および潰瘍性大腸炎は、集合的には炎症性腸疾患（ＩＢＤ）として知られている、腸の慢性炎症性疾患である。双方のこれら障害は、実際には、異なった原因を有する異種の群の疾患であるが、同様の永続性刺激物質および共通の組織傷害経路を有すると考えられる。再度、Ｔ細胞は、この疾患群の進行の中心にあり、免疫、間葉細胞および上皮細胞の活性化、循環性エフェクター細胞の動員、そして最終的には、胃腸管組織損傷をもたらす。

乾癬においては、ランゲルハンス細胞によるＣＤ４＋Ｔ細胞への抗原提示が、ケラチノサイト増殖を刺激するサイトカインの合成と、内皮細胞およびケラチノサイトによる接着分子の発現をもたらす。順次、ケラチノサイトは刺激されて、それ自体のサイトカインを生じ、それらが、自己分泌および／またはパラ分泌様式で作用して、乾癬過程を維持することがありうる。

全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、喘息、ループス腎炎、糸球体腎炎、ＩｇＡ腎症、歯肉炎、歯周病、アトピー性皮膚炎、強皮症および移植片対宿主病（ＧＶＨＤ）を含めた多数の他の炎症性疾患には、Ｔ細胞の中心的関与について同様に強い根拠がある。したがって、Ｔ細胞増殖の阻害剤は、一定範囲の炎症性疾患および自己免疫疾患の処置に有用でありうる。

レイン（１，８−ジヒドロキシアントラキノン−３−カルボン酸）は、一定範囲の炎症性疾患に有用性が認められている、充分に特性決定された抗炎症薬である。この薬剤は、Ｔ細胞増殖を阻害することが証明されていないが、ヒト変形性関節症の滑膜および軟骨細胞中の炎症誘発性サイトカイン（ＩＬ−１βおよびＴＮＦα）の生産を阻害すること（J. Martel-Pelletier et al, Journal of Rheumatology, 1998, 25(4), 753-762）、およびループス腎炎モデルにおいてサイトカイン遺伝子発現を阻害すること（S. Lemay et al, Kidney International, 1996, 50(1), 85-93）が知られている。テトラサイクリンと共通して、レインおよびそのプロドラッグであるジアセライン（diacerein）は、プロマトリックスメタロプロテイナーゼ（プロＭＭＰ−１、−３、−９および−１３）の生産をダウンレギュレーションし、ウサギ関節軟骨細胞からのメタロプロテイナーゼ−１の組織阻害剤（ＴＩＭＰ−１）の生産をアップレギュレーションすることが示されている（T. Tamura et al, Osteoarthritis and Cartilage, 2001, 9(3), 257-263）。

レインは、ＩＬ−１βの過剰生産が特に関与している疾患である関節炎および多発性硬化症（ＵＳ４３４６１０３号）および糖尿病性腎症（ＥＰ０９９０４４１Ａ１号）に有用であると開示されている。レインの広範囲にわたる使用は、そのかなり不十分な物理化学的性質によってある程度制限されてきた。この問題は、充分に特性決定されたプロドラッグジアセラインについては完全には対処されておらず、この場合の臨床的設定での有用性も、やはり、不十分な物理化学的性質によって制限されている（P. Nicolas et al, Clin. Pharmacokinet., 1998, 35(5), 348-359）。

本発明は、レインの簡単なエステル誘導体が、レイン自体および他の簡単な誘導体が応答を生じることができないアッセイにおいて、サイトカイン産生およびＴ細胞増殖を阻害することができるという知見に関する。これら薬剤は、親化合物にまさるそれらの改善された物理的性質ゆえに、上記の広範囲の炎症性疾患および自己免疫疾患に臨床的に有用であろうと考えられる。

本発明は、サイトカイン産生およびＴ細胞増殖を阻害することができ、したがって、上記のものを含めたＴ細胞に媒介される疾患の処置に有用である新規なジヒドロキシアントラキノン類を包含する。

本発明の第一の側面において、新規な化合物は、一般式（Ｉ）

（式中、Ｘ_１は、ＨまたはＣＯＲ_１であり、Ｘ_２は、ＨまたはＣＯＲ_２であるが、Ｘ_１およびＸ_２は、双方ともがＨとなる場合はなく；
Ｒ_１およびＲ_２は、同じであるか異なっていて、各々、Ｒ_３で置換されたＣ_１−４アルキルであるか、または４〜７員環であり、当該環は、Ｒ_８で場合により置換されていてもよく、そしてＯ、Ｓ（Ｏ）_ｎおよびＮＲ_９より選択される１個またはそれを超える追加のヘテロ原子を含有してもよく；
Ｒ_３は、Ｆ、ＣＦ_３、ＯＲ_４、ＮＲ_５Ｒ_６またはＳ（Ｏ）_ｎＲ_７であり；
Ｒ_４、Ｒ_５およびＲ_６は、同じであるか異なっていて、各々、Ｈであるか、またはＲ_３で場合により置換されてよいＣ_１−４アルキルであり、或いはＮＲ_５Ｒ_６は、Ｏ、ＮＲ_８およびＳ（Ｏ）_ｎより選択される１個またはそれを超えるヘテロ原子を含有するＣ_４−６ヘテロシクロアルキル環であり；
ｎは各々、０〜２であり；
Ｒ_７は、Ｃ_１−４アルキルであり；
Ｒ_８は、Ｒ_３について定義された通りであるか、またはＲ_３またはハロゲンで場合により置換されてよいＣ_１−４アルキルであり；そして
Ｒ_９は、ＨまたはＣ_１−４アルキルである）
を有する化合物；
およびそれらの塩、溶媒和物および水和物である。

本発明の化合物は、ジエステル（Ｘ_１はＣＯＲ_１であり、Ｘ_２はＣＯＲ_２である；以下、式１）であってよいし、またはＸ_１がＨであるモノエステル（式２）若しくはＸ_２がＨであるモノエステル（式３）であってよい。

本発明の更に別の側面は、式Ｉの化合物を含む医薬組成物、治療でのそれらの使用、より詳しくは、炎症性状態の処置におけるそれらの使用を包含する。

発明の説明
本発明による化合物が、一つまたはそれを超える不斉置換炭素原子を含有することができるということは理解されるであろう。式（１）、式（２）および式（３）の化合物中の一つまたはそれを超えるこれら不斉中心の存在は、立体異性体を生じることがありうるが、各場合において、本発明は、鏡像異性体およびジアステレオマー、およびそれらのラセミ混合物を含めた混合物を含めたこのような立体異性体全てに及ぶと理解されるはずである。

「Ｃ_１−４アルキル」という用語は、１〜４個の炭素原子を有する直鎖または分岐状鎖アルキル部分を意味し、それには、例えば、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、tert−ブチル等が含まれる。

「Ｃ_４−６ヘテロシクロアルキル」という用語は、３〜６個の炭素原子と、Ｎ、Ｏ、Ｓの群からの１個またはそれを超えるヘテロ原子を有する飽和複素環式部分を意味し、それには、例えば、アゼチジニル、オキセチジニル、ピロリジニル、テトラヒドロフラニル、ピペリジニル、テトラヒドロピラニル等が含まれる。

「ハロゲン」という用語は、フッ素、塩素、臭素またはヨウ素を意味する。

式（１）、式（２）および式（３）の化合物の塩には、薬学的に許容しうる塩、例えば、塩酸塩、臭化水素酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩、リン酸塩、硫酸塩、過塩素酸塩、酢酸塩、トリフルオロ酢酸塩、プロピオン酸塩、クエン酸塩、マロン酸塩、コハク酸塩、乳酸塩、シュウ酸塩、酒石酸塩および安息香酸塩のような、無機酸または有機酸から誘導される酸付加塩が含まれる。

塩は、塩基で形成されもよい。このような塩には、無機塩基または有機塩基から誘導される塩、例えば、マグネシウム塩またはカルシウム塩などのアルカリ金属塩；およびモルホリン塩、ピペリジン塩、ジメチルアミン塩またはジエチルアミン塩などの有機アミン塩が含まれる。

カルボキシル基は、メチルエステル、エチルエステル、ベンジルエステルまたは tert−ブチルエステルのような、容易に切断可能なエステルの形で保護することができる。

式（１）、式（２）および式（３）の化合物は、当該技術分野において知られているいずれかの適する方法によっておよび／または次の方法によって製造することができる。式（１）、式（２）または式（３）の特定の立体異性体が必要とされる場合、本明細書中に記載の合成方法を、適切なホモキラル出発物質と一緒に用いることができる、および／または異性体を、慣用的な分離技術（例えば、ＨＰＬＣ）を用いて混合物から分割することができるということは理解されるであろう。

本発明による化合物は、次の方法によって製造することができる。下の説明および式中、基Ｒ_１、Ｒ_２、Ｒ_３、Ｒ_４、Ｒ_５、Ｒ_６、Ｒ_７、Ｒ_８およびＲ_９は、それ以外に示される場合を除いて、上に定義の通りである。下記のいろいろな化合物中に存在していて、しかも保持することが望まれる、アミノ基、ヒドロキシル基またはカルボキシル基などの官能基は、なんらかの反応が開始する前に保護された形である必要がありうることが理解される。このような場合、保護基の除去は、特定の反応の最終工程であってよい。このような官能基に適する保護基は、当業者に明らかであろう。具体的な詳細については、“Protective Groups in Organic Synthesis”, Wiley Interscience, T W Greene, PGM Wuts を参照されたい。

式（１）の化合物を製造する方法は、塩基の存在下における活性エステルの変換（ジアセラインをレインへなど）の後に、酸塩化物または酸無水物のような必要な活性化された酸と反応させることを含む。カルボン酸は、還元されて、アルコールおよび更に置換されたヒドロキシル基を生じることができ、または所望のアミドを、カルボン酸または活性化された酸と、適するアミンとを反応させることによって形成することができる。ジアセラインおよび対応する活性化酸は、商業的に入手可能であるかまたは、合成有機化学の当業者によって商業的に入手可能な材料から容易に得られる。

一般式（２）および（３）の化合物を製造する方法は、（１）について記載されたものと類似するであろうが、酸塩化物との反応の前に１個のヒドロキシル基を選択的に保護する追加の工程を必要とし、そしてこれに引き続いて標的化合物を現す脱保護工程を行う必要があるであろう。

得られた最終生成物または中間体の混合物はいずれも、それら構成成分の物理化学的相違に基づいて、既知の様式で、例えば、クロマトグラフィー、蒸留、分別結晶化によって、またはそれら状況下で適当または可能ならば、塩の形成によって、純粋な最終生成物または中間体へと分離することができる。

本発明の化合物は、Ｔ細胞増殖に関するin vitro 阻害活性を示す。本発明による化合物は、更に、炎症誘発性サイトカイン放出に対する in vitro 阻害を示す。それら化合物の活性は、適当な細胞アッセイの使用によって、例えば、下に記載のように決定することができる。

本発明は、更に、前に記載したような、Ｔ細胞増殖に起因することがありうる障害または疾患に苦しむ患者（ヒトおよび／または酪農、食肉または毛皮産業において飼育されたまたは愛玩動物としての哺乳動物を含めた）の処置方法、より具体的には、活性成分として、式（１）、式（２）および式（３）を有するＴ細胞増殖阻害剤を投与することを含む処置方法に関する。

上述のように、式（１）、式（２）および式（３）の化合物は、Ｔ細胞増殖の阻害剤として活性であるので、それらは、ヒトまたは獣医学に有用である。したがって、別の側面において、本発明は、
哺乳動物、具体的には、ヒトにおけるＴ細胞によって媒介される疾患または状態の管理（処置または予防を意味する）方法であって、その哺乳動物に、有効量の上記式（１）、式（２）または式（３）の化合物、またはその薬学的に許容しうる塩を投与することを含む方法；および
ヒトまたは獣医学において、具体的には、Ｔ細胞によって媒介される疾患または状態の管理（処置または予防を意味する）において用いるための式（１）、式（２）または式（３）の化合物；および
Ｔ細胞によって媒介される疾患または状態の管理（処置または予防を意味する）のための薬剤の製造における、式（１）、式（２）または式（３）の化合物の使用に関する。

上に論じられた疾患または状態には、関節リウマチ、変形性関節症、骨粗鬆症、潰瘍性大腸炎およびクローン病を含めた炎症性腸疾患、潰瘍性大腸炎、多発性硬化症、歯周病、歯肉炎、移植片対宿主反応、乾癬、強皮症、アトピー性皮膚炎、喘息、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、腎症および慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）のような炎症性疾患および自己免疫疾患が含まれる。処置することができる皮膚状態には、上に挙げられたもの、そして更に、乾癬性関節炎、表皮水疱症、アトピー性皮膚炎および脈管炎が含まれる。抗血管新生活性は、加齢性黄斑変性および癌のような状態の処置を可能としうる。

関節リウマチ、多発性硬化症、および上で強調されたものなどの、Ｔ細胞の過活性によって生じる他の疾患および適応症の処置のために、式（１）、式（２）または式（３）の化合物は、経口で、局所に、非経口で、吸入または鼻内噴霧で、または直腸に、無毒性の薬学的に許容しうる担体、アジュバントおよびビヒクルを含有する投薬単位製剤の形で投与することができる。本明細書中で用いられる非経口という用語には、皮下注射、静脈内、筋肉内、胸骨内の注射または注入技術が含まれる。マウス、ラット、ウマ、ウシ、ヒツジ、イヌ、ネコ等のような温血動物の処置に加えて、本発明の化合物は、ヒトの処置に有効である。

当該活性成分を含有する医薬組成物は、例えば、錠剤、トローチ、ロゼンジ、水性または油性の懸濁剤、分散性散剤または顆粒剤、乳剤、硬または軟カプセル剤、またはシロップ剤またはエリキシル剤として経口使用に適する形をとることができる。経口使用を予定した組成物は、医薬組成物の製造について当該技術分野で知られているいずれの方法によっても製造することができ、このような組成物は、薬学的に上質で且つ口当たりのよい製剤を提供するために、甘味剤、着香剤、着色剤および保存剤から成る群より選択される一つまたはそれを超える薬剤を含有してよい。錠剤は、活性成分を、錠剤の製造に適している無毒性の薬学的に許容しうる賦形剤との混合物として含有する。これら賦形剤は、例えば、炭酸カルシウム、炭酸ナトリウム、ラクトース、リン酸カルシウムまたはリン酸ナトリウムなどの不活性希釈剤；造粒剤および崩壊剤、例えば、トウモロコシデンプンまたはアルギン酸；結合剤、例えば、デンプン、ゼラチンまたはアカシア；および滑沢剤、例えば、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸またはタルクであってよい。それら錠剤は、未コーティングであってよいし、またはそれらは、既知の技法により、胃腸管内での崩壊および吸収を遅らせ、それによって、より長時間にわたる持続作用を与えるようにコーティングされていてよい。例えば、グリセリルモノステアラートまたはグリセリルジステアラートなどの時間遅延材料を用いることができる。それらは、ＵＳ４２５６１０８号、ＵＳ４１６６４５２号およびＵＳ４２６５８７４号に記載の技法によってコーティングされて、制御放出のための浸透圧性治療錠剤を形成することもできる。

経口使用のための製剤は、活性成分が、不活性固体希釈剤、例えば、炭酸カルシウム、リン酸カルシウムまたはカオリンと混合されているゼラチン硬カプセル剤として、または活性成分が、水または油基剤、例えば、ラッカセイ油、流動パラフィンまたはオリーブ油と混合されているゼラチン軟カプセル剤として与えることもできる。

水性懸濁剤は、活性物質を、水性懸濁剤の製造に適する賦形剤との混合物で含有する。このような賦形剤は、懸濁化剤、例えば、ナトリウムカルボキシメチルセルロース、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、アルギン酸ナトリウム、ポリビニルピロリドン、トラガカントゴムおよびアラビアゴムであり；分散助剤または湿潤剤は、天然に存在するホスファチド、例えば、レシチンでもよく；またはアルキレンオキシドと脂肪酸との縮合生成物、例えば、ポリオキシエチレンステアラートでもよく；またはエチレンオキシドと長鎖脂肪族アルコールとの縮合生成物、例えば、ヘプタデカエチレンオキシセタノールでもよく；またはエチレンオキシドと脂肪酸およびヘキシトールから誘導される部分エステルとの縮合生成物、例えば、ポリオキシエチレンと脂肪酸およびヘキシトール無水物から誘導される部分エステルとのもの、例えば、ポリオキシエチレンソルビタンモノオレアートであってよい。水性懸濁剤は、一つまたはそれを超える保存剤、例えば、ｐ−ヒドロキシ安息香酸エチルまたはｎ−プロピル、一つまたはそれを超える着色剤、一つまたはそれを超える着香剤、およびスクロースまたはサッカリンなどの一つまたはそれを超える甘味剤も含有してよい。

油状懸濁剤は、活性成分を、植物油、例えば、ラッカセイ油、オリーブ油、ゴマ油またはヤシ油中に、または流動パラフィンなどの鉱油中に懸濁させることによって製剤化することができる。それら油状懸濁剤は、増粘剤、例えば、蜜蝋、硬質パラフィンまたはセチルアルコールを含有してよい。上に挙げられたものなどの甘味剤と、着香剤を加えて、口当たりのよい経口製剤を提供することができる。これら組成物は、アスコルビン酸などの酸化防止剤の添加によって保存することができる。

水の添加によって水性懸濁液の製造に適する分散性散剤及び顆粒剤は、活性成分を、分散剤または湿潤剤、懸濁化剤、および一つまたはそれを超える保存剤と混合して提供する。適する分散剤または湿潤剤および懸濁化剤が例示されており、例えば、甘味剤、着香剤および着色剤も存在してよい。

本発明の医薬組成物は、水中油エマルジョンの形であってもよい。その油状相は、植物油、例えば、オリーブ油またはラッカセイ油、または鉱油、例えば、流動パラフィン、またはこれらの混合物であってよい。適する乳化剤は、天然に存在するガム、例えば、アラビアゴムまたはトラガカントゴム；天然に存在するホスファチド、例えば、ダイズ、レシチン；および脂肪酸および無水ヘキシトールから誘導されるエステルまたは部分エステル、例えば、ソルビタンモノオレアート；およびこの部分エステルとエチレンオキシドとの縮合生成物、例えば、ポリオキシエチレンソルビタンモノオレアートであってよい。それらエマルジョンは、更に、甘味剤および着香剤を含有してよい。

シロップ剤およびエリキシル剤は、甘味剤、例えば、グリセロール、プロピレングリコール、ソルビトールまたはスクロースと一緒に製剤化することができる。このような製剤は、更に、粘滑剤、保存剤、および着香剤および着色剤を含有してよい。それら医薬組成物は、滅菌注射可能水性または油脂性懸濁剤の形であってよい。この懸濁剤は、既知の技術にしたがって、上に述べられた適する分散剤または湿潤剤および懸濁化剤を用いて製剤化することができる。滅菌注射可能製剤は、無毒性の非経口的に許容しうる希釈剤または溶媒中の、例えば、１，３−ブタンジオール中の液剤としての滅菌注射可能液剤または懸濁剤の形態をとることができる。用いることができる許容しうるビヒクルおよび溶媒の中には、水、リンガー液および等張塩化ナトリウム溶液がある。更に、滅菌固定油は、溶媒または懸濁用基剤として慣用的に用いられる。この目的には、合成のモノグリセリドまたはジグリセリドを含めた、いずれの無刺激固定油も、用いることができる。更に、オレイン酸などの脂肪酸は、注射可能物質の製造に用いられる。

式（１）、式（２）および式（３）の化合物は、更に、薬物の直腸投与のための坐剤の形で投与することができる。これら組成物は、薬物を、常温で固体であるが、直腸内温度で液体であり、したがって、直腸内で溶融して薬物を放出する適する無刺激性賦形剤と混合することによって製造することができる。このような材料は、カカオ脂およびポリエチレングリコールである。

局所使用には、式（１）、式（２）および式（３）の化合物を含有するクリーム剤、軟膏剤、ゼリー剤、溶液剤または懸濁剤等が用いられる。本明細書の目的のためには、局所適用には、口内洗剤および含嗽剤が含まれる。

上に示された状態の処置には、１日に体重１キログラムにつき約０．０５ｍｇ〜約１４０ｍｇ程度の投薬量レベルが有用である（１日に患者一人につき約２．５ｍｇ〜約７ｇ）。例えば、炎症は、１日に体重１キログラムにつき約０．０１ｍｇ〜５０ｍｇ（１日に患者一人につき約０．５ｍｇ〜約３．５ｇ）の化合物の投与によって有効に処置することができる。

担体材料と混合されて単一の剤形を生じることができる活性成分の量は、処置される宿主および具体的な投与方式に依存して異なるであろう。例えば、ヒトへの経口投与を予定した製剤は、全組成物の約５〜約９５パーセントであってよい。単位剤形は、概して、約１ｍｇ〜約５００ｍｇの活性成分を含有するであろう。

しかしながら、いずれの特定の患者についても、具体的な用量レベルは、用いられる具体的な化合物の活性、年齢、体重、全身の健康状態、性別、食事、投与時間、投与経路、排泄速度、薬物組合せ、および治療下にある特定の疾患の重症度を含めたいろいろな因子に依存するということは理解されるであろう。

次の実施例は、本発明を詳しく説明する。

実施例１４，５−ビス（テトラヒドロピラン−４−カルボニルオキシ）−９，１０−ジオキソジヒドロアントラセン−２−カルボン酸
１．４，５−ジヒドロキシ−９，１０−ジオキソアントラセン−２−カルボン酸
ジアセライン（１５０ｇ，０．４１ｍｏｌ）を、１０％（ｗ／ｗ）Ｎａ_２ＣＯ_３溶液（４Ｌ）中で撹拌して、赤色混合物を生じた。一晩撹拌後、混合物を、５ＭＨＣｌ溶液でｐＨ２まで酸性にして、黄色沈殿を生じた。これを濾過し、真空オーブン中において５０℃で乾燥させた（１６８ｇ，＞１００％）。

２．テトラヒドロピラン−４−イルカルボン酸
テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−カルボン酸メチル（２７０ｇ，１．８７ｍｏｌ）を、エタノール（２Ｌ）中で希釈した。１ＭＬｉＯＨ水溶液（１８７０ｍｌ，１．８７ｍｏｌ）をＲＴで加え（僅かに発熱）、その反応液を３時間撹拌した。反応混合物を、約１Ｌまで濃縮し、５ＭＨＣｌ溶液でｐＨ２まで酸性にした。その水溶液を酢酸エチル（３ｘ６００ｍｌ）で抽出し、有機層を乾燥させ（ＭｇＳＯ_４）、蒸発乾固させて、白色固体（２３０．３ｇ，９４％）を生じた。

３．テトラヒドロ−４−ピラニルクロリド
テトラヒドロピラン−４−イルカルボン酸（２３０ｇ）を、塩化チオニル（１５００ｍｌ）中に溶解させ、２．５時間還流した。この時間後、混合物を室温に冷却し、蒸発乾固させた。得られた油状物に、トルエン（５００ｍｌ）を加え、その混合物を蒸発乾燥させて、淡緑色油状物を生じた。これを、精製することなく、次の段階で用いた。

４．４，５−ビス（テトラヒドロピラン−４−カルボニルオキシ）−９，１０−ジオキソジヒドロアントラセン−２−カルボン酸
４，５−ジヒドロキシ−９，１０−ジオキソアントラセン−２−カルボン酸（１６８ｇ）を、ピリジン（５Ｌ）中においてＲＴで撹拌して、褐色懸濁液を生じた。酸塩化物（２０９ｇ，１．４１ｍｏｌ）を、１０分間にわたって加え、その反応物をＲＴで４８時間撹拌した。反応混合物を５個の等しいバッチに分け、そして各々を、３ＭＨＣｌ溶液（３．７５Ｌ）に、氷冷しながら徐々に加えて、黄色沈殿を生じた。それら混合物を濾過し、合わせた固体をアセトン（２ｘ６００ｍｌ）で研和した。得られた固体を、真空オーブン中において５０℃で乾燥させた（１７３ｇ，８３％）。

次の実施例を、同様にして行った。

実施例２４，５−ビスブチリルオキシ−９，１０−ジオキソ−９，１０−ジヒドロアントラセン−２−カルボン酸
４，５−ジヒドロキシ−９，１０−ジオキソアントラセン−２−カルボン酸（３．０ｇ）を、ピリジン（１００ｍｌ）中に懸濁させ、ＲＴで３０分間撹拌した。塩化ブチリル（３．６ｇ，５当量）を加えて、透明な反応混合物を生じ、それをＲＴで週末にわたって撹拌した。反応混合物を、より少ない容量へと減少させ、２ＭＨＣｌ（２００ｍｌ）でクケンチして、ｐＨをｐＨ２に調整した。橙色固体を濾過によって分離した。この固体を、水（３０ｍｌ）中、次に酢酸エチル（３０ｍｌ）およびジクロロメタン（３０ｍｌ）中でスラリーにし、そして濾過によって黄色固体（２．０ｇ，４５％）として単離した。

実施例３４，５−ビス（２−ベンジルオキシアセチルオキシ）−９，１０−ジオキソ−９，１０−ジヒドロアントラセン−２−カルボン酸
４，５−ジヒドロキシ−９，１０−ジオキソアントラセン−２−カルボン酸（３．０ｇ）を、ピリジン（１００ｍｌ）中に懸濁させ、ＲＴで３０分間撹拌した。ベンジルオキシアセチルクロリド（３．６ｇ，５当量）を加えて、透明な反応混合物を生じ、それをＲＴで週末にわたって撹拌した。反応混合物を、より少ない容量へと減少させ、２ＭＨＣｌ（２００ｍｌ）でクエンチして、ｐＨをｐＨ２に調整した。橙色固体を濾過によって分離した。この粗製固体を、水（３０ｍｌ）中、次に酢酸エチル（３０ｍｌ）およびジクロロメタン（３０ｍｌ）中でスラリーにした。黄色固体を濾過によって分離した（３．６ｇ，６１％）。

実施例４４，５−ビス（４−メトキシブチリルオキシ）−９，１０−ジオキソ−９，１０−ジヒドロアントラセン−２−カルボン酸
１．４−メトキシブチロニトリル
ナトリウムメトキシド（２２ｇ）を反応容器に入れ、メタノールを加え、そして反応混合物をＲＴで３０分間撹拌した。その混合物を＜５℃に冷却し（氷浴）、そしてメタノール（１００ｍｌ）中の４−ブロモブチロニトリル（２０ｇ）の溶液を滴加した。添加を完了したら、反応混合物をＲＴに暖め、一晩撹拌した。次に、反応混合物を、単離することなく、直ちに加水分解した。

２．４−メトキシ酪酸
４−メトキシブチロニトリルの撹拌溶液に、水（２２０ｍｌ）中の水酸化カリウム（２２ｇ）の溶液を滴加した。添加を完了したら、反応混合物を還流温度に加熱し、この温度で一晩保持した。次に、反応混合物をＲＴに冷却し、そして２ＭＨＣｌの添加により、ｐＨをｐＨ２に調整した。次に、反応混合物を酢酸エチル（２ｘ５００ｍｌ）中に抽出した。合わせた有機層を、硫酸マグネシウム上で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮した。シリカゲルカラムクロマトグラフィー（１：１の酢酸エチル／ヘキサン）による精製は、必要な物質を無色油状物（２工程で１０．２ｇ，６２％）として生じた。

３．４−メトキシブチリルクロリド
トルエン（５０ｍｌ）中の４−メトキシ酪酸（１０ｇ）を、トルエン（５０ｍｌ）中の塩化オキサリル（８ｍｌ）の氷浴温度での撹拌溶液に滴加した。添加を完了したら、反応液をＲＴに暖め、一晩撹拌した。反応混合物を蒸発乾固させて生成物を生じ、それを直ちに用いた。

４．４，５−ビス（４−メトキシブチリルオキシ）−９，１０−ジオキソ−９，１０−ジヒドロアントラセン−２−カルボン酸
ピリジン（３０ｍｌ）中の４，５−ジヒドロキシ−９，１０−ジオキソアントラセン−２−カルボン酸（１ｇ）の撹拌懸濁液に、４−メトキシブチリルクロリド（２ｇ）を加えた。その反応をＲＴで２日間撹拌したが、ＴＬＣは、出発の酸がなお存在することを示したので、更に２ｇの酸塩化物を加えた。反応は、ＲＴで更に２日後に完了した。その反応混合物を、蒸発乾固させ、２ＭＨＣｌ（３０ｍｌ）中で３０分間撹拌した。得られた粗製固体を濾過によって分離した。次に、これを、水（３０ｍｌ）、次に酢酸エチル（３０ｍｌ）でスラリーにした。固体を濾過によって分離し、一晩オーブン乾燥させて、１．０ｇ（５９％）を生じた。

実施例５４，５−ビス（テトラヒドロフラン−３−カルボニルオキシ）−９，１０−ジオキソ−９，１０−ジヒドロアントラセン−２−カルボン酸
トルエン（５０ｍｌ）中のテトラヒドロフラン酸（１０ｇ）を、トルエン（５０ｍｌ）およびＤＭＦ（１滴）中の塩化オキサリル（８．１ｍｌ）の溶液に氷浴温度で滴加した。添加を完了したら、その反応液をＲＴに暖め、一晩撹拌した。次に、反応混合物を真空中で濃縮して、テトラヒドロ−３−フリルクロリドを黄色油状物（９．４ｇ，８１％）として生じた。

ピリジン（１００ｍｌ）中の４，５−ジヒドロキシ−９，１０−ジオキソアントラセン−２−カルボン酸（２ｇ）の撹拌懸濁液に、ジクロロメタン（１０ｍｌ）中のテトラヒドロ−３−フリルクロリド（２．１ｇ）を氷浴温度で滴加した。添加を完了したら、反応混合物を、不活性雰囲気下においてＲＴで一晩撹拌した。次に、更に２．２当量の酸塩化物を加えて、反応を完了させた。ＲＴで更に３時間後、反応混合物を、より少ない容量（約２０ｍｌ）へと減少させ、２ＭＨＣｌ（１００ｍｌ）を加えた。次に、反応混合物を濾過して黄色固体を生じ、それを、酢酸エチル（２５ｍｌ）中、次に水（５０ｍｌ）中でスラリーにした。固体を濾過によって分離して、（１６）を黄色固体（２．１ｇ，６０％）として生じた。

ＥＳＩ［Ｍ＋Ｈ］^＋４８１
本発明の更なる例示的な化合物は、
４，５−ビス（１，１−ジフルオロシクロヘキシル−４−カルボニルオキシ）−９，１０−ジオキソ−９，１０−ジヒドロアントラセン−２−カルボン酸；
４，５−ビス（アゼチジン−３−カルボニルオキシ）−９，１０−ジオキソ−９，１０−ジヒドロアントラセン−２−カルボン酸；および
４，５−ビス（モルホリン−４−アセチルオキシ）−９，１０−ジオキソ−９，１０−ジヒドロアントラセン−２−カルボン酸である。

実施例１の化合物は、ＬＰＳマウスモデルおよびラットＥＡＥモデルにおいて効力を有することが分かった。

ＬＰＳマウスアッセイ
餌と水を随意供給されている７週令 Balb−ｃマウス（ｎ＝８）に、１％メチルセルロースビヒクル中の実施例１の化合物を３ｍｇ／ｋｇ、３０ｍｇ／ｋｇおよび３００ｍｇ／ｋｇで、経口強制飼養（１０ｍｌ／ｋｇ）によって０の時間に投与した。薬物処置から３０分後、１ｍｇ／ｋｇのＬＰＳ（通常生理食塩水中で５ｍｌ／ｋｇ）を、マウスに腹腔内投与した。ＬＰＳチャレンジ後２時間の血液試料を、イソフルラン麻酔下での心臓穿刺によって採取した。血液試料を室温で１０分間凝固させた後、４℃において６０００ｇで３分間回転させるまでは氷上に置き、その後、ＥＬＩＳＡによってＴＮＦαおよびＩＬ−１βのレベルについてアッセイするまでは−２０℃で貯蔵した。ＴＮＦαおよびＩＬ−１βのレベルは、血清中のｐｇ／ｍｌ（平均＋−ＳＥＭ）として報告し、有意性は、Dunnett's アッセイで、次に Kruskal-Wallis 一元分析で、次に Dunn's アッセイで評価した。

実施例１の化合物は、全３種類の用量でのＬＰＳ傷害後ＴＮＦαレベルを用量依存様式で減少させることに有意の効力を示した。実施例１の化合物での処置は、ＩＬ−１βレベルを上位二つの用量において減少させた。このアッセイでは、ジアセラインを内部ポジティブコントロールとして用いた。

実験的自己免疫性脳炎（ＥＡＥ）
雄Lewis ラット（２５０〜２９０ｇ）（ｎ＝１０）の両後肢肉球に、８ｍｇ／ｍｌのヒト型結核菌（Mycobacterium tuberculosis）Ｈ３７Ｒａと一緒に、等しい部数のモルモット脊髄、リン酸緩衝化生理食塩水および不完全フロイントアジュバントを含有する０．１ｍｌのエマルジョンを注射した。実施例１の化合物（１５０ｍｇ／ｋｇ）を、１０％アラビアゴムビヒクル（１ｍｌ／ｋｇ）中で、接種日より１日２回経口投与した。

体重および神経学的スコアを、接種後７日目より毎日観察した。毎日のスコア合計を各群について計算し、時間に対してプロットした。ノンパラメトリックの統計的分析として（Kruskal-Wallis）一元分析後、Dunn's アッセイを用いた。実施例１の化合物は、ＥＡＥモデルで引き起こされる臨床徴候の処置に有意の効力を示した。

Claims

一般式（Ｉ）

（式中、Ｘ_１は、ＨまたはＣＯＲ_１であり、Ｘ_２は、ＨまたはＣＯＲ_２であるが、Ｘ_１およびＸ_２は、双方ともＨとなる場合はなく；
Ｒ_１およびＲ_２は、同じであるか異なっていて、各々、Ｒ_３で置換されたＣ_１−４アルキルであるか；または、Ｒ_８で置換されているか、若しくはＯ、Ｓ（Ｏ）_ｎおよびＮＲ_９より選択される１個またはそれを超えるヘテロ原子を含有する４〜７員環であり、；
Ｒ_３は、Ｆ、ＣＦ_３、ＯＲ_４、ＮＲ_５Ｒ_６またはＳ（Ｏ）_ｎＲ_７であり；
Ｒ_４、Ｒ_５およびＲ_６は、同じであるかまたは異なっていて、各々、Ｈであるか、またはＲ_３で置換されてよいＣ_１−４アルキルであり、或いはＮＲ_５Ｒ_６は、Ｏ、ＮＲ_８およびＳ（Ｏ）_ｎより選択される１個またはそれを超えるヘテロ原子を含有するＣ_４−６ヘテロシクロアルキル環であり；
ｎは各々、０〜２であり；
Ｒ_７は、Ｃ_１−４アルキルであり；
Ｒ_８は、Ｒ_３について定義された通りであるか、またはＲ_３若しくはハロゲンで置換されているＣ_１−４アルキルであり；そして
Ｒ_９は、ＨまたはＣ_１−４アルキルである）
を有する化合物；
またはその塩、溶媒和物もしくは水和物。
Ｘ_１がＣＯＲ_１であり、Ｘ_２がＣＯＲ_２である、請求項１に記載の化合物。
Ｘ_１がＨであり、Ｘ_２がＣＯＲ_２である、請求項１に記載の化合物。
Ｘ_１がＣＯＲ_１であり、Ｘ_２がＨである、請求項１に記載の化合物。
Ｒ_３が、ＣＦ_３、ＯＲ_４、ＮＲ_５Ｒ_６またはＳ（Ｏ）_ｎＲ_７である、請求項１〜４のいずれか１項に記載の化合物。
４，５−ビス（テトラヒドロピラン−４−カルボニルオキシ）−９，１０−ジオキソジヒドロアントラセン−２−カルボン酸である、請求項１に記載の化合物。
４，５−ビス（２−ベンジルオキシアセチルオキシ）−９，１０−ジオキソ−９，１０−ジヒドロアントラセン−２−カルボン酸；
４，５−ビス（４−メトキシブチリルオキシ）−９，１０−ジオキソ−９，１０−ジヒドロアントラセン−２−カルボン酸；または
４，５−ビス（テトラヒドロフラン−３−カルボニルオキシ）−９，１０−ジオキソ−９，１０−ジヒドロアントラセン−２−カルボン酸である、請求項１に記載の化合物。
治療で用いるための医薬組成物であって、請求項１〜７のいずれか１項に記載の化合物および薬学的に許容しうる希釈剤または担体を含む医薬組成物。