JP4478226B2

JP4478226B2 - 中枢カンナビノイドレセプターｃｂ１の既知の作用薬の利用

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Publication number: JP4478226B2
Application number: JP04856798A
Authority: JP
Inventors: ヨアヒム・ミツテンドルフ; ユルゲン・ドレツセル; ミヒヤエル・マツケ; ユルゲン・フランツ; ペーター・シユプライアー; フエレナ・フエーリンガー; ヨアヒム・シユーマツハー; アルノ・フリートル; エアフイン・ホーアフアト; フランク・マウラー; ジヤン−マリー−ビクトル・ド・ブリ; ラインハルト・ヨルク
Original assignee: Bayer Pharma AG
Current assignee: Bayer Pharma AG
Priority date: 1997-02-21
Filing date: 1998-02-16
Publication date: 2010-06-09
Anticipated expiration: 2018-02-16
Also published as: ES2290975T3; DE19706903A1; EP0860168A3; DE59814072D1; US20010034344A1; JPH10236978A; US6525087B2; EP0860168B1; EP0860168A2; US6284788B1; ATE369131T1

Description

【０００１】
本発明は神経変性障害(neurodegenerative disorders)の予防及び処置のための、特に脳卒中及び頭蓋脳損傷の処置のための中枢（ｃｅｎｔｒａｌ）カンナビノイドレセプターＣＢ１の既知の作用薬(agonists)の利用に関する。
【０００２】
Δ⁹−テトラヒドロカンナビノール（Δ⁹−ＴＨＣ）及び、わずかにΔ⁸−ＴＨＣも、植物カンナビス・サチバ（Ｃａｎｎａｂｉｓｓａｔｉｖａ）（マリファナ、ハシシ）の抽出物中の生物学的に活性な成分であり、ヒト中枢神経系（ＣＮＳ）への影響を担っている。カンナビス調剤の可能性としての歴史的及び一時的な治療的利用には、中でも痛覚脱失症、嘔吐、食欲不振、緑内障及び運動障害が含まれる。
【０００３】
現在までに、カンナビノイドレセプターの２つの細分型及び１つのスプライス変異体が同定されている。ＣＢ１レセプター（Ｎａｔｕｒｅ１９９０，３４６，５６１）及びスプライス変異体ＣＢ１ａ（Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．１９９５，２７０，３７２６）は主に中枢神経系に局在する。ＣＢ２レセプターは主に末梢組織に、特に白血球、脾臓及びマクロファージで見いだされた（Ｅｕｒ．Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．１９９５，２３２，５４）。ＣＢ１及びＣＢ２レセプターは７つの貫膜領域を有し、Ｇタンパク質レセプターの群に属する。両レセプターはＧ_i／Ｇ_oタンパク質を介してアデニル酸シクラーゼに負に連結し、おそらくグルタメートのシナプス前放出に負に連結する［Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．１９９６，１６，４３２２を参照されたい］。ＣＢ１レセプターはさらにカリウムチャンネルに正に連結し、Ｎ−及びＱ−型カルシウムチャンネルに負に連結する。
【０００４】
さらに、カンナビノイドＣＢ１レセプター作用薬が古典的及び非古典的カンナビノイド、アミノアルキルインドール、ならびにイコサノイドの４つの種類に細分されることは既知である［Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｒｅｖ．１９８６，３８，７５；Ｅｕｒ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．１９９６，３，１０１；ＣａｎｎａｂｉｎｏｉｄＲｅｃｅｐｔｏｒｓ，Ｒ．Ｐｅｒｔｗｅｅ（Ｅｄ．），ＡｃａｄｅｍｉｃＰｒｅｓｓ，ＳａｎＤｉｅｇｏ，１９９５；Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．１９７６，１９，４４５；Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．１９７６，１９，４５４；Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．１９７６，１９，４６１；ＷＯ９５／３３４２９；ＤＥ２４１６４９１；Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．１９９６，３６，３８７５；ＵＳ４３７１７２０；Ｃｕｒｒ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．１９９６，３，１０１；Ｃｕｒｒ．Ｐｈａｒｍ．Ｄｅｓｉｇｎ１９９５，１，３４３；Ｔｅｔｒａｈｅｄｒ．Ｌｅｔｔ．１９９４，５０，２６７１；ＬｉｆｅＳｃｉ．１９９５，５６，２００７；Ｊｏｈｎｓｏｎ，Ｍ．Ｒ．，Ｍｅｌｖｉｎ，Ｌ．Ｓ．ｉｎ ”ＣａｎｎａｂｉｎｏｉｄｓａｓＴｈｅｒａｐｅｕｔｉｃＡｇｅｎｔｓ；ＭｅｃｈｏｕｌａｍＲ．，Ｅｄ．；ＣＲＣＰｒｅｓｓ，ＢｏｃａＲａｔｏｎＦｌ１９８６，ｐｐ．１２１−１４５；Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．１９８４，７，６７；ＰｈａｒｍａｃｏｌＲｅｖ．１９８６，３８，１；Ｅｘｐ．Ｏｐｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．Ｄｒｕｇｓ１９９６，５，１２４５；Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｒｅｖ．１９８６，３８，１５１；ＤｒｕｇＤｅｓｉｇｎａｎｄＤｉｓｃｏｖｅｒｙ１９９５，１３，１５５；Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｅｘｐ．Ｔｈｅｒ．１９９３，２６５，２１８；ＵＳ４３９１８２７；Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．１９９５，３８，３０９４；Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．６，１９９６，１７；Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．１９９２，３５，１２４；Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．１９９１，３４，１０９９；Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．４，１９９４，５６３；Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．５，１９９５，３８１；ＵＳ５１１２８２０；Ｔｅｔｒａｈｅｄｒ．Ｌｅｔｔ．１９９５，１４０１；Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．１９９６，３９，４５１５；ＤｒｕｇｏｆＴｏｄａｙ３２，１９９６，２７５；Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．１９９６，３９，４７１；Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．１９９４，３７，１８８９；Ｍｏｌ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．４６，５１６，１９９４；Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．１９９５，５０，８３；Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．１９９３，３６，３０３２；Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．１９９４，４８，１５３７；Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．１９９４，２６９，２２９３７；Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ１９９３，９０，７６５６；Ｊ．Ｐｒｏｓｔａｇｌ．Ｌｅｕｋｏｔｒ．Ｅｓｓｅｎ．ＦａｔｔｙＡｃｉｄｓ１９９５，５２，８３；Ｓｃｉｅｎｃｅ１９９２，２５８，１９４６；ＬｉｆｅＳｃｉ１９９５，５６，２０４１；ＦＥＢＳＬｅｔｔ．１９９４，３５０，２４０；ＳｈｏｗａｌｔｅｒＶ．Ｍ．；Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｅｓｐ．Ｔｈｅｒａｐ．１９９６，９８９；Ｐｈａｒｍ．Ｒｅｓ．１３，１９９６，６２；Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．１９９７，４０，６５９を参照されたい］。
【０００５】
脳卒中がヒトの脳領域の突然の循環障害の結果であり、機能喪失が続き、対応する神経学的及び／又は心理学的症状を伴うことがさらに既知である。脳卒中の原因は脳の出血（例えば高血圧、動脈硬化及び卒中性動脈瘤における血管裂傷の後）、ならびに虚血（例えば血圧降下発症又は塞栓症による）にあり得る。脳における機能喪失は脳細胞の変性又は破壊に導く（ＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｅｒｅｂｒａｌＢｌｏｏｄＦｌｏｗａｎｄＭｅｔａｂｏｌｉｓｍ１９８１，１，１５５；Ｃｈｅｍ．Ｅｎｇ．Ｎｅｗｓ１９９６（Ｍａｙ１３），４１；ＴｒｅｎｄｓＰｈａｒｍａｃｏｌ．Ｓｃｉ．１９９６，１７，２２７を参照されたい）。頭蓋脳損傷は、脳を含む覆われた、及び開いた頭の傷を意味すると理解される［Ｓｃｈｗｅｉｚ．ｍｅｄ．Ｗｓｃｈｒ．１９９３，１２３，４４９を参照されたい］。
【０００６】
脳血管閉塞の後、それに伴う循環の制限及び酸素供給の減少の直接の結果として破壊されるのは組織容積の一部のみである［Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ１９９６，４７，８８４を参照されたい］。梗塞芯と称されるこの組織領域は、例えば局所的血栓崩壊により直後に血管閉鎖を再疎通させることによってのみ、乾燥から守ることができ、従って制限的にしか治療を受けられない。半影部（ｐｅｎｕｍｂｒａ）とも称される、容積の点で少なくともちょうど同じ程度の大きさの外部周辺領域も明白に血管閉塞の開始の直後にはその機能を停止するが、初期にはまだ付帯供給により酸素が相応に供給され、数時間後、又は数日後に初めて不可逆的に損傷を受ける。この領域の細胞死は即時には起こらないので、発作の後、及び損傷の後の両方の疾患の経過の好ましくない展開を阻止する治療の機会が現れる。
【０００７】
梗塞容積の減少のための多数の治療的開始点には、例えばグルタメートレセプター又はグルタメート放出、ラジカル掃去剤、抗−炎症物質、電圧−依存性カルシウムもしくはナトリウムチャンネルの遮蔽のための物質、ならびにＧＡＢＡ作用薬の阻止が含まれる［ＴｒｅｎｄｓＰｈａｒｍａｃｏｌ．Ｓｃｉ．１７，１９９６，２２７を参照されたい］。
【０００８】
グメタメート作動性神経伝達の阻害又はグルタメート放出の阻害は、異なる薬理学的作用を有し、かくして異なる作用機構を有する複数の物質により行うことができる［ＧＡＢＡレセプターリガンド（Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．Ｌｅｔｔ１９９０，１１８，９９，Ｂｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．１９９７，１２０，６０）、アルミニウム（Ｎｅｕｒｏｔｏｘｉｃｏｌ．１９９２，１３，４１３）、エタノール（Ｅｕｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．１９９２，２１９，４６９）、バルビツール酸系催眠薬、例えばチオペンタール（Ｂｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．１９９６，１１９，１４９８）、アデノシンＡ１レセプター（Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．Ｌｅｔｔ．１９９６，２２０，１６３）、α₂−作用薬（Ａｎｅｓｔｈｅｓｉｏｌ．１９９６，８５，５５１）、カンナビノイドレセプター作用薬（Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．１９９６，１６，４３２２）。
【０００９】
キヌレン酸（ＢｒａｉｎＲｅｓ．１９９２，５９２，３３３）及びテオフィリン（Ｂｒａｉｎｒｅｓ１９９１，５６５，３５３）に関し、これらの物質は試験管内においてグルタメート放出を顕著に阻害するが、生体内で神経保護作用を有していないことが示された。
【００１０】
Ｓｈｅｎｅｔａｌ．（Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．１９９６，１６，４３２２）による考察と対照的に、カンナビノイドレセプターに不活性であるＨＵ−２１１の（−）−エナンチオマーのカンナビノイドレセプター作用薬ＨＵ２１０は、頭蓋脳損傷モデルにおいて非−神経保護性である（Ｊ．Ｎｅｕｒｏｔｒａｕｍａ１９９３，１０，１０９）。
【００１１】
今回、上記の既知のカンナビノイドＣＢ１レセプター作用薬が、驚くべきことに、神経変性障害の、特に脳卒中及び頭蓋脳損傷の予防及び処置に適していることが見いだされた。
【００１２】
［Ａ］一般式（Ｉ）
【００１３】
【化１３】

【００１４】
［式中、
Ａ及びＤは同一又は異なり、単結合又は二重結合の位置に依存して、Ｃ原子又はＣＨ基を示し、
Ｅは単結合又は二重結合の位置に依存してＣＨもしくはＣＨ₂基又は硫黄原子を示し、
Ｇ、Ｌ及びＭは同一又は異なり、単結合又は二重結合の位置に依存して、式−ＣＲ⁵、−ＣＲ⁶Ｒ⁷又はＮ−Ｒ⁸の基を示し、
ここで
Ｒ⁵、Ｒ⁶、Ｒ⁷及びＲ⁸は同一又は異なり、
水素、ヒドロキシル、ホルミル、（Ｃ₂−Ｃ₆）−アルケニル、（Ｃ₂−Ｃ₆）−アルキニルを示すか、あるいは
場合によりヒドロキシル又は（Ｃ₁−Ｃ₄）−アルコキシにより置換されていることができる（Ｃ₁−Ｃ₆）−アルキルを示すか、
あるいは
Ｒ⁶及びＲ⁷は一緒になって式＝Ｏの基を示し、
ａは０又は１の数を示し、
Ｒ¹は水素又はヒドロキシルを示すか、あるいは
（Ｃ₁−Ｃ₁₁）−アルキル、（Ｃ₁−Ｃ₆）−アルコキシ、（Ｃ₁−Ｃ₆）−アルコキシカルボニル又は（Ｃ₁−Ｃ₄）−アシルオキシを示し、そのそれぞれは場合によりヒドロキシル、（Ｃ₁−Ｃ₁₀）−アルコキシにより又は式−ＮＲ⁹Ｒ¹⁰の基により置換されていることができ、
ここで
Ｒ⁹及びＲ¹⁰は同一又は異なり、水素、フェニル、（Ｃ₁−Ｃ₄）−アルキルを示すか、
あるいは
Ｒ⁹及びＲ¹⁰は窒素原子と一緒になって、場合によりさらにＳ及びＯの系列のさらなる複素原子を含むことができる５−〜７−員の飽和複素環又は式−ＮＲ¹¹の基を形成し、
ここで
Ｒ¹¹は水素、フェニル、（Ｃ₁−Ｃ₆）−アルキル又は（Ｃ₁−Ｃ₆）−アシルを示し、
Ｒ²は（Ｃ₁−Ｃ₁₀）−アルキル又は（Ｃ₁−Ｃ₁₀）−アルコキシを示し、そのそれぞれは場合によりフェニル、ハロゲン、ヒドロキシル、アジド、ニトロ、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、カルボキシル、（Ｃ₁−Ｃ₄）−アルコキシもしくは（Ｃ₁−Ｃ₄）−アルコキシカルボニルにより又は式−ＮＲ¹²Ｒ¹³の基により置換されていることができ、
ここで
Ｒ¹²及びＲ¹³は同一又は異なり、上記のＲ⁹及びＲ¹⁰の意味を有し、
Ｒ³及びＲ⁴は同一又は異なり、
水素又は場合によりヒドロキシルにより置換されていることができる（Ｃ₁−Ｃ₆）−アルキルを示すか、
あるいは
Ｒ³及びＲ⁴は一緒になって式Ｈ₂Ｃ＝の基を示し、
Ｔは（Ｃ₁−Ｃ₆）−アルキル又は（Ｃ₂−Ｃ₆）−アルケニルを示し、
Ｖはヒドロキシルを示すか、
あるいは
Ｔ及びＶは一緒になって閉環と共に
酸素原子又は式−ＮＲ¹⁴の基を示し、
ここで
Ｒ¹⁴は水素又はメチルを示し
以下の配置
【００１５】
【化１４】

【００１６】
の化合物を除く］
の中枢カンナビノイドレセプターＣＢ１の既知の作用薬、
［Ｂ］一般式（Ｉａ）：
【００１７】
【化１５】

【００１８】
［式中、
Ｒ¹’及びＲ²’は同一又は異なり、上記のＲ¹及びＲ²の意味を有し、
Ｒ¹⁵及びＲ¹⁶は同一又は異なり、
水素又は場合によりヒドロキシルで置換されていることができる（Ｃ₁−Ｃ₈）−アルキルを示すか、
あるいは
Ｒ¹⁵及びＲ¹⁶は一緒になってＣ−Ｃ結合を含み、フェニル環又は３−〜７−員の炭素環式環を形成し、ここで環系は場合により（Ｃ₁−Ｃ₆）−アルコキシカルボニル又は（Ｃ₁−Ｃ₈）−アルキルにより置換されていることができ、それらはそれら自身がヒドロキシルにより置換されていることができ、
Ｒ¹⁷は水素を示すか、
あるいは
Ｒ¹⁶及びＲ¹⁷は一緒になってＳ及びＯの系列の複素原子を含有することができる６−員の飽和、部分的飽和もしくは不飽和の複素環又は式−ＮＲ¹⁸の基を形成し、
ここで
Ｒ¹⁸は水素又は（Ｃ₁−Ｃ₄）−アルキルを示し、
ここで環系は場合により、それ自身がヒドロキシルにより置換されていることができる（Ｃ₁−Ｃ₈）−アルキルにより同一に又は異なって、また、同一炭素上で最高３回置換されていることができる］
の非−古典的カンナビノイド、
［Ｃ］一般式（Ｉｂ）又は（Ｉｃ）：
【００１９】
【化１６】

【００２０】
［式中、
Ｒ¹⁹及びＲ¹⁹’は同一又は異なり、
（Ｃ₆−Ｃ₁₀）−アリール又は、Ｓ、Ｎ及び／又はＯの系列の最高３個の複素原子を有する５−〜７−員の飽和もしくは不飽和の複素環を示し、そのそれぞれは場合により：ニトロ、ハロゲン、トリフルオロメチル、ヒドロキシル、カルボキシルから成る群から選ばれる１つもしくはそれ以上の同一もしくは異なる置換基により、あるいはそれ自身がヒドロキシルにより置換されていることができる（Ｃ₁−Ｃ₅）−アシル、（Ｃ₁−Ｃ₆）−アルコキシ、（Ｃ₁−Ｃ₆）−アルキルチオ、（Ｃ₁−Ｃ₆）−アルコキシカルボニル及び（Ｃ₁−Ｃ₆）−アルキルにより置換されていることができ、
Ｒ²⁰は水素又はメチルを示し、
Ｒ²¹及びＲ²²は同一又は異なり、
水素又は（Ｃ₁−Ｃ₆）−アルキルを示すか、あるいは
Ｒ²¹及びＲ²²は窒素原子と一緒になって、場合によりさらなる酸素もしくは硫黄原子を含有することができる５−〜７−員の飽和もしくは部分的の飽和複素環又は式−ＮＲ²⁸の基を形成し、
ここで
Ｒ²⁸は上記のＲ⁸の意味を有し、これと同一又は異なっており、
Ｒ²³は水素、ハロゲン、ヒドロキシル、（Ｃ₁−Ｃ₈）−アルキル又は（Ｃ₁−Ｃ₈）−アルコキシを示し、
Ｒ²⁴は水素又は（Ｃ₁−Ｃ₆）−アルキルを示し、
Ｒ²⁵は水素、フェニル、炭素数が３〜８のシクロアルキル又は場合により式−ＮＲ²⁹Ｒ³⁰の基により置換されていることができる（Ｃ₁−Ｃ₆）−アルキルを示し、
ここで
Ｒ²⁹及びＲ³⁰は同一又は異なり、上記のＲ⁹及びＲ¹⁰の意味を有し、
Ｒ²⁶及びＲ²⁷は水素を示すか、あるいは
一緒になって二重結合を含み、フェニル環を形成する］
のアミノアルキルインドール、
［Ｄ］一般式（Ｉｄ）：
【００２１】
【化１７】

【００２２】
［式中、
Ｒ³¹は上記のＲ¹⁹の意味を有し、これと同一又は異なっており、
Ｒ³²は水素、（Ｃ₁−Ｃ₃）−アルキル又は（Ｃ₁−Ｃ₃）−アルコキシを示し、
Ｒ³³及びＲ³⁴は上記のＲ²¹及びＲ²²の意味を有し、これと同一又は異なっている］
の化合物、
ならびに［Ｅ］一般式（Ｉｅ）：
【００２３】
【化１８】

【００２４】
［式中、
Ｙ及びＹ’は水素を示すか、
あるいは
Ｙ及びＹ’は一緒になって式＝Ｏ又は＝Ｓの基を示し、
Ｒ³⁵は少なくとも３つの二重結合を有する（Ｃ₁₆−Ｃ₃₀）−アルケニルを示し、
Ｒ³⁶はトリフルオロメチル又は式−ＯＲ³⁷もしくは−ＮＲ³⁸Ｒ³⁹の基を示し、
ここで
Ｒ³⁷は水素又は、場合により：ヒドロキシル、ハロゲン、トリフルオロメチル、（Ｃ₆−Ｃ₁₀）−アリール及び（Ｃ₁−Ｃ₆）−アルコキシから成る群より選ばれる１つもしくはそれ以上の同一もしくは異なる置換基により置換されていることができる（Ｃ₁−Ｃ₁₀）−アルキルを示し、
Ｒ³⁸及びＲ³⁹は上記のＲ³⁷の意味を有し、これと同一又は異なっているか、
あるいは
Ｒ³⁸及びＲ³⁹は、窒素原子と一緒になって、場合によりＳ及びＯの系列のさらなる複素原子を含有することができる５−〜７−員の飽和複素環又は式−ＮＲ⁴⁰の基を形成し、
ここで
Ｒ⁴⁰は上記のＲ⁸の意味を有し、これと同一又は異なる］
のエイコサノイド、
ならびにそれらの塩及び異性体を神経変性障害、特に脳卒中及び頭蓋脳損傷の抑制に用いるのが好ましい。
【００２５】
本発明に従って用いられる化合物はそれらの塩の形態で存在することもできる。一般に有機又は無機塩基又は酸との塩をここで挙げることができる。
【００２６】
本発明に関し、生理学的に許容され得る塩が好ましい。本発明の化合物の生理学的に許容され得る塩は無機酸、カルボン酸又はスルホン酸との本発明の物質の塩であることができる。特に好ましい塩は、例えば塩酸、臭化水素酸、硫酸、リン酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、トルエンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ナフタレンジスルホン酸、酢酸、プロピオン酸、乳酸、酒石酸、クエン酸、フマル酸、マレイン酸又は安息香酸との塩である。特別に好ましい塩はアミン官能基により形成される上記の塩である。
【００２７】
生理学的に許容され得る塩は、本発明の化合物の金属又はアンモニウム塩であることもできる。特に好ましい塩は、例えばナトリウム、カリウム、マグネシウム又はカルシウム塩、ならびにアンモニア又は有機アミン類、例えばエチルアミン、ジ−もしくはトリエチルアミン、ジ−もしくはトリエタノールアミン、ジシクロヘキシルアミン、ジメチルアミノエタノール、アルギニン、リシン、エチレンジアミン又は２−フェニルエチルアミンから誘導されるアンモニウム塩である。
【００２８】
本発明に関し、置換基は一般に以下の意味を有する：
（Ｃ ₁ −Ｃ ₁₁ ）−、（Ｃ ₁ −Ｃ ₁₀ ）−、（Ｃ ₁ −Ｃ ₈ ）−、（Ｃ ₁ −Ｃ ₆ ）−、（Ｃ ₁ −Ｃ ₄ ）−及び（Ｃ ₁ −Ｃ ₃ ）−アルキルは一般に、上記の置換基に依存して、炭素数が１〜１１の直鎖状もしくは分枝鎖状の炭化水素基を示す。挙げることができる例はメチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ペンチル、イソペンチル、ヘキシル、イソヘキシル、ヘプチル、イソヘプチル、オクチル及びイソオクチルである。
【００２９】
（Ｃ ₁₆ −Ｃ ₃₀ ）−及び（Ｃ ₂ −Ｃ ₆ ）−アルケニルは一般に、上記の置換基に依存して、炭素数が２〜３０であり、１つ又はそれ以上の、好ましくは１、２もしくは少なくとも３個の二重結合を有する直鎖状もしくは分枝鎖状の炭化水素基を示す。挙げることができる例は、アリル、プロペニル、イソプロペニル、ブテニル、イソブテニル、ペンテニル、イソペンテニル、ヘキセニル、イソヘキセニル、ヘプテニル、イソヘプテニル、オクテニル及びイソオクテニルである。
【００３０】
（Ｃ ₂ −Ｃ ₆ ）−アルキニルは一般に炭素数が２〜６であり、１つ又はそれ以上の、好ましくは１又は２つの三重結合を有する直鎖状もしくは分枝鎖状の炭化水素基を示す。炭素数が２〜約５であり、１つの三重結合を有する低級アルキル基が好ましい。炭素数が２〜４であり、１つの三重結合を有するアルケニル基が特に好ましい。挙げることができる例はアセチレン、２−ブチン、２−ペンチン及び２−ヘキシンである。
【００３１】
シクロアルキルは一般に炭素数が３〜８の環状炭化水素基を示す。シクロプロパン、シクロペンタン及びシクロヘキサン環が好ましい。挙げることができる例はシクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル及びシクロオクチルである。
【００３２】
アリールは一般に炭素数が６〜１０の芳香族基を示す。好ましいアリール基はフェニル及びナフチルである。
【００３３】
（Ｃ ₁ −Ｃ ₁₀ ）−、（Ｃ ₁ −Ｃ ₆ ）−及び（Ｃ ₁ −Ｃ ₄ ）−アルコキシは一般に、上記の置換基に依存して、酸素原子を介して結合している炭素数が１〜１０の直鎖状もしくは分枝鎖状の炭化水素基を示す。挙げることができる例はメトキシ、エトキシ、プロポキシ、イソプロポキシ、ブトキシ、イソブトキシ、ペントキシ、イソペントキシ、ヘキソキシ、イソヘキソキシ、ヘプトキシ、イソヘプトキシ、オクトキシ又はイソオクトキシである。
【００３４】
（Ｃ ₁ −Ｃ ₆ ）−及び（Ｃ ₁ −Ｃ ₅ ）−アシルは一般に、カルボニル基を介して結合している炭素数が１〜６の直鎖状もしくは分枝鎖状の低級アルキルを示す。挙げることができる例は：アセチル、エチルカルボニル、プロピルカルボニル、イソプロピルカルボニル、ブチルカルボニル及びイソブチルカルボニルである。
【００３５】
（Ｃ₁−Ｃ₆）−及び（Ｃ₁−Ｃ₄）−アルコキシカルボニルは、例えば式
【００３６】
【化１９】

【００３７】
により示すことができる。これに関し、アルキルは炭素数が１〜６又は１〜４の直鎖状もしくは分枝鎖状の炭化水素基を示す。挙げることができる例は以下のアルコキシカルボニル基である：メトキシカルボニル、エトキシカルボニル、プロポキシカルボニル、イソプロポキシカルボニル、ブトキシカルボニル又はイソブトキシカルボニル。
【００３８】
ハロゲンは本発明に関し、フッ素、塩素、臭素及びヨウ素を示す。
【００３９】
（Ｃ ₁ −Ｃ ₆ ）−アルキルチオは一般に、硫黄原子を介して結合している炭素数が１〜６の直鎖状もしくは分枝鎖状の炭化水素基を示す。挙げることができる例はメチルチオ、エチルチオ及びプロピルチオである。
【００４０】
（Ｃ ₁ −Ｃ ₄ ）−アシルオキシは、例えば式
【００４１】
【化２０】

【００４２】
により示すことができる。これに関し、アルキルは炭素数が１〜４の直鎖状もしくは分枝鎖状の炭化水素基を示す。挙げることができる例は以下のアシルオキシ基である：メトカルボニルオキシ、エチルカルボニルオキシ及びプロピルカルボニルオキシ。
【００４３】
飽和、部分的飽和及び不飽和複素環は本発明に関し、一般にＳ、Ｎ及び／又はＯの系列の最高３個の複素原子を含有することができる５−〜７−員、好ましくは５−〜６−員の複素環を示す。挙げることができる例は：ピリジル、チエニル、フリル、ピロリル、ピロリジニル、ピペラジニル、ピリミジル、チアゾリル、オキサゾリル、イミダゾリル、モルホリニル又はピペリジルである。
【００４４】
本発明の化合物は像と鏡像として挙動する（エナンチオマー）か又は像と鏡像として挙動しない（ジアステレオマー）立体異性体として存在することができる。本発明はエナンチオマー又はジアステレオマー及びそれらのそれぞれの混合物の両方に関する。エナンチオマー及びジアステレオマーのこれらの混合物は既知の方法で立体異性体的に均一な成分に分離することができる。
【００４５】
本発明に従って神経変性障害、特に脳卒中及び頭蓋脳損傷の抑制に用いられるのが好ましい化合物は、
一般式（Ｉ）の化合物において
Ａ、Ｄ、Ｅ、Ｇ、ａ、Ｌ、Ｍ、Ｔ及びＶは上記の意味を有し、
Ｒ¹はヒドロキシル又は式−Ｏ−ＣＯ−ＣＨ₃もしくは−Ｏ−ＣＯ−（ＣＨ₃）−Ｎ（Ｃ₂Ｈ₅）₂の基を示し、
Ｒ³及びＲ⁴は一緒になって＝ＣＨ₂基を示すか、
あるいは
Ｒ³及びＲ⁴は水素、メチル又は（ＣＨ₂）₃−ＯＨ基を示し、
一般式（Ｉａ）の化合物において
Ｒ²’及びＲ¹⁷は上記の意味を有し、
Ｒ¹’はヒドロキシルを示し、
Ｒ¹⁵及びＲ¹⁶は水素を示すか、あるいは
一緒になってＣ−Ｃ結合を含み、ピリジル又はＣＨ−ＯＨ−置換フェニル環を形成し、
一般式（Ｉｂ）の化合物において
Ｒ¹⁹はナフチルを示し、
Ｒ²⁰はメチルを示し、
Ｒ²³は水素を示し、
Ｒ²¹及びＲ²²は窒素原子と一緒になってモルホリン環を形成し、
一般式（Ｉｃ）の化合物において
Ｒ¹⁹’はメトキシ−置換ナフチルを示し、
Ｒ²⁴は水素を示し、
Ｒ²⁵はフェニル、（Ｃ₁−Ｃ₆）−アルキル又は基
【００４６】
【化２１】

【００４７】
を示し、
Ｒ²⁶及びＲ²⁷は水素又はフェニルを示し、
一般式（Ｉｄ）の化合物において
Ｒ³¹は場合によりメトキシで置換されていることができるナフチルを示し、
Ｒ³²は水素又はメチルを示し、
Ｒ³³及びＲ³⁴は窒素原子と一緒になってモルホリンを示し、
一般式（Ｉｅ）の化合物において
Ｙ及びＹ’は水素を示すか、又は一緒になって＝Ｏ基を示し、
Ｒ³⁵は（Ｃ₁₆−Ｃ₂₁）−アルケニルを示し、
Ｒ³⁶はトリフルオロメチル又は式−ＮＲ³⁸Ｒ³⁹の基を示し、
ここで
Ｒ³⁸及びＲ³⁹は同一又は異なり
水素又は場合によりフッ素もしくはヒドロキシルで置換されていることができる（Ｃ₁−Ｃ₃）−アルキルを示す
一般式Ｉの化合物ならびにそれらの塩及び異性体である。
【００４８】
下記の化合物を神経変性障害の予防及び処置に、特に脳卒中及び頭蓋脳損傷の処置に用いるのが特別に好ましい。
【００４９】
【化２２】

【００５０】
【化２３】

【００５１】
【化２４】

【００５２】
【化２５】

【００５３】
上記の既知の化合物は通常の方法により製造することができる［上記の参照文献を参照されたい］。
【００５４】
カンナビノイドレセプターＣＢ−１作用薬は、本発明の意味において、下記のＣＢ−１ルシフェラーゼリポーター遺伝子試験において、１０^-5Ｍ未満のＩＣ₅₀値を有する化合物である。
【００５５】
【ＣＢ１ルシフェラーゼリポーター遺伝子試験】
１．ラットカンナビノイドレセプターＣＢ１のクローニング
ラット脳からの全ＲＮＡ（組織は殺したばかりの動物から採取し、液体窒素中でショック−凍結（ｓｈｏｃｋ−ｆｒｏｚｅｎ）した）を酸性グアニジニウムチオシアナート／フェノール／クロロホルム抽出を用いて単離し（Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．１９７９，１８，５２９４）、逆転写酵素及びランダムプライマー（それぞれＩｎｖｉｔｒｏｇｅｎから）を用いてｃＤＮＡに変換した。ポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ、条件：９４℃において４分、１ｘ；９４℃において１分；５３℃において２分；７２℃において１分；５０サイクル；９４℃において１分、５３℃において２分、７２℃において４分、１ｘ）を、ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒサーモサイクラーにおいて、酵素Ｔａｑポリメラーゼ（ｐｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ）を用いて行った；用いたオリゴヌクレオチドプライマー（塩基９９から１２２：５’→３’、”下流へ”；１５５６−１５７５：３’←５’、”上流へ”）はラットカンナビノイドレセプターの公開されている配列から誘導し（Ｎａｔｕｒｅ１９９０，３４６，５６１）、ＡｐｐｌｉｅｄＢｉｏｓｙｓｔｅｍｓからのＤＮＡ合成機モデル１３８０上で合成した。ＰＣＲ反応の一部を１ｘＴＢＥ緩衝液中の１％濃度アガロースゲル中で分離し、次いでエチジウムブロミドで染色し、予想の長さを有する１つのバンドのみが可視であった（約１．５ｋｂ）。このＰＣＲ生成物をＴＡクローニングベクター（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）中にサブクローニングし、挿入片のヌクレオチド配列をＴ７ＤＮＡポリメラーゼ（Ｓｅｑｕｅｎａｓｅ，ＵＳＡ／Ａｍｅｒｓｈａｍ）を用い、ジデオキシヌクレオチド連鎖停止反応により決定した。挿入片は１４７７塩基対の長さを有し、４７３アミノ酸のタンパク質に相当する１４１９塩基対の読み取り枠を含有する。塩基対の数、読み取り枠の位置及びアミノ酸の数は公開されている配列と一致する。ＧＣＧソフトウェアスーツ（ＧｅｎｅｔｉｃＣｏｍｐｕｔｅｒＧｒｏｕｐ）を用いてコンピューター分析を行った。ｃＤＮＡ挿入片をＨｉｎｄＩＩＩ及びＮｏｔＩ（Ｂｉｏｌａｂｓ）で部分的に消化した後に発現ベクターｐＲｃ／ＣＭＶ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）中にサブクローニングした。この構築物（プラスミドＣＭＶ−ＲＨ）をトランスフェクション実験に用いた。
【００５６】
２．ＣＨＯｌｕｃ９リポーター細胞の安定なトランスフェクション
ＣＨＯｌｕｃ９細胞を１０％の牛胎児血清（ＦＣＳ）を含有する５０％Ｄｕｌｂｅｃｃｏ修正Ｅａｇｌｅ培地／５０％Ｆ−１２（ＤＭＥＭ／Ｆ１２）中で培養した。トランスフェクションを６−ウェルプレートにおいて準備した。製造者（ＢｏｅｈｒｉｎｇｅｒＭａｎｎｈｅｉｍ）の実験案に対応して、ＤＯＴＡＰトランスフェクションシステムを用い、１０⁵細胞当たりに７．５μｇのＱｉａｇｅｎ−精製ＣＭＶ−ＲＨプラスミドＤＮＡを加えた。トランスフェクションされた細胞を１ｍｇ／ｍｌのＧ４１８を用いて選択し、９６−ウェルプレート上における制限希釈によりそれぞれのクローンを得た。カンナビノイドレセプターを発現する細胞系を、カンナビノイドレセプター作用薬、ＷＩＮ−５５，２１２１−２と共にインキュベーションした後、リポーター遺伝子発現の阻害に関して、フォルスコリン（ｆｏｒｓｋｏｌｉｎ）の存在下で同定した。いくつかの安定してトランスフェクションされ、サブクローニングされた細胞系を、１の下に記載された通り、ＲＴ−ＰＣＲを用いてさらに特性化した。
【００５７】
３．試験の最適化及びＣＨＯＣＢ１リポーター細胞系の薬理学的特性化
高い感度及び再現性、低い変動、ならびに機械的システムで行うための優れた適合性を目的として、いくつかの試験パラメーター、例えば細胞濃度、発育相及び試験インキュベーションの持続時間、フォルスコリン濃度、培地組成などを変動させることにより、ルシフェラーゼ試験を最適化した。以下の試験案を細胞の薬理学的特性化に、及び機械に補助される物質のスクリーニングに用いた：原培養を１０％のＦＣＳを有する５０％Ｄｕｌｂｅｃｃｏ修正Ｅａｇｌｅ培地／５０％Ｆ−１２（ＤＭＥＭ／Ｆ１２）中で、１０％ＣＯ₂下に、３７℃において培養し、それぞれの場合に２〜３日後に１：１０に分断した。試験培養を９６−ウェルプレート中に、ウェル当たり５０００細胞において接種し、３７℃で７０時間培養した。次いで培養をリン酸塩−緩衝食塩水で注意深く洗浄し、無血清Ｕｌｔｒａ−ＣＨＯ培地（Ｂｉｏ−Ｗｈｉｔｔａｋｅｒ）を用いて再構成した。ＤＭＳＯに溶解された物質を培地中で１ｘに希釈し、２０分後に試験培養中にピペットで入れ（試験混合物中の最終的最大ＤＭＳＯ濃度：０．５％）、フォルスコリンを加え、次いで培養をインキュベーターにおいて３７℃で３時間インキュベーションした。次いで上澄み液を除去し、２５μｌのライシス試薬（２ｍＭＤＴＴ、１０％グリセロール、３％ＴｒｉｔｏｎＸ１００を含む２５ｍＭトリホスフェート、ｐＨ７．８）の添加により細胞をライシスした。
【００５８】
この直後にルシフェラーゼ基質溶液（２．５ｍＭＡＴＰ、０．５ｍＭルシフェリン、０．１ｍＭ補酵素Ａ、１０ｍＭトリシン、１．３５ｍＭＭｇＳＯ₄、１５ｍＭＤＴＴ、ｐＨ７．８）を加え、混合物を短時間震盪し、Ｈａｍａｍａｔｚｕカメラシステムを用いてルシフェラーゼ活性を測定した。
【００５９】
Ｇ_iタンパク質の不活化のために、試験前に試験培養を５ｎｇ／ｍｌ（最終的濃度）の百日ぜき毒で１６時間処理した。
【００６０】
ＩＣ₅₀値をＧｒａｐｈＰａｄＰｒｉｓｍプログラム（Ｈｉｌｌ式、特異的：１−部位競合）を用いて算出した。
【００６１】
【表１】

【００６２】
ラット皮質膜に関する結合研究
膜タンパク質は種々の組織から、又は細胞から標準的方法により調製する。緩衝液、標識されたリガンド、ＤＭＳＯ又は試験物質を一緒にピペットで入れ、次いで１００μｇのタンパク質を加え、混合物を十分に混合し、水浴中で３０℃において６０分間インキュベーションする。インキュベーション時間の終了後、氷−冷インキュベーション緩衝液をそれぞれの管に加えることにより反応を停止させる。濾過の後、３／４ｍｌのインキュベーション緩衝液を用いて洗浄を行う。フィルターをミニバイアルに移し、液体シンチレーションカウンターで放射性を決定する。
【００６３】
【表２】

【００６４】
グルタメート放出の阻害
ラットの断頭の後、頭蓋を開け、脳を持ち上げて出し、正中裂に沿って切断する。海馬を露出し、残りの組織から分離し、３５０μｍの厚さの切片に切断し、ストレイニング容器（ｓｔｒａｉｎｉｎｇｖｅｓｓｅｌ）中で３７℃において６０分間インキュベーションする。その後基本値及び７５ｍＭＫＣｌを用いた１回の刺激が続き（Ｓ１）、切片を試験物質と一緒にインキュベーションし、次いでＫＣｌ及び試験物質を用いる刺激（Ｓ２）を繰り返す。次いで調べられるべき試料のグルタメート濃度をＮＡＤＨの酵素反応（ＧＬＤＨ）及び蛍光測定を用いて測定する。キャリブレーション曲線を用い、試料のグルタメート含有量を決定し、タンパク質含有量の知識を用いてタンパク質１ｍｇ当たりのグルタメート含有量を算出することができる。Ｓ２／Ｓ１の比率を比較する；グルタメート放出阻害剤は、濃度−依存的にこの比率を減少させる。
【００６５】
【表３】

【００６６】
低体温症
１．アゴニズム試験（ａｇｏｎｉｓｍｔｅｓｔｉｎｇ）：
食道温度プローブを介して基本体温を決定してから５分後に、試験物質を投与する（静脈内）。標準の群は試験物質のための溶媒のみを、同様に静脈内で与えられる。静脈内投与から７．５、１５、３０及び６０分後に体温を測定する。１種類の投薬量当たりの群の大きさは５〜７匹の動物である（ラット）。
【００６７】
【表４】

【００６８】
^a)１℃の最大温度低下を達成するために必要な投薬量
２．拮抗試験：
試験物質の投与の６０分前に特異的ＣＢ１拮抗薬ＳＲ１４１７１６Ａ、又は標準の群には溶媒（Ｓｏｌｕｔｏｌ／０．９％ＮａＣｌ）のみを腹腔内に投与する。食道温度プローブを介し、ＳＲ１４１７１６Ａの投与の５分前に基本体温を測定する。その後の方法は「作用試験」の方法に対応する。１種類の投薬量当たりの群の大きさは５〜７匹の動物である（ラット）。
【００６９】
ラットにおける持続性焦点性脳虚血（ＭＣＡ−Ｏ）
イソフルラン麻酔下で正中脳動脈を片側で露出し、動脈とその側枝を電気凝固を用いて不可逆的に封止する。介入の結果として脳梗塞が形成される。手術の間、動物の体温は３７℃に保つ。傷を閉じ、麻酔から覚ました後、動物を再びそのかごに放つ。閉塞の後、種々の時間計画に従って、及び種々の投与経路（静脈内、腹腔内）を介して物質の投与を行う。７日後に梗塞の寸法を決定する。これを行うために、脳を取り出し、組織学的に仕上げ、梗塞の容積をコンピューター−補助分析システムを用いて決定する。
【００７０】
【表５】

【００７１】
^a)閉塞からそれぞれ２及び４時間後に直接、静脈内ボーラス注射として物質投与。
【００７２】
ラットにおける硬膜下血腫（ＳＤＨ）
麻酔下で、動物自身の血液を片側において硬膜下に注射する。血腫下で梗塞が形成される。種々の時間計画に従って、及び種々の投与経路（静脈内、腹腔内）を介して物質投与を行う。ラットにおける持続性焦点性虚血（ＭＣＡ−Ｏ）のモデルにおいて記載された通りに梗塞の寸法を決定する。
【００７３】
【表６】

【００７４】
^a)損傷からそれぞれ２及び４時間後に直接、静脈内ボーラス注射として物質投与。
【００７５】
本発明は不活性で無毒性の製薬学的に適した助剤及び賦形剤の他に、１種又はそれ以上の一般式（Ｉ）〜（Ｉｅ）の化合物を含有する、あるいは１種又はそれ以上の式（Ｉ）〜（Ｉｅ）の活性化合物から成る製薬学的調剤、ならびにこれらの調剤の製造法も含む。
【００７６】
式（Ｉ）〜（Ｉｅ）の活性化合物はこれらの調剤中で、混合物全体の０．１〜９９．５重量％、好ましくは０．５〜９５重量％の濃度で存在しなければならない。
【００７７】
式（Ｉ）〜（Ｉｅ）の活性化合物の他に、製薬学的調剤は他の製薬学的活性化合物も含有することができる。
【００７８】
上記の製薬学的調剤は既知の方法により通常のやり方で、例えば助剤又は賦形剤を用いて製造することができる。
【００７９】
所望の結果を達成するために、一般に式（Ｉ）〜（Ｉｅ）の活性化合物を２４時間毎に体重１ｋｇ当たり約０．０１〜約１００ｍｇの合計量で、好ましくは体重１ｋｇ当たり約１ｍｇ〜５０ｍｇの合計量で、適宜、数回の個別の投薬量の形態で投与するのが有利であることが証明された。
【００８０】
しかし適宜、主に、処置される患者の種類及び体重、薬剤に対する患者の挙動、疾患の種類及び重度、調剤及び投与の型、ならびに投与が行われる時間又はその後の間隔に依存して上記の量から変動させるのが有利であり得る。

Claims

下記式

の化合物から選ばれるカンナビノイドレセプターＣＢ１の作用薬を含有することを特徴とする神経変性障害の予防及び処置のための薬剤。