JP4474164B2 - ワクチン製造のための連続継代性細胞系 - Google Patents
ワクチン製造のための連続継代性細胞系 Download PDFInfo
- Publication number
- JP4474164B2 JP4474164B2 JP2003565516A JP2003565516A JP4474164B2 JP 4474164 B2 JP4474164 B2 JP 4474164B2 JP 2003565516 A JP2003565516 A JP 2003565516A JP 2003565516 A JP2003565516 A JP 2003565516A JP 4474164 B2 JP4474164 B2 JP 4474164B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- marek
- cell line
- disease virus
- cells
- virus
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Lifetime
Links
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
- C12N15/85—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for animal cells
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/12—Viral antigens
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/12—Viral antigens
- A61K39/245—Herpetoviridae, e.g. herpes simplex virus
- A61K39/255—Marek's disease virus
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
- A61P31/20—Antivirals for DNA viruses
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/005—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from viruses
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N7/00—Viruses; Bacteriophages; Compositions thereof; Preparation or purification thereof
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2510/00—Genetically modified cells
- C12N2510/02—Cells for production
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2510/00—Genetically modified cells
- C12N2510/04—Immortalised cells
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2710/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA dsDNA viruses
- C12N2710/00011—Details
- C12N2710/16011—Herpesviridae
- C12N2710/16311—Mardivirus, e.g. Gallid herpesvirus 2, Marek-like viruses, turkey HV
- C12N2710/16321—Viruses as such, e.g. new isolates, mutants or their genomic sequences
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2710/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA dsDNA viruses
- C12N2710/00011—Details
- C12N2710/16011—Herpesviridae
- C12N2710/16311—Mardivirus, e.g. Gallid herpesvirus 2, Marek-like viruses, turkey HV
- C12N2710/16322—New viral proteins or individual genes, new structural or functional aspects of known viral proteins or genes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2710/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA dsDNA viruses
- C12N2710/00011—Details
- C12N2710/16011—Herpesviridae
- C12N2710/16311—Mardivirus, e.g. Gallid herpesvirus 2, Marek-like viruses, turkey HV
- C12N2710/16334—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2710/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA dsDNA viruses
- C12N2710/00011—Details
- C12N2710/16011—Herpesviridae
- C12N2710/16311—Mardivirus, e.g. Gallid herpesvirus 2, Marek-like viruses, turkey HV
- C12N2710/16351—Methods of production or purification of viral material
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2810/00—Vectors comprising a targeting moiety
- C12N2810/50—Vectors comprising as targeting moiety peptide derived from defined protein
- C12N2810/60—Vectors comprising as targeting moiety peptide derived from defined protein from viruses
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Virology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Zoology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Oncology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Description
いて導入させるに至った21,22,36,40。
動物。白色ローマン上質レッグホーン(White Lohmann selected leghorns)(LSL)(ローマン社、クックスハーフェン(Cuxhaven)、ドイツ)を用い、孵化日に翼に標識を施した。トリを、ケージ内で飼育し、適宜飼料および水を与えた。
血漿中のMDV−1に特異的な抗体を、酵素結合免疫測定法(ELISA)によって決定した。抗原は、凍結融解による感染から5日後に採集された5×107のBAC20に感染したCEF溶解物から構成された。この溶解物(PBS中5mL)を、60Wで60秒間超音波分解し、細胞の破片を、遠心分離(10,000g,10分、4℃)によって除去した。5×107の未感染のCEF溶解物を、陰性対照として用いた。ELISAプレート(ヌンク(Nunc)社製)を、4℃で16時間、100μLの溶解物(最終濃度:5μL溶解物/mL)で被覆した。血漿サンプルを、1:100希釈度で開始してlog2ステップで希釈し、2%スキムミルクを用いてブロッキングした後、25℃で60分間、プレートに加えた。PBSによる十分な洗浄の後、100μLの抗ニワトリIgGペルオキシダーゼ複合体(シグマ社製)を、25℃で30分間加えた。PBSによる最終洗浄後、100μLのTMB基質溶液(シグマ社製)を、反応が2MのH2SO4によって停止されるまで、10分間加えた。450nmでの吸光度(A450)を読み取り(TecanSPECTRA、クライルスハイム(Crailsheim)、ドイツ)、終点抗体力価を前述のように測定した20。
QM7細胞を、前述のとおりリン酸カルシウム沈殿法によってトランスフェクションした29。QM7細胞を、約70%の密集度まで6ウェルプレートにおいて成長させ、10μgの組み換えプラスミドpcMgEによってトランスフェクションした30。トランスフェクションされた細胞を、5%FCSと1mLあたり1000μgのG−418(ギブコBRL社製)を含有するDMEM培地でオーバーレイした。抗生物質の存在下での2週間の細胞培養後、単一の細胞クローンを、96ウェルプレートに選別した。細胞クローンが96ウェルプレートにおいて飽和密度にまで成長した後、これらを、1:2に分割し、回復期MDVI血清を用いるIIFを、細胞クローンにおいて実行した。実質上全ての細胞がMDVgEを発現した細胞クローンを、同定し(図2)、SOgEと称した。SOgE細胞を、拡張させるとともに、週間隔でgE発現について検査した。G−418の存在下で、gE発現は、15週間以上安定していることを示した。この薬剤の不存在下で、SOgEにおけるgE発現は、10週間以内に検出された。SOgE中の(QM7細胞中にない)MDVgEのDNAの存在を、それぞれ1×107の細胞から調製されたDNAのPCR分析によって確認した(図3)。
産生された細胞系による機能的MDVgEの発現の問題を、SOgE細胞におけるgE陰性MDVの成長分析によって対処した。糖蛋白質Eは、in vitroでのMDV成長に不可欠であることを示した30。したがって、gE陰性BAC20ウイルスをコード化する20ΔgEのDNA(Schumacher et al., 2000)を、SOgEまたはQM7細胞にトランスフェクションし、プラーク形成を監視した。SOgE細胞において、20ΔgEプラークが、抗gBmab2K11を用いるIIFの後、簡単に観察されたのに対して、親QM7細胞においては、単一の感染細胞しか、mabによって視覚化され得なかった(図4)。これらの結果は、SOgEによって産生される機能的gEが、gE欠失ウイルスにおいて不可欠なMDV−1gEを補完することができることを確かにした。
SOgE細胞における20ΔgEプラークの寸法は、QM7細胞におけるBAC20ウイルスの寸法、またはQM7細胞を発現するgBにおけるgB陰性ウイルス変異体の寸法よりも非常に大きいようであった29。この予期しなかった観察を、更なる実験において対処した。無毒性のMDV−1株584Ap80CおよびCVI988、ならびに毒性RB1Bおよび超毒性株のプラーク寸法を、CEF、QM7およびSOgEにおいて評価した。これは、それぞれの細胞と、感染したCEFまたはPBMC(EU1)との共同播種によって行った。低い感染多重度で(MOI=0.0001、すなわち1×106細胞あたり100PFU)、584Ap80C、CVI988、またはRB1Bによって感染されたCEF細胞とSOgE細胞との共同播種が、プラーク形成をもたらすことを実証することができた(図5)。このプラーク寸法は、CEF細胞の寸法に匹敵した(図5)。さらに、SOgE細胞のトランスフェクションの後、ウイルスDNAまたは大腸菌由来クローン化ウイルスDNA(BAC20)29から伝染性MDV−1を直接再構成することができた(図5)。したがって、冗長な細胞培養継代なしに、SOgE細胞に対するMDVの直接的な適応が可能であり、このことは、ワクチン製造と、動物実験のための毒性および超毒性MDV−1の単離または産生との両方に関して主要な利点である。
SOgE細胞が化学的に誘導されたウズラ腫瘍に由来するという事実が、全体の細胞製剤の全身適用後にニワトリの腫瘍を発生させ得るというとても起こりそうにない可能性を提起した。この重要な問題に対処するために、18羽のニワトリ全部に、SOgE細胞(12羽)または親QM7細胞(6羽)のいずれかを接種した。それぞれ個別のニワトリには、筋内に1×106の細胞を、また、腹腔内経路で1×106の細胞を与えた(表1)。接種されたニワトリの運命は、解剖が実行されたときに、全体で12週間続いた。ニワトリは、実験の経過中に、いずれの臨床的症状も示さなかった。さらに、全てのニワトリは、良好な栄養状態のようであったし、かつ解剖時に腫瘍形成のいずれの症状もなかったようであった。これらの結果から、我々は、ワクチン投与量に比して約100〜1000倍多い細胞が投与されたとしても、組み換えMDVgE発現SOgE細胞と親QM7細胞とは、ニワトリにおいて腫瘍を生じさせないことを結論付けた。したがって、我々は、MDVまたは組み合わせたワクチンの製造に関して、SOgE細胞が安全であると考えた。
SOgE細胞において増殖されたワクチン株RispensCVI988と、CEF細胞において従来産生されたこのワクチン株との防御能力を比較するために、動物実験を行った。1日齢のニワトリに、1×106のSOgE細胞(第1群、表2)、1×106の親QM7細胞(第4群、表1)、またはSOgE(第2群、表2)もしくはCEF細胞(第3群、表2)において産生された、1×103のCVI988プラーク形成ユニットを与えた。交差感染を避けるために、ワクチンウイルスを、CEFから単離されたCVI988のDNAの、SOgEまたはCEF細胞に対するトランスフェクションの後に産生した。トランスフェクションされた細胞を、新鮮な未感染の細胞とともに共同播種し、ワクチンウイルスを、完全な細胞変性効果が生じたとき、免疫後5日目に採集した。免疫されたトリを、免疫後12日目に超毒性MDV−1株EU1で対抗感染させた。模擬免疫された動物(QM7細胞、第4群)において、ニワトリは、感染後7日の早さでMDに苦しみ、2羽のトリは、それぞれ9日目および10日目に死亡した。免疫後37日目までに、全てのトリは、感染の結果死亡した(表2)。SOgEで免疫された動物において、4羽のニワトリは、感染の結果死亡したが、3羽のトリは、感染後70日目の実験終了まで生残した(表2)。しかしながら、3羽の生残したトリは、総病理検査および内臓器官の腫瘍の検出によって証明されるようにMDを示した(表2)。対照的に、SOgEまたはCEF細胞のいずれかにおいて産生されたCVI988で免疫されたニワトリは、実験終了までにMDによって死亡しなかった(表2)。しかしながら、第2群および第3群のそれぞれ1羽のトリにおいて、MDの症状が全体病理によって同定された(表2)。
免疫かつ対抗されたトリにおける血清抗MDV−1反応に続いて、ELISA試験を実行した。防御されたトリは、対抗感染後時間が経つにつれて徐々に上昇するELISA抗体を示したのに対して、SOgEまたはQM7細胞で接種されたニワトリが高い抗体力価を生じさせなかった。それどころか、抗体力価は、感染後の時点が後になるほど下降し、または実質的に一定のままであった(図6)。これらの結果から、永続性SOgE細胞において産生されたMDCVI988ワクチンがCEF細胞において従来産生されたものと同様に良好な防御を提供することが結論付けられる。さらに、MDに対する防御は、徐々に上昇する抗MDV−1抗体と一致し、このことは、ワクチンウイルスの存在によって制御され得る、細胞溶解複製するワクチンウイルス、または低レベル複製するEU1のいずれかによるニワトリ免疫システムの永続的促進が、腫瘍遺伝子MDに対する防御の必須条件であることを示し得る。
Claims (28)
- 細胞関連アルファヘルペスウイルスの成長を支持することができる連続継代性細胞系であって、ヘルペスウイルスの糖タンパク質gE遺伝子またはマレック病ウイルス由来の糖タンパク質gE遺伝子の機能的フラグメントを含む核酸によって、細胞をトランスフェクションするステップと、前記細胞またはその子孫を、前記核酸の安定な発現と、前記細胞またはその子孫の少なくとも10継代の増殖とに適した条件下で培養するステップとを含む方法により得られることを特徴とする連続継代性細胞系。
- 前記トランスフェクションされた細胞は、脊椎動物細胞であることを特徴とする請求項1記載の連続継代性細胞系。
- 前記トランスフェクションされた細胞は、鳥類細胞であることを特徴とする請求項1または2記載の連続継代性細胞系。
- 前記トランスフェクションされた細胞は、筋芽細胞であることを特徴とする請求項1〜3のうちいずれか1項に記載の連続継代性細胞系。
- 前記筋芽細胞は、QM7であることを特徴とする請求項4記載の連続継代性細胞系。
- 前記QM7細胞は、ATCC CRL−1962として寄託された細胞に由来することを特徴とする請求項5記載の連続継代性細胞系。
- 前記ヘルペスウイルスは、マレック病ウイルスを含むことを特徴とする請求項1〜6のうちいずれか1項に記載の連続継代性細胞系。
- 前記マレック病ウイルスは、血清型1,2または3であることを特徴とする請求項7に記載の連続継代性細胞系。
- 前記マレック病ウイルスは、無毒性のマレック病ウイルスであることを特徴とする請求項8記載の連続継代性細胞系。
- 前記無毒性株は、RispensCVI988を含むことを特徴とする請求項9記載の連続継代性細胞系。
- 前記連続継代性細胞系は、前記ウイルスの適応なしにマレック病ウイルス株の成長を支持することができることを特徴とする請求項1〜10のうちいずれか1項に記載の連続継代性細胞系。
- 請求項1〜11のいずれか1項に記載の細胞系から得られることを特徴とする細胞調製物。
- 脊椎動物において疾病に対する防御を誘導することができるワクチンの調製のための、請求項1〜11のいずれか1項に記載の細胞系および/または請求項12記載の調製物の使用。
- 前記脊椎動物は鳥類であることを特徴とする請求項13記載の使用。
- 超毒性、および/または強毒性、および/または強毒性株、および/または毒性、および/または無毒性のマレック病ウイルス株の産生および/または維持および/または単離のための、請求項1〜11のいずれか1項に記載の細胞系の使用。
- ジェネティシン、その誘導体またはアナローグの存在下で、前記ウイルスを有する前記細胞系を培養するステップをさらに含むことを特徴とする請求項15記載の使用。
- 前記マレック病ウイルス株は、マレック病ウイルス血清型1を含むことを特徴とする請求項15または16記載の使用。
- 前記マレック病ウイルス株は、EU1またはRB1Bまたは584Ap80CまたはCVI988を含むことを特徴とする請求項15〜17のうちいずれか1項に記載の使用。
- 前記マレック病ウイルス株は、天然の株、または遺伝学的に改変された株を含むことを特徴とする請求項15〜18のうちいずれか1項に記載の使用。
- マレック病の診断用抗原の産生のための、請求項1〜11のいずれか1項に記載の細胞系の使用。
- マレック病ウイルス株の産生および/または単離および/または維持方法であって、請求項1〜11のいずれか1項に記載の細胞系を前記株によって感染させるステップと、前記細胞系を、前記細胞系の増殖と、マレック病ウイルスの産生、維持および単離とに適した条件下で、培養するステップとを含むことを特徴とする方法。
- ジェネティシン、その誘導体またはアナローグの存在下で、前記ウイルスを有する前記細胞系を培養するステップをさらに含むことを特徴とする請求項21記載の方法。
- 前記マレック病ウイルス株は、マレック病ウイルス血清型1および/または血清型2および/または血清型3を含むことを特徴とする請求項21または22記載の方法。
- 前記マレック病ウイルス株は、EU1またはRB1Bまたは584Ap80CまたはCVI988を含むことを特徴とする請求項21〜23のうちいずれか1項に記載の方法。
- 前記マレック病ウイルス株は、ワクチン株を含むことを特徴とする請求項21〜24のうちいずれか1項に記載の方法。
- マレック病ウイルスの診断用抗原の産生方法であって、請求項1〜11のいずれか1項に記載の細胞系を供給するステップと、そこから成分を単離するステップとを含むことを特徴とする方法。
- 脊椎動物において疾病に対する防御を誘導することができるワクチンの調製方法であって、請求項1〜11のいずれか1項に記載の細胞系を培養するステップと、そこから細胞培養成分を採集するステップとを含むことを特徴とする方法。
- 前記脊椎動物は、鳥類であることを特徴とする請求項27記載の方法。
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
EP02075480 | 2002-02-06 | ||
PCT/EP2003/001213 WO2003066093A1 (en) | 2002-02-06 | 2003-02-05 | A continuous cell line for the production of vaccines |
Publications (3)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2005528888A JP2005528888A (ja) | 2005-09-29 |
JP2005528888A5 JP2005528888A5 (ja) | 2006-03-02 |
JP4474164B2 true JP4474164B2 (ja) | 2010-06-02 |
Family
ID=27675691
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2003565516A Expired - Lifetime JP4474164B2 (ja) | 2002-02-06 | 2003-02-05 | ワクチン製造のための連続継代性細胞系 |
Country Status (13)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US20050084503A1 (ja) |
EP (1) | EP1471937B1 (ja) |
JP (1) | JP4474164B2 (ja) |
CN (1) | CN1688335A (ja) |
AU (1) | AU2003206861B2 (ja) |
BR (1) | BR0307512A (ja) |
CA (1) | CA2475326A1 (ja) |
DE (1) | DE60328456D1 (ja) |
DK (1) | DK1471937T3 (ja) |
ES (1) | ES2330425T3 (ja) |
IL (1) | IL163379A (ja) |
RU (1) | RU2329060C2 (ja) |
WO (1) | WO2003066093A1 (ja) |
Families Citing this family (9)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2007060725A1 (ja) * | 2005-11-24 | 2007-05-31 | The Research Foundation For Microbial Diseases Of Osaka University | 組換え多価ワクチン |
KR20140096162A (ko) * | 2008-02-25 | 2014-08-04 | 백스터 인터내셔널 인코포레이티드 | 연속 세포주 제조 방법 |
CN101875978B (zh) * | 2010-02-10 | 2013-03-27 | 广西大学 | 一种区分马立克氏病病毒疫苗毒株与强毒株的鉴别方法 |
FR2956409A1 (fr) | 2010-02-15 | 2011-08-19 | Univ Claude Bernard Lyon | Procedes pour optimiser la production virale par l'inactivation ou l'inhibition du gene hipk2 et cellules modifiees pour la production virale |
RU2506309C2 (ru) * | 2012-03-11 | 2014-02-10 | Екатерина Алексеевна Федорова | Способ культивирования миобластов in vitro для получения биомассы миоцитов для пищевых целей |
CN103977400B (zh) * | 2014-05-29 | 2015-06-17 | 南京创启生物科技有限公司 | 一种用细胞系生产鸡马立克氏病活疫苗的方法 |
JP2014236748A (ja) * | 2014-08-26 | 2014-12-18 | 一般財団法人阪大微生物病研究会 | 組換え多価ワクチン |
CN109825497A (zh) * | 2019-01-25 | 2019-05-31 | 石河子大学 | 一种新型结核杆菌融合菌株的制备方法及其应用 |
KR102179463B1 (ko) * | 2019-12-06 | 2020-11-16 | 서울대학교 산학협력단 | 닭의 대흉근으로부터 확립된 근아섬유세포주 및 이를 이용한 생리활성물질 스크리닝 방법 |
Family Cites Families (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP0748867A1 (en) * | 1995-06-12 | 1996-12-18 | Duphar International Research B.V | Marek's disease vaccine |
US5833980A (en) * | 1995-10-27 | 1998-11-10 | Board Of Trustess Operating Michigan State University | Sustainable cell line for the production of the Marek's disease vaccines |
US5827738A (en) * | 1995-10-27 | 1998-10-27 | Board Of Trustees Operating Michigan State University | Sustainable chick cell line infected with Marek's disease virus |
US5989805A (en) * | 1995-10-27 | 1999-11-23 | Board Of Trustees Operating Michigan State University | Immortal avian cell line to grow avian and animal viruses to produce vaccines |
EP0884382A3 (en) * | 1997-06-10 | 2000-10-25 | Pfizer Products Inc. | Processes for preparation of marek's disease virus using continuous mammalian cell lines |
US6475770B1 (en) * | 1997-06-10 | 2002-11-05 | Pfizer, Inc. | Processes for preparation of Marek's Disease using continuous mammalian cell lines |
EP1038952A3 (en) * | 1998-12-09 | 2001-06-27 | Pfizer Products Inc. | Processes for preparation of Marek's Disease Virus using continuous avian cell lines |
-
2003
- 2003-02-05 BR BR0307512-5A patent/BR0307512A/pt not_active IP Right Cessation
- 2003-02-05 ES ES03704569T patent/ES2330425T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2003-02-05 DK DK03704569T patent/DK1471937T3/da active
- 2003-02-05 CA CA002475326A patent/CA2475326A1/en not_active Abandoned
- 2003-02-05 CN CNA038076055A patent/CN1688335A/zh active Pending
- 2003-02-05 RU RU2004126695/13A patent/RU2329060C2/ru not_active IP Right Cessation
- 2003-02-05 JP JP2003565516A patent/JP4474164B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 2003-02-05 EP EP03704569A patent/EP1471937B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2003-02-05 DE DE60328456T patent/DE60328456D1/de not_active Expired - Lifetime
- 2003-02-05 AU AU2003206861A patent/AU2003206861B2/en not_active Ceased
- 2003-02-05 WO PCT/EP2003/001213 patent/WO2003066093A1/en active Application Filing
-
2004
- 2004-08-04 US US10/912,535 patent/US20050084503A1/en not_active Abandoned
- 2004-08-05 IL IL163379A patent/IL163379A/en not_active IP Right Cessation
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
AU2003206861A2 (en) | 2003-09-02 |
RU2329060C2 (ru) | 2008-07-20 |
US20050084503A1 (en) | 2005-04-21 |
ES2330425T3 (es) | 2009-12-10 |
BR0307512A (pt) | 2004-12-07 |
JP2005528888A (ja) | 2005-09-29 |
EP1471937B1 (en) | 2009-07-22 |
AU2003206861A1 (en) | 2003-09-02 |
DE60328456D1 (de) | 2009-09-03 |
IL163379A (en) | 2010-06-30 |
WO2003066093A1 (en) | 2003-08-14 |
DK1471937T3 (da) | 2009-11-23 |
CA2475326A1 (en) | 2003-08-14 |
AU2003206861B2 (en) | 2009-04-23 |
CN1688335A (zh) | 2005-10-26 |
EP1471937A1 (en) | 2004-11-03 |
RU2004126695A (ru) | 2005-06-27 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP6845266B2 (ja) | 多価組換型鳥ヘルペスウイルス及び鳥類を免疫化するためのワクチン | |
JP5508252B2 (ja) | 鳥インフルエンザ遺伝子を含有する組み換え七面鳥ヘルペスウイルス | |
JP6246985B1 (ja) | 改良されたhvtベクターnd−ibdワクチン | |
US11512115B2 (en) | Modified S1 subunit of the coronavirus spike protein | |
US20220088187A1 (en) | Recombinant non-pathogenic marek's disease virus constructs encoding multiple heterologous antigens | |
US20240123057A1 (en) | Recombinant Non-Pathogenic Marek's Disease Virus Constructs Encoding Infectious Laryngotracheitis Virus and Infectious Bursal Disease Virus Antigens | |
RU2771165C2 (ru) | Вирус утиного энтерита и его применение | |
CN108368488B (zh) | 鸭肠炎病毒及其用途 | |
JP4474164B2 (ja) | ワクチン製造のための連続継代性細胞系 | |
CN114828882A (zh) | 多价hvt载体疫苗 | |
JP3284118B2 (ja) | 連続的鳥類細胞株を用いるマレック病ウイルスの製造方法 | |
JP2023545524A (ja) | 組換えhvt及びその使用 | |
RU2777400C2 (ru) | Рекомбинантные непатогенные конструкции вируса болезни марека, кодирующие антигены вируса инфекционного ларинготрахеита и вируса инфекционного бурсита |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A521 | Written amendment |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20051220 |
|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20060116 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20080930 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20081225 |
|
A602 | Written permission of extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602 Effective date: 20090108 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20090130 |
|
A602 | Written permission of extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602 Effective date: 20090206 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20090225 |
|
A602 | Written permission of extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602 Effective date: 20090304 |
|
A521 | Written amendment |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20090330 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20091110 |
|
A521 | Written amendment |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20100122 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20100216 |
|
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20100308 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20130312 Year of fee payment: 3 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |