JP4421692B2 - ピラン環と環縮合した１，２−ジオキセタン誘導体、該誘導体を用いる測定試薬及び測定方法 - Google Patents

Description

【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、一般式（Ｉ）
【化１３】

（式中、Ｒ¹ 、Ｒ² 、Ｒ³ 、Ｒ⁴ 、Ｒ⁵ 、Ｒ⁶ 及びＲ⁷ はそれぞれ独立に水素原子、アルキル基又はアリール基である。また、Ｒ² とＲ³ 、Ｒ⁴ とＲ⁵ 及びＲ⁶ とＲ⁷ は一体となり、それぞれ独立に環状アルキル基を形成することもできる。Ａｒは式（Ａ）
【化１４】

（式中、Ｒ⁸ はヒドロキシル基、アルコキシル基、アラルキルオキシ基、−ＯＳｉ（Ｒ¹⁰Ｒ¹¹Ｒ¹²）（ただし、Ｒ¹⁰、Ｒ¹¹及びＲ¹²は互いに独立にアルキル基である。）で表される基又はリン酸塩基であり、Ｒ⁹ は水素原子、アルキル基、アリール基、ヒドロキシル基、アルコキシル基、アリールオキシ基又はアラルキルオキシ基であり、Ｖは酸素原子又は硫黄原子である。）で表される基、式（Ｂ）
【化１５】

（式中、Ｒ⁸ は前記式（Ａ）のＲ⁸ と同じである。Ｗは窒素原子又はＣ−Ｒ¹³（ただし、Ｒ¹³は、水素原子、アルキル基、アリール基、アルコキシル基又はアラルキルオキシ基である。）で表される基であり、Ｘは酸素原子又は硫黄原子である。）で表される基、又は式（Ｃ）
【化１６】

（式中、Ｒ⁸ は前記式（Ａ）のＲ⁸ と同じである。Ｒ¹⁴は水素原子、ハロゲン原子、アルキル基、アルコキシル基又は
【化１７】

（式中、Ｙは酸素原子、硫黄原子又はＮ−Ｒ¹⁵で表される基であり、Ｚは水素原子、アルキル基、アリール基、−ＯＲ¹⁶、−ＳＲ¹⁷又は
【化１８】

で表される基である。ここで、Ｒ¹⁵は水素原子、アルキル基、アリール基、ヒドロキシル基又はアルコキシル基であり、Ｒ¹⁶、Ｒ¹⁷、Ｒ¹⁸及びＲ¹⁹は水素原子、アルキル基又はアリール基である。また、Ｒ¹⁵とＲ¹⁶、Ｒ¹⁵とＲ¹⁷、Ｒ¹⁵とＲ¹⁸、Ｒ¹⁸とＲ¹⁹は一体となり環を形成することもでき、この環は２つ以上のヘテロ原子を含んでいてもよい。）で表される基である。）で表される１，２−ジオキセタン誘導体に関する。本発明の１，２−ジオキセタン誘導体は化学発光を誘導することができる化合物であり、例えば免疫測定等の基質として使用することができる。
【０００２】
【従来の技術】
従来より、１，２−ジオキセタン誘導体は種々合成されており、特に３位にスピロアダマンチル基が結合した化合物は化学発光基質として有用であることが知られている（例えば、特公平５−２１９１８号公報明細書及び特公平５−４５５９０号公報明細書参照）。
また、化合物の熱的安定性が前記化合物と比べて極めて高い化合物も同様の用途に有用であることが知られている（特開平９−２１６８８７号公報明細書参照）。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】
１，２−ジオキセタン誘導体に関しては前記のように様々な検討がなされ、種々の化合物が創出されている。しかしながら、臨床検査等の分野で応用するためには化合物自体が安定で取扱いが容易であり、かつ高い効率で発光を行うことができる等の性質が要求され、従来の化合物よりもさらに優れた化合物の創出が望まれている。
【０００４】
【課題を解決するための手段】
本願発明者は、このような課題を踏まえ、従来化合物よりもさらに優れた化合物を創出するために鋭意検討した結果、前記一般式（Ｉ）で表される１，２−ジオキセタン誘導体を見出し本発明を完成したものである。
【０００５】
以下、本発明を詳細に説明するにあたって、本発明で「アルキル基」とは、置換基を有していてもよい炭素数１〜２０個の直鎖状又は分枝鎖状のアルキル基をいい、そのアルキル基は、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル、ヘプチル、オクチル、ノニル、デシル、ウンデシル、ドデシル、テトラデシル、ペンタデシル、ヘキサデシル、ヘプタデシル、オクタデシル、ノナデシル、イコサニルの直鎖の基及び前記のアルキル基が適宜分枝状に結合した基をいう。前記置換していてもよい基とは、例えば、ヒドロキシル基、アルコキシル基、アリール基、複素環基等である。そのアルコキシル基としては、例えばメトキシ、エトキシ、プロポキシ、ブトキシ、ペンチルオキシ、ヘキシルオキシ、メトキシエトキシ、メトキシプロポキシ、エトキシエトキシ、エトキシプロポキシ、メトキシエトキシエトキシ基等であり、またそのアリール基としては、例えば、フェニル、ナフチル基等であり、その複素環基としては、フリル、チエニル、ピリジル基等を挙げることができる。
【０００６】
また、本発明で「アルコキシル基」とは、前記したアルキル基に置換してもよいアルコキシル基と同じであり、「アリール基」とは、これも前記したアルキル基に置換してもよいアリール基である。さらに、「アラルキルオキシ基」とはベンジルオキシ、フェネチルオキシ基等である。また「ハロゲン原子」とはフッ素、塩素、臭素等である。
【０００７】
本発明においては、上記一般式（Ｉ）において。Ａｒが式（ａ）
【化１９】

（式中、Ｒ⁸ 、Ｒ⁹ 及びＶは前記式（Ａ）のＲ⁸ 、Ｒ⁹ 及びＶと同じである。）で表される基、式（ｂ）
【化２０】

（式中、Ｒ⁸ 、Ｗ及びＸは前記式（Ｂ）のＲ⁸ 、Ｗ及びＸと同じである。）で表される基、又は式（ｃ）
【化２１】

（式中、Ｒ⁸ 及びＲ¹⁴は前記式（ｃ）のＲ⁸ 及びＲ¹⁴と同じである。）でで表される基であるものが好ましい。
【０００８】
上記一般式（Ｉ）において、Ｒ¹ 、Ｒ² 及びＲ³ はアルキル基である場合が好ましく、より好ましくは、炭素数１〜４のアルキル基である。また、上記Ｒ⁴ 、Ｒ⁵ 、Ｒ⁶ 及びＲ⁷ は水素原子である場合が好ましい。
【０００９】
上記一般式（Ｉ）において。Ａｒが上記式（Ｃ）である場合、Ｙが酸素原子であり、Ｚが式
【化２２】

で表される基であり、式中Ｒ¹⁸及びＲ¹⁹が一体となり、３〜７員環を形成するものであることが好ましい。より好ましくは、Ｚが
【化２３】

で表される基である場合である。
【００１０】
上記一般式（Ｉ）において、Ａｒが上記式（Ｃ）である場合には、ＹがＮ−Ｒ¹⁵であり、Ｚが−ＯＲ¹⁶であり、Ｒ¹⁵とＲ¹⁶が一体となり、５〜７員環を形成するものも好ましい。より好ましくは、Ｒ¹⁵とＲ¹⁶が一体となり
【化２４】

で表される基である場合である。
【００１１】
本発明の前記一般式（Ｉ）で表される１，２−ジオキセタン誘導体は、一般式
【化２５】

（式中、Ｒ¹ 〜Ｒ⁷ は一般式（Ｉ）のＲ¹ 〜Ｒ⁷ と同じで基であり、Ｒ⁸¹はアルコキシル基又はアラルキルオキシ基である。また、（Ｒ⁸¹）Ａｒは、式（Ａ’）
【化２６】

（式中、Ｒ⁹ 及びＶは式（Ａ）のＲ⁹ 及びＶと同じであり、Ｒ⁸¹は前記一般式（ＩＩ）のＲ⁸¹と同じである。）で表される基、式（Ｂ’）
【化２７】

（式中、Ｗ及びＸは式（Ｂ）のＷ及びＸと同じであり、Ｒ⁸¹は前記一般式（ＩＩ）のＲ⁸¹と同じである。）で表される基、又は式（Ｃ’）
【化２８】

（式中、Ｒ¹⁴は式（Ｃ）のＲ¹⁴と同じであり、Ｒ⁸¹は前記一般式（ＩＩ）のＲ⁸¹と同じである。）で表される基である。）で表されるＲ⁸¹で置換されたアリール基を有するジヒドロフラン環誘導体から下記反応式に従って、本発明の一般式（Ｉ）で表される１，２−ジオキセタン誘導体を製造することができる。
【００１２】
【化２９】

（式中、Ｒ¹ 〜Ｒ⁷ は前記一般式（Ｉ）のＲ¹ 〜Ｒ⁷ と同じであり、Ｒ⁸¹は前記一般式（ＩＩ）で表される化合物のＲ⁸¹と同じである。またＲ⁸²は
【化３０】

（式中、Ｒ²⁰及びＲ²¹は、アルキル基又はＲ²⁰及びＲ²¹が一体となり環を形成してもよい基である。）で表されるリン酸基又は−ＯＳｉ（Ｒ¹⁰Ｒ¹¹Ｒ¹²）（ただし、Ｒ¹⁰、Ｒ¹¹及びＲ¹²は前記と同じである。）で表される基である。一般式（ＩＩＩ）の（ＨＯ）Ａｒ−で表される基は、一般式（ＩＩ）の置換基Ｒ⁸¹の位置と同じ位置にＯＨ基を有するものであり、一般式（ＩＶ）の（Ｒ⁸²）Ａｒで表される基は、一般式（ＩＩ）の置換基Ｒ⁸¹の位置と同じ位置にＲ⁸²を有するものである。）
【００１３】
（第１工程）
本工程は、一般式（ＩＩ）で表される化合物の脱保護反応を行い一般式（ＩＩＩ）で表される化合物を製造するものである。
【００１４】
脱保護反応に供する化合物としては、前記一般式（ＩＩ）（ここでＲ¹ 〜Ｒ⁷ は前記と同じであり、Ｒ⁸¹はアルキル基又はアラルキルオキシ基（好ましくは、メトキシ基又はベンジルオキシ基である。）である。）で表される化合物で、本反応は当業者に熟知された方法、即ちアルキルチオールのアニオンを反応させ行うかあるいは水素添加反応に付すことにより行うことができるが、どちらの反応を選択するかは脱保護すべき基により適宜選択すればよい。
【００１５】
（第２工程）
本工程は、前記一般式（ＩＩＩ）で表される化合物に、シリルオキシ基あるいはリン酸基形成のため対応するハロゲン化トリアルキルシランあるいはハロゲン化ホスフェートを反応させ、一般式（ＩＶ）で表される化合物を製造するものである。
【００１６】
本工程において、例えばリン酸基導入のためクロロエチレンホスフェートを反応させた場合には、シアン化ナトリウムでシアノエチルホスフェートのナトリウム塩に変換し、さらにシアノエチル基を脱離し、アンモニウム ナトリウム塩に変換することができる。このアンモニウム ナトリウム塩は、例えば炭酸水素ナトリウムと反応させることにより容易にジナトリウム塩に変換できる。
【００１７】
（第３工程）
本工程は一般式（ＩＩ）、（ＩＩＩ）又は（ＩＶ）で表される化合物を一重項酸素と反させ、前記一般式（Ｉ）で表される１，２−ジオキセタン誘導体を製造するものである。
【００１８】
一重項酸素との反応は、前記一般式（ＩＩ）、（ＩＩＩ）又は（ＩＶ）で表されるジヒドロフラン誘導体を、メチレンブルー、ローズベンガル、テトラフェニルポルフィン（ＴＰＰ）等の光増感剤の共存下、酸素雰囲気の下で可視光照射を行うことにより達成される。
【００１９】
このとき、溶媒はジクロロメタン、ジクロロエタン、四塩化炭素等のハロゲン化炭化水素又はメタノール、エタノール等のアルコール等を用いることができる。
【００２０】
なお、反応は−８０℃〜室温で行うことが好ましい。
【００２１】
前記一般式（ＩＩ）で表されるジヒドロフラン誘導体の製造方法は、例えば、下記の方法を挙げることができる。
【００２２】
（１）（Ｒ⁸¹）Ａｒが前記式（Ａ’）で表される基の場合
前記一般式（ＩＩ）で表される化合物において、（Ｒ⁸¹）Ａｒが前記式（Ａ’）で表される基である場合、以下反応式に従って、一般式（ＩＩ）で表されるジヒドロフラン誘導体を製造することができる。
【００２３】
【化３１】

（式中、Ｒ¹ 〜Ｒ⁷ 及びＲ⁸¹は前記と同じであり、Ｒ⁸³はハロゲン原子であり、Ｒ⁸⁴はアルコキシル基又はアラルキルオキシ基である（Ｒ⁸³及びＲ⁸⁴は隣接する炭素原子に結合しているものである。）。Ｒはハロゲン原子、置換スルホニルオキシ基又はヒドロキシル基である。前記一般式（ＩＩ）で表される化合物の（Ｒ⁸¹）Ａｒは、前記式（Ａ’）で表される基である。）
【００２４】
（第１Ａ工程）
本工程は、前記一般式（１Ａ）で表される化合物を前記一般式（２Ａ）で表される化合物と反応させることによって前記一般式（３Ａ）で表される化合物を製造するものである。
【００２５】
反応は当業者に熟知された、いわゆる、ウィリアムソン合成により達成することができる。
【００２６】
ここで、一般式（１Ａ）で表される化合物の置換基Ｒがハロゲン原子又は置換スルホニルオキシ基である場合は直接反応に付し、Ｘがヒドロキシル基である場合には、一旦反応系中でハロゲン化トシル等によりスルホニルオキシ基に変換してから反応に付すことで本工程を達成することができる。
【００２７】
（第２Ａ工程）
本工程は、前記一般式（３Ａ）で表される化合物を酸化することによって、前記一般式（４Ａ）で表される化合物を製造するものである。
【００２８】
本工程における酸化は、クロム系酸化剤又は活性化剤を用いることにより行うことができる。
【００２９】
前記、クロム系酸化剤としてはピリジニウムクロロクロメート（ＰＣＣ）、ピリジニウムジクロロクロメート（ＰＤＣ）等を用いることができ、この時、溶媒はジクロロメタン等のハロゲン化炭化水素を用いることができる。
【００３０】
また、前記活性化剤を用いる場合は、Ｐｙ・ＳＯ₃ ／トリエチルアミン／ＤＭＳＯ、Ａｃ₂ Ｏ／ＤＭＳＯ系等のような溶媒との組み合わせで反応を行うことができる。
【００３１】
（第３Ａ工程）
本工程は、前記一般式（４Ａ）で表される化合物を閉環させ、前記一般式（５Ａ）で表される化合物を製造するものである。
【００３２】
反応はリチウムジイソピロピルアミド等の２級アミンのリチウム塩又はｔ−ブトキシカリウム等の塩基を用いて行うものである。
【００３３】
溶媒としては、ＴＨＦ、ＤＭＳＯ等の有機溶媒を用いることができ、０℃〜室温で、１〜５時間反応を行うことが好ましい。
【００３４】
（第４Ａ工程）
本工程は、前記一般式（５Ａ）で表される化合物を脱水することによって、前記一般式（６Ａ）で表される化合物を製造するものである。
【００３５】
反応はピリジン等の塩基の存在下、塩化チオニルを作用させるか又はリン酸、ｐ−トルエンスルホン酸等の酸を触媒として用いることができる。
【００３６】
溶媒としては、塩化メチレン等のハロゲン化炭化水素又はトルエン等の芳香族炭化水素を用いることができ、作用させる試薬によって、適宜選択することができる。
【００３７】
（第５Ａ工程）
本工程は、前記一般式（６Ａ）で表される化合物を還元し、一般式（７Ａ）で表される化合物を製造するものである。
反応はブチルリチウム等のリチウム塩を作用させた後、ｐ−トルエンスルホンアジド等のアジドを反応させ、トリフェニルホスフィン等で還元を行い、次いで、エタンチオール等のチオールを作用させることにより達成することができる。
【００３８】
溶媒としてはＴＨＦ、ＤＭＦ等の有機溶媒を用いることができ、反応は還流下で行うことが好ましい。
【００３９】
（第６Ａ工程）
本工程は前記一般式（７Ａ）で表される化合物から前記一般式（ＩＩ）で表される化合物を製造するものである。
【００４０】
反応は前記一般式（７Ａ）で表される化合物のＲ⁸⁴をヒドロキシル基又はＳＨ基に変換し、次いでオルトカルボン酸エステル又はカルボニルイミダゾール等を用いることにより縮合環を形成することができる。
【００４１】
反応はオルトカルボン酸エステルを用いる場合は１００〜２００℃の加熱下において、またカルボニルイミダゾールを用いる場合は０℃〜室温において行うことが好ましい。
【００４２】
（２）（Ｒ⁸¹）Ａｒが前記式（Ｃ’）で表される基の場合
上記一般式（ＩＩ）で表される化合物において、（Ｒ⁸¹）Ａｒが前記式（Ｃ’）で表される基である場合、以下の反応式に従って、一般式（ＩＩ）で表されるジヒドロフラン誘導体を得ることができる。
【００４３】
【化３２】

（式中、Ｒ¹ 〜Ｒ⁷ 、Ｒ⁸¹及びＲは前記と同じである。前記一般式（ＩＩ）で表される化合物の（Ｒ⁸¹）Ａｒは、前記式（Ｃ’）で表される基である。）
【００４４】
（第１Ｃ工程）
本反応は、一般式（１Ｃ）で表される化合物を一般式（２Ｃ）で表される化合物と反応させることによって一般式（３Ｃ）で表される化合物を製造するものである。
【００４５】
前記一般式（２Ｃ）で表される化合物は、（Ｒ⁸¹）Ａｒが式（Ａ’）で表される基である場合に使用した一般式（２Ａ）で表される化合物と同じであり、本第１Ｃ工程は前記第１Ａ工程と同様にして、ウィリアムソン合成により達成することができる。
【００４６】
（第２Ｃ工程及び第３Ｃ工程）
これらの工程によって一般式（５Ｃ）で表される化合物を製造する方法は、上記第２Ａ工程及び第３Ａ工程と同様にして達成することができる。
【００４７】
（第４Ｃ工程）
本工程は、前記一般式（５Ｃ）で表される化合物を臭素化し、一般式（６Ｃ）で表される化合物を製造するものである。
【００４８】
反応は、Ｎ−ブロモスクシンイミド等の臭素化剤を用いることにより達成される。溶媒としては、含水ＴＨＦ、ジオキサン、ＤＭＦ等の有機溶媒を用いて行うことができる。
【００４９】
（第５Ｃ工程）
本工程は、上記第４Ａ工程と同様にして行うことができる。
【００５０】
（第６Ｃ工程）
本工程は、前記一般式（７Ｃ）で表される化合物の臭素を置換することにより目的の置換基を導入した前記一般式（ＩＩ）で表される化合物を製造するものである。
【００５１】
置換アミノ基を導入するには、ブチルリチウム等のリチウム塩を用い、カルボキシル基を導入し、次いでカルボニルイミダゾールを縮合剤として用い、アミン又はアンモニアと反応させることによって行うことができる。
【００５２】
さらに、上記反応によって製造されたアミドから、例えば、オキサゾリン環を有する化合物とするには、置換又は無置換のエタノールアミンを作用させることにより行うことができる。
【００５３】
また、アシル基を導入するには、前記と同様にブチルリチウム等のリチウム塩を用い、Ｎ−メチルホルムアニリドと反応させるか又はアセトアルデヒド、ベンズアルデヒド等のアルデヒドと反応させた後、二酸化マンガン等の酸化剤により、ヒドロキシル基を酸化させることによって達成される。
【００５４】
ここで、アシル基を導入した化合物は、第１工程に付した後、ヒドロキシルアミン又はアルコキシルアミンと反応させることによりオキシムとし、第３工程の出発物質とすることもできる。
【００５５】
（３）（Ｒ⁸¹）Ａｒが前記式（Ｂ’）で表される基の場合
前記一般式（ＩＩ）で表される化合物において、（Ｒ⁸¹）Ａｒが式（Ｂ’）で表される基である場合、以下の反応式に従って、一般式（ＩＩ）で表されるジヒドロフラン誘導体を製造することができる。
【００５６】
【化３３】

（式中、Ｒ¹ 〜Ｒ⁷ 、Ｗ、Ｘ及びＲ⁸¹は前記と同じである。前記一般式（ＩＩ）で表される化合物中の（Ｒ⁸¹）Ａｒは、前記式（Ｂ’）で表される基である。）
【００５７】
（第１Ｂ工程）
本工程は、一般式（１Ｂ）で表される化合物と一般式（２Ｂ）で表される化合物とを縮合させることによって、一般式（３Ｂ）で表される化合物を製造するものである。
【００５８】
反応は縮合剤を存在させることにより行うことができ、その縮合剤としてはカルボジイミド、カルボニルイミダゾール等を挙げることができる。
【００５９】
反応を行うにあたっては、ジクロロメタン等のハロゲン化炭化水素を溶媒として用いることができる。
【００６０】
（第２Ｂ工程）
本工程は、前記第２Ａ工程と同様にして行うことができる。
【００６１】
（第３Ｂ工程）
本工程は、一般式（４Ｂ）で表される化合物をチタンの存在下、還元剤及び塩基を用いてアルコール誘導体を製造し、次いで酸触媒の存在下で脱水環化反応を行うことにより前記一般式（ＩＩ）で表される化合物を製造するものである。
【００６２】
前段階の反応はチタンの存在下に行うことを必須の要件とし、チタンとしては塩化チタン等のハロゲン化チタンを用いることが好ましい。還元剤としては、水素化アルミニウムリチウム等、塩基としてはトリエチルアミン、ピリジン等を用いて還元状態を形成させ、反応に供することが望ましい。反応を行うにあたってはＴＨＦ等の有機エーテル中で行うことが望ましい。反応は０〜１００℃で進行するが、ＴＨＦの還流下に行うことが操作及び反応性の観点から好ましい。
【００６３】
後段階の脱水環化反応においては、酸触媒としてＰＰＴＳ、ｐ−トルエンスルホン酸等を用いるとが好ましい。溶媒としてはハロゲン化炭化水素又はベンゼン、トルエン等の芳香族炭化水素を用い反応を行うことができる。
【００６４】
本発明の一般式（Ｉ）で表される１，２−ジオキセタン誘導体は、アルカリ性条件下で化学発光を伴ってカルボニル化合物に分解するほか、アリールエステラーゼ、アセチルコリンエステラーゼ等のエステラーゼ（カルボン酸エステルヒドロラーゼ）、酸性又はアルカリ性フォスファターゼ等の酵素によって、化学発光を伴って分解する。従って、試料中の検出物質の濃度を求めることを目的とする免疫測定法における免疫測定試薬として利用することができるほか、種々の測定における標識試薬として用いることができる。
【００６５】
上記免疫測定法における検出物質としては、例えば、ｈＣＧ、ＴＳＨ、ＬＨ等のホルモン、ＡＦＰ、ＣＥＡ等の癌関連物質、ＨＩＶ、ＨＴＬＶ−Ｉ等のウイルス抗原並びにその抗体及び核酸等を挙げることができる。
【００６６】
上記免疫測定法としては、例えば、上記のような検出物質に対する特異的結合性を有する物質に上記酵素をあらかじめ結合させておき、これと検出物質を含む試料を混合し、一定時間反応させて、試料中の検出物質とそれに結合性を有する物質とを結合させる工程、及び、結合したか又は結合しなかった結合性を有する物質の量を求める工程は、酵素と本発明の１，２−ジオキセタン誘導体とを反応させ、酵素量に比例して１，２−ジオキセタン誘導体からの発光強度が増大するので、この発光強度を測定することによって該物質の濃度を求めることができる。
【００６７】
本発明の１，２−ジオキセタン誘導体を含有する免疫測定試薬及びそれを用いた上記のような免疫測定も本発明の一つである。
【００６８】
本発明の一般式（Ｉ）で表される１，２−ジオキセタン誘導体は熱的安定性が高く、かつ、発光量子収率が極めて高い化合物である。従って、化合物の保存にあっては、冷蔵保存によらなくとも長期間保存が可能であり、また発光の効率が良いため従来と比べ、少量で同程度の目的を達することができる。例えば、臨床検査の分野に用いた場合には、検査物質の存在を効率良く、簡便に検出することができる。
【００６９】
以下、実施例及び参考例により本発明を詳細に説明する。
【００７０】
【実施例】
（参考例１）
【化３４】

窒素雰囲気下において、ＤＭＦ１０ｍＬに６０％水素化ナトリウム５８４ｍｇ（１４．４ｍｍｏｌ）を加えた。０℃にした後にＤＭＦ５ｍＬに溶解した３，３，５，５−テトラメチル−１，４−ヘキサンジオール（化合物〔２〕）２．０９ｇ（１２．０ｍｍｏｌ）を滴下し、３０分撹拌した。次にＤＭＦ３ｍＬに溶解した３−メトキシベンジルクロライド（化合物〔１〕）１．７５ｍＬ（１２．１ｍｍｏｌ）を滴下し、室温まで戻し一晩撹拌した。反応溶液を飽和塩化アンモニウム溶液に投じ、酢酸エチルで抽出した。水層を酢酸エチルで抽出し、先の有機層と合わせて飽和食塩水で３回洗浄した。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥、濃縮した。濃縮物をシリカゲルカラムにかけ、酢酸エチルとヘキサンの１：５混合溶媒で流しだしたところ、６−（３−メトキシ）ベンジルオキシ−２，２，４，４−テトラメチル−３−ヘキサノールを３．０８ｇ、収率 ８７．１％で無色油状物として得た。
【００７１】
得られた６−（３−メトキシ）ベンジルオキシ２，２，４，４−テトラメチル−３−ヘキサノール２．６３ｇ（８．９３ｍｍｏｌ）を塩化メチレン１０ｍＬに溶解させ、窒素雰囲気下、室温において塩化メチレン３０ｍＬ、ＰＣＣ２．６４ｇ（１２．２ｍｍｏｌ）、セライト７．６９ｇの混合溶液中に滴下し一晩撹拌した。反応溶液に２−プロパノール５ｍＬ、エーテル１２０ｍＬを加え１時間撹拌した後、セライトろ過を行い、ろ液を濃縮した。濃縮物をシリカゲルカラムにかけ、酢酸エチルとヘキサンの１：７の混合溶媒で流しただしたところ、６−（３−メトキシ）ベンジルオキシ−２，２，４，４−テトラメチル−３−ヘキサノン（化合物〔３〕）を２．４６ｇ、収率 ９４．３％で無色油状物として得た。
【００７２】
¹ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃ ）；δ１．２２（ｓ，９Ｈ），１．２７（ｓ，６Ｈ），１．９６（ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，２Ｈ），３．３９（ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，２Ｈ），３．８１（ｓ，３Ｈ），４．４２（ｓ，２Ｈ），６．８１（ｄ ｗｉｔｈ ｆｉｎｅ ｃｏｕｐｌｉｎｇ，Ｊ＝８．９Ｈｚ，１Ｈ），６．８６−６．８８（ｍ，２Ｈ）ｐｐｍ
【００７３】
（参考例２）
【化３５】

窒素雰囲気下、室温においてＴＨＦ１５ｍＬにジイソプロピルアミン２．１０ｍＬ（１５．０ｍｍｏｌ）を加え、次いで１．６０Ｍブチルリチウムを８．５０ｍＬ（１３．７ｍｍｏｌ）加え、３０分撹拌した。−７８℃にした後にＴＨＦ５ｍＬに溶解させた６−（３−メトキシ）ベンジルオキシ−２，２，４，４−テトラメチル−３−ヘキサノン（化合物〔３〕）２．２７ｇ（７．７６ｍｍｏｌ）を滴下した。反応溶液を徐々に室温に戻し３時間撹拌した。反応溶液を飽和塩化アンモニウムに投じ、酢酸エチルで抽出を行った。水層を酢酸エチルで抽出し、先の有機層と合わせて飽和食塩水で洗浄した。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥、濃縮した。濃縮物をシリカゲルカラムにかけ、酢酸エチルとヘキサンの１：７混合溶媒で流しだしたところ、３−ｔ−ブチル−３−ヒドロキシ−２−（３−メトキシ）フェニル−４，４−ジメチル−３，４，５，６−テトラヒドロピランを２．０８ｇ、収率 ９１．８％で無色油状物として得た。
【００７４】
得られた３−ｔ−ブチル−３−ヒドロキシ−２−（３−メトキシ）フェニル−４，４−ジメチル−３，４，５，６−テトラヒドロピラン１．７４ｇ（５．９６ｍｍｏｌ）及びピリジン５．５ｍＬ（６８．０ｍｍｏｌ）を窒素雰囲気下、室温において塩化メチレン２０ｍＬに加えた。０℃にした後に塩化チオニル０．７５ｍＬ（１０．３ｍｍｏｌ）を加え２時間撹拌した。反応溶液を飽和食塩水に投じ、酢酸エチルで抽出を行った。水層を酢酸エチルで抽出し、先の有機層と合わせて飽和食塩水で洗浄し、有機層を硫酸マグネシウムで乾燥、濃縮した。濃縮物をシリカゲルカラムにかけ、塩化メチレンとヘキサンの２：１混合溶媒で流しだしたところ、５−ｔ−ブチル−６−（３−メトキシ）フェニル−４，４−ジメチル−３，４−ジヒドロピラン（化合物〔４〕）を１．２５ｇ、収率７６．７％で無色油状物として得た。
【００７５】
¹ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃ ）；δ１．０４（ｓ，９Ｈ），１．３９（ｓ，６Ｈ），１．６９（ｔ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，２Ｈ），３．８０（ｓ，３Ｈ），４．０１（ｔ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，２Ｈ），６．８３−６．８７（ｍ，３Ｈ），７．２１（ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ）ｐｐｍ
ＩＲ（ｌｉｑｕｉｄ ｆｉｌｍ）；２９２４，２８５６，１５８５，１２３８，１０４７ｃｍ^-1
Ｍａｓｓ（ｍ／ｚ，％）；２５９（３６），２１８（２７），２０３（１００），１５１（２４），１３５（３０），１１１（２６），７７（５１）
【００７６】
（実施例１）
【化３６】

酸素雰囲気下、０℃において重クロロホルム５ｍＬに５−ｔ−ブチル−６−（３−メトキシ）フェニル−４，４−ジメチル−３，４−ジヒドロピラン（化合物〔４〕）７０．７ｍｇ（０．２５８ｍｍｏｌ）、ＴＰＰ１．３ｍｇを加え、８時間、９４０Ｗナトリウムランプで外部照射を行った。反応溶液を濃縮した後シリカゲルカラムにかけ、エーテルとヘキサンの１：２０混合溶媒で流しだしたところ、６−ｔ−ブチル−１−（３−メトキシ）フェニル−５，５−ジメチル−２，７，８−トリオキサビシクロ［４．２．０］オクタン（化合物〔５〕）を４５．７ｍｇ、収率 ５７．９％で無色固体として得た。
【００７７】
融点；１０７−１０８℃
¹ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃ ）；δ０．９９（ｓ，９Ｈ），１．１７（ｓ，３Ｈ），１．３７−１．４４（ｍ，１Ｈ），１．５４（ｓ，３Ｈ），３．０１（ｄｔ，Ｊ＝１３．２ ａｎｄ ９．７Ｈｚ，１Ｈ），３．８１（ｓ，３Ｈ），４．１１（ｑ，Ｊ＝９．７Ｈｚ，１Ｈ），４．４０−４．４５（ｍ，１Ｈ），６．８０−７．２９（ｍ，４Ｈ）ｐｐｍ
ＩＲ（ＫＢｒ）；２９７２，２８９８，１６１２，１２９１，１０９１ｃｍ^-1
【００７８】
（参考例３）
【化３７】

窒素雰囲気下、０℃においてＤＭＦ２ｍＬに６０％水素化ナトリウム１５３ｍｇ（１．３１ｍｍｏｌ）、次いでエタンチオール０．１２ｍＬ（１．５５ｍｍｏｌ）を加え、攪拌した。ＤＭＦ２ｍＬに溶解した５−ｔ−ブチル−６−（３−メトキシ）フェニル−４，４−ジメチル−３，４−ジヒドロピラン（化合物〔４〕）１７１ｍｇ（０．６２ｍｍｏｌ）を滴下し、２時間還流した。反応溶液を飽和食塩水に投じ、酢酸エチルで抽出を行った。水層を酢酸エチルで抽出し、先の有機層と合わせて飽和食塩水で洗浄した。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥、濃縮した。濃縮物をシリカゲルカラムにかけ、酢酸エチルとヘキサンの１：５混合溶媒で流しだしたところ、５−ｔ−ブチル−６−（３−ヒドロキシ）フェニル−４，４−ジメチル−３，４−ジヒドロピラン（化合物〔６〕）を１３１ｍｇ、収率８０．７％で無色固体として得た。
【００７９】
融点；１３１−１３２℃
¹ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃ ）；δ１．０４（ｓ，９Ｈ），１．３９（ｓ，６Ｈ），１．６８（ｔ，Ｊ＝５．３Ｈｚ，２Ｈ），４．００（ｔ，Ｊ＝５．３Ｈｚ，２Ｈ），４．６２（ｓ，１Ｈ），６．７４−６．７６（ｍ，２Ｈ），６．８５（ｄ，Ｊ＝７．７Ｈｚ，１Ｈ），７．１７（ｔ，Ｊ＝７．７Ｈｚ，１Ｈ）ｐｐｍ
ＩＲ（ＫＢｒ）；３４０１，２９６３，２８８１，１５８８，１４４２，１１１２ｃｍ^-1
Ｍａｓｓ（ｍ／ｚ，％）；２４５（２３），２０４（２５），１８９（１００），１７５（３），１２１（２２），９３（６）
【００８０】
（参考例４）
【化３８】

窒素雰囲気下、室温においてＤＭＦ３ｍＬに５−ｔ−ブチル−６−（３−ヒドロキシ）フェニル−４，４−ジメチル−３，４−ジヒドロピラン（化合物〔６〕）９２．７ｍｇ（０．３５６ｍｍｏｌ）、イミダゾール（６０ｍｇ，０．８８１ｍｍｏｌ）を加えた。次にｔ−ブチルジメチルクロロシラン１０２ｍｇ（０．６７９ｍｍｏｌ）を加え２時間攪拌した。反応溶液を飽和食塩水に投じ、酢酸エチルで抽出を行った。水層を酢酸エチルで抽出し、先の有機層と合わせて飽和食塩水で洗浄した。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥、濃縮し、濃縮物をシリカゲルカラムにかけ、酢酸エチルとヘキサンの１：１０混合溶媒で流しだしたところ、５−ｔ−ブチル−６−（３−ｔ−ブチルジメチルシロキシ）フェニル−４，４−ジメチル−３，４−ジヒドロヒドロピラン（化合物〔７〕）を１１４ｍｇ、収率８５．６％で無色油状物として得た。
【００８１】
¹ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃ ）；δ０．１７（ｓ，６Ｈ），０．９８（ｓ，９Ｈ），１．０３（ｓ，９Ｈ），１．３８（ｓ，６Ｈ），１．６８（ｔ，Ｊ＝５．３Ｈｚ，２Ｈ），４．００（ｔ，Ｊ＝５．３Ｈｚ，２Ｈ），６．７４−６．７６（ｍ，２Ｈ），６．８５（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），７．１４（ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ）ｐｐｍ
ＩＲ（ｌｉｑｕｉｄ ｆｉｌｍ）；２９５６，２８８０，１５８２，１２４２，１０４３，８５０ｃｍ^-1
Ｍａｓｓ（ｍ／ｚ，％）；３７５（Ｍ⁺ ，５），３５９（８３），３１８（３８），２５２（１８），２０３（７），１５１（１７）
【００８２】
（実施例２）
【化３９】

酸素雰囲気下、０℃において重クロロホルム１０ｍＬに５−ｔ−ブチル−６−（３−ｔ−ブチルジメチルシロキシ）フェニル−４，４−ジメチル−３，４−ジヒドロピラン（化合物〔７〕）９５．１ｍｇ（０．２３４ｍｍｏｌ）、ＴＰＰ１．２ｍｇを加え、９時間、９４０Ｗナトリウムランプで外部照射を行った。反応溶液を濃縮した後シリカゲルカラムにかけ、エーテルとヘキサンの１：３０混合溶媒で流しだしたところ、６−ｔ−ブチル−１−（３−ｔ−ブチルジメチルシロキシ）フェニル−５，５−ジメチル−２，７，８−トリオキサビシクロ［４．２．０］オクタン（化合物〔８〕）を９３．０ｍｇ、収率７３．８％で無色油状物として得た。
【００８３】
¹ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃ ）；δ０．１８（ｓ，６Ｈ），０．９８（ｓ，９Ｈ），０．９９（ｓ，９Ｈ），１．３７−１．４３（ｍ，１Ｈ），１．５８（ｓ，３Ｈ），３．００（ｄｔ，Ｊ＝１３．２ ａｎｄ ９．５Ｈｚ，１Ｈ），４．０７−４．１４（ｍ，１Ｈ），４．３９−４．４５（ｍ，１Ｈ），６．７９−７．１５（ｍ，２Ｈ），７．２１（ｔ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，２Ｈ）ｐｐｍ
ＩＲ（ｌｉｑｕｉｄ ｆｉｌｍ）；２９５７，２８６０，１５９８，１１２５，１０５７ｃｍ^-1
【００８４】
（参考例５）
【化４０】

窒素雰囲気下においてＴＨＦ３０ｍＬに６０％水素化ナトリウム１．４８ｇ（３６．９０ｍｍｏｌ）を加え、氷冷下でＴＨＦ１０ｍＬに溶解した３，３，５−トリメチル１，４−ヘキサンジオール（化合物〔９〕）３．０７ｇ（３０．７５ｍｍｏｌ）を加え、３０分攪拌した後、ｍ−メトキシベンジルクロライド（化合物〔１〕）４．４７ｍＬ（３０．７５ｍｍｏｌ）を加え、さらに３０分攪拌した。ＤＭＦ１０ｍＬを加え、２時間後さらにＤＭＦ１０ｍＬを加えた。反応溶液を酢酸エチルで抽出し、飽和塩化アンモニウム水溶液、飽和食塩水で洗浄した。硫酸マグネシウムで乾燥、濃縮し、シリカゲルカラムにかけ、ヘキサンと酢酸エチルの７：１混合溶媒で流しだしたところ、６−（３−メトキシベンジルオキシ）−２，３，３−トリメチル−３−ヘキサノール（化合物〔１０〕）を５．４１ｇ、収率６２．７％で黄色油状物として得た。
【００８５】
¹ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃ ）；δ０．９０（ｓ，３Ｈ），０．９３（ｓ，３Ｈ），０．９３（ｄ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，３Ｈ），１．００（ｄ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，３Ｈ），１．６７（ｑ_ABｔ，Ｊ＝１４．７ ａｎｄ ５．４Ｈｚ，２Ｈ），１．８１−１．９４（ｍ，１Ｈ），２．８７（ｄ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，１Ｈ），３．１５（ｄｄ，Ｊ＝５．９ ａｎｄ ２．０Ｈｚ，１Ｈ），３．８１（ｓ，３Ｈ），３．５０−３．５９（ｍ，２Ｈ），４．５０（ｑ_AB，Ｊ＝１２．１Ｈｚ，２Ｈ），６．８３（ｄｄ，Ｊ＝８．３ ａｎｄ ２．４Ｈｚ，１Ｈ），６．８９（ｓ，１Ｈ），６．９０（ｄ，Ｊ＝１１．２Ｈｚ，１Ｈ），７．２５（ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ）ｐｐｍ
ＩＲ（ｌｉｑｕｉｄ ｆｉｌｍ）；３４４７，２９５８，２８７１，１４６７，１２６６，７８３，７４３ｃｍ^-1
【００８６】
（参考例６）
【化４１】

窒素雰囲気下において塩化メチレン８０ｍＬにセライト２４．２８ｇ、ＰＣＣ１２．１４ｇ（５６．２５ｍｍｏｌ）、塩化メチレン５ｍＬに溶解した６−（３−メトキシベンジルオキシ）−２，３，３−トリメチル−３−ヘキサノール（化合物〔１０〕）１０．５３ｇ（３７．５５ｍｍｏｌ）を加え、一晩攪拌した後、イソプロパノール９．９２ｍＬ（０．１３ｍｏｌ）を加え、６０分後にエーテルを加え、１０分攪拌し、セライトろ過、濃縮を行なった。濃縮物をシリカゲルカラムにかけ、ヘキサンと酢酸エチルの５：１混合溶媒で流しだしたところ、６−（３−メトキシベンジルオキシ）−２，３，３−トリメチル−３−ヘキサノン（化合物〔１１〕）を９．８５ｇ、収率９０．６％で無色油状物として得た。
【００８７】
¹ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃ ）；δ１．０２（ｄ，Ｊ＝６．３６Ｈｚ，６Ｈ），１．１６（ｓ，６Ｈ），１．８９（ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，２Ｈ），３．１１（ｈｅｐｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，１Ｈ），３．４１（ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，２Ｈ），３．８２（ｓ，３Ｈ），４．４３（ｓ，２Ｈ），６．８１（ｄ ｗｉｔｈ ｆｉｎｅ ｃｏｕｐｌｉｎｇ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ），６．８６−６．８６（ｍ，２Ｈ），７．２４（ｔ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ）ｐｐｍ
ＩＲ（ｌｉｑｕｉｄ ｆｉｌｍ）；２９６８，２８７１，１７０２，１４９０，１２６６，１０５０，７４３ｃｍ^-1
【００８８】
（参考例７）
【化４２】

窒素雰囲気下においてＴＨＦ２５ｍＬにジイソプロピルアミン４．６７ｍＬ（０．０３３ｍｏｌ）、ブチルリチウム２０．０１ｍＬ（０．０３２ｍｏｌ）を加え、３０分攪拌した。−７８℃に冷却し、ＴＨＦ１０ｍＬに溶解した６−（３−メトキシベンジルオキシ）−２，３，３−トリメチル−３−ヘキサノン（化合物〔１１〕）３．００ｇ（０．０１１ｍｏｌ）を滴下し、−７８℃で３時間攪拌し、−２５℃まで温度をあげ、さらに２時間半攪拌した。反応溶液を酢酸エチルで抽出し、飽和塩化アンモニウム水溶液、飽和食塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥、濃縮した。濃縮物をシリカゲルカラムにかけ、酢酸エチルとヘキサンの１：５混合溶媒で流しだし、再度シリカゲルカラムにかけ、ヘキサンと塩化メチレンの２：３混合溶媒により流しだしたところ、３−ヒドロキシ−３−イソプロピル−２−（３−メトキシフェニル）−４，４−ジメチル−２，３，４，５−テトラヒドロピラン（化合物〔１２〕）を１．０９ｇ、収率７０．４１％で無色結晶として得た。
【００８９】
融点；５６．０−５６．９℃（柱状晶；ヘキサンで再結晶）
¹ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃ ）；δ１．０２（ｄ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，３Ｈ），１．１３（ｓ，３Ｈ），１．１５（ｓ，１Ｈ），１．１９（ｄ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，６Ｈ），１．１９−１．２６（ｍ，１Ｈ），１．２７（ｓ，３Ｈ），１．７３（ｓｅｐｔ，Ｊ＝７．１６，１Ｈ），２．３０（ｔｄ，Ｊ＝１３．４ ａｎｄ ５．９Ｈｚ，１Ｈ），３．８１（ｓ，３Ｈ），３．８９（ｄｄｄ，Ｊ＝１３．４，１１．７ ａｎｄ ２．９Ｈｚ，１Ｈ），３．９９（ｄｄ，Ｊ＝１１．７ ａｎｄ ５．９Ｈｚ，１Ｈ），４．６８（ｓ，１Ｈ），６．８１（ｄ ｗｉｈｔ ｆｉｎｅ ｃｏｕｐｌｉｎｇ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ），７．０１（ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ），７．０２（ｓ，１Ｈ），７．２３（ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ）ｐｐｍ
¹³ＣＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃ ）；δ１９．９，２０．５，２５．１，２７．７，３４．７，３９．１，３９．３，５５．２，６４．８，７５．８，８３．６，１１２．９，１１９．９，１２８．７，１４１．２，１５９．３ｐｐｍＩＲ（ＫＢｒ）；３５１４，２９７１，２８６１，１６０１，１４９１，１１７３，１０１９，７０７ｃｍ^-1
【００９０】
（参考例８）
【化４３】

窒素雰囲気下において無水塩化メチレン１０ｍＬにピリジン２．９１ｍＬ（３５．９２ｍｍｏｌ）、３−ヒドロキシ−３−イソプロピル−２−（３−メトキシフェニル）−４，４−ジメチル−２，３，４，５−テトラヒドロピラン（化合物〔１２〕）１．０１ｇ（３．５９ｍｍｏｌ）を加え、０℃においてチオニルクロライド０．３４ｍＬ（４．６７ｍｍｏｌ）を加え、一晩攪拌した。反応溶液を酢酸エチルで抽出し、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥、濃縮した。濃縮物をシリカゲルカラムにかけ、酢酸エチルとヘキサンの１：７混合溶媒で流しだしたところ、５−イソプロピル−６−（３−メトキシフェニル）−４，４−ジメチル−２，３−ジヒドロピラン（化合物〔１３〕）を０．７１ｇ、収率７１．２７％で無色油状物として得た。
【００９１】
¹ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃ ）；δ０．９０（ｄ，Ｊ＝７．３２Ｈｚ，６Ｈ），１．１９（ｓ，６Ｈ），１．７３（ｔ，Ｊ＝５．４Ｈｚ，２Ｈ），２．４３（ｈｅｐｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，１Ｈ），３．８１（ｓ，３Ｈ），４．０４（ｔ，Ｊ＝５．１Ｈｚ，２Ｈ），６．８３−６．８９（ｍ，３Ｈ），７．２３（ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ）ｐｐｍ
¹³ＣＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃ ）；δ２４．０，２７．４，２８．８，３２．６，３９．９，５５．１，６２．８，１１３．６，１１５．６，１２２．０，１２２．７，１２８．６，１３９．９，１４８．４，１５８．９ｐｐｍ
ＩＲ（ｌｉｑｕｉｄ ｆｉｌｍ）；２９５８，２９３２，２８７０，１４６４，１２４１，１０４８，７８９ｃｍ^-1
【００９２】
（実施例３）
【化４４】

酸素雰囲気下、０℃において重クロロホルム５ｍＬにＴＰＰ１．６ｍｇ、５−イソプロピル−６−（３−メトキシフェニル）−４，４−ジメチル−２，３−ジヒドロピラン（化合物〔１３〕）１０１．０ｍｇ（０．３８８ｍｍｏｌ）を加え、１時間半９４０Ｗナトリウムランプで外部照射を行った。反応溶液を濃縮した後、濃縮物をシリカゲルカラムにかけ、エーテルとヘキサンの１：２０混合溶媒で流しだしたところ、６−イソプロピル−１−（３−メトキシフェニル）−５，５−ジメチル−２，７，８−トリオキサビシクロ［４．２．０］オクタン（化合物〔１４〕）を６７．９ｍｇ、収率５９．９％で黄色油状物として得た。
【００９３】
¹ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃ ）；δ０．７２（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，３Ｈ），０．８１（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，３Ｈ），１．０５（ｓ，３Ｈ），１．３７（ｓ，３Ｈ），１．３７（ｄｄｄ，Ｊ＝１３．４，７．８ ａｎｄ １．７Ｈｚ，１Ｈ），２．４１（ｓｅｐｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１Ｈ），３．０５（ｄｄｄ，Ｊ＝１３．４，１０．６ ａｎｄ ９．０Ｈｚ，１Ｈ），３．８４（ｓ，３Ｈ），４．２３（ｄｔ，Ｊ＝１０．６ ａｎｄ ７．８Ｈｚ，１Ｈ），４．４０（ｄｄｄ，Ｊ＝１０．６，９．０ ａｎｄ １．７Ｈｚ，１Ｈ），６．８９−６．９４（ｍ，１Ｈ），７．２９−７．３２（ｍ，３Ｈ）ｐｐｍ
¹³ＣＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃ ）；δ１８．２，１８．７，２４．０，２５．１，３３．４，３５．１，３６．６，５５．４，６１．０，９６．６，１０８．９，１１３．４，１１４．６，１２０．２，１２８．７，１３９．６，１５９．２ｐｐｍ
ＩＲ（ｌｉｑｕｉｄ ｆｉｌｍ）；２９６７，１７１８，１５８６，１４８８，１４５８，１２７７，１０４９ｃｍ^-1
【００９４】
（参考例９）
【化４５】

窒素雰囲気下、ＤＭＦ２ｍＬに６０％水素化ナトリウム０．２４ｇ（２．３０ｍｍｏｌ）、０℃でエタンチオール０．２１ｍＬ（２．８８ｍｍｏｌ）を加え、ＤＭＦ２ｍＬに溶解した５−イソプロピル−６−（３−メトキシフェニル）−４，４−ジメチル−２，３−ジヒドロピラン（化合物〔１３〕）０．３０ｇ（１．１５ｍｍｏｌ）を０℃で滴下した。滴下終了後、１４０℃で５時間加熱した。反応溶液を酢酸エチルで抽出し、飽和塩化アンモニウム水溶液、飽和食塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥、濃縮した。濃縮物をシリカゲルカラムにかけ、酢酸エチルとヘキサンの１：５混合溶媒で流しだしたところ、６−（３−ヒドロキシフェニル）−５−イソプロピル−４，４−ジメチル−２，３−ジヒドロピラン（化合物〔１５〕）を０．２５ｇ、収率８７．０％で無色結晶として得た。
【００９５】
融点；１４０．７−１４１．０℃（柱状晶；塩化メチレンとヘキサンの混合溶媒にて再結晶）
¹ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃ ）；δ０．９０（ｄ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，６Ｈ），１．１８（ｓ，６Ｈ），１．１７−１．７４（ｍ，２Ｈ），２．４３（ｓｅｐｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１Ｈ），４．０２−４．０５（ｍ，２Ｈ），４．９５（ｓ，１Ｈ），６．７２−６．７５（ｍ，２Ｈ），６．８５（ｄ ｗｉｔｈ ｆｉｎｅ ｃｏｕｐｌｉｎｇ，Ｊ＝７．３２Ｈｚ，１Ｈ），７．１５−７．１９（ｍ，１Ｈ）ｐｐｍ
¹³ＣＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃ ）；δ２４．０，２７．４，２８．７，３２．６，３９．９，６２．９，１１５．０，１１７．４，１２２．６，１２２．７，１２８．９，１３９．８，１４８．０，１５５．０ｐｐｍ
ＩＲ（ＫＢｒ）；３４１０，２９６２，２９２２，２８７２，１６５５，１５９７，１０１６，７１１ｃｍ^-1
【００９６】
（参考例１０）
【化４６】

窒素雰囲気下、ＤＭＦ２ｍＬに６−（３−ヒドロキシフェニル）−５−イソプロピル−４，４−ジメチル−２，３−ジヒドロピラン（化合物〔１５〕）０．２３ｇ（０．９４ｍｍｏｌ）、イミダゾール０．１３ｇ（１．８９ｍｍｏｌ）、ｔ−ブチルジメチルクロロシラン０．２６ｇ（１．７０ｍｍｏｌ）を加え、室温で１．５時間攪拌した。反応溶液を酢酸エチルで抽出し、飽和食塩水で洗浄、硫酸マグネシウムで乾燥、濃縮した。濃縮物をシリカゲルカラムにかけ、ヘキサンと酢酸エチルの１：６混合溶媒で流しだしたところ、６−（３−ｔ−ブチルジメチルシロキシロキシフェニル）−５−イソプロピル−４，４−ジメチル−２，３−ジヒドロピラン（化合物〔１６〕）を０．３３ｇ、収率９７．１％で無色固体として得た。
【００９７】
融点；３５．４−３５．９℃（針状晶）
¹ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃ ）；δ０．１８（ｓ，６Ｈ），０．８９（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，６Ｈ），０．９８（ｓ，９Ｈ），１．１８（ｓ，６Ｈ），１．７１−１．７４（ｍ，２Ｈ），２．４３（ｓｅｐｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１Ｈ），４．０１−４．０４（ｍ，２Ｈ），６．７５−６．７８（ｍ，２Ｈ），６．８７（ｄ ｗｉｔｈ ｆｉｎｅ ｃｏｕｐｌｉｎｇ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ），７．１６（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ）ｐｐｍ
¹³ＣＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃ ）；δ−４．４，１８．１，２４．１，２５．７，２７．４，２８．８，３２．６，４０．０，６２．８，１１９．４，１２１．９，１２２．０，１２３．４，１２８．５，１４０．０，１４８．４，１５５．０ｐｐｍ
ＩＲ（ｌｉｑｕｉｄ ｆｉｌｍ）；２９５７，２９３０，２８６１，１４８０，１３０６，１２５２，９５３ｃｍ^-1
【００９８】
（実施例４）
【化４７】

酸素雰囲気下、０℃において重クロロホルム３ｍＬにＴＰＰ１．５ｍｇ、６−（３−ｔ−ブチルジメチルシロキシフェニル）−５−イソプロピル−４，４−ジメチル−２，３−ジヒドロピラン（化合物〔１６〕）４５．７ｍｇ（０．１２７ｍｍｏｌ）を加え、１時間可視光照射を行なった。反応溶液を濃縮した後、濃縮物をシリカゲルカラムにかけ、エーテルとヘキサンの１：３０混合溶媒で流しだしたところ、１−（３−ｔ−ブチルジメチルシロキシフェニル）−６−イソプロピル−５，５−ジメチル−２，７，８−トリオキサビシクロ［４．２．０］オクタン（化合物〔１７〕）を４２．４ｍｇ、収率８５．３％で黄色油状物として得た。
【００９９】
¹ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃ ）；δ０．１９（ｓ，６Ｈ），０．７０（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，３Ｈ），０．８２（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，３Ｈ），０．９９（ｓ，９Ｈ），１．０４（ｓ，３Ｈ），１．３５（ｓ，３Ｈ），１．３７（ｄｄｄ，Ｊ＝１３．２，７．８ ａｎｄ １．９Ｈｚ，１Ｈ），２．４４（ｓｅｐｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１Ｈ），３．０３（ｄｄｄ，Ｊ＝１３．２，１０．７ ａｎｄ ７．８Ｈｚ，１Ｈ），４．２３（ｄｔ，Ｊ＝１０．７ ａｎｄ ７．８Ｈｚ，１Ｈ），４．４１（ｄｄｄ，Ｊ＝１０．７，８．９ ａｎｄ １．９Ｈｚ，１Ｈ），６．８４（ｄｄｄ，Ｊ＝７．８，２．４ ａｎｄ １．５Ｈｚ，１Ｈ），７．３０−７．３１（ｍ，３Ｈ）ｐｐｍ
¹³ＣＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃ ）；δ−４．４，１８．１，１８．３，２４．０，２５．１，２５．７，３３．４，３５．２，３６．６，６０．９，９６．５，１０８．８，１１９．８，１２０．７，１２０．８，１２８．７，１３９．６，１５５．３ｐｐｍ
ＩＲ（ｌｉｑｕｉｄ ｆｉｌｍ）；２９２９，１８５９，１７２１，１６０２，１５８５，１４８５，１４３６，１２９３，１２１１ｃｍ^-1
【０１００】
（試験例１）
実施例２で得られた６−ｔ−ブチル−１−（３−ｔ−ブチルジメチルシロキシ）フェニル−５，５−ジメチル−２，７，８−トリオキサビシクロ［４．２．０］オクタン（化合物〔８〕）の１．００×１０^-5Ｍ ＤＭＳＯ溶液１ｍｌを、テトラブチルアンモニウムフルオライドの１．００×１０^-2Ｍ ＤＭＳＯ溶液２ｍｌに２５℃で加え、そのときの発光を蛍光分析計で測定した。このときの発光量子収率は０．４０と見積もられ、発光の半減期は１３．２秒、λ_max は４６６ｎｍであった。
【０１０１】
（試験例２）
実施例２で得られた６−ｔ−ブチル−１−（３−ｔ−ブチルジメチルシロキシ）フェニル−５，５−ジメチル−２，７，８−トリオキサビシクロ［４．２．０］オクタン（化合物〔８〕）１０ｍｇをトルエン−ｄ₈ （０．３５ｍＬ）に溶解後、８０℃、９０℃及び１００℃における恒温槽でそれぞれ加熱して経時的に ¹ＨＮＭＲを測定し、各温度での反応速度定数を算出した。その結果、２５℃における半減期は４９．２年と見積もられた。
【０１０２】
【発明の効果】
本発明の１，２−ジオキセタン誘導体（Ｉ）は、熱的安定性が高いため冷蔵保存等することなく保存が可能な化合物であり、かつ量子収率が極めて高い安定な発光を行うことができる化合物である。よって、保存に特別の気をつかうことなく、取り扱いが容易で、発光の発生効率が極めて高いため、発光の測定を効率良く行うことができる。例えば、臨床検査の免疫測定の分野において高感度測定を行うために有用である。

Claims (10)

1. 一般式
   

   

   で表される１，２−ジオキセタン誘導体（式中、Ｒ¹ 、Ｒ² 、Ｒ³ 、Ｒ⁴ 、Ｒ⁵ 、Ｒ⁶ 及びＲ⁷ はそれぞれ独立に水素原子、置換基を有していてもよい炭素数１〜２０個の直鎖状若しくは分岐鎖状のアルキル基、フェニル基、ナフチル基、フリル基、チエニル基又はピリジル基である。また、Ｒ² とＲ³ 、Ｒ⁴ とＲ⁵ 及びＲ⁶ とＲ⁷ は一体となり、それぞれ独立に環状アルキル基を形成することもできる。Ａｒは式（Ｃ）
   

   

   （式中、Ｒ⁸ はヒドロキシル基、メトキシ基、エトキシ基、プロポキシ基、ブトキシ基、ペンチルオキシ基、ヘキシルオキシ基、メトキシエトキシ基、メトキシプロポキシ基、エトキシエトキシ基、エトキシプロポキシ基、メトキシエトキシエトキシ基、ベンジルオキシ基、フェネチルオキシ基、−ＯＳｉ（Ｒ ¹⁰ Ｒ ¹¹ Ｒ ¹² ）（ただし、Ｒ ¹⁰ 、Ｒ ¹¹ 及びＲ ¹² は互いに独立に置換基を有していてもよい炭素数１〜２０個の直鎖状又は分岐鎖状のアルキル基である。）で表される基又はリン酸塩基である。Ｒ¹⁴は水素原子、ハロゲン原子、置換基を有していてもよい炭素数１〜２０個の直鎖状若しくは分岐鎖状のアルキル基、メトキシ基、エトキシ基、プロポキシ基、ブトキシ基、ペンチルオキシ基、ヘキシルオキシ基、メトキシエトキシ基、メトキシプロポキシ基、エトキシエトキシ基、エトキシプロポキシ基、メトキシエトキシエトキシ基又は
   

   

   （式中、Ｙは酸素原子、硫黄原子又はＮ−Ｒ¹⁵で表される基であり、Ｚは水素原子、置換基を有していてもよい炭素数１〜２０個の直鎖状又は分岐鎖状のアルキル基、フェニル基、ナフチル基、フリル基、チエニル基、ピリジル基、−ＯＲ¹⁶、−ＳＲ¹⁷又は
   

   

   で表される基である。ここで、Ｒ¹⁵は水素原子、置換基を有していてもよい炭素数１〜２０個の直鎖状若しくは分岐鎖状のアルキル基、フェニル基、ナフチル基、フリル基、チエニル基、ピリジル基、ヒドロキシル基、メトキシ基、エトキシ基、プロポキシ基、ブトキシ基、ペンチルオキシ基、ヘキシルオキシ基、メトキシエトキシ基、メトキシプロポキシ基、エトキシエトキシ基、エトキシプロポキシ基又はメトキシエトキシエトキシ基であり、Ｒ¹⁶、Ｒ¹⁷、Ｒ¹⁸及びＲ¹⁹は水素原子、置換基を有していてもよい炭素数１〜２０個の直鎖状若しくは分岐鎖状のアルキル基、フェニル基、ナフチル基、フリル基、チエニル基又はピリジル基である。また、Ｒ¹⁵とＲ¹⁶、Ｒ¹⁵とＲ¹⁷、Ｒ¹⁵とＲ¹⁸、Ｒ¹⁸とＲ¹⁹は一体となり環を形成することもでき、この環は２つ以上のヘテロ原子を含んでいてもよい。）で表される基である。）。
2. Ａｒが、式（ｃ）
   

   

   （式中、Ｒ⁸ 及びＲ¹⁴は前記式（Ｃ）のＲ⁸ 及びＲ¹⁴と同じである。）で表される基である請求項１に記載の１，２−ジオキセタン誘導体。
3. Ｒ¹ 、Ｒ² 及びＲ³ が置換基を有していてもよい炭素数１〜２０個の直鎖状又は分岐鎖状のアルキル基、Ｒ⁴ 、Ｒ⁵ 、Ｒ⁶ 及びＲ⁷ が水素原子である請求項１又は２に記載の１，２−ジオキセタン誘導体。
4. Ｒ¹ 、Ｒ² 及びＲ³ が炭素数１〜４のアルキル基である請求項３に記載の１，２−ジオキセタン誘導体。
5. Ｙが酸素原子であり、Ｚが式
   

   

   （式中、Ｒ¹⁸とＲ¹⁹とは一体となり、３〜７員環を形成する。）で表される基である請求項１乃至４のいづれか１項に記載の１，２−ジオキセタン誘導体。
6. Ｒ¹⁸とＲ¹⁹は一体となり、Ｚが式
   

   

   で表される基である請求項５に記載の１，２−ジオキセタン誘導体。
7. ＹがＮ−Ｒ¹⁵であり、Ｚが−ＯＲ¹⁶であり、Ｒ¹⁵とＲ¹⁶とが一体となり、５〜７員環を形成するものである請求項１乃至４のいづれか１項に記載の１，２−ジオキセタン誘導体。
8. Ｒ¹⁵とＲ¹⁶とが一体となり、
   

   

   で表される基である請求項７に記載の１，２−ジオキセタン誘導体。
9. 請求項１乃至８のいづれか１項に記載の１，２−ジオキセタン誘導体を含有してなることを特徴とする免疫測定試薬。
10. 請求項９に記載の免疫測定試薬を使用することを特徴とする免疫測定方法。