JP4397015B2

JP4397015B2 - ゲル化組成物

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Publication number: JP4397015B2
Application number: JP2003162503A
Authority: JP
Inventors: 豊次覚知; 敏文佐藤
Original assignee: マクロテック株式会社
Priority date: 2003-06-06
Filing date: 2003-06-06
Publication date: 2010-01-13
Anticipated expiration: 2023-06-06
Also published as: JP2004358073A

Description

【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、ゲル化組成物、特に医療用接着剤、癒着防止材料および創傷被覆材料等として有用な医療用ゲル化組成物、この組成物を用いたゲル化および接着方法、並びにゲル化により得られるゲルおよびこのゲルを含む人工組織に関する。
【０００２】
【従来の技術】
手術時や受傷時においては、生体、特に血管に生じた破孔や損傷、接合部を安全、確実かつ迅速に封鎖する必要がある。こうした目的には、縫合や吻合時に人工繊維片を補助として用いるか、ゲル化材料が用いられてきた。
【０００３】
人工繊維片としては、天然の線維状のコラーゲンが生化学的な止血作用を奏することを利用して、これを成形した止血材料が記載されている（例えば、特許文献１）。しかしながら、天然の線維状のコラーゲンは生体内での分解性が低く、長期間残留することによって異物反応が起きる可能性がある。そこで、抗原決定基を酵素処理またはアルカリ処理して抗原性を低下させて得られるアテロコラーゲンも用いられる（例えば、特許文献２および３）。しかし、これらのアテロコラーゲンは止血性が弱いため、再線維化に加え架橋を施さないと、止血するまでの一定期間、生体内に溶解させずに留置させることは難しい。しかし、強度に架橋を加えたアテロコラーゲンは、生体適合性が低く、炎症性を発現するという報告がある（非特許文献１）。
【０００４】
ゲル化材料としては、現在、外科用接着剤、止血剤として用いられている医療用ゲル材料の殆どは、人の血漿蛋白質や、牛や豚の骨や皮といった生体材料（フィブリノゲン、ゼラチン、コラーゲンなど）を原料にして製造されている。例えば、特許文献４は、エチレンオキシドにより滅菌されたコラーゲン蛋白部分加水分解物質および多価フェノール化合物を主成分とする糊剤成分およびアルデヒド類を主成分とする硬化成分を含む生体用止血乃至組織接着剤を開示している。ここで、コラーゲン蛋白部分加水分解物質はゼラチンまたは膠である。しかし、一般に生体由来材料には肝炎ウイルス、発熱性物質、アレルゲン、牛海綿状脳症（ＢＳＥ）等が含まれているおそれがあり、感染症等に対する懸念から他の材料への置換えが望ましい。
【０００５】
そこで、人体や動物に由来する原料を用いないで製造された、化学合成による外科用接着剤や止血剤も検討されている。例えば、特許文献５には特定構造の直鎖ジアミンの塩を架橋剤として用いた分子内にカルボキシル基を有する多糖類からなる水膨潤性高分子ゲルが記載されている。カルボキシル基を有する多糖類としてはアルギン酸塩またはヒアルロン酸塩が、直鎖ジアミンの塩としてはＮ−ヒドロキシコハク酸イミド塩が挙げられている。
【０００６】
また、特許文献６には、カルボキシル基を有する多糖に、カルボニルジイミダゾール、カルボニルトリアゾール、ヨウ化クロロメチルピリジリウム（ＣＭＰ−Ｊ）、ヒドロキシベンゾトリアゾール、ｐ−ニトロフェノールｐ−ニトロフェニルトリフルオロアセテート、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド等と反応させてなる化合物を特定構造のポリアミンで架橋するゲル化方法が記載されている。この公報にはカルボキシル基を有する多糖としてカルボキシメチルセルロースも挙げられているが、実施可能な特性を備えたカルボキシメチルセルロースを用いた医療用接着材料は具体的には開示されていない。また、ポリアミンとしては直鎖ジアミンのみが記載されている。
【０００７】
化学合成品として現段階で実用化されているのは、シアノアクリレート系、およびポリエチレングリコール系の材料のみであるが、その性能や毒性に基づく制約から適用はごく限られたものにとどまっている。
【０００８】
そこで、本発明者らはスクシンイミド残基を側鎖に導入した鎖状多糖誘導体とポリアミンとを含む医療用組成物を開発し、本願と同日付で出願した。これは迅速かつ確実なゲル化という点で従来ない優れた組成物であるが、鎖状多糖誘導体は比較的粘性が高いという問題があり、場合によっては、より低粘性のゲル化組成物も必要とされる。
【０００９】
【特許文献１】
特願２００２−５６９０１号
【００１０】
【特許文献２】
特開平６−３３９４８３号公報
【特許文献３】
特開平６−１９７９４６号公報
【特許文献４】
特開平８−１９６６１４号公報
【特許文献５】
特開平１０−３１４２９４号公報
【特許文献６】
特許第３１０７７２６号
【非特許文献１】
Ｋｏｉｄｅｅｔａｌ．，ＪｏｕｒｎａｌｏｆＢｉｏｍｅｄｉｃａｌＭａｔｅｒｉａｌｓＲｅｓｅａｒｃｈ，２７（１）（1993）ｐ．７９−８７
【００１１】
【発明が解決しようとする課題】
すなわち、本発明は、それ自体は粘性が低いが、適用時には迅速にゲル化して安定な被覆、閉塞、接着、分離等の機能を示すとともに、生体適合性にも優れた医療用組成物を提供することを目的とする。
【００１２】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは、デンドリマー等の一般の球状高分子では従来の高分子にない物理的および化学的特性が得られる点に着目し、先に無水糖の重合体からなる多分岐多糖およびその製造方法を提案した（特願2002-56901号）。本発明者らは、さらに検討を進めた結果、特願2002-56901号に記載の多分岐多糖に特定の基を導入することにより反応性を高め、ゲル化材料としての可能性を有する反応性多分岐多糖誘導体を開発することに成功し、これがゲル組成物として有用であることを見出し本発明を完成するに至った。
【００１３】
すなわち、本発明は、以下のゲル組成物、この組成物を用いたゲル化および接着等の方法、並びにゲル化により得られるゲルおよびこの医療用ゲルを含む人工組織を提供する。
〔１〕（ａ）多分岐多糖分子中の水酸基の少なくとも一部の水素原子を
【化２】

〔式中、Ｙは置換されていてもよいカルバモイル基であり、Ｚは−ＯＲ¹¹または−ＮＨＲ¹²（式中、Ｒ¹¹は水素原子、金属原子、脂肪族炭化水素もしくは芳香族炭化水素または−Ｎ（ＣＯＣＨ₂）₂で表わされるＮ−スクシンイミド基を表わし、Ｒ¹²は１個以上のアミノ基で置換されている脂肪族炭化水素基を表わす。）から選択され、分子中に複数の種類のＹが混在してもよい。〕で置換してなる多分岐多糖誘導体を含む第１液と
（ｂ）（ａ）と反応してゲルを形成する化学種を含む第２液
を含み両者の混合によりゲル化する組成物。
【００１４】
〔２〕多分岐多糖誘導体（ａ）におけるＺが−ＯＲ¹¹でありＲ¹¹が−Ｎ（ＣＯＣＨ₂）₂であり、化学種（ｂ）がポリアミンである前記１に記載のゲル化組成物。
〔３〕多分岐多糖誘導体（ａ）におけるＺが−ＯＲ¹¹でありＲ¹¹が水素原子または金属原子であり、化学種（ｂ）が２価の金属塩である前記１に記載のゲル化組成物。
【００１５】
〔４〕多分岐多糖誘導体（ａ）におけるＺが−ＮＨＲ¹²であり、化学種（ｂ）がスクシンイミド基含有ポリマーまたはイソシアナートである前記１に記載のゲル化組成物。
〔５〕多分岐多糖誘導体（ａ）の分岐度が0.05〜1.00の範囲である前記１乃至４のいずれかに記載のゲル化組成物。
【００１６】
〔６〕多分岐多糖誘導体（ａ）が、Ｄ−グルコース、Ｄ−マンノース、Ｄ−ガラクトース、Ｄ−アロース、Ｄ−アルトロース、Ｄ−イドース、Ｄ−タロース、Ｄ−キシロース、Ｄ−リボースおよびＤ−アラビノースからなる群から選択される１種または複数の単糖類を構成単位として含む前記１乃至５のいずれかに記載のゲル化組成物。
【００１７】
〔７〕多分岐多糖誘導体（ａ）において、構成単位当たり平均して0.01〜３個の水素原子が前記式（Ｉ）の置換基で置換されている前記１乃至６のいずれかに記載のゲル化組成物。
〔８〕多分岐多糖が無水糖の重合反応によって得られるものである前記１乃至７のいずれかに記載のゲル化組成物。
【００１８】
〔９〕多分岐多糖誘導体（ａ）の一部が分岐度が0.05未満であり多分岐多糖誘導体（ａ）と同種の置換基を有する鎖状多糖誘導体で代替されている前記１乃至８のいずれかに記載のゲル化組成物。
〔１０〕多分岐多糖誘導体が、透析によって低分子量の不純物を除去したものである前記１乃至９のいずれかに記載のゲル化組成物。
〔１１〕ゲルがヒトもしくは動物の任意の組織または人工組織の接着、吻合、閉鎖、閉塞、分離、被覆を含む用途に用いられる前記１乃至１０のいずれかに記載の医療用ゲル化組成物。
【００１９】
〔１２〕前記１乃至１０のいずれかに記載のゲル組成物における多分岐多糖誘導体（ａ）とゲル形成化学種（ｂ）とを混合して反応させて得られるゲル。
〔１３〕多分岐多糖誘導体（ａ）を含む第１液とゲル形成化学種（ｂ）を含む第２液を同時または異時に適用することによるヒトもしくは動物の任意の組織または人工組織の接着、吻合、閉鎖、閉塞、分離または被覆を行なう方法。
〔１４〕前記１３に記載の方法により医療用ゲル組成物が付与された人工組織。
【００２０】
【発明の実施の形態】
（Ａ）ゲル組成物
本発明のゲル組成物は、簡単に言えば、
（ａ）反応性多分岐多糖分子を含む第１液と
（ｂ）（ａ）と反応してゲルを形成する化学種を含む第２液
を含むゲル化組成物、およびそのゲル化組成物をゲル化して形成するゲルである。
【００２１】
（ａ）反応性多分岐多糖分子
本発明に使用する多分岐多糖誘導体（ａ）は反応性置換基を有する多分岐多糖の誘導体であり、模式的には、次式：
【化３】

で示される。式中、Ｒは水素原子、炭素数１乃至３０の置換されていてもよい脂肪族炭化水素もしくは芳香族炭化水素等の糖鎖に可能な任意の基であるが、少なくともその一部は次式（Ｉ）：
【００２２】
【化４】

〔式中、Ｙは置換されていてもよいカルバモイル基であり、Ｚは−ＯＲ¹¹または−ＮＨＲ¹²（式中、Ｒ¹¹は水素原子、金属原子、脂肪族炭化水素もしくは芳香族炭化水素または−Ｎ（ＣＯＣＨ₂）₂で表わされるＮ−スクシンイミド基を表わし、Ｒ¹²は１個以上のアミノ基で置換されている脂肪族炭化水素基を表わす。）から選択され、分子中に複数の種類のＹが混在してもよい。〕の反応性置換基を含む。
【００２３】
本発明の典型的態様では、反応性多分岐多糖分子（ａ）は球状分子であり、その表面またはこれに近い層の糖単位の水酸基が上記式（Ｉ）で表わされる反応性置換基で置換されていている（球状分子内部の水酸基も置換されていてもよい）。複数の反応性多分岐多糖誘導体（ａ）が存在する系中にこれと適当な化学種を添加すると、反応性多分岐多糖誘導体（ａ）表面の上記反応性置換基を介して分子間に架橋または相互作用を生じさせる。この結果、ゲル体が生じることになる。ゲル形成化学種（ｂ）は反応性多分岐多糖誘導体（ａ）との組み合わせによって決まる。具体例については後述する。
【００２４】
式（II）ではＤ−グルコースを構成単位として描いているが、本発明の多分岐多糖誘導体を構成する単糖類は特に限定されない。構成単位として使用できる単糖類の例としては、Ｄ−グルコース、Ｄ−マンノース、Ｄ−ガラクトース、Ｄ−アロース、Ｄ−アルトロース、Ｄ−イドース、Ｄ−タロース等のヘキソアルドース（６炭糖）、Ｄ−キシロース、Ｄ−リボース、Ｄ−アラビノース等のペントアルドース（５炭糖）またはこれらの誘導体が挙げられる。但し、これらは例示であって、例えば、Ｄ−フルクトース等のケトースも用い得る。また、対応するＬ体でもよい。
【００２５】
式（II）に示すタイプの多分岐多糖類は、例えば、次式：
【化５】

で表わされる分子内脱水糖（無水糖）を適当な開始剤の存在下に重合することにより得られ（特願2002-56901号）、無水糖としては、１，６−アンヒドロ−β−Ｄ−グルコピラノース、１，６−アンヒドロ−β−Ｄ−マンノピラノース、１，６−アンヒドロ−β−Ｄ−ガラクトピラノース、１，６−アンヒドロ−β−Ｄ−アロピラノース、１，６−アンヒドロ−β−Ｄ−アルトロピラノース等の１，６−アンヒドロ糖；１，４−アンヒドロ−β−Ｄ−リボピラノース、１，４−アンヒドロ−β−Ｄ−キシロピラノース、１，４−アンヒドロ−β−Ｄ−アラビノピラノース、１，４−アンヒドロ−β−Ｄ−リキソピラノース等の１，４−アンヒドロ糖；１，３−アンヒドロ−β−Ｄ−グルコピラノース、１，３−アンヒドロ−β−Ｄ−マンノピラノース等の１，３−アンヒドロ糖；１，２−アンヒドロ−β−Ｄ−グルコピラノース、１，２−アンヒドロ−β−Ｄ−マンノピラノース等の１，２−アンヒドロ糖；さらに５，６−アンヒドロ−β−Ｄ−グルコピラノース等の５，６−アンヒドロ糖；および３，５−アンヒドロ糖等が含まれる。これらの無水糖は、例えば、木材等の含セルロース材料のマイクロ波処理や熱分解により得ることができる。
【００２６】
式（II）に示す本発明の多分岐多糖類は大きな多分岐度を有しており、この結果、ユニークな特徴を有する。例えば、分子形状が球に近く（球状体）分子同士の「絡み合い」が少ない結果として粘性が小さい。また、鎖状分子と比べて分子全体の形状の変化が少なく、前記球状体の表面またはそれに近い層の糖単位に集中して修飾基（前記式（Ｉ）の置換基）が導入されやすく、かつ、導入された修飾基が常に表面層に存在することから、安定的かつ優れた反応性が得られる。
【００２７】
多分岐多糖誘導体中に導入することが望ましい修飾基（置換基−ＹＣＯＺ）の数は、多分岐多糖誘導体の使用目的や修飾基の種類、分子量によって変わる。通常は構成単位当たり0.01％個以上、好ましくは0.1個以上、より好ましくは0.4個以上であり、さらに好ましくは１個以上の修飾基を含む。なお、置換度の上限値については、５個の糖と結合している分岐ユニットが０個、４個の糖と結合している分岐ユニットが１個、３個の糖と結合している分岐ユニットが２個、２個の糖と結合している直鎖ユニットが３個、１個の糖と結合している末端ユニットが４つであり、従って、単位構成あたり３個である。一般的には、重合度が高い場合、特に分子形状が球状に近い場合は、表面または表面に近い層に修飾基が分布していればよい。なお、導入する置換基の数は、反応原料の量比の制御等や反応時間、温度等の反応条件の制御によって容易に調整することができる。
【００２８】
本願において、多分岐度は以下の式（Ｆｒｅｃｈｅｔの式）で定義される。
分岐度＝（分岐ユニット数＋ポリマー末端数）／（分岐ユニット数＋ポリマー末端数＋直鎖ユニット数）
ここで、分岐ユニット数とは分岐を有する糖単位（すなわち、隣接する糖３分子以上と結合している糖単位）の数であり、直鎖ユニット数とは分岐を有さず隣接する２分子とのみ結合している糖単位の数であり、ポリマー末端数とは隣接する１分子とのみ結合している糖単位の数である。また、分子数は測定対象とする分子集団に含まれる多糖分子の合計数である。
【００２９】
分岐度の範囲は、構成単位や多糖誘導体の用途にもよるが、通常は0.05〜1.00、好ましくは0.4〜1.0の範囲である。分岐度0.05未満では一般には多分岐多糖としての特徴が十分に現れない。多糖は前記構成糖の１種のみから構成されるホモ多糖、またはこれらの構成糖類の２種以上から構成されるヘテロ多糖でもよい。
【００３０】
なお、式（Ｉ）の置換基は、多分岐多糖分子とアミノ酸エステルイソシアナートＯＣＮ−ＣＨ（Ｒ²）−ＣＯＯＲ³（式中、Ｒ²およびＲ³は同一でも異なっていてもよく炭素数１乃至３０の置換されていてもよい脂肪族炭化水素もしくは芳香族炭化水素を表わす。）とを反応させ、必要に応じて脱エステルし、さらにＮ−ヒドロキシスクシンイミドまたはポリアミンと反応させることにより導入できる。
アミノ酸エステルイソシアナート：ＯＣＮ−ＣＨ（Ｒ²）−ＣＯＯＲ³は、アミノ酸：ＮＨ₂ＣＨ（Ｒ²）ＣＯＯＨから誘導される化合物である。特にいわゆる必須アミノ酸や慣用されるその誘導体から誘導されるアミノ酸エステルイソシアナートが好ましい。なお、ここで必須アミノ酸としては、グリシン、アラニン、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、システイン、シスチン、グルタミン酸、グルタミン、ヒスチジン、リシン、ロイシン、イソロイシン、メチオニン、フェニルアラニン、プロリン、バリン、チロシン、スレオニン、トリプトファン、セリン等が挙げられ、慣用されるその誘導体にはヒドロキシプロリン、ヒドロキシリシン等が挙げられる。
【００３１】
また、得られた多分岐多糖誘導体は、好ましくは透析により低分子不純物を除去することが望ましい。例えば、透過分子量14000以下の透析膜を用いて、２時間〜３日間程度、好ましくは１〜２日間程度かけて行なうことが好ましい。特に好適な透析は、室温で蒸留水中、所定時間(例えば、１時間)おきに蒸留水を交換することで行なうことができる。
【００３２】
（ｂ）ゲル形成化学種
本発明で用い得るゲル形成化学種（ｂ）は反応性多分岐多糖誘導体（ａ）との組み合わせによって決まるが、典型的には以下の組み合わせである。
(i)多分岐多糖誘導体（ａ）におけるＺ（式（I））が−ＯＲ¹¹でありＲ¹¹が−Ｎ（ＣＯＣＨ₂）₂であり、化学種（ｂ）がポリアミンであるゲル組成物。
(ii)多分岐多糖誘導体（ａ）におけるＺが−ＯＲ¹¹でありＲ¹¹が水素原子または金属原子であり、化学種（ｂ）が２価の金属塩であるゲル組成物。
(iii)多分岐多糖誘導体（ａ）におけるＺが−ＮＨＲ¹²であり、化学種（ｂ）がスクシンイミド基含有ポリマーまたはイソシアナートであるゲル組成物。
【００３３】
上記(i)は、複数の反応性多糖誘導体分子の端部カルボニル基（式（Ｉ）：ＹＣＯＺにおけるカルボニル基）とポリアミン分子中の複数のアミノ基とが架橋する反応と考えられる。この際、ＨＯ−Ｎ（ＣＯＣＨ₂）₂（すなわち、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド）の脱離を伴う。
【００３４】
ここで、ポリアミンは、分子中に２以上のアミノ基を有する化合物であり、エチレンジアミン、ジエチレントリアミン等のポリアルキレンポリアミン、側鎖にアミノ基を有する次式：
【化６】

（式中、Ｒ⁴は、水素原子、炭素数１乃至１０個のアルキル、フェニルまたはベンジル基であり、Ｂは単結合または炭素数１乃至１０個のアルキレン、好ましくは炭素数１乃至６個のアルキレンであり、Ａは単結合またはヒドロキシ、カルボキシ、ハロゲン、アルコキシ、アミノもしくはアリール基により置換されていてもよい炭素数１乃至１０個のアルキレンまたはアルキレンにより結合された１個以上のオキシ基、カルボニル基もしくはアミノ基を表わし、ｍは２以上の整数であり、Ｒ⁴、ＢおよびＡは上記単位ごとに異なっていてもよい。）等が挙げられる。なお、式(III)のポリアミンにおいて定義していない末端基は、例えば水素原子またはメチル等のアルキル基である。
【００３５】
上記(ii)は、複数の反応性多糖誘導体分子の端部カルボキシル基（式（Ｉ））と２価の金属塩とが反応してゲル化が進行する。この機構はグルコマンナンのゲル化と同様にイオン性の機構と考えられる。２価の金属としてはカルシウム等が挙げられ、その金属塩としては水溶性のもの、例えば、塩化カルシウムが挙げられる。
【００３６】
上記(iii)は、多分岐多糖誘導体（ａ）に含まれるポリアミノ基中の少なくとも一部のアミノ基がスクシンイミド含有含有ポリマーと反応して、上記(i)と同様の反応（但し、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドはスクシンイミド含有含有ポリマーからの脱離する。）が進行して分子間架橋が形成される。
ここで、スクシンイミド含有含有ポリマーの例としては、
・上記(i)の反応性多糖誘導体分子、
・上記(i)と同様に糖鎖にスクシンイミドが導入された鎖状の（すなわち、多分岐ではない）反応性多糖誘導体分子、または
・上記(i)と同様に水酸基にスクシンイミドが導入された鎖状または多分岐の反応性の非多糖類ポリマーが挙げられる。
【００３７】
上記(i)と同様に糖鎖にスクシンイミドが導入された鎖状反応性多糖誘導体分子の例としては、本発明者らが本願と同日付で出願した主鎖がセルロースまたはキチン、キトサンであるセルロース骨格系カーバメート誘導体、鎖状多糖誘導体（この場合、式（I）のＹは置換されていてもよいカルバモイル基またはＹは置換されていてもよいアルキレンであり、後者の場合にはセルロースはカルボキシル化セルロース誘導体である。）、同様のアミロース誘導体が含まれ、さらにヒアルロン酸等の糖水酸基がカルボキシル基化された糖鎖の誘導体が含まれる。また、水酸基にスクシンイミドが導入された反応性の非多糖類ポリマーの例としては分岐あるいは多分岐のポリエチレングリコール誘導体、ポリアルキルアルコール誘導体（ポリビニルアルコール誘導体等）、ポリ（メタ）アクリル酸誘導体等が挙げられる。
【００３８】
また、イソシアナートの例としては、４，４’−ジイソシアン酸メチレンジフェニル、トルエン−２，４−ジイソアナート等のジイソアナート類、各種のトリイソシアナート、多置換芳香族イソシアナート、多置換脂肪族イソシアナート等が挙げられる。なお、イソシアナートは、多分岐多糖誘導体（ａ）におけるＺ（式（Ｉ））が−ＯＲ¹¹でありＲ¹¹が水素原子、金属原子、脂肪族炭化水素もしくは芳香族炭化水素である多分岐多糖誘導体（ａ）に対してもゲル形成剤として用い得る。
【００３９】
（Ｃ）ゲル化反応
ゲル化は、反応性多分岐多糖分子を含む第１液またはゲル形成化学種を含む第２液の一方を対象面に塗付し、次いで、前記対象面に他方の液を塗付または滴下してゲル状反応生成物を生じさせることによってゲル化させる重層塗布法が通常であるが、接着においては、接続または吻合すべき患部の一方に第１液（第２液）を塗布し、他方に第２液（第１液）を塗布する二面塗布法でもよい。または同時に上記２液を滴下する方法、あるいはスプレー法等の混合塗布法等も用い得る。
【００４０】
反応性多分岐多糖分子は、そのままでも用い得るが、コストを考慮して希釈して用いてもよい。希釈に用いる溶媒は特に限定されないが、生体内での使用または生体組織との接触を考慮すると、水性溶媒、特に水や希エタノール等が好ましい。通常、１〜７５質量％程度、好ましくは２〜６０質量％、より好ましくは３〜３０質量％、最も好ましくは４〜２０質量％に希釈する。また、分岐度が0.05未満であり多分岐多糖誘導体（ａ）と同種の置換基を有する鎖状多糖誘導体（前述の本発明者らが本願と同日付で出願した主鎖がセルロースまたはキチン、キトサンであるセルロース骨格系カーバメート誘導体等）を併用してもよい。
【００４１】
また、ゲル形成化学種を含む第２液は、通常の濃度で用い得るが、特に広い範囲に適用する場合には水性溶媒、特に水や希エタノール等で通常、１〜７５質量％程度、好ましくは２〜６０質量％、より好ましくは３〜３０質量％、最も好ましくは４〜２０質量％に希釈して用いることが好ましい。反応に害を及ぼさない範囲の任意の塩類を含んでもよく、例えば、リン酸塩、クエン酸塩、カルボン酸塩等でｐＨを調節してもよい。
【００４２】
（Ｄ）適用対象
本発明の医療用ゲル化材料は、前述の通り、組織の接着、接合、被覆、補強、封鎖、分離（癒着防止）などに広く用いることができる。組織は人体、動物の任意の組織を含み、さらに人工血管などの人工組織を含む。より具体的には、例えば、硬膜、腹膜、筋膜、胸膜の接着、骨あるいは軟骨の接着、実質臓器切開部の接着、皮膚の接着、神経吻合、微小血管吻合、腸管吻合、卵管吻合、植皮片あるいは創傷被覆保護材の貼付等の組織の接着を目的とした生体接着剤として用いることができる。また、本発明の医療用ゲル化材料は、血液、体液のような水分存在下においてもゲルを形成し、生体組織に対して高い接着性を示すので、実質臓器の微小血管からの出血、縫合時の縫合糸穴からの出血等の止血を目的とした止血材や、髄液、胆汁等の体液の漏出防止、鼓膜欠損の閉鎖、代用血管の閉鎖、肺手術後の空気漏れ穴の閉鎖、気管支の閉鎖、シャントチューブのシールを目的とした生体または医療材料の閉鎖材等として用いることができる。さらに外科手術によって分離された組織間の術後癒着の防止材としても有用である。
【００４３】
特に本発明の反応性多分岐多糖誘導体（ａ）は低粘度なので、これを含む第１液を人工組織（例えば、人工血管）の内部に流し、しかる後にゲル形成化学種（ｂ）を含む第２液を流すことにより、内部被覆が容易に行なえる（液の適用順序は反対でもよい）。同様の理由で反応性多分岐多糖誘導体（ａ）を含む第１液に人工組織を浸漬し、しかる後にゲル形成化学種（ｂ）を含む第２液に浸漬することにより、内部に中空部を有する構造や組織内外面の被覆が容易に行なえる（液の適用順序は反対でもよい）。
【００４４】
【実施例】
以下、参考例および実施例により本発明を具体的に説明するが、これらは本発明を限定するものではない。なお、以下の例において「置換度」は、元素分析の結果から算出した糖鎖水酸基の置換度である。また、以下の例においてハイパーブランチグルカンは、前記特願2002-56901号の実施例１に準じて合成した多分岐多糖であり、重量平均分子量：70,000（分子量は静的光散乱測定法により測定した。）である。
また、アミノ酸エステルイソシアナートは、原料のアミノ酸としてＬ−ロイシン、Ｌ−アスパラギン酸、Ｌ（−）−フェニルアラニンを使用し（すべて関東化学社製）、参考例１、２に記載の方法で合成した。
【００４５】
参考例１：アミノ酸エステルの合成
各種アミノ酸に、アミノ酸がすべて溶解するまで1.0ｍｏｌ／Ｌアルコール性塩酸（キシダ社製）を加えた。１０時間加熱還流した後、溶液を冷ましてアルコールを減圧留去した。残留物をジクロロメタンに溶解し、アンモニア水を用いてｐＨ１０に調製した水とともに分液漏斗にて抽出を行った。有機相を飽和食塩水でもう一度抽出し、硫酸マグネシウムにて乾燥した後、減圧蒸留にて精製した。
【００４６】
参考例２：アミノ酸エステルイソシアナートの合成
ジクロロメタンにアミノ酸エステルを溶解した溶液を、ジクロロメタンに４−ジメチルアミノピリジン(1.0eq)(和光純薬)と二炭酸ジ−ｔ−ブチル（1.4eq）(和光純薬社製)を溶解した溶液に滴下した。１０分後、0.5ｍｏｌ／Ｌ塩酸と氷を用いて抽出を２回行い、さらに有機層を飽和食塩水にて抽出した。得られた有機相を硫酸マグネシウムにて乾燥した後、減圧蒸留にて精製した。
【００４７】
実施例１：ハイパーブランチグルカン（Ｌ−ロイシンエチルエステルカルバメート）
前記式（II）においてＲが次式で表わされるハイパーブランチグルカン（Ｌ−ロイシンエチルエステルカルバメート）を合成した。
【化７】

【００４８】
ハイパーブランチグルカン1.0ｇをドライピリジン（関東化学社製）４５ｍＬに溶解した。この溶液を１００℃に加熱した後、Ｌ−ロイシンエチルエステルイソシアナート11.5ｇを加え、撹拌しながら２４時間反応させた。冷却後、反応溶液を過剰量のメタノールに注ぎいれて反応を停止し、標題の化合物（ポリマー）を得た（収量：1.96ｇ）。得られたポリマーはアセトン、メタノール、クロロホルム、酢酸エチル、ジクロロメタン、トルエン、ジクロロメタン等の有機溶媒に可溶で、水、へキサン等の溶媒に不溶であった。
置換度は元素分析の結果から2.9と見積もられた。
＜元素分析値＝Ｃ：54.84％；Ｈ：7.62％；Ｎ：5.78％＞
生成物の¹Ｈ−ＮＭＲスペクトルを図１に示す。
【００４９】
実施例２：ハイパーブランチグルカン(Ｌ−アスパラギン酸エチルエステルカルバメート)
前記式（II）においてＲが次式で表わされるハイパーブランチグルカン(Ｌ−アスパラギン酸エチルエステルカルバメート)を合成した。
【化８】

【００５０】
ハイパーブランチグルカン0.2ｇをドライピリジン（関東化学社製）９ｍＬに溶解した。この溶液を１００℃に加熱した後、Ｌ−アスパラギン酸エチルエステルイソシアナート1.33ｇを加え、撹拌しながら２４時間反応させた。冷却後、反応溶液を過剰量のメタノールに注ぎいれて反応を停止し、標題の化合物（ポリマー）を得た（収量：0.74ｇ）。得られたポリマーはアセトン、メタノール、クロロホルム、酢酸エチル、ジクロロメタン、トルエン、ジクロロメタン等の有機溶媒に可溶で、水、へキサン等の溶媒に不溶であった。
置換度は元素分析の結果から2.7と見積もられた。
＜元素分析値＝Ｃ：48.75％；Ｈ：6.11％；Ｎ：5.04％＞
生成物の¹Ｈ−ＮＭＲスペクトルを図２に示す。
【００５１】
実施例３：ハイパーブランチグルカン(Ｌ−フェニルアラニンエチルエステルカルバメート)
前記式（II）においてＲが次式で表わされるハイパーブランチグルカン(Ｌ−アスパラギン酸エチルエステルカルバメート)を合成した。
【化９】

【００５２】
ハイパーブランチグルカン0.2ｇをドライピリジン（関東化学社製）９ｍＬに溶解した。この溶液を１００℃に加熱した後、Ｌ−フェニルアラニンエチルエステルイソシアナート1.4ｇを加え、撹拌しながら２４時間反応させた。冷却後、反応溶液を過剰量のメタノールに注ぎいれて反応を停止し、標題の化合物（ポリマー）を得た（収量：0.45ｇ）。得られたポリマーはアセトン、メタノール、クロロホルム、酢酸エチル、ジクロロメタン、トルエン、ジクロロメタン等の有機溶媒に可溶で、水、へキサン等の溶媒に不溶であった。
置換度は元素分析の結果から2.4と見積もられた。
＜元素分析値＝Ｃ：61.02％；Ｈ：6.08％；Ｎ：4.89％＞
生成物の¹Ｈ−ＮＭＲスペクトルを図３に示す。
【００５３】
実施例４：ハイパーブランチグルカン（Ｌ−ロイシンカルバメート）
前記式（II）においてＲが次式で表わされるハイパーブランチグルカン（Ｌ−ロイシンカルバメート）を合成した。
【化１０】

【００５４】
実施例１で得られたハイパーブランチグルカン（Ｌ−ロイシンエチルエステルカルバメート）に１ＭＮａＯＨ溶液（２０ｍｌ）を加え、室温で１２時間撹拌した。反応溶液を透析膜（透過分子量1000）に入れ、４８時間、蒸留水を用いて透析を行った。凍結乾燥による乾燥後、標題化合物（ポリマー）を得た。得られたポリマーは白色の粉末で、水に可溶性であった。
生成物の¹Ｈ−ＮＭＲスペクトルを図４に示す。
【００５５】
実施例５：ハイパーブランチグルカン（Ｌ−アスパラギン酸カルバメート）
前記式（II）においてＲが次式で表わされるハイパーブランチグルカン（Ｌ−アスパラギン酸カルバメート）を合成した。
【化１１】

【００５６】
実施例２で得られたハイパーブランチグルカン（Ｌ−アスパラギン酸エチルエステルカルバメート）に１ＭＮａＯＨ溶液（２０ｍｌ）を加え、室温で１２時間撹拌した。反応溶液を透析膜（透過分子量1000）に入れ、４８時間水を用いて透析を行った。凍結乾燥による乾燥後、標題化合物（ポリマー）を得た。得られたポリマーは白色の粉末で、水に可溶性であった。
【００５７】
実施例６：ハイパーブランチグルカン（Ｌ−ロイシンコハク酸イミドエステルカルバメート）
前記式（II）においてＲが次式で表わされるハイパーブランチグルカン（Ｌ−ロイシンコハク酸イミドエステルカルバメート）を合成した。
【化１２】

【００５８】
実施例４で得られたハイパーブランチグルカン（Ｌ−ロイシンカルバメート）（0.5ｇ）のグルコース単位ユニットに対しＮ−ヒドロキシコハク酸イミド（0.09ｇ）および1-ヒドロキシベンゾトリアゾール（0.11ｇ）をメタノールと水の混合溶媒（メタノール：水＝１：２）（４ｍＬ）に入れ、脱水縮合剤として１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル−カルボジイミド）（0.12ｇ、ペプチド研究所製）を滴下した。室温で２４時間撹拌後、過剰量のメタノールに注ぎ入れて反応を止め、蒸留水を用いた透析により精製し、凍結乾燥して白色固体状の標題化合物（ポリマー）を得た（収量：0.44ｇ）。得られたポリマーは水、メタノールおよびジメチルスルホキシドに可溶であった。
生成物の¹Ｈ−ＮＭＲスペクトルを図５に示す。
【００５９】
実施例７：ハイパーブランチグルカン（Ｌ−アスパラギン酸コハク酸イミドエステルカルバメート）
前記式（II）においてＲが次式で表わされるハイパーブランチグルカン（Ｌ−アスパラギン酸コハク酸イミドエステルカルバメート）を合成した。
【化１３】

【００６０】
実施例５で得られたハイパーブランチグルカン（Ｌ−アスパラギン酸カルバメート）（0.2ｇ）のグルコース単位ユニットに対し１当量のＮ−ヒドロキシコハク酸イミド（0.04ｇ）および1-ヒドロキシベンゾトリアゾール（0.48ｇ）をメタノールと水の混合溶媒（メタノール：水＝１：２）（３ｍＬ）に入れ、脱水縮合剤として１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル−カルボジイミド）（0.06g、ペプチド研究所製）を滴下した。室温で２４時間撹拌後、過剰量のメタノールに注ぎ入れて反応を止め、水を用いた透析により精製し、凍結乾燥して白色固体状の標題化合物（ポリマー）を得た（収量：0.22ｇ）。得られたポリマーは水に可溶性、メタノールおよびジメチルスルホキシドに不溶性であった。
【００６１】
実施例８：ハイパーブランチグルカン（Ｌ−ロイシンエチレンジアミンエステルカルバメート）
前記式（II）においてＲが次式で表わされるハイパーブランチグルカン（Ｌ−ロイシンエチレンジアミンエステルカルバメート）を合成した。
【化１４】

【００６２】
実施例１で得られたハイパーブランチグルカン（Ｌ−ロイシンエチルエステルカルバメート）（0.2ｇ）をメタノール（8.31ｍＬ）に溶解し、撹拌しながらエチレンジアミン（5.23ｇ）を加えた。室温で２４時間反応した後、メタノールを用いた透析により精製し、標題化合物（ポリマー）を得た（収量：0.17ｇ）。
【００６３】
実施例９：ハイパーブランチグルカン（Ｌ−ロイシンコハク酸イミドエステルカルバメート）とポリアリルアミンとのゲル化反応
実施例６で得られたハイパーブランチグルカン（Ｌ−ロイシンコハク酸イミドエステルカルバメート）（0.1ｇ）をｐＨ7.4のリン酸緩衝溶液（0.1ｍＬ）に溶解し、１０ｗｔ％ポリアリルアミン水溶液（0.6ｇ、分子量15,000、日東紡）を加え、室温で撹拌した。滴下後、系内は瞬時に白濁し、ゲルを形成した。
【００６４】
実施例１０：ハイパーブランチグルカン（Ｌ−アスパラギン酸コハク酸イミドエステルカルバメート）とポリアリルアミンとのゲル化反応
実施例７で得られたハイパーブランチグルカン（Ｌ−アスパラギン酸コハク酸イミドエステルカルバメート）（0.1ｇ）をｐＨ7.4のリン酸緩衝溶液（0.1ｍＬ）に溶解し、１０ｗｔ％ポリアリルアミン水溶液（0.6ｇ、分子量15,000、日東紡）を加え、室温で撹拌した。滴下後、系内は瞬時に白濁し、ゲルを形成した。
【００６５】
実施例１１：ハイパーブランチグルカン（Ｌ−ロイシンコハク酸イミドエステルカルバメート）とポリアリルアミンとのゲル化反応
実施例６で得られたハイパーブランチグルカン（Ｌ−ロイシンコハク酸イミドエステルカルバメート）（0.1ｇ）をｐＨ7.4のリン酸緩衝溶液（0.1ｍＬ）に溶解し、４０ｗｔ％ポリアリルアミン水溶液（0.4ｇ、分子量3,000、日東紡）を加え、室温で撹拌した。滴下後、系内は瞬時に白濁し、ゲルを形成した。
【００６６】
実施例１２：ハイパーブランチグルカン（Ｌ−アスパラギン酸コハク酸イミドエステルカルバメート）とポリアリルアミンとのゲル化反応
実施例７で得られたハイパーブランチグルカン（Ｌ−アスパラギン酸コハク酸イミドエステルカルバメート）（0.1ｇ）をｐＨ7.4のリン酸緩衝溶液（0.1ｍＬ）に溶解し、４０ｗｔ％ポリアリルアミン水溶液（0.4ｇ、分子量3,000、日東紡）を加え、室温で撹拌した。滴下後、系内は瞬時に白濁し、ゲルを形成した。
【００６７】
実施例１３：ハイパーブランチグルカン（Ｌ−ロイシンコハク酸イミドエステルカルバメート）とハイパーブランチグルカン（Ｌ−ロイシンエチレンジアミンエステルカルバメート）とのゲル化反応
実施例６で得られたハイパーブランチグルカン（Ｌ−ロイシンコハク酸イミドエステルカルバメート）（0.2ｇ）をｐＨ7.4のリン酸緩衝溶液（１ｍＬ）に、実施例７で得られたハイパーブランチグルカン（Ｌ−ロイシンエチレンジアミンエステルカルバメート）（0.2ｇ）をエタノール（0.4ｍＬ）に各々溶解し、これらの溶液を混合した。２液混合後、系内は瞬時に白濁し、糊状のゲルを形成した。
【００６８】
実施例１４：ハイパーブランチグルカン（Ｌ−アスパラギン酸コハク酸イミドエステルカルバメート）とハイパーブランチグルカン（Ｌ−ロイシンエチレンジアミンエステルカルバメート）の架橋反応を用いたゲルの合成）
実施例７で得られたハイパーブランチグルカン（Ｌ−アスパラギン酸コハク酸イミドエステルカルバメート）をｐＨ7.4のリン酸緩衝溶液に、実施例８で得られたハイパーブランチグルカン（Ｌ−ロイシンエチレンジアミンエステルカルバメート）をエタノールに各々溶解し、これらの溶液を混合した。２液混合後、系内は瞬時に白濁し、糊状のゲルを形成した。
【００６９】
実施例１５：ハイパーブランチグルカンと４，４’−ジイソシアン酸メチレンジフェニルとのゲル化反応
前記特願2002-56901号の実施例１に準じて合成したハイパーブランチグルカン（0.1ｇ）をジメチルスルホキシド（２ｍＬ）に溶解させた後、４，４’−ジイソシアン酸メチレンジフェニル（0.12ｇ）を加え、１００℃で撹拌した。４，４’−ジイソシアン酸メチレンジフェニル投入後、約１分でゲル化し、系内の溶媒をすべて取り込んだ透明な膨潤体を形成した。得られたゲルは薄黄味がかった透明なゼリー状固体であり、ジメチルスルホキシド中で膨潤、水中で収縮した。
【００７０】
実施例１６：ハイパーブランチグルカンと２，４−ジイソシアン酸トリレンとのゲル化反応
実施例１５と同じハイパーブランチグルカン（0.1ｇ）をジメチルスルホキシド（１ｍＬ）に溶解させた後、2,4-ジイソシアン酸トリレン（0.11ｇ）を加え、１００℃で撹拌した。２，４−ジイソシアン酸トリレン投入後、約1分でゲル化し、系内の溶媒をすべて取り込んだ透明な膨潤ゲルを形成した。得られたゲルは薄黄味がかった透明なゼリー状固体であり、ジメチルスルホキシド中で膨潤、水中で収縮した。
【００７１】
実施例１７：ハイパーブランチグルカン（Ｌ−ロイシンエチルエステルカルバメート）と４，４’−ジイソシアン酸メチレンジフェニルとのゲル化反応
実施例1に準じて合成したハイパーブランチグルカン（Ｌ−ロイシンエチルエステルカルバメート）（0.02ｇ、置換度0.8）をジメチルスルホキシド（0.2ｍＬ）に溶解させた後、４，４’−ジイソシアン酸メチレンジフェニル（0.03ｇ）を加え、１００℃で撹拌した。４，４’−ジイソシアン酸メチレンジフェニル投入後、約１分でゲル化し、系内の溶媒をすべて取り込んだ透明な膨潤ゲルを形成した。
【００７２】
実施例１８：ハイパーブランチグルカン（Ｌ−アスパラギン酸エチルエステルカルバメート）と４，４’−ジイソシアン酸メチレンジフェニルとのゲル化反応
実施例２に準じて合成したハイパーブランチグルカン（Ｌ−アスパラギン酸エチルエステルカルバメート）（0.02ｇ、置換度0.6）をジメチルスルホキシド（0.2ｍＬ）に溶解させた後、４，４’−ジイソシアン酸メチレンジフェニル（0.03ｇ）を加え、１００℃で撹拌した。４，４’−ジイソシアン酸メチレンジフェニル投入後、約１分でゲル化し、系内の溶媒をすべて取り込んだ透明な膨潤ゲルを形成した。
【００７３】
実施例１９：ハイパーブランチグルカン（Ｌ−フェニルアラニンエチルエステルカルバメート）と４，４’−ジイソシアン酸メチレンジフェニルとのゲル化反応
実施例３に準じて合成したハイパーブランチグルカン（Ｌ−フェニルアラニンエチルエステルカルバメート）（0.02ｇ、置換度0.7）をジメチルスルホキシド（0.2ｍＬ）に溶解させた後、４，４’−ジイソシアン酸メチレンジフェニル（0.03ｇ）を加え、１００℃で撹拌した。４，４’−ジイソシアン酸メチレンジフェニル投入後、約１分でゲル化し、系内の溶媒をすべて取り込んだ透明な膨潤ゲルを形成した。
【００７４】
【発明の効果】
本発明は、分子形状が球に近く（球状体）分子同士の「絡み合い」が少ない結果として粘性が小さく、また、鎖状分子と比べて分子全体の形状の変化が少ないという特異な性質を有する多分岐多糖の水酸基を反応性の官能基に置換した反応性多分岐多糖を提供したものである。前記球状多糖の表面またはそれに近い層の糖単位に修飾基（前記式（Ｉ）の置換基）を有することから、安定的かつ優れた反応性が得られる。このため、それ自体としては低粘度であるが、適当なゲル形成剤との組み合わせで安定なゲルを迅速に形成することができる。
【図面の簡単な説明】
【図１】実施例１で合成されたハイパーブランチグルカン（Ｌ−ロイシンエチルエステルカルバメート）の¹Ｈ−ＮＭＲスペクトルである。
【図２】実施例２で合成されたハイパーブランチグルカン(Ｌ−アスパラギン酸エチルエステルカルバメート)の¹Ｈ−ＮＭＲスペクトルである。
【図３】実施例３で合成されたハイパーブランチグルカン(Ｌ−フェニルアラニンエチルエステルカルバメート)の¹Ｈ−ＮＭＲスペクトルである。
【図４】実施例４で合成されたハイパーブランチグルカン（L-ロイシンカルバメート）の¹Ｈ−ＮＭＲスペクトルである。
【図５】実施例６で合成されたハイパーブランチグルカン（Ｌ−ロイシンコハク酸イミドエステルカルバメート）の¹Ｈ−ＮＭＲスペクトルである。

Claims

（ａ）多分岐多糖分子中の水酸基の少なくとも一部の水素原子を

〔式中、Ｙは下記式（ＩＶ）：

（式中、Ｒ²は水素原子または炭素数１乃至３０の置換されていてもよい脂肪族炭化水素もしくは芳香族炭化水素を表わす。）で表わされる置換されていてもよいカルバモイル基であり、Ｚは−ＯＲ¹¹または−ＮＨＲ¹²（式中、Ｒ¹¹は水素原子、金属原子、脂肪族炭化水素もしくは芳香族炭化水素または−Ｎ（ＣＯＣＨ₂)₂で表わされるＮ−スクシンイミド基を表わし、Ｒ¹²は１個以上のアミノ基で置換されている脂肪族炭化水素基を表わす。）から選択され、分子中に複数の種類のＹが混在してもよい。〕で置換してなる多分岐多糖誘導体を含む第１液と
（ｂ）（ａ）と反応してゲルを形成する化学種を含む第２液
を含み両者の混合によりゲル化する組成物。
多分岐多糖誘導体（ａ）におけるＺが−ＯＲ¹¹でありＲ¹¹が−Ｎ（ＣＯＣＨ₂)₂であり、化学種（ｂ）がポリアミンである請求項１に記載のゲル化組成物。
多分岐多糖誘導体（ａ）におけるＺが−ＯＲ¹¹でありＲ¹¹が水素原子または金属原子であり、化学種（ｂ）が２価の金属塩である請求項１に記載のゲル化組成物。
多分岐多糖誘導体（ａ）におけるＺが−ＮＨＲ¹²であり、化学種（ｂ）がスクシンイミド基含有ポリマーまたはイソシアナートである請求項１に記載のゲル化組成物。
多分岐多糖誘導体（ａ）の分岐度が0.05〜1.00の範囲である請求項１乃至４のいずれかに記載のゲル化組成物。
多分岐多糖誘導体（ａ）が、Ｄ−グルコース、Ｄ−マンノース、Ｄ−ガラクトース、Ｄ−アロース、Ｄ−アルトロース、Ｄ−イドース、Ｄ−タロース、Ｄ−キシロース、Ｄ−リボースおよびＤ−アラビノースからなる群から選択される１種または複数の単糖類を構成単位として含む請求項１乃至５のいずれかに記載のゲル化組成物。
多分岐多糖誘導体（ａ）において、構成単位当たり平均して0.01〜３個の水素原子が前記式（Ｉ）の置換基で置換されている請求項１乃至６のいずれかに記載のゲル化組成物。
多分岐多糖が無水糖の重合反応によって得られるものである請求項１乃至７のいずれかに記載のゲル化組成物。
多分岐多糖誘導体（ａ）の一部が分岐度が0.05未満であり多分岐多糖誘導体（ａ）と同種の置換基を有する鎖状多糖誘導体で代替されている請求項１乃至８のいずれかに記載のゲル化組成物。
多分岐多糖誘導体が、透過分子量14000以下の透析膜により低分子量の不純物を除去したものである請求項１乃至９のいずれかに記載のゲル化組成物。
ゲルがヒトもしくは動物の任意の組織または人工組織の接着、吻合、閉鎖、閉塞、分離、被覆を含む用途に用いられる請求項１乃至１０のいずれかに記載の医療用ゲル化組成物。
請求項１乃至１０のいずれかに記載のゲル組成物における多分岐多糖誘導体（ａ）とゲル形成化学種（ｂ）とを混合して反応させて得られるゲル。
請求項１に記載の多分岐多糖誘導体（ａ）を含む第１液とゲル形成化学種（ｂ）を含む第２液を同時または異時に適用することによる人工組織の接着、吻合、閉鎖、閉塞、分離または被覆を行なう方法。
請求項１３に記載の方法により医療用ゲル組成物が付与された人工組織。