JP3997538B2 - 赤血球溶血剤、白血球分類用試薬および試薬 - Google Patents
赤血球溶血剤、白血球分類用試薬および試薬 Download PDFInfo
- Publication number
- JP3997538B2 JP3997538B2 JP2002149378A JP2002149378A JP3997538B2 JP 3997538 B2 JP3997538 B2 JP 3997538B2 JP 2002149378 A JP2002149378 A JP 2002149378A JP 2002149378 A JP2002149378 A JP 2002149378A JP 3997538 B2 JP3997538 B2 JP 3997538B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- reagent
- blood
- hemoglobin
- amidosulfuric acid
- erythrocyte
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
Images
Landscapes
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、血液試料中のヘモグロビン量（濃度等）の測定の血液試料中の赤血球を溶血させる溶血剤および白血球を分類するための白血球分類用試薬に関する。
【０００２】
【従来の技術】
従来より、血液中の血球をその粒径によって赤血球、白血球、血小板等に識別して、各血球数を測定するための自動血球計数器が知られている。粒径が近いものがある赤血球と白血球を識別するために、溶血剤を用いて赤血球を溶血させている。赤血球を溶血させるとヘモグロビンが溶出するために白血球数とヘモグロビン濃度の測定が可能となる。
【０００３】
例えば、特公平３−５８０６７号（アメリカ特許第４，３４６，０１８号）では、第４級アンモニウム塩とシアン化合物を含有する試薬が開示されている。第４級アンモニウム塩は赤血球を溶解し白血球ヒストグラムを作成するのに有効な成分であり、シアン化合物はヘモグロビンを安定化させる作用があり安定してヘモグロビン濃度を測定するのに有効な成分であることはよく知られている。
【０００４】
しかし、シアンメトヘモグロビン法で用いられるシアン化合物は、循環器系症状・呼吸器症状等の中毒症状をもたらす毒性の強い毒物である。したがって、シアン化合物を生産および使用する際の取り扱いには十分注意が必要である。また、シアンメトヘモグロビン法による測定後に排出される廃液中のシアン化合物を無害な化合物に分解する必要がある。そのために、取り扱い上の問題や、処理コストの問題があった。さらにシアン化合物であるので長期保存ができない等保存性の問題があった。
【０００５】
この問題を解決するために、シアン化合物を含有しない溶血剤が開発されてきている。
特表平１１−５０７７３３号（アメリカ特許第５，６８６，３０８号）は、血液中の白血球の鑑別式決定のための試薬および方法が開示されている。この試薬はエトキシル化長鎖アミン化合物とｐＨを調整する酸および高張アルカリ安定化試薬を含有しているので、ｐＨが２．０〜３．６に限定され、白血球の膨張を抑制するためのアルカリ安定化試薬を添加して中和しなければならないという制約がある。
【０００６】
特許第２８３６８６５号にもシアン化合物を含有しない試薬が開示されている。
ここでは、血液中の赤血球を溶解し、ヘモグロビンを変成させうる濃度の第四級アンモニウム塩、ヘモグロビン中のヘムを酸化させうる酸化剤等を含有する試薬が開示されている。しかしながら、この試薬では、メトヘモグロビンを安定化する成分を含まないために、試料作成後、ヘモグロビン値が経時的に変化するという問題がある。
【０００７】
【発明が解決しようとする課題】
本発明の目的は、自然環境、人体への影響を有する化学物質の抑制を図ることにより、赤血球溶血剤、白血球分類用試薬の生産、使用における危険性を低減し、効率かつ安全な作業環境を創造することにある。
さらに本発明の目的は、血液試料への試薬添加後、測定中の白血球、ヘモグロビンの経時的変化を抑制し、白血球数の測定、ヘモグロビン濃度の測定を安定かつ再現性よく行うことができ、かつ保存性のよい赤血球溶血剤、白血球分類用試薬を提供することにある。
【０００８】
【課題を解決するための手段】
この目的を達成するために、血液中の赤血球を溶血させ、溶血後のヘモグロビンを安定化する赤血球溶血剤において、第４級アンモニウム塩であるラウリルトリメチルアンモニウムクロライドまたはセチルトリメチルアンモニウムクロライドのうち少なくともいずれか一方と、ヘモグロビン安定化剤であるアミド硫酸とを含むことを特徴とする（請求項１）。
【００１１】
さらに、赤血球溶血剤は、希釈液によりｐＨ１〜７に調整されることを特徴とする（請求項２）。さらに好適には、赤血球溶血剤は、希釈液によりｐＨ２〜４に調整されていることを特徴とする（請求項３）。
【００１２】
さらに、アミド硫酸は、検査血液１μＬに対し、０．０２〜２ｍｇの割合で混合する濃度であることを特徴とする（請求項４）。さらに、好適には、アミド硫酸は、検査血液１μＬに対し、０．１〜１ｍｇの割合で混合する濃度であることを特徴とする（請求項５）。
【００１３】
また、ヘモグロビンを安定化し白血球を分類するための白血球分類用試薬において、第４級アンモニウム塩であるラウリルトリメチルアンモニウムクロライドまたはセチルトリメチルアンモニウムクロライドのうち少なくともいずれか一方と、ヘモグロビン安定化剤であるアミド硫酸とを含むことを特徴とする（請求項６）。
【００１６】
さらに、白血球分類用試薬は、希釈液によりｐＨ５〜９に調整されることを特徴とする（請求項７）。さらに、好適には、白血球分類用試薬は、希釈液によりｐＨ６〜８に調整されることを特徴とする（請求項８）。
【００１７】
さらに、アミド硫酸は、検査血液１μＬに対し、０．０２〜２ｍｇの割合で混合する濃度であることを特徴とする（請求項９）。さらに好適には、アミド硫酸は、検査血液１μＬに対し、０．１〜１ｍｇの割合で混合する濃度であることを特徴とする（請求項１０）。
【００１８】
または、血液中の赤血球を溶血させ、溶血後のヘモグロビンを安定化させるとともに、白血球を分類するための試薬において、第４級アンモニウム塩であるラウリルトリメチルアンモニウムクロライドまたはセチルトリメチルアンモニウムクロライドのうち少なくともいずれか一方と、ヘモグロビン安定化剤であるアミド硫酸とを含むことを特徴とする（請求項１１）。
【００２０】
さらに、その試薬は、希釈液によりｐＨ５〜７に調整されることを特徴とする（請求項１２）。
【００２１】
さらに、その試薬において、アミド硫酸は、検査血液１μＬに対し、０．０２〜２ｍｇの割合で混合する濃度であることを特徴とする（請求項１３）。さらに好適には、アミド硫酸は、検査血液１μＬに対し、０．１〜１ｍｇの割合で混合する濃度であることを特徴とする（請求項１４）。
【００２２】
【発明の実施の形態】
血液を、塩化ナトリウム等により血液と等張であるリン酸緩衝液（希釈液）で希釈し、アミド硫酸を含有する試薬Ａ〜Ｌとアミド硫酸を含有しない比較例１それぞれに添加した場合の希釈血液に試薬を混合した後の試薬各成分の検査血液（希釈前血液）１μＬに対する重量とヘモグロビン吸光変化率の実験データを示す。
なお、実験は、血液希釈液に試薬を添加して２０秒から１３０秒まで１０秒おきに吸光度を計測した。ヘモグロビン吸光度変化率は、添加２０秒後の吸光度を基準としている。ヘモグロビン吸光度を計測するために使用した波長は、５４０ｎｍと５５５ｎｍである。
また、ラウリルトリメチルアンモニウムクロライドとセチルトリメチルアンモニウムクロライドはいずれも第４級アンモニウム塩である。
【００２３】
また、血液をリン酸緩衝液で希釈し、それをアミド硫酸を含有する試薬Ａ〜Ｊ（成分は表示されている）それぞれに添加し、インピーダンス法により測定した血球サイズによる白血球ヒストグラムの形で得た実験データを図１に示す。
【００２４】
なお、リン酸水素二ナトリウム、トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタンは試薬のｐＨを調整するために添加したものである。このリン酸水素二ナトリウム、トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタンの添加量を変えることにより、リン酸緩衝液による希釈、試薬添加後のｐＨの値を種々に変え、ｐＨ値に対するヘモグロビン吸光度変化率および白血球分類度合いを検討する。
【００２５】
【表１】
【００２６】
【表２】
【００２７】
【表３】
【００２８】
【表４】
【００２９】
【表５】
【００３０】
【表６】
【００３１】
【表７】
【００３２】
【表８】
【００３３】
【表９】
【００３４】
【表１０】
【００３５】
【表１１】
【００３６】
【表１２】
【００３７】
【表１３】
【００３８】
血液中のヘモグロビン濃度を測定するにあたり、計測誤差を最小限にするためには、血液希釈液に溶血剤を添加した後に測定されるヘモグロビン吸光度の時間経過による変化が最小限であることが必要である。そして、ヘモグロビン吸光度の時間経過による変化は、溶血剤添加後約１３０秒の間で、約±１．０％の範囲であることが望ましい。
【００３９】
この点、第４級アンモニウム塩は含まれているがアミド硫酸が含まれていない溶血剤である比較例１の結果は、溶血剤添加後１３０秒の間でのヘモグロビン吸光度は±１．０％を越えている。一方、第４級アンモニウム塩とアミド硫酸の双方が含まれている試薬Ａ，Ｂ，Ｋ，Ｌでは、吸光度変化は約±１．０％の範囲であり、良好な結果が得られていることがわかる。
【００４０】
本願発明者はこのように多くの実験を行った結果、ヘモグロビン吸光度の時間経過による変化が少ない結果が得られる適切な成分のアミド硫酸の濃度範囲は０．１〜１０．０重量％である。これは、検査血液１μＬに対し、アミド硫酸０．０２〜２ｍｇの割合で混合することになる。
さらに、より好適には、アミド硫酸の濃度範囲は、０．５〜５．０重量％である。これは、検査血液１μＬに対し、アミド硫酸０．１〜１ｍｇの割合で混合することになる。
このような溶血剤を、塩化ナトリウム等により血液に等張な希釈液であるリン酸緩衝液ないしトリス緩衝液により血液を希釈した血液希釈液に添加すれば安定したヘモグロビン濃度測定を行うことができるのである。
このとき、リン酸緩衝液希釈後ｐＨは、１〜７が適切な範囲であり、より好適にはｐＨ２〜４が望ましい。
【００４１】
各血球サイズによる白血球ヒストグラムにおいて、横軸の血球サイズに対して縦軸の分布度数が広く分布している程、白血球の分類が詳細にできることになる。
そこで、図１の白血球ヒストグラムＡ，Ｂを見れば、横軸の血球サイズが小さく狭い範囲に分布しており、白血球分類が困難である。白血球ヒストグラムＪにおいても、若干分布が小体積側へシフトしており、正確な分類値を求めることができない。
【００４２】
本願発明者はこのようにして多くの実験を行った結果、白血球ヒストグラム上、分布度数が白血球分類のために適度に分布するのは、ｐＨが５〜９が適切な範囲であり、より好適にはｐＨ６〜８が望ましい。
【００４３】
さらには、以上から、アミド硫酸と第４級アンモニウム塩（ラウリルトリメチルアンモニウムクロライド、セチルトリメチルアンモニウムクロライド）を含有する赤血球溶血剤は、ｐＨ５〜７、アミド硫酸の濃度を０．１〜１０重量％が適切であり、好適には０．５〜５．０重量％の範囲で適切に調整することにより、リンパ球、単球、顆粒球に分類でき、白血球分類用試薬としても適切な試薬となることがわかる。これは結果として、検査血液１μＬに対し、それぞれ、アミド硫酸０．０２〜２ｍｇ、より好適には０．１〜１ｍｇの割合で混合することになる。
【００４４】
なお、検査血液は、先にリン酸緩衝液と混合し次に赤血球溶血剤と混合するようにしてもよい。結果として検査血液は適切なｐＨ範囲に調整されることになる。あるいは検査血液を、リン酸緩衝液により予め希釈された赤血球溶血剤に混合するようにしてもよい。予め希釈された赤血球溶血剤であれば、その状態でｐＨが調整されていることになる。
【００４５】
【発明の効果】
以上、詳述したように本発明に係る赤血球溶血剤によれば、赤血球から溶出したヘモグロビンを安定化させ、ヘモグロビン量（濃度等）を測定することができる。また、本発明に係る白血球分類用試薬は、白血球ヒストグラム上白血球を分類できるように可能ならしめるものである。
【図面の簡単な説明】
【図１】本発明の実施の形態の試薬Ａ〜Ｊによる白血球分類の実験データを示す図。
【発明の属する技術分野】
本発明は、血液試料中のヘモグロビン量（濃度等）の測定の血液試料中の赤血球を溶血させる溶血剤および白血球を分類するための白血球分類用試薬に関する。
【０００２】
【従来の技術】
従来より、血液中の血球をその粒径によって赤血球、白血球、血小板等に識別して、各血球数を測定するための自動血球計数器が知られている。粒径が近いものがある赤血球と白血球を識別するために、溶血剤を用いて赤血球を溶血させている。赤血球を溶血させるとヘモグロビンが溶出するために白血球数とヘモグロビン濃度の測定が可能となる。
【０００３】
例えば、特公平３−５８０６７号（アメリカ特許第４，３４６，０１８号）では、第４級アンモニウム塩とシアン化合物を含有する試薬が開示されている。第４級アンモニウム塩は赤血球を溶解し白血球ヒストグラムを作成するのに有効な成分であり、シアン化合物はヘモグロビンを安定化させる作用があり安定してヘモグロビン濃度を測定するのに有効な成分であることはよく知られている。
【０００４】
しかし、シアンメトヘモグロビン法で用いられるシアン化合物は、循環器系症状・呼吸器症状等の中毒症状をもたらす毒性の強い毒物である。したがって、シアン化合物を生産および使用する際の取り扱いには十分注意が必要である。また、シアンメトヘモグロビン法による測定後に排出される廃液中のシアン化合物を無害な化合物に分解する必要がある。そのために、取り扱い上の問題や、処理コストの問題があった。さらにシアン化合物であるので長期保存ができない等保存性の問題があった。
【０００５】
この問題を解決するために、シアン化合物を含有しない溶血剤が開発されてきている。
特表平１１−５０７７３３号（アメリカ特許第５，６８６，３０８号）は、血液中の白血球の鑑別式決定のための試薬および方法が開示されている。この試薬はエトキシル化長鎖アミン化合物とｐＨを調整する酸および高張アルカリ安定化試薬を含有しているので、ｐＨが２．０〜３．６に限定され、白血球の膨張を抑制するためのアルカリ安定化試薬を添加して中和しなければならないという制約がある。
【０００６】
特許第２８３６８６５号にもシアン化合物を含有しない試薬が開示されている。
ここでは、血液中の赤血球を溶解し、ヘモグロビンを変成させうる濃度の第四級アンモニウム塩、ヘモグロビン中のヘムを酸化させうる酸化剤等を含有する試薬が開示されている。しかしながら、この試薬では、メトヘモグロビンを安定化する成分を含まないために、試料作成後、ヘモグロビン値が経時的に変化するという問題がある。
【０００７】
【発明が解決しようとする課題】
本発明の目的は、自然環境、人体への影響を有する化学物質の抑制を図ることにより、赤血球溶血剤、白血球分類用試薬の生産、使用における危険性を低減し、効率かつ安全な作業環境を創造することにある。
さらに本発明の目的は、血液試料への試薬添加後、測定中の白血球、ヘモグロビンの経時的変化を抑制し、白血球数の測定、ヘモグロビン濃度の測定を安定かつ再現性よく行うことができ、かつ保存性のよい赤血球溶血剤、白血球分類用試薬を提供することにある。
【０００８】
【課題を解決するための手段】
この目的を達成するために、血液中の赤血球を溶血させ、溶血後のヘモグロビンを安定化する赤血球溶血剤において、第４級アンモニウム塩であるラウリルトリメチルアンモニウムクロライドまたはセチルトリメチルアンモニウムクロライドのうち少なくともいずれか一方と、ヘモグロビン安定化剤であるアミド硫酸とを含むことを特徴とする（請求項１）。
【００１１】
さらに、赤血球溶血剤は、希釈液によりｐＨ１〜７に調整されることを特徴とする（請求項２）。さらに好適には、赤血球溶血剤は、希釈液によりｐＨ２〜４に調整されていることを特徴とする（請求項３）。
【００１２】
さらに、アミド硫酸は、検査血液１μＬに対し、０．０２〜２ｍｇの割合で混合する濃度であることを特徴とする（請求項４）。さらに、好適には、アミド硫酸は、検査血液１μＬに対し、０．１〜１ｍｇの割合で混合する濃度であることを特徴とする（請求項５）。
【００１３】
また、ヘモグロビンを安定化し白血球を分類するための白血球分類用試薬において、第４級アンモニウム塩であるラウリルトリメチルアンモニウムクロライドまたはセチルトリメチルアンモニウムクロライドのうち少なくともいずれか一方と、ヘモグロビン安定化剤であるアミド硫酸とを含むことを特徴とする（請求項６）。
【００１６】
さらに、白血球分類用試薬は、希釈液によりｐＨ５〜９に調整されることを特徴とする（請求項７）。さらに、好適には、白血球分類用試薬は、希釈液によりｐＨ６〜８に調整されることを特徴とする（請求項８）。
【００１７】
さらに、アミド硫酸は、検査血液１μＬに対し、０．０２〜２ｍｇの割合で混合する濃度であることを特徴とする（請求項９）。さらに好適には、アミド硫酸は、検査血液１μＬに対し、０．１〜１ｍｇの割合で混合する濃度であることを特徴とする（請求項１０）。
【００１８】
または、血液中の赤血球を溶血させ、溶血後のヘモグロビンを安定化させるとともに、白血球を分類するための試薬において、第４級アンモニウム塩であるラウリルトリメチルアンモニウムクロライドまたはセチルトリメチルアンモニウムクロライドのうち少なくともいずれか一方と、ヘモグロビン安定化剤であるアミド硫酸とを含むことを特徴とする（請求項１１）。
【００２０】
さらに、その試薬は、希釈液によりｐＨ５〜７に調整されることを特徴とする（請求項１２）。
【００２１】
さらに、その試薬において、アミド硫酸は、検査血液１μＬに対し、０．０２〜２ｍｇの割合で混合する濃度であることを特徴とする（請求項１３）。さらに好適には、アミド硫酸は、検査血液１μＬに対し、０．１〜１ｍｇの割合で混合する濃度であることを特徴とする（請求項１４）。
【００２２】
【発明の実施の形態】
血液を、塩化ナトリウム等により血液と等張であるリン酸緩衝液（希釈液）で希釈し、アミド硫酸を含有する試薬Ａ〜Ｌとアミド硫酸を含有しない比較例１それぞれに添加した場合の希釈血液に試薬を混合した後の試薬各成分の検査血液（希釈前血液）１μＬに対する重量とヘモグロビン吸光変化率の実験データを示す。
なお、実験は、血液希釈液に試薬を添加して２０秒から１３０秒まで１０秒おきに吸光度を計測した。ヘモグロビン吸光度変化率は、添加２０秒後の吸光度を基準としている。ヘモグロビン吸光度を計測するために使用した波長は、５４０ｎｍと５５５ｎｍである。
また、ラウリルトリメチルアンモニウムクロライドとセチルトリメチルアンモニウムクロライドはいずれも第４級アンモニウム塩である。
【００２３】
また、血液をリン酸緩衝液で希釈し、それをアミド硫酸を含有する試薬Ａ〜Ｊ（成分は表示されている）それぞれに添加し、インピーダンス法により測定した血球サイズによる白血球ヒストグラムの形で得た実験データを図１に示す。
【００２４】
なお、リン酸水素二ナトリウム、トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタンは試薬のｐＨを調整するために添加したものである。このリン酸水素二ナトリウム、トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタンの添加量を変えることにより、リン酸緩衝液による希釈、試薬添加後のｐＨの値を種々に変え、ｐＨ値に対するヘモグロビン吸光度変化率および白血球分類度合いを検討する。
【００２５】
【表１】
【表２】
【表３】
【表４】
【表５】
【表６】
【表７】
【表８】
【表９】
【表１０】
【表１１】
【表１２】
【表１３】
血液中のヘモグロビン濃度を測定するにあたり、計測誤差を最小限にするためには、血液希釈液に溶血剤を添加した後に測定されるヘモグロビン吸光度の時間経過による変化が最小限であることが必要である。そして、ヘモグロビン吸光度の時間経過による変化は、溶血剤添加後約１３０秒の間で、約±１．０％の範囲であることが望ましい。
【００３９】
この点、第４級アンモニウム塩は含まれているがアミド硫酸が含まれていない溶血剤である比較例１の結果は、溶血剤添加後１３０秒の間でのヘモグロビン吸光度は±１．０％を越えている。一方、第４級アンモニウム塩とアミド硫酸の双方が含まれている試薬Ａ，Ｂ，Ｋ，Ｌでは、吸光度変化は約±１．０％の範囲であり、良好な結果が得られていることがわかる。
【００４０】
本願発明者はこのように多くの実験を行った結果、ヘモグロビン吸光度の時間経過による変化が少ない結果が得られる適切な成分のアミド硫酸の濃度範囲は０．１〜１０．０重量％である。これは、検査血液１μＬに対し、アミド硫酸０．０２〜２ｍｇの割合で混合することになる。
さらに、より好適には、アミド硫酸の濃度範囲は、０．５〜５．０重量％である。これは、検査血液１μＬに対し、アミド硫酸０．１〜１ｍｇの割合で混合することになる。
このような溶血剤を、塩化ナトリウム等により血液に等張な希釈液であるリン酸緩衝液ないしトリス緩衝液により血液を希釈した血液希釈液に添加すれば安定したヘモグロビン濃度測定を行うことができるのである。
このとき、リン酸緩衝液希釈後ｐＨは、１〜７が適切な範囲であり、より好適にはｐＨ２〜４が望ましい。
【００４１】
各血球サイズによる白血球ヒストグラムにおいて、横軸の血球サイズに対して縦軸の分布度数が広く分布している程、白血球の分類が詳細にできることになる。
そこで、図１の白血球ヒストグラムＡ，Ｂを見れば、横軸の血球サイズが小さく狭い範囲に分布しており、白血球分類が困難である。白血球ヒストグラムＪにおいても、若干分布が小体積側へシフトしており、正確な分類値を求めることができない。
【００４２】
本願発明者はこのようにして多くの実験を行った結果、白血球ヒストグラム上、分布度数が白血球分類のために適度に分布するのは、ｐＨが５〜９が適切な範囲であり、より好適にはｐＨ６〜８が望ましい。
【００４３】
さらには、以上から、アミド硫酸と第４級アンモニウム塩（ラウリルトリメチルアンモニウムクロライド、セチルトリメチルアンモニウムクロライド）を含有する赤血球溶血剤は、ｐＨ５〜７、アミド硫酸の濃度を０．１〜１０重量％が適切であり、好適には０．５〜５．０重量％の範囲で適切に調整することにより、リンパ球、単球、顆粒球に分類でき、白血球分類用試薬としても適切な試薬となることがわかる。これは結果として、検査血液１μＬに対し、それぞれ、アミド硫酸０．０２〜２ｍｇ、より好適には０．１〜１ｍｇの割合で混合することになる。
【００４４】
なお、検査血液は、先にリン酸緩衝液と混合し次に赤血球溶血剤と混合するようにしてもよい。結果として検査血液は適切なｐＨ範囲に調整されることになる。あるいは検査血液を、リン酸緩衝液により予め希釈された赤血球溶血剤に混合するようにしてもよい。予め希釈された赤血球溶血剤であれば、その状態でｐＨが調整されていることになる。
【００４５】
【発明の効果】
以上、詳述したように本発明に係る赤血球溶血剤によれば、赤血球から溶出したヘモグロビンを安定化させ、ヘモグロビン量（濃度等）を測定することができる。また、本発明に係る白血球分類用試薬は、白血球ヒストグラム上白血球を分類できるように可能ならしめるものである。
【図面の簡単な説明】
【図１】本発明の実施の形態の試薬Ａ〜Ｊによる白血球分類の実験データを示す図。
Claims (14)
- 血液中の赤血球を溶血させ、溶血後のヘモグロビンを安定化する赤血球溶血剤において、
第４級アンモニウム塩であるラウリルトリメチルアンモニウムクロライドまたはセチルトリメチルアンモニウムクロライドのうち少なくともいずれか一方と、ヘモグロビン安定化剤であるアミド硫酸とを含むことを特徴とする赤血球溶血剤。 - 請求項１に記載の赤血球溶血剤において、
赤血球溶血剤は、希釈液によりｐＨ１〜７に調整されることを特徴とする赤血球溶血剤。 - 請求項１または請求項２のうちいずれか１つに記載の赤血球溶血剤において、
赤血球溶血剤は、希釈液によりｐＨ２〜４に調整されることを特徴とする赤血球溶血剤。 - 請求項１乃至請求項３のうちいずれか１つに記載の赤血球溶血剤において、
前記アミド硫酸は、検査血液１μＬに対し、０．０２〜２ｍｇの割合で混合する濃度であることを特徴とする赤血球溶血剤。 - 請求項１乃至請求項４のうちいずれか１つに記載の赤血球溶血剤において、
前記アミド硫酸は、検査血液１μＬに対し、０．１〜１ｍｇの割合で混合する濃度であることを特徴とする赤血球溶血剤。 - ヘモグロビンを安定化し白血球を分類するための白血球分類用試薬において、
第４級アンモニウム塩であるラウリルトリメチルアンモニウムクロライドまたはセチルトリメチルアンモニウムクロライドのうち少なくともいずれか一方と、ヘモグロビン安定化剤であるアミド硫酸とを含むことを特徴とする白血球分類用試薬。 - 請求項６に記載の白血球分類用試薬において、
白血球分類用試薬は、希釈液によりｐＨ５〜９に調整されることを特徴とする白血球分類用試薬。 - 請求項６または請求項７のうちいずれか１つに記載の白血球分類用試薬において、
白血球分類用試薬は、希釈液によりｐＨ６〜８に調整されることを特徴とする白血球分類用試薬。 - 請求項６乃至請求項８のうちいずれか１つに記載の白血球分類用試薬において、
前記アミド硫酸は、検査血液１μＬに対し、０．０２〜２ｍｇの割合で混合する濃度であることを特徴とする白血球分類用試薬。 - 請求項６乃至請求項９のうちいずれか１つに記載の白血球分類用試薬において、
前記アミド硫酸は、検査血液１μＬに対し、０．１〜１ｍｇの割合で混合する濃度であることを特徴とする白血球分類用試薬。 - 血液中の赤血球を溶血させ、溶血後のヘモグロビンを安定化させるとともに、白血球を分類するための試薬において、
第４級アンモニウム塩であるラウリルトリメチルアンモニウムクロライドまたはセチルトリメチルアンモニウムクロライドのうち少なくともいずれか一方と、ヘモグロビン安定化剤であるアミド硫酸とを含むことを特徴とする試薬。 - 請求項１１に記載の試薬において、
前記試薬は、希釈液によりｐＨ５〜７に調整されることを特徴とする試薬。 - 請求項１１または請求項１２のうちいずれか１つに記載の試薬において、
前記アミド硫酸は、検査血液１μＬに対し、０．０２〜２ｍｇの割合で混合する濃度であることを特徴とする試薬。 - 請求項１１乃至請求項１３のうちいずれか１つに記載の試薬において、
前記アミド硫酸は、検査血液１μＬに対し、０．１〜１ｍｇの割合で混合する濃度であることを特徴とする試薬。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2002149378A JP3997538B2 (ja) | 2002-05-23 | 2002-05-23 | 赤血球溶血剤、白血球分類用試薬および試薬 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2002149378A JP3997538B2 (ja) | 2002-05-23 | 2002-05-23 | 赤血球溶血剤、白血球分類用試薬および試薬 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2003344387A JP2003344387A (ja) | 2003-12-03 |
| JP3997538B2 true JP3997538B2 (ja) | 2007-10-24 |
Family
ID=29767570
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2002149378A Expired - Fee Related JP3997538B2 (ja) | 2002-05-23 | 2002-05-23 | 赤血球溶血剤、白血球分類用試薬および試薬 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP3997538B2 (ja) |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US9090931B2 (en) * | 2010-08-11 | 2015-07-28 | Kyowa Medex Co., Ltd | Method for measuring glycated hemoglobin |
| CN108132343B (zh) * | 2017-12-12 | 2020-04-07 | 山东兰桥医学科技有限公司 | 一种白细胞四分群分析用溶血剂 |
-
2002
- 2002-05-23 JP JP2002149378A patent/JP3997538B2/ja not_active Expired - Fee Related
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP2003344387A (ja) | 2003-12-03 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US4346018A (en) | Multi-purpose blood diluent and lysing agent for differential determination of lymphoid-myeloid population of leukocytes | |
| JP4263247B2 (ja) | ヘモグロビン及び細胞分析のためのシアン化物不含溶解試薬組成物及び方法 | |
| US4521518A (en) | Multi-purpose blood diluent and lysing agent for differential determination of lymphoid-myeloid population of leukocytes | |
| US5882934A (en) | Composition and method for hemoglobin and cell analysis | |
| JP4153162B2 (ja) | 血液希釈剤 | |
| WO1998032016A9 (en) | A cyanide-free lytic reagent composition and method for hemoglobin and cell analysis | |
| EP1877802B1 (en) | Cyanide-free lytic reagent composition and method of use for hemoglobin and white blood cell measurement | |
| US4962038A (en) | Multi-purpose blood diluent and lysing agent for differential determination of lymphoid-myeloid population of leukocytes | |
| AU2005297497B2 (en) | Lysing reagent for simultaneous enumeration of different types of blood cells in a blood sample | |
| JP3830613B2 (ja) | 血液中の白血球及びヘモグロビン濃度測定試薬 | |
| US6632676B1 (en) | Multi-purpose reagent system and method for enumeration of red blood cells, white blood cells and thrombocytes and differential determination of white blood cells | |
| US20040241769A1 (en) | Multi-purpose reagent system and method for enumeration of red blood cells, white blood cells and thrombocytes and differential determination of white blood cells | |
| WO2003012426A1 (en) | Lytic reagent composition for determination of nucleated red blood cells | |
| JP3997538B2 (ja) | 赤血球溶血剤、白血球分類用試薬および試薬 | |
| JP3997539B2 (ja) | 赤血球溶血剤、白血球分類用試薬および試薬 | |
| US6890756B2 (en) | Method of using cyanide-free lyse solution to emulate a cyanide-containing lyse solution in the measurement of hemoglobin | |
| JP4391489B2 (ja) | 血液中のヘモグロビン濃度測定方法 | |
| CN111006990A (zh) | 血细胞分析用试剂及其应用 | |
| CN110954489A (zh) | 一种无氰溶血剂及其应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20041025 |
|
| A977 | Report on retrieval |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A971007 Effective date: 20060421 |
|
| A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20060509 |
|
| A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20060707 |
|
| TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
| A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20070703 |
|
| A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20070727 |
|
| R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 3997538 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20100817 Year of fee payment: 3 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20100817 Year of fee payment: 3 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20110817 Year of fee payment: 4 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20120817 Year of fee payment: 5 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20120817 Year of fee payment: 5 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20130817 Year of fee payment: 6 |
|
| LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |