JP3980734B2 - 抗男性ホルモン剤原料及び組成物 - Google Patents
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Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、抗男性ホルモン剤原料及び組成物に関し、その目的は、良性前立腺過形成の治療や、脱毛症、にきびの予防及び治療に有効に用いることができ、しかも安全性の高い抗男性ホルモン剤原料及び組成物を提供することにある。
【０００２】
【従来の技術】
男性に特有の病気である良性前立腺過形成、脱毛症やにきびが、男性ホルモンであるテストステロンの作用に関与していることは従来より知られている。即ち、テストステロンは生体内で、還元酵素であるテストステロン５α−リダクターゼにより還元され、活性型男性ホルモンであるジヒドロテストステロン（以下、ＤＨＴと称す）となるが、このＤＨＴが良性前立腺過形成を強く刺激する作用、毛母細胞への栄養供給を阻害して脱毛を促進する作用、にきびを発生させる作用を有している。
【０００３】
これらの見地から、テストステロンをＤＨＴに代謝する還元酵素であるテストステロン５α−リダクターゼの活性を阻害することにより、良性前立腺過形成の治療、また脱毛症やにきびの予防及び治療が可能であると考えられている。尚、上記した良性前立腺過形成とは、前立腺の中葉の成長のことであり、これにより尿道が圧迫され塞ぎはじめる。良性前立腺過形成の治療としては、前立腺の全部または一部の外科的切除が最も有効とされており、また、最近では、テストステロン５α−リダクターゼの活性阻害物質が良性前立腺過形成の治療に導入されている。
【０００４】
上記したテストステロン５α−リダクターゼの活性阻害物質としては、従来より２−メチル−５−イソプロペニルシクロヘキセン−３−オン（以下、１−カルボンと称す）が一般に用いられている。
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】
しかしながら、上記した１−カルボンは、その含有率が低いとき、テストステロン５α−リダクターゼの活性を阻害する効果が著しく低下するという問題点が存在する。一方、１−カルボンの含有率を高くすると、その効果は高くなるが、１−カルボン特有の香りが強くなりすぎ、また、粘稠性があるため、化粧品等に添加すると、その使用感が悪くなるという問題点が生じ、１−カルボンの使用量を多量とすることも、少量とすることもいずれも好ましくなかった。
【０００６】
そこで、低含有率でも優れたテストステロン５α−リダクターゼ活性阻害効果を発揮する抗男性ホルモン剤原料及び組成物の創出が望まれており、本発明者らは既に、特願平８−１８８１４０号において、レモングラス（Cymbopogon flexuous (D.C.) Staps）の精油またはエキスが優れたテストステロン５α−リダクターゼ活性阻害効果を有することを、また、特願平９−１９５０６３号において、シトラール及びゲラニウム酸が優れたテストステロン５α−リダクターゼ活性阻害効果を有することを提案している。
【０００７】
上記レモングラス（Cymbopogon flexuous (D.C.) Staps）の精油またはエキス、シトラール、ゲラニウム酸はいずれも、従来よりテストステロン５α−リダクターゼの活性阻害物質として使用されている１−カルボンに比べて、テストステロン５α−リダクターゼの活性阻害効果が大きく、また、低含有率でもテストステロン５α−リダクターゼ活性阻害効果の低下が小さいという優れたものであるが、本発明者らは、テストステロン５α−リダクターゼの活性阻害物質に関する鋭意研究を更に続けたところ、ドロセラ ラメンタセア（Drosera ramentacea）或いはドロセラ ロツンディフォリア（Drosera rotundifolia）の抽出物もまた、テストステロン５α−リダクターゼの活性阻害効果が大きく、低含有率では、レモングラス（Cymbopogon flexuous (D.C.) Staps）の精油またはエキス、シトラール、ゲラニウム酸よりも更に優れたテストステロン５α−リダクターゼの活性阻害効果を発揮することを見出した。
【０００８】
【課題を解決するための手段】
即ち、請求項１に係る発明は、ドロセラ ラメンタセア（Drosera ramentacea）及び／又はドロセラ ロツンディフォリア（Drosera rotundifolia）の抽出物からなることを特徴とする抗男性ホルモン剤原料に関し、また請求項２に係る発明は、請求項１に記載の抗男性ホルモン剤原料が含有されてなる育毛剤であることを特徴とする抗男性ホルモン剤組成物に関する。
【０００９】
【発明の実施の形態】
上述した如く、本発明者らは、ドロセラ ラメンタセア（Drosera ramentacea）或いはドロセラ ロツンディフォリア（Drosera rotundifolia）の抽出物が、テストステロン５α−リダクターゼの活性阻害能を有することを見出し、本発明を完成するに至った。即ち、本発明においては、これらの植物の抽出物を抗男性ホルモン剤原料とする。
【００１０】
本発明において用いられるドロセラ ラメンタセア（Drosera ramentacea）及びドロセラ ロツンディフォリア（Drosera rotundifolia）はモウセンゴケ属に属する多年草で、日あたりのよい湿地に群生する食虫植物である。
【００１１】
本発明においては、上記したドロセラ ラメンタセア（Drosera ramentacea）或いはドロセラ ロツンディフォリア（Drosera rotundifolia）の地上部、地下部など、全部位が使用可能で、全草を使用しても、あるいは葉部、茎部、花部等を使用してもよい。
【００１２】
抽出物を得る際に使用する溶媒としては、水の他に、極性溶媒として、メタノール、エタノール、イソプロピルアルコール、ｎ−プロピルアルコール、イソブタノール、ｎ−ヘキサノール、メチルアミルアルコール、２−エチルブタノール、ｎ−オクタノール等の炭素数１〜８の一価アルコール、エチレングリコール、プロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール、ヘキシレングリコール、エチレングリコールモノメチルエーテル、エチレングリコールモノエチルエーテル、プロピレングリコールモノメチルエーテル、プロピレングリコールモノエチルエーテル等の炭素数２〜６の多価アルコール或いはその誘導体、アセトン、メチルアセトン、エチルメチルケトン、イソブチルメチルケトン、メチル−ｎ−プロピルケトン等の炭素数３〜６のケトン、エチルエーテル、イソプロピルエーテル、ｎ−ブチルエーテル等の炭素数４〜８のエーテル等を例示することができる。また、非極性有機溶媒としては、石油エーテル、或いはｎ−ブタン、ｎ−ペンタン、ｎ−ヘキサン、ｎ−オクタン等の炭素数４〜８の脂肪族炭化水素、四塩化炭素、クロロホルム、ジクロロエタン、トリクロロエチレン等の炭素数１〜２の脂肪族炭化水素のハロゲン化物、ベンゼン、トルエン等の炭素数６〜７の芳香族炭化水素等を例示することができる。尚、上記した有機溶媒の中でも、特にエタノールが好ましく用いられる。また、抽出方法は特に限定されない。
【００１３】
本発明においては、上記ドロセラ ラメンタセア（Drosera ramentacea）或いはドロセラ ロツンディフォリア（Drosera rotundifolia）の抽出物のうち１種を単独で用いることも、或いは２種以上を混合して用いることも可能である。
【００１４】
抗男性ホルモン剤原料として上記した植物の抽出物を用い、抗男性ホルモン剤組成物を製造する場合、抽出物の配合量は特に限定されないが、抽出に用いた植物の乾燥固形分として、全組成物中０．０１〜１０重量％とするのが好ましい。０．０１重量％未満では抽出物配合による効果が十分発揮されず、また１０重量％を超えてもそれ以上の効果は期待できず、いずれの場合も好ましくないからである。
【００１５】
【化１】
【化２】
【００１６】
尚、５−ヒドロキシ−２−メチル−１，４−ナフトキノン（化式１）及び５−ヒドロキシ−７−メチル−１，４−ナフトキノン（化式２）は、上記ドロセラ ラメンタセア（Drosera ramentacea）の抽出物中の活性成分であり、この２種の１，４−ナフトキノン誘導体を含め、２−メチル−１，４−ナフトキノンなど、メチル基を有する１，４−ナフトキノン誘導体は、テストステロン５α−リダクターゼの活性阻害能が極めて高い。
【００１７】
上記した１，４−ナフトキノンの誘導体を用いて抗男性ホルモン剤組成物を製造する場合、１，４−ナフトキノンの誘導体の配合量は特に限定されないが、全組成物中０．０００１〜５重量％とするのが好ましい。０．０００１重量％未満では抽出物配合による効果が十分発揮されず、また５重量％を超えてもそれ以上の効果は期待できず、いずれの場合も好ましくないからである。
【００１８】
上記ドロセラ ラメンタセア（Drosera ramentacea）或いはドロセラ ロツンディフォリア（Drosera rotundifolia）の抽出物が抗男性ホルモン剤原料として含有されてなる抗男性ホルモン剤組成物は化粧品、医薬部外品あるいは医薬品として用いることができる。例えば、育毛・養毛を目的とするヘアトニック、ヘアクリーム、ヘアトリートメント等の化粧品、にきびの予防、しみ、そばかすの緩和等特定の使用目的を有した化粧用クリーム、乳液等の化粧品或いは薬用化粧品（医薬部外品）、更には、にきびや良性前立腺過形成の治療を目的とした医薬品として用いることができる。医薬品として使用する場合には、１ｍｇ〜１０００ｍｇ／日を２〜３回に分けて施用すればよい。
【００１９】
本発明に係る抗男性ホルモン剤組成物には、上記抗男性ホルモン剤原料以外に、以下のような物質が適宜配合される。例えば、育毛・養毛成分として、ビタミンＥ及びその誘導体、センブリエキス、ニンニクエキス、セファランチン、塩化カルプロニウム、アセチルコリン等の血行促進剤、トウガラシチンキ、カンタリスチンキ、ショウキョウチンキ、ノニル酸バニルアミド等の局所刺激剤、サリチル酸、レゾルシン、乳酸などの角質溶解剤、プラセンタエキス、ペンタデカン酸グリセリド、パントテニルエチルエーテル、ビオチン、ヒノキチオール、アラントイン等の代謝賦活剤、グリチルリチン酸、グリチルレチン酸等の消炎剤、イソプロピルメチルフェノール、トリクロサン、ジンクピリチオン、ヒノキチオール等の殺菌剤、メントール、カンフル等の清涼剤、その他女性ホルモン等が適宜配合される。また、アスコルビン酸やその誘導体、イオウ製剤、グルタチオン等の美白剤、或いは保湿剤、紫外線吸収剤、ビタミン類等、通常使用されている公知の添加剤を適宜配合することもできる。
【００２０】
更に、本発明の効果を損なわない範囲で、アルコ−ル、多価アルコール、水溶性高分子、酸化防止剤、ｐＨ調整剤、紫外線防止剤、金属イオン封鎖剤、増粘剤、界面活性剤、精製水、香料、防腐剤、抗菌剤、油剤、高級脂肪酸、脂肪酸エステル、保湿剤、清涼剤、色素等の通常の化粧品成分、或いはホルモン類、ビタミン類、アミノ酸類、収れん剤及び胎盤抽出物、エラスチン、コラーゲン、ムコ多糖、アロエ抽出物、ヘチマ水、ローヤルゼリー、バーチ、ニンジンエキス、カモミラエキス、甘草エキス、サルビアエキス、アルテアエキス、セイヨウノコギリソウエキス等の生薬成分をはじめとする動植物抽出成分等特殊配合成分を、目的に応じて適宜任意に配合してもよい。
【００２１】
本発明において用いられるドロセラ ラメンタセア（Drosera ramentacea）或いはドロセラ ロツンディフォリア（Drosera rotundifolia）の抽出物は天然物であるため安全性が高く、また、１，４−ナフトキノンの誘導体も安全性の高い物質である。以下、１，４−ナフトキノンの誘導体の安全性について、試験結果に基づいて説明する。
【００２２】
毒性試験として、マウスを用いて、１，４−ナフトキノンの誘導体の５０％致死量（ＬＤ50）を調べた。結果を表１に示す。
【表１】
【００２３】
上記試験結果から、１，４−ナフトキノンの誘導体は安全性の高い物質であると言える。
【００２４】
【実施例】
以下、本発明を実施例及び比較例に基づき詳細に説明する。但し、本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。
〔試験例１〕
まず、ドロセラ ラメンタセア（Drosera ramentacea）或いはドロセラ ロツンディフォリア（Drosera rotundifolia）の抽出物の、テストステロン５α−リダクターゼ活性阻害率を調べた。
（実施例１）
ドロセラ ラメンタセア（Drosera ramentacea）の全草１００ｇにエタノール４０００ｍｌを加えて２時間還流し、抽出液を濾過後、溶媒を留去して抽出物３．０ｇを得た。
【００２５】
（実施例２）
ドロセラ ロツンディフォリア（Drosera rotundifolia）の全草１００ｇにエタノール４０００ｍｌを加えて２時間還流し、抽出液を濾過後、溶媒を留去して抽出物３．３ｇを得た。
【００２６】
上記実施例１及び２により得られた抽出物を用いて、以下に記す試験方法に基づき、テストステロン５α−リダクタ−ゼを触媒とするテストステロンをＤＨＴに代謝する酵素反応の阻害率を調べた。尚、比較例として１−カルボン（和光純薬製）を用いて同様の試験を行った。
【００２７】
（試験方法）
テストステロン５α−リダクタ−ゼ液として、ＳＤ系雄性ラット肝臓のホモジネ−トの９０００×ｇ上清画分（オリエンタル酵母製；以下、Ｓ−９と称す）を用いた。テストステロンとしては、０．５７６ｍｇ／ｍｌのテストステロン−プロピレングリコ−ル溶液１．５ｍｌに、１ｍｇ／ｍｌのβ−ＮＡＤＰＨ／５ｍＭ−Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ緩衝液（ｐＨ７．０）を５．０ｍｌ加えた溶液（以下、溶液Ａと称す）を準備した。尚、テストステロン及びプロピレングリコ−ルは和光純薬製のものを、β−ＮＡＤＰＨはオリエンタル酵母製のものを、Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ緩衝液はＧＩＢＣＯＢＲＬ製のものを用いた。
【００２８】
実施例１と２及び比較例の試料それぞれ７．７５ｍｇにエタノール０．２５ｍｌを添加して試料溶液とした。前記溶液Ａ５．０ｍｌにこの試料溶液を添加し、更にＳ−９を１．０ｍｌずつ加えたものを反応液とした。この時、試料の全反応系中での濃度は０．１重量％であった。同様に、試料の全反応系中での濃度が０．０１重量％の反応液を得た。
【００２９】
上記の反応液を十分に攪拌したあと、３７℃で３０分間インキュベートし、その後、ジクロロメタン（和光純薬製）５．０ｍｌを加えて激しく振り、酵素反応を完全に止めた。次に、内部標準物質として、５．０ｍｇ／ｍｌのプロゲステロン（シグマ製）−エタノール溶液を０．１ｍｌ加え、十分に攪拌した。攪拌後、３０００ｒｐｍで１０分間遠心分離を行ってジクロロメタン層を分取し、その後、湯浴中で軽く振盪しながら濃縮した。濃縮した試料中の残留テストステロン、反応生成物であるＤＨＴ、３α−アンドロスタンジオール、３β−アンドロスタンジオールをガスクロマトグラフィーを用いて、定量分析した。このガスクロマトグラフィーによる定量分析の条件は、ＤＢ−１７をカラムに用い、カラム温度を２８０℃とした。また、検出はＦＩＤを用いて行った。
【００３０】
ガスクロマトグラフィーの各成分のピーク面積から、各成分の量を算出し、次式（数１）に基づいて、テストステロン５α−リダクタ−ゼ活性阻害率を求めた。
【数１】
ａ；試料溶液を添加しないときの残留テストステロン量
ｂ；試料溶液を添加しないときのＤＨＴ、３α−アンドロスタンジオール、３β−アンドロスタンジオールの総量
ａ' ；試料溶液添加時の残留テストステロン量
ｂ' ；試料溶液添加時のＤＨＴ、３α−アンドロスタンジオール、３β−アンドロスタンジオールの総量
【００３１】
結果を表２に示す。尚、表中の数値は阻害率（％）である。
【表２】
【００３２】
表２の結果から、ドロセラ ラメンタセア（Drosera ramentacea）或いはドロセラ ロツンディフォリア（Drosera rotundifolia）の抽出物は、テストステロン５α−リダクタ−ゼ活性阻害能を有しており、また、低含有率でも優れたテストステロン５α−リダクタ−ゼ活性阻害効果を発揮することがわかる。
【００３３】
〔試験例２〕
次に、ドロセラ ラメンタセア（Drosera ramentacea）の抽出物中の活性成分を分画し、この活性成分の、テストステロン５α−リダクタ−ゼ活性阻害率を調べた。
【００３４】
（実施例３）
ドロセラ ラメンタセア（Drosera ramentacea）のエタノール抽出物を水に分散させ、ヘキサン、クロロホルム、ｎ−ブタノールの順で抽出（溶媒分画）を行い、ヘキサン部、クロロホルム部、ｎ−ブタノール部および残部の４種類に分画した。４つの分画について、試験例１の試験方法をもとにテストステロン５α−リダクタ−ゼ活性阻害能を調べたところ、クロロホルム部に活性が認められた。
【００３５】
次に、上記クロロホルム部を、溶出溶媒として以下に示す７種類のクロロホルム−メタノール系溶媒を用いて、ＳｉＯ2 カラムクロマトグラフィーにより、７種類に分画した。
（１）クロロホルム
（２）クロロホルム：メタノール＝９：１
（３）クロロホルム：メタノール＝８：２
（４）クロロホルム：メタノール＝７：３
（５）クロロホルム：メタノール＝６：４
（６）クロロホルム：メタノール＝１：１
（７）メタノール
７つの分画について、テストステロン５α−リダクタ−ゼ活性阻害能を調べたところ、（１）のクロロホルム溶出部に活性が認められた。
【００３６】
上記クロロホルム溶出部をクロロホルムに溶解させ、１０％ＮａＨＣＯ3水溶液、５％ＮａＯＨ水溶液の順で抽出を行い、１０％ＮａＨＣＯ3 水溶液で抽出される酸性部、５％ＮａＯＨ水溶液で抽出されるフェノール部、どちらの水溶液にも抽出されない中性部の３種類に分画した。３つの分画についてテストステロン５α−リダクタ−ゼ活性阻害能を調べたところ、フェノール部に活性が認められた。このフェノール部を実施例３の試料とした。
【００３７】
尚、上記フェノール部を精製し、ガスクロマトグラフィー及び質量スペクトルを測定したところ、この分画には、５−ヒドロキシ−２−メチル−１，４−ナフトキノン（プルンバギン）が７２％、５−ヒドロキシ−７−メチル−１，４−ナフトキノン（７−メチルユグロン）が２８％存在していた。
【００３８】
上記実施例３の試料を用いて、試験例１と同じ試験方法により、反応系での濃度が０．００３重量％の場合の、テストステロン５α−リダクタ−ゼ活性阻害率を調べた。結果を表３に示す。尚、表中の数値は阻害率（％）である。
【表３】
【００３９】
以下、本発明に係る抗男性ホルモン剤原料を配合した抗男性ホルモン剤組成物を示す。
（処方例１）
エアゾール式育毛剤
原液 （％）
実施例１の抽出液 ０．５
グリチルリチン酸ジカリウム ０．１
キナエキス １．０
１，３−ブタンジオール １．０
ポリオキシエチレン（EO60）硬化ヒマシ油 ０．２
香料 ０．０５
エタノール ６５．０
精製水 残 部
合計 １００．０
噴射剤 （％）
ＬＰＧ（20℃、1.5kg/cm2） ８６．２
窒素 １３．８
合 計 １００．０
原液 ９７．１１
噴射剤 ２．８９
合計 １００．０
【００４０】
【発明の効果】
以上詳述した如く、請求項１に係る発明は、ドロセラ ラメンタセア（Drosera ramentacea）及び／又はドロセラ ロツンディフォリア（Drosera rotundifolia）の抽出物からなることを特徴とする抗男性ホルモン剤原料に関し、また請求項２に係る発明は、請求項１に記載の抗男性ホルモン剤原料が含有されてなる育毛剤であることを特徴とする抗男性ホルモン剤組成物に関するものであるから、以下のような効果を奏する。
【００４１】
即ち、ドロセラ ラメンタセア（Drosera ramentacea）或いはドロセラ ロツンディフォリア（Drosera rotundifolia）の抽出物は、優れたテストステロン５α−リダクタ−ゼ活性阻害能を有しているため、これらの抽出物からなる抗男性ホルモン剤原料は、男性ホルモンであるテストステロンを活性型男性ホルモンであるジヒドロテストステロン（ＤＨＴ）に代謝する還元酵素であるテストステロン５α−リダクターゼの活性を阻害することができ、良性前立腺過形成の治療、脱毛症やにきびの予防及び治療に有効であるという効果を奏する。また、上記植物の抽出物からなる抗男性ホルモン剤原料は、低含有率でも優れたテストステロン５α−リダクタ−ゼ活性阻害効果を発揮し、しかも安全性が高いので、この抗男性ホルモン剤原料が含有されてなる化粧品、医薬品、医薬部外品は良性前立腺過形成の治療、脱毛症やにきびの予防及び治療に有効に用いることができ、しかも安全性が高いという優れた効果を奏する。
【発明の属する技術分野】
本発明は、抗男性ホルモン剤原料及び組成物に関し、その目的は、良性前立腺過形成の治療や、脱毛症、にきびの予防及び治療に有効に用いることができ、しかも安全性の高い抗男性ホルモン剤原料及び組成物を提供することにある。
【０００２】
【従来の技術】
男性に特有の病気である良性前立腺過形成、脱毛症やにきびが、男性ホルモンであるテストステロンの作用に関与していることは従来より知られている。即ち、テストステロンは生体内で、還元酵素であるテストステロン５α−リダクターゼにより還元され、活性型男性ホルモンであるジヒドロテストステロン（以下、ＤＨＴと称す）となるが、このＤＨＴが良性前立腺過形成を強く刺激する作用、毛母細胞への栄養供給を阻害して脱毛を促進する作用、にきびを発生させる作用を有している。
【０００３】
これらの見地から、テストステロンをＤＨＴに代謝する還元酵素であるテストステロン５α−リダクターゼの活性を阻害することにより、良性前立腺過形成の治療、また脱毛症やにきびの予防及び治療が可能であると考えられている。尚、上記した良性前立腺過形成とは、前立腺の中葉の成長のことであり、これにより尿道が圧迫され塞ぎはじめる。良性前立腺過形成の治療としては、前立腺の全部または一部の外科的切除が最も有効とされており、また、最近では、テストステロン５α−リダクターゼの活性阻害物質が良性前立腺過形成の治療に導入されている。
【０００４】
上記したテストステロン５α−リダクターゼの活性阻害物質としては、従来より２−メチル−５−イソプロペニルシクロヘキセン−３−オン（以下、１−カルボンと称す）が一般に用いられている。
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】
しかしながら、上記した１−カルボンは、その含有率が低いとき、テストステロン５α−リダクターゼの活性を阻害する効果が著しく低下するという問題点が存在する。一方、１−カルボンの含有率を高くすると、その効果は高くなるが、１−カルボン特有の香りが強くなりすぎ、また、粘稠性があるため、化粧品等に添加すると、その使用感が悪くなるという問題点が生じ、１−カルボンの使用量を多量とすることも、少量とすることもいずれも好ましくなかった。
【０００６】
そこで、低含有率でも優れたテストステロン５α−リダクターゼ活性阻害効果を発揮する抗男性ホルモン剤原料及び組成物の創出が望まれており、本発明者らは既に、特願平８−１８８１４０号において、レモングラス（Cymbopogon flexuous (D.C.) Staps）の精油またはエキスが優れたテストステロン５α−リダクターゼ活性阻害効果を有することを、また、特願平９−１９５０６３号において、シトラール及びゲラニウム酸が優れたテストステロン５α−リダクターゼ活性阻害効果を有することを提案している。
【０００７】
上記レモングラス（Cymbopogon flexuous (D.C.) Staps）の精油またはエキス、シトラール、ゲラニウム酸はいずれも、従来よりテストステロン５α−リダクターゼの活性阻害物質として使用されている１−カルボンに比べて、テストステロン５α−リダクターゼの活性阻害効果が大きく、また、低含有率でもテストステロン５α−リダクターゼ活性阻害効果の低下が小さいという優れたものであるが、本発明者らは、テストステロン５α−リダクターゼの活性阻害物質に関する鋭意研究を更に続けたところ、ドロセラ ラメンタセア（Drosera ramentacea）或いはドロセラ ロツンディフォリア（Drosera rotundifolia）の抽出物もまた、テストステロン５α−リダクターゼの活性阻害効果が大きく、低含有率では、レモングラス（Cymbopogon flexuous (D.C.) Staps）の精油またはエキス、シトラール、ゲラニウム酸よりも更に優れたテストステロン５α−リダクターゼの活性阻害効果を発揮することを見出した。
【０００８】
【課題を解決するための手段】
即ち、請求項１に係る発明は、ドロセラ ラメンタセア（Drosera ramentacea）及び／又はドロセラ ロツンディフォリア（Drosera rotundifolia）の抽出物からなることを特徴とする抗男性ホルモン剤原料に関し、また請求項２に係る発明は、請求項１に記載の抗男性ホルモン剤原料が含有されてなる育毛剤であることを特徴とする抗男性ホルモン剤組成物に関する。
【０００９】
【発明の実施の形態】
上述した如く、本発明者らは、ドロセラ ラメンタセア（Drosera ramentacea）或いはドロセラ ロツンディフォリア（Drosera rotundifolia）の抽出物が、テストステロン５α−リダクターゼの活性阻害能を有することを見出し、本発明を完成するに至った。即ち、本発明においては、これらの植物の抽出物を抗男性ホルモン剤原料とする。
【００１０】
本発明において用いられるドロセラ ラメンタセア（Drosera ramentacea）及びドロセラ ロツンディフォリア（Drosera rotundifolia）はモウセンゴケ属に属する多年草で、日あたりのよい湿地に群生する食虫植物である。
【００１１】
本発明においては、上記したドロセラ ラメンタセア（Drosera ramentacea）或いはドロセラ ロツンディフォリア（Drosera rotundifolia）の地上部、地下部など、全部位が使用可能で、全草を使用しても、あるいは葉部、茎部、花部等を使用してもよい。
【００１２】
抽出物を得る際に使用する溶媒としては、水の他に、極性溶媒として、メタノール、エタノール、イソプロピルアルコール、ｎ−プロピルアルコール、イソブタノール、ｎ−ヘキサノール、メチルアミルアルコール、２−エチルブタノール、ｎ−オクタノール等の炭素数１〜８の一価アルコール、エチレングリコール、プロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール、ヘキシレングリコール、エチレングリコールモノメチルエーテル、エチレングリコールモノエチルエーテル、プロピレングリコールモノメチルエーテル、プロピレングリコールモノエチルエーテル等の炭素数２〜６の多価アルコール或いはその誘導体、アセトン、メチルアセトン、エチルメチルケトン、イソブチルメチルケトン、メチル−ｎ−プロピルケトン等の炭素数３〜６のケトン、エチルエーテル、イソプロピルエーテル、ｎ−ブチルエーテル等の炭素数４〜８のエーテル等を例示することができる。また、非極性有機溶媒としては、石油エーテル、或いはｎ−ブタン、ｎ−ペンタン、ｎ−ヘキサン、ｎ−オクタン等の炭素数４〜８の脂肪族炭化水素、四塩化炭素、クロロホルム、ジクロロエタン、トリクロロエチレン等の炭素数１〜２の脂肪族炭化水素のハロゲン化物、ベンゼン、トルエン等の炭素数６〜７の芳香族炭化水素等を例示することができる。尚、上記した有機溶媒の中でも、特にエタノールが好ましく用いられる。また、抽出方法は特に限定されない。
【００１３】
本発明においては、上記ドロセラ ラメンタセア（Drosera ramentacea）或いはドロセラ ロツンディフォリア（Drosera rotundifolia）の抽出物のうち１種を単独で用いることも、或いは２種以上を混合して用いることも可能である。
【００１４】
抗男性ホルモン剤原料として上記した植物の抽出物を用い、抗男性ホルモン剤組成物を製造する場合、抽出物の配合量は特に限定されないが、抽出に用いた植物の乾燥固形分として、全組成物中０．０１〜１０重量％とするのが好ましい。０．０１重量％未満では抽出物配合による効果が十分発揮されず、また１０重量％を超えてもそれ以上の効果は期待できず、いずれの場合も好ましくないからである。
【００１５】
【化１】
尚、５−ヒドロキシ−２−メチル−１，４−ナフトキノン（化式１）及び５−ヒドロキシ−７−メチル−１，４−ナフトキノン（化式２）は、上記ドロセラ ラメンタセア（Drosera ramentacea）の抽出物中の活性成分であり、この２種の１，４−ナフトキノン誘導体を含め、２−メチル−１，４−ナフトキノンなど、メチル基を有する１，４−ナフトキノン誘導体は、テストステロン５α−リダクターゼの活性阻害能が極めて高い。
【００１７】
上記した１，４−ナフトキノンの誘導体を用いて抗男性ホルモン剤組成物を製造する場合、１，４−ナフトキノンの誘導体の配合量は特に限定されないが、全組成物中０．０００１〜５重量％とするのが好ましい。０．０００１重量％未満では抽出物配合による効果が十分発揮されず、また５重量％を超えてもそれ以上の効果は期待できず、いずれの場合も好ましくないからである。
【００１８】
上記ドロセラ ラメンタセア（Drosera ramentacea）或いはドロセラ ロツンディフォリア（Drosera rotundifolia）の抽出物が抗男性ホルモン剤原料として含有されてなる抗男性ホルモン剤組成物は化粧品、医薬部外品あるいは医薬品として用いることができる。例えば、育毛・養毛を目的とするヘアトニック、ヘアクリーム、ヘアトリートメント等の化粧品、にきびの予防、しみ、そばかすの緩和等特定の使用目的を有した化粧用クリーム、乳液等の化粧品或いは薬用化粧品（医薬部外品）、更には、にきびや良性前立腺過形成の治療を目的とした医薬品として用いることができる。医薬品として使用する場合には、１ｍｇ〜１０００ｍｇ／日を２〜３回に分けて施用すればよい。
【００１９】
本発明に係る抗男性ホルモン剤組成物には、上記抗男性ホルモン剤原料以外に、以下のような物質が適宜配合される。例えば、育毛・養毛成分として、ビタミンＥ及びその誘導体、センブリエキス、ニンニクエキス、セファランチン、塩化カルプロニウム、アセチルコリン等の血行促進剤、トウガラシチンキ、カンタリスチンキ、ショウキョウチンキ、ノニル酸バニルアミド等の局所刺激剤、サリチル酸、レゾルシン、乳酸などの角質溶解剤、プラセンタエキス、ペンタデカン酸グリセリド、パントテニルエチルエーテル、ビオチン、ヒノキチオール、アラントイン等の代謝賦活剤、グリチルリチン酸、グリチルレチン酸等の消炎剤、イソプロピルメチルフェノール、トリクロサン、ジンクピリチオン、ヒノキチオール等の殺菌剤、メントール、カンフル等の清涼剤、その他女性ホルモン等が適宜配合される。また、アスコルビン酸やその誘導体、イオウ製剤、グルタチオン等の美白剤、或いは保湿剤、紫外線吸収剤、ビタミン類等、通常使用されている公知の添加剤を適宜配合することもできる。
【００２０】
更に、本発明の効果を損なわない範囲で、アルコ−ル、多価アルコール、水溶性高分子、酸化防止剤、ｐＨ調整剤、紫外線防止剤、金属イオン封鎖剤、増粘剤、界面活性剤、精製水、香料、防腐剤、抗菌剤、油剤、高級脂肪酸、脂肪酸エステル、保湿剤、清涼剤、色素等の通常の化粧品成分、或いはホルモン類、ビタミン類、アミノ酸類、収れん剤及び胎盤抽出物、エラスチン、コラーゲン、ムコ多糖、アロエ抽出物、ヘチマ水、ローヤルゼリー、バーチ、ニンジンエキス、カモミラエキス、甘草エキス、サルビアエキス、アルテアエキス、セイヨウノコギリソウエキス等の生薬成分をはじめとする動植物抽出成分等特殊配合成分を、目的に応じて適宜任意に配合してもよい。
【００２１】
本発明において用いられるドロセラ ラメンタセア（Drosera ramentacea）或いはドロセラ ロツンディフォリア（Drosera rotundifolia）の抽出物は天然物であるため安全性が高く、また、１，４−ナフトキノンの誘導体も安全性の高い物質である。以下、１，４−ナフトキノンの誘導体の安全性について、試験結果に基づいて説明する。
【００２２】
毒性試験として、マウスを用いて、１，４−ナフトキノンの誘導体の５０％致死量（ＬＤ50）を調べた。結果を表１に示す。
【表１】
上記試験結果から、１，４−ナフトキノンの誘導体は安全性の高い物質であると言える。
【００２４】
【実施例】
以下、本発明を実施例及び比較例に基づき詳細に説明する。但し、本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。
〔試験例１〕
まず、ドロセラ ラメンタセア（Drosera ramentacea）或いはドロセラ ロツンディフォリア（Drosera rotundifolia）の抽出物の、テストステロン５α−リダクターゼ活性阻害率を調べた。
（実施例１）
ドロセラ ラメンタセア（Drosera ramentacea）の全草１００ｇにエタノール４０００ｍｌを加えて２時間還流し、抽出液を濾過後、溶媒を留去して抽出物３．０ｇを得た。
【００２５】
（実施例２）
ドロセラ ロツンディフォリア（Drosera rotundifolia）の全草１００ｇにエタノール４０００ｍｌを加えて２時間還流し、抽出液を濾過後、溶媒を留去して抽出物３．３ｇを得た。
【００２６】
上記実施例１及び２により得られた抽出物を用いて、以下に記す試験方法に基づき、テストステロン５α−リダクタ−ゼを触媒とするテストステロンをＤＨＴに代謝する酵素反応の阻害率を調べた。尚、比較例として１−カルボン（和光純薬製）を用いて同様の試験を行った。
【００２７】
（試験方法）
テストステロン５α−リダクタ−ゼ液として、ＳＤ系雄性ラット肝臓のホモジネ−トの９０００×ｇ上清画分（オリエンタル酵母製；以下、Ｓ−９と称す）を用いた。テストステロンとしては、０．５７６ｍｇ／ｍｌのテストステロン−プロピレングリコ−ル溶液１．５ｍｌに、１ｍｇ／ｍｌのβ−ＮＡＤＰＨ／５ｍＭ−Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ緩衝液（ｐＨ７．０）を５．０ｍｌ加えた溶液（以下、溶液Ａと称す）を準備した。尚、テストステロン及びプロピレングリコ−ルは和光純薬製のものを、β−ＮＡＤＰＨはオリエンタル酵母製のものを、Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ緩衝液はＧＩＢＣＯＢＲＬ製のものを用いた。
【００２８】
実施例１と２及び比較例の試料それぞれ７．７５ｍｇにエタノール０．２５ｍｌを添加して試料溶液とした。前記溶液Ａ５．０ｍｌにこの試料溶液を添加し、更にＳ−９を１．０ｍｌずつ加えたものを反応液とした。この時、試料の全反応系中での濃度は０．１重量％であった。同様に、試料の全反応系中での濃度が０．０１重量％の反応液を得た。
【００２９】
上記の反応液を十分に攪拌したあと、３７℃で３０分間インキュベートし、その後、ジクロロメタン（和光純薬製）５．０ｍｌを加えて激しく振り、酵素反応を完全に止めた。次に、内部標準物質として、５．０ｍｇ／ｍｌのプロゲステロン（シグマ製）−エタノール溶液を０．１ｍｌ加え、十分に攪拌した。攪拌後、３０００ｒｐｍで１０分間遠心分離を行ってジクロロメタン層を分取し、その後、湯浴中で軽く振盪しながら濃縮した。濃縮した試料中の残留テストステロン、反応生成物であるＤＨＴ、３α−アンドロスタンジオール、３β−アンドロスタンジオールをガスクロマトグラフィーを用いて、定量分析した。このガスクロマトグラフィーによる定量分析の条件は、ＤＢ−１７をカラムに用い、カラム温度を２８０℃とした。また、検出はＦＩＤを用いて行った。
【００３０】
ガスクロマトグラフィーの各成分のピーク面積から、各成分の量を算出し、次式（数１）に基づいて、テストステロン５α−リダクタ−ゼ活性阻害率を求めた。
【数１】
ｂ；試料溶液を添加しないときのＤＨＴ、３α−アンドロスタンジオール、３β−アンドロスタンジオールの総量
ａ' ；試料溶液添加時の残留テストステロン量
ｂ' ；試料溶液添加時のＤＨＴ、３α−アンドロスタンジオール、３β−アンドロスタンジオールの総量
【００３１】
結果を表２に示す。尚、表中の数値は阻害率（％）である。
【表２】
表２の結果から、ドロセラ ラメンタセア（Drosera ramentacea）或いはドロセラ ロツンディフォリア（Drosera rotundifolia）の抽出物は、テストステロン５α−リダクタ−ゼ活性阻害能を有しており、また、低含有率でも優れたテストステロン５α−リダクタ−ゼ活性阻害効果を発揮することがわかる。
【００３３】
〔試験例２〕
次に、ドロセラ ラメンタセア（Drosera ramentacea）の抽出物中の活性成分を分画し、この活性成分の、テストステロン５α−リダクタ−ゼ活性阻害率を調べた。
【００３４】
（実施例３）
ドロセラ ラメンタセア（Drosera ramentacea）のエタノール抽出物を水に分散させ、ヘキサン、クロロホルム、ｎ−ブタノールの順で抽出（溶媒分画）を行い、ヘキサン部、クロロホルム部、ｎ−ブタノール部および残部の４種類に分画した。４つの分画について、試験例１の試験方法をもとにテストステロン５α−リダクタ−ゼ活性阻害能を調べたところ、クロロホルム部に活性が認められた。
【００３５】
次に、上記クロロホルム部を、溶出溶媒として以下に示す７種類のクロロホルム−メタノール系溶媒を用いて、ＳｉＯ2 カラムクロマトグラフィーにより、７種類に分画した。
（１）クロロホルム
（２）クロロホルム：メタノール＝９：１
（３）クロロホルム：メタノール＝８：２
（４）クロロホルム：メタノール＝７：３
（５）クロロホルム：メタノール＝６：４
（６）クロロホルム：メタノール＝１：１
（７）メタノール
７つの分画について、テストステロン５α−リダクタ−ゼ活性阻害能を調べたところ、（１）のクロロホルム溶出部に活性が認められた。
【００３６】
上記クロロホルム溶出部をクロロホルムに溶解させ、１０％ＮａＨＣＯ3水溶液、５％ＮａＯＨ水溶液の順で抽出を行い、１０％ＮａＨＣＯ3 水溶液で抽出される酸性部、５％ＮａＯＨ水溶液で抽出されるフェノール部、どちらの水溶液にも抽出されない中性部の３種類に分画した。３つの分画についてテストステロン５α−リダクタ−ゼ活性阻害能を調べたところ、フェノール部に活性が認められた。このフェノール部を実施例３の試料とした。
【００３７】
尚、上記フェノール部を精製し、ガスクロマトグラフィー及び質量スペクトルを測定したところ、この分画には、５−ヒドロキシ−２−メチル−１，４−ナフトキノン（プルンバギン）が７２％、５−ヒドロキシ−７−メチル−１，４−ナフトキノン（７−メチルユグロン）が２８％存在していた。
【００３８】
上記実施例３の試料を用いて、試験例１と同じ試験方法により、反応系での濃度が０．００３重量％の場合の、テストステロン５α−リダクタ−ゼ活性阻害率を調べた。結果を表３に示す。尚、表中の数値は阻害率（％）である。
【表３】
以下、本発明に係る抗男性ホルモン剤原料を配合した抗男性ホルモン剤組成物を示す。
（処方例１）
エアゾール式育毛剤
原液 （％）
実施例１の抽出液 ０．５
グリチルリチン酸ジカリウム ０．１
キナエキス １．０
１，３−ブタンジオール １．０
ポリオキシエチレン（EO60）硬化ヒマシ油 ０．２
香料 ０．０５
エタノール ６５．０
精製水 残 部
合計 １００．０
噴射剤 （％）
ＬＰＧ（20℃、1.5kg/cm2） ８６．２
窒素 １３．８
合 計 １００．０
原液 ９７．１１
噴射剤 ２．８９
合計 １００．０
【００４０】
【発明の効果】
以上詳述した如く、請求項１に係る発明は、ドロセラ ラメンタセア（Drosera ramentacea）及び／又はドロセラ ロツンディフォリア（Drosera rotundifolia）の抽出物からなることを特徴とする抗男性ホルモン剤原料に関し、また請求項２に係る発明は、請求項１に記載の抗男性ホルモン剤原料が含有されてなる育毛剤であることを特徴とする抗男性ホルモン剤組成物に関するものであるから、以下のような効果を奏する。
【００４１】
即ち、ドロセラ ラメンタセア（Drosera ramentacea）或いはドロセラ ロツンディフォリア（Drosera rotundifolia）の抽出物は、優れたテストステロン５α−リダクタ−ゼ活性阻害能を有しているため、これらの抽出物からなる抗男性ホルモン剤原料は、男性ホルモンであるテストステロンを活性型男性ホルモンであるジヒドロテストステロン（ＤＨＴ）に代謝する還元酵素であるテストステロン５α−リダクターゼの活性を阻害することができ、良性前立腺過形成の治療、脱毛症やにきびの予防及び治療に有効であるという効果を奏する。また、上記植物の抽出物からなる抗男性ホルモン剤原料は、低含有率でも優れたテストステロン５α−リダクタ−ゼ活性阻害効果を発揮し、しかも安全性が高いので、この抗男性ホルモン剤原料が含有されてなる化粧品、医薬品、医薬部外品は良性前立腺過形成の治療、脱毛症やにきびの予防及び治療に有効に用いることができ、しかも安全性が高いという優れた効果を奏する。
Claims (2)
- ドロセラ ラメンタセア（Drosera ramentacea）及び／又はドロセラ ロツンディフォリア（Drosera rotundifolia）の抽出物からなることを特徴とする抗男性ホルモン剤原料。
- 請求項１に記載の抗男性ホルモン剤原料が含有されてなる育毛剤であることを特徴とする抗男性ホルモン剤組成物。
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