JP3904377B2 - 微生物性リパーゼ阻害剤 - Google Patents

Description

【０００１】
【発明の属する技術分野】
この発明は、新規な微生物性リパーゼ阻害剤に関する。さらに詳しくは、微生物性のリパーゼに起因する疾患を安全に予防，防止することのできる、微生物性リパーゼ阻害剤に関するものである。
【０００２】
【従来の技術】
皮脂腺の肥大増殖や毛嚢孔の角化亢進等が原因となって皮脂が溜まると、毛嚢の毛漏斗に存在する皮膚常在菌のニキビ桿菌や皮膚ブドウ状球菌が増加し、これらの菌のリパーゼが皮脂を構成している皮質成分の内のトリグリセリドを分解して遊離脂肪酸に変え、この遊離脂肪酸が上皮に作用し、各種の酵素を産生して、ニキビ，皮膚炎，フケ等の要因になるといわれている（光井武夫「新化粧品学」p29-30,1993）。
【０００３】
これに対し、微生物性のリパーゼを阻害してニキビ，皮膚炎，フケなどを抑制又は予防する薬剤の開発は未だあまり進められておらず、テトラサイクリン及び金属塩（特開昭５９−１８７６９１９号公報），ビワ抽出物（特開平１０−２６５３６４号公報），コラ・デ・カバロ抽出物（特開平１１−２２８３３８号公報）等が開示されているにすぎない。しかしながら、これらの薬剤は他の配合成分との関係から微生物性リパーゼ阻害効果を発揮できなかったり、局所適用における安全性，有効性の点で必ずしも満足できるものではなかった。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】
そこで本発明においては、安全性が高く、局所適用で微生物性リパーゼに対する阻害効果を有効に発揮し得る微生物性リパーゼ阻害剤を得ることを目的とした。
【０００５】
【課題を解決するための手段】
上記の課題を解決するべく種々検討した結果、ハッカ属植物をはじめとする、特定の植物抽出物において、有効な微生物性リパーゼ阻害作用を見いだし、本発明を完成するに至った。
【０００６】
すなわち本発明においては、ハッカ属(Mentha L.)，オトギリソウ属(Hypericum L.)，キハダ(Phellodendron amurense Rupr.)，イブキジャコウソウ属(Thymus L.)，ユーカリ(Eucalyptus globulus Labill.)，クワ属(Morus L.)，スギナ(Equisetum arvense L.)，トクサ(Equiswtum hyemale L.)，イヌドクサ(Equisetum ramosissimum Desf.)から選択される１種又は２種以上の植物の抽出物を有効成分とする微生物性リパーゼ阻害剤を得る。
【０００７】
【発明の実施の形態】
まず、本発明において抽出物を得るのに用いる植物について説明する。
【０００８】
ハッカ属(Mentha L.)植物は、シソ科(Labiatae)に属する双子葉植物であり、特にその種類は限定されず、イエハッカ(Mentha arvens L. var. piperascens Malinv.; Mentha haplocalyx Briq. var. piperascens (Malinv.) Wu et Li)，ベルガモットミント(Mentha aquatica L. ; Mentha citrata Ehrh.)，ハッカ(Mentha haplocalyx Briq.)，ホースミント(Mentha longifolia (L.) Huds. ; Mentha sylvestris L.)，セイヨウハッカ(Mentha piperita L.)，ペニローヤルミント(Mentha pulegium L.)，ミドリハッカ(Mentha spicata L. ; Mentha viridis L.)等が例示される。これらのハッカ属植物の中でも、微生物性リパーゼ阻害作用の点から、イエハッカ(Mentha arvens L. var. piperascens Malinv.; Mentha haplocalyx Briq. var. piperascens (Malinv.) Wu et Li)及びハッカ(Mentha haplocalyx Briq.)から選択される１種又は２種の抽出物を用いることが好ましい。全草若しくは、花，葉，茎，根等各部位を用いることができるが、全草若しくは葉を用いることが特に好ましい。
【０００９】
オトギリソウ属(Hypericum L.)植物は、オトギリソウ科(Guttiferae)に属する双子葉植物であり、特にその種類は限定されず、トモエソウ(Hypericum ascyron L.)，ビヨウヤナギ(Hypericum chinense L. var. salicifolia (Sieb. et Zucc.) Choisy)，オトギリソウ(Hypericum erectum L.)，ヒメオトギリ(Hypericum japonicum Thunb.)，キンシバイ(Hypericum patulum Thunb.)，セイヨウオトギリ(Hypericum perforatum L.)等が例示される。これらのオトギリソウ属植物の中でも、微生物性リパーゼ阻害作用の点から、オトギリソウ(Hypericum erectum L.)及びセイヨウオトギリ(hypericum perforatum L.)から選択される１種又は２種を用いることが好ましい。全草若しくは、花，葉，茎，根等各部位を用いることができるが、全草若しくは葉，花を用いることが特に好ましい。
【００１０】
キハダ(Phellodendron amurense Rupr.)は、ミカン科(Rutaceae)キハダ属(Phellodendron Rupr.)に属する双子葉植物であり、コルク層を除き平板状に乾燥した樹皮を黄檗（黄柏）と称し、漢方では健胃薬として用いられている。また樹皮の内皮の粉末は民間で健胃薬，打ち身に際しての湿布薬としても用いられ、これらの薬理作用は主成分のアルカロイド，ベルベリンによるものである。花，葉，茎，根，樹皮，根皮等の各部位を用いることができるが、樹皮を用いることが特に好ましい。
【００１１】
イブキジャコウソウ属(Thymus L.)は、シソ科(Labiatae)に属する双子葉植物で、特にその種類は問わないが、イブキジャコウソウ(Thymus serphyllum L. subsp. quinquecostatua (Aelak.) Kitamura)，ヨウシュイブキジャコウソウ(Thymus serphyllum L. subsp. quinquecostatua (Aelak.) Kitamura Subsp. serphyllum)，タチジャコウソウ(Thymus vulgaris L.)等が例示される。これらのイブキジャコウソウ属植物の中でも、微生物性リパーゼ阻害作用の点から、タチジャコウソウウ(Thymus vulgaris L.)を用いることが好ましい。全草若しくは、花，葉，茎，根等各部位を用いることができるが、全草若しくは葉を用いることが特に好ましい。
【００１２】
ユーカリ(Eucalyptus globulus Labill.)は、フトモモ科(Myrtaceae)ユーカリ属(Eucalyptus L'Herit)に属する双子葉植物であり、葉から採取されるユーカリ油は薬用，殺虫剤，香料に用いられ、その主要成分はシネオールである。花，葉，茎，根，樹皮，根皮等の各部位を用いることができるが、葉を用いることが特に好ましい。
【００１３】
クワ属(Morus L.)は、クワ科(Moraceae)に属する双子葉植物であり、特にその種類は問わないが、マグワ(Morus alba L. ; Morus atropurpure Roxb.)，シマグワ(Morus australis Poir. ; Morus acidosa Griff.)，ヤマグワ(Morus bombycis Koidz. ; Morus alba L. var. stylosa Bur. ; Morus japonica Bailey non Sieb.)，ハチジョウグワ(Morus lagayamae Koidz.)，ログワ(Morus latifolia (Bur.) Poir. ; Morus alba L. var. latifolia Bur. ; Morus multicaulis Perr. ; Morus alba L. var. multicaulis Loud.)，モウコグワ(Morus mongolica (Bur.) Schneid. ; Morus alba var. mongolica Bur.)，クロミグワ(Morus nigra L.)，アカミグワ(Morus rubra L.)等が例示される。これらのクワ属植物の中では、原料供給の面から、マグワ(Morus alba L. ; Morus atropurpure Roxb.)若しくはヤマグワ(Morus bombycis Koidz. ; Morus alba L. var. stylosa Bur. ; Morus japonica Bailey non Sieb.)、及びこれらの栽培用の品種を用いることが好ましい。クワ属植物から抽出物を得る際の使用部位は、葉が好ましい。
【００１４】
スギナ(Equisetum arvense L.)、トクサ(Equiswtum hyemale L.)、及びイヌドクサ(Equisetum ramosissimum Desf.)は、トクサ科(Equisetaeae)、トクサ属(Equisetum L.)に属するシダ植物である。全草若しくは、根を除く全草，葉，茎，根等各部位を用いることができるが、根を除く全草を用いることが特に好ましい。
【００１５】
本発明においては、上記植物は生のまま抽出に供してもよいが、抽出効率を考えると、細切，乾燥，粉砕等の処理を行った後に抽出を行うことが好ましい。抽出は、抽出溶媒に浸漬して行う。抽出効率を上げるため撹拌を行ったり、抽出溶媒中でホモジナイズしてもよい。抽出温度としては、５℃程度から抽出溶媒の沸点以下の温度とするのが適切である。抽出時間は抽出溶媒の種類や抽出温度によっても異なるが、４時間〜２週間程度とするのが適切である。
【００１６】
抽出溶媒としては、水の他、メタノール，エタノール，プロパノール，イソプロパノール等の低級アルコール、1,3-ブチレングリコール，プロピレングリコール，ジプロピレングリコール，グリセリン等の多価アルコール、エチルエーテル，プロピルエーテル等のエーテル類、酢酸エチル，酢酸ブチル等のエステル類、アセトン，エチルメチルケトン等のケトン類などの極性有機溶媒を用いることができ、これらより１種又は２種以上を選択して用いる。また、生理食塩水，リン酸緩衝液，リン酸緩衝生理食塩水等を用いてもよい。抽出の際の植物と溶媒との比率は特に限定されないが、植物１に対して溶媒０．１〜１０００重量倍、特に抽出操作，効率の点で、０．５〜１００重量倍が好ましい。
【００１７】
ハッカ等上記植物の上記溶媒による抽出物は、そのままでも本発明に係る微生物性リパーゼ阻害剤として用いることができるが、濃縮，乾固したものを水や極性溶媒に再度溶解したり、或いは微生物性リパーゼ阻害作用を損なわない範囲で脱色，脱臭，脱塩等の精製処理を行ったり、カラムクロマトグラフィーによる分画処理を行った後に用いてもよい。また保存のため、精製処理の後凍結乾燥し、用時に溶媒に溶解して用いることもできる。
【００１８】
本発明においては、ハッカ等上記植物の上記溶媒による抽出物又は前記処理物をそのまま、或いは水，低級アルコール等の水性担体、乳剤，ゲル，クリーム，軟膏等の基剤に含有させたり、粉末化或いは顆粒化して微生物性リパーゼ阻害剤とする。また、リポソーム等のベシクルやマイクロカプセル等に内包させることもできる。
【００１９】
【実施例】
さらに実施例により、本発明の特徴について詳細に説明する。
【００２０】
［実施例１〜実施例７］ 微生物性リパーゼ阻害剤
表１に示す植物各２５０gを乾燥，粉砕し、５０容量エタノール水溶液１０００ml中に浸漬して、２５℃で７日間静置して抽出した。抽出物をろ過してろ液を回収し、ミリポアフィルターにて除菌して、水性製剤である実施例１〜実施例７を得た。
【００２１】
【表１】

【００２２】
上記実施例１〜実施例７について、微生物性リパーゼ活性阻害効果を評価した。評価は、脱エステル化することにより蛍光を発する4-メチルウンベリフェリルオレエートに微生物性リパーゼ（アクネ菌(Propionibacterium acnes) 由来）を作用させ、生成した蛍光性を有する4-メチルウンベリフェロンを蛍光強度計を用いて定量することにより行った。詳細には、９６穴マイクロプレートに微生物由来のリパーゼ溶液を最終濃度で１mg/mlになるように調製し、各実施例を０．１mg/mlになるように添加し、さらに4-メチルウンベリフェリルオレエートを１００μＭになるように添加した。暗所で２０分間反応させ、分解して得られた4-メチルウンベリフェロンを蛍光強度計にて、励起波長:355nm，蛍光波長:460nmの条件で測定した。微生物性リパーゼ活性阻害効果は、4-メチルウンベリフェリルオレエートと微生物由来リパーゼ溶液のみで反応させた場合に生成した4-メチルウンベリフェロン量を１００とした時の、実施例を添加した場合に生成した4-メチルウンベリフェロン量にて表した。結果を表２に示した。
【００２３】
【表２】

【００２４】
表２より明らかなように、本発明の実施例１〜実施例７は、いずれも高い微生物性リパーゼ活性阻害効果を示していた。
【００２５】
次に本発明の実施例について、使用試験により微生物性リパーゼ活性阻害に基づく効果を評価した。まず、下記のローション９５重量部に対して、実施例１〜実施例７をそれぞれ５重量部添加したローションを調製した。アクネ若しくはフケを気にする男女２０名を一群とし、各群に実施例を含有するローションをそれぞれブラインドにて１日２回，７日間患部に塗布させた。また、微生物性リパーゼ阻害剤を添加していないローションを比較例１として同様に使用試験を行った。アクネ若しくはフケ症状の改善状況は、「改善」，「やや改善」，「変化無し」，「悪化」の四段階で評価し、各評価を得たパネラー数にて表３に示した。
【００２６】
ローション処方
(１)エタノール ３５．０(重量部)
(２)ヒドロキシエチルセルロース １．０
(３)グリセリン ７．０
(４)グアイアズレンスルホン酸ナトリウム ０．５
(５)精製水 ５６．５
製法：(１)〜(６)を混合し、均一とする。
【００２７】
【表３】

【００２８】
表３より明らかなように、本発明の実施例使用群では、いずれにおいてもアクネ及びフケについて症状の悪化したパネラーは存在せず、３５％以上のパネラーで症状の改善傾向が認められていた。これに対し、比較例使用群では、症状の改善傾向を認めたのはアクネについて２５％，フケについて４０％にとどまり、アクネについては３５％，フケについては１０％のパネラーで症状の悪化が見られていた。すなわち、本発明に係る微生物性リパーゼ阻害剤は外用により、アクネ及びフケ症状を有意に改善することが示された。
【００２９】
また、本発明の実施例１〜実施例７については、男性３０名を用いた２４時間の背部閉塞貼付試験において、何ら皮膚刺激性反応を認めず、さらに皮膚感作性反応も認められなかった。
【００３０】
【発明の効果】
以上詳述したように本発明により、安全性が高く、局所適用で微生物性リパーゼに対する阻害効果を有効に発揮し得る微生物性リパーゼ阻害剤を得ることができた。

Claims (1)

1. スギナ(Equisetum arvense L.)，トクサ(Equiswtum hyemale L.)，イヌドクサ(Equisetum ramosissimum Desf.)から選択される１種又は２種以上の植物の抽出物を有効成分とする、アクネ菌(Propionibacterium acnes)由来リパーゼ阻害剤。