JP3877213B2

JP3877213B2 - アレイブロック作成方法とこれに使用される組織くりぬき装置

Info

Publication number: JP3877213B2
Application number: JP2003312248A
Authority: JP
Inventors: 康彦北山
Original assignee: 康彦北山; 株式会社東屋医科器械
Priority date: 2003-02-07
Filing date: 2003-09-04
Publication date: 2007-02-07
Anticipated expiration: 2023-09-04
Also published as: JP2004258017A

Description

本発明は、一般の病理診断及び研究に適用するアレイブロック作成方法と組織くりぬき装置に関する。

近年、組織配列作成用のティシュアレイヤー（ｔｉｓｓｕｅａｒｒａｙｅｒ）がビーチャーインスツルメンツ社（ｂｅｅｃｈｅｒｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ）から提供されている。これは、装置に２ｍｍ、１ｍｍ、０．６ｍｍの中空芯のいずれかが２つずつ付けられており、片方で既存のパラフィンブロックから組織をくりぬき、他方で組織の包埋されていないパラフィンブロックに穴を空け、くりぬいたパラフィン円柱組織を包埋されていない方のパラフィンブロックに埋め込む方法である。採取するパラフィンブロックの位置決めは、へマトキシリンーエオジン（ＨＥ）染色標本と対応させながら決定する。この方法によると、採取する組織が小さいため粘着テープを張った特殊なスライドグラスが必要になる。この際、溶剤の中でテープを剥がし、ＵＶランプの下で重合する必要がある。この組織くりぬき装置では、操作が非常に煩雑で手間や時間がかかる上に、加温しないので既存の組織ブロックに穴を空ける時、ブロックが破損することが多い。また、組織か小さいので通常の病理診断用には適しておらず、遺伝子などの研究用としての用途が主である。

上記組織配列を作成する装置は、Ｚ軸方向に移動可能なパンチ台キャリッジと、このパンチ台キャリッジ上に取付けられ、このパンチ台キャリッジに対して戻り止め或いは止めにより正確に規定された少なくとも第一及び第二の位置の間で移動可能なパンチ台と、このパンチ台上に取付けられ、それぞれパンチと協働探り針とを備える少なくとも第一及び第二のパンチユニットと、移植ブロックを保持するための手段と、移植ブロックとパンチ台とを、Ｘ軸及びＺ軸の方向に、互いに対して選択的に再位置決めするための手段と、移植ブロックとパンチ台キャリッジの少なくとも一方の移動を、互いに対してＺ軸方向に案内するための手段と、を備えた装置であって、上記第一のパンチユニットが、移植者パンチとそれに係る探り針とを備え、供給者パンチが移植者パンチより大きい内径を有し、上記パンチ台が上記第一の位置にある時は、上記移植者パンチが、上記Ｚ軸と心合わせされた上記移植者ブロックホルダ上の位置にあり、上記パンチ台が上記第二の位置にある時は、上記供給者パンチが、上記Ｚ軸と芯合わせされた上記移植者ブロックホルダ上の位置にある装置である。これにより、正確且つ連続した複数のパンチの位置決めができる。パンチの位置決めが手動で容易に起動できる。組織配列の半自動又は自動生産できる。更に、組織微小配列構成装置において、２個の針状パンチを交互に位置決めできる簡単な手段が提供できる（例えば、特許文献１参照。）。
特表２００２−５３７７９４号公報

しかしながら、上記組織配列作成の装置とその方法においは、一般の組織診断用には殆ど使用できず、特殊染色や免疫染色、ｉｎｓｉｔｕｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎなどにおいても一個一個の組織が小さすぎて、正確な判定・評価が難しく、また組織の局在の違いによるさまざまな蛋白等の発現の差を知ることも難しい。また、採取する組織の位置決めが難しく、目的とする位置からずれて採取されることも多い。使用するブロックも加温しないので、ブロック破損も高率に生じる。また、固まったパラフィンブロックに埋め込む方法なので、埋め込む組織と周囲のパラフィンがうまく馴染まず、良好な切片が作れない場合がある。更に、固定後の臓器そのものから組織をくりぬいてくることはほとんど不可能である。操作も非常に煩雑で、時間も手間もかかる上、使いこなすにはある程度の熟練が必要である。また、通常のスライドグラスが使用できず、特殊なスライドグラスが必要であったり、粘着テープやＵＶの照射の必要性もある。更に、コストも高く日常の病理業務での用途は殆どないといっても良い。このような状況下で、現在多数の切片を載せて、非常に簡単に作成できる日常の病理診断用の配列ブロックを作ることが非常に重要な課題となっている。

本発明はこのような点に基づいてなされたものでその目的とするところは、良好な切片を容易に作成可能なアレイブロック作成方法とこれに使用する組織くりぬき装置を提供することにある。

上記目的を達成するべく本発明の請求項１によるアレイブロック作成方法は、臓器のホルマリン固定パラフィンブロックをステージに固定し、上記ホルマリン固定パラフィンブロックをステージの加熱器にて４０℃〜５０℃に加温し、臓器の目的とする部分に筒状刃の先端を移動して合わせ、該筒状刃で上記組織をくりぬき、続いて、組織抜き棒にて筒状刃から組織を抜き、予め上記筒状刃とほぼ同径の中空穴を複数形成したティシュブロックを用意しておき、くりぬいた組織を包埋皿上に配置したティシュブロックの中空穴に先端側が包埋皿側に突出するように埋め込み、包埋皿とティシュブロックの間にパラフィン液を流し込んで充填・固化させることにより組織とパラフィンとを一体化させるようにしたことを特徴とするものである。

また、請求項２によるアレイブロック作成方法は、臓器のホルマリン固定パラフィンブロックをステージに固定し、臓器の目的とする部分に筒状刃の先端を移動して合わせ、該筒状刃で上記組織をくりぬき、続いて、組織抜き棒にて筒状刃から組織を抜き、予め上記筒状刃とほぼ同径の中空穴を複数形成したティシュブロックを用意しておき、くりぬいた組織を包埋皿上に配置したティシュブロックの中空穴に先端側が包埋皿側に突出するように埋め込み、包埋皿とティシュブロックの間にパラフィン液を流し込み、パラフィン液を加熱器にて加温することにより、組織とパラフィンとを一体化させて充填・固化させるようにしたことを特徴とするものである。

また、請求項３によるアレイブロック作成方法は、ホルマリン固定後の臓器をステージに固定し、臓器の目的とする部分に筒状刃の先端を移動して合わせ、該筒状刃で上記組織をくりぬき、続いて、組織抜き棒にて筒状刃から組織を抜き、予め上記筒状刃とほぼ同径の中空穴を複数形成したティシュブロックを用意しておき、くりぬいた組織を包埋皿上に固定したティシュブロックの中空穴に先端側が包埋皿側に突出するように埋め込み、包埋皿とティシュブロックの間にパラフィン液を流し込み、パラフィン液を加熱器にて加温することにより、組織とパラフィンとを一体化させて充填・固化させるようにしたことを特徴とするものである。

また、請求項４によるアレイブロック作成方法は、請求項１〜３のうちいずれか１項記載のアレイブロック作成方法において、筒状刃は、３ｍｍ〜７ｍｍの外径としたことを特徴とするものである。

また、請求項５によるアレイブロック作成方法は、請求項１〜４のうちいずれか１項記載のアレイブロック作成方法において、筒状刃で組織をくりぬく際、筒状刃内を真空引きすることを特徴とするものである。

また、請求項６による組織くりぬき装置は、基台と、上記基台に取り付けられ昇降操作機構により組織をくりぬく筒状刃と、上記基台に取り付けられ臓器のホルマリン固定パラフィンブロックを固定するとともに水平方向位置決め機構によりＸ軸、Ｙ軸方向の位置を操作して臓器のおおよそ目的とする部分を筒状刃の先端に移動させるステージと、上記ステージに備えられホルマリン固定パラフィンブロックを加温する加熱器と、を具備したことを特徴とするものである。

また、請求項７による組織くりぬき装置は、請求項６記載の組織くりぬき装置において、筒状刃は３ｍｍ〜７ｍｍの外径としたことを特徴とするものである。

また、請求項８による組織くりぬき装置は、請求項６〜７のうちいずれか１項記載の組織くりぬき装置において、基台に筒状刃と選択的に取り付けられ目的とする組織の正確な位置を決定する位置出しピンを備えたことを特徴とするものである。

また、請求項９による組織くりぬき装置は、請求項６〜８のうちいずれか１項記載の組織くりぬき装置において、筒状刃に真空引き手段を取り付けたことを特徴とするものである。

すなわち、上記請求項１のアレイブロック作成方法によると、手術或いは生検で採取された臓器のホルマリン固定パラフィンブロックから臓器組織の目的とする部分をくりぬき、この組織を、包埋皿上に固定したティシュブロックの中空穴に埋め込み、包埋皿とティシュブロックの間に溶融したパラフィン液を流し込む。これにより、組織とパラフィンとが一体化し、非常にきれいでしっかりしたアレイブロックとなり、良好な切片を容易に作成することが可能となる。また、ホルマリン固定パラフィンブロックをステージの加熱器にて４０℃〜５０℃に加温することにより、パラフィンブロツクが柔らかくなって割れが生じることなくくりぬくことが可能となり、パラフィンブロツクの破損を生じない。これにより、きれいで完全な組織が採取できる。

また、上記請求項２又は３のアレイブロック作成方法によると、手術或いは生検で採取された臓器のホルマリン固定パラフィンブロック又は臓器から臓器組織の目的とする部分をくりぬき、この組織を、包埋皿上に固定したティシュブロックの中空穴に埋め込み、包埋皿とティシュブロックの間に溶融したパラフィン液を流し込む。これにより、組織とパラフィンとが一体化し、非常にきれいでしっかりしたアレイブロックとなり、良好な切片を容易に作成することが可能となる。また、ステージ上に配置した包埋皿とティシュブロックの間に流し込んだパラフィン液を加熱器にて加温することにより、採取した組織とパラフィンをより一体化することができる。

また、上記アレイブロック作成方法において、筒状刃は、３ｍｍ〜７ｍｍ程度の外径としたことにより、比較的に広い範囲の組織が採取可能となり、日常の組織診断用として使用でき、特殊染色や免疫染色の判定も十分にできるし、ｉｎｓｉｔｕｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎやＦＩＳＨ法などの蛍光染色にも応用でき、更に、研究用としても十分に使用できるものが得られる。

また、上記アレイブロック作成方法において、筒状刃で組織をくりぬく際、筒状刃内を真空引きすることにより、組織の抜き取りを確実に行うことができる。

また、上記組織くりぬき装置によると、臓器のおおよそ目的とする部分を容易にくりぬくことができる。また、ステージに固定したホルマリン固定パラフィンブロックを加温する加熱器を備えたから、パラフィンブロツクが柔らかくなって割れが生じることなくくりぬくことが可能となり、パラフィンブロツクの破損を生じない。これにより、きれいで完全な組織を採取することができる。

また、上記組織くりぬき装置において、筒状刃を３ｍｍ〜７ｍｍの外径としたから、比較的に広い範囲の組織を採取でき、日常の組織診断用とすることができ、特殊染色や免疫染色の判定も十分にできるし、ｉｎｓｉｔｕｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎやＦＩＳＨ法などの蛍光染色にも応用でき、更に、研究用にも十分に使用できる組織を得ることができる。

また、上記組織くりぬき装置において、筒状刃を目的とする組織の正確な位置に決定する位置出しピンを備えたことにより、目的とする組織の正確な位置決めができ、組織くりぬき操作が非常に簡略化されるし、短期間で簡単に誰でも使いこなすことが可能となる。

また、上記組織くりぬき装置において、筒状刃に真空引き手段を取り付けたことにより、組織をくりぬく際、確実に抜き取ることが可能となる。

本発明の請求項１のアレイブロック作成方法によると、採取された臓器のホルマリン固定パラフィンブロックから臓器組織の目的とする部分をくりぬいた組織は、包埋皿の上に固定したティシュブロックの中空穴に埋め込み、包埋皿とティシュブロックの間を通してパラフィン液を流し込んで全体にパラフィンで充填させたアレイブロックとし、組織とパラフィンとの一体化を計って充分固まったところで、上記アレイブロックを包埋皿から外してアレイブロックを形成するから、採取した組織とパラフィンが充分に一体化することができ、非常にきれいでしっかりしたアレイブロックを作成することができる。また、ホルマリン固定パラフィンブロックをステージの加熱器にて４０℃〜５０℃に加温するようにしたから、パラフィンブロツクが柔らかくなってくりぬかれ、パラフィンブロツクの破損が殆ど生じない。しかして、きれいで完全な臓器組織が採取できる。

本発明の請求項２のアレイブロック作成方法によると、採取された臓器のホルマリン固定パラフィンブロックから臓器組織の目的とする部分をくりぬいた組織は、包埋皿の上に固定したティシュブロックの中空穴に埋め込み、包埋皿とティシュブロックの間を通してパラフィン液を流し込んで全体にパラフィンで充填させたアレイブロックとし、組織とパラフィンとの一体化を計って充分固まったところで、上記アレイブロックを包埋皿から外してアレイブロックを形成するから、採取した組織とパラフィンが充分に一体化することができ、非常にきれいでしっかりしたアレイブロックを作成することができる。また、上記ステージ上に配置した包埋皿と組織ブロックの間に流し込むパラフィン液を加熱器にて加温するようにしたから、ティシュブロックに筒状刃でくりぬいた検体を挿入した後に、採取した組織とパラフィンが充分に一体化することができ、非常にきれいでしっかりとしたアレイブロックが作成できる。

上記請求項３のアレイブロック作成方法によると、ホルマリン固定後の臓器そのものから臓器組織をくりぬき、くりぬいた臓器組織は、組織包埋器で脱水・脱脂した後、包埋皿の上に固定したティシュブロックの中空穴に埋め込み、包埋皿とティシュブロックの間を通してパラフィン液を流し込んで全体にパラフィンで充填させたアレイブロックとし、組織とパラフィンとの一体化を計って充分固まったところで、上記アレイブロックを包埋皿から外してアレイブロックを形成するから、採取した組織とパラフィンが充分に一体化することができ、非常にきれいでしっかりとしたアレイブロックを作成することができる。また、上記ステージ上に配置した包埋皿と組織ブロックの間に流し込むパラフィン液を加熱器にて加温するようにしたから、ティシュブロックに筒状刃でくりぬいた検体を挿入した後に、採取した組織とパラフィンが充分に一体化することができ、非常にきれいでしっかりとしたアレイブロックが作成できる。

上記請求項４のアレイブロック作成方法によると、上記アレイブロック作成方法において、上記筒状刃は、３ｍｍ〜７ｍｍ程度の外径としたから、比較的に広い範囲の組織が採取可能となり、日常の組織診断用として使用できる。そして、特殊染色や免疫染色の判定も十分にできる上に、ｉｎｓｉｔｕｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎやＦＩＳＨ法などの蛍光染色にも応用でき、更に、研究用としても十分に使用できる。

上記請求項５のアレイブロック作成方法によると、上記アレイブロック作成方法において、筒状刃で組織をくりぬく際、筒状刃内を真空引きすることにより、組織の抜き取りを確実に行うことができる。

上記請求項６の組織くりぬき装置によると、臓器のおおよそ目的とする部分を容易にくりぬくことができる。また、ステージに固定したホルマリン固定パラフィンブロックを加温する加熱器を備えているから、パラフィンブロツクを柔らかくしてくりぬくことができ、パラフィンブロツクの破損を生じさせない。これにより、きれいで完全な臓器組織を採取させることができる。

上記請求項７の組織くりぬき装置によると、上記組織くりぬき装置において、筒状刃を３ｍｍ〜７ｍｍの外径としたから、比較的に広い範囲の組織が採取でき、日常の組織診断用とすることができる。そして、特殊染色や免疫染色の判定も十分にできる上に、ｉｎｓｉｔｕｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎやＦＩＳＨ法などの蛍光染色にも応用でき、更に、研究用にも十分に使用できる。

上記請求項８の組織くりぬき装置によると、上記組織くりぬき装置において、筒状刃を目的とする組織の正確な位置に決定する位置出しピンを備えたから、目的とする組織の正確な位置決めを実行させることができる。これで、組織くりぬき操作が非常に簡略化されるし、短期間で簡単に誰でも使いこなすことが可能となる。しかして、多方面においてコストダウンができ、一般の病理業務での応用範囲も広く使いこなすことができる。

上記請求項９の組織くりぬき装置によると、上記組織くりぬき装置において、筒状刃に真空引き手段を取り付けたことにより、組織をくりぬく際、確実に抜き取ることが可能となる。

以下、図１〜図１５を参照して本発明のアレイブロック作成方法とこれに使用する組織くりぬき装置について説明する。

まず、本発明の組織くりぬき装置１００は、図６に示すように、手術或いは生検で採取された臓器Ｚのホルマリン固定パラフィンブロックＨＰを載置して固定するステージ１２７と、上記臓器Ｚから組織をくりぬく例えば円柱状の筒状刃Ｋと、からなる。上記ステージ１２７は水平方向位置決め機構を備えＸ軸、Ｙ軸方向の位置を操作して臓器Ｚのおおよそ目的とする部分を筒状刃Ｋの先端に移動させる。尚、この水平方向位置決め機構は筒状刃Ｋ側に備えてもよい。本組織くりぬき装置１００の場合は、図１〜図５に示すように、基台１２０に筒状刃Ｋ及び位置出しピンＰ０を交換して保持するホルダ１４５と、このホルダ１４５を昇降させる操作レバー１４３を備える。上記操作手順は、ステージ１２７に載置した臓器Ｚを内存させたホルマリン固定パラフィンブロックＨＰを所定位置に固定する。そして、採取すべき位置は、位置出しピンＰ０により位置決めされる。

続いて、筒状刃Ｋに付け替え、筒状刃Ｋをホルマリン固定パラフィンブロックＨＰ内まで押し下げて、組織ＺをパラフィンブロックＨＰからくりぬく。上記ステージ１２７は、Ｘ軸、Ｙ軸のメモリをずらし臓器組織の目的とする部分に位置出しピンＰ０及び筒状刃Ｋの先端を移動させる回転ハンドル１２３と１２５を装備している。更に、上記ステージ１２７に加熱器１２９Ａを備え、ホルマリン固定パラフィンブロックＨＰを加温する。その温度としては４０℃〜５０℃が好適である。これにより、パラフィンブロツクＨＰを柔らかくしてくりぬくことができ、パラフィンブロツクＨＰの破損を生じない。よって、きれいで完全な臓器組織を採取することができる。尚、加熱器１２９Ａは必須ではなく、常温下で上記のくりぬき作業を行っても良い。

上記筒状刃Ｋとしては、直径３ｍｍ，５ｍｍ，７ｍｍの３種類が用意され、それぞれ所定の大きさの組織Ｚをくりぬく。そして、この３種類の組織Ｚに対応した３種類のティシュブロック（tissue block ）ＴＢ１，ＴＢ２，ＴＢ３が予め用意される。ティシュブロック（組織保持体）は、例えば合成樹脂製の矩形の板状体であり、これに直径３ｍｍ，５ｍｍ，７ｍｍの筒状刃Ｋとほぼ同径の中空穴ｈ１，ｈ２，ｈ３（穴径は、直径７．５ｍｍ，５．５ｍｍ，３．５ｍｍ）が複数穿設されており、これら中空穴に組織Ｚを埋め込むものである。そして、図１２に示すように、その隙間Ｇから流し込んだパラフィンＰＲと一体化を計って埋め込んだ組織ＺをパラフィンをＰＲで固定させたアレイブロックＳＢが作成される。

続いて、図１〜図４を参照して上記組織くりぬき装置１００の構成を詳細に説明する。まず、本装置は、基台１２０の上に、Ｙ軸回転ツマミ１２３で前後方向に移動するＹ軸テーブル台１２４と、Ｘ軸回転ツマミ１２５で左右方向に移動するＸ軸テーブル１２７Ａとからなる水平方向位置決め機構が設けられ、この上にステージ１２７が設けられている。上記Ｘ軸テーブル１２７Ａ上には、加熱器１２９Ａと２つの中間層１２９Ｂと臓器Ｚのホルマリン固定パラフィンブロックＨＰを載置・固定する保持板１２９Ｃとが設けられている。この保持板１２９Ｃの中央位置には、ホルマリン固定パラフィンブロックＨＰを係合させ２つの止めネジＢで固定される凹部の加温体１２９Ｄを備えている。この加温体１２９Ｄの温度は、温度センサＴＳにより検出され、温度コントローラＴＣで加熱器１２９Ａの発熱量を加減して加熱温度を４０〜５０℃に制御される。

上記基台１２０の後部には、支柱１３５が立設されており、この上部には昇降可能なヘッド１３９が係合されていて、ヘッド位置固定ハンドル１４０により任意な高さ位置に固着される。上記ヘッド１３９の右側部には、ハンドルレバー１４３を備えている。このハンドルレバー１４３の操作により、筒状刃Ｋを保持するホルダ体１４５が昇降動される。このホルダ体１４５は、ヘッド１３９内のコイルバネ１４７により上昇方向に付勢され常時上昇位置に保持されている。組織抜き棒Ｐは、図２と図８に示すように、各筒状刃Ｋの直径３ｍｍ，５ｍｍ，７ｍｍに対応した３種類のものＰ１，Ｐ２，Ｐ３を用意しておく。尚、ヘッド１３９の上部には、筒状刃深さストッパ１５５を備え、筒状刃Ｋの昇降ストロークが規制される。

しかして、アレイブロックの作成においては、Ｘ軸、Ｙ軸のメモリをずらすことによりステージ１２７を平面移動させ、臓器組織Ｚのおおよそ目的とする部分に筒状刃Ｋの先端を移動させ、筒状刃Ｋにより臓器組織Ｚをくりぬく。そして、組織抜き棒Ｐによりくりぬいた組織Ｚは、包埋皿１３３の上に固定したティシュブロックＴＢの中空穴ｈ１，ｈ２，ｈ３に埋め込まれる。上記ティシュブロックＴＢは、図９に示すように、例えば、２４検体、１２検体、６検体を埋め込むことができるように３種類用意されている。しかして、図１２に示すように、上記包埋皿１３３とティシュブロックＴＢの間Ｇ、或いはティシュブロックＴＢの両サイドの溝を通して全体にパラフィン液ＰＲを流し込む。これで、組織Ｚとパラフィン液ＰＲとの一体化が計られてパラフィンが固化し、しかる後、ティシュブロックＴＢを包埋皿１３３から外すことにより、アレイブロック（array block）（組織配列体）ＳＢ（ＳＢ１，ＳＢ２，ＳＢ３）が作成されるものである。

尚、上記組織のくりぬき装置１００には、ホルマリン固定パラフィンブロックＨＰをステージ１２７にて４０℃〜５０℃に加温する加熱器１２９Ａを備えるとともに、上記筒状刃Ｋを目的とする組織Ｚの正確な位置に決定する位置出しピンＰ０を備え、更に、上記ステージ１２７上に配置した包埋皿１３３とティシュブロックＴＢの間に流し込むパラフィン液ＰＲを加熱する加熱器１２９Ａを備えている。上記加熱器１２９Ａはステージ１２７上のものを併用することができる。また、上記位置出しピンＰ０は必須ではなく、筒状刃Ｋを目印として組織の任意の位置に位置決めすることも可能である。

また、上記組織のくりぬき装置１００は、図１９，図２０に示すように、筒状刃Ｋに真空引き手段を備えたものとすることもできる。すなわち、上記装置においては、ハンドルレバー１４３を押して、筒状刃Ｋをホルマリン固定パラフィンブロックＨＰ内まで押し下げて、組織ＺをパラフィンブロックＨＰからくりぬくのであるが、組織やパラフィンには格差があり、うまく組織を抜き取れないことが何回かに一回ある。そこで、このような場合は、筒状刃Ｋ内を真空引きする真空引き手段により対応する。真空引き手段は、真空ポンプＶＰを備え、その吸入口にチューブＣＨを取り付け、この先端をホルダ体１４５の孔部を介して筒状刃Ｋの背後に接続し、真空ポンプＶＰのスイッチのオン・オフで筒状刃Ｋ内を真空引きするものである。上記の構成により、ハンドルレバー１４３を押して、筒状刃Ｋをホルマリン固定パラフィンブロックＨＰ内まで押し下げて、組織ＺをパラフィンブロックＨＰからくりぬく際に、組織が取り出せない場合、真空ポンプＶＰを作動させると、筒状刃Ｋ内が負圧となるので、ホルマリン固定パラフィンブロックＨＰ側に付いた組織を吸引して筒状刃Ｋ内に収納し、確実に抜き取ることができる。この真空引き手段は、組織やパラフィンの状態に応じて随時使用することができる。

以下、本発明のアレイブロックの作成方法について、図６〜図１４の工程図及び図１５に示すフローチャート図により説明する。まず、手術或いは生検で採取された臓器Ｚのホルマリン固定パラフィンブロックＨＰを用意する（ステップＳ１）。上記ホルマリン固定パラフィンブロックＨＰはステージ１２７上に固定され、ステージ１２７に付設の加熱器１２９Ａにて４０〜５０℃に加熱される（ステップＳ２）。次に、パラフィンブロックＨＰが暖まったところで、回転ハンドル１２３，１２５にてＸ軸、Ｙ軸のメモリをずらし組織Ｚのおおよそ目的とする部分に筒状刃Ｋの先端を移動させる（ステップＳ３）。更に、このとき、位置出しピンＰによって目的とする組織の正確な位置を決定する（ステップＳ４）。次に、ハンドルレバー１４３を押すことによって、筒状刃Ｋで組織をくりぬく（ステップＳ５）。筒状刃Ｋは、直径３ｍｍ，５ｍｍ，７ｍｍと３種類が用意されており、必要とする組織の大きさに応じて選択する。尚、組織ＺをパラフィンブロックＨＰからくりぬく際に、組織が取り出せない場合、真空ポンプＶＰを作動させ、筒状刃Ｋ内を負圧としてホルマリン固定パラフィンブロックＨＰ側に付いた組織を吸引して筒状刃Ｋ内に収納し、確実に抜き取るものである。次に、上記筒状刃Ｋに対応した組織抜き棒Ｐにて筒状刃Ｋから組織を抜く（ステップＳ６）。

くりぬいた組織Ｚは、包埋皿１３３上に固定したティシュブロックＴＢの中空穴ｈに埋め込む（ステップＳ７）。このティシュブロックＴＢも直径３ｍｍ，５ｍｍ，７ｍｍの組織Ｚをそれぞれ埋め込めるように３種類容易し、選択して使用する。各ブロックは、２４検体、１２検体、６検体を埋め込むことができるように設計されている。次に、包埋皿１３３とティシュブロックＴＢの間から、或いはティシュブロックＴＢの両サイドの溝を通して加熱したパラフィン液ＰＲを流し込んで充填する（ステップＳ８）。この時、パラフィン供給手段２００からパラフィン液ＰＲを充填させ、ステージ１２７に付設の加熱器１２９Ａ上にしばらく置き、組織ＺとパラフィンＰＲとをなじませて一体化を図る（ステップＳ９）。尚、ステージ１２７に付設の加熱器１２９Ａに代えて既存の組織包埋器のステージ上で加熱、冷却を行う場合もある。その後、冷やしたステージ１２７に移し充分固まったところで、アレイブロックＳＢを包埋皿１３３から外す（ステップＳ１０）。以上の工程により、図１３に示すような構成のアレイブロックＳＢを得ることができる。このアレイブロックＳＢは、図１４に示すように、通常のパラフィンブロックと同様にミクロトームで薄切りして切片を形成する。このアレイブロックＳＢは組織ＺがティシュブロックＴＢによって支持されるとともに、パラフィンＰＲと一体化しており、これを薄切りして切片Ｕとしたものは、切片Ｕ内に薄い組織ｚが剥がれずにしっかり保持されたものとなる。

また、本発明のアレイブロックの作成方法においては、ホルマリン固定後の臓器そのものから組織をくり抜いてアレイブロックＳＢを得ることもできる。すなわち、ホルマリン固定後の臓器Ｚを用意する（ステップＳ１１）。そして、この臓器Ｚをステージ１２７上に固定し、筒状刃Ｋにより組織をくりぬく（ステップＳ３）〜（ステップＳ６）。その大きさは、３ｍｍ，５ｍｍ，７ｍｍ径の選択が可能である。これらのくりぬいた組織は、既成の組織包埋器で脱水・脱脂される（ステップＳ１２）。尚、上記脱水・脱脂の操作は必須ではなく、くりぬいた組織をそのまま使用しても良い。この後は、上記の方法と同様にティシュブロックＴＢの中空穴ｈ１に同じように埋め込んで行き、その後は、溶けたパラフィン液ＰＲを流し込み一体化させた後、冷却して固める（ステップＳ７）〜（ステップＳ１０）。このようにして、２４検体、１２検体、６検体と３種類のいずれかのアレイブロックＳＢを作成する。このアレイブロックＳＢは、ミクロトームで薄切りされる。

尚、上記ホルマリン固定後の臓器そのものから組織をくり抜いてアレイブロックＳＢを製造する場合、図１６〜図１８に示すように、くりぬいた組織Ｚの脱水・脱脂工程及び溶けたパラフィン液ＰＲを流し込み一体化させる工程において、組織Ｚが移動しないように固定する上蓋１５７を備えたティシュブロックＴＢを使用する方法もある。上記上蓋１５７は、ティシュブロックＴＢとほぼ同じ大きさの矩形板状をなし、長手方向の両側にはティシュブロックＴＢの両側に設けた係止凸部１５９と嵌合する係止凹部１６１とその外側に延長形成された係止部１６３を有し、また、板状面にはパラフィン液ＰＲの流入を図るため、多数の孔１６４を形成するとともに、その短手方向の両側に長孔１６５を形成したものである。尚、ティシュブロックＴＢの短手方向の両側にも上記長孔１６５と対応する位置に長孔１７１が形成されている。

上記上蓋１５７を備えたティシュブロックＴＢを使用したアレイブロックＳＢの製造方法としては、まず、ホルマリン固定後の臓器そのものからくり抜いた組織Ｚを包埋皿１３３上に固定したティシュブロックＴＢの中空穴ｈに埋め込み、次に、ティシュブロックＴＢ上に上蓋１５７を被せ板状面で組織Ｚを押さえるようにする。そして、係止凹部１６１を係止凸部１５９と嵌合・係止させるとともに、係止部１６３を包埋皿１３３の長手方向の両側上縁に形成した係止部１６７と重ね、両者をクリップ１６９で接合させる。これにより上蓋１５７をティシュブロックＴＢ上に固定し、且つ上蓋１５７とティシュブロックＴＢとを包埋皿１３３に固定することができ、組織Ｚを中空穴ｈ内に動かないように保持することができる。したがって、これを自動包埋器にかけて、アルコール、キシレンによる脱水・脱脂工程と、上蓋１５７とティシュブロックＴＢの両サイドの長孔１６５，１７１や上蓋１５７の板状面の多数の孔１６４を通じて加熱したパラフィン液ＰＲをスムーズに流し込んで充填する工程が連続して直接実施できる。このとき、組織Ｚは上蓋１５７により中空穴ｈ内に動かないように保持されているので、パラフィン液ＰＲの充填時の振動等によって、組織Ｚが動いてしまうような事態を防止することかでき、各組織Ｚが正確に位置決めされた高品質のアレイブロックＳＢを容易且つ確実に製造することができる。

以上本実施の形態によると次のような効果を奏することができる。まず、本発明のアレイブロック作成方法によると、新たに開発したティシュブロックに組織を挿入した後、溶かしたパラフィンを流し込む方法としたから、組織とパラフィンの一体化が良好となり、非常にきれいでしっかりとしたアレイブロックを作成することが可能である。また、固定後の臓器そのものから組織を採取して、同様のアレイブロックが作成できるから、用途の面で応用範囲が非常に広くなった。また、アレイブロックの薄切後の解析には、通常のスライドグラスが使用でき、特殊なスライドグラスや粘着テープ、ＵＶ照射等の必要がない。

また、アレイブロック作成方法において、ホルマリン固定パラフィンブロックＨＰをステージ１２７の加熱器１２９Ａにて４０℃〜５０℃に加温するから、パラフィンブロツクＨＰが柔らかくなってくりぬかれ、パラフィンブロツクの破損が殆ど生じない。これにより、きれいで完全な臓器組織が採取できる。また、筒状刃Ｋで組織をくりぬく際、筒状刃内を真空引きすることにより、組織Ｚの抜き取りを確実に行うことができる。

更に、組織のくりぬき装置１００において、筒状刃Ｋを３ｍｍ〜７ｍｍの外径としたから、比較的に広い範囲の組織Ｚを採取でき、日常の組織診断用とすることができる。そして、特殊染色や免疫染色の判定も十分に出来る上に、ｉｎｓｉｔｕｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎやＦＩＳＨ法などの蛍光染色にも応用でき、更に、研究用にも十分に使用可能である。

更に、組織のくりぬき装置１００において、筒状刃Ｋを目的とする組織の正確な位置に決定する位置出しピンＰ０を備えたから、目的とする組織の正確な位置決めができる。これで、組織くりぬき操作が従来装置よりも、非常に簡略化されるし、短期間で簡単に誰でも使いこなすことが可能となって、多方面においてコストダウンが可能となり一般の病理業務での応用範囲も広く使いこなせる。また、上記組織くりぬき装置１００において、筒状刃Ｋに真空引き手段を取り付けたことにより、組織Ｚをくりぬく際、確実に抜き取ることが可能となる。

また、本発明の組織のくりぬき装置１００によると、機器の操作が従来装置型より高度に簡略化されているため、操作が簡単で短時間に誰でも使いこなせる。

また、本発明のアレイブロックＳＢによると、一枚のスライドグラスに多数の検体をのせて診断できるので、一般の病理業務用及び研究用としても従来配列のように、一臓器一切片での診断に対し、全てのランニングコストを１／１０〜１／２０に抑えることができる。

また、上記のように３種類のアレイブロックＳＢは、各々２４，１２，６検体が埋め込まれているため、一度の染色にて同時に２４検体、１２検体、６検体の診断解析が可能である。

また、上記アレイブロックＳＢによると、通常のへマトキシリンーエオジン（ＨＥ）染色以外に特殊染色や高価な抗体を使う必要のある免疫染色にも使用でき、大幅なコストダウンが可能である。

更に、上記アレイブロックＳＢによると、研究用として、ｉｎｓｉｔｕｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎによる染色やＦＩＳＨ法を用いた蛍光染色による癌などの染色体・遺伝子解析も一度に多数の解析が可能であり、更なるコストダウンが可能である。

また、上記アレイブロックＳＢによると、多数の異なる臓器を載せて、特殊な抗体やプローブで染色すると、コントロールスライドとして使用することもできる。

更に、上記アレイブロックＳＢによると、病理解剖などでは、マクロでおおよその見たい臓器の一部をトリミングした後、目的とする部分を、このくりぬき装置で採取し、一度に多数の検体を診断できる。各臓器の病変部をわずか数枚のスライドで診断できるので、従来装置のように、一臓器一切片のスライドが必要なくスライドグラスやカバーグラス、試薬のコストダウンにもつながる。

また、上記ティシュブロックＴＢによると、くりぬいた組織を中空穴を利用して配列された状態で、しかも先端側が包埋皿側に突出するように埋め込むことが可能となり、これと包埋皿の間にパラフィン液を流し込んで充填・固化させることにより配列した組織とパラフィンとを一体化させたアレイブロックＳＢを容易に効率良く製造することができる。

尚、本発明は、上記実施形態に限定されない。例えば、組織くりぬき装置は、上記一実施形態に限定されない。具体的には、筒状刃の外径やその形状及びこれに対応するティシュブロックにおける中空穴の外径や形状、配列個数は任意である。また、ステージのＸ，Ｙ軸の送りハンドルを手動式・自動式の何れかの方式にすることについても任意である。更に、上記各実施の形態内で説明した各部材の詳細構成についてもその設計の変更が可能である。また、アレイブロック作成方法についても、その要旨を変更しない範囲でその作成工程の変更が可能である。

本発明の第１実施形態を示し、組織のくりぬき装置の正面図である。本発明の第１実施形態を示し、組織のくりぬき装置の右側図である。本発明の第１実施形態を示し、組織のくりぬき装置の左側面図である。本発明の第１実施形態を示し、水平方向位置決め機構の斜視図である。位置出しピンの正面図と筒状刃の一部切欠断面図である。ステージ上のホルマリン固定パラフィンブロックの斜視図である。組織をくりぬいた筒状刃の一部切欠断面図である。筒状刃内の組織を抜き出す状態を示す斜視図である。ティッシュブロックの正面図である。包埋皿へのティッシュブロックの装着状態を示す斜視図である。ティッシュブロックの中空穴への組織の挿入を示す断面図である。包埋皿とティッシュブロック間へのパラフィン液の充填を示す断面図である。各アレイブロックを完成させた状態を示す正面図である。アレイブロックと薄切りした切片の斜視図である。アレイブロックの作成方法を示すフローチャート図である。包埋皿とティッシュブロックと上蓋の位置関係を示す斜視図である。包埋皿へのティッシュブロック及び上蓋の装着状態を示す斜視図である。包埋皿とティッシュブロック間及び上蓋へのパラフィン液の充填を示す断面図である。組織のくりぬき装置の右側面図である。組織のくりぬき装置の腰部を拡大して示す断面図である。

符号の説明

ＳＢ（ＳＢ１，ＳＢ２，ＳＢ３）アレイブロック
Ｇ隙間
ＨＰホルマリン固定パラフィンブロック
Ｋ（Ｋ１，Ｋ２，Ｋ３）筒状刃
ＰＲパラフィン
Ｐ０位置出しピン
Ｐ（Ｐ１，Ｐ２，Ｐ３）組織抜き棒
ｈ（ｈ１，ｈ２，ｈ３）中空穴
ＴＳ温度センサ
ＴＣ温度コントローラ
ＴＢ（ＴＢ１，ＴＢ２，ＴＢ３）ティシュブロック
Ｚ，ｚ組織（臓器）
Ｕ切片
１００組織くりぬき装置
１２０基台
１２３Ｙ軸回転ツマミ
１２５Ｘ軸回転ツマミ
１２７ステージ
１２９基板
１２９Ａ加熱器
１２９Ｃ保持板
１２９Ｄ加温体
１３３包埋皿
１３５支柱
１３９ヘッド
１４０ヘッド位置固定ハンドル
１４３組織抜きハンドル
１４９保持筒
１４９Ａ保持穴
１５０抜き刃固定ネジ
１５３ホルダ締めハンドル
２００パラフィン供給手段
ＶＰ真空ポンプ
ＣＨチューブ

Claims

臓器のホルマリン固定パラフィンブロックをステージに固定し、上記ホルマリン固定パラフィンブロックをステージの加熱器にて４０℃〜５０℃に加温し、臓器の目的とする部分に筒状刃の先端を移動して合わせ、該筒状刃で上記組織をくりぬき、続いて、組織抜き棒にて筒状刃から組織を抜き、予め上記筒状刃とほぼ同径の中空穴を複数形成したティシュブロックを用意しておき、くりぬいた組織を包埋皿上に配置したティシュブロックの中空穴に先端側が包埋皿側に突出するように埋め込み、包埋皿とティシュブロックの間にパラフィン液を流し込んで充填・固化させることにより組織とパラフィンとを一体化させるようにしたことを特徴とするアレイブロック作成方法。
臓器のホルマリン固定パラフィンブロックをステージに固定し、臓器の目的とする部分に筒状刃の先端を移動して合わせ、該筒状刃で上記組織をくりぬき、続いて、組織抜き棒にて筒状刃から組織を抜き、予め上記筒状刃とほぼ同径の中空穴を複数形成したティシュブロックを用意しておき、くりぬいた組織を包埋皿上に配置したティシュブロックの中空穴に先端側が包埋皿側に突出するように埋め込み、包埋皿とティシュブロックの間にパラフィン液を流し込み、パラフィン液を加熱器にて加温することにより、組織とパラフィンとを一体化させて充填・固化させるようにしたことを特徴とするアレイブロック作成方法。
ホルマリン固定後の臓器をステージに固定し、臓器の目的とする部分に筒状刃の先端を移動して合わせ、該筒状刃で上記組織をくりぬき、続いて、組織抜き棒にて筒状刃から組織を抜き、予め上記筒状刃とほぼ同径の中空穴を複数形成したティシュブロックを用意しておき、くりぬいた組織を包埋皿上に固定したティシュブロックの中空穴に先端側が包埋皿側に突出するように埋め込み、包埋皿とティシュブロックの間にパラフィン液を流し込み、パラフィン液を加熱器にて加温することにより、組織とパラフィンとを一体化させて充填・固化させるようにしたことを特徴とするアレイブロック作成方法。
筒状刃は、３ｍｍ〜７ｍｍの外径としたことを特徴とする請求項１〜３のうちいずれか１項記載のアレイブロック作成方法。
筒状刃で組織をくりぬく際、筒状刃内を真空引きすることを特徴とする請求項１〜４のうちいずれか１項記載のアレイブロック作成方法。
基台と、上記基台に取り付けられ昇降操作機構により組織をくりぬく筒状刃と、上記基台に取り付けられ臓器のホルマリン固定パラフィンブロックを固定するとともに水平方向位置決め機構によりＸ軸、Ｙ軸方向の位置を操作して臓器のおおよそ目的とする部分を筒状刃の先端に移動させるステージと、上記ステージに備えられホルマリン固定パラフィンブロックを加温する加熱器と、を具備したことを特徴とする組織くりぬき装置。
筒状刃は３ｍｍ〜７ｍｍの外径としたことを特徴とする請求項６記載の組織くりぬき装置。
基台に筒状刃と選択的に取り付けられ目的とする組織の正確な位置を決定する位置出しピンを備えたことを特徴とする請求項６〜７のうちいずれか１項記載の組織くりぬき装置。
筒状刃に真空引き手段を取り付けたことを特徴とする請求項６〜８のうちいずれか１項記載の組織くりぬき装置。