JP3742434B2 - I型コラーゲンの架橋結合されたn−テロペプチドの合成ペプチド同族体 - Google Patents
I型コラーゲンの架橋結合されたn−テロペプチドの合成ペプチド同族体 Download PDFInfo
- Publication number
- JP3742434B2 JP3742434B2 JP53507796A JP53507796A JP3742434B2 JP 3742434 B2 JP3742434 B2 JP 3742434B2 JP 53507796 A JP53507796 A JP 53507796A JP 53507796 A JP53507796 A JP 53507796A JP 3742434 B2 JP3742434 B2 JP 3742434B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- sequence
- type
- seq
- xaa
- information
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Lifetime
Links
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 title claims description 135
- 108010049937 collagen type I trimeric cross-linked peptide Proteins 0.000 title description 6
- 108010022452 Collagen Type I Proteins 0.000 title description 2
- 102000012422 Collagen Type I Human genes 0.000 title description 2
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 claims description 161
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 160
- ODHCTXKNWHHXJC-VKHMYHEASA-N 5-oxo-L-proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCC(=O)N1 ODHCTXKNWHHXJC-VKHMYHEASA-N 0.000 claims description 118
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 claims description 23
- 125000003396 thiol group Chemical group [H]S* 0.000 claims description 17
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 claims description 13
- XVOYSCVBGLVSOL-UHFFFAOYSA-N cysteic acid Chemical compound OC(=O)C(N)CS(O)(=O)=O XVOYSCVBGLVSOL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 13
- OYIFNHCXNCRBQI-UHFFFAOYSA-N 2-aminoadipic acid Chemical compound OC(=O)C(N)CCCC(O)=O OYIFNHCXNCRBQI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- 235000008206 alpha-amino acids Nutrition 0.000 claims description 12
- XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N L-Cysteine Chemical compound SC[C@H](N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N 0.000 claims description 11
- 229940079889 pyrrolidonecarboxylic acid Drugs 0.000 claims description 9
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 claims description 8
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 claims description 8
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 claims description 8
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 7
- 150000001370 alpha-amino acid derivatives Chemical class 0.000 claims description 5
- FFFHZYDWPBMWHY-VKHMYHEASA-N L-homocysteine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCS FFFHZYDWPBMWHY-VKHMYHEASA-N 0.000 claims description 4
- 239000000539 dimer Substances 0.000 claims description 3
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 claims description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 2
- 150000003573 thiols Chemical class 0.000 claims description 2
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 74
- ODHCTXKNWHHXJC-GSVOUGTGSA-N Pyroglutamic acid Natural products OC(=O)[C@H]1CCC(=O)N1 ODHCTXKNWHHXJC-GSVOUGTGSA-N 0.000 description 72
- ODHCTXKNWHHXJC-UHFFFAOYSA-N acide pyroglutamique Natural products OC(=O)C1CCC(=O)N1 ODHCTXKNWHHXJC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 72
- BEBCJVAWIBVWNZ-UHFFFAOYSA-N glycinamide Chemical compound NCC(N)=O BEBCJVAWIBVWNZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 67
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 24
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 9
- SNDPXSYFESPGGJ-UHFFFAOYSA-N 2-aminopentanoic acid Chemical compound CCCC(N)C(O)=O SNDPXSYFESPGGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 150000001371 alpha-amino acids Chemical class 0.000 description 7
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 6
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical group C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 description 5
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 description 5
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 description 5
- -1 His Chemical group 0.000 description 5
- SNDPXSYFESPGGJ-BYPYZUCNSA-N L-2-aminopentanoic acid Chemical compound CCC[C@H](N)C(O)=O SNDPXSYFESPGGJ-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 5
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 5
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 description 5
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 5
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 5
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 4
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 4
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 4
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 4
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 4
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 4
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 4
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 3
- 125000000291 glutamic acid group Chemical group N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)* 0.000 description 3
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 3
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 3
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 3
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 2
- 208000006386 Bone Resorption Diseases 0.000 description 2
- SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N Glutaraldehyde Chemical compound O=CCCCC=O SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 description 2
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 2
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 2
- 230000008033 biological extinction Effects 0.000 description 2
- 230000024279 bone resorption Effects 0.000 description 2
- PMMYEEVYMWASQN-UHFFFAOYSA-N dl-hydroxyproline Natural products OC1C[NH2+]C(C([O-])=O)C1 PMMYEEVYMWASQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 2
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 2
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000004408 hybridoma Anatomy 0.000 description 2
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 2
- 239000002198 insoluble material Substances 0.000 description 2
- 239000004816 latex Substances 0.000 description 2
- 229920000126 latex Polymers 0.000 description 2
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 2
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 2
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 2
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CNMAQBJBWQQZFZ-LURJTMIESA-N (2s)-2-(pyridin-2-ylamino)propanoic acid Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC1=CC=CC=N1 CNMAQBJBWQQZFZ-LURJTMIESA-N 0.000 description 1
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 1
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 1
- 108090001008 Avidin Proteins 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- BWGNESOTFCXPMA-UHFFFAOYSA-N Dihydrogen disulfide Chemical compound SS BWGNESOTFCXPMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- PMMYEEVYMWASQN-DMTCNVIQSA-N Hydroxyproline Chemical group O[C@H]1CN[C@H](C(O)=O)C1 PMMYEEVYMWASQN-DMTCNVIQSA-N 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 241000237536 Mytilus edulis Species 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical group C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- LSNNMFCWUKXFEE-UHFFFAOYSA-N Sulfurous acid Chemical compound OS(O)=O LSNNMFCWUKXFEE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010008038 Synthetic Vaccines Proteins 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 1
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012472 biological sample Substances 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 1
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 1
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 1
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 1
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 238000004891 communication Methods 0.000 description 1
- 239000002131 composite material Substances 0.000 description 1
- 239000013256 coordination polymer Substances 0.000 description 1
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 108060003552 hemocyanin Proteins 0.000 description 1
- WGBBUURBHXLGFM-UHFFFAOYSA-N hexan-2-amine Chemical compound CCCCC(C)N WGBBUURBHXLGFM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 1
- 229960002591 hydroxyproline Drugs 0.000 description 1
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000026045 iodination Effects 0.000 description 1
- 238000006192 iodination reaction Methods 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 238000000034 method Methods 0.000 description 1
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 235000020638 mussel Nutrition 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- NMHMNPHRMNGLLB-UHFFFAOYSA-N phloretic acid Chemical compound OC(=O)CCC1=CC=C(O)C=C1 NMHMNPHRMNGLLB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000002467 phosphate group Chemical group [H]OP(=O)(O[H])O[*] 0.000 description 1
- NYCVCXMSZNOGDH-UHFFFAOYSA-N pyrrolidine-1-carboxylic acid Chemical compound OC(=O)N1CCCC1 NYCVCXMSZNOGDH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 238000004007 reversed phase HPLC Methods 0.000 description 1
- 238000007363 ring formation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 238000012795 verification Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/78—Connective tissue peptides, e.g. collagen, elastin, laminin, fibronectin, vitronectin or cold insoluble globulin [CIG]
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Description
本発明は免疫検定法に関しており、そして■型コラーゲンの天然の架橋結合されたアミノ−末端テロペプチドの免疫活性同族体として作用する合成ペプチドを提供する。
発明の背景
■型コラーゲンの架橋結合されたN−テロペプチド(NTx)は尿中に骨吸収過程の最終生成物として排泄される。これらの代謝物質は、例えばハイブリドーマ1H11(ATTC No.HB 10611)により産生されるモノクローナル抗体(mAb)1H11を使用して、免疫検定により測定して骨吸収活性の正確で且つ特異的な指標を与えることができる。mAb 1H11により認識されるエピトープは、コラーゲンα2(■)N−テロペプチド配列Gln−Tyr−Asp−Gly−K−Gly−Val−Gly(ここでKは架橋結合で具現される)をα1(■)またはα2(■)からの結合された第二テロペプチドと一緒に含む、排泄された架橋結合されたN−テロペプチドの形態で具現される。尿中に排泄される主な架橋結合されたNTx代謝物質を以下に示す:
そしてGlnはグルタミン(Q)または完全に環化されたピロリドンカルボン酸(5−オキソ−2−ピロリジンカルボン酸、すなわちピログルタミン酸)(J)である)。
人のα1(■)またはα2(■)N−テロペプチド配列に適合するように合成され、そしてKが単にリシンである線状ペプチド類はmAb 1H11によりそれぞれ認識されないかまたは非常に弱くしか認識されない。WO 91/08478、Hanson et al., Journal of Bone and Mineral Research, 7(11):1251-1258, 1992.
mAb 1H11を産生するハイブリドーマ セルラインは1990年11月20日に米国、20852、メリーランド州、ロックヴィル、パークローン・ドライブ、12301のアメリカン・タイプ・カルチャー・コレクション(ATCC)に寄託番号HB 10611で寄託された。
発明の要約
本発明では、我々はmAb 1H11に対する強い結合を示す合成ペプチド類を記載する。本発明のペプチド類は、Gln−Tyr−Xaa−Gly−Xaa−Gly−Val−Gly(ここで、Glnはピロリドンカルボン酸であり、ここで位置2における基XaaはAsp、Glu、または負に荷電された側鎖(R基)を有する他のα−アミノ酸であり、そして位置5にある基Xaaの構造はペプチドがmAb 1H11に結合するように架橋結合されたNTx構造および化学的性質の特徴に類似するものである)により表される。第一の態様では、位置5にあるXaaはAsp、Glu、および他の負に荷電されたアミノ酸類から選択される。第二の態様では、位置5におけるXaaはPro、Nva(ノルバリン)、Trp、His、およびmAb 1H11に対する必要な結合度を与える性質の似ている置換基から選択される。第三の態様では、位置5にあるXaaはチオール基を有しており、その場合にはペプチド類がシステイン架橋を介して二量化していてもよい。第四の態様では、位置5にあるXaaは担体分子または不溶性物質と結合しているアミノ基またはチオール基を有する。架橋結合されたNTxエピトープのこれらの分子類似物は、一般的には免疫検定標準、固相コーテイング抗原、免疫原、および生物学的サンプル中でNTxを測定するための他の結合分子構造として使用するために合成される。
好適態様の詳細な説明
本発明は架橋結合されたNTx中でmAb 1H11により認識されるエピトープに類似する合成線状ペプチド類を提供する。本発明のペプチド類は、一般式Gln−Tyr−Xaa−Gly−Xaa−Gly−Val−Gly(ここで、Glnはピロリドンカルボン酸であり、位置3における基Xaaは負に荷電されており、そして位置5にある基Xaaの構造はペプチドがmAb 1H11に結合する程度まで架橋結合されたNTx構造および化学的性質に類似するものである)により表される。SEQ ID NO:1−59により指定されている代表的なペプチド類が、mAb 1H11に対するそれらの相対的な結合親和力と共に以下の表に示されている。
合成されたα2(■)N−テロペプチド配列Gln−Tyr−Asp−Gly−Lys−Gly−Val−Gly(SEQ ID NO:9)がmAb 1H11に対する非常に弱い結合パートナーであるという知見から出発して、ある種のアミノ酸類がリシン(Lys)を置換している一連のペプチド類が合成された。位置5における正に荷電されたLys基が負に荷電された側鎖を有するアミノ酸類、特にグルタミン酸(Glu)(SEQ ID NO:4)およびそれより少ない程度であるがアスパラギン酸(Asp)(SEQ ID NO:3および31)で置換される時に、mAb 1H11に対する結合力の改善は特に顕著であった。例えば、ペプチドGln−Tyr−Asp−Gly−Glu−Gly−Val−Gly(Glnがピログルタミン酸であるように合成された)は架橋結合されたNTx抗原の結合親和力に匹敵するmAb 1H11に対する結合親和力を有していた。NTx(尿または骨に由来する)およびGln−Tyr−Asp−Gly−Glu−Gly−Val−Glyに関するmAb 1H11抑制曲線は本質的に平行であり、合成ペプチドが天然エピトープに類似していることを示している。本発明の当該合成ペプチド類のこのような好適な態様は、架橋結合されたNTx代謝物(上記のもの)が抗体抑制検定で結合するのと実質的に等モル程度までmAb 1H11と結合する。
利用できるデータは、コア配列Gln−Tyr−Asp−Gly−Glu−Gly−Val−GlyがmAb 1H11により認識されるエピトープを発現するのに要求されるサイズを表すことを示唆している。N−末端Gln−をGly−Gly−で置換すること(SEQ ID NO:41)または−Lysまたは−Gly−Lys−LeuをC−末端に加えること(SEQ ID NO:40および42)がmAb 1H11結合を妨害する。
コア配列中の個々のアミノ酸類が、mAb 1H11エピトープ結合に対して必須であると考えられる程度は、下記の通りである。N−末端Gln(位置1)が環化された形態、すなわちピロリジンカルボン酸(J)、である時には、コラーゲン鎖中で天然に生じるようにmAb 1H11に対する結合が生じる。該コア配列は、位置1におけるピロリドンカルボン酸を用いて最初に位置1にGluを有するコア配列を配列させ、その後にペプチドをオートクレーブ処理することにより、製造することができる。オートクレーブ処理はGluのピロリドンカルボン酸への環化を引き起こす。
位置2におけるTyrのヨウ素化またはPheでの置換(SEQ ID NO:36)は、mAb 1H11結合を妨害するため、位置2におけるTyr基が必須の要件である。
位置3におけるAsp基も、この位置における負の荷電を排除した置換基がmAb 1H11結合を妨害するので、重要であると考えられる(人以外の動物種からの修飾した構造のNTxを用いた結合試験に基づく)。しかしながら、位置3におけるAspはGlu(SEQ ID NO:30)または負に荷電されたR基を有する他のα−アミノ酸基により置換されていてもよい。
位置4におけるGly基は、この位置における性質の似ているVal(SEQ ID NO:37)やAla(SEQ ID NO:27)の置換によってmAb 1H11結合親和力が実質的に失われることから、重要である。
位置6および8におけるGly基は、これらの位置におけるAla、Val、Leu、Pro、およびCysを含む種々の置換基がmAb 1H11結合親和力の損失をもたらすため、同等に重要である。(SEQ ID NO:28、35、46、49、52、54、および56参照)。
位置7におけるVal基は、例えばLeu(SEQ ID NO:29)またはIle(SEQ ID NO:55)のような性質の似ている他の疎水性置換基による置換によってmAb 1H11の要求される結合が失われることから、重要である。
従って、本発明の第一の態様ではGln−Tyr−Xaa−Gly−Xaa−Gly−Val−Gly(SEQ ID NO:60)、(ここで、Glnはピロリドンカルボン酸であり、位置3における基Xaaは負に荷電されたアミノ酸基であり、そして位置5における基Xaaも負に荷電されたR基を有するアミノ酸基である)を含んでなるmAb 1H11と結合するペプチドを提供する。負に荷電されたR基を有する好適なアミノ酸はGlu、Asp、並びに負に荷電されたR基、例えばカルボキシル、サルフェート、またはホスフェート基、を有する他の天然および合成α−アミノ酸類である。代表例には、α−アミノアジピン酸(SEQ ID NO:34)およびシステイン酸(SEQ ID NO:26)が包含される。
第二の態様では、位置5にあるXaa基がPro、Trp、Nva、およびHis(SEQ ID NO:61)または要求されるmAb 1H11結合度を与えるそれらに性質の似ている置換基から選択される。非極性R基を有する代表的なアミノ酸類には、Pro(SEQ ID NO:13)、Trp(SEQ ID NO:19)、ノルバリン(SEQ ID NO:38)、並びに例えばAla、Ile、Leu、Met、Phe、Pro、Trp、およびValを特徴づける非極性R基を有する他の天然および合成α−アミノ酸類が包含される。
位置5におけるHisの置換(SEQ ID NO:7)は、さらに制限された1H11結合度を与えた。正に荷電されたR基を有する他の天然および合成α−アミノ酸類は、本開示に従い簡便に合成および試験することができる。
極性であるが荷電されていないR基を有する試験したアミノ酸類の中では、位置5におけるCys(SEQ ID NO:2)がmAb 1H11に対する優れた結合を与えた。例えばAsn、Cys、Gln、Gly、Ser、Thr、およびTyrを特徴づける極性であるが荷電されていないR基を有する、他の天然および合成α−アミノ酸類も適すると考えられる。代表例には、ピリジニルアラニン(SEQ ID NO:62)(ベーケム)およびR基がピリジン環を有する他のα−アミノ酸類が包含される。システインおよび他のチオールを有するα−アミノ酸類が、mAb 1H11結合度に関して特に好適な態様である。
したがって、第三の態様では、本発明はGln−Tyr−Xaa−Gly−Xaa−Gly−Val−Gly(SEQ ID NO:63)(ここで、Glnはピロリドンカルボン酸であり、位置3におけるXaaは負に荷電されたアミノ酸基であり、そして位置5におけるXaaはチオール基を有するα−アミノ酸である)を含んでなるmAb 1H11と結合するペプチドを提供する。代表例にはシステイン(SEQ ID NO:2)、ホモシステイン(SEQ ID NO:64)、およびRの炭素数が0−3である関連基が包含される。大気酸素の存在下では、このペプチドは下記の如きNTxエピトープに類似するジスルフィド結合した二量体を形成する:
位置5における基Xaaの各々は、チオール基を有する側鎖(R)を有する同一もしくは相異なるα−アミノ酸であってよい。
第四の態様では、尿NTx中で具現される天然エピトープは、合成ペプチドGln−Tyr−Xaa−Gly−Xaa−Gly−Val−Gly(SEQ ID NO:65)を溶質または不溶性物質に結合させることにより模倣される。ここで、Glnおよび位置3におけるXaaは先に定義されている通りであり、そして位置5におけるXaaは側鎖アミノ基またはチオール基を有するα−アミノ酸である。例えば、位置5におけるXaaはイプシロンアミノ基を有するリシン(SEQ ID NO:9)であってよく、その場合には溶質または不溶性物質に対する結合は、例えば標準的工程を使用しグルタルアルデヒドによりアミノ基を介したものである。この目的のための代表的なXaa基は、リシンおよびシステイン(SEQ ID NO:2)であり、そして例えば牛血清アルブミンに対する結合用の代表的な結合剤は、それぞれグルタルアルデヒドおよびm−マレイミドベンゾイル−N−ヒドロキシスクシンイミドエステル(MBS)である。溶質は水溶液中に溶解した分子物質を意味する。この目的のための代表的な溶質には、蛋白質、例えばスカシガイのヘモシアニン(KLH)、アルブミン、並びに酵素、ペプチド類、例えばGln−Tyr−Asp−Gly−Cys−Gly−Val−Gly(またはGln−Tyr−Asp−Gly−Lys−Gly−Val−Gly)、並びに他の可溶性分子、例えばビオチン、アビジン、並びに蛍光および化学蛍光団が包含される。代表的な不溶性分子にはラテックス粒子、浸漬棒、マイクロタイターウェル、および不均質免疫検定で使用される他の基材が包含される。上記の標準的結合剤により、例えばKLHに結合されると、Gln−Tyr−Asp−Gly−Lys−Gly−Val−GlyペプチドのmAb 1H11に対する抗体−結合親和力は約50倍増加して、天然エピトープの結合親和力に近付く。そのような結合物は、溶液中で競合抗原として使用され、または例えばマイクロタイタープレートキット中のウェルやラテックスまたは自動測定システム中の他の粒子を被覆する固体表面用のコーテイング剤として使用することができる。
従って、本発明のこの第四の態様は、
(ここで、Glnはピロリドンカルボン酸であり、位置3におけるXaaは負に荷電されたアミノ酸基であり、位置5におけるXaaはアミノ基またはチオール基を有するアミノ酸基であり、そしてRはアミノ基またはチオール基を介して位置5における基Xaaと結合されている溶質または不溶性物質である)
を含んでなるmAb 1H11と結合する結合ペプチドを提供する。
実施例
合成ペプチド類のmAb 1H11との結合試験
本発明の合成ペプチド類は、例えばA. P. Glorr, et al., Synthesis Notes, Novabiochem Catalog and Peptide Synthesis Handbook, La Jolla, CA, pp. S1-S5, 1994-1995にまとめられているような当技術分野で既知の方法により製造される。下記の実験のためには、合成ペプチド類は外部の販売業者から購入したか、または自社でライニン・インスツルメント・カンパニー(マサチュセッツ州、ウォバーン)製のSymphony/Multiplex(商標)複合ペプチド合成器を使用して製造した。
10%以下のペプチド類を純度に関して試験した。試験したものは、逆相HPLCによると80%以上の純度であることが判明した。
製造されたペプチド類のほとんどは、単一の芳香族アミノ酸であるチロシンを有する。我々はチロシンの280ナノメートルにおける吸光係数を合成ペプチド類の吸光係数と同じであると仮定した。ペプチド類が別の芳香族基を有する場合には、吸光係数に関する理論的調整を行った。
一般的に、1mL当たり1ミリグラムのペプチド溶液をPBSで調製した。A280における吸収を読み取りそして濃度を確認した。ペプチドを次に例えばOSTEOMARK(商標)カリブレーター希釈剤(OSTEOMARK検定、ワシントン州、シアトルのオステックス・インターナショナル)のような緩衝液でペプチドを希釈した。操作強度濃度は1ミリリットル当たり10〜0.01マイクログラムの間であった。
mAb 1H11に対する合成ペプチド類の見掛け親和力を試験するために、OSTEOMARK検定をOSTEOMARKキットおよびモノクローナル抗体1H11を含む成分を使用して行った。OSTEOMARKカリブレーターを使用して標準曲線を作成した。ペプチドサンプルを一般的には1mL当たり10、3、1、および0.01μGまでにおいて試験した。標準OSTEOMARK曲線を4パラメーター理論曲線適合プログラム(ニューヨーク州、ニューヨークのメドデータ・インコーポレーテッド)を使用して作成した。ペプチド値を標準曲線に逆適合させ、そして測定値をピコモル骨コラーゲン当量(BCE)/mL(これはナノモルBCE、すなわちnM BCEに等しい)で報告した。1H11と競合した全てのペプチド類が線状の応答を示したわけではないので、0.5〜1光学濃度単位の測定値を採用しそして平均した。
調製しそして試験した代表的なペプチド類を下記の表に示す。この表中の値は、一定のペプチドのマイクログラムに等しいBCEのナノモル数として報告されている。500nモルBCEより低い抗体結合値は商業的に意味がないと考えられた。
1mAb 1H11と結合するペプチドは下記の単位で表示されている:1μg合成ペプチド=XnモルBCE、ここでXは表中の値である。比較用に、天然配列JYDGKGVG(SEQ ID NO:9)はこの検定で100の値を示した。
2X=システイン酸(2−アミノ−3−スルホプロパン酸)。すなわち、ジスルフィド架橋を妨害するノルマルメルカプト(−SH)基を置換した亜硫酸塩(−SO3 -2)基を有するシステイン。
3配列EYDGEGVGは1H11によって認識されない。ここでは、位置1にあるグルタミン酸をピログルタミン酸に転化させる条件下でこのペプチドをオートクレーブ処理することにより、1H11結合における実質的な増加が生じた。従って、N末端ピログルタミン酸はエピトープの一部である。
4X=リシンの側鎖アミノ基が負に荷電されたカルボキシル基により置換されているα−アミノアジピン酸(2−アミノヘキサン二酸化)。
5X=ノルバリン。
6X=G−NH2。位置8にあるGly基のカルボキシル基は通常は露呈されている(ペプチド結合中でない)。ここでは、アミノ基がカルボキシル基に付加され(1,2−ジアミノアセトアルデヒドを形成し)、それが認識を妨害する。従って、遊離カルボキシル基はエピトープの一部であると考えられる。
7X=4−ヒドロキシプロリン。
8nd=測定されなかった。
9X=ビオチン化されたリシン(K)。
10X=ビオチン化されたシステイン(C)。
要約すると、本発明は免疫化学的に例えばmAb 1H11により認識される架橋結合された人の骨および尿のNTxの複合エピトープに類似する合成ペプチド類を提供する。これらの合成ペプチド類を使用すると免疫検定キットおよび他の商業用フォーマットの製造が簡素化され、例えば米国特許第5,212,064号および第5,362,625号(マイクロジェニックス・コーポレーション)に開示されているような、均質免疫検定システム並びに他の自動化検定システム中での使用のための再現性のあるカリブレーションスタンダードおよび新規な合成抗原調合物を提供することができる。当該合成ペプチド類の免疫検定標準、固相コーテイング抗原、免疫原、および免疫検定用の他の結合分子構造としてのそのような使用は、Principles and Practice of Immunoassay, C. P. Price及びD. J. Newman (Eds.), Stockton Press, NY, 1991に開示されているような、当技術分野の専門家が入手できる一般的な情報に従う。
本発明の好適な態様を説明しそして記載してきたが、本発明の精神および範囲から逸脱せずに種々の変更を行えることは認識されよう。
配列表
(1)一般情報
(i)出願人:エア・ディビッド・R
クレメンス・J・ダニエル
オックス・ビンセント・W
(ii)発明の名称:NTxの合成ペプチド同族体
(iii)配列の数:74
(iv)通信住所:
(A)受信人:クリステンセン・オコノール・ジョンソン・アンド・カインドネスPLLC
(B)街路:1420、フィフス・アベニュー、スイート 2800
(C)市:シアトル
(D)州:ワシントン
(E)国:米国
(F)郵便番号:98101
(v)コンピューター読み取り形式
(A)媒体タイプ:フロッピーディスク
(B)コンピューター:IBM PC 互換性
(C)操作システム:PC−DOS/MS−DOS
(D)ソフトウエア:パテントイン・レリース#1.0、バージョン#1.30
(vi)本出願のデータ:
(A)出願番号:
(B)出願日:
(C)分類:
(vii)先行出願のデータ:
(A)出願番号:08/446,206
(B)出願日:1995年5月19日
(viii)弁理士/代理人情報:
(A)氏名:シェルトン・デニス・K
(B)登録番号:26,997
(C)照合/整理番号:WROS19489
(xi)遠距離通信情報:
(A)電話:206 224 0718
(B)テレファックス:206 224 0779
(2)SEQ ID NO:1に関する情報:
(i)配列特性:
(A)長さ:8個のアミノ酸
(B)型:アミノ酸
(C)鎖の数:
(D)トポロジー:直鎖状
(ii)配列の種類:ペプチド
(v)フラグメント型:N−末端
(ix)配列の特徴:
(A)名称/キー:雑種タイプ
(B)位置:1
(D)他の情報:Xaaはピログルタミン酸である
(xi)配列:SEQ ID NO:1:
(2)SEQ ID NO:2に関する情報:
(i)配列特性:
(A)長さ:8個のアミノ酸
(B)型:アミノ酸
(C)鎖の数:
(D)トポロジー:直鎖状
(ii)配列の種類:ペプチド
(v)フラグメント型:N−末端
(ix)配列の特徴:
(A)名称/キー:雑種タイプ
(B)位置:1
(D)他の情報:Xaaはピログルタミン酸である
(xi)配列:SEQ ID NO:2:
(2)SEQ ID NO:3に関する情報:
(i)配列特性:
(A)長さ:8個のアミノ酸
(B)型:アミノ酸
(C)鎖の数:
(D)トポロジー:直鎖状
(ii)配列の種類:ペプチド
(v)フラグメント型:N−末端
(ix)配列の特徴:
(A)名称/キー:雑種タイプ
(B)位置:1
(D)他の情報:Xaaはピログルタミン酸である
(xi)配列:SEQ ID NO:3:
(2)SEQ ID NO:4に関する情報:
(i)配列特性:
(A)長さ:8個のアミノ酸
(B)型:アミノ酸
(C)鎖の数:
(D)トポロジー:直鎖状
(ii)配列の種類:ペプチド
(v)フラグメント型:N−末端
(ix)配列の特徴:
(A)名称/キー:雑種タイプ
(B)位置:1
(D)他の情報:Xaaはピログルタミン酸である
(xi)配列:SEQ ID NO:4:
(2)SEQ ID NO:5に関する情報:
(i)配列特性:
(A)長さ:8個のアミノ酸
(B)型:アミノ酸
(C)鎖の数:
(D)トポロジー:直鎖状
(ii)配列の種類:ペプチド
(v)フラグメント型:N−末端
(ix)配列の特徴:
(A)名称/キー:雑種タイプ
(B)位置:1
(D)他の情報:Xaaはピログルタミン酸である
(xi)配列:SEQ ID NO:5:
(2)SEQ ID NO:6に関する情報:
(i)配列特性:
(A)長さ:8個のアミノ酸
(B)型:アミノ酸
(C)鎖の数:
(D)トポロジー:直鎖状
(ii)配列の種類:ペプチド
(v)フラグメント型:N−末端
(ix)配列の特徴:
(A)名称/キー:雑種タイプ
(B)位置:1
(D)他の情報:Xaaはピログルタミン酸である
(xi)配列:SEQ ID NO:6:
(2)SEQ ID NO:7に関する情報:
(i)配列特性:
(A)長さ:8個のアミノ酸
(B)型:アミノ酸
(C)鎖の数:
(D)トポロジー:直鎖状
(ii)配列の種類:ペプチド
(v)フラグメント型:N−末端
(ix)配列の特徴:
(A)名称/キー:雑種タイプ
(B)位置:1
(D)他の情報:Xaaはピログルタミン酸である
(xi)配列:SEQ ID NO:7:
(2)SEQ ID NO:8に関する情報:
(i)配列特性:
(A)長さ:8個のアミノ酸
(B)型:アミノ酸
(C)鎖の数:
(D)トポロジー:直鎖状
(ii)配列の種類:ペプチド
(v)フラグメント型:N−末端
(ix)配列の特徴:
(A)名称/キー:雑種タイプ
(B)位置:1
(D)他の情報:Xaaはピログルタミン酸である
(xi)配列:SEQ ID NO:8:
(2)SEQ ID NO:9に関する情報:
(i)配列特性:
(A)長さ:8個のアミノ酸
(B)型:アミノ酸
(C)鎖の数:
(D)トポロジー:直鎖状
(ii)配列の種類:ペプチド
(v)フラグメント型:N−末端
(ix)配列の特徴:
(A)名称/キー:雑種タイプ
(B)位置:1
(D)他の情報:Xaaはピログルタミン酸である
/註=“アルファ2(■)■型コラーゲン”
(xi)配列:SEQ ID NO:9:
(2)SEQ ID NO:10に関する情報:
(i)配列特性:
(A)長さ:8個のアミノ酸
(B)型:アミノ酸
(C)鎖の数:
(D)トポロジー:直鎖状
(ii)配列の種類:ペプチド
(v)フラグメント型:N−末端
(ix)配列の特徴:
(A)名称/キー:雑種タイプ
(B)位置:1
(D)他の情報:Xaaはピログルタミン酸である
(xi)配列:SEQ ID NO:10:
(2)SEQ ID NO:11に関する情報:
(i)配列特性:
(A)長さ:8個のアミノ酸
(B)型:アミノ酸
(C)鎖の数:
(D)トポロジー:直鎖状
(ii)配列の種類:ペプチド
(v)フラグメント型:N−末端
(ix)配列の特徴:
(A)名称/キー:雑種タイプ
(B)位置:1
(D)他の情報:Xaaはピログルタミン酸である
(xi)配列:SEQ ID NO:11:
(2)SEQ ID NO:12に関する情報:
(i)配列特性:
(A)長さ:8個のアミノ酸
(B)型:アミノ酸
(C)鎖の数:
(D)トポロジー:直鎖状
(ii)配列の種類:ペプチド
(v)フラグメント型:N−末端
(ix)配列の特徴:
(A)名称/キー:雑種タイプ
(B)位置:1
(D)他の情報:Xaaはピログルタミン酸である
(xi)配列:SEQ ID NO:12:
(2)SEQ ID NO:13に関する情報:
(i)配列特性:
(A)長さ:8個のアミノ酸
(B)型:アミノ酸
(C)鎖の数:
(D)トポロジー:直鎖状
(ii)配列の種類:ペプチド
(v)フラグメント型:N−末端
(ix)配列の特徴:
(A)名称/キー:雑種タイプ
(B)位置:1
(D)他の情報:Xaaはピログルタミン酸である
(xi)配列:SEQ ID NO:13:
(2)SEQ ID NO:14に関する情報:
(i)配列特性:
(A)長さ:8個のアミノ酸
(B)型:アミノ酸
(C)鎖の数:
(D)トポロジー:直鎖状
(ii)配列の種類:ペプチド
(v)フラグメント型:N−末端
(ix)配列の特徴:
(A)名称/キー:雑種タイプ
(B)位置:1
(D)他の情報:Xaaはピログルタミン酸である
(xi)配列:SEQ ID NO:14:
(2)SEQ ID NO:15に関する情報:
(i)配列特性:
(A)長さ:8個のアミノ酸
(B)型:アミノ酸
(C)鎖の数:
(D)トポロジー:直鎖状
(ii)配列の種類:ペプチド
(v)フラグメント型:N−末端
(ix)配列の特徴:
(A)名称/キー:雑種タイプ
(B)位置:1
(D)他の情報:Xaaはピログルタミン酸である
(xi)配列:SEQ ID NO:15:
(2)SEQ ID NO:16に関する情報:
(i)配列特性:
(A)長さ:8個のアミノ酸
(B)型:アミノ酸
(C)鎖の数:
(D)トポロジー:直鎖状
(ii)配列の種類:ペプチド
(v)フラグメント型:N−末端
(ix)配列の特徴:
(A)名称/キー:雑種タイプ
(B)位置:1
(D)他の情報:Xaaはピログルタミン酸である
(xi)配列:SEQ ID NO:16:
(2)SEQ ID NO:17に関する情報:
(i)配列特性:
(A)長さ:8個のアミノ酸
(B)型:アミノ酸
(C)鎖の数:
(D)トポロジー:直鎖状
(ii)配列の種類:ペプチド
(v)フラグメント型:N−末端
(ix)配列の特徴:
(A)名称/キー:雑種タイプ
(B)位置:1
(D)他の情報:Xaaはピログルタミン酸である
(xi)配列:SEQ ID NO:17:
(2)SEQ ID NO:18に関する情報:
(i)配列特性:
(A)長さ:8個のアミノ酸
(B)型:アミノ酸
(C)鎖の数:
(D)トポロジー:直鎖状
(ii)配列の種類:ペプチド
(v)フラグメント型:N−末端
(ix)配列の特徴:
(A)名称/キー:雑種タイプ
(B)位置:1
(D)他の情報:Xaaはピログルタミン酸である
(xi)配列:SEQ ID NO:18:
(2)SEQ ID NO:19に関する情報:
(i)配列特性:
(A)長さ:8個のアミノ酸
(B)型:アミノ酸
(C)鎖の数:
(D)トポロジー:直鎖状
(ii)配列の種類:ペプチド
(v)フラグメント型:N−末端
(ix)配列の特徴:
(A)名称/キー:雑種タイプ
(B)位置:1
(D)他の情報:Xaaはピログルタミン酸である
(xi)配列:SEQ ID NO:19:
(2)SEQ ID NO:20に関する情報:
(i)配列特性:
(A)長さ:8個のアミノ酸
(B)型:アミノ酸
(C)鎖の数:
(D)トポロジー:直鎖状
(ii)配列の種類:ペプチド
(v)フラグメント型:N−末端
(ix)配列の特徴:
(A)名称/キー:雑種タイプ
(B)位置:1
(D)他の情報:Xaaはピログルタミン酸である
(xi)配列:SEQ ID NO:20:
(2)SEQ ID NO:21に関する情報:
(i)配列特性:
(A)長さ:8個のアミノ酸
(B)型:アミノ酸
(C)鎖の数:
(D)トポロジー:直鎖状
(ii)配列の種類:ペプチド
(v)フラグメント型:N−末端
(ix)配列の特徴:
(A)名称/キー:雑種タイプ
(B)位置:1
(D)他の情報:Xaaはピログルタミン酸である
(xi)配列:SEQ ID NO:21:
(2)SEQ ID NO:22に関する情報:
(i)配列特性:
(A)長さ:8個のアミノ酸
(B)型:アミノ酸
(C)鎖の数:
(D)トポロジー:直鎖状
(ii)配列の種類:ペプチド
(v)フラグメント型:N−末端
(ix)配列の特徴:
(A)名称/キー:雑種タイプ
(B)位置:1
(D)他の情報:Xaaはピログルタミン酸である
(xi)配列:SEQ ID NO:22:
(2)SEQ ID NO:23に関する情報:
(i)配列特性:
(A)長さ:7個のアミノ酸
(B)型:アミノ酸
(C)鎖の数:
(D)トポロジー:直鎖状
(ii)配列の種類:ペプチド
(v)フラグメント型:N−末端
(ix)配列の特徴:
(A)名称/キー:雑種タイプ
(B)位置:1
(D)他の情報:Xaaはピログルタミン酸である
(xi)配列:SEQ ID NO:23:
(2)SEQ ID NO:24に関する情報:
(i)配列特性:
(A)長さ:5個のアミノ酸
(B)型:アミノ酸
(C)鎖の数:
(D)トポロジー:直鎖状
(ii)配列の種類:ペプチド
(v)フラグメント型:N−末端
(ix)配列の特徴:
(A)名称/キー:雑種タイプ
(B)位置:1
(D)他の情報:Xaaはピログルタミン酸である
(xi)配列:SEQ ID NO:24:
(2)SEQ ID NO:25に関する情報:
(i)配列特性:
(A)長さ:6個のアミノ酸
(B)型:アミノ酸
(C)鎖の数:
(D)トポロジー:直鎖状
(ii)配列の種類:ペプチド
(v)フラグメント型:N−末端
(ix)配列の特徴:
(A)名称/キー:雑種タイプ
(B)位置:1
(D)他の情報:Xaaはピログルタミン酸である
(xi)配列:SEQ ID NO:25:
(2)SEQ ID NO:26に関する情報:
(i)配列特性:
(A)長さ:8個のアミノ酸
(B)型:アミノ酸
(C)鎖の数:
(D)トポロジー:直鎖状
(ii)配列の種類:ペプチド
(v)フラグメント型:N−末端
(ix)配列の特徴:
(A)名称/キー:雑種タイプ
(B)位置:1,5..6
(D)他の情報:位置1のXaaはピログルタミン酸である
(ix)配列の特徴:
(A)名称/キー:雑種タイプ
(B)位置:5
(D)他の情報:位置5のXaaはシステイン酸である
(xi)配列:SEQ ID NO:26:
(2)SEQ ID NO:27に関する情報:
(i)配列特性:
(A)長さ:8個のアミノ酸
(B)型:アミノ酸
(C)鎖の数:
(D)トポロジー:直鎖状
(ii)配列の種類:ペプチド
(v)フラグメント型:N−末端
(ix)配列の特徴:
(A)名称/キー:雑種タイプ
(B)位置:1
(D)他の情報:Xaaはピログルタミン酸である
(xi)配列:SEQ ID NO:27:
(2)SEQ ID NO:28に関する情報:
(i)配列特性:
(A)長さ:8個のアミノ酸
(B)型:アミノ酸
(C)鎖の数:
(D)トポロジー:直鎖状
(ii)配列の種類:ペプチド
(v)フラグメント型:N−末端
(ix)配列の特徴:
(A)名称/キー:雑種タイプ
(B)位置:1
(D)他の情報:Xaaはピログルタミン酸である
(xi)配列:SEQ ID NO:28:
(2)SEQ ID NO:29に関する情報:
(i)配列特性:
(A)長さ:8個のアミノ酸
(B)型:アミノ酸
(C)鎖の数:
(D)トポロジー:直鎖状
(ii)配列の種類:ペプチド
(v)フラグメント型:N−末端
(ix)配列の特徴:
(A)名称/キー:雑種タイプ
(B)位置:1
(D)他の情報:Xaaはピログルタミン酸である
(xi)配列:SEQ ID NO:29:
(2)SEQ ID NO:30に関する情報:
(i)配列特性:
(A)長さ:8個のアミノ酸
(B)型:アミノ酸
(C)鎖の数:
(D)トポロジー:直鎖状
(ii)配列の種類:ペプチド
(v)フラグメント型:N−末端
(ix)配列の特徴:
(A)名称/キー:雑種タイプ
(B)位置:1
(D)他の情報:Xaaはピログルタミン酸である
(xi)配列:SEQ ID NO:30:
(2)SEQ ID NO:31に関する情報:
(i)配列特性:
(A)長さ:8個のアミノ酸
(B)型:アミノ酸
(C)鎖の数:
(D)トポロジー:直鎖状
(ii)配列の種類:ペプチド
(v)フラグメント型:N−末端
(ix)配列の特徴:
(A)名称/キー:雑種タイプ
(B)位置:1
(D)他の情報:Xaaはピログルタミン酸である
(xi)配列:SEQ ID NO:31:
(2)SEQ ID NO:32に関する情報:
(i)配列特性:
(A)長さ:8個のアミノ酸
(B)型:アミノ酸
(C)鎖の数:
(D)トポロジー:直鎖状
(ii)配列の種類:ペプチド
(v)フラグメント型:N−末端
(ix)配列の特徴:
(A)名称/キー:雑種タイプ
(B)位置:1
(D)他の情報:Xaaはピログルタミン酸である
(xi)配列:SEQ ID NO:32:
(2)SEQ ID NO:33に関する情報:
(i)配列特性:
(A)長さ:8個のアミノ酸
(B)型:アミノ酸
(C)鎖の数:
(D)トポロジー:直鎖状
(ii)配列の種類:ペプチド
(v)フラグメント型:N−末端
(ix)配列の特徴:
(A)名称/キー:雑種タイプ
(B)位置:1
(D)他の情報:Xaaは(ペプチドのオートクレーブ処理により)ピログルタミン酸に転化されたGluである
(xi)配列:SEQ ID NO:33:
(2)SEQ ID NO:34に関する情報:
(i)配列特性:
(A)長さ:8個のアミノ酸
(B)型:アミノ酸
(C)鎖の数:
(D)トポロジー:直鎖状
(ii)配列の種類:ペプチド
(v)フラグメント型:N−末端
(ix)配列の特徴:
(A)名称/キー:雑種タイプ
(B)位置:1
(D)他の情報:Xaaはピログルタミン酸である
(ix)配列の特徴:
(A)名称/キー:雑種タイプ
(B)位置:5
(D)他の情報:Xaaは2−アミノアジピン酸である
(xi)配列:SEQ ID NO:34:
(2)SEQ ID NO:35に関する情報:
(i)配列特性:
(A)長さ:8個のアミノ酸
(B)型:アミノ酸
(C)鎖の数:
(D)トポロジー:直鎖状
(ii)配列の種類:ペプチド
(v)フラグメント型:N−末端
(ix)配列の特徴:
(A)名称/キー:雑種タイプ
(B)位置:1
(D)他の情報:Xaaはピログルタミン酸である
(xi)配列:SEQ ID NO:35:
(2)SEQ ID NO:36に関する情報:
(i)配列特性:
(A)長さ:8個のアミノ酸
(B)型:アミノ酸
(C)鎖の数:
(D)トポロジー:直鎖状
(ii)配列の種類:ペプチド
(v)フラグメント型:N−末端
(ix)配列の特徴:
(A)名称/キー:雑種タイプ
(B)位置:1
(D)他の情報:Xaaはピログルタミン酸である
(xi)配列:SEQ ID NO:36:
(2)SEQ ID NO:37に関する情報:
(i)配列特性:
(A)長さ:8個のアミノ酸
(B)型:アミノ酸
(C)鎖の数:
(D)トポロジー:直鎖状
(ii)配列の種類:ペプチド
(v)フラグメント型:N−末端
(ix)配列の特徴:
(A)名称/キー:雑種タイプ
(B)位置:1
(D)他の情報:Xaaはピログルタミン酸である
(xi)配列:SEQ ID NO:37:
(2)SEQ ID NO:38する情報:
(i)配列特性:
(A)長さ:8個のアミノ酸
(B)型:アミノ酸
(C)鎖の数:
(D)トポロジー:直鎖状
(ii)配列の種類:ペプチド
(v)フラグメント型:N−末端
(ix)配列の特徴:
(A)名称/キー:雑種タイプ
(B)位置:1
(D)他の情報:Xaaはピログルタミン酸である
(ix)配列の特徴:
(A)名称/キー:雑種タイプ
(B)位置:5
(D)他の情報:Valはノルバリンである
(xi)配列:SEQ ID NO:38:
(2)SEQ ID NO:39に関する情報:
(i)配列特性:
(A)長さ:8個のアミノ酸
(B)型:アミノ酸
(C)鎖の数:
(D)トポロジー:直鎖状
(ii)配列の種類:ペプチド
(v)フラグメント型:N−末端
(ix)配列の特徴:
(A)名称/キー:雑種タイプ
(B)位置:1
(D)他の情報:Xaaはピログルタミン酸である
(xi)配列:SEQ ID NO:39:
(2)SEQ ID NO:40に関する情報:
(i)配列特性:
(A)長さ:9個のアミノ酸
(B)型:アミノ酸
(C)鎖の数:
(D)トポロジー:直鎖状
(ii)配列の種類:ペプチド
(v)フラグメント型:N−末端
(ix)配列の特徴:
(A)名称/キー:雑種タイプ
(B)位置:1
(D)他の情報:Xaaはピログルタミン酸である
(xi)配列:SEQ ID NO:40:
(2)SEQ ID NO:41に関する情報:
(i)配列特性:
(A)長さ:9個のアミノ酸
(B)型:アミノ酸
(C)鎖の数:
(D)トポロジー:直鎖状
(ii)配列の種類:ペプチド
(v)フラグメント型:N−末端
(xi)配列:SEQ ID NO:41:
(2)SEQ ID NO:42に関する情報:
(i)配列特性:
(A)長さ:11個のアミノ酸
(B)型:アミノ酸
(C)鎖の数:
(D)トポロジー:直鎖状
(ii)配列の種類:ペプチド
(v)フラグメント型:N−末端
(ix)配列の特徴:
(A)名称/キー:雑種タイプ
(B)位置:1
(D)他の情報:Xaaはピログルタミン酸である
(xi)配列:SEQ ID NO:42:
(2)SEQ ID NO:43に関する情報:
(i)配列特性:
(A)長さ:8個のアミノ酸
(B)型:アミノ酸
(C)鎖の数:
(D)トポロジー:直鎖状
(ii)配列の種類:ペプチド
(v)フラグメント型:N−末端
(xi)配列:SEQ ID NO:43:
(2)SEQ ID NO:44に関する情報:
(i)配列特性:
(A)長さ:8個のアミノ酸
(B)型:アミノ酸
(C)鎖の数:
(D)トポロジー:直鎖状
(ii)配列の種類:ペプチド
(v)フラグメント型:N−末端
(ix)配列の特徴:
(A)名称/キー:雑種タイプ
(B)位置:1
(D)他の情報:Xaaはピログルタミン酸である
(ix)配列の特徴:
(A)名称/キー:雑種タイプ
(B)位置:8
(D)他の情報:Xaaは1,2−ジアミノアセトアルデヒドである
(xi)配列:SEQ ID NO:44:
(2)SEQ ID NO:45に関する情報:
(i)配列特性:
(A)長さ:8個のアミノ酸
(B)型:アミノ酸
(C)鎖の数:
(D)トポロジー:直鎖状
(ii)配列の種類:ペプチド
(v)フラグメント型:N−末端
(xi)配列:SEQ ID NO:45:
(2)SEQ ID NO:46に関する情報:
(i)配列特性:
(A)長さ:8個のアミノ酸
(B)型:アミノ酸
(C)鎖の数:
(D)トポロジー:直鎖状
(ii)配列の種類:ペプチド
(v)フラグメント型:N−末端
(ix)配列の特徴:
(A)名称/キー:雑種タイプ
(B)位置:1
(D)他の情報:Xaaはピログルタミン酸である
(xi)配列:SEQ ID NO:46:
(2)SEQ ID NO:47に関する情報:
(i)配列特性:
(A)長さ:8個のアミノ酸
(B)型:アミノ酸
(C)鎖の数:
(D)トポロジー:直鎖状
(ii)配列の種類:ペプチド
(v)フラグメント型:N−末端
(ix)配列の特徴:
(A)名称/キー:雑種タイプ
(B)位置:1
(D)他の情報:Xaaはピログルタミン酸である
(xi)配列:SEQ ID NO:47:
(2)SEQ ID NO:48に関する情報:
(i)配列特性:
(A)長さ:8個のアミノ酸
(B)型:アミノ酸
(C)鎖の数:
(D)トポロジー:直鎖状
(ii)配列の種類:ペプチド
(v)フラグメント型:N−末端
(ix)配列の特徴:
(A)名称/キー:雑種タイプ
(B)位置:1
(D)他の情報:Xaaはピログルタミン酸である
(xi)配列:SEQ ID NO:48:
(2)SEQ ID NO:49に関する情報:
(i)配列特性:
(A)長さ:8個のアミノ酸
(B)型:アミノ酸
(C)鎖の数:
(D)トポロジー:直鎖状
(ii)配列の種類:ペプチド
(v)フラグメント型:N−末端
(ix)配列の特徴:
(A)名称/キー:雑種タイプ
(B)位置:1
(D)他の情報:Xaaはピログルタミン酸である
(xi)配列:SEQ ID NO:49:
(2)SEQ ID NO:50に関する情報:
(i)配列特性:
(A)長さ:8個のアミノ酸
(B)型:アミノ酸
(C)鎖の数:
(D)トポロジー:直鎖状
(ii)配列の種類:ペプチド
(v)フラグメント型:N−末端
(xi)配列:SEQ ID NO:50:
(2)SEQ ID NO:51に関する情報:
(i)配列特性:
(A)長さ:8個のアミノ酸
(B)型:アミノ酸
(C)鎖の数:
(D)トポロジー:直鎖状
(ii)配列の種類:ペプチド
(v)フラグメント型:N−末端
(xi)配列:SEQ ID NO:51:
(2)SEQ ID NO:52に関する情報:
(i)配列特性:
(A)長さ:8個のアミノ酸
(B)型:アミノ酸
(C)鎖の数:
(D)トポロジー:直鎖状
(ii)配列の種類:ペプチド
(v)フラグメント型:N−末端
(ix)配列の特徴:
(A)名称/キー:雑種タイプ
(B)位置:1
(D)他の情報:Xaaはピログルタミン酸である
(xi)配列:SEQ ID NO:52:
(2)SEQ ID NO:53に関する情報:
(i)配列特性:
(A)長さ:8個のアミノ酸
(B)型:アミノ酸
(C)鎖の数:
(D)トポロジー:直鎖状
(ii)配列の種類:ペプチド
(v)フラグメント型:N−末端
(ix)配列の特徴:
(A)名称/キー:雑種タイプ
(B)位置:1
(D)他の情報:Xaaはピログルタミン酸である
(xi)配列:SEQ ID NO:53:
(2)SEQ ID NO:54に関する情報:
(i)配列特性:
(A)長さ:8個のアミノ酸
(B)型:アミノ酸
(C)鎖の数:
(D)トポロジー:直鎖状
(ii)配列の種類:ペプチド
(v)フラグメント型:N−末端
(ix)配列の特徴:
(A)名称/キー:雑種タイプ
(B)位置:1
(D)他の情報:Xaaはピログルタミン酸である
(xi)配列:SEQ ID NO:54:
(2)SEQ ID NO:55に関する情報:
(i)配列特性:
(A)長さ:8個のアミノ酸
(B)型:アミノ酸
(C)鎖の数:
(D)トポロジー:直鎖状
(ii)配列の種類:ペプチド
(v)フラグメント型:N−末端
(ix)配列の特徴:
(A)名称/キー:雑種タイプ
(B)位置:1
(D)他の情報:Xaaはピログルタミン酸である
(xi)配列:SEQ ID NO:55:
(2)SEQ ID NO:56に関する情報:
(i)配列特性:
(A)長さ:8個のアミノ酸
(B)型:アミノ酸
(C)鎖の数:
(D)トポロジー:直鎖状
(ii)配列の種類:ペプチド
(v)フラグメント型:N−末端
(ix)配列の特徴:
(A)名称/キー:雑種タイプ
(B)位置:1
(D)他の情報:Xaaはピログルタミン酸である
(xi)配列:SEQ ID NO:56:
(2)SEQ ID NO:57に関する情報:
(i)配列特性:
(A)長さ:8個のアミノ酸
(B)型:アミノ酸
(C)鎖の数:
(D)トポロジー:直鎖状
(ii)配列の種類:ペプチド
(v)フラグメント型:N−末端
(ix)配列の特徴:
(A)名称/キー:雑種タイプ
(B)位置:1
(D)他の情報:Xaaは4Hypである
(xi)配列:SEQ ID NO:57:
(2)SEQ ID NO:58に関する情報:
(i)配列特性:
(A)長さ:8個のアミノ酸
(B)型:アミノ酸
(C)鎖の数:
(D)トポロジー:直鎖状
(ii)配列の種類:ペプチド
(v)フラグメント型:N−末端
(ix)配列の特徴:
(A)名称/キー:雑種タイプ
(B)位置:1
(D)他の情報:Xaaはピログルタミン酸である
(ix)配列の特徴:
(A)名称/キー:雑種タイプ
(B)位置:5
(D)他の情報:Xaaはビオチン化Lysである
(xi)配列:SEQ ID NO:58:
(2)SEQ ID NO:59に関する情報:
(i)配列特性:
(A)長さ:8個のアミノ酸
(B)型:アミノ酸
(C)鎖の数:
(D)トポロジー:直鎖状
(ii)配列の種類:ペプチド
(v)フラグメント型:N−末端
(ix)配列の特徴:
(A)名称/キー:雑種タイプ
(B)位置:1
(D)他の情報:Xaaはピログルタミン酸である
(ix)配列の特徴:
(A)名称/キー:雑種タイプ
(B)位置:5
(D)他の情報:Xaaはビオチン化Cysである
(xi)配列:SEQ ID NO:59:
(2)SEQ ID NO:60に関する情報:
(i)配列特性:
(A)長さ:8個のアミノ酸
(B)型:アミノ酸
(C)鎖の数:
(D)トポロジー:直鎖状
(ii)配列の種類:ペプチド
(v)フラグメント型:N−末端
(ix)配列の特徴:
(A)名称/キー:雑種タイプ
(B)位置:1
(D)他の情報:Xaaはピログルタミン酸である
(ix)配列の特徴:
(A)名称/キー:雑種タイプ
(B)位置:3
(D)他の情報:Xaaは負に荷電したアミノ酸残基である
(ix)配列の特徴:
(A)名称/キー:雑種タイプ
(B)位置:5
(D)他の情報:Xaaは負に荷電したアミノ酸残基である
(xi)配列:SEQ ID NO:60:
(2)SEQ ID NO:61に関する情報:
(i)配列特性:
(A)長さ:8個のアミノ酸
(B)型:アミノ酸
(C)鎖の数:
(D)トポロジー:直鎖状
(ii)配列の種類:ペプチド
(v)フラグメント型:N−末端
(ix)配列の特徴:
(A)名称/キー:雑種タイプ
(B)位置:1
(D)他の情報:Xaaはピログルタミン酸である
(ix)配列の特徴:
(A)名称/キー:雑種タイプ
(B)位置:3
(D)他の情報:Xaaは負に荷電したアミノ酸残基である
(ix)配列の特徴:
(A)名称/キー:雑種タイプ
(B)位置:5
(D)他の情報:XaaはPro,Trp,Nva,又はHisである
(xi)配列:SEQ ID NO:61:
(2)SEQ ID NO:62に関する情報:
(i)配列特性:
(A)長さ:8個のアミノ酸
(B)型:アミノ酸
(C)鎖の数:
(D)トポロジー:直鎖状
(ii)配列の種類:ペプチド
(v)フラグメント型:N−末端
(ix)配列の特徴:
(A)名称/キー:雑種タイプ
(B)位置:1
(D)他の情報:Xaaはピログルタミン酸である
(ix)配列の特徴:
(A)名称/キー:雑種タイプ
(B)位置:3
(D)他の情報:Xaaは負に荷電したアミノ酸残基である
(ix)配列の特徴:
(A)名称/キー:雑種タイプ
(B)位置:5
(D)他の情報:Xaaはピリジニルアラニンである
(xi)配列:SEQ ID NO:62:
(2)SEQ ID NO:63に関する情報:
(i)配列特性:
(A)長さ:8個のアミノ酸
(B)型:アミノ酸
(C)鎖の数:
(D)トポロジー:直鎖状
(ii)配列の種類:ペプチド
(v)フラグメント型:N−末端
(ix)配列の特徴:
(A)名称/キー:雑種タイプ
(B)位置:1
(D)他の情報:Xaaはピログルタミン酸である
(ix)配列の特徴:
(A)名称/キー:雑種タイプ
(B)位置:3
(D)他の情報:Xaaは負に荷電したアミノ酸残基である
(ix)配列の特徴:
(A)名称/キー:雑種タイプ
(B)位置:5
(D)他の情報:Xaaはチオール基を有するα−アミノ酸残基である
(xi)配列:SEQ ID NO:63:
(2)SEQ ID NO:64に関する情報:
(i)配列特性:
(A)長さ:8個のアミノ酸
(B)型:アミノ酸
(C)鎖の数:
(D)トポロジー:直鎖状
(ii)配列の種類:ペプチド
(v)フラグメント型:N−末端
(ix)配列の特徴:
(A)名称/キー:雑種タイプ
(B)位置:1
(D)他の情報:Xaaはピログルタミン酸である
(ix)配列の特徴:
(A)名称/キー:雑種タイプ
(B)位置:3
(D)他の情報:Xaaは負に荷電したアミノ酸残基である
(ix)配列の特徴:
(A)名称/キー:雑種タイプ
(B)位置:5
(D)他の情報:Xaaはホモシステインである
(xi)配列:SEQ ID NO:64:
(2)SEQ ID NO:65に関する情報:
(i)配列特性:
(A)長さ:8個のアミノ酸
(B)型:アミノ酸
(C)鎖の数:
(D)トポロジー:直鎖状
(ii)配列の種類:ペプチド
(v)フラグメント型:N−末端
(ix)配列の特徴:
(A)名称/キー:雑種タイプ
(B)位置:1
(D)他の情報:Xaaはピログルタミン酸である
(ix)配列の特徴:
(A)名称/キー:雑種タイプ
(B)位置:3
(D)他の情報:Xaaは負に荷電したアミノ酸残基である
(ix)配列の特徴:
(A)名称/キー:雑種タイプ
(B)位置:5
(D)他の情報:Xaaは側鎖アミノ−又はチオール基を有するα−アミノ酸である
(xi)配列:SEQ ID NO:65:
(2)SEQ ID NO:66に関する情報:
(i)配列特性:
(A)長さ:8個のアミノ酸
(B)型:アミノ酸
(C)鎖の数:
(D)トポロジー:直鎖状
(ii)配列の種類:ペプチド
(v)フラグメント型:N−末端
(ix)配列の特徴:
(A)名称/キー:雑種タイプ
(B)位置:1
(D)他の情報:Xaaはピログルタミン酸である
(ix)配列の特徴:
(A)名称/キー:雑種タイプ
(B)位置:3
(D)他の情報:Xaaは負に荷電したアミノ酸残基である
(ix)配列の特徴:
(A)名称/キー:雑種タイプ
(B)位置:5
(D)他の情報:Xaaはグルタミンである
(xi)配列:SEQ ID NO:66:
(2)SEQ ID NO:67に関する情報:
(i)配列特性:
(A)長さ:8個のアミノ酸
(B)型:アミノ酸
(C)鎖の数:
(D)トポロジー:直鎖状
(ii)配列の種類:ペプチド
(v)フラグメント型:N−末端
(ix)配列の特徴:
(A)名称/キー:雑種タイプ
(B)位置:1
(D)他の情報:Xaaはピログルタミン酸である
(ix)配列の特徴:
(A)名称/キー:雑種タイプ
(B)位置:3
(D)他の情報:Xaaは負に荷電したアミノ酸残基である
(ix)配列の特徴:
(A)名称/キー:雑種タイプ
(B)位置:5
(D)他の情報:Xaaはアスパルギン酸である
(xi)配列:SEQ ID NO:67:
(2)SEQ ID NO:68に関する情報:
(i)配列特性:
(A)長さ:8個のアミノ酸
(B)型:アミノ酸
(C)鎖の数:
(D)トポロジー:直鎖状
(ii)配列の種類:ペプチド
(v)フラグメント型:N−末端
(ix)配列の特徴:
(A)名称/キー:雑種タイプ
(B)位置:1
(D)他の情報:Xaaはピログルタミン酸である
(ix)配列の特徴:
(A)名称/キー:雑種タイプ
(B)位置:3
(D)他の情報:Xaaは負に荷電したアミノ酸残基である
(ix)配列の特徴:
(A)名称/キー:雑種タイプ
(B)位置:5
(D)他の情報:Xaaはシステイン酸である
(xi)配列:SEQ ID NO:68:
(2)SEQ ID NO:69に関する情報:
(i)配列特性:
(A)長さ:8個のアミノ酸
(B)型:アミノ酸
(C)鎖の数:
(D)トポロジー:直鎖状
(ii)配列の種類:ペプチド
(v)フラグメント型:N−末端
(ix)配列の特徴:
(A)名称/キー:雑種タイプ
(B)位置:1
(D)他の情報:Xaaはピログルタミン酸である
(ix)配列の特徴:
(A)名称/キー:雑種タイプ
(B)位置:3
(D)他の情報:Xaaは負に荷電したアミノ酸残基である
(ix)配列の特徴:
(A)名称/キー:雑種タイプ
(B)位置:5
(D)他の情報:Xaaはα−アミノアジピン酸である
(xi)配列:SEQ ID NO:69:
(2)SEQ ID NO:70に関する情報:
(i)配列特性:
(A)長さ:8個のアミノ酸
(B)型:アミノ酸
(C)鎖の数:
(D)トポロジー:直鎖状
(ii)配列の種類:ペプチド
(v)フラグメント型:N−末端
(ix)配列の特徴:
(A)名称/キー:雑種タイプ
(B)位置:1
(D)他の情報:Xaaはピログルタミン酸である
(ix)配列の特徴:
(A)名称/キー:雑種タイプ
(B)位置:3
(D)他の情報:Xaaは負に荷電したアミノ酸残基である
(ix)配列の特徴:
(A)名称/キー:雑種タイプ
(B)位置:5
(D)他の情報:Xaaはプロリンである
(xi)配列:SEQ ID NO:70:
(2)SEQ ID NO:71に関する情報:
(i)配列特性:
(A)長さ:8個のアミノ酸
(B)型:アミノ酸
(C)鎖の数:
(D)トポロジー:直鎖状
(ii)配列の種類:ペプチド
(v)フラグメント型:N−末端
(ix)配列の特徴:
(A)名称/キー:雑種タイプ
(B)位置:1
(D)他の情報:Xaaはピログルタミン酸である
(ix)配列の特徴:
(A)名称/キー:雑種タイプ
(B)位置:3
(D)他の情報:Xaaは負に荷電したアミノ酸残基である
(ix)配列の特徴:
(A)名称/キー:雑種タイプ
(B)位置:5
(D)他の情報:Xaaはトリプトファンである
(xi)配列:SEQ ID NO:71:
(2)SEQ ID NO:72に関する情報:
(i)配列特性:
(A)長さ:8個のアミノ酸
(B)型:アミノ酸
(C)鎖の数:
(D)トポロジー:直鎖状
(ii)配列の種類:ペプチド
(v)フラグメント型:N−末端
(ix)配列の特徴:
(A)名称/キー:雑種タイプ
(B)位置:1
(D)他の情報:Xaaはピログルタミン酸である
(ix)配列の特徴:
(A)名称/キー:雑種タイプ
(B)位置:3
(D)他の情報:Xaaは負に荷電したアミノ酸残基である
(ix)配列の特徴:
(A)名称/キー:雑種タイプ
(B)位置:5
(D)他の情報:Xaaはノルバリンである
(xi)配列:SEQ ID NO:72:
(2)SEQ ID NO:73に関する情報:
(i)配列特性:
(A)長さ:8個のアミノ酸
(B)型:アミノ酸
(C)鎖の数:
(D)トポロジー:直鎖状
(ii)配列の種類:ペプチド
(v)フラグメント型:N−末端
(ix)配列の特徴:
(A)名称/キー:雑種タイプ
(B)位置:1
(D)他の情報:Xaaはピログルタミン酸である
(ix)配列の特徴:
(A)名称/キー:雑種タイプ
(B)位置:3
(D)他の情報:Xaaは負に荷電したアミノ酸残基である
(ix)配列の特徴:
(A)名称/キー:雑種タイプ
(B)位置:5
(D)他の情報:Xaaはヒスチジンである
(xi)配列:SEQ ID NO:73:
(2)SEQ ID NO:74に関する情報:
(i)配列特性:
(A)長さ:8個のアミノ酸
(B)型:アミノ酸
(C)鎖の数:
(D)トポロジー:直鎖状
(ii)配列の種類:ペプチド
(v)フラグメント型:N−末端
(ix)配列の特徴:
(A)名称/キー:雑種タイプ
(B)位置:1
(D)他の情報:Xaaはピログルタミン酸である
(ix)配列の特徴:
(A)名称/キー:雑種タイプ
(B)位置:3
(D)他の情報:Xaaは負に荷電したアミノ酸残基である
(ix)配列の特徴:
(A)名称/キー:雑種タイプ
(B)位置:5
(D)他の情報:Xaaはヒスチジンである
(xi)配列:SEQ ID NO:74:
Claims (12)
- ATTC HB 10611から得られる抗体と結合する次の配列からなるペプチド:
Gln-Tyr-Xaa-Gly-Xaa-Gly-Val-Gly
式中、Glnはピロリドンカルボン酸であり、位置3にあるXaaは負に荷電されたアミノ酸であり、そして位置5にあるXaaは負に荷電されたアミノ酸であるか、またはPro、Trp、Nva、およびHisの中から選択されるか、もしくはチオール基を有するアミノ酸であるか、或いはXaa−Rであり、ここでXaaはアミノ基またはチオール基を有するアミノ酸でありそしてRはXaaとアミノ基またはチオール基を介して結合されている溶質または不溶性物質である。 - 位置3にあるXaaがGlu、Asp、システイン酸、またはα−アミノアジピン酸である、第1項記載のペプチド。
- 位置5にあるXaaが負に荷電されたアミノ酸(SEQ ID NO:60)である、第1項記載のペプチド。
- 位置5にあるXaaがGlu(SEQ ID NO:66)、Asp(SEQ ID NO:67)、システイン酸(SEQ ID NO:68)、またはα−アミノアジピン酸(SEQ ID NO:69)である、第3項記載のペプチド。
- 位置5にあるXaaがPro(SEQ ID NO:70)、Trp(SEQ ID NO:71)、Nva(SEQ ID NO:72)、およびHis(SEQ ID NO:73)である、第1項記載のペプチド。
- 位置5にあるXaaがチオール基を有するα−アミノ酸(SEQ ID NO:63)である、第1項記載のペプチド。
- 位置5にあるXaaがシステイン(SEQ ID NO:74)またはホモシステイン(SEQ ID NO:64)である、第6項記載のペプチド。
- 位置5にある各々のXaaが独立してシステインまたはホモシステインである、第8項記載の二量体ペプチド。
- 溶質が蛋白質またはペプチドである、第10項記載のペプチド。
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US08/446,206 US5750647A (en) | 1995-05-19 | 1995-05-19 | Synthetic peptide analogs of NTx |
US08/446,206 | 1995-05-19 | ||
PCT/US1996/007132 WO1996036645A1 (en) | 1995-05-19 | 1996-05-17 | Synthetic peptide analogs of cross-linked n-telopeptides of type i collagen |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JPH11505804A JPH11505804A (ja) | 1999-05-25 |
JP3742434B2 true JP3742434B2 (ja) | 2006-02-01 |
Family
ID=23771712
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP53507796A Expired - Lifetime JP3742434B2 (ja) | 1995-05-19 | 1996-05-17 | I型コラーゲンの架橋結合されたn−テロペプチドの合成ペプチド同族体 |
Country Status (5)
Country | Link |
---|---|
US (2) | US5750647A (ja) |
EP (1) | EP0827510A1 (ja) |
JP (1) | JP3742434B2 (ja) |
AU (1) | AU5796796A (ja) |
WO (1) | WO1996036645A1 (ja) |
Families Citing this family (14)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
DK104093D0 (da) * | 1993-09-17 | 1993-09-17 | Osteometer A S | Fremgangsmaade til bestemmelse af collagen-fragmenter i legemsvaesker, test-kit og midler til udoevelse af fremgangsmaaden og anvendelse af fremgangsmaaden til diagnosticering af lidelser associeret til collagen-metabolismen |
US6110689A (en) * | 1994-01-21 | 2000-08-29 | Osteometer A/S | Method of assaying collagen fragments in body fluids, a test kit and means for carrying out the method and use of the method to diagnose the presence of disorders associated with the metabolism of collagen |
GB9617616D0 (en) | 1996-08-22 | 1996-10-02 | Osteometer Biotech As | Assaying protein fragments in body fluids |
DE69705423T2 (de) * | 1996-12-09 | 2002-05-16 | Osteometer Biotech As Herlev | Sandwichtest zum nachweis von kollagenfragmenten |
ES2214722T3 (es) * | 1997-07-31 | 2004-09-16 | Metra Biosystems, Inc. | Metodo de ensayo de peptidos de colageno. |
US6348320B1 (en) * | 1998-06-19 | 2002-02-19 | Washington Research Foundation | Cartilage resorption assays measuring type II collagen fragments |
US6255056B1 (en) | 1998-06-19 | 2001-07-03 | Washington Research Foundation | Cartilage resorption assays |
US6916903B2 (en) | 1998-06-19 | 2005-07-12 | Washington Research Foundation | Collagen type III synthetic peptides for collagen resorption assays |
US6602980B1 (en) | 1998-06-19 | 2003-08-05 | Washington Research Foundation | Collagen type III synthetic peptides for collagen resorption assays |
US6197592B1 (en) * | 1999-07-15 | 2001-03-06 | Bio-Rad Laboratories, Inc. | Clinical control materials for detection of bone resorptive markers |
EP1325339A2 (en) * | 2000-10-03 | 2003-07-09 | The Rowett Research Institute | Method of assaying pyrrole-containing biological compounds |
US20050124071A1 (en) * | 2003-09-30 | 2005-06-09 | Kraus Virginia B. | Methods and compositions for diagnosing musculoskeletal, arthritic and joint disorders by biomarker dating |
EA012656B1 (ru) | 2005-05-25 | 2009-12-30 | Аэроджен, Инк. | Вибрационные системы и их применение |
WO2023068248A1 (ja) * | 2021-10-20 | 2023-04-27 | 積水メディカル株式会社 | I型コラーゲン架橋n-テロペプチドの免疫測定方法及び免疫測定キット、並びに抗体又はその抗体断片 |
Family Cites Families (9)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4973666A (en) * | 1987-11-06 | 1990-11-27 | Washington Research Foundation | Peptide fragments containing HP and LP cross-links |
US5300434A (en) * | 1987-11-06 | 1994-04-05 | Washington Research Foundation | Hybridoma cell line producing an antibody to type-I collagen amino-terminal telopeptide |
US5320970A (en) * | 1987-11-06 | 1994-06-14 | Washington Research Foundation | Detection of collagen degradation in vivo |
WO1995004282A1 (de) * | 1993-07-28 | 1995-02-09 | Boehringer Mannheim Gmbh | Immunoassay zum nachweis von kollagen oder kollagenfragmenten |
DE4225038C2 (de) * | 1992-07-29 | 1995-11-30 | Boehringer Mannheim Gmbh | Herstellung und Verwendung von Antikörpern gegen Kollagen |
DK104093D0 (da) * | 1993-09-17 | 1993-09-17 | Osteometer A S | Fremgangsmaade til bestemmelse af collagen-fragmenter i legemsvaesker, test-kit og midler til udoevelse af fremgangsmaaden og anvendelse af fremgangsmaaden til diagnosticering af lidelser associeret til collagen-metabolismen |
EP0787301B1 (en) * | 1994-10-17 | 2001-02-14 | Osteometer Biotech AS | Estimation of the fragmentation pattern of collagen in body fluids and the diagnosis of disorders associated with the metabolism of collagen |
US5629322A (en) * | 1994-11-15 | 1997-05-13 | Merck & Co., Inc. | Cyclic amidine analogs as inhibitors of nitric oxide synthase |
DE59505585D1 (de) * | 1994-12-23 | 1999-05-12 | Roche Diagnostics Gmbh | Antigene und Antikörper zum Nachweis von Kollagen I |
-
1995
- 1995-05-19 US US08/446,206 patent/US5750647A/en not_active Expired - Lifetime
-
1996
- 1996-05-17 JP JP53507796A patent/JP3742434B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1996-05-17 AU AU57967/96A patent/AU5796796A/en not_active Abandoned
- 1996-05-17 WO PCT/US1996/007132 patent/WO1996036645A1/en not_active Application Discontinuation
- 1996-05-17 EP EP96914682A patent/EP0827510A1/en not_active Ceased
-
1997
- 1997-02-26 US US08/807,030 patent/US5817755A/en not_active Expired - Lifetime
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
WO1996036645A1 (en) | 1996-11-21 |
US5750647A (en) | 1998-05-12 |
AU5796796A (en) | 1996-11-29 |
EP0827510A1 (en) | 1998-03-11 |
JPH11505804A (ja) | 1999-05-25 |
US5817755A (en) | 1998-10-06 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP3742434B2 (ja) | I型コラーゲンの架橋結合されたn−テロペプチドの合成ペプチド同族体 | |
Wehland et al. | Amino acid sequence requirements in the epitope recognized by the alpha‐tubulin‐specific rat monoclonal antibody YL 1/2. | |
JP2703116B2 (ja) | コラーゲンまたはコラーゲン断片を検出するためのイムノアッセイ | |
JPH08505149A (ja) | 骨再吸収検定法 | |
AU752227B2 (en) | Collagen-peptide assay method | |
JPS61204135A (ja) | 発癌遺伝子生成物阻害剤 | |
JP3360826B2 (ja) | コラーゲンまたはコラーゲンフラグメントの検出用のイムノアッセイ | |
Birkenberger et al. | Properties of the desmin tail domain: studies using synthetic peptides and antipeptide antibodies. | |
US5225354A (en) | Monoclonal antibodies specific for human glycoalbumin | |
JP2000516721A (ja) | 体液中のd―アミノ酸の測定法 | |
US8013115B1 (en) | Use of stabilised synthetic compounds in immunoassay | |
EP0631586B1 (en) | Amino procollagen 1(i) peptides | |
EP0257421B1 (en) | Antibodies for use in determining human glycoalbumin | |
JP3245052B2 (ja) | I型プロコラーゲンのアミノ末端プロペプチドに対する抗体およびそれを用いるアッセイ法 | |
US20110028409A1 (en) | Detection of anti-ribosomal p protein antibodies by means of synthetic peptides | |
FR2756827A1 (fr) | Composes synthetiques biepitopiques utilisables comme etalons dans les dosages biologiques de la troponine i | |
EP0805821A1 (en) | HUMAN HEART CNBr TROPONIN I ISOFORM AND USE OF SAME | |
US5021551A (en) | Method of enhancing peptide immunogenicity | |
JP2559907B2 (ja) | ヒト・オステオカルシンフラグメントに対する抗体 | |
Yoshitake et al. | Production of monoclonal antibodies with specificity for different epitopes on the human epidermal growth factor molecule | |
Miller et al. | Structure-function relationship of lapemis toxin: a synthetic approach | |
JP2628336B2 (ja) | ブラジキニン誘導体およびその定量 | |
JP2005535573A (ja) | マイコプラズマポリペプチド | |
DAVIS JR | SPECIFICITIES OF ANTIBODIES TO A CARBODIIMIDE AND TO THE AMINO-TERMINUS OF A PLATELET MITOGEN (GROWTH FACTORS, HAPTENS) | |
JPH04152894A (ja) | エンドセリン―3あるいはエンドセリン―3前駆体に対するモノクローナル抗体およびその用途 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20051018 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20051111 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20081118 Year of fee payment: 3 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20091118 Year of fee payment: 4 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20091118 Year of fee payment: 4 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20091118 Year of fee payment: 4 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20101118 Year of fee payment: 5 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20111118 Year of fee payment: 6 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20111118 Year of fee payment: 6 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20121118 Year of fee payment: 7 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20121118 Year of fee payment: 7 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20131118 Year of fee payment: 8 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
EXPY | Cancellation because of completion of term |