JP3507055B2 - 抗酸化剤、真皮線維芽細胞賦活剤及び表皮細胞賦活剤 - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、特定の植物の抽出
物を有効成分とする抗酸化剤および細胞賦活剤に関す
る。さらに、かかる抗酸化剤および細胞賦活剤を有効成
分として含有する老化防止および表皮恒常性回復に有効
な皮膚外用剤に関する。

【０００２】

【従来の技術】加齢や紫外線等の外来ストレスにより生
じるシワ、シミの発生、皮膚弾性の低下といった皮膚の
老化症状には、皮膚真皮の線維芽細胞の機能低下やマト
リックス線維の減少または分解、変性が重要な要因とな
っている。従って、皮膚の老化防止、改善作用を有する
皮膚外用剤を得るため、線維芽細胞の賦活あるいは増殖
促進作用を有する成分や、活性酸素種の消去を目的とし
た抗酸化作用を有する成分に関して検討が行われてい
る。

【０００３】たとえば、線維芽細胞の賦活や増殖促進作
用に関しては、ビワ抽出物（特公平５−１２７２０６号
公報）、α−ヒドロキシ酢酸（特開平５−１１２４２２
号公報）、α−ヒドロキシ酸のステロールエステル（特
開平８−１０４６３２号公報）、６−ベンジルアミノプ
リン（特開平７−２３３０３７号公報）、特定のリボヌ
クレアーゼ（特開平７−３０９７７８号公報）、Ｌ−リ
シル−Ｌ−グリシル−Ｌ−ヒスチジン（特開平７−３１
６１９２号公報）、乳汁由来線維芽細胞増殖因子（特開
平８−１１９８６７号公報）、酸化型コエンザイムＡ
（特開平８−１７５９６１号公報）等が開示されてい
る。また、酸化防止剤に関してはキク科へテロ属（特開
平１１−１８０８８６号公報）などが知られているほ
か、ＢＨＡ（ブチルヒドロキシアニソール）やＢＨＴ
（ブチルヒドロキシトルエン）などの合成抗酸化剤の配
合や天然の抗酸化剤として知られているビタミンＥなど
の配合が考えられる。

【０００４】また、加齢や紫外線等の外来ストレスによ
り、シワ等の老化の兆候のほかに肌荒れが誘発される
が、これは当該ストレスにより表皮の恒常性ぐずれるこ
とが重要な因子と成っていることが知られている。この
問題を解決するために、グリセリントウのポリオール
類、ヒアルロン酸等のムコ多糖類、アミノ酸、有機酸、
尿素、動植物の抽出物等の保湿剤を配合した化粧料が対
症療法的に用いられてきた。

【０００５】しかしながら、上記の効果を有する成分等
の中には、作用効果が不十分であったり、安定性が悪い
などの問題点があり、皮膚外用剤基剤中に含有させた場
合、有効な効果を得るにはかなりの量を含有させなけれ
ばならないものも存在していた。また、好ましくない副
作用や刺激性などを有していたり、製剤安定性に悪影響
を及ぼすものや、臭いや色の点で外用剤に配合しにくい
もの、一定の作用、品質を維持することの困難なものも
多かった。中でも、肌荒れの改善用の成分として知られ
ている成分には、保湿効果が一時的なものが多く、表皮
自体を活性化するものは非常にまれであり、根本的な表
皮の状態の改善効果のある皮膚外用剤、すなわち表皮の
恒常性の回復効果のある皮膚外用剤の開発が望まれてい
た。

【０００６】

【発明が解決しようとする課題】従って、本発明の課題
は、加齢や紫外線等の外来ストレスにより生じるシワ、
シミの発生、皮膚弾性の低下といった皮膚の老化症状や
肌荒れの等の皮膚のさまざまなトラブルに対応する皮膚
外用剤を提供することに有り、その具体的な効果は、抗
老化効果および表皮の恒常性の回復効果である。

【０００７】

【課題を解決するための手段】上記の課題を解決するた
め、本発明者らは、抗酸化効果、真皮線維芽細胞および
表皮細胞の賦活効果を指標として有効な活性化作用のあ
る物質のスクリーニングを行った。その結果、驚くべき
ことにサクラソウ科サクラソウ属の植物の抽出物に顕著
な抗酸化効果、真皮線維芽細胞および表皮細胞賦活効果
があることを見出し、本発明を完成するに至った。

【０００８】すなわち、本発明は、プリムラ・シッキメ
ンシスの抽出物を有効成分とする頭皮を除く皮膚用抗酸
化剤、真皮線維芽細胞賦活剤、表皮細胞賦活剤にかかる
ものである。

【０００９】以下、本発明の構成について詳細に述べ
る。本発明のサクラソウ属植物抽出物に関する技術とし
ては、レシチンとの併用による乳化の安定化技術（特公
平０７−８３３３）や、コウジ酸との併用による美白剤
に関する技術（特開平０７−１７８４６）あるいは、メ
ラニン産生促進剤に関する技術（特開２００１−２９４
５１６）などが既に開示されているが、サクラソウ属植
物抽出物が顕著な抗酸化効果および細胞賦活効果を有す
ることは知られておらず、今回はじめて見出された。ま
た、当該植物抽出物を抗老化皮膚外用剤および／または
表皮恒常性回復用皮膚外用剤に関する技術に関しても、
知られていなかった。

【００１０】

【発明の実施の形態】本発明におけるサクラソウ属（Ｐ
ｒｉｍｕｌａ Ｌ．）の植物としては、プリムラ・シッ
キメンシス（Ｐ．ｓｉｋｋｉｍｅｎｓｉｓ Ｈｏｏｋ．
オウカホウシュン（黄花報春））、プリムラ・ファベリ
（Ｐ．ｆａｂｅｒｉ Ｏｌｉｖ．ガビホウシュン（峨眉
報春））、プリムラ・パテンス（Ｐ．ｐａｔｅｎｓ Ｔ
ｕｒｃｚ．スイナンホウシュン（翠南報春））、プリム
ラ・シノデンティクラタ（Ｐ．ｓｉｎｏｄｅｎｔｉｃｕ
ｌａｔａ Ｂａｌｆ． ｆ．テンホクキュウカホウシュ
ン（てん北球花報春））、プリムラ・ヴィッタータ
（Ｐ．ｖｉｔｔａｔａ Ｂｕｒ． ｅｔ Ｆｒａｎｃ
ｈ．ジョウモンホウシュン（条紋報春））、プリムラ・
カピタータ（Ｐ．ｃａｐｉｔａｔａ Ｈｏｏｋ．ヒマラ
ヤサクラソウ）や、その他、プリムラ・デンティクラタ
（Ｐ．ｄｅｎｔｉｃｕｌａｔａ）、プリムラ・ストゥア
ルティイ（Ｐ．ｓｔｕａｒｔｉｉ）、プリムラ・オブリ
カ（Ｐ．ｏｂｌｉｑａ）、プリムラ・マクロフィラ
（Ｐ．ｍａｃｒｏｐｈｙｌｌａ）、プリムラ・コンキナ
（Ｐ．ｃｏｎｃｉｎｎａ）、プリムラ・ウォラストニイ
（Ｐ．ｗｏｌｌａｓｔｏｎｉｉ）、プリムラ・クロキフ
ォリア（Ｐ．ｃｒｏｃｉｆｏｌｉａ）、プリムラ・コッ
クブルニアナ（Ｐ．ｃｏｃｋｂｕｒｎｉａｎａ）、プリ
ムラ・プロリフェラ（Ｐ．ｐｒｏｌｉｆｅｒａ）、プリ
ムラ・プルヴェルレンタ（Ｐ．ｐｕｌｖｅｒｕｌｅｎｔ
ａ）、プリムラ・サクシティリス（Ｐ．ｓａｘｔｉｌｉ
ｓ）、プリムラ・コルツソイデス（Ｐ．ｃｏｒｔｕｓｏ
ｉｄｅｓ）、 プリムラ・ヴィアリイ（Ｐ．ｖｉａｌｉ
ｉ）等が好適に用いられるが、これらの種に限定するも
のではない。これらの植物は、主としてシベリアから中
国内陸部を経てヒマラヤに至る高原地帯の冷涼な気候の
地域に分布・自生する植物である。

【００１１】本発明の抽出物は、サクラソウ属植物の
花、実、種子、葉、茎、根等の何れの部分を用いても良
く、さらにはその全草を用いても良い。

【００１２】本発明において使用する上記サクラソウ属
植物の抽出物を調製する方法について以下に述べるが、
これらの抽出溶媒および抽出方法に限定されるものでは
ない。水、エタノール、メタノール、イソプロパノー
ル、イソブタノール、ｎ−ヘキサノール、メチルアミル
アルコール、２−エチルブタノール、ｎ−オクチルアル
コールなどのアルコール類、グリセリン、エチレングリ
コール、エチレングリコールモノメチルエーテル、エチ
レングリコールモノエチルエーテル、プロピレングリコ
ール、プロピレングリコールモノメチルエーテル、プロ
ピレングリコールモノエチルエーテル、トリエチレング
リコール、１，３−ブチレングリコール、ヘキシレング
リコール等の多価アルコール又はその誘導体、アセト
ン、メチルエチルケトン、メチルイソブチルケトン、メ
チル−ｎ−プロピルケトンなどのケトン類、酢酸エチ
ル、酢酸イソプロピルなどのエステル類、エチルエーテ
ル、イソプロピルエーテル、ｎ−ブチルエーテル等のエ
ーテル類などの極性溶媒から選択される１種又は２種以
上の混合溶媒が好適に使用でき、また、リン酸緩衝生理
食塩水を用いることができる。或いは、石油エーテル、
ｎ−ヘキサン、ｎ−ペンタン、ｎ−ブタン、ｎ−オクタ
ン、シクロヘキサン、スクワラン等の炭化水素類、四塩
化炭素、クロロホルム、ジクロロメタン、トリクロロエ
チレン、ベンゼン、トルエンなどの低極性もしくは無極
性溶媒から選択される１種又は２種以上の混合溶媒も好
適に使用することもできる。さらには、水や二酸化炭
素、エチレン、プロピレン、エタノール、メタノール、
アンモニアなどの１種または２種以上の超臨界流体や亜
臨界流体も用いることもできる。

【００１３】抽出方法としては、常圧、若しくは加圧，
減圧下で、室温、冷却又は加熱した状態で含浸させて抽
出する方法、水蒸気蒸留などの蒸留法を用いて抽出する
方法、サクラソウ属植物を圧搾して抽出物を得る圧搾法
などが例示され、これらの方法を単独で、又は２種以上
を組み合わせて抽出を行うこともできる。

【００１４】このようにして得られたサクラソウ属植物
の抽出物は、抽出物をそのまま用いることもできるが、
その効果を失わない範囲で、脱臭、脱色、濃縮などの精
製操作を加えたり、さらにはカラムクロマトグラフィー
などを用いて分画物として用いてもよい。これらの抽出
物や精製物、分画物は、これらから溶媒を除去すること
によって乾固物とすることもでき、さらに、アルコール
などの溶媒に可溶化した形態、或いは乳剤の形態で用い
ることができる。

【００１５】本発明における抗酸化剤および細胞賦活剤
は、前述のサクラソウ属植物抽出物を有効成分とする。
また、かかる抗酸化剤，細胞賦活剤の有効成分であるサ
クラソウ属植物抽出物を皮膚外用剤に配合することによ
り、優れた老化防止効果および表皮恒常性回復効果を発
揮することができる。

【００１６】サクラソウ属植物抽出物の皮膚外用剤への
配合量としては、乾燥物として一般的に０．０００１重
量％〜１０．０重量％であり、好ましくは、０．００１
重量％〜５.０重量％、さらに好ましくは、０．００１
重量％〜１．０重量％である。

【００１７】サクラソウ属植物の抽出物を配合する皮膚
外用剤の剤型としては、クリームや乳液などの乳化物
や、化粧水やジェル状化粧料などの水性化粧料、石鹸や
洗顔フォームなどの洗浄用化粧料、あるいはピールオフ
型や洗い流し型のパック剤などがあげらる。

【００１８】このような皮膚外用剤中に組み合わせて使
用できる原料としては、次に示す（Ａ）群に含まれる原
料が挙げられ、これらを目的に応じて組合せて使用する
ことができる。当然のことであるが、本発明は、組み合
わせて使用できるものを（Ａ）群に含まれる原料に限る
ものではなく、発明の効果を損なわない範囲で種々の原
料と併用することができる。（Ａ）油分、保湿剤、界面
活性剤、増粘剤、中和剤、防腐剤、粉体成分、色素、キ
レート剤、香料、紫外線吸収剤、薬効剤、細胞賦活剤、
抗酸化剤。

【００１９】

【実施例】次に本発明の詳細について、実施例を用いて
詳細に説明する。

【００２０】［実施例１］ プリムラ・シッキメンシス
の乾燥物を粉砕し、その１．６７ｋｇを１０重量倍量の
５０％エタノールにて一週間含浸した。その後、濾過に
より残渣を取り除き抽出液を減圧濃縮、さらには凍結乾
燥を行い、０．１ｋｇの抽出物を得、これを実施例１と
した。

【００２１】［実施例２］ プリムラ・ファベリの乾燥
物を粉砕し、その１２４．０ｇを１０重量倍量の５０％
エタノールにて一週間含浸した。その後、濾過により残
渣を取り除き、これを実施例２とした。

【００２２】［実施例３］ プリムラ・パテンスの乾燥
物を粉砕し、その１８６．０ｇを１０重量倍量の５０％
１，３−ブチレングリコールにて一週間含浸した。その
後、濾過により残渣を取り除き、これを実施例３とし
た。

【００２３】［実施例４］ プリムラ・カピタタの乾燥
物を粉砕し、１．３５ｋｇを１０重量倍量のｎ−ヘキサ
ンにて一週間含浸した。その後、濾過により残渣を取り
除き抽出液を減圧濃縮および乾燥を行い、８．３ｇの抽
出物を得、これを実施例４とした。

【００２４】［実施例５］ プリムラ・スアルティイの
乾燥物を粉砕し、９８．０ｇを１０重量倍量のスクワラ
ンで一週間含浸した。その後、濾過により残渣を取り除
き、実施例５とした。

【００２５】＜抗酸化効果の評価＞任意の濃度に希釈し
た実施例１の５０％エタノール溶液を９６穴プレートに
１００μＬ添加した。次に０．２ｍＭの１，１−ジフェ
ニル−２−ピクリルヒドラジル（ＤＰＰＨ）エタノール
溶液を、９６穴マイクロプレートに１００μＬ添加し
た。室温，暗所にて２４時間放置後、ＤＰＰＨラジカル
に由来する５１６ｎｍの波長の光の吸光度を測定した。
実施例１を無添加の場合の吸光度を（Ａ）、サンプルの
みの吸光度を（Ｂ）としたとき、実施例１のラジカル消
去率は次の式（１）で表すことができる。 ラジカル消去率＝［１−（Ｂ）／（Ａ）］×１００ 式（１） 測定データより得られた、ＤＰＰＨラジカルを５０％消
去するのに必要な実施例１の濃度（ＩＣ_５０）、および
比較例として既存の抗酸化剤として良く用いられるｄｌ
−α−トコフェロールのＩＣ_５０値を表１に示す。表１
より明らかなように、ｄｌ−α−トコフェロールの０．
００６２％と比較して、実施例１はより低濃度の０．０
０３９％濃度でＤＰＰＨラジカルを５０％消去すること
が認められ、これによりサクラソウ属植物抽出物の優れ
た抗酸化効果が明らかとなった。

【００２６】

【表１】

【００２７】＜真皮線維芽細胞賦活作用＞正常ヒト真皮
線維芽細胞を１穴あたり２．０×１０^４個となるように
９６穴プレートに播種した。播種培地は５％牛胎児血清
を添加した市販培地のＤ−ＭＥＭ（日研生物医学研究所
製）を用いた。２４時間培養後、任意の濃度の実施例１
を添加した１％牛胎児血清含有Ｄ−ＭＥＭ培地に交換
し、さらに４８時間培養を行った。その後、３−（４，
５−ジメチル−２−チアゾリル）−２，５−ジフェニル
テトラゾリウムブロミド（ＭＴＴ）を１００μｇ／ｍＬ
添加したＤ−ＭＥＭ培地に交換して２時間培養し、テト
ラゾリウム環の開環により生じるフォルマザンを２−プ
ロパノールにて抽出し、５５０ｎｍの吸光度を測定し
た。同時に、濁度として６５０ｎｍにおける吸光度を測
定し，両測定値の差により真皮線維芽細胞賦活作用を評
価した。その結果を実施例１が無添加の場合の真皮線維
芽細胞賦活作用を１００とした相対値として表２に示
す。表２より明らかなように、０．０２５重量％〜０．
０５重量％の濃度の範囲で、明らかな（１％有意）真皮
線維芽細胞賦活作用が認められた。

【００２８】

【表２】

【００２９】＜表皮細胞賦活作用＞正常ヒト表皮ケラチ
ノサイトを１穴あたり２．０×１０^４個となるように９
６穴プレートに播種した。播種培地は市販培地のＫＧ−
２（クラボウ製）を用いた。２４時間培養後、任意の濃
度の実施例１を添加したＫＧ−２培地に交換し、さらに
２４時間培養を行った。その後、３−（４，５−ジメチ
ル−２−チアゾリル）−２，５−ジフェニルテトラゾリ
ウムブロミド（ＭＴＴ）を１００μｇ／ｍＬ添加したＫ
Ｇ−２培地に交換して２時間培養し、テトラゾリウム環
の開環により生じるフォルマザンを２−プロパノールに
て抽出し、５５０ｎｍの吸光度を測定した。同時に、濁
度として６５０ｎｍにおける吸光度を測定し，両測定値
の差により表皮細胞賦活作用を評価した。その結果を実
施例１が無添加の場合の表皮細胞賦活作用を１００とし
た相対値として表３に示す。表３より明らかなように、
０．０３１２５重量％〜０．０６２５重量％の濃度の範
囲で、明らかな（１％有意）表皮細胞賦活作用が認めら
れた。

【００３０】

【表３】

【００３１】［実施例６］化粧水 （１）エタノール １０.００（重量％）（２）ポリオ
キシエチレン硬化ヒマシ油（６０Ｅ．Ｏ．）０．３０
（３）サクラソウ属植物抽出物（実施例２） ０．０５
（４）パラオキシ安息香酸メチル ０．０２（５）濃グ
リセリン ３．００（６）１、３−ブチレングリコール
１．００（７）精製水 残部 製法：（１）に（２）、（３）、（４）を順次添加し、
均一に溶解しアルコール相とする。これを、あらかじめ
（７）に（５）及び（６）を添加して均一にした水相に
撹拌しながら均一に混合する。

【００３２】［実施例７］クリーム （１）スクワラン １０．００（重量％）（２）ステア
リン酸 ２．００（３）水素添加パーム核油 ０．５０
（４）水素添加大豆リン脂質 ０．１０（５）セタノー
ル ３．６０（６）親油型モノステアリン酸グリセリン
２．００（７）グリセリン １０．００（８）パラオ
キシ安息香酸メチル ０．１０（９）カルボキシビニル
ポリマー ０．１５（１０）Ｌ−アルギニン ０．１０
（１１）サクラソウ属抽出物（実施例３） ５．００
（１２）精製水 残部 製法：（１）〜（６）の油相成分を加熱溶解し、８０℃
とする。一方（７）〜（９）及び（１２）の一部を加熱
溶解し、８０℃とする。これに前記油相を攪拌しながら
加えたあと、（１０）を（１２）の残部に溶解したもの
を８０℃まで加熱溶解したものを加えて、ホモジナイザ
ーにより均一に乳化する。３０℃まで冷却した後、（１
１）を添加し混合、均一化する。

【００３３】［実施例８］乳液 （１）スクワラン ５．００（重量％）（２）サクラソ
ウ属植物抽出物（実施例５） ５．００（３）メチルフ
ェニルポリシロキサン ４．００（４）水素添加パーム
核油 ０．５０（５）モノステアリン酸ポリオキシエチ
レンソルビタン（２０Ｅ．Ｏ．） １．３０（６）モノ
ステアリン酸ソルビタン １．００（７）グリセリン
１０．００（８）パラオキシ安息香酸メチル ０．１０
（９）カルボキシビニルポリマー ０．１５（１０）Ｌ
−アルギニン ０．１０（１２）精製水 残部 製法：（１）〜（６）の油相成分を加熱溶解し、８０℃
とする。一方（７）〜（９）および（１２）を加熱溶解
したもの（水相Ａ）と、（１０）と（１２）の残部を加
熱したもの（水相Ｂ）を調製し、８０℃とする。水相Ａ
を前記油相に攪拌しながら加えたあと、水相Ｂを加え、
ホモジナイザーにより均一に乳化した後、冷却する。

【００３４】［実施例９］ ピールオフ型パック （１）ポリビニルアルコール １０．００（重量％）
（２）エタノール ２．００（３）精製水 ５０．００
（４）ポリエチレングリコール１５００ １．５０
（５）１，３−ブチレングリコール ５．００（６）パ
ラオキシ安息香酸メチル０．１０（７）サクラソウ属植
物抽出物（実施例１） ０．２０（８）ポリオキシエチ
レン硬化ヒマシ油（５０Ｅ．Ｏ．） ０．２０（９）エ
タノール ８．００（１０）精製水 残部 製法：（１）に（２）を加え湿らせておいたものに、常
温の（３）を加え、ゆっくりと撹拌しながら８０℃まで
加熱する。（１）が均一に溶解したことを確認後、５０
℃まで冷却し、（４）、（５）を加え撹拌する。（４）
の溶解を確認後、３０℃まで冷却し、あらかじめ（９）
に（６）〜（８）を溶解したアルコール層と（１０）を
順次添加して、均一に撹拌する。

【００３５】［実施例１０］ゲル状化粧料 （１）ジプロピレングリコール １０．００（重量％）
（２）カルボキシビニルポリマー ０．５０（３）水酸
化カリウム ０．１０（４）パラオキシ安息香酸メチル
０．１０（５）サクラソウ属植物抽出物（実施例４）
０．０５（６）精製水 残部 製法：（６）に（２）を均一に溶解した後、（１）に
（４）、（５）を溶解して添加し、次いで（３）を加え
て増粘させる。

【００３６】［実施例１１］洗顔料 （１）ミリスチン酸 ２４．００（重量％）（２）ステ
アリン酸 １２．００（３）親油型モノステアリン酸グ
リセリン ３．００（４）濃グリセリン １５．００
（５）精製水 ３０．００（６）水酸化カリウム ７．
８０（７）サクラソウ属植物抽出物（実施例２） ３．
００（８）精製水 残部 製法:（１）、（２）、（３）、（４）を順次量りこ
み、８０℃まで加熱する。これに、（６）を溶解させた
（５）を８０℃まで加熱したものをゆっくりと撹拌しな
がら加える。均質になるまで撹拌後、４５℃まで冷却
し、（７）および（８）を加えて均質になるまで撹拌す
る。

【００３７】［使用試験］実施例１〜実施例５に示した
サクラソウ属植物抽出物を配合した皮膚外用剤（実施例
６〜実施例１０）を用いて使用試験を行った。同時に、
実施例６〜実施例１０において配合した実施例１〜実施
例５をそれぞれ次のものに代替してそれぞれ比較例１〜
５として、同様に使用試験を行った。実施例１を精製
水、実施例２を５０％エタノール、実施例３を５０％
１，３−ブチレングリコール、実施例４を精製水、実施
例５をスクワランにそれぞれ代替した。

【００３８】使用試験は、２０〜４０才の女性パネラー
各２０名を１群として、ブラインドにて、起床時の洗顔
後および就寝直前の１日２回、試料の適量を顔面に塗布
させ行った。なお、パネラーは使用試験の前後に、角質
層の状態評価、キュートメーターを用いた肌の弾力、肉
眼および写真判定による小じわの評価を行った。なお、
角質層の状態評価については、使用試験開始後３０日後
の状態を、肌の弾力および小じわの評価については、６
０日後の状態を使用前と比較して評価した。 ［角質層の状態評価］洗顔後の油分の少ない状態で、市
販のセロファンテープを被験者の頬に貼り付け、しばら
く抑えた後、これを剥がし、あらかじめ固着剤を塗布し
たスライドガラスに貼り付ける。ついで、このスライド
ガラスを１時間キシレンに浸漬し、テープを静かに剥が
した後再度、キシレンに１時間浸漬する。その後、スラ
イドガラスを取り出し、風乾させた後、１０分間１％ゲ
ンチアナバイオレットＢ水溶液に浸漬する。ついで、ス
ライドガラスを取り出し、水洗、乾燥後バルサム封入し
て角層標本を得る。

【００３９】得られた角質標本を顕微鏡を用いて目視で
観察し、角質細胞の形状、剥離密度、有核細胞数の数に
ついて、それぞれ表４〜表６に示した基準にてスコア化
した。また角質の剥離多重度については、得られた角質
層の画像をコンピュータに取り込み、画像解析ソフトを
用いて以下のようにしてスコア化した。

【００４０】画像として取り込んだ角質細胞の占める部
分の面積Ｓおよび、ｎ枚の角層の重なっている部分の面
積Ｓ_ｎを、画像解析ソフトを用いて求める。この値によ
り下記式（２）を用いて角層剥離多重度を算出し、得ら
れた角質剥離多重度の値を表７に示す基準でスコア化し
た。 角質剥離多重度＝Σｎ・Ｓ_n／Ｓ （２）

【００４１】

【表４】

【００４２】

【表５】

【００４３】

【表６】

【００４４】

【表７】角質細胞の剥離多重度の評価

【００４５】試験前に作成していた角質層の状態スコア
の合計値と比較して、「改善」、「やや改善」、「変化
なし」の３段階で評価した。肌の弾力、および小じわの
状態の状態の変化についても、「改善」、「やや改
善」、「変化なし」の３段階で評価した。これらの結果
について、下表８にまとめた。

【００４６】

【表８】

【００４７】以上の結果、サクラソウ属植物抽出物を配
合した皮膚外用剤は表皮および角質層の状態を顕著に改
善させ、さらには高い老化防止を有することが明らかと
なった。さらに、この使用試験期間中、実施例６〜１０
の連用による皮膚への影響を観察したが、いずれの実施
例を使用した群においても、痛み、かゆみ等の皮膚刺激
やアレルギー反応等の皮膚障害を訴えたパネラーはいな
かった。

【００４８】また、製剤の安定性を確認するために各種
虐待試験を試みたが、配合成分の沈降、分離及び変質等
の化粧料の品質の低下もみられなかった。

【００４９】

【発明の効果】本発明により、優れた効果を有する抗酸
化剤および細胞賦活剤を提供することができる。さらに
これを外用剤に配合することで加齢や紫外線等の外来ス
トレスにより生じるシワ、シミの発生、皮膚弾性の低下
といった皮膚の老化症状や肌荒れの等の皮膚のさまざま
なトラブル対応できる、抗老化効果および表皮の恒常性
の回復効果に優れた皮膚外用剤を提供することができ
る。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号 ＦＩ Ａ６１Ｐ 43/00 １０７ Ａ６１Ｐ 43/00 １０７ (72)発明者 花野 彰紀 兵庫県神戸市中央区港島中町６丁目13番 地の１ 株式会社ノエビア 神戸本社内 (56)参考文献 特開2000−86489（ＪＰ，Ａ) 特開2000−319154（ＪＰ，Ａ) 特開2001−294516（ＪＰ，Ａ) 特開 平８−133955（ＪＰ，Ａ) 特開 平７−17846（ＪＰ，Ａ) (58)調査した分野(Int.Cl.⁷，ＤＢ名) A61K 7/00 - 7/50 A61K 35/78 ＪＩＣＳＴファイル（ＪＯＩＳ)

Claims (3)

(57)【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 プリムラ・シッキメンシスの抽出物を有
   効成分とする頭皮を除く皮膚用抗酸化剤。
2. 【請求項２】 プリムラ・シッキメンシスの抽出物を有
   効成分とする頭皮を除く皮膚用真皮線維芽細胞賦活剤。
3. 【請求項３】 プリムラ・シッキメンシスの抽出物を有
   効成分とする頭皮を除く表皮細胞賦活剤。