JP3486416B2 - ヒト又は動物の細胞試料の処理方法及び処理装置 - Google Patents
ヒト又は動物の細胞試料の処理方法及び処理装置Info
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Classifications
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- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N1/00—Sampling; Preparing specimens for investigation
- G01N1/28—Preparing specimens for investigation including physical details of (bio-)chemical methods covered elsewhere, e.g. G01N33/50, C12Q
- G01N1/30—Staining; Impregnating ; Fixation; Dehydration; Multistep processes for preparing samples of tissue, cell or nucleic acid material and the like for analysis
- G01N1/31—Apparatus therefor
- G01N1/312—Apparatus therefor for samples mounted on planar substrates
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01F—MIXING, e.g. DISSOLVING, EMULSIFYING OR DISPERSING
- B01F31/00—Mixers with shaking, oscillating, or vibrating mechanisms
- B01F31/29—Mixing by periodically deforming flexible tubular members through which the material is flowing
-
- G—PHYSICS
- G02—OPTICS
- G02B—OPTICAL ELEMENTS, SYSTEMS OR APPARATUS
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- G02B21/34—Microscope slides, e.g. mounting specimens on microscope slides
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
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Description
【発明の詳細な説明】
本発明はヒト又は動物の細胞試料の処理方法及び処理
装置に関する。特に、本発明は疾患の臨床診断を可能と
する試料処理に関する。試料を顕微鏡スライドのような
平坦な表面上に固定し、そして試料の水和又は脱水又は
試料の染色の目的で、又は、例えば抗原又は核酸配列の
検知のような化学分析のために液体で化学的に処理す
る。そのような試料を処理するために用いる液体として
は次のものがある： 1.有機溶媒。
装置に関する。特に、本発明は疾患の臨床診断を可能と
する試料処理に関する。試料を顕微鏡スライドのような
平坦な表面上に固定し、そして試料の水和又は脱水又は
試料の染色の目的で、又は、例えば抗原又は核酸配列の
検知のような化学分析のために液体で化学的に処理す
る。そのような試料を処理するために用いる液体として
は次のものがある： 1.有機溶媒。
2.抗体。
3.DNA及びRNAプローブ。
4.化学溶液。
5.洗浄溶液。
慣例的には、試料の化学処理及び化学分析は、表面上
に試料が固定されているガラス製スライドを、処理溶液
を収容しているビーカー中に浸漬することによって行わ
れる。ある種の溶液は高価であり、それでスライドを水
平に配置した状態にしてピペットを用いて溶液をスライ
ド上に分配し、そしてガラス製カバーをスライドの上に
置いて溶液の広がりをもたらし且つ蒸発を遅くしてい
る。慣用のプロセスは労働集約的であり、従業者を試薬
蒸気にさらし、ことによると化学薬品と接触させる。プ
ロセス工程の正確なタイミングもまた達成が困難である
傾向がある。発生する廃液の量はしばしば多量であり、
このことは問題であるかもしれない。なぜならば、処理
する必要のある廃液は攻撃的な溶媒又は伝染性ウイルス
のような生物学的有害物質を含有し得るからである。こ
れらの問題を克服するために、プロセスをオートメーシ
ョン化するための多数の発明が提案されてきている。
に試料が固定されているガラス製スライドを、処理溶液
を収容しているビーカー中に浸漬することによって行わ
れる。ある種の溶液は高価であり、それでスライドを水
平に配置した状態にしてピペットを用いて溶液をスライ
ド上に分配し、そしてガラス製カバーをスライドの上に
置いて溶液の広がりをもたらし且つ蒸発を遅くしてい
る。慣用のプロセスは労働集約的であり、従業者を試薬
蒸気にさらし、ことによると化学薬品と接触させる。プ
ロセス工程の正確なタイミングもまた達成が困難である
傾向がある。発生する廃液の量はしばしば多量であり、
このことは問題であるかもしれない。なぜならば、処理
する必要のある廃液は攻撃的な溶媒又は伝染性ウイルス
のような生物学的有害物質を含有し得るからである。こ
れらの問題を克服するために、プロセスをオートメーシ
ョン化するための多数の発明が提案されてきている。
ブリガティ（Brigati,D.）等の米国特許第4,731,335
号、第4,777,020号及び第5,002,736号の各明細書には、
顕微鏡スライドのような平坦な表面２個を、試料側を内
側に向けて、向かい合わせで配置するシステムが記載さ
れている。それらのスライドの隣接しているそれらの被
覆部分はそれらの試料の間に毛細管状の隙間を形成して
いる。このスライド対は、そのスライド対の下方縁が処
理液と接触してその処理液が次いで毛細管状の隙間中に
移動するように配置することができる。それで、液体を
抜き出して吸収することのできる吸収材料の上にそのス
ライド対を接触させて置くことによって液体をその隙間
から取り除くことができる。
号、第4,777,020号及び第5,002,736号の各明細書には、
顕微鏡スライドのような平坦な表面２個を、試料側を内
側に向けて、向かい合わせで配置するシステムが記載さ
れている。それらのスライドの隣接しているそれらの被
覆部分はそれらの試料の間に毛細管状の隙間を形成して
いる。このスライド対は、そのスライド対の下方縁が処
理液と接触してその処理液が次いで毛細管状の隙間中に
移動するように配置することができる。それで、液体を
抜き出して吸収することのできる吸収材料の上にそのス
ライド対を接触させて置くことによって液体をその隙間
から取り除くことができる。
シャンドン・サイエンティフィック・リミッテッド
（Shandon Scientific Limited）の米国特許第4,985,20
6号明細書には、組織を処理するための装置が記載され
ている。その発明の核心はチャンネルを形成するエレメ
ントである。このエレメントは、試料側がエレメント側
に向いている状態にして、試料を保持しているスライド
としっかりと結合される。そのエレメントはその主壁と
スライドとの間にチャンネルを形成する。そのチャンネ
ルが実質的に垂直である時には、そのエレメントの上方
部は液体分配容器を形成する。それで、オペレーター又
は液体取り扱いロボットはその容器に適当な試薬を満た
すことができる。重力作用及び毛細管作用により試薬が
チャンネル中に移動する。ひとたびそのチャンネルが液
体で満たされ且つその容器が空になれば、その液体はそ
の表面張力に起因してその隙間中に留まる。その隙間中
の液体は、新しい試薬をその容器中に入れることによっ
て置き換えることができる。
（Shandon Scientific Limited）の米国特許第4,985,20
6号明細書には、組織を処理するための装置が記載され
ている。その発明の核心はチャンネルを形成するエレメ
ントである。このエレメントは、試料側がエレメント側
に向いている状態にして、試料を保持しているスライド
としっかりと結合される。そのエレメントはその主壁と
スライドとの間にチャンネルを形成する。そのチャンネ
ルが実質的に垂直である時には、そのエレメントの上方
部は液体分配容器を形成する。それで、オペレーター又
は液体取り扱いロボットはその容器に適当な試薬を満た
すことができる。重力作用及び毛細管作用により試薬が
チャンネル中に移動する。ひとたびそのチャンネルが液
体で満たされ且つその容器が空になれば、その液体はそ
の表面張力に起因してその隙間中に留まる。その隙間中
の液体は、新しい試薬をその容器中に入れることによっ
て置き換えることができる。
トヤ（Toya,M.）等は米国特許第5,068,091号及び英国
特許第2,265,981号の各明細書において、顕微鏡スライ
ドと下方プラトーとの間の実質的に水平なくさび形の毛
細管状の隙間を記載している。液体はそのプラトーの露
出端に分配することができ、それで毛細管作用により液
体はくさび形の隙間に移動することができる。次いで、
吸引を用いることによってその隙間から試薬を取り除く
ことができる。その除去プロセスの間、その液体容積は
その液体の表面張力により連続して保たれる。
特許第2,265,981号の各明細書において、顕微鏡スライ
ドと下方プラトーとの間の実質的に水平なくさび形の毛
細管状の隙間を記載している。液体はそのプラトーの露
出端に分配することができ、それで毛細管作用により液
体はくさび形の隙間に移動することができる。次いで、
吸引を用いることによってその隙間から試薬を取り除く
ことができる。その除去プロセスの間、その液体容積は
その液体の表面張力により連続して保たれる。
上記した従来技術の装置は全て、ある場合には処理液
による試料の一様な処理を提供することができないとい
う不利益をこうむる。このことは毛細管状の隙間に閉じ
込められる空気の生成によって引き起こされる。前記ブ
リガティの各発明の場合には、毛細管力は液体をスライ
ド対の下方縁から上方にある距離だけ引き上げることが
できるに過ぎず、それでこのことはスライド上に処理の
低下した区域を生じさせることになる。前記ブリガティ
の各発明においては液体の除去速度は制御することがで
きない。また、毛細管状の隙間は新しい液体が付与され
得る前に排液される必要がある。これらのことは不利益
を形成する。何故なら、ある場合には、液体を置き換え
る時にその試料が空気に全く露出されないことが望まし
いからである。このことは、液体の置き換えの間に容易
に蒸発して試料をすっかり乾燥させることになる有機溶
剤のような揮発性液体を用いる時に特に望ましい。試料
が乾燥すると、高度の非特異的染色のようなプロセス特
質を低下させることになり得る。他の場合には、液体の
置き換えの間、試料を湿った状態に保つために、液体薄
膜を試料の表面に残しておくべきである。その他の場合
には、付与された液体の最高濃度を確保するために新し
い液体を付与する前に試料を完全に乾燥させることが望
ましい。
による試料の一様な処理を提供することができないとい
う不利益をこうむる。このことは毛細管状の隙間に閉じ
込められる空気の生成によって引き起こされる。前記ブ
リガティの各発明の場合には、毛細管力は液体をスライ
ド対の下方縁から上方にある距離だけ引き上げることが
できるに過ぎず、それでこのことはスライド上に処理の
低下した区域を生じさせることになる。前記ブリガティ
の各発明においては液体の除去速度は制御することがで
きない。また、毛細管状の隙間は新しい液体が付与され
得る前に排液される必要がある。これらのことは不利益
を形成する。何故なら、ある場合には、液体を置き換え
る時にその試料が空気に全く露出されないことが望まし
いからである。このことは、液体の置き換えの間に容易
に蒸発して試料をすっかり乾燥させることになる有機溶
剤のような揮発性液体を用いる時に特に望ましい。試料
が乾燥すると、高度の非特異的染色のようなプロセス特
質を低下させることになり得る。他の場合には、液体の
置き換えの間、試料を湿った状態に保つために、液体薄
膜を試料の表面に残しておくべきである。その他の場合
には、付与された液体の最高濃度を確保するために新し
い液体を付与する前に試料を完全に乾燥させることが望
ましい。
前記したシャンドンの装置は、別個の液体処理の間に
隙間をきれいにする（隙間に空気を満たす）ための設備
が設けられておらず、それ故に、隙間に閉じ込められた
いかなる気泡もそのプロセスの間中留まると思われると
いう追加の問題を持っている。また、前記したシャンド
ンの装置は、液体を置き換えている間のプロセス中に試
料を空気に露出させる性能を提供することができない。
前記したトヤ等の装置においては、毛細管状の隙間をき
れいにするために吸引するとその液体は２以上の区画に
分割され、ただ１つの区画が廃棄物封じ込めシステム中
に吸い取られるだけであり、それで液体のそのような不
完全な掃除は試料の処理を許容されないものにする。
隙間をきれいにする（隙間に空気を満たす）ための設備
が設けられておらず、それ故に、隙間に閉じ込められた
いかなる気泡もそのプロセスの間中留まると思われると
いう追加の問題を持っている。また、前記したシャンド
ンの装置は、液体を置き換えている間のプロセス中に試
料を空気に露出させる性能を提供することができない。
前記したトヤ等の装置においては、毛細管状の隙間をき
れいにするために吸引するとその液体は２以上の区画に
分割され、ただ１つの区画が廃棄物封じ込めシステム中
に吸い取られるだけであり、それで液体のそのような不
完全な掃除は試料の処理を許容されないものにする。
本発明の一目的は、少量の液体を、なんらかの空隙が
その液体の広がり中に形成される可能性を避けるか又は
少なくとも減少させる制御された方法で、ヒト又は動物
の細胞試料を担持している実質的に平坦な表面上に広げ
るための方法及び装置を提供することにある。本発明に
適する液体の範囲は広範囲の粘着性物質及び広範囲の表
面張力物質を包含する。
その液体の広がり中に形成される可能性を避けるか又は
少なくとも減少させる制御された方法で、ヒト又は動物
の細胞試料を担持している実質的に平坦な表面上に広げ
るための方法及び装置を提供することにある。本発明に
適する液体の範囲は広範囲の粘着性物質及び広範囲の表
面張力物質を包含する。
従って、本発明は、平坦な表面の一部分上にヒト又は
動物の細胞試料を担持している平坦な表面上に液体を広
げるための方法であって、 ｉ）平坦面を有するエレメントを、該平坦面が該試料と
平行となり、該試料にごく接近し且つ該試料から横方向
に転置されるように、該表面に隣接して配置し、該平坦
面をスペーサー手段によって該表面から所定の間隔で配
置する工程、 ii）該液体を該表面上又は該エレメント上に分配する工
程、及び iii）該液体を分配する工程の後、該エレメントを該ス
ペーサー手段を介して該表面と接触させながら該エレメ
ントの該平坦面が該試料を覆うまで該表面とは相対的に
移動させて、該液体を該表面と該平坦面との間のキャビ
ティ中に閉じ込め且つ該試料全体に均等に広げる工程 を含むことを特徴とする方法を提供する。
動物の細胞試料を担持している平坦な表面上に液体を広
げるための方法であって、 ｉ）平坦面を有するエレメントを、該平坦面が該試料と
平行となり、該試料にごく接近し且つ該試料から横方向
に転置されるように、該表面に隣接して配置し、該平坦
面をスペーサー手段によって該表面から所定の間隔で配
置する工程、 ii）該液体を該表面上又は該エレメント上に分配する工
程、及び iii）該液体を分配する工程の後、該エレメントを該ス
ペーサー手段を介して該表面と接触させながら該エレメ
ントの該平坦面が該試料を覆うまで該表面とは相対的に
移動させて、該液体を該表面と該平坦面との間のキャビ
ティ中に閉じ込め且つ該試料全体に均等に広げる工程 を含むことを特徴とする方法を提供する。
本発明のその上の形態に従って、平坦な表面の一部分
上にヒト又は動物の細胞試料を保持している平坦な表面
上に液体を広げるための装置であって、該装置が僅かに
凹んだ平坦面を持つエレメントを含んでいること、その
ことによって該平坦面が該表面に平行になるようにして
該エレメントを該表面上に配置した時に、薄いキャビテ
ィが該エレメントと該表面との間に形成され、該キャビ
ティは該エレメントの一つの縁に沿って接近可能であり
且つ該キャビティは該試料を収容するのに十分な大きさ
であることを特徴とする装置が提供される。
上にヒト又は動物の細胞試料を保持している平坦な表面
上に液体を広げるための装置であって、該装置が僅かに
凹んだ平坦面を持つエレメントを含んでいること、その
ことによって該平坦面が該表面に平行になるようにして
該エレメントを該表面上に配置した時に、薄いキャビテ
ィが該エレメントと該表面との間に形成され、該キャビ
ティは該エレメントの一つの縁に沿って接近可能であり
且つ該キャビティは該試料を収容するのに十分な大きさ
であることを特徴とする装置が提供される。
本発明が一層容易に理解できるように、特定の実施態
様を添付の図面を参照して記載する。図面において、 第１図は、別個の３つの図面（ａ）、（ｂ）及び
（ｃ）において、顕微鏡スライド及び関連した本発明の
エレメントの異なった相対位置での透視図を示してお
り、また図面（ｂ）及び（ｃ）はスライド上に末端止め
を含んでおり； 第２図は、第１図のエレメントの一つの特定の形状の
下側透視図であり；又 第３図は、エレメントのその他の実施態様を示してい
る、第２図に類似の図面である。
様を添付の図面を参照して記載する。図面において、 第１図は、別個の３つの図面（ａ）、（ｂ）及び
（ｃ）において、顕微鏡スライド及び関連した本発明の
エレメントの異なった相対位置での透視図を示してお
り、また図面（ｂ）及び（ｃ）はスライド上に末端止め
を含んでおり； 第２図は、第１図のエレメントの一つの特定の形状の
下側透視図であり；又 第３図は、エレメントのその他の実施態様を示してい
る、第２図に類似の図面である。
第１図を参照するに、実質的に平坦なエレメント１及
び試料担持用顕微鏡スライド２が示されている。顕微鏡
スライド２は試料担持用表面３を持っており、その表面
３上には試料４が配置され、また平坦なエレメント１は
一端にはす縁５を持っており、エレメントの一面に形成
された凹部又はキャビティ６（第２図）への開口を形成
している。
び試料担持用顕微鏡スライド２が示されている。顕微鏡
スライド２は試料担持用表面３を持っており、その表面
３上には試料４が配置され、また平坦なエレメント１は
一端にはす縁５を持っており、エレメントの一面に形成
された凹部又はキャビティ６（第２図）への開口を形成
している。
使用する際には、試料４をスライドの試料担持用表面
３上に配置した後、平坦なエレメント１及びスライド
を、凹部６及び試料担持用表面３が概して相互に向かい
あった状態で凹部６の平坦基部10及び試料担持用表面３
が概して相互に平行であるように、且つそれらが相互に
横方向にずれていてエレメント１のはす縁５が、横断縁
11に隣接したスライド２の端部を覆った状態となるよう
に配置する（第１図（ａ）に示した状態に類似）。凹部
６の平坦基部10及び試料担持用表面３が約20μｍ〜300
μｍの距離だけ相互に間隔が置かれていることが好まし
いが、必須ではない。
３上に配置した後、平坦なエレメント１及びスライド
を、凹部６及び試料担持用表面３が概して相互に向かい
あった状態で凹部６の平坦基部10及び試料担持用表面３
が概して相互に平行であるように、且つそれらが相互に
横方向にずれていてエレメント１のはす縁５が、横断縁
11に隣接したスライド２の端部を覆った状態となるよう
に配置する（第１図（ａ）に示した状態に類似）。凹部
６の平坦基部10及び試料担持用表面３が約20μｍ〜300
μｍの距離だけ相互に間隔が置かれていることが好まし
いが、必須ではない。
次いで、多数の処理液の第一のもの（図示せず）をエ
レメントのはす縁５と試料４との間の位置で試料４上に
又は試料担持用表面３上に直接に分配する。次いで、凹
部６中への開口13が試料上を通過するようにエレメント
１を試料に向かう方向に移動させ、その間、凹部６の平
坦基部10と試料担持用表面３との間の所定の距離が維持
され、そのことによって試料４及び処理液の大部分が凹
部６内に閉じ込められる。
レメントのはす縁５と試料４との間の位置で試料４上に
又は試料担持用表面３上に直接に分配する。次いで、凹
部６中への開口13が試料上を通過するようにエレメント
１を試料に向かう方向に移動させ、その間、凹部６の平
坦基部10と試料担持用表面３との間の所定の距離が維持
され、そのことによって試料４及び処理液の大部分が凹
部６内に閉じ込められる。
ある場合には、温置プロセスの前及び／又は温置プロ
セス中にエレメント１をスライド２上で前後に移動させ
て液体を攪拌することが望ましいかもしれない。この攪
拌はサンプル中への処理液の一層良好な浸透をもたら
し、従って改善された結果を提供する。
セス中にエレメント１をスライド２上で前後に移動させ
て液体を攪拌することが望ましいかもしれない。この攪
拌はサンプル中への処理液の一層良好な浸透をもたら
し、従って改善された結果を提供する。
凹部６の平坦基部10は平坦な表面３によって担持され
る試料４の処理面積よりも大きいが、その平坦な表面自
体よりも小さいことが好ましい。
る試料４の処理面積よりも大きいが、その平坦な表面自
体よりも小さいことが好ましい。
次の処理液を付与する前に試料がすっかり乾燥するの
を避けるために、試料を温置し終わった後にも少量の処
理液を試料上に留めておくことが好ましいかもしれな
い。
を避けるために、試料を温置し終わった後にも少量の処
理液を試料上に留めておくことが好ましいかもしれな
い。
試料の温置期間が終了した後、次の処理液の付与が可
能になるように試料担持用表面３から余分の処理液を除
去する。このことは、エレメント１をスライドの縦に沿
って引っ込める時と同時に行って試料４を露出させるこ
とができる。
能になるように試料担持用表面３から余分の処理液を除
去する。このことは、エレメント１をスライドの縦に沿
って引っ込める時と同時に行って試料４を露出させるこ
とができる。
試料担持用表面３と基部10との間に形成されている容
積はエレメントの逆方向の移動の間に小さくなるので、
即ち、凹部又はキャビティ６の容積が減少するので、そ
の液体の表面張力は液体を単一物として保つように作用
する。その小さくなる容積中に詰め込まれない余分の液
体を除去するために、真空ノズル８が凹部６に対面し且
つごく近接するように試料担持用表面３の横断縁11にノ
ズル８を配置する。エレメント１は引っ込み、そのノズ
ルを通りすぎて移動するので、余分の処理液は適用され
た真空によってエレメント１から除去され、そして密閉
容器（図示せず）中に入れられる。なぜなら、その余分
の処理液は状況によっては環境リスクをもたらすことも
あるからである。その第一処理のための液体の余剰分を
いったん除去すれば、第二の処理液を次の温置のために
分配することができ、また、必要に応じてそのプロセス
をそれ以降の処理液のために繰り返すことができる。
積はエレメントの逆方向の移動の間に小さくなるので、
即ち、凹部又はキャビティ６の容積が減少するので、そ
の液体の表面張力は液体を単一物として保つように作用
する。その小さくなる容積中に詰め込まれない余分の液
体を除去するために、真空ノズル８が凹部６に対面し且
つごく近接するように試料担持用表面３の横断縁11にノ
ズル８を配置する。エレメント１は引っ込み、そのノズ
ルを通りすぎて移動するので、余分の処理液は適用され
た真空によってエレメント１から除去され、そして密閉
容器（図示せず）中に入れられる。なぜなら、その余分
の処理液は状況によっては環境リスクをもたらすことも
あるからである。その第一処理のための液体の余剰分を
いったん除去すれば、第二の処理液を次の温置のために
分配することができ、また、必要に応じてそのプロセス
をそれ以降の処理液のために繰り返すことができる。
エレメント１とスライド２との相対移動をコンピュー
ター（図示せず）によってオートメーション化して制御
することができる。そのメカニズムは本発明の一部を構
成するものではないので、一形式においてはマイクロス
テッピングステップモーターによって駆動されるベルト
駆動リニア軸を用いるという以外はここではそのメカニ
ズムを記載する必要がないと考える。更に、この相対移
動は多段階で実施してもよい。例えば、第一段階では、
エレメントを試料担持用表面をほんの一部分覆うように
移動させ、次いで、相対移動の完了時に凹部６内に空気
が閉じ込められる可能性を最小にするためにエレメント
１のはす縁５とスライドの横断縁11との間の空間に処理
液を充満させる時間の間停止させる。第二段階において
は、相対移動を再び続けて最初に凹部内にあったいかな
る空気も試料４及び処理液によって完全に置き換えられ
てしまうことを確実にすることができる。
ター（図示せず）によってオートメーション化して制御
することができる。そのメカニズムは本発明の一部を構
成するものではないので、一形式においてはマイクロス
テッピングステップモーターによって駆動されるベルト
駆動リニア軸を用いるという以外はここではそのメカニ
ズムを記載する必要がないと考える。更に、この相対移
動は多段階で実施してもよい。例えば、第一段階では、
エレメントを試料担持用表面をほんの一部分覆うように
移動させ、次いで、相対移動の完了時に凹部６内に空気
が閉じ込められる可能性を最小にするためにエレメント
１のはす縁５とスライドの横断縁11との間の空間に処理
液を充満させる時間の間停止させる。第二段階において
は、相対移動を再び続けて最初に凹部内にあったいかな
る空気も試料４及び処理液によって完全に置き換えられ
てしまうことを確実にすることができる。
今度は、エレメント１の一形式を示す第２図を参照す
るに、その凹部は、エレメント１上の３個の外方向に延
びた突出部又はレール７を持っている実質的に平坦な表
面10を備えている。レール７は概して“Ｕ字形”に配置
されており、エレメント１上の平坦な基部表面10と共同
で、１個の短い縁でのみ開口している凹部を形成してい
る。このことは、使用の際に凹部が試料４を実質的に完
全に閉じ込めることを意味する。試料４を凹部で実質的
に閉じ込める理由は、凹部に閉じ込められた時の液体の
蒸発速度を低下させることにある。このことは、長時間
の高温温置を必要とする幾つかの処理プロセスで有益で
ある。
るに、その凹部は、エレメント１上の３個の外方向に延
びた突出部又はレール７を持っている実質的に平坦な表
面10を備えている。レール７は概して“Ｕ字形”に配置
されており、エレメント１上の平坦な基部表面10と共同
で、１個の短い縁でのみ開口している凹部を形成してい
る。このことは、使用の際に凹部が試料４を実質的に完
全に閉じ込めることを意味する。試料４を凹部で実質的
に閉じ込める理由は、凹部に閉じ込められた時の液体の
蒸発速度を低下させることにある。このことは、長時間
の高温温置を必要とする幾つかの処理プロセスで有益で
ある。
凹部６の他方の短い端部にあるレール７は、エレメン
ト１とスライド２との相対移動の間に空気が凹部から逃
げることができるようにそのレール７に形成された小さ
な開口12を持っていてもよい。他の態様としては、凹部
６の閉塞端にあるレールは、他の実施態様の第３図に示
されているように完全に除かれていてもよい。
ト１とスライド２との相対移動の間に空気が凹部から逃
げることができるようにそのレール７に形成された小さ
な開口12を持っていてもよい。他の態様としては、凹部
６の閉塞端にあるレールは、他の実施態様の第３図に示
されているように完全に除かれていてもよい。
その上の他の実施態様においては、エレメント１とス
ライド２との間に所望の間隔を維持するためにエレメン
ト１上に又はスライド２上にその他の手段を設けてもよ
い。そのような手段としては、例えば、エレメント１の
面から又はスライド２の平坦な試料担持用表面３から外
方向に延びている小さなボス又は突出部を包含し得る。
ライド２との間に所望の間隔を維持するためにエレメン
ト１上に又はスライド２上にその他の手段を設けてもよ
い。そのような手段としては、例えば、エレメント１の
面から又はスライド２の平坦な試料担持用表面３から外
方向に延びている小さなボス又は突出部を包含し得る。
温置の間の処理液の蒸発を更に低下させるために、エ
レメント１のはす縁５での凹部への開口を制限するか又
は閉じるように、例えば、スライド２上に端部止め９を
固定することができる。端部止め９は、エレメントがそ
の最終温置位置に移動し終えた時に端部止め９がはす縁
でエレメントの端部とかみ合うように置くべきであり、
それで、この目的で、端部止め９はエレメント１のはす
縁５と相補的なはす縁を持つ。
レメント１のはす縁５での凹部への開口を制限するか又
は閉じるように、例えば、スライド２上に端部止め９を
固定することができる。端部止め９は、エレメントがそ
の最終温置位置に移動し終えた時に端部止め９がはす縁
でエレメントの端部とかみ合うように置くべきであり、
それで、この目的で、端部止め９はエレメント１のはす
縁５と相補的なはす縁を持つ。
ある場合には、試料を空気に曝すことなしで第二又は
それ以降の処理液を凹部６に加えることがプロセスにと
って特に有益である。このことの理由は、試料を空気に
曝すと試料を乾燥させることになり、このことは処理の
特質を低下させるということにある。このことはある種
の染色法に関して特にその通りである。
それ以降の処理液を凹部６に加えることがプロセスにと
って特に有益である。このことの理由は、試料を空気に
曝すと試料を乾燥させることになり、このことは処理の
特質を低下させるということにある。このことはある種
の染色法に関して特にその通りである。
空気を排除すべきであるならば、凹部６が真空ノズル
にまさしく開放されるようにエレメント１を僅かに移動
させ、次いで試料担持用表面３上にそれ以降の処理液を
分配すると同時に真空を適用することによって現在使用
中の処理液をそれ以降の処理液によって置き換えること
ができる。換言すれば、凹部又はキャビティ６のほんの
小部分を露出させる。この場合には、それ以降の処理液
を真空ノズルとは反対側のエレメント端で分配すること
が好ましい。実際には、それ以降の処理液の余剰分は、
液体が真空下にあって真空ノズルによって捕らえられて
いる間は液体の凝集力に起因して凹部に移動する傾向が
ある。分配端における余分の処理液が使い切られると、
液体の移動は実質的に停止する。
にまさしく開放されるようにエレメント１を僅かに移動
させ、次いで試料担持用表面３上にそれ以降の処理液を
分配すると同時に真空を適用することによって現在使用
中の処理液をそれ以降の処理液によって置き換えること
ができる。換言すれば、凹部又はキャビティ６のほんの
小部分を露出させる。この場合には、それ以降の処理液
を真空ノズルとは反対側のエレメント端で分配すること
が好ましい。実際には、それ以降の処理液の余剰分は、
液体が真空下にあって真空ノズルによって捕らえられて
いる間は液体の凝集力に起因して凹部に移動する傾向が
ある。分配端における余分の処理液が使い切られると、
液体の移動は実質的に停止する。
このプロセスは、真空ノズルが試料担持用表面の下方
端にあり、それ以降の液体の分配が試料担持用表面の上
方端にあるように全集成装置をある角度で、好ましくは
約５゜で配置することによって促進することができる。
端にあり、それ以降の液体の分配が試料担持用表面の上
方端にあるように全集成装置をある角度で、好ましくは
約５゜で配置することによって促進することができる。
エレメント１は、試料４上に分配された処理液が相対
移動の間にエレメントの頂部を越えて流れるのを防止す
るのに十分な厚さを持っていることが好ましい。典型的
には、この厚さは2mmよりも大であろう。加えて、エレ
メントがスライド上のいかなる障害物も、例えば、パラ
フィン固定試料上のワックス粒体も乗り越えることがで
きるように、はす縁５は表面３の面に対する種々の異な
る角度にすることができる。
移動の間にエレメントの頂部を越えて流れるのを防止す
るのに十分な厚さを持っていることが好ましい。典型的
には、この厚さは2mmよりも大であろう。加えて、エレ
メントがスライド上のいかなる障害物も、例えば、パラ
フィン固定試料上のワックス粒体も乗り越えることがで
きるように、はす縁５は表面３の面に対する種々の異な
る角度にすることができる。
エレメント１を化学的に不活性な物質で構成して、そ
の結果としてそれが処理反応に影響を及ぼさないこと、
並びに試料上で行われるべき、例えば、脱ろう法及び脱
水法が可能となるようにそれを有機溶剤に耐える物質で
製作することが好ましい。使用者が試料中で起こる反応
を観察できるようにするためにエレメントを透明な又は
半透明の物質で製作することも望ましい。これらの要求
の全てを満足するためには、好ましくはエレメントをガ
ラスで構成し、フルオロエチレンポリマーのような不活
性且つ耐久性のある物質を用いてエレメント上にレール
または突出物を印刷するか又は塗布する。他の実施態様
としては、研削仕上げ又はエッチングのような種々の製
作法を用いてレールをガラスで構成してもよい。
の結果としてそれが処理反応に影響を及ぼさないこと、
並びに試料上で行われるべき、例えば、脱ろう法及び脱
水法が可能となるようにそれを有機溶剤に耐える物質で
製作することが好ましい。使用者が試料中で起こる反応
を観察できるようにするためにエレメントを透明な又は
半透明の物質で製作することも望ましい。これらの要求
の全てを満足するためには、好ましくはエレメントをガ
ラスで構成し、フルオロエチレンポリマーのような不活
性且つ耐久性のある物質を用いてエレメント上にレール
または突出物を印刷するか又は塗布する。他の実施態様
としては、研削仕上げ又はエッチングのような種々の製
作法を用いてレールをガラスで構成してもよい。
試料担持用表面が顕微鏡スライドであるならば、真空
ノズルは試料域に最も近いスライド端に配置することが
できる。この端は典型的にはスライドの艶消し端14の反
対側である。好ましい態様では、真空ノズルの開口は、
顕微鏡スライドの幅と実質的に同じ幅であってもよいス
リットの形状であり得、またスリットの縦は顕微鏡スラ
イドの面と平行であるように真空ノズルの開口を整列さ
せることができる。
ノズルは試料域に最も近いスライド端に配置することが
できる。この端は典型的にはスライドの艶消し端14の反
対側である。好ましい態様では、真空ノズルの開口は、
顕微鏡スライドの幅と実質的に同じ幅であってもよいス
リットの形状であり得、またスリットの縦は顕微鏡スラ
イドの面と平行であるように真空ノズルの開口を整列さ
せることができる。
─────────────────────────────────────────────────────
フロントページの続き
(56)参考文献 特開 平１−302135（ＪＰ，Ａ)
特開 昭57−82765（ＪＰ，Ａ)
特開 昭62−245156（ＪＰ，Ａ)
特開 平４−357460（ＪＰ，Ａ)
特開 昭59−219714（ＪＰ，Ａ)
特開 平１−257261（ＪＰ，Ａ)
特開 昭63−257709（ＪＰ，Ａ)
実開 平３−40545（ＪＰ，Ｕ)
特公 平５−11857（ＪＰ，Ｂ２)
米国特許4790640（ＵＳ，Ａ)
米国特許5068091（ＵＳ，Ａ)
(58)調査した分野(Int.Cl.7，ＤＢ名)
G01N 1/00 - 1/44
C12M 3/00 - 3/10
G01N 33/48 - 33/98
G02B 21/34
ＪＩＣＳＴファイル（ＪＯＩＳ)
Claims (17)
- 【請求項１】平坦な表面の一部分上にヒト又は動物の細
胞試料を担持している平坦な表面上に液体を広げるため
の方法であって、 ｉ）平坦面を有するエレメントを、該平坦面が該試料と
平行となり、該試料にごく接近し且つ該試料から横方向
に転置されるように、該表面に隣接して配置し、該平坦
面をスペーサー手段によって該表面から所定の間隔で配
置する工程、 ii）該液体を該表面上又は該エレメント上に分配する工
程、及び iii）該液体を分配する工程の後、該エレメントを該ス
ペーサー手段を介して該表面と接触させながら該エレメ
ントの該平坦面が該試料を覆うまで該表面とは相対的に
移動させて、該液体を該表面と該平坦面との間のキャビ
ティ中に閉じ込め且つ該試料全体に均等に広げる工程 を含むことを特徴とする方法。 - 【請求項２】上記の試料の適当な温置の後に余分な量の
液体を除去する工程、及び 上記のエレメントを、該エレメントと上記の表面との間
の接触を維持しながら該試料から離れる方向に該表面と
は相対的に移動させ、そして、上記のキャビティが該表
面の端を越えて移動する時に、液体の表面張力によって
該キャビティ内に保持さている該余分の液体を除去する
ために該端で真空を適用する工程 を更に含む請求の範囲第１項記載の方法。 - 【請求項３】上記の試料を空気に曝すことなしで、上記
の除去された余分の液体の置き換えのために追加の処理
液を該試料に付与する工程を更に含み、上記のエレメン
トを該試料から離れる方向に移動させる上記の工程が上
記のキャビティの小部分を上記の真空に曝すのに単に十
分であるように該エレメントを移動させることを含み、
また、該追加の処理液を付与する工程を上記の真空の適
用と同時に実施し、該追加の処理液を該真空が適用され
ている該エレメント端とは反対側の端に隣接して付与す
る請求の範囲第２項記載の方法。 - 【請求項４】上記の表面及びエレメントを水平に対して
僅かな角度で傾斜させことを更に含み、上記の真空を付
与する工程が該表面の下方端に真空を適用する請求の範
囲第３項記載の方法。 - 【請求項５】温置プロセスの前及び／又は温置プロセス
中に、上記のエレメントを上記の表面上で前後に移動さ
せて上記の液体を攪拌する請求の範囲第１項記載の方
法。 - 【請求項６】液体を上記の表面上又は上記のエレメント
上に分配する工程が上記のキャビティへの開口に隣接し
ている該表面上に該液体を分配することを含む請求の範
囲第１項記載の方法。 - 【請求項７】上記の移動させる工程が、上記の表面と上
記のエレメントの平坦面との間の間隔をコンピューター
によって制御することを含む請求の範囲第１項記載の方
法。 - 【請求項８】平坦な表面の一部分上にヒト又は動物の細
胞試料を担持している平坦な表面上に液体を広げるため
の装置であって、僅かに凹んだ平坦面を持つエレメント
を該平坦面が該表面に平行になるようにして該表面上に
配置した時に、薄いキャビティが該エレメントと該表面
との間に形成されるように構成され且つ配置された僅か
に凹んだ平坦面を持つエレメントを含み、該キャビティ
は該エレメントの一つの縁に沿って接近可能であり且つ
該キャビティは該試料を収容するのに十分な大きさであ
ること、並びに、該エレメントと該表面との間の相対的
移動がコンピューターによってオートメーション化され
且つ生業されることを特徴とする装置。 - 【請求項９】上記のエレメントが複数の持ち上がったレ
ールを更に含み、上記のキャビティが上記の平坦な表
面、該平坦な表面と平行な上記の平坦面、及び該平坦面
上の持ち上がったレールによって形成されており、該持
ち上がったレールは概して該エレメントの２個の平行な
縁に沿ってそれぞれ延びており、該キャビティに近づく
手段を提供する１個の縁がレールを持っていない請求の
範囲第８項記載の装置。 - 【請求項１０】上記の平坦な表面が顕微鏡スライドの上
にあり、該スライドの下側で該スライドの縁に隣接して
配置されている真空ノズルを更に含む請求の範囲第９項
記載の装置。 - 【請求項１１】上記のキャビティに近ずく手段を提供す
る上記のエレメントの１個の縁が、該エレメントを上記
の表面上に配置した時に該表面とで鋭角を形成するはす
縁である請求の範囲第10項記載の装置。 - 【請求項１２】上記のスライド上に固定される端部止め
を更に含み、上記のエレメントが該スライド上の最終温
置位置にある時に該端部止めは該エレメントの上記のは
す縁にかみ合い、該端部止めは、該エレメントの該最終
温置位置において該エレメントのはす縁に沿って接近す
るための、エレメントのはす縁と相補的なはす縁を持っ
ている請求の範囲第11項記載の装置。 - 【請求項１３】上記の相対移動を複数段階で実施し、そ
のことにより、第一段階では、上記のエレメントを、該
エレメントの上記のはす縁が上記のスライドの一端部に
隣接している第一の位置から該エレメントが上記の表面
を一部分覆う第二の位置に移動させ、そして、該第一段
階の前に該表面上に置かれた上記の処理液を該エレメン
トのはす縁と該スライドの該一端部との間の空間に充満
させるのに十分な時間第二の位置に滞留させ、第二段階
においては、該エレメントを該スライドを横切って更に
移動させて、上記の試料をキャビティ内に含ませ且つ最
初に該キャビティ内に含まれていたいかなる空気も該試
料及び該処理液によって完全に置き換える請求の範囲第
８項記載の装置。 - 【請求項１４】上記のスライド及び上記のエレメントは
水平に対して僅かの角度で傾斜しており、且つ上記の真
空ノズルが該スライドの下方縁にある請求の範囲第13項
記載の装置。 - 【請求項１５】上記のスライドと上記のエレメントとの
間のオートメーション化され、制御される相対移動は、
温置プロセスの前及び／又は温置プロセス中に該エレメ
ントをスライドとの相対運動で前後に移動させて液体を
攪拌するのに適合している請求の範囲第14項記載の装
置。 - 【請求項１６】上記のレールを含む該エレメントがガラ
スで構成されており且つ上記の平坦面より上の該レール
の高さは20〜150μｍの間である請求の範囲第14項記載
の装置。 - 【請求項１７】上記のエレメントが上記のレールを除い
てガラスで構成されており、該レールは不活性且つ耐久
性のある物質を用いてエレメント上に印刷するか又は塗
布されており、且つ上記の平坦面より上のレールの高さ
は20〜300μｍの間である請求の範囲第14項記載の装
置。
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| AU0389 | 1995-01-05 | ||
| AUPN0389A AUPN038995A0 (en) | 1995-01-05 | 1995-01-05 | Method and apparatus for human or animal cell sample treatment |
| PCT/AU1996/000007 WO1996021142A1 (en) | 1995-01-05 | 1996-01-04 | Method and apparatus for treatment of human or animal cell samples |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH10512048A JPH10512048A (ja) | 1998-11-17 |
| JP3486416B2 true JP3486416B2 (ja) | 2004-01-13 |
Family
ID=3784894
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP52064296A Expired - Lifetime JP3486416B2 (ja) | 1995-01-05 | 1996-01-04 | ヒト又は動物の細胞試料の処理方法及び処理装置 |
Country Status (6)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US5985669A (ja) |
| EP (1) | EP0801732B1 (ja) |
| JP (1) | JP3486416B2 (ja) |
| AU (1) | AUPN038995A0 (ja) |
| DE (1) | DE69634911T2 (ja) |
| WO (1) | WO1996021142A1 (ja) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2016505846A (ja) * | 2012-12-26 | 2016-02-25 | ベンタナ メディカル システムズ， インコーポレイテッド | 対向部および対向部を有する自動検体処理システム |
| US10746752B2 (en) | 2009-11-13 | 2020-08-18 | Ventana Medical Systems, Inc. | Opposables and automated specimen processing systems with opposables |
Families Citing this family (43)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| AUPN923596A0 (en) | 1996-04-12 | 1996-05-09 | Australian Biomedical Corporation Limited | Method and apparatus for treatment of human or animal cell samples |
| US6096271A (en) * | 1998-02-27 | 2000-08-01 | Cytologix Corporation | Random access slide stainer with liquid waste segregation |
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| US7897106B2 (en) * | 1999-07-08 | 2011-03-01 | Lee Angros | Situ heat induced antigen recovery and staining apparatus and method |
| US8298485B2 (en) * | 1999-07-08 | 2012-10-30 | Lee H. Angros | In situ heat induced antigen recovery and staining apparatus and method |
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