JP3443737B2 - 美白化粧品 - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】 【０００１】 【発明の目的】 【産業上の利用分野】本発明は、いわゆる美白化粧品
（クリーム、乳状美容液、ファンデーション)に関する
ものである。 【０００２】 【発明の背景】チロシナーゼの阻害物質は、生鮮食品の
褐変防止、メラニン色素生成抑制の作用をもち、化粧品
を含む幅広い応用が考えられる。この種の物質の一つで
あるアルブチン（ヒドロキノン−β−Ｄ−グルコシド)
は、感染性泌尿器疾患の治療薬として用いられてきた生
薬ウワウルシの有効成分として単離されたが、近年皮膚
炎等のアレルギー、及び炎症疾患に対しても用いられ、
その有効性が注目されている。 【０００３】さらにこのものが最近大きくクローズアッ
プされてきたのは、美白化粧品の有効成分として、スキ
ンケアのためのクリーム，乳状美容液、日焼け防止用の
ファンデーション等の分野で、同じくチロシナーゼ阻害
活性を有するコウジ酸との共用を含めて、広範囲に使用
されるようになってきたことである。 【０００４】一方、（＋）−カテキンの配糖体の合成に
関しては、１９９１年船山等により、サイクロデキスト
リングルコーストランスフェラーゼ（ＣＧ Ｔａｓｅ)
を使用し、また１９９２年北尾等により、シュクロース
ホスホリラーゼを使用し、いずれも酵素的に（＋）−カ
テキンのモノグルコシドを合成した報告があるが収量
は、必ずしも高くない。 【０００５】化学的な（＋）−カテキンの配糖体の合成
は、Ｋ．Ｗｅｉｎｇｅｓが約３０年前に（＋）−カテキ
ンのモノグルコシドを合成した報告があるだけで、収量
はきわめて低かった。また船山等によると、ＣＧ Ｔａ
ｓｅの利用により得られた（＋）−カテキングルコシド
のチロシナーゼ阻害活性を検討した結果、アルブチンと
同程度であることが報告されている。 【０００６】 【開発を試みた技術的事項】本発明はこのような背景に
鑑みなされたものであって、アルブチンよりもチロシナ
ーゼ阻害活性の高い物質を有効成分とする美白化粧品の
提供を試みたものである。 【０００７】 【発明の構成】 【目的達成の手段】即ち本出願の美白化粧品は、一般式
化２ 【化２】 （式中、Ｒは単糖または２糖残基を示す）で表される
（＋）−カテキン−３−Ｏ−β−配糖体を有効成分とし
て含有することを特徴とするものであり、、この発明に
より前記目的を達成しようとするものである。 【０００８】以下本発明について説明する。（＋）−カ
テキンを始めとするカテキン類は生薬阿仙薬（整腸薬)
の主要成分であり、また茶の一成分でもあり、近年この
ものは生理活性として、抗菌作用、抗う蝕作用、血圧上
昇抑制作用、血中コレステロール上昇抑制作用、抗ガン
作用、インフルエンザウイルス感染阻止作用等を有する
こと、また機能性として強い抗酸化作用、消臭作用を示
すことが多くの研究者によって報告されている。 【０００９】しかし、カテキンの誘導体の合成、並びに
合成化合物の生理活性についての報告は、きわめて少な
くカテキンのフェノール基をメトオキシに置換したもの
が、イネゴマ葉枯病菌に対し、強い殺菌作用をもつとい
う報告がある程度である。従って、カテキンの誘導体を
合成し、機能性や生理活性の向上がみられるかどうかを
追求することは、大変興味深い研究対象であると考えら
れる。 【００１０】本発明は（＋）−カテキンを使用し、グル
コース、マンノース、キシロース、ガラクトース、マル
トース、ラムノース等の３−Ｏ−β配糖体を化学的に合
成し、その生理活性、機能性等について究明したもので
ある。カテキンの合成に当たっては、過塩素酸銀および
シルバートリフレートを使うことにより合成法を簡略化
するとともに、収量を向上させ、また合成困難のマルト
シドの合成を可能にするものである。また（＋）−カテ
キンの配糖体を合成する全く新しい手法として、糖を弗
素化する合成法を導入した。またこれら合成法によって
得られた（＋）−カテキンの配糖体のうち、（＋）−カ
テキンキシロシドは、アルブチンに匹敵するといわれる
カテキングルコシドを上回るチロシナーゼ阻害活性を有
することと、他の配糖体もアルブチンに匹敵するか、あ
るいはそれを若干上回る阻害活性を有することが認めら
れ、これらのものが美白化粧品の成分として有効である
ことがわかった。以下本発明の実施例を示す。 【００１１】 【実施例】まず各実施例共通として、（＋）−カテキン
の５, ７, ３′, ４′位のアセチル化、即ち５, ７,
３′, ４′−テトラアセチル（＋）−カテキンの合成を
行なう。 【００１２】〔５, ７, ３′, ４′−テトラアセチル
（＋）−カテキンの合成〕（＋）−カテキン３ｇを乾燥
アセトン６mlに加温しながら溶かし、９mlの無水酢酸を
加え、１. ５mlの無水ピリジンを、さらに加えた後、１
分間激しく攪拌する。そのものを３００mlの氷水に注
ぎ、３０分〜１時間放置後、上清をこぼしクロロホルム
で抽出する。抽出物を分液ろ斗に入れ５％塩酸で２回、
水で２回、飽和重曹水で２回とさらに水で３回程度洗浄
し、中性にする。クロロホルム層は、無水硫酸マグネシ
ウムで脱水し濃縮する。目的物は、シリカゲル：セライ
ト（２：１) のカラムクロマトグラフィ、展開溶媒、ク
ロロホルム：酢酸エチル（１０：１) で分画、精製、無
色のシロップ状物質として得られる。収率１９％であ
り、ＮＭＲとＩＲで構造を確認した。 【００１３】¹Ｈ−ＮＭＲ：δ２. １〜２. ３５（１２
Ｈ、アセチル基) 、δ２. ５〜２.９５（２Ｈ、Ｈ−４)
、δ３. ５（１Ｈ、Ｈ−３) 、δ４. ６〜４. ７５
（１Ｈ、Ｈ−２) 、δ６. ４〜６. ６（２Ｈ、Ｈ−６、
Ｈ−８) 、δ７. １５〜７. ３（３Ｈ、Ｈ−２′,
５′, ６′) 【００１４】次に実施例１〜５共通として、それぞれの
糖のアセチル化は、糖に無水酢酸ナトリウムと無水酢酸
とを加え、沸騰湯浴中で約２時間反応させた後、氷水中
に注ぐ常法に従って行なった。 【００１５】またアセチル化した糖の１位の臭素化は、
臭化水素飽和氷酢酸を加え、密栓をして室温に放置後、
クロロホルムで抽出、濃縮する方法に従って行なった。 【００１６】〔実施例１〕（＋）−カテキン−３−グル
コシドの過塩素酸銀使用による合成 ０. ５ｇの５, ７, ３′, ４′テトラアセチル（＋）−
カテキンを無水クロロホルム１０mlに溶かし、モレキュ
ラシーブ４Ａ６００mgを加え、室温で１時間攪拌する。
その後、過塩素酸銀０. ５ｇを加え、無水クロロホルム
１２mlに溶かした２, ３, ４, ６−テトラ−Ｏ−アセチ
ル−α−Ｄ−グルコピラノシルブロマイドを分液ろ斗よ
り滴下しながら、１時間攪拌する。さらに３時間攪拌
後、反応液を飽和重曹水の入った容器に吸引ろ過し、ろ
液を飽和重曹水で１回、水で２〜３回洗浄し、中性にし
て塩化カルシウムで脱水する。 【００１７】脱水後ろ過したクロロホルム溶液を濃縮
し、できた油状物に０. １Ｎのナトリウムメチラート２
５mlを加え、２時間反応させ、脱アセチルする。反応液
に蒸留水を１０ml加え、さらにＨ⁺ イオン交換樹脂によ
り反応液を中性にし、ろ過、濃縮する。濃縮物は少量の
メタノールに溶かし、少量のシリカゲルに吸着させ、メ
タノールを蒸発させた後、シリカゲルカラムクロマトグ
ラフィにより分離する。展開液には、酢酸エチル：メタ
ノール：水＝８０：７：３を使用した。目的物は朱色の
シロップ状物質として得られた。収量約７０mg、収率１
４％であり、構造はＮＭＲ、ＩＲにより確認した。 【００１８】¹Ｈ−ＮＭＲ：δ２. ４〜２. ９（２Ｈ、
Ｈ−４) 、δ４. ３（１Ｈ、Ｈ−２) 、δ４. ８（１
Ｈ、糖Ｃ−１) 、δ３. ３〜５. ３（糖の環もしくはＯ
Ｈのプロトン) 、δ５. ６（１Ｈ、Ｈ−６) 、δ５. ９
（１Ｈ、Ｈ−８) 、δ６. ４〜６. ８５（３Ｈ、Ｈ−
２′, ５′, ６′) 、δ８. ３〜９. ３５（４Ｈ、ＯＨ
−５, ７, ３′, ４′) 【００１９】〔実施例２〕 （＋）−カテキン−３−マ
ンノシドの合成 ５, ７, ３′, ４′−テトラアセチル（＋）−カテキン
１. ２６ｇを無水クロロホルム２０mlに溶かし、モレキ
ュラシーブ４Ａ４. ０ｇを加え、室温で１時間攪拌す
る。その後、過塩素酸銀１. ５ｇを加え、無水クロロホ
ルム２０mlに溶かした２, ３, ４, ６−テトラ−Ｏ−ア
セチル−α−Ｄ−マンノピラノシルブロマイド１. ５ｇ
を分液ろ斗より滴下しながら１時間攪拌する。さらに３
時間攪拌後、反応液を飽和重曹水を入れた容器に吸引ろ
過し、ろ液を飽和重曹水で１回、水で２〜３回洗浄し、
中性にして塩化カルシウムで脱水する。 【００２０】脱水後ろ過したクロロホルム溶液を濃縮
し、できた油状物に０. １Ｎのナトリウムメチラート５
０mlを加え、２時間反応させ、脱アセチルする。反応液
に蒸留水を１０ml加え、さらにＨ⁺ イオン交換樹脂によ
り反応液を中性にし、ろ過、濃縮する。濃縮物は少量の
メタノールに溶かし、少量のシリカゲルに吸着させ、メ
タノールを蒸発させた後、シリカゲルカラムクロマトグ
ラフィ（展開溶媒、酢酸エチル：メタノール：水＝８
０：２：１) により目的物を分離した。目的物はうすい
黄色のシロップ状物質として得られた。収量約２２０m
g、収率１８％で、構造はＮＭＲ、ＩＲにより確認し
た。 【００２１】¹Ｈ−ＮＭＲ：δ２. ４〜２. ９６（２
Ｈ、Ｈ−４) 、δ４. ４（１Ｈ、Ｈ−２) 、δ４. ７
（１Ｈ、糖Ｃ−１) 、δ３. ３〜４. ９（糖の環もしく
はＯＨのプロトン) 、δ５. ６５（１Ｈ、Ｈ−６) 、δ
５. ８（１Ｈ、Ｈ−８) 、δ６.４〜６. ７（３Ｈ、Ｈ
−２′, ５′, ６′) 、δ８. ６〜９. ２（４Ｈ、ＯＨ
−５, ７, ３′, ４′) 【００２２】〔実施例３〕 （＋）−カテキン−３−キ
シロシドの合成 ５, ７, ３′, ４′−テトラアセチル（＋）−カテキン
０. ５ｇを無水クロロホルム１０mlに溶かし、モレキュ
ラシーブ４Ａ６００mgを加え、室温で１時間攪拌する。
その後、過塩素酸銀０. ５ｇを加え、無水クロロホルム
１２mlに溶かした２, ３, ４−トリ−Ｏ−アセチル−α
−Ｄ−キシロピラノシルブロマイド０.５ｇを分液ろ斗
より滴下しながら１時間攪拌する。さらに３時間攪拌
後、反応液を飽和重曹水を入れた容器に、吸引ろ過し、
ろ液を飽和重曹水で１回、水で２〜３回洗浄し、中性に
して塩化カルシウムで脱水する。 【００２３】脱水後ろ過したクロロホルム溶液を濃縮
し、濃縮物に０. １Ｎのナトリウムメチラート２５mlを
加え、２時間反応させ、脱アセチルする。反応液に蒸留
水を１０ml加え、さらにＨ⁺ イオン交換樹脂により反応
液を中性にし、ろ過、濃縮する。濃縮物は少量のメタノ
ールに溶かし、少量のシリカゲルに吸着させ、メタノー
ルを蒸発させた後、シリカゲルカラムクロマトグラフィ
（展開溶媒：酢酸エチル：メタノール：水＝８０：２：
１) により目的物を分離した。目的物は黄色のシロップ
状物質として得られた。収量約９０mg、収率１９％で、
構造はＮＭＲ、ＩＲにより確認した。 【００２４】¹Ｈ−ＮＭＲ：δ２. ３〜２. ９５（２
Ｈ、Ｈ−４) 、δ４. ２（１Ｈ、Ｈ−２) 、δ４. ８
（１Ｈ、糖Ｃ−１) 、δ３. ５〜４. ９５（糖の環、も
しくはＯＨプロトン) 、δ５. ６５（１Ｈ、Ｈ−６) 、
δ５. ８（１Ｈ、Ｈ−８) 、δ６. ４〜６. ７（３Ｈ、
Ｈ−２′, ５′, ６′) 、δ８. ３〜９. ３（４Ｈ、Ｏ
Ｈ−５, ７, ３′, ４′) 【００２５】〔実施例４〕 （＋）−カテキン−３−ガ
ラクトシドの合成 ５, ７, ３′, ４′−テトラアセチル（＋）−カテキン
０. ５ｇを無水クロロホルム１０mlに溶かし、モレキュ
ラシーブ４Ａを６００mgを加え、室温で１時間攪拌す
る。その後、過塩素酸銀０. ５ｇを加え、無水クロロホ
ルム１２mlに溶かした２, ３, ４, ６−テトラ−Ｏ−ア
セチル−α−Ｄ−ガラクトピラノシルブロマイド０. ５
ｇ分液ろ斗より滴下しながら１時間攪拌する。さらに３
時間攪拌後、反応液を飽和重曹水を入れた容器に、吸引
ろ過する。ろ液を飽和重曹水で１回、水で２〜３回洗浄
し、中性にして塩化カルシウムで脱水する。 【００２６】脱水後ろ過したクロロホルム溶液を濃縮
し、濃縮物に０. １Ｎのナトリウムメチラート２５mlを
加え、２時間反応させ、脱アセチルする。反応液に蒸留
水を１０ml加え、さらにＨ⁺ イオン交換樹脂により反応
液を中性にし、ろ過、濃縮する。濃縮物は少量のメタノ
ールに溶かし、少量のシリカゲルに吸着させ、メタノー
ルを蒸発させた後、シリカゲルカラムクロマトグラフィ
（展開溶媒：酢酸エチル：メタノール：水＝８０：１
５：１０) により目的物を分離した。目的物は黄色のシ
ロップ状物質として得られた。収量約１００mg、収率２
０％で、構造はＮＭＲ、ＩＲにより確認した。 【００２７】¹Ｈ−ＮＭＲ：δ２. ３〜２. ７（２Ｈ、
Ｈ−４) 、δ４. ３（１Ｈ、Ｈ−２) 、δ４. ６（１
Ｈ、糖Ｃ−１) 、δ３. ３〜４. ９（糖の環、もしくは
ＯＨプロトン) 、δ５. ６５（１Ｈ、Ｈ−６) 、δ５.
７５（１Ｈ、Ｈ−８) 、δ６.３〜６. ６５（３Ｈ、Ｈ
−２′, ５′, ６′) 、δ８. ４〜９. ０（４Ｈ、ＯＨ
−５, ７, ３′, ４′) 【００２８】〔実施例５〕 （＋）−カテキン−３−マ
ルトシドのシルバートリフレート使用による合成 １. ３５ｇの５, ７, ３′, ４′−テトラアセチル
（＋）−カテキンを無水クロロホルム６０mlに溶かし、
モレキュラシーブ４Ａを４．０ｇ、シルバートリフレー
ト（ＣＦ₃ ＳＯ₃ Ａｇ) １. ５ｇを加え、室温で１時間
攪拌する。つぎに２, ３, ６, ２′, ３′, ４′, ６′
−ヘプタ−Ｏ−アセチル−α−マルトシルブロマイド
２. ０ｇを反応液に加えた後、０℃にして、さらに１時
間攪拌する。室温にもどして、１時間攪拌した後、飽和
重曹水を入れた容器に、吸引ろ過し、ろ液を飽和重曹水
と水で洗浄し、中性にした後塩化カルシウムで脱水す
る。 【００２９】脱水後ろ過したクロロホルム溶液を濃縮
し、濃縮物に０. １Ｎのナトリウムメチラート５０mlを
入れ、２時間反応させ、脱アセチルする。反応液に蒸留
水を３０ml加え、さらにＨ⁺ イオン交換樹脂で反応液を
中性にし、ろ過、濃縮する。濃縮物をシリカゲルカラム
クロマトグラフィ（展開溶媒、酢酸エチル：メタノー
ル：水＝８０：１５：１０) にかけ目的物を分離した。
目的物は朱色のシロップ状物質として得られた。収量約
２７０mg、収率１３％で、構造はＮＭＲ、ＩＲにより確
認した。 【００３０】¹Ｈ−ＮＭＲ：δ２. ３５〜２. ８（２
Ｈ、Ｈ−４) 、δ４. ３（１Ｈ、Ｈ−２) 、δ４. ７
（１Ｈ、糖Ｃ−１) 、δ３. ５〜５. ４（糖の環、もし
くはＯＨプロトン) 、δ５. ６（１Ｈ、Ｈ−６) 、δ
５. ８（１Ｈ、Ｈ−８) 、δ６. ４〜６. ８（３Ｈ、Ｈ
−２′, ５′, ６′) 、δ８. ３〜９. ３（４Ｈ、ＯＨ
−５, ７, ３′, ４′) 【００３１】以下、糖の弗素化手法による（＋）−カテ
キン配糖体の製造方法の実施例を掲げる。 〔実施例６〕 《５, ７, ３′, ４′−テトラアセチル（＋）−カテキ
ンの３位のトリメチルシリル化》５, ７, ３′, ４′−
テトラアセチル（＋）−カテキン０. ７４ｇを無水ピリ
ジン２mlに溶かし、ヘキサメチルジシルアザン０. ５ml
とトリメチルクロロシラン０. ５mlを加えたものを栓を
して室温に４〜５時間放置する。反応液を濃縮し、濃縮
物を四塩化炭素に溶かし、ろ過、ろ液を濃縮する。目的
とする５, ７, ３′, ４′−テトラアセチル−３−（ト
リメチルシリロキシ）-(＋）−カテキンは黄白色のシロ
ップ状物質として得られる。収量０. ８５ｇ、収率９９
％、トリメチルシリル化は、薄層クロマトグラフィ（展
開溶媒、トルエン：酢酸エチル＝１６. ３) で、５,
７, ３′, ４′−テトラアセチル（＋）−カテキンは原
点にとどまるのに対し、目的物はＲｆ＝０. ２５である
ことにより確認した。 【００３２】《２, ３, ４−トリ−Ｏ−アセチル−Ｌ−
ラムノースの合成》無水酢酸４０ｍｌと無水ピリジン４
０ｍｌを三角フラスコにとり、０℃に冷却、攪拌しなが
らα−Ｌ−ラムノース１０．０ｇを加え、１日室温に放
置する。反応液を氷水中に滴下し、冷蔵庫に放置後、ク
ロロホルムで抽出し、希塩酸、飽和重曹水、水で洗い、
中性にして濃縮した。 【００３３】《２, ３, ４−トリ−Ｏ−アセチル−α−
Ｌ−ラムノピラノシルフルオライドの合成》２, ３, ４
−トリ−Ｏ−アセチル−Ｌ−ラムノース１. ３１ｇを無
水テトラヒドロフランに攪拌して溶解させ、ドライアイ
スで冷やしたアセトンバスで−３０℃にする。ＤＡＳＴ
（ジエチルアミノサルファートリフルオライド) ０. ６
６mlを加え、密栓し、室温で６０分攪拌後、再び−３０
℃に冷却し、０. ６６mlのＤＡＳＴを加え室温で６０分
攪拌する。薄層クロマトグラフィ（展開溶媒、クロロホ
ルム：アセトン＝９：１) でＲｆ０. ７１の目的物が合
成されていることを確認した後、−３０℃に冷却、メタ
ノール０. ３mlを加える。さらに、３倍量のクロロホル
ムを加え、飽和重曹水、蒸留水で洗い、硫酸マグネシウ
ムで脱水し、ろ過、濃縮する。シリカゲルカラムクロマ
トグラフィー（展開溶媒、ヘキサン：酢酸エチル：１,
２−ジクロロエタン＝１０：１：１) で目的物を分離す
る。目的物は無色のシロップ状物質として得られる。収
量は０. ６４ｇ、収率４９％である。 【００３４】《糖の弗素化手法による（＋）−カテキン
−３−ラムノシドの合成》１mlの無水ベンゼン中に３フ
ッ化ホウ素ジエチルエーテル０. ２mlを溶かした溶液
に、２mlの無水ベンゼン中に２, ３, ４−トリ−Ｏ−ア
セチル−α−Ｌ−ラムノピラノシルフルオライド０. ４
８ｇ、５, ７, ３′, ４′−テトラアセチル−３−（ト
リメチルシリロキシ）−（＋）−カテキン０. ８５ｇを
溶かした溶液を混合し、１２時間攪拌後、反応液をクロ
ロホルムで希釈し、蒸留水、飽和重曹水、蒸留水で洗
い、中性にして硫酸マグネシウムで脱水する。 【００３５】脱水後、クロロホルム溶液を濃縮し、０.
１Ｎのナトリウムメチラート２５mlと２時間反応させ脱
アセチルする。反応液に蒸留水を１０ml加え、Ｈ⁺ イオ
ン交換樹脂で中性にした後、ろ過、濃縮する。濃縮物は
少量のメタノールに溶かし少量のシリカゲルに吸着さ
せ、メタノールを蒸発させた後、シリカゲルカラムクロ
マトグラフィ（展開溶媒、酢酸エチル：メタノール：水
＝８０：７：３) で目的物を分離した。目的物は黄色の
シロップ状物質として得られた収量２５０mg、収率３４
％で、構造はＮＭＲ、ＩＲにより確認した。 【００３６】¹ＮＭＲ、δ１. １（３Ｈ、ＣＨ₃ ) 、δ
２. ４〜２. ７（２Ｈ、Ｈ−４) 、δ４. ３（１Ｈ、Ｈ
−２) 、δ４. ５（１Ｈ、糖Ｃ−１) 、３. ３〜４. ８
（糖の環、もしくはＯＨプロトン) 、δ５. ６（１Ｈ、
Ｈ−６) 、δ５. ８（１Ｈ、Ｈ−８) 、δ６. ５〜６.
８（３Ｈ、Ｈ−２′, ５′, ６) 、δ８. ６〜９. ２
（４Ｈ、ＯＨ−５, ７, ３′, ４′) 【００３７】以上が（＋）−カテキンの配糖体の製造方
法の実施例であり、以下各（＋）−カテキンの配糖体の
チロシナーゼ阻害活性の検定について説明する。 《検定１》０. ９％ＮａＣｌを含む２ｍＭ Ｌ−ＤＯＰ
Ａ含有、０. １Ｍリン酸緩衝液（ＰＨ６. ５) １. ５ml
と被験液０. ３ml：（＋）−カテキン−３−グルコシ
ド、（＋）−カテキン−３−ガラクトシド、アルブチン
水溶液（いずれも１０mg／ml) を混合し、０. ２mlのマ
シュルームチロシナーゼ水溶液（１００μg ／ml：Ｓｉ
ｇｍａ社の３８７０ｕｎｉｔ／mg固形量) を加え、２５
℃でＤＯＰＡクローム生成に由来する４７５nmにおける
吸光度の増加を１５分間追跡し、その抑制効果から阻害
活性を検定した。なお、対照はサンプル水溶液のかわり
に水を置き換えたものとした。 【００３８】その結果、図１のように、テストした両配
糖体は、アルブチンを上まわるチロシナーゼ阻害活性を
示した。 【００３９】《検定２》０. ９％Ｎａｃｌを含む２ｍＭ
Ｌ−ＤＯＰＡ含有、０. １Ｍリン酸緩衝液（ＰＨ６.
５) １. ５mlと被験液０. ２ml：（＋）−カテキン−３
−グルコシド、（＋）−カテキン−３−ガラクトシド、
アルブチン水溶液（いずれも２０mg／ml) を混合し、
０. ２mlのマシュルームチロシナーゼ水溶液（５０μg
／ml：Ｓｉｇｍａ社の３８７０ｕｎｉｔ／mg固形量) を
加え、２５℃でＤＯＰＡクローム生成に由来する４７５
nmにおける吸光度の増加を６０分間追跡し、その抑制効
果から阻害活性を検定した。なお、対照はサンプル水溶
液のかわりに水を置き換えたものとした。 【００４０】その結果、図２のように、６０分間のテス
トにおいても、テストした両配糖体は、アルブチンを上
まわるチロシナーゼ阻害活性を示した。 【００４１】《検定３》０. ９％Ｎａｃｌを含む２ｍＭ
Ｌ−ＤＯＰＡ含有、０. １Ｍリン酸緩衝液（ＰＨ６.
５) １. ５mlと被験液０. ２ml：（＋）−カテキン−３
−グルコシド、（＋）−カテキン−３−ガラクトシド、
（＋）−カテキン−３−キシロシド、アルブチン水溶液
（いずれも２０mg／ml) を混合し、０. ２mlのマシュル
ームチロシナーゼ水溶液（５０μg ／ml：Ｓｉｇｍａ社
の３８７０ｕｎｉｔ／mg固形量)を加え、２５℃でＤＯ
ＰＡクローム生成に由来する４７５nmにおける吸光度の
増加を６０分間追跡し、その抑制効果から阻害活性を検
定した。なお、対照はサンプル水溶液のかわりに水を置
き換えたものとした。 【００４２】その結果、図３のように、テストした３種
の配糖体は、いずれもアルブチンを上まわるチロシナー
ゼ阻害活性を示し、なかでも（＋）−カテキン−３−キ
シロシドはグルコシド、ガラクトシドをさらに上まわっ
ていることが判明した。 【００４３】《検定４》０. ９％Ｎａｃｌを含む２ｍＭ
Ｌ−ＤＯＰＡ含有、０. １Ｍリン酸緩衝液（ＰＨ６.
５) １. ５mlと被験液０. ２ml：（＋）−カテキン−３
−マンノシド、（＋）−カテキン−３−マルトシド、
（＋）−カテキン−３−ラムノシド、アルブチン水溶液
（いずれも２０mg／ml) を混合し、０. ２mlのマシュル
ームチロシナーゼ水溶液（５０μg ／ml：Ｓｉｇｍａ社
の３８７０ｕｎｉｔ／mg固形量) を加え、２５℃でＤＯ
ＰＡクローム生成に由来する４７５nmにおける吸光度の
増加を６０分間追跡し、その抑制効果から阻害活性を検
定した。なお、対照はサンプル水溶液のかわりに水を置
き換えたものとした。 【００４４】その結果、図４のように、テストした３種
の配糖体のうち、マンノシドとラムノシドがアルブチン
と同程度か、それを若干上まわる阻害活性、またマルト
シドがアルブチンを上まわる阻害活性を示した。 【００４５】 【発明の効果】本発明では、カテキンの合成に当たって
過塩素酸銀またはシルバートリフレートを使うことによ
り合成法が簡略化できるとともに、従来法のように酸化
銀や炭酸銀を用いる場合に比べて収量が３倍以上に向上
し、また従来合成困難なマルトシドの合成を可能にし
た。また糖を弗素化して（＋）−カテキンの配糖体を合
成する新しい手法の導入による配糖体の合成に成功し、
収量が大幅にアップできた。 【００４６】また合成した配糖体について生理活性等を
検定した結果、（＋）−カテキンのグルコシド、ガラク
トシド、キシロシド、マルトシドにアルブチンを上まわ
るチロシナーゼ阻害活性が認められ、なかでもキシロシ
ドはグルコシドを若干上まわっていることが認められ
た。他の配糖体のマンノシド、ラムノシドは、アルブチ
ンと同程度、もしくは若干上まわる阻害活性を示した。
従って（＋）−カテキンの配糖体は、美白化粧品の成分
として有望であると考えられる。

【図面の簡単な説明】 【図１】（＋）−カテキンの配糖体のチロシナーゼ阻害
活性の検定結果を示すグラフであって、検定１の結果を
示すものである。 【図２】同上検定２の結果を示すものである。 【図３】同上検定３の結果を示すものである。 【図４】同上検定４の結果を示すものである。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (58)調査した分野(Int.Cl.⁷，ＤＢ名) A61K 7/00 - 7/50 ＣＡ（ＳＴＮ)

Claims (1)

1. (57)【特許請求の範囲】 【請求項１】 一般式化１ 【化１】 （式中、Ｒは単糖または２糖残基を示す）で表される
   （＋）−カテキン−３−Ｏ−β−配糖体を有効成分とし
   て含有することを特徴とする美白化粧品。