JP3314930B2 - 抗生物質ａ４０９２６エステル誘導体 - Google Patents
抗生物質ａ４０９２６エステル誘導体Info
- Publication number
- JP3314930B2 JP3314930B2 JP50491592A JP50491592A JP3314930B2 JP 3314930 B2 JP3314930 B2 JP 3314930B2 JP 50491592 A JP50491592 A JP 50491592A JP 50491592 A JP50491592 A JP 50491592A JP 3314930 B2 JP3314930 B2 JP 3314930B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- antibiotic
- alkyl
- acid
- complex
- compounds
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K9/00—Peptides having up to 20 amino acids, containing saccharide radicals and having a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K9/006—Peptides having up to 20 amino acids, containing saccharide radicals and having a fully defined sequence; Derivatives thereof the peptide sequence being part of a ring structure
- C07K9/008—Peptides having up to 20 amino acids, containing saccharide radicals and having a fully defined sequence; Derivatives thereof the peptide sequence being part of a ring structure directly attached to a hetero atom of the saccharide radical, e.g. actaplanin, avoparcin, ristomycin, vancomycin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Oncology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Public Health (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
- Cephalosporin Compounds (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Description
【発明の詳細な説明】 本発明は式Ｉ ［式中、 R2は水素又はアミノ官能基の保護基を示し、 Ｍは水素、α−Ｄ−マンノピラノシル又は６−Ｏ−アセ
チル−α−Ｄ−マンノピラノシルを示し、 R'は（C10−C11）アルキルを示し、 R3は（C1−C6）アルキル、ヒドロキシ（C1−C6）アルキ
ル、又はハロ（C1−C6）アルキルを示す］ の新規抗生物質A40926エステル誘導体及びその付加塩を
目的とする。
チル−α−Ｄ−マンノピラノシルを示し、 R'は（C10−C11）アルキルを示し、 R3は（C1−C6）アルキル、ヒドロキシ（C1−C6）アルキ
ル、又はハロ（C1−C6）アルキルを示す］ の新規抗生物質A40926エステル誘導体及びその付加塩を
目的とする。
単独で、又は他の置換基と組み合わせて本文で用いる
「アルキル」という用語は直鎖状及び分枝鎖状炭化水素
基の両方を含み、特に「（C1−C6）アルキル」は炭素数
が１−６の直鎖状もしくは分枝鎖状脂肪族炭化水素鎖、
例えばメチル、エチル、プロピル、１−メチルエチル、
ブチル、１−メチルプロピル、1,1−ジメチルエチル、
ペンチル、１−メチルブチル、２−メチルブチル、ヘキ
シル、１−メチルペンチル、3,3−ジメチルブチル、１
−エチルブチル、４−メチルペンチル、３−メチルペン
チルなどを示す。
「アルキル」という用語は直鎖状及び分枝鎖状炭化水素
基の両方を含み、特に「（C1−C6）アルキル」は炭素数
が１−６の直鎖状もしくは分枝鎖状脂肪族炭化水素鎖、
例えばメチル、エチル、プロピル、１−メチルエチル、
ブチル、１−メチルプロピル、1,1−ジメチルエチル、
ペンチル、１−メチルブチル、２−メチルブチル、ヘキ
シル、１−メチルペンチル、3,3−ジメチルブチル、１
−エチルブチル、４−メチルペンチル、３−メチルペン
チルなどを示す。
「ハロ（C1−C6）アルキル」という用語は炭素数が１
−６のモノ−又はポリ−ハロゲン化アルキル基を示し、
ハロ原子はクロロ、フルオロ又はブロモであることがで
き、アルキル鎖のどの炭素原子上に位置することもでき
る。
−６のモノ−又はポリ−ハロゲン化アルキル基を示し、
ハロ原子はクロロ、フルオロ又はブロモであることがで
き、アルキル鎖のどの炭素原子上に位置することもでき
る。
「ハロ（C1−C6）アルキル」基は１−３の範囲の数の
ハロ原子を含むことが好ましく、モノ置換であることが
最も好ましい。
ハロ原子を含むことが好ましく、モノ置換であることが
最も好ましい。
「ハロ（C1−C6）アルキル」基の例は:2−クロロエチ
ル、１−クロロエチル、２−ブロモエチル、2,2−ジク
ロロエチル、2,2−ジブロモエチル、２−フルオロエチ
ル、３−クロロプロピル、３−ブロモプロピル、3,3,3
−トリブロモプロピル、３−フルオロプロピル、２−ク
ロロプロピル、２−ブロモプロピル、２−フルオロプロ
ピル、４−クロロブチル、４−ブロモブチル、４−フル
オロブチル、３−ブロモブチル、３−クロロブチルなど
である。
ル、１−クロロエチル、２−ブロモエチル、2,2−ジク
ロロエチル、2,2−ジブロモエチル、２−フルオロエチ
ル、３−クロロプロピル、３−ブロモプロピル、3,3,3
−トリブロモプロピル、３−フルオロプロピル、２−ク
ロロプロピル、２−ブロモプロピル、２−フルオロプロ
ピル、４−クロロブチル、４−ブロモブチル、４−フル
オロブチル、３−ブロモブチル、３−クロロブチルなど
である。
「ヒドロキシ（C1−C6）アルキル」という用語は炭素
数が１−６のモノ−又はポリ−ヒドロキシアルキル基を
示し、ヒドロキシ基はアルキル鎖のどの炭素原子上にあ
ることもでき、但し各炭素は１個以上のヒドロキシ基を
含むことはできない。
数が１−６のモノ−又はポリ−ヒドロキシアルキル基を
示し、ヒドロキシ基はアルキル鎖のどの炭素原子上にあ
ることもでき、但し各炭素は１個以上のヒドロキシ基を
含むことはできない。
「ヒドロキシ（C1−C6）アルキル」基は１−３の範囲
の数のヒドロキシ原子を含むのが好ましく、モノ置換が
最も好ましい。
の数のヒドロキシ原子を含むのが好ましく、モノ置換が
最も好ましい。
「ヒドロキシ（C1−C6）アルキル」基の例は:2−ヒド
ロキシエチル、３−ヒドロキシプロピル、２−ヒドロキ
シプロピル、2,3−ジヒドロキシプロピル、４−ヒドロ
キシブチル、２−ヒドロキシブチル、３−ヒドロキシブ
チルなどである。
ロキシエチル、３−ヒドロキシプロピル、２−ヒドロキ
シプロピル、2,3−ジヒドロキシプロピル、４−ヒドロ
キシブチル、２−ヒドロキシブチル、３−ヒドロキシブ
チルなどである。
本発明で用いることができるＮ−保護基は、参照文献
（例えばT.W.Greene,“Protective Groups in Organ
ic Chemistry",John Wiley and Sons,New York,19
81,p.323−326,及びM.Mc.Omie“Protecting Groups i
n Organic Chemistry",Plenum Press,New York,197
3を参照）に記載されており、式Ｉの抗生物質の15位の
第１アミノ基と結合を形成することができる当該技術に
おいて既知のＮ−保護基の１つである。
（例えばT.W.Greene,“Protective Groups in Organ
ic Chemistry",John Wiley and Sons,New York,19
81,p.323−326,及びM.Mc.Omie“Protecting Groups i
n Organic Chemistry",Plenum Press,New York,197
3を参照）に記載されており、式Ｉの抗生物質の15位の
第１アミノ基と結合を形成することができる当該技術に
おいて既知のＮ−保護基の１つである。
好ましいＮ−保護基はベンジルである。
抗生物質A40926は、アクチノマデュラ（Actinomadur
a）sp.ATCC39727と命名された、炭素、窒素及び無機塩
の同化源を含む培地中のアクチノマデュラの培養物から
単離された糖ペプチド抗生物質である（欧州特許出願公
開（EP−Ａ）第177882号明細書を参照）。上記の特許に
記載の方法に従うと、その因子が因子Ａ、因子Ｂ、因子
B0、因子PA及び因子PBと命名された抗生物質複合体の回
収は、発酵ブロスを濾過又は一次精製法の後に固定Ｄ−
アラニル−Ｄ−アラニル上のアフィニティークロマトグ
ラフィーにかけることを含む。
a）sp.ATCC39727と命名された、炭素、窒素及び無機塩
の同化源を含む培地中のアクチノマデュラの培養物から
単離された糖ペプチド抗生物質である（欧州特許出願公
開（EP−Ａ）第177882号明細書を参照）。上記の特許に
記載の方法に従うと、その因子が因子Ａ、因子Ｂ、因子
B0、因子PA及び因子PBと命名された抗生物質複合体の回
収は、発酵ブロスを濾過又は一次精製法の後に固定Ｄ−
アラニル−Ｄ−アラニル上のアフィニティークロマトグ
ラフィーにかけることを含む。
A40926因子は、R2及びR3が水素であり、R'が（C10−C
11）アルキル基であり、Ｍがα−Ｄ−マンノピラノシル
又は６−Ｏ−アセチル−α−Ｄ−マンノピラノシル基で
ある上式Ｉにより示すことができる。
11）アルキル基であり、Ｍがα−Ｄ−マンノピラノシル
又は６−Ｏ−アセチル−α−Ｄ−マンノピラノシル基で
ある上式Ｉにより示すことができる。
さらに特定すると抗生物質A40926因子Ａは、R'がｎ−
デシルであり、Ｍがα−Ｄ−マンノピラノシルである上
式Ｉの化合物であり、因子Ｂの主成分である抗生物質A4
0926因子B0はR'が９−メチルデシルであり、Ｍがα−Ｄ
−マンノピラノシルである上式Ｉの化合物である。
デシルであり、Ｍがα−Ｄ−マンノピラノシルである上
式Ｉの化合物であり、因子Ｂの主成分である抗生物質A4
0926因子B0はR'が９−メチルデシルであり、Ｍがα−Ｄ
−マンノピラノシルである上式Ｉの化合物である。
抗生物質A40926因子PA及び因子PBは、マンノース単位
が６−Ｏ−アセチル−α−Ｄ−マンノピラノシル単位に
置換されている点で対応する因子Ａ及びＢと異なる。
が６−Ｏ−アセチル−α−Ｄ−マンノピラノシル単位に
置換されている点で対応する因子Ａ及びＢと異なる。
抗生物質A40926因子PA及びPBは、少なくともある発酵
条件下でA40926生産微生物の主要抗生物質産物である。
条件下でA40926生産微生物の主要抗生物質産物である。
抗生物質A40926因子Ａ及びＢは主にそれぞれ抗生物質
A40926因子PA及びPBの変換産物であり、多くの場合発酵
ブロス中にすでに存在する。
A40926因子PA及びPBの変換産物であり、多くの場合発酵
ブロス中にすでに存在する。
糖部分はすべてＯ−グリコシド結合を介して抗生物質
A40926核に結合している。
A40926核に結合している。
塩基性条件下でアミノグルクロニル単位のアシル基を
置換することなくマンノース単位のアセチル基を除去
し、抗生物質A40926因子PAを抗生物質A40926因子Ａに変
換し、抗生物質A40926因子PBを抗生物質A40926因子Ｂに
変換できることが見いだされた。
置換することなくマンノース単位のアセチル基を除去
し、抗生物質A40926因子PAを抗生物質A40926因子Ａに変
換し、抗生物質A40926因子PBを抗生物質A40926因子Ｂに
変換できることが見いだされた。
従って発酵ブロス、又はその抗生物質A40926含有抽出
物あるいは濃縮物を塩基性条件下である時間放置すると
（例えばpH＞９の求核的塩基の水溶液中で終夜）、抗生
物質A40926因子Ａ及び因子Ｂの豊富な抗生物質A40926複
合体が得られるであろう。
物あるいは濃縮物を塩基性条件下である時間放置すると
（例えばpH＞９の求核的塩基の水溶液中で終夜）、抗生
物質A40926因子Ａ及び因子Ｂの豊富な抗生物質A40926複
合体が得られるであろう。
抗生物質A40926複合体の精製法の間に、因子PA及びPB
は大半が因子Ａ及びＢに変換される。
は大半が因子Ａ及びＢに変換される。
さらに糖部分の１つを制御下で酸加水分解することに
より、抗生物質A40926複合体（complex）、その単一の
因子又は該因子のいずれかの割合の混合物を、対応する
Ｎ−アシルアミノグルクロニルアグリコン複合体AB、Ｎ
−アシルアミノグルクロニルアグリコン因子Ａ、Ｎ−ア
シルアミノグルクロニルアグリコン因子Ｂならびにマン
ノシルアグリコンに変換できることが見いだされた（欧
州特許出願公開第240609号及び欧州特許出願公開第2280
15号明細書を参照）。Ｎ−アシルアミノグルクロニルア
グリコンの製造のための好ましい加水分解条件には、40
℃−80℃の温度でジメチルスルホキシド／濃塩酸の8:2
から9.5:0.5の混合物を用いることが含まれる。
より、抗生物質A40926複合体（complex）、その単一の
因子又は該因子のいずれかの割合の混合物を、対応する
Ｎ−アシルアミノグルクロニルアグリコン複合体AB、Ｎ
−アシルアミノグルクロニルアグリコン因子Ａ、Ｎ−ア
シルアミノグルクロニルアグリコン因子Ｂならびにマン
ノシルアグリコンに変換できることが見いだされた（欧
州特許出願公開第240609号及び欧州特許出願公開第2280
15号明細書を参照）。Ｎ−アシルアミノグルクロニルア
グリコンの製造のための好ましい加水分解条件には、40
℃−80℃の温度でジメチルスルホキシド／濃塩酸の8:2
から9.5:0.5の混合物を用いることが含まれる。
抗生物質A40926N−アシルアミノグルクロニルアグリ
コンは、R2、R3及びＭが水素であり、R'が（C10−C11）
アルキルである上式Ｉにより示される。
コンは、R2、R3及びＭが水素であり、R'が（C10−C11）
アルキルである上式Ｉにより示される。
A40926抗生物質のすべての糖部分を完全に切断すると
アグルコンを与える。この加水分解法は欧州特許出願公
開第240609号明細書に記載されている。
アグルコンを与える。この加水分解法は欧州特許出願公
開第240609号明細書に記載されている。
抗生物質A40926、その因子、対応するＮ−アシルアミ
ノグルクロニルアグリコン、脱アシル化誘導体、マンノ
シルアグリコン、アグリコン、いずれかの割合のそれら
の混合物は、主にグラム陽性バクテリア及びナイセリア
（Neisseriae）に対して活性である。
ノグルクロニルアグリコン、脱アシル化誘導体、マンノ
シルアグリコン、アグリコン、いずれかの割合のそれら
の混合物は、主にグラム陽性バクテリア及びナイセリア
（Neisseriae）に対して活性である。
抗生物質A40926複合体及びそのＮ−アシルアミノグル
クロニルアグリコンは式Ｉの抗生物質A40926誘導体の製
造に適した出発材料である。
クロニルアグリコンは式Ｉの抗生物質A40926誘導体の製
造に適した出発材料である。
本発明の化合物は酸性及び塩基性官能基を有し、従来
の方法に従って有機及び無機対イオンと塩を形成するこ
とができる。
の方法に従って有機及び無機対イオンと塩を形成するこ
とができる。
本発明の化合物の代表的で適した酸付加塩には、有機
及び無機酸の両方、例えば塩酸、臭化水素酸、硫酸、リ
ン酸、酢酸、三フッ化酢酸、三塩化酢酸、コハク酸、ク
エン酸、アスコルビン酸、乳酸、リンゴ酸、フマル酸、
パルミチン酸、コリン酸、パモ酸（pamoic acid）、粘
液酸、グルタミン酸、樟脳酸、グルタル酸、グルコール
酸、フタル酸、酒石酸、ラウリン酸、ステアリン酸、サ
リチル酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ソ
ルビン酸、ピクリン酸、安息香酸、ケイ皮酸などの酸と
の標準的反応により形成される塩が含まれる。
及び無機酸の両方、例えば塩酸、臭化水素酸、硫酸、リ
ン酸、酢酸、三フッ化酢酸、三塩化酢酸、コハク酸、ク
エン酸、アスコルビン酸、乳酸、リンゴ酸、フマル酸、
パルミチン酸、コリン酸、パモ酸（pamoic acid）、粘
液酸、グルタミン酸、樟脳酸、グルタル酸、グルコール
酸、フタル酸、酒石酸、ラウリン酸、ステアリン酸、サ
リチル酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ソ
ルビン酸、ピクリン酸、安息香酸、ケイ皮酸などの酸と
の標準的反応により形成される塩が含まれる。
本発明の化合物と塩を形成することができる塩基の代
表的例は：アルカリ金属又はアルカリ土類金属ヒドロキ
シド、例えばナトリウム、カリウム、カルシウム、マグ
ネシウム、バリウムヒドロキシド；アンモニア及び脂肪
族、脂環式又は芳香族有機アミン、例えばメチルアミ
ン、ジメチルアミン、トリメチルアミン及びピコリンで
ある。
表的例は：アルカリ金属又はアルカリ土類金属ヒドロキ
シド、例えばナトリウム、カリウム、カルシウム、マグ
ネシウム、バリウムヒドロキシド；アンモニア及び脂肪
族、脂環式又は芳香族有機アミン、例えばメチルアミ
ン、ジメチルアミン、トリメチルアミン及びピコリンで
ある。
本発明の「非−塩」（non−salt）化合物の対応する
付加塩への変換、及びその逆、すなわち本発明の化合物
の付加塩から非−塩形態への変換は、通常の技術的熟練
の範囲内であり、本発明に含まれる。
付加塩への変換、及びその逆、すなわち本発明の化合物
の付加塩から非−塩形態への変換は、通常の技術的熟練
の範囲内であり、本発明に含まれる。
例えば式Ｉの化合物は水性溶媒中に非−塩の形態を溶
解し、小モル過剰量の選ばれた酸又は塩基を加えること
により対応する酸又は塩基との塩に変換することができ
る。得られた溶液又は懸濁液をその後凍結乾燥して所望
の塩を回収する。
解し、小モル過剰量の選ばれた酸又は塩基を加えること
により対応する酸又は塩基との塩に変換することができ
る。得られた溶液又は懸濁液をその後凍結乾燥して所望
の塩を回収する。
最終的塩が、非−塩の形態が溶解性の有機溶媒中に不
溶性の場合、化学量論的量又は小モル過剰量の選ばれた
酸又は塩基を加えた後に非−塩の形態の有機溶液から濾
過により塩を回収する。
溶性の場合、化学量論的量又は小モル過剰量の選ばれた
酸又は塩基を加えた後に非−塩の形態の有機溶液から濾
過により塩を回収する。
非−塩の形態は水性溶媒中に溶解した対応する塩から
製造することができ、それをその後中和して非−塩の形
態を遊離させる。その後これは例えば有機溶媒を用いた
抽出により回収するか、あるいは選ばれた酸又は塩基を
加え、上記の通りに仕上げることにより他の付加塩に変
換する。
製造することができ、それをその後中和して非−塩の形
態を遊離させる。その後これは例えば有機溶媒を用いた
抽出により回収するか、あるいは選ばれた酸又は塩基を
加え、上記の通りに仕上げることにより他の付加塩に変
換する。
中和の後に脱塩が必要な場合、通常の脱塩法を用いる
ことができる。
ことができる。
例えば孔径制御ポリデキストラン樹脂（Sephadex Ｌ
Ｈ 20など）又はシラン化シリカゲル上のカラムクロ
マトグラフィーを簡便に用いることができる。望ましく
ない塩を水溶液を用いて溶離した後、水と極性又は非極
性溶媒の混合物の直線勾配又は段階的−勾配、例えばア
セトニトリル／水50:50から約100％アセトニトリルを用
いて所望の生成物を溶離する。
Ｈ 20など）又はシラン化シリカゲル上のカラムクロ
マトグラフィーを簡便に用いることができる。望ましく
ない塩を水溶液を用いて溶離した後、水と極性又は非極
性溶媒の混合物の直線勾配又は段階的−勾配、例えばア
セトニトリル／水50:50から約100％アセトニトリルを用
いて所望の生成物を溶離する。
当該技術において既知の通り、製薬学的に許容し得る
酸及び塩基、あるいは製薬学的に許容し得ない酸及び塩
基との塩形成を簡単な精製法として用いることができ
る。生成及び単離の後、式Ｉの化合物の塩の形態を対応
する非−塩又は製薬学的に許容し得る塩に変換すること
ができる。
酸及び塩基、あるいは製薬学的に許容し得ない酸及び塩
基との塩形成を簡単な精製法として用いることができ
る。生成及び単離の後、式Ｉの化合物の塩の形態を対応
する非−塩又は製薬学的に許容し得る塩に変換すること
ができる。
しかし式Ｉの化合物及びその塩の性質の類似性の観点
から、式Ｉの化合物の生物学的活性に関連して本出願中
で言われていることはその製薬学的に許容し得る塩にも
当てはまり、逆も真である。
から、式Ｉの化合物の生物学的活性に関連して本出願中
で言われていることはその製薬学的に許容し得る塩にも
当てはまり、逆も真である。
本発明の化合物は主にグラム−陰性バクテリア及びナ
イセリアに活性な半−合成抗バクテリア剤として有用で
ある。
イセリアに活性な半−合成抗バクテリア剤として有用で
ある。
好ましい化合物は式ＩにおいてR'が（C10−C11）アル
キルであり、R2が水素又はベンジルであり、R3が（C1−
C4）アルキル、ヒドロキシ（C1−C4）アルキル、ハロ
（C1−C4）アルキルであり、Ｍが水素又はα−Ｄ−マン
ノピラノシルである化合物である。
キルであり、R2が水素又はベンジルであり、R3が（C1−
C4）アルキル、ヒドロキシ（C1−C4）アルキル、ハロ
（C1−C4）アルキルであり、Ｍが水素又はα−Ｄ−マン
ノピラノシルである化合物である。
より好ましい化合物は式ＩにおいてR'が（C10−C11）
アルキルであり、R2が水素であり、R3がメチル又は２−
ヒドロキシエチルであり、Ｍがα−Ｄ−マンノピラノシ
ルである化合物により示される。
アルキルであり、R2が水素であり、R3がメチル又は２−
ヒドロキシエチルであり、Ｍがα−Ｄ−マンノピラノシ
ルである化合物により示される。
式Ｉの化合物のエステル化法に一般的方法を適用する
ことができるが、もちろん式Ｉの化合物のエステル化法
の場合、Ｎ−アシルアミノグルクロニル部分のカルボキ
シ基及びペプチドコアの38位のカルボキシ基の２個のカ
ルボキシ基が存在し、これらの反応性は全く異なる。
ことができるが、もちろん式Ｉの化合物のエステル化法
の場合、Ｎ−アシルアミノグルクロニル部分のカルボキ
シ基及びペプチドコアの38位のカルボキシ基の２個のカ
ルボキシ基が存在し、これらの反応性は全く異なる。
本発明のエステル誘導体の製造のための一般的方法
は、N15−保護又は遊離−アミノA40926基質又はその脱
マンノシル誘導体（すなわちＮ−アシルアミノグルクロ
ニルアグリコン）を酸性媒体中でアルコールと反応させ
る、あるいはN15−保護A40926誘導体又はその脱マンノ
シル類似体を場合によりハロゲン化水素酸受容体の存在
下でアルキルハライド（好ましくはブロミド、クロリド
又はヨーダイド）と反応させることを含む。
は、N15−保護又は遊離−アミノA40926基質又はその脱
マンノシル誘導体（すなわちＮ−アシルアミノグルクロ
ニルアグリコン）を酸性媒体中でアルコールと反応させ
る、あるいはN15−保護A40926誘導体又はその脱マンノ
シル類似体を場合によりハロゲン化水素酸受容体の存在
下でアルキルハライド（好ましくはブロミド、クロリド
又はヨーダイド）と反応させることを含む。
特にA40926エステル誘導体及び脱マンノシルA40926エ
ステル誘導体の製造に有用な制御されたエステル化法に
は、A40926基質を０℃−室温の温度の濃無機酸の存在下
で過剰の選ばれたアルカノールと、導入するべき基の立
体的複雑さにより変化する時間接触させるエステル化反
応（例えばＮ−アシルアミノグルクロニル部分に存在す
るカルボキシ基においてエステル化されたA40926 6B−
アルキルエステルの製造の場合）；及びA40926基質を酸
の不在下で過剰のハロアルカノールと接触させるエステ
ル化反応（例えばA40926 6B−ハロアルキルエステルの
製造の場合）が含まれる。
ステル誘導体の製造に有用な制御されたエステル化法に
は、A40926基質を０℃−室温の温度の濃無機酸の存在下
で過剰の選ばれたアルカノールと、導入するべき基の立
体的複雑さにより変化する時間接触させるエステル化反
応（例えばＮ−アシルアミノグルクロニル部分に存在す
るカルボキシ基においてエステル化されたA40926 6B−
アルキルエステルの製造の場合）；及びA40926基質を酸
の不在下で過剰のハロアルカノールと接触させるエステ
ル化反応（例えばA40926 6B−ハロアルキルエステルの
製造の場合）が含まれる。
ある場合にはA40926出発材料の15位の第１アミノ官能
基を保護して起こり得る望ましくない副反応を減少させ
るのが便利である。これはT.W.Greene,“Protective G
roups in Organic SynthesisF,John Wiley and S
ons,New York,1981,及びM.Mc Omie“Protecting Gro
ups in Organic Chemistry"Plenum Press,New Yor
k,1973などの参照文献に記載されているような当該技術
においてそれ自体既知の方法により行うことができる。
これらの保護基は反応法の条件にて安定でなければなら
ず、主反応と好ましくない抵触があってはならず、主反
応の最後に容易に切断されなければならない。
基を保護して起こり得る望ましくない副反応を減少させ
るのが便利である。これはT.W.Greene,“Protective G
roups in Organic SynthesisF,John Wiley and S
ons,New York,1981,及びM.Mc Omie“Protecting Gro
ups in Organic Chemistry"Plenum Press,New Yor
k,1973などの参照文献に記載されているような当該技術
においてそれ自体既知の方法により行うことができる。
これらの保護基は反応法の条件にて安定でなければなら
ず、主反応と好ましくない抵触があってはならず、主反
応の最後に容易に切断されなければならない。
tert−ブトキシカルボニル（tBOC）、カーボベンジル
オキシ（Cbz）及びアリールアルキル基が適したアミノ
保護基の例である。おそらく立体障害のために、カルバ
メート形成試薬を用いた保護は15位に遊離のアミノ基を
有するリストセチンの種類の他の糖ペプチド抗生物質の
場合より困難である。逆に塩基の存在下で場合により置
換されたベンジルハライドを用いたベンジル化は定量的
収率で順調に起こり、カルボキシ基のアラルキルエステ
ルの形成を伴わずに対応するN15−ベンジル誘導体のみ
を形成する。
オキシ（Cbz）及びアリールアルキル基が適したアミノ
保護基の例である。おそらく立体障害のために、カルバ
メート形成試薬を用いた保護は15位に遊離のアミノ基を
有するリストセチンの種類の他の糖ペプチド抗生物質の
場合より困難である。逆に塩基の存在下で場合により置
換されたベンジルハライドを用いたベンジル化は定量的
収率で順調に起こり、カルボキシ基のアラルキルエステ
ルの形成を伴わずに対応するN15−ベンジル誘導体のみ
を形成する。
15位におけるアミノ酸の選択的保護は、ハロゲン化水
素受容体（すなわち第３アミン）の存在下でベンジルブ
ロミドとの反応により２個のカルボキシ基のエステル化
を伴わずに行うのが好ましい。
素受容体（すなわち第３アミン）の存在下でベンジルブ
ロミドとの反応により２個のカルボキシ基のエステル化
を伴わずに行うのが好ましい。
N15−保護基の除去の条件は、アミノ保護基の除去の
ための当該技術において既知の条件の範囲内であり、分
子内に存在する他の基の反応性の評価の後に開始しなけ
ればならない。式Ｉの最終化合物が酸性条件下で不安定
な基を含む場合、例えばＧ及びＭが酸性媒体中で加水分
解される上記で定義された糖部分を示す場合は明らか
に、例えばパラジウムカーボンを触媒として用いた接触
水添などの他の除去条件を用いて正しい保護基を除去し
なければならない。しかしこの場合、接触水添により変
化する基の存在に注意しなければならない。
ための当該技術において既知の条件の範囲内であり、分
子内に存在する他の基の反応性の評価の後に開始しなけ
ればならない。式Ｉの最終化合物が酸性条件下で不安定
な基を含む場合、例えばＧ及びＭが酸性媒体中で加水分
解される上記で定義された糖部分を示す場合は明らか
に、例えばパラジウムカーボンを触媒として用いた接触
水添などの他の除去条件を用いて正しい保護基を除去し
なければならない。しかしこの場合、接触水添により変
化する基の存在に注意しなければならない。
さらに式Ｉの化合物のマンノース部分を選択的に除去
し、マンース残基が水素で置換された式Ｉの他の化合物
にそれを変換することができる。
し、マンース残基が水素で置換された式Ｉの他の化合物
にそれを変換することができる。
Ｍがα−Ｄ−マンノピラノシル又は６−Ｏ−アセチル
−α−Ｄ−マンノピラノシルであり、R3がアルキルであ
る式Ｉの化合物は、選択的酸加水分解を用いてR3が上記
の通りであり、Ｍが水素である対応する化合物に変換す
ることができる。欧州特許出願第240609号明細書に開示
されている通り、脱マンノシルA40926複合体（すなわち
Ｎ−アシルアミノグルクロニルアグリコン）の製造のた
めの好ましい加水分解条件は、65℃の温度における8:2
（v/v）から9.5:0.5（v/v）のジメチルスルホキシド／
濃塩酸の混合物の利用を含む。従ってA40926のエステル
の脱マンノシル誘導体は対応するアグリコンとの混合物
として得られ、これは分取HPLCにより分離することがで
きる。
−α−Ｄ−マンノピラノシルであり、R3がアルキルであ
る式Ｉの化合物は、選択的酸加水分解を用いてR3が上記
の通りであり、Ｍが水素である対応する化合物に変換す
ることができる。欧州特許出願第240609号明細書に開示
されている通り、脱マンノシルA40926複合体（すなわち
Ｎ−アシルアミノグルクロニルアグリコン）の製造のた
めの好ましい加水分解条件は、65℃の温度における8:2
（v/v）から9.5:0.5（v/v）のジメチルスルホキシド／
濃塩酸の混合物の利用を含む。従ってA40926のエステル
の脱マンノシル誘導体は対応するアグリコンとの混合物
として得られ、これは分取HPLCにより分離することがで
きる。
加水分解条件を適当に修正し、得られる生成物の比率
を変えることができる。例えばＮ−アシルアミノグルク
ロニル部分の6B位がエステル化されたA40926から出発
し、78:1の溶媒／塩酸比を用い、反応温度を60℃以下に
保ち、反応時間を約７日に増すことにより、A40926の望
ましくないアグリコンに対するＮ−アシルアミノグルク
ロニル部分の6B位がエステル化された所望の脱マンノシ
ルA40926の比率は約1.4:1.0となる。
を変えることができる。例えばＮ−アシルアミノグルク
ロニル部分の6B位がエステル化されたA40926から出発
し、78:1の溶媒／塩酸比を用い、反応温度を60℃以下に
保ち、反応時間を約７日に増すことにより、A40926の望
ましくないアグリコンに対するＮ−アシルアミノグルク
ロニル部分の6B位がエステル化された所望の脱マンノシ
ルA40926の比率は約1.4:1.0となる。
反応経路は当該技術において既知の方法に従いHPLCに
より監視することができる。
より監視することができる。
これらの分析の結果に基づき、当該技術における熟練
者は反応経路を評価し、反応を停止してそれ自体既知の
方法により反応塊の仕上げを開始する時を決定すること
ができ、仕上げの方法は例えば溶媒を用いた抽出、非溶
媒による沈澱を、さらに行われるクロマトグラフィーに
よる分離及び精製と組み合わせて含む。
者は反応経路を評価し、反応を停止してそれ自体既知の
方法により反応塊の仕上げを開始する時を決定すること
ができ、仕上げの方法は例えば溶媒を用いた抽出、非溶
媒による沈澱を、さらに行われるクロマトグラフィーに
よる分離及び精製と組み合わせて含む。
本発明の化合物の抗バクテリア活性は、標準的微量ブ
ロス希釈法（microbroth dilution methodology）を
用いて試験管内で決定した。最小阻止濃度（MIC）は、3
7℃にて18−24時間インキュベートした後に目に見える
成長を示さない最低の濃度と考えられる。クロスツリジ
ウム ディフィシレ（Clostridium difficile）、プロ
ピオニバクテリウム アクネス（Propionibacterium a
cnes）、及びバクテロイデス フラギリス（Bacteroide
s fragilis）に関するMICを寒天希釈法により決定し
た。他に指示がなければ接種量は１スポット当たり約10
4cfu（コロニー形成単位）/mlであった。N.ゴノロエア
エ（N.gonorrhoeae）、ヘモフィルス インフルエンザ
（Haemophilus influenzae）、クロスツリジウム デ
ィフィシレ、プロピオニバクテリウム アクネス及びバ
クテロイデス フラギリス（48時間）の場合を除いてイ
ンキュベーション時間は18−24時間であった。すべての
生物を37℃でインキュベートした。ナイセリア ゴノロ
エアエ及びヘモフィルス インフルエンザは５％のCO2
雰囲気中でインキュベートし、嫌気性生物は嫌気性気体
混合物中でインキュベートした。用いた培地は:Oxoid
Iso−sensitestブロス（スタフィロコックス（Staphylo
cocci）、エンテロコックス ファエカリス（Enterococ
cus faecalis）、エシェリキア コリ（Escherichia
coli））;Difco Todd−Hewittブロス（ストレプトコッ
クス（Streptococci））;N.ゴノロエアエのための１％
のBBL IsoVitalexを含むDifco GCベースブロス;H.イ
ンフルエンザのための１％のDifco補足物Ｃを含むDifco
Brain−Heart Infusionブロス；クロスツリジウム
ペルフリンゲンス（Clostridium perfringens）のため
の寒天を含まないDifco AC培地；他の嫌気性生物のた
めのOxoid Willkins−Chalgren寒天であった。
ロス希釈法（microbroth dilution methodology）を
用いて試験管内で決定した。最小阻止濃度（MIC）は、3
7℃にて18−24時間インキュベートした後に目に見える
成長を示さない最低の濃度と考えられる。クロスツリジ
ウム ディフィシレ（Clostridium difficile）、プロ
ピオニバクテリウム アクネス（Propionibacterium a
cnes）、及びバクテロイデス フラギリス（Bacteroide
s fragilis）に関するMICを寒天希釈法により決定し
た。他に指示がなければ接種量は１スポット当たり約10
4cfu（コロニー形成単位）/mlであった。N.ゴノロエア
エ（N.gonorrhoeae）、ヘモフィルス インフルエンザ
（Haemophilus influenzae）、クロスツリジウム デ
ィフィシレ、プロピオニバクテリウム アクネス及びバ
クテロイデス フラギリス（48時間）の場合を除いてイ
ンキュベーション時間は18−24時間であった。すべての
生物を37℃でインキュベートした。ナイセリア ゴノロ
エアエ及びヘモフィルス インフルエンザは５％のCO2
雰囲気中でインキュベートし、嫌気性生物は嫌気性気体
混合物中でインキュベートした。用いた培地は:Oxoid
Iso−sensitestブロス（スタフィロコックス（Staphylo
cocci）、エンテロコックス ファエカリス（Enterococ
cus faecalis）、エシェリキア コリ（Escherichia
coli））;Difco Todd−Hewittブロス（ストレプトコッ
クス（Streptococci））;N.ゴノロエアエのための１％
のBBL IsoVitalexを含むDifco GCベースブロス;H.イ
ンフルエンザのための１％のDifco補足物Ｃを含むDifco
Brain−Heart Infusionブロス；クロスツリジウム
ペルフリンゲンス（Clostridium perfringens）のため
の寒天を含まないDifco AC培地；他の嫌気性生物のた
めのOxoid Willkins−Chalgren寒天であった。
式Ｉの代表的化合物の抗バクテリア試験の結果を下表
Ｉにまとめる。
Ｉにまとめる。
調べた化合物はA40926と同等か又はそれ以下の試験管
内抗バクテリア活性を示した。
内抗バクテリア活性を示した。
２つの脱マンノシル誘導体（化合物VIII及びＸ）はコ
アギュラーゼ−陰性スタフィロコックスに対して親化合
物（Ｘ対Ｉ及びVIII対VII）より優れた試験管内活性を
有した。
アギュラーゼ−陰性スタフィロコックスに対して親化合
物（Ｘ対Ｉ及びVIII対VII）より優れた試験管内活性を
有した。
驚くべきことにいくつかのエステル誘導体は、A40926
と比較した場合にマウス中のストレプトコックス性敗血
症に対して向上した生体内の結果を示した。
と比較した場合にマウス中のストレプトコックス性敗血
症に対して向上した生体内の結果を示した。
これらの生体内試験の場合、標準及び処理グループに
は体重が18−22gの５匹のCD−１マウス（Charles Rive
r）が含まれた。それらを、滅菌ペプトン化食塩水を用
いて終夜培養したストレプトコックス ピオゲネス（St
reptococcus pyogenes）C203を希釈することにより調
製した0.5mlのバクテリア懸濁液に腹腔内感染させた。
接種量は未処理動物が48時間以内に敗血症で死ぬように
調節した。感染の直後に抗生物質を皮下投与した。７日
目にSpearman及びKaerberの方法（D.J.Finney,“Statis
tical Methods in Biological Assays",Griffin,pa
ge524,1952）により、各投薬量における生存動物のパー
センテージからED50をmg/kgで算出した。本発明の代表
的化合物の生体内試験の結果を下表IIにまとめる。
は体重が18−22gの５匹のCD−１マウス（Charles Rive
r）が含まれた。それらを、滅菌ペプトン化食塩水を用
いて終夜培養したストレプトコックス ピオゲネス（St
reptococcus pyogenes）C203を希釈することにより調
製した0.5mlのバクテリア懸濁液に腹腔内感染させた。
接種量は未処理動物が48時間以内に敗血症で死ぬように
調節した。感染の直後に抗生物質を皮下投与した。７日
目にSpearman及びKaerberの方法（D.J.Finney,“Statis
tical Methods in Biological Assays",Griffin,pa
ge524,1952）により、各投薬量における生存動物のパー
センテージからED50をmg/kgで算出した。本発明の代表
的化合物の生体内試験の結果を下表IIにまとめる。
上記で報告された生体内の優れた抗微生物活性の観点
から、本発明の化合物は人及び獣医学で用いられる抗微
生物調剤の活性成分として、該活性成分に感受性のある
病原バクテリアによって起こる感染性疾患の予防及び処
置のために有効に用いることができる。
から、本発明の化合物は人及び獣医学で用いられる抗微
生物調剤の活性成分として、該活性成分に感受性のある
病原バクテリアによって起こる感染性疾患の予防及び処
置のために有効に用いることができる。
一般に抗バクテリア処置の場合、A40926エステル誘導
体及びA40926N−アシルアミノグルクロニルアグリコン
エステル誘導体、ならびに製薬学的に許容し得るその無
毒性塩は、局所的又は非経口的などの種々の経路により
投与することができる。一般に非経口的投与が好ましい
投与経路である。
体及びA40926N−アシルアミノグルクロニルアグリコン
エステル誘導体、ならびに製薬学的に許容し得るその無
毒性塩は、局所的又は非経口的などの種々の経路により
投与することができる。一般に非経口的投与が好ましい
投与経路である。
注射用の組成物は油性又は水性ビヒクル中の懸濁液、
溶液又は乳液の形態をとることができ、懸濁剤、安定
剤、及び／又は分散剤などのアジュバンドを含むことが
できる。
溶液又は乳液の形態をとることができ、懸濁剤、安定
剤、及び／又は分散剤などのアジュバンドを含むことが
できる。
別の場合活性成分は、デリバリー時に滅菌水などの適
したビヒクルをそれに加えて再構築するための粉末の形
態であることができる。
したビヒクルをそれに加えて再構築するための粉末の形
態であることができる。
投与の経路に依存してこれらの化合物は種々の投薬形
態に調製することができる。
態に調製することができる。
ある場合には本発明の化合物を経口投与用の腸用−被
覆（enteric−coated）投薬形態に調製することがで
き、これは当該技術において既知の通りに製造すること
ができる（例えば“Remington's Pharmaceutical Sci
ences",fifteenth edition,Mack Publishing Compan
y,Easton,Pennsylvania,USA,page 1614を参照）。
覆（enteric−coated）投薬形態に調製することがで
き、これは当該技術において既知の通りに製造すること
ができる（例えば“Remington's Pharmaceutical Sci
ences",fifteenth edition,Mack Publishing Compan
y,Easton,Pennsylvania,USA,page 1614を参照）。
これは特に抗微生物物質が胃管を変化せずに通過し、
腸管で吸収されるのが特に望ましい場合に当てはまる。
腸管で吸収されるのが特に望ましい場合に当てはまる。
投与するべき活性成分の量は、処置される患者の大き
さ及び状態、投与の経路及び頻度ならびに含まれている
作用薬剤などの種々の因子に依存する。
さ及び状態、投与の経路及び頻度ならびに含まれている
作用薬剤などの種々の因子に依存する。
本発明の抗生物質、すなわち抗生物質A40926複合体6B
−メチルエステル及び製薬学的に許容し得るその塩は一
般に、場合により１日当たり１−４回の投与に分けた患
者の体重1kg当たり約0.5−50mgの活性成分という１日の
投薬量で有効である。
−メチルエステル及び製薬学的に許容し得るその塩は一
般に、場合により１日当たり１−４回の投与に分けた患
者の体重1kg当たり約0.5−50mgの活性成分という１日の
投薬量で有効である。
特に望ましい組成物は、単位当たり約100−約5,000mg
を含む投薬単位で調製された組成物である。
を含む投薬単位で調製された組成物である。
当該記述において既知の通り、種々の機構に基づいて
作用持続性調剤を調製することができる。
作用持続性調剤を調製することができる。
抗生物質A40926 6B−メチルエステルを含む作用持続
性調剤の調製のための好ましい方法は、水性又は油性媒
体中に懸濁した非水溶性の形態のこの抗生物質の使用を
含む。これらの形態、すなわち不溶性塩又は遊離の酸と
しての形態は、実際に筋肉内注射するとその水への溶解
度の低さのために放出が非常に遅く、抗生物質の血液量
を持続する。
性調剤の調製のための好ましい方法は、水性又は油性媒
体中に懸濁した非水溶性の形態のこの抗生物質の使用を
含む。これらの形態、すなわち不溶性塩又は遊離の酸と
しての形態は、実際に筋肉内注射するとその水への溶解
度の低さのために放出が非常に遅く、抗生物質の血液量
を持続する。
製薬学的組成物の調製 筋肉内注射用の単位投薬形態を、８％のプロピレング
リコール及び500mgの抗生物質A40926 6B−モノメチル
エステルの製薬学的に許容し得る塩基付加塩を含む5ml
の滅菌懸濁液USPを用いて調製する。
リコール及び500mgの抗生物質A40926 6B−モノメチル
エステルの製薬学的に許容し得る塩基付加塩を含む5ml
の滅菌懸濁液USPを用いて調製する。
筋肉内注射用の単位投薬形態を、5mlの注射用の滅菌
水中に懸濁した非水溶性の酸の形態の1,000mgの抗生物
質A40926 6B−モノメチルエステルを用いて製造する。
水中に懸濁した非水溶性の酸の形態の1,000mgの抗生物
質A40926 6B−モノメチルエステルを用いて製造する。
実施例 実施例1:抗生物質A40926複合体6B−モノメチルエステル
（化合物Ｉ）の製造 欧州特許出願第177882号明細書に従って得た抗生物質
A40926複合体（150mg;0.0866ミリモル）を無水メタノー
ル（30ml）中に溶解し、濃硫酸を用いてpHを２に調節し
た。混合物を室温で26時間撹拌した。0.15mlのトリエチ
ルアミンを用いてpHを６にすると沈澱が現れた。ジエチ
ルエーテルの添加後、沈澱を集め、ジエチルエーテルで
十分に洗浄し、乾燥した。収量:150mg（99％）。
（化合物Ｉ）の製造 欧州特許出願第177882号明細書に従って得た抗生物質
A40926複合体（150mg;0.0866ミリモル）を無水メタノー
ル（30ml）中に溶解し、濃硫酸を用いてpHを２に調節し
た。混合物を室温で26時間撹拌した。0.15mlのトリエチ
ルアミンを用いてpHを６にすると沈澱が現れた。ジエチ
ルエーテルの添加後、沈澱を集め、ジエチルエーテルで
十分に洗浄し、乾燥した。収量:150mg（99％）。
実施例2:抗生物質A40926複合体6B−モノエチルエステル
（化合物II）の製造 無水エタノール（30ml）中の抗生物質A40926複合体
（250mg;0.144ミリモル）の撹拌溶液に、室温で２滴の
濃硫酸を加えてpHを３とした。23時間後にトリエチルア
ミンを用いてpHを７とした。ジエチルエーテルを加える
と沈澱が現れ、それを濾過により集めた。この沈澱を水
（130ml）中に懸濁し、水相をブタノールで２回抽出し
た。抽出物を合わせ、蒸発させて小体積とした。ジエチ
ルエーテルを加えた後、固体沈澱物を集め、125mgを得
た（収率:49.2％）。
（化合物II）の製造 無水エタノール（30ml）中の抗生物質A40926複合体
（250mg;0.144ミリモル）の撹拌溶液に、室温で２滴の
濃硫酸を加えてpHを３とした。23時間後にトリエチルア
ミンを用いてpHを７とした。ジエチルエーテルを加える
と沈澱が現れ、それを濾過により集めた。この沈澱を水
（130ml）中に懸濁し、水相をブタノールで２回抽出し
た。抽出物を合わせ、蒸発させて小体積とした。ジエチ
ルエーテルを加えた後、固体沈澱物を集め、125mgを得
た（収率:49.2％）。
実施例3:抗生物質A40926複合体6B−モノプロピルエステ
ル（化合物III）の製造 抗生物質A40926複合体（200mg;0.115ミリモル）を無
水ｎ−プロパノール（50ml）に溶解した。40μｌの濃硫
酸を用いてpHを３に調節し、溶液を室温で15時間撹拌し
た。NH4OHを用いてpHを７に調節し、ジエチルエーテル
を加えて生成物を沈澱させた。収量:267mg（91.2％）。
ル（化合物III）の製造 抗生物質A40926複合体（200mg;0.115ミリモル）を無
水ｎ−プロパノール（50ml）に溶解した。40μｌの濃硫
酸を用いてpHを３に調節し、溶液を室温で15時間撹拌し
た。NH4OHを用いてpHを７に調節し、ジエチルエーテル
を加えて生成物を沈澱させた。収量:267mg（91.2％）。
実施例4:抗生物質A40926複合体6B−モノブチルエステル
（化合物IV）の製造 抗生物質A40926複合体（200mg;0.115ミリモル）を無
水ブタノール（100ml）に溶解し、上記の通りにpHを調
節し、溶液を室温で３日放置した。その後40μｌのNH4O
H（32％）を用いてpHを上げ、100mlの水を加え、有機層
を分離し、水相をブタノールで２回抽出した。ブタノー
ル抽出液を集め、小体積に濃縮した。ジエチルエーテル
を添加し、136mg（収率:65.9％）の標題化合物を集め
た。
（化合物IV）の製造 抗生物質A40926複合体（200mg;0.115ミリモル）を無
水ブタノール（100ml）に溶解し、上記の通りにpHを調
節し、溶液を室温で３日放置した。その後40μｌのNH4O
H（32％）を用いてpHを上げ、100mlの水を加え、有機層
を分離し、水相をブタノールで２回抽出した。ブタノー
ル抽出液を集め、小体積に濃縮した。ジエチルエーテル
を添加し、136mg（収率:65.9％）の標題化合物を集め
た。
実施例5:抗生物質A40926複合体6B−（２−ヒドロキシエ
チル）エステル（化合物Ｖ）の製造 抗生物質A40926複合体（150mg;0.0866ミリモル）を室
温で撹拌しながらエチレングリコール（20ml）に溶解し
た。40μｌの濃硫酸を用いてpHを２に調節し、混合物を
３日放置した。溶液を約5mlに濃縮し、0.02MのNaH2PO4
中31％のCH3CNを5l（無勾配）用いた分取HPLCによる分
離に直接用いた。通常の単離法により27mgの非常に純粋
なエステルを得た（収率:18％）。
チル）エステル（化合物Ｖ）の製造 抗生物質A40926複合体（150mg;0.0866ミリモル）を室
温で撹拌しながらエチレングリコール（20ml）に溶解し
た。40μｌの濃硫酸を用いてpHを２に調節し、混合物を
３日放置した。溶液を約5mlに濃縮し、0.02MのNaH2PO4
中31％のCH3CNを5l（無勾配）用いた分取HPLCによる分
離に直接用いた。通常の単離法により27mgの非常に純粋
なエステルを得た（収率:18％）。
実施例6:抗生物質A40926複合体6B−（４−ヒドロキシブ
チル）エステル（化合物VI）の製造 25mlの1,4−ブタンジオール中の抗生物質A40926複合
体（400mg;0.230ミリモル）の溶液に、室温で撹拌しな
がら60μｌの濃硫酸を加え、溶液を55時間放置した。溶
液を50mlのブタノールで希釈し、ジエチルエーテルを添
加すると固体が沈澱し、それを集め、0.02MのNaH2PO4中
31％のCH3CNを5l用いた分取HPLCにより調製した。通常
の単離法を用い、227mg（54.5％）の標題化合物を得
た。
チル）エステル（化合物VI）の製造 25mlの1,4−ブタンジオール中の抗生物質A40926複合
体（400mg;0.230ミリモル）の溶液に、室温で撹拌しな
がら60μｌの濃硫酸を加え、溶液を55時間放置した。溶
液を50mlのブタノールで希釈し、ジエチルエーテルを添
加すると固体が沈澱し、それを集め、0.02MのNaH2PO4中
31％のCH3CNを5l用いた分取HPLCにより調製した。通常
の単離法を用い、227mg（54.5％）の標題化合物を得
た。
実施例7:抗生物質A40926複合体6B−（２−ブロモエチ
ル）エステル（化合物VII）及びその脱マンノシル類似
体（化合物VIII）の製造 抗生物質A40926複合体（300mg;0.173ミリモル）を5ml
の２−ブロモエタノールに溶解し、溶液を０℃で22時間
撹拌した。温度を室温に上げ、撹拌を15時間続けた。出
発材料は、大量のアグリコン及びマンノシルアグリコン
を伴う２つのより親油性の化合物に完全に変換された。
溶液を０℃に冷却した。ジエチルエーテルを加えると沈
澱が現れ、それを集め（295mg）、その後0.02MのNaH2PO
4緩衝液中34％のアセトニトリルを用いた分取HPLC（RP
−18、10μｍ）を用いて分離した。15mg（収率4.7％）
及び27mg（収率:9.3％）の２つの留分が単離され、それ
はそれぞれA40926 6B−（２−ブロモエチル）エステル
（VII）及びその脱マンノシル誘導体（VIII）に対応し
た。
ル）エステル（化合物VII）及びその脱マンノシル類似
体（化合物VIII）の製造 抗生物質A40926複合体（300mg;0.173ミリモル）を5ml
の２−ブロモエタノールに溶解し、溶液を０℃で22時間
撹拌した。温度を室温に上げ、撹拌を15時間続けた。出
発材料は、大量のアグリコン及びマンノシルアグリコン
を伴う２つのより親油性の化合物に完全に変換された。
溶液を０℃に冷却した。ジエチルエーテルを加えると沈
澱が現れ、それを集め（295mg）、その後0.02MのNaH2PO
4緩衝液中34％のアセトニトリルを用いた分取HPLC（RP
−18、10μｍ）を用いて分離した。15mg（収率4.7％）
及び27mg（収率:9.3％）の２つの留分が単離され、それ
はそれぞれA40926 6B−（２−ブロモエチル）エステル
（VII）及びその脱マンノシル誘導体（VIII）に対応し
た。
実施例8:N15−ベンジルA40926複合体（化合物IX）の製
造 抗生物質A40926複合体（1.5g;0,87ミリモル）を100ml
の乾燥DMF中に溶解し、溶液を０℃に冷却した。0.26ml
（1.83ミリモル）のトリエチルアミンを用いてpHを７に
調節した。撹拌下でベンジルブロミド（0.11ml;0.96ミ
リモル）を加え、７時間後にもう一度20.6μｌ（0.145
ミリモル）のこの反応物を加えた。48時間後にジエチル
エーテルを加え、沈澱を集め、ジエチルエーテルで注意
深く洗浄し、乾燥した。収量:1.53g（96.7％）。
造 抗生物質A40926複合体（1.5g;0,87ミリモル）を100ml
の乾燥DMF中に溶解し、溶液を０℃に冷却した。0.26ml
（1.83ミリモル）のトリエチルアミンを用いてpHを７に
調節した。撹拌下でベンジルブロミド（0.11ml;0.96ミ
リモル）を加え、７時間後にもう一度20.6μｌ（0.145
ミリモル）のこの反応物を加えた。48時間後にジエチル
エーテルを加え、沈澱を集め、ジエチルエーテルで注意
深く洗浄し、乾燥した。収量:1.53g（96.7％）。
実施例9:O42−脱マンノシルA40926 6B−メチルエステ
ル（すなわちA40926N−アシルアミノグルクロニルアグ
リコン6B−メチルエステル）（化合物Ｘ）の製造 7mlのDMSO中の650mg（0.086ミリモル）の抗生物質A40
926複合体6B−メチルエステル（Ｉ）の溶液に、50μｌ
の37％HClを加え、pHを２とした。混合物を50℃に24時
間加熱した。その後追加の25μｌのHClを加え、48時間
後にさらに15μｌを加え、かくしてpHを２に保った。７
日後にHPLCにより抗生物質A40926複合体の消失が示さ
れ、O42−脱マンノシルA40926複合体6B−メチルエステ
ル及び対応するアグリコンが1.4:1.0の比率で現れたこ
とが示された。反応混合物を15mlのジエチルエーテルと
5mlのブタノールの混合物中に注ぎ、固体沈澱（653mg）
を得、それを濾過により集め、30％CH3CN/70％0.02MのN
aH2PO4（5l）、その後33％CH3CN/67％0.02MのNaH2PO
4（2l）及び最後に40％CH3CN/60％0.02MのNaH2PO4（2
l）を用い、無勾配条件下の分取HPLCにより分離した。
所望の化合物を含む留分を集め、小体積に濃縮し、ブタ
ノールで３回抽出し、ブタノール相を小体積に濃縮し
た。ジエチルエーテルを加え、68mg（収率:11.5％）の
標題化合物を集めた。
ル（すなわちA40926N−アシルアミノグルクロニルアグ
リコン6B−メチルエステル）（化合物Ｘ）の製造 7mlのDMSO中の650mg（0.086ミリモル）の抗生物質A40
926複合体6B−メチルエステル（Ｉ）の溶液に、50μｌ
の37％HClを加え、pHを２とした。混合物を50℃に24時
間加熱した。その後追加の25μｌのHClを加え、48時間
後にさらに15μｌを加え、かくしてpHを２に保った。７
日後にHPLCにより抗生物質A40926複合体の消失が示さ
れ、O42−脱マンノシルA40926複合体6B−メチルエステ
ル及び対応するアグリコンが1.4:1.0の比率で現れたこ
とが示された。反応混合物を15mlのジエチルエーテルと
5mlのブタノールの混合物中に注ぎ、固体沈澱（653mg）
を得、それを濾過により集め、30％CH3CN/70％0.02MのN
aH2PO4（5l）、その後33％CH3CN/67％0.02MのNaH2PO
4（2l）及び最後に40％CH3CN/60％0.02MのNaH2PO4（2
l）を用い、無勾配条件下の分取HPLCにより分離した。
所望の化合物を含む留分を集め、小体積に濃縮し、ブタ
ノールで３回抽出し、ブタノール相を小体積に濃縮し
た。ジエチルエーテルを加え、68mg（収率:11.5％）の
標題化合物を集めた。
一般的実験条件及び分析法 溶媒の蒸発は発泡を防ぐためにｎ−ブタノールの添加
後に回転蒸発器で真空下の45℃にて行った。他に記載が
なければ最終生成物はジエチルエーテルで洗浄し、真空
下の40℃で乾燥した。分離はシラン化シリカゲル60（0.
06−0.2mm）又はシリカゲルRP−80（LiChroprep 40−6
3μm;Merck）を用いた通常のカラムで、あるいは481UV
−検出機及び分取カラムLiChrosorb RP−18、10μｍ
（サイズ250x50mm、ループ5ml、流量30ml/分）を備えた
Watersモデル590を用いた分取HPLCで行った。HPLCは、2
54nmの2050UV−検出器及びカラムLichrosorb RP−８、
５μｍ又はRP−18、10μｍ（それぞれ125x4及び250x4m
m）を備えたVarian 5000機を用いて反応、クロマトグ
ラフィー留分及び化合物の純度を監視するためにも用い
た。注入体積:10μl;流量:1.5ml/分；可動相、（Ａ）0.
02MのNaH2PO4水溶液、（Ｂ）CH3CN。
後に回転蒸発器で真空下の45℃にて行った。他に記載が
なければ最終生成物はジエチルエーテルで洗浄し、真空
下の40℃で乾燥した。分離はシラン化シリカゲル60（0.
06−0.2mm）又はシリカゲルRP−80（LiChroprep 40−6
3μm;Merck）を用いた通常のカラムで、あるいは481UV
−検出機及び分取カラムLiChrosorb RP−18、10μｍ
（サイズ250x50mm、ループ5ml、流量30ml/分）を備えた
Watersモデル590を用いた分取HPLCで行った。HPLCは、2
54nmの2050UV−検出器及びカラムLichrosorb RP−８、
５μｍ又はRP−18、10μｍ（それぞれ125x4及び250x4m
m）を備えたVarian 5000機を用いて反応、クロマトグ
ラフィー留分及び化合物の純度を監視するためにも用い
た。注入体積:10μl;流量:1.5ml/分；可動相、（Ａ）0.
02MのNaH2PO4水溶液、（Ｂ）CH3CN。
すべての化合物はN2下の140℃で乾燥後にＣ、Ｈ及び
Ｎに関して分析した。重量損失を140℃にて熱重量分析
（TGA）により決定した。試料をO2中の900℃で加熱した
後、無機残留物を決定した。存在する場合はCl及びBrを
上記の要領で乾燥した試料につき決定した。分析結果は
理論値に従っていた。
Ｎに関して分析した。重量損失を140℃にて熱重量分析
（TGA）により決定した。試料をO2中の900℃で加熱した
後、無機残留物を決定した。存在する場合はCl及びBrを
上記の要領で乾燥した試料につき決定した。分析結果は
理論値に従っていた。
Aspect 3000コンピューターを備えたAM250又はAM500
Bruker装置を用いて1H−NMRを得た。スペクトルはTMSを
内部標準として用い、DMSO−d6溶液中の40℃にて記録し
た。
Bruker装置を用いて1H−NMRを得た。スペクトルはTMSを
内部標準として用い、DMSO−d6溶液中の40℃にて記録し
た。
3000ダルトン質量範囲のKratos MS−50フォーカシン
グ質量分析機にて8kVの加速電圧を用い、FAB−MS陽イオ
ンスペクトルを得た。装置はコンピュータ制御下で運転
した。高品質のデータを得るために“粗データ（raw d
ata）”取得においてDS−90データ系を用いた。質量キ
ャリブレーションにはCs Ｉ及びNa Ｉの混合物を用い
た。FABの場合、電圧6kV及び電流1mAにてXeガス（2x10
-5トール圧）を用いたサドルフィールド（saddle fiel
d）原子銃を用いた。試料は溶解度によりメタノール又
はDMFに溶解した。１μｌのこの溶液をターゲット上で
0.1μｌのCH3COOHを含む１μｌのチオグリセロールマト
リックスと混合した。
グ質量分析機にて8kVの加速電圧を用い、FAB−MS陽イオ
ンスペクトルを得た。装置はコンピュータ制御下で運転
した。高品質のデータを得るために“粗データ（raw d
ata）”取得においてDS−90データ系を用いた。質量キ
ャリブレーションにはCs Ｉ及びNa Ｉの混合物を用い
た。FABの場合、電圧6kV及び電流1mAにてXeガス（2x10
-5トール圧）を用いたサドルフィールド（saddle fiel
d）原子銃を用いた。試料は溶解度によりメタノール又
はDMFに溶解した。１μｌのこの溶液をターゲット上で
0.1μｌのCH3COOHを含む１μｌのチオグリセロールマト
リックスと混合した。
表IIIは本発明の代表的化合物のいくつかの物理−化
学的性質をまとめたものである（R'が（C10−C11）アル
キルであり、R2、R3及びＭは示された通りである式Ｉの
化合物）。
学的性質をまとめたものである（R'が（C10−C11）アル
キルであり、R2、R3及びＭは示された通りである式Ｉの
化合物）。
フロントページの続き (72)発明者 セルバ， エンリコ イタリー国パビア・27027グロペロカイ ロリ・ビアデイビツトリオ15 (72)発明者 デナロ， マウリツイオ イタリー国ミラノ・20090オペラ・スポ ルテイング ミラゾーレ35 (56)参考文献 Ｊｏｕｒｎａｌ ｆｏ Ａｎｔｉｂｉ ｏｔｉｃｓ，1987年，Ｖｏｌ．40，Ｎ ｏ．11，ｐ．1572−1587 (58)調査した分野(Int.Cl.7，ＤＢ名) C07K 9/00 A61K 38/14 A61P 31/04 ＣＡＰＬＵＳ（ＳＴＮ) ＭＥＤＬＩＮＥ（ＳＴＮ) ＲＥＧＩＳＴＲＹ（ＳＴＮ)
Claims (4)
- 【請求項１】式Ｉ ［式中、 R2は水素又はアミン官能基の保護基を示し、 Ｍは水素、α−Ｄ−マンノピラノシル又は６−Ｏ−アセ
チル−α−Ｄ−マンノピラノシルを示し、 Ｒ′は（C10−C11）アルキルを示し、 R3は（C1−C6）アルキル、ヒドロキシ（C1−C6）アルキ
ル、 又はハロ（C1−C6）アルキルを示す］ の新規抗生物質A40926エステル誘導体及びその付加塩。 - 【請求項２】R2が水素を示し、Ｍ及びＲ′が請求の範囲
第１項と同義であり、R3が（C1−C4）アルキル、ヒドロ
キシ（C1−C4）アルキル、ハロ（C1−C4）アルキルであ
る請求の範囲第１項に記載の化合物。 - 【請求項３】抗生物質A40926複合体、そのＮ−アシルア
ミノグルクロニルアグリコン又はそれらのN15−保護誘
導体を、濃無機酸の存在下で０℃ないし室温の温度に
て、過剰の選ばれたアルカノールと、導入するべき基の
立体的複雑さに依存する時間反応させることを特徴とす
る請求の範囲第１又は２項に記載の化合物の製造法。 - 【請求項４】請求の範囲第１又は２項に記載の化合物を
有効成分として含有することを特徴とする抗微生物剤。
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| AT91104857.7 | 1991-03-27 | ||
| EP91104857 | 1991-03-27 | ||
| PCT/EP1992/000374 WO1992017495A1 (en) | 1991-03-27 | 1992-02-21 | Antibiotic a 40926 ester derivatives |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH06505716A JPH06505716A (ja) | 1994-06-30 |
| JP3314930B2 true JP3314930B2 (ja) | 2002-08-19 |
Family
ID=8206576
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP50491592A Expired - Fee Related JP3314930B2 (ja) | 1991-03-27 | 1992-02-21 | 抗生物質ａ４０９２６エステル誘導体 |
Country Status (15)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (2) | EP0505735A1 (ja) |
| JP (1) | JP3314930B2 (ja) |
| KR (1) | KR100209971B1 (ja) |
| AT (1) | ATE145921T1 (ja) |
| AU (1) | AU652615B2 (ja) |
| CA (1) | CA2099866C (ja) |
| DE (1) | DE69215665T2 (ja) |
| DK (1) | DK0578644T3 (ja) |
| ES (1) | ES2095459T3 (ja) |
| GR (1) | GR3022731T3 (ja) |
| HU (1) | HU210665B (ja) |
| IE (1) | IE920960A1 (ja) |
| IL (1) | IL101326A (ja) |
| WO (1) | WO1992017495A1 (ja) |
| ZA (1) | ZA922203B (ja) |
Families Citing this family (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1993003060A1 (en) * | 1991-07-29 | 1993-02-18 | Gruppo Lepetit S.P.A. | Amide derivatives of antibiotic a 40926 |
| CN1036654C (zh) * | 1993-01-01 | 1997-12-10 | 格鲁波莱佩蒂特公司 | 抗菌素a40926的酰氨衍生物及其制备方法 |
| DE69633234T2 (de) * | 1995-07-05 | 2005-09-15 | Aventis Bulk S.P.A. | Reinigung von dalbeheptide-antibiotika mittels isoelektrofokussierung |
| DK0912604T3 (da) | 1996-04-23 | 2002-03-25 | Biosearch Italia Spa | Forbedret kemisk fremgangsmåde til fremstilling af amidderivater af A 40926 antibiotikum |
| WO2022148868A1 (en) * | 2021-01-11 | 2022-07-14 | Xellia Pharmaceuticals Aps | Synthesis process |
Family Cites Families (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| GB8425685D0 (en) | 1984-10-11 | 1984-11-14 | Lepetit Spa | Antibiotic a 40926 complex |
| GB8531846D0 (en) | 1985-12-30 | 1986-02-05 | Lepetit Spa | Antibiotic a 40926 mannosyl aglycon |
| GB8608809D0 (en) | 1986-04-11 | 1986-05-14 | Lepetit Spa | Antibiotic |
-
1992
- 1992-02-21 AT AT92904857T patent/ATE145921T1/de not_active IP Right Cessation
- 1992-02-21 AU AU12585/92A patent/AU652615B2/en not_active Ceased
- 1992-02-21 ES ES92904857T patent/ES2095459T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1992-02-21 HU HU9302712A patent/HU210665B/hu not_active IP Right Cessation
- 1992-02-21 CA CA002099866A patent/CA2099866C/en not_active Expired - Lifetime
- 1992-02-21 EP EP92102972A patent/EP0505735A1/en active Pending
- 1992-02-21 KR KR1019930702884A patent/KR100209971B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1992-02-21 JP JP50491592A patent/JP3314930B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 1992-02-21 EP EP92904857A patent/EP0578644B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1992-02-21 WO PCT/EP1992/000374 patent/WO1992017495A1/en active IP Right Grant
- 1992-02-21 DK DK92904857.7T patent/DK0578644T3/da active
- 1992-02-21 DE DE69215665T patent/DE69215665T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1992-03-22 IL IL10132692A patent/IL101326A/en not_active IP Right Cessation
- 1992-03-26 ZA ZA922203A patent/ZA922203B/xx unknown
- 1992-03-26 IE IE096092A patent/IE920960A1/en not_active IP Right Cessation
-
1997
- 1997-03-03 GR GR970400423T patent/GR3022731T3/el unknown
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Ｊｏｕｒｎａｌ ｆｏ Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ，１９８７年，Ｖｏｌ．４０，Ｎｏ．１１，ｐ．１５７２−１５８７ |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| AU1258592A (en) | 1992-11-02 |
| IE920960A1 (en) | 1992-10-07 |
| EP0578644B1 (en) | 1996-12-04 |
| DE69215665D1 (de) | 1997-01-16 |
| HU9302712D0 (en) | 1993-12-28 |
| KR100209971B1 (ko) | 1999-07-15 |
| EP0505735A1 (en) | 1992-09-30 |
| DK0578644T3 (da) | 1996-12-23 |
| JPH06505716A (ja) | 1994-06-30 |
| DE69215665T2 (de) | 1997-06-12 |
| AU652615B2 (en) | 1994-09-01 |
| ZA922203B (en) | 1993-01-27 |
| EP0578644A1 (en) | 1994-01-19 |
| IL101326A (en) | 1996-03-31 |
| WO1992017495A1 (en) | 1992-10-15 |
| HUT65471A (en) | 1994-06-28 |
| ES2095459T3 (es) | 1997-02-16 |
| IL101326A0 (en) | 1992-11-15 |
| HU210665B (en) | 1995-06-28 |
| CA2099866A1 (en) | 1992-09-28 |
| ATE145921T1 (de) | 1996-12-15 |
| GR3022731T3 (en) | 1997-06-30 |
| CA2099866C (en) | 2002-07-09 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US5912226A (en) | Anhydro- and isomer-A-21978C cyclic peptides | |
| KR100242682B1 (ko) | 항생물질 a 40926의 아미드 유도체 | |
| JP2514942B2 (ja) | 抗生物質ａ４０９２６マンノシルアグリコン | |
| JP2554350B2 (ja) | グリコペプチド抗生物質 | |
| KR960014104B1 (ko) | 테이코플라닌 화합물의 치환 알킬아미드 | |
| AU638977B2 (en) | New substituted alkylamide derivatives of teicoplanin | |
| JP3314930B2 (ja) | 抗生物質ａ４０９２６エステル誘導体 | |
| US5606036A (en) | Antibiotic A 40926 ester derivatives | |
| EP0276740A1 (en) | N15-alkyl and N15,N15-dialkyl derivates of teicoplanin compounds | |
| EP0290922B1 (en) | Teicoplanin derivatives | |
| EP0351597A2 (en) | "N15-alkyl and N15,N15-di-alkyl derivatives of teicoplanin antibiotics carrying functional groups on the alkyl side chain | |
| JP3107586B2 (ja) | マンノシルテイコプラニン誘導体及びマンノシルテイコプラニンアグリコンの製造方法 | |
| US5438117A (en) | Hexapeptides deriving from aglucoteicoplanin and a process for preparing them | |
| EP0560795B1 (en) | 38-decarboxy-38-hydroxymethyl derivatives of teicoplanin antibiotics, and a process for preparing them | |
| EP0351684A2 (en) | Process for preparing N15, N15-dialkyl derivatives of teicoplanin compounds | |
| EP0055846A1 (en) | New peptide, process for preparation thereof and pharmaceutical composition containing it | |
| EP0247074A1 (en) | DE- (ACETYLGLUCOSAMINYL) -DI (DEHYDRO) -DEOXY TEICOPLANIN DERIVATIVES. | |
| EP0326029A2 (en) | Antibiotic A 42867 derivative | |
| JPH04235187A (ja) | ３４−デ（アセチルグルコサミニル）−３４−デオキシ−テイコプラニンのｃ６３−アミン誘導体およびグリコペプチドの抗生物質に対して抵抗性のバクテリアに対する薬物としてのそれらの使用 | |
| EP0563062B1 (en) | Hexapeptides deriving from aglucoteicoplanin and a process for preparing them |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20080607 Year of fee payment: 6 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20090607 Year of fee payment: 7 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20100607 Year of fee payment: 8 |
|
| LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |