JP3223326B2 - ビフィズス菌増殖促進剤及びその製造法 - Google Patents
ビフィズス菌増殖促進剤及びその製造法Info
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Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、天然物である茶から抽
出可能なビフィズス菌増殖促進剤、及びその製造方法に
関する。
出可能なビフィズス菌増殖促進剤、及びその製造方法に
関する。
【０００２】
【従来の技術】整腸作用の主な要因としては、腸内細菌
であるビフィズス菌の増殖促進と腸内有害細菌の増殖抑
制のバランスが重要である。このビフィズス菌の増殖促
質物質としてはオリゴ糖を添加することが知られてい
る。しかし古くから整腸作用が言われてきた茶において
は、中枢神経作用のあるカフェイン、大量に摂取すると
胃腸障害を起こすカテキン類が含まれていることは知ら
れているものの、茶葉成分をビフィズス菌増殖促進剤と
して用いた事例はなく、活性成分も明らかではなかっ
た。
であるビフィズス菌の増殖促進と腸内有害細菌の増殖抑
制のバランスが重要である。このビフィズス菌の増殖促
質物質としてはオリゴ糖を添加することが知られてい
る。しかし古くから整腸作用が言われてきた茶において
は、中枢神経作用のあるカフェイン、大量に摂取すると
胃腸障害を起こすカテキン類が含まれていることは知ら
れているものの、茶葉成分をビフィズス菌増殖促進剤と
して用いた事例はなく、活性成分も明らかではなかっ
た。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】そこで発明者は新たな
着想に立ち、広く用いられている茶葉成分からビフィズ
ス菌増殖促進作用物質を抽出可能か否かを研究した。而
して大量摂取に問題のあるカフェインやカテキン類を除
去し、ビフィズス菌増殖促進作用物質を抽出し、活性成
分を明らかにするとともに、茶由来の増殖促進剤を開発
することを目的としたのが本発明である。
着想に立ち、広く用いられている茶葉成分からビフィズ
ス菌増殖促進作用物質を抽出可能か否かを研究した。而
して大量摂取に問題のあるカフェインやカテキン類を除
去し、ビフィズス菌増殖促進作用物質を抽出し、活性成
分を明らかにするとともに、茶由来の増殖促進剤を開発
することを目的としたのが本発明である。
【０００４】
【課題を解決するための手段】上記課題を解決するビフ
ィズス菌増殖促進剤は、茶の熱水抽出物からカフェイン
及びカテキン類を除去し、得られた抽出物から分子量が
１，０００を超える物質を除去して得られる茶抽出物を
有効成分として得ることができる。
ィズス菌増殖促進剤は、茶の熱水抽出物からカフェイン
及びカテキン類を除去し、得られた抽出物から分子量が
１，０００を超える物質を除去して得られる茶抽出物を
有効成分として得ることができる。
【０００５】上記有効成分は、アスパラギン酸、グルタ
ミン酸、アスパラギン、アラニン、テアニン、ミオイノ
シトール、フラノース、ピラノース、アラビノース、フ
ルクトース、グルコース及びアラビノピラノシルミオイ
ノシトールを含有している。
ミン酸、アスパラギン、アラニン、テアニン、ミオイノ
シトール、フラノース、ピラノース、アラビノース、フ
ルクトース、グルコース及びアラビノピラノシルミオイ
ノシトールを含有している。
【０００６】なお、上記有効成分は、見方を変えれば、
蔗糖、アラビノピラノシルミオイノシトール、テアニ
ン、遊離アミノ酸、カリウム、リン、及びキナ酸を含有
しているとも言える。
蔗糖、アラビノピラノシルミオイノシトール、テアニ
ン、遊離アミノ酸、カリウム、リン、及びキナ酸を含有
しているとも言える。
【０００７】上記ビフィズス菌増殖促進剤の有効成分
は、茶の熱水抽出物を、クロロホルム、酢酸エチル及び
ブタノールで段階的に抽出して得られた水層成分から分
子量が１，０００を超える物質を除去して得ることがで
き。また、カフェイン及びカテキン類を吸着可能な合成
樹脂充填層に茶の熱水抽出物を通し、次いで当該合成吸
着剤充填層に蒸留水を通して溶出させて得られた水溶出
成分から分子量が１，０００を超える物質を除去して得
ることができる。この場合、カフェイン及びカテキン類
を吸着可能な合成樹脂としては、例えばスチレン−ジビ
ニルベンゼン或いはメタアクリル酸エステルを母体とす
る合成樹脂充填を挙げることができる。
は、茶の熱水抽出物を、クロロホルム、酢酸エチル及び
ブタノールで段階的に抽出して得られた水層成分から分
子量が１，０００を超える物質を除去して得ることがで
き。また、カフェイン及びカテキン類を吸着可能な合成
樹脂充填層に茶の熱水抽出物を通し、次いで当該合成吸
着剤充填層に蒸留水を通して溶出させて得られた水溶出
成分から分子量が１，０００を超える物質を除去して得
ることができる。この場合、カフェイン及びカテキン類
を吸着可能な合成樹脂としては、例えばスチレン−ジビ
ニルベンゼン或いはメタアクリル酸エステルを母体とす
る合成樹脂充填を挙げることができる。
【０００８】
【発明の効果】本発明により、茶葉成分からカフェイン
やカテキン類を除去し、さらに高分子物質を除去し、顕
著なビフィズス菌増殖促進作用を示す有効成分を得るこ
とができた。この抽出物中には蔗糖、アラビノピラノシ
ルミオイノシトール、テアニン、遊離アミノ酸、カリウ
ム、リン、及びキナ酸の含有が認められた。このように
して得られた活性分画は、カフェインやタンニン類を含
んでいないため、人体に対して有害性が比較的少なく、
苦みや渋みが無いため飲料や食品にビフィズス菌増殖因
子として添加する事が出来る。
やカテキン類を除去し、さらに高分子物質を除去し、顕
著なビフィズス菌増殖促進作用を示す有効成分を得るこ
とができた。この抽出物中には蔗糖、アラビノピラノシ
ルミオイノシトール、テアニン、遊離アミノ酸、カリウ
ム、リン、及びキナ酸の含有が認められた。このように
して得られた活性分画は、カフェインやタンニン類を含
んでいないため、人体に対して有害性が比較的少なく、
苦みや渋みが無いため飲料や食品にビフィズス菌増殖因
子として添加する事が出来る。
【０００９】
【実施例】茶から抽出したそれぞれの分画が、ビフィズ
ス菌に対して活性であるか否かを確かめるために、次に
示すようなバイオアッセイを行った。
ス菌に対して活性であるか否かを確かめるために、次に
示すようなバイオアッセイを行った。
【００１０】ビフィズス菌はヒト由来の５種類の菌、即
ち、ビフィドバクテリウムアドレッセンティス(Bifidob
acterium adolescentis ATCC#15703) 、ビフィドバクテ
リウムロンガム(Bifidobacterium longum ATCC#15707)
、ビフィドバクテリウビフィダム(Bifidobacterium bi
fidum ATCC#29521)、ビフィドバクテリウムブレビ(Bifi
dobacterium breve ATCC#15700)、ビフィドバクテリウ
ムインファンテス(Bifidobacterium infantis ATCC#156
97) を用い、試験操作は全て嫌気性菌培養装置内で行っ
た。
ち、ビフィドバクテリウムアドレッセンティス(Bifidob
acterium adolescentis ATCC#15703) 、ビフィドバクテ
リウムロンガム(Bifidobacterium longum ATCC#15707)
、ビフィドバクテリウビフィダム(Bifidobacterium bi
fidum ATCC#29521)、ビフィドバクテリウムブレビ(Bifi
dobacterium breve ATCC#15700)、ビフィドバクテリウ
ムインファンテス(Bifidobacterium infantis ATCC#156
97) を用い、試験操作は全て嫌気性菌培養装置内で行っ
た。
【００１１】試験は、嫌気性菌実験操作法（米国：VIRG
INIA POLYTECHNIC INSTITUTE ANDSTATE UNIVERSITY BL
ACKSBURGで出版されている実験書記載の方法）により、
ＧＭＢ培地の組成のうち無機塩の濃度を４分の１とした
修正ＧＭＢを作成して行った。
INIA POLYTECHNIC INSTITUTE ANDSTATE UNIVERSITY BL
ACKSBURGで出版されている実験書記載の方法）により、
ＧＭＢ培地の組成のうち無機塩の濃度を４分の１とした
修正ＧＭＢを作成して行った。
【００１２】修正ＧＭＢ培地をマイクロプレ−トに取
り、所定量のＢＨＩ培地及び所定量のビフィズス菌培養
液を添加し、所定量の修正ＧＭＢ培地を分注し、これに
所定量の試料を加え、さらに各ビフィズス菌をＢＨＩ培
地に感作させ、３７°Ｃで一夜培養して所定量のカルチ
ャーを加え、３７°Ｃで一夜インキュベーションした。
増殖の度合いは、肉眼またはマイクロプレートリーダに
よって比較判断し、著しく濁りが認められたものを陽
性、すなわちビフィズス菌増殖促進に活性効果があった
と判断した。
り、所定量のＢＨＩ培地及び所定量のビフィズス菌培養
液を添加し、所定量の修正ＧＭＢ培地を分注し、これに
所定量の試料を加え、さらに各ビフィズス菌をＢＨＩ培
地に感作させ、３７°Ｃで一夜培養して所定量のカルチ
ャーを加え、３７°Ｃで一夜インキュベーションした。
増殖の度合いは、肉眼またはマイクロプレートリーダに
よって比較判断し、著しく濁りが認められたものを陽
性、すなわちビフィズス菌増殖促進に活性効果があった
と判断した。
【００１３】［活性分画の抽出］まず玉露を熱水によっ
て抽出した熱水抽出分画から、カフェイン及びカテキン
類を除去する。この方法としては、例えば２つが挙げら
れる。１つは、クロロホルム、酢酸エチルおよびブタノ
−ルで段階的に抽出し、水の層を凍結乾燥物（以下ＧＷ
ＷＥという）として得る方法と、スチレンージビニルベ
ンゼンあるいはメタアクリル酸エステルなどを母体とす
る合成吸着剤を充填したカラムを通して蒸留水で溶出さ
せ、凍結乾燥物として得る方法がある。下記の実験を進
めるに当たっては、どちらの方法から得られる試料を使
用しても同様の結果が得られる。
て抽出した熱水抽出分画から、カフェイン及びカテキン
類を除去する。この方法としては、例えば２つが挙げら
れる。１つは、クロロホルム、酢酸エチルおよびブタノ
−ルで段階的に抽出し、水の層を凍結乾燥物（以下ＧＷ
ＷＥという）として得る方法と、スチレンージビニルベ
ンゼンあるいはメタアクリル酸エステルなどを母体とす
る合成吸着剤を充填したカラムを通して蒸留水で溶出さ
せ、凍結乾燥物として得る方法がある。下記の実験を進
めるに当たっては、どちらの方法から得られる試料を使
用しても同様の結果が得られる。
【００１４】この試料を２％濃度に溶解し、排除限界が
２０, ０００ダルトンのバイオゲルＰ−１０ポリアクリ
ルアミドゲルを充填したカラムによって、蒸留水を溶出
液として、紫外部吸収を検出しながらゲル濾過を行い、
流出物を順次分取し、それぞれについてビフィズス菌に
対する活性効果を調べた。また、ピーク毎にまとめて凍
結乾燥した。ＧＷＷＥの上記Ｐ−１０による典型的なク
ロマトグラフを図１に示した。図１において、活性効果
は、斜線で示した後半のピーク（Ａ）に一致して認めら
れた。また２０, ０００ダルトン以上の高分子化合物は
前半のピークの初めに流出したが、この分画に活性効果
は認められなかった。
２０, ０００ダルトンのバイオゲルＰ−１０ポリアクリ
ルアミドゲルを充填したカラムによって、蒸留水を溶出
液として、紫外部吸収を検出しながらゲル濾過を行い、
流出物を順次分取し、それぞれについてビフィズス菌に
対する活性効果を調べた。また、ピーク毎にまとめて凍
結乾燥した。ＧＷＷＥの上記Ｐ−１０による典型的なク
ロマトグラフを図１に示した。図１において、活性効果
は、斜線で示した後半のピーク（Ａ）に一致して認めら
れた。また２０, ０００ダルトン以上の高分子化合物は
前半のピークの初めに流出したが、この分画に活性効果
は認められなかった。
【００１５】次に、１００─１，８００ダルトンの範囲
で分離可能なバイオゲルＰ−２をガラスカラムに充填
し、凍結乾燥バイオゲルＰ−１０で分離された活性分画
（Ａ）の凍結乾燥物を、紫外部吸収を測定しながら蒸留
水で溶出し、Ｐ−１０と同様に流出物を分得し、それぞ
れについてビフィズス菌に対する活性効果を調べた。こ
のクロマトグラフを図２に示す。このクロマトグラフィ
ーにより、図２に示すようにＰ−１０で分離された活性
分画は、さらに分子量の差に従って分画され、斜線で示
した領域（Ｂ）の分画に活性が認められた。しかし、活
性はバイオゲルＰ−１０分画に比べて著しく低下した。
このことから活性成分がＰ−２ゲルに吸着されたか、ま
たは相乗効果的な作用物質がゲル濾過によって分離され
た可能性が考えられる。この活性成分を検定するために
さらに以下の実験を行った。
で分離可能なバイオゲルＰ−２をガラスカラムに充填
し、凍結乾燥バイオゲルＰ−１０で分離された活性分画
（Ａ）の凍結乾燥物を、紫外部吸収を測定しながら蒸留
水で溶出し、Ｐ−１０と同様に流出物を分得し、それぞ
れについてビフィズス菌に対する活性効果を調べた。こ
のクロマトグラフを図２に示す。このクロマトグラフィ
ーにより、図２に示すようにＰ−１０で分離された活性
分画は、さらに分子量の差に従って分画され、斜線で示
した領域（Ｂ）の分画に活性が認められた。しかし、活
性はバイオゲルＰ−１０分画に比べて著しく低下した。
このことから活性成分がＰ−２ゲルに吸着されたか、ま
たは相乗効果的な作用物質がゲル濾過によって分離され
た可能性が考えられる。この活性成分を検定するために
さらに以下の実験を行った。
【００１６】［活性成分の分子量の測定］ＧＷＷＥの活
性分画を、標準物質として分子量既知のスタキオース
（667)、ラフィノース (595)、及び蔗糖(342) を用い、
ゲル濾過を行った。これにより分子量は７００以下と推
定されたが、流速などキャリブレーション条件の誤差等
を考慮すれば、ＧＷＷＥの活性成分の分子量はおおよそ
１，０００以下の物質により構成されていると推定され
た。
性分画を、標準物質として分子量既知のスタキオース
（667)、ラフィノース (595)、及び蔗糖(342) を用い、
ゲル濾過を行った。これにより分子量は７００以下と推
定されたが、流速などキャリブレーション条件の誤差等
を考慮すれば、ＧＷＷＥの活性成分の分子量はおおよそ
１，０００以下の物質により構成されていると推定され
た。
【００１７】［ＨＰＬＣによる成分分析］以前から茶に
含有されていることが知られているカフェイン、カテキ
ン類、アミノ酸類及び糖類について、活性分画中のそれ
ぞれについて、ＨＰＬＣを用いて成分分析を行った。カ
フェイン、カテキン類及びアミノ酸の分析用カラムは、
カプセルパックＣ１８タイプＣ１８を用い、また糖類の
分析のカラムは、ＮＨ２Ｐ−５０を用いた。
含有されていることが知られているカフェイン、カテキ
ン類、アミノ酸類及び糖類について、活性分画中のそれ
ぞれについて、ＨＰＬＣを用いて成分分析を行った。カ
フェイン、カテキン類及びアミノ酸の分析用カラムは、
カプセルパックＣ１８タイプＣ１８を用い、また糖類の
分析のカラムは、ＮＨ２Ｐ−５０を用いた。
【００１８】その結果、バイオゲルＰ−１０によるゲル
濾過の活性分画中のアミノ酸類については、アスパラギ
ン酸、グルタミン酸、アスパラギン、アラニン及びテア
ニンの５種類の顕著なピークが見られた。この活性分画
を更にバイオゲルＰ−２で処理すると、殆どテアニンの
みになった。カフェイン及びカテキン類は、バイオゲル
Ｐ−１０及びＰ─２による活性分画のいずれにも検出さ
れなかった。
濾過の活性分画中のアミノ酸類については、アスパラギ
ン酸、グルタミン酸、アスパラギン、アラニン及びテア
ニンの５種類の顕著なピークが見られた。この活性分画
を更にバイオゲルＰ−２で処理すると、殆どテアニンの
みになった。カフェイン及びカテキン類は、バイオゲル
Ｐ−１０及びＰ─２による活性分画のいずれにも検出さ
れなかった。
【００１９】また、バイオゲルＰ─１０によるゲル濾過
の活性分画中の糖類については、示唆屈折系：ＲＩを使
い分析した。一般的に、炭水化物はＲＩに対して検出さ
れ易いため、グルコース及びサッカロースが推定でき、
それぞれをＧＣ−ＭＳ（RibermagＲ−１０とＬＫＢ−９
０００）で同定した。さらにバイオゲＰ−２カラムによ
り分離された分画のうち、活性分画をＮＭＲ測定マスス
ペクトル（バリアンＫＬ−４００）で分析すると、標準
物質に照らしてテアニン及びキナ酸が確認された。
の活性分画中の糖類については、示唆屈折系：ＲＩを使
い分析した。一般的に、炭水化物はＲＩに対して検出さ
れ易いため、グルコース及びサッカロースが推定でき、
それぞれをＧＣ−ＭＳ（RibermagＲ−１０とＬＫＢ−９
０００）で同定した。さらにバイオゲＰ−２カラムによ
り分離された分画のうち、活性分画をＮＭＲ測定マスス
ペクトル（バリアンＫＬ−４００）で分析すると、標準
物質に照らしてテアニン及びキナ酸が確認された。
【００２０】更に、活性分画の有機化学的な基本構造を
決定するために、活性分画を硫酸で加水分解して、ＧＣ
−ＭＳによる分析を行った。その結果、ＧＣ−ＭＳによ
りミオイノシトール、フラノース及びピラノースが検出
され、さらに標準物質に照らして、アラビノース、フル
クトース及びグルコースが推定された。また更に、活性
分画のマススペクトルの結果とプロトンＮＭＲの結果か
ら、アラビノピラノシルミオイノシトル（arabinopyran
osylmyo-inositol）も含有されていることが推定され
た。
決定するために、活性分画を硫酸で加水分解して、ＧＣ
−ＭＳによる分析を行った。その結果、ＧＣ−ＭＳによ
りミオイノシトール、フラノース及びピラノースが検出
され、さらに標準物質に照らして、アラビノース、フル
クトース及びグルコースが推定された。また更に、活性
分画のマススペクトルの結果とプロトンＮＭＲの結果か
ら、アラビノピラノシルミオイノシトル（arabinopyran
osylmyo-inositol）も含有されていることが推定され
た。
【００２１】［活性分画中のミネラル成分］茶にはミネ
ラル成分が含まれていることが知られているが、文献的
にはカリウムの存在が確認されているのみである。そこ
でＧＷＷＥ中の活性分画のミネラル成分について検討し
た。ＧＷＷＥを５８０゜Ｃで灰化処理して原子吸光分析
を行った。その結果以下のような含有成分が確認され
た。
ラル成分が含まれていることが知られているが、文献的
にはカリウムの存在が確認されているのみである。そこ
でＧＷＷＥ中の活性分画のミネラル成分について検討し
た。ＧＷＷＥを５８０゜Ｃで灰化処理して原子吸光分析
を行った。その結果以下のような含有成分が確認され
た。
【００２２】ＧＷＷＥ中の成分は、アルミニウム １，
０００─３，０００PPM 、アンチモン １０PPM 、ホウ
素 １０─３０PPM 、カドミウム ２０PPM 、コバルト
１０PPM 、銅５─１０PPM 、ハフニウム ２０PPM 、イ
リジウム ２０PPM 、鉄 ３０─５０PPM 、マグネシウ
ム ３０，０００─５０，０００PPM 、マンガン ３，
０００─５，０００PPM 、水銀 ２０PPM 、ニオビウム
１０PPM 、ニッケル３０─５０PPM 、リン ３，００
０─５，０００PPM 、ロジウム ２０PPM 、ルテニウム
２０PPM 、シリコン ３００─５００PPM 、ナトリウ
ム ３，０００─５，０００PPM 、タンタル ２０PPM
、タングステン １０PPM 、亜鉛 ２０PPM 、であっ
た。
０００─３，０００PPM 、アンチモン １０PPM 、ホウ
素 １０─３０PPM 、カドミウム ２０PPM 、コバルト
１０PPM 、銅５─１０PPM 、ハフニウム ２０PPM 、イ
リジウム ２０PPM 、鉄 ３０─５０PPM 、マグネシウ
ム ３０，０００─５０，０００PPM 、マンガン ３，
０００─５，０００PPM 、水銀 ２０PPM 、ニオビウム
１０PPM 、ニッケル３０─５０PPM 、リン ３，００
０─５，０００PPM 、ロジウム ２０PPM 、ルテニウム
２０PPM 、シリコン ３００─５００PPM 、ナトリウ
ム ３，０００─５，０００PPM 、タンタル ２０PPM
、タングステン １０PPM 、亜鉛 ２０PPM 、であっ
た。
【００２３】そこで含有率が１，０００PPM以上のアル
ミニウム、カルシウム、マグネシウム、マンガン、リ
ン、ナトリウム、そして文献からカリウムの以上７種類
の無機塩のビフィズス菌増殖作用について、前記のバイ
オアッセイにより検討した。その結果、リン（３０．９
７）とカリウム（３９．１）が低いながらも活性を示し
た。
ミニウム、カルシウム、マグネシウム、マンガン、リ
ン、ナトリウム、そして文献からカリウムの以上７種類
の無機塩のビフィズス菌増殖作用について、前記のバイ
オアッセイにより検討した。その結果、リン（３０．９
７）とカリウム（３９．１）が低いながらも活性を示し
た。
【００２４】［ビフィズス菌以外の有害といわれている
腸内細菌に対するＧＷＷＥの増殖促進作用試験］この試
験では、予め糖、BHI 培地あるいは微量の栄養成分の濃
度の調整を含めて約２０種類の培地を試験し、最適条件
のものを用いた。生物的試験は二重法で、マイクロプレ
ート法による定性的試験法を採用した。ＧＷＷＥの濃度
は、１％の原液を作成して、適時０．５％（W/V ）、
０．１％、０．０５％、０．０１％に希釈して用いた。
希釈には全てそれぞれの菌に応じ、次のような培地を用
い、その結果は次の通りであった。
腸内細菌に対するＧＷＷＥの増殖促進作用試験］この試
験では、予め糖、BHI 培地あるいは微量の栄養成分の濃
度の調整を含めて約２０種類の培地を試験し、最適条件
のものを用いた。生物的試験は二重法で、マイクロプレ
ート法による定性的試験法を採用した。ＧＷＷＥの濃度
は、１％の原液を作成して、適時０．５％（W/V ）、
０．１％、０．０５％、０．０１％に希釈して用いた。
希釈には全てそれぞれの菌に応じ、次のような培地を用
い、その結果は次の通りであった。
【００２５】クロストリジウムパーフリンジェンス（Cl
ostridium perfringens ATCC No.25285)に対して、ＢＨ
Ｉと修正ＧＭＢ培地を１：１で混合し、糖を含まない培
地で試験した結果、ＧＷＷＥは、上記菌を増殖させなか
った。バクテロイデスフラジリス（Bacteroides fragil
is ATCC No.13124 ) に対して、０．０４％の糖を含ん
だ修正ＧＭＢ培地で試験した結果、ＧＷＷＥは、上記菌
を増殖させなかった。バクテロイデスディスタソニス
（Bacteroids distasonis ATCC No.8503 )に対してＣＭ
培地とＭＢ培地を１：１で混合した培地で試験した結
果、ＧＷＷＥは上記菌を増殖させなかった。ユウバクテ
リウレンタム（Eubacterium lentum ATCC No.25559 )に
対してＣＭ培地とＭＢ培地を１：５に混合した培地で試
験した結果、ＧＷＷＥは上記菌を増殖させなかった。な
おコントロールとして、ビフィドバクテリウムアドレッ
センティス（Bfidobacterium adolescentis ）も試験し
たが、これは正常に増殖した。
ostridium perfringens ATCC No.25285)に対して、ＢＨ
Ｉと修正ＧＭＢ培地を１：１で混合し、糖を含まない培
地で試験した結果、ＧＷＷＥは、上記菌を増殖させなか
った。バクテロイデスフラジリス（Bacteroides fragil
is ATCC No.13124 ) に対して、０．０４％の糖を含ん
だ修正ＧＭＢ培地で試験した結果、ＧＷＷＥは、上記菌
を増殖させなかった。バクテロイデスディスタソニス
（Bacteroids distasonis ATCC No.8503 )に対してＣＭ
培地とＭＢ培地を１：１で混合した培地で試験した結
果、ＧＷＷＥは上記菌を増殖させなかった。ユウバクテ
リウレンタム（Eubacterium lentum ATCC No.25559 )に
対してＣＭ培地とＭＢ培地を１：５に混合した培地で試
験した結果、ＧＷＷＥは上記菌を増殖させなかった。な
おコントロールとして、ビフィドバクテリウムアドレッ
センティス（Bfidobacterium adolescentis ）も試験し
たが、これは正常に増殖した。
【００２６】これまでの試験結果から、茶の熱水抽出物
に比べて、その抽出物からカテキン類、カフェイン及び
高分子物質を除いた分画に、高いビフィズス菌増殖促進
作用が認められた。すなわち、カフェイン、カテキン類
及び高分子物質は活性化促進には関与していないことが
明らかになった。また茶由来のビフィズス菌増殖促進剤
の生産においては、ヒトが大量に摂取すると弊害が予想
されるカフェイン及びカテキン類を除去する必要があ
る。そして更に、高分子物質を除くことで活性分画の純
度を上げることができる。
に比べて、その抽出物からカテキン類、カフェイン及び
高分子物質を除いた分画に、高いビフィズス菌増殖促進
作用が認められた。すなわち、カフェイン、カテキン類
及び高分子物質は活性化促進には関与していないことが
明らかになった。また茶由来のビフィズス菌増殖促進剤
の生産においては、ヒトが大量に摂取すると弊害が予想
されるカフェイン及びカテキン類を除去する必要があ
る。そして更に、高分子物質を除くことで活性分画の純
度を上げることができる。
【図１】茶抽出乾燥物をバイオゲルＰ−１０に通して得
たクロマトグラフである。
たクロマトグラフである。
【図２】バイオゲルＰ−１０を通して後にバイオゲルＰ
−２に通して得たクロマトグラフである。
−２に通して得たクロマトグラフである。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.7 識別記号 ＦＩ Ｃ１２Ｒ 1:01） Ｃ１２Ｒ 1:01） (72)発明者 川崎 年夫 静岡県榛原郡相良町女神21 株式会社伊 藤園中央研究所内 (56)参考文献 特開 平２−211863（ＪＰ，Ａ) 特開 平１−191680（ＪＰ，Ａ) 特開 昭61−282070（ＪＰ，Ａ) 特開 昭60−66978（ＪＰ，Ａ) (58)調査した分野(Int.Cl.7，ＤＢ名) C12N 1/38 A23L 1/30 A61K 35/78 C12N 1/20
Claims (8)
- 【請求項１】 茶の熱水抽出物からカフェイン及びカテ
キン類を除去し、得られた抽出物から分子量が１，００
０を超える物質を除去して得られる茶抽出物を有効成分
とするビフィズス菌増殖促進剤。 - 【請求項２】 茶の熱水抽出物を、クロロホルム、酢酸
エチル及びブタノールで段階的に抽出して得られた水層
成分から分子量が１，０００を超える物質を除去して得
られる茶抽出物を有効成分とするビフィズス菌増殖促進
剤。 - 【請求項３】 カフェイン及びカテキン類を吸着可能な
合成樹脂充填層に茶の熱水抽出物を通し、次いで当該合
成吸着剤充填層に蒸留水を通して溶出させて得られた水
溶出成分から分子量が１，０００を超える物質を除去し
て得られる茶抽出物を有効成分とするビフィズス菌増殖
促進剤。 - 【請求項４】 茶の熱水抽出物を、スチレン−ジビニル
ベンゼン或いはメタアクリル酸エステルを母体とする合
成吸着剤充填層に通し、次いで当該合成吸着剤充填層に
蒸留水を通して溶出させて得られた水溶出成分から分子
量が１，０００を超える物質を除去して得られる茶抽出
物を有効成分とするビフィズス菌増殖促進剤。 - 【請求項５】 上記茶抽出物は、アスパラギン酸、グル
タミン酸、アスパラギン、アラニン、テアニン、ミオイ
ノシトール、フラノース、ピラノース、アラビノース、
フルクトース、グルコース及びアラビノピラノシルミオ
イノシトールを含有していることを特徴とする請求項１
〜４のいずれかに記載のビフィズス菌増殖促進剤。 - 【請求項６】 茶の熱水抽出物を、クロロホルム、酢酸
エチル及びブタノールで段階的に抽出して水層成分を
得、この水層成分から分子量が１，０００を超える物質
を除去して有効成分を得ることを特徴とするビフィズス
菌増殖促進剤の製造方法。 - 【請求項７】 カフェイン及びカテキン類を吸着可能な
合成樹脂充填層に茶の熱水抽出物を通し、次いで当該合
成吸着剤充填層に蒸留水を通して溶出させて得られた水
溶出成分から分子量が１，０００を超える物質を除去し
て有効成分を得ることを特徴とするビフィズス菌増殖促
進剤の製造方法。 - 【請求項８】 スチレン−ジビニルベンゼン或いはメタ
アクリル酸エステルを母 体とする合成樹脂充填層に茶の
熱水抽出物を通し、次いで当該合成吸着剤充填層に蒸留
水を通して溶出させて得られた水溶出成分から分子量が
１，０００を超える物質を除去して有効成分を得ること
を特徴とするビフィズス菌増殖促進剤の製造方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP03863692A JP3223326B2 (ja) | 1992-01-29 | 1992-01-29 | ビフィズス菌増殖促進剤及びその製造法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP03863692A JP3223326B2 (ja) | 1992-01-29 | 1992-01-29 | ビフィズス菌増殖促進剤及びその製造法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH05276937A JPH05276937A (ja) | 1993-10-26 |
| JP3223326B2 true JP3223326B2 (ja) | 2001-10-29 |
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ID=12530733
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| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP03863692A Expired - Lifetime JP3223326B2 (ja) | 1992-01-29 | 1992-01-29 | ビフィズス菌増殖促進剤及びその製造法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP3223326B2 (ja) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2006126476A1 (ja) | 2005-05-27 | 2006-11-30 | Kabushiki Kaisha Yakult Honsha | 乳酸菌発酵物およびそれを含有してなる発酵乳食品 |
| KR102414623B1 (ko) * | 2019-12-26 | 2022-06-30 | 주식회사 나누리 | 옻 빨대 및 이의 제조 방법 |
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| IN2012DE00371A (ja) * | 2012-02-10 | 2015-05-15 | Council Scient Ind Res | |
| KR101492993B1 (ko) * | 2013-01-31 | 2015-02-12 | 경상대학교산학협력단 | 차나무 추출물로부터 데아닌의 정제방법 |
-
1992
- 1992-01-29 JP JP03863692A patent/JP3223326B2/ja not_active Expired - Lifetime
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| US9708579B2 (en) | 2005-05-27 | 2017-07-18 | Kabushiki Kaisha Yakult Honsha | Lactic acid bacteria fermented substance and fermented milk food product containing the same |
| KR102414623B1 (ko) * | 2019-12-26 | 2022-06-30 | 주식회사 나누리 | 옻 빨대 및 이의 제조 방법 |
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| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH05276937A (ja) | 1993-10-26 |
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