JP3173617U - 細胞凍結作業用具 - Google Patents

Abstract

【課題】液体窒素の使用量を低減でき、かつ細胞凍結作業が容易に行うことができる細胞凍結作業用具を提供する。
【解決手段】細胞凍結作業用具１は、凍結用冷媒収納部を有する本体２を備え、収納部４は、ケーン収納部５と、ケーン収納部の先端より延びかつ幅が先端に向かって拡がる細胞凍結作業部６と、両側部より中央方向に延びる２つの側部膨出部７，８を備え、側部膨出部間により、ケーン収納部および細胞凍結作業部が形成されている。側部膨出部は、ケーン収納部５に向かって斜め下方に傾斜するケーン収納部側部傾斜部７１，８１と、細胞凍結作業部６に向かって斜め下方に傾斜するとともに幅が細胞凍結作業部６の先端に向かって狭くなる作業用傾斜面７２，８２と、ケーン収納部５の先端部に設けられたケーン浮上抑制部３を備える。
【選択図】図１２

Description

本考案は、哺乳動物の卵子、胚などの卵、精子、造血幹細胞、多能性幹細胞等の幹細胞などの生体細胞を凍結保存する際に使用する細胞凍結作業用具に関する。

哺乳動物胚の凍結保存は、特定の系統や品種の遺伝資源の保存を可能とする。また、絶滅の危機に瀕している動物種の維持にも有効である。さらに、ヒトの不妊治療においても有用である。

細胞凍結に関するものではないが、凍結作業は、例えば、特許文献１（特開平２０１０−２８６４３１）のように液体窒素を用いて行われる。具体的には、卵子は、特許文献１の図７に示すような細胞凍結保存具を用いて、ガラス化凍結される。この細胞凍結保存具２０は、液体窒素耐性材料により形成された本体部１１と、液体窒素耐性材料により形成された細胞付着保持部１２と、細胞着保持部１２を被包可能に本体部１１に着脱自在に取り付けられた耐窒素耐性材料により形成された筒状部材１７とからなる。

特開２０１０−２８６４３１

卵子の凍結作業として、最初に採取した卵子の細胞内液を平衡液に置換し、さらに、細胞外液をガラス化液に置換する作業が行われる。そして、顕微鏡下において、生体細胞凍結保存具２０の細胞付着保持部１２に細胞(例えば、卵子）を少量のガラス化液とともに配置させ、付着させる。卵子が付着した細胞凍結保存具２０を先端側（生体細胞保持部１２側）より、あらかじめ準備しておいた液体窒素に浸漬し凍結（ガラス化）させた後、細胞付着保持部１２部分を被包する筒状部材１７を装着する。そして、図８に示すように筒状部材１７が装着された細胞凍結保存具２０は、図９および図１０に示すようなスリーブ装着ケーンのスリーブ２２，２３に収納される。なお、図１１に示すように、スリーブ２２に収納された生体細胞凍結保存具２０は、後端部が突出するものとなっている。そして、同一対象者より複数の卵子を採取しており、上記の作業を複数回繰り返す。上記の凍結作業は、通常、ある程度の深さを有する箱状容器内に液体窒素を相当量入れた状態にて行われる。このため、液体窒素の使用量が多く、廃棄される量も多い。また、凍結作業も容易なものではかった。
本考案の目的は、液体窒素の使用量を低減でき、かつ細胞凍結作業が容易に行うことができる細胞凍結作業用具を提供するものである。

上記目的を達成するものは、以下のものである。
（１） 凍結用冷媒耐性材料により形成された細胞凍結作業用具であって、前記細胞凍結作業用具は、凍結用冷媒収納部を有する本体を備え、前記凍結用冷媒収納部は、スリーブ装着ケーンを収納可能なケーン収納部と、前記ケーン収納部の先端より延びかつ幅が先端に向かって拡がる細胞凍結作業部とを備え、前記本体は、両側部より中央方向に延びる２つの側部膨出部を備え、前記側部膨出部間により、前記ケーン収納部および前記細胞凍結作業部が形成されており、さらに、前記２つの側部膨出部は、前記ケーン収納部に向かって斜め下方に傾斜するケーン収納部側部傾斜部と、前記細胞凍結作業部に向かって斜め下方に傾斜するとともに幅が前記細胞凍結作業部の先端に向かって狭くなる作業用傾斜面とを備え、前記細胞凍結作業用具は、前記本体の前記ケーン収納部の先端部に設けられたケーン浮上抑制部を備え、前記ケーン浮上抑制部の下部は、前記スリーブ装着ケーンの一部が進入可能な空洞部となっている細胞凍結作業用具。

（２） 前記作業用傾斜面は、凍結作業時における作業者の手の載置可能部を形成している上記（１）に記載の細胞凍結作業用具。
（３） 前記ケーン収納部の後端と前記ケーン浮上抑制部の後端間の距離は、前記スリーブ装着ケーンの全長より短く、かつ、前記ケーン収納部の後端と前記ケーン浮上抑制部の先端間の距離は、前記スリーブ装着ケーンの全長より長いものとなっている上記（１）または（２）に記載の細胞凍結作業用具。
（４） 前記ケーン浮上抑制部は、前記ケーン収納部の上端より、所定長下方に位置する上記（１）ないし（３）のいずれかに記載の細胞凍結作業用具。
（５） 前記ケーン収納部側部傾斜部と前記作業用傾斜面は、連続している上記（１）ないし（４）のいずれかに記載の細胞凍結作業用具。
（６） 前記細胞凍結作業部は、前記ケーン収納部の先端部を短辺とし、前記細胞凍結作業部の先端部を長辺とする略台形状のものとなっている上記（１）ないし（５）のいずれかに記載の細胞凍結作業用具。
（７） 前記ケーン浮上抑制部は、下部が開口したコの字型部材により形成され、前記コの字型部材の両脚部が、前記側部膨出部の内側面に固定されている上記（１）ないし（６）のいずれかに記載の細胞凍結作業用具。
（８） 前記スリーブ装着ケーンは、先端屈曲部と、凍結チューブ装着部を有し、前記ケーン浮上抑制部の幅は、前記凍結チューブ装着部に装着された凍結チューブの開口端と前記先端屈曲部間の距離より短いものとなっている上記（１）ないし（７）のいずれかに記載の細胞凍結作業用具。
（９） 前記ケーン浮上抑制部の上面は、前記スリーブ装着ケーンの端部が載置可能となっている上記（１）ないし（８）のいずれかに記載の細胞凍結作業用具。
（１０） 前記ケーン収納部の幅は、前記本体の幅の１／３以下である上記（１）ないし（９）のいずれかに記載の細胞凍結作業用具。
（１１） 前記細胞凍結作業用具は、生体細胞凍結作業用具である上記（１）ないし（１０）のいずれかに記載の細胞凍結作業用具。

本考案の凍結用冷媒耐性材料により形成された細胞凍結作業用具は、凍結用冷媒耐性材料により形成された細胞凍結作業用具であって、細胞凍結作業用具は、凍結用冷媒収納部を有する本体を備え、凍結用冷媒収納部は、スリーブ装着ケーンを収納可能なケーン収納部と、ケーン収納部の先端より延びかつ幅が先端に向かって拡がる細胞凍結作業部とを備え、本体は、両側部より中央方向に延びる２つの側部膨出部を備え、側部膨出部間により、ケーン収納部および細胞凍結作業部が形成されており、さらに、２つの側部膨出部は、ケーン収納部に向かって斜め下方に傾斜するケーン収納部側部傾斜部と、細胞凍結作業部に向かって斜め下方に傾斜するとともに幅が細胞凍結作業部の先端に向かって狭くなる作業用傾斜面とを備え、細胞凍結作業用具は、本体のケーン収納部の先端部に設けられたケーン浮上抑制部を備え、ケーン浮上抑制部の下部は、スリーブ装着ケーンの一部が進入可能な空洞部となっている。
このため、ケーン収納部には、収納されるケーンを冷却可能かつ少ない量の凍結用冷媒が収納されるものとなっており、凍結用冷媒の使用量を減少させることができる。さらに、細胞凍結作業部は、十分な大きさを有し、かつ、作業用傾斜面を用いることにより、凍結作業を容易に行うことが可能である。

図１は、本考案の実施例の細胞凍結作業用具の平面図である。 図２は、図１に示した細胞凍結作業用具の正面図である。 図３は、図１のＡ−Ａ線断面図である。 図４は、図２のＢ−Ｂ線断面図である。 図５は、図２のＣ−Ｃ線断面図である。 図６は、本考案の他の実施例の細胞凍結作業用具の断面図である。 図７は、本考案の細胞凍結作業用具を用いて細胞凍結を行うための細胞凍結保存具の一例の正面図である。 図８は、図７に示した細胞凍結保存具の作用を説明するための説明図である。 図９は、本考案の細胞凍結作業用具を用いて細胞凍結を行うために使用されるスリーブ装着ケーンの一例の平面図である。 図１０は、図９に示したスリーブ装着ケーンの正面図である。 図１１は、本考案の細胞凍結作業用具を用いて細胞凍結を行う時に使用されるスリーブ装着ケーンの一説明図である。 図１２は、本考案の細胞凍結作業用具の作用を説明するための説明図である。 図１３は、図１２のＤ−Ｄ線断面図である。 図１４は、本考案の細胞凍結作業用具の作用を説明するための説明図である。 図１５は、本考案の他の実施例の細胞凍結作業用具の作用を説明するための説明図である。 図１６は、本考案の細胞凍結作業用具に用いられる蓋体の平面図である。 図１７は、図１６のＥ−Ｅ線断面図である。

本考案の細胞凍結作業用具を図面に示す実施例を用いて説明する。
本考案の凍結用冷媒耐性材料により形成された細胞凍結作業用具１は、凍結用冷媒収納部を有する本体２を備え、凍結用冷媒収納部４は、スリーブ装着ケーン２０を収納可能なケーン収納部５と、ケーン収納部５の先端より延びかつ幅が先端に向かって拡がる細胞凍結作業部６とを備える。本体２は、両側部より中央方向に延びる２つの側部膨出部７，８を備え、２つの側部膨出部７，８間により、ケーン収納部５および細胞凍結作業部６が形成されており、さらに、２つの側部膨出部７，８は、ケーン収納部５に向かって斜め下方に傾斜するケーン収納部側部傾斜部７１，８１と、細胞凍結作業部６に向かって斜め下方に傾斜するとともに幅が細胞凍結作業部６の先端に向かって狭くなる作業用傾斜面７２，８２とを備えている。細胞凍結作業用具１は、本体２のケーン収納部５の先端部に設けられたケーン浮上抑制部３を備え、ケーン浮上抑制部３の下部は、スリーブ装着ケーンの一部が進入可能な空洞部３１となっている。

なお、本考案の細胞凍結作業用具１は、胚などの卵、卵子、精子、造血幹細胞、多能性幹細胞等の幹細胞などの生体細胞、植物細胞などを凍結保存するために用いることができる。
この実施例の細胞凍結作業用具１は、図１ないし図６に示すように、本体２を備えており、本体２には、凹部となっている凍結用冷媒収納部４が形成されている。特に、この実施例では、凍結用冷媒収納部４は、略Ｙ字状の凹部となっており、この収納部には、凍結用冷媒が、収納される。凍結用冷媒としては、液体窒素、液化二酸化炭素または液体空気など使用可能であるが、通常、液体窒素が用いられる。
凍結用冷媒収納部４は、スリーブ装着ケーン２０を収納可能なケーン収納部５と、ケーン収納部５の先端より延びかつ幅が先端に向かって拡がる細胞凍結作業部６とを備える。また、本体２は、両側部より中央方向に延びる２つの側部膨出部７，８を備え、側部膨出部７，８間により、ケーン収納部５および細胞凍結作業部６が形成されている。

具体的には、本体２の長手方向の後端より、先端方向（細胞凍結作業部６方向）に延び、かつ本体２の中央方向に膨出する向かい合う２つの側部膨出部７，８を備えている。そして、側部膨出部７，８間のほぼ平行に向かい合う部分により、ケーン収納部５が形成されている。また、側部膨出部７，８の先端部間と本体２の先端壁部間により細胞凍結作業部６が形成されている。
ケーン収納部５は、所定幅にて直線的に延びる直方体状のものとなっており、細胞凍結作業部６は、ケーン収納部５より先端方向に向かって幅が拡がりながら延びる台形柱状のものとなっている。つまり、本体２は、上述した側部膨出部７，８を備えるため、凍結用冷媒収納部４を形成する凹部は、本体２の全体ではなく、所定領域にのみ設けられている。このため、凍結用冷媒収納部４の大きさ（容量）は、本体２に形成可能な収納部の最大容量より十分に小さいものとなっている。特に、ケーン収納部５には、収納されるケーンを冷却可能かつ少ない量の凍結用冷媒が収納されるものとなっている。また、細胞凍結作業部６は、作業に十分な量の凍結用冷媒が収納可能となっている。
また、細胞凍結作業部６は、ケーン収納部５の先端部を短辺とし、細胞凍結作業部６の先端部を長辺とする略台形状のものとなっている。ケーン収納部５の幅は、本体２の幅の１／２以下であることが好ましく、特に、１／３以下が好ましく、さらには、１／４以下が好ましい。また、ケーン収納部５の幅は、細胞凍結作業部６の最大幅の１／２以下であることが好ましく、特に、１／３以下が好ましく、さらには、１／４以下が好ましい。

さらに、図１ないし図５に示すように、本体２の側部膨出部７，８の上面は、ケーン収納部５に向かって斜め下方に傾斜する（言い換えれば、ケーン収納部５の両側部より、本体の側部に向かって斜め上方に傾斜する）ケーン収納部側部傾斜部７１，８１を備えている。このため、膨出部７，８は、ケーン収納部５に向かって低くなっているので、スリーブ装着ケーン２０のケーン収納部５への収納作業を容易なものとしている。また、本体２の側部膨出部７，８の上面は、細胞凍結作業部６に向かって斜め下方に傾斜する（言い換えれば、細胞凍結作業部６の両側部より、本体２の側部に向かって斜め上方に傾斜する）とともに幅が細胞凍結作業部６の先端に向かって狭くなる作業用傾斜面７２，８２を備えている。この細胞凍結作業用具１を用いた凍結操作は、通常、細胞凍結作業部６の先端部（幅が広い側）が、手元側となるように配置した状態にて行われる。そして、後述する採取した細胞が載せられた細胞凍結具を一方の手に持ち、他方の手に、細胞凍結具に被嵌される筒状部材を保持具により把持した状態にて行われる。この際、上記作業用傾斜面７２，８２に、手を載せることができ、さらに、傾斜しているため、手を載せると、手は自然に細胞凍結作業部６方向を向くものとなり、凍結作業を容易に行うことが可能となっている。さらに、傾斜面は、本体２の先端に向かって、言い換えれば、作業時の手元方向に向かって、幅が狭くなっているため、作業に障害となることもない。つまり、作業用傾斜面７２，８２は、凍結作業時における作業者の手の載置可能部を形成している。また、この実施例の細胞凍結作業用具１では、ケーン収納部側部傾斜部７１，８１と作業用傾斜面７２，８２とは、明確な境界はなく、連続している。

そして、細胞凍結作業用具１は、本体２のケーン収納部５の先端部に設けられたケーン浮上抑制部３を備え、ケーン浮上抑制部３の下部は、スリーブ装着ケーンの一部が進入可能な空洞部３１となっている。この実施例の細胞凍結作業用具１では、ケーン収納部５の先端部に、ケーン浮上抑制部３が固定されており、ケーン浮上抑制部３は、コの字型の金属部材により形成されている。ケーン浮上抑制部３は、上板部３２と上板部３２の両端より下方に延びる２本の脚部３３とを備え、脚部３３の側面が、上述した膨出部７，８の内面に固定されている。また、ケーン浮上抑制部３の下部（言い換えれば、ケーン浮上抑制部３の内部）は、スリーブ装着ケーン２０の一部（具体的には、端部）が進入可能な空洞部３１となっている。
また、ケーン収納部５の後端とケーン浮上抑制部３の後端間の距離は、スリーブ装着ケーン２０の全長より短く、かつ、ケーン収納部５の後端とケーン浮上抑制部３の先端間の距離は、スリーブ装着ケーンの全長より長いものとなっている。このため、スリーブ装着ケーン２０の端部のケーン浮上抑制部３の空洞部３１への進入作業が容易であるとともに、進入させたスリーブ装着ケーン２０が浮上してもその端部は、図１３に示すように、ケーン浮上抑制部３の上板部３２の下面に当接するため、それ以上の浮上を抑制する。そして、ケーン浮上抑制部３は、ケーン収納部５の上端より、所定長下方に位置している。

また、ケーン浮上抑制部３は、図１ないし図５に示すように、下部が開口し、上部が所定幅の上板部を有するコの字型部材により形成され、コの字型部材の両脚部が、ケーン収納部５の内側部に固定されている。また、ケーン浮上抑制部３の上面（言い換えれば、上板部３２の上面）は、図１４に示すように、スリーブ装着ケーンの端部が載置可能となっていることが好ましい。この実施例では、上板部３２の上面は、平面状となっており、スリーブ装着ケーンの端部の載置を可能としている。また、ケーン浮上抑制部３のケーン収納部５の底面からの高さは、ケーン収納部５の上面までの高さの１／２以下であることが好ましい。
そして、本体２としては、高さが、１０〜２０ｃｍが好ましく、幅が、２００〜３０ｃｍが好ましく、長さが、３０〜６０ｃｍが好ましい。また、ケーン収納部５の深さは、６〜１０ｃｍが好ましく、幅が、４〜１０ｃｍが好ましく、長さが、２０〜４０ｃｍが好ましい。また、ケーン浮上抑制部３としては、ケーン収納部５の底面からの高さは、２〜５ｃｍが好ましく、ケーン収納部５の上端との間の距離は、２〜６ｃｍが好ましく、幅は、１〜３ｃｍが好ましい。ケーン収納部５の後端とケーン浮上抑制部３の後端間の距離は、使用されるスリーブ装着ケーン２０の全長より、０．５〜２ｃｍ短いことが好ましく、かつ、ケーン収納部５の後端とケーン浮上抑制部３の先端間の距離は、使用されるスリーブ装着ケーン２０の全長より、０．５〜２ｃｍ長いことが好ましい。
また、細胞凍結作業部６の先端部での深さは、６〜１５ｃｍが好ましく、長さ（ケーン収納部までの距離）が、７〜１４ｃｍが好ましい。

また、本考案の細胞凍結作業用具１ａとしては、図６に示すように、本体２ａは、上述した本体２より高さが低く、かつ、ケーン浮上抑制部が、ケーン収納部５の上端付近に位置するものであってもよい。
さらに、本考案の細胞凍結作業用具１は、図１６および図１７に示すような本体２の上面に取り付け可能な蓋体５０を備えていてもよい。さらに、この実施例の細胞凍結作業用具１では、本体２は、上面に環状の突出部９を備えている。また、蓋体５０は、図１６および図１７に示すように、本体部５１の周縁より下方に延びる環状突出部５２を備えている。本体２の環状突出部９と蓋体５０の環状突出部５２が係合することにより、蓋体５０は、本体をほぼ気密状態にて封止可能となっている。

本考案の細胞凍結作業用具１に用いられる細胞凍結保存具としては、例えば、図７および図８に示すようなタイプのものが使用される。なお、この細胞凍結保存具は、例示であり、このようなものに限定されるものではない。
図７は、本考案の細胞凍結作業用具を用いて細胞凍結を行うための細胞凍結保存具の一例の正面図である。図８は、図７に示した細胞凍結保存具の作用（本体部に筒状部材１７を装着した状態）を説明するための説明図である。
図示する細胞凍結保存具１０は、凍結用冷媒耐性材料（具体的には、液体窒素耐性材料）により形成された本体部１１と、凍結用冷媒耐性材料（具体的には、液体窒素耐性材料）により形成された細胞付着保持部１２と、細胞付着保持部１２を被包可能に本体部１１に着脱自在に取り付けられる一端が封鎖され、かつ凍結用冷媒耐性材料（具体的には、液体窒素耐性材料）により形成された筒状部材１７とを備えている。

図７および図８に示すように、本体部１１は、細胞付着保持部１２の一端を保持するとともに筒状部材１７の他端内に侵入しする柱状部１３と柱状部１３の基端に設けられ、筒状部材１７の開口部内面と係合するテーパー部１６および筒状部材１７の開口端と当接可能なフランジ部１４と、把持部１５とを備えている。
本体部１１は、ポリエステル（例えば、ポリエチレンテレフタレート、ポリブチレンテレフタレート）、ポリオレフィン（例えば、ポリエチレン、超高分子量ポリエチレン、ポリプロピレン、エチレン−プロピレン共重合体、エチレン−酢酸ビニル共重合体）、スチレン系樹脂（例えば、ポリスチレン、メタクリレート−スチレン共重合体、メタクリレート−ブチレン−スチレン共重合体）、ポリアミド（例えば、６ナイロン，６６ナイロン）、ポリサルホン、フッ素樹脂、ポリイミド等の耐寒性樹脂が使用され、特に、液体窒素の温度に耐え得るものが好ましい。
細胞付着保持部１２は、可撓性かつ透明性かつ液体窒素耐性材料により形成されており、この実施例では、細長い平坦フィルム状のものとなっている。細胞付着保持部１２は、卵付着作業を容易にするために、可撓性かつ無色透明な平坦フィルム状のものが用いられている。細胞付着保持部１２の露出する部分の長さは、１０〜３０ｍｍ程度、幅０．５〜２．０ｍｍ程度、厚さが０．０１〜０．４ｍｍ程度のものが用いられる。

細胞付着保持部１２の形成材料としては、例えば、３−フッ化ポリエチレン、低密度ポリエチレン、中密度ポリエチレン、高密度ポリエチレン、ポリカーボネート、ナイロン、ポリスルホン、ポリエステル、ポリスチレン、ポリイミド、超高分子量ポリエチレン、エチレン−酢酸ビニル共重合体などの合成樹脂からなるフィルムあるいはそれらの積層体が挙げられる。特に、液体窒素耐性材料、言い換えれば、液体窒素に接触しても脆化しないものが使用される。
筒状部材１７は、細胞付着保持部１２を被包可能に本体部１１に着脱自在に取り付けられる一端が封鎖され、かつ耐寒性材料により形成されたものである。特に、この実施例の筒状部材１７は、一端側内部に挿入された綿状体１９により通気可能に封止されている。

筒状部材１７は、細胞付着保持部１２に接触することなく被包できる内径および長さを備えている。筒状部材１７の形成材料としては、例えば、３−フッ化ポリエチレン、低密度ポリエチレン、中密度ポリエチレン、高密度ポリエチレン、ポリカーボネート、ナイロン、ポリスルホン、ポリエステル、ポリスチレン、ポリイミド、超高分子量ポリエチレン、エチレン−酢酸ビニル共重合体などの合成樹脂からなるフィルムあるいはそれらの積層体が挙げられる。特に、液体窒素耐性材料、言い換えれば、液体窒素に接触しても脆化しないものが好ましい。

本考案の細胞凍結作業用具１に用いられるスリーブ装着ケーンとしては、例えば、図９および図１０に示すようなタイプのものが使用される。なお、このスリーブ装着ケーンは、例示であり、このようなものに限定されるものではない。
スリーブ装着ケーン２０は、ケーン本体２１と、ケーン本体に着脱可能に装着されるスリーブ２２，２３とからなる。この例では、ケーン本体２１は、２つの縦に並んだスリーブ装着部を備えている。そして、ケーン本体２１は、先端部に形成された先端屈曲部（把持部）２４を備える幅の細い半筒状のものとなっている。そして、屈曲部２４より所定長基端側に、先端側スリーブ装着部を形成する２つのスリーブ保持部２１ａ、２１ｂを備え、保持部２１ｂの基端部付近に、第１の係止部２５を備えている。さらに、第１の係止部２５より、所定長基端側に、後端側スリーブ装着部を形成する２つのスリーブ保持部２１ｃ、２１ｄを備え、保持部２１ｄの基端部付近でありかつ本体２１の基端に形成された第２の係止部２６を備えている。そして、上述したケーン浮上抑制部３の幅は、スリーブ装着ケーン２０の先端屈曲部２４と先端側の凍結チューブ装着部２１ａ，２１ｂに装着された凍結チューブ２２の開口端間の距離より短いものとなっていることが好ましい。このようにすることにより、図１５に示すように、ケーン２０の浮上時に、上記スリーブ装着ケーン２０の先端屈曲部２４と先端側の凍結チューブ装着部２１ａ，２１ｂに装着された凍結チューブ２２の開口端間に ケーン浮上抑制部３が入り込むことが可能となり、浮上したケーンの動きを抑制する。そして、この例のケーン本体２１は、スリーブ保持部２１ａ、２１ｂ、２１ｃ、２１ｄの底面部に開口部２７ａ，２７ｂ，２７ｃ，２７ｄが形成されており、凍結用冷媒のスリーブへの接触を確実なものとしている。また、この例のケーン本体２１は、図１１に示すように、スリーブの開口端が斜め上方を向いた状態にて仮保持することが可能となっている。スリーブ２２，２３は、先端が開口し、基端が閉塞した筒状部材である。

次に、本考案の細胞凍結作業用具１の使用方法について説明する。
この説明では、細胞である卵子を凍結保存する場合を例に取り説明する。
まず、本考案の細胞凍結作業用具１の本体２の凍結用冷媒収納部４に液体窒素４５をケーン浮上抑制部３の上面付近もしくは上面を若干越える程度まで、注入する。そして、図１１に示すように、ケーン本体２１にスリーブの開口端が斜め上方を向いた状態にて仮保持させたものを、図１５に示すように、ケーン本体２１の先端部（屈曲部）がケーン浮上抑制部３上となるように、載置し、ケーン本体２１およびスリーブを冷却する。
そして、ピペットの先端に卵子を採取し、卵子の細胞内液を平衡液に置換する作業を行い、さらに、細胞外液をガラス化液に置換する作業を行う。そして、顕微鏡下において、細胞凍結保存具１０の細胞付着保持部１２に卵子を少量のガラス化液とともに付着させる。そして、卵子が付着保持された細胞凍結具を一方の手（例えば、右手）に持ち、他方の手（左手）に、細胞凍結保存具１０に被嵌される筒状部材１７を保持具（図示せず）により把持し、それぞれの手を細胞凍結作業用具１の作業用傾斜面７２，８２に載せる。これにより、手は自然に細胞凍結作業部６方向を向くものとなり、その状態にて、卵子が付着された細胞付着保持部１２を進行させて、細胞凍結作業部６内の液体窒素４５に浸漬し凍結（ガラス化）させる。凍結させたのち、速やかに、筒状部材１７に細胞凍結具本体１１を挿入し、図８の状態とした後、スリーブ２１内に挿入する。通常、同一対象者より複数の卵子を採取しており、上記の作業を複数回繰り返す。そして、一つのケーン２０により保持される細胞凍結保存具１０の凍結作業が終了後、凍結チューブ２２，２３を鉗子等にて押し、凍結チューブ２２，２３を完全にケーンに装着させた後、ケーン２０を図１２および図１３に示すように、ケーン収納部５内に充填されている液体窒素４５内に浸漬させるとともに、その一端（屈曲部）が、ケーン浮上抑制部３の下方となるように、ケーン収納部５内に配置する。浸漬されたケーン２０は、液体窒素４５の表面に浮上することがあるが、浮上しても、図１３のように、ケーン浮上抑制部３に当接するため、それ以上の浮上が抑制され、冷却状態を確実に保持する。上述したように、同一対象者より複数の卵子を採取しており、続いて、第２のケーン２０により保持される細胞凍結保存具１０の凍結作業を上記と同様に行い、作業対象のすべてのケーンについて、上記の凍結作業が終了した後、ケーン収納部５内のケーンを取り出し、液体窒素が収納されている冷却保管用タンク内の収納させる。また、細胞凍結作業用具１内の液体窒素は、異なる対象者の卵子凍結に用いることなく、廃棄する。

１ 細胞凍結作業用具
２ 本体
３ ケーン浮上抑制部
４ 凍結用冷媒収納部
５ ケーン収納部
６ 細胞凍結作業部
７，８ 側部膨出部
１０ 細胞凍結保存具
２０ スリーブ装着ケーン
２２，２３ スリーブ
７１，８１ ケーン収納部側部傾斜部
７２，８２ 作業用傾斜面

Claims (11)

1. 凍結用冷媒耐性材料により形成された細胞凍結作業用具であって、前記細胞凍結作業用具は、凍結用冷媒収納部を有する本体を備え、前記凍結用冷媒収納部は、スリーブ装着ケーンを収納可能なケーン収納部と、前記ケーン収納部の先端より延びかつ幅が先端に向かって拡がる細胞凍結作業部とを備え、前記本体は、両側部より中央方向に延びる２つの側部膨出部を備え、前記側部膨出部間により、前記ケーン収納部および前記細胞凍結作業部が形成されており、さらに、前記２つの側部膨出部は、前記ケーン収納部に向かって斜め下方に傾斜するケーン収納部側部傾斜部と、前記細胞凍結作業部に向かって斜め下方に傾斜するとともに幅が前記細胞凍結作業部の先端に向かって狭くなる作業用傾斜面とを備え、前記細胞凍結作業用具は、前記本体の前記ケーン収納部の先端部に設けられたケーン浮上抑制部を備え、前記ケーン浮上抑制部の下部は、前記スリーブ装着ケーンの一部が進入可能な空洞部となっていることを特徴とする細胞凍結作業用具。
2. 前記作業用傾斜面は、凍結作業時における作業者の手の載置可能部を形成している請求項１に記載の細胞凍結作業用具。
3. 前記ケーン収納部の後端と前記ケーン浮上抑制部の後端間の距離は、前記スリーブ装着ケーンの全長より短く、かつ、前記ケーン収納部の後端と前記ケーン浮上抑制部の先端間の距離は、前記スリーブ装着ケーンの全長より長いものとなっている請求項１または２に記載の細胞凍結作業用具。
4. 前記ケーン浮上抑制部は、前記ケーン収納部の上端より、所定長下方に位置する請求項１ないし３のいずれかに記載の細胞凍結作業用具。
5. 前記ケーン収納部側部傾斜部と前記作業用傾斜面は、連続している請求項１ないし４のいずれかに記載の細胞凍結作業用具。
6. 前記細胞凍結作業部は、前記ケーン収納部の先端部を短辺とし、前記細胞凍結作業部の先端部を長辺とする略台形状のものとなっている請求項１ないし５のいずれかに記載の細胞凍結作業用具。
7. 前記ケーン浮上抑制部は、下部が開口したコの字型部材により形成され、前記コの字型部材の両脚部が、前記側部膨出部の内側面に固定されている請求項１ないし６のいずれかに記載の細胞凍結作業用具。
8. 前記スリーブ装着ケーンは、先端屈曲部と、凍結チューブ装着部を有し、前記ケーン浮上抑制部の幅は、前記凍結チューブ装着部に装着された凍結チューブの開口端と前記先端屈曲部間の距離より短いものとなっている請求項１ないし７のいずれかに記載の細胞凍結作業用具。
9. 前記ケーン浮上抑制部の上面は、前記スリーブ装着ケーンの端部が載置可能となっている請求項１ないし８のいずれかに記載の細胞凍結作業用具。
10. 前記ケーン収納部の幅は、前記本体の幅の１／３以下である請求項１ないし９のいずれかに記載の細胞凍結作業用具。
11. 前記細胞凍結作業用具は、生体細胞凍結作業用具である請求項１ないし１０のいずれかに記載の細胞凍結作業用具。

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