JP3154721B2 - エナンチオマー性２−アルカン酸類の製造方法 - Google Patents

エナンチオマー性２−アルカン酸類の製造方法

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Description

【発明の詳細な説明】 発明の分野 ニトリルからエナンチオマー性アミド中間生成物を介
しての対応する２−アルカン酸のエナンチオマーへのエ
ナンチオ選択性の生物学的触媒作用を受ける加水分解。
技術の現状 一般式Ｘ−CHR−COOHの多くの農業化学品および薬品
がラセミ体またはジアステレオマー混合物として最近市
販されている。多くの場合には、生理学的効果は唯一の
エナンチオマー／ジアステレオマーから誘導されてお
り、他のエナンチオマー／ジアステレオマーは不活性で
あったりまたは有害でさえある。エナンチオマー類を分
離するための化学的および酵素的技術が高いエナンチオ
マー純度の化学品を製造するためのますます重要な手段
になってきている。
WO86/07386は、対応するアミノニトリルとエナンチオ
選択性ニトリラーゼとのエナンチオマー性混合物からの
アミノ酸類またはアミノ酸アミド類の製造および生じた
光学的に活性なアミノ酸またはアミノアミドのその後の
回収方法を開示している。この刊行物は本発明を示唆し
ておらず、その理由はそれは異なる微生物を使用してお
り且つ記されている加水分解は立体特異性でなく立体選
択性であるためである。
EPA326,482は、対応するラセミ体アミドの微生物性加
水分解による例えば２−（４−クロロフェニル）−３−
メチル酪酸の如きアリール−２−アルカン酸類の立体特
異性製造を開示している。FPA326,482中に開示されてい
る微生物には、ブレヴィバクテリウムおよびコリネバク
テリウムの構成員が包含される。該方法は有機溶媒を用
いずにバッチ式に行われ、そして酵素活性物質は１回使
用された後に廃棄されていた。EPA326,482の実施例中の
データは、Ｓ−アミドの35−60％が未転化のまま残って
いたことを示している。製造されたＳ−酸のエナンチオ
マー過剰量は92−97％であった。
U.S.4,366,250は、一般的なニトリルヒドラターゼお
よびＬ−立体特異性アミダーゼを有するバクテリアを用
いる対応するラセミ体アミノニトリルからのＬ−アミノ
酸類の製造方法を開示している。微生物はバシラス、バ
クテリジウム、ミクロコッカスおよびブレヴィバクテリ
ウムから選択される。
EPA356,912は、微生物または酵素の存在下での対応す
るラセミ体ニトリルの加水分解による光学的に活性な２
−置換されたカルボン酸類の製造を開示している。使用
される微生物は、ここで見いだされたものがニトリル類
を酸類のアミド先駆体に転化させることは示唆していな
い。
EPA348,901は、式ｉのラセミ体α−置換されたニトリ
ルまたはアミドをアルカリゲネス、シュードモナス、ロ
ドシュードモナス、コリネバクテリウム、アシネトバク
ター、バシラス、ミコバクテリウム、ロドコッカスおよ
びカンジダ群から選択された微生物で処理することによ
る式iiの光学的に活性なα−置換された有機酸の製造方
法を開示している： ［式中、 R1およびR2はそれぞれハロゲン、ヒドロキシ、置換され
ているかもしくは未置換のアルキル、シクロアルキル、
アルコキシ、アリール、アリールオキシまたは複素環を
表し、但し条件としてR1およびR2は異なっており、そし
てＸはニトリルまたはアミド基である］ ヤマモト（Yamamoto）他、Appl.Envir.Microbiol.、56
（10）、3125−９、1990も参照のこと。
EPA330,529は、対応するラセミ体アリール−２−プロ
ピオン酸アミドからの式iii ［式中、 Arは置換されているもしくは未置換の単環式または多環
式の芳香族またはヘテロ芳香族基を表す］ のアリール−２−プロピオン酸のＳ−エナンチオマーの
製造用のブレヴィバクテリウムおよびコリネバクテリウ
ムの使用方法を開示している。
U.S.4,800,162は、多相および抽出酵素膜を使用する
例えばエステル類、アミド類、カルボン酸類、アルコー
ル類およびアミン類の如き光学的に活性な化合物のラセ
ミ体混合物の分割を開示している。
発明の要旨 本発明は、ラセミ体アルキルニトリルを中間生成物で
あるアミドを介して対応するＲ−またはＳ−アルカン酸
へ転化させるための生物学的に触媒作用を受ける方法に
おけるある種の個別および組み合わせ工程に関するもの
である。出発ニトリルは、 ［式中、 Ａは からなる群から選択され、 R1はC1−C4アルキルであり、 R2はＨまたはOHであり、 R3はＨ、Cl、OCF2H、（CH3）2CHCH2、 H2C＝Ｃ（CH3）CH2NH、 であり、そして R4はClまたはＦである］ である。
Ａの好適な意味は、Ａ−１、Ａ−５、Ａ−９、Ａ−10
およびＡ−11である。Ａ−１の好適な意味は、R3が群C
l、（CH3）2CHCH2、 から選択されるものである。R1に関する好適な意味は、
CH3およびCH（CH3）２である。
本発明の方法の工程ｉにおけるアミドの製造は、式Ｉ
のニトリル類のR,S混合物を実質的に反対のエナチオマ
ーを含んでいないＲ−またはＳ−アミドに立体特異的に
転化させる生物学的物質とＩを接触させることを含んで
いる。式Ｉのニトリルの混合されたＲ−およびＳ−エナ
ンチオマーの分割後に、本発明の方法の工程iiによる式
IIの対応する酸への転化を行う。
アミド中間生成物はＡ−Ｃ（R1）（R2）−CONH2であ
る。本発明は、ラセミ化（工程iii）およびその後の工
程iiから元の反応器への連続的方法における未転化のＲ
−またはＳ−ニトリルの再循環にも関するものであり、
ここでR2はＨである。連続的方法では、ラセミ体アルキ
ルニトリル出発反応物をニトリルヒドラターゼおよびア
ミダーゼ酵素を同時に含有しているかまたはそれらから
なっている生物学的物質と接触させるかまたは連続的に
最初にアミドへ（工程ｉ）そして次に酸へ（工程ii）進
行させる。アルキル酸は連続的に除去され、そして副生
物であるＲ−またはＳ−アルキルニトリル（ここでR2は
Ｈである）をラセミ化しそして連続方法で再循環させ、
そこでそれを追加のアルキルニトリルと組み合わせそし
て酵素（類）と接触させてアルキルアミドを製造しそし
て次に酸を製造する。
本発明は特に、工程ｉで使用される生物学的物質（微
生物またはそれらの変異体もしくは突然変異体、或いは
酵素）により、並びに生物学的触媒作用（工程ｉ）と鉱
酸加水分解（工程ii）または既知のアミダーゼ酵素（工
程iii）との組み合わせにより、特徴づけられている。
ニトリルラセミ化は、実質的量の水の不存在下でのそし
て最も好適には例えばメタノール、エタノール、トルエ
ン、ジオキサンなどの如き非水性溶媒の存在下での強塩
基性イオン交換樹脂の使用により特徴づけられている。
本発明の記載を簡単にするために、有用であると見いだ
されている酵素を参照しながら該方法を説明しよう。
好適な工程ｉの酵素は下記の微生物中で見いだされる
ものを含んでいる：シュードモナス種、例えばピュチ
ダ、アウレオファシエンス、モラキセラ種、セラチア、
例えばセラチア・リクエフアシエンス。これらの酵素は
単離または生合成することができそしてそのままで使用
されるが、適当な微生物（類）を使用することの方が一
般的にさらに簡便である。
ニトリルのR,S−混合物を水和しそして対応するＲ−
またはＳ−エナンチオマー性の酸に転化させるためのこ
の方法では、工程ｉは立体特異性ニトリルヒドラターゼ
の製造用に適している培地の存在下での微生物の培養に
より得られた微生物中で生じる立体特異性ニトリルヒド
ラターゼ酵素の作用により達成される。この培地は酵素
誘発剤としてニトリル類またはアミド類を含むことがで
き、または誘発剤の不存在下で本質的に酵素を生成する
シュードモナス・ピュチダ5B−MGN−2pの場合には成長
用の適当な窒素源（例えば塩化アンモニウム）のみを含
むことが必要である。このようにして得られたニトリル
ヒドラターゼをＲ−またはＳ−ニトリル類に加えて作用
させて対応するＲ−またはＳ−アミド類を生成する。工
程iiでは、Ｒ−またはＳ−アミドを鉱酸またはアミダー
ゼ酵素により対応するＲ−またはＳ−酸に加水分解す
る。
この二工程方法がＲ−またはＳ−酸およびＳ−または
Ｒ−ニトリルをそれぞれ生成する。偏光性ニトリルおよ
び酸を最初に中和および溶媒抽出により分離する。次
に、偏光性ニトリルをR,Sニトリルの混合物にラセミ化
し、それを工程ｉに記されている立体特異性ニトリルヒ
ドラターゼの作用により再びＲ−またはＳ−アミドに立
体特異的に加水分解することができる。
ニトリルヒドラターゼをニトリルに作用させるための
一方法は、酵素を生成する微生物から酵素を集めそして
酵素を酵素調製物として生物学的に認識された方法で使
用することである。
本発明はまた、ラセミ体ニトリルを対応するエナンチ
オマー性Ｒ−またはＳ−アミドに立体特異的に転化させ
るシュードモナス種3L−Ｇ−１−５−1a、シュードモナ
ス種2G−８−５−1a、P.ピュチダ5B−MGN−2pおよびP.
アウレオファシエンスMOB C2−１中に存在しているかも
しくはそれらから誘導される生物学的物質またはそれら
の変異体もしくは突然変異体にも関するものである。
発明の詳細 ４ 本開示の概念では、「立体特異性反応」または「立
体特異性ニトリルヒドラターゼ」という語はＲ−および
Ｓ−エナンチオマー類に関するエナンチオマー比（Ｅ）
により定義されている。Ｅは２種のエナンチオマー類の
反応速度の比に対応している。Ｅが高いすなわち７より
大きい時には反応は立体特異性であり、そしてＥが７よ
り小さい時には反応は立体選択性である。好適な反応は
Ｅが8.5より高いものであり、そして最も好適な反応は1
0以上であるものである。
略語 CPIN − ２−（４−クロロフェニル）−３−メチルブ
チロニトリル CPIAm− ２−（４−クロロフェニル）−３−メチルブ
チルアミド CPIA − ２−（４−クロロフェニル）−３−メチル酪
酸 IBCN − ２−（４−イソブチルフェニル）−プロピオ
ニトリル IBAm − ２−（４−イソブチルフェニル）−プロピオ
アミド IBAC − ２−（４−イソブチルフェニル）−プロピオ
ン酸（イブプロフェン） NPCN − ２−（６−メトキシ−２−ナフチル）−プロ
ピオニトリル NPAm − ２−（６−メトキシ−２−ナフチル）−プロ
ピオアミド NPAC − ２−（６−メトキシ−２−ナフチル）−プロ
ピオン酸 HPLC − 高性能液体クロマトグラフィー GC − ガスクロマトグラフィー DMSO − ジメチルスルホキシド 工程ｉ 本発明で使用される微生物はシュードモナス、モラキ
セラ、およびセラチア種に属している。代表的菌株に
は、P.ピュチダ5B−MGN−2P、モラクセラ種3L−Ａ−１
−５−1a−１、P.ピュチダ13−5S−ACN−2a、シュード
モナス種3L−Ｇ−１−５−1a、およびセラチア・リクエ
ファシエンスMOB IM/N3が包含される。これらの菌株は
ブダペスト条約の下でNRRL（北部地方研究センター、米
国農業省、1815ノース・ユニバーシティー・ストリー
ト、ペオリア、イリノイ州）に供託されており、そして
下記の受け入れ番号がついている： P.ピュチダ5B−MGN−2P、NRRL−Ｂ−18668 モラキセラ種3L−Ａ−１−５−1a−１、NRRL−Ｂ−1867
1 P.ピュチダ13−5S−ACN−2a、NRRL−Ｂ−18669 シュードモナス種3L−Ｇ−１−５−1a、NRRL−Ｂ−1867
0 セラチア・リクエファシエンスMOB IM/N3、NRRL−Ｂ−1
8821 P.ピュチダ2D−11−５−1b、NRRL−Ｂ−18820 シュードモナス種2D−11−５−1c、NRRL−Ｂ−18819 シュードモナス種2G−８−５−1a、NRRL−Ｂ−18833 P.アウレオファシエンスMOB C2−１、NRRL−Ｂ−1883
4。
上記の菌株はテキサス州オレンジで集められた土壌か
ら単離された。下記の修飾培地（PR基底培地）を用いる
標準的な増菌工程を使用した。PR基底培地 g/L KH2PO4 8.85 クエン酸ナトリウム 0.225 MgSO4・7H2O 0.5 FeSO4・7H2O 0.05 FeCl2・4H2O 0.0015 CoCl2・6H2O 0.0002 MnCl2・4H2O 0.0001 ZnCl2 0.00007 H3BO3 0.000062 NaMoO4・2H2O 0.000036 NiCl2・6H2O 0.000024 CuCl2・2H2O 0.000017 ビオチン 0.00001 葉酸 0.00005 ピリドキシン・HCl 0.000025 リボフラビン 0.000025 ニコチン酸 0.000025 パントテン酸 0.00025 ビタミンB12 0.000007 Ｐ−アミノ安息香酸 0.00025 上記の増菌用のPR基底培地に対して下記の添加および
／または修飾を行った。
菌株を最初に増菌ニトリル上での成長およびアンモニ
ア生成を基にして選択した。単離物をバクト・ブレイン
・ハート・インフュージョン・アガー上の反復通過およ
びその後の増菌ニトリルからのアンモニア生成に関する
スクリーニングにより精製した。
精製された菌株を、マイクロバイアルIDインコーポレ
ーテッド（ニューワーク、デラウェア州）からのマイク
ロバイアルIDソフトウェア・アンド・エアローブ・ライ
ブラリー（型3.0）を用いる標準的方法（ムカワヤ（Muk
awaya）他、J.Clin.Microbial、1989、27:2640−46）後
のメチルエステル類の膜脂肪酸分析並びに以下で数値が
つけられている標準的な細菌学、生理学および生化学試
験を基にして同定した。
単独炭素源としての使用 ニトリル加水分解活性を試験するために、10g/Lのグ
ルコースを含んでいるPR基底培地を使用して細胞物質を
成長させた。この培地には25mMの（±）−２−メチルグ
ルタロニトリル（5B−MGN−2P、3L−Ｇ−１−５−1a）
または25mMの1,4−ジシアノブタン（3L−Ａ−１−５−1
a−１、13−5S−ACN−2a）または25mMのアセトアミド
（全菌株）が補足されていた。P.ピュチダ5B−MGN−2p
もニトリルまたはアミドの代わりに25mMのNH4Clまたは
（NH4）2SO4を含んでいるニトリルまたはアミド誘発剤
の不存在下で成長させた。10mL容量の完全培地に0.1mL
の凍結貯蔵培養物（全菌株）を接種した。250rpmのシェ
ーカー上での室温（22−25℃）における一夜の成長後
に、２−Ｌフラスコ中で10mLの接種物を990mLの新しい
培地に加えた。細胞を室温において培地中で発泡を起こ
すのに充分高い速度で撹拌しながら一夜成長させた。細
胞を遠心により採取し、0.85％食塩水で１回洗浄し、そ
して濃縮された細胞ペーストを直ちに−70℃の凍結器中
に貯蔵のために入れた。約80％の水を含有している解凍
された細胞ペーストを全てのニトリル加水分解生転化で
使用した。
上記の立体特異性ニトリル−加水分解用微生物は、上
記の増菌培養物を介して単離された微生物の供託物から
の代表的な菌株であった。増菌実験から単離されたニト
リル−加水分解用微生物の立体特異的および立体選択的
活性を表１に示す。
ａ明細書中に記されている如き脂肪酸分析による菌株同
定b ACN＝アセトニトリル;MGN＝２−メチルグルタロニトリ
ル;SBN＝Ｓ−２−メチルブチロニトリル； 4CP＝４−シアノフェノール;NAN＝１−ナフトアセトニ
トリル;PBN＝フェニルブチロニトリル； PPA＝プロピオンアミドc 28℃における48−64時間後に残っているＲ−およびＳ
−エナンチオマーの比；偏光HPLCにより測定された。d E＝明細書中で定義されている如きエナンチオマー比。
逆相HPLCおよび偏光HPLCにより測定された。e NT＝試験されなかった。ｆ 基質中に存在している痕跡量のR,S−NPAmに関して補
正されたデータg 2D−11−５−１から誘導された2D−11−５−1bおよび2
D−11−５−1c 微生物は突然変異を受ける傾向がある。従って、バク
テリアはそれらが上記の適格性菌株の突然変異体である
場合でもそれの培養が立体特異性ニトリルヒドラターゼ
を生成する限り本発明に従う方法で使用することができ
る。ここに表されている開示と一緒に表１を参照するこ
とにより、当技術の専門家は全てのニトリル出発反応物
をそれらの対応するアミド類／酸類に転化させるための
別のシュードモナス、モラキセラ、およびセラチア（並
びに他の属）を最少の実験で選択することができる。
偏光性アミドから偏光性酸への酸加水分解 本発明では、R,Sニトリルから誘導されたＲ−または
Ｓ−アミドをＲ−またはＳ−酸に加水分解させるために
鉱酸を使用することができる。おもしろいことに、偏光
性シアノヒドリン類は濃鉱酸を用いて対応する偏光性ヒ
ドロキシ酸類に加水分解される：エッフェンベルゲル
（Effenberger）他、テトラヘドロン・レタース（Tetra
hedron Letters）、1990、31（９）:1249−1252および
そこに引用されている参考文献を参照のこと。しかしな
がら、２−アリール−２−アルキルアセトニトリル類は
対応する偏光性アミド類が偏光性酸類に加水分解される
ような条件下では鉱酸により加水分解されないというこ
とを見いだした。偏光性酸は下記の如くして望ましくな
いニトリルから容易に分離することができる。
さらに、偏光性アミドを例えばEPA326,482中に記され
ているブレヴィバクテリウムおよびコリネバクテリウム
種の如きアミダーゼ酵素により加水分解することもでき
る。この反応は立体特異性アミダーゼを必要とせず、従
ってラセミ体２−アリール−アルキルアミド類を加水分
解するアミダーゼならどれでも使用することができる。
偏光性ニトリル類のラセミ化 立体特異性微生物性ニトリル加水分解とアミド類の鉱
酸またはアミダーゼ加水分解との組み合わせが、希望す
る偏光性酸および望ましくない偏光性ニトリルの混合物
を生成する。例えば塩基中和およびニトリルの溶媒抽出
による希望する酸からの望ましくないニトリルの分離後
に、Ｒ−またはＳ−ニトリルの再循環がラセミ化に必要
である。偏光性ニトリル（ここではR2はＨである）を例
えばアンベルライトRIRA−400（OH）樹脂、アンベルラ
イトRA−26、またはダウエックスR1X8樹脂（水酸化物イ
オンとの交換後）の如き強塩基性イオン交換樹脂を用い
て有機溶媒中でラセミ体ニトリルに転化できるというこ
とを見いだした。この工程は高いラセミ体ニトリル収率
を生じ、ニトリルから対応するアミドまたは酸への実質
的な加水分解はなかった。生成したラセミ体ニトリルを
前記の条件下で対応するＲ−またはＳ−酸に加水分解す
ることができる。
分析工程 ニトリル類並びに微生物または鉱酸加水分解によるア
ミドおよび酸生成物は逆相HPLCにより測定される。検出
は紫外線吸収による。0.1％のH3PO4で酸性化された70−
75％のメタノールおよび25−30％のH2Oの移動相または
0.1％のH3PO4で酸性化された67％のアセトニトリル（AC
N）および33％のH2Oを使用するデュポンゾルバックスRC
18カラムを使用する。ニトリル類のクロマトグラフィー
同定および定量化並びにそれらの生じるアミドおよび酸
生成物は認証されている標準との比較により測定するこ
とができる。
エナンチオマー類の分離用の偏光HPLCはクロムテク
（スエーデン）から得られるα１−酸グリコ蛋白質カラ
ムを用いて実施することができる。種々のエナンチオマ
ー類の分離用の移動相は以下にまとめられている。
上記のニトリル類、アミド類および酸類のエナンチオ
マー組成、純度並びにクロマトグラフィー同定を認証さ
れている標準的エナンチオマー類またはラセミ体混合物
との比較により測定した。
CPIN、CPIAmおよびCPIAのGC分析は、スペルコ担体（1
20メッシュ）上に３％のSP2100を含有している183cm×2
mm（内径）ガラスカラムの上で実施された。125℃にお
ける５分間から出発しそして250℃までの毎分８℃の上
昇という温度プログラムを使用した。
本発明の方法を下記の実施例により説明する。
実施例１ 工程i.P.ピュチダ5B−MGN−2Pの凍結細胞ペーストの1
00mg（Ｓ−CPIN、Ｒ−CPIN加水分解）または200mg（R,S
−CPIN加水分解）試料を室温において3mLの燐酸塩緩衝
液（100mM、pH7.0）に加えた。次に、120μＬのジメチ
ルスルホキシド中の30−40μモルのＳ−CPINもしくはＲ
−CPINまたはR,S−CPINを加えた。28℃における撹拌し
ながらの48時間にわたる培養後に、反応を3M H2SO4を用
いてpH3.0に酸性化した。４容量の塩化メチレンを各試
料に加え、そして懸濁液を15−30分間撹拌した。塩化メ
チレン層を除去し、窒素流の下で蒸発乾固し、そして残
渣を3mLのメタノール中に再懸濁させた。メタノール溶
液の組成を逆相HPLCおよび偏光HPLCにより測定し、そし
てそれを表２に示す。
実施例２ 工程i.25mMの（±）−２−メチルグルタロニトリルの
代わりに25mMのNH4Clが補足されているPRグルコース培
地上で増殖された培養物から得られたP.ピュチダ5B−MG
N−2Pの凍結細胞ペーストの50mg試料を室温において20.
6μモルのＳ−CPINまたはR,S−CPINを含有している1mL
の燐酸塩緩衝液（5mM、pH7.5）に加えた。28℃における
撹拌しながらの24時間にわたる培養後に、反応を3M H2S
O4を用いてpH3.0に酸性化した。４容量の塩化メチレン
を各試料に加え、そして懸濁液を15−30分間撹拌した。
塩化メチレン層を除去し、窒素流の下で蒸発乾固し、そ
して残渣を1mLのメタノール中に再懸濁させた。メタノ
ール溶液の組成を逆相HPLCおよび偏光HPLCにより測定
し、そしてそれを表３に示す。
実施例３ 工程i.P.ピュチダ5B−MGN−2Pの凍結細胞ペーストの2
0mg試料を室温においてMgCl2・6H2O（2mM）を含有して
いる1mLの燐酸塩緩衝液（0.3mM、pH7.2）に加えた。次
に40μＬのジメチルスルホキシド中の0.95μモルのR,S
−NPCNを加えた。28℃における撹拌しながらの24時間に
わたる培養後に、反応を3M H2SO4を用いてpH3.0に酸性
化した。４容量の塩化メチレンを各試料に加え、そして
懸濁液を30分間撹拌した。塩化メチレン層を除去し、窒
素流の下で蒸発乾固し、そして残渣を1mLのメタノール
中に再懸濁させた。抽出された上澄み液の組成を逆相HP
LCおよび偏光HPLCにより測定し、そしてそれを表４に示
す。
実施例４ 工程i.P.ピュチダ5B−MGN−2Pの凍結細胞ペーストの4
0mg試料を室温において1mLの燐酸塩緩衝液（100mM、pH
7.0）に加えた。次に40μＬのジメチルスルホキシド中
の10.7μモルのR,S−IBCNを加えた。28℃における撹拌
しながらの48時間にわたる培養後に、反応を3M H2SO4を
用いてpH3.0に酸性化した。４容量の塩化メチレンを各
試料に加え、そして懸濁液を15−30分間撹拌した。塩化
メチレン層を除去し、窒素流の下で蒸発乾固し、そして
残渣を1mLのメタノール中に再懸濁させた。抽出された
上澄み液の組成を逆相HPLCおよび偏光HPLCにより測定
し、そしてそれを表５に示す。
実施例５ 工程i.モラキセラ種3L−Ａ−１−５−1a−１の凍結細
胞ペーストの50mg試料を室温において1mLの燐酸塩緩衝
液（100mM、pH7.0）に加えた。次に、40μＬのジメチル
スルホキシド中の10.3μモルのＳ−CPIN、Ｒ−CPINまた
はR,S−CPINを加えた。28℃における撹拌しながらの48
時間にわたる培養後に、反応を3M H2SO4を用いてpH3.0
に酸性化した。４容量の塩化メチレンを各試料に加え、
そして懸濁液を15−30分間撹拌した。塩化メチレン層を
除去し、窒素流の下で蒸発乾固し、そして残渣を1mLの
メタノール中に再懸濁させた。メタノール溶液の組成を
逆相HPLCおよび偏光HPLCにより測定し、そしてそれを表
６に示す。
実施例６ 工程i.モラキセラ種3L−Ａ−１−５−1a−１の凍結細
胞ペーストの40mg試料を室温において1mLの燐酸塩緩衝
液（100mM、pH7.0）に加えた。実施例４中と同じ方法
で、10.7μモルのR,S−IBCNを加えた。実施例４中と同
じ培養および抽出処方に従い、抽出された上澄み液の組
成を逆相HPLCおよび偏光HPLCにより測定した。結果を表
７に示す。
実施例７ 工程i.シュードモナス種3L−Ｇ−１−５−1a−１の凍
結細胞ペーストの20mg試料を室温においてMgCl2・6H2O
を含有している燐酸塩緩衝液（0.3mM、pH7.0）に加え
た。実施例３中と同じ方法で、0.95μモルのR,S−NPCN
を加えた。実施例３中と同じ培養および抽出に従い、抽
出された上澄み液の組成を逆相HPLCおよび偏光HPLCによ
り測定した。結果を表８に示す。
実施例８ 工程i.P.ピュチダ13−5S−ACN−2aの凍結細胞ペース
トの100mg試料を室温において3mLの燐酸塩緩衝液（100m
M、pH7.0）に加えた。次に40μＬのジメチルスルホキシ
ド中の10.7μモルのR,S−IBCNを加えた。実施例１中と
同じ方法で、30.95μモルのＳ−CPIN、Ｒ−CPINまたは
R,S−CPINを加えた。実施例１中と同じ培養および抽出
方法に従い、抽出された上澄み液の組成を逆相HPLCおよ
び偏光HPLCにより測定した。結果を表９に示す。
実施例９ 工程i.P.ピュチダ13−5S−ACN−2aの凍結細胞ペース
トの40mg試料を室温において燐酸塩緩衝液（100mM、pH
7.0）に加えた。実施例４中と同じ方法で、10.7μモル
のR,S−IBCNを加えた。実施例４中と同じ培養および抽
出方法に従い、抽出された上澄み液の組成を逆相HPLCお
よび偏光HPLCにより測定した。結果を表10に示す。
実施例10 工程i.P.ピュチダ2D−11−５−1bの凍結細胞ペースト
の50mg試料を室温において1mLの燐酸塩緩衝液（100mM、
pH7.0）に加えた。実施例５中と同じ方法で、10.3μモ
ルのＳ−CPINまたはR,S−CPINを加えた。実施例５中と
同じ培養および抽出処方に従い、抽出された上澄み液の
組成を逆相HPLCおよび偏光HPLCにより測定した。結果を
表11に示す。
CPINの明らかに過剰量の回収はほとんどが実験誤差に
よるものであるようである。
実施例11 工程i.P.ピュチダ2D−11−５−1bの凍結細胞ペースト
の50mg試料を室温において2mLの燐酸塩緩衝液（100mM、
pH7.0）に加えた。実施例４中と同じ方法で、10.7μモ
ルのR,S−IBCNを加えた。実施例４中と同じ培養および
抽出処方に従い、抽出された上澄み液の組成を逆相HPLC
および偏光HPLCにより測定した。結果を表12に示す。
実施例12 工程i.S.リクエファシエンスMOB IM/N3の凍結細胞ペ
ーストの50mg試料を室温において1mLの燐酸塩緩衝液（1
00mM、pH7.0）に加えた。実施例５と同じ方法で、10.3
μモルのＳ−CPIN、Ｒ−CPINまたはR,S−CPINを加え
た。実施例５中と同じ培養および抽出方法に従い、抽出
された上澄み液の組成を逆相HPLCおよび偏光HPLCにより
測定した。結果を表13に示す。
実施例13 工程i.P.アウレオファシエンスMOB C2−１の凍結細胞
ペーストの50mg試料を室温において1mLの燐酸塩緩衝液
（100mM、pH7.0）に加えた。実施例５と同じ方法で、1
0.3μモルのＳ−CPIN、Ｒ−CPINまたはR,S−CPINを加え
た。実施例５中と同じ培養および抽出方法に従い、抽出
された上澄み液の組成を逆相HPLCおよび偏光HPLCにより
測定した。結果を表14に示す。
実施例14 工程i.P.アウレオファシエンスMOB C2−１の凍結細胞
ペーストの50mg試料を室温において1mLの燐酸塩緩衝液
（100mM、pH7.0）に加えた。実施例４中と同じ方法で、
10.7μモルのR,S−IBCNを加えた。実施例４中と同じ培
養および抽出方法に従い、抽出された上澄み液の組成を
逆相HPLCおよび偏光HPLCにより測定した。結果を表15に
示す。
実施例15 工程i.シュードモナス種2G−８−５−1aの凍結細胞ペ
ーストの20mg試料を室温において1mLの燐酸塩緩衝液
（0.1M、pH7.2）に加えた。次に、40μＬのジメチルス
ルホキシド中の約１μモルのR,S−NPCNを加えた。28℃
における撹拌しながらの48時間にわたる培養後に、反応
を3M H2SO4を用いてpH3.0に酸性化した。４容量の塩化
メチレンを各試料に加え、そして懸濁液を30分間撹拌し
た。塩化メチレン層を除去し、そして窒素流の下で蒸発
乾固させた。残渣を1mLのメタノール中に再溶解させ
た。抽出された上澄み液の組成を他に記載されている如
くして逆相HPLCおよび偏光HPLCにより測定した。結果を
表16に示す。
実施例16 工程i. シュードモナス種2D−11−５−1cの凍結細胞
ペーストの約10mg試料を室温において1mLの燐酸塩緩衝
液（0.1M、pH7.2）に加えた。次に、40μＬのジメチル
スルホキシド中の約１μモルのR,S−NPCNを加えた。28
℃における撹拌しながらの48時間にわたる培養後に、反
応を3M H2SO4を用いてpH3.0に酸性化した。４容量の塩
化メチレンを各試料に加え、そして懸濁液を30分間撹拌
した。塩化メチレン層を除去し、そして窒素流の下で蒸
発乾固させた。残渣を1mLのメタノール中に再溶解させ
た。抽出された上澄み液の組成を他に記載されている如
くして逆相HPLCおよび偏光HPLCにより測定した。結果を
表17に示す。
実施例17 工程i.P.アウレオファシエンスMOB Cの凍結細胞ペー
ストの約2mg試料を室温において1mLの燐酸塩緩衝液（0.
1M、pH7.2）に加えた。次に、40μＬのジメチルスルホ
キシド中の約１μモルのR,S−NPCNを加えた。28℃にお
ける撹拌しながらの48時間にわたる培養後に、反応を3M
H2SO4を用いてpH3.0に酸性化した。４容量の塩化メチ
レンを各試料に加え、そして懸濁液を30分間撹拌した。
塩化メチレン層を除去し、そして窒素流の下で蒸発乾固
させた。残渣を1mLのメタノール中に再溶解させた。抽
出された上澄み液の組成を他に記載されている如くして
逆相HPLCおよび偏光HPLCにより測定した。結果を表18に
示す。
実施例18 工程ii.1.00gのＳ−CPIAmの16mLの水性塩酸（18％）
中懸濁液を撹拌し、そして加熱還流させた。懸濁液が加
熱されるにつれて、固体が溶解した。16時間後に、反応
混合物を冷却した。沈澱しそしてスタラーの周囲で固化
した固体を塩化メチレンで抽出した。抽出物を蒸発させ
ると、0.98gの無色固体が残り、それをGCおよびHPLCの
組み合わせにより分析した。GCによると主としてCPIA
（92.3面積％）であり残りが未変化のアミドであること
が示された。酸の構造は偏光HPLCによるとＳ−エナンチ
オマー（少なくとも98.2％）であると制定され、痕跡量
だけのラセミ化されたＲ−エナンチオマーであった。
実施例19 工程ii.1.02gのＳ−CPIAmおよび15mLの濃塩酸を用い
て反応を実施例18中の如くして繰り返した。還流下での
約16時間後に、反応混合物を冷却し、そして沈澱した固
体を濾過により集めそして空気乾燥した。0.96gの無色
固体が回収され、それをGC/質量分光計およびHPLCによ
り分析した。主成分はCPIA（96％）であり約４％が未変
化のアミドであると同定された。偏光HPLCは、酸が96.6
％のＳ−エナンチオマーおよび3.4％のＲ−エナンチオ
マーであることを示した。
実施例20 工程iii.1gの湿っているアンベルライトRIRA−400（O
H-形）を10mLの５％NaOHで撹拌しながら10分間処理し、
濾過し、そして洗浄液が中性となるまで蒸留水で洗浄し
た。固体を25mLの無水エタノール中に懸濁させ、そして
1.06gのＲ−CPINを加えた。これを撹拌しそして64時間
にわたり加熱還流させた。濾過による樹脂の除去後に、
濾液を冷却しそして回転−蒸発させると、1.01gの無色
油が残った。偏光HPLC分析は、油がＲ−およびＳ−CPIN
の50/50混合物であることを示した。
例えばCPINの如きR,Sアルキルニトリル類の相対的安
定性および相対的に強い反応条件下での対応する酸類へ
の転化がないことを示す方法は下記の如くであった。9.
70gのR,S−CPINの100mLの濃塩酸中懸濁液を16時間にわ
たり加熱還流させた。反応混合物を冷却しそして塩化メ
チレンで３回抽出した。一緒にした抽出物を水で洗浄
し、そして無水硫酸マグネシウム上で乾燥した。溶媒を
除去すると無色油が残り、それをGCにより同定した。１
種の主成分（90％以上）が存在しており、設定された出
発ニトリルと同じ保有時間を有していた。加水分解によ
り生成されるであろう対応する酸に関する証拠はなかっ
た。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.7 識別記号 ＦＩ Ｃ１２Ｒ 1:01） (Ｃ１２Ｎ 1/20 Ｃ１２Ｒ 1:425） (Ｃ１２Ｎ 1/20 Ｃ１２Ｒ 1:38） (Ｃ１２Ｐ 41/00 Ｃ１２Ｒ 1:01） (Ｃ１２Ｐ 41/00 Ｃ１２Ｒ 1:425） (Ｃ１２Ｐ 41/00 Ｃ１２Ｒ 1:40） (Ｃ１２Ｐ 41/00 Ｃ１２Ｒ 1:38） 微生物の受託番号 ＮＲＲＬ−Ｂ−１８８２１ 微生物の受託番号 ＮＲＲＬ−Ｂ−１８８２０ 微生物の受託番号 ＮＲＲＬ−Ｂ−１８８１９ 微生物の受託番号 ＮＲＲＬ−Ｂ−１８８３３ 微生物の受託番号 ＮＲＲＬ−Ｂ−１８８３４ (72)発明者 リン， ウイリアム・ジヨセフ アメリカ合衆国ペンシルベニア州19382 ウエスト チエスター・サークルドライ ブ1311 (72)発明者 ステイーグリツツ， バリー アメリカ合衆国ペンシルベニア州19096 ウインウツド・クロスヒルロード127 (72)発明者 ウイツターホルト， ビンセント・ジエ ラード アメリカ合衆国デラウエア州19803ウイ ルミントン・スパルデイングロード334 (58)調査した分野(Int.Cl.7，ＤＢ名) C12P 41/00 ＢＩＯＳＩＳ（ＤＩＡＬＯＧ)

Claims (4)

    (57)【特許請求の範囲】
  1. 【請求項１】式 ［式中、 Ａは からなる群から選択され、 R1はC1−C4アルキルであり、 R2はＨまたはOHであり、 R3はＨ、Cl、OCF2H、（CH3）2CHCH2、 H2C＝Ｃ（CH3）CH2NH、 であり、そして R4はClまたはＦである］ のニトリルを、ラセミ体ニトリルを対応するＲ−または
    Ｓ−アミドに立体特異的に変換する活性を有する生物学
    的物質と接触させることからなり、ここで生物学的物質
    がシュードモナス（Pseudomonas）、モラキセラ（Morax
    ella）およびセラチア（Serratia）属からなる群より選
    ばれる属の微生物または該微生物に由来する調製物であ
    ることを特徴とする、前記式のニトリルの対応するアミ
    ドへの変換方法。
  2. 【請求項２】生物学的物質がシュードモナス・ピュチダ
    （Pseudomonas putida）、モラキセラ種（Moraxella s
    p.）およびセラチア・リクエファシエンス（Serratia l
    iquefaciens）の微生物であるかまたはそれらに由来す
    る調製物である請求項１に記載の方法。
  3. 【請求項３】エナンチオマー性アミドを対応する２−ア
    ルカン酸に加水分解する追加の工程を含んでなる請求項
    １または２に記載の方法。
  4. 【請求項４】シュードモナス・ピュチダ5B−MGN−2P（N
    RRL−Ｂ−18668）、モラキセラ種3L−Ａ−１−５−1a−
    １（NRRL−Ｂ−18671）、シュードモナス・ピュチダ13
    −5S−ACN−2a（NRRL−Ｂ−18669）、シュードモナス種
    3L−Ｇ−１−５−1a（NRRL−Ｂ−18670）、セラチア・
    リクエフアシエンスMOB IM/N3（NRRL−Ｂ−18821）、
    シュードモナス・ピュチダ2D−11−５−1b（NRRL−Ｂ−
    18820）、シュードモナス種2D−11−５−1c（NRRL−Ｂ
    −18819）、シュードモナス種2G−８−５−1a（NRRL−
    Ｂ−18833）およびシュードモナス・アウレオフアシエ
    ンスMOB C2−１（NRRL−Ｂ−18834）からなる群より選
    ばれる微生物。
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Families Citing this family (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
SG48037A1 (en) * 1990-11-14 1998-04-17 Nitto Chemical Industry Co Ltd Biology process for production-alpha-hydroxyamide or alpha-hydroxy acid
EP0662149A1 (en) * 1992-09-21 1995-07-12 E.I. Du Pont De Nemours And Company A process for the preparation of enantiomeric 2-alkanoic acids
JPH11513255A (ja) * 1995-10-06 1999-11-16 イー・アイ・デユポン・ドウ・ヌムール・アンド・カンパニー 立体特異的ニトリルヒドラターゼおよびアミダーゼ酵素をコードする核酸断片、ならびにキラルアミドおよび酸の生産に有用なそれら酵素を発現する組換え微生物
GB9602516D0 (en) * 1996-02-08 1996-04-10 Chiroscience Ltd Racemisation
US5728556A (en) * 1996-03-14 1998-03-17 E. I. Du Pont De Nemours And Company Production of ω-cyanocarboxamides from aliphatic α,ω-dinitriles using pseudomonas putida-derived biocatalysts
US5866379A (en) * 1997-01-28 1999-02-02 Novus International Enzymatic conversion of α-hydroxynitriles to the corresponding .alpha.
DE19848129A1 (de) 1998-10-19 2000-04-20 Basf Ag Verfahren zur Herstellung chiraler Carbonsäuren aus Nitrilen mit Hilfe einer Nitrilase oder Mikroorganismen, die ein Gen für die Nitrilase enthalten
JP4584242B2 (ja) 2003-02-27 2010-11-17 ビーエーエスエフ ソシエタス・ヨーロピア 改変されたニトリラーゼおよびカルボン酸の製造方法におけるその使用

Family Cites Families (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE1643428A1 (de) * 1967-07-14 1971-05-27 Knoll Ag Verfahren zur Racemisierung von Salzen des D-alpha-Amino-alpha-(3,4-dimethyloxybenzyl)-propionitrils
FR2015728A1 (en) * 1968-04-18 1970-04-30 Lilly Co Eli Anti-inflammatory substd-phenylalkanoic acids and - derivs
US4366250A (en) 1980-09-24 1982-12-28 Anvar Preparation process of optically active α-aminated acids by biological hydrolysis of nitriles
DK261685A (da) 1985-06-11 1986-12-12 Novo Industri As Fremgangsmaade til fremstilling af optisk aktive, organiske forbindelser
US4800162A (en) 1987-04-01 1989-01-24 Sepracor, Inc. Method for resolution of steroisomers in multiphase and extractive membrane reactors
FR2626288B1 (ja) 1988-01-27 1990-05-18 Rhone Poulenc Sante
FR2626289B1 (fr) * 1988-01-27 1990-06-08 Rhone Poulenc Sante Procede de preparation d'acides aryl-2 alkanoiques optiquement actifs
JP2623345B2 (ja) * 1988-06-27 1997-06-25 旭化成工業株式会社 光学活性なα―置換有機酸の製造方法
EP0356912A3 (en) * 1988-08-29 1991-09-18 Idemitsu Kosan Company Limited A method for the preparation of an optically active 2-substituted carboxylic acid

Also Published As

Publication number Publication date
EP0683235A1 (en) 1995-11-22
ES2085487T3 (es) 1996-06-01
DK0549710T3 (da) 1996-03-18
EP0683145A1 (en) 1995-11-22
ATE134706T1 (de) 1996-03-15
EP0549710B1 (en) 1996-02-28
DE69117521D1 (de) 1996-04-04
JPH06506343A (ja) 1994-07-21
DE69117521T2 (de) 1996-09-19
EP0549710A1 (en) 1993-07-07
HK122196A (en) 1996-07-19
WO1992005275A1 (en) 1992-04-02

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