JP3040502B2 - 亜硝酸菌の硝化反応促進方法 - Google Patents
亜硝酸菌の硝化反応促進方法Info
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- Purification Treatments By Anaerobic Or Anaerobic And Aerobic Bacteria Or Animals (AREA)
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は水産動物の畜養・輸送設
備、水族館等の閉鎖系循環水に含まれる硝化細菌のうち
亜硝酸菌の硝化反応促進方法に関し、廃水、下水および
し尿処理設備、土壌、海水および河川水など自然界に広
く分布する亜硝酸菌の硝化反応促進方法に関し、それら
の菌数測定手段としても利用できる方法に関する。
備、水族館等の閉鎖系循環水に含まれる硝化細菌のうち
亜硝酸菌の硝化反応促進方法に関し、廃水、下水および
し尿処理設備、土壌、海水および河川水など自然界に広
く分布する亜硝酸菌の硝化反応促進方法に関し、それら
の菌数測定手段としても利用できる方法に関する。
【０００２】
【従来の技術】硝化菌はアンモニアまたは亜硝酸を亜硝
酸または硝酸に酸化し、二酸化炭素を唯一の炭素源とし
て菌体成分を合成する独立栄養細菌であり、有機部が共
存すると硝化菌の硝化反応は阻害されるといわれてき
た。
酸または硝酸に酸化し、二酸化炭素を唯一の炭素源とし
て菌体成分を合成する独立栄養細菌であり、有機部が共
存すると硝化菌の硝化反応は阻害されるといわれてき
た。
【０００３】硝化菌にはアンモニアを酸化して亜硝酸塩
にするアンモニア酸化細菌（以下「亜硝酸菌」という）
と、亜硝酸塩を酸化して硝酸塩にする亜硝酸酸化菌（以
下「硝酸菌」という）の２つの細菌群からなる。それぞ
れの化学反応式はつぎの通りである。 （ａ）亜硝酸菌のアンモニア酸化反応 ＮＨ4 + ＋ 3/2Ｏ2 →ＮＯ2 - ＋Ｈ2 Ｏ＋３９．５ｋｃ
ａｌ （ｂ）硝酸菌の亜硝酸酸化反応 ＮＯ2 - ＋ 1/2Ｏ2 →ＨＯ3 - ＋２１．６ｋｃａｌ
にするアンモニア酸化細菌（以下「亜硝酸菌」という）
と、亜硝酸塩を酸化して硝酸塩にする亜硝酸酸化菌（以
下「硝酸菌」という）の２つの細菌群からなる。それぞ
れの化学反応式はつぎの通りである。 （ａ）亜硝酸菌のアンモニア酸化反応 ＮＨ4 + ＋ 3/2Ｏ2 →ＮＯ2 - ＋Ｈ2 Ｏ＋３９．５ｋｃ
ａｌ （ｂ）硝酸菌の亜硝酸酸化反応 ＮＯ2 - ＋ 1/2Ｏ2 →ＨＯ3 - ＋２１．６ｋｃａｌ
【０００４】これらの細菌は従属栄養細菌（有機物の酸
化反応によって生ずるエネルギーを利用して増殖する）
に比べて増殖速度が遅く、硝化反応が十分に現れるだけ
の菌量に達するまでに長時間を要する。従来の亜硝酸菌
の計数方法を例にその詳細を以下に説明する。
化反応によって生ずるエネルギーを利用して増殖する）
に比べて増殖速度が遅く、硝化反応が十分に現れるだけ
の菌量に達するまでに長時間を要する。従来の亜硝酸菌
の計数方法を例にその詳細を以下に説明する。
【０００５】下水または土壌の亜硝酸菌を計測する場
合、１リットルの蒸留水に対し、硫酸アンモニウム３０
mg、第一リン酸カリウム１００mg、キレート鉄６mg、硫
酸マグネシウム・７水塩５０mg、塩化カルシウム・２水
塩２０mg、炭酸水素ナトリウム２００mg、炭酸カルシウ
ム少量、石英砂少量を加え、ｐＨ７．０とし、高圧滅菌
する。｛河合章：窒素化合物の代謝に関与する細菌群の
計数法、「陸水生物生産研究法（陸水生物生産測定方法
論研究会編）」、２９１〜２９５（１９６９）｝これら
の培地９mlを滅菌した試験管に分注する。
合、１リットルの蒸留水に対し、硫酸アンモニウム３０
mg、第一リン酸カリウム１００mg、キレート鉄６mg、硫
酸マグネシウム・７水塩５０mg、塩化カルシウム・２水
塩２０mg、炭酸水素ナトリウム２００mg、炭酸カルシウ
ム少量、石英砂少量を加え、ｐＨ７．０とし、高圧滅菌
する。｛河合章：窒素化合物の代謝に関与する細菌群の
計数法、「陸水生物生産研究法（陸水生物生産測定方法
論研究会編）」、２９１〜２９５（１９６９）｝これら
の培地９mlを滅菌した試験管に分注する。
【０００６】一方試料を滅菌希釈液で１０倍・１０倍に
薄め、それぞれの希釈段階の試料１mlを上記培地を分注
した試験管に加える通常各段階ごとに３本または５本の
培地に接種し、４０日間２０〜３０℃で培養し、各培地
亜硝酸イオン（ＮＯ2 - ）を検出し、その結果から統計
学的に最確数（ｍｏｓｔ ｐｒｏｂａｂｌｅ ｎｕｍｂ
ｅｒ，ＭＰＮ）とよばれる数を計算し、試料中の菌数を
推定する。
薄め、それぞれの希釈段階の試料１mlを上記培地を分注
した試験管に加える通常各段階ごとに３本または５本の
培地に接種し、４０日間２０〜３０℃で培養し、各培地
亜硝酸イオン（ＮＯ2 - ）を検出し、その結果から統計
学的に最確数（ｍｏｓｔ ｐｒｏｂａｂｌｅ ｎｕｍｂ
ｅｒ，ＭＰＮ）とよばれる数を計算し、試料中の菌数を
推定する。
【０００７】
（１）従来の計測方法では培養所要日数が通常３０〜６
０日間と著しく長く、迅速な計測はおこなえない。その
ため浄化装置などの運転状況を的確に判断できない。
０日間と著しく長く、迅速な計測はおこなえない。その
ため浄化装置などの運転状況を的確に判断できない。
【０００８】（２）各希釈段階ごとに３または５本の試
験管を用いるために、多くの器具、装置および労力を要
する。それに加え培養日数が著しく長いために、集中的
に多数の試料を計測するためにはさらに多くの器具、装
置と労力が必要となり、効率よく計測することは現実に
は困難であった。
験管を用いるために、多くの器具、装置および労力を要
する。それに加え培養日数が著しく長いために、集中的
に多数の試料を計測するためにはさらに多くの器具、装
置と労力が必要となり、効率よく計測することは現実に
は困難であった。
【０００９】（３）硝化装置が定常運転において、系内
のなんらかの原因により硝化菌がダメージを受け硝化性
能が低下することがある。その場合性能回復に要する時
間は有機物廃水浄化装置などに比べて長時間を要する。
これは従属栄養細菌に比べて硝化菌の増殖が遅いためで
ある。
のなんらかの原因により硝化菌がダメージを受け硝化性
能が低下することがある。その場合性能回復に要する時
間は有機物廃水浄化装置などに比べて長時間を要する。
これは従属栄養細菌に比べて硝化菌の増殖が遅いためで
ある。
【００１０】本発明は以上の問題点を解決するために、
硝化菌のうち亜硝酸菌の菌数測定も可能な硝化反応の促
進方法を提案するものである。
硝化菌のうち亜硝酸菌の菌数測定も可能な硝化反応の促
進方法を提案するものである。
【００１１】
【課題を解決するための手段】本発明は亜硝酸菌の硝化
反応を促進させる方法において、（１）乳酸もしくはそ
の塩、ピルビン酸もしくはその塩、オキサル酢酸もしく
はその塩、クエン酸もしくはその塩、コハク酸もしくは
その塩、フマル酸もしくはその塩、リンゴ酸もしくはそ
の塩、（２）グルタミン酸もしくはその塩、アスパラギ
ン酸もしくはその塩、セリンもしくはその塩、（３）α
−Ｌ−ラムノース、α−Ｌ−フコース、Ｄ−グルクロン
酸もしくはその塩、Ｎ−アセチル−Ｄ−ムラミン酸、
（４）α−Ｌ−ラムノース１分子、Ｄ−グルクロン酸１
分子及びＤ−グルコース２分子を１ユニットとし、該ユ
ニットが直鎖状に重合した高分子多糖類のうち少なくと
も１種類以上の有機化合物を含む液で亜硝酸菌を培養す
ることを特徴とする亜硝酸菌の硝化反応の促進方法であ
る。
反応を促進させる方法において、（１）乳酸もしくはそ
の塩、ピルビン酸もしくはその塩、オキサル酢酸もしく
はその塩、クエン酸もしくはその塩、コハク酸もしくは
その塩、フマル酸もしくはその塩、リンゴ酸もしくはそ
の塩、（２）グルタミン酸もしくはその塩、アスパラギ
ン酸もしくはその塩、セリンもしくはその塩、（３）α
−Ｌ−ラムノース、α−Ｌ−フコース、Ｄ−グルクロン
酸もしくはその塩、Ｎ−アセチル−Ｄ−ムラミン酸、
（４）α−Ｌ−ラムノース１分子、Ｄ−グルクロン酸１
分子及びＤ−グルコース２分子を１ユニットとし、該ユ
ニットが直鎖状に重合した高分子多糖類のうち少なくと
も１種類以上の有機化合物を含む液で亜硝酸菌を培養す
ることを特徴とする亜硝酸菌の硝化反応の促進方法であ
る。
【００１２】
【作用】特定有機化合物によって亜硝酸菌の硝化能力が
促進され、比較的短時間のうちに亜硝酸イオン（ＮＯ2
- ）が検出可能な濃度にまで生成される。なお特定の有
機化合物による亜硝酸菌硝化能力促進のメカニズムはま
だ不明である。おそらくこれらの特定有機化合物は、従
属栄養細菌にあっては他の有機化合物から容易に生合成
されるが、亜硝酸菌にあっては代謝経路の違いからその
生合成に相当の時間を要するのではないかと考えられ
る。
促進され、比較的短時間のうちに亜硝酸イオン（ＮＯ2
- ）が検出可能な濃度にまで生成される。なお特定の有
機化合物による亜硝酸菌硝化能力促進のメカニズムはま
だ不明である。おそらくこれらの特定有機化合物は、従
属栄養細菌にあっては他の有機化合物から容易に生合成
されるが、亜硝酸菌にあっては代謝経路の違いからその
生合成に相当の時間を要するのではないかと考えられ
る。
【００１３】
（例１）以下に亜硝酸菌の代表菌株（Ｎｉｔｒｏｓｏｍ
ｏｎａｓ ｅｕｒｏｐａｅａＡＴＣＣ２５９７８）を例
にとって、本発明の一実施例を説明する。なおこの実施
例での亜硝酸菌の培養は表１に示す高圧滅菌した培地
（次の培地を参考にした。Lewis , R. F. and D. Prame
r, 1958. " Isolation of Nitrosomonas in pure cultu
re " , 76 , 524-528 ) を用いて、すべて無菌的に操作
した。
ｏｎａｓ ｅｕｒｏｐａｅａＡＴＣＣ２５９７８）を例
にとって、本発明の一実施例を説明する。なおこの実施
例での亜硝酸菌の培養は表１に示す高圧滅菌した培地
（次の培地を参考にした。Lewis , R. F. and D. Prame
r, 1958. " Isolation of Nitrosomonas in pure cultu
re " , 76 , 524-528 ) を用いて、すべて無菌的に操作
した。
【表１】
【００１４】表１の培地であらかじめ１０日間前培養し
ておいた亜硝酸菌英１０mlを新鮮培地１００mlに加え、
３つの三角フラスコ（２００ml容）にそれぞれ２０mlず
つ分注した。ついで添加濃度が１ｍＭおよび５ｍＭとな
るようにそれぞれの液にろ過滅菌したオキサル酢酸溶液
を加え、温度３０℃、回転数１２０ｒｐｍで１１７時間
回転培養した。これらの培養液について培養開始時と終
了時における亜硝酸濃度を測定した。なお亜硝酸濃度の
測定はグリース・ロミイン試薬によった。
ておいた亜硝酸菌英１０mlを新鮮培地１００mlに加え、
３つの三角フラスコ（２００ml容）にそれぞれ２０mlず
つ分注した。ついで添加濃度が１ｍＭおよび５ｍＭとな
るようにそれぞれの液にろ過滅菌したオキサル酢酸溶液
を加え、温度３０℃、回転数１２０ｒｐｍで１１７時間
回転培養した。これらの培養液について培養開始時と終
了時における亜硝酸濃度を測定した。なお亜硝酸濃度の
測定はグリース・ロミイン試薬によった。
【００１５】添加物質が乳酸ナトリウムの場合は１０ｍ
Ｍおよび２０ｍＭ、ピルビン酸ナトリウムの場合は１ｍ
Ｍおよび５ｍＭ、クエン酸３ナトリウム・２水和物の場
合は５ｍＭおよび１０ｍＭ、コハク酸ナトリウム・６水
和物の場合は１ｍＭおよび５ｍＭ、フマル酸１ナトリウ
ムの場合は５ｍＭおよび１０ｍＭ、Ｌ−リンゴ酸２ナト
リウムの場合は１ｍＭおよび１０ｍＭとなるようにそれ
ぞれ培地に加え、上記方法と同様に９６時間回転培養を
行った。
Ｍおよび２０ｍＭ、ピルビン酸ナトリウムの場合は１ｍ
Ｍおよび５ｍＭ、クエン酸３ナトリウム・２水和物の場
合は５ｍＭおよび１０ｍＭ、コハク酸ナトリウム・６水
和物の場合は１ｍＭおよび５ｍＭ、フマル酸１ナトリウ
ムの場合は５ｍＭおよび１０ｍＭ、Ｌ−リンゴ酸２ナト
リウムの場合は１ｍＭおよび１０ｍＭとなるようにそれ
ぞれ培地に加え、上記方法と同様に９６時間回転培養を
行った。
【００１６】また比較のため、これと並行して添加物質
を含まない亜硝酸菌のみの培養液（コントロール）につ
いても硝化試験を行った。以上の結果を表２に示す。
を含まない亜硝酸菌のみの培養液（コントロール）につ
いても硝化試験を行った。以上の結果を表２に示す。
【００１７】これよりいずれの添加濃度においても生成
された亜硝酸濃度はコントロールよりも高いレベルに達
し、これらの添加物質は亜硝酸菌の硝化反応を促進させ
る効果があることが分かった。
された亜硝酸濃度はコントロールよりも高いレベルに達
し、これらの添加物質は亜硝酸菌の硝化反応を促進させ
る効果があることが分かった。
【００１８】なお同時に行った菌数の計数から培養終了
時の菌濃度を比較すると、クエン酸、コハク酸、フマル
酸およびリンゴ酸ではコントロールの菌濃度（２．９×
１０ 8 cells/ml) とほぼ同じか下回った。すなわちこれ
らの添加物質は亜硝酸菌の増殖促進にほとんど効果がな
かった。
時の菌濃度を比較すると、クエン酸、コハク酸、フマル
酸およびリンゴ酸ではコントロールの菌濃度（２．９×
１０ 8 cells/ml) とほぼ同じか下回った。すなわちこれ
らの添加物質は亜硝酸菌の増殖促進にほとんど効果がな
かった。
【００１９】一方オキサル酢酸、乳酸およびピルビン酸
は亜硝酸菌の増殖促進の最適添加濃度と硝化反応促進の
最適添加濃度は一致しなかった。すなわちこれらの物質
は添加濃度によって亜硝酸菌の増殖または硝化反応のど
ちらかを促進する効果があった。
は亜硝酸菌の増殖促進の最適添加濃度と硝化反応促進の
最適添加濃度は一致しなかった。すなわちこれらの物質
は添加濃度によって亜硝酸菌の増殖または硝化反応のど
ちらかを促進する効果があった。
【表２】
【００２０】（例２）Ｌ−グルタミン酸ナトリウムが１
mg／ｌおよび１０mg／ｌに、Ｌ−アスパラギン酸ナトリ
ウムが１mg／ｌおよび５mg／ｌに、Ｌ−セリンが５mg／
ｌおよび１０mg／ｌとなるように添加した培地につい
て、前培養１０日間の亜硝酸菌を植種し、例１と同様に
して培養を行った。これらの結果を表３に示す。
mg／ｌおよび１０mg／ｌに、Ｌ−アスパラギン酸ナトリ
ウムが１mg／ｌおよび５mg／ｌに、Ｌ−セリンが５mg／
ｌおよび１０mg／ｌとなるように添加した培地につい
て、前培養１０日間の亜硝酸菌を植種し、例１と同様に
して培養を行った。これらの結果を表３に示す。
【００２１】これよりいずれの添加物質も、生成された
亜硝酸濃度はコントロールよりも高いレベルに達し、亜
硝酸菌の硝化反応を促進させる効果があることが分かっ
た。
亜硝酸濃度はコントロールよりも高いレベルに達し、亜
硝酸菌の硝化反応を促進させる効果があることが分かっ
た。
【００２２】しかし同時に行った菌数の計数から培養終
了時の菌濃度を比較すると、これらの添加物質ではコン
トロールの菌濃度（１．３×１０8 cells/ml) とほぼ同
じか下回り、いずれも亜硝酸菌の増殖に効果がなかっ
た。
了時の菌濃度を比較すると、これらの添加物質ではコン
トロールの菌濃度（１．３×１０8 cells/ml) とほぼ同
じか下回り、いずれも亜硝酸菌の増殖に効果がなかっ
た。
【表３】
【００２３】（例３）α−Ｌ−ラムノースおよびα−Ｌ
−フコースがそれぞれ１ｍＭおよび５ｍＭに、Ｄ−グル
クロン酸ナトリウムが１ｍＭおよび５ｍＭに、Ｎ−アセ
チル−Ｄ−ムラミン酸が２５mg／ｌおよび５０mg／ｌと
なるように添加した培地について、前培養７日間の亜硝
酸菌を植種し、例１と同様にして培養した。これらの結
果を表４に示す。
−フコースがそれぞれ１ｍＭおよび５ｍＭに、Ｄ−グル
クロン酸ナトリウムが１ｍＭおよび５ｍＭに、Ｎ−アセ
チル−Ｄ−ムラミン酸が２５mg／ｌおよび５０mg／ｌと
なるように添加した培地について、前培養７日間の亜硝
酸菌を植種し、例１と同様にして培養した。これらの結
果を表４に示す。
【００２４】これよりＬ−フコース５ｍＭの場合の除い
て、他のいずれの添加物質も、生成された亜硝酸濃度は
コントロールより高いレベルに達し、亜硝酸菌の硝化反
応を促進させる効果があることが分かった。
て、他のいずれの添加物質も、生成された亜硝酸濃度は
コントロールより高いレベルに達し、亜硝酸菌の硝化反
応を促進させる効果があることが分かった。
【００２５】なお同時に行った菌数の計数から培養終了
時の菌濃度を比較すると、これらの添加物質は亜硝酸菌
の増殖促進の最適添加濃度と硝化反応促進の最適添加濃
度は一致しなかった。すなわちこれらの物質は添加濃度
によって亜硝酸菌の増殖または硝化反応のどちらかを促
進する効果があった。
時の菌濃度を比較すると、これらの添加物質は亜硝酸菌
の増殖促進の最適添加濃度と硝化反応促進の最適添加濃
度は一致しなかった。すなわちこれらの物質は添加濃度
によって亜硝酸菌の増殖または硝化反応のどちらかを促
進する効果があった。
【表４】
【００２６】（例４）Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｅｌｏ
ｄｅａ（ＡＴＣＣ３１４６１）が産出する粘液物質を脱
アセチル化し生成して得られた高分子多糖類（和光純薬
製商品名：ゲランガム）を用いて亜硝酸菌の硝化試験を
おこなわた。この物質はα−Ｌ−ラムノース１分子、Ｄ
−グルクロン酸１分子およびＤ−グルコース２分子を１
ユニットとし、該ユニットが直鎖状に重合下高分子多糖
類（平均重量分子量は６５万）である。この物質が０．
１、０．２、０．５、１．０および５．０％の濃度とな
るように加え、高圧滅菌した培地（表１）に前培養６日
間の亜硝酸菌を植種し、例１と同様にして９６時間培養
した。その結果を表５に示す。
ｄｅａ（ＡＴＣＣ３１４６１）が産出する粘液物質を脱
アセチル化し生成して得られた高分子多糖類（和光純薬
製商品名：ゲランガム）を用いて亜硝酸菌の硝化試験を
おこなわた。この物質はα−Ｌ−ラムノース１分子、Ｄ
−グルクロン酸１分子およびＤ−グルコース２分子を１
ユニットとし、該ユニットが直鎖状に重合下高分子多糖
類（平均重量分子量は６５万）である。この物質が０．
１、０．２、０．５、１．０および５．０％の濃度とな
るように加え、高圧滅菌した培地（表１）に前培養６日
間の亜硝酸菌を植種し、例１と同様にして９６時間培養
した。その結果を表５に示す。
【００２７】これよりゲランガムがいずれの濃度の時で
も、生成した亜硝酸濃度がコントロールよりも高く、亜
硝酸菌の硝化反応を促進させることが分かった。
も、生成した亜硝酸濃度がコントロールよりも高く、亜
硝酸菌の硝化反応を促進させることが分かった。
【００２８】なお同時に行った菌数の計数から培養終了
時の菌濃度を比較すると、この添加物質は亜硝酸菌の増
殖促進の最適添加濃度と硝化反応促進の最適添加濃度は
一致しなかった。すなわちこれらの物質は添加濃度によ
って亜硝酸菌の増殖または硝化反応のどちらかを促進す
る効果があった。
時の菌濃度を比較すると、この添加物質は亜硝酸菌の増
殖促進の最適添加濃度と硝化反応促進の最適添加濃度は
一致しなかった。すなわちこれらの物質は添加濃度によ
って亜硝酸菌の増殖または硝化反応のどちらかを促進す
る効果があった。
【表５】
【００２９】（例５）オキサル酢酸が１ｍＭ、乳酸ナト
リウムが１０ｍＭ、ピルビン酸ナトリウムが５ｍＭ、ク
エン酸３ナトリウム・２水和物が１０ｍＭ、コハク酸ナ
トリウム・６水和物が５ｍＭ、フマル酸１ナトリウムが
１０ｍＭ、Ｌ−リンゴ酸２ナトリウムが１ｍＭ、Ｌ−グ
ルタミン酸ナトリウム・１水和物が１０ｍｇ／ｌ、Ｌ−
アスパラギン酸ナトリウム・１水和物が５ｍｇ／ｌ、Ｌ
−セリンが１０ｍｇ／ｌ、α−Ｌ−ラムノースが１ｍ
Ｍ、α−Ｌ−フコースが１ｍＭ、Ｄ−グルクロン酸ナト
リウムが５ｍＭ、Ｎ−アセチル−Ｄ−ムラミン酸が２５
ｍｇ／ｌ、ゲランガムが０．５％の濃度となるように表
６の培地（ Engel , M. S. and M. Alexander , 1958.
"Growth and autotrophic metabolism of Nitorosomon
as europaea" , J. Bacteriol,. 76 , 217-222. )に加
え、それぞれの物質の添加培地を調製した。これを各添
加培地ごとに３本の試験管に５ｍｌづつ分注した。
リウムが１０ｍＭ、ピルビン酸ナトリウムが５ｍＭ、ク
エン酸３ナトリウム・２水和物が１０ｍＭ、コハク酸ナ
トリウム・６水和物が５ｍＭ、フマル酸１ナトリウムが
１０ｍＭ、Ｌ−リンゴ酸２ナトリウムが１ｍＭ、Ｌ−グ
ルタミン酸ナトリウム・１水和物が１０ｍｇ／ｌ、Ｌ−
アスパラギン酸ナトリウム・１水和物が５ｍｇ／ｌ、Ｌ
−セリンが１０ｍｇ／ｌ、α−Ｌ−ラムノースが１ｍ
Ｍ、α−Ｌ−フコースが１ｍＭ、Ｄ−グルクロン酸ナト
リウムが５ｍＭ、Ｎ−アセチル−Ｄ−ムラミン酸が２５
ｍｇ／ｌ、ゲランガムが０．５％の濃度となるように表
６の培地（ Engel , M. S. and M. Alexander , 1958.
"Growth and autotrophic metabolism of Nitorosomon
as europaea" , J. Bacteriol,. 76 , 217-222. )に加
え、それぞれの物質の添加培地を調製した。これを各添
加培地ごとに３本の試験管に５ｍｌづつ分注した。
【００３０】一方下水汚泥から純粋分離した亜硝酸菌を
表６の培地により７日間培養（このときの菌濃度は直接
計数で１．３×１０8 cells/ml) した後、この培養液を
無菌整理食塩水で１０8 〜１０10倍希釈した。その各段
階希釈液１ｍｌを上記添加培地ごとに準備した３本の試
験管にそれぞれ加えた。これらの試験管を毎分１８０ス
トローク、３０℃で振とう培養した。
表６の培地により７日間培養（このときの菌濃度は直接
計数で１．３×１０8 cells/ml) した後、この培養液を
無菌整理食塩水で１０8 〜１０10倍希釈した。その各段
階希釈液１ｍｌを上記添加培地ごとに準備した３本の試
験管にそれぞれ加えた。これらの試験管を毎分１８０ス
トローク、３０℃で振とう培養した。
【００３１】またこれと並行して、添加物質を加えない
表６の培地を分注した３本の試験管（コントロール）に
も各段階希釈液１ｍｌをそれぞれ加え、上記と同じ条件
で培養した。
表６の培地を分注した３本の試験管（コントロール）に
も各段階希釈液１ｍｌをそれぞれ加え、上記と同じ条件
で培養した。
【００３２】その結果培養するにつれて培地が黄変色し
た試験管について、亜硝酸濃度を測定したところ、すべ
て１０ｍｇ／ｌ以上であった。培地が黄変色するのに要
した日数と、これらの結果から求めた最確数（ＭＰＮ）
値による菌濃度推定値を表７に示した。
た試験管について、亜硝酸濃度を測定したところ、すべ
て１０ｍｇ／ｌ以上であった。培地が黄変色するのに要
した日数と、これらの結果から求めた最確数（ＭＰＮ）
値による菌濃度推定値を表７に示した。
【００３３】これより最確数（ＭＰＮ）と直接計数によ
り求めた菌濃度とは比較的よく一致した。またコントロ
ールに比べて、添加培地は所要培養日数が著しく短いこ
とが分かった。
り求めた菌濃度とは比較的よく一致した。またコントロ
ールに比べて、添加培地は所要培養日数が著しく短いこ
とが分かった。
【表６】
【表７】
【００３４】
（１）本発明では従来の無機化合物（アンモニア）によ
る亜硝酸菌の培養に比べて、硝化能力（亜硝酸生成能
力）が１．５〜３倍も向上する。 （２）起動時またはトラブル発生時の硝化装置は硝化能
力が低い。このような場合でも、本発明によれば従来と
は比較にならないほど硝化能力を迅速に向上または回復
できる。 （３）従来の方法では所要培養日数が著しく長く、迅速
な計測が行えなかった亜硝酸菌の菌数計測が、比較的短
日数で可能となり、硝化装置等の起動・停止または運転
状況を的確に判断することが可能となる。 （４）亜硝酸菌の菌数計測が比較的簡単で短日数で行え
るため、従来法で必要な多くの器具、装置及び労力の低
減が図れる。
る亜硝酸菌の培養に比べて、硝化能力（亜硝酸生成能
力）が１．５〜３倍も向上する。 （２）起動時またはトラブル発生時の硝化装置は硝化能
力が低い。このような場合でも、本発明によれば従来と
は比較にならないほど硝化能力を迅速に向上または回復
できる。 （３）従来の方法では所要培養日数が著しく長く、迅速
な計測が行えなかった亜硝酸菌の菌数計測が、比較的短
日数で可能となり、硝化装置等の起動・停止または運転
状況を的確に判断することが可能となる。 （４）亜硝酸菌の菌数計測が比較的簡単で短日数で行え
るため、従来法で必要な多くの器具、装置及び労力の低
減が図れる。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.7 識別記号 ＦＩ Ｃ１２Ｒ 1:01）
Claims (1)
- 【請求項１】 亜硝酸菌の硝化反応を促進させる方法に
おいて、（１）乳酸もしくはその塩、ピルビン酸もしく
はその塩、オキサル酢酸もしくはその塩、クエン酸もし
くはその塩、コハク酸もしくはその塩、フマル酸もしく
はその塩、リンゴ酸もしくはその塩、（２）グルタミン
酸もしくはその塩、アスパラギン酸もしくはその塩、セ
リンもしくはその塩、（３）α−Ｌ−ラムノース、α−
Ｌ−フコース、Ｄ−グルクロン酸もしくはその塩、Ｎ−
アセチル−Ｄ−ムラミン酸、（４）α−Ｌ−ラムノース
１分子、Ｄ−グルクロン酸１分子及びＤ−グルコース２
分子を１ユニットとし、該ユニットが直鎖状に重合した
高分子多糖類のうち少なくとも１種類以上の有機化合物
を含む液で亜硝酸菌を培養することを特徴とする亜硝酸
菌の硝化反応の促進方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2875191A JP3040502B2 (ja) | 1991-02-22 | 1991-02-22 | 亜硝酸菌の硝化反応促進方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2875191A JP3040502B2 (ja) | 1991-02-22 | 1991-02-22 | 亜硝酸菌の硝化反応促進方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH06121999A JPH06121999A (ja) | 1994-05-06 |
| JP3040502B2 true JP3040502B2 (ja) | 2000-05-15 |
Family
ID=12257116
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2875191A Expired - Lifetime JP3040502B2 (ja) | 1991-02-22 | 1991-02-22 | 亜硝酸菌の硝化反応促進方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP3040502B2 (ja) |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2012206017A (ja) * | 2011-03-29 | 2012-10-25 | Kubota Kankyo Service Kk | 排水処理方法、及び排水処理装置 |
-
1991
- 1991-02-22 JP JP2875191A patent/JP3040502B2/ja not_active Expired - Lifetime
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH06121999A (ja) | 1994-05-06 |
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