JPS637776A - 硫酸還元菌の培養方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 の培養法に関する。デ芝ルフォビプリオ属に属する微生
物は菌体内にチトクロームＣｓｔ含有する。

このチトクロームＣ５は優れ７？：、に子伝達作用を有
する物質である。

細菌であシ、培養中に硫化水素を発生する特徴を有して
いる。

従来、該微生物の培養方法として酸素の混入を防ぐため
に密閉容器を用いてきたが、この方法では培養液中に硫
化水素が高濃度に蓄積するため、蓄積された硫化水素が
該微生物の生育を阻害し該微生物を効率よく、高濃度に
増殖させることが出来ないという欠点を有していた。

又、この問題を解決するために培地中に鉄イオンを加え
阻害作用のない硫化鉄にせしめる方法も用いられている
が硫化鉄の生成量が膨大となシ、培養液から菌体を分離
する際に、菌体と硫化鉄沈澱部の分離がきわめて困難で
あった。

（本発明が解決しようとする問題点） 本発明が解決しようとする問題点は従来の技術微生物の
生育がこの硫化水素によシ阻害を受け、大量に菌体を得
ることができないこと、及び培地中に鉄イオンを加えて
生成する硫化水素をデズルフォピブリオ属に属する微生
物の生育に阻害を与えない硫化鉄にすると菌体と硫化鉄
の分離がきわめて困難であることを解決し念新しいデメ
ルフォビブリオ属に属する微生物の大量培養法を開発す
ることにある。

（問題点を解決するための手段） 本発明者等は、上述の問題点を解決すべく種々検討を行
なった結果、デメルフォビブリオ属に属する微生物の培
養に際し、不活性ガスを培養液中、に通気し、培養液中
の硫化水素を排気の不活性ガスと共に除去することによ
）、培養液中の硫化水素を該微生物の生育を阻害しない
濃度に維持すること、更に、培地中の乳酸濃度を制御す
ることによシ、従来の培養法では得ることのできなかっ
た大量の菌体を得ることができることを見い出した。

本発明はこの知見に基づいてなされｔものである。

即ち、デ２ルフォビブリオ属に属する微生物を液体培地
に接糧し、培地中の硫化水素濃度が０，０５〜１１００
０ｐｐに維持されるように不活性ガスを通気しつつ培養
すること、更に培地中の乳酸ｔ−０，１〜１．！１Ｍ／
ｄｔに維持しつつ培養することを特徴とするデスルフォ
ピブリオ属に属する微生物の培養法に関する。

本発明で言う所の硫化水素とは培養液中で生成する硫化
水素の塩を含み、−収約に検知管法で測定される浴存硫
化物を指す。

廿 Ｉ＋ｊ ａｆｒｉｃａｎｕａ　）又はデｔルフオビブ１ノオ、ギ
ｊｆｘ（Ｄ＊ａｕｌｆｏｖｉｂｒｉｏ　ｇｌｇａｓ　）
などが挙げられる。

本発明に使用する培地成分としては、炭素源としては、
乳酸が好適であるが、その他に公知の硫酸還元菌が資化
する有機化合物を使用することもできる。Ｎ源としては
、Ｉす４ノトン、酵母エキス等の有機窒素源と硫酸アン
モニウム、硝酸アンモニウム、リン酸アンモニウム、ア
ンモニア等の無機窒素源のいずれも使用可能である。

無機塩類としては、リン酸１カリウム、硫酸マグネシウ
ム、硫酸第１鉄、硫酸ナトリウム等を添加する。

本発明で使用する乳酸は乳酸塩の型であっても良い。乳
酸塩としてはナトリウム塩、カリウム塩、アンモニウム
塩などがある。

この様にして調製した培地を、常法に従い加熱殺菌又は
濾過除菌して培養に供する。

殺菌した培地に予め用意した種菌液を加え、培すオ属に
属する微生物の増殖を阻害しないガスなら何でも使用可
能であるが、安価なＮ２ガスが好適である。

培養液中への不活性ガスの通気度は、培養液中に生成す
る硫化水素濃度に応じて決められる。不活性ガスの培地
中への通気方法は連続的に通気する方法と断続的に通気
する方法がちシ、いずれの方法を採用しても良い。

本発明においては培地中の硫化水素が０．０５〜１１０
００ｐｐに維持されるように不活性ガスを通気しつつ培
養を行う。培地中の硫化水素が１０００　ｐｐｍ以上に
なると微生物の増殖は著しく阻害される。

本発明において不活性ガスを通気して培地中の硫化水素
ｋ　０．０５　ｐｐｍ〜１０００　ｐｐｍＫｍ持しつつ
、培地中の乳酸濃度を０．１ｆＩ〜１．５．９　／　ｄ
ｔに制御することによシ更に大量に菌体を得ることがで
きる。

高濃度に乳ａｔ含んだ培地で培養をし次場合に菌の増殖
阻害が生じるのに対し、本発明による培地中の乳酸’ｉ
ｏ、１．Ｆ　〜１．５．９／ｄｔに制御することにより
、菌の増殖阻害がなく効率よく大量に菌体りても断続的
であっても良い。

本発明において排気される不活性ガス中の硫化水素は適
切な脱硫処理を施すことにより硫化水素を除去すること
ができる。培養液中で増殖した菌体は遠心分離等の手段
によシ培養液から分離される。

実施例１ 乳酸０．７１／ｄｔ、ポリペプトン０．３ｆｌｌｄｔ、
硫酸ソーダ０．７５９７ｄｌ、リン酸１カリウム０．０
４ｊｉ／ｄｌ、硫酸マグネシウム０．０６，９／ｄｔの
組成の種し、３７℃で第１表に示し次流量の窒素ガスを
通気して２０時間培養した。この時の菌体量、培地中の
俗存硫化水素社を第１表に示し友。なお、菌体量は乾燥
重置法により、辱存硫化水素社は検知管法により測定し
友。

第　　　　　１　　　　　表 （Ｎ　ガス）　　　　（９／ｌ）　　　　　　ｐｐｍ無
通気　　　　０．０６　　　　　１０５０１１５００　
　　　　０．１１　　　　　　　９００１１５０　　　
　　　０．１６　　　　　　　４２０１１５　　　　　
　０．１５　　　　　　　１６０実施例２ 窒素ガスの通気ｍｋ無通気〜最太１１５　ｖｖｍに通気
させ培養液中の俗存硫化水素濃度を一定に維持、させ几
以外は実施例１と同じ条件で培０を行った。

この時の培養中の俗存硫化水素濃度と培養終了時の菌体
量を第２表に示した。

第　　　　　２　　　　　表 （ｐｐｍ）　　　　　　　ＣＩｌ／１）１０００〜１１
５０　　　　０．０６ ５００〜７５０　　　　０．１３ ２５０〜４５０　　　　０．１７ 件で培養全行ない、培養の途中で培地中の乳酸濃度が０
．１．９〜１．０１７ｄｔになるようにＮａＯＨで−５
，０に調整し几２０チ乳酸１．２５Ａ！を５回に分けて
添加し次。培養開始時に２０％乳酸ｉ１．２５１添加し
て培養し九時の菌体生成量を対照とじ几。

これらの結果全第３表に示した。

第　　　　　３　　　　　表 菌体量 乳酸ｔ−５回に分はテ０．３１１７１ 添加

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １）デサルフォビブリオ属に属する微生物を液体培地に
   接種し、培地中の硫化水素濃度が０．０５〜１０００ｐ
   ｐｍに維持されるように不活性ガスを通気しつつ培養す
   ることを特徴とするデサルフォビブリオ属に属する微生
   物の培養法。 ２）培地中の乳酸濃度が０．１〜１．５ｇ／ｄｌに維持
   するように乳酸を添加することを特徴とする特許請求の
   範囲第１項記載のデサルフォビブリオ属に属する微生物
   の培養法。