JP3040234B2 - 新規バチルス属微生物およびその用途 - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、バチルス・サブチルス
に属する新規微生物およびその用途に関する。

【０００２】

【従来の技術およびその課題】農業経営の広い範囲にお
いて、各種の微生物活動が関係しているが、この関係の
仕方には、農業にとって利益となる場合と不利益になる
場合がある。

【０００３】例えば、真菌類は、通常かびと呼ばれてい
る微生物であり、大きく藻菌類、子のう菌類、担子菌
類、不完全菌類に分けられるが、この中には、酵母を始
め、有用なものも多い。

【０００４】しかし、例えば、糸状菌等のように土壌中
に存在して農作物の病源菌となるものがあるので、その
発育を阻止することは農業経営上重要なことである。ま
た、堆肥は、農作物の肥料として有用なものであるが、
このなかに家畜糞等が含まれており、真菌の発育によっ
て悪臭の元となったり、病源性真菌増殖の温床となった
りするおそれがあった。更に、糸状菌等の真菌による農
作物の感染病は、伝染性があり、農作物を全滅させるこ
ともあるので、これを有効に阻止する手段の開発が望ま
れている。

【０００５】従来、真菌の発育を阻害する方法として
は、種々の抗菌剤や静菌剤を用いる方法が知られている
が、これらの方法は、抗菌剤や静菌剤成分が分解するた
め、一定期間毎に散布する必要性があり、また、他の有
用な微生物の活動も阻害したり、耐性菌の発生により効
果がなくなるという欠点があり、充分に満足の行くもの
とはいえなかった。

【０００６】従って、長期間にわたって作用を有し、し
かも耐性菌の発生の問題のないような真菌抑制剤の開発
が求められていた。

【０００７】一方、生活環境や意識の変化にともない、
悪臭や異臭の防止に対する要求の程度が高まっており、
例えば、従来から生産を続けている畜産農家等に対して
も、近隣住民より家畜糞等から発生する悪臭や異臭の防
止または削減が要求されるに至っていることも多い。

【０００８】悪臭を防止する消臭方法としては、マスキ
ング法、化学的消臭方法、物理的消臭方法、生物学的消
臭方法等が従来より知られているが、悪臭源である家畜
糞が継続的且つ大量に発生する畜産においては、化学的
消臭方法や物理的消臭方法ではその作用に限界があり、
ましてやマスキング法では全く問題にならない。そこ
で、悪臭源である家畜糞を速やかに発酵せしめ、悪臭の
発生を防止する生物的消臭法が注目されるが、未だ家畜
糞からの悪臭発生を防止するような発酵促進方法が確立
されていないのが現状である。また、旧来の汲取型の便
所や家庭から排出される生ゴミについても同様な問題が
あるが、これらもいまだ解決されていない。更に、木
材、竹、わらなどの木化した植物体の主成分の一つであ
り、網状高分子化合物であるリグニンは、分解されにく
く、ゴミとして残るという問題があった。

【０００９】従って、簡単な操作で、家畜糞、人糞、生
ゴミ等の悪臭源、更にはリグニンまでをも速やかに発酵
させ、悪臭の発生を有効に防止する方法の開発が強く要
求されていた。

【００１０】更にまた、畜産農家における大きな関心事
の一つは、いかに家畜を健康に飼育し、優れた肉や卵を
得るかであるが、実際の飼育においては、家畜が十分に
飼料を摂取しなかったり、また、その消化が十分でなか
ったり、更には病気に罹患したりすることにより満足行
くように飼育できないことも多い。例えば、牛等の反芻
動物に発酵しやすい飼料を一度に大量に給餌すると、一
時的にルーメンアシドーシスが発生し、牛の食欲を低下
させる。そして、このような現象は、第一胃（ルーメ
ン）胃液のｐＨの異常、胃壁の損傷、アミン類等の異常
な代謝産物の産生、異常な発酵熱等を引き起こし、正常
な消化や、吸収を阻害する。更に、フロラ以外の細菌が
異常増殖し、これが血中へ移行して消化管疾患、肝障
害、運動器疾患、繁殖障害、熱射病、乳房炎、皮膚炎等
の原因となることもある。

【００１１】従って、家畜を健康に飼育し、より多くの
畜産生産物を得るためには、家畜の飼料を消化を促進
し、家畜を肥育する技術の開発が強く要求されていた。

【００１２】

【課題を解決するための手段】本発明者らは土壌中から
多くの微生物を単離し、その性質について検索を行なっ
ていたところ、バチルス・サブチルスに属し、アフラト
キシン分解性を有する新規な微生物を見出した。そして
この微生物は真菌の発生を阻害し、優れた真菌発生抑制
効果を示すとともにこの微生物を用いることにより発酵
が促進され、リグニンをも有効に分解すること、更に、
この微生物を飼料と共に家畜に給餌すると、家畜消化管
内での異常発酵等が抑制され、家畜の生育が促進される
ことを見出し、本発明を完成した。

【００１３】すなわち、本発明の目的は、アフラトキシ
ン分解性を有するバチルス・サブチルスＤＢ９０１１株
を提供することである。また、本発明の他の目的は、上
記微生物を有効成分として含有する真菌発育抑制剤を提
供することである。更に、本発明の別の目的は、上記微
生物を有効成分として含有する発酵促進剤を提供するこ
とである。更にまた、本発明の他の別の目的は、上記微
生物を有効成分とする家畜肥育剤を提供することであ
る。

【００１４】本発明の微生物は、アフラトキシン分解性
を有するバチルス・サブチルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓ
ｕｂｔｉｌｉｓ） ＤＢ９０１１株である。

【００１５】この微生物の有する性質を次に示す。

【００１６】本発明者らが見出したバチルス・サブチル
スＤＢ９０１１株の微生物学的性質は次の通りである。

【００１７】形態： 菌体幅０．７〜０．８μｍの桿菌である。楕円形の芽胞
がやや中央に存在し、菌体を膨脹しない。運動性はあ
り、Ｒ型コロニーを形成する。嫌気性条件下において生
育しない。

【００１８】各培地における生育状態： （１）ＤＨＬ寒天培地 生育せず。 （２）マッコンキー寒天培地 発育せず。 （３）マンニット食塩培地 良好な発育。 光沢あり。 コロニーの表面にしわはな
く、コロニーの色は黄色である。 （４）普通寒天培地 良好な発育。 光沢なし。 コロニーの表面にしわがあ
り、コロニーの色は白である。 （５）ハートインフージョン寒天培地 良好な発育。 光沢なし。 コロニーの表面にしわがあ
り、コロニーの色は白である。 （６）血液寒天培地（１０％緬羊血液加） 良好な発育。 光沢なし。 コロニーの表面にしわがあ
り、コロニーの色は白である。 （７）ＰＤＡ培地 良好な発育。 光沢なし。 コロニーの表面にしわがあ
り、コロニーの色は白である。

【００１９】 生理学的性質： グラム反応： ＋ ゼラチン試験： 生育状態； 全面液化 ゼラチン液化； ＋ リトマスミルク： 反応； 酸 状態； 凝固 硝酸塩還元： ＋ 脱窒反応： − ＭＲテスト： − インドールの生成： 硫化水素の生成： クエン酸の利用（クリステゼン）： ＋ ウレアーゼ： − オキシダーゼ： ＋ カタラーゼ： ＋ 生育の範囲： ｐＨ ； ４〜９ 温度 ； ２５〜５０℃ ＯＦテスト： 発酵およびガス発生（ブドウ糖分解によるもの）

【００２０】糖類の利用性 ガス発生 酸生成 Ｌ−アラビノース − ＋ Ｄ−キシロース − ＋ Ｄ−グルコース ＋ ＋ Ｄ−マンノース − ＋ Ｄ−フラクトース − ＋ Ｄ−ガラクトース − ＋ 麦芽糖（マルトース） − ＋ ショ糖（シュークロース） − ＋ 乳糖（ラクトース） − ＋ トレハロース − ＋ Ｄ−ソルビット − ＋ Ｄ−マンニット − ＋ イノシット − ＋ グリセリン − ＋ デンプン − ＋

【００２１】 エスクリンの分解： ＋ マロン酸の利用： アルギニンの分解： ＋ リジンの脱炭酸反応： ＋ 尿素分解： ± アフラトキシン分解： ＋ オルニチンの脱炭酸反応： − コアグラーゼ： − 溶血性： ＋ 塩化ナトリウムの耐性： １０％以下 シアン化カリウムの耐性： 発育可能 レシチナーゼ： −

【００２２】本発明者らは、上記の各性質からバチルス
・サブチルスＤＢ９０１１株を新規な菌株と判断し、１
９９１年５月２１日付で通商産業省工業技術院微生物工
業技術研究所に微工研条寄第３４１８号（ＦＥＲＭ Ｂ
Ｐ−３４１８）として寄託した。なお、当初は、バチル
ス・リケニホルミスと分類したが、その後バチルス・サ
ブチルスであることが確認されたたため、分類学上の名
称を訂正した。

【００２３】上記の本発明微生物をもちい、真菌発育抑
制剤を調製するには、この微生物を植物性有機物質、脱
脂米糠、ふすま等の栄養源、特に熟成された植物性有機
物質中で増殖させた後、これをそのまま、またはこれを
濾過した水懸濁液の状態とすれば良い。水懸濁液とする
場合、１ｍｌ当たりの微生物量は１０^４個以上とするこ
とが好ましい。

【００２４】増殖に用いる植物性有機物質の例として
は、人工しめじ栽培に使用した廃用のおがくずを完全に
熟成したものが挙げられ、このような植物性有機物質を
用いた場合、バチルス・サブチルスＤＢ９０１１株は栄
養型から増殖型となり、菌数の増加と共にその作用も向
上する。

【００２５】本発明の真菌発育抑制剤を土壌に適用する
場合には、真菌を病原菌とする農作物の病気の予防であ
るか、すでに多数存在する病原性真菌の除去であるかに
よって異なるが、一般には１ｍ^２当たり１０^９個程度と
なるように散布すれば良い。

【００２６】一方、本発明の真菌発育抑制剤を、堆肥等
に適用する場合は、その表面にむらなく散布するか、こ
れらと十分に混合させれば良い。こうすることにより堆
肥等の中で有効成分であるバチルス・サブチルスＤＢ９
０１１株が増殖し、真菌の生育を抑制することが可能と
なる。この場合、真菌発育阻害剤の使用量は、一般に堆
肥等からの臭いの消失を目安に決めることができる。

【００２７】また、本発明微生物を用いて発酵促進剤を
調製するには、本発明微生物を前記植物性有機物質、脱
脂米糠、ふすま等の賦形剤、特に熟成された植物性有機
物質に担持させ調製することが好ましい。この場合、賦
形剤１ｇ当たりの微生物量は２×１０^５個以上とするこ
とが好ましい。

【００２８】本発明の発酵促進剤は、悪臭源、例えば、
鶏糞、豚糞、牛糞等の家畜糞、人糞、生ゴミ等の表面に
むらなく散布するか、これらと十分に混合させれば良
い。こうすることにより発酵を促進するので悪臭を防止
することができる。この消臭効果は、適用１日目からみ
られ、１５日間以上持続する。例えば、悪臭源である家
畜糞の発生が一定量であり、排泄された家畜糞が上から
堆積しない場合は、数ヶ月に１度表面にむらなく散布す
ることにより消臭効果が期待できる。

【００２９】また、曝気槽中での発酵の促進は、曝気槽
中に本発明の発酵促進剤を投入すれば良く、こうするこ
とにより曝気槽中の発酵が促進される。

【００３０】本発明の発酵促進剤の使用量は、悪臭源の
種類、量、条件等により異なるので一概に定められず、
実験的に決めることが必要であるが、一般には悪臭源か
らの臭いの消失を目安に適切な使用量を決めることがで
きる。

【００３１】更に、本発明微生物を用いて家畜肥育剤を
調製するには、必須成分として本発明を配合し、家畜の
生長に必要な他の成分を任意成分として配合することに
より調製される。このような任意成分の例としては、脱
脂米糠、植物性有機物質、ふすま、貝化石等のカルシウ
ム源、ビール粕、各種ビタミン、栄養剤等が挙げられ
る。家畜肥育剤１ｇ当中の微生物量は１×１０^５個以上
とすることが好ましい。

【００３２】本発明家畜肥育剤の好ましい例としては、
脱脂米糠と貝化石を適度の割合、例えば４：１程度で混
合した後、これに１×１０^５個以上のバチルス・サブチ
ルスＤＢ９０１１株を加えたものが挙げられる。 この
ような家畜肥育剤中ではバチルス・サブチルスＤＢ９０
１１株は栄養型から増殖型となり、有機物質を栄養分と
して増殖し、菌数の増加と共にその作用も向上する。

【００３３】本発明の家畜肥育剤は、家畜飼料に添加
し、これを家畜に給餌すればよいが、場合によっては、
飼料に代えて給餌しても良い。 飼料とともに投与する
場合は、一般には飼料に対して０．５〜１０％程度、好
ましくは１〜５％程度添加すれば良い。

【００３４】本発明の家畜肥育剤の使用期間は、投与す
る家畜の種類、生育時期、肥育程度等により異なるので
一概に定められず、実験的に決めることが必要である。

【００３５】

【作用】本発明微生物が、真菌発育抑制剤、発酵促進
剤、家畜肥育剤等多くの用途に用いられる理由は未だ明
らかではないが、環境中に存在し、不利な作用をする微
生物、例えば病源性真菌、悪臭を発生する糸状菌、アフ
ラトキシン等発育阻害物質を産生する微生物の発育を抑
え、バチルス属微生物の通常の発酵を促進するためと考
えられる。

【００３６】より詳しくは、真菌発育抑制剤の作用は、
バチルス・サブチルスＤＢ９０１１株の有する真菌と
の競合発育作用、真菌に対する溶菌作用、発育阻止
物質の産生等がのいずれかの理由またはそれらが相乗的
に作用することが理由と考えられる。

【００３７】また、発酵促進剤の作用は、バチルス・サ
ブチルスＤＢ９０１１株の有する家畜糞等の中で繁殖
し、悪臭を発生する糸状菌の発育を阻害し、これに代
わって家畜糞中で増殖し、これを分解するという性質に
基づくものと考えられる。

【００３８】更に、本発明の家畜肥育剤の作用は、バチ
ルス・サブチルスＤＢ９０１１株の有する家畜の消化
管内において、有害な細菌の増殖を阻害し、これに代
わって家畜管内中で増殖し、飼料中に含まれ、分解さ
れにくいとされるリグニンを分解するという性質に基づ
くものと考えられる。

【００３９】そして、上記の作用は、バチルス属に属す
る他の種の微生物を始めとする他の微生物では全く得ら
れないものである。

【００４０】

【発明の効果】本発明の微生物は、微生物活動が関与し
ている農業の分野で極めて有利に利用することができ
る。

【００４１】例えば、本発明の微生物を用いた真菌発育
抑制剤を用いれば、真菌、特に病源性糸状菌の生育を抑
制することができるので、土壌や植物体に適用すること
により農作物の病害を予防することが可能となる。ま
た、この真菌発育抑制剤を堆肥等に適用することによ
り、堆肥中の病源性糸状菌の生育を阻害し、糸状菌の増
殖による悪臭の発生を防ぐことができる。

【００４２】また、本発明の微生物を用いた発酵促進剤
を家畜糞等に散布すると、その発酵が極めて促進され、
従来半年から１年かかった発酵が１〜２ヵ月で完了し、
しかもその間、悪臭もほとんど発生しない。一方、本発
明の発酵促進剤を曝気槽に使用すると、汚水処理時間が
従来の１／２となり、また、悪臭の発生も減少するほ
か、処理後のＢＯＤ値、ＳＳ値も従来の１／３０程度以
上に減少する。他方、家畜飼育（ブロイラー、オガコ豚
舎、肥育子牛）の敷き料として使用しているおがくずに
本発明の発酵促進剤を加えると、糞処理が簡便化され、
悪臭の発生もなく、また、敷き料中で継続的に発酵が行
なわれている結果、敷き料は冬でもあたたかく、従来家
畜の腹の冷えに起因する下痢、肺炎等の病気に発生が減
少する。

【００４３】更に、本発明の微生物を用いた家畜肥育剤
を家畜に投与すると、家畜消化管内の状態を正常に保つ
ことができ、消化管よりの栄養の吸収を促進する結果、
家畜の体重を着実に増加させることができ、また、例え
ば卵の生産を増加させることができるので、畜産におい
て極めて有利なものである。以上のように、本発明微生
物は農業経営の上で極めて有利なものである。

【００４４】

【実施例】次に実施例を挙げ、本発明を更に詳しく説明
するが、本発明はこれら実施例になんら制約されるもの
ではない。

【００４５】試験例１ＰＤＡ寒天の斜面培地を作製し、
これに下記の真菌を接種し、２５〜２８℃で７〜１０日
間培養する（ほとんどの真菌はこの期間で胞子を形成す
る）。形成した胞子を、１×１０^６個／ｍｌとなるよう
界面活性剤を添加した生理食塩水あるいはリン酸緩衝液
に懸濁させ、胞子浮遊液とする。この胞子浮遊液を別に
作製しておいたＰＤＡ寒天培地平板（９０ｍｍ径シャー
レ）に、１枚当たり０．１ｍｌまき、コンラージ棒でむ
らなく広げ、培地に十分吸収させる。この培地の中央部
に、１０^６個／ｍｌに調製したバチルス懸濁液を１スポ
ット（約２５μｌ）接種し、２５〜２８℃で５〜１０日
間培養し、阻止円の形成を観察した。この結果、バチル
ス・サブチルスＤＢ９０１１株はすべての真菌の発育を
阻害した。

【００４６】

【００４７】実施例１ 完全に熟成された人工しめじ栽培に使用した廃用のおが
くずに、おがくず１ｇ当たり２×１０^５個のバチルス・
サブチルスＤＢ９０１１株（ＦＥＲＭ ＢＰ−３４１
８）を加え、真菌発育抑制剤を調製した（本発明品
１）。

【００４８】実施例２ 実施例１の本発明品１を１０日間、約２０℃で保存した
後、その１００ｇを水１０００ｍｌに懸濁させ、十分に
撹拌した後、濾過した。この濾液を液状の真菌抑制剤と
した（本発明品２）。本発明品２の１ｍｌ中には、バチ
ルス・サブチルスＤＢ９０１１株が１×１０^４個含まれ
ていた。

【００４９】実施例３ 真菌が原因とされるモンパ病で枯れた桃の木の後に、本
発明品１ ２ｋｇを散布し、土壌と十分に混合した後、
新たに桃の木の苗を植えた。この桃の木の苗は、移植７
ヵ月を経過したが、十分に根付き、その木の成長の勢い
もすばらしかった。なお、モンパ病にかかって桃の木が
枯れると、その土壌中には病源性の糸状菌が多量に存在
し、新たに植える苗木をすぐに枯らすため、一般には３
年経過しないと新しい苗木を植えることができないとさ
れている。

【００５０】実施例４ 根こぶ病により、立ち枯れの発生したキュウリ畑で、本
発明品１を１株当たり１００ｇ、根元に数ヵ所穴をあけ
て散布した。立ち枯れた株も、散布１週間後より新芽が
出始め、ヒゲつるがどんどん延びてきて樹勢が回復し
た。

【００５１】実施例５ 腐乱病（糸状菌病）の発生の多いりんご農場において、
本発明の真菌発育抑制剤の効果を調べた。腐乱病に侵さ
れている枝を切り取った後に、全部のりんごの樹木に対
し、樹木１本当たり１０リットルの割合で本発明品２を
散布した。この結果、散布後には腐乱病に感染する樹木
はなかった。また、既に腐乱病に感染していた樹木の樹
勢は回復した。

【００５２】実施例６ 灰色カビ病が発生したビニールハウスで、本発明の真菌
発育抑制剤の効果を調べた。灰色カビの発生が目視によ
って判断できるキュウリの株を引き抜き、その後に本発
明品２をビニールハウス全体に１ｍ^２当たり８００ｍｌ
となるように散布した。この結果、このビニールハウス
内では灰色カビ病の発生はなく、収穫量に影響はなかっ
た。なお、通常はこの病気が発生するとキュウリの収穫
量が大きく減少する。

【００５３】実施例７ 本発明の抗真菌剤について、アフラトキシン産生能を有
するアスペルギルス・フラバス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕ
ｓ ｆｌａｖｕｓ）ＮＲＲＬ ２９９９にを用い、これ
に対する生育抑制および毒素産生抑制効果を次の方法に
より調べた。

【００５４】抗真菌剤の調製：バチルス・サブチルスＤＢ９０１１株 の一白金耳を、１
００ｍｌのブレインハートインフュージョンで２４時間
振盪培養し、水で１０倍に希釈したものを使用した（抗
真菌剤３）。

【００５５】実験結果： （１）培養ビン内での試験 ポテトデキストローズアガー培地（ＰＤＡ培地）を試験
用培養ビン内に入れ、これを固化させた後、この上にと
うもろこし粉１ｇおよび被験微生物１０^６個を加えた。
次いで、この中に抗真菌剤３を１滴（約３０μｌ）滴下
した後、約３０℃で培養し、培養開始後４日目および６
日目にアスペルギルス・フラバスおよび他の真菌の生育
の有無を調べた。この結果、抗真菌剤３を滴下した培養
ビン中ではアスペルギルス・フラバスを始めとする真菌
の生育は認められなかった。これに対し、抗真菌剤３を
滴下しなかった対照ではアスペルギルス・フラバスの菌
糸発育及び分生子形成が認められ、更に他の真菌の発育
も認められた。

【００５６】（２）シャーレ内での試験 シャーレ中で固化したＰＤＡ培地の上に、試験飼料０．
５ｇをのせ、被験微生物１０^６個を接種した後、抗真菌
剤３をピペットで１滴（約２５μｌ）滴下した。次い
で、これを約３０℃で培養し、培養開始後４日目および
６日目にアスペルギルス・フラバスおよび他の真菌生育
状況を観察した。この結果を次に示す。

【００５７】 ＊ 配合飼料Ａ 成鶏飼育用飼料 ＊＊ 配合飼料Ｂ 肥育肉豚用飼料 なお、抗真菌剤３を滴下しない場合は、いずれもアスペ
ルギルス・フラバスの菌糸発育及び分生子形成が認めら
れ、更に他の真菌の発育も認められた。

【００５８】（３）アフラトキシン生成の抑制 前記（１）の培養を、試験開始から１７日間継続した
後、この培養物をクロロホルム５０ｍｌで２回抽出し、
２ｍｌに濃縮した後、薄層クロマトグラフィーに付して
アフラトキシン生成の有無を調べた。この結果、対照で
はアフラトキシンＢ_１およびＧ_１の産生が認められたの
に対し、抗真菌剤３を用いたものではその産生が認めら
れなかった。

【００５９】実施例８ 完全に熟成された人工しめじ栽培に使用した廃用のおが
くずに、おがくず１ｇ当たり２×１０^５個のバチルス・
サブチルスＤＢ９０１１株を加え、発酵促進剤を調製し
た（本発明品４）。

【００６０】実施例９ 鶏糞１００ｇの表面に、実施例８で得られた本発明品
４、３ｇをむらなく散布した。 この結果、従来発酵に
は６ヶ月〜１年かかるとされている家畜糞が３０〜４５
日で完全に発酵した。また、本発明品を散布しなかった
場合と比べ、悪臭の発生は極めて少なかった。 豚糞や
牛糞を用いた場合も同様な効果が認められた。

【００６１】実施例１０ 養豚農場（１０００頭規模）の豚糞処理用の２５トン曝
気槽に、本発明品４を６０ｋｇ投入した。投入時の曝気
槽内の水温は２２℃であったが翌日の水温は２８℃に上
昇しており、以前には発生しない水蒸気が発生してい
た。また悪臭はかなり改善されていた。更に、本発明品
投入前の曝気槽内のＢＯＤ値は８００ｍｇ／ｌ、ＳＳ値
は２５，０００ｍｇ／ｌであったが、投入１ヶ月後には
これらがそれぞれ１６ｍｇ／ｌおよび２０ｍｇ／ｌとな
った。

【００６２】実施例１１ 養豚農場（６０００頭規模）の曝気槽のうち５トンのも
のに本発明品４を１５０ｋｇ投入した。投入１日後には
試験曝気槽の異臭がかなり軽減された。また、従来使用
した菌では認められなかった泡が発生し、発酵が行なわ
れていることが確認された。

【００６３】実施例１２ ４００リットルの汲取式外便所の内容物２００リットル
（尿量７割、便３割）を良くかき回した後、これに本発
明品４１ｋｇを投入し、更に攪拌した。投入前は悪臭が
強かったが、４日後にはこれがドブの臭いに変化し、更
に７日後には便槽のなかで若干臭いを感じる程度とな
り、１０日後には臭いが消失した。その後、１ヶ月を経
過しても悪臭の発生は認められなかった。

【００６４】実施例１３ ４００リットルの汲取式内便所の内容物をすべてバキュ
ームカーで吸い出した後、１ｋｇの本発明品４をむらな
く散布した。散布直後より１ヶ月間観察したが、その
間、悪臭の発生は認められなかった。

【００６５】実施例１４ 買い物用ビニール袋に１週間を経た家庭生ゴミ（非常な
悪臭）をいれ、これに本発明品４を片手で４掴み投入す
る。投入３日後で悪臭は甘酸っぱい臭気に変わり、投入
１週間後には生野菜は完全に溶けていた。

【００６６】実施例１５ １５リットルの家庭用生ゴミ容器（２０％の入量）に本
発明品４を１００ｇ投入した。投入８時間後には異臭は
消失し、６０％入量となっても臭いはなかった。

【００６７】実施例１６ 養豚農家（１５００頭規模）の１４豚房中、２豚房の敷
き料として１トンのおがくずに３％の本発明品４を加え
たものを用い、これを２０ｃｍの厚さに敷いた。この豚
房では翌日から悪臭が消え、しかも敷き料が乾燥せず、
適度な水分を保持するため埃がたたなかった。また、お
がくずが発酵し、適度な温度を保つため、冷えからくる
豚の下痢が発生しなかった。試験３週目から豚糞の色が
変わり、排泄したばかりの豚糞でも臭わなかった（試験
豚房中の豚が、敷き料中の本発明品４を食べたためと思
われる）。これに対し、敷き料としておがくずのみを用
いた対照区では悪臭が発生し、埃がたっていた。なお、
豚出荷後の試験豚房の敷き料は悪臭の発生がなく、堆積
することにより速やかに発酵し、発酵終了後は再度敷き
料として使用できた。

【００６８】実施例１７ 脱脂米糠８０％、貝化石２０％の混合物に、１ｇ当たり
１×１０^５個のバチルス・サブチルスＤＢ９０１１株
（ＦＥＲＭ ＢＰ−３４１８）、を加え、家畜肥育剤を
調製した（本発明品５）。

【００６９】実施例１８ ジャガイモ寒天培地に、それぞれ、０．５ｍＭのα−ナ
フトール及び０．１％のｐ−クレゾールを加えて試験培
地を調製した。この試験培地に、バチルス・サブチルス
ＤＢ９０１１株を接種して５〜１０日間培養した。 α
−ナフトール添加試験培地は、それぞれ紫色に着色し、
ラッカーゼの生成が確認された。また、ｐ−クレゾール
添加試験培地は褐色に着色し、チロシナーゼの分泌が確
認された。この結果から、本菌株はリグニン分解能を有
するものであることが確認された。

【００７０】実施例１９ 飼料に対し３％となるように、本発明品５を添加し、１
ヶ月にわたって乳牛に給餌した。この結果、いずれの家
畜肥育剤を添加した場合も、これを添加しなかった場合
に比べ、乳牛の乳量は５％程度増加した。更に、繁殖障
害等の問題も起きず、その予防にも効果が認められた。

【００７１】実施例２０ ブロイラー鶏（コブ種）１区１０羽を用い、鶏に対する
本発明家畜肥育剤の効果を調べた。まず、本発明品５を
飼料に３％添加した試験区と、飼料のみの試験区（対照
区）を設定し、３週間飼育し、その平均体重を測定し
た。この結果、飼育後の体重は、本発明の家畜肥育剤を
投与した試験区の鶏の平均体重は、対照区の鶏のものよ
り１５０ｇ重かった。また、剖検した結果では、試験区
の鶏では全例について腸管の異常を認めなかったのに対
し、対照区では１０羽全例について、十二指腸および空
腸に点状出血、充出血を認めた。また、鶏の腸管の長さ
も、試験区のものは対照区のものの約１．５倍となり、
消化吸収が活発となったことがうかがえた。 本発明品
２を用いた場合にも、ほぼ同様な効果が得られた。

【００７２】実施例２１ 産卵鶏（デカルブ種ＴＸ鶏；１４３日令）１区１０羽を
用い、本発明家畜肥育剤投与による産卵率向上効果を調
べた。本発明品５を飼料に３％添加した試験区（３％
区）、１０％添加した試験区（１０％区）および飼料の
みの区（対照区）を設定し、２ヵ月間飼育し、その間の
産卵率を調べた。この結果を表２に示す。なお、給餌は
不断給餌とし、各種ワクチンは通常通り接種した。

【００７３】

【００７４】この結果から明らかなように、本発明の家
畜肥育剤を用いた場合、鶏の産卵率が向上した。なお、
試験期間中の鶏の体重増加、剖検結果は３区において変
わりはなかったが、飼料摂取量は、３％区で１羽当たり
２５ｇ／日、１０％区で２ｇ／日程度対照区より多かっ
た。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号 ＦＩ Ｃ０２Ｆ 3/34 Ｃ０２Ｆ 3/34 Ｚ Ｃ１２Ｎ 1/38 Ｃ１２Ｎ 1/38 //(Ｃ１２Ｎ 1/20 Ｃ１２Ｒ 1:125） (58)調査した分野(Int.Cl.⁷，ＤＢ名) C12N 1/20 A01N 63/02 A23K 1/16 A61L 9/01 C02F 3/34 C12N 1/38

Claims (17)

(57)【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 アフラトキシン分解性を有するバチルス
   ・サブチルスＤＢ９０１１株。
2. 【請求項２】 アフラトキシン分解性を有するバチルス
   ・サブチルスＤＢ９０１１株を有効成分として含有する
   真菌発育抑制剤。
3. 【請求項３】 動植物由来の病源性真菌の発育を抑制す
   る請求項第２項記載の真菌発育抑制剤。
4. 【請求項４】 アフラトキシン生成能を有する真菌の発
   育を抑制する請求項第２項記載の真菌発育抑制剤。
5. 【請求項５】 穀類若しくは木の実に適用するものであ
   る請求項第４項記載の真菌発育抑制剤。
6. 【請求項６】 更に、熟成された植物性有機物質を有効
   成分として含有するものである請求項第２〜４項のいず
   れかの項記載の真菌発育抑制剤。
7. 【請求項７】 液状である請求項第２〜４項のいずれか
   の項記載の真菌発育抑制剤。
8. 【請求項８】 アフラトキシン分解性を有するバチルス
   ・サブチルスＤＢ９０１１株を有効成分として含有する
   発酵促進剤。
9. 【請求項９】 アフラトキシン分解性を有するバチルス
   ・サブチルスＤＢ９０１１株と、熟成された植物性有機
   物質とを有効成分として含有する発酵促進剤。
10. 【請求項１０】 悪臭源に消臭を目的として適用するも
    のである請求項第８項または第９項記載の発酵促進剤。
11. 【請求項１１】 アフラトキシン分解性を有するバチル
    ス・サブチルスＤＢ９０１１株を有効成分として含有す
    る家畜肥育剤。
12. 【請求項１２】 アフラトキシン分解性を有するバチル
    ス・サブチルスＤＢ９０１１株を有効成分として含有す
    る液状の真菌発育抑制剤を農作物に散布することを特徴
    とする病源性真菌による農作物病の防除方法。
13. 【請求項１３】 アフラトキシン分解性を有するバチル
    ス・サブチルスＤＢ９０１１株を有効成分として含有す
    る真菌発育抑制剤を家畜飼料に添加することを特徴とす
    る病源性真菌による家畜病の予防方法。
14. 【請求項１４】 穀類もしくは木の実に、アフラトキシ
    ン分解性を有するバチルス・サブチルスＤＢ９０１１株
    を有効成分として含有する真菌発育抑制剤を適用するこ
    とを特徴とする穀類もしくは木の実のアフラトキシン生
    成防止方法。
15. 【請求項１５】 アフラトキシン分解性を有するバチル
    ス・サブチルスＤＢ９０１１株を有効成分として含有す
    る発酵促進剤を悪臭源に散布することを特徴とする悪臭
    源の発酵促進方法。
16. 【請求項１６】 悪臭源が家畜糞、人糞または生ゴミで
    ある請求項第１５項記載の発酵促進方法。
17. 【請求項１７】 家畜飼料にアフラトキシン分解性を有
    するバチルス・サブチルスＤＢ９０１１株を有効成分と
    して含有する家畜肥育剤を添加し、これを家畜に給餌す
    ることを特徴とする家畜の肥育方法。