JP3018564B2 - ピンホ−ル基板及びそれを用いた共焦点用光スキャナ - Google Patents

ピンホ−ル基板及びそれを用いた共焦点用光スキャナ

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JP3018564B2
JP3018564B2 JP3120307A JP12030791A JP3018564B2 JP 3018564 B2 JP3018564 B2 JP 3018564B2 JP 3120307 A JP3120307 A JP 3120307A JP 12030791 A JP12030791 A JP 12030791A JP 3018564 B2 JP3018564 B2 JP 3018564B2
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Description

【発明の詳細な説明】
【0001】
【産業上の利用分野】本発明は、ピンホ−ル基板及びそ
れを用いた共焦点用光スキャナに関するものである。
【0002】
【従来の技術】図7は本願出願人によるピンホ−ル基板
の先行例である。また、図8はピンホ−ル基板を用いた
共焦点用光スキャナを共焦点顕微鏡に応用した一例を示
す構成図である。図8において、図示しないレ−ザ光源
からの出射光は、ダイクロイックミラ−2で反射され、
ピンホ−ル基板1に入射される。ここで、ピンホ−ル基
板1は、図7に示すように、ガラス基板11の一方の面
には薄膜13が、他方の面にはフレネルレンズ12がそ
れぞれ形成され、ガラス基板11の厚さtは、ガラス基
板11の一方の面に形成されたフレネルレンズ12の焦
点距離と同一とされ、薄膜13上にはフレネルレンズ1
2の焦点位置にピンホ−ル14を備えた構成とされてい
る。このピンホ−ル基板1に光が照射されると、フレネ
ルレンズ12により、入射光がフレネルレンズ12の焦
点位置に形成されたピンホ−ル14の入口に集められ、
フレネルレンズ12を介して、より多くの光を集光でき
る。図8に戻り、ピンホ−ル基板1を通過した光は図示
しない試料に照射される。試料からの反射光は、再びピ
ンホ−ル基板1を通って、ダイクロイックミラ−2を透
過し、カメラ3に結像する(試料の像をカメラ3を介し
て目で捕らえることができる)。この装置では、ピンホ
−ル基板1を例えば図示しないモ−タで一定速度で回転
させており、ピンホ−ル基板1の回転に伴うピンホ−ル
14の移動により、試料への集束光点を走査している。
【0003】しかしながら、上記従来技術に示すピンホ
−ル基板およびそれを用いた共焦点用光スキャナにおい
ては、試料で反射して、再びピンホ−ル基板1を通過し
た光は、平行光に戻ってしまうため、図8中に示すよう
に、試料からの反射光がピンホ−ル基板1のピンホ−ル
14に入射する際、φbに絞られた光が、ピンホ−ル基
板1のフレネルレンズ12を通過した後では、φaの平
行光になり、大きくなってしまう。例えば、図9に示す
ように、画素の大きさcが、b<c<aとすると、ピン
ホ−ル14の像の走査ピッチpは一般にp<aであり、
カメラ3で捕えられる試料の像の分解能は明らかに低下
してしまう。また、分解能を上げるため、ダイクロイッ
クミラ−2とカメラ3との間にレンズを入れた構成とす
ると、試料から反射され、ピンホ−ル基板1を通過した
光が全て平行光であるため、レンズにより1点に集中し
てしまい、結像しない。更にフレネルレンズ14がフレ
ネルゾ−ンプレ−トのように光量の減少を伴うような場
合では、光利用効率が悪く、試料からの微弱な螢光も減
少させられてしまい、低感度であった。
【0004】
【発明が解決しようとする課題】本発明は上記従来技術
の課題を踏まえて成されたものであり、ピンホール基板
のフレネルレンズの明部と暗部を有するフレネルゾーン
プレートとし、このフレネルゾーンプレートの暗部を
起レーザ光と蛍光の波長によって透過率の異なる物質で
形成し、若しくは、励起レーザ光と蛍光の波長によって
屈折率の異なる物質で形成することにより、フレネルゾ
ーンプレートが励起レーザ光に対してフレネルレンズと
して機能させ、このピンホール基板を用いることによ
り、高分解能かつ高感度の結像を得られる共焦点用光ス
キャナを提供することを目的としたものである。
【0005】
【課題を解決するための手段】上記課題を解決するため
の本発明の第1の構成は、基板と、この基板の片面に形
成された複数のフレネルレンズと、この複数のフレネル
レンズの焦点位置にそれぞれ配置された複数のピンホー
ルとを備えたピンホール基板において、 前記複数のフレ
ネルレンズはそれぞれ暗部と明部を同心円状に交互に複
数配置してなるフレネルゾーンプレートであって、この
フレネルゾーンプレートの暗部は励起レーザ光と蛍光の
波長によって透過率の異なる物質で形成されることによ
り、前記フレネルゾーンプレートが前記励起レーザ光に
対してフレネルレンズとして機能する。また、第2の構
成は、前記第1の構成において、前記フレネルゾ−ンプ
レ−トの暗部をダイクロイックミラ−で形成したことに
より、前記フレネルゾーンプレートが前記励起レーザ光
に対してフレネルレンズとして機能する。また、第3の
構成は、基板と、この基板の片面に形成された複数のフ
レネルレンズと、この複数のフレネルレンズの焦点位置
にそれぞれ配置された複数のピンホールとを備えたピン
ホール基板において、前記複数のフレネルレンズはそれ
ぞれ暗部と明部を同心円状に交互に複数配置してなるフ
レネルゾーンプレートであって、このフレネルゾーンプ
レートの暗部は励起レーザ光と蛍光の波長によって屈折
率の異なる物質で形成されることにより、前記フレネル
ゾーンプレートが前記励起レーザ光に対してフレネルレ
ンズとして機能する。また、第4の構成は、前記第3の
構成において、前記フレネルゾ−ンプレ−トの明部と暗
部は色分散の異なる物質で構成したことにより、前記フ
レネルゾーンプレートが前記励起レーザ光に対してフレ
ネルレンズとして機能する。更に、第5の構成は、ピン
ホール基板を回転させ、このピンホール基板を通過した
照射光を試料に対して走査する共焦点用光スキャナにお
いて、前記ピンホール基板は前記第1乃至第4の構成
ピンホール基板を用いたことにより、高分解能かつ高感
度の結像を得られる共焦点用光スキャナを実現できる。
【0006】
【作用】本発明のピンホ−ル基板およびそれを用いた共
焦点用光スキャナを使用すれば、試料からの反射光であ
る螢光の損失を減少することができるため、カメラ上に
小さなスポットで結像でき、高分解能かつ高感度であ
る。
【0007】
【実施例】以下、本発明を図面に基づいて説明する。図
1は本発明のピンホ−ル基板の第1の実施例を示す構成
図である。なお、図1において図7と同一要素には同一
符号を付して重複する説明は省略する。図1において図
7との相違点は、ガラス基板11の入射光側の面に形成
されたフレネルレンズ12の代わりに、明部151と暗
部152を同心円状に交互に複数配置してなるフレネル
ゾ−ンプレ−ト15を用い、このフレネルゾ−ンプレ−
ト15の暗部152は、波長によって透過率の違う物
質、例えば、励起レ−ザ光は遮光し、螢光は透過する特
性を有する色フィルタを用いている点である。なお、ガ
ラス基板11の厚さtは、ガラス基板11の一方の面に
形成されたフレネルゾ−ンプレ−ト15の焦点距離と同
一とされ、薄膜13上のフレネルゾ−ンプレ−ト15の
焦点位置にピンホ−ル14を備えた構成とされている。
【0008】ここで、図2は図1のピンホ−ル基板を用
いた共焦点用光スキャナを共焦点顕微鏡に応用した一実
施例を示す構成図である。なお、図2において図8と同
一要素には同一符号を付して重複する説明は省略する。
図2において、1aは図1のピンホ−ル基板、4はピン
ホ−ル基板1aを通った光を試料5に集束させる対物レ
ンズ、6は試料5で反射されピンホ−ル基板1aを通っ
て広がった光をカメラ3に結像させる集光レンズであ
る。
【0009】このような構成において、図示しない光源
から出射されたレ−ザ光(レ−ザ光だけでなく白色光な
どでも良い)は、ダイクロイックミラ−2で反射され、
ピンホ−ル基板1aに入射される。ピンホ−ル基板1a
では、フレネルゾ−ンプレ−ト15によりピンホ−ル1
4に集光され、対物レンズ4を介して、試料5上に照射
される。試料5からの反射光は、再び対物レンズ4を介
して、ピンホ−ル基板1aに入射される。ピンホ−ル基
板1aに入射した光は、ピンホ−ル14を通って、フレ
ネルゾ−ンプレ−ト15に導かれる。ここで、フレネル
ゾ−ンプレ−ト15の暗部152は、励起レ−ザ光は遮
光し、螢光は透過する特性を有する色フィルタで構成し
ている。したがって、試料5からの螢光は、フレネルゾ
−ンプレ−ト15を透過した後、そのまま広がり、ダイ
クロイックミラ−2を介して、集光レンズ6により、カ
メラ3に結像されるが、励起レ−ザ光の試料5での反射
光は、フレネルゾ−ンプレ−ト15を透過して、フレネ
ルレンズ機能により平行光となり、ダイクロイックミラ
−2で反射されるため、カメラ3には入射されない。し
たがって、螢光の損失を減少でき、カメラ3に高分解能
かつ高感度の結像をえることができる。なお、この装置
でも、ピンホ−ル基板1aを例えば図示しないモ−タで
一定速度で回転させており、ピンホ−ル基板1aの回転
に伴うピンホ−ル14の移動により、試料5への集束光
点を走査している。
【0010】図3は本発明のピンホ−ル基板の第2の実
施例を示す構成図である。なお、図3において図1と同
一要素には同一符号を付して重複する説明は省略する。
図3と図1との相違点は、フレネルゾ−ンプレ−ト15
aの暗部152aをダイクロイックミラ−で形成した点
である。ダイクロイックミラ−は、色フィルタ−と同様
に、励起レ−ザ光は遮光し、螢光は透過する特性を有す
るため、図1のピンホ−ル基板と同様の効果を得られ
る。
【0011】図4は本発明のピンホ−ル基板の第3の実
施例を示す構成図である。なお、図4において図1と同
一要素には同一符号を付して重複する説明は省略する。
図4と図1との相違点は、波長によって屈折率の違う物
質、例えば、フレネルゾ−ンプレ−ト15bの暗部15
2bを色分散の大きな物質で形成し、基板11aに埋め
込まれた構成とされている点である。この場合、図5に
示すように、基板11aの材質aと暗部152bを構成
する色分散の大きな物質bは、螢光(波長λ2)におい
ては、同一の屈折率であり、励起レ−ザ光(波長λ1 )
においては、異なる屈折率を有するものである。したが
って、暗部152bを構成する色分散の大きな物質bの
厚みを適切に選択することにより、励起レ−ザ光に対し
てのみフレネルレンズとして機能するピンホ−ル基板を
構成できる。即ち、励起レ−ザ光に対しては、レンズと
して機能するため、入射光はピンホ−ルを通して試料に
照射される。試料から反射した励起光は、ピンホ−ル基
板1cを通ることにより、再びフレネルゾ−ンプレ−ト
15bを通過するため、平行光となり、図2装置におい
ては、ダイクロイックミラ−2で反射され、カメラには
入射されないが、螢光に対しては、レンズとして機能し
ないため、試料から反射した螢光は、ピンホ−ル基板1
cを通って広がり、図2装置においては、ダイクロイッ
クミラ−2を通過して、集光レンズ6により、カメラ3
に結像される。したがって、図1および図3のピンホ−
ル基板と同様に、螢光の損失を減少でき、カメラ3に高
分解能の結像をえることができる。
【0012】図6は図4のピンホ−ル基板の変形実施例
である。なお、図6において図4と同一要素には同一符
号を付して重複する説明は省略する。図6と図4との相
違点は、フレネルゾ−ンプレ−ト15cの暗部152c
をブレ−ズ型としたものである。この形状とすることに
より、図4のピンホ−ル基板に比べて、励起光の集光効
率を向上できるため、図2装置のように共焦点用光スキ
ャナに用いて共焦点顕微鏡に応用すると、更に光利用効
率を向上できる。
【0013】なお、上記実施例において、図4および図
6のピンホ−ル基板において、基板と暗部を形成する物
質は、逆であっても良く、同様の効果を得ることができ
る。また、図3,4,6に示すピンホ−ル基板を共焦点
用光スキャナに用いて共焦点顕微鏡などに応用しても良
く、図2装置と同様の効果を得ることができる。
【0014】
【発明の効果】以上、実施例と共に具体的に説明したよ
うに、本発明によれば、フレネルゾーンプレートの暗部
を励起レーザ光と蛍光の波長によって透過率の異なる物
質で形成し、若しくは、励起レーザ光と蛍光の波長によ
って屈折率の異なる物質で形成してフレネルゾーンプレ
ートが励起レーザ光に対してフレネルレンズとして機能
させ、このピンホ−ル基板を用いることにより、高分解
能かつ高感度の結像を得られる共焦点用光スキャナを実
現できる。
【図面の簡単な説明】
【図1】本発明のピンホ−ル基板の第1の実施例を示す
構成図である。
【図2】図1のピンホ−ル基板を用いた共焦点用光スキ
ャナを共焦点顕微鏡に応用した一実施例を示す構成図で
ある。
【図3】本発明のピンホ−ル基板の第2の実施例を示す
構成図である。
【図4】本発明のピンホ−ル基板の第3の実施例を示す
構成図である。
【図5】図4の機能を説明するための波長−屈折率の関
係を示す図である。
【図6】本発明のピンホ−ル基板の第3の実施例の変形
実施例を示す構成図である。
【図7】本願出願人によるピンホ−ル基板の先行例であ
る。
【図8】ピンホ−ル基板を用いた共焦点用光スキャナを
共焦点顕微鏡に応用した従来例の構成図である。
【図9】図8装置の動作を説明するための図である。
【符号の説明】
1a,1b,1c,1d ピンホ−ル基板 11,11a 基板 13 薄膜 14 ピンホ−ル 15,15a,15b,15c フレネルゾ−ンプレ−
ト 151 明部 152,152a,152b,152c 暗部

Claims (5)

    (57)【特許請求の範囲】
  1. 【請求項1】基板と、この基板の片面に形成された複数
    のフレネルレンズと、この複数のフレネルレンズの焦点
    位置にそれぞれ配置された複数のピンホールとを備えた
    ピンホール基板において、 前記複数のフレネルレンズはそれぞれ暗部と明部を同心
    円状に交互に複数配置してなるフレネルゾーンプレート
    であって、このフレネルゾーンプレートの暗部は励起レ
    ーザ光と蛍光の波長によって透過率の異なる物質で形成
    され、前記フレネルゾーンプレートが前記励起レーザ光
    に対してフレネルレンズとして機能することを特徴とす
    るピンホール基板。
  2. 【請求項2】請求項1記載のピンホール基板において、 前記フレネルゾーンプレートの暗部をダイクロイックミ
    ラーで形成したことを特徴とするピンホール基板。
  3. 【請求項3】基板と、この基板の片面に形成された複数
    のフレネルレンズと、この複数のフレネルレンズの焦点
    位置にそれぞれ配置された複数のピンホールとを備えた
    ピンホール基板において、 前記複数のフレネルレンズはそれぞれ暗部と明部を同心
    円状に交互に複数配置してなるフレネルゾーンプレート
    であって、このフレネルゾーンプレートの暗部は励起レ
    ーザ光と蛍光の波長によって屈折率の異なる物質で形成
    され、前記フレネルゾーンプレートが前記励起レーザ光
    に対してフレネルレンズとして機能することを特徴とす
    るピンホール基板。
  4. 【請求項4】請求項3記載のピンホール基板において、 前記フレネルゾーンプレートの明部と暗部は色分散の異
    なる物質で構成したことを特徴とするピンホール基板。
  5. 【請求項5】ピンホール基板を回転させ、このピンホー
    ル基板を通過した照射光を試料に対して走査する共焦点
    用光スキャナにおいて、 前記ピンホール基板は請求項1乃至請求項4記載のピン
    ホール基板を用いたことを特徴とする共焦点用光スキャ
    ナ。
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