JP2995632B2 - サルモネラ菌識別用の分離媒体 - Google Patents
サルモネラ菌識別用の分離媒体Info
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Description
分離媒体に関する。
療細菌学と農産物細菌モニタにおける主要問題である。
合、細菌が腸管に寄生した家禽類は発病せず、サルモネ
ラ菌の保菌庫となってしまう。サルモネラ菌は、家禽類
の卵を通じて広がり、発病してからは食物連鎖によって
拡散してゆく。さらに、サルモネラ菌はその宣誓申告が
義務づけられている。
染された場所、とくに農場を広い範囲にわたって検査す
る必要がある。
にも一般に認められる。
分けしたり、サルモネラ菌のコロニーを検出できる腸内
細菌を選別するための寒天などの分離媒体を用いて行な
われる。理想的な分離媒体では、腸内細菌を成長させ、
存在する各種細菌種の識別に役立ち、その後に行なわれ
る各細菌種のコロニーを識別して、サルモネラ菌のコロ
ニーを検出する作業を可能とするものでなくてはならな
い。
離媒体では、サルモネラ菌の検出にはあまり役立たな
い。事実、プロテウスミラビリス菌型の共生菌がしばし
ば見つかってしまうことがあり、検査結果が誤まってし
まう。
的の望ましいが、高価な点が欠点である。かくして、こ
のヘクトーエン媒体上で、サルモネラ菌は、中央が黒い
青色コロニー(lac-sac-sal-H2S+)を形成し、同じ性質
をもつミラビリス菌も同様に、中央が黒い青いコロニー
を形成する。したがって、かような陽性の誤認が生じる
ので、さらに作業が必要となり、費用もかかる。つま
り、疑わしい幾つかのコロニーをつづいて検査しなけれ
ばならない。もしかような陽性の誤認がなければ手早く
読みとっても診断上のエラーをすることもない。
故に、コロニーの着色状態の容易に識別する場合に比べ
て、より高度の且つ質の高い処置方法を用いてコロニー
の再分離と生化学的な差別作業をつづいて行う必要が生
じる。最後に、上記生化学的差別処理作業を行うことに
より、菌の識別が遅れ、作業全体が時間のかかるものと
なる。
より、あいまいさの残らない方法でサルモネラ菌コロニ
ーを検出できる、上記欠点をもたない分離媒体を提供す
るにある。事実、本発明はプロテウス菌を陽性として誤
って明視できてしまう、従来技術によるサルモネラ菌の
マーキング特性H2S+lac-sac-sal-は用いない。
めの分離媒体に関するもので、この媒体においては、サ
ルモネラ菌によって代謝されるポリオールと、酸性化に
発色反応するPH指示薬とが、ペプトンを含む培養サポー
トに添加されたものである。
て代謝可能のこのポリオールは、くだけ易い物質に吸収
される。
μm以下の粒子からできていて、上記ポリオールを確実
に吸収し、かくして得られた粉状体は流動性のよいもの
が望ましい。
的にはシリカゲルがよい。しかし、セルロースなどの他
の種類の物質もまた、採用可能である。使用されるポリ
オールのうち、よりくわしくは、エタンジオールのよう
な2〜10個の炭素原子を含むジオール、プロパンジオー
ル、ブタンジオール、特に1,2−プロパンジオールなど
のポリオールである。事実、これらのジオールはサルモ
ネラ菌によって代謝され、ニュートラルレッドのような
PH指示薬と発色反応させうる酸性種を作る。これに対し
て、大腸菌やプロテウス菌のような共生種は、この種の
発色反応は起さない。
に用いうるが、すべてのサルモネラ菌はこの媒体上で事
実な結果を生じさせる。このプロセスを実行する場合
は、より迅速にサルモネラ菌のコロニーを確認しうるコ
ロニー培養に適した寒天培養媒体を用いるのが望まし
い。
オキシコール酸塩を含む媒体を用いることができる。検
出精度を向上させたい場合は、β−ガラクトシダーゼ基
質を媒体に添加することもできる。上記基質は、ブロー
クロロインドキシルガラクトシド、ブローナフチルガラ
クトシド、あるいはハイドロキシキノリンガラクトシド
型の発色原体基質であり、もし適切であるなら、誘導原
たとえばIPTGの存在下において添加することができる。
事実、サルモネラ変種はベータガル−特性なので、この
基質とは反応しない。
を用いる場合、ポリオールの存在はベータガル+特性を
妨げるようなものではない。これに反し炭水化物の大部
分は、異化抑制により、ベータガル+特性を妨げること
ができる。これらの2つの識別特性が発色反応によって
可視化されたときは、各種タイプの菌、特にサルモネラ
菌、プロテウス菌、および大腸菌などが注意深い処置に
よって識別されうる。かくして、PH指示薬としてのニュ
ートラルレッドおよびβ−ガラクトシダーゼ基質として
のX−ガルによって、サルモネラ菌を大腸菌、シトラバ
クテル菌、プロテウス菌から、これらを含む混合液内に
おいて、識別することができる。このメカニズムは以下
の記載から明らかになる。
負のサルモネラ特性、たとえば、ベータグルー−を用い
ることもできる。この場合は、β−グルコシダーゼ基が
用いられる。
紙製の柱状サポートのような他の種類のサポートを用い
て、媒体それ自体内で検出することもできる。
セスにも関する。このプロセスにおいて試料は本発明に
よる媒体上で培養され、媒体の酸性化に対するPH指示薬
の発色反応によってサルモネラ菌の存在が検知される。
の利点と特徴が明らかになる。
培養し、その後接種することによって次の結果が得られ
た。
コロニーを示し、シトロバクテル菌は青、紫コロニーを
示し、プロテウス菌は無色のコロニーを示した。
に吸収される。
培養し、その後接触することにより次の結果が得られ
た。この結果は、例1の目的である培養媒体において観
察されたものに類似する。すなわち、サルモネラ菌は赤
コロニーを示し、大腸菌は・緑コロニーを示し、シトロ
バクテル菌は青・紫コロニーを示し、プロテウス菌は無
色コロニーを示した。
Claims (11)
- 【請求項1】サルモネラ菌によって代謝されうる、エタ
ンジオール、ブタンジオール、プロパンジオールのいず
れか1より選択されたジオールと、酸性化に対して反応
するPH指示薬とが、ペプトンを含む培養サポートに添加
されるようになされた、サルモネラ菌識別用の分離媒
体。 - 【請求項2】前記サルモネラ菌によって代謝されうる前
記ジオールが、粉末物質に吸収されていることを特徴と
する請求項1に記載のサルモネラ菌識別用の分離媒体。 - 【請求項3】前記粉末物質の粒子サイズは100μm以下
であることを特徴とする請求項2に記載のサルモネラ菌
識別用の分離媒体。 - 【請求項4】前記粉末物質は望ましくは微粉シリカ、シ
リカゲル、セルロースのいずれかであることを特徴とす
る請求項2又は3に記載のサルモネラ菌識別用の分離媒
体。 - 【請求項5】前記プロパンジオールが1,2プロパンジオ
ールであることを特徴とする請求項1乃至4のいずれか
1項に記載のサルモネラ菌識別用の分離媒体。 - 【請求項6】前記PH指示薬はニュートラルレッドである
ことを特徴とする請求項1乃至5のいずれか1項に記載
のサルモネラ菌識別用の分離媒体。 - 【請求項7】前記培養サポートはコロニーの培養に適し
た寒天媒体であることを特徴とする請求項1乃至6のい
ずれか1項に記載のサルモネラ菌識別用の分離媒体。 - 【請求項8】該媒体はデオキシコール酸塩も含むことを
特徴とする請求項1乃至7のいずれか1項に記載のサル
モネラ菌識別用の分離媒体。 - 【請求項9】該媒体は発色性のβ−ガラクトシダーゼ基
質も含むことを特徴とする請求項1乃至8のいずれか1
項に記載のサルモネラ菌識別用の分離媒体。 - 【請求項10】該媒体はイソプロピル・ベーターD−4
チオガラクトピラノシド(IPTG)も含むことを特徴とす
る請求項1乃至9のいずれか1項に記載のサルモネラ菌
識別用の分離媒体。 - 【請求項11】請求項1乃至10のいずれか1項に記載の
サルモネラ菌識別用の分離媒体上で試料を培養し、該分
離媒体の酸性化に対するPH指示薬の発色反応によってサ
ルモネラ菌の存在を決める各段階より成る、試料中のサ
ルモネラ菌の存在を識別するための方法。
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