JP2995632B2 - サルモネラ菌識別用の分離媒体 - Google Patents

サルモネラ菌識別用の分離媒体

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Description

【発明の詳細な説明】 [産業上の利用分野] 本発明は、サルモネラ菌種のバクテリアを識別できる
分離媒体に関する。
[従来の技術] 人間を発病させるサルモネラ菌を識別することは、医
療細菌学と農産物細菌モニタにおける主要問題である。
つまり、養鶏めんどりによって媒介された伝染病の場
合、細菌が腸管に寄生した家禽類は発病せず、サルモネ
ラ菌の保菌庫となってしまう。サルモネラ菌は、家禽類
の卵を通じて広がり、発病してからは食物連鎖によって
拡散してゆく。さらに、サルモネラ菌はその宣誓申告が
義務づけられている。
この菌による発病を防止するため、サルモネラ菌で汚
染された場所、とくに農場を広い範囲にわたって検査す
る必要がある。
事実サルモネラ菌は共生種の大腸菌とプロテウス菌内
にも一般に認められる。
通常サルモネラ菌の検出は、病源となる腸内細菌を区
分けしたり、サルモネラ菌のコロニーを検出できる腸内
細菌を選別するための寒天などの分離媒体を用いて行な
われる。理想的な分離媒体では、腸内細菌を成長させ、
存在する各種細菌種の識別に役立ち、その後に行なわれ
る各細菌種のコロニーを識別して、サルモネラ菌のコロ
ニーを検出する作業を可能とするものでなくてはならな
い。
しかし、腸内細菌を分離するための従来技術による分
離媒体では、サルモネラ菌の検出にはあまり役立たな
い。事実、プロテウスミラビリス菌型の共生菌がしばし
ば見つかってしまうことがあり、検査結果が誤まってし
まう。
上述の寒天の選択媒体の内、ヘクトーエン媒体は一般
的の望ましいが、高価な点が欠点である。かくして、こ
のヘクトーエン媒体上で、サルモネラ菌は、中央が黒い
青色コロニー(lac-sac-sal-H2S+)を形成し、同じ性質
をもつミラビリス菌も同様に、中央が黒い青いコロニー
を形成する。したがって、かような陽性の誤認が生じる
ので、さらに作業が必要となり、費用もかかる。つま
り、疑わしい幾つかのコロニーをつづいて検査しなけれ
ばならない。もしかような陽性の誤認がなければ手早く
読みとっても診断上のエラーをすることもない。
さらに、サルモネラ菌についてのかような不確実さの
故に、コロニーの着色状態の容易に識別する場合に比べ
て、より高度の且つ質の高い処置方法を用いてコロニー
の再分離と生化学的な差別作業をつづいて行う必要が生
じる。最後に、上記生化学的差別処理作業を行うことに
より、菌の識別が遅れ、作業全体が時間のかかるものと
なる。
[発明の開示] 本発明の目的は、コロニーを特定的に着色することに
より、あいまいさの残らない方法でサルモネラ菌コロニ
ーを検出できる、上記欠点をもたない分離媒体を提供す
るにある。事実、本発明はプロテウス菌を陽性として誤
って明視できてしまう、従来技術によるサルモネラ菌の
マーキング特性H2S+lac-sac-sal-は用いない。
より特定的には、本発明はサルモネラ菌を確認するた
めの分離媒体に関するもので、この媒体においては、サ
ルモネラ菌によって代謝されるポリオールと、酸性化に
発色反応するPH指示薬とが、ペプトンを含む培養サポー
トに添加されたものである。
本発明の特定の具体例によると、サルモネラ菌によっ
て代謝可能のこのポリオールは、くだけ易い物質に吸収
される。
使用される物質は小さいサイズの粒状体、つまり100
μm以下の粒子からできていて、上記ポリオールを確実
に吸収し、かくして得られた粉状体は流動性のよいもの
が望ましい。
この粉砕された物質は望ましくは、微細シリカ、特定
的にはシリカゲルがよい。しかし、セルロースなどの他
の種類の物質もまた、採用可能である。使用されるポリ
オールのうち、よりくわしくは、エタンジオールのよう
な2〜10個の炭素原子を含むジオール、プロパンジオー
ル、ブタンジオール、特に1,2−プロパンジオールなど
のポリオールである。事実、これらのジオールはサルモ
ネラ菌によって代謝され、ニュートラルレッドのような
PH指示薬と発色反応させうる酸性種を作る。これに対し
て、大腸菌やプロテウス菌のような共生種は、この種の
発色反応は起さない。
この媒体は、食品中のサルモネラ菌を検出するのに特
に用いうるが、すべてのサルモネラ菌はこの媒体上で事
実な結果を生じさせる。このプロセスを実行する場合
は、より迅速にサルモネラ菌のコロニーを確認しうるコ
ロニー培養に適した寒天培養媒体を用いるのが望まし
い。
腸内細菌の成長を促進させる媒体のうち、たとえばデ
オキシコール酸塩を含む媒体を用いることができる。検
出精度を向上させたい場合は、β−ガラクトシダーゼ基
質を媒体に添加することもできる。上記基質は、ブロー
クロロインドキシルガラクトシド、ブローナフチルガラ
クトシド、あるいはハイドロキシキノリンガラクトシド
型の発色原体基質であり、もし適切であるなら、誘導原
たとえばIPTGの存在下において添加することができる。
事実、サルモネラ変種はベータガル特性なので、この
基質とは反応しない。
本発明によるポリオールの価は、上記2つの識別特性
を用いる場合、ポリオールの存在はベータガル特性を
妨げるようなものではない。これに反し炭水化物の大部
分は、異化抑制により、ベータガル特性を妨げること
ができる。これらの2つの識別特性が発色反応によって
可視化されたときは、各種タイプの菌、特にサルモネラ
菌、プロテウス菌、および大腸菌などが注意深い処置に
よって識別されうる。かくして、PH指示薬としてのニュ
ートラルレッドおよびβ−ガラクトシダーゼ基質として
のX−ガルによって、サルモネラ菌を大腸菌、シトラバ
クテル菌、プロテウス菌から、これらを含む混合液内に
おいて、識別することができる。このメカニズムは以下
の記載から明らかになる。
言うまでもなく、この種の媒体の場合は、他の種類の
負のサルモネラ特性、たとえば、ベータグルーを用い
ることもできる。この場合は、β−グルコシダーゼ基が
用いられる。
同様に、とくにシート状の寒天媒体を用いる代りに、
紙製の柱状サポートのような他の種類のサポートを用い
て、媒体それ自体内で検出することもできる。
本発明はまた、サルモネラ菌の認識を行うためのプロ
セスにも関する。このプロセスにおいて試料は本発明に
よる媒体上で培養され、媒体の酸性化に対するPH指示薬
の発色反応によってサルモネラ菌の存在が検知される。
[実施例] 非限定的試料として以下に示す例により、本発明の他
の利点と特徴が明らかになる。
例1 サルモネラ菌を検知できる分離媒体 以下の組成を有する媒体を生産される。
成 分 グラム/水1リットル 1,2−プロパンジオール 5 ペプトン 5 酵母エキス 2 デトキシコール酸塩 1 ブロークロロインドキシル ガラクトシド 0.1 ニュートラルレッド 0.03 寒天 15 各種タイプのエンテロバクテリアでこの媒体を48時間
培養し、その後接種することによって次の結果が得られ
た。
サルモネラ菌は、赤コロニーを示し、大腸菌は青・緑
コロニーを示し、シトロバクテル菌は青、紫コロニーを
示し、プロテウス菌は無色のコロニーを示した。
例2 本発明による分離媒体により、ポリオールは粉末物質
に吸収される。
使用された混合物は以下の組成を示す。
成 分 グラム/水1リットル 1,2−プロパンジオール/シリ カゲル (10g/16g) 26 ペプトン 5 酵母エキス 2 デオキシコール酸塩 1 ブロークロロインドキシルガラ クトシド 0.1 ニュートラルレッド 0.03 寒天 15 各種タイプのエンテロバクテリアでこの媒体を48時間
培養し、その後接触することにより次の結果が得られ
た。この結果は、例1の目的である培養媒体において観
察されたものに類似する。すなわち、サルモネラ菌は赤
コロニーを示し、大腸菌は・緑コロニーを示し、シトロ
バクテル菌は青・紫コロニーを示し、プロテウス菌は無
色コロニーを示した。

Claims (11)

    (57)【特許請求の範囲】
  1. 【請求項1】サルモネラ菌によって代謝されうる、エタ
    ンジオール、ブタンジオール、プロパンジオールのいず
    れか1より選択されたジオールと、酸性化に対して反応
    するPH指示薬とが、ペプトンを含む培養サポートに添加
    されるようになされた、サルモネラ菌識別用の分離媒
    体。
  2. 【請求項2】前記サルモネラ菌によって代謝されうる前
    記ジオールが、粉末物質に吸収されていることを特徴と
    する請求項1に記載のサルモネラ菌識別用の分離媒体。
  3. 【請求項3】前記粉末物質の粒子サイズは100μm以下
    であることを特徴とする請求項2に記載のサルモネラ菌
    識別用の分離媒体。
  4. 【請求項4】前記粉末物質は望ましくは微粉シリカ、シ
    リカゲル、セルロースのいずれかであることを特徴とす
    る請求項2又は3に記載のサルモネラ菌識別用の分離媒
    体。
  5. 【請求項5】前記プロパンジオールが1,2プロパンジオ
    ールであることを特徴とする請求項1乃至4のいずれか
    1項に記載のサルモネラ菌識別用の分離媒体。
  6. 【請求項6】前記PH指示薬はニュートラルレッドである
    ことを特徴とする請求項1乃至5のいずれか1項に記載
    のサルモネラ菌識別用の分離媒体。
  7. 【請求項7】前記培養サポートはコロニーの培養に適し
    た寒天媒体であることを特徴とする請求項1乃至6のい
    ずれか1項に記載のサルモネラ菌識別用の分離媒体。
  8. 【請求項8】該媒体はデオキシコール酸塩も含むことを
    特徴とする請求項1乃至7のいずれか1項に記載のサル
    モネラ菌識別用の分離媒体。
  9. 【請求項9】該媒体は発色性のβ−ガラクトシダーゼ基
    質も含むことを特徴とする請求項1乃至8のいずれか1
    項に記載のサルモネラ菌識別用の分離媒体。
  10. 【請求項10】該媒体はイソプロピル・ベーターD−4
    チオガラクトピラノシド(IPTG)も含むことを特徴とす
    る請求項1乃至9のいずれか1項に記載のサルモネラ菌
    識別用の分離媒体。
  11. 【請求項11】請求項1乃至10のいずれか1項に記載の
    サルモネラ菌識別用の分離媒体上で試料を培養し、該分
    離媒体の酸性化に対するPH指示薬の発色反応によってサ
    ルモネラ菌の存在を決める各段階より成る、試料中のサ
    ルモネラ菌の存在を識別するための方法。
JP2108966A 1989-04-27 1990-04-26 サルモネラ菌識別用の分離媒体 Expired - Lifetime JP2995632B2 (ja)

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FR8905594 1989-04-27
FR8909114 1989-07-06
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JPH0367599A JPH0367599A (ja) 1991-03-22
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DE (1) DE69010268T2 (ja)
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