JP2823702B2 - 脱分化初期細胞系による物質の生産方法 - Google Patents
脱分化初期細胞系による物質の生産方法Info
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Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、脱分化初期の細胞塊を
エリシターで刺激することによって有用な物質を製造す
る方法に関する。本発明の方法によれば、４’, ７−ジ
ヒドロキシフラボンや新規物質である２−ヒドロキシピ
サチンを効率よく取得することができる。
エリシターで刺激することによって有用な物質を製造す
る方法に関する。本発明の方法によれば、４’, ７−ジ
ヒドロキシフラボンや新規物質である２−ヒドロキシピ
サチンを効率よく取得することができる。
【０００２】
【従来技術】従来より、植物を用いて化学物質を取得す
る方法が広く用いられている。例えば、生薬成分の抽出
・分離の例に見られるように、植物体自体から直接取得
する方法がある。しかし、この方法では、植物体に元来
微量しか生産されない物質や代謝速度が速くて殆ど検出
ができなかった物質を大量に生産することは困難であ
る。
る方法が広く用いられている。例えば、生薬成分の抽出
・分離の例に見られるように、植物体自体から直接取得
する方法がある。しかし、この方法では、植物体に元来
微量しか生産されない物質や代謝速度が速くて殆ど検出
ができなかった物質を大量に生産することは困難であ
る。
【０００３】また、シコンカルスからのシコニン取得の
例に見られるように、脱分化細胞株を培養増殖し培養細
胞を経て取得する方法がある。しかし、脱分化細胞が安
定増殖する程度に脱分化が進行すると、母植物中に見い
だされた有用物質の生産能は一般に低下してしまう。こ
のため、かかる方法では、所望の物質を効率良く生産す
ることが困難である。
例に見られるように、脱分化細胞株を培養増殖し培養細
胞を経て取得する方法がある。しかし、脱分化細胞が安
定増殖する程度に脱分化が進行すると、母植物中に見い
だされた有用物質の生産能は一般に低下してしまう。こ
のため、かかる方法では、所望の物質を効率良く生産す
ることが困難である。
【０００４】このような従来法の問題点に対処するため
に、試行錯誤のうえ有用物質を比較的多量に含む植物種
を選択したり、有用物質の抽出方法を改良するなどの検
討がなされてきた。しかし、植物が生産する物質の種類
や量そのものを調節する技術は、未だ開発されるに至っ
ていない。
に、試行錯誤のうえ有用物質を比較的多量に含む植物種
を選択したり、有用物質の抽出方法を改良するなどの検
討がなされてきた。しかし、植物が生産する物質の種類
や量そのものを調節する技術は、未だ開発されるに至っ
ていない。
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】本発明は、植物細胞か
ら所望の化学物質を時間的・量的に効率良く取得する方
法を提供することを目的とする。また、本発明は、従来
法では取得することが困難であった物質を得る方法を提
供することも目的とする。
ら所望の化学物質を時間的・量的に効率良く取得する方
法を提供することを目的とする。また、本発明は、従来
法では取得することが困難であった物質を得る方法を提
供することも目的とする。
【０００６】かかる目的は、脱分化初期の細胞塊をエリ
シターで刺激することによって物質を生産する方法を開
発することによって達成された。本発明は特に、アルフ
ァルファの脱分化初期の細胞塊に酵母エキスを添加して
培養し、抽出することによって、４’，７−ジヒドロキ
シフラボンを製造する方法を提供するものである。ま
た、本明細書ではこの他に、エンドウの脱分化初期の細
胞塊にキトサンを添加して培養し、抽出することによっ
て２−ヒドロキシピサチンを製造する方法も開示する。
シターで刺激することによって物質を生産する方法を開
発することによって達成された。本発明は特に、アルフ
ァルファの脱分化初期の細胞塊に酵母エキスを添加して
培養し、抽出することによって、４’，７−ジヒドロキ
シフラボンを製造する方法を提供するものである。ま
た、本明細書ではこの他に、エンドウの脱分化初期の細
胞塊にキトサンを添加して培養し、抽出することによっ
て２−ヒドロキシピサチンを製造する方法も開示する。
【０００７】本発明は、脱分化初期の細胞塊、即ち外植
片から誘導され安定に増殖しうる以前の数世代の細胞塊
には、もともと外植片に存在していた量以上の二次代謝
産物が蓄積することおよび外植片には見い出しがたい新
しい二次代謝産物が大量に蓄積すること、さらに、エリ
シターに対する感受性が大きく変化して有機化合物を効
率良く生産・蓄積することを発見したことに基づき完成
されたものである。
片から誘導され安定に増殖しうる以前の数世代の細胞塊
には、もともと外植片に存在していた量以上の二次代謝
産物が蓄積することおよび外植片には見い出しがたい新
しい二次代謝産物が大量に蓄積すること、さらに、エリ
シターに対する感受性が大きく変化して有機化合物を効
率良く生産・蓄積することを発見したことに基づき完成
されたものである。
【０００８】本発明で使用する脱分化初期の細胞塊は、
アルファルファやエンドウであればその部位や組織的違
いによってとくに制限されない。例えばアルファルファ
の子葉やエンドウの胚軸などからの脱分化初期の細胞を
使用する。また、脱分化させる細胞は、植物の種子、
根、葉、茎、花など種々の部位から採取することができ
る。
アルファルファやエンドウであればその部位や組織的違
いによってとくに制限されない。例えばアルファルファ
の子葉やエンドウの胚軸などからの脱分化初期の細胞を
使用する。また、脱分化させる細胞は、植物の種子、
根、葉、茎、花など種々の部位から採取することができ
る。
【０００９】アルファルファの脱分化初期の細胞は、酵
母エキスを含むエリシターで刺激する。また、エンドウ
の脱分化初期の細胞は、キトサンを含むエリシターで刺
激する。このようなエリシターによる刺激を与えること
によって、細胞はフラボン骨格またはイソフラボン骨格
を有する物質をはじめとする種々の有用な化合物を生産
する。特に、アルファルファに酵母エキスを作用させた
場合には４’, ７−ジヒドロキシフラボンをはじめとす
る化合物が得られ、エンドウにキトサンを作用させた場
合には２−ヒドロキシピサチンをはじめとする化合物が
得られる。 本発明の方法を実施するにあたっては、生物
由来の他の組成物、光、熱、温度、湿度などを、酵母エ
キスまたはキトサンと組み合わせてエリシターとしても
よい。このような組み合わせは、フラボン骨格またはイ
ソフラボン骨格を有する化合物の生産に悪影響を及ぼさ
ない限り適宜用い得る。エリシターの適用方法は、一度
に行なっても、数回に分けて行なっても、あるいは一定
時間持続させてもよい。例えば、生物由来の組成物を含
む溶液中に１日１〜２回浸漬する方法をとることができ
る。
母エキスを含むエリシターで刺激する。また、エンドウ
の脱分化初期の細胞は、キトサンを含むエリシターで刺
激する。このようなエリシターによる刺激を与えること
によって、細胞はフラボン骨格またはイソフラボン骨格
を有する物質をはじめとする種々の有用な化合物を生産
する。特に、アルファルファに酵母エキスを作用させた
場合には４’, ７−ジヒドロキシフラボンをはじめとす
る化合物が得られ、エンドウにキトサンを作用させた場
合には２−ヒドロキシピサチンをはじめとする化合物が
得られる。 本発明の方法を実施するにあたっては、生物
由来の他の組成物、光、熱、温度、湿度などを、酵母エ
キスまたはキトサンと組み合わせてエリシターとしても
よい。このような組み合わせは、フラボン骨格またはイ
ソフラボン骨格を有する化合物の生産に悪影響を及ぼさ
ない限り適宜用い得る。エリシターの適用方法は、一度
に行なっても、数回に分けて行なっても、あるいは一定
時間持続させてもよい。例えば、生物由来の組成物を含
む溶液中に１日１〜２回浸漬する方法をとることができ
る。
【００１０】脱分化初期の細胞塊自体およびエリシター
で刺激することによって生産された有用物質は、当業者
に周知の分離・精製技術によって単離することができ
る。有用物質は細胞内に蓄積される場合と、周囲に放出
される場合があるが、いずれの場合であっても細胞また
は周囲の媒体をアセトンやエーテルなどの有機溶媒で抽
出し、クロマトグラフィーなどによって精製することに
よって目的物質を得ることができる。
で刺激することによって生産された有用物質は、当業者
に周知の分離・精製技術によって単離することができ
る。有用物質は細胞内に蓄積される場合と、周囲に放出
される場合があるが、いずれの場合であっても細胞また
は周囲の媒体をアセトンやエーテルなどの有機溶媒で抽
出し、クロマトグラフィーなどによって精製することに
よって目的物質を得ることができる。
【００１１】本発明は、従来法にはない様々な利点を有
している。
している。
【００１２】まず、特定の物質を効率良く取得するに
は、脱分化開始後特定の日数が経過した細胞塊自体を直
接抽出するか、あるいは、この状態の細胞塊にエリシタ
ーによる刺激を与えると、特定の物質が多量に細胞内に
蓄積したり、細胞外に放出したりする。このため、所望
の物質の濃度が最も高くなる条件で本発明の操作を行え
ば、多量の物質を効率良く得ることができる。
は、脱分化開始後特定の日数が経過した細胞塊自体を直
接抽出するか、あるいは、この状態の細胞塊にエリシタ
ーによる刺激を与えると、特定の物質が多量に細胞内に
蓄積したり、細胞外に放出したりする。このため、所望
の物質の濃度が最も高くなる条件で本発明の操作を行え
ば、多量の物質を効率良く得ることができる。
【００１３】例えば、アルファルファの脱分化初期の細
胞に対して、部分精製酵母エキスによる刺激を与える
と、脱分化開始後の日数によって細胞外に放出される物
質の量が図１に示すように変化する（実施例１）。例え
ば、ｔＲ＝４.６の物質は、脱分化開始後５日目の細胞
に刺激を与えると放出量が約４倍になり、脱分化後７日
目の細胞に刺激を与えると放出量が約１.５倍になる。
かかる刺激による放出量の増加は、脱分化後１０日目の
細胞が放出するｔＲ＝８.０（４',７ージヒドロキシフ
ラボン）およびｔＲ＝１４.８（フォルモノネチン）の
場合にも確認された。このように、エリシターの刺激に
より放出量が増加する場合をあらかじめ確認しておき、
その条件で所望の物質を生産・分離すれば取得効率を高
めることができる。なお、実施例１に示すアルファルフ
ァの系は数種のフェノール性物質を顕著に誘導すること
から、新しいエリシターの分離・精製を進めるための有
効な手段となりうる。
胞に対して、部分精製酵母エキスによる刺激を与える
と、脱分化開始後の日数によって細胞外に放出される物
質の量が図１に示すように変化する（実施例１）。例え
ば、ｔＲ＝４.６の物質は、脱分化開始後５日目の細胞
に刺激を与えると放出量が約４倍になり、脱分化後７日
目の細胞に刺激を与えると放出量が約１.５倍になる。
かかる刺激による放出量の増加は、脱分化後１０日目の
細胞が放出するｔＲ＝８.０（４',７ージヒドロキシフ
ラボン）およびｔＲ＝１４.８（フォルモノネチン）の
場合にも確認された。このように、エリシターの刺激に
より放出量が増加する場合をあらかじめ確認しておき、
その条件で所望の物質を生産・分離すれば取得効率を高
めることができる。なお、実施例１に示すアルファルフ
ァの系は数種のフェノール性物質を顕著に誘導すること
から、新しいエリシターの分離・精製を進めるための有
効な手段となりうる。
【００１４】エリシターによる刺激は、物質の放出量を
増加させるだけでなく、場合によっては放出のパターン
を変えてしまうこともある。例えば、図１に示すｔＲ＝
８.０の物質の放出量は、未処理の場合は脱分化開始後
５日目の細胞で最大になるが、エリシターによる刺激を
与えた場合は脱分化開始後５日目で最小になるという逆
転現象が生ずる。細胞内物質蓄積量の変化を示した図２
によれば、エリシターによる刺激を与えた場合、脱分化
開始後５日目の細胞にｔＲ＝８.０が著しく蓄積されて
いることが伺える。従って、この条件で本発明を適用し
て、細胞から抽出すれば、極めて効率良くｔＲ＝８.０
の物質を取得することができる。
増加させるだけでなく、場合によっては放出のパターン
を変えてしまうこともある。例えば、図１に示すｔＲ＝
８.０の物質の放出量は、未処理の場合は脱分化開始後
５日目の細胞で最大になるが、エリシターによる刺激を
与えた場合は脱分化開始後５日目で最小になるという逆
転現象が生ずる。細胞内物質蓄積量の変化を示した図２
によれば、エリシターによる刺激を与えた場合、脱分化
開始後５日目の細胞にｔＲ＝８.０が著しく蓄積されて
いることが伺える。従って、この条件で本発明を適用し
て、細胞から抽出すれば、極めて効率良くｔＲ＝８.０
の物質を取得することができる。
【００１５】本発明には、このような量的な効率のみな
らず、時間的な効率も高いという特徴がある。すなわ
ち、脱分化細胞株を培養増殖させ培養細胞としてから物
質を取得していた従来法に比べると、脱分化初期の細胞
を使用する本発明は時間が大幅に短縮されている。従っ
て、本発明は所望の物質を迅速に取得したい場合に極め
て有用である。
らず、時間的な効率も高いという特徴がある。すなわ
ち、脱分化細胞株を培養増殖させ培養細胞としてから物
質を取得していた従来法に比べると、脱分化初期の細胞
を使用する本発明は時間が大幅に短縮されている。従っ
て、本発明は所望の物質を迅速に取得したい場合に極め
て有用である。
【００１６】さらに、本発明によれば、既知物質のみな
らず、新規誘導体を取得することも可能である。例え
ば、エンドウの細胞をキトサン水溶液で刺激した場合に
は、新規物質である２ーヒドロキシピサチン（ｔＲ＝１
０.０）が細胞内に多量に蓄積される。従って、本発明
によれば、生理活性を有する新規物質の発見や、有用な
物質を合成するための新しい原料の提供が可能になると
期待される。
らず、新規誘導体を取得することも可能である。例え
ば、エンドウの細胞をキトサン水溶液で刺激した場合に
は、新規物質である２ーヒドロキシピサチン（ｔＲ＝１
０.０）が細胞内に多量に蓄積される。従って、本発明
によれば、生理活性を有する新規物質の発見や、有用な
物質を合成するための新しい原料の提供が可能になると
期待される。
【００１７】また、従来法では植物から取得することが
困難であるとされていた中間体を、本発明によば効率良
く取得することができる点にも大きな特徴がある。例え
ば、植物体内において、物質Ａが酵素αの働きにより中
間体Ｂになり、さらにそれが酵素βによって物質Ｃに変
化する反応系を仮定する。このとき、物質Ａから中間体
Ｂへの反応速度よりも、中間体Ｂから物質Ｃへの反応速
度の方が速いとすると、中間体Ｂを取得するのは極めて
困難になる。そこで、本発明によって酵素βの活性を弱
めるエリシターを作用させれば、植物細胞内に中間体Ｂ
が蓄積しこれを取得することが可能になる。また、母植
物中に存在する物質Ａ、Ｂ、Ｃの合成に関与する酵素の
発現様式は脱分化の進行に伴って大きく変化し、物質Ｂ
から物質Ｃへの転換酵素が活性を発現しないため、新た
に蓄積する物質Ｂを大量に効率良く取得できる。従っ
て、本発明によれば従来は取得することが困難であった
不安定な物質や存在時間の短い物質を得ることが可能に
なり、その応用範囲は極めて広い期待される。
困難であるとされていた中間体を、本発明によば効率良
く取得することができる点にも大きな特徴がある。例え
ば、植物体内において、物質Ａが酵素αの働きにより中
間体Ｂになり、さらにそれが酵素βによって物質Ｃに変
化する反応系を仮定する。このとき、物質Ａから中間体
Ｂへの反応速度よりも、中間体Ｂから物質Ｃへの反応速
度の方が速いとすると、中間体Ｂを取得するのは極めて
困難になる。そこで、本発明によって酵素βの活性を弱
めるエリシターを作用させれば、植物細胞内に中間体Ｂ
が蓄積しこれを取得することが可能になる。また、母植
物中に存在する物質Ａ、Ｂ、Ｃの合成に関与する酵素の
発現様式は脱分化の進行に伴って大きく変化し、物質Ｂ
から物質Ｃへの転換酵素が活性を発現しないため、新た
に蓄積する物質Ｂを大量に効率良く取得できる。従っ
て、本発明によれば従来は取得することが困難であった
不安定な物質や存在時間の短い物質を得ることが可能に
なり、その応用範囲は極めて広い期待される。
【００１８】以上述べたように、本発明は、植物が生産
する天然有機化合物（例えば、アルカロイド、テルペ
ン、フェノール性化合物、色素成分）をはじめとする様
々な物質を効率良く取得して、医薬、農薬、食品、香料
などの幅広い分野に利用することが可能である。
する天然有機化合物（例えば、アルカロイド、テルペ
ン、フェノール性化合物、色素成分）をはじめとする様
々な物質を効率良く取得して、医薬、農薬、食品、香料
などの幅広い分野に利用することが可能である。
【００１９】
【実施例】以下に実施例を挙げて本発明を具体的に説明
するが、これらの実施例は本発明の範囲を限定するもの
ではない。
するが、これらの実施例は本発明の範囲を限定するもの
ではない。
【００２０】実施例１ 酵母エキス（ナカライ）２００ｇに脱イオン水１リット
ルとメタノール４リットルを添加して撹拌し、室温に２
４時間放置した。上澄を除去し、残留した沈殿物に再び
脱イオン水１リットルとメタノール４リットルを添加し
て撹拌し、室温に２４時間放置した。上澄を除去し残留
した沈殿物に脱イオン水１リットルを添加し、陰イオン
交換樹脂（Diaion SA20A）に通し、溶出液をナス型フラ
スコに入れて蒸留器で乾固した（４.２ｇ）。これに脱
イオン水を添加して５００mlにして、部分精製酵母エキ
スを得た。
ルとメタノール４リットルを添加して撹拌し、室温に２
４時間放置した。上澄を除去し、残留した沈殿物に再び
脱イオン水１リットルとメタノール４リットルを添加し
て撹拌し、室温に２４時間放置した。上澄を除去し残留
した沈殿物に脱イオン水１リットルを添加し、陰イオン
交換樹脂（Diaion SA20A）に通し、溶出液をナス型フラ
スコに入れて蒸留器で乾固した（４.２ｇ）。これに脱
イオン水を添加して５００mlにして、部分精製酵母エキ
スを得た。
【００２１】無菌的に生育させたアルファルファ子葉を
無菌的に切り出して、２,４ーＤを含むＭＳ培地で脱分
化させた。脱分化開始後０日目、３日目、５日目、７日
目および１０日目にそれぞれ細胞を取り出し、一部を部
分精製酵母エキスからなるエリシター溶液に浸漬して１
８℃で４８時間暗所にて回転培養した。また、残りの細
胞を、対照のためにエリシター溶液に浸漬せず１８℃で
４８時間暗所にて回転培養した。回転培養後、試料を濾
過して細胞塊と濾液に分離した。
無菌的に切り出して、２,４ーＤを含むＭＳ培地で脱分
化させた。脱分化開始後０日目、３日目、５日目、７日
目および１０日目にそれぞれ細胞を取り出し、一部を部
分精製酵母エキスからなるエリシター溶液に浸漬して１
８℃で４８時間暗所にて回転培養した。また、残りの細
胞を、対照のためにエリシター溶液に浸漬せず１８℃で
４８時間暗所にて回転培養した。回転培養後、試料を濾
過して細胞塊と濾液に分離した。
【００２２】濾液を酢酸エチルで抽出し、ＨＰＬＣで分
析した［展開液：メタノールー水（７：３）、流速：
０.５ml/分、検出波長：２５４nm］。ｔＲ＝４.６、６.
３、８.０、１４.８および１６.４の成分について、２
５４nmのピーク面積と脱分化の日数との関係を図１に示
した。
析した［展開液：メタノールー水（７：３）、流速：
０.５ml/分、検出波長：２５４nm］。ｔＲ＝４.６、６.
３、８.０、１４.８および１６.４の成分について、２
５４nmのピーク面積と脱分化の日数との関係を図１に示
した。
【００２３】また、細胞塊をアセトンで抽出して、同様
にＨＰＬＣで分析した。ｔＲ＝８.０、１１.６および１
４.８の成分について、その量と脱分化の日数との関係
を図２に示した。ｔＲ＝８.０とｔＲ＝１４.８の成分は
機器分析の結果、既知物質である４',７ージヒドロキシ
フラボンとフォルモノネチンと同定された。
にＨＰＬＣで分析した。ｔＲ＝８.０、１１.６および１
４.８の成分について、その量と脱分化の日数との関係
を図２に示した。ｔＲ＝８.０とｔＲ＝１４.８の成分は
機器分析の結果、既知物質である４',７ージヒドロキシ
フラボンとフォルモノネチンと同定された。
【００２４】実施例２ 部分精製した酵母エキスの代わりに未精製の酵母エキス
を用いて実施例１と同一の操作を行った。細胞塊をアセ
トンで抽出し、ＨＰＬＣで分析した結果を図３に示し
た。
を用いて実施例１と同一の操作を行った。細胞塊をアセ
トンで抽出し、ＨＰＬＣで分析した結果を図３に示し
た。
【００２５】参考例 無菌的に生育させたエンドウ実生の茎から植物片を切り
出して、植物ホルモン組成ＮＡＡ１０．７μＭ、６ＢＡ
４．４μＭのＭＳ培地上において２６℃暗所で脱分化さ
せた。脱分化開始後０日目、２日目、４日目、６日目お
よび８日目にそれぞれ細胞を取り出し、一部をキトサン
水溶液（４ｍｇ／ｍｌ）に浸漬して２５℃で２４時間暗
所にて回転培養した。また、残りの細胞を、対照のため
にキトサン水溶液に浸漬せずに２５℃で２４時間暗所に
て回転培養した。
出して、植物ホルモン組成ＮＡＡ１０．７μＭ、６ＢＡ
４．４μＭのＭＳ培地上において２６℃暗所で脱分化さ
せた。脱分化開始後０日目、２日目、４日目、６日目お
よび８日目にそれぞれ細胞を取り出し、一部をキトサン
水溶液（４ｍｇ／ｍｌ）に浸漬して２５℃で２４時間暗
所にて回転培養した。また、残りの細胞を、対照のため
にキトサン水溶液に浸漬せずに２５℃で２４時間暗所に
て回転培養した。
【００２６】回転培養後、試料を濾過して得た細胞塊を
アセトンで抽出し、ＨＰＬＣで分析した。ｔＲ＝１０.
０と２０.０の成分について、検出波長２８５nmのピー
ク面積と脱分化の日数との関係を図４に示した。また、
検出波長を２５４nm、２８５nmおよび３１０nmとして同
様の分析を行ったところ、ｔＲ＝２０.０はｔＲ＝１０.
０とほぼ同じ比率でピーク面積が変化していることが確
認された。
アセトンで抽出し、ＨＰＬＣで分析した。ｔＲ＝１０.
０と２０.０の成分について、検出波長２８５nmのピー
ク面積と脱分化の日数との関係を図４に示した。また、
検出波長を２５４nm、２８５nmおよび３１０nmとして同
様の分析を行ったところ、ｔＲ＝２０.０はｔＲ＝１０.
０とほぼ同じ比率でピーク面積が変化していることが確
認された。
【００２７】ｔＲ＝１０.０の成分は標品との比較によ
り（＋）ピサチンと同定され、また、ｔＲ＝２０.０の
成分は下記の1Ｈ ＮＭＲデータより文献未記載の新規物
質２ーヒドロキシピサチンと同定された。1 Ｈ ＮＭＲ：２.３３、３.８３、３.９５、４.１３、
５.２１、５.２６、５.８８、５.９１、６.３８、６.４
４、６.７７，６.９７
り（＋）ピサチンと同定され、また、ｔＲ＝２０.０の
成分は下記の1Ｈ ＮＭＲデータより文献未記載の新規物
質２ーヒドロキシピサチンと同定された。1 Ｈ ＮＭＲ：２.３３、３.８３、３.９５、４.１３、
５.２１、５.２６、５.８８、５.９１、６.３８、６.４
４、６.７７，６.９７
【００２８】
【発明の効果】本発明の脱分化初期細胞系による物質の
生産方法によれば、植物細胞から所望の化学物質を時間
的・量的に効率良く生産することができる。また、従来
は取得困難とされていた物質も効率良く得ることができ
る。
生産方法によれば、植物細胞から所望の化学物質を時間
的・量的に効率良く生産することができる。また、従来
は取得困難とされていた物質も効率良く得ることができ
る。
【図面の簡単な説明】
【図１】脱分化からの日数と細胞から放出される物質量
との関係を示したものである。
との関係を示したものである。
【図２】脱分化からの日数と細胞塊内に蓄積される物質
量との関係を示したものである。
量との関係を示したものである。
【図３】脱分化からの日数と細胞塊内に蓄積される物質
量との関係を示したものである。
量との関係を示したものである。
【図４】脱分化からの日数と細胞から放出される物質量
との関係を示したものである。
との関係を示したものである。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 田井 章博 香川県高松市壇紙町796−１ (72)発明者 中本 泰子 広島県広島市安芸区船越４−５−３ (56)参考文献 Ｂｉｏｓｃｉ．，Ｖｏｌ．37Ｃ，Ｎ ｏ．７−８，（1982），ｐ．724−726 (58)調査した分野(Int.Cl.6，ＤＢ名) C12P 17/06 C12N 5/04 ＢＩＯＳＩＳ（ＤＩＡＬＯＧ)
Claims (1)
- 【請求項１】アルファルファの脱分化初期の細胞塊に酵
母エキスを添加して培養し、抽出することによって、
４’，７−ジヒドロキシフラボンを製造する方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2402423A JP2823702B2 (ja) | 1990-12-14 | 1990-12-14 | 脱分化初期細胞系による物質の生産方法 |
Applications Claiming Priority (1)
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| JP2402423A JP2823702B2 (ja) | 1990-12-14 | 1990-12-14 | 脱分化初期細胞系による物質の生産方法 |
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| Ｂｉｏｓｃｉ．，Ｖｏｌ．３７Ｃ，Ｎｏ．７−８，（１９８２），ｐ．７２４−７２６ |
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