JP2660175B2 - キクイモ由来のレクチンおよびその分離精製法 - Google Patents
キクイモ由来のレクチンおよびその分離精製法Info
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Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は，キク科の植物であるキ
クイモ（学名：Helianthus tuberosus）から得られた新
規レクチンおよび該レクチンの分離精製法に関する。
クイモ（学名：Helianthus tuberosus）から得られた新
規レクチンおよび該レクチンの分離精製法に関する。
【０００２】
【従来の技術】レクチンは特定の構造をもった糖に結合
し，血球や細胞を凝集したり，多糖類や糖蛋白質を沈降
させる特性をもった蛋白質の総称であり，特定の物質の
名称ではない。レクチン活性をもつ蛋白質は植物，動
物，微生物など広く生物界から発見されており，糖に対
する特性に基き，いくつかのグループに大別されてい
る。
し，血球や細胞を凝集したり，多糖類や糖蛋白質を沈降
させる特性をもった蛋白質の総称であり，特定の物質の
名称ではない。レクチン活性をもつ蛋白質は植物，動
物，微生物など広く生物界から発見されており，糖に対
する特性に基き，いくつかのグループに大別されてい
る。
【０００３】通常，レクチンは複数の糖結合サイトを持
つために細胞凝集能を示すが，単一細胞の懸濁液を必要
とするフローサイトメーターおよびセルソーターを用い
た細胞表層糖鎖の解析，細胞分画などにレクチンを用い
る場合，細胞を凝集させないことが必要である。そのた
め，使用する細胞株でレクチンが凝集を起こさない閾値
を求め，その濃度内で実験操作を行ったり，反応温度を
下げることで凝集反応を遅らせたり，また，化学的処理
により一価単量体を調製するなどの工夫が必要である。
しかしながら，酸性条件では凝集活性は失われるが，糖
結合活性は保持するという特徴を有する本レクチンを用
いれば，このような操作は不要であり，ｐＨを５．０以
下にするだけでよく，非常に有利である。
つために細胞凝集能を示すが，単一細胞の懸濁液を必要
とするフローサイトメーターおよびセルソーターを用い
た細胞表層糖鎖の解析，細胞分画などにレクチンを用い
る場合，細胞を凝集させないことが必要である。そのた
め，使用する細胞株でレクチンが凝集を起こさない閾値
を求め，その濃度内で実験操作を行ったり，反応温度を
下げることで凝集反応を遅らせたり，また，化学的処理
により一価単量体を調製するなどの工夫が必要である。
しかしながら，酸性条件では凝集活性は失われるが，糖
結合活性は保持するという特徴を有する本レクチンを用
いれば，このような操作は不要であり，ｐＨを５．０以
下にするだけでよく，非常に有利である。
【０００４】培養細胞であるカルスを材料にレクチンを
分離精製しようとする試みは，ダイズなど２，３の例が
知られているだけであり，キク科植物ではカルスなどの
培養細胞からレクチンを精製した例はない。
分離精製しようとする試みは，ダイズなど２，３の例が
知られているだけであり，キク科植物ではカルスなどの
培養細胞からレクチンを精製した例はない。
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】 本発明
が解決しようとする課題は，キク科植物であるキクイモ
からレクチンを発見し，性質を明らかにすると共に，複
合糖類，微生物，細胞などの分離，除去，検出，解析，
増殖制御などに利用でき，産業上有用な性質をもつ新規
レクチンを提供することにある。
が解決しようとする課題は，キク科植物であるキクイモ
からレクチンを発見し，性質を明らかにすると共に，複
合糖類，微生物，細胞などの分離，除去，検出，解析，
増殖制御などに利用でき，産業上有用な性質をもつ新規
レクチンを提供することにある。
【０００６】
【課題を解決するための手段】本発明によれば，課題の
主たるものはキクイモ（Helianthus tuberosus）由来の
マンノース，グルコースおよびマンノースやグルコース
を構成糖とするオリゴ糖，特にαーマンノシド結合した
糖鎖と強い親和性をもち，分子量がｐＨ７．４の条件で
約３４０００であり，トリプシン処理したウサギ赤血球
に対する凝集活性にはＣａ2+などの金属イオンを要求せ
ず，ｐＨ７．０以下ではトリプシン処理したウサギ赤血
球に対する凝集活性が低下し，ｐＨ５．０で活性が完全
に失われるが，糖結合活性は保持するという性質を有す
るレクチンにある。
主たるものはキクイモ（Helianthus tuberosus）由来の
マンノース，グルコースおよびマンノースやグルコース
を構成糖とするオリゴ糖，特にαーマンノシド結合した
糖鎖と強い親和性をもち，分子量がｐＨ７．４の条件で
約３４０００であり，トリプシン処理したウサギ赤血球
に対する凝集活性にはＣａ2+などの金属イオンを要求せ
ず，ｐＨ７．０以下ではトリプシン処理したウサギ赤血
球に対する凝集活性が低下し，ｐＨ５．０で活性が完全
に失われるが，糖結合活性は保持するという性質を有す
るレクチンにある。
【０００７】すなわち，このレクチンはキクイモのカル
スを原料とし，硫安塩析，イオン交換処理後，マルトー
スをリガンドとするアフィニティークロマトグラフィー
により吸着，分離および分画することにより得ることが
できる。このレクチンは糖に対する活性阻害試験によ
り，マンノース，グルコースおよびマンノースやグルコ
ースを構成糖とするオリゴ糖，特にαーマンノシド結合
した糖鎖と強く反応する。また，分子量は高速液体クロ
マトグラフィーによるゲル濾過により，ｐＨ７．４の条
件で，約３４０００である。トリプシン処理したウサギ
赤血球に対する凝集活性にはＣａ2+，Ｍｇ2+，Ｍｎ2+を
添加した凝集反応試験から，これら金属イオンを要求し
ない。また，ｐＨ変動による凝集反応試験から，ｐＨ
７．０以下でトリプシン処理したウサギ赤血球に対する
凝集活性は減少し，ｐＨ５．０で活性は失われる。さら
に，ｐＨ５．０の条件下でマルトースをリガンドとする
アフィニティークロマトグラフィーを行うと，レクチン
は吸着，分離および分画され，サブユニットに解離し，
凝集活性は失われるが，糖結合活性は保持する。
スを原料とし，硫安塩析，イオン交換処理後，マルトー
スをリガンドとするアフィニティークロマトグラフィー
により吸着，分離および分画することにより得ることが
できる。このレクチンは糖に対する活性阻害試験によ
り，マンノース，グルコースおよびマンノースやグルコ
ースを構成糖とするオリゴ糖，特にαーマンノシド結合
した糖鎖と強く反応する。また，分子量は高速液体クロ
マトグラフィーによるゲル濾過により，ｐＨ７．４の条
件で，約３４０００である。トリプシン処理したウサギ
赤血球に対する凝集活性にはＣａ2+，Ｍｇ2+，Ｍｎ2+を
添加した凝集反応試験から，これら金属イオンを要求し
ない。また，ｐＨ変動による凝集反応試験から，ｐＨ
７．０以下でトリプシン処理したウサギ赤血球に対する
凝集活性は減少し，ｐＨ５．０で活性は失われる。さら
に，ｐＨ５．０の条件下でマルトースをリガンドとする
アフィニティークロマトグラフィーを行うと，レクチン
は吸着，分離および分画され，サブユニットに解離し，
凝集活性は失われるが，糖結合活性は保持する。
【０００８】
【実施例】以下に，実施例を挙げて本発明を更に詳しく
説明する。
説明する。
【０００９】キクイモ塊茎から，１．０ｍｇ／Ｌナフタ
レン酢酸，１．０ｍｇ／Ｌベンジルアミノプリンを含む
Ｍｕｒａｓｈｉｇｅ−Ｓｋｏｏｇの寒天培地を用い，２
６℃，４０日間，暗所で静置培養し得たカルス７００ｇ
に，２％イソアスコルビン酸を含む蒸留水６００ｍＬを
添加し，ポリトロンで２３×１０3，３分間破砕した。
これを８０００ｒｐｍ，２０分間４℃で遠心分離し，上
清を回収し，４５％飽和硫酸アンモニウムを添加する。
十分に溶解し，１時間以上放置した後，８０００ｒｐ
ｍ，２０分間，４℃で遠心分離した。ペレットを集め，
０．０１Ｍトリス緩衝液（ｐＨ７．４）で一晩透析し
た。透析した溶液はＤＥＡＥートヨパールイオン交換ク
ロマトグラフィーを行い，レクチン活性をもつ画分を回
収した。このときのカラムサイズは５．０×２７ｃｍ，
溶媒は０．０１Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ７．４），溶出は
０から０．６Ｍ塩化ナトリウムの直線濃度勾配という条
件で行った。次に，回収画分を集め，マルトースをリガ
ンドとするアガロースアフィニティークロマトグラフィ
ーを行った。このときのカラムサイズは１．５×２．０
ｃｍ，溶媒は０．１５Ｍ塩化ナトリウムを添加した０．
０１Ｍリン酸緩衝液（以下，これをＰＢＳと略す）（ｐ
Ｈ７．４），溶出は０．１Ｍマルトースを含むＰＢＳと
いう条件で行った。この結果を図１に示す。レクチン活
性をもつ画分を回収し，ネイティブ電気泳動（Ｌａｅｍ
ｍｌｉ法：Nature誌 1963年198巻865-866頁）を行っ
た。その結果，２つのバンドが確認された。これを図２
に示す。２つのバンドをゲルから切り出し，蛋白質回収
器を用いてゲルからの回収を試みた。回収された２つの
蛋白質は共にレクチン活性をもち，サブユニットの分子
量とアミノ酸組成に僅かな違いが認められたが、レクチ
ンとしての性質に違いはなかった。それらをＨＴＡＩお
よびＨＴＡIIと名づけた。このときのレクチン活性の測
定方法は，トリプシン処理したウサギ赤血球の凝集反応
を調べることで行い，１Ｕは凝集反応が陽性と判定され
た希釈系列の最高希釈度で表した。この実施例における
レクチンの精製結果を表１に示し，さらに，このときの
レクチンの性質を下記に示した。
レン酢酸，１．０ｍｇ／Ｌベンジルアミノプリンを含む
Ｍｕｒａｓｈｉｇｅ−Ｓｋｏｏｇの寒天培地を用い，２
６℃，４０日間，暗所で静置培養し得たカルス７００ｇ
に，２％イソアスコルビン酸を含む蒸留水６００ｍＬを
添加し，ポリトロンで２３×１０3，３分間破砕した。
これを８０００ｒｐｍ，２０分間４℃で遠心分離し，上
清を回収し，４５％飽和硫酸アンモニウムを添加する。
十分に溶解し，１時間以上放置した後，８０００ｒｐ
ｍ，２０分間，４℃で遠心分離した。ペレットを集め，
０．０１Ｍトリス緩衝液（ｐＨ７．４）で一晩透析し
た。透析した溶液はＤＥＡＥートヨパールイオン交換ク
ロマトグラフィーを行い，レクチン活性をもつ画分を回
収した。このときのカラムサイズは５．０×２７ｃｍ，
溶媒は０．０１Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ７．４），溶出は
０から０．６Ｍ塩化ナトリウムの直線濃度勾配という条
件で行った。次に，回収画分を集め，マルトースをリガ
ンドとするアガロースアフィニティークロマトグラフィ
ーを行った。このときのカラムサイズは１．５×２．０
ｃｍ，溶媒は０．１５Ｍ塩化ナトリウムを添加した０．
０１Ｍリン酸緩衝液（以下，これをＰＢＳと略す）（ｐ
Ｈ７．４），溶出は０．１Ｍマルトースを含むＰＢＳと
いう条件で行った。この結果を図１に示す。レクチン活
性をもつ画分を回収し，ネイティブ電気泳動（Ｌａｅｍ
ｍｌｉ法：Nature誌 1963年198巻865-866頁）を行っ
た。その結果，２つのバンドが確認された。これを図２
に示す。２つのバンドをゲルから切り出し，蛋白質回収
器を用いてゲルからの回収を試みた。回収された２つの
蛋白質は共にレクチン活性をもち，サブユニットの分子
量とアミノ酸組成に僅かな違いが認められたが、レクチ
ンとしての性質に違いはなかった。それらをＨＴＡＩお
よびＨＴＡIIと名づけた。このときのレクチン活性の測
定方法は，トリプシン処理したウサギ赤血球の凝集反応
を調べることで行い，１Ｕは凝集反応が陽性と判定され
た希釈系列の最高希釈度で表した。この実施例における
レクチンの精製結果を表１に示し，さらに，このときの
レクチンの性質を下記に示した。
【００１０】
【表１】 ──────────────────────────────────── 精製ステッフ゜ 総蛋白質 総赤血球凝集活性 比活性 回収率 (mg) (U) (U/mg蛋白質) (%) ━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━ 粗抽出液 998 1280000 1283 100 硫安塩析画分 351.3 1146880 3265 89.6 DEAEートヨハ゜ール クロマトク゛ラフィー画分 20.6 691200 33553 54.0 マルトースアカ゛ロースアフィニティー クロマトク゛ラフィー画分 4.65 552240 112310 43.1 調製用電気泳動 HTAＩ 2.80 147300 52607 11.5 HTAII 1.40 294500 210357 23.0 ────────────────────────────────────
【００１１】ＨＴＡＩおよびＨＴＡIIの高速液体クロマ
トグラフィーで測定した分子量は，共に約３４０００で
あった（図３）。このときのカラムは，ＴＳＫｇｅｌＧ
３０００ＳＷ，溶媒は０．３Ｍ塩化ナトリウムを含む５
０ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ７．４）であった。
トグラフィーで測定した分子量は，共に約３４０００で
あった（図３）。このときのカラムは，ＴＳＫｇｅｌＧ
３０００ＳＷ，溶媒は０．３Ｍ塩化ナトリウムを含む５
０ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ７．４）であった。
【００１２】ＳＤＳ電気泳動（Ｌａｅｍｍｌｉ法）を行
った結果，ＨＴＡＩは約１７０００の同一サブユニット
からなる２量体であり，ＨＴＡIIは約１８０００のサブ
ユニットと１７０００のサブユニットからなる２量体で
あった（図４）。
った結果，ＨＴＡＩは約１７０００の同一サブユニット
からなる２量体であり，ＨＴＡIIは約１８０００のサブ
ユニットと１７０００のサブユニットからなる２量体で
あった（図４）。
【００１３】ＨＴＡＩとＨＴＡIIのアミノ酸組成は非常
に類似し，ヒスチジン，システインおよびメチオニンは
検出されなかった（表２）。
に類似し，ヒスチジン，システインおよびメチオニンは
検出されなかった（表２）。
【００１４】糖に対するトリプシン処理されたウサギ赤
血球の活性阻害試験を行った結果，ＨＴＡＩとＨＴＡII
は共に同一の阻害活性を示し，特にマンノースオリゴ糖
である，（１−α−３，１−α−６）（１−α−３，１
−α−６）−マンノペンタオースで強い阻害が認められ
た（表３）。
血球の活性阻害試験を行った結果，ＨＴＡＩとＨＴＡII
は共に同一の阻害活性を示し，特にマンノースオリゴ糖
である，（１−α−３，１−α−６）（１−α−３，１
−α−６）−マンノペンタオースで強い阻害が認められ
た（表３）。
【００１５】ＨＴＡＩおよびＨＴＡIIの赤血球凝集活性
は，ｐＨ７．０以下で減少し，ｐＨ５．０で完全に活性
は失われた（図５）。
は，ｐＨ７．０以下で減少し，ｐＨ５．０で完全に活性
は失われた（図５）。
【００１６】トヨパールＨＷ−５５Ｓによるゲル濾過を
行った結果，ｐＨ５．０の条件下で，ＨＴＡＩおよびＨ
ＴＡIIは分子量約１７０００付近に溶出し，ｐＨ７．０
およびｐＨ８．０では３４０００付近に溶出した（図
６）。このときのカラムサイズは，２．５×４０ｃｍ，
溶媒はＰＢＳ（ｐＨ５．０，ｐＨ７．０または０．１５
Ｍ塩化ナトリウムを含むトリス緩衝液（ｐＨ８．０）で
あった。このことは，ＨＴＡＩおよびIIと名づけたレク
チンが共に，酸性条件下ではサブユニットの状態で存在
していることを示している。
行った結果，ｐＨ５．０の条件下で，ＨＴＡＩおよびＨ
ＴＡIIは分子量約１７０００付近に溶出し，ｐＨ７．０
およびｐＨ８．０では３４０００付近に溶出した（図
６）。このときのカラムサイズは，２．５×４０ｃｍ，
溶媒はＰＢＳ（ｐＨ５．０，ｐＨ７．０または０．１５
Ｍ塩化ナトリウムを含むトリス緩衝液（ｐＨ８．０）で
あった。このことは，ＨＴＡＩおよびIIと名づけたレク
チンが共に，酸性条件下ではサブユニットの状態で存在
していることを示している。
【００１７】ＰＢＳ（ｐＨ５．０）の酸性条件下で，マ
ルトースをリガンドとするアフィニティークロマトグラ
フィーを行った結果，ＨＴＡＩおよびＨＴＡIIはゲルに
吸着し，０．１Ｍマルトースを含むＰＢＳ（ｐＨ５．
０）で溶出された（図７）。このときのカラムサイズ
は，１．５×１．８ｃｍ，溶媒はＰＢＳ（ｐＨ５．０）
であった。このことは，サブユニットにわかれているＨ
ＴＡＩおよびＨＴＡIIと名づけたレクチンが共に，糖結
合活性を保持していることを示している。
ルトースをリガンドとするアフィニティークロマトグラ
フィーを行った結果，ＨＴＡＩおよびＨＴＡIIはゲルに
吸着し，０．１Ｍマルトースを含むＰＢＳ（ｐＨ５．
０）で溶出された（図７）。このときのカラムサイズ
は，１．５×１．８ｃｍ，溶媒はＰＢＳ（ｐＨ５．０）
であった。このことは，サブユニットにわかれているＨ
ＴＡＩおよびＨＴＡIIと名づけたレクチンが共に，糖結
合活性を保持していることを示している。
【００１８】
【表２】 ──────────────────── アミノ酸 モル％ ─────────── HTAＩ HTAII ━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━ Asx 16 16 Glx 12 18 Ser 8 14 Gly 29 33 Arg 3 3 Thr 10 9 Ala 11 12 Tyr 7 7 Val 12 8 Ile 16 14 His ND ND Leu 9 10 Phe 7 6 Lys 2 4 Cys ND ND Pro 7 3 Met ND ND ──────────────────── ND,検出されない。
【００１９】
【表３】 ──────────────────────────── 糖類 最少赤血球凝集活性阻害濃度 (mM) ━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━ Nーアセチルク゛ルコサミン 10 ク゛ルコース 10 メチルーβーク゛ルコシト゛ 15 メチルーαーク゛ルコシト゛ 7 イソマルトース 7 トレハロース 5 マルトース 7 マルトトリオース 7 マルトトリイトール 10 マルトテトラオース 7 マルトテトライトール 10 マルトヘ゜ンタオース 7 マンノース 5 メチルーαーマンノシト゛ 1 1ーαー3ーマンノヒ゛オース 1.2 1ーαー6ーマンノヒ゛オース 1.2 1ーαー3,1ーαー6ーマンノトリオース 0.6 (1ーαー3,1ーαー6)(1ーαー3, 1ーαー6)ーマンノヘ゜ンタオース 0.15 ────────────────────────────
【００２０】
【発明の効果】本発明はキク科植物であるキクイモから
得られた新規レクチンであり，大量かつ安定に供給でき
る細胞培養技術を利用した原材料を使用しているため，
工業生産が容易である。また，このレクチンは分離精製
の容易さ，活性の安定性，活性発現に金属イオンを要求
しないこと，酸性条件下で凝集活性は起こさないが，糖
結合活性は保持する性質をもつことなど，既知のレクチ
ンに比べて，いくつかの優位な特徴をもっている。従っ
て，マンノースやグルコースを構成成分とするオリゴ糖
や複合糖類の分離・除去・製造，マンノース糖鎖をもつ
複合糖類，微生物，細胞などの分離・除去・検出・解析
・増殖制御など，利用分野は種々のものが考えられ，産
業上有用なレクチンとして大いに期待できる。
得られた新規レクチンであり，大量かつ安定に供給でき
る細胞培養技術を利用した原材料を使用しているため，
工業生産が容易である。また，このレクチンは分離精製
の容易さ，活性の安定性，活性発現に金属イオンを要求
しないこと，酸性条件下で凝集活性は起こさないが，糖
結合活性は保持する性質をもつことなど，既知のレクチ
ンに比べて，いくつかの優位な特徴をもっている。従っ
て，マンノースやグルコースを構成成分とするオリゴ糖
や複合糖類の分離・除去・製造，マンノース糖鎖をもつ
複合糖類，微生物，細胞などの分離・除去・検出・解析
・増殖制御など，利用分野は種々のものが考えられ，産
業上有用なレクチンとして大いに期待できる。
【図１】マルトースとリガンドとするアガロースアフィ
ニティークロマトグラフィーの溶出パターンを示す。
ニティークロマトグラフィーの溶出パターンを示す。
【図２】図１に示されるクロマトグラフィーを実施して
得た活性画分を，ネイティブ電気泳動した際の泳動パタ
ーン（図中の３），その結果得られる２つのバンドを分
離回収したときに得られる２種類のレクチンであるＨＴ
ＡＩ（図中の１）およびＨＴＡII（図中の２）の泳動パ
ターンを示す。
得た活性画分を，ネイティブ電気泳動した際の泳動パタ
ーン（図中の３），その結果得られる２つのバンドを分
離回収したときに得られる２種類のレクチンであるＨＴ
ＡＩ（図中の１）およびＨＴＡII（図中の２）の泳動パ
ターンを示す。
【図３】レクチンの分子量（図中の○印）をマーカー蛋
白質（１：シトクローム，２：馬ミオグロビン，３：卵
アルブミン，４：牛血清アルブミン）とともに示す。
白質（１：シトクローム，２：馬ミオグロビン，３：卵
アルブミン，４：牛血清アルブミン）とともに示す。
【図４】精製されたＨＴＡＩとＨＴＡIIをＳＤＳ電気泳
動にした際の泳動パターン（１：ＨＴＡII，２：ＨＴＡ
Ｉ，３および４：マーカー蛋白質）を示す。
動にした際の泳動パターン（１：ＨＴＡII，２：ＨＴＡ
Ｉ，３および４：マーカー蛋白質）を示す。
【図５】レクチン（ＨＴＡＩ及びＨＴＡII）の赤血球凝
集活性に及ぼすｐＨの影響を示す。
集活性に及ぼすｐＨの影響を示す。
【図６】ｐＨ５．０，ｐＨ７．０およびｐＨ８．０で，
レクチン（ＨＴＡＩおよびＨＴＡII）をゲル濾過したと
きのレクチンの溶出パターンを，マーカー蛋白質の溶出
パターンとともに示す。
レクチン（ＨＴＡＩおよびＨＴＡII）をゲル濾過したと
きのレクチンの溶出パターンを，マーカー蛋白質の溶出
パターンとともに示す。
【図７】ｐＨ５．０の条件下で，精製レクチンを，マル
トースをリガンドとするアフィニティークロマトグラフ
ィーに供したときの溶出パターンを示す。
トースをリガンドとするアフィニティークロマトグラフ
ィーに供したときの溶出パターンを示す。
Claims (2)
- 【請求項１】 キクイモ(Helianthus tuberosus)由来の
レクチンであって，マンノース，グルコースおよびマン
ノースやグルコースを構成糖とするオリゴ糖，特にαー
マンノシド結合した糖鎖と強い親和性をもち，分子量が
ｐＨ７．４の条件で約３４０００であり，トリプシン処
理したウサギ赤血球に対する凝集活性にはＣａ2+などの
金属イオンを要求せず，ｐＨ７．０以下ではトリプシン
処理したウサギ赤血球に対する凝集活性が低下し，ｐＨ
５．０で活性が完全に失われるが，糖結合活性は保持す
るという性質を有するレクチン。 - 【請求項２】 マルトースをリガンドとするアフィニテ
ィークロマトグラフィーを用いてキクイモ（Helianthus
tuberosus）から請求項１のレクチンを吸着，分離，お
よび分画することを特徴とする請求項１のレクチンの分
離精製法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP28141694A JP2660175B2 (ja) | 1994-10-19 | 1994-10-19 | キクイモ由来のレクチンおよびその分離精製法 |
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| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP28141694A JP2660175B2 (ja) | 1994-10-19 | 1994-10-19 | キクイモ由来のレクチンおよびその分離精製法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH08119994A JPH08119994A (ja) | 1996-05-14 |
| JP2660175B2 true JP2660175B2 (ja) | 1997-10-08 |
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ID=17638862
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| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
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|---|---|
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|---|---|---|---|---|
| WO2007139028A1 (ja) * | 2006-05-29 | 2007-12-06 | Kaneka Corporation | 分離材料およびそれを用いた細胞等の採取方法 |
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1994
- 1994-10-19 JP JP28141694A patent/JP2660175B2/ja not_active Expired - Fee Related
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