JP2648472B2 - β−ラクタム化合物及びその製造方法 - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】この発明は、β−ラクタム化
合物、特に新規なクラバム誘導体に関する。またこの発
明はクラバム誘導体の製造法に関する。イギリス国特許
第1,508,977号明細書には、クラバラン酸として知られ
ているクラバム誘導体が記載され、これはストレプトミ
セス・クラブリゲルス（Streptomyces clavuligerus）
ＡＴＣＣ27064号もしくはその高収率産生の変異菌株が
産生する化合物である。クラバラン酸は下記構造式
（Ａ）で表され、その絶対立体化学構造と番号付け方式
を示す。

【０００２】

【化１７】

【０００３】したがって、クラバラン酸はＺ−（２Ｒ，
５Ｒ）−（β−ヒドロキシエチリデン）−７−オキソ−
４−オキサ−１−アザビシクロ〔３．２．０〕ヘプタン
−２−カルボン酸である。クラバラン酸は、β−ラクタ
マーゼ酵素類の有効な阻害剤であり、β−ラクタマーゼ
の作用を受けやすいβ−ラクタム構成物質類が分解する
のを防止するので、非常に重要な価値ある化合物であ
る。

【０００４】日本特許第２５３０８２５号には、式
（Ｉ）：

【０００５】

【化１８】

【０００６】で表される化合物、その塩または保護され
た形態の化合物が記載されている。式（Ｉ）の化合物お
よびその塩が有用なのは、それに開示しているようにク
ラバラン酸の製造法において中間体としてはたらく性能
を有することにある。式（Ｉ）の化合物、その塩もしく
は保護形態の化合物は、式（II）：

【０００７】

【化１９】

【０００８】で表される前駆化合物もしくはその塩を、
所望の環化反応をなすことができる酵素系で処理し、そ
の後、必要もしくは所望により、生成物をその塩もしく
は保護された形態の化合物に変換することから製造され
る。

【０００９】この発明は、式（II）の化合物、その塩ま
たは保護形態の化合物を提供するものである。式（II）
の化合物は、二つの不斉炭素原子を有し、式中星印でマ
ークしてある。それ故これらの化合物には四つの立体異
性体がある。この発明は、他の異性体を含有しないもの
とか、または他の異性体といずれかの比率で混合したも
のであろうとも、式（II）の化合物の立体異性体全部を
包含し、したがって例えば鏡像体類のラセミ混合物を包
含する。式（II）の化合物もしくはその塩の溶媒和物、
特に水和物もこの発明の範囲に含まれる。またこの発明
は、式（II）の化合物の保護された誘導体、すなわち１
以上の官能基が保護された形態の化合物も含まれる。し
たがってそのカルボキシ基が保護されていてもよく、ア
ミノ基が保護されていてもよく、また両者が保護されて
いてもよい。式（II）の化合物やこの明細書に記載され
ている他の化合物のかような保護された形態のものは、
“保護形態（protected form）”の用語に含められる。
さらに、その明細書に記載の化合物に適用される“保護
形態”の用語は“マスクされた”中間体類も包含し、こ
れらは、一つの官能基を他の基に変換することができる
（分子の残余の部分は実質的に変化しないままで残
る）。例えば、アミンの好ましいマスクされた形態に
は、還元反応によって所望のアミンに変換できる対応す
るアジド類およびシアノ類が含まれる（対応するシアノ
化合物は、そのシアノ基の一つの炭素原子を除いて、側
鎖中に一つ少ない炭素原子を有する）。

【００１０】式（II）の化合物のカルボキシ基とアミノ
基の適切な保護基には、式（Ｉ）の化合物のカルボキシ
基とアミノ基を保護するのに適切な基が含まれる。

【００１１】エステル形成性カルボキシ保護基の適切な
ものには、任意に置換された、Ｃ_1-6アルキル、Ｃ_2-6ア
ルケニル、Ｃ_2-6アルキニル、Ｃ_3-7シクロアルキル、ア
リール、アリールＣ_1-6アルキルおよびトリＣ_1-6アルキ
ルシリル基が含まれる。この明細書において用いられる
“アリール”という用語は、フェニルおよびナフチル基
と、それぞれ五つまでの下記基で任意に置換された基を
含む。弗素原子、塩素原子、Ｃ_1-6アルキル、Ｃ_1-6アル
コキシ、ハロ（Ｃ_1-6）アルキル、ヒドロキシ、アミ
ノ、カルボキシ、Ｃ_1-6アルコキシカルボニル、アリー
ルオキシカルボニル、Ｃ_1-6アルコキシカルボニル（Ｃ
_1-6）アルキル、ニトロ、アリールオキシカルボニルオ
キシ、アリールＣ_1-6アルキルオキシカルボニルオキ
シ、Ｃ_1-6アルキルオキシカルボニルオキシ、Ｃ_1-6アル
キルカルボニルオキシ、アリールカルボニルオキシ、ア
リールＣ_1-6アルキルカルボニルオキシまたはアリール
Ｃ_1-6アルキルオキシカルボニル基である。

【００１２】“ハロゲン”という用語は、弗素原子、臭
素原子およびヨウ素原子を意味する。したがってハロお
よびハロゲン化物という用語は上記に対応して解釈され
るべきである。この明細書に記載されている、保護基の
任意の置換基の例としては、ハロゲン原子、ヒドロキ
シ、Ｃ_1-6アルコキシ、Ｃ_1-6アルキルチオ、シアノ、ニ
トロ、カルボキシ、カルボン酸Ｃ_1-6アルキルエステ
ル、カルバモイル、アミノ、モノ（Ｃ_1-6）アルキルア
ミノおよびジ（Ｃ_1-6）アルキルアミノ基から選択され
る三つまでの基（同一もしくは異なってもよい）が挙げ
られる。

【００１３】特に適切なエステル形成カルボキシ保護基
は、通常に条件下で除去しうる基である。かような基に
は、メチルおよびエチル基のようなＣ_1-6アルキル基、
ベンジル、ｐ−メトキシベンジル、ベンゾイルメチル、
ｐ−ニトロベンジル、４−ピリジルメチル、２，２，
２，−トリクロロエチル、２，２，２−トリブロモエチ
ル、ｔ−ブチル、ｔ−アミル、アリル、ジフェニルメチ
ル、トリフェニルメチル、アダマンチル、２−ベンゾイ
ルオキソフェニル、４−メチルチオフェニル、テトラヒ
ドロフリ−２−イル、テトラヒドロピラン−２−イル、
ペンタクロロフェニル、アセトニル、ｐ−トルエンスル
フォニルエチル、メトキシメチル基、シリル基、スタン
ニル基または燐含有基が含まれる。

【００１４】カルボキシ基は、上記のいずれのエステル
基からでも、その特定のエステル基に対して適切な通常
の方法、例えば酸触媒加水分解法および塩基触媒加水分
解法、酵素触媒加水分解法または分子の残余部分が実質
的に変化しない条件下での水素添加分解反応によって、
再生することができる。 式（II）の化合物のカルボキ
シ基の好ましい保護基はベンジル基である。

【００１５】アミノ基の適切な保護基は、容易に脱離さ
せることのできる基である。アミノ基を保護できる方法
および得られた保護された誘導体の脱離法に関する広範
な議論が、例えばT.W. Greene著“Protective Groups i
n Organic Synthesis”（Wiley-Interscience, New Yor
k,1981)に記載されている。アミノ保護基の適切な例に
は、上記のマスキング基が含まれる。すなわち、任意に
置換されたＣ_1-6アルキルカルボニル；アリールカルボ
ニル；アリールＣ_1-6アルキルカルボニル；（ヘテロシ
クリル）カルボニル（そのヘテルシクリル基は酸素原
子、窒素原子および硫黄原子から選択される四つまでの
異原子を有する５員もしくは６員の芳香族環である）；
そのフェニルリングが、Ｃ_1-4アルキル、Ｃ_1-4アルコキ
シ、トリフルオロメチル、ハロゲン原子またはニトロか
ら選択される一つもしくは二つの置換基で任意に置換さ
れたベンジルオキシカルボニル基のようなカルバメート
を与える基；ｔｅｒ−ブトキシカルボニル基のようなＣ
_1-4アルキルオキシカルボニル基；または２，２，２−
トリクロロエトキシカルボニルもしくは１−クロロエト
キシカルボニルのような、Ｃ_1-4アルコキシ、ハロゲン
原子もしくはニトロ基から選択される三つまでの置換基
によってそのアルキル基が任意に置換されたＣ_1-4アル
キルオキシカルボニル基である。

【００１６】式（II）の化合物のアミノ基の好ましい保
護基にはベンジルオキシカルボニル基とアジド基が含ま
れる。

【００１７】式（II）の化合物のヒドロキシ基の適切な
保護基には、T. W. Greeneが前記文献で論じた基が含ま
れる。特に適切な保護基としては次のようなエステル類
を与える基が含まれる。例えば、アセテートのような任
意に置換されたＣ_1-6アルカノイルエステル基；任意に
置換されたＣ_1-6のアルキルカーボネート基およびアリ
ールカーボネート基；任意に置換されたＣ_1-6アルキ
ル、アリール、およびアリールＣ_1-6アルキルエーテル
基；任意に置換されたトリ−Ｃ_1-6アルキルシリルエー
テル；並びにアセタール類（例えば、テトラヒドロピラ
ニルオキシ誘導体，ＴＨＰエーテルと記載される場合が
ある）である。

【００１８】式（II）の化合物は、単離された形態で核
酸物質を含有しないものが望ましい。この化合物は、例
えば実質的に純粋なものが適切であり、少なくとも純度
が７５％のものがより適切であり、少なくとも純度が８
５％のもの例えば純度９０〜１００％のものが好まし
い。単離された形態として好ましいものとして固体のも
のが挙げられるが、より好ましいのは結晶形態である。
しかし、上記のことから、式（II）の化合物を純粋でな
い形態で用いることが妨げられるものではないと解され
るべきである。

【００１９】この発明の化合物を有機溶媒から結晶化も
しくは再結晶させるばあい、結晶化の溶媒が結晶生成物
内に存在していてもよい。この発明は、その権利範囲
に、かような溶媒和物を含む。同様にこの発明の化合物
は、水含有の溶媒から結晶化もしくは再結晶させてもよ
い。この場合、水和物が形成される。この発明は、その
権利範囲に、凍結乾燥のごとき方法で製造できる種々の
量の水を含有する化合物のみならず化学量論的水和物を
含むものである。

【００２０】式（II）の化合物は双性イオンの形態であ
ってもよい。式（II）の化合物の塩は、例えば酸付加
塩、金属塩、アンモニウム塩および置換アンモニウム
塩、例えば第三アミン塩であってもよい。塩は、カルボ
キシ基と末端アミノ基のいずれかもしくは両者に形成さ
せることができる。

【００２１】酸付加塩は、末端のアミノ基に形成させる
ことができ、例えば塩酸、臭化水素酸、オルト燐酸もし
くは硫酸のような無機酸、またはメタンスルフォン酸、
トルエンスルフォン酸、酢酸、プロピオン酸、乳酸、ク
エン酸、フマル酸、リンゴ酸、コハク酸、サリチル酸も
しくはアセチルサリチル酸のような有機酸の塩であって
もよい。

【００２２】金属塩はカルボキシル基に形成させること
ができ、例えばアルミニウム塩、例えばリチウム、ナト
リウム、カリウム、カルシウムおよびマグネシウム塩の
ようなアルカリ金属塩やアルカリ土類金属塩であっても
よい。置換アンモニウム塩としては、Ｃ_1-6アルキルア
ミンの塩でもよく、例えばトリエチルアミン；２−ヒド
ロキシエチルアミン、ビス（２−ヒドロキシエチル）ア
ミンもしくはトリ（２−ヒドロキシエチル）アミンのよ
うなヒドロキシ（Ｃ_1-6）アルキルアミン類；ビシクロ
ヘキシルアミンのようなシクロアルキルアミン類との塩
があり、またはプロカイン、ジベンジルピペリジン、Ｎ
−ベンジル−β−フェネチルアミン、デヒドロアビエチ
ルアミン、Ｎ，Ｎ’−ビスデヒドロアビエチルアミン、
グルカミン、Ｎ−メチルグルカミンまたはピリジン、コ
リジンもしくはキノリンのようなピリジン型塩基との塩
であってもよい。

【００２３】式（II）の化合物、その塩または保護形態
の特定の化合物として、次のものが含まれる。５−アミ
ノ−３−ヒドロキシ−２−（２−オキソアゼチジン−１
−イル）吉草酸（valeric acid）；５−ベンジルオキシ
カルボニルアミノ−３−ヒドロキシ−２−（２−オキソ
−アゼチジン−１−イル）吉草酸；ベンジル ５−ベン
ジルオキシカルボニルアミノ−３−ヒドロキシ−２−
（２−オキソアゼチジン−１−イル）バレレート（vale
rate）；およびベンジル ５−アジド−３−ヒドロキシ
−２−（２−オキソアゼチジン−１−イル）−バレレー
ト。

【００２４】式（II）の化合物は、式（III）；

【００２５】

【化２０】

【００２６】（式中、Ｘは脱離基、官能基の−ＣＯ
₂Ｈ，−ＯＨおよび−ＮＨ₂は保護されていてもよい）で
表される化合物を環化することによって製造できる。Ｘ
で表される脱離基は、その反応条件下で出発物質から開
裂し、所定の部位で反応を促進する基である。この基Ｘ
は、ヒドロキシ基、または任意にハロゲン原子で置換さ
れた硫酸エステルのようなエステル化されたヒドロキシ
基；臭素、塩素もしくはヨウ素のようなハロゲン基；ｐ
−トルエンスルフォニルオキシ（トシル基）もしくはメ
タンスルフォニルオキシ基（メシル基）のようなアリー
ル−もしくはアルキル−スルホニルオキシ基；またはア
ルキルオキソニウム塩であってもよい。

【００２７】上記の製造法は塩基性条件下で行うのが好
ましい。例えば水酸化ナトリウムもしくは水酸化カリウ
ムまたは水素化ナトリウムもしくは水素化カリウムの存
在下で行われる。環化反応は次のように行うことができ
る。 ａ）Ｘがハロゲン原子、アリール−もしくはアルキル−
スルフォニルオキシまたはアルコールのアルキルオキソ
ニウム塩の場合、例えばジメチルスルフォキシド、ジメ
チルホルムアミド、ヘキサメチルフォスフォルアミド、
ジクロロメタン、アセトニトリルもしくは酢酸エチルの
ような溶媒、またはこれら溶媒の混合物の存在下で行
う、 ｂ）Ｘがハロゲン原子またはクロロサルフェートエステ
ルのようなアルコールのサルフェートエステル基の場
合、テトラブチルアンモニウムバイサルフェートもしく
はテトラブチルアンモニウムハライド、またはベンジル
トリメチルアンモニウムハライドのごとき第四アンモニ
ウム塩の存在下、水性および／または有機溶液中で相転
移触媒法（phase transfer catalysis method）によっ
て行う、 ｃ）Ｘがヒドロキシの場合、（Ｃ₆Ｈ₅）₃Ｐ／Ｃ₂Ｈ₅Ｏ₂
ＣＮ＝ＮＣＯ₂Ｃ₂Ｈ₅のような適切な試薬の存在下で行
なう。

【００２８】化合物（III）中のアミノ基のＮ−保護基
の適切な例には、ペプチド化学において、この用途で通
常知られている基が含まれる。かような基の例として次
のものが含まれる。アセチル、クロロアセチル、トリフ
ルオロアセチル、ブチリル、ベンゾイル、フェニルアセ
チル、ピリジンカルボニルのようなカルボン酸基；エト
キシカルボニル、ベンゾイルオキシカルボニル、ｔ−ブ
トキシカルボニル、ビフェニルイソプロポキシカルボニ
ル、ｐ−メチルベンジルオキシカルボニル、ｐ−ニトロ
ベンジルオキシカルボニル、ｐ−ブロモベンジルオキシ
カルボニル、ｐ−フェニルアゾベンジルオキシカルボニ
ル、ｐ−（ｐ−メトキシフェニルアゾ）ベンジルオキシ
カルボニル、ｔ−アミルオキシカルボニル基のような炭
酸由来の酸の基；スルフォン酸もしくはｐ−トルエンス
ルフォン酸由来の酸の基；またはベンジル、トリチル、
ホルミル、フタロイル、ｏ−ニトロフェニルスルフェニ
ル、ベンジリデンまたはニトロ基のような他の基であ
る。好ましいＮ−保護基には、ｔ−ブトキシカルボニル
とベンジルオキシカルボニル基が含まれる。ある場合、
窒素原子は、前記基の二つ、例えばベンジル基とベンジ
ルオキシカルボニル基とで置換されてもよい。一方アミ
ノ基は、アジド基もしくはシアノ基の形態で保護されて
いてもよく、これは適切な方法、例えば還元反応によっ
て生成させることができる。

【００２９】得られた化合物中の保護基の除去は、保護
基の種類にしたがって適切な方法で行うことができる。
いくつかの典型的方法を挙げると次のとおりである。末
端アミノ基を保護する、ベンジルオキシカルボニル、ｐ
−ニトロベンジルオキシカルボニル、ｐ−ブロモベンジ
ルオキシカルボニル、ｐ−フェニルアゾベンジルオキシ
カルボニル、ｐ−（ｐ’−メトキシフェニルアゾ）ベン
ジルオキシカルボニルおよびトリチル基の、パラジウム
触媒（例えばパラジウム炭、パラジウム黒）の存在下で
の水素化反応；末端アミノ基を保護する、ベンジルオキ
シカルボニル、ｐ−ブロモベンジルオキシカルボニル、
ｐ−フェニルアゾベンジルオキシカルボニル、ｔ−ブト
キシカルボニル基の氷酢酸中臭素化水素での処理；末端
アミノ基を保護する、ベンジルオキシカルボニル、ｐ−
ブロモベンジルオキシカルボニルおよびトシル基の、液
体アンモニア中金属ナトリウムでの処理；末端アミノ基
を保護する、トリチル、ｔ−ブトキシカルボニル、ホル
ミルおよびベンジリデン基の、塩酸および／または酢酸
による処理である。代わりに、脱保護（deprotection）
は適切な加水分解酵素、例えばアミダーゼで行うことが
できる。末端のアジドもしくはシアノ基は、例えばパラ
ジウム触媒の存在下での水素添加反応によってアミノ基
に還元することができる。

【００３０】化合物（III）中の基−ＣＯ₂Ｈについての
カルボキシ基ブロッキング誘導体の適切な例として、こ
のカルボン酸の塩やエステルの誘導体が挙げられる。こ
の誘導体は、反応の後期の段階で容易に開裂できるもの
が好ましい。塩の適切な例には、ナトリウム、カリウム
およびリチウムの塩のような金属、ならびにトリ（Ｃ
_1-6）アルキルアミン、Ｎ−エチルピペリジン、２，６
−ルチジン、ピリジン、Ｎ−メチルピロリジンもしくは
ジメチルピペラジンのような第三アミンの塩のような塩
が含まれる。好ましい塩はトリエチルアミン塩である。

【００３１】化合物（III）中のエステル形成カルボキ
シ保護基の適切な例は、式（II）の化合物のカルボキシ
基を保護するのに適していると前記したのと同様に、通
常の条件下で除去できる基である。このヒドロキシ基は
式（II）の化合物のヒドロキシ基と同様の方式で保護さ
れていてもよく、例えばシリルエーテルの形態か、また
はエステル誘導体、特に、アセテート誘導体のようなＣ
_1-6アルカノイルであってもよい。

【００３２】式（III）の化合物は、その官能基は遊離
しているかもしくは１以上が保護された形態であるが、
新規化合物でありこの発明の一態様を形成するものであ
る。式（III）の化合物は、下記の、式（IV）の化合物
もしくはそのＮ−アシル化誘導体と式（Ｖ）の化合物も
しくはその誘導体とをカップリングさせてアシル化する
ことによって製造することができる。

【００３３】

【化２１】

【００３４】（式中、Ｘは前記定義と同じ、いずれの官
能基も保護されてもよい）この保護基の性質とその除去
法は、式（III）について先に論じたのと同じである。
保護された形態の化合物（III）から保護基を除かず
に、環化させて、前記のような保護された形態の式（I
I）の化合物を製造するのが簡便なことは勿論である。

【００３５】アシル化反応を起こさせかつ式（Ｖ）の出
発物質のα−アミノ基に任意に存在する基の適切な例に
は、Ｎ−シリル、Ｎ−スタンニルおよびＮ−燐含有基が
含まれ、例えばトリメチルシリル基のようなトリアルキ
ルシリル基、トリ−ｎ−ブチル錫基のようなトリアルキ
ル錫基、式−ＰＲ^aＲ^bの基（式中Ｒ^aはアルキル、アラ
ルキル、アルコキシ、ハロアルキル、アリール、ハロア
ルコキシ、アリールオキシ、アラルキルオキシもしくは
ジアルキルアミノ基；Ｒ^bはＲ^aと同じもしくはハロゲン
原子；またはＲ^a、Ｒ^bは合して環を形成する）があり、
適切な燐含有基としては、例えば−Ｐ（ＯＣ₂Ｈ₅）₂、
−Ｐ（Ｃ₂Ｈ₅）₂、

【００３６】

【化２２】

【００３７】酸（IV）の反応性Ｎ−アシル化誘導体を上
記製造法に用いてもよい。反応性誘導体の選択はその酸
の置換基の化学的性質に影響されることは勿論である。
Ｎ−アシル化誘導体の適切な例は酸ハライドであり、好
ましいのは酸塩化物もしくは酸臭化物である。酸ハライ
ドによるアシル化反応は、次のような酸結合剤の存在下
で行ってもよい。例えばトリエチルアミンもしくはジメ
チルアニリンのような第三アミン、水酸化ナトリウムも
しくは炭酸水素ナトリウムのごとき無機塩基、またはオ
キシランがあり、これらはアシル化反応で放出されるハ
ロゲン化水素と結合する。オキシランとしては、エチレ
ンオキシドもしくはプロピレンオキシドのような（Ｃ
_1-6）−１，２−アルキレンオキシドが好ましい。酸ハ
ライドを用いるアシル化反応は、−５０℃〜＋５０℃の
温度範囲で、次のような水性もしくは非水性媒体中で行
ってもよく、例えば水性アセトン、水性テトラヒドロフ
ラン、酢酸エチル、ジメチルアセタミド、ジメチルホル
ムアミド、アセトニトリル、ジクロロメタン、１，２−
ジクロロエタン、またはこれらの混合物がある。かわり
にこの反応は、水と不混和性の溶媒、特にメチルイソブ
チルケトンもしくは酢酸ブチルのような脂肪族のエステ
ルもしくはケトンの不安定なエマルジン中で行ってもよ
い。

【００３８】式（IV）の酸のＮ−アシル化誘導体の他の
適切な例には、スクシンイミド、フタルイミド、ｐ−ニ
トロフェニルエステルのごとき活性化されたエステル、
または化合物（IV）の無水物もしくは化合物（IV）と他
の酸との混合無水物が含まれる。かわりに式（IV）の化
合物は、脱水試薬を用いて、適切なのはＮ，Ｎ’−ジシ
クロヘキシル−カルボジイミドもしくは（１，３−ジメ
チルアミノプロピル）−３−エチル−カルボジイミドの
ようなカルボジイミド試薬を用いて、式（Ｖ）の化合物
にカップリングさせてもよい。

【００３９】このカルボジイミド・カップリング反応
は、カルボジイミド試薬の性質や化合物（IV）と（Ｖ）
内の保護基にしたがって、水と不混和性の溶媒、水と混
和性の溶媒、二層系溶媒または水と水混和性溶媒との混
合物中で行うことができる。ペプチド合成用に用いられ
る他のカップリング試薬の例えばジピリジルジスフィド
／トリフェニルフォスフィンなども、化合物（IV）と
（Ｖ）とから式（III）の化合物を製造するのに適切な
ものである。

【００４０】また式（III）の化合物は、式（VI）：

【００４１】

【化２３】

【００４２】（式中、Ｘは前記定義と同じ）で表される
化合物を還元することによって製造することができる。
この還元反応は、例えばＮａＢＨ₄、Ｚｎ（ＢＨ₄）₂も
しくはＮａＢＨ₃ＣＮのような水素化物の還元剤を用い
て適切な水性もしくは有機の溶媒中で行われる。代わり
に、化合物（VI）を適切な補因子の存在下、適切な酵素
で還元してもよく、または酵母もしくは肝臓細胞のよう
な全細胞を用いて還元してもよい。式（VI）の化合物
は、式（IV）の化合物もしくはそのアシル化誘導体を式
（VII）：

【００４３】

【化２４】

【００４４】で表される化合物とカップリングさせるこ
とによって製造できる。化合物（VII）のカルボキシ基
およびδアミノ基は適切に保護されていてもよい。保護
基の適切な例には、式（III）の化合物の保護用に前記
した基が含まれる。加うるに、化合物（VII）内のカル
ボニル基は、例えばT. W. Greeneが述べた当該技術分野
で公知の方法（前記文献）で保護してもよい。式（IV）
の化合物を式（Ｖ）の化合物とカップリングさせる前記
方法は、式（IV）の化合物を式（VII）とカップリング
させるのに使用できる。また、式（III）の化合物が製
造されるまでかまたは実際に保護された形態の式（II
I）の化合物が環化してしまうまで、いずれの保護基も
除去しないのが好都合である。

【００４５】式（VII）の化合物は、例えば無水の有機
溶媒中の塩基の存在下で、下記の式（VIII）の化合物も
しくは（IX）の化合物（式中Ｒはエステル形成カルボキ
シブロックキング基）とグリシン（Ｘ）とを縮合結合さ
せることによって製造できる。

【００４６】

【化２５】

【００４７】塩基の適切な例として、水素化ナトリウム
もしくは水素化カリウムのような無機塩基およびリチウ
ムジイソプロピルアミンもしくはリチウムビス（トリメ
チルシリル）アミドのような有機塩基が挙げられる。エ
ステル形成基Ｒは、例えばアルキルもしくはアラルキル
基であってもよい。化合物（VIII）、（IX）および
（Ｘ）のアミノ基およびカルボキシ基は保護されていて
もよい。化合物（IX）との反応中、グリシン（Ｘ）のカ
ルボニル基がエステル形成基で保護されている場合、そ
の基は基Ｒと同じ基が好ましい。

【００４８】適切な保護基には、式（III）の化合物に
ついて先に記載されたものが含まれる。例えば化合物
（VIII）と（IX）のアミノ基はアジドもしくはシアノ基
として保護されてもよく、この基はその後アミノ基に変
換することができる。化合物（Ｘ）におけるアミノ基
は、Ｎ−（ジフェニルメチレン）もしくはイソニトリル
誘導体として保護される。

【００４９】式（Ｖ）の化合物は、類似の方法で製造す
ることができる。例えば、式（XI）： の化合物とグリシン〔式（Ｘ）〕とを縮合結合させるこ
とによって製造できる。グリシン（Ｘ）のカルボキシ
基、およびグリシン（Ｘ）と化合物（XI）とのアミノ基
は、上記保護基によって適切に保護することができる。

【００５０】またこの発明は、式（XIA）： （式中、Ｙはハロゲン原子もしくはアミノ基であり、そ
のアミノ基は任意に保護されている）で表される化合物
と、式（XII）：

【００５１】

【化２６】

【００５２】（式中、カルボキシ基は保護されていても
よい）で表される化合物もしくはその塩とを縮合結合さ
せ、次いで必要もしくは所望により下記工程： (i) 基Ｙをアミノ基に変換する、 (ii)生成物をその遊離酸、塩もしくは保護形態に変換す
る、の１以上を行うことからなる、式（II）の化合物、
その塩もしくは保護形態の化合物の製造法を提供するも
のである。

【００５３】式（XIA）の化合物としては、前記の式（X
I）の化合物が好ましい。この縮合反応は、化合物（VI
I）の製造について前記した塩基性条件を用いて行うこ
とができる。化合物（XII）のカルボキシ基は適切に保
護されていてもよく化合物（XI）のアミノ基は保護され
ていてもよい。例えばこのアミノ基は、アジド基もしく
はシアノ基として保護されていてもよく、還元によって
生成させてもよい。

【００５４】この発明の他の好ましい態様として、化合
物（XI）の代わりに、出発物質として、式（XI’）： で表される対応する塩化化合物を用いることができる。
化合物（XII）との縮合反応で製造される化合物は、化
合物（II）に類似するが末端にアジド基を有する化合物
に変換することができる。例えば、ジメチルスルフォキ
シドのような適切な溶媒中、アジ化ナトリウムのような
適切なアジド化合物と反応させることによって行われ
る。次いで、この末端のアジド基を還元することによっ
て化合物（II）を生成させることができる。

【００５５】またこの発明は別の態様として、式（XII
I）：

【００５６】

【化２７】

【００５７】（式中、カルボキシ基とアミノ基は、所望
により前記方法によって保護されていてもよい）で表さ
れる化合物もしくはその塩を還元し、次いで必要に応じ
て (i) いずれの保護基も除去する、 (ii)生成物をその遊離酸、塩もしくは保護された形態に
変換することからなる、式（II）の化合物、その塩もし
くはその保護された形態の化合物の製造法を提供するも
のである。

【００５８】有用な還元剤の適切な例は、例えば水性も
しくは有機溶媒の媒体中の、ＮａＢＨ₄、ＮａＢＨ₃Ｃ
Ｎ、Ｚｎ（ＢＨ₄）₂のような水素化金属の錯化合物であ
る。代わりに、化合物（XIII）を、適切な補因子の存在
下適切な酵素で還元するか、酵母もしくは肝臓細胞のご
とき全細胞を用いて還元してもよい。式（XIII）の化合
物は、式（VIII）もしくは（IX）の化合物から、例えば
前記の塩基性条件を用いて、式（VII）の化合物と縮合
結合させることによって製造できる。

【００５９】別の方法で、式（II）の化合物は、式（XI
V）：

【００６０】

【化２８】

【００６１】で表される化合物を還元させることによっ
て製造することができる。化合物（XIV）の官能基は上
記のように保護されてもよい。適切な保護基としては、
式（III）の化合物について前に述べた基が挙げられ
る。環化させるために、そのプロピオニル部分のカルボ
キシ基と第二アミンの基は保護しないで残しておくのが
好ましい。化合物（XIV）の環化は脱水剤を用いて行う
ことができる。ペプチド合成に通常用いられる試薬が適
切である。例えばオルボジイミド試薬、もしくはトリフ
ェニルフォスフィンとジピリジルジスルフィドとの混合
物を用いることができる。カルボジイミド試薬は、用い
られる特定の試薬によるが通常水性もしくは有機の溶媒
中で用いられる。トリフェニルフォスフィン／ジピリジ
ルジスルフィド試薬は、例えば有機溶媒中、普通アセト
ニトリル中で適切に用いられる。

【００６２】上記のことから、式（II）の化合物は、式
（XIV）の化合物もしくは前記定義の式（III）の化合物
を環化させることによって製造できることが分かる。し
たがってこの発明は、式（XIVA）：

【００６３】

【化２９】

【００６４】〔式中、Ｚは式ＨＯ₂ＣＣＨ₂ＣＨ₂ＮＨ−
もしくはＸＣＨ₂ＣＨ₂ＣＯＮＨ−（式中Ｘは脱離基）、
およびいずれの反応性基も保護されていてもよい〕で表
される化合物もしくはその塩を環化させ、次いで必要に
応じて下記工程： (i) いずれの保護基も除去する、 (ii)生成物をその遊離酸、塩もしくは保護された形態に
変換する、の１以上の工程を行うことからなる、式（I
I）：

【００６５】

【化３０】

【００６６】で表される化合物、その塩もしくは保護さ
れた形態の化合物の製造方法を提供するものである。式
（XIV）の化合物は、下記の式（Ｖ）の３−ヒドロキシ
オルニチンと下記の式（XV）の化合物とを反応させるこ
とによって製造できる。

【００６７】

【化３１】

【００６８】化合物（Ｖ）の中のα−カルボキシ基とδ
−アミノ基は保護されていてもよい。例えばδ−アミノ
基はベンジルオキシカルボニル基によって保護すること
ができる。化合物（XV）のカルボキシ基は、遊離形態、
塩の形態、または他の保護された形態であってもよい。
適切な保護基は、例えばエステル基である。かような場
合、トリクロロエチルエステルが通常用いられる。この
エステル基は、通常、反応後、亜鉛／酢酸／テトラヒド
ロフランの混合物を用いて除去される。

【００６９】また式（II）の化合物は、通常のβ−ラク
タム製造技術によって製造できる。例えば式（XVI）：

【００７０】

【化３２】

【００７１】で表される化合物を、例えばフェニルスル
フェニルクロリドを用い、次いで相転移触媒（phase tr
ansfer catalyst）とともに水酸化カリウムを用いる合
成法で式（II）の化合物に変換することができる。この
製造法は、“ワン・ポット”合成法（“one-pot”synth
esis）として行うのが好ましい。別の方法で、下記の式
（XVII）の化合物と下記式（Ｖ）の化合物とを、例えば
−７０℃より低温、好ましくは−７８℃で、最初にｔ−
Ｃ₄Ｈ₉ＯＣｌを次いで亜硝酸銀を用いる合成法で反応さ
せることができる。

【００７２】

【化３３】

【００７３】この製造法はワン・ポット合成法として行
うのが好ましい。前記の両方の製造法では、反応に関与
しないいずれの官能基も保護されていてもよく、所望に
よりその保護基はその後に除去されてもよい。上記反応
において、必要もしくは所望により、出発物質の遊離ヒ
ドロキシ基、カルボキシ基またはアミノ基は、前記反応
中の当該技術分野で普通用いられる保護基によって保護
されていてもよい。その保護基は、所望により、製造後
に通常の公知方法によって除去できる。

【００７４】またこの発明は、新規な中間体類を包含す
るものであり、これらは遊離型であっても、またはその
官能基の１以上が保護された形態であってもよい。上記
のことから、この発明は、式（XVIII）：

【００７５】

【化３４】

【００７６】（式中、官能基は保護されていてもよく、
Ｚ¹は水素原子もしくはＣＨ₂＝ＣＨ−ＣＯ−である。）
で表される化合物もしくはその塩を、Ｚ¹ＮＨ−基（式
中、Ｚ¹は上記定義と同じ）を下記式：

【００７７】

【化３５】

【００７８】のβ−ラクタム部に変換しうる当該技術分
野で公知の試薬で処理し、次いで、必要により、下記工
程： (i) いずれの保護基も除去する (ii)生成物をその遊離酸、塩もしくは保護された形態に
変換する、の１以上を行うことからなる、式（II）：

【００７９】

【化３６】

【００８０】で表される化合物、その塩もしくはエステ
ルの製造方法を提供するものであることが分かるであろ
う。式（IV）、（VIII）、（IX）、（Ｘ）、（XI）、
（XI’）、（XII）、（XV）、（XVI）および（XVII）の
化合物は、公知の化合物であるか、または公知方法もし
くは公知方法に類似の方法で公知の化合物から製造でき
る。

【００８１】また化合物（II）は、酵素による合成法例
えば無細胞合成法、またはエス・クラブリゲルス、エス
・ジュモンジネンシス、エス・カツラハマヌスもしくは
エス・リップマニーのようなストレプトミセス種の適切
な菌株から単離する方法によって製造できる。化合物
（II）を適切に単離するには、菌糸体を破壊し、その細
胞成分から化合物（II）を単離することが必要である。
精製された形態の化合物（II）を単離するには通常クロ
マトグラフィ処理を要する。

【００８２】代わりに、化合物（II）は、不純かもしく
はある程度純粋な形態で用いてもよい。式（II）の化合
物の塩は、塩の出発物質を用いる前記の方法で製造して
もよい、または製造された遊離型の化合物（II）を次い
で塩に変換してもよいことは理解されるであろう。また
所望により、製造された化合物（II）の塩は、所望によ
り、塩にされていない遊離の化合物に変換してもよい
し、化合物（II）の他の塩に変換してもよい。

【００８３】式（II）の化合物の塩は、例えば式（II）
の化合物を適当な酸もしくは塩基で処理することによっ
て製造してもよい。上記方法で製造された式（II）の化
合物とその塩は、通常の方法で回収することができる。
式（II）の化合物は、所望により、メタノール、酢酸エ
チルもしくはその混合物のような適切な溶媒から分別結
晶することによって、鏡像体（enantiomer）のジアステ
レオ異性体の対（diastereoisomeric p airs）に分離す
ることができる。このようにして得られた鏡像体の対
は、通常の手段で個々の立体異性体に分離することがで
き、例えば分割剤として光学的に活性な塩を用いると
か、またはズブチリシンのごときエステラーゼのような
適切な酵素を用いて保護基を立体選択的に除去すること
によって行われる。式（II）で表されるジアステレオ異
性体の混合物中のジアステレオ異性体の比率は、１，５
−ジアザビシクロ〔４．３．０〕ノネ−５−エンのごと
き非求核性塩基で処理することによって変化させること
ができる。

【００８４】分割剤として用いることができる、適切な
光学的に活性な化合物は、“Topics in Stereochimistr
y" Vol.6, Wiley Interscience, 1971, Allinger, N.
L.and Eliel, W. L., Eds.に記載されている。上記とは
異なり、式（II）の化合物のいずれの鏡像体も、公知の
立体配置を有する光学的に純粋な出発物質を用いる立体
特異合成法で得ることができる。

【００８５】この発明を下記実施例で説明する。そこに
引用された百分率はすべて重量基準であり、比率はすべ
て容量基準で与えられている。¹ＨＮＭＲスペクトルに
ついて、“交換しうる”と記載されているプロトンはＤ
₂Ｏとともに振盪すると重水素と交換する。

【００８６】実施例１ ベンジル ５−アジド−３−ヒドロキシ−２−（２−オ
キソアゼチジン−１−イル）−バレレート 乾燥窒素雰囲気下、ベンジル２−（２−オキソアゼチジ
ン−１−イル）アセテート（３．２８ｇ，１５mmol）の
乾燥テトラヒドロフラン（５ml）溶液を、あらかじめ−
７０℃に冷却したリチウムビス（トリメチルシリル）ア
ミド（１モル濃度のテトラヒドロフラン溶液１５ml）に
加えた。添加速度はその溶液の温度が−６０℃以上にな
らないようにし、添加完了后、反応混合物を−７０℃で
１５分間撹拌した。反応液に３−アジドプロピオンアル
デヒド（１８mmol）のテトラヒドロフラン（５ml）溶液
を温度を−６０℃以下に維持しながら加えた。−７０℃
で更に２時間撹拌后反応混合物を酢酸（０．８６ml，１
５mmol）の水（２ml）溶液で処理し、常温になるまで放
置した。

【００８７】生成物を酢酸エチル中に抽出し、水，重炭
酸ソーダの飽和溶液及び水で順次洗浄し、硫酸マグネシ
ウムで乾燥し、蒸発してオレンジ色の油状物を得た。こ
の油状物を酢酸エチル／ヘキサン（２：１）を溶離剤と
するシリカゲル（メルク番号９３８５）のクロマトグラ
フィに付してベンジル ５−アジド−３−ヒドロキシ−
２−（２−オキソアゼチジン−１−イル）バレレートを
淡黄色油状物（２．７２ｇ，３６％）を得た。

【００８８】この物はジクロロメタン／酢酸エチル／エ
タノール（６０：１０：１）混合物を溶離剤とするシリ
カゲルプレート（メルク番号５７１９）の薄層クロマト
グラフィーに付し、よう素蒸気で可視化処理した結果Ｒ
ｆが夫々０．４４と０．４０であるジアステレオ異性体
の１：２の混合物であることが判った。 ＩＲ：ν max（ＫＢｒ）3107,2100および1733cm^-1 ＮＭＲ：δＨppm （CDCl₃；250MHz）1.76 (1H, m), 1.9
6 (1H, m), 3.02 (2H, m), 3.32 (2H, m), 3.49 (2H,
m), 4.03 (1H, d, J 3.3Hz), 4.28 (1H, m), 4.51(1H,
d, J 5Hz, 交換可能）5.23 (2H, s)および7.34 (5H,
s).

【００８９】実施例２ ベンジル ５−アジド−３−ヒドロキシ−２−（２−オ
キソアゼチジン−１−イル）−バレレートのエピマー化 実施例１と同様にして作ったベンジル ５−アジド−３
−ヒドロキシ−２−（２−オキソアゼチジン−１−イ
ル）バレレート（４．１ｇ，１２．８mmol）のジクロロ
メタン（４００ml）溶液に、１，５−ジアザビシクロ
〔４．３．０〕ノネ−５−エン（１．８６ｇ，１４．９
mmol）を加えて室温で１時間撹拌した。減圧下で溶媒を
除去し残った油状物の１／２を、ジクロロメタン、酢酸
エチル及びエタノール（６０：１０：１）混合物を用い
るシリカゲル（メルク番号９３８５）のカラム（４５×
４．５ｃｍ）のクロマトグラフィーに付して、ベンジル
５−アジド−３−ヒドロキシ−２−（２−オキソアゼチ
ジン−１−イル）バレレートの速く移動するジアステレ
オ異性体の油状物（１．１ｇ）（これは放置すると結晶
化する）および速く移動するジアステレオ異性体と遅く
移動するジアステレオ異性体との３０：７０混合物の油
状物（５８mg）を得た。反応混合物の残りの１／２を同
じ条件でクロマトグラフィーに付し、同様量の、速く移
動するジアステレオ異性体および二つのジアステレオ異
性体の混合物とを得た。

【００９０】速く移動するジアステレオ異性体をヘキサ
ンから再結晶して白色針状結晶を得、その物性は次のと
おりであった。 融点：６３〜６４℃ ＩＲ：ν max（ＫＢｒ）3400, 2101, 1725, 1263, 752,
699cm^-1 ＮＭＲ：δＨppm （CDCl₃，400MHz），1.7 (1H, m), 1.
84 (1H, m) 3.03 (2H, m), 3.35 (1H, m), 3.43 (1H,
m), 3.51 (2H, m), 4.04 (1H, d, J 3Hz), 4.32 (2H,
m), 5.23および5.26 (2H, ABq, J 12Hz),および7.37 (5
H, s). 元素分析 Ｃ₁₅Ｈ₁₈Ｎ₄Ｏ₄ Ｃ Ｈ Ｎ 実測値 ５６．６３ ５．６４ １７．５０（％） Ｃ Ｈ Ｎ 計算値 ５６．５９ ５．７０ １７．６０（％）

【００９１】ベンジル ５−アジド−３−ヒドロキシ−
２−（２−オキソアゼチジン−１−イル）バレレートの
遅く移動するジアステレオ異性体はこのジアステレオ異
性体を或割合で含んでいる試料を同じ方式でクロマトグ
ラフィーに付して油状物として得られた。物性は次のと
おり。ＮＭＲ：δＨｐｐｍ（ＣＨＣｌ₃，２５０ＭＨ
ｚ），１．７８（１Ｈ，ｍ），１．９７（１Ｈ，ｍ），
２．９９（２Ｈ，ｔ，Ｊ ４．５Ｈｚ），３．３３（２
Ｈ，ｍ），３．５（２Ｈ，ｍ），４．０４（１Ｈ，ｄ，
Ｊ ４．５Ｈｚ），４．２７（１Ｈ，ｍ），４．５２
（１Ｈ，ｄ，Ｊ ５Ｈｚ），５．２２（２Ｈ，ｍ）およ
び７．３６（５Ｈ，ｓ）．低速移動（遅く移動する）ジ
アステレオ異性体は前記の如く１，５−ジアサビシクロ
〔４．３．０〕ノネ−５−エンで処理することによっ
て、高速移動（速く移動する）ジアステレオ異性体と低
速移動ジアステレオ異性体を夫々３：１の比で含有する
混合物に異性化される。

【００９２】２つのジアステレオ異性体は、アクリロニ
トリル、酢酸及びジクロロメタンの８：０．１：９１．
９の比の混合物を溶離剤とするスフェリソーブ（Ｓｐｈ
ｅｒｉｓｏｒｂ）のシリカカラムで構成される高速液体
クロマトグラフィ（ｈｐｌｃ）システムを用い、２５４
ｎｍの紫外光による検出で容易に分析できる。

【００９３】実施例３ベンジル ５−アジド−３−ヒドロキシ−２−（２−オ
キソアゼチジン−１−イル）バレレートの高速移動ジア
ステレオ異性体の分割 ベンジル ５−アジド−３−ヒドロキシ−２−（２−オ
キソアゼチジン−１−イル）バレレートの高速移動ジア
ステレオ異性体（３００mg，０．９４mmol）をアセトン
（５．５ml）と０．１モル濃度のりん酸緩衝液（２５m
l）に溶解し３７℃で撹拌した。シグマ・ケミカル社
（Ｓｉｇｍａ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｃｏ．Ｌｔｄ．）の
ズブチリシン・カールスバーグ（Ｓｕｂｔｉｌｉｓｉｎ
Ｃａｒｌｓｂｅｒｇ）（５０ml）を加え、メトローム
ｐＨスタット（Ｍｅｔｒｏｈｍ ｐＨＳｔａｔ）を使い
反応混合物を水酸化ナトリウムの１モル濃度溶液で、ｐ
Ｈ７．６に維持した。追加の水酸化ナトリウムが使われ
なくなってから約５時間半后に、溶液のｐＨを９．５に
調整し、次いでその溶液を酢酸エチルで抽出した。その
有機相を水で洗浄しＭｇＳＯ₄で乾燥し加水分解してな
いエステル（１４２mg）を得た。水相を希塩酸でｐＨ
３．０に酸性化し、そして酢酸エチルで抽出した。不安
定な油状物を乾燥し（ＭｇＳＯ₄）、５−アジド−３−
ヒドロキシ−２−（２−オキソアゼチジン−１−イル）
吉草酸（８３mg）を得た。 加水分解してないエステル
の試料を酢酸エチル／ヘキサン／エタノール（４０：６
０：２）を溶離剤とするシリカゲル（メルク番号９３８
５）のカラム・クロマトグラフィーに付して鏡像体とし
て純粋なベンジル ５−アジド−３−ヒドロキシ−２−
（２−オキソアゼチジン−１−イル）バレレートを得
た。 〔α〕²⁰ _D＋３１．８°（Ｃ２．０％；ＣＨＣｌ₃） １ＨのＮＭＲスペクトルは出発物質と同一であった。

【００９４】実施例４エチル ５−アジド−３−ヒドロキシ−２−（２−オキ
ソアゼチジン−１−イル）バレレート エチル ５−クロロ−３−ヒドロキシ−２−（２−オキ
ソアゼチジン−１−イル）バレレート（３．４５ｇ，１
３．８mmol）とアジ化ナトリウム（１．１０ｇ，１７mm
ol）の乾燥ジメチルスルホキサイド（２０ml）溶液を５
５〜６５℃で５時間撹拌した。反応混合物をジクロロメ
タンで稀繹し、その有機相を３回水で洗浄し乾燥（Ｍｇ
ＳＯ₄）し蒸発した。残渣を酢酸エチル／ヘキサン
（２：１）を溶離剤とするシリカゲル（メルク番号９３
８５）のクロマトグラフィーに付しエチル ５−アジド
−３−ヒドロキシ−２−（２−オキソアゼチジン−１−
イル）バレレートを淡黄色油状物として収率７３％
（２．５９ｇ）で得た。０．２ｍｍＨｇ，１８５〜１９
５℃でバルブ・ツウ・バルブ蒸溜法（ｂｕｌｂ ｔｏｂ
ｕｌｂ ｄｉｓｔｉｌｌａｔｉｏｎ）に付して更に精製
して無色油状物が得られた。 ＩＲ：ν max（ＫＢｒ）3405, 2102および1733cm^-1． ＮＭＲ：δppm （CHCl₃，250MHz）1.31 (3H, t, J 7H
z), 1.81 (1H, m), 1.87 (1H, m), 3.03 (2H, t, J 3H
z), 3.40 (2H, m), 3.53 (2H, m), 4.00 (1H, d, J3.5
Hz), 4.25 (3H, m)および4.53 (1H, d, J 4.5Hz, 交換
可能）．

【００９５】実施例５５−アジド−３−ヒドロキシ−２−（２−オキソアゼチ
ジン−１−イル）吉草酸 ５−アジド−３−ヒドロキシ−２−（２−オキソアゼチ
ジン−１−イル）バレレート（０．７７ｇ，３mmol）の
テトラヒドロフラン（１３ml）と水（１３ml）混合物の
溶液を炭酸カリウム（０．４４５ｇ，３．２mmol）の水
（２．５ml）溶液で、反応混合物のｐＨが１１．５以上
に上がらないようにしながら処理した。溶媒を蒸発后、
生成物をエタノール中に抽出し、濾過し、エタノールを
溶離剤とするシリカゲル（メルク番号９３８５）のクロ
マトグラフィーに付して白色固体（３９６mg）を得た。
この物質（２００mg）を水に溶解し、ＩＲ１２０（Ｈ）
イオン変換樹脂のカラムを通して、５−アジド−３−ヒ
ドロキシ−２−（２−オキソアゼチジン−１−イル）吉
草酸（９２mg）を油状物として得た。この油状物は徐々
に白色固体に代る。この化合物は更に精製しないで使用
された。ＮＭＲ：δＨppm ［(CD₃)₂SO＋D₂O］1.69 (2H,
m), 2.89 (2H, t, J 3Hz), 3.40(4H, m), 3.89 (1H,
m) および4.10 (1H, d, J 6.6Hz).

【００９６】実施例６エチル ５−クロロ−３−ヒドロキシ−２−（２−オキ
ソアゼチジン−１−イル）バレレート 乾燥窒素雰囲気下、エチル ２−（２−オキソアゼチジ
ン−１−イル）アセテート（８．４５ｇ，５４mmol）の
乾燥テトラヒドロフラン（２０ml）溶液を、−７０℃に
冷却したリチウムビス（トリメチルシリル）アミド（テ
トラヒドロフラン中１モル濃度溶液５５ml）に加えた。
添加速度はその溶液の温度が−６０℃以上に上がらない
ように行った。添加完了後反応混合物は−７０℃で１５
分間撹拌した。３−クロロプロピオンアルデヒド（６５
mmol）のエーテル（９０ml）溶液を−６０℃以下に保持
しながら反応混合物へ加えた。−７０℃でさらに２時間
撹拌后、反応混合物を酢酸（３．５ml）の水（３ml）溶
液で処理し、常温になるまで放置した。

【００９７】生成物は酢酸エチル中に抽出し、水，飽和
重炭酸ナトリウム溶液及び水で順次洗浄し、乾燥（Ｍｇ
ＳＯ₄）し、蒸発して油状物を得た。この油状物を酢酸
エチル／ヘキサン（２：１）で溶離するシリカゲル（メ
ルク番号９３８５）のクロマトグラフィーに付して、エ
チル ５−クロロ−３−ヒドロキシ−２−（２−オキソ
アゼチジン−１−イル）バレレートを油状物として収率
２９％（３．９０ｇ）で得て、エチル２−（２−オキソ
アゼチジン−１−イル）アセテートを５％回収した。

【００９８】生成物は更に０．３ｍｍＨｇ，１７０〜１
８０℃でバルブ・ツウ・バルブ蒸溜で精製することがで
きた。 ＩＲ：ν max（ＫＢｒ）3383及び1734cm^-1． ＮＭＲ：δＨppm （CDCl₃，60MHz）1.31 (3H, t, J 6H
z), 2.09 (2H, m), 3.03(2H, m), 3.39 (2H, m), 3.70
(2H, m)及び4.25 (5H, m,プロトン１ケ交換可能）．

【００９９】実施例７ベンジルＮ ⁵ −ベンジルオキシカルボニル−３−ヒドロ
キシオルニチネート塩酸塩 ベンジルＮ−（ジフェニルメチレン）グリシネート
（３．６ｇ，１１mmol）の乾燥テトラヒドロフラン（１
５ml）溶液を乾燥窒素雰囲気下、−７０℃に冷却し撹拌
しながら、これにリチウムビス（トリメチルシリル）ア
ミド（１モルＴＨＦ溶液の１１ml）を約２０分間かけて
滴下し、反応混合物の温度が−６０℃以上に上昇しない
ようにした。反応混合物を−７０℃で２０分間撹拌し、
次いで再び温度を−６０℃以下に保ちながら、Ｎ−ベン
ジルオキシカルボニル−３−アミノプロピオンアルデヒ
ド（３ｇ，１４．５mmol）の乾燥テトラヒドロフラン
（１５ml）溶液を滴下した。反応物を更に−７０℃で７
分間撹拌した。反応混合物が自然に−２０℃になってか
ら、良く撹拌されているエーテル（１００ml）とｐＨ
７．０のりん酸緩衝液（１００ml）との混合物中に注ぎ
込んだ。エーテル相を分離し、水相をエーテルで抽出し
た（２×５０ml）。有機抽出物を合わせて水で洗浄し、
乾燥（ＭｇＳＯ₄）して蒸発し油状物（７．２ｇ）を得
た。この物の¹ＨＮＭＲスペクトルはこれが実質的に純
粋なベンジルＮ²−ジフェニルメチレン−Ｎ⁵−ベンジル
オキシカルボニル−３−ヒドロキシオルニチネートであ
ることを示した。この化合物をエーテル（２５ml）に溶
解し、２規定塩酸（２５ml）を加え、室温で２時間激し
く攪拌した。反応混合物を濾過してベンジルＮ⁵−ベン
ジルオキシカルボニル−３−ヒドロキシオルニチネート
塩酸塩のジアステレオ異性体混合物を淡黄色の固体とし
て得た（２．４ｇ）。この物３００mgをエタノールから
再結晶して溶解度の小さいジアステレオ異性体（１１０
mg）を得た。この生成物の物性は次のとおり。

【０１００】融点 １９５〜１９７℃ ＩＲ：ν max（ＫＢｒ）3300, 1708, 1691, 1272c
m^-1 ． ＮＭＲ：δＨppm ［(CD₃)₂SO］1.69 (2H, m), 3.1 (2H,
m), 3.98 (1H, m), 4.11 (1H, d, J 2.5Hz), 5.0 (2H,
s), 5.18 (1H, d, J 12.5Hz), 5.28 (1H, d, J12.5H
z), 5.77 (1H, d, J 5Hz), 7.36 (10H, m), 8.53 (3H,
br. s). 元素分析 Ｃ₂₀ Ｈ₂₅ Ｃｌ Ｎ₂ Ｏ₅ Ｃ Ｈ Ｎ Ｃｌ 実測値 58.67 5.96 6.67 8.76 （％） 計算値 58.74 6.16 6.85 8.76 （％） 濾液からエタノールを蒸発し、残渣を酢酸エチルで研和
して、濾過后溶解度の小さいジアステレオ異性体をさら
に得た（１００mg）。濾液を蒸発してベンジルＮ⁵−ベ
ンジルオキシカルボニル−３−ヒドロキシオルニチネー
ト塩酸塩の溶解度の大きいジアステレオ異性体をガム状
物として得た。 ＮＭＲ：δＨppm 〔(CD₃)₂SO〕1.67 (H, m), 3.14 (2H,
m), 4.10 (2H, m), 4.99 (2H, s), 5.20 (1H, d, J 1
2.5Hz), 5.30 (1H, d, J 12.5Hz), 5.80 (1H, d,J 5H
z), 7.38 (10H, m) 及び8.44 (3H, br.s). これは溶解度の小さいジアステレオ異性体の少量を不純
物として含んでいた。

【０１０１】ベンジルＮ²−ジフェニルメチレン−Ｎ⁵−
ベンジルオキシカルボニル−３−ヒドロキシオルニチネ
ートの加水分解后残った酸溶液からジアステレオ異性体
混合物をさらに回収した。酸溶液をエーテル相から分離
し、ｐＨを６．０に調整し、水を蒸発で除去した。ガム
状残渣にエタノールを加え、蒸発させてガム状物（１．
５ｇ）を得た。ガム状物をアセトンで研和し固体を濾過
し、濾液からアセトンを蒸発させて、ベンジルＮ⁵−ベ
ンジルオキシカルボニル−３−ヒドロキシオルニチネー
ト塩酸塩の溶解度の大きいジアステレオ異性体を主体と
するジアステレオ異性体混合物（５００mg）を得た。ジ
アステレオ異性体の分離はエチルアセテートでの研和で
達成できる。ベンジルＮ⁵−ベンジルオキシカルボニル
−３−ヒドロキシ−オルニチネート塩酸塩の全収量は
２．９ｇ（６５％）であった。

【０１０２】実施例８ベンジルＮ ² −（β−カルボキシエチル）−Ｎ ⁵ −ベンジ
ルオキシカルボニル−３−ヒドロキシオルニチネート 約９０％の溶解度の小さいジアステレオ異性体と約１０
％の溶解度の大きいジアステレオ異性体を含むベンジル
Ｎ⁵−ベンジルオキシカルボニル−３−ヒドロキシオル
ニチネート塩酸塩（１．０ｇ，２．４mmol）の水（１５
ml）溶液を、酢酸エチル（１５０ml）とともに撹拌し、
水酸化ナトリウムの稀薄溶液でｐＨを７．７５に調整し
た。水性相を分液し酢酸エチルで抽出した（３×１００
ml）。有機相を集めて乾燥（ＭｇＳＯ₄）し、蒸発して
ベンジルＮ⁵−ベンジルオキシカルボニル−３−ヒドロ
キシオルニチネート（０．５７ｇ）を部分的に結晶化し
た油状物として得た。この物（４３０mg，１．１５mmo
l）をアクリル酸（０．７８８ml，１１．５mmol）を含
む蒸留したアセトニトリル（１５ml）に溶解し、３日間
室温で撹拌した。得られた白色沈澱を濾別し、数ミリリ
ットルのアセトニトリルで洗浄してベンジルＮ²−（β
−カルボキシエチル）Ｎ⁵−ベンジルオキシカルボニル
−３−ヒドロキシオルニチネート（３９０mg，７６％）
を得た。 融点 153.5−154.5℃（アセトニトリル） ＩＲ：ν max (ＫＢｒ） 3336, 1740, 1691, 1633, 153
3, 750および698cm^-1. ＮＭＲ：δＨppm [(CD₃)₂SO ；250MHz〕1.45 (1H, m),
1.73 (1H, m), 2.31 (2H, t, J 6.6Hz), 2.56 (1H, m),
2.74 (1H, m), 3.06 (3H, m), 3.37 (2H, br s), 3.63
(1H, m), 5.00 (2H, s), 5.12 (2H, s), 7.19 (1H, t,
J 5.3Hz）および7.35 (10H, m). 元素分析 C₂₃ H₂₈ N₂ O₇ Ｃ Ｈ Ｎ ＭＨ⁺ （p. i. F. A. 実測値 61.86 6.18 6.21 445 Ｂ．チオグ 計算値 62.15 6.35 6.30 444 リセロール）

【０１０３】実施例９ベンジル ５−ベンジルオキシカルボニルアミノ−３−
ヒドロキシ−２−（２−オキソアゼチジン−１−イル）
バレレート ベンジルＮ²−（β−カルボキシエチル）−Ｎ⁵−ベンジ
ルオキシカルボニル−３−ヒドロキシオルニチネート
（２２７mg，０．５１mmol）含有の蒸留アセトニトリル
（５０ml）を、再結晶した２，２’ジピリジル ジサル
ファイド（１３５mg，０．６１mmol）とトリフェニルホ
スフィン（１６０mg，０．６１mmol）と共に８時間還流
下で加熱した。減圧下でアセトニトリルを除去し、残渣
をエーテル／エタノール（４９：１）、酢酸エチル／イ
ソプロピルアルコール（１９：１）及びヘキサン／アセ
トン／イソプロピルアルコール（８：８：１）を溶離剤
として繰返して使用するシリカゲル（メルク番号９３８
５）のクロマトグラフィーに付し、題記化合物の低速移
動ジアステレオ異性体を油状物（２１７mg，６４％）と
して得た。この油状物は徐々に結晶化した。融点 ６６
〜６８℃（酢酸エチル／ヘキサン）〔Ｒｆ０．２２ シ
リカゲルプレート（メルク番号５７１９）の薄層クロマ
トグラフィー，溶離剤はジクロロメタン／酢酸エチル／
エタノール（６０：１０：１）〕 ＩＲ：ν max (ＫＢｒ） 1725, 742, および698cm^-1 ＮＭＲ：δＨppm （CDCl₃, 250MHz), 1.85 (2H, m), 2.
98 (2H, t, J 4.2Hz), 3.40 (4H, m), 4.09 (1H, d, J
3.3H), 4.17 (1H, m), 4.69 (1H, d, J 4.1Hz) (D₂O で
交換）, 5.10 (2H, s), 5.22 (3H, m)および7.36 (10H,
m). 元素分析 C₂₃ H₂₆ N₂ O₇ Ｃ Ｈ Ｎ ＭＮ⁺ （p. i. F. A. 実測値 64.81 6.12 6.55(%) 427 Ｂ．チオグ 計算値 64.77 6.15 6.57(%) 426 リセロール）

【０１０４】実施例１０ベンジル ５−ベンジルオキシカルボニルアミノ−３−
ヒドロキシ−２−（２−オキソアゼチジン−１−イル）
バレレートのエピマー化 実施例９に記載したのと同様にして製造した題記化合物
の低速移動ジアステレオ異性体（０．７mg，１．６μmo
lを、実施例２と同様に１，５−ジアザビシクロ〔４．
３．０〕ノネ−５−エン（０．２５μｌ，２．０μmo
l）含有のジクロロメタン（３５０μｌ）で処理した。
９０分後反応混合物を高速液体クロマトグラフィーに付
した。クロマトグラフィーの条件は下記の通り。

【０１０５】カラム：スフェリソーブ（Spherisorb）５
μＭシリカ 溶離剤：酢酸エチル−ヘキサン−酢酸（５０：４９．８
５：０．１５）混合物 流速：１．５ml／min. 検出：２５４nm紫外線 その結果、高速移動ジアステレオ異性体（保持時間９．
７分）と低速移動ジアステレオ異性体（保持時間１１．
１分）との７１：２９の混合物に変化したことが分かっ
た。高速移動ジアステレオ異性体は、両ジアステレオ異
性体の混合物からジクロロメタン／酢酸エチル／エタノ
ール（６０：１０：１）を溶離剤とするシリカゲル（メ
ルク番号９３８５）のクロマトグラフィーで分離でき
る。シリカプレート（メルク番号５７１９）を使用した
薄層クロマトグラフィーにおいて、同じ溶媒系で、高速
移動ジアステレオ異性体はＲｂ ０．２５、低速移動ジ
アステレオ異性体はＲｂ ０．２２であった。高速ジア
ステレオ異性体は次のスペクトル特性値を示す。

【０１０６】ＩＲ：ν max (ＫＢｒ） 1725, 1527, 752
および698； ＮＭＲ：δＨppm （CDCl₃, 250MHz) 1.70 (2H, m), 3.01 (2H, t. J4Hz), 3.37 (4H, m), 4.
34 (1H, d, J 3Hz), 4.28 (1H, m) 4.49 (1H, d, 8.4H
z), 5.10 (3H, m), 5.21 (2H, m)および7.35 (10H, m).

【０１０７】実施例１１ベンジル ５−ベンジルオキシカルボニルアミノ−３−
オキソ−２−（２−オキソアゼチジン−１−イル）バレ
レート ベンジル ２−（２−オキソアゼチジン−１−イル（ア
セテート（１．２５ｇ，５．７mmol）を乾燥テトラヒド
ロフラン（４０ml）に溶解し、乾燥窒素雰囲気下−６０
℃に冷却した。リチウムビス（トリメチルシリル）アミ
ド（１．０モルヘキサン溶液６．２７ml）を１０分間か
けて滴下し、混合物を更に１５分間−６０℃で撹拌し
た。β−ベンジル−オキシカルボニルアミノプロオニル
クロライド（２．４１ｇ，１０mmol）の乾燥テトラヒド
ロフラン（１０ml）溶液を１５分間かけて添加し、混合
物は−６０℃で更に２時間撹拌した。

【０１０８】酢酸（０．５ml）と酢酸エチル（４００m
l）とを反応混合物に加え、次いで水（５０ml）、ブラ
イン（５０ml）および飽和重炭酸ナトリウム溶液（５０
ml）で洗浄し、乾燥した（ＭｇＳＯ₄）。溶媒は減圧下
低温で蒸発し、得られた粗生成物を酢酸エチルを溶離剤
とするシリカゲル（メルク番号９３８５）のカラムクロ
マトグラフィーで精製して、ベンジル ５−ベンジルオ
キシカルボニルアミノ−３−オキソ−２−（２−オキソ
アゼチジン−１−イル）バレレート（０．４１５ｇ，１
７．１％）をガム状物として得た。 ＩＲ：ν max (ＫＢｒ） 3382, 1760, 1719, 1522およ
び1247； ＮＭＲ：δ（CDCl₃, 250MHz) 2.58 (1H, t, 7Hz), 2.9
(2H, m), 3.1 (1H, m),3.4 (3H, m), 4.0 (1H, m), 5.0
7 (2H, s), 5.20 (2H, s ）および7.35 (10H, m).

【０１０９】実施例１２ベンジル ５−ベンジルオキシカルボニルアミノ−３−
ヒドロキシ−２−（２−オキソアゼチジン−１−イル）
バレレート ベンジル−５−ベンジルオキシカルボニルアミノ−３−
オキソ−２−（２−オキソアゼチジン−１−イル）バレ
レート（６．９mg，１６μmol）のテトラヒドロフラン
（１．５ml）溶液を水素化ほう素ナトリウム（２．２m
g，５８μmol）で処理した。１時間後反応混合物を実施
例１０と同様の条件で高速液体クロマトグラフィーに付
して分析した。反応混合物は、題記化合物の高速移動ジ
アステレオ異性体と同化合物の低速移動ジアステレオ異
性体とを５５：４５の比で含有しまた未反応出発物質も
含んでいた。

【０１１０】実施例１３５−アミノ−３−ヒドロキシ−２−（２−オキソ−アゼ
チジン−１−イル）吉草酸の製造 実施例１と同様にして製造したジアステレオ異性体混合
物としての、ベンジル５−アジド−３−ヒドロキシ−２
−（２−オキソ−アゼチジン−１−イル）−バレレート
（１．６ｇ，５mmol）を、エタノール（４５ml）及び水
（７ml）中で、炭素にパラジウム５％担持した触媒（９
００mg）により常圧で水素添加した。水素を吸収しなく
なった時に反応混合物を濾過し、濾液を蒸発してガム状
物を得た。エーテルで研和して個体を得、これを濾別
し、真空乾燥して碎け易い泡状物を得た。この泡状物メ
タノールで研和して白色固体と淡黄色の溶液を得た。そ
の固体を濾別、乾燥し、題記化合物の難溶成ジアステレ
オ異性体（２４９mg）を白色粉末として得た。

【０１１１】融点 152−153℃ ＩＲ：ν max (ＫＢｒ） 3422, 1709, 1637, 1578, 137
6, 1333, 1248, 1228および1151； ＮＭＲ：ppm （D₂O, 250MHz), 1.93 (2H, m), 3.03 (2
H, t, J 4Hz), 3.21 (2H,m), 3.55 (2H, m）及び4.21
(2H, m)； δＣppm （D₂O, 100MHz) 31.06, 36.23, 37.99, 41.03,
62.49, 69.54, 172.40および174.74. 淡黄色のメタノール溶液を蒸発させ、難溶性の上記ジア
ステレオ異性体と、良溶解性のジアステレオ異性体の混
合物を粉末（５７４．２mg）として得た。２Ｄ炭素−プ
ロトンＮＭＲ相関実験（２Ｄ carbon-proton ＮＭＲ c
orrelation experiment）の結果は次のとおりであっ
た。 （δＣ：δＨ）； 30.9, 1.90 ； 31.5, 1.84 ； 36.2,
2.95 ； 37.8, 3.15 ；41.0, 3.44 ； 41.0, 3.56 ；
62.39, 4.18 ； 62.89, 4.13 ； 69.47, 4.16および6
9.47, 4.26.

【０１１２】実施例１４５−アミノ−３−ヒドロキシ−２−（２−オキソアゼチ
ジン−１−イル）吉草酸の製造 ベンジル ５−アジド−３−ヒドロキシ−２−（２−オ
キソアゼチジン−１−イル）バレレートの高速移動ジア
ステレオ異性体（０．７６ｇ，２３．９mmol）を、エタ
ノール（２０ml）と水（５ml）との混合物中、炭素に５
％担持させたパラジウムの触媒で１時間水素添加した。
触媒を濾別し、濾液を蒸発した。残ったガム状物をエー
テルで研和し、濾過して題記化合物を淡黄色固体（４５
６mg，９７％）として得た。黄色に着色した不純物は酢
酸エチルで研和して除去した。題記化合物（４００mg）
は水／エタノール（１５：８５）を溶離剤とするシリカ
ゲル（メルク番号９３８５）のカラムクロマトグラフィ
ーによって更に精製して、題記化合物（２９０mg）を、
１／７モル当量のエタノールを含む白色固体として得
た。 ＮＭＲ：δＨppm （D₂O, 400MHz) 1.16 (t, CH₃ CH₂ O
H), 1.84 (2H, m), 3.00(2H, t, J 3.9Hz), 3.15 (2H,
m), 3.50 (1H, m), 3.58 (1H, m), 3.63 (q, CH₃CH₂ O
H), 4.07 (1H, d, J 5.4Hz), 4.19 (1H, m), δＣ（D₂
O, 100MHz), 31.66, 36.12, 37.61, 40.99, 63.19, 69.
54, 174.79および174.97. 試料を水性メタノールで再結晶して白色角柱状結晶を得
た。 融点 130−135℃ ＩＲ：ν max (ＫＢｒ） 3349, 1723, 1653, 1611, 139
0, 918および769.

【０１１３】実施例１５鏡像体として純粋なベンジル ５−アジド−３−ヒドロ
キシ−２−（２−オキソ−アゼチジン−１−イル）バレ
レートからの ５−アミノ−３−ヒドロキシ−２−（２
−オキソアゼチジン−１−イル） 吉草酸 実施例３に記載したように高速移動ジアステレオ異性体
をズブチリシン・カールスバーグ（subtilisin Carlsbe
rg）により処理して得た鏡像体として純粋なベンジル
５−アジド−３−ヒドロキシ−２−（２−オキソ−アゼ
チジン−１−イル）バレレート（１４０mg）（〔α〕²⁰
_D＋３１．８°（Ｃ ２．０、ＣＨＣｌ₃））をエタノー
ル（７ml）−水（２ml）中で炭素に５％担持させたパラ
ジウムの触媒を使って水素添加した。濾過後、溶液を蒸
発させ油状物を得た。この油状物をメタノールに溶解
し、濾過し、濾液を蒸発して ５−アミノ−３−ヒドロ
キシ−２−（２−オキソアゼチジン−１−イル）吉草酸
を白色（６１mg）として得た。 〔α〕²⁰ _D＋７．００（Ｃ ０．５％、Ｈ₂Ｏ）¹ Ｈ ＮＭＲは、実施例１４で製造した化合物と一致し
た。

【０１１４】実施例１６ベンジル ２−（２−オキソ−〔２− ¹³ Ｃ〕アゼチジン
−１−イル）−〔１，２− ¹³ Ｃ ₂ 〕アセテートａ）ベン
ジル〔１，２− ¹³ Ｃ ₂ 〕グリシネートのトシレート塩 各位の Ｃが９９．５原子％である〔１，２−¹³Ｃ₂〕
−グリシン（１．１ｇ、１４．３mmol）含有のベンジル
アルコール（７ml、６７．６mmol）＋トルエン（２０m
l）混合物を、ディーン・スターク（Dean and Stark）
装置を使い、ｐ−トルエンスルホン酸（３．１ｇ、１
６．３mmol）と還流下３時間加熱した。反応混合物を冷
却し、撹拌エーテル（１５０ml）中に注ぎ込んだ。生成
した結晶性固体を濾別し、エーテル（１５ml）で洗浄
し、乾燥してベンジル〔１，２−¹³Ｃ₂〕グリシネート
のトシレート塩（４．５１ｇ、９３％）を得た。融点
130−132℃（標識されていない化合物は132〜134℃） ＩＲ：ν max (ＫＢｒ） 1707, 1223, 1183および687cm
^-1 ＮＭＲ：δＨppm 〔(CD₃)₂SO, 250MHz〕2.30 (3H, s),
3.90 (2H, dd, J 144.8および6.5HZ), 5.25 (2H, d, J
3.5Hz), 7.30 (4H, dd, J 92および8.0Hz), 7.40 (5H,
m)および8.25 (3H, br s). δＣ〔(CD₃)₂SO, 100MHz〕39.7 (d, J 62.1Hz), 167.5
(d, J 62.1Hz) ．

【０１１５】この物質は、その¹³ＣＮＭＲスペクトルか
らみて、そのグリシン部分の第１位と２位において９
９．５原子％¹³Ｃであると判断した。 ｂ）ベンジルＮ−（３−ブロモ−〔１− ¹³ Ｃ〕プロピオ
ニル）−〔１，２− ¹³ Ｃ ₂ 〕−グリシネート 上記のようにして製造されたベンジル〔１，２−
¹³Ｃ₂〕グリシネート（３．２３ｇ，９．５２mmol）の
トシレート塩を、水（１５ml）とテトラヒドロフラン
（１５ml）との混合物中に入れ４℃で激しく撹拌した。
その間に標準的な方法で作られた３−ブロモ−〔１−¹³
Ｃ〕−プロピニルクロライド（１．６４ｇ，９．５１mm
ol，９１原子％の¹³Ｃ〕のテトラヒドロフラン（５ml）
溶液を１０分間かけて滴下した。反応混合物のｐＨを、
水酸ナトリウム稀薄溶液によって、その添加中及び更に
４５分間５．５〜６．５に保った。反応混合物を酢酸エ
チル（１５０ml）で稀繹し、有機相を分離し飽和ブライ
ンで洗浄し乾燥した（ＭｇＳＯ₄）。乾燥した溶液を蒸
発して白色固体を得、これをヘキサン（３０ml）で研和
してベンジルＮ−（３−ブロモ−〔１−¹³Ｃ〕プロピオ
ニル）−〔１，２−¹³Ｃ₂〕−グリシネート（２．７
ｇ，９４％）を得た。その物性は次のとおりであった。

【０１１６】融点６２．５−６４．０℃； ＩＲ：ν max (ＫＢｒ） 3309, 1694, 1611, 1537, 755
および701cm^-1； ＮＭＲ：δＨppm 〔(CDCl₃), 250MHz〕2.83 (2H, m),
3.63 (2H, m), 4.13 (2H,dddd, J 141.5, 7.9, 5.4およ
び2.8Hz), 5.20 (2H, d, J 3.2Hz), 6.10 (1H, br s)お
よび7.36 (5H, s)；δCppm (CDCl₃, 100MHz) 41.5 (d,
61.6Hz), 169.6 (dd, J 61.8 および2Hz)および169.7
(d, J 2Hz).

【０１１７】ｃ）ベンジル２−（２−オキソ−〔２− ¹³
Ｃ〕アゼチジン−１−イル）−〔１，２− ¹³ Ｃ ₂ 〕アセ
テート 水酸化カリウム粉末（１．０５ｇ，１８．７mmol）とテ
トラブチルアンモニウムブロマイド（０．７８ｇ，２．
４mmol）を１００℃で２時間真空乾燥し、冷却し、ジク
ロロメタンとアセトニトリルの（１９：１）混合物（３
００ml）中に懸濁させた。この混合物を激しく撹拌し３
０〜４０℃で超音波処理をし、ベンジルＮ−（３−ブロ
モ−〔１−¹³Ｃ〕−プロピオニル）−〔１，２−
¹³Ｃ₂〕グリシネート（２．５ｇ，８．２mmol）含有の
ジクロロメタン／アセトニトリル（１９：１）混合物
（３００ml）を５時間かけて添加した。反応混合物を撹
拌し更に１５分間超音波処理をし、不溶解物質は濾別
し、濾液を蒸発乾固した。得られた油状物はエーテルで
完全に抽出し（２×８０ml）、エーテル相を合わせて蒸
発した。残渣は酢酸エチル／ヘキサン（１：１）を用い
るシリカゲル（メルク番号９３８５）のクロマトグラフ
ィーに付して、出発物質であるベンジルＮ−（３−ブロ
モ−〔１−¹³Ｃ〕−プロピオニル）−〔１，２−
¹³Ｃ₂）グリシネート（０．８４ｇ，３３％）とベンジ
ル ２−（２−オキソ〔２−¹³Ｃ〕アゼチジン−１−イ
ル）−〔１，２−¹³Ｃ₂〕アセテートを油状物（０．３
６ｇ，２０％）として得た。

【０１１８】ＩＲ：ν max (ＫＢｒ） 1700, 742および
700cm^-1； ＮＭＲ：δＨppm (CDCl₃, 250MHz) 3.04 (2H, dt, J 6
および4.1Hz), 3.43 (2H, m), 3.75 (1H, m), 4.31 (1
H, m), 5.18 (2H, d, J 3.1Hz)および7.37 (5H, m)；δ
Cppm (CDCl₃, 100MHz) 43.12 (dd, J 62.1および0.9H
z), 167.84 (m)および168.1((dd, J62.3 および1.2Hz)

【０１１９】実施例１７ベンジル ５−アジド−３−ヒドロキシ−２−（２−オ
キソ−〔２− ¹³ Ｃ〕アゼチジン−１−イル）−〔１，２
− ¹³ Ｃ ₂ 〕バレレート 題記化合物を、ベンジル ２−（２−オキソ−〔２−¹³
Ｃ〕アゼチジン−１−イル）−〔１，２−¹³Ｃ₂〕アセ
テートと３−アジドプロピオンアルデヒドとを実施例と
同様にして反応させ、得られた生成物を実施例２に記載
した如くにして１，５−ジアザビシクロ〔４．３．０〕
ノネ−５−エンでエピマー化し、クロマトグラフィーで
高速移動ジアステレオ異性体を分離した。クロマトグラ
フィーにカラムから回収した高速及び低速移動ジアステ
レオ異性体の混合物を更に異性化して、追加量の題記化
合物の純粋な高速移動ジアステレオ異性体を得た。題記
化合物の高速移動ジアステレオ異性体の合計収率は３６
％であった。 ＩＲ：ν max (ＫＢｒ） 2102, 1696, 1668, 761および
704cm^-1； ＮＭＲ：δＨppm （CDCl₃, 400MHz), 1.71 (1H, m), 1.
83 (1H, m), 3.03 (2H,m), 3.34 (1H, m), 3.43 (1H,
m), 3.51 (2H, m), 3.87 (1/2H, m), 4.22 (1/2H, m),
4.26 (1H, m), 4.34 (1H, m), 5.23 (2H, m)および7.36
(5H, m)；δppm(CDCl₃, 100mHz) 63.4 (d, J 61.3Hz),
168.1 (d, J 61.2Hz）および169.3.

【０１２０】実施例１８５−アミノ−３−ヒドロキシ−２−（２−オキソ−〔２
− ¹³ Ｃ〕アゼチジン−１−イル）−〔１，２− ¹³ Ｃ ₂ 〕
吉草酸 ベンジル ５−アジド−３−ヒドロキシ−２−（２−オ
キソ〔２−¹³Ｃ〕アゼチジン−１−イル）−〔１，２−
¹³Ｃ₂〕バレレートを実施例１４と同様に炭素に５％担
持したパラジウム触媒の存在下水素で還元し、題記化合
物を吸湿性の粉末として得た。 ＩＲ：ν max (ＫＢｒ） 3424, 1678, 1544 および1355
cm^-1； ＮＭＲ：δＨppm （D₂O, 250Mz) 1.85 (2H, m), 3.0 (2
H, m), 3.15 (2H, m), 3.55 (2H, m), 3.80 (1/2 H,
m), 4.19 (1H, m ）および4.34 (1/2H, m)；δC (D₂O,
100MHz) 63.20 (d, J 54Hz), 172.6および174.97 (d, J
53Hz)。 マススペクトル C₅ ¹³C₃ H₁₄ N₂ O₄ MH⁺ (p. i. F. A. B. チリオリセロー ル） 実測値 206 計算値 205 ¹³ ＣのＮＭＲスペクトルから判定される¹³Ｃの濃縮度
（degree of enrichment）吉草酸部分の１位と２位では
９９．５％でアゼチジン−１−イル部分の２位も同等で
あった。

【０１２１】実施例１９ストレプトミセス・クラブリゲルスから ５−アミノ−
３−ヒドロキシ−２−（２−オキソ−アゼチジン−１−
イル）吉草酸（化合物II）の単離 ８ １／２インチの円板羽根を備えた３００ｌの醗酵槽
に入れた、増殖培地Ａ（実施例１９で得られたのと同
じ）１５０ｌに、種培地Ａ（実施例１９で得られたのと
同じ）中で４８時間培養したストレプトミセス・クラブ
リゲルスの培養物１．５ｌを接種した。この槽を５７０
ｒ．ｐ．ｍ．で撹拌し、毎分１５０ｌの無菌空気を吹き
こんだ（sparge）。プルロニック（Pluronic）Ｌ８１
〔ブラッデン−キャンベル・ケミカル社、クロイドン、
英国（Blagden-Campbell Chemical Co., Croydon, U
K）〕消胞剤を培地に入れて発泡をおさえた。槽を４８
時間２６℃に保った。次いで培養物を５℃に冷却し、連
続遠心分離で細胞を除去した。細胞ペーストを１〜５℃
の水７５ｌに再分散させ、その細胞を、マントン−ガウ
リン（Manton-Gaulin)ホモジナイザー〔モデル１５Ｍ−
８ＢＡ，Ａ，ＡＰＶ、クラウレエ−、サセックス、英国
（Crawley, Sussex, UK)〕に３，０００〜５，０００ｐ
ｓｉの圧力で通過させて粉砕した。細胞片を連続遠心分
離で除去し、上澄液を、公称の分子量カットオフ値が１
０，０００ダルトンのＰＭ１０ポリスルホン膜１０m²を
備えたアルファ・ラベル（Alfa Laval）ＶＦＳ−４限外
濾過機で限外濾過した。低分子量フラクションは逆浸透
法で６リットルに濃縮した。これを凍結乾燥して化合物
IIを含有する固体（バッチ１）４７４ｇを得た。（化合
物IIはジオキシゲナーゼ製剤で化合物Ｉに変換し、実施
例２５に記載したプレカラムイミダゾール・デリバティ
ゼーションＨＰＬ法で生成した化合物Ｉの量をモニター
して、分析した。化合物IIのＩへの変換は必ずしも定量
的とは言えないので、この分析法は化合物IIを含むフラ
クションの選別の定性的指針として使った。第２の醗酵
および単離を同様の方法で行って化合物（II）を含有す
る凍結乾燥固体（バッチ２）５４４ｇを得た。

【０１２２】凍結乾燥した固体（バッチ１ １６６ｇ＋
バッチ２ ３４４ｇ）の１００ｇづつの試料５つを下記
のようにして更に精製した。各１００ｇの試料を水１４
０mlに溶解し、エタノール１４０mlを加え、分散液を１
０，０００ｇで１５分間遠心分離した。沈澱を棄て、化
合物IIを含有する上澄液をシリカ６０（２３０〜４００
メッシュ)(Ｅ．メルク、ダムスタッド、西独）の、工業
用メタノール変性アルコール（ＩＭＳ）でパックされた
カラム（１８×１９．５cm）のクロマトグラフィーに付
しＩＭＳ８５％／水１５％の溶離剤で４５ml／分の流速
で溶離した。５つの試料を処理して得た化合物IIを含有
するフラクション全部を集めロータリーエバポレーター
で蒸発乾固し固体６６．５ｇを得た。この重量は、この
物質を上記の同じサイズのシリカ６０カラムを使って再
度処理すると２５ｇに減少した。試料を、ダイヤインＨ
Ｐ２０ＳＳ（三菱化成工業（株）の水でパックされたカ
ラム（８×５０cm）で２回クロマトグラフィーに付し、
水で溶離した（７ml／分）。化合物IIを含むフラクショ
ンをプールし、ロータリエバポレータで蒸発乾固し（１
０．０ｇ）、水（３４ml）に再度溶解し、水でパックさ
れたバイオゲル（Biogel）Ｐ２カラム（８×５７．５c
m）〔バイオ−ラド・ラボラトリーズ・ワットフォー
ド、ハートフォードシャー、英国（Bio-Rad Laboratori
es, Watford, Hertfordshire, UK）〕に注入した。化合
物を水５ml／分の流速で溶離した。化合物IIを含有する
フラクションを集めロータリーエバポレータで乾燥して
固体５．２５ｇを得た。これらを水６mlに溶解し、次い
でエタノール６mlを加え、得られた溶液を、エタノール
８５％水１５％でパックされたメルクシリカ６０（２３
０〜４００メッシュ）カラム（５×２１cm）に流速２ml
／分で注入した。陽性フラクションをもう一度同様のカ
ラムを通過させた後、水でパックされたバイオゲルＰ２
カラム２．７×１１７cmを用い、水で溶離する（流速
０．８ml／分）カラムクロマトグラフィに付して、試料
（２．１５ｇ）を更に精製した。化合物IIを含有する溶
離フラクションを集めロータリーエバポレーターで蒸発
乾固して、ＮＭＲ法で純度が６０〜７０％と判定された
試料５８０mgを得た。

【０１２３】この試料の少量を逆相（reverse-phase)シ
ステムを使う高速液体クロマトグラフィーによって均質
体に精製した〔ミリポア・ウォータース μ−ボンダパ
ックＣＮ カラム（Millipore Waters μ−Bondapak C
N column〕３．９×３０cmを使用し０．７ml／分の流速
の水で溶離した〕。試料（２１．８５mg）を水に１０mg
／mlで溶解しその１５μｌづつをカラム上に注入した。
主ピーク（２０５nm紫外光で検出）を一つの別個のフラ
クションとして集め、濃縮し、上記と同様にして再びク
ロマトグラフィーに付し、次いでロータリーエバポレー
ターで乾固し７．３mgの化合物IIを無色ガラス状固体と
して得た。

【０１２４】ＩＲν max (ＫＢｒ） 3400, 2900, 1720
および1600cm^-1 ＮＭＲδＨppm （D₂O, 250MHz), 1.89 (2H, m), 3.02
(2H, t), 3.18 (2H,dt), 3.52 (1H, m), 3.60 (1H, m),
4.08 (1H, d),および4.22 (1H, m)． マススペクトル〔C₈ H₁₄ N₂ O₄〕H⁺ MH⁺ (p. i. F. A. B.） 実測値 203.1028 計算値 203.1032

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 Ｃ１２Ｒ 1:465） (72)発明者 スティフン・ウイリアム・エルスン イギリス国、サリー アールエイチ３ ７エイジェイ、ベツチウオース、ブロク ハム・パーク（無番地） ビーチャム・ ファーマシューティカルズ，リサーチ ディビィジョン内 (72)発明者 ステファーン・ローランド・ウォロニキ ィ イギリス国、サリー アールエイチ３ ７エイジェイ、ベツチウオース、ブロク ハム・パーク（無番地） ビーチャム・ ファーマシューティカルズ，リサーチ ディビィジョン内 (72)発明者 キース・ハワード・バガリィ イギリス国、サリー アールエイチ３ ７エイジェイ、ベツチウオース、ブロク ハム・パーク（無番地） ビーチャム・ ファーマシューティカルズ，リサーチ ディビィジョン内

Claims (9)

(57)【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 式（II）： 【化１】 で表される化合物、その塩または保護された形態の化合
   物。
2. 【請求項２】 ５−アミノ−３−ヒドロキシ−２−（２
   −オキソアゼチジン−１−イル）吉草酸、５−ベンジル
   オキシカルボニルアミノ−３−ヒドロキシ−２−（２−
   オキソ−アゼチジン−１−イル）吉草酸、ベンジル ５
   −ベンジルオキシカルボニルアミノ−３−ヒドロキシ−
   ２−（２−オキソアゼチジン−１−イル）バレレートま
   たはベンジル ５−アジド−３−ヒドロキシ−２（２−
   オキソアゼチジン−１−イル）−バレレートである特許
   請求の範囲第１項の化合物。
3. 【請求項３】 式（XIA）： （式中、Ｙはハロゲン原子もしくはアミノ基であり、そ
   のアミノ基は任意にマスクもしくは保護されている）で
   表される化合物と、式（ＸII）： 【化２】 （式中、カルボキシ基は保護されていてもよい）で表さ
   れる化合物もしくはその塩とを反応させ、次いで必要に
   応じて下記工程： （ｉ）基Ｙをアミノ基に変換する、 （ii）生成物をその遊離酸、塩もしくは保護された形態
   の化合物に変換する、の１以上を行うことからなる、式
   （II）： 【化３】 で表される化合物、その塩または保護された形態の化合
   物の製造方法。
4. 【請求項４】 式（XIII）： 【化４】 （式中、カルボキシ基とアミノ基は保護されていてもよ
   い）で表される化合物もしくはその塩を還元し、次いで
   必要により、下記工程： （ｉ）いずれの保護基も除去する、 （ii）生成物を遊離酸、その塩または保護された形態の
   化合物に変換するの１以上を行うことからなる、 式（II）： 【化５】 で表される化合物、その塩または保護された形態の化合
   物の製造方法。
5. 【請求項５】 式（III）； 【化６】 （式中、Ｘは脱離基、官能基の−ＣＯ₂Ｈ，−ＯＨおよ
   び−ＮＨ₂は保護されていてもよい）で表される化合物
   を環化することからなる、式（II）： 【化７】 で表される化合物、その塩または保護された形態の化合
   物の製造方法。
6. 【請求項６】 式（XIV）： 【化８】 で表される化合物を還元することからなる、式（II）： 【化９】 で表される化合物、その塩または保護された形態の化合
   物の製造方法。
7. 【請求項７】 式（XIVA）： 【化１０】 〔式中、Ｚは式ＨＯ₂ＣＣＨ₂ＣＨ₂ＮＨ−もしくはＸＣ
   Ｈ₂ＣＨ₂ＣＯＮＨ−（式中Ｘは脱離基）、およびいずれ
   の反応性基も保護されていてもよい〕で表される化合物
   もしくはその塩を還化させ、次いで必要に応じて下記工
   程： (i) いずれの保護基も除去する、 (ii)生成物をその遊離酸、塩もしくは保護された形態に
   変換する、 の１以上の工程を行うことからなる、式（II）： 【化１１】 で表される化合物、その塩または保護された形態の化合
   物の製造方法。
8. 【請求項８】 式（XVI）： 【化１２】 で表される化合物を相転移触媒を用いて変換することか
   らなる、式（II）： 【化１３】 で表される化合物、その塩または保護された形態の化合
   物の製造方法。
9. 【請求項９】 式（XVIII）： 【化１４】 （式中、官能基は保護されていてもよく、Ｚ¹は水素原
   子もしくはＣＨ₂＝ＣＨ−ＣＯ−である。）で表される
   化合物もしくはその塩を、Ｚ¹ＮＨ−基（式中、Ｚ¹は上
   記定義と同じ）を下記式： 【化１５】 のβ−ラクタム部に変換しうる試薬で処理し、次いで、
   必要により、下記工程： （i）いずれの保護基も除去する （ii）生成物をその遊離酸、塩もしくは保護された形態
   に変換する、 の１以上を行うことからなる、式（II）： 【化１６】 で表される化合物、その塩または保護された形態の化合
   物の製造方法。