JP2613732B2 - プロラクチン又は成長ホルモンの分泌促進剤 - Google Patents
プロラクチン又は成長ホルモンの分泌促進剤Info
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Description
【０００１】本発明はプロラクチン又は成長ホルモンの
分泌促進剤に関し、さらに詳しくは、イネ科植物、殊に
麦類植物の緑葉の搾汁成分を有効成分とする実質的に無
毒性の安全性の高いプロラクチン又は成長ホルモンの分
泌促進剤に関する。
分泌促進剤に関し、さらに詳しくは、イネ科植物、殊に
麦類植物の緑葉の搾汁成分を有効成分とする実質的に無
毒性の安全性の高いプロラクチン又は成長ホルモンの分
泌促進剤に関する。
【０００２】本発明者らは、イネ科植物、特に麦類植物
の成熟期前の若葉を搾汁液又はその乾燥粉末の生理作用
に着目し、それについて永年研究を続けており、これま
で、動脈硬化予防ないし治療作用（特公昭４６−３８５
４８号公報参照）、制癌作用（特公昭５９−３６８９０
号公報参照）、血圧降下作用（特公昭５９−３６８８８
号公報及び特公昭５９−３９４１０号公報参照）、血糖
低下作用（特開昭６２−２２６９２７号公報参照）、抗
ウイルス作用（特開平３−１６９８２３号公報参照）、
抗酸化活性（特願平２−２２０３９８号出願参照）等を
見い出しており、その中のあるものについては活性本体
の単離、確認にも成功している。
の成熟期前の若葉を搾汁液又はその乾燥粉末の生理作用
に着目し、それについて永年研究を続けており、これま
で、動脈硬化予防ないし治療作用（特公昭４６−３８５
４８号公報参照）、制癌作用（特公昭５９−３６８９０
号公報参照）、血圧降下作用（特公昭５９−３６８８８
号公報及び特公昭５９−３９４１０号公報参照）、血糖
低下作用（特開昭６２−２２６９２７号公報参照）、抗
ウイルス作用（特開平３−１６９８２３号公報参照）、
抗酸化活性（特願平２−２２０３９８号出願参照）等を
見い出しており、その中のあるものについては活性本体
の単離、確認にも成功している。
【０００３】本発明者らは、上記一連の研究の過程で、
今回、イネ科植物、殊に麦類植物の緑葉の搾汁成分にプ
ロラクチン及び／又は成長ホルモンの分泌促進作用があ
ることを見い出し、さらにその作用物質の１つとしてビ
タミンＥコハク酸エステルを確認することに成功し、本
発明を完成するに至った。
今回、イネ科植物、殊に麦類植物の緑葉の搾汁成分にプ
ロラクチン及び／又は成長ホルモンの分泌促進作用があ
ることを見い出し、さらにその作用物質の１つとしてビ
タミンＥコハク酸エステルを確認することに成功し、本
発明を完成するに至った。
【０００４】かくして、本発明によれば、イネ科植物の
緑葉の搾汁成分を有効成分として含有することを特徴と
するプロラクチン又は成長ホルモンの分泌促進剤が提供
される。
緑葉の搾汁成分を有効成分として含有することを特徴と
するプロラクチン又は成長ホルモンの分泌促進剤が提供
される。
【０００５】以下、本発明のプロラクチン又は成長ホル
モンの分泌促進剤についてさらに詳細に説明する。
モンの分泌促進剤についてさらに詳細に説明する。
【０００６】本発明の分泌促進剤の有効成分の原料とな
るイネ科植物としては、麦類植物が好適であり、麦類植
物としては、例えば、大麦、小麦、裸麦、エン麦、ハト
麦、トウモロコシ、キビ、イタリアンダイグラスなどが
挙げられ、中でも特に大麦、小麦及び裸麦が適してい
る。
るイネ科植物としては、麦類植物が好適であり、麦類植
物としては、例えば、大麦、小麦、裸麦、エン麦、ハト
麦、トウモロコシ、キビ、イタリアンダイグラスなどが
挙げられ、中でも特に大麦、小麦及び裸麦が適してい
る。
【０００７】本発明では、これら麦類植物の中でも成熟
期前に収穫した若い植物の新鮮な茎及び／又は葉の部分
（本明細書では茎及び／又は葉の部分を総称して「緑
葉」という）が特に適している。
期前に収穫した若い植物の新鮮な茎及び／又は葉の部分
（本明細書では茎及び／又は葉の部分を総称して「緑
葉」という）が特に適している。
【０００８】イネ科植物、殊に麦類植物の緑葉をまず、
ミキサー、ジューサー等の機械的破砕手段で不当な熱変
性を生じない条件下で搾汁し、篩別、濾過等の手段によ
って粗大固形分を除去することにより搾汁液（以下、こ
れを「青汁」という）を調製する。このようにして得ら
れる青汁はそのまま本発明の搾汁成分として使用するこ
とができる。なお、一般的には、上記の搾汁に先立っ
て、緑葉を次亜塩素酸ソーダの如き殺菌剤で殺菌処理し
てから搾汁処理を行なうのが好ましい。
ミキサー、ジューサー等の機械的破砕手段で不当な熱変
性を生じない条件下で搾汁し、篩別、濾過等の手段によ
って粗大固形分を除去することにより搾汁液（以下、こ
れを「青汁」という）を調製する。このようにして得ら
れる青汁はそのまま本発明の搾汁成分として使用するこ
とができる。なお、一般的には、上記の搾汁に先立っ
て、緑葉を次亜塩素酸ソーダの如き殺菌剤で殺菌処理し
てから搾汁処理を行なうのが好ましい。
【０００９】また、上記の如くして得られる青汁は、好
ましくは更に遠心分離して上清液を採取し、場合により
これを滅菌フイルター等で除菌濾過処理した後、得られ
る上清成分を本発明の搾汁成分として使用することもで
きる。
ましくは更に遠心分離して上清液を採取し、場合により
これを滅菌フイルター等で除菌濾過処理した後、得られ
る上清成分を本発明の搾汁成分として使用することもで
きる。
【００１０】さらに、上記の如くして得られる青汁又は
上清成分を例えば特公昭４６−３８５４８号公報に記載
の方法に従いｐＨ５〜９程度に中和し、噴霧乾燥、凍結
乾燥などの実質的に熱変性が生じない適当な手段で乾燥
して粉末化し青汁粉末又は上清粉末とすることができ
る。これらの青汁粉末又は上清粉末もまた本発明の搾汁
成分として利用することができる。
上清成分を例えば特公昭４６−３８５４８号公報に記載
の方法に従いｐＨ５〜９程度に中和し、噴霧乾燥、凍結
乾燥などの実質的に熱変性が生じない適当な手段で乾燥
して粉末化し青汁粉末又は上清粉末とすることができ
る。これらの青汁粉末又は上清粉末もまた本発明の搾汁
成分として利用することができる。
【００１１】さらにまた、上記青汁粉末又は上清粉末を
水に再溶解した液、或いはその再溶解水溶液から不溶分
を除去した液を本発明の搾汁成分とすることができ、或
いはまた、青汁粉末又は上清粉末を水性アルコール、例
えば５０％水性メタノールで抽出した液又はそれから水
性アルコールを除去して得られる粉末化物も本発明の搾
汁成分として使用することができる。
水に再溶解した液、或いはその再溶解水溶液から不溶分
を除去した液を本発明の搾汁成分とすることができ、或
いはまた、青汁粉末又は上清粉末を水性アルコール、例
えば５０％水性メタノールで抽出した液又はそれから水
性アルコールを除去して得られる粉末化物も本発明の搾
汁成分として使用することができる。
【００１２】前記青汁から固形分を除去した液又は青汁
粉末を水に再溶解し固形分を除去した液、例えば前記の
上清成分は、逆相クロマトグラフイー、イオン交換クロ
マトグラフイー、ゲル濾過等にかけることによって、プ
ロラクチン及び成長ホルモン分泌促進活性を有する画分
を採取することもできる。逆相クロマトグラフイーは、
例えば、Ｄｅｌｔａ−Ｐａｋ ３００Å １５μｍ Ｃ
18カラム（Ｗａｔｅｒｓ社製）を用いて、０.０１〜０.
５％三弗化酢酸及び０.０１〜０.５％三弗化酢酸を含む
アセトニトリルを溶出液として用いて活性画分を溶出す
ることができる。また、イオン交換クロマトグラフイー
としては、例えば、Ｐｒｏｔｅｉｎ−Ｐａｋ ＤＥＡＥ
−５ＰＷ（Ｗａｔｅｒｓ社製）によりｐＨ８.７の１〜
１００ｍＭトリス−ＨＣｌ緩衝液及び０.１〜１Ｍ Ｎ
ａＣｌを含む２０ｍＭトリスＨＣｌ緩衝液で０〜１００
％の直線濃度勾配でクロマトグラフイーを行なうことに
より活性画分を得ることができる。さらに、ゲル濾過は
例えばＰｒｏｔｅｉｎ−Ｐａｋ ３００ＳＷ（Ｗａｔｅ
ｒｓ社製）を用いて行なうことができる。
粉末を水に再溶解し固形分を除去した液、例えば前記の
上清成分は、逆相クロマトグラフイー、イオン交換クロ
マトグラフイー、ゲル濾過等にかけることによって、プ
ロラクチン及び成長ホルモン分泌促進活性を有する画分
を採取することもできる。逆相クロマトグラフイーは、
例えば、Ｄｅｌｔａ−Ｐａｋ ３００Å １５μｍ Ｃ
18カラム（Ｗａｔｅｒｓ社製）を用いて、０.０１〜０.
５％三弗化酢酸及び０.０１〜０.５％三弗化酢酸を含む
アセトニトリルを溶出液として用いて活性画分を溶出す
ることができる。また、イオン交換クロマトグラフイー
としては、例えば、Ｐｒｏｔｅｉｎ−Ｐａｋ ＤＥＡＥ
−５ＰＷ（Ｗａｔｅｒｓ社製）によりｐＨ８.７の１〜
１００ｍＭトリス−ＨＣｌ緩衝液及び０.１〜１Ｍ Ｎ
ａＣｌを含む２０ｍＭトリスＨＣｌ緩衝液で０〜１００
％の直線濃度勾配でクロマトグラフイーを行なうことに
より活性画分を得ることができる。さらに、ゲル濾過は
例えばＰｒｏｔｅｉｎ−Ｐａｋ ３００ＳＷ（Ｗａｔｅ
ｒｓ社製）を用いて行なうことができる。
【００１３】本発明者らは、この活性画分をさらに分析
し、該活性画分中に下記式
し、該活性画分中に下記式
【００１４】
【化１】
【００１５】で示されるビタミンＥコハク酸エステルが
存在すること、そしてこのビタミンＥコハク酸エステル
はプロラクチン及び成長ホルモンの分泌促進活性を有し
ていることを確認した。
存在すること、そしてこのビタミンＥコハク酸エステル
はプロラクチン及び成長ホルモンの分泌促進活性を有し
ていることを確認した。
【００１６】前記の如くして得られる青汁、上清成分又
は活性画分はそのまま又は例えば牛乳、脱脂乳、その他
のコロイド状蛋白含有物、甘味料などを配合して経口投
与することができるが、一般には、品質一定で且つ安定
性のより良い前記青汁粉末又は上清粉末、或いはそれら
の再溶解物や抽出液等を利用するのが好ましい。
は活性画分はそのまま又は例えば牛乳、脱脂乳、その他
のコロイド状蛋白含有物、甘味料などを配合して経口投
与することができるが、一般には、品質一定で且つ安定
性のより良い前記青汁粉末又は上清粉末、或いはそれら
の再溶解物や抽出液等を利用するのが好ましい。
【００１７】本発明において有効成分として使用する
「イネ科植物の緑葉の搾汁成分」は、イネ科植物、殊に
麦類植物の緑葉から前述の如くして得られる青汁のみな
らず、それから以上に述べた如くさらに処理することに
より得られるプロラクチン及び／又は成長ホルモンの分
泌促進作用をもつすべての処理成分又は画分をも包含す
る意味で用いるものである。
「イネ科植物の緑葉の搾汁成分」は、イネ科植物、殊に
麦類植物の緑葉から前述の如くして得られる青汁のみな
らず、それから以上に述べた如くさらに処理することに
より得られるプロラクチン及び／又は成長ホルモンの分
泌促進作用をもつすべての処理成分又は画分をも包含す
る意味で用いるものである。
【００１８】本発明のプロラクチン又は成長ホルモンの
分泌促進剤は、実質的に以上に述べた搾汁成分のみから
なることもできるが、一般には、製薬学的に許容しうる
各種の添加剤を配合して、投与に適した剤型に製剤化す
ることが好ましい。
分泌促進剤は、実質的に以上に述べた搾汁成分のみから
なることもできるが、一般には、製薬学的に許容しうる
各種の添加剤を配合して、投与に適した剤型に製剤化す
ることが好ましい。
【００１９】使用しうる添加剤としては、凍結乾燥もし
くは噴霧乾燥に際しての添加剤類のほか、所望の剤型に
製剤化するために通常用いられる任意の調剤用添加剤類
をあげることができ、具体的には例えば、アスコルビン
酸、ビオチン、パントテン酸カルシウム、カロチン、塩
化コリン、酸化マグネシウム、ナイアシン、塩化ピリド
キシン、リポフラピン、パントテン酸ナトリウム、チア
ミンヒドロクロライド、トコフエロール、ビタミンＡ、
ビタミンＢ12、ビタミンＤ2等の如き栄養剤；メタリン
酸ナトリウム、リン酸ナトリウム（第１、第２、第３
塩）、ピロリン酸ナトリウム、トリポリン酸ナトリウム
等の如き隠蔽剤；ソルビン酸カルシウム、安息香酸、パ
ラオキシ安息香酸メチル、安息香酸ソーダ等の如き保存
料；アラビヤゴム、トラガント、アルギン酸ナトリウ
ム、メチルセルローズ、カルボキシメチルセルローズ、
アルギン酸カルシウム、けい酸アルミニウム、けい酸カ
ルシウム、マンニツト、ソルビトール、乳糖、果糖、可
溶性澱粉、アミノ酸類、葡萄糖、砂糖、ハチミツ、蔗
糖、脂肪酸エステルの如き担体乃至希釈剤類をあげるこ
とができる。
くは噴霧乾燥に際しての添加剤類のほか、所望の剤型に
製剤化するために通常用いられる任意の調剤用添加剤類
をあげることができ、具体的には例えば、アスコルビン
酸、ビオチン、パントテン酸カルシウム、カロチン、塩
化コリン、酸化マグネシウム、ナイアシン、塩化ピリド
キシン、リポフラピン、パントテン酸ナトリウム、チア
ミンヒドロクロライド、トコフエロール、ビタミンＡ、
ビタミンＢ12、ビタミンＤ2等の如き栄養剤；メタリン
酸ナトリウム、リン酸ナトリウム（第１、第２、第３
塩）、ピロリン酸ナトリウム、トリポリン酸ナトリウム
等の如き隠蔽剤；ソルビン酸カルシウム、安息香酸、パ
ラオキシ安息香酸メチル、安息香酸ソーダ等の如き保存
料；アラビヤゴム、トラガント、アルギン酸ナトリウ
ム、メチルセルローズ、カルボキシメチルセルローズ、
アルギン酸カルシウム、けい酸アルミニウム、けい酸カ
ルシウム、マンニツト、ソルビトール、乳糖、果糖、可
溶性澱粉、アミノ酸類、葡萄糖、砂糖、ハチミツ、蔗
糖、脂肪酸エステルの如き担体乃至希釈剤類をあげるこ
とができる。
【００２０】本発明の分泌促進剤は経口又は非経口投与
することができ、それぞれの投与経路に適した任意の剤
型に製剤化することができ、例えば、散剤、顆粒剤、ペ
レットもしくは錠剤、コーティング錠剤、カプセル剤、
トローチ剤、液剤、シロップ剤などの経口投与に適した
剤型；注射剤、点滴剤、坐薬、点眼剤、点鼻剤、噴霧剤
などの非経口投与に適した剤型にすることができる。
することができ、それぞれの投与経路に適した任意の剤
型に製剤化することができ、例えば、散剤、顆粒剤、ペ
レットもしくは錠剤、コーティング錠剤、カプセル剤、
トローチ剤、液剤、シロップ剤などの経口投与に適した
剤型；注射剤、点滴剤、坐薬、点眼剤、点鼻剤、噴霧剤
などの非経口投与に適した剤型にすることができる。
【００２１】さらに、軟膏、クリーム、チンキ、パップ
剤等の外用剤型にすることも可能である。
剤等の外用剤型にすることも可能である。
【００２２】本発明の分泌促進剤の投与量は、搾汁成分
の精製の度合、患者の症状の軽量、性別、年令、体重、
医師の判断等に応じて広い範囲で変えることができる
が、一応の目安として一般に、有効成分として約０.０
１〜約２０ｍｇ／ｋｇ体重／日、好ましくは約０.０５
〜約１０ｍｇ／ｋｇ体重／日の範囲内を例示することが
できる。上記投与量は１日１回又は数回に分けて投与す
ることができる。しかし、経口投与する場合には、本発
明の分泌促進剤は以下に述べるとおり実質的に無毒性で
且つ副作用を伴わないので、上記範囲を越えて大量投与
することもできる。
の精製の度合、患者の症状の軽量、性別、年令、体重、
医師の判断等に応じて広い範囲で変えることができる
が、一応の目安として一般に、有効成分として約０.０
１〜約２０ｍｇ／ｋｇ体重／日、好ましくは約０.０５
〜約１０ｍｇ／ｋｇ体重／日の範囲内を例示することが
できる。上記投与量は１日１回又は数回に分けて投与す
ることができる。しかし、経口投与する場合には、本発
明の分泌促進剤は以下に述べるとおり実質的に無毒性で
且つ副作用を伴わないので、上記範囲を越えて大量投与
することもできる。
【００２３】本発明の分泌促進剤の有効成分であるイネ
科植物の緑葉の搾汁成分、例えば大麦の成熟期前の若葉
からの青汁粉末の急性毒性ＬＤ50は１２,０００ｍｇ／
ｋｇ（経口、マウス）と実質的に無毒性であり、１００
０ｍｇ／ｋｇ連続投与（経口、マウス）の亜急性毒性テ
ストの結果からも、毒性及び副作用は実質的に認められ
ない。
科植物の緑葉の搾汁成分、例えば大麦の成熟期前の若葉
からの青汁粉末の急性毒性ＬＤ50は１２,０００ｍｇ／
ｋｇ（経口、マウス）と実質的に無毒性であり、１００
０ｍｇ／ｋｇ連続投与（経口、マウス）の亜急性毒性テ
ストの結果からも、毒性及び副作用は実質的に認められ
ない。
【００２４】従って、その薬理効果の大きいこと、毒性
及び副作用のないことにおいて、本発明のイネ科植物の
緑葉の搾汁成分は、実用性あるプロラクチン及び／又は
成長ホルモンの分泌促進作用と実質的に無毒性で大量投
与可能であることの両者を兼備した極めてユニークなプ
ロラクチン又は成長ホルモンの分泌促進剤となることが
判明した。
及び副作用のないことにおいて、本発明のイネ科植物の
緑葉の搾汁成分は、実用性あるプロラクチン及び／又は
成長ホルモンの分泌促進作用と実質的に無毒性で大量投
与可能であることの両者を兼備した極めてユニークなプ
ロラクチン又は成長ホルモンの分泌促進剤となることが
判明した。
【００２５】以下、実施例により本発明をさらに具体的
に説明する。
に説明する。
【００２６】
実施例１：大麦若葉の青汁粉末の調製 成熟期前の大麦の若葉１ｋｇを水洗した後、クラッシャ
ーにて粉砕し、搾汁機を用いて搾汁して大麦若葉の青汁
１ｌを得た。この青汁に水酸化カルシウムを添加してｐ
Ｈを７.０に調節し、常法により凍結乾燥して、大麦若
葉の青汁粉末（以下、ＢＬＥ粉末という）４０ｇを得
た。
ーにて粉砕し、搾汁機を用いて搾汁して大麦若葉の青汁
１ｌを得た。この青汁に水酸化カルシウムを添加してｐ
Ｈを７.０に調節し、常法により凍結乾燥して、大麦若
葉の青汁粉末（以下、ＢＬＥ粉末という）４０ｇを得
た。
【００２７】実施例２：プロラクチン及び成長ホルモン
の分泌促進作用の測定試料液の調製 実施例１で調製したＢＬＥ粉末５ｇをＲＰＭＩ培地１０
０ｍｌ中に溶解し、不溶物を遠心分離によって除去し、
その上清液をＲＰＭＩ培地で所定の倍率で段階的に希釈
した後、０.２２μｍの滅菌フイルター（Ｍｉｌｌｉｐ
ｏｒｅ社製）で濾過して試料液とした。
の分泌促進作用の測定試料液の調製 実施例１で調製したＢＬＥ粉末５ｇをＲＰＭＩ培地１０
０ｍｌ中に溶解し、不溶物を遠心分離によって除去し、
その上清液をＲＰＭＩ培地で所定の倍率で段階的に希釈
した後、０.２２μｍの滅菌フイルター（Ｍｉｌｌｉｐ
ｏｒｅ社製）で濾過して試料液とした。
【００２８】測定法 スプラーグ−ダウリイラットの脳下垂体前葉細胞をＣｒ
ｏｎｉｎ及びＴｈｏｒｎｅｒの方法［Ｊ．Ｃｙｃｌｉｃ
Ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ Ｒｅｓ．，８，２６７（１９
８２）参照］で調製する。
ｏｎｉｎ及びＴｈｏｒｎｅｒの方法［Ｊ．Ｃｙｃｌｉｃ
Ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ Ｒｅｓ．，８，２６７（１９
８２）参照］で調製する。
【００２９】一方、牛胎児血清２.５％、馬血清７.５
％、ストレプトマイシン７.５μｇ／ｍｌ、ゲンタマイ
シン１５μｇ／ｍｌ、ペニシリン１０μｇ／ｍｌ及びフ
アンジゾン０.６μｇ／ｍｌを補充したＲＰＭＩ １６
４０培地を添加した２４ウエル組織培養用プレート（Ｆ
ａｌｃｏｎ社製）の各ウエルに、上記で準備した脳下垂
体前葉細胞を０.４×１０6生細胞／ウエルの割合で接種
する。
％、ストレプトマイシン７.５μｇ／ｍｌ、ゲンタマイ
シン１５μｇ／ｍｌ、ペニシリン１０μｇ／ｍｌ及びフ
アンジゾン０.６μｇ／ｍｌを補充したＲＰＭＩ １６
４０培地を添加した２４ウエル組織培養用プレート（Ｆ
ａｌｃｏｎ社製）の各ウエルに、上記で準備した脳下垂
体前葉細胞を０.４×１０6生細胞／ウエルの割合で接種
する。
【００３０】５％ＣＯ2−９５％空気の雰囲気中で３７
℃にて４日間培養後、抗生物質を含有する無血清ＲＰＭ
Ｉ １６４０培地で細胞を洗浄した後、上記で調製した
試料液１ｍｌをウエルに注加し、３７℃で３０分間培養
する。
℃にて４日間培養後、抗生物質を含有する無血清ＲＰＭ
Ｉ １６４０培地で細胞を洗浄した後、上記で調製した
試料液１ｍｌをウエルに注加し、３７℃で３０分間培養
する。
【００３１】培養後、培地をウエルから取り出し、ＮＩ
ＤＤＫ Ｒａｔ Ｐｉｔｕｉｔａｒｙ Ｈｏｒｍｏｎ
Ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ Ｐｒｏｇｒａｍに準じてラ
ジオイムノアッセイを行なうことにより、培地中のプロ
ラクチン及び成長ホルモンを定量する。その結果を表１
に示す。
ＤＤＫ Ｒａｔ Ｐｉｔｕｉｔａｒｙ Ｈｏｒｍｏｎ
Ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ Ｐｒｏｇｒａｍに準じてラ
ジオイムノアッセイを行なうことにより、培地中のプロ
ラクチン及び成長ホルモンを定量する。その結果を表１
に示す。
【００３２】
【表１】 表１：ＢＬＥによるプロラクチン及び成長ホルモンの分泌促進作用 ＢＬＥ＊ プロラクチン 成長ホルモン (μg／ml) (ng／well) (ng／well) ０ ２３０ ５０ ０.５ ３５０ ７５ ５ ４００ １１０ ５０ ４１０ １４０ ５００ ５９０ ３２０ ＊ 試料液１ｍｌを減圧下に蒸発乾固した後に残る固形
分の重量（μｇ）を意味する。
分の重量（μｇ）を意味する。
【００３３】実施例３ 波長２１４ｎｍにセットしたＭｏｄｅｌ９９０Ｐｈｏｔ
ｏｄｉｏｄｅ Ａｒｒａｙ（Ｗａｔｅｒｓ社製）を計装
したＭｏｄｅｌ６００ＨＰＬＣ Ｓｙｓｔｅｍ（Ｗａｔ
ｅｒｓ社製）に３００×１９ｍｍのＤｅｌｔａ−Ｐａｋ
３００Å １５μｍ Ｃ18カラム（Ｗａｔｅｒｓ社
製）を組み込み、このカラムに、前記実施例１で調製し
たＢＬＥ粉末２５０ｍｇのＨＰＬＣwater溶液（ＢＬＥ
粉末２５０ｍｇをＨＰＬＣwater５ｍｌに溶解し、その
溶液を３０００ｒｐｍ、３０分間遠心分離処理して不溶
分を除去した後、上清液をＭｉｌｌｉｐｏｒｅ ＤＥＰ
ＨＴｙｐｅフイルター０.４５μｍの滅菌フイルター及
び０.２２μｍの滅菌フイルター（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ
社製）で順次濾過して得られたもの）を負荷し、０.１
％三弗化酢酸からなる溶出液Ａと０.１％三弗化酢酸を
含有するアセトニトリルからなる溶出液Ｂとの間で、溶
出液Ａ ０％から溶出液Ｂ ８０％までの範囲の直線勾
配による溶出を行なった。その溶出曲線を図１に示す。
図１のグラフにおいて、タテ軸は２１４ｎｍの吸光率
（％）であり、ヨコ軸は溶出時間（分）を表わす。フラ
クシヨンコレクターにより補集された各フラクシヨンに
つき、実施例２に記載したと同様の方法でプロラクチン
放射活性を測定した結果、３０分から４０分の間に流出
したフラクシヨンに活性が認められた（図１の斜線部
分）。中でも３８分後に溶出したフラクシヨンに特に強
い活性が認められたので、このフラクシヨンを凍結乾燥
し、この凍結乾燥粉末５０ｍｇをＨＰＬＣwater ２ｍｌ
に溶解し、得られる溶液２００μｌについて上記と同様
の方法でＨＰＬＣを行った。その結果、プロラクチン放
出活性をもつ３つの活性フラクシヨンが得られた。
ｏｄｉｏｄｅ Ａｒｒａｙ（Ｗａｔｅｒｓ社製）を計装
したＭｏｄｅｌ６００ＨＰＬＣ Ｓｙｓｔｅｍ（Ｗａｔ
ｅｒｓ社製）に３００×１９ｍｍのＤｅｌｔａ−Ｐａｋ
３００Å １５μｍ Ｃ18カラム（Ｗａｔｅｒｓ社
製）を組み込み、このカラムに、前記実施例１で調製し
たＢＬＥ粉末２５０ｍｇのＨＰＬＣwater溶液（ＢＬＥ
粉末２５０ｍｇをＨＰＬＣwater５ｍｌに溶解し、その
溶液を３０００ｒｐｍ、３０分間遠心分離処理して不溶
分を除去した後、上清液をＭｉｌｌｉｐｏｒｅ ＤＥＰ
ＨＴｙｐｅフイルター０.４５μｍの滅菌フイルター及
び０.２２μｍの滅菌フイルター（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ
社製）で順次濾過して得られたもの）を負荷し、０.１
％三弗化酢酸からなる溶出液Ａと０.１％三弗化酢酸を
含有するアセトニトリルからなる溶出液Ｂとの間で、溶
出液Ａ ０％から溶出液Ｂ ８０％までの範囲の直線勾
配による溶出を行なった。その溶出曲線を図１に示す。
図１のグラフにおいて、タテ軸は２１４ｎｍの吸光率
（％）であり、ヨコ軸は溶出時間（分）を表わす。フラ
クシヨンコレクターにより補集された各フラクシヨンに
つき、実施例２に記載したと同様の方法でプロラクチン
放射活性を測定した結果、３０分から４０分の間に流出
したフラクシヨンに活性が認められた（図１の斜線部
分）。中でも３８分後に溶出したフラクシヨンに特に強
い活性が認められたので、このフラクシヨンを凍結乾燥
し、この凍結乾燥粉末５０ｍｇをＨＰＬＣwater ２ｍｌ
に溶解し、得られる溶液２００μｌについて上記と同様
の方法でＨＰＬＣを行った。その結果、プロラクチン放
出活性をもつ３つの活性フラクシヨンが得られた。
【００３４】各活性フラクシヨンを更に、３.９×３０
０ｍｍのDelta-Pak ３００Å１５μｍＣ18カラム（Wate
rs社製）に負荷し、０.５ｍｌ／ｍｉｎの流速で溶出液
Ａ０％から放出液Ｂ ８０％までの範囲内の直線濃度勾
配で４０分間クロマトグラフイーを行った。
０ｍｍのDelta-Pak ３００Å１５μｍＣ18カラム（Wate
rs社製）に負荷し、０.５ｍｌ／ｍｉｎの流速で溶出液
Ａ０％から放出液Ｂ ８０％までの範囲内の直線濃度勾
配で４０分間クロマトグラフイーを行った。
【００３５】その結果、上記３つの活性フラクシヨンか
らそれぞれ２６分、２６.５分及び２７分後に強いプロ
ラクチン放出活性を示す精製フラクシヨン Ｆ５４、Ｆ
５５およびＦ５６が得られた。Ｆ５６は０.０２ｍｇで
あった。
らそれぞれ２６分、２６.５分及び２７分後に強いプロ
ラクチン放出活性を示す精製フラクシヨン Ｆ５４、Ｆ
５５およびＦ５６が得られた。Ｆ５６は０.０２ｍｇで
あった。
【００３６】実施例４ 実施例３で得られたフラクシヨンＦ５６の精製標品をＶ
Ｇ ＺＡＢ−Ｔ MassSpectrometer (ＶＧ Instruments,
ＶＧ Analytical ＬＴＤ., Wythenshawe, Manchestter
England）により、直接化学イオン化法（ＤＣＩ）、電
子衝画法（ＥＩ）およびファスト・アトムボンバードメ
ント法（ＦＡＢ）を用いて解析した。化合物の元素組成
の解析には高解像質量分析法（ＨＲＭＳ）によりＦＡＢ
モードを用いて行った。高解像質量分析法によるＦＡＢ
−ＭＳの解析結果を図２に示す。このＦＡＢ−ＭＳの解
析結果から、ｍ／ｚ＝５３１に〔Ｍ＋Ｈ+〕、ｍ／ｚ＝
５５３に〔Ｍ＋Ｎａ+〕のピークがみられることより、
本化合物の分子量は５３０であり、元素分析の結果と併
せて考察すると、分子式はＣ33Ｈ54Ｏ5であること及び
本化合物のＵＶスペクトルの最大吸収波長は２８６ｎｍ
であることにより、本化合物はビタミンＥコハク酸エス
テル（VitaminＥ acid succinate）と判断された。
Ｇ ＺＡＢ−Ｔ MassSpectrometer (ＶＧ Instruments,
ＶＧ Analytical ＬＴＤ., Wythenshawe, Manchestter
England）により、直接化学イオン化法（ＤＣＩ）、電
子衝画法（ＥＩ）およびファスト・アトムボンバードメ
ント法（ＦＡＢ）を用いて解析した。化合物の元素組成
の解析には高解像質量分析法（ＨＲＭＳ）によりＦＡＢ
モードを用いて行った。高解像質量分析法によるＦＡＢ
−ＭＳの解析結果を図２に示す。このＦＡＢ−ＭＳの解
析結果から、ｍ／ｚ＝５３１に〔Ｍ＋Ｈ+〕、ｍ／ｚ＝
５５３に〔Ｍ＋Ｎａ+〕のピークがみられることより、
本化合物の分子量は５３０であり、元素分析の結果と併
せて考察すると、分子式はＣ33Ｈ54Ｏ5であること及び
本化合物のＵＶスペクトルの最大吸収波長は２８６ｎｍ
であることにより、本化合物はビタミンＥコハク酸エス
テル（VitaminＥ acid succinate）と判断された。
【００３７】実施例５ 実施例３で得られた活性フラクシヨンＦ５６を実施例２
の方法により活性を測定したところ、表２に示すよう
に、ビタミンＥコハク酸エステルを含む活性フラクシヨ
ンＦ５６はプロラクチン又は成長ホルモン産生に対して
顕著な活性を示すことが明らかになった。
の方法により活性を測定したところ、表２に示すよう
に、ビタミンＥコハク酸エステルを含む活性フラクシヨ
ンＦ５６はプロラクチン又は成長ホルモン産生に対して
顕著な活性を示すことが明らかになった。
【００３８】
【表２】 * 同様の結果はビタミンＥコハク酸エステルの市販品を
用いたときにも得られた。
用いたときにも得られた。
【００３９】 実施例Ａ：錠剤 ＢＬＥ粉末 １.０ｍｇ 乳糖 １００.０ｍｇ 結晶セルロース ９１.４ｍｇ タルク ５.０ｍｇ 結合剤（カルボキシメチルセルロース） ２.０ｍｇ ステアリン酸マグネシウム ０.６ｍｇ ２００.０ｍｇ ＢＬＥ粉末、乳糖、結晶セルロース、タルク及び結合剤
を均一に混合し、顆粒状とした後、ステアリン酸マグネ
シウムを加えて、１錠２００ｍｇの錠剤に成型する。
を均一に混合し、顆粒状とした後、ステアリン酸マグネ
シウムを加えて、１錠２００ｍｇの錠剤に成型する。
【００４０】実施例Ｂ：腸溶コーティング錠 実施例Ａで得た錠剤に下記の処方の腸溶性コーティング
を施し、１錠４３０ｍｇの腸溶錠を製造した。
を施し、１錠４３０ｍｇの腸溶錠を製造した。
【００４１】 メタアクリル酸／アクリル酸エチルコポリマー １０.８％ ポリエチレングリコール６０００ １.６％ 界面活性剤（Tween 80） １.１％ タルク ７.２％ 精製水 ７９.３％ １００.０％ 実施例Ｃ：顆粒剤 ＢＬＥ粉末 １.０ｍｇ 乳糖 ７００.０ｍｇ デンプン ２８９.０ｍｇ ゼラチン １０.０ｍｇ １０００.０ｍｇ ＢＬＥ粉末、乳糖及びデンプンを均一に混合し、少量の
水を加えてさらに混合し練合したのち顆粒状にし乾燥す
る（粒径０.８ｍｍ柱状顆粒）。
水を加えてさらに混合し練合したのち顆粒状にし乾燥す
る（粒径０.８ｍｍ柱状顆粒）。
【００４２】実施例Ｄ：カプセル剤 下記処方により顆粒を作り、腸溶性コーティングを行
い、それをカプセルに充填する。
い、それをカプセルに充填する。
【００４３】 顆粒（粒径０.８ｍｍ柱状顆粒） ＢＬＥ粉末 １.４ｍｇ 乳糖 １４０.０ｍｇ デンプン ５６.６ｍｇ ゼラチン ２.０ｍｇ ２００.０ｍｇ 腸溶性コーティング（コーティング量４３０ｍｇ／
ｇ顆粒） 処方は前記実施例Ｂのとおり。
ｇ顆粒） 処方は前記実施例Ｂのとおり。
【００４４】 カプセル充填 ゼラチンカプセル２号に２００ｍｇを充填する。
【００４５】実施例Ｅ：トローチ剤 ＢＬＥ粉末 １.０ｍｇ 白 糖 ９２０.０ｍｇ アラビアゴム ７９.０ｍｇ 精製水 適量 １０００.０ｍｇ ＢＬＥ抽出乾燥粉末及び白糖を均一に混合し、アラビア
ゴムを精製水少量にて溶かして加えて練合し、顆粒とし
たのち乾燥し、打錠してトローチ剤とした。
ゴムを精製水少量にて溶かして加えて練合し、顆粒とし
たのち乾燥し、打錠してトローチ剤とした。
【００４６】実施例Ｆ：坐薬 ＢＬＥ粉末 １.０ｇ ポリオキシエチレンラウリルエーテル(21E.O.) ３０.０ｇ ポリオキシエチレンソルビタン モノステアレート(6E.O.) １００.０ｇ 親油性モノステアリン酸グリセリン １６.０ｇ ポリエチレングリコール 400 ６.０ｇ ポリエチレングリコール 4000 適量 ポリオキシエチレンラウリルエーテル、ポリオキシエチ
レンソルビタンモノステアレート、親油性モノステアリ
ン酸グリセリン、ポリエチレングリコール４００及びポ
リエチレングリコール４０００を６０℃に加温して溶解
した後、４５℃まで冷却し、これにＢＬＥ粉末を加えて
均一に混合したのち、坐薬成型器にて２ｇの坐薬に成型
した。
レンソルビタンモノステアレート、親油性モノステアリ
ン酸グリセリン、ポリエチレングリコール４００及びポ
リエチレングリコール４０００を６０℃に加温して溶解
した後、４５℃まで冷却し、これにＢＬＥ粉末を加えて
均一に混合したのち、坐薬成型器にて２ｇの坐薬に成型
した。
【００４７】 乳糖を真空混合乾燥コーティング器内に投入後、回転混
合しながら約５０℃に加温し、次いで真空ポンプにより
タンク内を真空状態にし、ＢＬＥ粉末の水溶液 社製、アクリル系コポリマー）の塩化メチレン溶液（製
品全重量の１％のステアリン酸マグネシウムを含有）で
同様に真空下でコーティングを行い、ＢＬＥ粉末のマイ
クロカプセルを得た。
合しながら約５０℃に加温し、次いで真空ポンプにより
タンク内を真空状態にし、ＢＬＥ粉末の水溶液 社製、アクリル系コポリマー）の塩化メチレン溶液（製
品全重量の１％のステアリン酸マグネシウムを含有）で
同様に真空下でコーティングを行い、ＢＬＥ粉末のマイ
クロカプセルを得た。
【００４８】実施例Ｈ：錠剤 フラクシヨンＦ５６凍結乾燥粉末 １０ｍｇ 乳糖 ９０.０ｍｇ 結晶セルロース ９２.４ｍｇ タルク ５.０ｍｇ 結合剤（カルボキシメチルセルロース） ２.０ｍｇ ステアリン酸マグネシウム ０.６ｍｇ ２００.０ｍｇ フラクシヨンＦ５６凍結乾燥粉末、乳糖、結晶セルロー
ス、タルク及び結合剤を均一に混合し、顆粒状とした
後、ステアリン酸マグネシウムを加えて、１錠２００ｍ
ｇの錠剤に成型する。
ス、タルク及び結合剤を均一に混合し、顆粒状とした
後、ステアリン酸マグネシウムを加えて、１錠２００ｍ
ｇの錠剤に成型する。
【００４９】実施例Ｉ：腸溶コーティング錠 実施例Ｈで得た錠剤に下記の処方の腸溶性コーティング
を施し、１錠４３０ｍｇの腸溶錠を製造した。
を施し、１錠４３０ｍｇの腸溶錠を製造した。
【００５０】 メタアクリル酸／アクリル酸エチルコポリマー １０.８％ ポリエチレングリコール６０００ １.６％ 界面活性剤（Tween 80） １.１％ タルク ７.２％ 精製水 ７９.３％ １００.０％ 実施例Ｊ：顆粒剤 フラクシヨンＦ５６凍結乾燥粉末 １０ｍｇ 乳糖 ７００.０ｍｇ デンプン ２８０.０ｍｇ ゼラチン １０.０ｍｇ １０００.０ｍｇ フラクシヨンＦ５６凍結乾燥粉末、乳糖及びデンプンを
均一に混合し、少量の水を加えてさらに混合し練合した
のち顆粒状にし乾燥する（粒径０.８ｍｍ柱状顆粒）。
均一に混合し、少量の水を加えてさらに混合し練合した
のち顆粒状にし乾燥する（粒径０.８ｍｍ柱状顆粒）。
【００５１】実施例Ｋ：カプセル剤 下記処方により顆粒を作り、腸溶性コーティングを行
い、それをカプセルに充填する。
い、それをカプセルに充填する。
【００５２】 顆粒（粒径０.８ｍｍ柱状顆粒） フラクシヨンＦ５６凍結乾燥粉末 １０ｍｇ 乳糖 １１０.０ｍｇ デンプン ７８.０ｍｇ ゼラチン ２.０ｍｇ ２００.０ｍｇ 腸溶性コーティング（コーティング量４３０ｍｇ／
ｇ顆粒） 処方は前記実施例Ｂのとおり。
ｇ顆粒） 処方は前記実施例Ｂのとおり。
【００５３】 カプセル充填 ゼラチンカプセル２号に２００ｍｇを充填する。
【図面の簡単な説明】
【図１】図１はＢＬＥ粉末の水溶液のＲＰ−ＨＰＬＣに
よるカラムクロマトグラムである。
よるカラムクロマトグラムである。
【図２】図２は実施例３で得られるフラクシヨンＦ５６
の精製標品の高解像質量分析法によるＦＡＢ−ＭＳであ
る。
の精製標品の高解像質量分析法によるＦＡＢ−ＭＳであ
る。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (56)参考文献 特開 昭62−226927（ＪＰ，Ａ) 特公 昭46−38548（ＪＰ，Ｂ２) 特公 昭46−39548（ＪＰ，Ｂ２) 特公 昭42−21484（ＪＰ，Ｂ１) 特公 昭43−1974（ＪＰ，Ｂ１) 特公 昭39−2495（ＪＰ，Ｂ１) 特許142687（ＪＰ，Ｃ１)
Claims (3)
- 【請求項１】 大麦、小麦及び裸麦から選ばれる麦類植
物の成熟期前の緑葉の搾汁成分を有効成分として含有す
ることを特徴とするプロラクチン又は成長ホルモンの分
泌促進剤。 - 【請求項２】 麦類植物が大麦である請求項１記載の分
泌促進剤。 - 【請求項３】 ビタミンＥコハク酸エステルを含有する
請求項１記載の分泌促進剤。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP5062740A JP2613732B2 (ja) | 1992-03-04 | 1993-02-26 | プロラクチン又は成長ホルモンの分泌促進剤 |
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP4-81460 | 1992-03-04 | ||
| JP8146092 | 1992-03-04 | ||
| JP5062740A JP2613732B2 (ja) | 1992-03-04 | 1993-02-26 | プロラクチン又は成長ホルモンの分泌促進剤 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH069420A JPH069420A (ja) | 1994-01-18 |
| JP2613732B2 true JP2613732B2 (ja) | 1997-05-28 |
Family
ID=26403789
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP5062740A Expired - Fee Related JP2613732B2 (ja) | 1992-03-04 | 1993-02-26 | プロラクチン又は成長ホルモンの分泌促進剤 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP2613732B2 (ja) |
Families Citing this family (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| AU780043B2 (en) * | 2001-03-14 | 2005-02-24 | Enseki Aojiru Co., Ltd. | Process of collecting young leaves of rice plant and its processing method, processed goods and foods |
| CN101932226B (zh) | 2008-03-05 | 2013-10-30 | 星天具工业株式会社 | 割草机用旋转切割器 |
| JP6625187B1 (ja) * | 2018-10-18 | 2019-12-25 | 日本薬品開発株式会社 | 麦類若葉搾汁乾燥粉末の造粒物の製造方法 |
Family Cites Families (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH0643330B2 (ja) * | 1986-03-28 | 1994-06-08 | 義秀 萩原 | 麦類青汁系血糖降下剤 |
-
1993
- 1993-02-26 JP JP5062740A patent/JP2613732B2/ja not_active Expired - Fee Related
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH069420A (ja) | 1994-01-18 |
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