JP2600874B2 - ガラクトオリゴ糖の製造方法 - Google Patents
ガラクトオリゴ糖の製造方法Info
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- JP2600874B2 JP2600874B2 JP32485588A JP32485588A JP2600874B2 JP 2600874 B2 JP2600874 B2 JP 2600874B2 JP 32485588 A JP32485588 A JP 32485588A JP 32485588 A JP32485588 A JP 32485588A JP 2600874 B2 JP2600874 B2 JP 2600874B2
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- Japan
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- lactose
- galacto
- oligosaccharide
- cells
- glc
- Prior art date
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Description
【発明の詳細な説明】 （産業上の利用分野） 本発明は乳糖または乳糖含有物から一般式（Gal−（G
al）ｎ−Glc（但し、式中Galはガラクトース残基、Glc
はグルコース残基、ｎは１〜３の整数をそれぞれ表わ
す）で示されるガラクトオリゴ糖を生成する能力を有す
るロドトルラ属又はステリグマトマイセス属又はシロバ
シディウム属に属する微生物を乳糖または乳糖含有物に
作用せしめ生成するガラクトオリゴ糖を採取することを
特徴とするガラクトオリゴ糖の製造方法に関する。
al）ｎ−Glc（但し、式中Galはガラクトース残基、Glc
はグルコース残基、ｎは１〜３の整数をそれぞれ表わ
す）で示されるガラクトオリゴ糖を生成する能力を有す
るロドトルラ属又はステリグマトマイセス属又はシロバ
シディウム属に属する微生物を乳糖または乳糖含有物に
作用せしめ生成するガラクトオリゴ糖を採取することを
特徴とするガラクトオリゴ糖の製造方法に関する。
近年、ガラクトース残基を含むオリゴ糖がビフィズス
増殖因子として注目されている。
増殖因子として注目されている。
（従来技術と問題点） ガラクトオリゴ糖の製造方法は酵素法としてアスプル
ギウス・オリゼエのβ−ガラクトシダーゼを用いる方法
（特公昭58−20266、特開昭58−99497）が知られている
が、ガラクトオリゴ糖の生成収率が低くく実用性に乏し
い、また、ガラクトオリゴ糖を乳糖を原料としてクリプ
トコッカス・ローレンティを培養し、培養液中に蓄積さ
せる方法（特開昭60−251896）が知られているが、原料
である乳糖の仕込濃度が低くく高濃度にガラクトオリゴ
糖を蓄積することができない。
ギウス・オリゼエのβ−ガラクトシダーゼを用いる方法
（特公昭58−20266、特開昭58−99497）が知られている
が、ガラクトオリゴ糖の生成収率が低くく実用性に乏し
い、また、ガラクトオリゴ糖を乳糖を原料としてクリプ
トコッカス・ローレンティを培養し、培養液中に蓄積さ
せる方法（特開昭60−251896）が知られているが、原料
である乳糖の仕込濃度が低くく高濃度にガラクトオリゴ
糖を蓄積することができない。
（問題を解決するための手段） 本発明者らは上述の事情に鑑み乳糖または乳糖含有物
からガラクトオリゴ糖を高蓄積・高収率で生成する微生
物を検索した結果、ロドトルラ属又はステリグマトマイ
セス属又はシロバシディウム属に属する微生物が、乳糖
または乳糖含有物からきわめて高蓄積、高収率でガラク
トオリゴ糖を生産することを見いだし、本発明を完成す
るに至った。
からガラクトオリゴ糖を高蓄積・高収率で生成する微生
物を検索した結果、ロドトルラ属又はステリグマトマイ
セス属又はシロバシディウム属に属する微生物が、乳糖
または乳糖含有物からきわめて高蓄積、高収率でガラク
トオリゴ糖を生産することを見いだし、本発明を完成す
るに至った。
本発明において使用される微生物は具体的にはロドト
ルラ・ミヌタ（Rhodotorula minuta）IFO879、ステリグ
マトマイセス・エリビアエ（Sterigmatomyces elviae）
FERM BP−2586シロバシディウム・マグナム（Sirobasid
ium magnun）CBS 6803がある。
ルラ・ミヌタ（Rhodotorula minuta）IFO879、ステリグ
マトマイセス・エリビアエ（Sterigmatomyces elviae）
FERM BP−2586シロバシディウム・マグナム（Sirobasid
ium magnun）CBS 6803がある。
これらの微生物の培養には、通常これらの微生物が資
化しうる栄養源であれば何でも使用しうる。例えばグル
コース，シュクロース等の炭水化物、エタノール，グリ
セロール等のアルコール，酢酸，プロピオン酸等の有機
酸；大豆油等の炭素源またはこれらの混合物、酵母エキ
ス，ペプトン，肉エキス，コーンスティープリカー，硫
安，アンモニア等の含窒素無機有機栄養源；リン酸塩，
マグネシウム，鉄，マンガン，カリ等の無機栄養源；お
よびビオチン、チアミン等のビタミン類を適宜配合した
通常の培地が用いられる。培養の方法としては栄養培地
のpHを4.0〜9.5の範囲で好気的に20〜40℃の範囲で12時
間〜５日間培養する。
化しうる栄養源であれば何でも使用しうる。例えばグル
コース，シュクロース等の炭水化物、エタノール，グリ
セロール等のアルコール，酢酸，プロピオン酸等の有機
酸；大豆油等の炭素源またはこれらの混合物、酵母エキ
ス，ペプトン，肉エキス，コーンスティープリカー，硫
安，アンモニア等の含窒素無機有機栄養源；リン酸塩，
マグネシウム，鉄，マンガン，カリ等の無機栄養源；お
よびビオチン、チアミン等のビタミン類を適宜配合した
通常の培地が用いられる。培養の方法としては栄養培地
のpHを4.0〜9.5の範囲で好気的に20〜40℃の範囲で12時
間〜５日間培養する。
ガラクトオリゴ糖を生成させる方法としては培養初期
あるいは培養途中に、乳糖または脱脂乳等の乳糖含有物
を培地に添加し培養しながら行なってもよいし、静止菌
体を用いても良い。
あるいは培養途中に、乳糖または脱脂乳等の乳糖含有物
を培地に添加し培養しながら行なってもよいし、静止菌
体を用いても良い。
静止菌体を用いる方法としては、培養液をそのまま用
いる方法、遠心分離等により菌体を分離しこれをリン酸
緩衝液等に再懸濁したものに、乳糖または乳糖含有物を
添加し反応させる方法等がある。また菌体は生菌体のま
までもよいしアセトン処理凍結乾燥等の処理をほどこし
たものでよい。またこれらの菌体を担体に固定化して用
いることもできる。
いる方法、遠心分離等により菌体を分離しこれをリン酸
緩衝液等に再懸濁したものに、乳糖または乳糖含有物を
添加し反応させる方法等がある。また菌体は生菌体のま
までもよいしアセトン処理凍結乾燥等の処理をほどこし
たものでよい。またこれらの菌体を担体に固定化して用
いることもできる。
なお、乳糖または乳糖含有物からガラクトオリゴ糖を
生成させる反応において、乳糖または乳糖含有物の使用
量は特に制限されないが、乳糖として１〜70％重量％の
範囲、好ましくは2.5〜50重量％である。反応は通常20
〜70％、好ましくは25〜65℃の温度でpH2〜10、好まし
くは３〜７の範囲で２時間〜10日間行なう。
生成させる反応において、乳糖または乳糖含有物の使用
量は特に制限されないが、乳糖として１〜70％重量％の
範囲、好ましくは2.5〜50重量％である。反応は通常20
〜70％、好ましくは25〜65℃の温度でpH2〜10、好まし
くは３〜７の範囲で２時間〜10日間行なう。
反応が終了した反応液は必要に応じて菌体を分離後イ
オン交換樹脂、ゲル濾過、活性炭吸着などのクロマトグ
ラフィー等にかけることによりガラクトオリゴ糖を精製
できる。
オン交換樹脂、ゲル濾過、活性炭吸着などのクロマトグ
ラフィー等にかけることによりガラクトオリゴ糖を精製
できる。
以下、本発明を具体的に実施例にて説明するが、本発
明はこれら実施例のみに限定されるものではない。実施
例における乳糖及びガラクトオリゴ糖の定量は高速液体
クロマトグラフィー（ポンプは日立製作所製655型、検
出器は昭和電工SE−51カラムはShodex−S801、溶媒は
水）を用いピーク面積より求めた。
明はこれら実施例のみに限定されるものではない。実施
例における乳糖及びガラクトオリゴ糖の定量は高速液体
クロマトグラフィー（ポンプは日立製作所製655型、検
出器は昭和電工SE−51カラムはShodex−S801、溶媒は
水）を用いピーク面積より求めた。
実施例１ ラクトース（乳糖）10.0g/dl,グリセロール2.0g/dl,
酵母エキス0.05g/dl(NH4)2SO4 0.5g/dl,K2HPO4 0.3g/
dl,KH2PO4 0.1g/dl,MgSO4・7H2O 0.05g/dlを含む培地
（pH7.0）を500ml容フラスコに50ml入れ115℃15分間殺
菌した。
酵母エキス0.05g/dl(NH4)2SO4 0.5g/dl,K2HPO4 0.3g/
dl,KH2PO4 0.1g/dl,MgSO4・7H2O 0.05g/dlを含む培地
（pH7.0）を500ml容フラスコに50ml入れ115℃15分間殺
菌した。
これにマルツエキス寒天培地で25℃２日間培養した。
ロドトルラ・ミヌタIFO 879,ステリグマトマイセス・エ
リビアエFERM BP−2586シロバシディウム・マグナムCBS
6803をそれぞれ一白金耳接種し30℃にて４日間振とう
培養した。得られた培養液の上澄中の生成ガラクトオリ
ゴ糖の量を表１にしめした。
ロドトルラ・ミヌタIFO 879,ステリグマトマイセス・エ
リビアエFERM BP−2586シロバシディウム・マグナムCBS
6803をそれぞれ一白金耳接種し30℃にて４日間振とう
培養した。得られた培養液の上澄中の生成ガラクトオリ
ゴ糖の量を表１にしめした。
実施例２ ラクトース1.0g/dl,グリセロール2.0g/dl,酵母エキス
1.0g/dl,ポリペプトン1.0g/dl,(NH4)2SO4 0.5g/dl,K2HP
O4 0.3g/dl,KH2PO40.1g/dl,MgSO4・7H2O 0.05g/dlを含
む培地（pH7.0）を500ml容フラスコに50ml入れ115℃15
分間殺菌した。
1.0g/dl,ポリペプトン1.0g/dl,(NH4)2SO4 0.5g/dl,K2HP
O4 0.3g/dl,KH2PO40.1g/dl,MgSO4・7H2O 0.05g/dlを含
む培地（pH7.0）を500ml容フラスコに50ml入れ115℃15
分間殺菌した。
これにマルツエキス寒天培地で２日間培養した。ロド
トルラ・ミヌタIFO 879,ステリグマトマイセス・エリビ
アエFERM BP−2586シロバシディウム・マグナムCBS 680
3をそれぞれ一白金耳接種し30℃で２日間振とう培養し
た。培養終了後遠心分離により菌体を集め培養液と同量
の整理食塩水で一回洗浄し菌体を集めた。
トルラ・ミヌタIFO 879,ステリグマトマイセス・エリビ
アエFERM BP−2586シロバシディウム・マグナムCBS 680
3をそれぞれ一白金耳接種し30℃で２日間振とう培養し
た。培養終了後遠心分離により菌体を集め培養液と同量
の整理食塩水で一回洗浄し菌体を集めた。
この菌体を22g/dlの乳糖液（50mMリン酸緩衝液中pH7.
0）50mlに懸濁し50℃で２日間反応させた。反応液の糖
組成を表−２にしめした。
0）50mlに懸濁し50℃で２日間反応させた。反応液の糖
組成を表−２にしめした。
Claims (1)
- 【請求項１】乳糖または乳糖含有物から一般式Gal−（G
al）ｎ−Glc（但し式中Galはガラクトース残基、Glcは
グルコース残基、ｎは１〜３の整数をそれぞれ表わす）
で示されるガラクトオリゴ糖を生成する能力を有するロ
ドトルラ属、又はステリグマトマイセス属又はシロバシ
ディウム属に属する微生物を乳糖または乳糖含有物に作
用せしめ生成するガラクトオリゴ糖を採取することを特
徴とするガラクトオリゴ糖の製造方法。
Priority Applications (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP32485588A JP2600874B2 (ja) | 1988-05-17 | 1988-12-22 | ガラクトオリゴ糖の製造方法 |
| FR8917127A FR2640997A1 (en) | 1988-12-22 | 1989-12-22 | Process for the manufacture of a galactose transfer product. |
| US07/454,944 US5149640A (en) | 1988-12-22 | 1989-12-22 | Method for producing galactose transfer products |
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP11816088 | 1988-05-17 | ||
| JP63-118160 | 1988-05-17 | ||
| JP32485588A JP2600874B2 (ja) | 1988-05-17 | 1988-12-22 | ガラクトオリゴ糖の製造方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH0272890A JPH0272890A (ja) | 1990-03-13 |
| JP2600874B2 true JP2600874B2 (ja) | 1997-04-16 |
Family
ID=26456140
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP32485588A Expired - Lifetime JP2600874B2 (ja) | 1988-05-17 | 1988-12-22 | ガラクトオリゴ糖の製造方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP2600874B2 (ja) |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE102005024154B3 (de) | 2005-05-23 | 2007-02-08 | Bischoff Analysentechnik und -geräte GmbH | Elemente zur Trennung von Substanzen durch Verteilung zwischen einer stationären und einer mobilen Phase und Verfahren zur Herstellung einer Trennvorrichtung |
| US20090297660A1 (en) | 2008-06-02 | 2009-12-03 | Kraft Food Holdings, Inc. | Cheese Products Containing Galacto-Oligosaccharides And Having Reduced Lactose Levels |
-
1988
- 1988-12-22 JP JP32485588A patent/JP2600874B2/ja not_active Expired - Lifetime
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH0272890A (ja) | 1990-03-13 |
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