JP2568228B2 - 治療用ソマトスタチンアナログ - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】 ［産業上の利用分野］ 本発明は治療用のペプチドに関するものである。

［従来の技術］ GH−放出−阻害活性を示す多くのソマトスタチンアナ
ログが、天然に存在する14個のアミノ酸よりもアミノ酸
数の少ないアナログも含めて、文献に発表されている。
例えば、コイ（Coy）らによるアメリカ合衆国特許第4,4
85,101号（参照により本明細書に含まれ）にはＮ−末端
にアセチル基、Ｃ−末端にNH₂、６位の位置にＤ−Trpお
よび４位の位置にｐ−Cl−Pheを持つドデカペプチドに
ついて述べられている。（ここでは、立体配置の定義が
無いときは、Ｌ型異性体を意味している。） ［発明の構成］ 一般的には、本発明は下記の構造式： Ｒ−A¹−Cys−Tyr−Ｄ−Trp−Lys−α−アミノ酪酸−Cy
s−A², ［式中、ＲはH,あるいはC_1-20アルキルであり;A¹はＤ−
β−Nal（Nalはナフチルアラニンを意味する）,D−Trp,
あるいはＤ−Ｘ−Phe（ここで、ＸはH,OH,CH₃あるいは
ハロゲンである）であり；およびA²はThr−NH₂,Thr−O
H,Nal−NH₂,あるいはTrp−NH₂である］で表されるオク
タペプチドを特徴とする。

本発明の好ましい化合物は、 Ｄ−Phe−Cys−Tyr−Ｄ−Trp−Lys−α−アミノ酪酸−C
ys−Thr−NH₂;D−β−Nal−Cys−Tyr−Ｄ−Trp−Lys−
α−アミノ酪酸−Cys−Thr−NH₂;D−ｐ−Cl−Phe−Cys
−Tyr−Ｄ−Trp−Lys−α−アミノ酪酸−Cys−Thr−N
H₂;およびアセチル−Ｄ−ｐ−Cl−Phe−Cys−Tyr−Ｄ−
Trp−Lys−α−アミノ酪酸−Cys−Thr−NH₂を含んでい
る。

他の好ましい具体例においては、治療用化合物の治療
上有効量と薬学的に許容される担体物質（例えば、炭酸
マグネシウム、ラクトースあるいは治療用化合物のミセ
ルの形成をもたらすリン脂質）が治療用組成物を形成す
る。例えば、ヒト患者への経口投薬用の丸薬、錠剤、カ
プセルあるいは液体；その化合物を必要としているヒト
患者への経皮投与用として塗り広げられるクリーム、ゲ
ル、ローションあるいは軟膏；点滴あるいはスプレイと
して鼻に投与できる液体；あるいは静脈注射、皮下、非
経口的あるいは腹腔内投与のできる液体などがある。そ
の丸薬、錠剤あるいはカプセルは、組成物を患者の小腸
まで分解されないで通過させるために十分な時間の間、
その患者の胃の中で胃酸からその組成物を保護できる物
質で被覆することができる。治療用組成物は患者への筋
肉内投与用の生物分解される持続性放出処方物の形にも
できる。最高の効能を得るには、ゼロオーダーリリース
が望ましい。ゼロオーダーリリースは、治療用組成物を
投与するための埋め込みあるいは外部ポンプ、例えば、
インフソイド（Infusoid^TM）ポンプの使用により実現で
きる 本発明の化合物は、GH,インシュリンおよびグルカゴ
ンの分泌阻害活性がある。さらに、親脂性芳香族Ｎ−末
端は生体内での長期間の活性をもたらすことができる。

本発明の他の特徴および利点は、以下の発明の好まし
い具体例の説明および特許請求の範囲より明らかになる
であろう。

本発明の化合物は、前記の一般式をもっている。それ
らは総て、２位の位置にCys;3位の位置にTyr;4位の位置
にＤ−Trp;5位の位置にLyr;6位の位置にAbu（Abuはα−
アミノ酪酸を意味する）;7位の位置にCysをもっている
ソマトスタチンのオクタペプチドアナログである。特に
１位の位置のＤ−β−Nalが活性を強めることが分かっ
た。

本化合物は薬学的に許容される塩の形で提供できる。
好ましい塩の例は治療上許容される有機酸、例えば、酢
酸、乳酸、マレイン酸、クエン酸、リンゴ酸、アスコル
ビン酸、琥珀酸、安息香酸、サリチル酸、メタンスルフ
ォン酸、トリエンスルフォン酸あるいはパモエ酸、並び
にタンニン酸、カルボキシメチルセルロースのようなポ
リマー酸およびハロゲン化水素酸、塩酸、硫酸あるいは
リン酸のような無機酸との塩である。

実施例1.合成 一つのオクタペプチドの合成は下記に従っている。本
発明の他のオクタペプチドは、当業者の能力範囲内で、
下記の合成方法の適当な変法を作ることにより調製する
ことができる。

Ｄ−β−ナフチルアラニン−Cys−Tyr−Ｄ−Trp−Lys
−Abu−Cys−Thr−NH₂（BIM−23025と呼ぶ）の調製の最
初の段階は、次に示すように中間体、第三ブチルオキシ
カルボニル−Ｄ−β−ナフチルアラニン−Ｓ−メチルベ
ンジル−Csy−Tyr−Ｄ−Trp−Ｎ−ベンジルオキシカル
ボニル−Lys−Abu−Ｓ−メチルベンジル−Cys−Ｏ−ベ
ンジル−Thr−ベンズヒドリルアミン樹脂の調製であっ
た。

ベンズヒドリルアミン−ポリスチレン樹脂（ベガバイ
オケミカルズ社（Vega Biochemicals,Inc.））を塩素イ
オン型で、下記の反応サイクル：（ａ）メチレンクロラ
イド；（ｂ）メチレンクロライドに溶かした33％トリフ
ルオロ酢酸（各回１分および25分の２回）；（ｃ）メチ
レンクロライド；（ｄ）エタノール；（ｅ）メチレンク
ロライド；（ｆ）クロロホルムに溶かした10％トリエチ
ルアミン、を行うようにプログラムされたベックマン
（Beckman）990Bペプチド合成器の反応容器に入れた。

中和された樹脂は、メチレンクロライド中で１時間Bo
c−Ｏ−ベンジル−スレオニンおよびジイソプロピルカ
ルボジイミド（各1.5mmole）と撹拌した、そして生成し
たアミノ酸樹脂を、上記洗浄工程の（ａ）から（ｇ）の
段階で処理した。下記のアミノ酸（1.5mmole）も同じ手
法により順次結合させた:Boc−Ｓ−メチルベンジル−Cy
s,Boc−Ｎ−α−ベンジンオキシカルボニル−Abu,Boc−
Ne−ベンジルオキシカルボニル−リジン、Boc−Ｄ−Tr
p,Boc−Tyr,Boc−Ｓ−メチルベンジル−Cys、Boc−Ｄ−
β−ナフチルアラニン。

その樹脂を洗浄、乾燥し、そしてアニソール（4ml）
および無水フッ化水素酸（36ml）と０℃で混合し45分間
攪拌した。（チオアニソール、トリフルオロ酢酸および
トリフルオロメタンスルフォン酸を1:90:9:の比率で用
い６時間かけても良い）。過剰のフッ化水素酸を素早く
窒素気流中で蒸発させて遊離アミノ酸を沈澱させ、それ
をエーテルで洗浄した。次に、その粗ペプチドを90％酢
酸800mlに溶かし茶色が消えなくなるまでメタノールに
溶かしたI₂を加えた。その溶液を真空中で溶媒を除去す
る前に１時間攪拌した。その生成した油を最小容量の50
％酢酸に溶かし、セファデックスＧ−25のカラム（2.5x
100mm）に負荷した。紫外吸光および薄層クロマトグラ
フによる主成分を含む分画をプールし、小容量に濃縮
し、ワットマンLRP−１オクタデシルシラン（15−50μ
Ｍ）カラム（2.5x50cm）に負荷した。

そのカラムは、0.1％トリフルオロ酢酸を含む水中の
アセトニトリルの10−50％の直線濃度勾配により溶出し
た。各分画は薄層クロマトグラフにより分析用高速液体
クロマトグラフにより検査し、そしてプールして最高の
純度を得た、そして、もし必要ならば、異なった塩を調
製した。例えば、酢酸塩あるいはリン酸塩である。その
溶液を水から繰り返し凍結乾燥すると白い、ふわふわし
た粉末として生成物170mgを得た。

その生成物は、高速液体クロマトグラフおよび薄層ク
ロマトグラフにより均一であることが分かった。酸加水
分解物のアミノ酸分析によりオクタペプチドの組成が確
認された。

Ｄ−ｐ−Cl−Phe−Cys−Tyr−Ｄ−Trp−Lys−α−ア
ミノ酪酸−Cys−Thr−NH₂（BIM−23024と呼ぶ）；およ
びアセチル−Ｄ−ｐ−Cl−Phe−Cys−Tyr−Ｄ−Trp−Ly
s−α−アミノ酪酸−Cys−Thr−NH₂（BIM−23026と呼
ぶ）；およびＤ−Phe−Cys−Tyr−Ｄ−Trp−Lys−α−
アミノ酪酸−Cys−Thr−NH₂（BIM−23023と呼ぶ）の構
造式をもつ本発明のオクタペプチドは上記に述べた方法
と類似の方法に従って合成された。

BIM−23023の質量分析（FAB−MS）によるピークは103
2.5を示した。BIM−23024、BIM−23025およびBIM−2302
6は、下記条件でHPLC分析したところ、リテンションタ
イムが、それぞれ20.68分、22.86分および28.54分であ
った。

カラム：リクロスフェア（Lichrosphere）C18, 3.2×2
5mm,3μ（3 ODS, 100A） 検出： 280nm 溶出液:A＝0.1M酢酸アンモニウム，氷酢酸にてpHを4.6
に調整 Ｂ＝溶出液Ａとアセトニルトリルの20:80混合物 勾配： Ａ液中Ｂ液濃度を50分間で20％から70％に増加
（毎分１％） 流速： 0.5ml/分 実施例2.使用 ホ乳動物、特にヒトに投与するとき（例えば、経口、
局所、静脈、持続性放出の非経口、生物分解可能な形
態、鼻、あるいは坐薬）、この化合物は、GH放出を阻害
すること、インシュリン、グルカゴンおよびすい臓の外
分泌性の分泌の阻害すること、および中枢神経系に治療
上影響することにおいて有効である。

本化合物はソマトスタチンでの投薬量、あるいはその
活性がより強いので、それより少ない投薬量でホ乳動
物、例えばヒトに投与することができる。本発明の化合
物は癌の治療、特に成長ホルモン依存性癌（例えば、
骨、軟骨、すい臓（内分泌および外分泌）、前立腺、あ
るいは乳房）、先端肥大症およびそれに関連のある内分
泌性の分泌過多状態、あるいは急性の出血性潰瘍、およ
びすい臓炎あるいは下痢により苦しんでいる急患に使用
できる。本化合物は糖尿病の管理および肝硬変あるいは
肝炎で苦しむ患者の肝臓の保護にも使用することができ
る。本化合物は、またアルツハイマー病の治療のため
に、ある種のオピエート受容体に特異的に作用すること
により痛みを取り除くための鎮痛薬として、および潰瘍
治療用に胃細胞を保護する化合物としても使用できる。
この化合物はキノコ毒素中毒のある種のものの治療にも
使用できる。

本化合物は糖尿病起因性の網膜症の治療にも使用でき
る。本化合物の抗癌活性は、表皮成長因子のような癌起
因性成長因子を中和できる能力に関係しているかもしれ
ない。

本化合物はホ乳動物、例えばヒトに、0.01ないし1000
μg/kg/日の投与量で、好ましくは0.1ないし100μg/kg/
日で投与することができる。

他の具体例は、特許請求の範囲内である。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 ウィリアム・エイ・マーフィー アメリカ合衆国ルイジアナ州70433，コ ヴィントン，ルート ８，ボックス 979 (72)発明者 マーク・エル・ハイマン アメリカ合衆国ルイジアナ州70122，ニ ュー・オーリンズ，ジャスミン・ストリ ート 2513 (56)参考文献 特開 昭61−293997（ＪＰ，Ａ) Ｐｖｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃ ｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．，83（６），1896− 1900（1986)

Claims (5)

(57)【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】下記の構造式： A¹−Cys−Tyr−Ｄ−Trp−Lys−α−アミノ酪酸−Cys−T
   hr−NH₂ 〔式中、A¹はＤ−β−Nal、Ｄ−Phe、Ｄ−ｐ−Cl−Phe
   またはアセチル−Ｄ−ｐ−Cl−Pheである〕で表される
   オクタペプチドまたはその薬学的に許容される塩。
2. 【請求項２】構造式:D−Phe−Cys−Tyr−Ｄ−Trp−Lys
   −α−アミノ酪酸−Cys−Thr−NH₂である特許請求の範
   囲第１項記載のオクタペプチドまたはその薬学的に許容
   される塩。
3. 【請求項３】構造式:D−β−Nal−Cys−Tyr−Ｄ−Trp−
   Lys−α−アミノ酪酸−Cys−Thr−NH₂である特許請求の
   範囲第１項記載のオクタペプチドまたはその薬学的に許
   容される塩。
4. 【請求項４】構造式:D−ｐ−Cl−Phe−Cys−Tyr−Ｄ−T
   rp−Lys−α−アミノ酪酸−Cys−Thr−NH₂である特許請
   求の範囲第１項記載のオクタペプチドまたはその薬学的
   に許容される塩。
5. 【請求項５】構造式：アセチル−Ｄ−ｐ−Cl−Phe−Cys
   −Tyr−Ｄ−Trp−Lys−α−アミノ酪酸−Cys−Thr−NH₂
   である特許請求の範囲第１項記載のオクタペプチドまた
   はその薬学的に許容される塩。