JP2525958B2 - 化学的試験方法において使用する装置 - Google Patents

化学的試験方法において使用する装置

Info

Publication number
JP2525958B2
JP2525958B2 JP2507983A JP50798390A JP2525958B2 JP 2525958 B2 JP2525958 B2 JP 2525958B2 JP 2507983 A JP2507983 A JP 2507983A JP 50798390 A JP50798390 A JP 50798390A JP 2525958 B2 JP2525958 B2 JP 2525958B2
Authority
JP
Japan
Prior art keywords
waveguide
sample
reagent
light
cavity
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Fee Related
Application number
JP2507983A
Other languages
English (en)
Other versions
JPH03506078A (ja
Inventor
ワーシントン アトリッジ，ジョン
マルティン スミス，アラン
Original Assignee
アプライド リサーチ システムズ エーアールエス ホールディング ナームロゼ ベノートスハップ
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by アプライド リサーチ システムズ エーアールエス ホールディング ナームロゼ ベノートスハップ filed Critical アプライド リサーチ システムズ エーアールエス ホールディング ナームロゼ ベノートスハップ
Publication of JPH03506078A publication Critical patent/JPH03506078A/ja
Application granted granted Critical
Publication of JP2525958B2 publication Critical patent/JP2525958B2/ja
Anticipated expiration legal-status Critical
Expired - Fee Related legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
    • G01N21/75—Systems in which material is subjected to a chemical reaction, the progress or the result of the reaction being investigated
    • G01N21/77—Systems in which material is subjected to a chemical reaction, the progress or the result of the reaction being investigated by observing the effect on a chemical indicator
    • G01N21/7703—Systems in which material is subjected to a chemical reaction, the progress or the result of the reaction being investigated by observing the effect on a chemical indicator using reagent-clad optical fibres or optical waveguides
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01L—CHEMICAL OR PHYSICAL LABORATORY APPARATUS FOR GENERAL USE
    • B01L3/00—Containers or dishes for laboratory use, e.g. laboratory glassware; Droppers
    • B01L3/50—Containers for the purpose of retaining a material to be analysed, e.g. test tubes
    • B01L3/502—Containers for the purpose of retaining a material to be analysed, e.g. test tubes with fluid transport, e.g. in multi-compartment structures
    • B01L3/5027—Containers for the purpose of retaining a material to be analysed, e.g. test tubes with fluid transport, e.g. in multi-compartment structures by integrated microfluidic structures, i.e. dimensions of channels and chambers are such that surface tension forces are important, e.g. lab-on-a-chip
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
    • G01N21/62—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light
    • G01N21/63—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light optically excited
    • G01N21/64—Fluorescence; Phosphorescence
    • G01N21/6428—Measuring fluorescence of fluorescent products of reactions or of fluorochrome labelled reactive substances, e.g. measuring quenching effects, using measuring "optrodes"
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
    • G01N21/62—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light
    • G01N21/63—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light optically excited
    • G01N21/64—Fluorescence; Phosphorescence
    • G01N21/645—Specially adapted constructive features of fluorimeters
    • G01N21/648—Specially adapted constructive features of fluorimeters using evanescent coupling or surface plasmon coupling for the excitation of fluorescence
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/543—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals
    • G01N33/54366—Apparatus specially adapted for solid-phase testing
    • G01N33/54373—Apparatus specially adapted for solid-phase testing involving physiochemical end-point determination, e.g. wave-guides, FETS, gratings
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01L—CHEMICAL OR PHYSICAL LABORATORY APPARATUS FOR GENERAL USE
    • B01L2300/00—Additional constructional details
    • B01L2300/08—Geometry, shape and general structure
    • B01L2300/0809—Geometry, shape and general structure rectangular shaped
    • B01L2300/0822—Slides
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01L—CHEMICAL OR PHYSICAL LABORATORY APPARATUS FOR GENERAL USE
    • B01L2300/00—Additional constructional details
    • B01L2300/16—Surface properties and coatings
    • B01L2300/168—Specific optical properties, e.g. reflective coatings
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01L—CHEMICAL OR PHYSICAL LABORATORY APPARATUS FOR GENERAL USE
    • B01L2400/00—Moving or stopping fluids
    • B01L2400/04—Moving fluids with specific forces or mechanical means
    • B01L2400/0403—Moving fluids with specific forces or mechanical means specific forces
    • B01L2400/0406—Moving fluids with specific forces or mechanical means specific forces capillary forces
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
    • G01N21/01—Arrangements or apparatus for facilitating the optical investigation
    • G01N21/03—Cuvette constructions
    • G01N2021/0346—Capillary cells; Microcells
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
    • G01N21/75—Systems in which material is subjected to a chemical reaction, the progress or the result of the reaction being investigated
    • G01N21/77—Systems in which material is subjected to a chemical reaction, the progress or the result of the reaction being investigated by observing the effect on a chemical indicator
    • G01N21/7703—Systems in which material is subjected to a chemical reaction, the progress or the result of the reaction being investigated by observing the effect on a chemical indicator using reagent-clad optical fibres or optical waveguides
    • G01N2021/7706—Reagent provision
    • G01N2021/7733—Reservoir, liquid reagent
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
    • G01N21/75—Systems in which material is subjected to a chemical reaction, the progress or the result of the reaction being investigated
    • G01N21/77—Systems in which material is subjected to a chemical reaction, the progress or the result of the reaction being investigated by observing the effect on a chemical indicator
    • G01N2021/7769—Measurement method of reaction-produced change in sensor
    • G01N2021/7786—Fluorescence

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Optics & Photonics (AREA)
  • Plasma & Fusion (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Dispersion Chemistry (AREA)
  • Clinical Laboratory Science (AREA)
  • Investigating Or Analysing Materials By The Use Of Chemical Reactions (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
  • Investigating, Analyzing Materials By Fluorescence Or Luminescence (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、化学的、生化学的または臨床的試験方法に
おいて使用する装置、それらの製造方法、および該装置
の使用方法に関する。
より詳しくは、本発明は、中でもイムノアッセイが重
要なグループを構成している特異的結合アッセイにおけ
る使用に適する装置に関する。
少量の試験試料の処理および測定のための様々な分析
装置が従来技術において記載されている。特に、EP-A-1
71148は、好都合に製造することができ且つ非常に少量
の液体試料を使った特異的結合アッセイに適当であるキ
ャピラリー充填セル装置を記載している。それらの装置
は、各々が毛管作用により試料液をキャビティ中に吸込
むことができる程十分に小さい寸法を有する１または複
数のキャビティを有し、ここで前記キャビティの表面
は、該装置中で実施される試験に適当な固定化試薬を担
持しており、そして前記表面は、光透過性導波管として
働くように改造され且つキャビティの壁を形成している
透明固体プレートの表面であり、前記プレートは、実質
上光学的に平滑であり（「光学縁」）そして該プレート
の水平面に対して例えば或る横断角で横断するが最も好
ましくは垂直である縁（エッジ）を有する。そのような
装置は、便利な試料の捕集および前記固定化試薬と試料
との反応生成物のその場での光学分析を可能にする。導
波プレートは、使用することになっている波長の輻射
線、例えば赤外、可視および／または紫外光に対して透
過性であるべきであり、そしてEP-A-171148に記載の装
置を使った１つの方法は、アッセイ方法およびアッセイ
しようとする試料に依存して異なるであろう程度に蛍光
物質が固定化試薬に結合するように準備し、次いで生成
した結合した蛍光物質の光学測定を行うものである。
EP-A-171148は、アッセイの幾つかの形式が、試薬含
有導波管表面の反対側のキャピラリーキャビティの壁が
光吸収性、不透明または反射性材料から作られているの
が適切であり得る可能性、即ち装置が第１図に描写され
下記に詳細に記載される構造を有する可能性を開示して
いる。
分析物溶液中の蛍光団と導波管表面に結合した蛍光団
から生じる蛍光の角度分布の相違は当業界において公知
である。理想条件下では、導波管の縁から出てくる蛍光
の角度識別は、他の発光シグナルを区別するのに十分で
あろう。しかしながら、実際には、装置中の様々な欠陥
が、溶液中の蛍光団からの蛍光を散乱させ、そして通常
はエバネッセント結合した蛍光に関係づけられる角度に
おいて光学縁から、即ち表面結合した蛍光団から出現さ
せ得る。
本発明者らは、驚くべきことに、試薬を有する導波管
表面と反対側のキャピラリーセルの壁はアッセイに関与
する波長の輻射線に対して透明な材料から形成されてい
るが、前記透明材料の１もしくは複数の外側表面、好ま
しくは少なくとも導波管に平行な表面に、不透明または
光吸収性材料の層が適用されるならば、第１図に描写さ
れた構造を含むEP-A-171148に記載の構造物を上回る有
意に改善された性能によって、この問題が解決できるこ
とを見出した。「不透明層」なる用語は、以後、そのよ
うな不透明または光吸収性材料の層を意味するのに用い
られる。
本発明の１つの観点によれば、特異的反応性試料捕集
および試験装置が提供され、該装置は、毛管作用により
試料液をキャビティ中に吸込むことができる程十分に小
さい寸法を有する１または複数のキャビティを有し、前
記１または複数のキャビティの１表面は、該装置中で実
施される試験に適当な固定化試薬を担持しており、前記
表面は、光透過性導波管として働くように改造された第
一の透明固体プレートの表面であり、前記プレートは、
実質上光学的に平滑であり且つ該プレートの平面に対し
て横断する縁を有し、前記装置は、前記導波管と反対側
の１または複数のキャビティの壁が第二の透明プレート
を含んで成ることを特徴とし、前記第二の透明プレート
が上記キャビティと反対側の且つ上記固定化試薬担持表
面と平行な外側表面上に光吸収性または不透明材料を担
持している。
上述した様に、第一の透明固体プレートは、該プレー
トの水平面に対して横断する縁を有する。前記縁は、任
意の横断角であることができるが、最も好ましくは垂直
である。
ある態様では、本発明は、試料液中に存在する分析物
の蛍光イムノアッセイまたは発光イムノアッセイに使用
される装置も提供する。該装置は、試験しようとする試
料液の一定量を捕集および保持するための平面キャピラ
リーセルを含んで成り、前記キャピラリーセルは、一方
の端にキャピラリーキャビティ中への試料液の進入を可
能にする第一の開口および他方の端には試料液で満たさ
れるにつれてキャピラリーキャビティからの空気の排出
を可能にする第二の開口を有するキャピラリーキャビテ
ィを限定している、向かい合わせに固定された内側表面
を提供するように、間に空隙を有する一緒に固定されそ
して２つの対辺に沿ってシールされた一対の平らで平行
な２枚のプレートを含んで成る。ここで、前記プレート
の一方は、導波管の水平面に対して横断し且つシールさ
れた辺に対して垂直である光学的に平滑な縁を有する光
透過性導波管であり、前記導波管は、使用中キャピラリ
ーキャビティ内部に捕集された試料液と接触するよう
に、内側表面の少なくとも一部分に、標識リガンドを直
接的または間接的に結合することのできる固定化試薬を
結合しており、前記固定化試薬と前記標識リガンドは、
該装置中で実施することになっている分析物についての
試験に適するものであり、標識リガンドは、使用時に捕
集された試料液と接触しそして試料液中に遊離されるよ
うに、前記装置内部に遊離できるように保持される。そ
して他方のプレートは、上記キャビティと反対側の且つ
上記固定化試薬結合表面と平行な外側表面上に、光吸収
性または不透明材料を担持している。
便宜上、光吸収性または不透明材料を担持している第
二の透明プレートの表面を、本明細書中では、前記プレ
ートの外側表面と称し、該プレートの反対表面を内側表
面と称する。
或る状況下では、前記外側表面に加えて、キャピラリ
ーキャビティ壁の内側表面の一部分のみ、即ち第二の透
明プレートの内側表面の一部分のみが、光吸収性または
不透明材料を担持しているならば、有利であり得ること
を本発明者らは発見した。
従って、本発明の更なる観点によれば、特異的反応性
試料捕集および試験装置を提供し、該装置は、毛管作用
により試料液をキャビティ中に吸込むことができる程十
分に小さい寸法を有する１または複数のキャビティを有
し、前記１または複数のキャビティの１表面は、該装置
中で実施される試験に適当な固定化試薬を担持してお
り、前記表面は、光透過性導波管として働くように改造
された第一の透明固定プレートの表面であり、前記プレ
ートは、実質上光学的に平滑であり且つ該プレートの平
面に対して横断する縁を有し、前記装置は、前記導波管
と反対側の１または複数のキャビティの壁が第二の透明
プレートを含んで成り、前記第二の透明プレートがその
外側表面上に光吸収性または不透明材料の層を担持して
おり、そして内側表面の一部分のみの上にも光吸収性ま
たは不透明材料の層を担持していることを特徴とする。
本発明の装置は、EP-A-171148に記載のものと大体同
じであるが該装置の適当な表面に光吸収性または不透明
層を適用する追加の特徴を有する方法により製造するこ
とができる。
本発明によれば、上述の特異的反応性試料捕集および
試験装置の製造方法が提供され、該方法は次の段階を含
んで成る。
（ａ）多数の該装置の部分を提供するであろうシート材
料の表面上に固定化された特異的反応性コーティングを
形成せしめ、 （ｂ）前記コーティングされたシート材料と一緒になっ
て多数の装置の各々に、特異的反応性コーティングと接
触した時に毛管現象により一定容量の試料液を捕集およ
び保持するための毛管寸法のキャビティを提供する追加
の構造物の１または複数の表面上に光吸収性または不透
明層を形成せしめ、そして （ｃ）各々が１または複数の試料捕集および試験装置を
提供する部分にシート材料を分割する。
この方法では、特異的反応性コーティングと外側の不
透明層が両方とも連続であるか、または或るパターン、
例えば不連続部分のパターンに、例えば二次元配列のパ
ッチとして、分割することができる。そのようなパッチ
が形成される場合、まず連続コーティングを形成せしめ
次いでその一部分を除去して所望のパターン、例えば不
連続部分の配列を残すことによるか、またはパッチの配
列（例えば、スクリーン印刷したもの）として、それら
を作製することができる。キャビティ壁の内側表面の一
部分が不透明層を担持すべき場合、製造中に適用される
適切な不透明層は、もちろん不連続層として適用される
だろう。
特異的反応性コーティングは、直接的または間接的の
いずれかでキャビティの表面上に固定化され得る。例え
ば、特異的反応性コーティングが抗体である時、それ自
体前記表面に結合している抗−種抗体を用いて間接固定
化を行うことができる。あるいは、抗体をビオチンと接
合せしめ、そして前記表面上に予め固定化されたアビジ
ンと複合体形成せしめることにより、固定化を行うこと
ができる。直接固定化は、適当な試薬（例えばアミノプ
ロピルトリメトキシシランのようなシラン化試薬）での
処理により前記表面を活性化させることによって行うこ
とができ、適当な架橋剤（例えばグルタルアルデヒド）
を使ってそれに抗体を共有結合させることができる。
従来技術の装置に関して既に述べたように、液体試料
中のリガンドについてのアッセイにおいて本発明の装置
を用いる１つの方法は、アッセイやアッセイされる試料
物質に応じて異なるであろう程度に蛍光物質が固定化試
薬に結合するように準備し、次いで生成した結合した蛍
光物質の光学測定を実施することである。
適当な蛍光物質は、典型的には、蛍光団で標識された
リガンド類似体またはアッセイ中に蛍光団で標識される
リガンド特異的結合相手のいずれかである、補助試薬を
含んで成る。アッセイを実施する時、試料を装置に導入
する前に、蛍光物質を既知量において液体試料中に導入
することができる。あるいは、例えば可溶性保湿剤コー
ティングを用いて、可溶性の遊離可能な形で装置内の表
面上に蛍光物質を予め固定化することができる。後者の
場合、装置中への試料液への導入が可溶性保湿剤コーテ
ィングを溶解し、それによって補助試薬が試料液中に分
散されるようになる。
或る態様において、本発明は、次の段階を含んで成る
上記方法を提供する： （ａ）装置中で実施される試験に適当な試薬を、光透過
性導波管として働くことができ且つ多数の装置の部分を
提供することができる透明なフラットシート材料の表面
上の一部に固定化し； （ｂ）追加の構造物の１表面上に光吸収性または不透明
層を形成せしめ； （ｃ）段階（ｂ）の前または後に、多数の装置の各装置
に、２つの反対側に沿ってシールされ且つその内側表面
の少なくとも一部分上に固定化試薬を含有するキャピラ
リーキャビティを提供するように、間隙をあけて平行関
係において前記シート材料に前記追加の構造物を取り付
け、ここで前記キャピラリーキャビティは、前記固定化
試薬と接触すると毛管作用により一定容量の試料液を捕
集および保持するように改造されており；そして （ｄ）組立てたシートを部分に分割し、各部分は、各装
置の透明シート材料がシートの平面に対して横断し且つ
シールされた側面に対して垂直である少なくとも１つの
光学的に平滑な縁を有するような、１または複数の試料
捕集および保持装置を提供する。
本明細書中で使用する「リガンド類似体」という用語
は、アッセイ中のリガンドと同じ特異的結合相手の同一
結合部位と複合体形成することができる種を言い、そし
て特に、アッセイ中の既知量のリガンドが範囲内に含ま
れる。
上記で定義した不透明層の適当な材料は、例えば、所
望により熱もしくは赤外線照射により硬化され得る黒色
塗料、シリコーン塗料、顔料、または適当な光学的およ
び他の物理的性質を有する他の任意の（好ましくは不活
性の）材料である。そのような材料は、少なくともアッ
セイに関与する波長において、光を減衰または吸収すべ
きである。材料の不透明層の厚さは、典型的に最小で３
ミクロンであろう。
本発明は蛍光に関して特定的に記載されるが、同様な
考察を燐光および発光に応用できることは理解されるで
あろう。
本発明のより良い理解のために、添付図面について言
及する。
第１図は、EP-A-171148において提案されたキャピラ
リー充填装置の変形の断面図である。
第２図〜第６図は、本発明の様々な態様に従ったキャ
ピラリー充填装置の断面図である。
第７図は、第５図において断面として示された本発明
のキャピラリー充填装置の平面図である。
第８図は、第２図の装置における溶液蛍光の減衰を概
略的に示す。
第９図は、第３図の装置における溶液蛍光の減衰を概
略的に示す。
第10図は、本発明に従ってアッセイを実施するのに適
当な簡易装置を概略的に示す。
第１図について説明する。描写された装置は、上層の
透明（例えばプラスチック、シリカまたはガラス）プレ
ート１と下層の透明プレート２を含んで成り、両プレー
トは、適当な接着剤の接着跡（図示せず）により1mm未
満離れた実質上平行関係において一緒に固定された厚さ
ほぼ1mmのプレートである。そのようにして形成された
セルキャビティ３は両端が外側に開かれており、そのた
め毛管作用によって一方の口に試料が吸込まれる時、他
方の口から空気が排出できる。この装置の下層プレート
２はプレート１よりも大きく、装置から遠方に伸びる区
画４を有する。使用時、プレート２の区画４は、１滴の
試料液を上に適用することができる滞留性プラットホー
ムとして働き、そのためこの液体は毛管作用によりセル
キャビティ３を満たすことができる。
キャピラリーセルの内側表面上に固定化されているの
は、装置を使用する予定の試験に関連した材料の層５で
ある。第１図では、層５はプレート２上に担持された材
料のパッチである。イムノアッセイの場合、層５は、例
えば関連の固定化抗体であることができる。重層または
隣接関係のいずれかにおいて、１より多くの層５が存在
してもよい。
セルの内側表面上の平面１上に担持されているのは、
光吸収性または不透明材料の層６であり、この材料は、
装置を使用する予定の試験の性質および使用する予定の
光の波長に適当なものである。
第２図は、本発明の態様に従ったキャピラリーセル装
置の線断面図を示す。この装置は、第１図に関連づける
と上層の透明プレート７と下層の透明プレート８を含ん
で成る。プレート８の表面上に反応層９が存在する。プ
レート７はその外側表面上に不透明層10を担持してい
る。
第３図は、本発明の別の態様に従ったキャピラリーセ
ル装置の線断面図を示す。プレート11と12は第１図およ
び第２図と同じ関係で存在し；反応性層13が上記と同様
に配置され得る。この態様では、プレート11は外側表面
上に不透明層14を担持しており、そしてその反対表面
（即ちセルキャビティの内側表面）の一部分のみに類似
または同一材料の層15を担持している。
第４図は、本発明の更なる態様に従ったキャピラリー
セル装置の線断面図を示す。第２図に示した態様と同様
に、上層プレート17の外側表面上に不透明層16が配置さ
れる。しかしながら、第４図に示される態様では、上層
と下層のプレート17と18は、各プレートが第１図に示し
た区画４と同様に滞留性プラットホームとして働くこと
ができるように片寄らせてある。
第５図は、本発明の別の態様に従ったキャピラリーセ
ル装置の線断面図を示す。同じく、上層プレート22の外
側表面上に不透明層21が配置される。しかしながら、こ
の場合では、上層と下層のプレートの末端が滞留性プラ
ットホームとならないように整列される。
第６図は、本発明の別の態様に従ってキャピラリーセ
ル装置の線断面図を示す。この態様は第２図に示したも
のの変形であり、上層の透明プレート24の内側表面上に
適当な蛍光物質を含む可溶性保湿剤材料の装置23を追加
の特徴として有する。
第７図は、第５図に示した装置の平面図を示す。不透
明層25は中央領域として示される。上層プレートと下層
プレートは、毛管寸法（例えば100ミクロン）の空隙を
作るために適当な直径のガラスバロチーニを含んだ適当
な接着剤の接着跡26と27により、所望の関係の位置に保
持される。
第８図は、第２図に記載の本発明の装置において溶液
中の蛍光団から生じた蛍光の典型的光線および表面結合
した蛍光団から生じた蛍光の典型的光線をたどった進路
を概略的に示す。試料／ガラス界面における屈折は、溶
液蛍光団から出る光線の幾つかの進路を、界面に対する
臨界角よりも小さい界面における法線に対する角度（試
料溶液／ガラス界面については、それらの角度は典型的
には法線に対して０°〜60°の範囲にあるだろう）で上
層プレート35中に伝える。それらの光線は、不透明層37
との相互作用で減衰できる。下層ガラスプレート36の表
面上に固定された試薬に結合している蛍光分子（即ちエ
バネッセント領域内）は、エバネッセント波結合の結果
として、全範囲の角度（即ち試料と下層ガラスプレート
との界面における臨界角よりも大きい法線に対する角度
を含む）に渡り下層プレート36中に光を放射する。それ
らの光線の幾つかは、下層を通って「進行」し、不透明
層37と相互作用することなく末端38から出てくるだろ
う。従って、表面結合した蛍光団から生じる蛍光と溶液
蛍光団から生じる蛍光との識別が著しく高められる。
第９図は、第３図の装置における溶液蛍光団から生じ
た蛍光光線の進路を概略的に示す。この状況下では、溶
液蛍光から生じた光線の幾つかは、不透明層39において
減衰を受けるだけでなく、部分屈折の結果として更に不
透明層40等において減衰を受ける。層39と40の両方と相
互作用する光線は端41から出てくることができず、よっ
て層40の使用は、表面結合した蛍光団から生じる蛍光と
溶液蛍光団からのものと更に優れた識別をもたらし得る
ので、感度を増加させ得る。
第10図は、本発明と関連して用いるのに適当な簡単な
蛍光測定装置を略図形態において示す。種々の部品の特
定例を比較例Ａにおいて後述する。
適当な光源51からの光は、レンズ52により大まかに集
束された後、アッセイに関与する蛍光団を励起させるの
に用いる波長の範囲を限定するフィルタースタック53を
通過する。別のレンズ54が、装置55を通して試験装置56
の所望の領域上にこの光を集束させる。
試験装置56の適当な縁から出た光（「発光」）は、装
置57次いで１または複数のレンズ58を通過する。更なる
装置59を用いて発光をモニタリングする角度範囲を限定
する。更なるフィルター60を用いて或る波長の光（例え
ば励起波長の光）を除去し、別のレンズ61が残りの発光
を光検出器上に集束させる。
本発明は、また、本発明の装置を使って試料中のリガ
ンドについてアッセイする方法を提供し、該方法は、 （ａ）導波管の表面と接触している試料をインキュベー
トし、ここで前記導波管は前記装置の一部分であり、直
接的または間接的のいずれかにおいてその上に吸着され
ているかまたはそれに結合されている固定化試薬は、イ
ンキュベーション中に補助試薬（蛍光団で標識されたリ
ガンド類似体または蛍光団で標識された別の特異的結合
相手のいずれかである）が直接的または間接的に前記導
波管の表面に結合するようになるような、検出を所望す
るリガンドに対する特異的結合相手であり； （ｂ）試料液体中に存在する補助試薬と導波管に結合し
た補助試薬が励起されるような適当な光源からの光で前
記装置を照射し；そして （ｃ）補助試薬が複合体形成により前記導波管に結合し
たかどうかを、および所望であればその程度を測定する
ために、前記導波管から出てくる輻射線をモニタリング
する、 ことを含んで成る。
本発明のアッセイ方法において、第二の透明プレート
がその外側表面と内側表面の一部分のみとの両方に光吸
収性または不透明材料を担持している態様の装置を用い
る時、光吸収性または不透明材料を担持していない前記
第二プレートの内側表面の部分は、光源からの光で照射
される第一プレートの領域と反対側にある部分であろ
う。
本発明の方法は、特に抗原または抗体のアッセイ、即
ちイムノアッセイに適用することができ、本発明の好ま
しい態様においては、リガンドが抗原であり、そして特
異的結合相手が前記抗原に対する抗体を含んで成る。し
かしながら、本発明は抗体と抗原のアッセイに限定され
ると解釈してはならない。本発明の方法によりアッセイ
することができるリガンドの例を、各場合において適当
な特異的結合相手の表示と一緒に下の第１表に示す。
本発明の方法は非常に広範な利用可能性を有するが、
特に次のものをアッセイするのに用いることができる：
ホルモン、例えばペプチドホルモン〔例えば甲状腺刺激
ホルモン（TSH）、黄体形成ホルモン（LH）、ヒト絨毛
性性腺刺激ホルモン（hCG）、濾胞刺激ホルモン（FS
H）、インスリンおよびプロラクチン〕もしくは非ペプ
チドホルモン〔例えばステロイドホルモン、例えばコル
チゾール、エストラジオール、プロゲステロンおよびテ
ストラステロン、または甲状腺ホルモン、例えばチロキ
シン（T4）およびトリヨードチロニン〕、タンパク質
〔例えばガン胎児性抗原（CEA）およびアルファフェト
プロテイン（AFP）〕、薬剤（例えばジゴキシン）、
糖、毒素、ビタミン、タンパク質、ウイルス、例えばイ
ンフルエンザウイルス、パラ−インフルエンザウイル
ス、アデノウイルス、肝炎ウイルス、呼吸ウイルスおよ
びAIDSウイルス、または微生物。
本明細書中で使用する「抗体」なる用語は、その範囲
内に次のものを包含すると解釈されるだろう： （ａ）常用される任意の動物、例えばヒツジ、ウサギ、
ヤギまたはマウス由来の免疫グロブリンの様々なクラス
またはサブクラスのいずれか、例えばIgG,IgA,IgMまた
はIgE; （ｂ）モノクローナル抗体； （ｃ）モノクローナルまたはポリクローナル抗体の完全
分子または「断片」；ここで断片は、抗体の結合領域を
含むもの、即ちFc部分を欠く断片（例えばFab,Fab′,F
（ab′）2）または完全抗体中の重鎖を結合しているジ
スルフィド結合の還元的開裂により得られたいわゆる
「半分子」断片である。
抗体断片の調製方法は当業界で周知であり、従って本
明細書中には記載しない。
本明細書中で使用する「抗原」なる用語は、永久的に
抗原性の種（例えばタンパク質、細菌、細菌断片、細
胞、細胞断片およびウイルス）および適当な条件下で抗
原性になり得るハプテンの両方を包含すると解釈される
だろう。
本発明のアッセイ方法において使用できる蛍光団の例
としては、フルオレセインイソチオシアネート（FIT
C）、ローダミンイソチオシアネート、ルシフェリンイ
エロー、2,4−ジニトロフルオロベンゼン、フェニルイ
ソチオシアネートおよびダンシルクロリド、XRITC,TRIT
Cおよびフィコビリタンパク質（例えばアロフィコシア
ニンおよびフィコエリトリン）が挙げられる。
本発明は更に、上記のような本発明のアッセイ方法に
おける使用に適当な装置を提供する。この装置は、使用
中、輻射線が結合した蛍光団と遊離の蛍光団の両方を励
起させるような角度において上記の本発明の装置に入る
ように配置することができる輻射線源、および出てきた
輻射線をモニタリングするための手段を含んで成る。更
なる態様においては、該装置はマスクを経て照明され、
それによって結合反応が起こる装置の有効容量を限定す
ることができる。有効容量は、装置の下層プレートと上
層プレートとの間の距離と照明帯の面積との積である。
比較例Ａ 不透明層を有さないセルを使って実施したヒト絨毛性性
腺刺激ホルモン（hCG）についての光学イムノアッセイ 出発材料の調製 （ｉ）抗体でコーティングされた導波管の製作 1mmの厚さを有する一枚のPermablocガラス（Pilkingt
on Glass Ltd.,St Helens,UK）を、超純水中の洗剤（例
えばTween 20）を使って超音波振動により洗浄した。こ
れをアミノプロピルトリエトキシシランの２％水溶液中
で３〜４のpHにおいて25℃で２時間インキュベートする
ことにより、ガラスの表面を活性化した。水中ですすい
だ後、ガラス板を115℃で４時間以上乾燥させた。次い
でこのガラスを0.05Mリン酸緩衝液（pH7）中の2.5％グ
ルタルアルデヒド溶液中で60分間インキュベートし、次
いで蒸留水で徹底的に洗浄した。このガラスをリン酸緩
衝液中のhCGに対するモノクローナル抗体の１％溶液中
で２〜４時間インキュベートした。次に緩衝液でガラス
板を洗浄した。既知のやり方で6M尿素溶液を浸透させる
ことにより、望ましくない吸着タンパク質を除去した。
（ii）試験装置の製作 段階（ｉ）から得られた導波管基板上に、キャピラリ
ーセル装置の長さ方向の縁を決めるパターンにおいて、
直径100ミクロンのガラス微小球（Jencons Ltd.,UK）を
含む紫外線硬化接着剤（UVS 91,Norland Inc.,USA）の
接着跡をスクリーン印刷することにより、EP-A-171148
中に記載されたような試験装置を製作した。次いで一枚
の透明なPermablocガラス板を導波管基板上に置き、こ
の積層板に減圧を適用した。減圧の結果、上板のガラス
が接着剤上に押しつけられ、ガラス微小球がガラス板の
間に100ミクロンの隙間を限定するようにした。次いで
接着剤を硬化させるために、この積層板を紫外線光源に
暴露した。最後に、標準的なガラス罫書および破断法を
使って、積層板を個々の試験装置に作り上げた。
（iii）フルオレセインイソチオシアネート（FITC）に
接合した抗−hCG抗体の調製 FITC（Sigma Chemical Company Ltd.,UK）200mgと異
なる抗原決定基に特異的なhCGに対する第二モノクロー
ナル抗体5mgを、炭化水素ナトリウム緩衝液（pH9.0）1.
4ml中で一緒に混合した。この混合物を室温で18時間放
置しておくと、その間にモノクローナル抗体へのFITCの
接合が起こった。次いで超精密Sephadex G-50上でのゲ
ル濾過により、混合物を精製した。
（iv）hCG標準液の調製 一次国際標準調製物（75/537）に対して検量されたhC
Gの凍結乾燥調製物をBiodata SpA,Milan,Italyから入手
した。この試料をウマ血清（Serono Diagnostics Ltd.,
Working,UK）中に希釈し、必要とする範囲のhCG標準液
を得た。
（ｖ）hCGアッセイの測定に使用する装置 第10図は、適当なアッセイ測定を行うのに使った簡易
蛍光測定装置を示す。キセノンフラッシュランプ51（He
inmann）からの光は、FITC標準抗体を励起させるのに用
いる波長域を限定するフィルタースタック53を通過する
前にレンズ52により集束される。フィルタースタック
は、３つのフィルター:BG7 Schottガラスフィルター（E
aling Electro Optics UK Ltd.,Watford,UK）、450-480
nm FITC通過幅妨害フィルター（Optometrics Ltd.,UK）
および475nm短波通過妨害フィルター（Comar Instrumen
ts Ltd.,Cambridge,UK）を有する。第二レンズ54は、照
明領域および試験セルの活性容量を限定する窓55を通し
て試験セル56の活性表面上に励起光を集束させる。
試験セルの光学縁から出た光は、溶液から直接出た光
が検出光学素子に入るのを防ぐ窓57を通過する。レンズ
系58は発光を集束し、そして窓59は発光が測定される角
度範囲を限定する。これは、エバネッセント結合した蛍
光発光に関連づけられる角度と一致するように選択され
た。Schott OG515 515nmコロイド状ガラス長波通過フィ
ルター60（Ealing Electro Optics UK Ltd.,Watford,U
K）はいずれかの分散した励起光を除去し、そして第二
のレンズ61は光電子増倍管検出器62（Hamamatsu R931A,
Hakuto UK Ltd.,）上に発光を集束させる。
hCGについてのアッセイ手順 αhCG-FITC接合体をhCG標準液の各々に添加して約0.5
mlの試験溶液を得た。接合体濃度は１μg/mlであった。
８つの試験セルを選び、その各々を異なる試験溶液で満
たした。20℃の湿潤環境中での20分間のインキュベーシ
ョン後、セルを読んだ。こうして作成した標準曲線は、
不透明層を有さないセル装置について第11図に示され
る。「溶液蛍光団」からのバックグラウンドシグナルは
高く、乏しいシグナル対バックグラウンド比を与え、乏
しいアッセイ感度を生ずる。
比較例Ｂ 装置の内側表面に不透明層を有するセル（第１図参照）
中で実施したhCGについての光学イムノアッセイ 出発材料の調製 （ｉ）抗体でコーティングされた導波管の調製 比較例Ａを参照のこと。
（ii）試験セルの製作 Permablocガラスを洗剤と超音波振動を使って洗浄し
た。ガラスを乾燥した後、黒インクを使って表面上に所
望のパターンの不透明層をスクリーン印刷した。印刷さ
れた不透明材料を熱硬化させた後、積層前に不透明材料
が必ず装置の内側にくるように注意しながら、このガラ
ス板を比較例Ａの未処理のPermablocガラス板の代わり
に使った。残りの試験セル製作工程は比較例Ａに記載し
たものと同じであった。第１図に描写されるような試験
セルを得られた。
（iii）FITCに接合した抗−hCGの調製 比較例Ａと同じ。
（iv）hCG標準液の調製 比較例Ａと同じ。
（ｖ）アッセイの測定に使用する装置 比較例Ａと同じ。
hCGについてのアッセイ手順 用いたアッセイ手順は比較例Ａに記載のものと同じで
あるが、ただし４つのセルを各々のhCG試験溶液で処理
した。
第12図において、この例の結果を比較例Ａからの結果
と比較する。不透明層の存在は、バックグラウンドシグ
ナルをかなり減少させた。結果として、1000mIU/mlのhC
Gについてシグナル対バックグラウンド比が1.2:1から3:
1に改善され、従ってアッセイ感度が改善された。
実施例１ 装置の外側に不透明層を有するセル（第２図参照）中で
実施したhCGについての光学イムノアッセイ 出発材料の調製 （ｉ）抗体でコーティングされた導波管の製作 比較例Ａと同じ。
（ii）試験セルの製作 試験セルの製作方法は比較例Ｂと同様であった。ただ
し、必ず不透明層を製作工程中セルの外側に維持するよ
うに注意を払った。第２図に図示される試験セルが得ら
れた。
（iii）FITCに接合した抗−hCGの調製 比較例Ａと同じ。
（iv）hCG標準液の調製 比較例Ａと同じ。
（ｖ）アッセイの測定に使用する装置 比較例Ａと同じ。
hCGについてのアッセイ手順 比較例Ｂと同じ。第13図はこの例からの結果と比較例
Ｂのものとを示す。各々のセルタイプについての標準曲
線は同等である。しかしながら、セルの外側に不透明層
を用いると、アッセイ精度が増加する（内側不透明層に
ついての標準曲線の精度は8.0％であるのに比べて、外
側不透明層のものは4.6％であり、従ってこの精度の増
加によりアッセイ性能の増加が達成される）。これは、
セル空隙の均一性および調査される試料容量がガラス表
面により限定され不透明層の印刷の質により限定される
のではないために起こる。
実施例２ 第３図のように配置された不透明層を有するセル中で実
施したhCGについての光学イムノアッセイ 出発材料の調製 （ｉ）抗体でコーティングされた導波管の製作 比較例Ａと同じ。
（ii）試験セルの製作 比較例Ｂに記載の方法に従って一枚のPermablocガラ
ス上に全パターンの不透明材料を印刷しそして硬化させ
た。この後、ガラスを裏返し、最初の印刷に合わせて反
対側に第二の全パターンを印刷した。硬化後、適当な溶
剤を使って第二印刷の半分を取り除き、同じ幅であるが
半分の長さを有するパターンを残した。超音波振動によ
る洗剤中での洗浄後、比較例Ｂに記載したようにしてガ
ラス積層板を調製した。範囲の小さい方の印刷が必ずセ
ルの内側にくるように注意した。接着剤を硬化させた
後、常法により試験セルを分割した。第３図に概略的に
示される試験セルが得られた。
（iii）FITCに接合した抗−hCGの調製 比較例Ａと同じ。
（iv）hCG標準液の調製 比較例Ａと同じ。
（ｖ）アッセイの測定に使用する装置 比較例Ａと同じ。
hCGについてのアッセイ手順 比較例Ｂと同じ。第14図は、この実施例の結果と比較
例Ｂのものを示す。同様に標準曲線は同等であるけれど
も、比較例Ｂからのセルに比べてバックグラウンドシグ
ナルのわずかな減少（1.0から0.9に）が認められる。あ
るセル幾何学、例えばより短い試験セルについては、望
ましくない「溶液シグナル」を除去することにおけるこ
の配置の有効性がより大きいため、アッセイ性能に有意
な効果を与えることができた。
実施例３ 様々な長さの外側不透明層を有するセル中で実施したhC
Gについての光学イムノアッセイ 出発材料の調製 （ｉ）抗体でコーティングされた導波管の製作 比較例Ａと同じ。
（ii）試験セルの製作 実施例１と同じ。
（iii）FITCに接合した抗−hCGの調製 比較例Ａと同じ。
（iv）試験溶液の調製 この実施例については、ウマ血清中１μg/mlの接合体
の試験溶液を使った。
（ｖ）アッセイの測定に使用する装置 比較例Ａと同じ。
hCGについてのアッセイ手順 セルにゼロhCG標準試験溶液を満たし、読みを行っ
た。外科用メスを使って不透明縁末端から1mm長さを減
らし、そして第二の読みを行った。不透明材料が全く残
らなくなるまでこの操作を繰り返した。
第15図において、不透明層の長さの関数として典型的
応答を示す。不透明層の長さは、照明帯の後ろから光学
縁の方向において不透明層の前縁までの距離として定義
される。結果は、光学縁の末端の照明領域の縁から測っ
て約15mmの長さを使ったセル幾何学が、溶液シグナルを
効果的に除去するのに十分であり、バックグラウンドシ
グナルを最小にし、従って装置の感度を増加させる（即
ちシグナル対バックグラウンド比を改善する）ことを示
す。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 スミス，アラン マルティン イギリス国，チェシャー ダブリュエー 15 ９エイチキュー，アルトリンチャ ン，ヘイル，ヘイル ロード 129 (56)参考文献 特表 昭61−502420（ＪＰ，Ａ)

Claims (12)

    (57)【特許請求の範囲】
  1. 【請求項１】特異的反応性試料の捕集および試験装置で
    あって、その装置が毛管作用により試料液をその内に吸
    い込むことができる程十分に小さい寸法を有する１また
    は複数のキャビティを有し、その１または複数のキャビ
    ティの１表面がその装置中で実施される試験に適当な固
    定化試薬を担持しており、その表面が光透過性導波管と
    して働くように改造された第一透明固体プレートの表面
    であり、そのプレートが、実質上光学的に平滑であり且
    つそのプレートの上記の平らな表面に対して横断する縁
    （エッジ）を有し、上記導波管と反対側の、上記１また
    は複数のキャビティの壁が第二透明プレートの一部であ
    り、その第二透明プレートが、上記キャビティと反対側
    の且つ上記の固定化試薬担持表面と平行な外側表面上に
    光吸収性または不透明材料の層を担持していることを特
    徴とする装置。
  2. 【請求項２】第二透明プレートが、キャビティに近い方
    の内側表面の一部分のみの上にも光吸収性または不透明
    材料の層を担持している、請求項１に記載の装置。
  3. 【請求項３】１または複数のキャビティの１表面が、可
    溶性の遊離可能な形態で、その装置中で実施される試験
    に適当な蛍光補助試薬を担持している、請求項１または
    請求項２に記載の装置。
  4. 【請求項４】補助試薬が、試験しようとするリガンドに
    対する蛍光団標識特異的結合相手であるかまたは蛍光団
    標識リガンド類似体である、請求項３に記載の装置。
  5. 【請求項５】試料液中に存在する被分析物の蛍光イムノ
    アッセイまたは発光イムノアッセイに使用される装置で
    あって、その装置がテストしようとする試料液の一定量
    を捕集および保持するための平面キャピラリーセルを含
    んで成り、そのキャピラリーセルが一方の端にキャピラ
    リーキャビティ内への試料液の進入を可能にする第一の
    開口および他方の端に試料液で満たされるにつれてその
    キャピラリーキャビティからの空気の排出を可能にする
    第二の開口を有するキャピラリーキャビティを限定する
    向かい合わせに固定された内側表面を提供するように、
    一緒に固定されそして２つの向い合う側に沿ってシール
    された一対の平らで平行な間に空隙を有する２枚のプレ
    ートを含んで成り、ここで、その一のプレートが導波管
    の水平面に対して横断し且つシールされた辺に対して垂
    直である光学的に平滑なエッジを有する光透過性導波管
    であり、その導波管が使用中にキャピラリーキャビティ
    内部に捕集された試料液と接触するようにその内側表面
    の少なくとも一部分に標識リガンドを直接的または間接
    的に結合することのできる固定化試薬を結合しており、
    その固定化試薬とその標識リガンドがこの装置内で実施
    することになっている分析物についての試験に適するも
    のであり、その標識リガンドが使用中に捕集された試料
    液と接触しそしてその試料液中に放出されるようにこの
    装置内部に遊離できるように保持されており、そして他
    のプレートが、上記キャビティと反対側の、且つ、上記
    固定化試薬結合表面と平行な外側表面上に、光吸収性ま
    たは不透明材料を担持している、請求項１に記載の装
    置。
  6. 【請求項６】以下の段階： （ａ）多数の装置の部分を提供することができる透明な
    シート材料の表面上に固定化特異的反応性コーティング
    を形成せしめ； （ｂ）透明な追加の構造物の１表面上に光吸収性または
    不透明層を形成せしめ； （ｃ）段階（ｂ）の前または後に、上記多数の装置の各
    々に、上記特異的反応性コーティングと接触した時に一
    定量の試料液を毛管作用により捕集および保持するため
    の毛管寸法のキャビティを提供するように、そして光吸
    収性または不透明層がキャビティと反対側になるよう
    に、上記シート材料を上記追加の構造物に取り付け；そ
    して （ｄ）１または複数の試料捕集および試験装置を提供す
    る各々の部分にシート材料を分割する、 を含んで成る、請求項１〜５のいずれか１項に記載の特
    異的反応性試料捕集および試験装置の製造方法。
  7. 【請求項７】以下の段階： （ａ）装置内で実施される試験に適当な試薬を、光透過
    性導波管として働くことができ且つ多数の装置の部分を
    提供することができる透明なフラットシート材料の表面
    上の一部に固定化し； （ｂ）追加の構造物の１表面上に光吸収性または不透明
    層を形成せしめ； （ｃ）段階（ｂ）の前または後に、多数の装置の各装置
    に、２つの向い合う側に沿ってシールされ且つその内側
    表面の少なくとも一部分上に固定化試薬を含有するキャ
    ピラリーキャビティを提供するように、間隙をあけて平
    行関係において上記シート材料に上記追加の構造物を取
    り付け、ここでそのキャピラリーキャビティが、上記固
    定化試薬と接触すると毛管作用により一定容量の試料液
    を捕集および保持するように改造されており；そして （ｄ）組立てたシートを部分に分割し、各部分が各装置
    の透明シート材料がシートの平面に対して横断し且つシ
    ールされた側に対して垂直である少なくとも１つの光学
    的に平滑な縁（エッジ）を有するような、１または複数
    の試料捕集および保持装置を提供する、 を含んで成る、請求項６に記載の方法。
  8. 【請求項８】段階（ｂ）が段階（ｃ）の前に行われ、そ
    して追加の構造物の向かい合う両表面上に光吸収性また
    は不透明層を形成することを含んで成る、請求項６また
    は請求項７に記載の方法。
  9. 【請求項９】（ａ）装置の一部分である導波管の表面と
    接触している試料をインキュベートし、直接的または間
    接的にその上に吸着されているかまたはそれに結合され
    ている固定化試薬が、インキュベーション中に請求項４
    に記載の補助試薬が直接的または間接的にその導波管の
    表面に結合するようになるような検出を要求するリガン
    ドに対する特異的結合相手であり； （ｂ）試料液体中に存在する補助試薬と導波管に結合し
    た補助試薬が励起されるような適当な光源からの光でそ
    の装置を照射し；そして （ｃ）補助試薬が複合体形成によりその導波管に結合し
    たかどうかを、そして所望によりその程度を測定するた
    めに、その導波管から出てくる輻射線をモニタリングす
    る、 ことを含んで成る、請求項１〜５のいずれか１項に記載
    の装置を使用する試料中のリガンドについての検定法。
  10. 【請求項１０】リガンドが抗原であり、そして１または
    複数の特異的結合相手がその抗原に対する抗体を含んで
    成る、請求項９に記載の検定法。
  11. 【請求項１１】請求項９または請求項10に記載の検定法
    において使用される、請求項１〜５のいずれか１項に記
    載の装置を含んで成る機器であって、使用中、試料液体
    中に存在する補助試薬と導波管に結合した補助試薬の両
    方を励起させるような角度においてその装置に入るよう
    に配置することができる輻射線源、およびその装置から
    出てきた輻射線をモニタリングするための手段を含んで
    成る機器。
  12. 【請求項１２】使用中、検定が行われる装置の有効容量
    を限定する照明マスクを更に含んで成る、請求項11に記
    載の機器。
JP2507983A 1989-05-18 1990-05-17 化学的試験方法において使用する装置 Expired - Fee Related JP2525958B2 (ja)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
GB898911462A GB8911462D0 (en) 1989-05-18 1989-05-18 Devices for use in chemical test procedures
GB8911462.3 1989-05-18

Publications (2)

Publication Number Publication Date
JPH03506078A JPH03506078A (ja) 1991-12-26
JP2525958B2 true JP2525958B2 (ja) 1996-08-21

Family

ID=10656979

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP2507983A Expired - Fee Related JP2525958B2 (ja) 1989-05-18 1990-05-17 化学的試験方法において使用する装置

Country Status (11)

Country Link
US (1) US5192502A (ja)
EP (1) EP0426817B1 (ja)
JP (1) JP2525958B2 (ja)
AT (1) ATE96228T1 (ja)
AU (1) AU617254B2 (ja)
CA (1) CA2031515C (ja)
DE (1) DE69004049T2 (ja)
DK (1) DK0426817T3 (ja)
ES (1) ES2045921T3 (ja)
GB (1) GB8911462D0 (ja)
WO (1) WO1990014590A1 (ja)

Families Citing this family (60)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB9008261D0 (en) * 1990-04-11 1990-06-13 Ares Serono Res & Dev Ltd Method of improving assay sensitivity
GB9212305D0 (en) * 1992-06-10 1992-07-22 Applied Research Systems Sensor for optical assay
GB9212302D0 (en) * 1992-06-10 1992-07-22 Applied Research Systems Method for improving measurement precision in evanescent wave optical biosensor assays
US5512492A (en) * 1993-05-18 1996-04-30 University Of Utah Research Foundation Waveguide immunosensor with coating chemistry providing enhanced sensitivity
US5677196A (en) * 1993-05-18 1997-10-14 University Of Utah Research Foundation Apparatus and methods for multi-analyte homogeneous fluoro-immunoassays
AU749504B2 (en) * 1993-05-18 2002-06-27 University Of Utah Research Foundation Apparatus and methods for multianalyte homogeneous fluoroimmunoassays
US5919712A (en) 1993-05-18 1999-07-06 University Of Utah Research Foundation Apparatus and methods for multi-analyte homogeneous fluoro-immunoassays
ES2169079T3 (es) * 1993-05-18 2002-07-01 Univ Utah Res Found Aparato y metodos para fluoroinmunoensayos homogeneos multianalitos.
JP3326708B2 (ja) * 1993-08-31 2002-09-24 日水製薬株式会社 光学的測定装置およびその方法
GB9325718D0 (en) * 1993-12-16 1994-02-16 Ars Holding 89 Nv Sensor device for sandwich assay
GB9404749D0 (en) * 1994-03-10 1994-04-27 Ars Holding 89 Nv Device for use in spectrophotometry
US5490972A (en) * 1994-04-29 1996-02-13 Johnson & Johnson Clinical Diagnostics, Inc. Raising mechanism for incubator cover
US6335203B1 (en) 1994-09-08 2002-01-01 Lifescan, Inc. Optically readable strip for analyte detection having on-strip orientation index
US5526120A (en) * 1994-09-08 1996-06-11 Lifescan, Inc. Test strip with an asymmetrical end insuring correct insertion for measuring
US5563031A (en) * 1994-09-08 1996-10-08 Lifescan, Inc. Highly stable oxidative coupling dye for spectrophotometric determination of analytes
US5515170A (en) * 1994-09-08 1996-05-07 Lifescan, Inc. Analyte detection device having a serpentine passageway for indicator strips
ES2168389T3 (es) * 1994-09-08 2002-06-16 Lifescan Inc Tira de lectura optica y patron incorporado para la deteccion de un analito.
GB9419001D0 (en) 1994-09-21 1994-11-09 Applied Research Systems Assay method
US5599668A (en) * 1994-09-22 1997-02-04 Abbott Laboratories Light scattering optical waveguide method for detecting specific binding events
US5814565A (en) * 1995-02-23 1998-09-29 University Of Utah Research Foundation Integrated optic waveguide immunosensor
US5909227A (en) * 1995-04-12 1999-06-01 Eastman Kodak Company Photograph processing and copying system using coincident force drop-on-demand ink jet printing
US6143247A (en) * 1996-12-20 2000-11-07 Gamera Bioscience Inc. Affinity binding-based system for detecting particulates in a fluid
KR970706902A (ko) * 1995-09-12 1997-12-01 로드릭 리차드 제이 Dna 증폭 및 검정 방법 및 장치(device and method for dna amplification and assay)
US6794127B1 (en) 1997-06-16 2004-09-21 Diversa Corporation Capillary array-based sample screening
US6972183B1 (en) 1997-06-16 2005-12-06 Diversa Corporation Capillary array-based enzyme screening
GB9609653D0 (en) * 1996-05-09 1996-07-10 Applied Research Ars Holding N Method of assay
US6511854B1 (en) * 1997-07-31 2003-01-28 The Uab Research Foundation Regenerable biosensor using total internal reflection fluorescence with electrochemical control
US6222619B1 (en) 1997-09-18 2001-04-24 University Of Utah Research Foundation Diagnostic device and method
DE19753847A1 (de) * 1997-12-04 1999-06-10 Roche Diagnostics Gmbh Analytisches Testelement mit Kapillarkanal
DE19753850A1 (de) 1997-12-04 1999-06-10 Roche Diagnostics Gmbh Probennahmevorrichtung
DE19753851A1 (de) * 1997-12-04 1999-06-10 Roche Diagnostics Gmbh Vorrichtung zum kapillaren Flüssigkeitstransport
US6438279B1 (en) 1999-01-07 2002-08-20 Cornell Research Foundation, Inc. Unitary microcapiliary and waveguide structure and method of fabrication
AU5824300A (en) 1999-07-05 2001-01-22 Novartis Ag Sensor platform, apparatus incorporating the platform, and process using the platform
US6771376B2 (en) * 1999-07-05 2004-08-03 Novartis Ag Sensor platform, apparatus incorporating the platform, and process using the platform
US6395483B1 (en) 1999-09-02 2002-05-28 3M Innovative Properties Company Arrays with mask layers
US7167615B1 (en) 1999-11-05 2007-01-23 Board Of Regents, The University Of Texas System Resonant waveguide-grating filters and sensors and methods for making and using same
US6492133B1 (en) 2000-05-01 2002-12-10 3M Innovative Properties Company Reflective disc assay devices, systems and methods
JP2002202305A (ja) * 2000-12-28 2002-07-19 Ebara Corp アフィニテイー検出分析チップ、その作製方法、それを用いる検出方法及び検出システム
US7310543B2 (en) * 2001-03-26 2007-12-18 Kumetrix, Inc. Silicon microprobe with integrated biosensor
DE10134650B4 (de) 2001-07-20 2009-12-03 Roche Diagnostics Gmbh System zur Entnahme kleiner Körperflüssigkeitsmengen
DE10220296A1 (de) * 2002-05-07 2003-11-20 Roche Diagnostics Gmbh Vorrichtung zur Probennahme von flüssigen Proben
US20070264161A1 (en) * 2003-02-27 2007-11-15 Advalytix Ag Method and Device for Generating Movement in a Thin Liquid Film
EP1596974B1 (de) * 2003-02-27 2007-06-06 Advalytix AG Verfahren und vorrichtung zur durchmischung kleiner flüssigkeitsmengen in mikrokavitäten
DE10325313B3 (de) * 2003-02-27 2004-07-29 Advalytix Ag Verfahren und Vorrichtung zur Erzeugung von Bewegung in einem dünnen Flüssigkeitsfilm
JP3878144B2 (ja) * 2003-03-19 2007-02-07 富士フイルムホールディングス株式会社 生化学解析用ユニット
US8207509B2 (en) 2006-09-01 2012-06-26 Pacific Biosciences Of California, Inc. Substrates, systems and methods for analyzing materials
EP3936857B1 (en) * 2006-09-01 2023-06-21 Pacific Biosciences Of California, Inc. Substrates, systems and methods for analyzing materials
EP4325209A3 (en) 2008-09-16 2024-05-01 Pacific Biosciences Of California, Inc. Integrated optical device
EP4378584A2 (en) 2010-02-19 2024-06-05 Pacific Biosciences Of California, Inc. Integrated analytical system and method for fluorescence measurement
US8994946B2 (en) 2010-02-19 2015-03-31 Pacific Biosciences Of California, Inc. Integrated analytical system and method
US9372308B1 (en) 2012-06-17 2016-06-21 Pacific Biosciences Of California, Inc. Arrays of integrated analytical devices and methods for production
EP2936222B1 (en) 2012-12-18 2019-07-03 Pacific Biosciences Of California, Inc. An optical analytical device
EP2959283B1 (en) 2013-02-22 2022-08-17 Pacific Biosciences of California, Inc. Integrated illumination of optical analytical devices
CA2959518A1 (en) 2014-08-27 2016-03-03 Pacific Biosciences Of California, Inc. Arrays of integrated analytical devices
WO2016149397A1 (en) 2015-03-16 2016-09-22 Pacific Biosciences Of California, Inc. Integrated devices and systems for free-space optical coupling
CA2983882C (en) 2015-05-07 2023-10-03 Scott E. Helgesen Multiprocessor pipeline architecture
CN107924027B (zh) 2015-06-12 2024-01-23 加利福尼亚太平洋生物科学股份有限公司 用于光耦合的集成靶点波导器件和系统
US9851290B2 (en) * 2015-06-22 2017-12-26 Sharp Laboratories Of America, Inc. Particle detector for particulate matter accumulated on a surface
US10717671B2 (en) 2015-07-07 2020-07-21 Agc Glass Europe Glass substrate with increased weathering and chemical resistance
CN110612160B (zh) * 2017-03-31 2022-06-03 前进生物技术股份有限公司 用于测量流体体积的装置

Family Cites Families (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4447546A (en) * 1982-08-23 1984-05-08 Myron J. Block Fluorescent immunoassay employing optical fiber in capillary tube
DE3568874D1 (en) * 1984-06-13 1989-04-20 Ares Serono Inc Photometric instruments, their use in methods of optical analysis, and ancillary devices therefor
US4824789B1 (en) * 1986-10-10 1996-08-13 Minnesota Mining & Mfg Gas sensor

Also Published As

Publication number Publication date
EP0426817A1 (en) 1991-05-15
GB8911462D0 (en) 1989-07-05
WO1990014590A1 (en) 1990-11-29
AU617254B2 (en) 1991-11-21
US5192502A (en) 1993-03-09
CA2031515A1 (en) 1990-11-19
JPH03506078A (ja) 1991-12-26
EP0426817B1 (en) 1993-10-20
ATE96228T1 (de) 1993-11-15
DK0426817T3 (da) 1994-02-21
DE69004049D1 (de) 1993-11-25
AU5740390A (en) 1990-12-18
CA2031515C (en) 1996-06-04
DE69004049T2 (de) 1994-04-07
ES2045921T3 (es) 1994-01-16

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP2525958B2 (ja) 化学的試験方法において使用する装置
US6027944A (en) Capillary-fill biosensor device comprising a calibration zone
US5726064A (en) Method of assay having calibration within the assay
AU619120B2 (en) Method of optical analysis
JP3458860B2 (ja) サンドイッチ分析用センサ装置
JP3018006B2 (ja) 光学的分析用センサ
JP3535158B2 (ja) 消失性波光学的バイオセンサ分析における測定精度の向上方法
JP2571971B2 (ja) 分析方法及びキット
EP0422708B1 (en) Devices for use in chemical test procedures
JP2969177B2 (ja) 分析方法
JP3578407B2 (ja) アッセイ方法
CA2095245C (en) Method of assay
JPH0224459B2 (ja)
AU663062C (en) Method of assay
CA2200690C (en) Assay method

Legal Events

Date Code Title Description
R250 Receipt of annual fees

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250

R250 Receipt of annual fees

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250

R250 Receipt of annual fees

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250

R250 Receipt of annual fees

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250

FPAY Renewal fee payment (event date is renewal date of database)

Free format text: PAYMENT UNTIL: 20090531

Year of fee payment: 13

LAPS Cancellation because of no payment of annual fees