JP2024509016A - 新規なヘテロビサイクリック残基を有するインジルビン誘導体およびその用途 - Google Patents

新規なヘテロビサイクリック残基を有するインジルビン誘導体およびその用途 Download PDF

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Abstract

【要約書】本発明は、新規なヘテロビサイクリック残基を有するインジルビン誘導体、およびＦＬＴ３（ｆｍｓ－ｌｉｋｅ ｔｙｒｏｓｉｎｅ ｋｉｎａｓｅ ３）および形質感染途中再配列された（ｒｅａｒｒａｎｇｅｄ ｄｕｒｉｎｇ ｔｒａｎｓｆｅｃｔｉｏｎ；ＲＥＴ）キナーゼ抑制剤としてのその用途に関する。本発明の化合物は、ＦＬＴ３およびＲＥＴキナーゼの活性を効果的に抑制して、突然変異ＦＬＴ３および突然変異ＲＥＴ－関連疾病、特に、急性骨髄性白血病の予防または治療に有用できる。

Description

本発明は、新規なヘテロビサイクリック残基を有するインジルビン誘導体、およびそのＦＬＴ３（ｆｍｓ－ｌｉｋｅ ｔｙｒｏｓｉｎｅ ｋｉｎａｓｅ ３）抑制剤および形質感染途中再配列された（ｒｅａｒｒａｎｇｅｄ ｄｕｒｉｎｇ ｔｒａｎｓｆｅｃｔｉｏｎ；ＲＥＴ）キナーゼ抑制剤としての用途に関する。
Ｆｍｓ様チロシンキナーゼ３（ｆｍｓ－ｌｉｋｅ ｔｙｒｏｓｉｎｅ ｋｉｎａｓｅ ３；ＦＬＴ３）は、受容体様チロシンキナーゼのクラスＩＩＩに属すタンパク質である。ＦＬＴ３は、健常者ＣＤ３４陽性ヒト骨髄前駆細胞および樹状助細胞上に発現が確認され、これら細胞の増殖・分化などに重要な役割を果たす（Ｂｒｏｗｎ Ｐ ｅｔ ａｌ．、Ｅｕｒｏｐｅａｎ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃａｎｃｅｒ、４０ｔｈ、ｐｐ．７０７－７２１，２００４）。また、ＦＬＴ３のリガンド（ＦＬ）は、骨髄間質細胞およびＴ細胞に発現され、多数の造血系統の細胞発生に影響を与え、他の成長因子との相互作用により肝細胞、前駆細胞、樹状細胞および自然殺害細胞の増殖を刺激するサイトカインの一つである。
ＦＬＴ３はまた、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）標的抗原であり、健康な細胞と比較すると、ＡＭＬ患者ブラストで過発現され、患者の細胞大部分で発現されることが知られている（Ｃａｒｏｗ ｅｔ ａｌ．、Ｆｅｂ ２、１９９６ Ｂｌｏｏｄ：８７（３）；Ｂｉｒｇ ｅｔ ａｌ．、Ｎｏｖ １９９２ Ｂｌｏｏｄ：８０（１０））。特に、ＦＬＴ３は、ＡＭＬ患者から頻繁に突然変異される遺伝子であり、突然変異は、不良な予後と関連する（Ａｂｕ－Ｄｕｈｉｅｒ ｅｔ ａｌ．、Ｂｒｉｔｉｓｈ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｈａｅｍａｔｏｌｏｇｙ ２０００ Ｏｃｔ；１１１（１）：１９０－５，Ｙａｍａｍｏｔｏ ｅｔ ａｌ．、Ａｐｒｉｌ １５，２００１；Ｂｌｏｏｄ：９７（８））。また、最近には、ＦＬＴ３が膵臓癌の予後と関連する重要なバイオマーカーであり得るという点と（Ｇｅｒ ｅｔ ａｌ．、Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ３８：５７５９－５７６５（２０１８）ＦＬＴ３のリガンド（ＦＬ）が食道扁平上皮癌（ｅｓｏｐｈａｇｅａｌ ｓｑｕａｍｏｕｓ ｃｅｌｌ ｃａｒｃｉｎｏｍａ）の抵抗性を促進するという点（Ｚｈｕ ｅｔ ａｌ．、Ｆｒｏｎｔｉｅｒｓ ｉｎ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ、Ｍａｙ ２０２１、Ｖｏｌ １２、Ａｒｔｉｃｌｅ ６５９７３５）が報告されるなど、ＦＬＴ３キナーゼと膵臓癌および食道癌との関連性も確認されている。
ＲＥＴキナーゼは、末梢神経系と中枢神経系および腎臓を含む様々な組織で発達中に発現され、いくつかの組織および細胞類型の発達と成熟、保持のために必要なチロシンキナーゼに属す単一－通過膜貫通受容体である（Ｍｕｌｌｉｇａｎ、Ｌ．Ｍ．、Ｎａｔｕｒｅ Ｒｅｖｉｅｗｓ Ｃａｎｃｅｒ、２０１４、１４、１７３－１８６）。ＲＥＴタンパク質は、細胞外リガンド－結合ドメイン、疎水性膜貫通ドメインおよび２７個のアミノ酸の挿入により分割されたチロシンキナーゼドメインを有した細胞質部分の３個のドメインから構成される。ＲＥＴキナーゼの活性化突然変異は、肺癌および甲状腺癌患者などから発見され、これらの癌に対する誘導性突然変異と見なされている（Ｋｏｈｎｏ、Ｔ．ｅｔ ａｌ．、Ｎａｔｕｒｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ、２０１２、１８（３）、ｐｐ．３７５－３７７、Ｍａｔｓｕｂａｒａ、Ｄ．ｅｔ ａｌ．、Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｔｈｏｒａｃｉｃ Ｏｎｃｏｌｏｇｙ、２０１２、７（１２）、ｐｐ．１８７２－１８７６）。また、ＲＥＴ－媒介オートファジー（ａｕｔｏｐｈａｇｙ）抑制とＡＭＬとの相互依存性と、ＡＭＬ細胞株であるＭＯＬＭ－１３およびＭＯＬＭ－１４でＲＥＴキナーゼが発現されるという事実が報告されているなど（Ｒｕｄａｔ、ｅｔ ａｌ．、Ｌｅｕｋｅｍｉａ ３２、２１８９－２２０２（２０１８））、ＲＥＴキナーゼの活性化突然変異とＡＭＬ誘発との関連性が確認された。
本発明者らは、ＦＬＴ３とＲＥＴキナーゼの抑制能を有する新規化合物を導き出すために研究努力した結果、新規なヘテロビサイクリック残基を有するインジルビン誘導体化合物が既存に公知になっているインジルビン誘導体化合物に比べて効果的にＦＬＴ３、特に、突然変異ＦＬＴ３を抑制することができ、ＲＥＴキナーゼの抑制能にもまた優れることを究明することで、本発明を完成するに至った。
本発明は、ＦＬＴ３およびＲＥＴキナーゼの抑制能を有する、新規なヘテロビサイクリック残基を有するインジルビン誘導体化合物、その薬学的に許容される塩を提供することをその目的とする。
本発明のまた別の目的は、新規なヘテロビサイクリック残基を有するインジルビン誘導体化合物を含む、ＦＬＴ３およびＲＥＴキナーゼ関連疾病の予防または治療用薬学組成物、前記新規化合物のＦＬＴ３およびＲＥＴキナーゼ関連疾病の予防または治療用途、および前記新規化合物を、これを必要とする対象体に投与するステップを含む、ＦＬＴ３およびＲＥＴキナーゼ関連疾病の予防または治療方法を提供することにある。
本発明の一実施形態によって、下記化学式１で表される化合物またはその薬学的に許容される塩が提供される。
前記化学式１において、
Ｒ1は、水素またはハロゲンであり、
Ｒ2は、
であり、
Ｒ３は、
からなる群より選ばれるいずれか一つであり、
ここで、前記Ｘ1は、Ｃ－ＲaＲbであり、Ｘ2は、Ｃ－ＲcＲdであり、Ｘ3は、Ｃ－ＲeＲfであり、
Ｒ4、Ｒ5、Ｒa、Ｒb、Ｒc、Ｒd、ＲeおよびＲfは、それぞれ独立して、水素またはＣ1－Ｃ8アルキルであり、
ｎ、ｍおよびｌは、それぞれ独立して、１～３の整数である。
本発明の化合物は、ＦＬＴ３とＲＥＴキナーゼに対する高い抑制活性を有する。
本発明の化合物および薬学的組成物は、例えば、前記化合物または組成物を対象体に投与することにより、ＦＬＴ３関連疾病またはＲＥＴキナーゼ関連疾病を予防または治療するにあたって有用である。
本発明のヘテロビサイクリック残基を有するインジルビン誘導体化合物は、従来公知になっていない新規な化合物であって、ＦＬＴ３およびＲＥＴキナーゼの活性を効果的に抑制して、突然変異ＦＬＴ３および突然変異ＲＥＴ－関連疾病、特に、急性骨髄性白血病の予防または治療に有用できる。
本発明のヘテロビサイクリック残基を有するインジルビン誘導体化合物と、従来公知になっているインジルビン誘導体化合物をそれぞれ投与されたマウスから治療開示後、計２８日間測定された腫瘍サイズおよび体重の変化を示したものである。 本発明のヘテロビサイクリック残基を有するインジルビン誘導体化合物と、従来公知になっているインジルビン誘導体化合物をそれぞれ投与されたマウスから治療開示後、計２８日間測定された腫瘍サイズおよび体重の変化を示したものである。 本発明のヘテロビサイクリック残基を有するインジルビン誘導体化合物と、従来公知になっているインジルビン誘導体化合物をそれぞれ投与されたマウスから治療開示後、計２８日間測定された腫瘍サイズおよび体重の変化を示したものである。 本発明のヘテロビサイクリック残基を有するインジルビン誘導体化合物と、従来公知になっているインジルビン誘導体化合物をそれぞれ投与されたマウスから治療開示後、計２８日間測定された腫瘍サイズおよび体重の変化を示したものである。
用語の定義
別に定義されない限り、本発明において使用されるすべての技術用語は、本発明の属する分野における通常の技術者が一般的に理解するところと同一の意味を有する。また、本発明に記載されている数値は、明白に言及されない限り、「約」の意味を含むものと見なす。
本発明において使用される残基および置換基の定義を下記のように提供する。別途に明示しない限り、それぞれの残基は下記の定義を有し、通常の技術者が一般的に理解するところのような意味として使用される。
本発明に使用された置換基は、さらに置換されるか、または置換されない場合をすべて含むものと意図される。
本発明に使用された「ハロ」、「ハロゲン」なる用語は、ブロモ、クロロ、フルオロ、またはヨウ素を指称する。
本発明に使用された[アルキル]なる用語は、１次、２次、３次、および／または４次炭素原子を有する炭化水素であり、直鎖状、分岐状、または環状、あるいはそれらの組み合わせであってもよい飽和脂肪族基を含む。例えば、アルキル基は、１～８個の炭素原子（すなわち、Ｃ１－Ｃ８アルキル）、１～６個の炭素原子（すなわち、Ｃ１－Ｃ６アルキル）、または１～３個の炭素原子（すなわち、Ｃ１－Ｃ３アルキル）を有してもよい。適合なアルキルの例としては、メチル（Ｍｅ、－ＣＨ３）、エチル（Ｅｔ、－Ｃ２Ｈ５）、１－プロピル（ｎ－Ｐｒ、－ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３）、２－プロピル（ｉ－Ｐｒ、－ＣＨ（ＣＨ３）２）、１－ブチル（ｎ－Ｂｕ、－ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３）、２－メチル－１－プロピル（ｉ－Ｂｕ、－ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）２）、２－ブチル（ｓ－Ｂｕ、－ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ３）、２－メチル－２－プロピル（ｔ－Ｂｕ、－Ｃ（ＣＨ３）３）、１－ペンチル（ｎ－ペンチル、－ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３）、２－ペンチル（－ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３）、３－ペンチル（－ＣＨ（ＣＨ２ＣＨ３）２）、２－メチル－２－ブチル（－ＣＨ（ＣＨ３）２ＣＨ２ＣＨ３）、３－メチル－２－ブチル（－ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ（ＣＨ３）２）、３－メチル－１－ブチル（－ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）２）、２－メチル－１－ブチル（－ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ３）、１－ヘキシル（－ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３）、２－ヘキシル（－ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３）、３－ヘキシル（－ＣＨ（ＣＨ２ＣＨ３）（ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３））、２－メチル－２－ペンチル（－Ｃ（ＣＨ３）２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３）、３－メチル－２－ペンチル（－ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ３）、４－メチル－２－ペンチル（－ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）２）、３－メチル－３－ペンチル（－Ｃ（ＣＨ３）（ＣＨ２ＣＨ３）２）、２－メチル－３－ペンチル（－ＣＨ（ＣＨ２ＣＨ３）ＣＨ（ＣＨ３）２）、２，３－ジメチル－２－ブチル（－Ｃ（ＣＨ３）２ＣＨ（ＣＨ３）２）、３，３－ジメチル－２－ブチル（－ＣＨ（ＣＨ３）Ｃ（ＣＨ３）３）、およびオクチル（－（ＣＨ２）７ＣＨ３）が挙げられるが、これらに限定されるものではない。
「薬学的に許容される」なる語句は、当業界において通用される表現であって、物質または組成物が、製剤を構成する他の成分および／またはそれで治療される哺乳動物と化学的におよび／または毒性学的に相溶性でなければならないことを示す。
「薬学的に許容される塩」または「塩」は、本発明において患者の治療に適合な、または相溶性のある酸付加塩または塩基付加塩を指称するのに使用される。適合な塩を形成する例示的な無機酸としては、塩酸、臭化水素酸、硫酸およびリン酸、それだけでなく、金属塩、例えば、オルトリン酸一水素ナトリウムおよび硫酸水素カリウムが挙げられる。適合な塩を形成する例示的な有機酸としては、モノ－、ジ－およびトリカルボン酸、例えばグリコール酸、乳酸、ピルビン酸、マロン酸、コハク酸、グルタル酸、フマル酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、アスコルビン酸、マレイン酸、安息香酸、フェニル酢酸、桂皮酸およびサリチル酸、それだけでなくスルホン酸、例えば、ｐ－トルエンスルホン酸およびメタンスルホン酸が挙げられる。一酸塩または二酸塩が形成されてもよく、そのような塩は、水和、溶媒和、または実質的に無水の形態で存在してもよい。一般的に、本発明の化合物の酸付加塩は、それらの遊離塩基形態と比較して、水および様々な親水性有機溶媒にさらに可溶性であり、一般的により高い融点を示す。好適な塩の選択は、当業者にとって公知になっている。他の非－薬学的に許容される塩、例えば、シュウ酸塩は、例えば、実験室用で、または薬学的に許容される酸付加塩への後続転換用で、本発明の化合物の単離で使用できる。適合な塩を形成する例示的な無機塩基としては、リチウム、ナトリウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム、またはバリウムヒドロキシドが挙げられる。適合な塩を形成する例示的な有機塩基としては、脂肪族、脂環族、または芳香族有機アミン、例えば、メチルアミン、トリメチルアミンおよびピコリンまたはアンモニアが挙げられる。よって、一部の例において、本発明において考慮される塩としては、アルキル、ジアルキル、トリアルキルまたはテトラ－アルキルアンモニウム塩が挙げられる。特定の実施形態において、本発明において考慮される塩としては、Ｌ－アルギニン、ベネンタミン、ベンザチン、ベタイン、水酸化カリウム、コリン、デアノール、ジエタノールアミン、ジエチルアミン、２－（ジエチルアミノ）エタノール、エタノールアミン、エチレンジアミン、Ｎ－メチルグルカミン、ヒドラバミン、１Ｈ－イミダゾール、リチウム、Ｌ－リシン、マグネシウム、４－（２－ヒドロキシエチル）モルホリン、ピペラジン、カリウム、１－（２－ヒドロキシエチル）ピロリジン、ナトリウム、トリエタノールアミン、トロメタミン、および亜鉛塩が挙げられるが、これらに限定されるものではない。特定の実施形態において、本発明において考慮される塩としては、Ｎａ、Ｃａ、Ｋ、Ｍｇ、Ｚｎまたは他の金属塩が挙げられるが、これらに限定されるものではない。
好適な塩の選択は、当業者であれば公知である。
薬学的に許容される酸付加塩は、また、様々な溶媒和物、例えば、水、メタノール、エタノール、ジメチルホルムアミドなどとの溶媒和物として存在してもよい。そのような溶媒和物の混合物もまた調製できる。そのような溶媒和物の供給源は、結晶化の溶媒からのものであるか、調製または結晶化の溶媒に固有のもの、またはそのような溶媒に偶発的なものであり得る。
本発明に使用された「ＩＣ50」なる用語は、５０％抑制を生成する抑制剤または化合物の濃度を指称する。
本発明に使用された「ＧＩ50」なる用語は、細胞増殖の最大抑制に対して５０％抑制を生成する抑制剤または化合物の濃度を指称する。
本発明に使用された「対象」、「対象体」、「患者」なる用語は、温血動物、例えば、豚、牛、鶏、馬、モルモット、マウス、ラット、アレチネズミ、猫、兎、犬、サル、チンパンジー、およびヒトを指称する。
本発明に使用されるように、「治療した」、「治療する」、「治療」なる用語に加えて、「改善した」および「改善する」は、任意の客観的または主観的なパラメーター、例えば、減退；快方；症状を減少させるか、または症状、負傷、病理または病態を患者がさらによく耐えられるようにするか；症状または病態の頻度または持続期間を低下させるか；一部状況で、症状または病態の開始を防止することを始めとして、負傷、病理、病態、または症状（例えば、痛み）の治療または改善において任意の成功の徴候を指称する。症状の治療または改善は、例えば、身体検査の結果を含む、任意の客観的または主観的パラメーターに基づいてもよい。
ヘテロビサイクリックインジルビン誘導体化合物
本発明は、新規なヘテロビサイクリックインジルビン誘導体化合物を提供する。
一実施形態において、本発明は、下記化学式１で表されるヘテロビサイクリックインジルビン化合物またはその薬学的に許容される塩に関する。
［化学式１］
前記化学式１において、
Ｒ1は、水素またはハロゲンであり、
Ｒ2は、
であり、
Ｒ3は、
からなる群より選ばれるいずれか一つであり、
ここで、前記Ｘ1は、Ｃ－ＲaＲbであり、Ｘ2は、Ｃ－ＲcＲdであり、Ｘ3は、Ｃ－ＲeＲfであり、
Ｒ4、Ｒ5、Ｒa、Ｒb、Ｒc、Ｒd、ＲeおよびＲfは、それぞれ独立して、水素またはＣ1－Ｃ8アルキルであり、
ｎ、ｍおよびｌは、それぞれ独立して、１～３の整数である。
本発明の一具体的な実施形態において、前記Ｒ4、Ｒ5、Ｒa、Ｒb、Ｒc、Ｒd、ＲeおよびＲfは、それぞれ独立して、水素またはＣ1－Ｃ3アルキルであり、ｎ、ｍおよびｌは、１である。
本発明の一具体的な実施形態において、前記Ｒ3は、
からなる群より選ばれるいずれか一つであり、ｎおよびｍは、それぞれ独立して、１～３の整数である
本発明の一具体的な実施形態において、前記Ｒ4、Ｒ5、Ｒa、Ｒb、Ｒc、およびＲdは、それぞれ独立して、水素またはＣ1－Ｃ3アルキルであり、ｎおよびｍは１である。
本発明の一具体的な実施形態において、前記Ｒ1は、水素またはハロゲンであり、前記Ｒ2は、
からなる群より選ばれるいずれか一つである。
本発明の一具体的な実施形態において、前記Ｒ1は、水素またはハロゲンであり、前記Ｒ2は、
からなる群より選ばれるいずれか一つである。
本発明の一具体的な実施形態において、前記Ｒ1は、水素またはフッ素であり、前記Ｒ2は、
からなる群より選ばれるいずれか一つである。
前記化学式１の化合物は、以下の化合物１～２０からなる群より選ばれる化合物を含むが、これに制限されるものではない。
本発明の一具体的な実施形態において、本発明は、前記の本発明のヘテロビサイクリック残基を有するインジルビン誘導体化合物またはその薬学的に許容される塩を含む、ＦＬＴ３およびＲＥＴ－関連疾病の予防または治療のための製薬組成物に関する。
本発明の一具体的な実施形態において、前記製薬組成物は、白血病またはリンパ腫の予防または治療のためのものである。
本発明の一具体的な実施形態において、前記製薬組成物は、多発性骨髄腫、悪性形質細胞新生物、ホジキンリンパ種、結節性リンパ球優位型ホジキンリンパ腫、カーレル病および骨髄腫症、形質細胞白血病、形質細胞種、Ｂ－細胞前リンパ球性白血病、有毛細胞白血病、Ｂ－細胞非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、急性リンパ球性白血病（ＡＬＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、濾胞性リンパ腫、バーキットリンパ腫、辺縁帯リンパ腫、マントル細胞リンパ腫、大細胞型リンパ腫、前駆Ｂ－リンパ芽球性リンパ腫、骨髄性白血病、ワルデンストレーム大グロブリン血症、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、濾胞性リンパ腫、辺縁帯リンパ腫、粘膜関連リンパ組織リンパ種、小細胞リンパ球性リンパ種、マントル細胞リンパ種、バーキットリンパ腫、原発性縦隔（胸腺）大Ｂ細胞リンパ腫、リンパ形質細胞性リンパ種、ワルデンストレームマクログロブリン血症、リンパ節辺縁帯Ｂ細胞リンパ腫、脾臓辺縁帯リンパ腫、血管内大Ｂ－細胞リンパ種、原発性滲出性リンパ種、リンパ腫様肉芽腫症、Ｔ細胞／組織球－豊富型大Ｂ－細胞リンパ腫、原発性中枢神経係リンパ種、原発性皮膚びまん性大Ｂ－細胞リンパ腫（脚型）、高齢者のＥＢＶ陽性びまん性大Ｂ－細胞リンパ種、炎症に関連したびまん性大Ｂ－細胞リンパ腫、血管内大Ｂ－細胞リンパ腫、ＡＬＫ－陽性大Ｂ－細胞リンパ種、形質細胞性リンパ種、ＨＨＶ８－関連多重心性キャッスルマン病において発生する大Ｂ－細胞リンパ腫、びまん性大Ｂ－細胞リンパ腫とバーキットリンパ腫との間の中間特徴を有する未分類Ｂ－細胞リンパ種、またはびまん性大Ｂ－細胞リンパ腫と古典的ホジキンリンパ種との間の中間特徴として有する未分類Ｂ－細胞リンパ種の予防または治療のためのものである。
本発明の一具体的な実施形態において、前記製薬組成物は、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）の予防または治療のためのものである。
本発明の一具体的な実施形態において、前記急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）は、突然変異ＦＬＴ３または突然変異ＲＥＴキナーゼが発現されたものである。
治療用途
本発明による新規なヘテロビサイクリック残基を有するインジルビン誘導体化合物またはその薬学的に許容される塩は、ＦＬＴ３またはＲＥＴキナーゼ、特に、突然変異ＦＬＴ３の活性と突然変異ＲＥＴキナーゼの活性を抑制して、これらの活性と関連する疾病に予防または治療効果を示す。
突然変異ＦＬＴ３は、ＦＬＴ３アミノ酸配列のチロシンキナーゼドメイン（ｔｙｒｏｓｉｎｅ ｋｉｎａｓｅ ｄｏｍａｉｎ：ＴＫＤ）（ＦＬＴ３－ＴＫＤ）に突然変異を有するものであってもよい。前記突然変異ＦＬＴ３は、遺伝子内縦列重複（ｉｎｔｅｒｎａｌ ｔａｎｄｅｍ ｄｕｐｌｉｃａｔｉｏｎ；ＩＴＤ）をさらに含むものであってもよい。前記突然変異ＦＬＴ３の例としては、ＦＬＴ３－ＩＴＤ、ＦＬＴ３－Ｄ８３５Ｙ、ＦＬＴ３－Ｆ６９１Ｌ、ＦＬＴ３－Ｆ６９１Ｌ／Ｄ８３５Ｙ、ＦＬＴ３－ＩＴＤ／Ｄ８３５Ｙ、またはＦＬＴ３－ＩＴＤ／Ｆ６９１Ｌのうち一つ以上を含むが、これに制限されるものではない。
ＲＥＴキナーゼの発現、活性または水準の調節障害は、１つ以上のＲＥＴキナーゼタンパク質の点突然変異／挿入／結実を伴う。ＲＥＴキナーゼタンパク質の点突然変異／挿入／結実の非制限的な例は、Ｍ９１８Ｔ、Ｍ９１８Ｖ、Ｃ６３４Ｗ、Ｖ８０４Ｌ、およびＶ８０４Ｍのうち一つ以上を含むが、これに制限されるものではない。
一実施形態において、本発明の化合物は、ＦＬＴ３－およびＲＥＴキナーゼ関連疾患を治療するのに使用されてもよい。一部実施形態において、ＦＬＴ３－およびＲＥＴキナーゼ関連疾患は、これらのキナーゼを発現する悪性細胞、例えば、癌を含む。一部実施形態において、前記癌は、造血起源の癌、膵臓癌、食道癌、肺癌および甲状腺癌を含む。具体的な実施形態において、前記癌は、造血起源の癌、例えば、リンパ種または白血病である。より具体的な実施形態において、前記癌は、多発性骨髄腫、悪性形質細胞新生物、ホジキンリンパ種、結節性リンパ球優位型ホジキンリンパ腫、カーレル病および骨髄腫症、形質細胞白血病、形質細胞種、Ｂ－細胞前リンパ球性白血病、有毛細胞白血病、Ｂ－細胞非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、急性リンパ球性白血病（ＡＬＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、濾胞性リンパ腫、バーキットリンパ腫、辺縁帯リンパ腫、マントル細胞リンパ腫、大細胞型リンパ腫、前駆Ｂ－リンパ芽球性リンパ腫、骨髄性白血病、ワルデンストレーム大グロブリン血症、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、濾胞性リンパ腫、辺縁帯リンパ腫、粘膜関連リンパ組織リンパ種、小細胞リンパ球性リンパ種、マントル細胞リンパ種、バーキットリンパ腫、原発性縦隔（胸腺）大Ｂ細胞リンパ腫、リンパ形質細胞性リンパ種、ワルデンストレームマクログロブリン血症、リンパ節辺縁帯Ｂ細胞リンパ腫、脾臓辺縁帯リンパ腫、血管内大Ｂ－細胞リンパ種、原発性滲出性リンパ種、リンパ腫様肉芽腫症、Ｔ細胞／組織球－豊富型大Ｂ－細胞リンパ腫、原発性中枢神経係リンパ種、原発性皮膚びまん性大Ｂ－細胞リンパ腫（脚型）、高齢者のＥＢＶ陽性びまん性大Ｂ－細胞リンパ種、炎症に関連したびまん性大Ｂ－細胞リンパ腫、血管内大Ｂ－細胞リンパ腫、ＡＬＫ－陽性大Ｂ－細胞リンパ種、形質細胞性リンパ種、ＨＨＶ８－関連多重心性キャッスルマン病において発生する大Ｂ－細胞リンパ腫、びまん性大Ｂ－細胞リンパ腫とバーキットリンパ腫との間の中間特徴を有する未分類Ｂ－細胞リンパ種、またはびまん性大Ｂ－細胞リンパ腫と古典的ホジキンリンパ種との間の中間特徴として有する未分類Ｂ－細胞リンパ種、またはその他の造血細胞関連癌であるが、これに制限されるものではない。好ましくは、前記癌は、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）であり、より好ましくは、突然変異ＦＬＴ３またはＲＥＴキナーゼが発現されたＡＭＬである。
本願に使用された「急性骨髄性白血病（ａｃｕｔｅ ｍｙｅｌｏｉｄ ｌｅｕｋｅｍｉａ：ＡＭＬ）」なる用語は、骨髄に由来した非正常的な血液細胞の急速な成長を特徴とする正常血液細胞を妨げる、骨髄性血液細胞ラインの癌である。ＡＭＬの主症状は、疲労感、息苦しい呼吸、あざや出血が生じやすく、感染が頻繁に生じるなどである。ＡＭＬの原因として推定される様々なものが確認されたが、確実なＡＭＬの原因は明かされていない状況である。本発明の化合物は、特に、突然変異ＦＬＴ３および突然変異ＲＥＴキナーゼ抑制能を有するものであって、ＦＬＴ３－ＩＴＤ発現ＭＶ４－１１細胞株、ＦＬＴ３－ＩＴＤおよびＲＥＴ発現ＭＯＬＭ－１３細胞株、ＦＬＴ３／Ｄ８３５ＹおよびＲＥＴ発現ＭＯＬＭ１４－ＦＬＴ３／Ｄ８３５Ｙ細胞株などで強力な抗増殖活性を確認することで、ＡＭＬ治療剤として使用可能であることを確認した。
これによって、本発明は、本発明による化合物またはその薬学的に許容される塩を活性成分として含む、ＦＬＴ３およびＲＥＴキナーゼ抑制のための薬学的組成物を提供する。一具体例において、前記薬学的組成物は、ＦＬＴ３－およびＲＥＴキナーゼ－関連疾患の予防または治療、より具体的には、ＡＭＬの予防または治療のためのものである。
また、本発明は、本発明による化合物またはその薬学的に許容される塩、または前記薬学組成物をこれを必要とする対象体に投与するステップを含む、ＦＬＴ３－およびＲＥＴキナーゼ－関連疾患の予防または治療方法を提供する。
また、本発明は、本発明による化合物またはその薬学的に許容される塩、または前記薬学組成物を薬剤学的に有効な量でＡＭＬが発明された個体または発病される恐れのある個体に投与するステップを含む、ＦＬＴ３およびＲＥＴキナーゼの抑制方法を提供する。
追加的に、本発明は、前記薬学組成物がＦＬＴ３－ＩＴＤ発現ＭＶ４－１１細胞株、ＦＬＴ３－ＩＴＤおよびＲＥＴ発現ＭＯＬＭ－１３細胞株、およびＦＬＴ３／Ｄ８３５ＹおよびＲＥＴ発現ＭＯＬＭ１４－ＦＬＴ３／Ｄ８３５Ｙ細胞株で強力な抗増殖活性を有するものである、ＦＬＴ３抑制方法を提供する。
また、本発明は、ＦＬＴ３抑制、またはＦＬＴ３－関連疾患の予防または治療のための、本発明による化合物またはその薬学的に許容される塩の用途を提供する。本発明はまた、ＡＭＬの予防または治療用医薬の調製のための、本発明による化合物またはその薬学的に許容される塩の用途を提供する。
一具体的な実施形態において、本発明のインジルビン誘導体化合物は、ＦＬＴ３およびＲＥＴキナーゼ抑制に対するＩＣ50値が１００ｎＭ以下であってもよい。より具体的に、化学式１で表される化合物は、ＦＬＴ３およびＲＥＴキナーゼ抑制に対するＩＣ50値は５０ｎＭ以下であってもよく、より一層具体的には、４０ｎＭ以下であってもよく、より一層具体的には、３５ｎＭ以下であってもよく、より一層具体的には、３０ｎＭ以下であり、より一層具体的には、２５ｎＭ以下であり、より一層具体的には、２０ｎＭ以下であり、より一層具体的には、１５ｎＭ以下であり、より一層具体的には、１０ｎＭ以下であってもよい。
以下、実施例を通じて本発明をより詳しく説明しようとする。これらの実施例は、ひたすら本発明をより具体的に説明するためのものであって、本発明の要旨によって本発明の範囲がこれらの実施例によって制限されないということは、当業界において通常の知識を有する者にとって自明である。
一般的な合成方法
本発明による化合物は、容易に入手可能な出発物質から当業者に公知になっている、以下に記載される特定合成プロトコルへの変形を利用して調製できる。
反応式１および２に示した手順によりインジルビン類似体６ａ－ｔ（エチルリンカー包含）、８ａ－ｔ（エタノンリンカー包含）および置換体１０ａ－ｅを合成した。
［反応式１］
ビサイクリック残基を有するインジルビン誘導体の調製のための一般合成経路
試薬および条件：
（ａ）様々なイサチン、メトキシドナトリウム、メタノール、常温、２時間、６３－６５％；
（ｂ）ヒドロキシルアミンヒドロクロライド、ＫＯＨ、超音波処理（ｓｏｎｉｃａｔｉｏｎ）、２時間、８９－９１％；
（ｃ）１，２－ジブロモエタン、ＴＥＡ、ＤＭＦ、ＲＴ、一晩、７６－８０％；
（ｄ）様々なｂｏｃ－アミン、ＤＭＦ、７０℃、一晩、８５－８７％；
（ｅ）１０ａ－ｅ、ＴＥＡ、ＤＭＦ、７０℃、１２時間、８０－８４％；
（ｆ）ＤＣＭ中２０％ＴＦＡ、０℃、２時間、１５－３０％。
反応式１において、塩基性条件下で化合物１であるインドキシルアセテートと様々なイサチン（ｉｓａｔｉｎ）を共役反応させて５’－置換されたインジルビン誘導体２ａ－ｄを調製し、次いで２ａ－ｄとヒドロキシルアミンを反応させてケトンからＮ－オキシム基に変更して、５’－置換された－３－インジルビンオキシム誘導体３ａ－ｄを合成した。化合物４ａ－ｄは、それぞれ１，２－ジブロモエタンと各Ｎ－オキシム化合物３ａ－ｄとの間の親核性置換反応から修得した。４ａ－ｄの末端臭化物を塩基性条件下でビサイクリック残基を含む様々なｂｏｃ－保護されたアミンで置換して化合物５ａ－ｔを調製した。その後、ジクロロメタン中２０％トリフルオロ酢酸を使用して５ａ－ｔの各ｂｏｃ基をそれぞれ脱保護してエチルリンカーを有する最終化合物である６ａ－ｔを調製した。３ａ－ｄおよび化合物１０ａ－ｅを使用してｂｏｃ－保護されたヘテロサイクルの置換のステップｄに使用されたものと類似した反応条件下で様々なインジルビンＮ－オキシムとビサイクリック基を含むｂｏｃ－保護されたアミンとの間にエタノンリンカーを含む化合物７ａ－ｔを調製した。エタノンリンカーを有する最終化合物８ａ－ｔは、ステップｆに記載された同一の条件下で相応するｂｏｃ－保護された化合物７ａ－ｔを通じて合成された。
様々なクロロアセトアミド試薬である化合物１０ａ－ｅは、反応式２のように塩基性条件下で２－クロロアセチルクロライドと５種の窒素含有ビサイクリック残基から調製された。
［反応式２］
１０ａ－ｅ調製のための一般合成経路
試薬および条件：（ａ）様々なｂｏｃ－アミン、ＴＥＡ、ＤＭＦ、０℃ ２時間、８８－９０％。
合成方法
すべての化学物質と溶媒は、精製されていない化学物質供給企業から入手して使用した。精製のために予めコーティングされたシリカゲルプレート（ＭＥＲＣＫシリカゲル６０；Ｆ２５４、０．０４０－０．０６３ｍｍ）を使用してカラムクロマトグラフィーを遂行した。ＮＭＲスペクトルは、４００ＭＨｚの１Ｈ周波数でＪＥＯＬ ＥＣＳ ４００ＮＭＲ分光計（日本東京所在）を使用して修得した。陽性子化学的移動は、内部標準について百万分率（ｐｐｍ）単位で測定された。化学的移動、多重度およびカップリング定数（Ｊ）が記録され、ＡＣＤ ＮＭＲプロセッサアカデミックエディションソフトウェアを使用して計算された。合成されたすべての化合物は、トリプル四重極質量分析計（ｔｒｉｐｌｅ ｑｕａｄｒｕｐｏｌｅ ｍａｓｓ ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｅｒ（Ｍｉｃｒｏｍａｓｓ Ｑｕａｔｔｒｏ Ｍｉｃｒｏ、Ｗａｔｅｒｓ））に連結されたＷａｔｅｒｓ ＡＣＱＵＩＴＹ超高性能液体クロマトグラフィー（ＵＰＬＣ）を使用して分析された。等溶媒条件で分離する間４０℃で保持されたＢＥＨ Ｃ１８ １．７μｍ、２．１ｍｍ×５０ｍｍコラム（Ｗａｔｅｒｓ）上でクロマトグラフィー分離を遂行した（移動相Ａ：移動相Ｂ＝２０：８０）。移動相Ａは、０．１％ギ酸（ｖ／ｖ）を有する水（ＬＣ－ＭＳ等級）で構成され、移動相Ｂは、０．１％ギ酸（ｖ／ｖ）を有するアセトニトリル（ＬＣ－ＭＳ等級）で構成された。流速は、０．２ｍｌ／分であった。
（Ｚ）－［２，３’－ビインドリニリデン］－２’，３－ジオン（２ａ）の合成
イサチン（１．３当量）をメタノール中インドキシルアセテート、化合物１（１当量）の溶液（０．０５Ｍ）に添加した。反応混合物を室温で５分間撹拌した。その次、メトキシドナトリウム粉末（２当量）を反応混合物に注いで２時間の間撹拌した。ＴＬＣ（クロロホルム：メタノール＝２０：１、化合物１ Ｒｆ＝０．９、生成物Ｒｆ＝０．７）は、インドキシルアセテートが完全に消耗して一つの新たな斑（ｓｐｏｔ）が感知されたことを見せている。以後、反応混合物を冷水で希釈して紫色生成物の沈殿を得た。固体を濾過して水／メタノール＝２／１溶液およびヘキサンで洗浄した。前記固体を４０℃で５時間の間減圧下で乾燥して純度に優れた化合物２ａを修得した。
（Ｚ）－５’－フルオロ－［２，３’－ビインドリニリデン］－２’，３－ジオン（２ｂ）の合成
化合物２ｂは、化合物２ａについて記載された手順により化合物１および５－フルオロイサチンから合成された。
（Ｚ）－５’－クロロ－［２，３’－ビインドリニリデン］－２’，３－ジオン（２ｃ）の合成
化合物２ｃは、化合物２ａについて記載された手順により化合物１および５－クロロイサチンから合成された。
（Ｚ）－５’－ブロモ－［２，３’－ビインドリニリデン］－２’，３－ジオン（２ｄ）の合成
化合物２ｄは化合物２ａについて記載された手順により化合物１および５－ブロモイサチンから合成された。
（２Ｚ，３Ｅ）－３－（ヒドロキシイミノ）－［２，３’－ビインドリニリデン］－２’－オン（３ａ）の合成
１２当量のＫＯＨ固体を反応物に注いで、反応容器を３０℃で３０分間超音波処理した。ＴＬＣでモニタリングした反応の完了後、ＴＬＣ（クロロホルム：メタノール＝２０：１、化合物２ａ Ｒｆ＝０．７、生成物Ｒｆ＝０．６）は、化合物２ａが完全に消耗して一つの新たな斑が感知されたことを示した。前記反応混合物を１Ｎ ＨＣｌ溶液でｐＨ１～３になるまで酸性化させながら赤色生成物を沈殿させた。前記固体を濾過してお湯およびヘキサンで洗浄した。前記固体を４０℃で４時間の間減圧下で乾燥して化合物３ａを修得した。
（２Ｚ，３Ｅ）－５’－フルオロ－３－（ヒドロキシイミノ）－［２，３’－ビインドリニリデン］－２’－オン（３ｂ）の合成
化合物３ｂは、化合物３ａについて記載された手順により化合物２ｂから合成された。
（２Ｚ，３Ｅ）－５’－クロロ－３－（ヒドロキシイミノ）－［２，３’－ビインドリニリデン］－２’－オン（３ｃ）の合成
化合物３ｃは、化合物３ａについて記載された手順により化合物２ｃから合成した。
（２Ｚ，３Ｅ）－５’－ブロモ－３－（ヒドロキシイミノ）－［２，３’－ビインドリニリデン］－２’－オン（３ｄ）の合成
化合物３ｄは、化合物３ａについて記載された手順により化合物２ｄから合成した。
（２Ｚ，３Ｅ）－３－（（２－ブロモエトキシ）イミノ）－［２，３’－ビインドリニリデン］－２’－オン（４ａ）の合成
アルゴン大気下でＤＭＦ中の化合物４の溶液にＴＥＡ（７当量）および１，２－ジブロモエタン（７当量）を添加した。反応混合物を室温で一晩撹拌した。ＴＬＣでモニタリングした反応の完了後、ＴＬＣ（クロロホルム：メタノール＝２０：１、化合物３ａ Ｒｆ＝０．６、生成物Ｒｆ＝０．８）は、化合物３ａが完全に消耗して一つの新たな斑が検出されたことを示した。反応混合物を冷水で希釈して生成物の沈殿を伴った。前記沈殿物を濾過して、水およびヘキサンを使用して洗浄した。前記固体を４０℃で４時間の間減圧下で乾燥して化合物４ａを修得した。
（２Ｚ，３Ｅ）－３－（（２－ブロモエトキシ）イミノ）－５’－フルオロ－［２，３’－ビインドリニリデン］－２’－オン（４ｂ）の合成
化合物４ｂは、化合物４ａについて記載された手順により化合物３ｂから合成された。
（２Ｚ，３Ｅ）－３－（（２－ブロモエトキシ）イミノ）－５’－クロロ－［２，３’－ビインドリニリデン］－２’－オン（４ｃ）の合成
化合物４ｃは、化合物４ａについて記載された手順により化合物３ｃから合成された。
（２Ｚ，３Ｅ）－５’－ブロモ－３－（（２－ブロモエトキシ）イミノ）－［２，３’－ビインドリニリデン］－２’－オン（４ｄ）の合成
化合物４ｄは、化合物４ａについて記載された手順により化合物３ｄから合成された。
ｔｅｒｔ－ブチル６－（２－（（（Ｅ）－（（Ｚ）－２’－オキソ－［２，３’－ビインドリニリデン］－３－イリデン）アミノ）オキシ）エチル）－２，６－ジアザスピロ［３．３］ヘプタン－２－カルボキシレート（５ａ）の合成
アルゴン大気下でＤＭＦ中の化合物４ａの溶液に４当量のｔｅｒｔ－ブチル２，６－ジアザスピロ［３．３］ヘプタン－２－カルボキシレートおよびＴＥＡ（１０当量）を添加した。反応混合物を７０℃で１２時間の間撹拌した。ＴＬＣによりモニタリングされた反応の完了後、ＴＬＣ（クロロホルム：メタノール＝２０：１、化合物４ａ Ｒｆ＝０．８、生成物Ｒｆ＝０．７５）は、化合物４ａが完全に消耗して一つの新たな斑が検出されたことを示した。冷たい蒸溜水を前記反応混合物に注いで生成物の沈殿を伴った。前記固体を濾過して水で洗浄し、６０℃の真空オーブンで５時間の間乾燥して化合物５ａを修得した。
（１Ｒ，５Ｓ，６ｓ）－ｔｅｒｔ－ブチル６－（（２－（（（Ｅ）－（（Ｚ）－２’－オキソ－［２，３’－ビインドリニリデン］－３－イリデン）アミノ）オキシ）エチル）アミノ）－３－アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン－３－カルボキシレート（５ｂ）の合成
化合物５ｂは、化合物５ａについて記載された手順により化合物４ａおよび（１Ｒ，５Ｓ，６ｓ）－ｔｅｒｔ－ブチル６－アミノ－３－アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン－３－カルボキシレートから合成された。
ｔｅｒｔ－ブチル（（１Ｒ，５Ｓ，６ｓ）－３－（２－（（（Ｅ）－（（Ｚ）－２’－オキソ－［２，３’－ビインドリニリデン］－３－イリデン）アミノ）オキシ）エチル）－３－アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン－６－イル）カルバメート（５ｃ）の合成
化合物５ｃは、化合物５ａについて記載された手順により化合物４ａおよびｔｅｒｔ－（（１Ｒ，５Ｓ，６ｓ）－３－アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン－６－イル）カルバメートから合成された。
（１Ｒ，４Ｒ）－ｔｅｒｔ－ブチル５－（２－（（（Ｅ）－（（Ｚ）－２’－オキソ－［２，３’－ビインドリニリデン］－３－イリデン）アミノ）オキシ）エチル）－２，５－ジアザビシクロ［２．２．１］ヘプタン－２－カルボキシレート（５ｄ）の合成
化合物５ｄは、化合物５ａについて記載された手順により化合物４ａおよびｔｅｒｔ－ブチル（１Ｒ，４Ｒ）－２，５－ジアザビシクロ［２．２．１］ヘプタン－２－カルボキシレートから合成された。
（１Ｓ，４Ｓ）－ｔｅｒｔ－ブチル５－（２－（（（Ｅ）－（（Ｚ）－２’－オキソ－［２，３’－ビインドリニリデン］－３－イリデン）アミノ）オキシ）エチル）－２，５－ジアザビシクロ［２．２．１］ヘプタン－２－カルボキシレート（５ｅ）の合成
化合物５ｅは、化合物５ａについて記載された手順により化合物４ａおよびｔｅｒｔ－ブチル（１Ｓ，４Ｓ）－２，５－ジアザビシクロ［２．２．１］ヘプタン－２－カルボキシレートから合成された。
ｔｅｒｔ－ブチル６－（２－（（（Ｅ）－（（Ｚ）－５’－フルオロ－２’－オキソ－［２，３’－ビインドリニリデン］－３－イリデン）アミノ）オキシ）エチル）－２，６－ジアザスピロ［３．３］ヘプタン－２－カルボキシレート（５ｆ）の合成
化合物５ｆは、化合物５ａについて記載された手順により化合物４ｂおよびｔｅｒｔ－ブチル２，６－ジアザスピロ［３．３］ヘプタン－２－カルボキシレートから合成された。
（１Ｒ，５Ｓ，６ｓ）－ｔｅｒｔ－ブチル６－（（２－（（（Ｅ）－（（Ｚ）－５’－フルオロ－２’－オキソ－［２，３’－ビインドリニリデン］－３－イリデン）アミノ）オキシ）エチル）アミノ）－３－アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン－３－カルボキシレート（５ｇ）の合成
化合物５ｇは、化合物５ａについて記載された手順により化合物４ｂおよび（１Ｒ，５Ｓ，６ｓ）－ｔｅｒｔ－ブチル６－アミノ－３－アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン－３－カルボキシレートから合成された。
ｔｅｒｔ－ブチル（（１Ｒ，５Ｓ，６ｓ）－３－（２－（（（Ｅ）－（（Ｚ）－５’－フルオロ－２’－オキソ－［２，３’－ビインドリニリデン］－３－イリデン）アミノ）オキシ）エチル）－３－アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン－６－イル）カルバメート（５ｈ）の合成
化合物５ｈは、化合物５ａについて記載された手順により化合物４ｂおよびｔｅｒｔ－ブチル（（１Ｒ，５Ｓ，６ｓ）－３－アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン－６－イル）カルバメートから合成された。
（１Ｒ，４Ｒ）－ｔｅｒｔ－ブチル５－（２－（（（Ｅ）－（（Ｚ）－５’－フルオロ－２’－オキソ－［２，３’－ビインドリニリデン］－３－イリデン）アミノ）オキシ）エチル）－２，５－ジアザビシクロ［２．２．１］ヘプタン－２－カルボキシレート（５ｉ）の合成
化合物５ｉは、化合物５ａについて記載された手順により化合物４ｂおよびｔｅｒｔ－ブチル（１Ｒ，４Ｒ）－２，５－ジアザビシクロ［２．２．１］ヘプタン－２－カルボキシレートから合成された。
（１Ｓ，４Ｓ）－ｔｅｒｔ－ブチル５－（２－（（（Ｅ）－（（Ｚ）－５’－フルオロ－２’－オキソ－［２，３’－ビインドリニリデン］－３－イリデン）アミノ）オキシ）エチル）－２，５－ジアザビシクロ［２．２．１］ヘプタン－２－カルボキシレート（５ｊ）の合成
化合物５ｊは、化合物５ａについて記載された手順により化合物４ｂおよびｔｅｒｔ－ブチル（１Ｓ，４Ｓ）－２，５－ジアザビシクロ［２．２．１］ヘプタン－２－カルボキシレートから合成された。
ｔｅｒｔ－ブチル６－（２－（（（Ｅ）－（（Ｚ）－５’－クロロ－２’－オキソ－［２，３’－ビインドリニリデン］－３－イリデン）アミノ）オキシ）エチル）－２，６－ジアザスピロ［３．３］ヘプタン－２－カルボキシレート（５ｋ）の合成
化合物５ｋは、化合物５ａについて記載された手順により化合物４ｃおよびｔｅｒｔ－ブチル２，６－ジアザスピロ［３．３］ヘプタン－２－カルボキシレートから合成された。
（１Ｒ，５Ｓ，６ｓ）－ｔｅｒｔ－ブチル６－（（２－（（（Ｅ）－（（Ｚ）－５’－クロロ－２’－オキソ－［２，３’－ビインドリニリデン］－３－イリデン）アミノ）オキシ）エチル）アミノ）－３－アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン－３－カルボキシレート（５ｌ）の合成
化合物５ｌは、化合物５ａについて記載された手順により化合物４ｃおよび（１Ｒ，５Ｓ，６ｓ）－ｔｅｒｔ－ブチル６－アミノ－３－アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン－３－カルボキシレートから合成された。
ｔｅｒｔ－ブチル（（１Ｒ，５Ｓ，６ｓ）－３－（２－（（（Ｅ）－（（Ｚ）－５’－クロロ－２’－オキソ－［２，３’－ビインドリニリデン］－３－イリデン）アミノ）オキシ）エチル）－３－アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン－６－イル）カルバメート（５ｍ）の合成
化合物５ｍは、化合物５ａについて記載された手順により化合物４ｃおよびｔｅｒｔ－ブチル（（１Ｒ，５Ｓ，６ｓ）－３－アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン－６－イル）カルバメートから合成された。
（１Ｒ，４Ｒ）－ｔｅｒｔ－ブチル５－（２－（（（Ｅ）－（（Ｚ）－５’－クロロ－２’－オキソ－［２，３’－ビインドリニリデン］－３－イリデン）アミノ）オキシ）エチル）－２，５－ジアザビシクロ［２．２．１］ヘプタン－２－カルボキシレート（５ｎ）の合成
化合物５ｎは、化合物５ａについて記載された手順により化合物４ｃおよびｔｅｒｔ－ブチル（１Ｒ，４Ｒ）－２，５－ジアザビシクロ［２．２．１］ヘプタン－２－カルボキシレートから合成された。
合成例１２：（１Ｓ，４Ｓ）－ｔｅｒｔ－ブチル５－（２－（（（Ｅ）－（（Ｚ）－５’－クロロ－２’－オキソ－［２，３’－ビインドリニリデン］－３－イリデン）アミノ）オキシ）エチル）－２，５－ジアザビシクロ［２．２．１］ヘプタン－２－カルボキシレート（５ｏ）の合成
化合物５ｏは、化合物５ａについて記載された手順により化合物４ｃおよびｔｅｒｔ－ブチル（１Ｓ，４Ｓ）－２，５－ジアザビシクロ［２．２．１］ヘプタン－２－カルボキシレートから合成された。
1Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ6）δ ｐｐｍ １．３４－１．４５（ｍ，１Ｈ），１．５９－１．７０（ｍ，１Ｈ），２．４０－２．４７（ｍ，１Ｈ），２．５９－２．７２（ｍ，１Ｈ），２．９０－３．０１（ｍ，２Ｈ），３．０１－３．１７（ｍ，２Ｈ），３．３８－３．４７（ｍ，２Ｈ），４．６３（ｔ，Ｊ＝５．８４Ｈｚ，２Ｈ），６．９０（ｄ，Ｊ＝８．２４Ｈｚ，１Ｈ），７．００－７．１２（ｍ，１Ｈ），７．１８（ｄｄ，Ｊ＝８．２４，２．２９Ｈｚ，１Ｈ），７．３６－７．５１（ｍ，２Ｈ），８．１５（ｄｔ，Ｊ＝７．５６，０．９２Ｈｚ，１Ｈ），８．７１（ｄ，Ｊ＝２．０６Ｈｚ，１Ｈ），１０．４６－１１．２７（ｍ，１Ｈ），１１．２９－１２．１４（ｍ，１Ｈ）．ＭＳ（ＥＳＩ）：［Ｍ＋Ｈ］+＝４３６．５．
ｔｅｒｔ－ブチル６－（２－（（（Ｅ）－（（Ｚ）－５’－ブロモ－２’－オキソ－［２，３’－ビインドリニリデン］－３－イリデン）アミノ）オキシ）エチル）－２，６－ジアザスピロ［３．３］ヘプタン－２－カルボキシレート（５ｐ）の合成
化合物５ｐは、化合物５ａについて記載された手順により化合物４ｄ及びｔｅｒｔ－ブチル２，６－ジアザスピロ［３．３］ヘプタン－２－カルボキシレートから合成された。
（１Ｒ，５Ｓ，６ｓ）－ｔｅｒｔ－ブチル６－（（２－（（（Ｅ）－（（Ｚ）－５’－ブロモ－２’－オキソ－［２，３’－ビインドリニリデン］－３－イリデン）アミノ）オキシ）エチル）アミノ）－３－アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン－３－カルボキシレート（５ｑ）の合成
化合物５ｑは、化合物５ａについて記載された手順により化合物４ｄ及び（１Ｒ，５Ｓ，６ｓ）－ｔｅｒｔ－ブチル６－アミノ－３－アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン－３－カルボキシレートから合成された。
ｔｅｒｔ－ブチル（（１Ｒ，５Ｓ，６ｓ）－３－（２－（（（Ｅ）－（（Ｚ）－５’－ブロモ－２’－オキソ－［２，３’－ビインドリニリデン］－３－イリデン）アミノ）オキシ）エチル）－３－アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン－６－イル）カルバメート（５ｒ）の合成
化合物５ｒは、化合物５ａについて記載された手順により化合物４ｄ及びｔｅｒｔ－ブチル（（１Ｒ，５Ｓ，６ｓ）－３－アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン－６－イル）カルバメートから合成された。
（１Ｒ，４Ｒ）－ｔｅｒｔ－ブチル５－（２－（（（Ｅ）－（（Ｚ）－５’－ブロモ－２’－オキソ－［２，３’－ビインドリニリデン］－３－イリデン）アミノ）オキシ）エチル）－２，５－ジアザビシクロ［２．２．１］ヘプタン－２－カルボキシレート（５ｓ）の合成
化合物５ｓは、化合物５ａについて記載された手順により化合物４ｄ及びｔｅｒｔ－ブチル（１Ｒ，４Ｒ）－２，５－ジアザビシクロ［２．２．１］ヘプタン－２－カルボキシレートから合成された。
合成例１４：（１Ｓ、４Ｓ）－ｔｅｒｔ－ブチル５－（２－（（（Ｅ）－（（Ｚ）－５’－ブロモ－２’－オキソ－［２，３’－ビインドリニリデン］－３－イリデン）アミノ）オキシ）エチル）－２，５－ジアザビシクロ［２．２．１］ヘプタン－２－カルボキシレート（５ｔ）の合成
化合物５ｔは、化合物５ａについて記載された手順により化合物４ｄおよびｔｅｒｔ－ブチル（１Ｓ，４Ｓ）－２，５－ジアザビシクロ［２．２．１］ヘプタン－２－カルボキシレートから合成された。
1Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ6）δ ｐｐｍ １．３５－１．４３（ｍ，１Ｈ），１．５９－１．７１（ｍ，１Ｈ），２．４０－２．４８（ｍ，１Ｈ），２．５８－２．６９（ｍ，１Ｈ），２．８８－３．０１（ｍ，２Ｈ），３．０２－３．１６（ｍ，２Ｈ），３．３８－３．４７（ｍ，２Ｈ），４．６３（ｔｄ，Ｊ＝６．０１，０．８０Ｈｚ，２Ｈ），６．８６（ｄ，Ｊ＝８．２４Ｈｚ，１Ｈ），６．９８－７．１４（ｍ，１Ｈ），７．２７－７．３５（ｍ，１Ｈ），７．４０－７．５２（ｍ，２Ｈ），８．１５（ｄｔ，Ｊ＝７．７９，０．９２Ｈｚ，１Ｈ），８．８６（ｄ，Ｊ＝２．０６Ｈｚ，１Ｈ），１０．５４－１１．２６（ｍ，１Ｈ），１１．３６－１２．１１（ｍ，１Ｈ）．ＭＳ（ＥＳＩ）：［Ｍ＋Ｈ］+＝４８０．４．
実施例１：（２Ｚ，３Ｅ）－３－（（２－（２，６－ジアザスピロ［３．３］ヘプタン－２－イル）エトキシ）イミノ）－［２，３’－ビインドリニリデン］－２’－オン（６ａ）の合成
ＤＣＭ中の２０％ＴＦＡをＤＣＭ中の化合物５ａの溶液に０℃で２時間の間ゆっくり添加した。ＴＬＣでモニタリングした反応の完了後、ＴＬＣ（アンモニア飽和クロロホルム：メタノール＝１０：１、化合物５ａ Ｒｆ＝０．９、生成物Ｒｆ＝０．４）は、化合物５ａが完全に消耗して一つの新たな斑が感知されたことを示した。溶液を蒸発させた後、残留物を最小体積のメタノールを使用して懸濁させた。中和のために溶液を飽和水性ＮａＨＣＯ3溶液にゆっくり添加した。固体を濾過して水で洗浄し、６０℃の真空オーブンで５時間の間乾燥して化合物６ａを修得した。混合物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製した（溶離液：アンモニア飽和クロロホルム：メタノール＝１００：１）。
1Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ6）δ ｐｐｍ,２．８７（ｔ，Ｊ＝５．６１Ｈｚ，２Ｈ）,３．２７（ｓ，４Ｈ）３．４３（ｓ，４Ｈ）,４．５４（ｔ，Ｊ＝５．６１Ｈｚ，２Ｈ）,６．８９－６．９２（ｍ，１Ｈ）,６．９８（ｔｄ，Ｊ＝７．６７，１．１５Ｈｚ，１Ｈ）,７．０２－７．０７（ｍ，１Ｈ）,７．１３－７．１８（ｍ，１Ｈ）,７．４０－ ７．４７（ｍ，２Ｈ）,８．１４（ｄｔ，Ｊ＝７．６７，０．９７Ｈｚ，１Ｈ）,８．６１（ｄｄ，Ｊ＝７．９０，０．５７Ｈｚ，１Ｈ）,１０．７９（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）．ＭＳ（ＥＳＩ）：［Ｍ＋Ｈ］+＝４０１．７．
実施例２：（２Ｚ，３Ｅ）－３－（（２－（（１Ｒ，５Ｓ，６ｓ）－３－アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン－６－イルアミノ）エトキシ）イミノ）－［２，３’－ビインドリニリデン］－２’－オン（６ｂ）の合成
化合物６ｂは、化合物６ａについて記載された手順により化合物５ｂから合成された。
1Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ6）δ ｐｐｍ １．３０（ｓ，２Ｈ）,２．０３（ｔ，Ｊ＝１．９５Ｈｚ，１Ｈ）,２．５８（ｓ，１Ｈ）,２．６０（ｓ，１Ｈ）,２．７９（ｓ，１Ｈ）,２．８２（ｓ，１Ｈ）,３．０８（ｔ，Ｊ＝５．８４Ｈｚ，２Ｈ）,４．６２（ｔ，Ｊ＝５．７２Ｈｚ，２Ｈ）,６．８９－６．９２（ｍ，１Ｈ）,６．９７－７．０６（ｍ，２Ｈ）,７．１２－７．１８（ｍ，１Ｈ）,７．３９－７．４６（ｍ，２Ｈ）,８．１６（ｄｔ，Ｊ＝７．６７，０．９７Ｈｚ，１Ｈ）,８．６２（ｄ，Ｊ＝８．０１Ｈｚ，１Ｈ）,１０．７４－１０．８０（ｍ，１Ｈ）,１１．６５－１１．７４（ｍ，１Ｈ）．ＭＳ（ＥＳＩ）：［Ｍ＋Ｈ］+＝４０１．１．
実施例３：（２Ｚ，３Ｅ）－３－（（２－（（１Ｒ，５Ｓ，６ｓ）－６－アミノ－３－アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン－３－イル）エトキシ）イミノ）－［２，３’－ビインドリニリデン］－２’－オン（６ｃ）の合成
化合物６ｃは、化合物６ａについて記載された手順により化合物５ｃから合成された。
1Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ6）δ ｐｐｍ １．１５－１．２８（ｍ，２Ｈ），１．４９－１．７９（ｍ，２Ｈ），２．３６（ｔ，Ｊ＝１．９５Ｈｚ，１Ｈ），２．４０（ｄｔ，Ｊ＝８．４７，１．４９Ｈｚ，２Ｈ），２．９０（ｔ，Ｊ＝５．８０Ｈｚ，２Ｈ），３．０４（ｄ，Ｊ＝８．４７Ｈｚ，２Ｈ），４．６１（ｔ，Ｊ＝５．７２Ｈｚ，２Ｈ），６．８６－６．９３（ｍ，１Ｈ），６．９８（ｔｄ，Ｊ＝７．６７，１．１５Ｈｚ，１Ｈ），７．０１－７．０８（ｍ，１Ｈ），７．１５（ｔｄ，Ｊ＝７．６０，１．１０Ｈｚ，１Ｈ），７．３７－７．４９（ｍ，２Ｈ），８．１５（ｄｔ，Ｊ＝７．６７，０．９７Ｈｚ，１Ｈ），８．６０（ｄ，Ｊ＝７．４０Ｈｚ，１Ｈ），１０．６３－１０．９１（ｍ，１Ｈ），１１．３１－１２．０３（ｍ，１Ｈ）．ＭＳ（ＥＳＩ）：［Ｍ＋Ｈ］＋＝４０２．５．
実施例４：（２Ｚ，３Ｅ）－３－（（２－（（１Ｒ，４Ｒ）－２，５－ジアザビシクロ［２．２．１］ヘプタン－２－イル）エトキシ）イミノ）－［２，３’－ビインドリニリデン］－２’－オン（６ｄ）の合成
化合物６ｄは、化合物６ａについて記載された手順により化合物５ｄから合成された。
1Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ6）δ ｐｐｍ １．３５－１．４１（ｍ，１Ｈ）,１．５８－１．６３（ｍ，１Ｈ）,２．４０（ｄ，Ｊ＝８．７０Ｈｚ，１Ｈ）,２．６０（ｄｄ，Ｊ＝９．７３，１．０３Ｈｚ，１Ｈ）,２．９１－２．９８（ｍ，２Ｈ）,２．９９－３．１２（ｍ，２Ｈ）,３．４０（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）,４．５８－４．６５（ｍ，２Ｈ）,６．９０（ｄ，Ｊ＝７．７９Ｈｚ，１Ｈ）,６．９６－７．０６（ｍ，２Ｈ）,７．１３－７．１８（ｍ，１Ｈ）,７．３９－７．４６（ｍ，２Ｈ）,８．１６（ｄｄ，Ｊ＝７．６７，０．５７Ｈｚ，１Ｈ）,８．６３（ｄ，Ｊ＝７．７９Ｈｚ，１Ｈ）,１０．７４－１０．８０（ｍ，１Ｈ）,１１．６６－１１．７３（ｍ，１Ｈ）．ＭＳ（ＥＳＩ）：［Ｍ＋Ｈ］+＝４０１．５．
実施例５：（２Ｚ，３Ｅ）－３－（（２－（（１Ｓ，４Ｓ）－２，５－ジアザビシクロ［２．２．１］ヘプタン－２－イル）エトキシ）イミノ）－［２，３’－ビインドリニリデン］－２’－オン（６ｅ）の合成
化合物６ｅは、化合物６ａについて記載された手順により化合物５ｅから合成された。
1Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ6）δ ｐｐｍ １．３７－１．４７（ｍ，１Ｈ），１．６３－１．７１（ｍ，１Ｈ），２．４２－２．４８（ｍ，１Ｈ），２．６７（ｄｄ，Ｊ＝１０．０８，２．２９Ｈｚ，１Ｈ），２．９４（ｄｄ，Ｊ＝９．２７，２．４０Ｈｚ，１Ｈ），２．９７－３．１５（ｍ，３Ｈ），３．４４－３．４８（ｍ，２Ｈ），４．５３－４．６８（ｍ，２Ｈ），６．８６－６．９４（ｍ，１Ｈ），６．９４－７．０８（ｍ，２Ｈ），７．１５（ｔｄ，Ｊ＝７．６１，１．２６Ｈｚ，１Ｈ），７．３３－７．５０（ｍ，２Ｈ），８．１０－８．２０（ｍ，１Ｈ），８．６３（ｄ，Ｊ＝７．３０Ｈｚ，１Ｈ），１０．６６－１０．９０（ｍ，１Ｈ），１１．６９（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）．ＭＳ（ＥＳＩ）：［Ｍ＋Ｈ］＋＝４０２．５．
実施例６：（２Ｚ，３Ｅ）－３－（（２－（２，６－ジアザスピロ［３．３］ヘプタン－２－イル）エトキシ）イミノ）－５’－フルオロ－［２，３’－ビインドリニリデン］－２’－オン（６ｆ）の合成
化合物６ｆは、化合物６ａについて記載された手順により化合物５ｆから合成された。
1Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ6） δ ｐｐｍ ２．８９（ｔ，Ｊ＝５．５０Ｈｚ，２Ｈ）,３．２７（ｓ，２Ｈ）,３．２９（ｓ，４Ｈ）,３．４３（ｓ，２Ｈ）,４．５４（ｔ，Ｊ＝５．６１Ｈｚ，２Ｈ）,６．８４－６．９０（ｍ，１Ｈ）,６．９５－７．０２（ｍ，１Ｈ）,７．０７（ｄｄｄ，Ｊ＝７．７３，５．２１，３．３２Ｈｚ，１Ｈ）,７．４２－７．５０（ｍ，２Ｈ）,８．１５（ｄｔ，Ｊ＝７．５６，０．９２Ｈｚ，１Ｈ）,８．４５（ｄｄ，Ｊ＝１１．３３，２．６３Ｈｚ，１Ｈ）,１０．７４－１０．８６（ｍ，１Ｈ）．ＭＳ（ＥＳＩ）：［Ｍ＋Ｈ］＋＝４２０．２．
実施例７：（２Ｚ，３Ｅ）－３－（（２－（（１Ｒ，５Ｓ，６ｓ）－３－アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン－６－イルアミノ）エトキシ）イミノ）－５’－フルオロ－［２，３’－ビインドリニリデン］－２’－オン（６ｇ）の合成
化合物６ｇは、化合物６ａについて記載された手順により化合物５ｇから合成された。
1Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ6） δ ｐｐｍ １．２８－１．３１（ｍ，２Ｈ）,２．０２（ｔ，Ｊ＝１．９５Ｈｚ，１Ｈ）,２．５６－２．６１（ｍ，２Ｈ）,２．８０（ｄ，Ｊ＝１０．９９Ｈｚ，２Ｈ）,３．１０（ｔ，Ｊ＝５．８４Ｈｚ，２Ｈ）,４．６３（ｔ，Ｊ＝５．８４Ｈｚ，２Ｈ）,６．８７（ｄｄ，Ｊ＝８．４７，５．０４Ｈｚ，１Ｈ）,６．９８（ｔｄ，Ｊ＝８．８２，２．７５Ｈｚ，１Ｈ）,７．０６（ｄｄｄ，Ｊ＝７．９０，５．１５，３．２１Ｈｚ，１Ｈ）,７．４２－７．４８（ｍ，２Ｈ）,８．１６（ｄ，Ｊ＝７．５６Ｈｚ，１Ｈ）,８．４５（ｄｄ，Ｊ＝１１．３３，２．６３Ｈｚ，１Ｈ）,１０．７８（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）．ＭＳ（ＥＳＩ）：［Ｍ＋Ｈ］+＝４２０．３．
実施例８：（２Ｚ，３Ｅ）－３－（（２－（（１Ｒ，５Ｓ，６ｓ）－６－アミノ－３－アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン－３－イル）エトキシ）イミノ）－５’－フルオロ－［２，３’－ビインドリニリデン］－２’－オン（６ｈ）の合成
化合物６ｈは、化合物６ａについて記載された手順により化合物５ｈから合成された。
1Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ6）δ ｐｐｍ １．１２－１．２４（ｍ，２Ｈ），１．４２－２．０２（ｍ，２Ｈ），２．３５（ｔ，Ｊ＝１．９５Ｈｚ，１Ｈ），２．４１（ｄｔ，Ｊ＝８．４２，１．５２Ｈｚ，２Ｈ），２．９２（ｔ，Ｊ＝６．００Ｈｚ，２Ｈ），３．０４（ｄ，Ｊ＝８．５０Ｈｚ，２Ｈ），４．６１（ｔ，Ｊ＝６．００Ｈｚ，２Ｈ），６．８２－６．９１（ｍ，１Ｈ），６．９３－７．０１（ｍ，１Ｈ），７．０２－７．１２（ｍ，１Ｈ），７．３８－７．５２（ｍ，２Ｈ），８．１５（ｄｔ，Ｊ＝７．７９，０．９２Ｈｚ，１Ｈ），８．４３（ｄｄ，Ｊ＝１１．２２，２．５２Ｈｚ，１Ｈ），１０．６１－１０．９０（ｍ，１Ｈ），１１．２７－１２．２３（ｍ，１Ｈ）．ＭＳ（ＥＳＩ）：［Ｍ＋Ｈ］＋＝４２０．４．
実施例９：（２Ｚ，３Ｅ）－３－（（２－（（１Ｒ，４Ｒ）－２，５－ジアザビシクロ［２．２．１］ヘプタン－２－イル）エトキシ）イミノ）－５’－フルオロ－［２，３’－ビインドリニリデン］－２’－オン（６ｉ）の合成
化合物６ｉは、化合物６ａについて記載された手順により化合物５ｉから合成された。
1Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ6）δ ｐｐｍ １．３８（ｄ，Ｊ＝８．０１Ｈｚ，１Ｈ）,１．６０（ｄ，Ｊ＝８．７０Ｈｚ，１Ｈ）,２．４０（ｄ，Ｊ＝９．８５Ｈｚ，１Ｈ）,２．６０（ｄｄ，Ｊ＝９．７３，２．１８Ｈｚ，１Ｈ）,２．９０－２．９６（ｍ，２Ｈ）,２．９９－３．１５（ｍ，３Ｈ）,３．３９（ｓ，１Ｈ），４．６２（ｔ，Ｊ＝５．８４Ｈｚ，２Ｈ），６．８４－６．８９（ｍ，１Ｈ），６．９５－７．０１（ｍ，１Ｈ），７．０３－７．０９（ｍ，１Ｈ），７．４２－７．４８（ｍ，２Ｈ），８．１６（ｄｔ，Ｊ＝７．７９，０．９２Ｈｚ，１Ｈ），８．４７（ｄｄ，Ｊ＝１１．３３，２．６３Ｈｚ，１Ｈ），１０．７４－１０．８３（ｍ，１Ｈ），１１．７５（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）．ＭＳ（ＥＳＩ）：［Ｍ＋Ｈ］+＝４２０．２．
実施例１０：（２Ｚ，３Ｅ）－３－（（２－（（１Ｓ，４Ｓ）－２，５－ジアザビシクロ［２．２．１］ヘプタン－２－イル）エトキシ）イミノ）－５’－フルオロ－［２，３’－ビインドリニリデン］－２’－オン（６ｊ）の合成
化合物６ｊは、化合物６ａについて記載された手順により化合物５ｊから合成された。
1Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ6）δ ｐｐｍ １．３７－１．４５（ｍ，１Ｈ），１．６０－１．６８（ｍ，１Ｈ），２．３９－２．４７（ｍ，１Ｈ），２．６４（ｄｄ，Ｊ＝９．８５，２．０６Ｈｚ，１Ｈ），２．９３（ｄｄ，Ｊ＝９．２７，２．４０Ｈｚ，１Ｈ），２．９５－３．００（ｍ，１Ｈ），３．００－３．１４（ｍ，２Ｈ），３．３７－３．４４（ｍ，２Ｈ），４．６２（ｔ，Ｊ＝６．４０Ｈｚ，２Ｈ），６．８０－６．９２（ｍ，１Ｈ），６．９２－７．０２（ｍ，１Ｈ），７．０２－７．１１（ｍ，１Ｈ），７．３９－７．５１（ｍ，２Ｈ），８．１１－８．２３（ｍ，１Ｈ），８．４６（ｄｄ，Ｊ＝１１．２０，２．８０Ｈｚ，１Ｈ），１０．６９－１０．９８（ｍ，１Ｈ），１１．６５－１１．９４（ｍ，１Ｈ）．ＭＳ（ＥＳＩ）：［Ｍ＋Ｈ］+＝４２０．５．
（２Ｚ，３Ｅ）－３－（（２－（２，６－ジアザスピロ［３．３］ヘプタン－２－イル）エトキシ）イミノ）－５’－クロロ－［２，３’－ビインドリニリデン］－２’－オン（６ｋ）の合成
化合物６ｋは、化合物６ａについて記載された手順により化合物５ｋから合成された。
（２Ｚ，３Ｅ）－３－（（２－（（１Ｒ，５Ｓ，６ｓ）－３－アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン－６－イルアミノ）エトキシ）イミノ）－５’－クロロ－［２，３’－ビインドリニリデン］－２’－オン（６ｌ）の合成
化合物６ｌは、化合物６ａについて記載された手順により化合物５ｌから合成された。
（２Ｚ，３Ｅ）－３－（（２－（（１Ｒ，５Ｓ，６ｓ）－６－アミノ－３－アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン－３－イル）エトキシ）イミノ）－５’－クロロ－［２，３’－ビインドリニリデン］－２’－オン（６ｍ）の合成
化合物６ｍは、化合物６ａについて記載された手順により化合物５ｍから合成された。
実施例１１：（２Ｚ，３Ｅ）－３－（（２－（（１Ｒ，４Ｒ）－２，５－ジアザビシクロ［２．２．１］ヘプタン－２－イル）エトキシ）イミノ）－５’－クロロ－［２，３’－ビインドリニリデン］－２’－オン（６ｎ）の合成
化合物６ｎは、化合物６ａについて記載された手順により化合物５ｎから合成された。
1Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ6）δ ｐｐｍ １．３１－１．４６（ｍ，１Ｈ），１．５７－１．７１（ｍ，１Ｈ），２．４３（ｄ，Ｊ＝９．８０Ｈｚ，１Ｈ），２．６３（ｄｄ，Ｊ＝９．８５，２．２９Ｈｚ，１Ｈ），２．８６－３．００（ｍ，２Ｈ），３．０１－３．１７（ｍ，２Ｈ），３．３６－３．４５（ｍ，２Ｈ），４．６３（ｔ，Ｊ＝６．２０Ｈｚ，２Ｈ），６．９０（ｄ，Ｊ＝８．２４Ｈｚ，１Ｈ），６．９９－７．１２（ｍ，１Ｈ），７．１８（ｄｄ，Ｊ＝８．２４，２．２９Ｈｚ，１Ｈ），７．３５－７．５１（ｍ，２Ｈ），８．１５（ｄｔ，Ｊ＝７．６１，１．００Ｈｚ，１Ｈ），８．７１（ｄ，Ｊ＝２．０６Ｈｚ，１Ｈ），１０．７６－１１．０５（ｍ，１Ｈ），１１．４３－１２．１６（ｍ，１Ｈ）．ＭＳ（ＥＳＩ）：［Ｍ＋Ｈ］+＝４３６．４．
（２Ｚ，３Ｅ）－３－（（２－（（１Ｓ，４Ｓ）－２，５－ジアザビシクロ［２．２．１］ヘプタン－２－イル）エトキシ）イミノ）－５’－クロロ－［２，３’－ビインドリニリデン］－２’－オン（６ｏ）の合成
化合物６ｏは、化合物６ａについて記載された手順により化合物５ｏから合成された。
（２Ｚ，３Ｅ）－３－（（２－（２，６－ジアザスピロ［３．３］ヘプタン－２－イル）エトキシ）イミノ）－５’－ブロモ－［２，３’－ビインドリニリデン］－２’－オン（６ｐ）の合成
化合物６ｐは、化合物６ａについて記載された手順により化合物５ｐから合成された。
（２Ｚ，３Ｅ）－３－（（２－（（１Ｒ，５Ｓ，６ｓ）－３－アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン－６－イルアミノ）エトキシ）イミノ）－５’－ブロモ－［２，３’－ビインドリニリデン］－２’－オン（６ｑ）の合成
化合物６ｑは、化合物６ａについて記載された手順により化合物５ｑから合成された。
（２Ｚ，３Ｅ）－３－（（２－（（１Ｒ，５Ｓ，６ｓ）－６－アミノ－３－アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン－３－イル）エトキシ）イミノ）－５’－ブロモ－［２，３’－ビインドリニリデン］－２’－オン（６ｒ）の合成
化合物６ｒは、化合物６ａについて記載された手順により化合物５ｒから合成された。
実施例１３：（２Ｚ，３Ｅ）－３－（（２－（（１Ｒ，４Ｒ）－２，５－ジアザビシクロ［２．２．１］ヘプタン－２－イル）エトキシ）イミノ）－５’－ブロモ－［２，３’－ビインドリニリデン］－２’－オン（６ｓ）の合成
化合物６ｓは、化合物６ａについて記載された手順により化合物５ｓから合成された。
1Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ6）δ ｐｐｍ １．３３－１．４３（ｍ，１Ｈ），１．５５－１．６６（ｍ，１Ｈ），２．４１（ｄｄ，Ｊ＝９．０４，１．０３Ｈｚ，１Ｈ），２．６０（ｄｄ，Ｊ＝９．８５，２．２９Ｈｚ，１Ｈ），２．９０－３．００（ｍ，２Ｈ），３．０２－３．１７（ｍ，２Ｈ），３．３６－３．４３（ｍ，２Ｈ），４．６３（ｔｄ，Ｊ＝６．０１，０．８０Ｈｚ，２Ｈ），６．８６（ｄ，Ｊ＝８．２４Ｈｚ，１Ｈ），７．０２－７．１１（ｍ，１Ｈ），７．３０（ｄｄ，Ｊ＝８．２０，２．１０Ｈｚ，１Ｈ），７．４１－７．５０（ｍ，２Ｈ），８．１５（ｄｔ，Ｊ＝７．６１，１．００Ｈｚ，１Ｈ），８．８６（ｄ，Ｊ＝２．０６Ｈｚ，１Ｈ），１０．６０－１１．２７（ｍ，１Ｈ），１１．３４－１２．０９（ｍ，１Ｈ）．ＭＳ（ＥＳＩ）：［Ｍ＋Ｈ］+＝４８２．３．
（２Ｚ，３Ｅ）－３－（（２－（（１Ｓ，４Ｓ）－２，５－ジアザビシクロ［２．２．１］ヘプタン－２－イル）エトキシ）イミノ）－５’－ブロモ－［２，３’－ビインドリニリデン］－２’－オン（６ｔ）の合成
化合物６ｔは、化合物６ａについて記載された手順により化合物５ｔから合成された。
ｔｅｒｔ－ブチル６－（２－（（（Ｅ）－（（Ｚ）－２’－オキソ－［２，３’－ビインドリニリデン］－３－イリデン）アミノ）オキシ）アセチル）－２，６－ジアザスピロ［３．３］ヘプタン－２－カルボキシレート（７ａ）の合成
アルゴン大気下で４当量の１０ａおよびＴＥＡ（１０当量）をＤＭＦ中の化合物３ａの溶液に添加した。反応混合物を７０℃で１２時間の間撹拌した。ＴＬＣでモニタリングした反応の完了後、ＴＬＣ（クロロホルム：メタノール＝２０：１、化合物３ａ Ｒｆ＝０．８、生成物Ｒｆ＝０．７５）は、化合物３ａが完全に消耗して一つの新たな斑が感知されたことを示した。冷たい蒸溜水を前記反応混合物に注いで生成物の沈殿を伴った。前記固体を濾過して水で洗浄し、６０℃の真空オーブンで５時間の間乾燥して化合物７ａを修得した。
（１Ｒ，５Ｓ，６ｓ）－ｔｅｒｔ－ブチル６－（２－（（（Ｅ）－（（Ｚ）－２’－オキソ－［２，３’－ビインドリニリデン］－３－イリデン）アミノ）オキシ）アセトアミド）－３－アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン－３－カルボキシレート（７ｂ）の合成
化合物７ｂは、化合物７ａについて記載された手順により化合物３ａおよび１０ｂから合成された。
ｔｅｒｔ－ブチル（（１Ｒ，５Ｓ，６ｓ）－３－（２－（（（Ｅ）－（（Ｚ）－２’－オキソ－［２，３’－ビインドリニリデン］－３－イリデン）アミノ）オキシ）アセチル）－３－アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン－６－イル）カルバメート（７ｃ）の合成
化合物７ｃは、化合物７ａについて記載された手順により化合物３ａおよび１０ｃから合成された。
（１Ｒ，４Ｒ）－ｔｅｒｔ－ブチル５－（２－（（（Ｅ）－（（Ｚ）－２’－オキソ－［２，３’－ビインドリニリデン］－３－イリデン）アミノ）オキシ）アセチル）－２，５－ジアザビシクロ［２．２．１］ヘプタン－２－カルボキシレート（７ｄ）の合成
化合物７ｄは、化合物７ａについて記載された手順により化合物３ａおよび１０ｄから合成された。
（１Ｓ，４Ｓ）－ｔｅｒｔ－ブチル５－（２－（（（Ｅ）－（（Ｚ）－２’－オキソ－［２，３’－ビインドリニリデン］－３－イリデン）アミノ）オキシ）アセチル）－２，５－ジアザビシクロ［２．２．１］ヘプタン－２－カルボキシレート（７ｅ）の合成
化合物７ｅは、７ａについて記載された手順により化合物３ａおよび１０ｅから合成された。
ｔｅｒｔ－ブチル６－（２－（（（Ｅ）－（（Ｚ）－５’－フルオロ－２’－オキソ－［２，３’－ビインドリニリデン］－３－イリデン）アミノ）オキシ）アセチル）－２，６－ジアザスピロ［３．３］ヘプタン－２－カルボキシレート（７ｆ）の合成
化合物７ｆは、化合物７ａについて記載された手順により化合物３ｂおよび１０ａから合成された。
（１Ｒ，５Ｓ，６ｓ）－ｔｅｒｔ－ブチル６－（２－（（（Ｅ）－（（Ｚ）－５’－フルオロ－２’－オキソ－［２，３’－ビインドリニリデン］－３－イリデン）アミノ）オキシ）アセトアミド）－３－アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン－３－カルボキシレート（７ｇ）の合成
化合物７ｇは、化合物７ａについて記載された手順により化合物３ｂおよび１０ｂから合成された。
ｔｅｒｔ－ブチル（（１Ｒ，５Ｓ，６ｓ）－３－（２－（（（Ｅ）－（（Ｚ）－５’－フルオロ－２’－オキソ－［２，３’－ビインドリニリデン］－３－イリデン）アミノ）オキシ）アセチル）－３－アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン－６－イル）カルバメート（７ｈ）の合成
化合物７ｈは、化合物７ａについて記載された手順により化合物３ｂおよび１０ｃから合成された。
（１Ｒ，４Ｒ）－ｔｅｒｔ－ブチル５－（２－（（（Ｅ）－（（Ｚ）－５’－フルオロ－２’－オキソ－［２，３’－ビインドリニリデン］－３－イリデン）アミノ）オキシ）アセチル）－２，５－ジアザビシクロ［２．２．１］ヘプタン－２－カルボキシレート（７ｉ）の合成
化合物７ｉは、化合物７ａについて記載された手順により化合物３ｂおよび１０ｄから合成された。
（１Ｓ，４Ｓ）－ｔｅｒｔ－ブチル５－（２－（（（Ｅ）－（（Ｚ）－５’－フルオロ－２’－オキソ－［２，３’－ビインドリニリデン］－３－イリデン）アミノ）オキシ）アセチル）－２，５－ジアザビシクロ［２．２．１］ヘプタン－２－カルボキシレート（７ｊ）の合成
化合物７ｊは、化合物７ａについて記載された手順により化合物３ｂおよび１０ｅから合成された。
ｔｅｒｔ－ブチル６－（２－（（（Ｅ）－（（Ｚ）－５’－クロロ－２’－オキソ－［２，３’－ビインドリニリデン］－３－イリデン）アミノ）オキシ）アセチル）－２，６－ジアザスピロ［３．３］ヘプタン－２－カルボキシレート（７ｋ）の合成
化合物７ｋは、化合物７ａについて記載された手順により化合物３ｃおよび１０ａから合成された。
（１Ｒ，５Ｓ，６ｓ）－ｔｅｒｔ－ブチル６－（２－（（（Ｅ）－（（Ｚ）－５’－クロロ－２’－オキソ－［２，３’－ビインドリニリデン］－３－イリデン）アミノ）オキシ）アセトアミド）－３－アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン－３－カルボキシレート（７ｌ）の合成
化合物７ｌは、化合物７ａについて記載された手順により化合物３ｃおよび１０ｂから合成された。
ｔｅｒｔ－ブチル（（１Ｒ，５Ｓ，６ｓ）－３－（２－（（（Ｅ）－（（Ｚ）－５’－クロロ－２’－オキソ－［２，３’－ビインドリニリデン］－３－イリデン）アミノ）オキシ）アセチル）－３－アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン－６－イル）カルバメート（７ｍ）の合成
化合物７ｍは、化合物７ａについて記載された手順により化合物３ｃおよび１０ｃから合成された。
（１Ｒ，４Ｒ）－ｔｅｒｔ－ブチル５－（２－（（（Ｅ）－（（Ｚ）－５’－クロロ－２’－オキソ－［２，３’－ビインドリニリデン］－３－イリデン）アミノ）オキシ）アセチル）－２，５－ジアザビシクロ［２．２．１］ヘプタン－２－カルボキシレート（７ｎ）の合成
化合物７ｎは、化合物７ａについて記載された手順により化合物３ｃおよび１０ｄから合成された。
（１Ｓ，４Ｓ）－ｔｅｒｔ－ブチル５－（２－（（（Ｅ）－（（Ｚ）－５’－クロロ－２’－オキソ－［２，３’－ビインドリニリデン］－３－イリデン）アミノ）オキシ）アセチル）－２，５－ジアザビシクロ［２．２．１］ヘプタン－２－カルボキシレート（７ｏ）の合成
化合物７ｏは、化合物７ａについて記載された手順により化合物３ｃおよび１０ｅから合成された。
ｔｅｒｔ－ブチル６－（２－（（（Ｅ）－（（Ｚ）－５’－ブロモ－２’－オキソ－［２，３’－ビインドリニリデン］－３－イリデン）アミノ）オキシ）アセチル）－２，６－ジアザスピロ［３．３］ヘプタン－２－カルボキシレート（７ｐ）の合成
化合物７ｐは、化合物７ａについて記載された手順により化合物３ｄおよび１０ａから合成された。
（１Ｒ，５Ｓ，６ｓ）－ｔｅｒｔ－ブチル６－（２－（（（Ｅ）－（（Ｚ）－５’－ブロモ－２’－オキソ－［２，３’－ビインドリニリデン］－３－イリデン）アミノ）オキシ）アセトアミド）－３－アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン－３－カルボキシレート（７ｑ）の合成
化合物７ｑは、化合物７ａについて記載された手順により化合物３ｄおよび１０ｂから合成された。
ｔｅｒｔ－ブチル（（１Ｒ，５Ｓ，６ｓ）－３－（２－（（（Ｅ）－（（Ｚ）－５’－ブロモ－２’－オキソ－［２，３’－ビインドリニリデン］－３－イリデン）アミノ）オキシ）アセチル）－３－アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン－６－イル）カルバメート（７ｒ）の合成
化合物７ｒは、化合物７ａについて記載された手順により化合物３ｄおよび１０ｃから合成された。
（１Ｒ，４Ｒ）－ｔｅｒｔ－ブチル５－（２－（（（Ｅ）－（（Ｚ）－５’－ブロモ－２’－オキソ－［２，３’－ビインドリニリデン］－３－イリデン）アミノ）オキシ）アセチル）－２，５－ジアザビシクロ［２．２．１］ヘプタン－２－カルボキシレート（７ｓ）の合成
化合物７ｓは、化合物７ａについて記載された手順により化合物３ｄおよび１０ｄから合成された。
（１Ｓ，４Ｓ）－ｔｅｒｔ－ブチル５－（２－（（（Ｅ）－（（Ｚ）－５’－ブロモ－２’－オキソ－［２，３’－ビインドリニリデン］－３－イリデン）アミノ）オキシ）アセチル）－２，５－ジアザビシクロ［２．２．１］ヘプタン－２－カルボキシレート（７ｔ）の合成
化合物７ｔは、化合物７ａについて記載された手順により化合物３ｄおよび１０ｅから合成された。
実施例１５：（２Ｚ，３Ｅ）－３－（（２－オキソ－２－（２，６－ジアザスピロ［３．３］ヘプタン－２－イル）エトキシ）イミノ）－［２，３’－ビインドリニリデン］－２’－オン（８ａ）の合成
化合物８ａは、化合物６ａについて記載された手順により化合物７ａから合成された。
1Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ6）δ ｐｐｍ ３．４９－３．５４（ｍ，４Ｈ），４．０１（ｓ，２Ｈ），４．３３（ｓ，２Ｈ），５．０５（ｓ，２Ｈ），６．８７－６．９３（ｍ，２Ｈ），７．０２－ ７．０７（ｍ，１Ｈ），７．１５（ｔｄ，Ｊ＝７．６７，１．１４Ｈｚ，１Ｈ），７．４１－７．４８（ｍ，２Ｈ），８．１８－８．２１（ｍ，１Ｈ），８．４２－８．４６（ｍ，１Ｈ）．ＭＳ（ＥＳＩ）：［Ｍ＋Ｈ］+＝４１５．７．
実施例１６：Ｎ－（（１Ｒ，５Ｓ，６ｓ）－３－アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン－６－イル）－２－（（（Ｅ）－（（Ｚ）－２’－オキソ－［２，３’－ビインドリニリデン］－３－イリデン）アミノ）オキシ）アセトアミド（８ｂ）の合成
化合物８ｂは、化合物６ａについて記載された手順により化合物７ｂから合成された。
1Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ6）δ ｐｐｍ １．４６（ｓ，２Ｈ），２．５９（ｄｔ，Ｊ＝４．２４，２．００Ｈｚ，１Ｈ） ２．６１（ｓ，１Ｈ），２．６４（ｓ，１Ｈ），２．８８（ｓ，１Ｈ），２．９１（ｓ，１Ｈ），４．９１（ｓ，２Ｈ），６．８７－６．９０（ｍ，１Ｈ），６．９３（ｔｄ，Ｊ＝７．６７，１．１４Ｈｚ，１Ｈ），７．０１－７．０６（ｍ，１Ｈ），７．１５（ｔｄ，Ｊ＝７．６７，１．１４Ｈｚ，１Ｈ），７．４０－７．４７（ｍ，２Ｈ），８．１９（ｄｔ，Ｊ＝７．６１，１．００Ｈｚ，１Ｈ），８．２９（ｄ，Ｊ＝４．１２Ｈｚ，１Ｈ），８．４３－８．４７（ｍ，１Ｈ），１０．７７（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），１１．６６（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）．ＭＳ（ＥＳＩ）：［Ｍ＋Ｈ］+＝４１５．９．
（２Ｚ，３Ｅ）－３－（（２－（（１Ｒ，５Ｓ，６ｓ）－６－アミノ－３－アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン－３－イル）－２－オキソエトキシ）イミノ）－［２，３’－ビインドリニリデン］－２’－オン（８ｃ）の合成
化合物８ｃは、化合物６ａについて記載された手順により化合物７ｃから合成された。
実施例１７：（２Ｚ，３Ｅ）－３－（（２－（（１Ｒ，４Ｒ）－２，５－ジアザビシクロ［２．２．１］ヘプタン－２－イル）－２－オキソエトキシ）イミノ）－［２，３’－ビインドリニリデン］－２’－オン（８ｄ）の合成
化合物８ｄは、化合物６ａについて記載された手順により化合物７ｄから合成された。
1Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ6, 室温）δ ｐｐｍ １．５４－１．７１（ｍ，２Ｈ），２．７７（ｄ，Ｊ＝９．６２Ｈｚ，１Ｈ），２．８４（ｄｔ，Ｊ＝９．７９，２．２０Ｈｚ，１Ｈ），３．１６（ｄ，Ｊ＝１０．７６Ｈｚ，０．５Ｈ），３．４０（ｄ，Ｊ＝８．７０Ｈｚ，０．５Ｈ），３．５３（ｄｄ，Ｊ＝９．０４，２．１８Ｈｚ，０．５Ｈ），３．５８（ｓ，０．５Ｈ），３．６８（ｓ，０．５Ｈ），４．６４（ｄ，Ｊ＝１３．９７Ｈｚ，１Ｈ），５．０５－５．１５（ｍ，１Ｈ），５．２５（ｓ，１Ｈ），６．８８（ｄ，Ｊ＝７．１０Ｈｚ，１Ｈ），６．９３－６．９８（ｍ，１Ｈ），７．０２－７．０７（ｍ，１Ｈ），７．１１－７．１７（ｍ，１Ｈ），７．４０－７．４７（ｍ，２Ｈ），８．２２（ｔ，Ｊ＝６．９８Ｈｚ，１Ｈ），８．４７（ｔ，Ｊ＝８．０１Ｈｚ，１Ｈ），１０．７６（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）．室温での８ｄの1Ｈ ＮＭＲスペクトルが一部信号では二倍で表示されて、ＤＭＳＯ－ｄ６で２個の回転コンフォマーが～１：１の割合で存在することを示した。ＭＳ（ＥＳＩ）：［Ｍ＋Ｈ］+＝４１５．９．
（２Ｚ，３Ｅ）－３－（（２－（（１Ｓ，４Ｓ）－２，５－ジアザビシクロ［２．２．１］ヘプタン－２－イル）－２－オキソエトキシ）イミノ）－［２，３’－ビインドリニリデン］－２’－オン（８ｅ）の合成
化合物８ｅは、化合物６ａについて記載された手順により化合物７ｅから合成された。
実施例１８：（２Ｚ，３Ｅ）－５’－フルオロ－３－（（２－オキソ－２－（２，６－ジアザスピロ［３．３］ヘプタン－２－イル）エトキシ）イミノ）－［２，３’－ビインドリニリデン］－２’－オン（８ｆ）の合成
化合物８ｆは、化合物６ａについて記載された手順により化合物７ｆから合成された。
1Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ6）δ ｐｐｍ ３．５３（ｓ，３Ｈ），３．６２（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），３．９８－４．０３（ｍ，２Ｈ），４．３３（ｂｒ．ｓ．，２Ｈ），５．０５（ｓ，２Ｈ），６．８３－６．８８（ｍ，１Ｈ），６．９４－７．００（ｍ，１Ｈ），７．０７（ｔｄ，Ｊ＝７．２７，１．９５Ｈｚ，１Ｈ），７．４２－７．５０（ｍ，２Ｈ），８．１８（ｄｄ，Ｊ＝７．７９，０．９２Ｈｚ，１Ｈ），８．２０－８．２５（ｍ，１Ｈ），１０．８０（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）．ＭＳ（ＥＳＩ）：［Ｍ＋Ｈ］+＝４３４．６．
実施例１９：Ｎ－（（１Ｒ，５Ｓ，６ｓ）－３－アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン－６－イル）－２－（（（Ｅ）－（（Ｚ）－５’－フルオロ－２’－オキソ－［２，３’－ビインドリニリデン］－３－イリデン）アミノ）オキシ）アセトアミド（８ｇ）の合成
化合物８ｇは、化合物６ａについて記載された手順により化合物７ｇから合成された。
1Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ6）δ ｐｐｍ １．４５（ｓ，２Ｈ），２．５４－２．５７（ｍ，１Ｈ），２．６１（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），２．８７（ｓ，１Ｈ），２．９０（ｓ，１Ｈ），４．９４（ｓ，２Ｈ），６．８２－６．８９（ｍ，１Ｈ），６．９７（ｔｄ，J＝８．８２，２．２９Ｈｚ，１Ｈ），７．０４－７．１０（ｍ，１Ｈ），７．４２－７．５０（ｍ，２Ｈ），８．１８－８．２７（ｍ，３Ｈ），１０．７９（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），１１．７５（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）．ＭＳ（ＥＳＩ）：［Ｍ＋Ｈ］+＝４３４．６．
（２Ｚ，３Ｅ）－３－（（２－（（１Ｒ，５Ｓ，６ｓ）－６－アミノ－３－アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン－３－イル）－２－オキソエトキシ）イミノ）－５’－フルオロ－［２，３’－ビインドリニリデン］－２’－オン（８ｈ）の合成
化合物８ｈは、化合物６ａについて記載された手順により化合物７ｈから合成された。
実施例２０：（２Ｚ，３Ｅ）－３－（（２－（（１Ｒ，４Ｒ）－２，５－ジアザビシクロ［２．２．１］ヘプタン－２－イル）－２－オキソエトキシ）イミノ）－５’－フルオロ－［２，３’－ビインドリニリデン］－２’－オン（８ｉ）の合成
化合物８ｉは、化合物６ａについて記載された手順により化合物７ｉから合成された。
1Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ6，ｒｏｏｍ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ）δ ｐｐｍ １．５５－１．７２（ｍ，２Ｈ），２．７７－２．８６（ｍ，２Ｈ），３．１５－３．１９（ｍ，０．５Ｈ），３．５３（ｄｄ，Ｊ＝８．９３，２．０６Ｈｚ，０．５Ｈ），３．５８（ｓ，０．５Ｈ），３．６８（ｓ，０．５Ｈ），４．６０－４．６４（ｍ，１Ｈ），５．０６－５．１７（ｍ，１Ｈ），５．２３（ｄ，Ｊ＝１４．８８Ｈｚ，１Ｈ），５．３２（ｄ，Ｊ＝１４．８８Ｈｚ，１Ｈ），６．８２－６．８７（ｍ，１Ｈ），６．９２－６．９８（ｍ，１Ｈ），７．０７（ｄｄｄ，Ｊ＝８．０１，６．０７，２．１８Ｈｚ，１Ｈ），７．４２－７．５０（ｍ，２Ｈ），８．２１（ｄｄ，Ｊ＝７．７９，３．４３Ｈｚ，１Ｈ），８．２７（ｄｄｄ，Ｊ＝１１．２２，６．９８，２．６３Ｈｚ，１Ｈ），１０．７７（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），１１．７２（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）．室温で８ｉの1Ｈ ＮＭＲスペクトルが一部信号では二倍で表示され、これは、ＤＭＳＯ－ｄ６で２個の回転コンフォマーが～１：１の割合で存在することを示唆する。ＭＳ（ＥＳＩ）：［Ｍ＋Ｈ］+＝４３４．６．
（２Ｚ，３Ｅ）－３－（（２－（（１Ｓ，４Ｓ）－２，５－ジアザビシクロ［２．２．１］ヘプタン－２－イル）－２－オキソエトキシ）イミノ）－５’－フルオロ－［２，３’－ビインドリニリデン］－２’－オン（８ｊ）の合成
化合物８ｊは、化合物６ａについて記載された手順により化合物７ｊから合成された。
（２Ｚ，３Ｅ）－５’－クロロ－３－（（２－オキソ－２－（２，６－ジアザスピロ［３．３］ヘプタン－２－イル）エトキシ）イミノ）－［２，３’－ビインドリニリデン］－２’－オン（８ｋ）の合成
化合物８ｋは、化合物６ａについて記載された手順により化合物７ｋから合成された。
Ｎ－（（１Ｒ，５Ｓ，６ｓ）－３－アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン－６－イル）－２－（（（Ｅ）－（（Ｚ）－５’－クロロ－２’－オキソ－［２，３’－ビインドリニリデン］－３－イリデン）アミノ）オキシ）アセトアミド（８ｌ）の合成
化合物８ｌは、化合物６ａについて記載された手順により化合物７ｌから合成された。
（２Ｚ，３Ｅ）－３－（（２－（（１Ｒ，５Ｓ，６ｓ）－６－アミノ－３－アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン－３－イル）－２－オキソエトキシ）イミノ）－５’－クロロ－［２，３’－ビインドリニリデン］－２’－オン（８ｍ）の合成
化合物８ｍは、化合物６ａについて記載された手順により化合物７ｍから合成された。
（２Ｚ，３Ｅ）－３－（（２－（（１Ｒ，４Ｒ）－２，５－ジアザビシクロ［２．２．１］ヘプタン－２－イル）－２－オキソエトキシ）イミノ）－５’－クロロ－［２，３’－ビインドリニリデン］－２’－オン（８ｎ）の合成
化合物８ｎは、化合物６ａについて記載された手順により化合物７ｎから合成された。
（２Ｚ，３Ｅ）－３－（（２－（（１Ｓ，４Ｓ）－２，５－ジアザビシクロ［２．２．１］ヘプタン－２－イル）－２－オキソエトキシ）イミノ）－５’－クロロ－［２，３’－ビインドリニリデン］－２’－オン（８ｏ）の合成
化合物８ｏは、化合物６ａについて記載された手順により化合物７ｏから合成された。
（２Ｚ，３Ｅ）－５’－ブロモ－３－（（２－オキソ－２－（２，６－ジアザスピロ［３．３］ヘプタン－２－イル）エトキシ）イミノ）－［２，３’－ビインドリニリデン］－２’－オン（８ｐ）の合成
化合物８ｐは、化合物６ａについて記載された手順により化合物７ｐから合成された。
Ｎ－（（１Ｒ，５Ｓ，６ｓ）－３－アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン－６－イル）－２－（（（Ｅ）－（（Ｚ）－５’－ブロモ－２’－オキソ－［２，３’－ビインドリニリデン］－３－イリデン）アミノ）オキシ）アセトアミド（８ｑ）の合成
化合物８ｑは、化合物６ａについて記載された手順により化合物７ｑから合成された。
（２Ｚ，３Ｅ）－３－（（２－（（１Ｒ，５Ｓ，６ｓ）－６－アミノ－３－アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン－３－イル）－２－オキソエトキシ）イミノ）－５’－ブロモ－［２，３’－ビインドリニリデン］－２’－オン（８ｒ）の合成
化合物８ｒは、化合物６ａについて記載された手順により化合物７ｒから合成された。
（２Ｚ，３Ｅ）－３－（（２－（（１Ｒ，４Ｒ）－２，５－ジアザビシクロ［２．２．１］ヘプタン－２－イル）－２－オキソエトキシ）イミノ）－５’－ブロモ－［２，３’－ビインドリニリデン］－２’－オン（８ｓ）の合成
化合物８ｓは、化合物６ａについて記載された手順により化合物７ｓから合成された。
（２Ｚ，３Ｅ）－３－（（２－（（１Ｓ，４Ｓ）－２，５－ジアザビシクロ［２．２．１］ヘプタン－２－イル）－２－オキソエトキシ）イミノ）－５’－ブロモ－［２，３’－ビインドリニリデン］－２’－オン（８ｔ）の合成
化合物８ｔは、化合物６ａについて記載された手順により化合物７ｔから合成された。
ｔｅｒｔ－ブチル６－（２－クロロアセチル）－２，６－ジアザスピロ［３．３］ヘプタン－２－カルボキシレート（１０ａ）の合成
アルゴン大気下でＴＥＡ（２当量）をＤＣＭ中ｔｅｒｔ－ブチル２，６－ジアザスピロ［３．３］ヘプタン－２－カルボキシレートの溶液に添加した。 反応混合物を０℃で１０分間撹拌した。その後、クロロアセチルクロライド（１．５当量）を滴下し、０℃で２時間の間撹拌した。ＴＬＣによりモニタリングした反応の終了後、ＴＬＣ（クロロホルム：メタノール＝２０：１、ｔｅｒｔ－ブチル２，６－ジアザスピロ［３．３］ヘプタン－２－カルボキシレートＲｆ＝０．１、生成物Ｒｆ＝０．６）は、ｔｅｒｔ－ブチル２，６－ジアザスピロ［３．３］ヘプタン－２－カルボキシレートが完全に消耗してニンヒドリン染色により一つの新たな斑が感知されたことを示した。溶媒蒸発後、前記混合物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶離液：クロロホルム：メタノール＝１５０：１）で精製した。
（１Ｒ，５Ｓ，６ｓ）－ｔｅｒｔ－ブチル６－（２－クロロアセトアミド）－３－アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン－３－カルボキシレート（１０ｂ）の合成
化合物１０ｂは、化合物１０ａについて記載された手順によりクロロアセチルクロライドおよび（１Ｒ，５Ｓ，６ｓ）－ｔｅｒｔ－ブチル６－アミノ－３－アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン－３－カルボキシレートから合成された。
ｔｅｒｔ－ブチル（（１Ｒ，５Ｓ，６ｓ）－３－（２－クロロアセチル）－３－アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン－６－イル）カルバメート（１０ｃ）の合成
化合物１０ｃは、化合物１０ａについて記載された手順によりクロロアセチルクロライドおよびｔｅｒｔ－ブチル（（１Ｒ，５Ｓ，６ｓ）－３－アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン－６－イル）カルバメートから合成された。
（１Ｒ，４Ｒ）－ｔｅｒｔ－ブチル５－（２－クロロアセチル）－２，５－ジアザビシクロ［２．２．１］ヘプタン－２－カルボキシレート（１０ｄ）の合成
化合物１０ｄは、化合物１０ａについて記載された手順によりクロロアセチルクロライドおよび（１Ｒ，４Ｒ）－ｔｅｒｔ－ブチル２，５－ジアザビシクロ［２．２．１］ヘプタン－２－カルボキシレートから合成された。
（１Ｓ，４Ｓ）－ｔｅｒｔ－ブチル５－（２－クロロアセチル）－２，５－ジアザビシクロ［２．２．１］ヘプタン－２－カルボキシレート（１０ｅ）の合成
化合物１０ｅは、化合物１０ａについて記載された手順によりクロロアセチルクロライドおよび（１Ｓ，４Ｓ）－ｔｅｒｔ－ブチル２，５－ジアザビシクロ［２．２．１］ヘプタン－２－カルボキシレートから合成された。
実験例１．本発明による化合物のキナーゼ阻害活性評価
本実験例においては、ＦＬＴ酵素阻害試験および癌細胞株における細胞増殖阻害試験を通じて、本発明の化合物の抗癌効果を確認した。
ＦＬＴ３活性抑制は、ＡＤＰ－Ｇｌｏキナーゼ分析方法（Ｐｒｏｍｅｇａ、ｃａｔ＃ Ｖ９１０１）を使用した。ＡＤＰ－Ｇｌｏキナーゼ分析方法は、キナーゼ反応の間生成されたＡＤＰの量を定量化してキナーゼ活性を測定する、均一な高処理量スクリーニング方法を提供する発光ＡＤＰ検出分析法である。
分析は、２つのステップで遂行される。第一、キナーゼ反応後、同一の体積のＡＤＰ－ＧｌｏTM試薬を添加してキナーゼ反応を終了し、残りＡＴＰを枯渇させる。第二、キナーゼ検出試薬を添加してＡＤＰをＡＴＰに転換すると同時にルシフェラーゼ／ルシフェリン反応を通じて新たに合成されたＡＴＰを測定することができるようにし、生成された光は、ルミノメーターを使用して測定される。測定された発光量をＡＴＰ→ＡＤＰ標準転換曲線に適用してＡＤＰ濃度との相関関係を確認することができる。
ＦＬＴ３とＦＬＴ３（Ｄ８３５Ｙ）ドメインを含有する組換えタンパク質をＰｒｏｍｅｇａ（ｃａｔ＃ Ｖ４０６４、ｃａｔ＃Ｖ４５１４）からそれぞれ購入した。メーカーの指示に従って、ＡＤＰ－ＧｌｏTMキナーゼ分析方法（Ｐｒｏｍｅｇａ、ＵＳＡ）を使用して最適の酵素、ＡＴＰおよび基質濃度を確立した。キナーゼ反応バッファー５Ｘ（２００ｍＭ Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ、ｐＨ７．５、１００ｍＭ ＭｇＣｌ2、０．５ｍｇ／ｍｌ ＢＳＡ）を希釈して使用し、希釈された本発明の化合物（５Ｘ、１μｌ）、ＦＬＴ３酵素またはＦＬＴ３／Ｄ８３５Ｙ酵素（２．５Ｘ、２μｌ）と共に基質／ＡＴＰ混合物（２．５ｘ、２μｌ）を順に混合して室温で１２０分間反応させた。以後、ＡＤＰ－ＧｌｏTM試薬（５μｌ）を入れて常温でさらに４０分間反応させた。最後に、検出用試薬（キナーゼ検出試薬、１０μｌ）を添加した後、常温でさらに３０分間反応させてからＳｐｅｃｔｒａＭａｘ ＩＤ５ ｒｅａｄｅｒ（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｄｅｖｉｃｅｓ ＬＬＣ．、Ｓａｎ Ｊｏｓｅ、ＣＡ、ＵＳＡ）を使用してルシフェラーゼ信号（Ｉｎｔｅｇｒａｔｉｏｎ ｔｉｍｅ ０．５～１秒）を測定して基質ペプチドのリン酸化を測定した。ＩＣ50は、Ｐｒｉｓｍ ｖｅｒｓｉｏｎ ５．０１（ＧｒａｐｈＰａｄ）を利用した非線形回帰分析（ｎｏｎｌｉｎｅａｒ ｒｅｇｒｅｓｓｉｏｎ）によって計算された。
ＲＥＴ ｗｔ、ＲＥＴ（Ｍ９１８Ｔ）およびＲＥＴ（Ｖ８０４Ｌ）ドメインを含む組換えタンパク質をＰｒｏｍｅｇａ（ｃａｔ＃ Ｖ８０６１、ｃａｔ＃ ＶＡ７２７４、ｃａｔ＃Ｖ４４７３）からそれぞれ購入した。最適の酵素、ＡＴＰおよび基質濃度は、メーカーの指示に従って、ＡＤＰ－ＧｌｏTM Ｋｉｎａｓｅ Ａｓｓａｙ（Ｐｒｏｍｅｇａ、ＵＳＡ）を使用して確立した。キナーゼ反応バッファー５Ｘ（２００ｍＭ Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ、ｐＨ７．５、１００ｍＭ ＭｇＣｌ2、０．５ｍｇ／ｍｌ ＢＳＡ）を希釈して使用し、本発明の希釈された化合物（５Ｘ、１μｌ）、ＦＬＴ３酵素またはＦＬＴ３／Ｄ８３５Ｙ酵素（２．５Ｘ、２μｌ）と共に基質／ＡＴＰ ｍｉｘ（２．５ｘ、２μｌ）を順に混合して室温で１２０分間反応させた。以後、ＡＤＰ－ＧｌｏTM Ｒｅａｇｅｎｔ（５μｌ）を入れて常温でさらに４０分間反応させた。最後に、検出用試薬（Ｋｉｎａｓｅ Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ Ｒｅａｇｅｎｔ、１０μｌ）を添加した後、常温でさらに３０分間反応させてからＳｐｅｃｔｒａＭａｘ ＩＤ５ ｒｅａｄｅｒ（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｄｅｖｉｃｅｓ ＬＬＣ．、Ｓａｎ Ｊｏｓｅ、ＣＡ、ＵＳＡ）を使用してＬｕｃｉｆｅｒａｓｅ信号（Ｉｎｔｅｇｒａｔｉｏｎ ｔｉｍｅ ０．５－１ｓｅｃｏｎｄ）を測定して基質ペプチドのリン酸化を測定した。ＩＣ50は、Ｐｒｉｓｍ ｖｅｒｓｉｏｎ ５．０１（ＧｒａｐｈＰａｄ）を利用した非線形回帰分析（ｎｏｎｌｉｎｅａｒ ｒｅｇｒｅｓｓｉｏｎ）によって計算された。
測定された酵素活性（ＩＣ50、ｎＭ）結果を下記表２に示した。
表２から確認されるように、本発明の化合物は、ＦＬＴ３、ＦＬＴ３突然変異、ＲＥＴ、およびＲＥＴ突然変異に対してすべて優れた抑制活性を示した。
実験例２．ＡＭＬ細胞株での細胞増殖抑制評価
急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）細胞株に対する細胞増殖阻害実験は、ＦＬＴ３－ＩＴＤ発現ＡＭＬ細胞株であるＭＶ４－１１、Ｍｏｌｍ－１３、Ｍｏｌｍ－１４細胞を利用してＦＬＴ３抑制活性を試験して、すべての細胞株の起源はヒト由来細胞株であり、各細胞株の購入先と培養条件は、以下のとおりである。
ＭＶ４－１１細胞は、Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ（ＡＴＣＣ、Ｒｏｃｋｖｉｌｌｅ、ＭＤ、ＵＳＡ、ｃａｔ ＃ＣＲＬ－９５９１）、Ｍｏｌｍ－１３（ＤＳＭＺ、ｃａｔ ＃ＡＣＣ５５４）、Ｍｏｌｍ－１４（ＤＳＭＺ、ｃａｔ ＃ＡＣＣ７７７）から購入して細胞を１０％胎児ウシ血清、１％ペニシリン／ストレプトマイシンおよび４ｍＭ Ｌ－グルタミン（Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、ＧｒａｎｄＩｓｌａｎｄ、ＮＹ）が補充されたＲＰＭＩ １６４０培地（Ｃｏｒｎｉｎｇ Ｃｏ．１０－０４０－ＣＶ）で培養した。
細胞生存力は、Ａｌａｍａｒ Ｂｌｕｅ Ａｓｓａｙ ｋｉｔ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、ＵＳＡ）を使用してＲｅｓａｚｕｒｉｎの酸化還元基盤分析法で評価した。具体的に、ＭＶ４－１１、Ｍｏｌｍ－１３、Ｍｏｌｍ－１４細胞は、８０００個細胞を４５μｌの培地で３８４－ウェルプレートに塗抹した。陰性対照群としてジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）と共に化合物で処理した。化合物添加３日（７２時間）後、Ａｌａｍａｒ Ｂｌｕｅ ｋｉｔ試薬５μｌを３８４－ウェルプレートの各ウェルに入れて加湿されたＣＯ2インキュベーターで３７℃で２時間の間培養した。培養後ＳｐｅｃｔｒａＭａｘ ｉＤ３ Ｍｕｌｔｉ Ｍｏｄｅ Ｍｉｃｒｏｐｌａｔｅ Ｒｅａｄｅｒ（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｄｅｖｉｃｅｓ、ＩＤ３－ＳＴＤ）を使用して５４４ｎｍの５９０ｎｍ波長で蛍光密度（Ｆｌｕ）を測定した。ＧＩ５０は、Ｐｒｉｓｍ ｖｅｒｓｉｏｎ ５．０１（ＧｒａｐｈＰａｄ、ＬａＪｏｌｌａ、ＣＡ、ＵＳＡ）を使用して非線形回帰（ｎｏｎｌｉｎｅａｒ ｒｅｇｒｅｓｓｉｏｎ）によって計算した。
先行文献に公知になっている３種のインジルビン化合物を比較例として使用した。
測定された細胞増殖抑制活性（ＧＩ50、ｎＭ）結果を下記表４に示した。
表４から確認されるように、本発明の化合物は、急性白血病細胞株で強力な抗増殖活性を示すことが確認され、特に、突然変異キナーゼを発現するＦＬＴ３－ＩＴＤ発現ＭＶ４－１１細胞株、ＦＬＴ３－ＩＴＤおよびＲＥＴ発現Ｍｏｌｍ－１３細胞株およびＦＬＴ３／Ｄ８３５ＹおよびＲＥＴ発現Ｍｏｌｍ－１４細胞株で強力な抗増殖活性を示すことが確認できた。
実験例３．Ｉｎ ｖｉｖｏ腫瘍抑制評価
本発明の化合物４と比較例３の化合物を使用して、実験動物に対するｉｎ ｖｉｖｏ腫瘍抑制評価実験を遂行した。実験動物としては、ＢＡＬＢ／ｃヌードマウス（７－９週齢、雌、Ｓｈａｎｇｈａｉ Ｌｉｎｇｃｈａｎｇ Ｂｉｏｔｅｃｈ Ｃｏ．ＬＴＤ．）を使用し、腫瘍発達を向上させるために、０．２ｍＬのマトリゲル／ＰＢＳ（１：１）混合物を利用してＭＶ４－１１腫瘍細胞（１０×１０6、ＡＴＣＣ－ＣＲＬ－９５９１）を各マウス右側脇腹に皮下接種した。動物を無作為化して、平均腫瘍体積が１００－１５０ｍｍ3に到達したとき、試験を始めた。
無作為化された動物のうち腫瘍抑制評価実験のために選別された動物数は、計６４匹（計８個群、各群当たり８匹）である。化合物４の試験群は計４個群であり、それぞれ５ｍｇ／ｋｇ投与群、１０ｍｇ／ｋｇ投与群、２０ｍｇ／ｋｇ投与群、およびビヒクル投与群である。比較例３の試験群もまた計４個群であって、それぞれ１０ｍｇ／ｋｇ投与群、２０ｍｇ／ｋｇ投与群、４０ｍｇ／ｋｇ投与群およびビヒクル投与群である。薬物投与は、毎日一回ずつ経口投与にて進行し、賦形剤は、１００％蒸溜水を使用した。
２４日間すべての個体の体重測定および腫瘍抑制を観察した。腫瘍サイズはキャリパスを使用して測定され、体積はｍｍ3で表示した。
比較例３との比較実験結果を図１ａ－図１ｄに示した。図１ａ－図１ｄから確認されるように、本発明の化合物は、投与後に有意味な体重変化が観察されず、比較例３の化合物に比べて卓越な腫瘍体積減少傾向を示した。特に、本発明の化合物を５ｍｇ／ｋｇ投与した実験での腫瘍抑制効果は、比較例３の化合物を４０ｍｇ／ｋｇ投与した実験で得た腫瘍抑制効果に比べて卓越且つ顕著であるものと確認された。
これから、本発明の化合物は、ＦＴＬ３とＲＥＴキナーゼ、特に、ＦＬＴ３突然変異および突然変異ＲＥＴキナーゼの抑制活性、およびこれと関連する白血病またはリンパ腫の予防または治療効果に優れることが確認された。
Figure 2024509016000069

Claims (13)

  1. 下記化学式１で表される化合物またはその薬学的に許容される塩。
    前記化学式１において、
    Ｒ1は、水素またはハロゲンであり、
    Ｒ2は、
    であり、
    Ｒ３は、
    からなる群より選ばれるいずれか一つであり、
    ここで、前記Ｘ1は、Ｃ－ＲaＲbであり、Ｘ2は、Ｃ－ＲcＲdであり、Ｘ3は、Ｃ－ＲeＲfであり、
    Ｒ4、Ｒ5、Ｒa、Ｒb、Ｒc、Ｒd、ＲeおよびＲfは、それぞれ独立して、水素またはＣ1－Ｃ8アルキルであり、
    ｎ、ｍおよびｌは、それぞれ独立して、１～３の整数である。
  2. 前記Ｒ4、Ｒ5、Ｒa、Ｒb、Ｒc、Ｒd、ＲeおよびＲfは、それぞれ独立して、水素またはＣ1－Ｃ3アルキルであり、ｎ、ｍおよびｌは、１であることを特徴とする、請求項１に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩。
  3. 前記Ｒ3は、
    からなる群より選ばれるいずれか一つであり、ｎおよびｍは、それぞれ独立して、１～３の整数であることを特徴とする、請求項１に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩。
  4. 前記Ｒ4、Ｒ5、Ｒa、Ｒb、Ｒc、およびＲdは、それぞれ独立して、水素またはＣ1－Ｃ3アルキルであり、ｎおよびｍは１であることを特徴とする、請求項３に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩。
  5. 前記Ｒ1は、水素またはハロゲンであり、前記Ｒ2は、
    からなる群より選ばれるいずれか一つであることを特徴とする、請求項１に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩。
  6. 前記Ｒ1は、水素またはハロゲンであり、前記Ｒ2は、
    からなる群より選ばれるいずれか一つであることを特徴とする、請求項５に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩。
  7. 前記Ｒ1は、水素またはフッ素であり、前記Ｒ2は、
    からなる群より選ばれるいずれか一つであることを特徴とする、請求項５に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩。
  8. 前記化学式１の化合物が、以下の化合物１～２０からなる群より選ばれるものである、請求項１に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩。
  9. 請求項１ないし８のいずれか１項の化合物またはその薬学的に許容される塩を含む、ＦＬＴ３およびＲＥＴ－関連疾病の予防または治療のための製薬組成物。
  10. 請求項１ないし８のいずれか１項の化合物またはその薬学的に許容される塩を含む、白血病またはリンパ腫の予防または治療のための製薬組成物。
  11. 請求項１ないし８のいずれか１項の化合物またはその薬学的に許容される塩を含む、多発性骨髄腫、悪性形質細胞新生物、ホジキンリンパ種、結節性リンパ球優位型ホジキンリンパ腫、カーレル病および骨髄腫症、形質細胞白血病、形質細胞種、Ｂ－細胞前リンパ球性白血病、有毛細胞白血病、Ｂ－細胞非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、急性リンパ球性白血病（ＡＬＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、濾胞性リンパ腫、バーキットリンパ腫、辺縁帯リンパ腫、マントル細胞リンパ腫、大細胞型リンパ腫、前駆Ｂ－リンパ芽球性リンパ腫、骨髄性白血病、ワルデンストレーム大グロブリン血症、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、濾胞性リンパ腫、辺縁帯リンパ腫、粘膜関連リンパ組織リンパ種、小細胞リンパ球性リンパ種、マントル細胞リンパ種、バーキットリンパ腫、原発性縦隔（胸腺）大Ｂ細胞リンパ腫、リンパ形質細胞性リンパ種、ワルデンストレームマクログロブリン血症、リンパ節辺縁帯Ｂ細胞リンパ腫、脾臓辺縁帯リンパ腫、血管内大Ｂ－細胞リンパ種、原発性滲出性リンパ種、リンパ腫様肉芽腫症、Ｔ細胞／組織球－豊富型大Ｂ－細胞リンパ腫、原発性中枢神経係リンパ種、原発性皮膚びまん性大Ｂ－細胞リンパ腫（脚型）、高齢者のＥＢＶ陽性びまん性大Ｂ－細胞リンパ種、炎症に関連したびまん性大Ｂ－細胞リンパ腫、血管内大Ｂ－細胞リンパ腫、ＡＬＫ－陽性大Ｂ－細胞リンパ種、形質細胞性リンパ種、ＨＨＶ８－関連多重心性キャッスルマン病において発生する大Ｂ－細胞リンパ腫、びまん性大Ｂ－細胞リンパ腫とバーキットリンパ腫との間の中間特徴を有する未分類Ｂ－細胞リンパ種、またはびまん性大Ｂ－細胞リンパ腫と古典的ホジキンリンパ種との間の中間特徴として有する未分類Ｂ－細胞リンパ種の予防または治療のための製薬組成物。
  12. 急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）の予防または治療用の請求項１１に記載の製薬組成物。
  13. 前記急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）は、突然変異ＦＬＴ３または突然変異ＲＥＴキナーゼが発現されたものである、請求項１２に記載の製薬組成物。
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