JP2024508047A - 化合物、組成物、及びそれらの使用方法 - Google Patents

化合物、組成物、及びそれらの使用方法 Download PDF

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Abstract

本開示は、とりわけ、ポリヌクレオチドまたはオリゴヌクレオチド、例えば、ウイルスゲノムを送達するために有用な脂質、組成物、及び方法を含む。TIFF2024508047000342.tif73165

Description

関連出願の相互参照
本出願は、２０２１年２月１０に出願された米国仮特許出願第６３／１４７，９５９号、２０２１年４月２９日に出願された米国仮特許出願第６３／１８１，８９９号、及び２０２１年４月２９日に出願された米国仮特許出願第６３／１８１，９１７号の優先権及び利益を主張するものであり、これらの各々の内容は、全体として参照により本明細書に組み込まれる。
背景
脂質は、非経口投与時に標的細胞に送達される、核酸（ＮＡ）ベースの治療薬、例えば、ｓｉＲＮＡまたはｍＲＮＡをカプセル化する脂質－ＮＡナノ粒子を形成することができるため、核酸送達のための材料として使用されている（Ｚｉｍｍｅｒｍａｎｎ，２００６，Ｎａｔｕｒｅ，ｄｏｉ：１０．１０３８／ｎａｔｕｒｅ０４６８８（非特許文献１）、Ａｕｇｕｓｔ ａｔ ａｌ．，２０２１，Ｎａｔ Ｍｅｄ，ｄｏｉ：１０．１０３８／ｓ４１５９１－０２１－０１５７３－６（非特許文献２））。
対象の処置及び免疫化のための核酸の送達は、数年間にわたって目標とされてきた。ＤＮＡまたはＲＮＡの使用、例えば、ウイルスもしくは非ウイルスの送達ビヒクル（またはさらには送達ビヒクルを用いない「裸の」ワクチン）、複製ベクターもしくは非複製ベクター、またはウイルスベクターもしくは非ウイルスベクターのＤＮＡまたはＲＮＡの使用を含め、様々な手法が試験されている。
さらなる改善された核酸ベースの処置及びワクチン、そして特に核酸治療薬を送達する改善された方法が、依然として必要とされている。
Ｚｉｍｍｅｒｍａｎｎ，２００６，Ｎａｔｕｒｅ，ｄｏｉ：１０．１０３８／ｎａｔｕｒｅ０４６８８ Ａｕｇｕｓｔ ａｔ ａｌ．，２０２１，Ｎａｔ Ｍｅｄ，ｄｏｉ：１０．１０３８／ｓ４１５９１－０２１－０１５７３－６
概要
本出願は、ポリヌクレオチドまたはオリゴヌクレオチドを送達するのに有用な脂質、組成物、及び方法を提供する。
したがって、一態様において、本明細書で提供されるのは、式（Ｉ）の化合物：
Figure 2024508047000002
 またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物であり、式中、
Ａは、－Ｎ（ＣＨ２ＲＮ１）（ＣＨ２ＲＮ２）、または少なくとも１つのＮを含む４～７員ヘテロシクリル環であり、４～７員ヘテロシクリル環は、０～６つのＲ３で置換されていてもよく、
各Ｘは、独立的に、－Ｏ－、－Ｎ（Ｒ１）－、または－Ｎ（Ｒ２）－であり、
Ｒ１は、置換されていてもよいＣ１－Ｃ３１脂肪族及びステロイジルからなる群から選択され、
Ｒ２は、置換されていてもよいＣ１－Ｃ３１脂肪族及びステロイジルからなる群から選択され、
Ｒ３は、置換されていてもよいＣ１－Ｃ６脂肪族であり、
ＲＮ１及びＲＮ２は、各々独立的に、水素、ヒドロキシ－Ｃ１－Ｃ６アルキル、Ｃ２－Ｃ６アルケニル、またはＣ３－Ｃ７シクロアルキルであり、
Ｌ１は、置換されていてもよいＣ１－Ｃ２０アルキレン鎖、及び置換されていてもよい二価Ｃ２－Ｃ２０アルケニレン鎖からなる群から選択され、
Ｌ２は、置換されていてもよいＣ１－Ｃ２０アルキレン鎖、及び置換されていてもよい二価Ｃ２－Ｃ２０アルケニレン鎖からなる群から選択され、
Ｌ３は結合、置換されていてもよいＣ１－Ｃ６アルキレン鎖、または置換されていてもよい二価Ｃ３－Ｃ７シクロアルキレンであり、
ただし、Ａが－Ｎ（ＣＨ３）（ＣＨ３）であり、ＸがＯであるとき、Ｌ３はＣ１－Ｃ６アルキレン鎖ではないことを条件とする。
いくつかの実施形態では、該化合物は、式（Ｉ－ａ）の化合物：
Figure 2024508047000003
 またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物であり、式中、ｍは０、１、２、３、４、５、または６である。
いくつかの実施形態では、Ａは、１つ以上のＳを含む。いくつかの実施形態では、Ａは、Ｎを１つだけ含む、置換されていてもよい４～７員ヘテロシクリル環である。いくつかの実施形態では、Ａは、置換されていてもよい５～６員ヘテロシクリル環である。いくつかの実施形態では、Ａは、Ｎを１つだけ含む、置換されていてもよい６員ヘテロシクリル環である。いくつかの実施形態では、Ａは第三級アミンである。
いくつかの実施形態では、該化合物は、式（Ｉ－ｂ）の化合物：
Figure 2024508047000004
 またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物であり、式中、ｎは０、１、２、または３であり、ｍは０、１、２、３、４、５、または６である。
いくつかの実施形態では、該化合物は、式（Ｉ－ｂｉｉ）の化合物：
Figure 2024508047000005
 またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物であり、式中、ｍは０、１、２、または３であり、ｐ及びｑは、各々独立的に、０、１、２、または３であり、ｑ＋ｐは３以下である。
いくつかの実施形態では、ｎは１である。いくつかの実施形態では、ｎは２である。いくつかの実施形態では、ｎは３である。いくつかの実施形態では、ｍは０である。いくつかの実施形態では、ｍは１である。
いくつかの実施形態では、該化合物は、式（Ｉ－ｃ）の化合物：
Figure 2024508047000006
 またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物である。
いくつかの実施形態では、ＸはＯである。いくつかの実施形態では、Ｘは、ＮＲ１またはＮＲ２である。
いくつかの実施形態では、Ｒ１及びＲ２は、各々独立的に、置換されていてもよいＣ１－Ｃ３１アルキルまたは置換されていてもよいＣ２－Ｃ３１アルケニルである。いくつかの実施形態では、Ｒ１及びＲ２は同じである。いくつかの実施形態では、Ｒ１及びＲ２は、各々独立的に、置換されていてもよいＣ１０－Ｃ２０アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒ１及びＲ２は、各々独立的に、分岐状Ｃ１０－Ｃ２０アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒ１及びＲ２は異なる。いくつかの実施形態では、Ｒ１は、置換されていてもよいＣ６－Ｃ２０アルケニルであり、Ｒ２は、置換されていてもよいＣ１０－Ｃ２０アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒ１は、Ｃ６－Ｃ２０アルケニルであり、Ｒ２は、分岐状Ｃ１０－Ｃ２０アルキルである。
いくつかの実施形態では、Ｌ１は、置換されていてもよいＣ１－Ｃ１０アルキレン鎖であり、Ｌ２は、置換されていてもよいＣ１－Ｃ１０アルキレン鎖である。いくつかの実施形態では、Ｌ１は、置換されていてもよいＣ１－Ｃ５アルキレン鎖であり、Ｌ２は、置換されていてもよいＣ１－Ｃ５アルキレン鎖である。いくつかの実施形態では、Ｌ１は、置換されていてもよいＣ１－Ｃ３アルキレン鎖であり、Ｌ２は、置換されていてもよいＣ１－Ｃ３アルキレン鎖である。いくつかの実施形態では、Ｌ１及びＬ２は各々、－ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２－である。
いくつかの実施形態では、Ｌ３は、Ｃ１－Ｃ３アルキレン鎖である。いくつかの実施形態では、Ｌ３は結合である。いくつかの実施形態では、Ｌ３は、二価Ｃ３－Ｃ７シクロアルキレンである。いくつかの実施形態では、Ｌ３は結合である。いくつかの実施形態では、Ｌ３は、－ＣＨ２－である。
いくつかの実施形態では、チオレートのＳと、Ａに含まれる最も近いＮとの間の炭素原子の数が、２～１０である。いくつかの実施形態では、チオレートのＳと、Ａに含まれる最も近いＮとの間の炭素原子の数が、２～８である。いくつかの実施形態では、チオレートのＳと、Ａに含まれる最も近いＮとの間の炭素原子の数が、２～５である。いくつかの実施形態では、チオレートのＳと、Ａに含まれる最も近いＮとの間の炭素原子の数が、２～４である。いくつかの実施形態では、チオレートのＳと、Ａに含まれる最も近いＮとの間の炭素原子の数が、３である。
いくつかの実施形態では、Ｒ３は、Ｃ１－Ｃ６アルキルまたはＣ１－Ｃ６アルケニルであり、各Ｃ１－Ｃ６アルキルまたはＣ１－Ｃ６アルケニルは、１～３つのＣ３－Ｃ６シクロアルキルまたは－ＯＨで置換されていてもよい。いくつかの実施形態では、Ｒ３は、Ｃ１－Ｃ３アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒ３は、－ＣＨ３である。
いくつかの実施形態では、ＲＮ１及びＲＮ２は、各々独立的に、水素、ヒドロキシ－Ｃ１－Ｃ３アルキル、Ｃ２－Ｃ４アルケニル、またはＣ３－Ｃ４シクロアルキルから選択される。いくつかの実施形態では、ＲＮ１及びＲＮ２は、各々独立的に、水素、－ＣＨ２ＣＨ＝ＣＨ２、－ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、
Figure 2024508047000007
 から選択される。いくつかの実施形態では、ＲＮ１及びＲＮ２は同じである。いくつかの実施形態では、ＲＮ１及びＲＮ２は異なる。いくつかの実施形態では、ＲＮ１及びＲＮ２の一方は水素であり、他方は
Figure 2024508047000008
 である。
別の態様において、本明細書で提供されるのは、
Figure 2024508047000009
Figure 2024508047000010
Figure 2024508047000011
 からなる群から選択される化合物、またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物である。
いくつかの実施形態では、該化合物は、
Figure 2024508047000012
 またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物である。
いくつかの実施形態では、該化合物は、
Figure 2024508047000013
 またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物である。
いくつかの実施形態では、該化合物は、
Figure 2024508047000014
 またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物である。
別の態様において、本明細書で提供されるのは、
Figure 2024508047000015
 から選択される化合物、またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物である。
別の態様において、本明細書で提供されるのは、式（Ａ）の化合物：
Figure 2024508047000016
 またはその薬学的に許容される塩であり、式中、
ｎは、すべての端点を含む１０～２００の整数であり、
ＬＰ１は、－［（ＣＨ２）０－３－Ｃ（Ｏ）Ｏ］１－３－、－（ＣＨ２）０－３－Ｃ（Ｏ）Ｏ－（ＣＨ２）１－３－ＯＣ（Ｏ）－、または－Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｈ）－であり、
ＲＰ１は、Ｃ５－Ｃ２５アルキルまたはＣ５－Ｃ２５アルケニルであり、
ＲＰ２は、水素または－ＣＨ３であり、
ただし、式（Ａ）は、ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｈ）－（ＣＨ２）１７ＣＨ３ではないことを条件とする。
いくつかの実施形態では、ＬＰ１は、－ＣＨ２Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－ＣＨ２ＣＨ２Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－ＣＨ２Ｃ（Ｏ）ＯＣＨ２Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－ＣＨ２Ｃ（Ｏ）ＯＣＨ２ＣＨ２ＯＣ（Ｏ）－、または－Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｈ）－である。いくつかの実施形態では、該化合物は、式（Ａ－ａ）、式（Ａ－ｂ）、式（Ａ－ｃ）、式（Ａ－ｄ）、もしくは式（Ａ－ｅ）の化合物：
Figure 2024508047000017
 またはその薬学的に許容される塩である。
いくつかの実施形態では、ＲＰ１は、Ｃ１４－Ｃ１８アルキルまたはＣ１４－Ｃ１８アルケニルである。いくつかの実施形態では、ＲＰ１は、Ｃ１４アルキル、Ｃ１６アルキル、またはＣ１８アルキルである。
いくつかの実施形態では、ｎは、平均で約２０、約４０、約４５、約５０、約６８、約７５、または約１００である。
いくつかの実施形態では、該化合物は、
ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－ＣＨ２Ｃ（Ｏ）Ｏ－（ＣＨ２）１７ＣＨ３［ｎは、平均で約４５である］、
Ｈ３ＣＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－ＣＨ２Ｃ（Ｏ）Ｏ－（ＣＨ２）１７ＣＨ３［ｎは、平均で約４５である］、
ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－ＣＨ２Ｃ（Ｏ）Ｏ－（ＣＨ２）１５ＣＨ３［ｎは、平均で約４５である］、
ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－ＣＨ２Ｃ（Ｏ）Ｏ－（ＣＨ２）１３ＣＨ３［ｎは、平均で約４５である］、及び
ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｈ）－（ＣＨ２）１７ＣＨ３［ｎは、平均で約４５である］
からなる群から選択されるか、またはその薬学的に許容される塩である。
本明細書では、本明細書で開示される化合物、例えば式（Ｉ）の化合物を含む、脂質ナノ粒子（ＬＮＰ）も提供される。いくつかの実施形態では、ＬＮＰは、ヘルパー脂質、構造脂質、及びポリエチレングリコール（ＰＥＧ）脂質、例えば本明細書で開示されるＰＥＧ脂質を含む。いくつかの実施形態では、ＰＥＧ脂質は、式（Ａ’）の化合物：
Figure 2024508047000018
 またはその薬学的に許容される塩であり、式中、
ｎは、すべての端点を含む１０～２００の整数であり、
ＬＰ１’は結合、－Ｃ（Ｏ）－、－［（ＣＨ２）０－３－Ｃ（Ｏ）Ｏ］１－３－、－（ＣＨ２）０－３－Ｃ（Ｏ）Ｏ－（ＣＨ２）１－３－ＯＣ（Ｏ）－、または－Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｈ）－であり、
ＲＰ１’は、Ｃ５－Ｃ２５アルキルまたはＣ５－Ｃ２５アルケニルであり、
ＲＰ２’は、水素または－ＣＨ３である。
いくつかの実施形態では、ＰＥＧ脂質は、
ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－ＣＨ２Ｃ（Ｏ）Ｏ－（ＣＨ２）１７ＣＨ３［ｎは、平均で約４５である］、
Ｈ３ＣＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－ＣＨ２Ｃ（Ｏ）Ｏ－（ＣＨ２）１７ＣＨ３［ｎは、平均で約４５である］、
ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－ＣＨ２Ｃ（Ｏ）Ｏ－（ＣＨ２）１５ＣＨ３［ｎは、平均で約４５である］、
ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－ＣＨ２Ｃ（Ｏ）Ｏ－（ＣＨ２）１３ＣＨ３［ｎは、平均で約４５である］、及び
ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｈ）－（ＣＨ２）１７ＣＨ３［ｎは、平均で約４５である］
からなる群から選択される化合物、またはその薬学的に許容される塩である。
いくつかの実施形態では、ＰＥＧ脂質は、
ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－（ＣＨ２）１７ＣＨ３［ｎは、平均で約１００である］、
ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－（ＣＨ２）１７ＣＨ３［ｎは、平均で約２０である］、
ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－（ＣＨ２）１５ＣＨ３［ｎは、平均で約２０である］、及び
ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－Ｃ１８Ｈ３５［ｎは、平均で約２０である］
からなる群から選択される化合物、またはその薬学的に許容される塩である。
いくつかの実施形態では、ＰＥＧ脂質は、
ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－Ｃ（Ｏ）－（ＣＨ２）１４ＣＨ３［ｎは、平均で約１００である］、
ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－Ｃ（Ｏ）－（ＣＨ２）１４ＣＨ３［ｎは、平均で約５０である］、
ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－Ｃ（Ｏ）－（ＣＨ２）１４ＣＨ３［ｎは、平均で約４０である］、
ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－Ｃ（Ｏ）－（ＣＨ２）１６ＣＨ３［ｎは、平均で約１００である］、
ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－Ｃ（Ｏ）－（ＣＨ２）１６ＣＨ３［ｎは、平均で約５０である］、及び
ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－Ｃ（Ｏ）－（ＣＨ２）１６ＣＨ３［ｎは、平均で約４０である］
からなる群から選択される化合物、またはその薬学的に許容される塩である。
いくつかの実施形態では、ＰＥＧ脂質は、ＤＭＧ－ＰＥＧ（２０００）またはＤＰＧ－ＰＥＧ（２０００）である。
別の態様において、本明細書で提供されるのは、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）脂質、イオン化可能な脂質、ヘルパー脂質、及び構造脂質を含むＬＮＰであり、該ＬＮＰは、約０．００１％～約５％のＰＥＧ脂質のモル比を有し、該ＰＥＧ脂質は、式（Ａ”）の化合物：
Figure 2024508047000019
 またはその薬学的に許容される塩であり、式中、
ｎは、すべての端点を含む１０～２００の整数であり、
ＬＰ１”は結合、－［（ＣＨ２）０－３－Ｃ（Ｏ）Ｏ］１－３－、－（ＣＨ２）０－３－Ｃ（Ｏ）Ｏ－（ＣＨ２）１－３－ＯＣ（Ｏ）－、または－Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｈ）－であり、
ＲＰ１”は、Ｃ５－Ｃ２５アルキルまたはＣ５－Ｃ２５アルケニルであり、
ＲＰ２”は、水素または－ＣＨ３である。
いくつかの実施形態では、ＬＰ１”は結合、－ＣＨ２Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－ＣＨ２ＣＨ２Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－ＣＨ２Ｃ（Ｏ）ＯＣＨ２Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－ＣＨ２Ｃ（Ｏ）ＯＣＨ２ＣＨ２ＯＣ（Ｏ）－、または－Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｈ）－である。いくつかの実施形態では、ＰＥＧ脂質は、式（Ａ”－ａ）、式（Ａ”－ｂ）、式（Ａ”－ｃ）、式（Ａ”－ｃｄ）、式（Ａ”－ｅ）、もしくは式（Ａ”－ｆ）の化合物：
Figure 2024508047000020
 またはその薬学的に許容される塩である。
いくつかの実施形態では、ＲＰ１”は、Ｃ１４－Ｃ１８アルキルまたはＣ１４－Ｃ１８アルケニルである。いくつかの実施形態では、ＲＰ１”は、Ｃ１４アルキル、Ｃ１６アルキル、またはＣ１８アルキルである。
いくつかの実施形態では、ＰＥＧ脂質は、式（Ａ”－ｆ１）、式（Ａ”－ｆ２）、もしくは式（Ａ”－ｆ３）の化合物：
Figure 2024508047000021
 またはその薬学的に許容される塩である。
別の態様において、本明細書で提供されるのは、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）脂質、イオン化可能な脂質、ヘルパー脂質、構造脂質、及びウイルスゲノムをコードする核酸分子を含むＬＮＰであり、該ＬＮＰは、約０．００１％～約５％のＰＥＧ脂質のモル比を有し、該ＰＥＧ脂質は、式（Ｂ）の化合物：
Figure 2024508047000022
 またはその薬学的に許容される塩であり、式中、ｎは、すべての端点を含む１０～２００の整数であり、ＲＢ１は、Ｃ５－Ｃ２５アルキルまたはＣ５－Ｃ２５アルケニルである。いくつかの実施形態では、ＲＢ１は、Ｃ１５－Ｃ１７アルキルまたはＣ１５－Ｃ１７アルケニルである。いくつかの実施形態では、ＰＥＧ脂質は、式（Ｂ－ａ）もしくは式（Ｂ－ｂ）の化合物：
Figure 2024508047000023
 またはその薬学的に許容される塩である。
いくつかの実施形態では、ｎは、平均で約２０、約４０、約４５、約５０、約６８、約７５、または約１００である。いくつかの実施形態では、ＰＥＧ脂質は、約２００ダルトン～約１０，０００ダルトン、約５００ダルトン～約７，０００ダルトン、約８００ダルトン～約６，０００ダルトン、約１，０００ダルトン～約５，０００ダルトン、または約１，５００～約３，５００ダルトンの平均分子量を有するＰＥＧ部分を含む。いくつかの実施形態では、ＰＥＧ脂質は、約８００、約９００、約１，０００、約１，５００、約１，７５０、約２，０００、約２，２５０、約２，５００、約２，７５０、約３，０００、約３，２５０、約３，５００、約３，７５０、約４，０００、約４，５００、または約５，０００ダルトンの平均分子量を有するＰＥＧ部分を含む。いくつかの実施形態では、ＰＥＧ脂質は、約８００、約９００、約１，０００ダルトン、約１，５００、約２，０００、約２，５００、約３，０００、約３，５００、約４，０００、約４，５００、または約５，０００ダルトンの平均分子量を有するＰＥＧ部分を含む。
いくつかの実施形態では、ＰＥＧ脂質は、ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－（ＣＨ２）１７ＣＨ３［ｎは、平均で約１００である］、ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－（ＣＨ２）１７ＣＨ３［ｎは、平均で約２０である］、ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－（ＣＨ２）１５ＣＨ３［ｎは、平均で約２０である］、及びＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－Ｃ１８Ｈ３５［ｎは、平均で約２０である］からなる群から選択される。
いくつかの実施形態では、ＰＥＧ脂質は、ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－ＣＨ２Ｃ（Ｏ）Ｏ－（ＣＨ２）１７ＣＨ３［ｎは、平均で約４５である］、Ｈ３ＣＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－ＣＨ２Ｃ（Ｏ）Ｏ－（ＣＨ２）１７ＣＨ３［ｎは、平均で約４５である］、ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－ＣＨ２Ｃ（Ｏ）Ｏ－（ＣＨ２）１５ＣＨ３［ｎは、平均で約４５である］、ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－ＣＨ２Ｃ（Ｏ）Ｏ－（ＣＨ２）１３ＣＨ３［ｎは、平均で約４５である］、及びＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｈ）－（ＣＨ２）１７ＣＨ３［ｎは、平均で約４５である］からなる群から選択される化合物である。
いくつかの実施形態では、ＰＥＧ脂質は、ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－Ｃ（Ｏ）－（ＣＨ２）１４ＣＨ３［ｎは、平均で約１００である］、ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－Ｃ（Ｏ）－（ＣＨ２）１４ＣＨ３［ｎは、平均で約５０である］、ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－Ｃ（Ｏ）－（ＣＨ２）１４ＣＨ３［ｎは、平均で約４０である］、ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－Ｃ（Ｏ）－（ＣＨ２）１６ＣＨ３［ｎは、平均で約１００である］、ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－Ｃ（Ｏ）－（ＣＨ２）１６ＣＨ３［ｎは、平均で約５０である］、及びＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－Ｃ（Ｏ）－（ＣＨ２）１６ＣＨ３［ｎは、平均で約４０である］からなる群から選択される。
いくつかの実施形態では、イオン化可能な脂質は、ＤＬｉｎＤＭＡ、ＤＬｉｎ－ＫＣ２－ＤＭＡ、ＤＬｉｎ－ＭＣ３－ＤＭＡ（ＭＣ３）、ＣＯＡＴＳＯＭＥ（登録商標）ＳＳ－ＬＣ（旧名：ＳＳ－１８／４ＰＥ－１３）、ＣＯＡＴＳＯＭＥ（登録商標）ＳＳ－ＥＣ（旧名：ＳＳ－３３／４ＰＥ－１５）、ＣＯＡＴＳＯＭＥ（登録商標）ＳＳ－ＯＣ、ＣＯＡＴＳＯＭＥ（登録商標）ＳＳ－ＯＰ、ジ（（Ｚ）－ノナ－２－エン－１－イル）９－（（４－ジメチルアミノ）ブタノイル）オキシ）ヘプタデカンジオエート（Ｌ－３１９）、Ｎ－（２，３－ジオレオイルオキシ）プロピル）－Ｎ，Ｎ，Ｎ－トリメチルアンモニウムクロリド（ＤＯＴＡＰ）、またはそれらの混合物から選択される。
いくつかの実施形態では、イオン化可能な脂質は、式（ＩＩ－１）の化合物：
Figure 2024508047000024
 またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物であり、式中、
Ｒ１ａ及びＲ１ｂは、各々独立的に、Ｃ１－Ｃ８脂肪族または－Ｏ（Ｃ１－Ｃ８脂肪族）－であり、ここで、Ｏ原子は、存在する場合、ピペリジン環に結合しており、
Ｘａ及びＸｂは、各々独立的に、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－＊、－ＯＣ（Ｏ）－＊、－Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒｘ １）－＊、－Ｎ（Ｒｘ １）Ｃ（Ｏ）－＊、－Ｏ（Ｃ＝Ｏ）Ｎ（Ｒｘ １）－＊、－Ｎ（Ｒｘ １）（Ｃ＝Ｏ）Ｏ－＊、または－Ｏ－であり、ここで、－＊は、それぞれＲ２ａまたはＲ２ｂへの結合点を示し、Ｒｘ １の各存在は、水素及び置換されていてもよいＣ１－Ｃ４アルキルから独立的に選択され、
Ｒ２ａ及びＲ２ｂは、各々独立的に、ステロール残基、脂溶性ビタミン残基、またはＣ１３－Ｃ２３脂肪族である。
いくつかの実施形態では、イオン化可能な脂質は、式（ＩＩ－２）の化合物：
Figure 2024508047000025
 またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物であり、式中、
Ｒ１ａ’及びＲ１ｂ’は、各々独立的に、Ｃ１－Ｃ８アルキレンまたは－Ｏ（Ｃ１－Ｃ８アルキレン）であり、ここで、Ｏ原子は、存在する場合、ピペリジン環に結合しており、
Ｙａ’及びＹｂ’は、各々独立的に、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－＊、－ＯＣ（Ｏ）－＊、－Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒｘ １）－＊、－Ｎ（Ｒｘ １）Ｃ（Ｏ）－＊、－Ｏ（Ｃ＝Ｏ）Ｎ（Ｒｘ １）－＊、－Ｎ（Ｒｘ １）（Ｃ＝Ｏ）Ｏ－＊、－Ｎ（Ｒｘ １）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒｘ １）－、または－Ｏ－であり、ここで、－＊は、Ｒ２ａまたはＲ２ｂへの結合点を示し、Ｒｘ １の各存在は、水素及び置換されていてもよいＣ１－Ｃ４アルキルから独立的に選択され、
Ｚａ’及びＺｂ’は、各々独立的に、置換されていてもよいアリーレン－Ｃ０－Ｃ８アルキレンまたは置換されていてもよいアリーレン－Ｃ０－Ｃ８ヘテロアルキレンであり、ここで、アルキレンまたはヘテロアルキレン基は、それぞれＹａ’及びＹｂ’に結合しており、
Ｒ２ａ’及びＲ２ｂ’は、各々独立的に、ステロール残基、脂溶性ビタミン残基、またはＣ１２－Ｃ２２脂肪族である。
いくつかの実施形態では、イオン化可能な脂質は、式（ＩＩ－１ａ）の化合物である。
Figure 2024508047000026
いくつかの実施形態では、イオン化可能な脂質は、式（ＩＩ－２ａ）の化合物である。
Figure 2024508047000027
いくつかの実施形態では、イオン化可能な脂質は、本明細書で開示される化合物、例えば、式（Ｉ）の化合物である。
いくつかの実施形態では、ヘルパー脂質は、ジステアロイル－ｓｎ－グリセロ－ホスホエタノールアミン、ジステアロイルホスファチジルコリン（ＤＳＰＣ）、ジオレオイルホスファチジルコリン（ＤＯＰＣ）、ジパルミトイルホスファチジルコリン（ＤＰＰＣ）、ジオレオイルホスファチジルグリセロール（ＤＯＰＧ）、ジパルミトイルホスファチジルグリセロール（ＤＰＰＧ）、ジオレオイル－ホスファチジルエタノールアミン（ＤＯＰＥ）、パルミトイルオレオイルホスファチジルコリン（ＰＯＰＣ）、パルミトイルオレオイルホスファチジルエタノールアミン（ＰＯＰＥ）、ジオレオイルホスファチジルエタノールアミン４－（Ｎ－マレイミドメチル）－シクロヘキサン－ｌ－カルボキシレート（ＤＯＰＥ－ｍａｌ）、ジパルミトイルホスファチジルエタノールアミン（ＤＰＰＥ）、ジミリストイルホスホエタノールアミン（ＤＭＰＥ）、ジステアロイル－ホスファチジル－エタノールアミン（ＤＳＰＥ）、モノメチル－ホスファチジルエタノールアミン、ジメチルホスファチジルエタノールアミン、１８－１－ｔｒａｎｓ ＰＥ、ｌ－ステアロイル－２－オレオイルホスファチジエタノールアミン（ＳＯＰＥ）、水素添加大豆ホスファチジルコリン（ＨＳＰＣ）、卵ホスファチジルコリン（ＥＰＣ）、ジオレオイルホスファチジルセリン（ＤＯＰＳ）、スフィンゴミエリン（ＳＭ）、ジミリストイルホスファチジルコリン（ＤＭＰＣ）、ジミリストイルホスファチジルグリセロール（ＤＭＰＧ）、ジステアロイルホスファチジルグリセロール（ＤＳＰＧ）、ジエルコイルホスファチジルコリン（ＤＥＰＣ）、パルミトイルオレイオルホスファチジルグリセロール（ＰＯＰＧ）、ジエライドイル－ホスファチジルエタノールアミン（ＤＥＰＥ）、レシチン、ホスファチジルエタノールアミン、リゾレシチン、リゾホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルセリン、ホスファチジルイノシトール、スフィンゴミエリン、卵スフィンゴミエリン（ＥＳＭ）、セファリン、カルジオリピン、ホスファチジン酸、セレブロシド、ジセチルホスフェート、リゾホスファチジルコリン、ジリノレオイルホスファチジルコリン、またはそれらの混合物から選択される。いくつかの実施形態では、ヘルパー脂質は、ＤＳＰＣである。
いくつかの実施形態では、構造脂質はステロイドである。いくつかの実施形態では、構造脂質はコレステロールである。
いくつかの実施形態では、ＬＮＰは、式（Ａ”）のＰＥＧ脂質または本明細書で開示されるイオン化可能な脂質（例えば、式（Ｉ）のイオン化可能な脂質）を欠いている対照ＬＮＰと比較して低減した免疫応答をｉｎ ｖｉｖｏで誘導する。いくつかの実施形態では、免疫応答は、ＬＮＰの加速血液クリアランス（ＡＢＣ）である。いくつかの実施形態では、免疫応答は、ＩｇＭ応答である。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供されるＬＮＰは、式（Ｉ）の化合物と、コレステロールである構造脂質と、ＤＳＰＣであるヘルパー脂質と、式（Ａ”）の化合物であるＰＥＧ脂質とを含む。いくつかの実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、
Figure 2024508047000028
 からなる群から選択されるか、またはその薬学的に許容される塩である。いくつかの実施形態では、ＰＥＧ脂質は、ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－（ＣＨ２）１７ＣＨ３［ｎは、平均で約１００である］、ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－ＣＨ２Ｃ（Ｏ）Ｏ－（ＣＨ２）１３ＣＨ３［ｎは、平均で約４５である］、及びＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－ＣＨ２Ｃ（Ｏ）Ｏ－（ＣＨ２）１７ＣＨ３［ｎは、平均で約４５である］からなる群から選択される化合物である。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供されるＬＮＰは、式（ＩＩ－１ａ）の化合物と、コレステロールである構造脂質と、ＤＳＰＣであるヘルパー脂質と、式（Ａ”）の化合物であるＰＥＧ脂質とを含む。いくつかの実施形態では、ＰＥＧ脂質は、ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－ＣＨ２Ｃ（Ｏ）Ｏ－（ＣＨ２）１７ＣＨ３［ｎは、平均で約４５である］、Ｈ３ＣＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－ＣＨ２Ｃ（Ｏ）Ｏ－（ＣＨ２）１７ＣＨ３［ｎは、平均で約４５である］、ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－ＣＨ２Ｃ（Ｏ）Ｏ－（ＣＨ２）１５ＣＨ３［ｎは、平均で約４５である］、ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－ＣＨ２Ｃ（Ｏ）Ｏ－（ＣＨ２）１３ＣＨ３［ｎは、平均で約４５である］、及びＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｈ）－（ＣＨ２）１７ＣＨ３［ｎは、平均で約４５である］からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、ＰＥＧ脂質は、ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－（ＣＨ２）１７ＣＨ３［ｎは、平均で約１００である］である。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供されるＬＮＰは、式（ＩＩ－１ａ）の化合物と、コレステロールである構造脂質と、ＤＳＰＣであるヘルパー脂質と、式（Ｂ）の化合物であるＰＥＧ脂質とを含む。いくつかの実施形態では、ＰＥＧ脂質は、ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－Ｃ（Ｏ）－（ＣＨ２）１６ＣＨ３［ｎは、平均で約１００である］、ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－Ｃ（Ｏ）－（ＣＨ２）１６ＣＨ３［ｎは、平均で約５０である］、及びＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－Ｃ（Ｏ）－（ＣＨ２）１６ＣＨ３［ｎは、平均で約４０である］からなる群から選択される。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供されるＬＮＰは、約４０％～約７０％、例えば約４５％～約５５％、または約４９％～約６４％のモル比の本明細書で開示されるイオン化可能な脂質、例えば、式（Ｉ）の化合物を含む。いくつかの実施形態では、ＬＮＰは、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約５８％、または約６０％のモル比の本明細書で開示されるイオン化可能な脂質、例えば、式（Ｉ）の化合物を含む。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供されるＬＮＰは、約０．１％～約４％のモル比、例えば約０．２％～約０．８ｍｏｌ％、約０．４％～約０．６ｍｏｌ％、約０．７％～約１．３％、約１．２％～約１．８％、または約１％～約３．５ｍｏｌ％のＰＥＧ脂質を含む。いくつかの実施形態では、ＬＮＰは、約０．２５％、約０．５％、約１．５％、または約３％のモル比のＰＥＧ脂質を含む。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供されるＬＮＰは、約５％～約５０％、例えば約５％～約１０％、約２５％～約３５％、または約３５％～約５０％のモル比の構造脂質を含む。いくつかの実施形態では、ＬＮＰは、約２０％、約２２．５％、約２５％、約２７．５％、約３０％、約３２．５％、約３５％、約３７．５％、約４０％、約４２．５％、約４５％、または約５０％のモル比の構造脂質を含む。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供されるＬＮＰは、約５％～約５０％、例えば約５％～約１０％、約１０％～約２５％、または約２５％～約５０％のモル比のヘルパー脂質を含む。いくつかの実施形態では、ＬＮＰは、約５％、約７％、約９％、約１２％、約１５％、約２０％、約２５％、または約３０％のモル比のヘルパー脂質を含む。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供されるＬＮＰは、約４５％～約５５％のモル比のイオン化可能な脂質と、約５％～約９％のモル比のヘルパー脂質と、約３６％～約４４％のモル比の構造脂質と、約２．５％～約３．５％のモル比のＰＥＧ脂質とを含む。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供されるＬＮＰは、約４５％～約５５％のモル比の本明細書で開示されるイオン化可能な脂質、例えば、式（Ｉ）の化合物と、約５％～約９％のモル比のＤＳＰＣと、約３６％～約４４％のモル比のコレステロールと、約２．５％～約３．５％のモル比のＤＭＧ－ＰＥＧ（２０００）とを含む。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供されるＬＮＰは、約４９％～約６０％のモル比の本明細書で開示されるイオン化可能な脂質、例えば、式（Ｉ）の化合物と、約１８％～約２２％のモル比のヘルパー脂質と、約２２％～約２８％のモル比の構造脂質と、例えば、ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－ＣＨ２Ｃ（Ｏ）Ｏ－（ＣＨ２）１７ＣＨ３［ｎは、平均で約４５である］、Ｈ３ＣＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－ＣＨ２Ｃ（Ｏ）Ｏ－（ＣＨ２）１７ＣＨ３［ｎは、平均で約４５である］、ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－ＣＨ２Ｃ（Ｏ）Ｏ－（ＣＨ２）１５ＣＨ３［ｎは、平均で約４５である］、ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－ＣＨ２Ｃ（Ｏ）Ｏ－（ＣＨ２）１３ＣＨ３［ｎは、平均で約４５である］、及びＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｈ）－（ＣＨ２）１７ＣＨ３［ｎは、平均で約４５である］からなる群から選択される、約０．２％～約０．８％のモル比のＰＥＧ脂質とを含む。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供されるＬＮＰは、約４４％～約５４％のモル比の本明細書で開示されるイオン化可能な脂質、例えば、式（ＩＩ－１ａ）の化合物と、約１９％～約２５％のモル比のヘルパー脂質と、約２５％～約３３％のモル比の構造脂質と、例えば、ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－（ＣＨ２）１７ＣＨ３［ｎは、平均で約１００である］、ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－（ＣＨ２）１７ＣＨ３［ｎは、平均で約２０である］、ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－（ＣＨ２）１５ＣＨ３［ｎは、平均で約２０である］、ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－Ｃ１８Ｈ３５［ｎは、平均で約２０である］、ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－Ｃ（Ｏ）－（ＣＨ２）１４ＣＨ３［ｎは、平均で約１００である］、ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－Ｃ（Ｏ）－（ＣＨ２）１４ＣＨ３［ｎは、平均で約５０である］、ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－Ｃ（Ｏ）－（ＣＨ２）１４ＣＨ３［ｎは、平均で約４０である］、ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－Ｃ（Ｏ）－（ＣＨ２）１６ＣＨ３［ｎは、平均で約１００である］、ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－Ｃ（Ｏ）－（ＣＨ２）１６ＣＨ３［ｎは、平均で約５０である］、及びＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－Ｃ（Ｏ）－（ＣＨ２）１６ＣＨ３［ｎは、平均で約４０である］からなる群から選択される、約０．２％～約０．８％のモル比のＰＥＧ脂質とを含む。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供されるＬＮＰは、約４４％～約５４％のモル比の本明細書で開示されるイオン化可能な脂質、例えば、式（ＩＩ－１ａ）の化合物と、約１９％～約２５％のモル比のヘルパー脂質と、約２４％～約３２％のモル比の構造脂質と、例えば、ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－（ＣＨ２）１７ＣＨ３［ｎは、平均で約１００である］、ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－（ＣＨ２）１７ＣＨ３［ｎは、平均で約２０である］、ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－（ＣＨ２）１５ＣＨ３［ｎは、平均で約２０である］、ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－Ｃ１８Ｈ３５［ｎは、平均で約２０である］、ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－Ｃ（Ｏ）－（ＣＨ２）１４ＣＨ３［ｎは、平均で約１００である］、ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－Ｃ（Ｏ）－（ＣＨ２）１４ＣＨ３［ｎは、平均で約５０である］、ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－Ｃ（Ｏ）－（ＣＨ２）１４ＣＨ３［ｎは、平均で約４０である］、ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－Ｃ（Ｏ）－（ＣＨ２）１６ＣＨ３［ｎは、平均で約１００である］、ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－Ｃ（Ｏ）－（ＣＨ２）１６ＣＨ３［ｎは、平均で約５０である］、及びＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－Ｃ（Ｏ）－（ＣＨ２）１６ＣＨ３［ｎは、平均で約４０である］からなる群から選択される、約１．２％～約１．８％のモル比のＰＥＧ脂質とを含む。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供されるＬＮＰは、約４４％～約５４％のモル比の本明細書で開示されるイオン化可能な脂質のイオン化可能な脂質、例えば、式（ＩＩ－１ａ）の化合物と、約８％～約１４％のモル比のヘルパー脂質と、約３５％～約４３％のモル比の構造脂質と、例えば、ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－（ＣＨ２）１７ＣＨ３［ｎは、平均で約１００である］、ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－（ＣＨ２）１７ＣＨ３［ｎは、平均で約２０である］、ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－（ＣＨ２）１５ＣＨ３［ｎは、平均で約２０である］、ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－Ｃ１８Ｈ３５［ｎは、平均で約２０である］、ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－Ｃ（Ｏ）－（ＣＨ２）１４ＣＨ３［ｎは、平均で約１００である］、ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－Ｃ（Ｏ）－（ＣＨ２）１４ＣＨ３［ｎは、平均で約５０である］、ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－Ｃ（Ｏ）－（ＣＨ２）１４ＣＨ３［ｎは、平均で約４０である］、ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－Ｃ（Ｏ）－（ＣＨ２）１６ＣＨ３［ｎは、平均で約１００である］、ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－Ｃ（Ｏ）－（ＣＨ２）１６ＣＨ３［ｎは、平均で約５０である］、及びＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－Ｃ（Ｏ）－（ＣＨ２）１６ＣＨ３［ｎは、平均で約４０である］からなる群から選択される、約１．２％～約１．８％のモル比のＰＥＧ脂質とを含む。
いくつかの実施形態では、ＬＮＰは、ペイロード分子をカプセル化する。いくつかの実施形態では、ペイロード分子は、核酸、アニオン性タンパク質、アニオン性ペプチド、またはそれらの組み合わせのうちの１つ以上を含む。いくつかの実施形態では、ペイロード分子は核酸分子を含む。いくつかの実施形態では、核酸分子は、一本鎖ＲＮＡ（ｓｓＲＮＡ）、ｓｉＲＮＡ、マイクロＲＮＡ、ｍＲＮＡ、環状ＲＮＡ、低分子活性化ＲＮＡ、ＣＲＩＳＰＲ用ガイドＲＮＡ、自己増幅ＲＮＡ、ウイルスＲＮＡ（ｖＲＮＡ）、一本鎖ＤＮＡ（ｓｓＤＮＡ）、二本鎖ＤＮＡ（ｄｓＤＮＡ）、相補的ＤＮＡ（ｃＤＮＡ）、閉鎖環状ＤＮＡ（ｃｃＤＮＡ）、レプリコン、またはそれらの組み合わせを含む。いくつかの実施形態では、核酸分子は、１つ以上の治療用タンパク質をコードするヌクレオチド配列を含む。いくつかの実施形態では、治療用タンパク質は、サイトカイン（例えば、エリスロポエチン）、凝固因子、抗体、二重特異的Ｔ細胞エンゲージャー、またはそれらの組み合わせである。いくつかの実施形態では、核酸分子は、ウイルスゲノムに由来するヌクレオチド配列を含む。いくつかの実施形態では、ウイルスゲノムは、プラス一本鎖ＲＮＡウイルスゲノムプラス一本鎖ＲＮＡウイルスゲノムである。いくつかの実施形態では、ウイルスゲノムは、腫瘍溶解性ウイルス（例えば、コクサッキーウイルスＡ２１（ＣＶＡ２１）、セネカバレーウイルス（ＳＶＶ）、トガウイルス科、またはアルファウイルス（例えば、シンドビスウイルス、セムリキ森林ウイルス、ロスリバーウイルス、またはチクングニアウイルス））をコードする。いくつかの実施形態では、ペイロード分子は、コクサッキーウイルスをコードする合成ＲＮＡウイルスゲノムを含み、任意で、コクサッキーウイルスはＣＶＡ２１株である。いくつかの実施形態では、ペイロード分子は、ＳＶＶをコードする合成ＲＮＡウイルスゲノムを含む。いくつかの実施形態では、ペイロード分子は、外因性タンパク質をさらにコードし、該外因性タンパク質は、蛍光タンパク質、酵素タンパク質、サイトカイン、ケモカイン、細胞表面受容体に結合することができる抗原結合分子、または細胞表面受容体のリガンドである。いくつかの実施形態では、ウイルスゲノムは、プラス一本鎖ＲＮＡウイルスゲノムである。いくつかの実施形態では、ウイルスゲノムは、腫瘍溶解性ウイルス（例えば、コクサッキーウイルスＡ２１（ＣＶＡ２１）またはセネカバレーウイルス（ＳＶＶ）、トガウイルス科、またはアルファウイルス（例えば、シンドビスウイルス、セムリキ森林ウイルス、ロスリバーウイルス、またはチクングニアウイルス））をコードする。いくつかの実施形態では、ウイルスゲノムは、コクサッキーウイルスをコードする合成ＲＮＡウイルスゲノムであり、任意で、コクサッキーウイルスはＣＶＡ２１株である。いくつかの実施形態では、ウイルスゲノムは、ＳＶＶをコードする合成ＲＮＡウイルスゲノムである。いくつかの実施形態では、ウイルスゲノムは、外因性タンパク質をさらに含み、該外因性タンパク質は、蛍光タンパク質、酵素タンパク質、サイトカイン、ケモカイン、細胞表面受容体に結合することができる抗原結合分子、または細胞表面受容体のリガンドである。
いくつかの実施形態では、ＬＮＰは、約１～約２５の脂質窒素対リン酸（Ｎ：Ｐ）比を有する。いくつかの実施形態では、ＬＮＰは、約１４のＮ：Ｐ比を有する。いくつかの実施形態では、ＬＮＰは、約９のＮ：Ｐ比を有する。
本明細書では、本明細書で開示される化合物、または本明細書で開示されるＬＮＰ、及び薬学的に許容される賦形剤、担体、または希釈剤を含む、医薬組成物も提供される。
本明細書では、（１）ペイロード分子、及び（２）本明細書で開示されるＬＮＰを含む医薬組成物も提供される。いくつかの実施形態では、ペイロード分子は核酸分子を含む。いくつかの実施形態では、ペイロード分子は、コクサッキーウイルスまたはＳＶＶをコードする合成ＲＮＡウイルスゲノムを含む。いくつかの実施形態では、ＬＮＰに含まれるウイルスゲノムは、コクサッキーウイルスまたはＳＶＶをコードする合成ＲＮＡウイルスゲノムである。いくつかの実施形態では、医薬組成物は、薬学的に許容される担体をさらに含む。
いくつかの実施形態では、本開示の医薬組成物は、所定の閾値のものに匹敵するｉｎ ｖｉｖｏ半減期を有する。いくつかの実施形態では、本開示の医薬組成物は、所定の閾値のものよりも長いｉｎ ｖｉｖｏ半減期を有する。いくつかの実施形態では、本開示の医薬組成物は、所定の閾値のものよりも短いｉｎ ｖｉｖｏ半減期を有する。いくつかの実施形態では、医薬組成物は、所定の閾値のものに匹敵するｉｎ ｖｉｖｏのＡＵＣを有する。いくつかの実施形態では、医薬組成物は、所定の閾値のものよりも大きいｉｎ ｖｉｖｏのＡＵＣを有する。いくつかの実施形態では、医薬組成物は、所定の閾値のものよりも小さいｉｎ ｖｉｖｏのＡＵＣを有する。いくつかの実施形態では、所定の閾値は、ＬＮＰが式（Ａ’）のＰＥＧ脂質または本明細書で開示されるイオン化可能な脂質（例えば、式（Ｉ）のイオン化可能な脂質）を欠いていることを除いては同じペイロード分子及びＬＮＰを含む対照組成物で決定される。
いくつかの実施形態では、ＬＮＰは、約５０ｎｍ、約６０ｎｍ、約７０ｎｍ、約８０ｎｍ、約９０ｎｍ、約１００ｎｍ、約１１０ｎｍ、約１２０ｎｍ、または約１２５ｎｍの平均直径を有する。いくつかの実施形態では、ＬＮＰによるペイロード分子のカプセル化効率は、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９１％、約９２％、約９３％、約９４％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％、約９９％、または１００％である。いくつかの実施形態では、医薬組成物は、約１０ｍＭ、約２０ｍＭ、約３０ｍＭ、約４０ｍＭ、または約５０ｍＭの総脂質濃度を有する。いくつかの実施形態では、医薬組成物は、約２．５、約３、約３．５、約４、約４．５、約５、約５．５、または約６のｐＨで製剤化されている。
いくつかの実施形態では、医薬組成物は複数投与用に製剤化されている。いくつかの実施形態では、後続投与は、１回目の投与の少なくとも３日後、少なくとも５日後、少なくとも７日後、少なくとも９日後、少なくとも１１日後、少なくとも１４日後、または少なくとも２１日後に投与される。
本明細書では、疾患または障害を処置する方法であって、それを必要とする患者に、本明細書で開示されるＬＮＰまたは本明細書で開示される医薬組成物を投与することを含む方法も提供される。
いくつかの実施形態では、疾患または障害は、がんである。いくつかの実施形態では、がんは、肺癌、乳癌、卵巣癌、子宮頸癌、前立腺癌、精巣癌、大腸癌、結腸癌、膵臓癌、肝臓癌、腎細胞癌、胃癌、頭頸部癌、甲状腺癌、悪性神経膠腫、膠芽腫、メラノーマ、Ｂ細胞慢性リンパ球性白血病、多発性骨髄腫、意義不明の単クローン性高ガンマグロブリン血症（ＭＧＵＳ）、メルケル細胞癌、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、肉腫、神経芽細胞腫、神経内分泌癌、横紋筋肉腫、髄芽腫、膀胱癌、及び辺縁帯リンパ腫（ＭＺＬ）からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、がんは、肺癌、乳癌、結腸癌、膵臓癌、膀胱癌、腎細胞癌、卵巣癌、胃癌、及び肝臓癌からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、がんは、腎細胞癌、肺癌、または肝臓癌である。いくつかの実施形態では、肺癌は、小細胞肺癌または非小細胞肺癌（例えば、肺扁平上皮癌または肺腺癌）である。いくつかの実施形態では、肝臓癌は、肝細胞癌（ＨＣＣ）（例えば、Ｂ型肝炎ウイルス関連ＨＣＣ）である。いくつかの実施形態では、前立腺癌は、処置下で発現した神経内分泌前立腺癌である。いくつかの実施形態では、がんは、肺癌、肝臓癌、前立腺癌（例えば、ＣＲＰＣ－ＮＥ）、膀胱癌、膵臓癌、結腸癌、胃癌、乳癌、神経芽細胞腫、腎細胞癌、卵巣癌、横紋筋肉腫、髄芽腫、神経内分泌癌、メルケル細胞癌、またはメラノーマである。いくつかの実施形態では、がんは、小細胞肺癌（ＳＣＬＣ）または神経芽細胞腫である。
いくつかの実施形態では、医薬組成物の投与により、ペイロードが腫瘍細胞中に送達される。いくつかの実施形態では、医薬組成物の投与により、腫瘍成長が阻害される。
いくつかの実施形態では、ＬＮＰまたは医薬組成物は、非経口投与される。いくつかの実施形態では、ＬＮＰまたは医薬組成物は、腫瘍内及び／または静脈内に投与される。
Ａは、異なる凍結保護剤をスパイクしたＬＮＰ組成物の動的光散乱実験の結果を示すグラフである。Ｂは、ＲｉｂｏＧｒｅｅｎによって測定されたこれらのＬＮＰ組成物のカプセル化効率を示すグラフである。
Ａは、濃縮後または透析後のＬＮＰ組成物の動的光散乱実験の結果を示すグラフである。Ｂは、ＲｉｂｏＧｒｅｅｎによって測定されたこれらのＬＮＰ組成物のカプセル化効率を示すグラフである。
Ａは、ＰＥＧ脂質としてＰＥＧ２ｋ－ＤＰＧを含むＬＮＰ組成物のマウスにおけるＰＫ研究の結果を示すグラフである。Ｂは、ＰＥＧ脂質としてＢｒｉｊ Ｓ１００を含むＬＮＰ組成物のマウスにおけるＰＫ研究の結果を示すグラフである。
Ａは、本開示のＰＥＧ脂質を含むＬＮＰ組成物の動的光散乱実験の結果を示すグラフである。Ｂは、ＲｉｂｏＧｒｅｅｎによって測定されたこれらのＬＮＰ組成物のカプセル化効率を示すグラフである。
Ａは、本開示のＬＮＰ組成物を繰り返し投薬した際の腫瘍の成長を示すＨ４４６マウス腫瘍モデルの結果を示すグラフである。Ｂは、ＬＮＰ組成物を投与した際のＨ４４６マウス腫瘍モデルの体重変化を示すグラフである。
Ａは、本開示のＬＮＰ組成物を繰り返し投薬した際の腫瘍の成長を示すＨ４４６マウス腫瘍モデルの結果を示すグラフである。Ｂは、ＬＮＰ組成物を投与した際のＨ４４６マウス腫瘍モデルの体重変化を示すグラフである。
Ａは、Ｂｒｉｊ Ｓ１００またはＭｙｒｊ Ｓ４０を含むＬＮＰ組成物の動的光散乱実験の結果を示すグラフである。Ｂは、ＲｉｂｏＧｒｅｅｎによって測定されたこれらのＬＮＰ組成物のカプセル化効率を示すグラフである。
本開示のＬＮＰ組成物を繰り返し投薬した際の腫瘍の成長を示すＳＫ－ＭＥＬ－２８マウス腫瘍モデルの結果を示す。 本開示のＬＮＰ組成物を投与した際のＳＫ－ＭＥＬ－２８マウス腫瘍モデルの体重変化を示す。 本開示のＬＮＰ組成物を繰り返し投薬した際の腫瘍の成長を示すＳＫ－ＭＥＬ－２８マウス腫瘍モデルの結果を示す。 本開示のＬＮＰ組成物を投与した際のＳＫ－ＭＥＬ－２８マウス腫瘍モデルの体重変化を示す。 ＣＶＡ２１複製に関するＲＴ－ｑＰＣＲ測定値を示す。
ＬＮＰ／ピコルナウイルスＲＮＡ組成物及び作用様式の概略表現を示す。ＬＮＰ／ピコルナウイルスＲＮＡが全身投与され、ピコルナウイルスＲＮＡゲノムが許容性腫瘍細胞に送達され、ここでそれらが複製してピコルナウイルスビリオンを産生する。次いでピコルナウイルス感染は近隣の腫瘍細胞に広がり、腫瘍溶解及び抗ウイルス免疫応答を誘起する。
Ａ及びＢは、ＬＮＰ組成物の動的光散乱実験で決定された粒径（Ａ）及び多分散指数（Ｂ）を示す。Ｃは、ＲｉｂｏＧｒｅｅｎによって測定されたこれらのＬＮＰ組成物のカプセル化効率を示す。
Ａ及びＢは、タンジェンシャルフロー濾過（ＴＦＦ）またはオリゴ－ｄＴクロマトグラフィー及び逆相クロマトグラフィーによって精製されたＳＶＶ－ＲＮＡをカプセル化するＬＮＰの動的光散乱実験で決定された粒径（Ａ）及び多分散指数（Ｂ）を示す。Ｃは、ＲｉｂｏＧｒｅｅｎによって測定されたこれらのＬＮＰ組成物のカプセル化効率を示す。
Ａ及びＢは、様々なＲＮＡ酸性化緩衝液を用いて作製されたＣＡＴ４及びＣＡＴ５のＬＮＰ組成物の動的光散乱実験で決定された粒径（Ａ）及び多分散指数（Ｂ）を示す。Ｃは、ＲｉｂｏＧｒｅｅｎによって測定されたこれらのＬＮＰ組成物のカプセル化効率を示す。
Ａ及びＢは、ＬＮＰ組成物の動的光散乱実験で決定された粒径（Ａ）及び多分散指数（Ｂ）を示す。Ｃは、ＲｉｂｏＧｒｅｅｎによって測定されたこれらのＬＮＰ組成物のカプセル化効率を示す。
Ａは、－２０℃で貯蔵したＬＮＰ組成物の動的光散乱実験で決定された粒径（左）及びＲｉｂｏＧｒｅｅｎによって測定されたカプセル化効率（右）を示す。Ｂは、－８０℃で貯蔵したＬＮＰ組成物の動的光散乱実験で決定された粒径（左）及びＲｉｂｏＧｒｅｅｎによって測定されたカプセル化効率（右）を示す。
ＬＮＰ製剤の製剤化プロセスの概略表現を示す。
それぞれのＬＮＰ製剤の投薬９６時間後のＮａｎｏＬｕｃルシフェラーゼ活性化によって生成された発光によって測定されたＲＮＡレベルを示す。 それぞれのＬＮＰ製剤の投薬９６時間後のＮａｎｏＬｕｃルシフェラーゼ活性化によって生成された発光によって測定されたＲＮＡレベルを示す。 それぞれのＬＮＰ製剤の投薬９６時間後のＮａｎｏＬｕｃルシフェラーゼ活性化によって生成された発光によって測定されたＲＮＡレベルを示す。
それぞれのＬＮＰ製剤の投薬７２時間後のＮａｎｏＬｕｃルシフェラーゼ活性化によって生成された発光によって測定されたＲＮＡレベルを示す。 それぞれのＬＮＰ製剤の投薬７２時間後のＮａｎｏＬｕｃルシフェラーゼ活性化によって生成された発光によって測定されたＲＮＡレベルを示す。 それぞれのＬＮＰ製剤の投薬７２時間後のＮａｎｏＬｕｃルシフェラーゼ活性化によって生成された発光によって測定されたＲＮＡレベルを示す。
それぞれのＬＮＰ製剤で処置されたマウスの処置期間にわたる腫瘍体積（左）及び体重変化（右）を示す。 それぞれのＬＮＰ製剤で処置されたマウスの処置期間にわたる腫瘍体積（左）及び体重変化（右）を示す。 それぞれのＬＮＰ製剤で処置されたマウスの処置期間にわたる腫瘍体積（左）及び体重変化（右）を示す。 それぞれのＬＮＰ製剤で処置されたマウスの処置期間にわたる腫瘍体積（左）及び体重変化（右）を示す。 それぞれのＬＮＰ製剤で処置されたマウスの処置期間にわたる腫瘍体積（左）及び体重変化（右）を示す。
Ａは、それぞれのＬＮＰ製剤の投薬７２時間後のＮａｎｏＬｕｃルシフェラーゼ活性化によって生成された発光によって測定されたＲＮＡレベルを示す。Ｂは、それぞれのＬＮＰ製剤で処置されたマウスの処置期間にわたる腫瘍体積（右）及び体重変化（左）を示す。
ＬＣ－ＭＳによって測定された、処置マウスの血漿中の、ＬＮＰに含まれるイオン化可能な脂質（ＳＳ－ＯＣ）の濃度を示す。 ＬＣ－ＭＳによって測定された、処置マウスの血漿中の、ＬＮＰに含まれるイオン化可能な脂質（ＳＳ－ＯＣ）の濃度を示す。 ＬＣ－ＭＳによって測定された、処置マウスの血漿中の、ＬＮＰに含まれるイオン化可能な脂質（ＳＳ－ＯＣ）の濃度を示す。 ＬＣ－ＭＳによって測定された、処置マウスの血漿中の、ＬＮＰに含まれるイオン化可能な脂質（ＳＳ－ＯＣ）の濃度を示す。 ＬＣ－ＭＳによって測定された、処置マウスの血漿中の、ＬＮＰに含まれるイオン化可能な脂質（ＳＳ－ＯＣ）の濃度を示す。
ＬＣ－ＭＳによって測定された、処置マウスの血漿中の、ＬＮＰに含まれるイオン化可能な脂質（ＳＳ－ＯＣ）の濃度を示す。 ＬＣ－ＭＳによって測定された、処置マウスの血漿中の、ＬＮＰに含まれるイオン化可能な脂質（ＳＳ－ＯＣ）の濃度を示す。 ＬＣ－ＭＳによって測定された、処置マウスの血漿中の、ＬＮＰに含まれるイオン化可能な脂質（ＳＳ－ＯＣ）の濃度を示す。 ＬＣ－ＭＳによって測定された、処置マウスの血漿中の、ＬＮＰに含まれるイオン化可能な脂質（ＳＳ－ＯＣ）の濃度を示す。
ＬＣ－ＭＳによって測定された、処置マウスの血漿中の、ＬＮＰに含まれるイオン化可能な脂質（ＳＳ－ＯＣまたはＣＡＴ７）の濃度を示す。 ＬＣ－ＭＳによって測定された、処置マウスの血漿中の、ＬＮＰに含まれるイオン化可能な脂質（ＳＳ－ＯＣまたはＣＡＴ７）の濃度を示す。 ＬＣ－ＭＳによって測定された、処置マウスの血漿中の、ＬＮＰに含まれるイオン化可能な脂質（ＳＳ－ＯＣまたはＣＡＴ７）の濃度を示す。 ＬＣ－ＭＳによって測定された、処置マウスの血漿中の、ＬＮＰに含まれるイオン化可能な脂質（ＳＳ－ＯＣまたはＣＡＴ７）の濃度を示す。 ＬＣ－ＭＳによって測定された、処置マウスの血漿中の、ＬＮＰに含まれるイオン化可能な脂質（ＳＳ－ＯＣまたはＣＡＴ７）の濃度を示す。 ＬＣ－ＭＳによって測定された、処置マウスの血漿中の、ＬＮＰに含まれるイオン化可能な脂質（ＳＳ－ＯＣまたはＣＡＴ７）の濃度を示す。
ＬＣ－ＭＳによって測定された、処置マウスの血漿中の、ＬＮＰに含まれるイオン化可能な脂質（ＳＳ－ＯＣ、ＣＡＴ７、またはＣＡＴ１１）の濃度を示す。 ＬＣ－ＭＳによって測定された、処置マウスの血漿中の、ＬＮＰに含まれるイオン化可能な脂質（ＳＳ－ＯＣ、ＣＡＴ７、またはＣＡＴ１１）の濃度を示す。 ＬＣ－ＭＳによって測定された、処置マウスの血漿中の、ＬＮＰに含まれるイオン化可能な脂質（ＳＳ－ＯＣ、ＣＡＴ７、またはＣＡＴ１１）の濃度を示す。 ＬＣ－ＭＳによって測定された、処置マウスの血漿中の、ＬＮＰに含まれるイオン化可能な脂質（ＳＳ－ＯＣ、ＣＡＴ７、またはＣＡＴ１１）の濃度を示す。 ＬＣ－ＭＳによって測定された、処置マウスの血漿中の、ＬＮＰに含まれるイオン化可能な脂質（ＳＳ－ＯＣ、ＣＡＴ７、またはＣＡＴ１１）の濃度を示す。
Ａ及びＢは、ＥＬＩＳＡアッセイによって測定された、それぞれのＬＮＰ製剤で処置されたマウスの、示されている時点でのＩｇＭレベルを示す。
Ａ及びＢは、ＥＬＩＳＡアッセイによって測定された、それぞれのＬＮＰ製剤で処置されたマウスの、示されている時点でのＩｇＧレベルを示す。
Ａ及びＢは、ＥＣＬアッセイによって測定されたｍＲＮＡ ＢｉＴＥ（Ａ）またはｈＥＰＯ（Ｂ）の血漿レベルを示す。
ＣＡＴ７を含むＬＮＰのスクリーニング実験のＡ最適（Ａ－ｏｐｔｉｍａｌ）設計を示す。
ＣＡＴ７を含むＬＮＰの実験設計ランに基づき、かつＳＶＥＭ（Ｓｅｌｆ－Ｖａｌｉｄａｔｅｄ Ｅｎｓｅｍｂｌｅ Ｍｏｄｅｌｉｎｇ）法を使用してモデル化された、予測プロファイラーを示す。
詳細な説明
定義
化学的定義
本明細書で使用される「脂肪族」または「脂肪族基」という用語は、完全に飽和している、もしくは１つ以上の不飽和単位を含む、直鎖（すなわち、非分岐状）もしくは分岐状で、置換もしくは非置換の炭化水素鎖、または、完全に飽和している、もしくは１つ以上の不飽和単位を含むが、分子の残部に対する単一の結合点を有する、芳香族ではない単環式炭化水素もしくは二環式炭化水素（本明細書では「炭素環」、「脂環式」、または「シクロアルキル」とも称される）を意味する。別段の規定がない限り、脂肪族基は１～６つの脂肪族炭素原子を含む。いくつかの実施形態では、脂肪族基は１～５つの脂肪族炭素原子を含む。他の実施形態では、脂肪族基は１～４つの脂肪族炭素原子を含む。さらに他の実施形態では、脂肪族基は１～３つの脂肪族炭素原子を含み、なおも他の実施形態では、脂肪族基は１～２つの脂肪族炭素原子を含む。いくつかの実施形態では、「脂環式」（または「炭素環」もしくは「シクロアルキル」）は、完全に飽和している、または１つ以上の不飽和単位を含むが、分子の残部に対する単一の結合点を有する、芳香族ではない単環式Ｃ３－Ｃ６炭化水素を指す。好適な脂肪族基は、線状または分岐状、置換または非置換のアルキル、アルケニル、アルキニル基、及びそれらのハイブリッド、例えば（シクロアルキル）アルキル、（シクロアルケニル）アルキル、または（シクロアルキル）アルケニルを含むが、これらに限定されない。
本明細書で使用される「アルキル」という用語は、規定数の炭素原子を有する分岐状または非分岐状の飽和炭化水素基である。いくつかの実施形態では、アルキルは、３つの炭素原子（Ｃ３）を有する分岐状または非分岐状の飽和炭化水素基を指す。いくつかの実施形態では、アルキルは、６つの炭素原子（Ｃ６）を有する分岐状または非分岐状の飽和炭化水素基を指す。いくつかの実施形態では、「アルキル」という用語は、メチル、エチル、ｎ－プロピル、イソプロピル、ｎ－ブチル、イソブチル、ｓ－ブチル、ｔ－ブチル、ｎ－ペンチル、イソペンチル、ｓ－ペンチル、ネオペンチル、及びヘキシルを含むが、これらに限定されない。
本明細書で使用される場合、「アルキレン」という用語は、二価アルキル基を指す。「アルキレン鎖」は、ポリメチレン基、すなわち、－（ＣＨ２）ｎ－であり、ここで、ｎは、正の整数、好ましくは１～６、１～４、１～３、１～２、または２～３である。置換アルキレン鎖は、１つ以上のメチレン水素原子が置換基で置き換えられているポリメチレン基である。好適な置換基には、置換脂肪族基について後述するものが含まれる。
単独で、または「アラルキル」、「アラルコキシ」、もしくは「アリールオキシアルキル」のように、より大きな部分の一部として使用される「アリール」という用語は、合計５～１４個の環員を有する単環式及び二環式の環系を指し、この系における少なくとも１つの環は芳香族であり、この系における各環は３～７個の環員を含む。「アリール」という用語は、「アリール環」という用語と互換的に使用され得る。本開示のある特定の実施形態では、「アリール」は、１つ以上の置換基を有し得る、フェニル、ビフェニル、ナフチル、アントラシルなどを含むがこれらに限定されない芳香族環系を指す。「アリール」という用語が本明細書で使用される場合、その範囲には、インダニル、フタリミジル、ナフチミジル、フェナントリジニル、またはテトラヒドロナフチルなど、１つ以上の非芳香族環に芳香族環が縮合している基も含まれる。
単独で、または「ヘテロアラルキル」もしくは「ヘテロアラルコキシ」などのより大きな部分の一部として使用される「ヘテロアリール」及び「ヘテロアラ（ｈｅｔｅｒｏａｒ－）」という用語は、５～１０個の環原子、好ましくは５、６、または９個の環原子を有し、環状配置で共有された６、１０、または１４個のπ電子を有し、かつ炭素原子に加えて１～５個のヘテロ原子を有する基を指す。「ヘテロ原子」という用語は、窒素、酸素、または硫黄を指し、あらゆる酸化型の窒素または硫黄、及びあらゆる四級化型の塩基性窒素を含む。ヘテロアリール基は、限定されるものではないが、チエニル、フラニル、ピロリル、イミダゾリル、ピラゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、オキサジアゾリル、チアゾリル、イソチアゾリル、チアジアゾリル、ピリジル、ピリダジニル、ピリミジニル、ピラジニル、インドリジニル、プリニル、ナフチリジニル、及びプテリジニルを含む。本明細書で使用される「ヘテロアリール」及び「ヘテロアラ（ｈｅｔｅｒｏａｒ－）」という用語には、ヘテロ芳香族環が１つ以上のアリール、脂環式、またはヘテロシクリル環に縮合しており、ラジカルまたは結合点がヘテロ芳香族環上にある基も含まれる。非限定的な例としては、インドリル、イソインドリル、ベンゾチエニル、ベンゾフラニル、ジベンゾフラニル、インダゾリル、ベンズイミダゾリル、ベンズチアゾリル、キノリル、イソキノリル、シンノリニル、フタラジニル、キナゾリニル、キノキサリニル、４Ｈ－キノリジニル、カルバゾリル、アクリジニル、フェナジニル、フェノチアジニル、フェノキサジニル、テトラヒドロキノリニル、テトラヒドロイソキノリニル、及びピリド［２，３－ｂ］－ｌ，４－オキサジン－３（４Η）－オンが挙げられる。ヘテロアリール基は、単環式または二環式であり得る。「ヘテロアリール」という用語は、「ヘテロアリール環」、「ヘテロアリール基」、または「ヘテロ芳香族」という用語と互換的に使用することができ、これらの用語はいずれも、置換されていてもよい環を含む。「ヘテロアラルキル」という用語は、ヘテロアリールによって置換されたアルキル基を指し、ここで、アルキル及びヘテロアリール部分は、独立的に、置換されていてもよい。
「ハロ脂肪族」という用語は、１つ以上のハロゲン原子で置換されている脂肪族基を指す。
「ハロアルキル」という用語は、１つ以上のハロゲン原子で置換されている直鎖または分岐状のアルキル基を指す。
「ハロゲン」という用語は、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、またはＩを意味する。
本明細書で使用される場合、「複素環」、「ヘテロシクリル」、「複素環式ラジカル」、及び「複素環式環」という用語は、互換的に使用され、飽和または部分不飽和であり、炭素原子に加えて、上記で定義したようなヘテロ原子を１つ以上、好ましくは１～４つ有する、安定な５～７員単環式または７～１０員二環式複素環式部分を指す。複素環の環原子に関して使用される場合、「窒素」という用語には置換された窒素が含まれる。一例として、酸素、硫黄または窒素から選択される０～３つのヘテロ原子を有する飽和または部分不飽和の環において、窒素はＮ（３，４－ジヒドロ－２Ｈ－ピロリルなどの場合）、ＮＨ（ピロリジニルなどの場合）、または＋ＮＲ（ＴＶ置換ピロリジニルなどの場合）であり得る。複素環式環は、安定な構造をもたらす任意のヘテロ原子または炭素原子でそのペンダント基に結合していてもよく、いずれかの環原子は、置換されていてもよい。かかる飽和または部分不飽和の複素環式ラジカルの例は、限定されるものではないが、テトラヒドロフラニル、テトラヒドロチオフェニルピロリジニル、ピペリジニル、ピロリニル、テトラヒドロキノリニル、テトラヒドロイソキノリニル、デカヒドロキノリニル、オキサゾリジニル、ピペラジニル、ジオキサニル、ジオキソラニル、ジアゼピニル、オキサゼピニル、チアゼピニル、モルホリニル、及びキヌクリジニルを含む。「複素環」、「ヘテロシクリル」、「ヘテロシクリル環」、「複素環式基」、「複素環式部分」、及び「複素環式ラジカル」という用語は、本明細書では互換的に使用され、インドリニル、３Ｈ－インドリル、クロマニル、フェナントリジニル、またはテトラヒドロキノリニルなど、１つ以上のアリール、ヘテロアリール、または脂環式環にヘテロシクリル環が縮合している基も含み、ラジカルまたは結合点はヘテロシクリル環上にある。ヘテロシクリル基は、単環式または二環式であり得る。「ヘテロシクリルアルキル」という用語は、ヘテロシクリルによって置換されたアルキル基を指し、ここで、アルキル及びヘテロシクリル部分は、独立的に、置換されていてもよい。
複素環式環は、安定な構造をもたらす任意のヘテロ原子または炭素原子でそのペンダント基に結合していてもよく、いずれかの環原子は、置換されていてもよい。かかる飽和または部分不飽和の複素環式ラジカルの例は、限定されるものではないが、テトラヒドロフラニル、テトラヒドロチオフェニルピロリジニル、ピペリジニル、ピロリニル、テトラヒドロキノリニル、テトラヒドロイソキノリニル、デカヒドロキノリニル、オキサゾリジニル、ピペラジニル、ジオキサニル、ジオキソラニル、ジアゼピニル、オキサゼピニル、チアゼピニル、モルホリニル、及びキヌクリジニルを含む。「複素環」、「ヘテロシクリル」、「ヘテロシクリル環」、「複素環式基」、「複素環式部分」、及び「複素環式ラジカル」という用語は、本明細書では互換的に使用され、インドリニル、３Ｈ－インドリル、クロマニル、フェナントリジニル、またはテトラヒドロキノリニルなど、１つ以上のアリール、ヘテロアリール、または脂環式環にヘテロシクリル環が縮合している基も含み、ラジカルまたは結合点はヘテロシクリル環上にある。ヘテロシクリル基は、単環式または二環式であり得る。「ヘテロシクリルアルキル」という用語は、ヘテロシクリルによって置換されたアルキル基を指し、ここで、アルキル及びヘテロシクリル部分は、独立的に、置換されていてもよい。
本明細書に記載されるように、本開示の化合物は、「置換されていてもよい」部分を含み得る。概して、「置換される」という用語は、「ていてもよい」という用語を伴うか否かにかかわらず、指定された部分の１つ以上の水素が好適な置換基で置き換えられることを意味する。別段示されない限り、「置換されていてもよい」基は、その基の置換可能な位置の各々に好適な置換基を有することができ、任意の与えられた構造における複数の位置が特定の群から選択される複数の置換基で置換され得る場合、置換基は各位置で同じであっても異なっていてもよい。本開示によって想定される置換基の組み合わせは、好ましくは、安定なまたは化学的に実現可能な化合物の形成をもたらすものである。本明細書で使用される場合、「安定」という用語は、本明細書で開示される目的のうちの１つ以上のための、化合物の生産、検出、そしてある特定の実施形態では、それらの回収、精製、及び使用を可能にする条件に供されたとき、実質的に変化しない化合物を指す。
「置換されていてもよい」基の置換可能な炭素原子上の好適な一価置換基は、独立的に、ハロゲン；－（ＣＨ２）０－４Ｒ°；－（ＣＨ２）０－４ＯＲ°；－Ｏ（ＣＨ２）０－４Ｒ°、－Ｏ－（ＣＨ２）０－４Ｃ（Ｏ）ＯＲ°；－（ＣＨ２）０－４ＣＨ（ＯＲ°）２；－（ＣＨ２）０－４ＳＲ°；Ｒ°で置換されていてもよい－（ＣＨ２）０－４Ｐｈ；Ｒ°で置換されていてもよい－（ＣＨ２）０－４Ｏ（ＣＨ２）０－１Ｐｈ；Ｒ°で置換されていてもよい－ＣＨ＝ＣＨＰｈ；Ｒ°で置換されていてもよい－（ＣＨ２）０－４Ｏ（ＣＨ２）０－１－ピリジル；－ＮＯ２；－ＣＮ；－Ｎ３；－（ＣＨ２）０－４Ｎ（Ｒ°）２；－（ＣＨ２）０－４Ｎ（Ｒ°）Ｃ（Ｏ）Ｒ°；－Ｎ（Ｒ°）Ｃ（Ｓ）Ｒ°；－（ＣＨ２）０－４Ｎ（Ｒ°）Ｃ（Ｏ）ＮＲ° ２；－Ｎ（Ｒ°）Ｃ（Ｓ）ＮＲ° ２；－（ＣＨ２）０－４Ｎ（Ｒ°）Ｃ（Ｏ）ＯＲ°；－Ｎ（Ｒ°）Ｎ（Ｒ°）Ｃ（Ｏ）Ｒ°；－Ｎ（Ｒ°）Ｎ（Ｒ°）Ｃ（Ｏ）ＮＲ° ２；－Ｎ（Ｒ°）Ｎ（Ｒ°）Ｃ（Ｏ）ＯＲ°；－（ＣＨ２）０－４Ｃ（Ｏ）Ｒ°；－Ｃ（Ｓ）Ｒ°；－（ＣＨ２）０－４Ｃ（Ｏ）ＯＲ°；－（ＣＨ２）０－４Ｃ（Ｏ）ＳＲ°；－（ＣＨ２）０－４Ｃ（Ｏ）ＯＳｉＲ° ３；－（ＣＨ２）０－４ＯＣ（Ｏ）Ｒ°；－ＯＣ（Ｏ）（ＣＨ２）０－４ＳＲ°、ＳＣ（Ｓ）ＳＲ°；－（ＣＨ２）０－４ＳＣ（Ｏ）Ｒ°；－（ＣＨ２）０－４Ｃ（Ｏ）ＮＲ° ２；－Ｃ（Ｓ）ＮＲ° ２；－Ｃ（Ｓ）ＳＲ°；－ＳＣ（Ｓ）ＳＲ°、－（ＣＨ２）０－４ＯＣ（Ｏ）ＮＲ° ２；－Ｃ（Ｏ）Ｎ（ＯＲ°）Ｒ°；－Ｃ（Ｏ）Ｃ（Ｏ）Ｒ°；－Ｃ（Ｏ）ＣＨ２Ｃ（Ｏ）Ｒ°；－Ｃ（ＮＯＲ°）Ｒ°；－（ＣＨ２）０－４ＳＳＲ°；－（ＣＨ２）０－４Ｓ（Ｏ）２Ｒ°；－（ＣＨ２）０－４Ｓ（Ｏ）２ＯＲ°；－（ＣＨ２）０－４ＯＳ（Ｏ）２Ｒ°；－Ｓ（Ｏ）２ＮＲ° ２；－（ＣＨ２）０－４Ｓ（Ｏ）Ｒ°；－Ｎ（Ｒ°）Ｓ（Ｏ）２ＮＲ° ２；－Ｎ（Ｒ°）Ｓ（Ｏ）２Ｒ°；－Ｎ（ＯＲ°）Ｒ°；－Ｃ（ＮＨ）ＮＲ° ２；－Ｐ（Ｏ）２Ｒ°；－Ｐ（Ｏ）Ｒ° ２；－ＯＰ（Ｏ）Ｒ° ２；－ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ°）２；ＳｉＲ° ３；－（Ｃ１－４直鎖または分岐状のアルキレン）Ｏ－Ｎ（Ｒ°）２；または－（Ｃ１－４直鎖または分岐状のアルキレン）Ｃ（Ｏ）Ｏ－Ｎ（Ｒ°）２であり、ここで、各Ｒ°は、以下に定義するように置換されていてもよく、独立的に、水素、Ｃ１－６脂肪族、－ＣＨ２Ｐｈ、－Ｏ（ＣＨ２）０－１Ｐｈ、－ＣＨ２－（５～６員ヘテロアリール環）、または、窒素、酸素、もしくは硫黄から独立的に選択される０～４つのヘテロ原子を有する、５～６員飽和、部分不飽和、もしくはアリール環であるか、あるいは、上記の定義にかかわらず、Ｒ°の２つの独立した存在は、それらの介在原子（複数可）と一緒になって、以下に定義するように置換されていてもよい、窒素、酸素、もしくは硫黄から独立的に選択される０～４つのヘテロ原子を有する、３～１２員飽和、部分不飽和、またはアリール単環式もしくは二環式環を形成する。
Ｒ°（またはＲ°の２つの独立した存在を介在原子と一緒にすることによって形成された環）上の好適な一価置換基は、独立的に、ハロゲン、－（ＣＨ２）０－２Ｒ●、－（ハロＲ●）、－（ＣＨ２）０－２ＯＨ、－（ＣＨ２）０－２ＯＲ●、－（ＣＨ２）０－２ＣＨ（ＯＲ●）２；－Ｏ（ハロＲ●）、－ＣＮ、－Ｎ３、－（ＣＨ２）０－２Ｃ（Ｏ）Ｒ●、－（ＣＨ２）０－２Ｃ（Ｏ）ＯＨ、－（ＣＨ２）０－２Ｃ（Ｏ）ＯＲ●、－（ＣＨ２）０－２ＳＲ●、－（ＣＨ２）０－２ＳＨ、－（ＣＨ２）０－２ＮＨ２、－（ＣＨ２）０－２ＮＨＲ●、－（ＣＨ２）０－２ＮＲ● ２、－ＮＯ２、－ＳｉＲ● ３、－ＯＳｉＲ● ３、－Ｃ（Ｏ）ＳＲ●、－（Ｃ１－４直鎖または分岐状のアルキレン）Ｃ（Ｏ）ＯＲ●、または－ＳＳＲ●であり、ここで、各Ｒ●は、非置換であるか、または「ハロ」が先行する場合は１つ以上のハロゲンのみで置換されており、Ｃ１－４脂肪族、－ＣＨ２Ｐｈ、－Ｏ（ＣＨ２）０－１Ｐｈ、または、窒素、酸素、もしくは硫黄から独立的に選択される０～４つのヘテロ原子を有する、５～６員飽和、部分不飽和、もしくはアリール環から独立的に選択される。Ｒ°の飽和炭素原子上の好適な二価置換基は、＝Ｏ及び＝Ｓを含む。
「置換されていてもよい」基の飽和炭素原子上の好適な二価置換基は、＝Ｏ、＝Ｓ、＝ＮＮＲ＊ ２、＝ＮＮＨＣ（Ｏ）Ｒ＊、＝ＮＮＨＣ（Ｏ）ＯＲ＊、＝ＮＮＨＳ（Ｏ）２Ｒ＊、＝ＮＲ＊、＝ＮＯＲ＊、－Ｏ（Ｃ（Ｒ＊ ２））２－３Ｏ－、または－Ｓ（Ｃ（Ｒ＊ ２））２－３Ｓ－を含み、ここで、Ｒ＊の独立した各存在は、水素、以下に定義するように置換されていてもよいＣ１－６脂肪族、または、窒素、酸素、もしくは硫黄から独立的に選択される０～４つのヘテロ原子を有する、非置換の５～６員飽和、部分不飽和、もしくはアリール環から選択される。「置換されていてもよい」基の近傍の置換可能な炭素に結合する好適な二価置換基は、－Ｏ（ＣＲ＊ ２）２－３Ｏ－を含み、ここで、Ｒ＊の独立した各存在は、水素、以下に定義するように置換されていてもよいＣ１－６脂肪族、または、窒素、酸素、もしくは硫黄から独立的に選択される０～４つのヘテロ原子を有する、非置換の５～６員飽和、部分不飽和、もしくはアリール環から選択される。
Ｒ＊の脂肪族基上の好適な置換基は、ハロゲン、－Ｒ●、－（ハロＲ●）、－ＯＨ、－ＯＲ●、－Ｏ（ハロＲ●）、－ＣＮ、－Ｃ（Ｏ）ＯＨ、－Ｃ（Ｏ）ＯＲ●、－ＮＨ２、－ＮＨＲ●、－ＮＲ● ２、または－ＮＯ２を含み、ここで、各Ｒ●は、非置換であるか、または「ハロ」が先行する場合は１つ以上のハロゲンのみで置換されており、独立的に、Ｃ１－４脂肪族、－ＣＨ２Ｐｈ、－Ｏ（ＣＨ２）０－１Ｐｈ、または、窒素、酸素、もしくは硫黄から独立的に選択される０～４つのヘテロ原子を有する、５～６員飽和、部分不飽和、もしくはアリール環である。
「置換されていてもよい」基の置換可能な窒素上の好適な置換基は、－Ｒ†、－ＮＲ† ２、－Ｃ（Ｏ）Ｒ†、－Ｃ（Ｏ）ＯＲ†、－Ｃ（Ｏ）Ｃ（Ｏ）Ｒ†、－Ｃ（Ｏ）ＣＨ２Ｃ（Ｏ）Ｒ†、－Ｓ（Ｏ）２Ｒ†、－Ｓ（Ｏ）２ＮＲ† ２、－Ｃ（Ｓ）ＮＲ† ２、－Ｃ（ＮＨ）ＮＲ† ２、または－Ｎ（Ｒ†）Ｓ（Ｏ）２Ｒ†を含み、ここで、各Ｒ†は、独立的に、水素、以下に定義するように置換されていてもよいＣ１－６脂肪族、非置換－ＯＰｈ、または、窒素、酸素、もしくは硫黄から独立的に選択される０～４つのヘテロ原子を有する、非置換の５～６員飽和、部分不飽和、もしくはアリール環であるか、あるいは、上記の定義にかかわらず、Ｒ†の２つの独立した存在は、それらの介在原子（複数可）と一緒になって、窒素、酸素、もしくは硫黄から独立的に選択される０～４つのヘテロ原子を有する、非置換の３～１２員飽和、部分不飽和、またはアリール単環式もしくは二環式環を形成する。
Ｒ†の脂肪族基上の好適な置換基は、独立的に、ハロゲン、－Ｒ●、－（ハロＲ●）、－ＯＨ、－ＯＲ●、－Ｏ（ハロＲ●）、－ＣＮ、－Ｃ（Ｏ）ＯＨ、－Ｃ（Ｏ）ＯＲ●、－ＮＨ２、－ＮＨＲ●、－ＮＲ● ２、または－ＮＯ２であり、ここで、各Ｒ●は、非置換であるか、または「ハロ」が先行する場合は１つ以上のハロゲンのみで置換されており、独立的に、Ｃ１－４脂肪族、－ＣＨ２Ｐｈ、－Ｏ（ＣＨ２）０－１Ｐｈ、または、窒素、酸素、もしくは硫黄から独立的に選択される０～４つのヘテロ原子を有する、５～６員飽和、部分不飽和、もしくはアリール環である。
本明細書で使用される場合、「部分不飽和」という用語は、少なくとも１つの二重結合または三重結合を含む環部分を指す。「部分不飽和」という用語は、複数の不飽和部位を有する環を包含することを意図するが、本明細書で定義されるようなアリールまたはヘテロアリール部分を含むことは意図しない。
本明細書で使用する場合、「薬学的に許容される塩」という用語は、安全な医学的判断の範囲内で、過度の毒性、刺激、アレルギー反応などを伴わずに、ヒト及び下等動物の組織と接触させて使用するのに好適であり、妥当なベネフィット／リスク比に見合う塩を指す。薬学的に許容される塩は当技術分野で周知である。例えば、Ｓ．Ｍ．Ｂｅｒｇｅ ｅｔ ａｌ．は、薬学的に許容される塩について、参照により本明細書に組み込まれるＪ．Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，１９７７，６６，１－１９に詳細に記載している。本開示の化合物の薬学的に許容される塩には、好適な無機及び有機の酸及び塩基に由来するものが含まれる。薬学的に許容される非毒性の酸付加塩の例は、塩酸、臭化水素酸、リン酸、硫酸及び過塩素酸のような無機酸、または酢酸、シュウ酸、マレイン酸、酒石酸、クエン酸、コハク酸もしくはマロン酸のような有機酸と形成されるか、あるいは、イオン交換のような、当技術分野において使用されている他の方法を使用することによって形成される、アミノ基の塩である。その他の薬学的に許容される塩としては、アジピン酸塩、アルギン酸塩、アスコルビン酸塩、アスパラギン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、安息香酸塩、重硫酸塩、ホウ酸塩、酪酸塩、樟脳酸塩、カンファースルホン酸塩、クエン酸塩、シクロペンタンプロピオン酸塩、ジグルコン酸塩、ドデシル硫酸塩、エタンスルホン酸塩、ギ酸塩、フマル酸塩、グルコヘプトン酸塩、グリセロリン酸塩、グルコン酸塩、ヘミ硫酸塩、ヘプタン酸塩、ヘキサン酸塩、ヨウ化水素酸塩、２－ヒドロキシ－エタンスルホン酸塩、ラクトビオン酸塩、乳酸塩、ラウリン酸塩、ラウリル硫酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、マロン酸塩、メタンスルホン酸塩、２－ナフタレンスルホン酸塩、ニコチン酸塩、硝酸塩、オレイン酸塩、シュウ酸塩、パルミチン酸塩、パモ酸塩、ペクチン酸塩、過硫酸塩、３－フェニルプロピオン酸塩、リン酸塩、ピバル酸塩、プロピオン酸塩、ステアリン酸塩、コハク酸塩、硫酸塩、酒石酸塩、チオシアン酸塩、ｐ－トルエンスルホン酸塩、ウンデカン酸塩、吉草酸塩などが挙げられる。
適切な塩基に由来する塩としては、アルカリ金属塩、アルカリ土類金属塩、アンモニウム塩、及びＮ（Ｃ１－４アルキル）４塩が挙げられる。代表的なアルカリまたはアルカリ土類金属塩としては、ナトリウム、リチウム、カリウム、カルシウム、マグネシウムなどが挙げられる。さらなる薬学的に許容される塩には、適切な場合、非毒性アンモニウム、第四級アンモニウム、ならびにハロゲン化物、水酸化物、カルボン酸、硫酸、リン酸、硝酸、低級アルキルスルホン酸及びアリールスルホン酸などの対イオンを使用して形成されたアミンカチオンが含まれる。
「薬学的に許容される誘導体」は、レシピエントに投与すると、直接的または間接的に、本開示の化合物またはその活性代謝産物もしくは残留物を提供することができる、本開示の化合物のあらゆる非毒性の塩、エステル、エステルの塩または他の誘導体を意味する。
「第三級アミン」という用語は、３つの炭素含有基（これらの基の各々は、その基の炭素原子を通じてアミン基に共有結合している）に結合したアミン（窒素原子）を表すために使用される。第三級アミンは、プロトン化されている場合もあれば、ルイス酸と複合体を形成する場合もある。
本明細書における変数の任意の定義の中の化学基のリストの記載は、任意の単一の基または列挙された基の組み合わせとしてのその変数の定義を含む。本明細書における変数についての実施形態の記載は、任意の単一の実施形態としての、または任意の他の実施形態もしくはその一部と組み合わせた、その実施形態を含む。
別途記載のない限り、本明細書で示される構造は、その構造のあらゆるエナンチオマー型、ジアステレオマー型、及び幾何学（または立体構造）型、例えば、各不斉中心のＲ及びＳ構成、Ｚ及びＥ二重結合異性体、ならびにＺ及びＥ立体構造異性体を含むことも意図している。したがって、本開示の化合物の単一の立体化学異性体、ならびにエナンチオマー、ジアステレオマー、及び幾何学（または立体構造）の混合物は、本開示の範囲内にある。別途記載のない限り、本開示の化合物のあらゆる互変異性体型が本開示の範囲内にある。
他の定義
本明細書及び添付の特許請求の範囲で使用される場合、単数形「１つの（ａ）」、「１つの（ａｎ）」、及び「その（ｔｈｅ）」は、別途内容が明確に定めない限り、複数の指示対象を含む。
「約」という用語は、本明細書において、およそ、その辺り、おおよそ、またはほぼを意味するために使用される。「約」という用語が数値範囲と共に使用されるとき、これは、規定の数値の上下にその境界を拡張させることによって、その範囲を修飾する。したがって、「約」という用語は、当技術分野で許容されるレベルだけ変動する数量、レベル、値、数、頻度、パーセンテージ、寸法、サイズ、量、重量、または長さを意味する。いくつかの実施形態では、そのような変動は、基準の数量、レベル、値、数、頻度、パーセンテージ、寸法、サイズ、量、重量、または長さに対して３０、２５、２０、１５、１０、９、８、７、６、５、４、３、２、または１％程度であり得る。いくつかの実施形態では、そのような変動は、基準の数量、レベル、値、数、頻度、パーセンテージ、寸法、サイズ、量、重量、または長さに対して１０％程度であり得る。
「加速血液クリアランス」または「ＡＢＣ」という用語は、ある特定の医薬品（例えば、ＰＥＧ含有ＬＮＰ）が２回目及び後続の投与の際に血液から迅速に排除される現象を指す。ＡＢＣは、リポソーム及びＬＮＰを含む多くの脂質送達ビヒクルについて観察されている。
「投与」という用語は、本明細書では、組成物を対象に導入すること、あるいは組成物を細胞及び／または組織と接触させることを指す。
本明細書で使用される場合、「及び／または」という用語は、本開示では、別段示されない限り、「及び」または「または」のいずれかに対して使用される。
「抗体」という用語は、免疫グロブリン（Ｉｇ）分子の可変領域内に位置する少なくとも１つのエピトープ認識部位を通して、炭水化物、ポリヌクレオチド、脂質、またはポリペプチドなどの特定の標的に結合することができるＩｇ分子を指す。本明細書で使用される場合、この用語は、無傷のポリクローナル抗体またはモノクローナル抗体及びそれらの抗原結合断片を包含する。例えば、天然の免疫グロブリン分子は、２つの重鎖ポリペプチド及び２つの軽鎖ポリペプチドから構成されている。重鎖ポリペプチドの各々が、重鎖ポリペプチドと軽鎖ポリペプチドとの間の鎖間ジスルフィド結合によって軽鎖ポリペプチドと会合して、２つのヘテロ二量体タンパク質またはポリペプチド（すなわち、２つの異種ポリペプチド鎖から構成されたタンパク質）を形成する。次いで、２つのヘテロ二量体タンパク質が、重鎖ポリペプチド間のさらなる鎖間ジスルフィド結合によって会合して、免疫グロブリンタンパク質またはポリペプチドを形成する。
「がん」という用語は、調節されない細胞成長によって典型的に特徴付けられる、哺乳動物における生理学的状態を指すか、または記述する。
本明細書で使用される場合、「組み合わせ」、「組み合わせた」という用語、及び関連用語は、本開示に係る治療剤の同時または順次の投与を指す。例えば、本開示の化合物は、別の治療剤と同時または順次に、別個の単位剤形で、または単一の単位剤形で一緒に投与されてもよい。したがって、本開示は、提供される化合物、追加の治療剤、及び薬学的に許容される担体、アジュバント、またはビヒクルを含む、単一の単位剤形を提供する。
本明細書で使用される「生物学的試料」という用語は、限定されるものではないが、細胞培養物またはその抽出物、哺乳動物から得られた生検材料またはその抽出物、及び血液、唾液、尿、糞便、精液、涙、または他の体液もしくはその抽出物を含む。そのような目的の例は、輸血、臓器移植、生物学的標本の貯蔵、及び生物学的アッセイを含むが、これらに限定されない。
本明細書で使用される「単位剤形」という表現は、処置される患者に適切な薬剤の物理的に別個の単位を指す。しかしながら、本開示の化合物及び組成物の合計一日使用量が、合理的な医療判断の範囲内で担当医師によって決定されることは理解されよう。特定の患者または生物についての具体的な有効用量レベルは、処置される障害及び障害の重篤度；用いられる特定の化合物の活性；用いられる特定の組成物；患者の年齢、体重、全体的健康状態、性別、及び食事；用いられる特定の化合物の投与時間、投与経路、及び排出速度；処置期間；用いられる特定の化合物と組み合わせてまたは同時に使用される薬物、及び医学分野で周知の同様の要因を含む、種々の要因に依存する。
「カプセル化効率」または「ＥＥ％」という用語は、ＬＮＰへの封入に成功したペイロードのパーセンテージを指す。いくつかの実施形態では、カプセル化効率は、次式：
（ＥＥ％）＝（Ｗｔ／Ｗｉ）×１００％
を使用して計算することができ、式中、Ｗｔは、ＬＮＰ懸濁液中の薬物の総量であり、Ｗｉは、調製中に最初に加えられた薬物の総量である。説明のための例として、組成物に最初に提供された合計１００ｍｇのペイロード分子のうち、９７ｍｇのペイロード分子がＬＮＰに封入される場合、カプセル化効率は９７％と与えられ得る。
「半減期」という用語は、ペイロード分子（例えば、脂質ナノ粒子にカプセル化されたペイロード分子）の薬物動態特性を指す。半減期は、例えば、血清中で（すなわち、循環半減期）、または他の組織で測定した場合に、生物学的プロセス（例えば、代謝、排泄、加速血液クリアランスなど）を通じて、ｉｎ ｖｉｖｏで既知量の５０％のペイロード分子をその投与後に対象の身体（例えば、ヒト患者または他の哺乳動物）またはその特定のコンパートメントから排除するのに必要な時間として表すことができる。一般に、半減期の増加は、投与されたペイロード分子の循環中の平均滞留時間（ＭＲＴ）の増加をもたらす。
「脂質窒素対リン酸比」または「（Ｎ：Ｐ）」という用語は、脂質ナノ粒子中の核酸リン酸基に対する正に帯電可能な脂質アミン基の比を指す。
本明細書で使用される場合、「核酸」は、ポリヌクレオチドまたはオリゴヌクレオチドを意味し、デオキシリボヌクレオチドまたはリボヌクレオチド塩基の一本鎖または二本鎖のポリマーまたはオリゴマーを含む。核酸には、断片及び修飾型ヌクレオチドも含まれ得る。したがって、「ポリヌクレオチド」、「オリゴヌクレオチド」、「核酸配列」、「ヌクレオチド配列」及び「核酸断片」という用語は、互換的に使用され、一本鎖または二本鎖であり、合成の、非天然の、または改変されたヌクレオチド塩基を含んでもよい、ＲＮＡ及び／またはＤＮＡのポリマーまたはオリゴマーを表す。ヌクレオチド（通常は５’－モノリン酸形態で見出される）は、当技術分野で一般的に知られている一文字表記によって参照され得る。
本明細書で使用される場合、別のポリペプチドまたはポリヌクレオチドの由来であるポリペプチドまたはポリヌクレオチドは、「親」または「参照」のポリヌクレオチドまたはポリペプチドと称される。
本明細書で使用される場合、「薬学的に許容される」という用語は、当技術分野で周知の経路を使用して投与されたときにアレルギー反応または他の深刻な有害反応を通常は生成しない分子実体及び組成物を指す。動物における、より具体的にはヒトにおける使用について、連邦政府もしくは州政府の規制機関によって承認されている、または米国薬局方もしくは他の広く認識されている薬局方に収載されている分子実体及び組成物は、「薬学的に許容される」とみなされる。
「薬学的に許容される担体、アジュバント、またはビヒクル」という用語は、それと共に製剤化される化合物（複数可）の薬理学的活性を破壊しない非毒性の担体、アジュバント、またはビヒクルを指す。本明細書で開示される化合物の組成物に使用され得る薬学的に許容される担体、アジュバントまたはビヒクルは、イオン交換体、アルミナ、ステアリン酸アルミニウム、レシチン、ヒト血清アルブミンなどの血清タンパク質、リン酸塩などの緩衝物質、グリシン、ソルビン酸、ソルビン酸カリウム、硫酸プロタミンなどの飽和植物脂肪酸、水、塩または電解質の部分グリセリド混合物、リン酸水素二ナトリウム、リン酸水素カリウム、塩化ナトリウム、亜鉛塩、コロイド状シリカ、三ケイ酸マグネシウム、ポリビニルピロリドン、セルロース系物質、ポリエチレングリコール、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ポリアクリレート、ワックス、ポリエチレン－ポリオキシプロピレン－ブロックポリマー、ポリエチレングリコール及び羊毛脂を含むが、これらに限定されない。
本明細書で言及される「ポリヌクレオチド」という用語は、一本鎖または二本鎖の核酸ポリマーを意味する。いくつかの実施形態では、ポリヌクレオチドを構成するヌクレオチドは、ＲＮＡもしくはＤＮＡ、または修飾されたメッセンジャーＲＮＡ、トランスファーＲＮＡ、及び低分子ＲＮＡを含む、いずれかのタイプのヌクレオチドの修飾型であり得る。前記修飾は、ブロモウリジンなどの塩基修飾、アラビノシド及び２’，３’－ジデオキシリボースなどのリボース修飾、ならびにホスホロチオエート、ホスホロジチオエート、ホスホロセレノエート、ホスホロジセレノエート、ホスホロアニロチオエート、ホスホラニラデート、及びホスホロアミデートなどのヌクレオチド間結合修飾を含み得るが、これらに限定されない。「ポリヌクレオチド」という用語は、ＤＮＡに言及する場合、一本鎖型及び二本鎖型も含む。
「ポリペプチド」及び「タンパク質」という用語は、本明細書では互換的に使用され、単一の線形で連続した構成の共有結合したアミノ酸を指す。ポリペプチドは、１つ以上の鎖内ジスルフィド結合を形成することができる。
本明細書で使用される場合、「予防」は、疾患の症状の完全な防止、疾患の症状の発症の遅延、またはその後に発生する疾患の症状の重篤度の軽減を意味し得る。典型的に、予防的用量は疾患の早期段階前または早期段階の対象において使用されるため、予防有効量は治療有効量よりも少ないが、必ずしもそうとは限らない。
処置方法に対する「応答」には、とりわけ、陰性症状の減少または寛解、疾患またはその症状の進行の減少、有益な症状または臨床転帰の増加、副作用の軽減、疾患の安定化、疾患の部分的または完全な是正が含まれ得る。
本明細書で使用される場合、「配列同一性」という用語は、２つ以上のポリヌクレオチド配列間または２つ以上のポリペプチド配列間の関係を指す。１つの配列内のある位置が、比較配列の対応する位置で同じ核酸塩基またはアミノ酸残基によって占有されている場合、これらの配列は、その位置で「同一」であると言われる。パーセンテージ配列同一性は、両方の配列において同一の核酸塩基またはアミノ酸残基が生じる位置の数を決定して、同一位置の数を求めることによって計算される。次いで、同一位置の数を、比較ウィンドウ内の位置の総数で除し、１００を乗じることで、配列同一性のパーセンテージが求められる。配列同一性のパーセンテージは、比較ウィンドウにわたって最適にアラインされた２つの配列を比較することによって決定される。ポリヌクレオチド配列の比較ウィンドウは、例えば、少なくとも２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１１０、１２０、１３０、１４０、１５０、１６０、１７０、１８０、１９０、２００、３００、４００、５００、６００、７００、８００、９００、または１０００、またはそれ以上の核酸の長さであり得る。ポリペプチド配列の比較ウィンドウは、例えば、少なくとも２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１１０、１２０、１３０、１４０、１５０、１６０、１７０、１８０、１９０、２００、３００、またはそれ以上のアミノ酸の長さであり得る。比較のために配列を最適にアラインするためには、参照配列を一定に保ちながら、ポリヌクレオチドまたはポリペプチド配列のうち比較ウィンドウ内にある部分に、ギャップと呼ばれる付加または欠失を含めることができる。最適なアラインメントとは、ギャップがあっても、参照配列と比較配列との間で可能な最大数の「同一」位置をもたらすアラインメントである。２つの配列間のパーセンテージ「配列同一性」は、２００４年９月１日時点で米国国立生物工学情報センターから入手可能であったバージョンのプログラム「ＢＬＡＳＴ ２ Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ」を使用して決定することができ、このプログラムには、Ｋａｒｌｉｎ及びＡｌｔｓｃｈｕｌ（Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ９０（１２）：５８７３－５８７７，１９９３）のアルゴリズムに基づくプログラムであるプログラムＢＬＡＳＴＮ（ヌクレオチド配列比較用）及びＢＬＡＳＴＰ（ポリペプチド配列比較用）が組み込まれている。「ＢＬＡＳＴ ２ Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ」を利用する際、２００４年９月１日時点でデフォルトパラメータであったパラメータを、ワードサイズ（３）、オープンギャップペナルティ（１１）、拡張ギャップペナルティ（１）、ギャップドロップオフ（５０）、予想値（１０）、及び行列オプションを含むがこれに限定されない任意の他の必要なパラメータについて使用することができる。２つのヌクレオチド配列またはアミノ酸配列は、２つの配列が互いに対して少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％の配列同一性を有すれば、「実質的に同様の配列同一性」を有する、または「実質的に同一」であるとみなされる。
投与が企図される「対象」または「患者」という用語は、ヒト（すなわち、任意の年齢層の男性または女性、例えば、小児対象（例えば、乳児、幼児、青年）または成人対象（例えば、若年成人、中年成人、もしくは高齢成人））及び／または他の霊長類（例えば、カニクイザル、アカゲザル）；ウシ、ブタ、ウマ、ヒツジ、ヤギ、ネコ、及び／またはイヌなどの商業関連哺乳動物を含む哺乳動物；及び／またはニワトリ、アヒル、ガチョウ、ウズラ、及び／またはシチメンチョウなどの商業関連鳥類を含む鳥類を含むが、これらに限定されない。好ましい対象はヒトである。
本明細書で使用される場合、「治療有効量」は、所望の生物学的応答を誘起する物質（例えば、治療剤、組成物、及び／または製剤）の量を意味する。いくつかの実施形態では、物質の治療有効量は、疾患、障害、及び／または状態に罹患しているまたは罹患しやすい対象に投薬レジメンの一環として投与した場合に、疾患、障害、及び／または状態を処置する及び／またはその発症を診断するのに十分な量である。当業者には理解されるように、物質の有効量は、所望の生物学的エンドポイント、送達される物質、標的細胞または組織などの要因に応じて異なり得る。例えば、本明細書に記載されるＬＮＰ及びその組成物の治療有効量は、処置される状態、状態の重篤度及び経過、ＬＮＰまたはその組成物が防止目的で投与されるか治療目的で投与されるか、過去の療法、対象の臨床歴及び使用されるＬＮＰまたはその組成物に対する応答、ならびに担当医師の裁量に依存する。いくつかの実施形態では、疾患、障害、及び／または状態を処置するための提供されるＬＮＰまたはその組成物の有効量は、疾患、障害、及び／または状態を緩和する、寛解させる、軽減する、その重篤度を低減させる、及び／またはその１つ以上の症状もしくは特徴の発生率を低減させる量である。いくつかの実施形態では、「治療有効量」は、疾患または障害の１つ以上の症状を処置するのに十分である、提供される化合物、または提供される化合物を含む組成物の少なくとも最低の量である。
「処置する」、「処置」、または「処置すること」という用語は、疾患（例えば、本明細書に詳述される疾患もしくは障害）の発症もしくは進行を減少させる、抑制する、減弱させる、縮小させる、停止させる、もしくは安定化させること、疾患の重篤度を軽減すること、または疾患に関連する症状を改善することを意味する。処置には、疾患、障害、または状態の症状を処置することが含まれる。望ましくない状態（例えば、対象の疾患または他の望ましくない状態）の臨床的発現前に投与される場合、処置は予防的であり（すなわち、望ましくない状態の発症から対象を保護する）、一方、望ましくない状態の発現後に投与される場合、処置は治療的である（すなわち、既存の望ましくない状態またはその副作用を縮小、寛解、または安定化させることが意図される）。
本明細書で使用される「バリアント」または「バリアント（複数可）」という用語は、参照ポリヌクレオチドまたはポリペプチドの配列とは異なる配列を有するが、親ポリヌクレオチドまたはポリペプチドの本質的な特性を保持するポリヌクレオチドまたはポリペプチドを指す。概して、バリアントのポリヌクレオチドまたはポリペプチドの配列は、親のポリヌクレオチドまたはポリペプチドと全体的に極めて類似しており、多くの領域において同一である。例えば、バリアントのポリヌクレオチドまたはポリペプチドは、親のポリヌクレオチドまたはポリペプチドと比較して、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または少なくとも９９．５％の配列同一性を呈し得る。
化合物
式（Ｉ）の化合物
様々な実施形態では、本明細書で提供されるのは、式（Ｉ）の化合物：
Figure 2024508047000029
 またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物であり、式中、
Ａは、－Ｎ（ＣＨ２ＲＮ１）（ＣＨ２ＲＮ２）、または少なくとも１つのＮを含む４～７員ヘテロシクリル環であり、４～７員ヘテロシクリル環は、０～６つのＲ３で置換されていてもよく、
各Ｘは、独立的に、－Ｏ－、－Ｎ（Ｒ１）－、または－Ｎ（Ｒ２）－であり、
Ｒ１は、置換されていてもよいＣ１－Ｃ３１脂肪族及びステロイジルからなる群から選択され、
Ｒ２は、置換されていてもよいＣ１－Ｃ３１脂肪族及びステロイジルからなる群から選択され、
Ｒ３は、置換されていてもよいＣ１－Ｃ６脂肪族であり、
ＲＮ１及びＲＮ２は、各々独立的に、水素、ヒドロキシ－Ｃ１－Ｃ６アルキル、Ｃ２－Ｃ６アルケニル、またはＣ３－Ｃ７シクロアルキルであり、
Ｌ１は、置換されていてもよいＣ１－Ｃ２０アルキレン鎖、及び置換されていてもよい二価Ｃ２－Ｃ２０アルケニレン鎖からなる群から選択され、
Ｌ２は、置換されていてもよいＣ１－Ｃ２０アルキレン鎖、及び置換されていてもよい二価Ｃ２－Ｃ２０アルケニレン鎖からなる群から選択され、
Ｌ３は結合、置換されていてもよいＣ１－Ｃ６アルキレン鎖、または置換されていてもよい二価Ｃ３－Ｃ７シクロアルキレンである。
いくつかの実施形態では、Ａが－Ｎ（ＣＨ３）（ＣＨ３）であり、ＸがＯであるとき、Ｌ３はＣ１－Ｃ６アルキレン鎖ではない。
いくつかの実施形態では、本開示は、式（Ｉ－ａ）の化合物：
Figure 2024508047000030
 またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物を含み、式中、ｍは０、１、２、３、４、５、または６である。
いくつかの実施形態では、本開示は、式（Ｉ－ｂ）の化合物：
Figure 2024508047000031
 またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物を含み、式中、ｎは０、１、２、または３であり、ｍは０、１、２、３、４、５、または６である。
いくつかの実施形態では、本開示は、式（Ｉ－ｂｉ）の化合物：
Figure 2024508047000032
 またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物を含む。
いくつかの実施形態では、本開示は、式（Ｉ－ｂｉｉ）の化合物：
Figure 2024508047000033
 またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物を含み、式中、ｍは０、１、２、または３であり、ｐ及びｑは各々０、１、２、または３であり、ｑ＋ｐは３以下である。
いくつかの実施形態では、本開示は、式（Ｉ－ｂｉｉｉ）の化合物：
Figure 2024508047000034
 またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物を含む。
いくつかの実施形態では、本開示は、式（Ｉ－ｃ）の化合物：
Figure 2024508047000035
 またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物を含む。
いくつかの実施形態では、Ａは、－Ｎ（ＣＨ２ＲＮ１）（ＣＨ２ＲＮ２）であるか、または少なくとも１つのＮを含む、置換されていてもよい４～７員ヘテロシクリル環である。
いくつかの実施形態では、Ａは、－Ｎ（ＣＨ２ＲＮ１）（ＣＨ２ＲＮ２）である。いくつかの実施形態では、ＲＮ１及びＲＮ２は、各々独立的に、水素、ヒドロキシ－Ｃ１－Ｃ３アルキレン、Ｃ２－Ｃ４アルケニル、またはＣ３－Ｃ４シクロアルキルから選択される。
いくつかの実施形態では、ＲＮ１及びＲＮ２は、各々独立的に、水素、－ＣＨ２ＣＨ＝ＣＨ２、－ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、
Figure 2024508047000036
 から選択される。いくつかの実施形態では、ＲＮ１及びＲＮ２は同じである。いくつかの実施形態では、ＲＮ１及びＲＮ２は各々、水素である。いくつかの実施形態では、ＲＮ１及びＲＮ２は各々、Ｃ２－Ｃ４アルケニル、例えば、－ＣＨ２ＣＨ＝ＣＨ２である。いくつかの実施形態では、ＲＮ１及びＲＮ２は各々、ヒドロキシ－Ｃ１－Ｃ３アルキレン、例えば、－ＣＨ２ＣＨ２ＯＨである。いくつかの実施形態では、ＲＮ１及びＲＮ２は異なる。いくつかの実施形態では、ＲＮ１及びＲＮ２の一方は水素であり、他方はＣ３－Ｃ４シクロアルキルである。いくつかの実施形態では、ＲＮ１及びＲＮ２の一方は水素であり、他方は
Figure 2024508047000037
 である。
いくつかの実施形態では、Ａは、少なくとも１つのＮを含む、置換されていてもよい４～７員ヘテロシクリル環である。いくつかの実施形態では、Ａは、Ｎを１つだけ含む、置換されていてもよい４～７員ヘテロシクリル環である。いくつかの実施形態では、Ａは、少なくとも１つのＮを含む、非置換の４～７員ヘテロシクリル環である。いくつかの実施形態では、Ａは、Ｎを１つだけ含む、非置換の４～７員ヘテロシクリル環である。いくつかの実施形態では、Ａは、少なくとも１つのＮを含む、置換されていてもよい５～６員ヘテロシクリル環である。いくつかの実施形態では、Ａは、少なくとも１つのＮを含む、非置換の５～６員ヘテロシクリル環である。
いくつかの実施形態では、Ａは、少なくとも１つのＮを含む、置換されていてもよい４～７員ヘテロシクリル環であり、ＡのＮ原子は、第三級アミンである。
いくつかの実施形態では、Ａは、少なくとも１つのＮを含み、さらに１つ以上のＳを含む、置換されていてもよい４～７員ヘテロシクリル環である。いくつかの実施形態では、Ａは、少なくとも１つのＮを含み、さらにＳを１つだけ含む、置換されていてもよい４～７員ヘテロシクリル環である。
いくつかの実施形態では、Ａは、アゼチジン、ピロリジン、ピペリジン、アゼパン、及びチオモルホリンからなる群から選択される。いくつかの実施形態では、Ａは、ピロリジン及びピペリジンからなる群から選択される。
いくつかの実施形態では、Ｌ１は、置換されていてもよいＣ１－Ｃ２０アルキレン鎖、及び置換されていてもよい二価Ｃ１－Ｃ２０アルケニレン鎖からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、Ｌ２は、置換されていてもよいＣ１－Ｃ２０アルキレン鎖、及び置換されていてもよい二価Ｃ１－Ｃ２０アルケニレン鎖からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、Ｌ１は、置換されていてもよいＣ１－Ｃ２０アルキレン鎖である。いくつかの実施形態では、Ｌ２は、置換されていてもよいＣ１－Ｃ２０アルキレン鎖である。
いくつかの実施形態では、Ｌ１及びＬ２は同じである。いくつかの実施形態では、Ｌ１及びＬ２は異なる。
いくつかの実施形態では、Ｌ１は、置換されていてもよいＣ１－Ｃ１０アルキレン鎖である。いくつかの実施形態では、Ｌ２は、置換されていてもよいＣ１－Ｃ１０アルキレン鎖である。いくつかの実施形態では、Ｌ１は、置換されていてもよいＣ１－Ｃ５アルキレン鎖である。いくつかの実施形態では、Ｌ２は、置換されていてもよいＣ１－Ｃ５アルキレン鎖である。
いくつかの実施形態では、Ｌ１及びＬ２は各々、－ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２－である。いくつかの実施形態では、Ｌ１及びＬ２は各々、－ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２－である。いくつかの実施形態では、Ｌ１及びＬ２は各々、－ＣＨ２ＣＨ２－である。
いくつかの実施形態では、Ｌ３は結合、置換されていてもよいＣ１－Ｃ６アルキレン鎖、または置換されていてもよい二価Ｃ３－Ｃ６シクロアルキレンである。いくつかの実施形態では、Ｌ３は結合である。いくつかの実施形態では、Ｌ３は、置換されていてもよいＣ１－Ｃ６アルキレン鎖である。いくつかの実施形態では、Ｌ３は、置換されていてもよいＣ１－Ｃ３アルキレン鎖である。いくつかの実施形態では、Ｌ３は、非置換のＣ１－Ｃ３アルキレン鎖である。いくつかの実施形態では、Ｌ３は、－ＣＨ２－である。いくつかの実施形態では、Ｌ３は、－ＣＨ２ＣＨ２－である。いくつかの実施形態では、Ｌ３は、－ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２－である。いくつかの実施形態では、Ｌ３は、二価Ｃ３－Ｃ６シクロアルキレンである。いくつかの実施形態では、Ｌ３は
Figure 2024508047000038
 である。
いくつかの実施形態では、式（Ｉ）のチオレートのＳと、ＡのＮとの間の炭素原子の数は、２～１０である。いくつかの実施形態では、式（Ｉ）のチオレートのＳと、ＡのＮとの間の炭素原子の数は、２～８である。いくつかの実施形態では、式（Ｉ）のチオレートのＳと、ＡのＮとの間の炭素原子の数は、２～５である。いくつかの実施形態では、式（Ｉ）のチオレートのＳと、ＡのＮとの間の炭素原子の数は、２～４である。いくつかの実施形態では、式（Ｉ）のチオレートのＳと、ＡのＮとの間の炭素原子の数は、２である。いくつかの実施形態では、式（Ｉ）のチオレートのＳと、ＡのＮとの間の炭素原子の数は、３である。いくつかの実施形態では、式（Ｉ）のチオレートのＳと、ＡのＮとの間の炭素原子の数は、４である。
いくつかの実施形態では、Ｒ１は、置換されていてもよいＣ１－Ｃ３１脂肪族及び置換されていてもよいステロイジルからなる群から選択される。いくつかの実施形態では、Ｒ２は、置換されていてもよいＣ１－Ｃ３１脂肪族及び置換されていてもよいステロイジルからなる群から選択される。いくつかの実施形態では、Ｒ１は、置換されていてもよいＣ１－Ｃ３１アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒ２は、置換されていてもよいＣ１－Ｃ３１アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒ１は、置換されていてもよいＣ５－Ｃ２５アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒ２は、置換されていてもよいＣ５－Ｃ２５アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒ１は、置換されていてもよいＣ１０－Ｃ２０アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒ２は、置換されていてもよいＣ１０－Ｃ２０アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒ１は、置換されていてもよいＣ１０－Ｃ２０アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒ２は、置換されていてもよいＣ１０－Ｃ２０アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒ１は、非置換のＣ１０－Ｃ２０アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒ２は、非置換のＣ１０－Ｃ２０アルキルである。
いくつかの実施形態では、Ｒ１は、置換されていてもよいＣ１４－Ｃ１６アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒ２は、置換されていてもよいＣ１４－Ｃ１６アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒ１は、非置換のＣ１４－Ｃ１６アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒ２は、非置換のＣ１４－Ｃ１６アルキルである。
いくつかの実施形態では、Ｒ１は、置換されていてもよい分岐状Ｃ３－Ｃ３１アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒ２は、置換されていてもよい分岐状Ｃ３－Ｃ３１アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒ１は、置換されていてもよい分岐状Ｃ１０－Ｃ２０アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒ２は、置換されていてもよい分岐状Ｃ１０－Ｃ２０アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒ１は、置換されていてもよい分岐状Ｃ１４－Ｃ１６アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒ２は、置換されていてもよい分岐状Ｃ１４－Ｃ１６アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒ１は、置換された分岐状Ｃ３－Ｃ３１アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒ２は、置換された分岐状Ｃ３－Ｃ３１アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒ１は、置換された分岐状Ｃ１０－Ｃ２０アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒ２は、置換された分岐状Ｃ１０－Ｃ２０アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒ１は、置換された分岐状Ｃ１４－Ｃ１６アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒ２は、置換された分岐状Ｃ１４－Ｃ１６アルキルである。
いくつかの実施形態では、Ｒ１及びＲ２は同じである。
いくつかの実施形態では、Ｒ１及びＲ２は異なる。いくつかの実施形態では、Ｒ１は、置換されていてもよいＣ６－Ｃ２０アルケニルであり、Ｒ２は、置換されていてもよいＣ１０－Ｃ２０アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒ１は、Ｃ６－Ｃ２０アルケニルであり、Ｒ２は、分岐状Ｃ１０－Ｃ２０アルキルである。
いくつかの実施形態では、Ａは、少なくとも１つのＮを含み、０～６つのＲ３で置換されていてもよい４～７員ヘテロシクリル環である。いくつかの実施形態では、Ｒ３は、置換されていてもよいＣ１－Ｃ６脂肪族である。いくつかの実施形態では、Ｒ３は、置換されていてもよいＣ１－Ｃ３脂肪族である。いくつかの実施形態では、Ｒ３は、置換されていてもよいＣ１－Ｃ６アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒ３は、置換されていてもよいＣ１－Ｃ３アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒ３は、非置換のＣ１－Ｃ６アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒ３は、非置換のＣ１－Ｃ３アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒ３は、置換されていてもよいＣ１－Ｃ６アルケニルである。いくつかの実施形態では、Ｒ３は、置換されていてもよいＣ１－Ｃ３アルケニルである。いくつかの実施形態では、Ｒ３は、非置換のＣ１－Ｃ６アルケニルである。いくつかの実施形態では、Ｒ３は、非置換のＣ１－Ｃ３アルケニルである。
いくつかの実施形態では、Ｒ３は、１～３つのＣ３－Ｃ６シクロアルキルで置換されている。いくつかの実施形態では、Ｒ３は、１つのＣ３－Ｃ６シクロアルキルで置換されている。いくつかの実施形態では、Ｒ３は、シクロプロパニルで置換されている。いくつかの実施形態では、Ｒ３は、１～３つの－ＯＨで置換されている。いくつかの実施形態では、Ｒ３は、１つの－ＯＨで置換されている。
いくつかの実施形態では、ｍは０、１、２、３、４、５、または６である。いくつかの実施形態では、ｍは０または１である。いくつかの実施形態では、ｍは０である。いくつかの実施形態では、ｍは１である。いくつかの実施形態では、ｍは２である。いくつかの実施形態では、ｍは３である。いくつかの実施形態では、ｍは４である。いくつかの実施形態では、ｍは５である。いくつかの実施形態では、ｍは６である。
いくつかの実施形態では、ｎは０、１、２、または３である。いくつかの実施形態では、ｎは１または２である。いくつかの実施形態では、ｎは０である。いくつかの実施形態では、ｎは１である。いくつかの実施形態では、ｎは２である。いくつかの実施形態では、ｎは３である。
いくつかの実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、表１から選択される化合物、またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物である。
Figure 2024508047000039
Figure 2024508047000040
Figure 2024508047000041
Figure 2024508047000042
Figure 2024508047000043
式（Ａ）の化合物
様々な実施形態では、本明細書で提供されるのは、式（Ａ）の化合物：
Figure 2024508047000044
 またはその薬学的に許容される塩であり、式中、
ｎは、すべての端点を含む１０～２００の整数であり、
ＬＰ１は、－［（ＣＨ２）０－３－Ｃ（Ｏ）Ｏ］１－３－、－（ＣＨ２）０－３－Ｃ（Ｏ）Ｏ－（ＣＨ２）１－３－ＯＣ（Ｏ）－、または－Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｈ）－であり、
ＲＰ１は、Ｃ５－Ｃ２５アルキルまたはＣ５－Ｃ２５アルケニルであり、
ＲＰ２は、水素または－ＣＨ３である。
いくつかの実施形態では、式（Ａ）は、ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｈ）－（ＣＨ２）１７ＣＨ３ではない。
いくつかの実施形態では、ＬＰ１は、－ＣＨ２Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－ＣＨ２ＣＨ２Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－ＣＨ２Ｃ（Ｏ）ＯＣＨ２Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－ＣＨ２Ｃ（Ｏ）ＯＣＨ２ＣＨ２ＯＣ（Ｏ）－、または－Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｈ）－である。
いくつかの実施形態では、ＰＥＧ脂質は、式（Ａ－ａ）、式（Ａ－ｂ）、式（Ａ－ｃ）、式（Ａ－ｄ）、もしくは式（Ａ－ｅ）の化合物：
Figure 2024508047000045
 またはその薬学的に許容される塩である。
いくつかの実施形態では、ＲＰ１は、Ｃ６－Ｃ２４、Ｃ１０－Ｃ２０、Ｃ１０－Ｃ１８、Ｃ１０－Ｃ１６、Ｃ１０－Ｃ１４、Ｃ１０－Ｃ１２、Ｃ１２－Ｃ２０、Ｃ１２－Ｃ１８、Ｃ１２－Ｃ１６、Ｃ１２－Ｃ１４、Ｃ１４－Ｃ２０、Ｃ１４－Ｃ１８、Ｃ１４－Ｃ１６、Ｃ１６－Ｃ２０、Ｃ１６－Ｃ１８、またはＣ１８－Ｃ２０アルキルである。いくつかの実施形態では、ＲＰ１は、Ｃ１４－Ｃ１８アルキルである。いくつかの実施形態では、ＲＰ１は、Ｃ１４－Ｃ１６アルキルである。いくつかの実施形態では、ＲＰ１は、Ｃ１５－Ｃ１７アルキルである。いくつかの実施形態では、ＲＰ１は、Ｃ１６－Ｃ１８アルキルである。いくつかの実施形態では、ＲＰ１は、Ｃ６、Ｃ７、Ｃ８、Ｃ９、Ｃ１０、Ｃ１１、Ｃ１２、Ｃ１３、Ｃ１４、Ｃ１５、Ｃ１６、Ｃ１７、Ｃ１８、Ｃ１９、Ｃ２０、Ｃ２１、Ｃ２２、Ｃ２３、またはＣ２４アルキルである。いくつかの実施形態では、ＲＰ１は、Ｃ６－Ｃ２４、Ｃ１０－Ｃ２０、Ｃ１０－Ｃ１８、Ｃ１０－Ｃ１６、Ｃ１０－Ｃ１４、Ｃ１０－Ｃ１２、Ｃ１２－Ｃ２０、Ｃ１２－Ｃ１８、Ｃ１２－Ｃ１６、Ｃ１２－Ｃ１４、Ｃ１４－Ｃ２０、Ｃ１４－Ｃ１８、Ｃ１４－Ｃ１６、Ｃ１６－Ｃ２０、Ｃ１６－Ｃ１８、またはＣ１８－Ｃ２０アルケニルである。いくつかの実施形態では、ＲＰ１は、Ｃ１４－Ｃ１８アルケニルである。いくつかの実施形態では、ＲＰ１は、Ｃ１４－１６アルケニルである。いくつかの実施形態では、ＲＰ１は、Ｃ１５－Ｃ１７アルケニルである。いくつかの実施形態では、ＲＰ１は、Ｃ１６－１８アルケニルである。いくつかの実施形態では、ＲＰ１は、Ｃ６、Ｃ７、Ｃ８、Ｃ９、Ｃ１０、Ｃ１１、Ｃ１２、Ｃ１３、Ｃ１４、Ｃ１５、Ｃ１６、Ｃ１７、Ｃ１８、Ｃ１９、Ｃ２０、Ｃ２１、Ｃ２２、Ｃ２３、またはＣ２４アルケニルである。
いくつかの実施形態では、ＲＰ２は水素である。いくつかの実施形態では、ＲＰ２は、－ＣＨ３である。
いくつかの実施形態では、ｎは、平均で、１０～２００、１０～１８０、１０～１６０、１０～１４０、１０～１２０、１０～１００、１０～８０、１０～６０、１０～４０、１０～２０、２０～２００、２０～１８０、２０～１６０、２０～１４０、２０～１２０、２０～１００、２０～８０、２０～６０、２０～４０、４０～２００、４０～１８０、４０～１６０、４０～１４０、４０～１２０、４０～１００、４０～８０、４０～６０、６０～２００、６０～１８０、６０～１６０、６０～１４０、６０～１２０、６０～１００、６０～８０、８０～２００、８０～１８０、８０～１６０、８０～１４０、８０～１２０、８０～１００、１００～２００、１００～１８０、１００～１６０、１００～１４０、１００～１２０、１２０～２００、１２０～１８０、１２０～１６０、１２０～１４０、１４０～２００、１４０～１８０、１４０～１６０、１６０～２００、１６０～１８０、または１８０～２００である。いくつかの実施形態では、ｎは、平均で、１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１１０、１２０、１３０、１４０、１５０、１６０、１７０、１８０、１９０、または２００である。いくつかの実施形態では、ｎは、平均で約２０である。いくつかの実施形態では、ｎは、平均で約４０である。いくつかの実施形態では、ｎは、平均で約４５である。いくつかの実施形態では、ｎは、平均で約５０である。いくつかの実施形態では、ｎは、平均で約６８である。いくつかの実施形態では、ｎは、平均で約７５である。いくつかの実施形態では、ｎは、平均で約１００である。
いくつかの実施形態では、式（Ａ）の化合物は、
ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－ＣＨ２Ｃ（Ｏ）Ｏ－（ＣＨ２）１７ＣＨ３［ｎは、平均で約４５である］、
Ｈ３ＣＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－ＣＨ２Ｃ（Ｏ）Ｏ－（ＣＨ２）１７ＣＨ３［ｎは、平均で約４５である］、
ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－ＣＨ２Ｃ（Ｏ）Ｏ－（ＣＨ２）１５ＣＨ３［ｎは、平均で約４５である］、
ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－ＣＨ２Ｃ（Ｏ）Ｏ－（ＣＨ２）１３ＣＨ３［ｎは、平均で約４５である］、及び
ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｈ）－（ＣＨ２）１７ＣＨ３［ｎは、平均で約４５である］
からなる群から選択される化合物、またはその薬学的に許容される塩である。
代替的な実施形態
代替的な実施形態において、本明細書に記載される化合物は、１つ以上の同位体置換を含んでもよい。例えば、水素は２Ｈ（Ｄもしくは重水素）または３Ｈ（Ｔもしくはトリチウム）でもよく、炭素は例えば、１３Ｃまたは１４Ｃでもよく、酸素は例えば、１８Ｏでもよく、窒素は例えば、１５Ｎなどでもよい。他の実施形態では、特定の同位体（例えば、３Ｈ、１３Ｃ、１４Ｃ、１８Ｏ、または１５Ｎ）が、化合物の特定の部位を占有する元素の総同位体存在度の少なくとも１％、少なくとも５％、少なくとも１０％、少なくとも１５％、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９９％、または少なくとも９９．９％に相当してもよい。
脂質ナノ粒子
いくつかの実施形態では、本開示の化合物は、ナノ粒子を形成するために使用される。いくつかの実施形態では、ナノ粒子は、脂質ナノ粒子（ＬＮＰ）である。いくつかの実施形態では、ＬＮＰは、ＰＥＧ脂質、イオン化可能な脂質、ヘルパー脂質、及び構造脂質を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるＬＮＰは、治療剤を必要とする対象にそれを送達するために製剤化されている。いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるＬＮＰは、核酸分子を必要とする対象にそれを送達するために製剤化されている。
ＬＮＰ中の脂質の配合は、特定のＬＮＰの治療的使用及び有効性に著しく影響する。例えば、ＳＳ－ＯＣ／コレステロール／ＤＳＰＣ／ＰＥＧ２ｋ－ＤＰＧなどのＬＮＰ製剤は、典型的に、例えばマウス、非ヒト霊長類（ＮＨＰ）、及び／またはヒトにおける繰り返し静脈内（ＩＶ）投与の際に増加したクリアランス速度を示し、１回目の投薬後よりも２回目の投薬後に大幅に短いｉｎ ｖｉｖｏ循環時間を示す。短縮された循環時間は、おそらく標的へのＬＮＰの曝露が減少することにより、ＬＮＰの送達効率に悪影響を及ぼし得る。したがって、そのような製剤は、複数投与を必要としない薬剤の送達において有用であり得るが、後続投与を必要とする薬剤の送達のためのそれらの使用は、この短縮された循環時間によって制約され得る。
ｉｎ ｖｉｖｏで繰り返し投薬した際に、調節可能な循環及び標的細胞への曝露、例えば、持続的な循環及び一貫した曝露を示すＬＮＰ製剤が依然として必要とされている。本開示は、ＬＮＰの脂質配合に本開示のイオン化可能な脂質及び／またはＰＥＧ脂質を組み込むことにより、そのようなＬＮＰ製剤を提供する。
カチオン性脂質
いくつかの実施形態では、本明細書で提供されるＬＮＰは、１つ以上のカチオン性脂質を含む。「カチオン性脂質」及び「イオン化可能な脂質」は、本明細書では互換的に使用される。
カチオン性脂質は、生理学的ｐＨなどの選択されたｐＨで正味の正電荷を帯びる複数の脂質種のいずれかを指す。かかる脂質は、限定されるものではないが、１，２－ジリノレイルオキシ－Ｎ，Ｎ－ジメチルアミノプロパン（ＤＬｉｎＤＭＡ）、１，２－ジリノレニルオキシ－Ｎ，Ｎ－ジメチルアミノプロパン（ＤＬｅｎＤＭＡ）、ジオクタデシルジメチルアンモニウム（ＤＯＤＭＡ）、ジステアリルジメチルアンモニウム（ＤＳＤＭＡ）、Ｎ，Ｎ－ジオレイル－Ｎ，Ｎ－ジメチルアンモニウムクロリド（ＤＯＤＡＣ）、Ｎ－（２，３－ジオレイルオキシ）プロピル）－Ｎ，Ｎ，Ｎ－トリメチルアンモニウムクロリド（ＤＯＴＭＡ）、Ｎ，Ｎ－ジステアリル－Ｎ，Ｎ－ジメチルアンモニウムブロミド（ＤＤＡＢ）、Ｎ－（２，３－ジオレオイルオキシ）プロピル）－Ｎ，Ｎ，Ｎ－トリメチルアンモニウムクロリド（ＤＯＴＡＰ）、３－（Ｎ－（Ｎ’，Ｎ’－ジメチルアミノエタン）－カルバモイル）コレステロール（ＤＣ－Ｃｈｏｌ）、及びＮ－（１，２－ジミリスチルオキシプロパ－３－イル）－Ｎ，Ｎ－ジメチル－Ｎ－ヒドロキシエチルアンモニウムブロミド（ＤＭＲＩＥ）を含む。例えば、生理学的ｐＨ未満で正電荷を有するカチオン性脂質は、限定されるものではないが、ＤＯＤＡＰ、ＤＯＤＭＡ、及びＤＭＤＭＡを含む。いくつかの実施形態では、カチオン性脂質は、Ｃ１８アルキル鎖、頭部基とアルキル鎖との間のエーテル結合、及び０～３の二重結合を含む。かかる脂質には、例えば、ＤＳＤＭＡ、ＤＬｉｎＤＭＡ、ＤＬｅｎＤＭＡ、及びＤＯＤＭＡが含まれる。
いくつかの実施形態では、カチオン性脂質は、プロトン化可能な第三級アミン頭部基を含む。かかる脂質は、本明細書ではイオン化可能な脂質と称される。イオン化可能な脂質は、イオン化可能なアミン頭部基を含み、典型的には約７未満のｐＫａを含む脂質種を指す。したがって、酸性ｐＨの環境では、イオン化可能なアミン頭部基は、イオン化可能な脂質が負に帯電した分子（例えば、本明細書に記載の組換えポリヌクレオチドなどの核酸）と優先的に相互作用するようにプロトン化され、したがってナノ粒子のアセンブリ及びカプセル化を促進する。したがって、いくつかの実施形態では、イオン化可能な脂質は、脂質ナノ粒子への核酸の負荷を増加させることができる。ｐＨが約７よりも大きい環境（例えば、約７．４の生理学的ｐＨ）では、イオン化可能な脂質は中性電荷を含む。イオン化可能な脂質を含む粒子がエンドソームの低ｐＨ環境（例えば、ｐＨ＜７）に取り込まれると、イオン化可能な脂質は再びプロトン化され、アニオン性エンドソーム膜と結合して、粒子によってカプセル化された内容物の放出を促進する。いくつかの実施形態では、ＬＮＰは、イオン化可能な脂質、例えば、７．ＳＳ切断可能なｐＨ応答性脂質様物質（ＣＯＡＴＳＯＭＥ（登録商標）ＳＳシリーズなど）を含む。
いくつかの実施形態では、イオン化可能な脂質は、ＤＬｉｎＤＭＡ、ＤＬｉｎ－ＫＣ２－ＤＭＡ、ＤＬｉｎ－ＭＣ３－ＤＭＡ（ＭＣ３）、ＣＯＡＴＳＯＭＥ（登録商標）ＳＳ－ＬＣ（旧名：ＳＳ－１８／４ＰＥ－１３）、ＣＯＡＴＳＯＭＥ（登録商標）ＳＳ－ＥＣ（旧名：ＳＳ－３３／４ＰＥ－１５）、ＣＯＡＴＳＯＭＥ（登録商標）ＳＳ－ＯＣ、ＣＯＡＴＳＯＭＥ（登録商標）ＳＳ－ＯＰ、ジ（（Ｚ）－ノナ－２－エン－１－イル）９－（（４－ジメチルアミノ）ブタノイル）オキシ）ヘプタデカンジオエート（Ｌ－３１９）、Ｎ－（２，３－ジオレオイルオキシ）プロピル）－Ｎ，Ｎ，Ｎ－トリメチルアンモニウムクロリド（ＤＯＴＡＰ）、またはそれらの混合物から選択される。
いくつかの実施形態では、ＬＮＰのカチオン性脂質は、式（Ｉ）の化合物：
Figure 2024508047000046
 またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物であり、式中、変数は本明細書で定義されている。
いくつかの実施形態では、本開示のカチオン性脂質は、表１から選択される化合物、またはその薬学的に許容される塩である。
いくつかの実施形態では、ＬＮＰのカチオン性脂質は、式（ＩＩ－１）の化合物：
Figure 2024508047000047
 またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物であり、式中、
Ｒｌａ及びＲ１ｂは、各々独立的に、Ｃ１－Ｃ８脂肪族または－Ｏ（Ｃ１－Ｃ８脂肪族）－であり、ここで、Ｏ原子は、存在する場合、ピペリジン環に結合しており、
Ｘａ及びＸｂは、各々独立的に、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－＊、－ＯＣ（Ｏ）－＊、－Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒｘ １）－＊、－Ｎ（Ｒｘ １）Ｃ（Ｏ）－＊、－Ｏ（Ｃ＝Ｏ）Ｎ（Ｒｘ １）－＊、－Ｎ（Ｒｘ １）（Ｃ＝Ｏ）Ｏ－＊、または－Ｏ－であり、ここで、－＊は、それぞれＲ２ａまたはＲ２ｂへの結合点を示し、Ｒｘ １の各存在は、水素及び置換されていてもよいＣ１－Ｃ４アルキルから独立的に選択され、
Ｒ２ａ及びＲ２ｂは、各々独立的に、ステロール残基、脂溶性ビタミン残基、またはＣ１３－Ｃ２３脂肪族である。
いくつかの実施形態では、ＬＮＰのカチオン性脂質は、式（ＩＩ－２）の化合物：
Figure 2024508047000048
 またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物であり、式中、
Ｒ１ａ’及びＲ１ｂ’は、各々独立的に、Ｃ１－Ｃ８アルキレンまたは－Ｏ（Ｃ１－Ｃ８アルキレン）であり、ここで、Ｏ原子は、存在する場合、ピペリジン環に結合しており、
Ｙａ’及びＹｂ’は、各々独立的に、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－＊、－ＯＣ（Ｏ）－＊、－Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒｘ １）－＊、－Ｎ（Ｒｘ １）Ｃ（Ｏ）－＊、－Ｏ（Ｃ＝Ｏ）Ｎ（Ｒｘ １）－＊、－Ｎ（Ｒｘ １）（Ｃ＝Ｏ）Ｏ－＊、－Ｎ（Ｒｘ １）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒｘ １）－、または－Ｏ－であり、ここで、－＊は、Ｒ２ａまたはＲ２ｂへの結合点を示し、Ｒｘ １の各存在は、水素及び置換されていてもよいＣ１－Ｃ４アルキルから独立的に選択され、
Ｚａ’及びＺｂ’は、各々独立的に、置換されていてもよいアリーレン－Ｃ０－Ｃ８アルキレンまたは置換されていてもよいアリーレン－Ｃ０－Ｃ８ヘテロアルキレンであり、ここで、アルキレンまたはヘテロアルキレン基は、それぞれＹａ’及びＹｂ’に結合しており、
Ｒ２ａ’及びＲ２ｂ’は、各々独立的に、ステロール残基、脂溶性ビタミン残基、またはＣ１２－Ｃ２２脂肪族である。
いくつかの実施形態では、ＬＮＰのカチオン性脂質は、式（ＩＩ－１ａ）の化合物（ＣＯＡＴＳＯＭＥ（登録商標）ＳＳ－ＯＣ）または式（ＩＩ－２ａ）の化合物（ＣＯＡＴＳＯＭＥ（登録商標）ＳＳ－ＯＰ）である。
Figure 2024508047000049
いくつかの実施形態では、ＬＮＰのカチオン性脂質は、式（ＩＩ－１ａ）の化合物（ＣＯＡＴＳＯＭＥ（登録商標）ＳＳ－ＯＣ）である。ＣＯＡＴＳＯＭＥ（登録商標）ＳＳ－ＯＣは、ＳＳ－１８／４ＰＥ－１６としても知られている。
いくつかの実施形態では、ＬＮＰのカチオン性脂質は、式（ＩＩ－２ａ）の化合物（ＣＯＡＴＳＯＭＥ（登録商標）ＳＳ－ＯＰ）である。
いくつかの実施形態では、ＬＮＰのカチオン性脂質は、１，２－ジオレオイル－３－トリメチルアンモニウム－プロパン（ＤＯＴＡＰ）である。
ヘルパー脂質
いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるＬＮＰは、１つ以上のヘルパー脂質を含む。「ヘルパー脂質」という用語は、標的への、例えば細胞へのＬＮＰの送達を増加させることができる脂質を指す。いずれかの特定の理論に束縛されることを望むものではないが、ヘルパー脂質は、脂質ナノ粒子の安定性及び／または膜融合性を増強させ得ることが企図される。いくつかの実施形態では、ヘルパー脂質は、リン脂質である。いくつかの実施形態では、ヘルパー脂質は、リン脂質代替物または代用物である。いくつかの実施形態では、ヘルパー脂質は、アルキルレゾルシノールである。
いくつかの実施形態では、ヘルパー脂質は、ホスファチジルコリン（ＰＣ）である。いくつかの実施形態では、ヘルパー脂質は、ホスファチジルコリン（ＰＣ）ではない。いくつかの実施形態では、ヘルパー脂質は、リン脂質またはリン脂質代替物である。いくつかの実施形態では、リン脂質またはリン脂質代替物は、例えば、１つ以上の飽和もしくは（ポリ）不飽和リン脂質、もしくはリン脂質代替物、またはそれらの組み合わせであり得る。一般に、リン脂質は、リン酸頭部基及び１つ以上の脂肪酸尾部を含む。いくつかの実施形態では、リン脂質は、１つ以上の多重（例えば、二重または三重）結合（すなわち、１つ以上の不飽和）を含み得る。いくつかの実施形態では、ヘルパー脂質は、非カチオン性である。
リン酸頭部基は、例えば、ホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルグリセロール、ホスファチジルセリン、ホスファチジン酸、２－リゾホスファチジルコリン、及びスフィンゴミエリンからなる非限定的な群から選択され得る。
脂肪酸尾部は、例えば、ラウリン酸、ミリスチン酸、ミリストレイン酸、パルミチン酸、パルミトレイン酸、ステアリン酸、オレイン酸、リノール酸、アルファ－リノレン酸、エルカ酸、フィタン酸（ｐｈｙｔａｎｏｉｃ ａｃｉｄ）、アラキジン酸、アラキドン酸、エイコサペンタエン酸、ベヘン酸、ドコサペンタエン酸、及びドコサヘキサエン酸からなる非限定的な群から選択され得る。
リン脂質は、ホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルセリン、ホスファチジルイノシトール、ホスファチジグリセロール、及びホスファチジン酸などのグリセロリン脂質を含むが、これらに限定されない。リン脂質は、スフィンゴミエリンなどのホスホスフィンゴ脂質も含む。
いくつかの実施形態では、非カチオン性ヘルパー脂質は、ＤＳＰＣ類似体、ＤＳＰＣ代替物、オレイン酸、またはオレイン酸類似体である。
いくつかの実施形態では、非カチオン性ヘルパー脂質は、非ホスファチジルコリン（ＰＣ）双性イオン脂質、ＤＳＰＣ類似体、オレイン酸、オレイン酸類似体、または１，２－ジステアロイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン（ＤＳＰＣ）代替物である。
いくつかの実施形態では、リン脂質は、膜への融合を容易にし得る。例えば、カチオン性リン脂質は、膜（例えば、細胞膜または細胞内膜）の１つ以上の負に帯電したリン脂質と相互作用し得る。膜へのリン脂質の融合は、脂質含有組成物の１つ以上の要素に膜を通過させて、例えば、１つ以上の要素の細胞への送達を可能にし得る。
いくつかの実施形態では、リン酸頭部基は、ホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルグリセロール、ホスファチジルセリン、ホスファチジン酸、２－リゾホスファチジルコリン、及びスフィンゴミエリンからなる非限定的な群から選択され得る。脂肪酸尾部は、例えば、ラウリン酸、ミリスチン酸、ミリストレイン酸、パルミチン酸、パルミトレイン酸、ステアリン酸、オレイン酸、リノール酸、アルファ－リノレン酸、エルカ酸、フィタン酸（ｐｈｙｔａｎｏｉｃ ａｃｉｄ）、アラキジン酸、アラキドン酸、エイコサペンタエン酸、ベヘン酸、ドコサペンタエン酸、及びドコサヘキサエン酸からなる非限定的な群から選択され得る。
いくつかの実施形態では、ＬＮＰは、１つ以上の非カチオン性ヘルパー脂質（例えば、中性脂質）を含む。例示的な中性ヘルパー脂質には、（１，２－ジラウロイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホエタノールアミン）（ＤＬＰＥ）、１，２－ジフィタノイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホエタノールアミン（ＤｉＰＰＥ）、１，２－ジステアロイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン（ＤＳＰＣ）、１，２－ジパルミトイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン（ＤＰＰＣ）、１，２－ジオレイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホエタノールアミン（ＤＯＰＥ）、１，２－ジパルミトイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホエタノールアミン（ＤＰＰＥ）、１，２－ジミリストイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホエタノールアミン（ＤＭＰＥ）、（１，２－ジオレオイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホ－（ｌ’－ｒａｃ－グリセロール）（ＤＯＰＧ）、１，２－ジオレオイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン（ＤＯＰＣ）、１，２－ジステアロイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホエタノールアミン（ＤＳＰＥ）、セラミド、及びスフィンゴミエリンが含まれる。いくつかの実施形態では、１つ以上のヘルパー脂質は、１，２－ジステアロイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン（ＤＳＰＣ）、１，２－ジラウロイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホエタノールアミン（ＤＬＰＥ）、１，２－ジオレオイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン（ＤＯＰＣ）、及び１，２－ジオレオイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホエタノールアミン（ＤＯＰＥ）から選択される。いくつかの実施形態では、ＬＮＰのヘルプ脂質は、１，２－ジラウロイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホエタノールアミン（ＤＬＰＥ）または１，２－ジオレオイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホエタノールアミン（ＤＯＰＥ）を含むか、それから本質的になるか、またはそれからなる。いくつかの実施形態では、ＬＮＰは、ＤＳＰＣを含む。いくつかの実施形態では、ＬＮＰは、ＤＯＰＣを含む。いくつかの実施形態では、ＬＮＰは、ＤＬＰＥを含む。いくつかの実施形態では、ＬＮＰは、ＤＯＰＥを含む。
いくつかの実施形態では、リン脂質は、１，２－ジステアロイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン（ＤＳＰＣ）、１，２－ジオレオイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホエタノールアミン（ＤＯＰＥ）、１，２－ジリノレオイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン（ＤＬＰＣ）、１，２－ジミリストイル－ｓｎ－グリセロ－ホスホコリン（ＤＭＰＣ）、１，２－ジオレオイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン（ＤＯＰＣ）、１，２－ジパルミトイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン（ＤＰＰＣ）、１，２－ジウンデカノイル－ｓｎ－グリセロ－ホスホコリン（ＤＵＰＣ）、１－パルミトイル－２－オレオイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン（ＰＯＰＣ）、１，２－ジ－Ｏ－オクタデセニル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン（１８：０ジエーテルＰＣ）、１－オレオイル－２－コレステリルヘミスクシノイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン（ＯＣｈｅｍｓＰＣ）、１－ヘキサデシル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン（Ｃ１６ Ｌｙｓｏ ＰＣ）、１，２－ジリノレノイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン（１８：３（ｃｉｓ）ＰＣ）、１，２－ジアラキドノイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン（ＤＡＰＣ）、１，２－ジドコサヘキサエノイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン（２２：６（ｃｉｓ）ＰＣ）１，２－ジフィタノイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホエタノールアミン（４ＭＥ １６．０ ＰＥ）、１，２－ジステアロイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホエタノールアミン（ＤＳＰＥ）、１，２－ジリノレオイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホエタノールアミン（ＰＥ（１８：２／１８：２）、１，２－ジリノレノイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホエタノールアミン（ＰＥ １８：３（９Ｚ、１２Ｚ、１５Ｚ）、１，２－ジアラキドノイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホエタノールアミン（ＤＡＰＥ １８：３（９Ｚ、１２Ｚ、１５Ｚ）、１，２－ジドコサヘキサエノイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホエタノールアミン（２２：６（ｃｉｓ）ＰＥ）、１，２－ジオレオイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホ－ｒａｃ－（１－グリセロール）ナトリウム塩（ＤＯＰＧ）、及びスフィンゴミエリンからなる非限定的な群から選択される。
いくつかの実施形態では、ヘルパー脂質は、ジステアロイル－ｓｎ－グリセロ－ホスホエタノールアミン、ジステアロイルホスファチジルコリン（ＤＳＰＣ）、ジオレオイルホスファチジルコリン（ＤＯＰＣ）、ジパルミトイルホスファチジルコリン（ＤＰＰＣ）、ジオレオイルホスファチジルグリセロール（ＤＯＰＧ）、ジパルミトイルホスファチジルグリセロール（ＤＰＰＧ）、ジオレオイル－ホスファチジルエタノールアミン（ＤＯＰＥ）、パルミトイルオレオイルホスファチジルコリン（ＰＯＰＣ）、パルミトイルオレオイルホスファチジルエタノールアミン（ＰＯＰＥ）、ジオレオイルホスファチジルエタノールアミン４－（Ｎ－マレイミドメチル）－シクロヘキサン－ｌ－カルボキシレート（ＤＯＰＥ－ｍａｌ）、ジパルミトイルホスファチジルエタノールアミン（ＤＰＰＥ）、ジミリストイルホスホエタノールアミン（ＤＭＰＥ）、ジステアロイル－ホスファチジル－エタノールアミン（ＤＳＰＥ）、モノメチル－ホスファチジルエタノールアミン、ジメチルホスファチジルエタノールアミン、１８－１－ｔｒａｎｓ ＰＥ、ｌ－ステアロイル－２－オレオイルホスファチジエタノールアミン（ＳＯＰＥ）、水素添加大豆ホスファチジルコリン（ＨＳＰＣ）、卵ホスファチジルコリン（ＥＰＣ）、ジオレオイルホスファチジルセリン（ＤＯＰＳ）、スフィンゴミエリン（ＳＭ）、ジミリストイルホスファチジルコリン（ＤＭＰＣ）、ジミリストイルホスファチジルグリセロール（ＤＭＰＧ）、ジステアロイルホスファチジルグリセロール（ＤＳＰＧ）、ジエルコイルホスファチジルコリン（ＤＥＰＣ）、パルミトイルオレイオルホスファチジルグリセロール（ＰＯＰＧ）、ジエライドイル－ホスファチジルエタノールアミン（ＤＥＰＥ）、レシチン、ホスファチジルエタノールアミン、リゾレシチン、リゾホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルセリン、ホスファチジルイノシトール、スフィンゴミエリン、卵スフィンゴミエリン（ＥＳＭ）、セファリン、カルジオリピン、ホスファチジン酸、セレブロシド、ジセチルホスフェート、リゾホスファチジルコリン、及びジリノレオイルホスファチジルコリンからなる群から選択される。
いくつかの実施形態では、本開示のヘルパー脂質はＤＳＰＣである。
いくつかの実施形態では、ＬＮＰはＤＳＰＣを含む。いくつかの実施形態では、ＬＮＰはＤＯＰＥを含む。いくつかの実施形態では、ＬＮＰはＤＭＰＥを含む。いくつかの実施形態では、ＬＮＰはＤＳＰＣ及びＤＯＰＥの両方を含む。
いくつかの実施形態では、ヘルパー脂質は、ＤＳＰＣ、ＤＭＰＥ、及びＤＯＰＣまたはそれらの組み合わせからなる群から選択される。
本開示のいくつかの実施形態では、ヘルパー脂質は、
Figure 2024508047000050
 であり、ＣＡＳ番号は８１６－９４－４であり、示性式はＣ４４Ｈ８８ＮＯ８Ｐである。ＤＳＰＣは、１，２－ジステアロイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリンとしても知られている。
いくつかの実施形態では、本開示のリン脂質は、修飾型尾部を含む。いくつかの実施形態では、リン脂質は、修飾型尾部を含む、ＤＳＰＣ（１，２－ジオクタデカノイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン）、またはその類似体である。本明細書に記載される場合、「修飾型尾部」は、より短いもしくはより長い脂肪族鎖、分岐が導入された脂肪族鎖、置換基が導入された脂肪族鎖、１つ以上のメチレンが環式基もしくはヘテロ原子基で置き換えられた脂肪族鎖、またはそれらのいずれかの組み合わせを含む尾部であり得る。
いくつかの実施形態では、本開示のヘルパー脂質は、リン脂質ではない代替的な脂質である。
いくつかの実施形態では、本開示で有用なリン脂質は、修飾型尾部を含む。いくつかの実施形態では、本開示で有用なリン脂質は、修飾型尾部を含む、ＤＳＰＣ、またはその類似体である。本明細書に記載される場合、「修飾型尾部」は、より短いもしくはより長い脂肪族鎖、分岐が導入された脂肪族鎖、置換基が導入された脂肪族鎖、１つ以上のメチレンが環式基もしくはヘテロ原子基で置き換えられた脂肪族鎖、またはそれらのいずれかの組み合わせを含む尾部であり得る。
いくつかの実施形態では、本開示で有用なリン脂質は、第四級アミンをホスホリル基に連結するアルキル鎖がエチレンではない（例えば、ｎが２ではない）、修飾型ホスホコリン部分を含む。
いくつかの実施形態では、本開示のＬＮＰは、オレイン酸またはオレイン酸類似体をヘルパー脂質として含む。いくつかの実施形態では、オレイン酸類似体は、修飾型オレイン酸尾部、修飾型カルボン酸部分、またはその両方を含む。いくつかの実施形態では、オレイン酸類似体は、オレイン酸のカルボン酸部分が異なる基で置き換えられた化合物である。
いくつかの実施形態では、本開示のＬＮＰは、ヘルパー脂質としてリン脂質の代わりに異なる双性イオン基を含む。
いくつかの実施形態では、本開示のヘルパー脂質は、天然に存在する膜脂質である。いくつかの実施形態では、本開示のヘルパー脂質は、１，２－ジパルミトイル－ｓｎ－グリセロ－３－Ｏ－４’－（Ｎ，Ｎ，Ｎ－トリメチル）－ホモセリン（ＤＧＴＳ）、モノガラクトシルジアシルグリセロール（ＭＧＤＧ）、ジガラクトシルジアシルグリセロール（ＤＧＤＧ）、スルホキノボシルジアシルグリセロール（ＳＱＤＧ）、１－パルミトイル－２－ｃｉｓ－９，１０－メチレンヘキサデカノイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン（シクロＰＣ）、またはそれらの組み合わせである。いくつかの実施形態では、本開示のＬＮＰは、ヘルパー脂質の組み合わせを含む。いくつかの実施形態では、ヘルパー脂質の組み合わせは、ＤＳＰＣを含まない。いくつかの実施形態では、ヘルパー脂質の組み合わせは、ＤＳＰＣを含む。いくつかの実施形態では、１つ以上の天然に存在する膜脂質（例えば、ＤＧＴＳ）を含むＬＮＰは、唯一のヘルパー脂質としてＤＳＰＣを含むＬＮＰと比較して、ＬＮＰ中にカプセル化されたペイロード分子の肝臓トランスフェクション／送達が改善している。
いくつかの実施形態では、本開示のヘルパー脂質は、５－ヘプタデシルレゾルシノールまたはその誘導体である。
構造脂質
いくつかの実施形態では、本開示のＬＮＰは、１つ以上の構造脂質を含む。脂質ナノ粒子への構造脂質の組み込みは、粒子中の他の脂質の凝集を軽減させるのに役立ち得る。構造脂質は、ステロール、またはステロール部分を含む脂質であり得るが、これらに限定されない。
いくつかの実施形態では、ＬＮＰの構造脂質は、ステロール（例えば、植物ステロールまたは動物ステロール）である。いくつかの実施形態では、ステロールは、コレステロール、またはその類似体もしくは誘導体である。いくつかの実施形態では、ステロールは、コレステロールである。いくつかの実施形態では、ステロールは、単独または組み合わせの、コレステロール、β－シトステロール、フェコステロール、エルゴステロール、シトステロール、カンペステロール、スチグマステロール、ブラシカステロール、エルゴステロール、トマチジン、トマチン、ウルソル酸、アルファ－トコフェロールであり、それらの類似体、塩、またはエステルを含む。
いくつかの実施形態では、ＬＮＰの構造脂質は、コレステロール、コルチコステロイド（例えば、プレドニゾロン、デキサメタゾン、プレドニゾン、及びヒドロコルチゾンなど）、またはそれらの組み合わせである。
いくつかの実施形態では、ＬＮＰの構造脂質は、植物ステロールである。いくつかの実施形態では、植物ステロールは、単独または組み合わせの、シトステロール、スチグマステロール、カンペステロール、シトスタノール、カンペスタノール、ブラシカステロール、フコステロール、ベータ－シトステロール、スチグマスタノール、ベータ－シトスタノール、エルゴステロール、ルペオール、シクロアルテノール、Ａ５－アベナセロール、Ａ７－アベナセロール、またはＡ７－スチグマステロールであり、それらの類似体、塩、またはエステルを含む。
いくつかの実施形態では、ＬＮＰは、１つ以上の植物ステロールを含む。いくつかの実施形態では、ＬＮＰの植物ステロール成分は、単一の植物ステロールである。いくつかの実施形態では、本開示のＬＮＰの植物ステロール成分は、異なる植物ステロール（例えば、２、３、４、５または６つの異なる植物ステロール）の混合物である。いくつかの実施形態では、本開示のＬＮＰの植物ステロール成分は、１つ以上の植物ステロールと１つ以上の動物ステロールとのブレンド、例えば植物ステロール（例えば、ベータ－シトステロールなどのシトステロール）とコレステロールとのブレンドである。
本開示のいくつかの実施形態では、ＬＮＰの構造脂質は、コレステロール：
Figure 2024508047000051
 であり、ＣＡＳ番号は５７－８８－５であり、示性式はＣ２７Ｈ４６Ｏである。
ＰＥＧ脂質
いくつかの実施形態では、本開示のＰＥＧ脂質は、親水性頭部基及び疎水性脂質尾部を含む。いくつかの実施形態では、親水性頭部基はＰＥＧ部分である。いくつかの実施形態では、本開示のＰＥＧ脂質は、モノ脂質尾部を含む。いくつかの実施形態では、本開示のＰＥＧ脂質は、モノアルキル脂質尾部、モノアルケニル脂質尾部、モノアルキニル脂質尾部、またはモノアシル脂質尾部を含む。いくつかの実施形態では、モノ脂質尾部は、エーテル基、カルボニル基、またはエステル基を含む。いくつかの実施形態では、本開示のＰＥＧ脂質は、ポリオキシエチレンアルキルエーテル、ポリオキシエチレンアルケニルエーテル、またはポリオキシエチレンアルキニルエーテル（そのような分子はＢＲＩＪ（商標）分子としても知られている）を含み得る。いくつかの実施形態では、本開示のＰＥＧ脂質は、ポリオキシエチレンアルキルエステル、ポリオキシエチレンアルケニルエステル、またはポリオキシエチレンアルキニルエステル（そのような分子はＭＹＲＪ（商標）分子としても知られている）を含み得る。
いくつかの実施形態では、ＰＥＧ脂質は、ジ－アシル脂質尾部を含み得る。
いくつかの実施形態では、ＰＥＧ脂質は、式（Ａ）の化合物：
Figure 2024508047000052
 またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物であり、式中、変数は本明細書で定義されている。
いくつかの実施形態では、ＰＥＧ脂質は、式（Ａ’）の化合物：
Figure 2024508047000053
 またはその薬学的に許容される塩であり、式中、
ｎは、すべての端点を含む１０～２００の整数であり、
ＬＰ１’は結合、－Ｃ（Ｏ）－、－［（ＣＨ２）０－３－Ｃ（Ｏ）Ｏ］１－３－、－（ＣＨ２）０－３－Ｃ（Ｏ）Ｏ－（ＣＨ２）１－３－ＯＣ（Ｏ）－、または－Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｈ）－であり、
ＲＰ１’は、Ｃ５－Ｃ２５アルキルまたはＣ５－Ｃ２５アルケニルであり、
ＲＰ２’は、水素または－ＣＨ３である。
いくつかの実施形態では、ＬＰ１’は結合、－Ｃ（Ｏ）－、－ＣＨ２Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－ＣＨ２ＣＨ２Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－ＣＨ２Ｃ（Ｏ）ＯＣＨ２Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－ＣＨ２Ｃ（Ｏ）ＯＣＨ２ＣＨ２ＯＣ（Ｏ）－、または－Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｈ）－である。いくつかの実施形態では、ＲＰ１’は、ＲＰ１である。いくつかの実施形態では、ＲＰ２’は、ＲＰ２である。
いくつかの実施形態では、ＰＥＧ脂質は、式（Ａ”）の化合物：
Figure 2024508047000054
 またはその薬学的に許容される塩であり、式中、
ｎは、すべての端点を含む１０～２００の整数であり、
ＬＰ１”は結合、－［（ＣＨ２）０－３－Ｃ（Ｏ）Ｏ］１－３－、－（ＣＨ２）０－３－Ｃ（Ｏ）Ｏ－（ＣＨ２）１－３－ＯＣ（Ｏ）－、または－Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｈ）－であり、
ＲＰ１”は、Ｃ５－Ｃ２５アルキルまたはＣ５－Ｃ２５アルケニルであり、
ＲＰ２”は、水素または－ＣＨ３である。
いくつかの実施形態では、ＬＰ１”は結合、－ＣＨ２Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－ＣＨ２ＣＨ２Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－ＣＨ２Ｃ（Ｏ）ＯＣＨ２Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－ＣＨ２Ｃ（Ｏ）ＯＣＨ２ＣＨ２ＯＣ（Ｏ）－、または－Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｈ）－である。
いくつかの実施形態では、ＰＥＧ脂質は、式（Ａ”－ａ）、式（Ａ”－ｂ）、式（Ａ”－ｃ）、式（Ａ”－ｃｄ）、式（Ａ”－ｅ）、もしくは式（Ａ”－ｆ）の化合物：
Figure 2024508047000055
 またはその薬学的に許容される塩である。
いくつかの実施形態では、ＲＰ１”は、ＲＰ１である。いくつかの実施形態では、ＲＰ２”は、ＲＰ２である。
いくつかの実施形態では、ＰＥＧ脂質は、式（Ａ”－ｆ１）の化合物：
Figure 2024508047000056
 またはその薬学的に許容される塩である。
いくつかの実施形態では、ＰＥＧ脂質は、式（Ａ”－ｆ２）の化合物：
Figure 2024508047000057
 またはその薬学的に許容される塩である。
いくつかの実施形態では、ＰＥＧ脂質は、式（Ａ”－ｆ３）の化合物：
Figure 2024508047000058
 またはその薬学的に許容される塩である。
いくつかの実施形態では、本開示のＰＥＧ脂質は、式（Ｂ）の化合物：
Figure 2024508047000059
 またはその薬学的に許容される塩であり、式中、
ｎは、すべての端点を含む１０～２００の整数であり、
ＲＢ１は、Ｃ５－Ｃ２５アルキルまたはＣ５－Ｃ２５アルケニルである。
いくつかの実施形態では、ＲＢ１は、ＲＰ１である。
いくつかの実施形態では、ＰＥＧ脂質は、式（Ｂ－ａ）の化合物：
Figure 2024508047000060
 またはその薬学的に許容される塩である。
いくつかの実施形態では、ＰＥＧ脂質は、式（Ｂ－ｂ）の化合物：
Figure 2024508047000061
 またはその薬学的に許容される塩である。
いくつかの実施形態では、ｎは、平均で、１０～２００、１０～１８０、１０～１６０、１０～１４０、１０～１２０、１０～１００、１０～８０、１０～６０、１０～４０、１０～２０、２０～２００、２０～１８０、２０～１６０、２０～１４０、２０～１２０、２０～１００、２０～８０、２０～６０、２０～４０、４０～２００、４０～１８０、４０～１６０、４０～１４０、４０～１２０、４０～１００、４０～８０、４０～６０、６０～２００、６０～１８０、６０～１６０、６０～１４０、６０～１２０、６０～１００、６０～８０、８０～２００、８０～１８０、８０～１６０、８０～１４０、８０～１２０、８０～１００、１００～２００、１００～１８０、１００～１６０、１００～１４０、１００～１２０、１２０～２００、１２０～１８０、１２０～１６０、１２０～１４０、１４０～２００、１４０～１８０、１４０～１６０、１６０～２００、１６０～１８０、または１８０～２００である。いくつかの実施形態では、ｎは、平均で、１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１１０、１２０、１３０、１４０、１５０、１６０、１７０、１８０、１９０、または２００である。いくつかの実施形態では、ｎは、平均で約２０である。いくつかの実施形態では、ｎは、平均で約４０である。いくつかの実施形態では、ｎは、平均で約４５である。いくつかの実施形態では、ｎは、平均で約５０である。いくつかの実施形態では、ｎは、平均で約６８である。いくつかの実施形態では、ｎは、平均で約７５である。いくつかの実施形態では、ｎは、平均で約１００である。
いくつかの実施形態では、ＰＥＧ脂質は、約５００～約１０，０００ダルトンの平均分子量を有するＰＥＧ部分を含む。いくつかの実施形態では、ＰＥＧ脂質は、約５００～約５，０００ダルトン、約５００～約４，０００ダルトン、約５００～約３，０００ダルトン、約５００～約２，０００ダルトン、約５００～約１，０００ダルトン、約５００～約８００ダルトン、約５００～約６００ダルトン、約６００～約５，０００ダルトン、約６００～約４，０００ダルトン、約６００～約３，０００ダルトン、約６００～約２，０００ダルトン、約６００～約１，０００ダルトン、約６００～約８００ダルトン、約８００～約５，０００ダルトン、約８００～約４，０００ダルトン、約８００～約３，０００ダルトン、約８００～約２，０００ダルトン、約８００～約１，０００ダルトン、約１，０００～約５，０００ダルトン、約１，０００～約４，０００ダルトン、約１，０００～約３，０００ダルトン、約１，０００～約２，０００ダルトン、約２，０００～約５，０００ダルトン、約２，０００～約４，０００ダルトン、約２，０００～約３，０００ダルトン、約３，０００～約５，０００ダルトン、約３，０００～約４，０００ダルトン、約５，０００～約１０，０００ダルトン、約５，０００～約７，５００ダルトン、または約７，５００～約１０，０００ダルトンの平均分子量を有するＰＥＧ部分を含む。いくつかの実施形態では、ＰＥＧ脂質のＰＥＧ部分は、約１，５００～約２，５００ダルトンの平均分子量を有する。いくつかの実施形態では、ＰＥＧ脂質のＰＥＧ部分は、約１，０００～約５，０００ダルトンの平均分子量を有する。いくつかの実施形態では、ＰＥＧ脂質は、約５００、約６００、約８００、約１，０００、約１，５００、約２，０００、約，２５００、約３，０００、約３，５００、約４，０００、約４，５００、約５，０００、約６，０００、約７，０００、約８，０００、約９，０００、または約１０，０００ダルトンの平均分子量を有するＰＥＧ部分を含む。いくつかの実施形態では、ＰＥＧ脂質は、少なくとも５００、少なくとも１，０００、少なくとも１，５００、少なくとも２，０００、少なくとも２，５００、少なくとも３，０００、少なくとも３，５００、少なくとも４，０００、少なくとも４，５００、少なくとも５，０００、少なくとも６，０００、少なくとも７，０００、少なくとも８，０００、少なくとも９，０００、または少なくとも１０，０００ダルトンの平均分子量を有するＰＥＧ部分を含む。いくつかの実施形態では、ＰＥＧ脂質は、５００ダルトン以下、１，０００ダルトン以下、１，５００ダルトン以下、２，０００ダルトン以下、２，５００ダルトン以下、３，０００ダルトン以下、３，５００ダルトン以下、４，０００ダルトン以下、４，５００ダルトン以下、５，０００ダルトン以下、６，０００ダルトン以下、７，０００ダルトン以下、８，０００ダルトン以下、９，０００ダルトン以下、または１０，０００ダルトン以下の平均分子量を有するＰＥＧ部分を含む。すべての値は、すべての端点を含む。
いくつかの実施形態では、ＰＥＧ脂質は、ポリオキシエチレン（１００）ステアリルエーテル、ポリオキシエチレン（２０）セチルエーテル、ポリオキシエチレン（２０）オレイルエーテル、ポリオキシエチレン（２０）ステアリルエーテル、またはそれらの混合物である。いくつかの実施形態では、ＰＥＧ脂質は、ポリオキシエチレン（１００）ステアレート、ポリオキシエチレン（５０）ステアレート、ポリオキシエチレン（４０）ステアレート、ポリオキシエチレンパルミテート、またはそれらの混合物である。
本開示のいくつかの実施形態では、ＰＥＧ脂質は、
Figure 2024508047000062
 （ＢＲＩＪ（商標）Ｓ１００）であり、ＣＡＳ番号は９００５－００であり、示性式はＣ１８Ｈ３７（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｎＯＨであり、式中、ｎは１００である。ＢＲＩＪ（商標）Ｓ１００は、通称、ポリオキシエチレン（１００）ステアリルエーテルとしても知られている。したがって、いくつかの実施形態では、ＰＥＧ脂質は、ＨＯ－ＰＥＧ１００－ＣＨ２（ＣＨ２）１６ＣＨ３である。
本開示のいくつかの実施形態では、ＰＥＧ脂質は、
Figure 2024508047000063
 （ＢＲＩＪ（商標）Ｃ２０）であり、ＣＡＳ番号は９００４－９５－９であり、示性式はＣ１６Ｈ３３（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｎＯＨであり、式中、ｎは２０である。ＢＲＩＪ（商標）Ｃ２０は、ＢＲＩＪ（商標）５８としても知られ、通称、ポリエチレングリコールヘキサデシルエーテル、ポリオキシエチレン（２０）セチルエーテルとしても知られている。したがって、いくつかの実施形態では、ＰＥＧ脂質は、ＨＯ－ＰＥＧ２０－ＣＨ２（ＣＨ２）１４ＣＨ３である。
本開示のいくつかの実施形態では、ＰＥＧ脂質は、
Figure 2024508047000064
 （ＢＲＩＪ（商標）Ｏ２０）であり、ＣＡＳ番号は９００４－９８－２であり、示性式はＣ１８Ｈ３５（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｎＯＨであり、式中、ｎは２０である。ＢＲＩＪ（商標）Ｏ２０は、通称、ポリオキシエチレン（２０）オレイルエーテルとしても知られている。したがって、いくつかの実施形態では、ＰＥＧ脂質は、ＨＯ－ＰＥＧ２０－Ｃ１８Ｈ３５である。
本開示のいくつかの実施形態では、ＰＥＧ脂質は、
Figure 2024508047000065
 （ＢＲＩＪ（商標）Ｓ２０）であり、ＣＡＳ番号は９００５－００－９であり、示性式はＣ１８Ｈ３７（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｎＯＨであり、式中、ｎは２０である。ＢＲＩＪ（商標）Ｓ２０は、通称、ポリエチレングリコールオクタデシルエーテルまたはポリオキシエチレン（２０）ステアリルエーテルとしても知られている。したがって、いくつかの実施形態では、ＰＥＧ脂質は、ＨＯ－ＰＥＧ２０－ＣＨ２（ＣＨ２）１６ＣＨ３である。
本開示のいくつかの実施形態では、ＰＥＧ脂質は、
Figure 2024508047000066
 （ＭＹＲＪ（商標）Ｓ１００）であり、ＣＡＳ番号は９００４－９９－３であり、示性式はＣ１７Ｈ３５Ｃ（Ｏ）（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｎＯＨであり、式中、ｎは１００である。ＭＹＲＪ（商標）Ｓ１００は、通称、ポリオキシエチレン（１００）ステアレートとしても知られている。したがって、いくつかの実施形態では、ＰＥＧ脂質は、ＨＯ－ＰＥＧ１００－ＣＨ２（ＣＨ２）１５ＣＨ３である。
本開示のいくつかの実施形態では、ＰＥＧ脂質は、
Figure 2024508047000067
 （ＭＹＲＪ（商標）Ｓ５０）であり、ＣＡＳ番号は９００４－９９－３であり、示性式はＣ１７Ｈ３５Ｃ（Ｏ）（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｎＯＨであり、式中、ｎは５０である。ＭＹＲＪ（商標）Ｓ５０は、通称、ポリオキシエチレン（５０）ステアレートとしても知られている。したがって、いくつかの実施形態では、ＰＥＧ脂質は、ＨＯ－ＰＥＧ５０－ＣＨ２（ＣＨ２）１５ＣＨ３である。
本開示のいくつかの実施形態では、ＰＥＧ脂質は、
Figure 2024508047000068
 （ＭＹＲＪ（商標）Ｓ４０）であり、ＣＡＳ番号は９００４－９９－３であり、示性式はＣ１７Ｈ３５Ｃ（Ｏ）（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｎＯＨであり、式中、ｎは４０である。ＭＹＲＪ（商標）Ｓ４０は、通称、ポリオキシエチレン（４０）ステアレートとしても知られている。したがって、いくつかの実施形態では、ＰＥＧ脂質は、ＨＯ－ＰＥＧ４０－ＣＨ２（ＣＨ２）１５ＣＨ３である。
本開示のいくつかの実施形態では、ＰＥＧ脂質は、
Figure 2024508047000069
 （ＰＥＧ２ｋ－ＤＭＧ）であり、ＣＡＳ番号は１６０７４３０－６２－０４であり、示性式はＣ１２２Ｈ２４２Ｏ５０である。ＰＥＧ２ｋ－ＤＭＧは、１，２－ジミリストイル－ｒａｃ－グリセロ－３－メトキシポリエチレングリコール－２０００としても知られている。
本開示のいくつかの実施形態では、ＰＥＧ脂質は、
Figure 2024508047000070
 （ＰＥＧ２ｋ－ＤＰＧ）であり、Ｒ１ＣＯＯ＝Ｃ１６：０、Ｒ２ＣＯＯ＝Ｃ１６：０のアルキル組成を有する。ＰＥＧ２ｋ－ＤＰＧは、通称、１，２－ジパルミトイル－ｒａｃ－グリセロ－３－メチルポリオキシエチレンとしても知られている。
本開示のいくつかの実施形態では、ＰＥＧ脂質は、ＰＥＧ－ジラウロイルグリセロール、ＰＥＧ－ジミリストイルグリセロール（ＰＥＧ－ＤＭＧ）、ＰＥＧ－ジパルミトイルグリセロール、ＰＥＧ－ジステアロイルグリセロール（ＰＥＧ－ＤＳＰＥ）、ＰＥＧ－ジラウリルグリカミド、ＰＥＧ－ジミリスチルグリカミド、ＰＥＧ－ジパルミトイルグリカミド、ＰＥＧ－ジステアロイルグリカミド、ＰＥＧ－コレステロール（ｌ－［８’－（コレスタ－５－エン－３［ベータ］－オキシ）カルボキサミド－３’，６’－ジオキサオクタニル］カルバモイル－［オメガ］－メチル－ポリ（エチレングリコール）、ＰＥＧ－ＤＭＢ（３，４－ジテトラデコキシルベンジル－［オメガ］－メチル－ポリ（エチレングリコール）エーテル）、ｌ，２－ジミリストイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホエタノールアミン－Ｎ－［メトキシ（ポリエチレングリコール）－２０００］（ＰＥＧ２ｋ－ＤＭＧ）、ｌ，２－ジステアロイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホエタノールアミン－Ｎ－［メトキシ（ポリエチレングリコール）－２０００］（ＰＥＧ２ｋ－ＤＳＰＥ）、１，２－ジステアロイル－ｓｎグリセロール、メトキシポリエチレングリコール（ＰＥＧ２ｋ－ＤＳＧ）、ポリ（エチレングリコール）－２０００－ジメタクリレート（ＰＥＧ２ｋ－ＤＭＡ）、またはｌ，２－ジステアリルオキシプロピル－３－アミン－Ｎ－［メトキシ（ポリエチレングリコール）－２０００］（ＰＥＧ２ｋ－ＤＳＡ）であり得る。いくつかの実施形態では、ＰＥＧ脂質はＰＥＧ２ｋ－ＤＭＧであり得る。いくつかの実施形態では、ＰＥＧ脂質はＰＥＧ２ｋ－ＤＳＧであり得る。他の実施形態では、ＰＥＧ脂質はＰＥＧ２ｋ－ＤＳＰＥであり得る。いくつかの実施形態では、ＰＥＧ脂質はＰＥＧ２ｋ－ＤＭＡであり得る。さらに他の実施形態では、ＰＥＧ脂質はＰＥＧ２ｋ－Ｃ－ＤＭＡであり得る。いくつかの実施形態では、ＰＥＧ脂質はＰＥＧ２ｋ－ＤＳＡであり得る。他の実施形態では、ＰＥＧ脂質はＰＥＧ２ｋ－Ｃ１１であり得る。いくつかの実施形態では、ＰＥＧ脂質はＰＥＧ２ｋ－Ｃ１４であり得る。いくつかの実施形態では、ＰＥＧ脂質はＰＥＧ２ｋ－Ｃ１６であり得る。いくつかの実施形態では、ＰＥＧ脂質はＰＥＧ２ｋ－Ｃ１８であり得る。
いくつかの実施形態では、本開示の単一脂質尾部を有するＰＥＧ脂質（例えば、式（Ａ）、（Ａ’）、（Ａ”）、または（Ｂ）のＰＥＧ脂質）は、本開示のＬＮＰ組成物の投与及び／または繰り返し投与の際に、加速血液クリアランス（ＡＢＣ）を低減させ得る。いくつかの実施形態では、本開示の単一脂質尾部を有するＰＥＧ脂質は、本開示のＬＮＰ組成物の投与及び／または繰り返し投与の際に、対象の免疫系によって生成されるＰＥＧ特異的抗体（例えば、抗ＰＥＧ ＩｇＭ）を低減または枯渇させ得る。
ＬＮＰ組成物中の脂質モル比
いくつかの実施形態では、本開示のＬＮＰは、４０ｍｏｌ％～７０ｍｏｌ％のカチオン性脂質、最大５０ｍｏｌ％のヘルパー脂質、１０ｍｏｌ％～５０ｍｏｌ％の構造脂質、及び０．００１ｍｏｌ％～５ｍｏｌ％のＰＥＧ脂質を含む（すべての端点を含む）。いくつかの実施形態では、カチオン性脂質、ヘルパー脂質、構造脂質、及びＰＥＧ脂質の総ｍｏｌ％は１００％である。
いくつかの実施形態では、ＬＮＰ中のカチオン性脂質のｍｏｌ％は、４０～７０ｍｏｌ％、４０～５５ｍｏｌ％、４０～５０ｍｏｌ％、４０～４５ｍｏｌ％、４４～５４ｍｏｌ％、４５～６０ｍｏｌ％、４５～５５ｍｏｌ％、４５～５０ｍｏｌ％、５０～６０ｍｏｌ％、４９～６４ｍｏｌ％、５０～５５ｍｏｌ％、または５５～６０ｍｏｌ％である。いくつかの実施形態では、ＬＮＰ中のカチオン性脂質のｍｏｌ％は、４４～５４ｍｏｌ％である。いくつかの実施形態では、ＬＮＰ中のカチオン性脂質のｍｏｌ％は、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、または６０ｍｏｌ％である。いくつかの実施形態では、ＬＮＰ中のカチオン性脂質のｍｏｌ％は、約４０、約４１、約４２、約４３、約４４、約４５、約４６、約４７、約４８、約４９、約５０、約５１、約５２、約５３、約５４、約５５、約５６、約５７、約５８、約５９、または約６０ｍｏｌ％である。すべての値は、すべての端点を含む。
いくつかの実施形態では、ＬＮＰ中の構造脂質のｍｏｌ％は、１０～６０ｍｏｌ％、１０～３０ｍｏｌ％、１５～３５ｍｏｌ％、２０～４０ｍｏｌ％、２０～４５ｍｏｌ％、２５～３３ｍｏｌ％、２４～３２ｍｏｌ％、２５～４５ｍｏｌ％、３０～５０ｍｏｌ％、３５～４３ｍｏｌ％、３５～５５ｍｏｌ％、または４０～６０ｍｏｌ％である。いくつかの実施形態では、ＬＮＰ中の構造脂質のｍｏｌ％は、２０～４５ｍｏｌ％である。いくつかの実施形態では、ＬＮＰ中の構造脂質のｍｏｌ％は、２４～３２ｍｏｌ％である。いくつかの実施形態では、ＬＮＰ中の構造脂質のｍｏｌ％は、２５～３３ｍｏｌ％である。いくつかの実施形態では、ＬＮＰ中の構造脂質のｍｏｌ％は、２２～２８ｍｏｌ％である。いくつかの実施形態では、ＬＮＰ中の構造脂質のｍｏｌ％は、３５～４５ｍｏｌ％である。いくつかの実施形態では、ＬＮＰ中の構造脂質のｍｏｌ％は、３５～４３ｍｏｌ％である。いくつかの実施形態では、ＬＮＰ中の構造脂質のｍｏｌ％は、１０～６０ｍｏｌ％である。いくつかの実施形態では、ＬＮＰ中の構造脂質のｍｏｌ％は、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、または６０ｍｏｌ％である。いくつかの実施形態では、ＬＮＰ中の構造脂質のｍｏｌ％は、約１０、約１１、約１２、約１３、約１４、約１５、約１６、約１７、約１８、約１９、約２０、約２１、約２２、約２３、約２４、約２５、約２６、約２７、約２８、約２９、約３０、約３１、約３２、約３３、約３４、約３５、約３６、約３７、約３８、約３９、約４０、約４１、約４２、約４３、約４４、約４５、約４６、約４７、約４８、約４９、約５０、約５１、約５２、約５３、約５４、約５５、約５６、約５７、約５８、約５９、または約６０ｍｏｌ％である。いくつかの実施形態では、構造脂質はコレステロールである。すべての値は、すべての端点を含む。
いくつかの実施形態では、ＬＮＰ中のヘルパー脂質のｍｏｌ％は、１～５０ｍｏｌ％である。いくつかの実施形態では、ＬＮＰ中のヘルパー脂質のｍｏｌ％は、最大２９ｍｏｌ％である。いくつかの実施形態では、ＬＮＰ中のヘルパー脂質のｍｏｌ％は、１～１０ｍｏｌ％、５～９ｍｏｌ％、５～１５ｍｏｌ％、８～１４ｍｏｌ％、１８～２２％、１９～２５ｍｏｌ％、１０～２０ｍｏｌ％、１０～２５ｍｏｌ％、１５～２５ｍｏｌ％、２０～３０ｍｏｌ％、２５～３５ｍｏｌ％、３０～４０ｍｏｌ％、または３５～５０ｍｏｌ％である。いくつかの実施形態では、ＬＮＰ中のヘルパー脂質のｍｏｌ％は、１０～２５ｍｏｌ％である。いくつかの実施形態では、ＬＮＰ中のヘルパー脂質のｍｏｌ％は、５～９ｍｏｌ％である。いくつかの実施形態では、ＬＮＰ中のヘルパー脂質のｍｏｌ％は、８～１４ｍｏｌ％である。いくつかの実施形態では、ＬＮＰ中のヘルパー脂質のｍｏｌ％は、１８～２２ｍｏｌ％である。いくつかの実施形態では、ＬＮＰ中のヘルパー脂質のｍｏｌ％は、１９～２５ｍｏｌ％である。いくつかの実施形態では、ＬＮＰ中のヘルパー脂質のｍｏｌ％は、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、または４０ｍｏｌ％である。いくつかの実施形態では、ＬＮＰ中のヘルパー脂質のｍｏｌ％は、約１、約２、約３、約４、約５、約６、約７、約８、約９、約１０、約１１、約１２、約１３、約１４、約１５、約１６、約１７、約１８、約１９、約２０、約２１、約２２、約２３、約２４、約２５、約２６、約２７、約２８、約２９、約３０、約３１、約３２、約３３、約３４、約３５、約３６、約３７、約３８、約３９、または約４０ｍｏｌ％である。いくつかの実施形態では、ヘルパー脂質は、ＤＳＰＣである。すべての値は、すべての端点を含む。
いくつかの実施形態では、ＬＮＰ中のＰＥＧ脂質のｍｏｌ％は、ＬＮＰ中に存在する総脂質の０ｍｏｌ％超かつ最大５ｍｏｌ％である。いくつかの実施形態では、ＰＥＧ脂質のｍｏｌ％は、ＬＮＰ中に存在する総脂質の０．１ｍｏｌ％、０．２ｍｏｌ％、０．２５ｍｏｌ％、０．３ｍｏｌ％、０．４ｍｏｌ％、０．５ｍｏｌ％、０．６ｍｏｌ％、０．７ｍｏｌ％、０．８ｍｏｌ％、０．９ｍｏｌ％、１．０ｍｏｌ％、１．１ｍｏｌ％、１．２ｍｏｌ％、１．３ｍｏｌ％、１．４ｍｏｌ％、１．５ｍｏｌ％、１．６ｍｏｌ％、１．７ｍｏｌ％、１．８ｍｏｌ％、１．９ｍｏｌ％、２．０ｍｏｌ％、２．１ｍｏｌ％、２．２ｍｏｌ％、２．３ｍｏｌ％、２．４ｍｏｌ％、２．５ｍｏｌ％、２．６ｍｏｌ％、２．７ｍｏｌ％、２．８ｍｏｌ％、２．９ｍｏｌ％、３．０ｍｏｌ％、３．１ｍｏｌ％、３．２ｍｏｌ％、３．３ｍｏｌ％、３．４ｍｏｌ％、３．５ｍｏｌ％、４．０ｍｏｌ％、４．５ｍｏｌ％、または５ｍｏｌ％である。いくつかの実施形態では、ＰＥＧ脂質のｍｏｌ％は、ＬＮＰ中に存在する総脂質の約０．１ｍｏｌ％、約０．２ｍｏｌ％、約０．２５ｍｏｌ％、約０．３ｍｏｌ％、約０．４ｍｏｌ％、約０．５ｍｏｌ％、約０．６ｍｏｌ％、約０．７ｍｏｌ％、約０．８ｍｏｌ％、約０．９ｍｏｌ％、約１．０ｍｏｌ％、約１．１ｍｏｌ％、約１．２ｍｏｌ％、約１．３ｍｏｌ％、約１．４ｍｏｌ％、約１．５ｍｏｌ％、約１．６ｍｏｌ％、約１．７ｍｏｌ％、約１．８ｍｏｌ％、約１．９ｍｏｌ％、約２．０ｍｏｌ％、約２．１ｍｏｌ％、約２．２ｍｏｌ％、約２．３ｍｏｌ％、約２．４ｍｏｌ％、約２．５ｍｏｌ％、約２．６ｍｏｌ％、約２．７ｍｏｌ％、約２．８ｍｏｌ％、約２．９ｍｏｌ％、約３．０ｍｏｌ％、約３．１ｍｏｌ％、約３．２ｍｏｌ％、約３．３ｍｏｌ％、約３．４ｍｏｌ％、約３．５ｍｏｌ％、約４．０ｍｏｌ％、約４．５ｍｏｌ％、または約５ｍｏｌ％である。いくつかの実施形態では、ＰＥＧ脂質のｍｏｌ％は、ＬＮＰ中に存在する総脂質の少なくとも０．１ｍｏｌ％、少なくとも０．２ｍｏｌ％、少なくとも０．２５ｍｏｌ％、少なくとも０．３ｍｏｌ％、少なくとも０．４ｍｏｌ％、少なくとも０．５ｍｏｌ％、少なくとも０．６ｍｏｌ％、少なくとも０．７ｍｏｌ％、少なくとも０．８ｍｏｌ％、少なくとも０．９ｍｏｌ％、少なくとも１．０ｍｏｌ％、少なくとも１．１ｍｏｌ％、少なくとも１．２ｍｏｌ％、少なくとも１．３ｍｏｌ％、少なくとも１．４ｍｏｌ％、少なくとも１．５ｍｏｌ％、少なくとも１．６ｍｏｌ％、少なくとも１．７ｍｏｌ％、少なくとも１．８ｍｏｌ％、少なくとも１．９ｍｏｌ％、少なくとも２．０ｍｏｌ％、少なくとも２．１ｍｏｌ％、少なくとも２．２ｍｏｌ％、少なくとも２．３ｍｏｌ％、少なくとも２．４ｍｏｌ％、少なくとも２．５ｍｏｌ％、少なくとも２．６ｍｏｌ％、少なくとも２．７ｍｏｌ％、少なくとも２．８ｍｏｌ％、少なくとも２．９ｍｏｌ％、少なくとも３．０ｍｏｌ％、少なくとも３．１ｍｏｌ％、少なくとも３．２ｍｏｌ％、少なくとも３．３ｍｏｌ％、少なくとも３．４ｍｏｌ％、少なくとも３．５ｍｏｌ％、少なくとも４．０ｍｏｌ％、少なくとも４．５ｍｏｌ％、または少なくとも５ｍｏｌ％である。いくつかの実施形態では、ＰＥＧ脂質のｍｏｌ％は、ＬＮＰ中に存在する総脂質の最大０．１ｍｏｌ％、最大０．２ｍｏｌ％、最大０．２５ｍｏｌ％、最大０．３ｍｏｌ％、最大０．４ｍｏｌ％、最大０．５ｍｏｌ％、最大０．６ｍｏｌ％、最大０．７ｍｏｌ％、最大０．８ｍｏｌ％、最大０．９ｍｏｌ％、最大１．０ｍｏｌ％、最大１．１ｍｏｌ％、最大１．２ｍｏｌ％、最大１．３ｍｏｌ％、最大１．４ｍｏｌ％、最大１．５ｍｏｌ％、最大１．６ｍｏｌ％、最大１．７ｍｏｌ％、最大１．８ｍｏｌ％、最大１．９ｍｏｌ％、最大２．０ｍｏｌ％、最大２．１ｍｏｌ％、最大２．２ｍｏｌ％、最大２．３ｍｏｌ％、最大２．４ｍｏｌ％、最大２．５ｍｏｌ％、最大２．６ｍｏｌ％、最大２．７ｍｏｌ％、最大２．８ｍｏｌ％、最大２．９ｍｏｌ％、最大３．０ｍｏｌ％、最大３．１ｍｏｌ％、最大３．２ｍｏｌ％、最大３．３ｍｏｌ％、最大３．４ｍｏｌ％、最大３．５ｍｏｌ％、最大４．０ｍｏｌ％、最大４．５ｍｏｌ％、または最大５ｍｏｌ％である。いくつかの実施形態では、ＰＥＧ脂質のｍｏｌ％は、ＬＮＰ中に存在する総脂質の０．１～４ｍｏｌ％である。いくつかの実施形態では、ＰＥＧ脂質のｍｏｌ％は、ＬＮＰ中に存在する総脂質の０．１～２ｍｏｌ％である。いくつかの実施形態では、ＰＥＧ脂質のｍｏｌ％は、ＬＮＰ中に存在する総脂質の０．２～０．８ｍｏｌ％、０．４～０．６ｍｏｌ％、０．７～１．３ｍｏｌ％、１．２～１．８ｍｏｌ％、または１～３．５ｍｏｌ％である。いくつかの実施形態では、ＰＥＧ脂質のｍｏｌ％は、ＬＮＰ中に存在する総脂質の０．１～０．７ｍｏｌ％、０．２～０．８ｍｏｌ％、０．３～０．９ｍｏｌ％、０．４～０．８ｍｏｌ％、０．４～０．６ｍｏｌ％、０．４～１ｍｏｌ％、０．５～１．１ｍｏｌ％、０．６～１．２ｍｏｌ％、０．７～１．３ｍｏｌ％、０．８～１．４ｍｏｌ％、０．９～１．５ｍｏｌ％、１～３．５ｍｏｌ％、１～１．６ｍｏｌ％、１．１～１．７ｍｏｌ％、１．２～１．８ｍｏｌ％、１．３～１．９ｍｏｌ％、１．４～２ｍｏｌ％、１．５～２．１ｍｏｌ％、１．６～２．２ｍｏｌ％、１．７～２．３ｍｏｌ％、１．８～２．４ｍｏｌ％、１．９～２．５ｍｏｌ％、２～２．６ｍｏｌ％、２．４～３．８ｍｏｌ％、または２．６～３．４ｍｏｌ％である。すべての値は、すべての端点を含む。
いくつかの実施形態では、本開示のＬＮＰは、４４～６０ｍｏｌ％のカチオン性脂質、１９～２５ｍｏｌ％のヘルパー脂質、２５～３３ｍｏｌ％の構造脂質、及び０．２～０．８ｍｏｌ％のＰＥＧ脂質を含む（端点を含む）。いくつかの実施形態では、本開示のＬＮＰは、４４～５４ｍｏｌ％のカチオン性脂質、１９～２５ｍｏｌ％のヘルパー脂質、２４～３２ｍｏｌ％の構造脂質、及び１．２～１．８ｍｏｌ％のＰＥＧ脂質を含む（端点を含む）。いくつかの実施形態では、本開示のＬＮＰは、４４～５４ｍｏｌ％のカチオン性脂質、８～１４ｍｏｌ％のヘルパー脂質、３５～４３ｍｏｌ％の構造脂質、及び１．２～１．８ｍｏｌ％のＰＥＧ脂質を含む（端点を含む）。いくつかの実施形態では、本開示のＬＮＰは、４５～５５ｍｏｌ％のカチオン性脂質、５～９ｍｏｌ％のヘルパー脂質、３６～４４ｍｏｌ％の構造脂質、及び２．５～３．５ｍｏｌ％のＰＥＧ脂質を含む（端点を含む）。
いくつかの実施形態では、本開示のＬＮＰは、以下の表２によるＬＮＰ中の総脂質のｍｏｌ％（または総脂質のｍｏｌ％範囲）で、１つ以上の本開示のカチオン性脂質、１つ以上の本開示のヘルパー脂質、１つ以上の本開示の構造脂質、及び１つ以上の本開示のＰＥＧ脂質を含む。いくつかの実施形態では、これら４つの脂質成分の総ｍｏｌ％は１００％に等しい。いくつかの実施形態では、これら４つの脂質成分の総ｍｏｌ％は１００％未満である。いくつかの実施形態では、カチオン性脂質は、式（Ｉ）の化合物または表１から選択される化合物である。いくつかの実施形態では、構造脂質はコレステロールである。いくつかの実施形態では、ヘルパー脂質は、ＤＳＰＣである。いくつかの実施形態では、ＰＥＧ脂質は、式（Ａ）、式（Ａ’）、または式（Ａ”）のものである。
Figure 2024508047000071
Figure 2024508047000072
ＬＮＰ組成物の特性
本開示は、本明細書に記載される複数のＬＮＰを含む組成物（例えば、医薬組成物）を提供する。本明細書では、本明細書に記載されるＬＮＰ及びカプセル化ペイロード分子を含む組成物も提供される。
いくつかの実施形態では、本開示のＬＮＰは、対照ＬＮＰと比較してｉｎ ｖｉｖｏの免疫応答を低減させ得る。
いくつかの実施形態では、対照ＬＮＰは、式（Ａ）、式（Ａ’）、または式（Ａ”）のものではないＰＥＧ脂質を含むＬＮＰである。いくつかの実施形態では、対照ＬＮＰのＰＥＧ脂質はＰＥＧ２ｋ－ＤＰＧである。いくつかの実施形態では、対照ＬＮＰのＰＥＧ脂質はＰＥＧ２ｋ－ＤＭＧである。いくつかの実施形態では、対照ＬＮＰは、本開示のＬＮＰと同じＰＥＧ脂質のモル比を有する。いくつかの実施形態では、対照ＬＮＰが式（Ａ）、式（Ａ’）、または式（Ａ”）のものではないＰＥＧ脂質を含むことを除いては、対照ＬＮＰは本開示のＬＮＰと同一である（例えば、対照ＬＮＰは、ＰＥＧ２ｋ－ＤＰＧまたはＰＥＧ２ｋ－ＤＭＧをＰＥＧ脂質として含み得る）。
いくつかの実施形態では、対照ＬＮＰは、式（Ｉ）のものではないカチオン性脂質を含むＬＮＰである。いくつかの実施形態では、対照ＬＮＰのカチオン性脂質はＳＳ－ＯＣである。いくつかの実施形態では、対照ＬＮＰは、本開示のＬＮＰと同じカチオン性脂質のモル比を有する。いくつかの実施形態では、対照ＬＮＰが式（Ｉ）のものではないカチオン性脂質を含むことを除いては、対照ＬＮＰは本開示のＬＮＰと同一である（例えば、対照ＬＮＰはＳＳ－ＯＣをカチオン性脂質として含み得る）。
いくつかの実施形態では、免疫応答の低減は、加速血液クリアランス（ＡＢＣ）における低減であり得る。いくつかの実施形態では、ＡＢＣは、天然ＩｇＭ及び／または抗ＰＥＧ ＩｇＭの分泌に関連する。本明細書で使用される「天然ＩｇＭ」という用語は、既知の免疫曝露（例えば本開示のＬＮＰへの曝露）と無関係に存在する血清中の循環ＩｇＭを指す。「ＡＢＣの低減」という用語は、対照ＬＮＰと比較した、ＡＢＣにおけるあらゆる低減を指す。いくつかの実施形態では、ＡＢＣにおける低減は、２回目または後続の投薬時の、対照ＬＮＰに比したＬＮＰのクリアランスの低減であり得る。いくつかの実施形態では、低減は、少なくとも１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９８％、または１００％であり得る。いくつかの実施形態では、低減は、約１０％～約１００％、約１０～約５０％、約２０～約１００％、約２０～約５０％、約３０～約１００％、約３０～約５０％、約４０％～約１００％、約４０～約８０％、約５０～約９０％、または約５０～約１００％である。いくつかの実施形態では、ＡＢＣにおける低減は、２回目または後続の投与後のカプセル化ペイロードの増加、またはその持続的で検出可能なレベルによって測定され得る。いくつかの実施形態では、ＡＢＣにおける低減は、対照ＬＮＰの投与後のカプセル化ペイロードのレベルに比したカプセル化ペイロードのレベルの上昇（例えば、２倍、３倍、４倍、５倍、またはそれ以上の倍率の上昇）をもたらし得る。いくつかの実施形態では、低減したＡＢＣは、抗ＰＥＧ ＩｇＭのより低い血清レベルに関連する。
いくつかの実施形態では、本開示のＬＮＰは、ペイロード放出前に排除され得る対照ＬＮＰと比較して、繰り返し投薬の際のＬＮＰ及びその成分のクリアランスを遅延させ得る。したがって、本開示のＬＮＰは、後続用量中のカプセル化ペイロード（例えば、ＲＮＡ）の送達効率を増加させ得る。
いくつかの実施形態では、ＬＮＰは、約５０ｎｍ～約１５０ｎｍの平均サイズ（すなわち、平均外径）を有する。いくつかの実施形態では、本開示は、複数の脂質ナノ粒子を含む治療用組成物であって、複数のＬＮＰが約６０ｎｍ～約１３０ｎｍの平均サイズを有する、治療用組成物を提供する。いくつかの実施形態では、本開示は、複数の脂質ナノ粒子を含む治療用組成物であって、複数のＬＮＰが約７０ｎｍ～約１２０ｎｍの平均サイズを有する、治療用組成物を提供する。いくつかの実施形態では、本開示は、複数の脂質ナノ粒子を含む治療用組成物であって、複数のＬＮＰが約７０ｎｍの平均サイズを有する、治療用組成物を提供する。いくつかの実施形態では、本開示は、複数の脂質ナノ粒子を含む治療用組成物であって、複数のＬＮＰが約８０ｎｍの平均サイズを有する、治療用組成物を提供する。いくつかの実施形態では、本開示は、複数の脂質ナノ粒子を含む治療用組成物であって、複数のＬＮＰが約９０ｎｍの平均サイズを有する、治療用組成物を提供する。いくつかの実施形態では、本開示は、複数の脂質ナノ粒子を含む治療用組成物であって、複数のＬＮＰが約１００ｎｍの平均サイズを有する、治療用組成物を提供する。いくつかの実施形態では、本開示は、複数の脂質ナノ粒子を含む治療用組成物であって、複数のＬＮＰが約１１０ｎｍの平均サイズを有する、治療用組成物を提供する。すべての値は端点を含む。
いくつかの実施形態では、ＬＮＰによるペイロード分子のカプセル化効率は、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９１％、約９２％、約９３％、約９４％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％、約９９％、または１００％である。いくつかの実施形態では、複数のＬＮＰの約７０％、約７５％、約８０％、約９０％、約９５％、約９７％、約９８％、または約９９％は、カプセル化ペイロード分子を含む。いくつかの実施形態では、ＬＮＰによるペイロード分子のカプセル化効率は、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％である。いくつかの実施形態では、複数のＬＮＰの少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％は、カプセル化ペイロード分子を含む。いくつかの実施形態では、複数のＬＮＰの約７０％～１００％、約７５％～１００％、約８０％～１００％、約８５％～１００％、約９０％～１００％、約９１％～１００％、約９２％～１００％、約９３％～１００％、約９４％～１００％、約９５％～１００％、約９６％～１００％、約９７％～１００％、約９８％～１００％、約９９％～１００％は、カプセル化ペイロード分子を含む。
いくつかの実施形態では、ＬＮＰは、中性電荷（例えば、約０ｍＶ～１ｍＶの平均ゼータ電位）を有する。いくつかの実施形態では、ＬＮＰは、約４０ｍＶ～約－４０ｍＶの平均ゼータ電位を有する。いくつかの実施形態では、ＬＮＰは、約４０ｍＶ～約０ｍＶの平均ゼータ電位を有する。いくつかの実施形態では、ＬＮＰは、約３５ｍＶ～約０ｍＶ、約３０ｍＶ～約０ｍＶ、約２５ｍＶ～約０ｍＶ、約２０ｍＶ～約０ｍＶ、約１５ｍＶ～約０ｍＶ、約１０ｍＶ～約０ｍＶ、または約５ｍＶ～約０ｍＶの平均ゼータ電位を有する。いくつかの実施形態では、ＬＮＰは、約２０ｍＶ～約－４０ｍＶの平均ゼータ電位を有する。いくつかの実施形態では、ＬＮＰは、約２０ｍＶ～約－２０ｍＶの平均ゼータ電位を有する。いくつかの実施形態では、ＬＮＰは、約１０ｍＶ～約－２０ｍＶの平均ゼータ電位を有する。いくつかの実施形態では、ＬＮＰは、約１０ｍＶ～約－１０ｍＶの平均ゼータ電位を有する。いくつかの実施形態では、ＬＮＰは、約１０ｍＶ、約９ｍＶ、約８ｍＶ、約７ｍＶ、約６ｍＶ、約５ｍＶ、約４ｍＶ、約３ｍＶ、約２ｍＶ、約１ｍＶ、約０ｍＶ、約－１ｍＶ、約－２ｍＶ、約－３ｍＶ、約－４ｍＶ、約－５ｍＶ、約－６ｍＶ、約－７ｍＶ、約－８ｍＶ、約－９ｍＶ、約－９ｍＶまたは約－１０ｍＶの平均ゼータ電位を有する。
いくつかの実施形態では、ＬＮＰは、約０ｍＶ～－２０ｍＶの平均ゼータ電位を有する。いくつかの実施形態では、ＬＮＰは、約－２０ｍＶ未満の平均ゼータ電位を有する。例えば、いくつかの実施形態では、ＬＮＰは、約－３０ｍＶ未満、約３５ｍＶ未満、または約－４０ｍＶ未満の平均ゼータ電位を有する。いくつかの実施形態では、ＬＮＰは、約－５０ｍＶ～約－２０ｍＶ、約－４０ｍＶ～約－２０ｍＶ、または約－３０ｍＶ～約－２０ｍＶの平均ゼータ電位を有する。いくつかの実施形態では、ＬＮＰは、約０ｍＶ、約－１ｍＶ、約－２ｍＶ、約－３ｍＶ、約－４ｍＶ、約－５ｍＶ、約－６ｍＶ、約－７ｍＶ、約－８ｍＶ、約－９ｍＶ、約－１０ｍＶ、約－１１ｍＶ、約－１２ｍＶ、約－１３ｍＶ、約－１４ｍＶ、約－１５ｍＶ、約－１６ｍＶ、約－１７ｍＶ、約－１８ｍＶ、約－１９ｍＶ、約－２０ｍＶ、約－２１ｍＶ、約－２２ｍＶ、約－２３ｍＶ、約－２４ｍＶ、約－２５ｍＶ、約－２６ｍＶ、約－２７ｍＶ、約－２８ｍＶ、約－２９ｍＶ、約－３０ｍＶ、約－３１ｍＶ、約－３２ｍＶ、約－３３ｍＶ、約－３４ｍＶ、約－３５ｍＶ、約－３６ｍＶ、約－３７ｍＶ、約－３８ｍＶ、約－３９ｍＶ、または約－４０ｍＶの平均ゼータ電位を有する。いくつかの実施形態では、ＬＮＰは、約－２０ｍＶ未満、約－３０ｍＶ未満、約３５ｍＶ未満、または約－４０ｍＶ未満の平均ゼータ電位を有する。
いくつかの実施形態では、ＬＮＰは、腫瘍溶解性ウイルスをコードする合成ＲＮＡウイルスゲノムを含み、コードされる腫瘍溶解性ウイルスは、対象へのＬＮＰ投与の部位から離れている腫瘍のサイズを低減させることができる。例えば、いくつかの実施形態では、本開示のＬＮＰの静脈内投与は、ＬＮＰ投与の部位から離れている腫瘍またはがん性組織について、腫瘍組織におけるウイルス複製及び腫瘍サイズの低減をもたらす。このような効果は、容易にアクセスできない故に処置の腫瘍内送達に好適ではない腫瘍の処置において、本明細書に記載されるＬＮＰカプセル化腫瘍溶解性ウイルスを使用することを可能にする。
ペイロード
本開示のＬＮＰは、１つ以上のペイロード分子を含み得る。ペイロード分子は、標的細胞または対象に送達されることが望まれる任意の分子であり得る。例えば、ペイロード分子は、核酸、ポリペプチド、小分子、炭水化物、酵素、色素、蛍光色素、またはそれらの組み合わせであり得る。
いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるＬＮＰは、ＬＮＰの内面及び／または外面に連結された１つ以上のペイロードを含み得る。いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるＬＮＰは、ＬＮＰの１つ以上の脂質層、疎水性コンパートメント、親水性コンパートメント、またはカプセル化体積内に組み込まれた１つ以上のペイロード分子を含み得る。いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるＬＮＰは、１つ以上のカプセル化ペイロード分子を含む。
核酸分子
いくつかの実施形態では、本開示は、核酸ペイロード分子を含むＬＮＰを提供する。いくつかの実施形態では、ＬＮＰは、核酸分子を完全にカプセル化する。
いくつかの実施形態では、ＬＮＰは、ＤＮＡ、ＲＮＡ、ロックド核酸、タンパク質核酸（ＰＮＡ）、修飾された核酸、核酸類似体、合成核酸、またはＤＮＡもしくはＲＮＡを発現することができるプラスミドを含む。いくつかの実施形態では、ＬＮＰは、ＲＮＡを含む。いくつかの実施形態では、核酸分子は、一本鎖ＲＮＡ（ｓｓＲＮＡ）、ｓｉＲＮＡ、マイクロＲＮＡ、ｍＲＮＡ、またはガイドＲＮＡ（ｇＲＮＡ）を含む。いくつかの実施形態では、核酸分子は、一本鎖ＲＮＡ（ｓｓＲＮＡ）を含む。いくつかの実施形態では、核酸分子は、一本鎖ＤＮＡ（ｓｓＤＮＡ）または二本鎖ＤＮＡ（ｄｓＤＮＡ）を含む。いくつかの実施形態では、核酸分子は、少なくとも１つの修飾型ヌクレオチドを含む。いくつかの実施形態では、核酸分子は、少なくとも１つの２’－Ｏ－メチル（２’－ＯＭｅ）ヌクレオチドを含む。
いくつかの実施形態では、核酸ペイロードは、複製可能なウイルスゲノムをコードする配列を含むプラスミドである。一態様において、本開示は、複製可能なウイルスゲノムをコードするポリヌクレオチド配列を提供し、複製可能なウイルスをコードするポリヌクレオチド配列は、非ウイルス起源であり、該ポリヌクレオチドは、非ウイルス送達ビヒクルによって細胞に導入されると、複製可能なウイルスを産生することができる。
いくつかの実施形態では、核酸ペイロードは、複製可能なウイルスゲノムをコードするポリヌクレオチド配列を含む組換えＤＮＡまたはＲＮＡ分子であり、該ポリヌクレオチド配列は、哺乳動物ＲＮＡポリメラーゼＩＩ（Ｐｏｌ ＩＩ）と結合することができるプロモーター配列に作動可能に連結され、かつ３’リボザイムコード配列及び５’リボザイムコード配列に挟まれており、複製可能なウイルスゲノムをコードするポリヌクレオチドは、非ウイルス起源である。いくつかの実施形態では、核酸ペイロードは、非ウイルス送達ビヒクルによって細胞に導入されると、感染性の溶解性ウイルスを産生することができる。
いくつかの実施形態では、組換えＤＮＡまたはＲＮＡポリヌクレオチドは、複製可能なウイルスゲノムをコードするポリヌクレオチドに挿入される１つ以上のマイクロＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ）標的配列（ｍｉＲ－ＴＳ）カセットをさらに含み、ｍｉＲ－ＴＳカセットは、１つ以上のｍｉＲＮＡ標的配列を含み、細胞内の対応するｍｉＲＮＡのうちの１つ以上の発現は、細胞内のコードされたウイルスの複製を阻害する。
いくつかの実施形態では、核酸分子は、１，０００～２０，０００ヌクレオチドの長さである。いくつかの実施形態では、核酸分子は、１，０００～２０，０００ヌクレオチド、３，０００～２０，０００ヌクレオチド、５，０００～２０，０００ヌクレオチド、７，０００～２０，０００ヌクレオチド、１０，０００～２０，０００ヌクレオチド、１５，０００～２０，０００ヌクレオチド、１，０００～１５，０００ヌクレオチド、３，０００～１５，０００ヌクレオチド、５，０００～１５，０００ヌクレオチド、７，０００～１５，０００ヌクレオチド、１０，０００～１５，０００ヌクレオチド、１，０００～１０，０００ヌクレオチド、３，０００～１０，０００ヌクレオチド、５，０００～１０，０００ヌクレオチド、７，０００～１０，０００ヌクレオチド、１，０００～７，０００ヌクレオチド、３，０００～７，０００ヌクレオチド、５，０００～７，０００ヌクレオチド、１，０００～５，０００ヌクレオチド、３，０００～５，０００ヌクレオチド、または１，０００～３，０００ヌクレオチドの長さである。いくつかの実施形態では、核酸分子は、６，０００～９，０００ヌクレオチドの長さである。いくつかの実施形態では、核酸分子は、７，０００～８，０００ヌクレオチドの長さである。
いくつかの実施形態では、ＬＮＰは、１０：１～６０：１、２０：１～６０：１、３０：１～６０：１、４０：１～６０：１、５０：１～６０：１、１０：１～５０：１、２０：１～５０：１、３０：１～５０：１、４０：１～５０：１、１０：１～４０：１、２０：１～４０：１、３０：１～４０：１、１０：１～３０：１、２０：１～３０：１、または１０：１～２０：１の脂質（Ｌ）対核酸分子（Ｎ）質量比を有する（すべての端点を含む）。いくつかの実施形態では、ＬＮＰは、３０：１～４０：１の脂質：核酸分子質量比を有する。いくつかの実施形態では、ＬＮＰは、３０：１～３６：１の脂質：核酸分子質量比を有する。
いくつかの実施形態では、ＬＮＰは、本明細書に記載される組換え核酸分子を含み、約１０：１～約６０：１の脂質（Ｌ）対核酸（Ｎ）の質量比を有する。いくつかの実施形態では、ＬＮＰは、本明細書に記載される組換え核酸分子を含み、約２０：１の脂質（Ｌ）対核酸（Ｎ）の質量比を有する。いくつかの実施形態では、ＬＮＰは、本明細書に記載される組換え核酸分子を含み、約３０：１の脂質（Ｌ）対核酸（Ｎ）の質量比を有する。いくつかの実施形態では、ＬＮＰは、本明細書に記載される組換え核酸分子を含み、約４０：１の脂質（Ｌ）対核酸（Ｎ）の質量比を有する。いくつかの実施形態では、ＬＮＰは、本明細書に記載される組換え核酸分子を含み、約１５：１、約１６：１、約１７：１、約１８：１、約１９：１、約２０：１、約２１：１、約２２：１、約２３：１、約２４：１、約２５：１、約２６：１、約２７：１、約２８：１、約２９：１、約３０：１、約３１：１、約３２：１、約３３：１、約３４：１、約３５：１、約３６：１、約２３７：１、約２８：１、約３９：１、約４０：１、約４１：１、約４２：１、約４３：１、約４４：１、または約４５：１のＬ：Ｎ質量比を有する。
いくつかの実施形態では、ＬＮＰは、核酸分子を含み、１～２５の脂質窒素対リン酸比（Ｎ：Ｐ）を有する。いくつかの実施形態では、Ｎ：Ｐは、１～２５、１～２０、１～１５、１～１０、１～５、５～２５、５～２０、５～１５、５～１０、１０～２５、１０～２０、１０～１５、１５～２５、１５～２０、または２０～２５である。いくつかの実施形態では、Ｎ：Ｐは、約１、約２、約３、約４、約５、約６、約７、約８、約９、約１０、約１１、約１２、約１３、約１４、約１５、約１６、約１７、約１８、約１９、２０、約２１、約２２、約２３、約２４、または約２５である。いくつかの実施形態では、Ｎ：Ｐは約８．５である。いくつかの実施形態では、Ｎ：Ｐは約９である。
合成ＲＮＡウイルスゲノム
いくつかの実施形態では、核酸ペイロード分子は、ウイルスをコードするポリヌクレオチドである。いくつかの実施形態では、該ポリヌクレオチドは、ウイルスの部分的なゲノムを含む。いくつかの実施形態では、複製可能なウイルスゲノムは、ＤＮＡウイルスのゲノムまたはＲＮＡウイルスのゲノムである。いくつかの実施形態では、複製可能なウイルスゲノムは、アデノウイルスのゲノムである。いくつかの実施形態では、ＤＮＡゲノムまたはＲＮＡゲノムは、二本鎖または一本鎖のウイルスである。いくつかの実施形態では、複製可能なウイルスは、アデノウイルス、コクサッキーウイルス、ウマヘルペスウイルス、単純ヘルペスウイルス、インフルエンザウイルス、ラッサウイルス、マラバウイルス、麻疹ウイルス、マウス白血病ウイルス、粘液腫ウイルス、ニューカッスル病ウイルス、オルソミクソウイルス、パルボウイルス、ポリオウイルス（ＰＶＳ－ＲＩＰＯなどのキメラポリオウイルスを含む）、レオウイルス、セネカバレーウイルス（例えば、セネカウイルスＡ）、アルファウイルス（シンドビスウイルス、チクングニアウイルス、ベネズエラウマ脳炎ウイルス及びセムリキ森林ウイルスを含む）、ワクシニアウイルス、及び水疱性口内炎ウイルスからなる群から選択される。いくつかの実施形態では、コードされるウイルスは、一本鎖ＲＮＡ（ｓｓＲＮＡ）ウイルスである。いくつかの実施形態では、ｓｓＲＮＡウイルスは、ポジティブセンス（（＋）センス）またはネガティブセンス（（－）センス）ｓｓＲＮＡウイルスである。いくつかの実施形態では、（＋）センスｓｓＲＮＡウイルスは、ピコルナウイルスである。いくつかの実施形態では、ピコルナウイルスは、セネカバレーウイルス（ＳＶＶ）またはコクサッキーウイルスである。いくつかの実施形態では、コードされるウイルスは、コクサッキーウイルスＡ２１（ＣＶＡ２１）である。いくつかの実施形態では、コードされるウイルスは、ハイブリッドウイルス（例えば、偽型ウイルス）、アルファウイルス（例えば、シンドビスウイルス、チクングニアウイルス、ベネズエラウマ脳炎ウイルス、及びセムリキ森林ウイルス）、ならびにピコルナ及びアルファウイルスのレプリコンからなる群から選択される。いくつかの実施形態では、ポリヌクレオチドは、ウイルス及び／または炎症促進性分子（例えば、サイトカイン、ケモカイン、抗体、二重特異性、ウイルス、及びがん抗原をコードするヌクレオチド）をコードする修飾されたウイルスＲＮＡである。いくつかの実施形態では、ポリヌクレオチドは、外因性ペイロードタンパク質をコードするポリヌクレオチド配列をさらに含む。いくつかの実施形態では、ポリヌクレオチドは、ウイルス抗原、腫瘍抗原、サイトカイン、抗体または二重特異性抗体をコードするｍＲＮＡである。いくつかの実施形態では、外因性ペイロードタンパク質は、蛍光タンパク質、酵素タンパク質、サイトカイン、ケモカイン、細胞表面受容体のリガンド、または細胞表面受容体に結合することができる抗原結合分子である。
いくつかの実施形態では、核酸ペイロード分子は、腫瘍溶解性ウイルス（例えば、ＲＮＡゲノム）ウイルスゲノムをコードする組換えＲＮＡ分子である。そのような組換えＲＮＡ分子は、本明細書では「合成ウイルスゲノム」または「合成ＲＮＡウイルスゲノム」と称される。そのような実施形態では、合成ＲＮＡウイルスゲノムは、非ウイルス送達ビヒクルによって細胞に導入されると感染性で溶解性のウイルスを産生することができ、感染性ウイルスを複製及び産生するために細胞内に追加の外因性遺伝子またはタンパク質が存在する必要はない。むしろ、宿主細胞内の内因性翻訳メカニズムが、合成ＲＮＡウイルスゲノムからのウイルスタンパク質の発現を媒介する。発現されたウイルスタンパク質は、次いで、ウイルス複製、及びＲＮＡウイルスゲノムを含む感染性ウイルス粒子（カプシドタンパク質、エンベロープタンパク質、及び／または膜タンパク質を含み得る）へのアセンブリを媒介する。したがって、本明細書に記載されるＲＮＡポリヌクレオチド（すなわち、合成ＲＮＡウイルスゲノム）は、宿主細胞に導入されると、別の宿主細胞に感染することができるウイルスを産生する。いくつかの実施形態では、腫瘍溶解性ウイルスは、ピコルナウイルスである（図９の概略図を参照のこと）。いくつかの実施形態では、ピコルナウイルスはＣＶＡ２１である。いくつかの実施形態では、ピコルナウイルスはＳＶＶである。
いくつかの実施形態では、合成ＲＮＡウイルスゲノムは、レプリコン、導入遺伝子をコードするＲＮＡウイルスゲノム、ｍＲＮＡ分子、または環状ＲＮＡ分子（ｃｉｒｃＲＮＡ）である。いくつかの実施形態では、合成ＲＮＡウイルスゲノムは、一本鎖ＲＮＡ（ｓｓＲＮＡ）ウイルスゲノムを含む。いくつかの実施形態では、一本鎖ゲノムは、ポジティブセンスまたはネガティブセンスゲノムであり得る。
本明細書に記載される合成ＲＮＡウイルスゲノムは、腫瘍溶解性ウイルスをコードする。腫瘍溶解性ウイルスの例は、当技術分野で公知であり、限定されるものではないが、ピコルナウイルス（例えば、コクサッキーウイルス）、ポリオウイルス、麻疹ウイルス、水疱性口内炎ウイルス、オルトミクソウイルス、及びマラバウイルスを含む。いくつかの実施形態では、合成ＲＮＡウイルスゲノムによってコードされる腫瘍溶解性ウイルスは、ピコルナウイルス科のウイルス、例えばコクサッキーウイルス、ポリオウイルス（ＰＶＳ－ＲＩＰＯなどのキメラポリオウイルス及び他のキメラピコルナウイルスを含む）、もしくはセネカバレーウイルス、もしくは多数のピコルナウイルスのいずれかのキメラ起源のあらゆるウイルス、アレナウイルス科のウイルス、例えばラッサウイルス、レトロウイルス科のウイルス、例えばマウス白血病ウイルス、オルトミクソウイルス科のウイルス、例えばＡ型インフルエンザウイルス、パラミクソウイルス科のウイルス、例えばニューカッスル病ウイルスもしくは麻疹ウイルス、レオウイルス科のウイルス、例えば哺乳動物オルトレオウイルス、トガウイルス科のウイルス、例えばシンドビスウイルス、またはラブドウイルス科のウイルス、例えば水疱性口内炎ウイルス（ＶＳＶ）もしくはマラバウイルスである。
いくつかの実施形態では、本明細書に記載される合成ＲＮＡウイルスゲノムは、一本鎖ＲＮＡ（ｓｓＲＮＡ）ウイルスゲノムをコードする。いくつかの実施形態では、ｓｓＲＮＡウイルスは、ポジティブセンスのｓｓＲＮＡ（＋センスｓｓＲＮＡ）ウイルスである。例示的な＋センスｓｓＲＮＡウイルスには、ピコルナウイルス科（例えば、コクサッキーウイルス、ポリオウイルス、及びセネカバレーウイルス（ＳＶＶ）、ＳＶＶ－Ａを含む）、コロナウイルス科（例えば、ＨＣｏＶ－２２９Ｅ及びＨＣｏＶ－ＮＬ６３などのアルファコロナウイルス、ＨＣｏＶ－ＨＫＵ１、ＨＣｏＶ－ＯＣ３、及びＭＥＲＳ－ＣｏＶなどのベータコロナウイルス）、レトロウイルス科（例えば、マウス白血病ウイルス）、及びトガウイルス科（例えば、シンドビスウイルス）のメンバーが含まれる。ポジティブセンスのｓｓＲＮＡウイルスの追加の例示的な属及び種を以下の表３に示す。
Figure 2024508047000073
いくつかの実施形態では、本明細書に記載される組換えＲＮＡ分子は、コクサッキーウイルス、ポリオウイルス、及びセネカバレーウイルス（ＳＶＶ）から選択されるピコルナウイルスをコードする。いくつかの実施形態では、本明細書に記載される組換えＲＮＡ分子は、コクサッキーウイルスをコードする。
いくつかの実施形態では、本明細書に記載される合成ＲＮＡウイルスゲノムは、セネカバレーウイルス（ＳＶＶ）をコードする。
いくつかの実施形態では、本明細書に記載される合成ＲＮＡウイルスゲノムは、コクサッキーウイルスをコードする。いくつかの実施形態では、コクサッキーウイルスは、ＣＶＢ３、ＣＶＡ２１、及びＣＶＡ９から選択される。例示的なコクサッキーウイルスの核酸配列は、ＧｅｎＢａｎｋ参照番号Ｍ３３８５４．１（ＣＶＢ３）、ＧｅｎＢａｎｋ参照番号ＫＴ１６１２６６．１（ＣＶＡ２１）、及びＧｅｎＢａｎｋ参照番号Ｄ００６２７．１（ＣＶＡ９）で提供される。
いくつかの実施形態では、ペイロード分子は、腫瘍溶解性ウイルスをコードする。いくつかの実施形態では、腫瘍溶解性ウイルスは、コクサッキーウイルス、セネカバレーウイルス、トガウイルス科、またはアルファウイルス（例えば、シンドビスウイルス、セムリキ森林ウイルス、ロスリバーウイルス、またはチクングニアウイルス）であるか、またはそれに由来する。いくつかの実施形態では、腫瘍溶解性ウイルスは、コクサッキーウイルスＡ２１（ＣＶＡ２１）であるか、またはそれに由来する。いくつかの実施形態では、腫瘍溶解性ウイルスは、セネカバレーウイルス（ＳＶＶ）であるか、またはそれに由来する。
他のペイロード分子
本開示のＬＮＰは、核酸、ポリペプチド、小分子、炭水化物、酵素、色素、蛍光色素、及びそれらの組み合わせからなる群から選択されるペイロード分子を含み得る。いくつかの実施形態では、本開示のＬＮＰは、ペイロード分子の組み合わせを含む。ペイロード分子の組み合わせは、共有結合していてもよく、非共有結合していてもよく、または会合していなくてもよい。ペイロード分子の組み合わせの非限定的な例としては、抗体－薬物コンジュゲート及びＣａｓタンパク質／ｇＲＮＡ複合体が挙げられる。
いくつかの実施形態では、ペイロード分子は、Ｃａｓタンパク質／ｇＲＮＡ複合体であり得る。ＣＲＩＳＰＲ（クラスター化された規則的な間隔のある短い回文の繰り返し配列）／Ｃａｓ（ＣＲＩＳＰＲ関連）ヌクレアーゼ系は、哺乳動物ゲノムのエンジニアリングのために使用することができる細菌系に基づくエンジニアリングされたヌクレアーゼ系である。概して、この系は、Ｃａｓタンパク質（Ｃａｓヌクレアーゼ）及びガイドＲＮＡ（ｇＲＮＡ）を含む。ｇＲＮＡは、標的ゲノムＤＮＡ配列に特異的なｃｒｉｓｐｒ－ＲＮＡ（ｃｒＲＮＡ）と、Ｃａｓ結合を促進するｔｒａｃｒＲＮＡ（ｔｒＲＮＡ）との２つの部分から構成されている。ｃｒＲＮＡ及びｔｒＲＮＡは、別個のＲＮＡオリゴヌクレオチドとして存在してもよいし、同じＲＮＡオリゴヌクレオチド中に存在してもよい（シングルガイドＲＮＡ（ｓｇＲＮＡ）と呼ばれる）。本明細書で使用される場合、「ガイドＲＮＡ」または「ｇＲＮＡ」という用語は、個々のｔｒＲＮＡと個々のｃｒＲＮＡとの組み合わせまたはｓｇＲＮＡのいずれかを指す。例えば、Ｊｉｎｅｋ ｅｔ ａｌ．（２０１２）Ｓｃｉｅｎｃｅ ３３７：８１６－８２１、Ｃｏｎｇ ｅｔ ａｌ．（２０１３）Ｓｃｉｅｎｃｅ ３３９：８１９－８２３、及びＲａｎ ｅｔ ａｌ．（２０１３）Ｎａｔｕｒｅ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ８（１１）：２２８１－２３０８、米国特許公開第２０１０－００９３６１７号、同第２０１３－００１１８２８号、同第２０１０－０２５７６３８号、同第２０１０－００７６０５７号、同第２０１１－０２１７７３９号、同第２０１１－０３００５３８号、同第２０１３－０２８８２５１号、及び同第２０１２－０２７７１２０号、ならびに米国特許第８，５４６，５５３号を参照されたい。これらは各々、全体として参照により本明細書に組み込まれる。
いくつかの実施形態では、ペイロード分子は、塩基編集酵素（例えば、シチジンデアミナーゼまたはアデノシンデアミナーゼ）であり得る。いくつかの実施形態では、塩基編集酵素は、ＣＲＩＳＰＲタンパク質に融合している。いくつかの実施形態では、ＣＲＩＳＰＲタンパク質は、ガイドＲＮＡに結合している。
医薬組成物
いくつかの実施形態では、本開示は、式（Ｉ）の化合物、及び薬学的に許容される担体、アジュバント、またはビヒクルを含む、医薬組成物を含む。いくつかの実施形態では、本開示は、表１から選択される化合物、及び薬学的に許容される担体、アジュバント、またはビヒクルを含む、医薬組成物を含む。いくつかの実施形態では、本開示は、式（Ｉ）の化合物を含む脂質ナノ粒子（ＬＮＰ）を含む医薬組成物を含む。いくつかの実施形態では、本開示は、表１から選択される化合物を含むＬＮＰを含む医薬組成物を含む。いくつかの実施形態では、本開示は、式（Ａ）、（Ａ’）、または（Ａ”）の化合物を含む脂質ナノ粒子（ＬＮＰ）を含む医薬組成物を含む。いくつかの実施形態では、本開示は、本開示のＬＮＰ、及び薬学的に許容される賦形剤、担体、または希釈剤を含む、医薬組成物を含む。いくつかの実施形態では、医薬組成物は、（ｉ）本開示のＬＮＰと、任意で、ペイロード分子と、（ｉｉ）薬学的に許容される担体、希釈剤、または賦形剤とを含み得る。
医薬組成物は、薬学的に有用な組成物を調製するための既知の方法に従って製剤化することができ、それにより、治療用分子は、薬学的に許容される担体、希釈剤、または賦形剤との混合物中に組み合わされる。担体は、その投与がレシピエント対象によって忍容され得る場合、「薬学的に許容される担体」と言われる。滅菌リン酸緩衝食塩水は、薬学的に許容される担体の一例である。他の好適な担体、希釈剤、または賦形剤は当業者に周知である（例えば、Ｇｅｎｎａｒｏ（ｅｄ．），Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ（Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏｍｐａｎｙ，１９ｔｈ ｅｄ．１９９５）を参照のこと）。製剤は、バイアル表面でのタンパク質の損失などを防止するために、１つ以上の賦形剤、防腐剤、可溶化剤、緩衝剤、アルブミンをさらに含むことができる。
本開示のＬＮＰを含む医薬組成物は、経口単位剤形、静脈内単位剤形、鼻腔内単位剤形、坐薬単位剤形、皮内単位剤形、筋肉内単位剤形、腹腔内単位剤形、皮下単位剤形、硬膜外単位剤形、舌下単位剤形、及び脳内単位剤形からなる群から選択される剤形で製剤化され得る。経口単位剤形は、錠剤、丸薬、ペレット、カプセル、粉末、トローチ剤、顆粒、溶液、懸濁液、乳剤、シロップ、エリキシル剤、徐放性製剤、エアロゾル、及びスプレーからなる群から選択され得る。
医薬組成剤は、治療有効量で対象に投与され得る。予防的用途では、本開示のＬＮＰと、任意でペイロード分子とを含む医薬組成物は、特定の障害にかかりやすい、またはさもなければそのリスクのある対象に、障害のリスクを消失もしくは低減させる、またはその発症を遅延させるのに十分な量で投与される。治療的用途では、本開示のＬＮＰと、任意でペイロード分子とを含む組成物は、かかる障害の疑いがある、または既にそれに罹患している対象に、障害及びその合併症の症状を治癒する、または少なくとも部分的に止めるのに十分な量で投与される。これを達成するための適切な量は、治療有効用量または治療有効量と称される。予防及び治療のいずれの体制でも、十分な応答が達成されるまで複数の投与量でペイロード分子を投与することができる。典型的には、応答をモニターし、所望の応答が弱まり始めれば繰り返し投与量を与える。
本開示の方法によれば、組成物は、例えば、筋肉内、皮下、静脈内、心房内、関節内、非経口、鼻腔内、肺内、経皮、胸膜内、くも膜下腔内、腫瘍内、及び経口投与経路を含む様々な投与様式によって対象に投与することができる。防止及び処置の目的では、組成物は、単回ボーラス送達で、長期間にわたる連続送達（例えば、連続経皮送達）を介して、または繰り返し投与プロトコル（例えば、時間単位、日単位、週単位、または月単位）で対象に投与することができる。
投与は、注射、潅注、吸入、摂取、電気浸透、血液透析、イオン泳動、及び当技術分野で公知である他の方法によって行うことができる。投与経路は、当然、処置される疾患の位置及び性質によって変わり、例えば、耳介、頬側、結膜、皮膚、歯、子宮頸管内、副鼻腔内、気管内、腸内、硬膜外、間質内、関節内、動脈内、腹内、耳介内、胆管内、気管支内、嚢内、海綿内、脳内、槽内、角膜内、歯冠内、冠動脈内、頭蓋内、皮内、円板内、腺管内、十二指腸内、十二指腸内、硬膜内、心外膜内、表皮内、食道内、胃内、歯肉内、肝内、回腸内、病巣内、舌内、管腔内、リンパ腺内、乳腺内、骨髄内、髄膜内、筋肉内、鼻腔内、節内、眼内、網内、卵巣内、腹腔内、心膜内、胸膜内、前立腺内、肺内、第一胃内、洞内、脊髄内、滑液嚢内、腱内、精巣内、気管内、髄腔内、胸郭内、小管内、腫瘍内、鼓室内、子宮内、腹腔内、脈管内、脳室内、膀胱内、前庭内、静脈内、硝子体内、喉頭部、経鼻、経鼻胃、経口、眼、口咽頭、非経口、経皮（ｐｅｒｃｕｔａｎｅｏｕｓ）、関節周囲、硬膜外、神経周囲、歯周、呼吸器、尿細管後、直腸、脊髄、くも膜下、結膜下、皮下、真皮下、歯肉下、舌下、粘膜下、網膜下、局所、経皮（ｔｒａｎｓｄｅｒｍａｌ）、経心内膜、経粘膜、経胎盤、経気管、経鼓膜、尿管、尿道、及び／または膣灌流、洗浄、直接注射、ならびに経口による投与を含み得る。
いくつかの実施形態では、医薬組成物は、全身投与用に製剤化されている。いくつかの実施形態では、全身投与は、静脈内投与、動脈内投与、腹腔内投与、筋肉内投与、皮内投与、皮下投与、鼻腔内投与、経口投与、またはそれらの組み合わせを含む。いくつかの実施形態では、医薬組成物は、静脈内投与用に製剤化されている。いくつかの実施形態では、医薬組成物は、局所投与用に製剤化されている。いくつかの実施形態では、医薬組成物は、腫瘍内投与用に製剤化されている。
本開示の組成物の有効用量は、投与手段、標的部位、対象の生理学的状態、対象がヒトであるか動物であるか、投与される他の薬剤、処置が予防的であるか治療的であるか、ならびに、組成物自体の比活性及び個体において所望される応答を誘起する能力を含む、多くの異なる要因に応じて変わる。いくつかの実施形態では、対象はヒトである。いくつかの実施形態では、対象は非ヒト哺乳動物であり得る。典型的に、投与計画は、最適な治療応答を提供するように、すなわち、安全性及び有効性を最適化するように調整される。
この文脈における有効投与量の決定は、典型的には、ヒト臨床試験が後に続く動物モデル研究に基づくものであり、モデル対象における対象障害の発生または重篤度を著しく低減させる有効投与量及び投与プロトコルを決定することによって導かれる。本開示の組成物は、一度にまたは一連の処置にわたって対象に好適に投与することができ、診断以降の任意の時点で対象に投与することができる。本開示の組成物は、問題になっている状態の処置に有用な、単独処置として、単剤療法として、または他の薬物もしくは療法と併せて、併用療法として投与され得る。
医薬組成物の投与量は、標的部位における所望の濃度を維持するように担当医が変えることができる。送達の様式に基づいて、より高いまたはより低い濃度が選択され得る。また、投与量は、投与される製剤の放出速度に基づいて調整されるべきである。
いくつかの実施形態では、本開示の医薬組成物は、複数回（例えば、複数用量）で対象に投与される。いくつかの実施形態では、医薬組成物は、２回以上、３回以上、４回以上などで投与される。いくつかの実施形態では、医薬組成物の投与は、１回、２回、３回、４回、５回、６回、７回、８回、９回、１０回、またはそれ以上繰り返され得る。医薬組成物は、その意図される目的に応じて、慢性的または急性的に投与され得る。
いくつかの実施形態では、本開示の組成物の治療有効量は、約１ｎｇ／ｋｇ体重～約１００ｍｇ／ｋｇ体重である。いくつかの実施形態では、投与される本開示の組成物の範囲は、約１ｎｇ／ｋｇ体重～約１μｇ／ｋｇ体重、約１ｎｇ／ｋｇ体重～約１００ｎｇ／ｋｇ体重、約１ｎｇ／ｋｇ体重～約１０ｎｇ／ｋｇ体重、約１０ｎｇ／ｋｇ体重～約１μｇ／ｋｇ体重、約１０ｎｇ／ｋｇ体重～約１００ｎｇ／ｋｇ体重、約１００ｎｇ／ｋｇ体重～約１μｇ／ｋｇ体重、約１００ｎｇ／ｋｇ体重～約１０ｐｇ／ｋｇ体重、約１μｇ／ｋｇ体重～約１０ｐｇ／ｋｇ体重、約１μｇ／ｋｇ体重～約１００ｐｇ／ｋｇ体重、約１０ｐｇ／ｋｇ体重～約１００ｐｇ／ｋｇ体重、約１０ｐｇ／ｋｇ体重～約１ｍｇ／ｋｇ体重、約１００μｇ／ｋｇ体重～約１０ｍｇ／ｋｇ体重、約１ｍｇ／ｋｇ体重～約１００ｍｇ／ｋｇ体重、または約１０ｍｇ／ｋｇ体重～約１００ｍｇ／ｋｇ体重である。この範囲内の投与量は、例えば、１日に複数の投与、または毎日、毎週、隔週、もしくは毎月の投与を含め、単回または複数回の投与によって達成され得る。本開示の組成物は、必要もしくは適応に応じて、ボーラスもしくは持続注入による単回用量として、またはボーラスもしくは持続注入による複数用量として投与され得る。複数用量は、例えば、１日に複数回、１日１回、２、３、４、５、６もしくは７日ごと、毎週、２、３、４、５もしくは６週ごと、または毎月投与され得る。いくつかの実施形態では、本開示の組成物は、毎週投与される。いくつかの実施形態では、本開示の組成物は、隔週投与される。いくつかの実施形態では、本開示の組成物は、３週間ごとに投与される。しかしながら、他の投薬レジメンが有用な場合がある。この療法の進展は、従来の技術によって容易にモニターされる。
成人対象への投与の場合、治療有効量は、投薬ごとに０．０００６ｍｇ、投薬ごとに０．００１ｍｇ、投薬ごとに０．００３ｍｇ、投薬ごとに０．００６ｍｇ、投薬ごとに０．０１ｍｇ、投薬ごとに０．０３ｍｇ、投薬ごとに０．０６ｍｇ、投薬ごとに０．１ｍｇ、投薬ごとに０．３ｍｇ、投薬ごとに０．６ｍｇ、投薬ごとに１ｍｇ、投薬ごとに３ｍｇ、投薬ごとに６ｍｇ、投薬ごとに１０ｍｇ、投薬ごとに３０ｍｇ、投薬ごとに６０ｍｇ、投薬ごとに１００ｍｇ、投薬ごとに３００ｍｇ、投薬ごとに６００ｍｇ、及び投薬ごとに１０００ｍｇを含むがこれらに限定されない、投薬ごとに０．０００６ｍｇ～１０００ｍｇの範囲内の用量で投与することができ、複数の、通常は連続した日用量を処置の過程で投与することができる。いくつかの実施形態では、本開示の組成物は、約０．００１ｍｇ／ｋｇ／投薬～約１０ｍｇ／ｋｇ／投薬、約０．００１ｍｇ／ｋｇ／投薬～約６ｍｇ／ｋｇ／投薬、約０．００１ｍｇ／ｋｇ／投薬～約３ｍｇ／ｋｇ／投薬、約０．００１ｍｇ／ｋｇ／投薬～約１ｍｇ／ｋｇ／投薬、約０．００１ｍｇ／ｋｇ／投薬～約０．６ｍｇ／ｋｇ／投薬、約０．００１ｍｇ／ｋｇ／投薬～約０．３ｍｇ／ｋｇ／投薬、約０．００１ｍｇ／ｋｇ／投薬～約０．１ｍｇ／ｋｇ／投薬、約０．００１ｍｇ／ｋｇ／投薬～約０．０６ｍｇ／ｋｇ／投薬、約０．００１ｍｇ／ｋｇ／投薬～約０．０３ｍｇ／ｋｇ／投薬、約０．００１ｍｇ／ｋｇ／投薬～約０．０１ｍｇ／ｋｇ／投薬、約０．００１ｍｇ／ｋｇ／投薬～約０．００６ｍｇ／ｋｇ／投薬、約０．００１ｍｇ／ｋｇ／投薬～約０．００３ｍｇ／ｋｇ／投薬、約０．００３ｍｇ／ｋｇ／投薬～約１０ｍｇ／ｋｇ／投薬、約０．００３ｍｇ／ｋｇ／投薬～約６ｍｇ／ｋｇ／投薬、約０．００３ｍｇ／ｋｇ／投薬～約３ｍｇ／ｋｇ／投薬、約０．００３ｍｇ／ｋｇ／投薬～約１ｍｇ／ｋｇ／投薬、約０．００３ｍｇ／ｋｇ／投薬～約０．６ｍｇ／ｋｇ／投薬、約０．００３ｍｇ／ｋｇ／投薬～約０．３ｍｇ／ｋｇ／投薬、約０．００３ｍｇ／ｋｇ／投薬～約０．１ｍｇ／ｋｇ／投薬、約０．００３ｍｇ／ｋｇ／投薬～約０．０６ｍｇ／ｋｇ／投薬、約０．００３ｍｇ／ｋｇ／投薬～約０．０３ｍｇ／ｋｇ／投薬、約０．００３ｍｇ／ｋｇ／投薬～約０．０１ｍｇ／ｋｇ／投薬、約０．００３ｍｇ／ｋｇ／投薬～約０．００６ｍｇ／ｋｇ／投薬、約０．００６ｍｇ／ｋｇ／投薬～約１０ｍｇ／ｋｇ／投薬、約０．００６ｍｇ／ｋｇ／投薬～約６ｍｇ／ｋｇ／投薬、約０．００６ｍｇ／ｋｇ／投薬～約３ｍｇ／ｋｇ／投薬、約０．００６ｍｇ／ｋｇ／投薬～約１ｍｇ／ｋｇ／投薬、約０．００６ｍｇ／ｋｇ／投薬～約０．６ｍｇ／ｋｇ／投薬、約０．００６ｍｇ／ｋｇ／投薬～約０．３ｍｇ／ｋｇ／投薬、約０．００６ｍｇ／ｋｇ／投薬～約０．１ｍｇ／ｋｇ／投薬、約０．００６ｍｇ／ｋｇ／投薬～約０．０６ｍｇ／ｋｇ／投薬、約０．００６ｍｇ／ｋｇ／投薬～約０．０３ｍｇ／ｋｇ／投薬、約０．００６ｍｇ／ｋｇ／投薬～約０．０１ｍｇ／ｋｇ／投薬、約０．０１ｍｇ／ｋｇ／投薬～約１０ｍｇ／ｋｇ／投薬、約０．０１ｍｇ／ｋｇ／投薬～約６ｍｇ／ｋｇ／投薬、約０．０１ｍｇ／ｋｇ／投薬～約３ｍｇ／ｋｇ／投薬、約０．０１ｍｇ／ｋｇ／投薬～約１ｍｇ／ｋｇ／投薬、約０．０１ｍｇ／ｋｇ／投薬～約０．６ｍｇ／ｋｇ／投薬、約０．０１ｍｇ／ｋｇ／投薬～約０．３ｍｇ／ｋｇ／投薬、約０．０１ｍｇ／ｋｇ／投薬～約０．１ｍｇ／ｋｇ／投薬、約０．０１ｍｇ／ｋｇ／投薬～約０．０６ｍｇ／ｋｇ／投薬、約０．０１ｍｇ／ｋｇ／投薬～約０．０３ｍｇ／ｋｇ／投薬、約０．０３ｍｇ／ｋｇ／投薬～約１０ｍｇ／ｋｇ／投薬、約０．０３ｍｇ／ｋｇ／投薬～約６ｍｇ／ｋｇ／投薬、約０．０３ｍｇ／ｋｇ／投薬～約３ｍｇ／ｋｇ／投薬、約０．０３ｍｇ／ｋｇ／投薬～約１ｍｇ／ｋｇ／投薬、約０．０３ｍｇ／ｋｇ／投薬～約０．６ｍｇ／ｋｇ／投薬、約０．０３ｍｇ／ｋｇ／投薬～約０．３ｍｇ／ｋｇ／投薬、約０．０３ｍｇ／ｋｇ／投薬～約０．１ｍｇ／ｋｇ／投薬、約０．０３ｍｇ／ｋｇ／投薬～約０．０６ｍｇ／ｋｇ／投薬、約０．０６ｍｇ／ｋｇ／投薬～約１０ｍｇ／ｋｇ／投薬、約０．０６ｍｇ／ｋｇ／投薬～約６ｍｇ／ｋｇ／投薬、約０．０６ｍｇ／ｋｇ／投薬～約３ｍｇ／ｋｇ／投薬、約０．０６ｍｇ／ｋｇ／投薬～約１ｍｇ／ｋｇ／投薬、約０．０６ｍｇ／ｋｇ／投薬～約０．６ｍｇ／ｋｇ／投薬、約０．０６ｍｇ／ｋｇ／投薬～約０．３ｍｇ／ｋｇ／投薬、約０．０６ｍｇ／ｋｇ／投薬～約０．１ｍｇ／ｋｇ／投薬、約０．１ｍｇ／ｋｇ／投薬～約１０ｍｇ／ｋｇ／投薬、約０．１ｍｇ／ｋｇ／投薬～約６ｍｇ／ｋｇ／投薬、約０．１ｍｇ／ｋｇ／投薬～約３ｍｇ／ｋｇ／投薬、約０．１ｍｇ／ｋｇ／投薬～約１ｍｇ／ｋｇ／投薬、約０．１ｍｇ／ｋｇ／投薬～約０．６ｍｇ／ｋｇ／投薬、約０．１ｍｇ／ｋｇ／投薬～約０．３ｍｇ／ｋｇ／投薬、約０．３ｍｇ／ｋｇ／投薬～約１０ｍｇ／ｋｇ／投薬、約０．３ｍｇ／ｋｇ／投薬～約６ｍｇ／ｋｇ／投薬、約０．３ｍｇ／ｋｇ／投薬～約３ｍｇ／ｋｇ／投薬、約０．３ｍｇ／ｋｇ／投薬～約１ｍｇ／ｋｇ／投薬、約０．３ｍｇ／ｋｇ／投薬～約０．６ｍｇ／ｋｇ／投薬、約０．６ｍｇ／ｋｇ／投薬～約１０ｍｇ／ｋｇ／投薬、約０．６ｍｇ／ｋｇ／投薬～約６ｍｇ／ｋｇ／投薬、約０．６ｍｇ／ｋｇ／投薬～約３ｍｇ／ｋｇ／投薬、約０．６ｍｇ／ｋｇ／投薬～約１ｍｇ／ｋｇ／投薬、約１ｍｇ／ｋｇ／投薬～約１０ｍｇ／ｋｇ／投薬、約１ｍｇ／ｋｇ／投薬～約６ｍｇ／ｋｇ／投薬、約１ｍｇ／ｋｇ／投薬～約３ｍｇ／ｋｇ／投薬、約３ｍｇ／ｋｇ／投薬～約１０ｍｇ／ｋｇ／投薬、約３ｍｇ／ｋｇ／投薬～約６ｍｇ／ｋｇ／投薬、または約６ｍｇ／ｋｇ／投薬～約１０ｍｇ／ｋｇ／投薬の用量レベルで投与される。いくつかの実施形態では、本開示の組成物は、約０．００１ｍｇ／ｋｇ／投薬、約０．００３ｍｇ／ｋｇ／投薬、約０．００６ｍｇ／ｋｇ／投薬、約０．０１ｍｇ／ｋｇ／投薬、約０．０３ｍｇ／ｋｇ／投薬、約０．０６ｍｇ／ｋｇ／投薬、約０．１ｍｇ／ｋｇ／投薬、約０．３ｍｇ／ｋｇ／投薬、約０．６ｍｇ／ｋｇ／投薬、約１ｍｇ／ｋｇ／投薬、約３ｍｇ／ｋｇ／投薬、約６ｍｇ／ｋｇ／投薬、または約１０ｍｇ／ｋｇ／投薬の用量レベルで投与される。本開示の組成物は、１日のうちの様々な時点で投与することができる。一実施形態において、最適な治療用量は夕方に投与され得る。別の実施形態では、最適な治療用量は午前中に投与され得る。予想されるとおり、投与量は、対象の状態、サイズ、年齢、及び状態に依存する。
医薬組成物の投与量は、標的部位における所望の濃度を維持するように担当医が変えることができる。送達の様式に基づいて、より高いまたはより低い濃度が選択され得る。また、投与量は、投与される製剤の放出速度に基づいて調整されるべきである。
いくつかの実施形態では、本開示の医薬組成物は、複数回（例えば、複数用量）で対象に投与される。いくつかの実施形態では、医薬組成物は、２回以上、３回以上、４回以上などで投与される。いくつかの実施形態では、医薬組成物の投与は、１回、２回、３回、４回、５回、６回、７回、８回、９回、１０回、またはそれ以上繰り返され得る。医薬組成物は、その意図される目的に応じて、慢性的または急性的に投与され得る。
いくつかの実施形態では、医薬組成物の２回の連続する投薬間の間隔は、４週間未満、３週間未満、２週間未満、または１週間未満である。いくつかの実施形態では、２回の連続する投薬間の間隔は、３週間未満である。いくつかの実施形態では、２回の連続する投薬間の間隔は、２週間未満である。いくつかの実施形態では、２回の連続する投薬間の間隔は、１週間未満である。いくつかの実施形態では、２回の連続する投薬間の間隔は、２８日未満、２７日未満、２６日未満、２５日未満、２４日未満、２３日未満、２２日未満、２１日未満、２０日未満、１９日未満、１８日未満、１７日未満、１６日未満、１５日未満、１４日未満、１３日未満、１２日未満、１１日未満、１０日未満、９日未満、８日未満、７日未満、６日未満、５日未満、４日未満、３日未満、２日未満、または１日未満である。いくつかの実施形態では、医薬組成物の２回の連続する投薬間の間隔は、少なくとも４、少なくとも３、少なくとも２、または少なくとも１週間である。いくつかの実施形態では、本開示の医薬組成物の２回の連続する投薬間の間隔は、少なくとも３週間である。いくつかの実施形態では、本開示の医薬組成物の２回の連続する投薬間の間隔は、少なくとも２週間である。いくつかの実施形態では、本開示の医薬組成物の２回の連続する投薬間の間隔は、少なくとも１週間である。いくつかの実施形態では、本開示の医薬組成物の２回の連続する投薬間の間隔は、少なくとも２８、２７、２６、２５、２４、２３、２２、２１、２０、１９、１８、１７、１６、１５、１４、１３、１２、１１、１０、９、８、７、６、５、４、３、２、または１日である。いくつかの実施形態では、対象は、本開示の医薬組成物の用量を毎日、２日ごと、３日ごと、４日ごと、５日ごと、６日ごと、７日ごと、８日ごと、９日ごと、１０日ごと、１１日ごと、１２日ごと、１３日ごと、１４日ごと、１５日ごと、１６日ごと、１７日ごと、１８日ごと、１９日ごと、２０日ごと、２１日ごと、２２日ごと、２３日ごと、２４日ごと、２５日ごと、２６日ごと、２７日ごと、または２８日ごとに１回投与される。いくつかの実施形態では、対象は、本開示の医薬組成物の用量を４週ごと、５週ごと、６週ごと、７週ごと、８週ごと、９週ごと、１０週ごと、１１週ごと、または１２週ごとに１回投与される。いくつかの実施形態では、対象は、本開示の医薬組成物の用量を１か月ごと、２か月ごと、３か月ごと、４か月ごと、５か月ごと、６か月ごと、７か月ごと、８か月ごと、９か月ごと、１０か月ごと、１１か月ごと、または１２か月ごとに１回投与される。
いくつかの実施形態では、本開示の医薬組成物は複数回投与され、２回目及び／または後続の投与後の対象におけるＬＮＰの血清半減期は、１回目の投与後のＬＮＰの血清半減期の少なくとも４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、８５％、９０％、または９５％である。
いくつかの実施形態では、ペイロード分子を含む医薬組成物の２回目及び後続の用量は、２回目の投与または後続の投与後少なくとも１日間、２日間、３日間、４日間、５日間、６日間、または７日間にわたって、１回目の用量の活性の少なくとも５０％、または１回目の用量の少なくとも６０％、または１回目の用量の少なくとも７０％、または１回目の用量の少なくとも７５％、または１回目の用量の少なくとも８０％、または１回目の用量の少なくとも８５％、または１回目の用量の少なくとも９０％、または１回目の用量の少なくとも９５％、またはそれ以上であるペイロード分子の活性を維持し得る。
いくつかの実施形態では、本開示の医薬組成物は、約１時間以上、約２時間以上、約３時間以上、約４時間以上、約５時間以上、約６時間以上、約７時間以上、約８時間以上、約９時間以上、約１０時間以上、約１２時間以上、約１４時間以上、約１６時間以上、約１８時間以上、約２０時間以上、約２５時間以上、約３０時間以上、約３５時間以上、約４０時間以上、約４５時間以上、または約５０時間以上のｉｎ ｖｉｖｏ治療効果持続期間を有する。いくつかの実施形態では、本開示の医薬組成物は、少なくとも１時間、２時間、３時間、４時間、５時間、６時間、７時間、８時間、９時間、１０時間、１１時間、１２時間、１３時間、１４時間、１５時間、１６時間、１７時間、１８時間、１９時間、２０時間、２１時間、２２時間、２３時間、２４時間、１．５日、２日、３日、４日、５日、６日、７日、８日、９日、または１０日のｉｎ ｖｉｖｏ治療効果持続期間を有する。
いくつかの実施形態では、本開示の医薬組成物は、所定の閾値のものに匹敵するｉｎ ｖｉｖｏ半減期を有する。いくつかの実施形態では、本開示の医薬組成物は、所定の閾値のものよりも長いｉｎ ｖｉｖｏ半減期を有する。いくつかの実施形態では、本開示の医薬組成物は、所定の閾値のものよりも短いｉｎ ｖｉｖｏ半減期を有する。いくつかの実施形態では、所定の閾値は、ＬＮＰが、（ｉ）式（Ａ）、（Ａ’）、もしくは（Ａ”）のものではないＰＥＧ脂質（例えば、対照組成物中のＬＮＰのＰＥＧ脂質はＰＥＧ２ｋ－ＤＰＧであり得る）、または（ｉｉ）式（Ｉ）のものではないカチオン性脂質を含むことを除いては同じペイロード分子及びＬＮＰを含む対照組成物の半減期である。
いくつかの実施形態では、本開示の医薬組成物は、繰り返し投薬後に、先行投薬後のＡＵＣ（血液濃度－時間曲線下面積）の少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、または少なくとも１００％であるＡＵＣを有する。いくつかの実施形態では、医薬組成物は、先行投薬後のＡＵＣの少なくとも６０％であるＡＵＣを有する。いくつかの実施形態では、繰り返し投薬後、医薬組成物のＡＵＣは、先行投薬後のＡＵＣと比較して７０％未満、６０％未満、６０％未満、４０％未満、３０％未満、２０％未満、１０％未満、または５％未満減少する。いくつかの実施形態では、繰り返し投薬後、医薬組成物のＡＵＣは、先行投薬後のＡＵＣと比較して４０％未満減少する。
いくつかの実施形態では、本開示の医薬組成物は、腫瘍溶解性ウイルスのウイルスゲノムをコードする核酸分子を含み、腫瘍を有する対象への医薬組成物の投与により、核酸分子が腫瘍細胞中に送達される。いくつかの実施形態では、核酸分子は、ＲＮＡ分子である。いくつかの実施形態では、医薬組成物の投与は、腫瘍細胞における腫瘍溶解性ウイルスの複製をもたらす。いくつかの実施形態では、腫瘍を有する対象への医薬組成物の投与は、正常細胞と比較して、腫瘍細胞における腫瘍溶解性ウイルスの選択的複製をもたらす。
いくつかの実施形態では、腫瘍を有する対象への本開示の医薬組成物の投与は、腫瘍の成長を阻害する。いくつかの実施形態では、医薬組成物の投与は、少なくとも１週間、少なくとも１か月、少なくとも２か月、少なくとも３か月、少なくとも４か月、少なくとも６か月、少なくとも９か月、少なくとも１２か月、少なくとも２年、またはそれ以上にわたって腫瘍の成長を阻害する。いくつかの実施形態では、腫瘍の成長の阻害は、規定期間にわたって医薬組成物の投与直前の腫瘍のサイズの１００％以内に腫瘍のサイズを制御することを意味する。いくつかの実施形態では、腫瘍の成長の阻害は、医薬組成物の投与直前の腫瘍のサイズの１１０％以内、１２０％以内、１３０％以内、１４０％以内、または１５０％以内に腫瘍のサイズを制御することを意味する。
いくつかの実施形態では、腫瘍を有する対象への医薬組成物の投与は、腫瘍の縮小または消失につながる。いくつかの実施形態では、医薬組成物の投与は、少なくとも１週間、少なくとも１か月、少なくとも２か月、少なくとも３か月、少なくとも４か月、少なくとも６か月、少なくとも９か月、少なくとも１２か月、少なくとも２年、またはそれ以上にわたる腫瘍の縮小または消失につながる。いくつかの実施形態では、医薬組成物の投与は、１週間以内、２週間以内、３週間以内、４週間以内、１か月以内、２か月以内、３か月以内、４か月以内、６か月以内、９か月以内、１２か月以内、または２年以内に腫瘍の縮小または消失につながる。いくつかの実施形態では、腫瘍の縮小は、腫瘍のサイズを、医薬組成物の投与直前の腫瘍のサイズと比較して少なくとも１０％、少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％低減させることを意味する。いくつかの実施形態では、腫瘍の縮小は、腫瘍のサイズを、医薬組成物の投与直前の腫瘍のサイズと比較して少なくとも３０％低減させることを意味する。
医薬組成物は、本明細書に記載の医薬組成物を含む容器を備えるキットとして供給することができる。医薬組成物は、例えば、単回もしくは複数回用量の注射可能な溶液の形態で、または注射前に再構成される滅菌粉末として提供することができる。あるいは、そのようなキットは、医薬組成物を投与するための乾燥粉末分散器、液体エアロゾル発生器、またはネブライザーを含むことができる。そのようなキットは、医薬組成物の適応症及び使用法に関する書面情報をさらに備えることができる。
使用方法
いくつかの実施形態では、本開示は、疾患または障害の処置を必要とする対象においてそれを行う方法であって、治療有効量の本開示の組成物（例えば、医薬組成物）を対象に投与することを含む方法を提供する。いくつかの実施形態では、本開示は、疾患または障害を処置する方法であって、それを必要とする患者に、本明細書に記載される脂質ナノ粒子を投与することを含む方法を含む。いくつかの実施形態では、疾患または障害は、がんを含む。
この方法は、特にペイロード分子が治療剤である場合に、ペイロード分子が有効である状態を有するか、または有するリスクのある対象を処置する方法であり得る。あるいは、この方法は、対象を診断する方法であり得、その場合、ペイロード分子は診断剤であり得る。
いくつかの実施形態では、本開示は、細胞にペイロードを送達する方法であって、それを必要とする対象に、本明細書に記載される脂質粒子または医薬組成物を投与することを含む方法を含む。いくつかの実施形態では、本開示は、細胞にポリヌクレオチドを送達する方法であって、それを必要とする対象に、（ｉ）式（Ｉ）の化合物、（ｉｉ）表１から選択される化合物、または（ｉｉｉ）式（Ａ）、（Ａ’）、もしくは（Ａ”）の化合物を含む脂質粒子または医薬組成物を投与することを含む方法を含む。いくつかの実施形態では、ポリヌクレオチドは、ポリペプチドまたはその機能的バリアントもしくは断片の発現が増加するように、ポリペプチドまたはその機能的バリアントもしくは断片をコードする。別の実施形態では、ポリヌクレオチドは、免疫療法薬またはその機能的バリアントもしくは断片をコードする。いくつかの実施形態では、免疫療法薬またはその機能的バリアントもしくは断片をコードするポリヌクレオチド。いくつかの実施形態では、本開示は、ウイルスゲノムまたはその機能的バリアントもしくは断片を含むポリヌクレオチドを含む。いくつかの実施形態では、ポリヌクレオチドは、抗原、タンパク質、ＣＡＳ９タンパク質、もしくは塩基編集酵素、またはそれらの融合タンパク質（例えば、ガイドＲＮＡに結合したＣＲＩＳＰＲタンパク質と融合した塩基編集酵素）をコードする。いくつかの実施形態では、ポリヌクレオチドは、ｓｉＲＮＡ、ｓａＲＮＡ、ｍｉＲＮＡ、またはガイドＲＮＡを含む。
なおもさらなる関連実施形態において、本開示は、対象におけるポリペプチドの過剰発現によって特徴付けられる疾患または障害を処置する方法であって、本開示の脂質粒子または医薬組成物を対象に提供することを含み、該治療剤がポリヌクレオチドである方法を含む。
別の関連実施形態において、本開示は、対象におけるポリペプチドの過小発現によって特徴付けられる疾患または障害を処置する方法を含む。
いくつかの実施形態では、疾患または障害は、がんである。いくつかの実施形態では、がんは、肺癌、乳癌、卵巣癌、子宮頸癌、前立腺癌、精巣癌、大腸癌、結腸癌、膵臓癌、肝臓癌、胃癌、頭頸部癌、甲状腺癌、悪性神経膠腫、膠芽腫、メラノーマ、メルケル細胞癌、Ｂ細胞リンパ腫、多発性骨髄腫、白血病、腎細胞癌、及び神経芽細胞腫からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、がんは、肺癌である。いくつかの実施形態では、肺癌は、小細胞肺癌または非小細胞肺癌である。いくつかの実施形態では、がんは、肝臓癌である。いくつかの実施形態では、肝臓癌は、肝細胞癌（ＨＣＣ）である。いくつかの実施形態では、腎癌は、腎明細胞癌（ＲＣＣ）である。いくつかの実施形態では、腎細胞癌は、明細胞腎細胞癌、乳頭状腎細胞癌、及び嫌色素性腎細胞癌からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、がんは、Ｂ細胞リンパ腫である。いくつかの実施形態では、Ｂ細胞リンパ腫は、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、濾胞性リンパ腫、辺縁帯リンパ腫、及びマントル細胞リンパ腫からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、がんは、白血病である。いくつかの実施形態では、白血病は、Ｂ細胞白血病、Ｔ細胞白血病、急性骨髄性白血病、及び慢性骨髄性白血病からなる群から選択される。
さらに別の実施形態において、本開示は、ウイルス、細菌、または真菌のタンパク質をコードするポリヌクレオチドを含む医薬組成物を、対象の血清における抗体の産生を引き起こすのに十分な量で対象に投与することを含む、対象を処置する方法を含む。いくつかの実施形態では、投与される組成物の量は、循環抗体を産生するため、または対象においてウイルス特異的ＣＤ８＋Ｔ細胞を産生するため、または抗原特異的抗体を産生するために十分なものである。
他の実施形態では、投与は非経口的である。いくつかの実施形態では、投与は、皮下注射、皮内注射、もしくは筋肉内注射によるものであるか、または医薬組成物が少なくとも２回投与される。別の実施形態では、ある方法は、抗体力価またはＣＤ８＋Ｔ細胞を測定するステップをさらに含む。
いくつかの実施形態では、本明細書に記載される医薬組成物は、抗体をコードする核酸を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、細胞に会合したもしくは分泌されたタンパク質、またはヒトタンパク質の断片もしくはバリアントに結合することができる。別の実施形態では、抗体は、ウイルス、細菌、または真菌の粒子に結合することができる。本明細書の別の態様は、対象に対する抗体をコードする核酸を含む医薬組成物を、対象の血清における抗体の産生を引き起こすのに十分な量で、対象に投与することを含む、対象を処置する方法である。
様々な実施形態において、本開示は、がんの処置を必要とする対象においてそれを行う方法であって、治療有効量の本明細書に記載される組成物を対象に投与することを含む方法に関する。
いくつかの実施形態では、本開示は、細胞にペイロード分子を送達する方法を提供し、この方法は、ＬＮＰまたはその医薬組成物と細胞を接触させることを含み、ＬＮＰは、ペイロード分子を含む。いくつかの実施形態では、ペイロード分子は、ウイルスをコードする核酸分子であり、細胞をＬＮＰと接触させると、細胞によるウイルス粒子の産生がもたらされ、ウイルス粒子は、感染性及び溶解性である。
いくつかの実施形態では、本開示は、本開示のＬＮＰまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象にＬＮＰを送達する方法を提供する。いくつかの実施形態では、この方法は、複数投与を含む。いくつかの実施形態では、医薬組成物の２回の連続する投与間の間隔は、４週間未満、３週間未満、２週間未満、または１週間未満である。いくつかの実施形態では、２回の連続する投与間の間隔は、２週間未満である。いくつかの実施形態では、２回の連続する投与間の間隔は、１週間未満である。いくつかの実施形態では、２回の連続する投与間の間隔は、２８日未満、２７日未満、２６日未満、２５日未満、２４日未満、２３日未満、２２日未満、２１日未満、２０日未満、１９日未満、１８日未満、１７日未満、１６日未満、１５日未満、１４日未満、１３日未満、１２日未満、１１日未満、１０日未満、９日未満、８日未満、７日未満、６日未満、５日未満、４日未満、３日未満、２日未満、または１日未満である。いくつかの実施形態では、医薬組成物の２回の連続する投与間の間隔は、少なくとも４、少なくとも３、少なくとも２、または少なくとも１週間である。いくつかの実施形態では、本開示の医薬組成物の２回の連続する投与間の間隔は、少なくとも２週間である。いくつかの実施形態では、本開示の医薬組成物の２回の連続する投与間の間隔は、少なくとも１週間である。いくつかの実施形態では、本開示の医薬組成物の２回の連続する投与間の間隔は、少なくとも２８、２７、２６、２５、２４、２３、２２、２１、２０、１９、１８、１７、１６、１５、１４、１３、１２、１１、１０、９、８、７、６、５、４、３、２、または１日である。いくつかの実施形態では、この方法は、本開示の医薬組成物を対象に１日ごと、２日ごと、３日ごと、４日ごと、５日ごと、６日ごと、７日ごと、８日ごと、９日ごと、１０日ごと、１１日ごと、１２日ごと、１３日ごと、１４日ごと、１５日ごと、１６日ごと、１７日ごと、１８日ごと、１９日ごと、２０日ごと、２１日ごと、２２日ごと、２３日ごと、２４日ごと、２５日ごと、２６日ごと、２７日ごと、または２８日ごとに投与することを含む。いくつかの実施形態では、この方法は、本開示の医薬組成物を対象に４週ごと、５週ごと、６週ごと、７週ごと、８週ごと、９週ごと、１０週ごと、１１週ごと、または１２週ごとに１回投与することを含む。いくつかの実施形態では、この方法は、本開示の医薬組成物を対象に１か月ごと、２か月ごと、３か月ごと、４か月ごと、５か月ごと、６か月ごと、７か月ごと、８か月ごと、９か月ごと、１０か月ごと、１１か月ごと、または１２か月ごとに１回投与することを含む。
いくつかの実施形態では、本開示は、本開示のＬＮＰまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象にＬＮＰを送達する方法を提供し、この方法は、複数投与を含む。いくつかの実施形態では、この方法の２回目及び／または後続の投与後の対象におけるＬＮＰの血清半減期は、１回目の投与後のＬＮＰの血清半減期の少なくとも４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、８５％、９０％、または９５％である。
いくつかの実施形態では、ＬＮＰは、繰り返し投薬後に、先行投薬後のＡＵＣの少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、または少なくとも１００％であるＡＵＣを有する。いくつかの実施形態では、ＬＮＰは、先行投薬後のＡＵＣの少なくとも６０％であるＡＵＣを有する。いくつかの実施形態では、繰り返し投薬後、ＬＮＰのＡＵＣは、先行投薬後のＡＵＣと比較して７０％未満、６０％未満、６０％未満、４０％未満、３０％未満、２０％未満、１０％未満、または５％未満減少する。いくつかの実施形態では、繰り返し投薬後、ＬＮＰのＡＵＣは、先行投薬後のＡＵＣと比較して４０％未満減少する。
いくつかの実施形態では、本開示は、本開示のＬＮＰまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象にＬＮＰを送達する方法を提供し、ＬＮＰは、腫瘍溶解性ウイルスのウイルスゲノムをコードする核酸分子を含み、対象は腫瘍を有し、ＬＮＰの投与により、核酸分子が腫瘍細胞中に送達される。いくつかの実施形態では、ＬＮＰの投与は、腫瘍細胞における腫瘍溶解性ウイルスの複製をもたらす。いくつかの実施形態では、ＬＮＰの投与は、正常細胞と比較して、腫瘍細胞における腫瘍溶解性ウイルスの選択的複製をもたらす。
いくつかの実施形態では、本開示は、本開示のＬＮＰまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象にＬＮＰを送達する方法を提供し、腫瘍を有する対象へのＬＮＰの投与は、腫瘍の成長を阻害する。いくつかの実施形態では、この方法は、少なくとも１週間、少なくとも１か月、少なくとも２か月、少なくとも３か月、少なくとも４か月、少なくとも６か月、少なくとも９か月、少なくとも１２か月、少なくとも２年、またはそれ以上にわたって腫瘍の成長を阻害する。いくつかの実施形態では、腫瘍の成長の阻害は、規定期間にわたって医薬組成物の投与直前の腫瘍のサイズの１００％以内に腫瘍のサイズを制御することを意味する。いくつかの実施形態では、腫瘍の成長の阻害は、医薬組成物の投与直前の腫瘍のサイズの１１０％以内、１２０％以内、１３０％以内、１４０％以内、または１５０％以内に腫瘍のサイズを制御することを意味する。
いくつかの実施形態では、本開示は、本開示のＬＮＰまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象にＬＮＰを送達する方法を提供し、腫瘍を有する対象へのＬＮＰの投与は、腫瘍の縮小または消失につながる。いくつかの実施形態では、この方法は、少なくとも１週間、少なくとも１か月、少なくとも２か月、少なくとも３か月、少なくとも４か月、少なくとも６か月、少なくとも９か月、少なくとも１２か月、少なくとも２年、またはそれ以上にわたる腫瘍の縮小または消失をもたらす。いくつかの実施形態では、この方法は、１週間以内、２週間以内、３週間以内、４週間以内、１か月以内、２か月以内、３か月以内、４か月以内、６か月以内、９か月以内、１２か月以内、または２年以内に腫瘍の縮小または消失をもたらす。いくつかの実施形態では、腫瘍の縮小は、腫瘍のサイズを、医薬組成物の投与直前の腫瘍のサイズと比較して少なくとも１０％、少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％低減させることを意味する。いくつかの実施形態では、腫瘍の縮小は、腫瘍のサイズを、医薬組成物の投与直前の腫瘍のサイズと比較して少なくとも３０％低減させることを意味する。
いくつかの実施形態では、本開示は、本開示のＬＮＰまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象にＬＮＰを送達する方法を提供し、腫瘍を有する対象へのＬＮＰの投与は、がんの転移を阻害する。
いくつかの実施形態では、対象は哺乳動物である。いくつかの実施形態では、対象はヒトである。いくつかの実施形態では、対象はがんを有し、この方法は、がんの成長及び／または転移を阻害または緩徐化する。
いくつかの実施形態では、本開示は、ＬＮＰまたはその医薬組成物を全身投与することを含む、対象にＬＮＰを送達する方法を提供する。いくつかの実施形態では、投与は、静脈内、動脈内、腹腔内、筋肉内、皮内、皮下、鼻腔内、経口、またはそれらの組み合わせである。
いくつかの実施形態では、本開示は、ＬＮＰまたはその医薬組成物を局所投与することを含む、対象にＬＮＰを送達する方法を提供する。いくつかの実施形態では、投与は、腫瘍内である。
いくつかの実施形態では、がんは、肺癌、肝臓癌、前立腺癌、膀胱癌、膵臓癌、胃癌、乳癌、神経芽細胞腫、横紋筋肉腫、髄芽腫、またはメラノーマである。いくつかの実施形態では、がんは、神経内分泌癌である。
がんの例は、限定されるものではないが、癌腫、リンパ腫、芽細胞腫、肉腫（脂肪肉腫、骨肉腫、血管肉腫、内皮肉腫、平滑筋肉腫、脊索腫、リンパ管肉腫、リンパ管内皮肉腫、横紋筋肉腫、線維肉腫、粘液肉腫、軟骨肉腫を含む）、神経内分泌腫瘍、中皮腫、滑膜腫、神経鞘腫、髄膜腫、腺癌、メラノーマ、及び白血病またはリンパ性悪性腫瘍を含む。かかるがんのより詳細な例には、扁平上皮癌（例えば、上皮扁平上皮癌）、小細胞肺癌、非小細胞肺癌、肺腺癌腫、及び肺扁平上皮癌腫を含む肺癌、小細胞肺癌腫、腹膜癌、肝細胞癌、消化器癌を含む胃癌（ｇａｓｔｒｉｃ）または胃癌（ｓｔｏｍａｃｈ）、膵臓癌、膠芽腫、子宮頸癌、卵巣癌、肝臓癌、膀胱癌、肝細胞腫、乳癌、結腸癌、直腸癌、大腸癌、子宮内膜癌または子宮癌、唾液腺癌、腎臓癌または腎癌、前立腺癌、外陰癌、甲状腺癌、肝癌、肛門癌、陰茎癌、精巣癌、食道癌、胆道腫瘍、ユーイング腫瘍、基底細胞癌腫、腺癌腫、汗腺癌腫、皮脂腺癌腫、乳頭癌腫、乳頭腺癌腫、嚢胞腺癌腫、髄様癌腫、気管支原性癌腫、腎細胞癌、肝細胞癌腫、胆管癌腫、絨毛癌腫、セミノーマ、胚性癌腫、ウィルムス腫瘍、精巣腫瘍、肺癌腫、膀胱癌腫、上皮癌腫、神経膠腫、星状細胞腫、髄芽腫、頭蓋咽頭腫、上衣腫、松果体腫瘍、血管芽腫、聴神経腫、乏突起膠腫、髄膜腫、メラノーマ、神経芽細胞腫、網膜芽細胞腫、白血病、リンパ腫、多発性骨髄腫、ワルデンストレームマクログロブリン血症、骨髄異形成疾患、重鎖病、神経内分泌腫瘍、神経鞘腫、及び他の癌腫、ならびに頭頸部癌が含まれる。いくつかの実施形態では、がんは、小細胞肺癌（ＳＣＬＣ）、小細胞膀胱癌、大細胞神経内分泌癌（ＬＣＮＥＣ）、去勢抵抗性小細胞神経内分泌前立腺癌（ＣＲＰＣ－ＮＥ）、カルチノイド（例えば、肺カルチノイド）、及び多形神経膠芽腫ＩＤＨ変異型（ＧＢＭ－ＩＤＨ変異型）から選択される。
ＬＮＰ調製方法
いくつかの実施形態では、本開示は、核酸分子を含む脂質ナノ粒子（ＬＮＰ）の組成物を調製する方法であって、
（ａ）水溶液中で所望の濃度まで核酸分子を希釈するステップと、
（ｂ）マイクロ流体流を使用して、ＬＮＰの全脂質成分を含む有機脂質相を、核酸分子を含む水相と混合して、ＬＮＰを形成するステップと、
（ｃ）ＬＮＰを緩衝液に対して透析して有機溶媒を除去するステップと、
（ｄ）ＬＮＰを標的体積まで濃縮するステップと、
（ｅ）任意で、滅菌フィルターで濾過するステップと
を含む方法を提供する。
いくつかの実施形態では、有機脂質相及び水相は、１：１（ｖ：ｖ）～１：１０（ｖ：ｖ）の比率で混合される。いくつかの実施形態では、有機脂質相及び水相は、１：１（ｖ：ｖ）、１：２（ｖ：ｖ）、１：３（ｖ：ｖ）、１：４（ｖ：ｖ）、１：５（ｖ：ｖ）、１：６（ｖ：ｖ）、１：７（ｖ：ｖ）、１：８（ｖ：ｖ）、１：９（ｖ：ｖ）、または１：１０（ｖ：ｖ）の比率で混合される。いくつかの実施形態では、有機脂質相及び水相は、１：１（ｖ：ｖ）～１：３（ｖ：ｖ）、１：２（ｖ：ｖ）～１：４（ｖ：ｖ）、１：３（ｖ：ｖ）～１：５（ｖ：ｖ）、１：４（ｖ：ｖ）～１：６（ｖ：ｖ）、１：５（ｖ：ｖ）～１：７（ｖ：ｖ）、１：６（ｖ：ｖ）～１：８（ｖ：ｖ）、１：７（ｖ：ｖ）～１：９（ｖ：ｖ）、または１：８（ｖ：ｖ）～１：１０（ｖ：ｖ）の比率で混合される。いくつかの実施形態では、有機脂質相及び水相は、１：３（ｖ：ｖ）～１：５（ｖ：ｖ）の比率で混合される。いくつかの実施形態では、有機脂質相及び水相は、１：３（ｖ：ｖ）の比率で混合される。いくつかの実施形態では、有機脂質相及び水相は、１：５（ｖ：ｖ）の比率で混合される。
いくつかの実施形態では、マイクロ流体流の総流量は５～２０ｍＬ／分である。いくつかの実施形態では、マイクロ流体流の総流量は５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、または２０ｍＬ／分である。いくつかの実施形態では、マイクロ流体流の総流量は９～２０ｍＬ／分である。いくつかの実施形態では、マイクロ流体流の総流量は１１～１３ｍＬ／分である。
いくつかの実施形態では、ステップ（ｂ）における有機脂質相中の溶媒はエタノールである。いくつかの実施形態では、ステップ（ｂ）の有機脂質相に、熱が適用される。いくつかの実施形態では、ステップ（ｂ）の有機脂質相に、約４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５、または８０℃が適用される。いくつかの実施形態では、ステップ（ｂ）の有機脂質相に、６０℃の熱が適用される。いくつかの実施形態では、ステップ（ｂ）の有機脂質相に、熱が適用されない。
いくつかの実施形態では、ステップ（ａ）の水溶液は、１～７のｐＨを有する。いくつかの実施形態では、ステップ（ａ）の水溶液は、１～３、２～４、３～５、４～６、または５～７のｐＨを有する。いくつかの実施形態では、ステップ（ａ）の水溶液は、１、１．５、２、２．５、３、３．５、４、４．５、５、５．５、６、６．５、または７のｐＨを有する。いくつかの実施形態では、ステップ（ａ）の水溶液は、３のｐＨを有する。いくつかの実施形態では、ステップ（ａ）の水溶液は、５のｐＨを有する。
いくつかの実施形態では、総脂質濃度は、５ｍＭ～８０ｍＭである。いくつかの実施形態では、総脂質濃度は、約５、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５、または８０ｍＭである。いくつかの実施形態では、総脂質濃度は、約２０ｍＭである。いくつかの実施形態では、総脂質濃度は、約４０ｍＭである。
いくつかの実施形態では、この方法によって生成されたＬＮＰは、１～２５の脂質窒素対リン酸比（Ｎ：Ｐ）を有する。いくつかの実施形態では、Ｎ：Ｐは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、または２５である。いくつかの実施形態では、Ｎ：Ｐは、１～２５、１～２０、１～１５、１～１０、１～５、５～２５、５～２０、５～１５、５～１０、１０～２５、１０～２０、１０～１５、１５～２５、１５～２０、または２０～２５である。いくつかの実施形態では、ＬＮＰは、核酸分子を含み、１４の脂質窒素対リン酸比（Ｎ：Ｐ）を有する。
いくつかの実施形態では、ステップ（ｃ）の緩衝液は、中性ｐＨを有する（例えば、１×ＰＢＳ、ｐＨ７．２）。いくつかの実施形態では、ステップ（ｄ）は、濃縮のために遠心濾過を使用する。
いくつかの実施形態では、本開示の方法のカプセル化効率は、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％である。いくつかの実施形態では、本開示の方法のカプセル化効率は、少なくとも９０％である。いくつかの実施形態では、本開示の方法のカプセル化効率は、少なくとも９５％である。いくつかの実施形態では、カプセル化効率はＲｉｂｏＧｒｅｅｎによって決定される。
いくつかの実施形態では、本開示の方法によって産生されたＬＮＰは、約５０ｎｍ～約５００ｎｍの平均サイズ（すなわち、平均外径）を有する。いくつかの実施形態では、ＬＮＰは、約５０ｎｍ～約２００ｎｍ、約１００ｎｍ～約２００ｎｍ、約１５０ｎｍ～約２００ｎｍ、約５０ｎｍ～約１００ｎｍ、約５０ｎｍ～約１５０ｎｍ、約１００ｎｍ～約１５０ｎｍ、約２００ｎｍ～約２５０ｎｍ、約２５０ｎｍ～約３００ｎｍ、約３００ｎｍ～約４００ｎｍ、約１５０ｎｍ～約５００ｎｍ、約２００ｎｍ～約５００ｎｍ、約３００ｎｍ～約５００ｎｍ、約３５０ｎｍ～約５００ｎｍ、約４００ｎｍ～約５００ｎｍ、約４２５ｎｍ～約５００ｎｍ、約４５０ｎｍ～約５００ｎｍ、または約４７５ｎｍ～約５００ｎｍの平均サイズを有する。いくつかの実施形態では、複数のＬＮＰは、約５０ｎｍ、６０ｎｍ、７０ｎｍ、８０ｎｍ、９０ｎｍ、１００ｎｍ、１１０ｎｍ、約１２０、または約１２５ｎｍの平均サイズを有する。いくつかの実施形態では、複数のＬＮＰは、約１００ｎｍの平均サイズを有する。いくつかの実施形態では、複数のＬＮＰは、５０ｎｍ～１５０ｎｍの平均サイズを有する。いくつかの実施形態では、複数のＬＮＰは、５０ｎｍ～１５０ｎｍ、５０ｎｍ～１２５ｎｍ、５０ｎｍ～１００ｎｍ、５０ｎｍ～７５ｎｍ、７５ｎｍ～１５０ｎｍ、７５ｎｍ～１２５ｎｍ、７５ｎｍ～１００ｎｍ、１００ｎｍ～１５０ｎｍ、１００ｎｍ～１２５ｎｍ、または１２５ｎｍ～１５０ｎｍの平均サイズ（平均外径）を有する。いくつかの実施形態では、複数のＬＮＰは、７０ｎｍ～９０ｎｍ、８０ｎｍ～１００ｎｍ、９０ｎｍ～１１０ｎｍ、１００ｎｍ～１２０ｎｍ、１１０ｎｍ～１３０ｎｍ、１２０ｎｍ～１４０ｎｍ、または１３０ｎｍ～１５０ｎｍの平均サイズを有する。いくつかの実施形態では、複数のＬＮＰは、９０ｎｍ～１１０ｎｍの平均サイズを有する。
いくつかの実施形態では、複数のＬＮＰの多分散指数は、０．０１～０．３である。いくつかの実施形態では、複数のＬＮＰの多分散指数は、０．１～０．１５である。いくつかの実施形態では、複数のＬＮＰの多分散指数は、約０．０１、約０．０２、約０．０３、約０．０４、約０．０５、約０．０６、約０．０７、約０．０８、約０．０９、約０．１０、約０．１１、約０．１２、約０．１３、約０．１４、約０．１５、約０１６、約０．１７、約０．１８、約０．１９、約０．２０、約０．２１、約０．２２、約０．２３、約０．２４、約０．２５、約０．２６、約０．２７、約０．２８、約０．２９、または約０．３０である。いくつかの実施形態では、複数のＬＮＰの多分散指数は、約０．１０、約０．１１、約０．１２、約０．１３、約０．１４、または約０．１５である。いくつかの実施形態では、平均直径及び／または多分散性は、動的光散乱によって決定される。
略語：
Ｂｎ：ベンジル
ＤＣＭ：ジクロロメタン
ＤＭＡＰ：４－ジメチルアミノピリジン
ＥｔＯＡｃ：酢酸エチル
ＥＤＣＩ：１－エチル－３－（３－ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド
ＨＰＬＣ：高速液体クロマトグラフィー
ＬＣＭＳ：液体クロマトグラフィー／質量分析
Ｎｓ：ノシレート
ＴＢＡＩ：ヨウ化テトラブチルアンモニウム
ＴＥＡ：トリエチルアミン（ＮＥｔ３）
ＴＨＦ：テトラヒドロフラン
ＴＦＡ：トリフルオロ酢酸
Ｔｓ：トシル
薬物動態パラメータ
ＡＵＣ（曲線下面積）：濃度－時間曲線の積分
Ｃｍａｘ：投与後の薬物のピーク血漿中濃度
Ｃ０：所定体積の血漿中の薬物の量
ＣＬ（クリアランス）：単位時間当たりに薬物が排除された血漿の体積
ｔ１／２（排出半減期）：薬物の濃度がその元の値の半分に達するのに必要な時間
ｔｍａｘ：Ｃｍａｘに達するまでの時間
Ｖｓｓ（定常状態分布容積）：薬物が定常状態で分布している見かけの容積
実施例１：イオン化可能な脂質の合成
Figure 2024508047000074
ステップ１：（２Ｅ，２’Ｅ）－ジエチル４，４’－（ベンジルアザンジイル）ビス（ブタ－２－エノエート）（２）
Figure 2024508047000075
フェニルメタンアミン（６．９４ｇ、６４．７５ｍｍｏｌ、０．５当量）のＭｅＣＮ溶液（３００ｍＬ）に、Ｋ２ＣＯ３（１９．６９ｇ、１４２．４６ｍｍｏｌ、１．１当量）及びエチル（Ｅ）－４－ブロモブタ－２－エノエート（２５ｇ、１２９．５１ｍｍｏｌ、１当量）を加えた。この混合物を２０℃で１６時間撹拌した。反応混合物を濾過し、濾過ケークをＥｔＯＡｃ（２０ｍＬ×２）で洗浄した。濾液を真空中で濃縮して残渣を得た。この残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、ＥｔＯＡｃ／石油エーテル（ＰＥ）：０～１０％）によって精製して、化合物２（２０．３ｇ、５６．１７ｍｍｏｌ、４３．４％収率）を黄色の油状物として得た。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝ ７．３９ － ７．３１ （ｍ， ４Ｈ）， ７．３０ － ７．２３ （ｍ， １Ｈ）， ６．９９ － ６．９３ （ｍ， ２Ｈ）， ６．０７ － ６．０３ （ｍ， ２Ｈ）， ４．２２ （ｑ， Ｊ ＝ ７．２， ４Ｈ）， ３．６３ （ｓ， ２Ｈ）， ３．２４ － ３．２３ （ｍ， ４Ｈ）， １．３２ （ｔ， Ｊ ＝ ７．２， ６Ｈ）．
ステップ２：ジエチル４，４’－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アザンジイル）ジブタノエート（３）
Figure 2024508047000076
エチル（Ｅ）－４－［ベンジル－［（Ｅ）－４－エトキシ－４－オキソ－ブタ－２－エニル］アミノ］ブタ－２－エノエート（２０ｇ、６０．３５ｍｍｏｌ、１当量）のＥｔＯＨ溶液（４００ｍＬ）に、（Ｂｏｃ）２Ｏ（１９．７６ｇ、９０．５２ｍｍｏｌ、２０．８０ｍＬ、１．５当量）及びＰｄ／Ｃ（３ｇ、６０．３５ｍｍｏｌ、１０％純度）をＮ２下で加えた。この懸濁液を真空下で脱気し、Ｈ２で数回パージした。この混合物をＨ２（５０ｐｓｉ）下にて３５℃で８時間撹拌した。反応混合物を濾過し、濾過ケークをエタノール（８０ｍＬ×２）で洗浄した。濾液を真空中で濃縮して残渣を得た。この残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、ＥｔＯＡｃ／石油エーテル（ＰＥ）：０～１５％）によって精製して、化合物３（１３．２ｇ、３８．２１ｍｍｏｌ、６３．３％収率）を黄色の油状物として得た。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝ ４．１７ － ４．１２ （ｍ， ４Ｈ）， ３．２５ － ３．２１ （ｍ， ４Ｈ）， ２．３４ － ２．２９ （ｍ， ４Ｈ）， １．８９ － １．８２ （ｍ， ４Ｈ）， １．４７ （ｓ， ９Ｈ）， １．３０ － １．２５ （ｍ， ６Ｈ）．
ステップ３：４，４’－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アザンジイル）ジブタン酸（４）
Figure 2024508047000077
エチル４－［ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル－（４－エトキシ－４－オキソ－ブチル）アミノ］ブタノエート（１２．７ｇ、３６．７７ｍｍｏｌ、１当量）のＴＨＦ溶液（１５０ｍＬ）に、ＬｉＯＨ・Ｈ２Ｏ（５．４０ｇ、１２８．６８ｍｍｏｌ、３．５当量）を含むＨ２Ｏ（２０ｍＬ）を加えた。この混合物を３０℃で１６時間撹拌した。反応混合物をＨ２Ｏ（１２０ｍＬ）で希釈した。水相をＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ×２）で抽出した。次いで、水相をＨＣｌ水溶液（１Ｎ）でｐＨ＝４～５に中和し、ＥｔＯＡｃ（１５０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相をブライン（１２０ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮して、化合物４（８．５ｇ、２９．３８ｍｍｏｌ、７９．９％収率）を黄色の油状物として得た。この粗生成物をさらに精製することなく次のステップに使用した。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝ １１．８８ － ９．５８ （ｂｒｓ， ２Ｈ）， ３．３５ － ３．１５ （ｍ， ４Ｈ）， ２．３７ （ｔ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， ４Ｈ）， １．９０ － １．８３ （ｍ， ４Ｈ）， １．４６ （ｓ， ９Ｈ）．
ステップ４：ジ（ペンタデカン－８－イル）４，４’－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アザンジイル）ジブタノエート（５）
Figure 2024508047000078
４－［ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル（３－カルボキシプロピル）アミノ］ブタン酸（２ｇ、６．９１ｍｍｏｌ、１．２当量）をＤＣＭ（３０ｍＬ）に溶解した溶液、ＥＤＣＩ（３．３１ｇ、１７．２８ｍｍｏｌ、３当量）、ＴＥＡ（２．９１ｇ、２８．８０ｍｍｏｌ、４．０１ｍＬ、５当量）、及びＤＭＡＰ（７０３．８ｍｇ、５．７６ｍｍｏｌ、１当量）を、Ｎ２下０℃で加えた。添加後、混合物を２０℃で１時間撹拌し、次いで、ペンタデカン－８－オール（２．６３ｇ、１１．５２ｍｍｏｌ、２当量）を含むＤＣＭ（２０ｍＬ）を滴加した。得られた混合物を２０℃で１５時間撹拌した。反応混合物をＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）で希釈し、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（５０ｍＬ×２）、ブライン（５０ｍＬ）で連続的に洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮して残渣を得た。この残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（８０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、ＥｔＯＡｃ／ＰＥ：０～１０％）によって精製して、化合物５（１．５ｇ、２．１１ｍｍｏｌ、３６．７％収率）を無色の油状物として得た。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝ ４．９０ － ４．８７ （ｍ， ２Ｈ）， ３．２４ － ３．２１ （ｍ， ４Ｈ）， ２．３０ －２．２６ （ｍ， ４Ｈ）， １．８８ － １．８１ （ｍ， ４Ｈ）， １．５４ － １．１８ （ｍ， ８Ｈ）， １．４６ （ｓ， ９Ｈ）， １．３４ － １．２１ （ｍ， ４０Ｈ）， ０．９２ － ０．８５ （ｍ， １２Ｈ）．
ステップ５：ジ（ペンタデカン－８－イル）４，４’－アザンジイルジブタノエート（Ａ）
Figure 2024508047000079
１－ヘプチルオクチル４－［ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル－［４－（１－ヘプチルオクトキシ）－４－オキソ－ブチル］アミノ］ブタノエート（１．３ｇ、１．８３ｍｍｏｌ、１当量）のＤＣＭ溶液（２０ｍＬ）に、ＴＦＡ（３．０８ｇ、２７．０１ｍｍｏｌ、２ｍＬ）をＮ２下０℃で加えた。添加後、混合物を２０℃で４時間撹拌した。次いで、氷水（２０ｍＬ）を加え、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液で混合物をｐＨ＝８～９に中和した。水相をＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相をブライン（４０ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮して、化合物Ａ（１．０６ｇ、粗製）を黄色の油状物として得た。この粗生成物をさらに精製することなく次のステップに使用した。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝ ４．８９ － ４．８３ （ｍ， ２Ｈ）， ２．８６ － ２．８２ （ｍ， ４Ｈ）， ２．４２ － ２．３８ （ｍ， ４Ｈ）， １．９６ － １．９０ （ｍ， ４Ｈ）， １．５２ － １．５０ （ｍ， ８Ｈ）， １．３２ － １．２０ （ｍ， ４０Ｈ）， ０．９０ － ０．８６ （ｍ， １２Ｈ）．
中間体Ａの合成：経路２
Figure 2024508047000080
ステップ１：ジメチル４，４’－（（（４－ニトロフェニル）スルホニル）アザンジイル）ジブタノエート（７））
Figure 2024508047000081
メチル４－ブロモブタノエート（８９．５３ｇ、４９４．５９ｍｍｏｌ、４当量）及び４－ニトロベンゼンスルホンアミド（２５ｇ、１２３．６５ｍｍｏｌ、１当量）のＭｅＣＮ溶液（５００ｍＬ）に、Ｃｓ２ＣＯ３（８０．５７ｇ、２４７．３０ｍｍｏｌ、２当量）、ＫＩ（１０．２６ｇ、６１．８２ｍｍｏｌ、０．５当量）、及びＴＢＡＩ（４５６．７２ｍｇ、１．２４ｍｍｏｌ、０．０１当量）を加えた。この混合物を９０℃で１２時間撹拌した。反応混合物を飽和ＮＨ４Ｃ１水溶液（１０００ｍＬ）でクエンチし、次いでＥｔＯＡｃ（５００ｍＬ）で希釈した。水相をＥｔＯＡｃ（１０００ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相をブライン（６００ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮して残渣を得て、これをシリカゲルクロマトグラフィー（ＰＥ／ＥｔＯＡｃ＝１０／１から３／１）によって精製して、化合物メチル４－［（４－メトキシ－４－オキソ－ブチル）－（４－ニトロフェニル）スルホニル－アミノ］ブタノエート（４８ｇ、１１９．２８ｍｍｏｌ、９６．４７％収率）を黄色の固体として得た。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝ ８．３４ （ｄ， Ｊ ＝ ８．８ Ｈｚ， ２Ｈ）， ７．９８ （ｄ， Ｊ ＝ ８．８ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．６７ （ｓ， ６Ｈ）， ３．２１ （ｔ， Ｊ ＝ ７．６ Ｈｚ， ４Ｈ）， ２．３４ （ｔ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， ４Ｈ）， １．８９－１．８２ （ｍ， ４Ｈ）．
ステップ２：４，４’－（（（４－ニトロフェニル）スルホニル）アザンジイル）ジブタン酸（８）
Figure 2024508047000082
メチル４－［（４－メトキシ－４－オキソ－ブチル）－（４－ニトロフェニル）スルホニル－アミノ］ブタノエート（４８ｇ、１１９．２８ｍｍｏｌ、１当量）を含むＴＨＦ（３００ｍＬ）、ＭｅＯＨ（１００ｍＬ）及びＨ２Ｏ（１００ｍＬ）の溶液に、ＬｉＯＨ・Ｈ２Ｏ（２５．０３ｇ、５９６．３９ｍｍｏｌ、５当量）を加えた。この混合物を２５℃で１２時間撹拌した。反応混合物をＨＣｌ（２Ｎ水溶液）でｐＨ＝６に調整し、次いで固体を濾過し、真空中で濃縮して、化合物４－［３－カルボキシプロピル－（４－ニトロフェニル）スルホニル－アミノ］ブタン酸（４２ｇ、１１２．１９ｍｍｏｌ、９４．０６％収率）を黄色の固体として得た。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ６） δ ＝ ８．４１－８．３６ （ｍ， ２Ｈ）， ８．１０－８．０１ （ｍ， ２Ｈ）， ３．１８－３．１２ （ｍ， ４Ｈ）， ２．２４－２．１８ （ｍ， ４Ｈ）， １．７５－１．６８ （ｍ， ４Ｈ）．
ステップ３：ペンタデカン－８－オール（Ａ１）
Figure 2024508047000083
ペンタデカン－８－オン（２５ｇ、１１０．４３ｍｍｏｌ、１当量）を含むＴＨＦ（３００ｍＬ）及びＭｅＯＨ（５０ｍＬ）の溶液に、ＮａＢＨ４（１２．５３ｇ、３３１．２８ｍｍｏｌ、３当量）を０℃でゆっくりと加えた。この混合物を２０℃で２時間にわたってＮ２下で撹拌した。反応混合物を飽和ＮＨ４Ｃ１水溶液（４００ｍＬ）でクエンチし、次いでＥｔＯＡｃ（５００ｍＬ）で希釈した。水相をＥｔＯＡｃ（５００ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相をブライン（２００ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮して残渣を得て、これをシリカゲルクロマトグラフィー（ＰＥ／ＥｔＯＡｃ＝１０／１から３／１）によって精製して、化合物ペンタデカン－８－オール（２３ｇ、１００．６９ｍｍｏｌ、９１．１９％収率）を白色の固体として得た。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝ ３．６５－３．５６ （ｍ， １Ｈ）， １．５５－１．３６ （ｍ， ８Ｈ）， １．３３－１．２６ （ｍ， １６Ｈ）， ０．９５－０．８２ （ｍ， ６Ｈ）．
ステップ４：ジ（ペンタデカン－８－イル）４，４’－（（（４－ニトロフェニル）スルホニル）アザンジイル）ジブタノエート（９）
Figure 2024508047000084
４－［３－カルボキシプロピル－（４－ニトロフェニル）スルホニル－アミノ］ブタン酸（１２ｇ、３２．０５ｍｍｏｌ、１当量）及びペンタデカン－８－オール（１４．６４ｇ、６４．１１ｍｍｏｌ、２当量）のＣＨ２Ｃｌ２溶液（１００ｍＬ）に、ＥＤＣＩ（１８．４３ｇ、９６．１６ｍｍｏｌ、３当量）、ＤＭＡＰ（３．９２ｇ、３２．０５ｍｍｏｌ、１当量）、及びＴＥＡ（９．７３ｇ、９６．１６ｍｍｏｌ、１３．３８ｍＬ、３当量）を加えた。この混合物を２５℃で１２時間撹拌した。飽和ＮＨ４Ｃ１水溶液（３００ｍＬ）を加えて反応混合物をクエンチし、次いでＥｔＯＡｃ（５００ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機層をブライン（２００ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮し、これをシリカゲルクロマトグラフィー（ＰＥ／ＥｔＯＡｃ＝１０／１から３／１）によって精製して、化合物１－ヘプチルオクチル４－［［４－（１－ヘプチルオクトキシ）－４－オキソ－ブチル］－（４－ニトロフェニル）スルホニル－アミノ］ブタノエート（９ｇ、１１．３２ｍｍｏｌ、３５．３１％収率）を黄色の油状物として得た。
ステップ５：ジ（ペンタデカン－８－イル）４，４’－アザンジイルジブタノエート（Ａ）：（ＥＣ１０９０－４５）
Figure 2024508047000085
１－ヘプチルオクチル４－［［４－（１－ヘプチルオクトキシ）－４－オキソ－ブチル］－（４－ニトロフェニル）スルホニル－アミノ］ブタノエート（１０ｇ、１２．５８ｍｍｏｌ、１当量）、ベンゼンチオール（１．５２ｇ、１３．８３ｍｍｏｌ、１．４１ｍＬ、１．１当量）、Ｃｓ２ＣＯ３（８．２０ｇ、２５．１５ｍｍｏｌ、２当量）をＤＭＦ（１００ｍＬ）に含む混合物を脱気し、Ｎ２で３回パージしてから、混合物を２５℃で１２時間にわたってＮ２雰囲気下で撹拌した。水（５００ｍＬ）を加えて反応混合物をクエンチし、次いでＥｔＯＡｃ（５００ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機層をブライン（５００ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。この残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ＰＥ／ＥｔＯＡｃ＝１０／１から３／１）によって精製して、化合物１－ヘプチルオクチル４－［［４－（１－ヘプチルオクトキシ）－４－オキソ－ブチル］アミノ］ブタノエート（５．６ｇ、９．１８ｍｍｏｌ、７３．００％収率）を黄色の油状物として得た。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝ ４．８８ － ４．８５ （ｍ， ２Ｈ）， ２．７３ － ２．７０ （ｍ， ４Ｈ）， ２．３８ － ２．３５ （ｍ， ４Ｈ）， １．８７ － １．８４ （ｍ， ４Ｈ）， １．５２ － １．５０ （ｍ， ８Ｈ）， １．３２ － １．２０ （ｍ， ４０Ｈ）， ０．９０ － ０．８６ （ｍ， １２Ｈ）．
実施例１．１：ＣＡＴ１の合成
Figure 2024508047000086
ステップ１：３－（ピペリジン－１－イル）プロピルカルバミミドチオエート塩酸塩（１－２）：
Figure 2024508047000087
１－（３－クロロプロピル）ピペリジン（１０ｇ、５０．４７ｍｍｏｌ、１当量、ＨＣｌ）のＥｔＯＨ溶液（１２０ｍＬ）に、ＮａＩ（３７８．３ｍｇ、２．５２ｍｍｏｌ、０．０５当量）及びチオ尿素（３．８４ｇ、５０．４７ｍｍｏｌ、１当量）を加えた。この混合物を７５℃で１６時間撹拌した。反応混合物を１０℃に冷却すると、沈殿物が生じた。反応混合物を濾過し、濾過ケークをＥｔＯＡｃ（３０ｍＬ×２）で洗浄した。濾過ケークを真空中で濃縮して、化合物１－２（１０．４ｇ、粗製、ＨＣｌ）を白色の固体として得た。この粗生成物をさらに精製することなく次のステップに使用した。
ステップ２：３－（ピペリジン－１－イル）プロパン－１－チオール（１－３）：
Figure 2024508047000088
２－［３－（１－ピペリジル）プロピル］イソチオ尿素（４ｇ、１６．８２ｍｍｏｌ、１当量、ＨＣｌ）のＥｔＯＨ溶液（４０ｍＬ）に、ＮａＯＨ（１．０１ｇ、２５．２３ｍｍｏｌ、１．５当量）を含むＨ２Ｏ（５ｍＬ）を加えた。この混合物を８０℃で２時間撹拌した。反応混合物をＥｔＯＡｃ（１５０ｍＬ）で希釈した。固体Ｎａ２ＳＯ４（１０ｇ）を反応混合物に加えた。反応混合物を濾過し、濾過ケークをＥｔＯＡｃ（３０ｍＬ×２）で洗浄した。濾液をブライン（３０ｍＬ×２）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮して、化合物１－３（２．１ｇ、１３．１８ｍｍｏｌ、７８．４％収率）を黄色の油状物として得た。この粗生成物をさらに精製することなく次のステップに使用した。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝ ２．７１ （ｔ， Ｊ ＝ ７．６ Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．４１ － ２．３４ （ｍ， ６Ｈ）， １．９１ － １．８４ （ｍ， ２Ｈ）， １．６０ － １．５５ （ｍ， ４Ｈ）， １．４７ － １．４１ （ｍ， ２Ｈ）．
ステップ３：ジ（ペンタデカン－８－イル）４，４’－（（（（３－（ピペリジン－１－イル）プロピル）チオ）カルボニル）アザンジイル）ジブタノエート（ＣＡＴ１）：
Figure 2024508047000089
１－ヘプチルオクチル４－［［４－（１－ヘプチルオクトキシ）－４－オキソ－ブチル］アミノ］ブタノエート（７００ｍｇ、１．１５ｍｍｏｌ、１当量）を乾燥ＤＣＭ（１５ｍＬ）に溶解した溶液に、ＴＥＡ（３４８．４ｍｇ、３．４４ｍｍｏｌ、０．４８ｍＬ、３当量）及びトリホスゲン（２０４．３ｍｇ、０．６９ｍｍｏｌ、０．６当量）を窒素雰囲気下０℃で加えた。得られた溶液を窒素雰囲気下２０℃で１時間撹拌した。得られた反応混合物を減圧下で濃縮し、窒素雰囲気下に保った。ＮａＯＨ（３２１．２９ｍｇ、８．０３ｍｍｏｌ、７当量）を０℃の乾燥ＴＨＦ（１２ｍＬ）に溶解し、次いで３－（１－ピペリジル）プロパン－１－チオール（９１３．９ｍｇ、５．７４ｍｍｏｌ、５当量）を窒素雰囲気下で加えた。この得られた溶液に、ＴＨＦ（１０ｍＬ）中の塩化カルバモイルを、シリンジによって窒素雰囲気下０℃でゆっくりと加えた。得られた溶液を２０℃で１５時間撹拌した。反応混合物を０℃のＮＨ４Ｃｌ（５０ｍＬ）によってクエンチし、次いでＥｔＯＡｃ（３０ｍＬ）で希釈した。水相をＥｔＯＡｃ（４０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相をブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮して残渣を得た。この残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（４０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、ＤＣＭ：ＭｅＯＨ：０～１７．５％、２％ＮＨ３・Ｈ２Ｏ／ＭｅＯＨ）によって精製して、化合物ＣＡＴ１（１．０２ｇ、粗製）を黄色の油状物として得た。次いで、この粗生成物をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（２５ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、ＰＥ：ＥｔＯＡｃ：０～１２．５％、５％ＮＨ３・Ｈ２Ｏ／ＥｔＯＡｃ）によって再度精製して、純粋化合物ＣＡＴ１（５２２ｍｇ、０．６４ｍｍｏｌ、５０．２％収率、９８％純度）を黄色の油状物として得た。
ＬＣＭＳ：［Ｍ＋Ｈ］＋：７９６．５；
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝ ４．９０ － ４．８４ （ｍ， ２Ｈ）， ３．３８ － ３．３７ （ｍ， ４Ｈ）， ２．９１ （ｔ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．４５ － ２．２２ （ｍ， １０Ｈ）， １．９４ － １．８６ （ｍ， ４Ｈ）， １．８４ － １．７７ （ｍ， ２Ｈ）， １．６３ － １．４７ （ｍ， １２Ｈ）， １．４６ － １．３８ （ｍ， ２Ｈ）， １．３４ － １．２１ （ｍ， ４０Ｈ）， ０．８９ （ｔ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， １２Ｈ）．
実施例１．２：ＣＡＴ６の合成
Figure 2024508047000090
ステップ１：１－（アゼチジン－１－イル）－３－（トリチルチオ）プロパン－１－オン（２－３）
Figure 2024508047000091
３－トリチルスルファニルプロパン酸（２０ｇ、５７．４０ｍｍｏｌ、１．２３ｍＬ、１当量）、ＥＤＣＩ（１６．５０ｇ、８６．０９ｍｍｏｌ、１．５当量）、ＨＯＢｔ（１１．６３ｇ、８６．０９ｍｍｏｌ、１．５当量）をＤＭＦ（１００ｍＬ）に含む混合物を脱気し、Ｎ２で３回パージしてから、混合物を２０℃で１時間にわたってＮ２雰囲気下で撹拌し、次いで、アゼチジン（３．９３ｇ、６８．８８ｍｍｏｌ、４．６５ｍＬ、１．２当量）を含むＤＭＦ（５ｍＬ）を０℃で滴加した。得られた混合物を２０℃で１５時間撹拌した。完了後、反応混合物をＨ２Ｏ（１５０ｍＬ）で希釈し、ＥｔＯＡｃ（２００ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機層を飽和ブライン（１００ｍＬ×２）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して残渣を得た。この残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、ＥｔＯＡｃ／ＰＥ：０～５０％）によって精製して、化合物２－３（１５．１ｇ、３８．９６ｍｍｏｌ、６７．９％収率）を白色の固体として得た。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝ ７．４５ － ７．４３ （ｍ， ６Ｈ）， ７．３３ － ７．２６ （ｍ， ６Ｈ）， ７．２６ － ７．１９ （ｍ， ３Ｈ）， ４．０３ － ３．９３ （ｍ， ４Ｈ）， ２．５１ （ｔ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．２６ － ２．１８ （ｍ， ２Ｈ）， １．９８ － １．９５ （ｍ， ２Ｈ）．
ステップ２：１－（３－（トリチルチオ）プロピル）アゼチジン（２－４）
Figure 2024508047000092
１－（アゼチジン－１－イル）－３－トリチルスルファニル－プロパン－１－オン（７ｇ、１８．０６ｍｍｏｌ、１当量）のＴＨＦ溶液（１２０ｍＬ）に、ＬＡＨ（８２２．６７ｍｇ、２１．６８ｍｍｏｌ、１．２当量）を少量ずつＮ２下０℃で加えた。添加後、得られた混合物を２０℃で３時間撹拌した。完了後、反応混合物をＴＨＦ（６０ｍＬ）で希釈し、次いで、Ｈ２Ｏ（０．８２ｍＬ）、ＮａＯＨ水溶液（０．８２ｍＬ、４Ｍ）、Ｈ２Ｏ（２．５ｍＬ）、及びＮａ２ＳＯ４（２５ｇ）を連続的にＮ２下０℃で加えた。反応混合物を濾過し、濾液を真空中で濃縮して粗生成物を得た。この粗生成物を２０℃のＭＴＢＥ（５０ｍＬ）で３０分間粉砕して、化合物２－４（５．２ｇ、１３．９２ｍｍｏｌ、７７．１％収率）を淡黄色の固体として得た。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ６） δ ＝ ７．３３ － ７．２９ （ｍ， １２Ｈ）， ７．２６ － ７．２３ （ｍ， ３Ｈ）， ２．９１ （ｔ， Ｊ ＝ ６．８ Ｈｚ， ４Ｈ）， ２．１８ （ｔ， Ｊ ＝ ６．８ Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．１０ （ｔ， Ｊ ＝ ７．６ Ｈｚ， ２Ｈ）， １．８９ － １．８４ （ｍ， ２Ｈ）， １．２７ － １．２２ （ｍ， ２Ｈ）．
ステップ３：３－（アゼチジン－１－イル）プロパン－１－チオール（２－５）
Figure 2024508047000093
 １－（３－トリチルスルファニルプロピル）アゼチジン（４ｇ、１０．７１ｍｍｏｌ、１当量）のＤＣＭ溶液（３０ｍＬ）に、ＴＦＡ（２３．１０ｇ、２０２．５９ｍｍｏｌ、１５ｍＬ、１８．９２当量）及びＴＩＰＳ（４．２０ｇ、２１．４２ｍｍｏｌ、２当量）をＮ２下０℃で加えた。添加後、得られた混合物を２０℃で３時間撹拌した。完了後、反応混合物を減圧下で濃縮してＴＦＡを除去した。この残渣をＭｅＯＨ（１００ｍＬ）で希釈し、ＰＥ（５０ｍＬ×５）で抽出した。ＭｅＯＨ層を減圧下で濃縮して、化合物２－５（２．４ｇ、粗製、ＴＦＡ）を黄色の油状物として得た。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ６） δ ＝ ４．１２ － ４．０９ （ｍ， ２Ｈ）， ３．９９ － ３．９７ （ｍ， ２Ｈ）， ３．２２ － ３．１７ （ｍ， ２Ｈ）， ２．５１ － ２．５０ （ｍ， ２Ｈ）， ２．４０ － ２．３８ （ｍ， １Ｈ）， ２．３２ － ２．２２ （ｍ， １Ｈ）， １．７４ － １．７０ （ｍ， ２Ｈ）．
ステップ４：ジ（ペンタデカン－８－イル）４，４’－（（（（３－（アゼチジン－１－イル）プロピル）チオ）カルボニル）アザンジイル）ジブタノエート（ＣＡＴ６）
Figure 2024508047000094
１－ヘプチルオクチル４－［［４－（１－ヘプチルオクトキシ）－４－オキソ－ブチル］アミノ］ブタノエート（１．５０ｇ、２．４６ｍｍｏｌ、１当量）を乾燥ジクロロメタン（３０．０ｍＬ）に溶解した溶液に、トリエチルアミン（７４６．４８ｍｇ、７．３８ｍｍｏｌ、１．０３ｍＬ、３当量）及びトリホスゲン（４３７．８３ｍｇ、１．４８ｍｍｏｌ、０．６当量）を窒素雰囲気下０℃で加えた。得られた溶液を２０℃で１時間撹拌した。その後、得られた反応物を減圧下で濃縮した。同時に、３－（アゼチジン－１－イル）プロパン－１－チオール（２．１１ｇ、８．６１ｍｍｏｌ、３．５当量、ＴＦＡ）を乾燥テトラヒドロフラン（３０．０ｍＬ）に溶解した溶液に、ＮａＯＨ（６８８．５２ｍｇ、１７．２２ｍｍｏｌ、７当量）を窒素雰囲気下０℃で加えた。次いで、この得られた溶液に、テトラヒドロフラン（１５ｍＬ）に溶解した塩化カルバモイルを、シリンジにより、窒素雰囲気下０℃でゆっくりと加えた。その後、得られた溶液を２０℃で１５時間にわたって窒素雰囲気下で撹拌した。完了後、反応混合物を０℃のＮＨ４Ｃｌ（６０ｍＬ）によってクエンチし、次いでＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）で希釈した。水相をＥｔＯＡｃ（６０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相をブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮して残渣を得た。この残渣を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗｅｌｃｈ Ｕｌｔｉｍａｔｅ ＸＢ－ＳｉＯＨ ２５０＊５０＊１０ｕｍ；移動相：［ヘキサン－ＥｔＯＨ］；Ｂ％：０％－３０％、１０分）によって精製して、化合物ＣＡＴ６（３２２ｍｇ、４１９．６９ｕｍｏｌ、４９．５４％収率、１００％純度）を淡黄色の油状物として得た。
ＬＣＭＳ ［Ｍ＋１］ ＋ ： ７６７．５；
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝ ４．９０ － ４．８４ （ｍ， ２Ｈ）， ３．４２ －３．３１ （ｍ， ４Ｈ）， ３．１９ （ｔ， Ｊ ＝ ６．８ Ｈｚ， ４Ｈ）， ２．９０ （ｔ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．４７ （ｔ， Ｊ ＝ ８．０ Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．３６ － ２．２６ （ｍ， ４Ｈ）， ２．０８ － ２．０５ （ｍ， ２Ｈ）， １．９５ － １．８５ （ｍ， ４Ｈ）， １．６７ － １．６５ （ｍ， ２Ｈ）， １．５２ － １．５０ （ｍ， ８Ｈ）， １．３０ － １．２６ （ｍ， ４０Ｈ）， ０．９０ － ０．８６ （ｍ， １２Ｈ）．
実施例１．３：ＣＡＴ７の合成
Figure 2024508047000095
ステップ１：１－メチルピペリジン－４－イルカルバミミドチオエート（３－２）
Figure 2024508047000096
４－クロロ－１－メチルピペリジン（２０．０ｇ、１５０ｍｍｏｌ、１．００当量）及びチオ尿素（２８．５ｇ、７４．２ｍｍｏｌ、２．５０当量）のエタノール溶液（１００ｍＬ）に、ヨウ化ナトリウム（２．２４ｇ、１５．０ｍｍｏｌ、０．１０当量）を加えた。この混合物を脱気し、窒素で３回パージしてから、混合物を８０℃で２４時間にわたって窒素雰囲気下で撹拌して、化合物３－２（６０．０ｇ、粗製、塩酸塩）を黄色のゴム状物として得た。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝ ３．０６－３．０２ （ｍ， １Ｈ）， ２．７０ （ｓ， ３Ｈ）， ２．６７－２．５４ （ｍ， ４Ｈ）， １．９１－１．７３ （ｍ， ４Ｈ）
ステップ２：１－メチルピペリジン－４－チオール（３－３）
Figure 2024508047000097
１－メチルピペリジン－４－イルカルバミミドチオエート（１６．０ｇ、７６．３ｍｍｏｌ、１．００当量、塩酸塩）のエタノール溶液（８０．０ｍＬ）に、水（１０．０ｍＬ）に溶解した水酸化ナトリウム（１８．３ｇ、４５８ｍｍｏｌ、６．００当量）を加えた。この混合物を脱気し、窒素で３回パージしてから、混合物を８０℃で３時間にわたって窒素雰囲気下で撹拌した。完了後、混合物を濃縮し、次いで酢酸エチル（２００ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過した。濾液を減圧下で濃縮して、化合物３－３（４．２０ｇ、粗製）を黄色のゴム状物として得た。
ステップ３：ジ（ペンタデカン－８－イル）４，４’－（（（（１－メチルピペリジン－４－イル）チオ）カルボニル）アザンジイル）ジブタノエート（ＣＡＴ７）
Figure 2024508047000098
ジ（ペンタデカン－８－イル）４，４’－アザンジイルジブタノエート（２．００ｇ、３．２８ｍｍｏｌ、１．００当量）を乾燥ジクロロメタン（３０．０ｍＬ）に溶解した溶液に、トリエチルアミン（９９５ｍｇ、９．８４ｍｍｏｌ、１．３７ｍＬ、３．００当量）及びトリホスゲン（５８４ｍｇ、１．９７ｍｍｏｌ、０．６０当量）を窒素雰囲気下０℃で加えた。得られた溶液を２０℃で１時間撹拌した。その後、得られた反応物を減圧下で濃縮した。同時に、１－メチルピペリジン－４－チオール（２．１５ｇ、１６．４ｍｍｏｌ、５．００当量）を乾燥テトラヒドロフラン（２０．０ｍＬ）に溶解した溶液に、水酸化ナトリウム（９１８ｍｇ、２３．０ｍｍｏｌ、７．００当量）を窒素雰囲気下０℃で加えた。最後に、この得られた溶液に、テトラヒドロフラン（２０．０ｍＬ）に溶解した塩化カルバモイルを、シリンジにより、窒素雰囲気下０℃でゆっくりと加えた。得られた溶液を２０℃で１５時間にわたって窒素雰囲気下で撹拌した。完了後、０℃の飽和塩化アンモニウム水溶液（２００ｍＬ）によって混合物をクエンチし、次いで、酢酸エチル（２００ｍＬ×３）で抽出し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過した。濾液を減圧下で濃縮した。この残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、石油エーテル／酢酸エチル／ＮＨ３・Ｈ２Ｏ＝５０／１／０．０５から２／１／０．０５）及び分取ＨＰＬＣ（中性条件；カラム：Ｗｅｌｃｈ Ｕｌｔｉｍａｔｅ ＸＢ－ＣＮ ２５０＊５０＊１０μｍ；移動相：［ヘキサン－ＥｔＯＨ］；Ｂ％：０％－１０％、１２分）によって精製して、－ＣＡＴ７（３５０ｍｇ、４５２ｕｍｏｌ、５１．７％収率、９９．６％純度）を黄色の油状物として得た。
ＬＣＭＳ ［Ｍ＋１］ ＋ ：７６８．４；
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝ ４．９１－４．８４ （ｍ， ２Ｈ）， ３．４６－３．３３ （ｍ， ４Ｈ）， ２．９３－２．８１ （ｍ， ２Ｈ）， ２．３６ （ｓ， ３Ｈ）， ２．３４－２．２８ （ｍ， ５Ｈ）， ２．１４－２．０４ （ｍ， ２Ｈ）， １．９３－１．７９ （ｍ， ６Ｈ）， １．５５－１．４９ （ｍ， ８Ｈ）， １．３１－１．２４ （ｍ， ４２Ｈ）， ０．９１－０．８６ （ｍ， １２Ｈ）．
実施例１．４：ＣＡＴ８の合成
Figure 2024508047000099
ステップ１：４，４’－（（（４－ニトロフェニル）スルホニル）アザンジイル）ビス（Ｎ，Ｎ－ジオクチルブタンアミド）（４－２）
Figure 2024508047000100
４－［３－カルボキシプロピル－（４－ニトロフェニル）スルホニル－アミノ］ブタン酸（６．００ｇ、１６．０ｍｍｏｌ、１当量）のＤＣＭ溶液（５０ｍＬ）に、ＥＤＣＩ（９．２２ｇ、４８．１ｍｍｏｌ、３当量）、ＴＥＡ（４．８７ｇ、４８．１ｍｍｏｌ、６．６９ｍＬ、３当量）、及びＤＭＡＰ（９７９ｍｇ、８．０１ｍｍｏｌ、０．５当量）をＮ２下０℃で加えた。添加後、混合物を２０℃で１時間撹拌し、次いで、Ｎ－オクチルオクタン－１－アミン（８．１３ｇ、３３．７ｍｍｏｌ、２．１当量）のＤＣＭ溶液（１０ｍＬ）を滴加した。得られた混合物を２０℃で６時間撹拌した。水（１００ｍＬ）を加えて反応混合物をクエンチし、次いで酢酸エチル（２００ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機層をブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。この残渣を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗｅｌｃｈ Ｕｌｔｉｍａｔｅ ＸＢ－ＣＮ ２５０＊５０＊１０ｕｍ；移動相：［ヘキサン－ＥｔＯＨ］；Ｂ％：０％－１５％、１２分）によって精製して、化合物４－２（９．００ｇ、１１．０ｍｍｏｌ、６８％収率）を黄色の油状物として得た。
ＬＣＭＳ：［Ｍ＋Ｈ］＋：８２１．６．
ステップ２：４，４’－アザンジイルビス（Ｎ，Ｎ－ジオクチルブタンアミド）（４－３）
Figure 2024508047000101
４－［［４－（ジオクチルアミノ）－４－オキソ－ブチル］－（４－ニトロフェニル）スルホニル－アミノ］－Ｎ，Ｎ－ジオクチル－ブタンアミド（８．００ｇ、９．７４ｍｍｏｌ、１当量）及びベンゼンチオール（２．１５ｇ、１９．５ｍｍｏｌ、１．９９ｍＬ、２当量）のＤＭＦ溶液（１００ｍＬ）に、Ｃｓ２ＣＯ３（６．３５ｇ、１９．５ｍｍｏｌ、２．０当量）を加えた。この混合物を２０℃で１２時間にわたってＮ２下で撹拌した。水（１００ｍＬ）を加えて反応混合物をクエンチし、次いで酢酸エチル（３００ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機層をブライン（５００ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。この残渣を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗｅｌｃｈ Ｕｌｔｉｍａｔｅ ＸＢ－ＣＮ ２５０＊５０＊１０ｕｍ；移動相：［ヘキサン－ＥｔＯＨ］；Ｂ％：５％－５０％、３０分）によって精製して、化合物４－３（２．９０ｇ、４．５６ｍｍｏｌ、４７％収率）を黄色の油状物として得た。
ＬＣＭＳ： ［Ｍ＋Ｈ］＋： ６３７．４．
ステップ３：Ｓ－（３－（ジメチルアミノ）プロピル）ビス（４－（ジオクチルアミノ）－４－オキソブチル）カルバモチオエート（ＣＡＴ８）
Figure 2024508047000102
４－［［４－（ジオクチルアミノ）－４－オキソ－ブチル］アミノ］－Ｎ，Ｎ－ジオクチル－ブタンアミド（２．００ ３．１４ｍｍｏｌ、１当量）を乾燥ＤＣＭ（２０ｍＬ）に溶解した溶液に、ＴＥＡ（９５５ｍｇ、９．４３ｍｍｏｌ、１．３１ｍＬ、３当量）及び炭酸ビス（トリクロロメチル）（４６７ｍｇ、１．５７ｍｍｏｌ、０．５当量）をＮ２下０℃で加えた。得られた溶液を２０℃で１時間撹拌した。得られた反応物を減圧下で濃縮し、Ｎ２下に保った。３－（ジメチルアミノ）プロパン－１－チオール（１．８７ｇ、１５．７ｍｍｏｌ、５当量）の乾燥ＴＨＦ溶液（２０ｍＬ）に、ＮａＯＨ（８８０ｍｇ、２２．０ｍｍｏｌ、７当量）をＮ２下０℃で加えた。この得られた溶液に、塩化カルバモイルをシリンジによってＮ２下０℃でゆっくりと加えた。得られた溶液を２０℃で１５時間撹拌した。反応混合物を飽和ＮＨ４Ｃ１水溶液（１００ｍＬ）でクエンチし、次いで酢酸エチル（１００ｍＬ）で希釈した。水相を酢酸エチル（１００ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相をブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空下で濃縮して残渣を得た。この残渣をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ジクロロメタン／メタノール＝５０／１から１０／１）によって精製した。化合物Ｓ－［３－（ジメチルアミノ）プロピル］Ｎ，Ｎ－ビス［４－（ジオクチルアミノ）－４－オキソ－ブチル］カルバモチオエート（４．１０ｇ、粗製）が黄色の油状物として得られた。
ＬＣＭＳ： ［Ｍ＋Ｈ］＋： ７５６．１；
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ：４．８２ － ４．７７ （ｍ， ２Ｈ）， ３．３９ － ３．２９ （ｍ， ４Ｈ）， ２．８４ （ｔ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．３１ － ２．２２ （ｍ， ６Ｈ）， ２．１７ － ２．１５ （ｍ， ６Ｈ）， １．８５ － １．７０ （ｍ， ６Ｈ）， １．４６－１．４２ （ｍ， ８Ｈ）， １．２５ － １．１０ （ｍ， ４０Ｈ）， ０．８６ － ０．７２ （ｍ， １２Ｈ）．
実施例１．５：ＣＡＴ３の合成
Figure 2024508047000103
ステップ１：３－（ピロリジン－１－イル）プロピルカルバミミドチオエート塩酸塩（５－２）：
Figure 2024508047000104
１－（３－クロロプロピル）ピロリジン（２５ｇ、１６９．３２ｍｍｏｌ、１当量、ＨＣｌ）のＥｔＯＨ溶液（３００ｍＬ）に、ＮａＩ（１．２７ｇ、８．４７ｍｍｏｌ、０．０５当量）及びチオ尿素（１３．５３ｇ、１７７．７９ｍｍｏｌ、１．０５当量）を加えた。この混合物を７５℃で１６時間撹拌した。反応混合物を０℃に冷却すると、沈殿物が生じた。反応混合物を濾過し、濾過ケークをＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ×３）で洗浄した。濾過ケークを真空中で濃縮して、化合物５－２（２２．５ｇ、１００．５５ｍｍｏｌ、５９．４％収率、ＨＣｌ）を白色の固体として得た。この粗生成物をさらに精製することなく次のステップに使用した。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ６） δ ＝ １１．２４ （ｓ， １Ｈ）， ９．３７ （ｓ， ３Ｈ）， ３．５２ － ３．４４ （ｍ， ２Ｈ）， ３．３３ － ３．３１ （ｍ， ２Ｈ）， ３．２２ － ３．１４ （ｍ， ２Ｈ）， ３．０２ － ２．９２ （ｍ， ２Ｈ）， ２．０９ － ２．００ （ｍ， ２Ｈ）， ２．００ － １．９２ （ｍ， ２Ｈ）， １．９１ － １．８２ （ｍ， ２Ｈ）．
ステップ２：３－（ピロリジン－１－イル）プロパン－１－チオール（５－３）：
Figure 2024508047000105
２－（３－ピロリジン－１－イルプロピル）イソチオ尿素（５．２ｇ、２３．２４ｍｍｏｌ、１当量、ＨＣｌ）のＥｔＯＨ溶液（８０ｍＬ）に、ＮａＯＨ（２．７９ｇ、６９．７２ｍｍｏｌ、３当量）を含むＨ２Ｏ（１０ｍＬ）を加えた。この混合物を８０℃で１６時間撹拌した。反応混合物をＥｔＯＡｃ（１５０ｍＬ）で希釈した。次いで、混合物をブライン（３０ｍＬ×２）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮して、化合物５－３（２．８ｇ、１９．２８ｍｍｏｌ、８２．９％収率）を黄色の油状物として得た。この粗生成物をさらに精製することなく次のステップに使用した。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝ ２．７３ （ｔ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， １Ｈ）， ２．６２ － ２．５３ （ｍ， ２Ｈ）， ２．５０ － ２．４８ （ｍ， ６Ｈ）， １．８３ － １．７５ （ｍ， ６Ｈ）．
ステップ３：ジ（ペンタデカン－８－イル）４，４’－（（（（３－（ピロリジン－１－イル）プロピル）チオ）カルボニル）アザンジイル）ジブタノエート（ＣＡＴ３）：
Figure 2024508047000106
１－ヘプチルオクチル４－［［４－（１－ヘプチルオクトキシ）－４－オキソ－ブチル］アミノ］ブタノエート（１．２ｇ、１．９７ｍｍｏｌ、１当量）の乾燥ＤＣＭ溶液（１５ｍＬ）に、ＴＥＡ（５９７．２ｍｇ、５．９０ｍｍｏｌ、０．８２ｍＬ、３当量）及びトリホスゲン（３５０．３ｍｇ、１．１８ｍｍｏｌ、０．６当量）を窒素雰囲気下０℃で加えた。得られた溶液を窒素雰囲気下２０℃で１時間撹拌した。得られた反応混合物を減圧下で濃縮し、窒素雰囲気下に保った。窒素雰囲気下で０℃の、３－ピロリジン－１－イルプロパン－１－チオール（１．００ｇ、６．８９ｍｍｏｌ、３．５当量）の乾燥ＴＨＦ溶液（１２ｍＬ）に、ＮａＯＨ（５５０．８ｍｇ、１３．７７ｍｍｏｌ、７当量）を窒素雰囲気下で加えた。得られた溶液に、塩化カルバモイルのＴＨＦ溶液（１０ｍＬ）を、シリンジによって窒素雰囲気下０℃でゆっくりと加え、これを２０℃で１５時間撹拌した。反応混合物を０℃のＮＨ４Ｃｌ（６０ｍＬ）によってクエンチし、次いでＥｔＯＡｃ（４０ｍＬ）で希釈した。水相をＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相をブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮して残渣を得た。この残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（４０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、ＰＥ：ＥｔＯＡｃ：０～１５％、５％ＮＨ３・Ｈ２Ｏ／ＥｔＯＡｃ）によって精製して、化合物ＣＡＴ３（１．１ｇ、粗製）を黄色の油状物として得た。次いで、この粗生成物をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（２５ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、ＥｔＯＡｃ：ＰＥ：０～１２％、５％ＮＨ３・Ｈ２Ｏ／ＥｔＯＡｃ）によって再度精製して、純粋化合物ＣＡＴ３（３９５ｍｇ、０．５０ｍｍｏｌ、３０．０％収率、９８．７％純度）を黄色の油状物として得た。
ＬＣＭＳ： ［Ｍ＋Ｈ］＋： ７８１．６；
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝ ４．９０ － ４．８４ （ｍ， ２Ｈ）， ３．３９ － ３．３７ （ｍ， ４Ｈ）， ２．９４ （ｔ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．５６ － ２．４４ （ｍ， ６Ｈ）， ２．３３ －２．２８ （ｍ， ４Ｈ）， １．９７ － １．８１ （ｍ， ６Ｈ）， １．８０ － １．７４ （ｍ， ４Ｈ）， １．５６ － １．４６ （ｍ， ８Ｈ）， １．３５ －１．２４ （ｍ， ４０Ｈ）， ０．８８ （ｔ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， １２Ｈ）．
実施例１．６：ＣＡＴ４の合成
Figure 2024508047000107
ステップ１：２－（２－クロロエチル）－１－メチルピロリジン塩酸塩（６－２）
Figure 2024508047000108
２－（１－メチルピロリジン－２－イル）エタノール（２．００ｇ、１５．５ｍｍｏｌ、２．１０ｍＬ、１．００当量）のジクロロメタン溶液（２０．０ｍＬ）に、塩化チオニル（５．５２ｇ、４６．４ｍｍｏｌ、３．３７ｍＬ、３．００当量）を滴加した。次いで、この混合物を４０℃で２時間撹拌した。完了後、反応混合物を濾過し、減圧下で濃縮して、化合物６－２（２．２０ｇ、粗製）を黄色の固体として得た。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ６） δ ＝ １１．３２ （ｓ， １Ｈ）， ３．８６－３．７９ （ｍ， １Ｈ）， ３．７１－３．６３ （ｍ， １Ｈ）， ３．５３－３．４４ （ｍ， １Ｈ）， ３．４０－３．２９ （ｍ， １Ｈ）， ３．０６－２．９６ （ｍ， １Ｈ）， ２．７４ （ｄ， Ｊ ＝ ４．８ Ｈｚ， ３Ｈ）， ２．４０－２．３１ （ｍ， １Ｈ）， ２．２６－２．１０ （ｍ， ２Ｈ）， ２．０２－１．８３ （ｍ， ２Ｈ）， １．７４－１．６３ （ｍ， １Ｈ）．
ステップ２：２－（１－メチルピロリジン－２－イル）エチルカルバミミドチオエート塩酸塩（６－３）
Figure 2024508047000109
２－（２－クロロエチル）－１－メチルピロリジン塩酸塩（１４．０ｇ、７６．０ｍｍｏｌ、１．００当量）、チオ尿素（５．９０ｇ、７７．６ｍｍｏｌ、１．０２当量）、及びヨウ化ナトリウム（２．２８ｇ、１５．２ｍｍｏｌ、０．２０当量）をエタノール（１００ｍＬ）に含む混合物を脱気し、窒素で３回パージしてから、混合物を８０℃で１２時間にわたって窒素雰囲気下で撹拌した。完了後、反応混合物を周囲温度まで冷ました。次いで、恒久的な乳白光が検出されるまで酢酸エチル（１００ｍＬ）を加え、混合物を４℃で１２時間維持した。その後、混合物を濾過し、減圧下で濃縮して、化合物６－３（１６．０ｇ、７１．５ｍｍｏｌ、９４．０％収率）を黄色の固体として得た。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ６） δ ＝ １０．９９ （ｓ， １Ｈ）， ９．３２ （ｓ， ３Ｈ）， ３．５０－３．３９ （ｍ， ２Ｈ）， ３．３５－３．２９ （ｍ， ２Ｈ）， ３．０８－２．９８ （ｍ， １Ｈ）， ２．７７ （ｄ， Ｊ ＝ ４．８ Ｈｚ， ３Ｈ）， ２．２８－２．１６ （ｍ， ２Ｈ）， ２．０４－１．９３ （ｍ， ２Ｈ）， １．９２－１．６９ （ｍ， ２Ｈ）．
ステップ３：２－（１－メチルピロリジン－２－イル）エタンチオール（６－４）
Figure 2024508047000110
２－（１－メチルピロリジン－２－イル）エチルカルバミミドチオエート塩酸塩（１０．０ｇ、４４．７ｍｍｏｌ、１．００当量）のエタノール溶液（８０．０ｍＬ）に、水（２０．０ｍＬ）に溶解した水酸化ナトリウム（５．３６ｇ、１３４ｍｍｏｌ、３．００当量）を加えた。この混合物を８０℃で３時間にわたって窒素雰囲気下で撹拌した。完了後、混合物を濃縮し、次いで酢酸エチル（２００ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過した。濾液を減圧下で濃縮して、化合物６－４（２．４０ｇ、粗製）を黄色の油状物として得た。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝ ３．０８－３．０１ （ｍ， ２Ｈ）， ２．５０－２．４５ （ｍ， １Ｈ）， ２．３１ （ｓ， ３Ｈ）， ２．１８－２．０９ （ｍ， ４Ｈ）， １．７９－１．６５ （ｍ， ４Ｈ）．
ステップ４：ジ（ペンタデカン－８－イル）４，４’－（（（（２－（１－メチルピロリジン－２－イル）エチル）チオ）カルボニル）アザンジイル）ジブタノエート（ＣＡＴ４）
Figure 2024508047000111
ジ（ペンタデカン－８－イル）４，４’－アザンジイルジブタノエート（２．００ｇ、３．２８ｍｍｏｌ、１．００当量）を乾燥ジクロロメタン（３０．０ｍＬ）に溶解した溶液に、トリエチルアミン（９９５ｍｇ、９．８４ｍｍｏｌ、１．３７ｍＬ、３．００当量）及びトリホスゲン（５８４ｍｇ、１．９７ｍｍｏｌ、０．６０当量）を窒素雰囲気下０℃で加えた。得られた溶液を２０℃で１時間撹拌した。その後、得られた反応物を減圧下で濃縮した。同時に、２－（１－メチルピロリジン－２－イル）エタンチオール（２．３８ｇ、１６．４ｍｍｏｌ、５．００当量）を乾燥テトラヒドロフラン（２０．０ｍＬ）に溶解した溶液に、水酸化ナトリウム（９１８ｍｇ、２２．９ｍｍｏｌ、７．００当量）を窒素雰囲気下０℃で加えた。次いで、この得られた溶液に、テトラヒドロフラン（２０．０ｍＬ）に溶解した塩化カルバモイルを、シリンジにより、窒素雰囲気下０℃でゆっくりと加えた。その後、得られた溶液を２０℃で１５時間にわたって窒素雰囲気下で撹拌した。完了後、０℃の塩化アンモニウム（２００ｍＬ）によって混合物をクエンチし、次いで、酢酸エチル（２００ｍＬ×３）で抽出し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過した。濾液を減圧下で濃縮した。この残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、石油エーテル／酢酸エチル／ＮＨ３・Ｈ２Ｏ＝１／０／０．０５から１０／１／０．０５）によって精製して、ＣＡＴ４（４５１ｍｇ、５７６ｕｍｏｌ、１７．６％収率、９９．９％純度）を黄色の油状物として得た。
ＬＣＭＳ ［Ｍ＋１］＋： ７８１．５；
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝ ４．９１－４．８４ （ｍ， ２Ｈ）， ３．４３－３．３３ （ｍ， ４Ｈ）， ３．１４－３．０３ （ｍ， １Ｈ）， ３．００－２．９２ （ｍ， １Ｈ）， ２．８９－２．８０ （ｍ， １Ｈ）， ２．３３ （ｓ， ３Ｈ）， ２．３２－２．２９ （ｍ， ２Ｈ）， ２．２３－２．０９ （ｍ， ２Ｈ）， ２．０３－１．８６ （ｍ， ６Ｈ）， １．８０－１．６７ （ｍ， ２Ｈ）， １．５８－１．４７ （ｍ， １０Ｈ）， １．３３－１．２２ （ｍ， ４２Ｈ）， ０．９２－０．８５ （ｍ， １２Ｈ）．
実施例１．７：２３（ＣＡＴ４）の合成
Figure 2024508047000112
ステップ１：２－（２－クロロエチル）－１－メチルピロリジン塩酸塩（２０）：
Figure 2024508047000113
２－（１－メチルピロリジン－２－イル）エタノール（２ｇ、１５．４８ｍｍｏｌ、２．１０ｍＬ、１当量）のＣＨ２Ｃｌ２溶液（２０ｍＬ）に、ＳＯＣｌ２（５．５２ｇ、４６．４４ｍｍｏｌ、３．３７ｍＬ、３当量）をゆっくりと滴加した。この混合物を４５℃で２時間撹拌した。反応混合物を濾過し、減圧下で濃縮して、化合物２－（２－クロロエチル）－１－メチル－ピロリジン（２．２ｇ、１１．９５ｍｍｏｌ、７７．１９％収率、塩酸塩）を黄色の固体として得た。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ６） δ ＝ １１．３２ （ｓ， １Ｈ）， ３．８８－３．８０ （ｍ， １Ｈ）， ３．７５－３．６６ （ｍ， １Ｈ）， ３．５５－３．４５ （ｍ， １Ｈ）， ３．４３－３．３５ （ｍ， １Ｈ），．３．０８－２．９７ （ｍ， １Ｈ）， ２．７５ （ｓ， ３Ｈ）， ２．４８－２．３１ （ｍ， １Ｈ）， ２．２８－２．１０ （ｍ， ２Ｈ）， ２．０４ －１．８８ （ｍ， ２Ｈ）， １．８２－１．６６ ｐｐｍ （ｍ， １Ｈ）．
ステップ２：２－（１－メチルピロリジン－２－イル）エチルカルバミミドチオエート塩酸塩（２１）：
Figure 2024508047000114
２－（２－クロロエチル）－１－メチル－ピロリジン（１４ｇ、７６．０４ｍｍｏｌ、１当量、塩酸塩）、チオ尿素（５．９０ｇ、７７．５６ｍｍｏｌ、１．０２当量）、ＮａＩ（２．２８ｇ、１５．２１ｍｍｏｌ、０．２当量）をＥｔＯＨ（１００ｍＬ）に含む混合物を脱気し、Ｎ２で３回パージしてから、混合物を８０℃で１２時間にわたってＮ２雰囲気下で撹拌した。反応混合物を周囲温度に冷却した。恒久的な乳白光が得られるまでＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）。次いで、この反応混合物を４℃で１２時間静置した。次いでこの混合物を濾過し、減圧下で濃縮して、化合物２－［２－（１－メチルピロリジン－２－イル）エチル］イソチオ尿素（１６ｇ、７１．５０ｍｍｏｌ、９４．０３％収率、塩酸塩）を黄色の固体として得た。
ＬＣＭＳ： ［Ｍ＋Ｈ］＋： １８８．１．
ステップ３：２－（１－メチルピロリジン－２－イル）エタンチオール（２２）：
Figure 2024508047000115
２－［２－（１－メチルピロリジン－２－イル）エチル］イソチオ尿素（３ｇ、１３．４１ｍｍｏｌ、１当量、塩酸塩）を含むＨ２Ｏ（１ｍＬ）及びＥｔＯＨ（８ｍＬ）の溶液に、ＮａＯＨ（２．６８ｇ、６７．０３ｍｍｏｌ、５当量）を加えた。この混合物を９０℃で２時間撹拌した。この混合物を濾過し、減圧下で濃縮して、化合物２－（１－メチルピロリジン－２－イル）エタンチオール（１．８ｇ、１２．３９ｍｍｏｌ、９２．４２％収率）を黄色の油状物として得て、これを精製せずに次のステップで使用した。
ステップ４：ジ（ペンタデカン－８－イル）４，４’－（（（（２－（１－メチルピロリジン－２－イル）エチル）チオ）カルボニル）アザンジイル）ジブタノエート（２３）：
Figure 2024508047000116
１－ヘプチルオクチル４－［［４－（１－ヘプチルオクトキシ）－４－オキソ－ブチル］アミノ］ブタノエート（１．５ｇ、２．４６ｍｍｏｌ、１当量）を乾燥ＣＨ２Ｃｌ２（１５ｍＬ）に溶解した溶液に、ＴＥＡ（７４６．４７ｍｇ、７．３８ｍｍｏｌ、１．０３ｍＬ、３当量）及びトリホスゲン（３６４．８５ｍｇ、１．２３ｍｍｏｌ、０．５当量）を窒素雰囲気下０℃で加えた。得られた溶液を窒素雰囲気下２０℃で１時間撹拌した。反応物を減圧下で濃縮し、窒素雰囲気下に保った。ＮａＯＨ（６８８．４７ｍｇ、１７．２２ｍｍｏｌ、７当量）を窒素雰囲気下０℃の乾燥ＴＨＦ（２０ｍＬ）に溶解し、次いで２－（１－メチルピロリジン－２－イル）エタンチオール（１．７９ｇ、１２．３０ｍｍｏｌ、５当量）を窒素雰囲気下で加えた。この得られた溶液に、ＴＨＦ（１０ｍＬ）に溶解した塩化カルバモイルを、窒素雰囲気下０℃でゆっくりと加えた。この混合物を２０℃で１２時間撹拌した。反応混合物を水（５０ｍＬ）によってクエンチし、次いでＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）で希釈し、次いでＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相をブライン（２０ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮して残渣を得た。この残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ＰＥ／ＥｔＯＡｃ＝２０／１から０／１、６％ＮＨ３・Ｈ２Ｏ／ＥｔＯＡｃ）によって精製して、化合物ＣＡＴ４（５５１ｍｇ、６９５．３９ｕｍｏｌ、２８．２７％収率、９８．６％純度）を黄色の油状物として得た。
ＬＣＭＳ： ［Ｍ＋Ｈ］＋： ７８１．９；
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝ ４．９５－４．７８ （ｍ， ２Ｈ）， ３．５１－３．４０ （ｍ， ４Ｈ）， ３．１２－３．０３ （ｍ， １Ｈ）， ３．０１－２．９４ （ｍ， １Ｈ）， ２．９１－２．８３ （ｍ， １Ｈ）， ２．３２ （ｓ， ３Ｈ）， ２．３１－２．２６ （ｍ， ２Ｈ）， ２．２２－２．１０ （ｍ， ２Ｈ）， ２．０４－１．９４ （ｍ， ６Ｈ）， １．８５－１．６２ （ｍ， ４Ｈ）， １．５９－１．５２ （ｍ， ８Ｈ）， １．３７－１．１８ （ｍ， ４２Ｈ）， ０．８８ （ｔ， Ｊ ＝ ６．８ Ｈｚ， １２Ｈ）．
実施例１．８：ＣＡＴ５の合成
Figure 2024508047000117
ステップ１：３－クロロ－Ｎ－（シクロプロピルメチル）－Ｎ－メチル－プロパン－１－アミン（８－６）
Figure 2024508047000118
シクロプロパンカルバルデヒド（１９．４６ｇ、２７７．７０ｍｍｏｌ、２０．７５ｍＬ、２当量）及び３－クロロ－Ｎ－メチル－プロパン－１－アミン（２０ｇ、１３８．８５ｍｍｏｌ、１当量、塩酸塩）のジクロロメタン溶液（２００ｍＬ）に、ＮａＢＨ３ＣＮ（１３．０９ｇ、２０８．２７ｍｍｏｌ、１．５当量）及びＫＯＡｃ（４０．８８ｇ、４１６．５４ｍｍｏｌ、３当量）を加えた。この混合物を２５℃で１２時間撹拌した。反応混合物を飽和ＮＨ４Ｃ１水溶液（５００ｍＬ）でクエンチし、次いで酢酸エチル（３００ｍＬ）で希釈した。水相を酢酸エチル（５００ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相をブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮して残渣を得た。この残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（石油エーテル／酢酸エチル＝１０／１から３／１及び酢酸エチル／メタノール＝３０／１から１０／１）によって精製して、化合物８－６（１５ｇ、９２．７８ｍｍｏｌ、６６．８２％収率）を黄色の油状物として得た。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝ ３．６２－３．５５ （ｍ， ２Ｈ）， ２．５４－２．５１ （ｍ， ２Ｈ）， ２．２８－２．２３ （ｍ， ５Ｈ）， ２．０２－１．９７ （ｍ， ２Ｈ）， ０．９０－０．８５ （ｍ， １Ｈ）， ０．５５－０．４８ （ｍ， ２Ｈ）， ０．１８－０．０８ （ｍ， ２Ｈ）．
ステップ２：２－［３－［シクロプロピルメチル（メチル）アミノ］プロピル］イソチオ尿素塩酸塩（８－７）
Figure 2024508047000119
３－クロロ－Ｎ－（シクロプロピルメチル）－Ｎ－メチル－プロパン－１－アミン（７ｇ、４３．３０ｍｍｏｌ、１当量）及びチオ尿素（３．９６ｇ、５１．９６ｍｍｏｌ、１．２当量）のエタノール溶液（１５ｍＬ）に、ＮａＩ（６４９．０１ｍｇ、４．３３ｍｍｏｌ、０．１当量）を加えた。この混合物を９０℃で１２時間撹拌した。反応混合物を濾過し、減圧下で濃縮して、化合物８－７（８ｇ、３３．６４ｍｍｏｌ、７７．７０％収率、塩酸塩）を褐色の油状物として得た。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ６） δ ＝ ７．０３－６．９５ （ｍ， ４Ｈ）， ３．２８－３．２４ （ｍ， １Ｈ）， ２．９１－２．８５ （ｍ， ２Ｈ）， ２．７０－２．６６ （ｍ， ２Ｈ）， ２．５３－２．４８ （ｍ， ３Ｈ）， ２．３８－２．３２ （ｍ， ２Ｈ）， １．７２－１．５８ （ｍ， ２Ｈ）， ０．９８－０．９０ （ｍ， １Ｈ）， ０．４８－０．４１ （ｍ， ２Ｈ）， ０．２６－０．１２ （ｍ， ２Ｈ）．
ステップ３：３－［シクロプロピルメチル（メチル）アミノ］プロパン－１－チオール（８－８）
Figure 2024508047000120
２－［３－［シクロプロピルメチル（メチル）アミノ］プロピル］イソチオ尿素（８ｇ、３９．７４ｍｍｏｌ、１当量塩酸塩）を含むエタノール（１６ｍＬ）及び水（４ｍＬ）の溶液に、ＮａＯＨ（９．５４ｇ、２３８．４１ｍｍｏｌ、６当量）を加えた。この混合物を９０℃で１２時間撹拌した。反応混合物を濾過し、減圧下で濃縮して、化合物８－８（２．４ｇ、１５．０７ｍｍｏｌ、３７．９２％収率）を黄色の油状物として得た。
ステップ４：１－ヘプチルオクチル４－［３－［シクロプロピルメチル（メチル）アミノ］プロピルスルファニルカルボニル－［４－（１－ヘプチルオクトキシ）－４－オキソ－ブチル］アミノ］ブタノエート（ＣＡＴ５）
Figure 2024508047000121
１－ヘプチルオクチル４－［［４－（１－ヘプチルオクトキシ）－４－オキソ－ブチル］アミノ］ブタノエート（２ｇ、３．２８ｍｍｏｌ、１当量）を乾燥ジクロロメタン（２０ｍＬ）に溶解した溶液に、ＴＥＡ（９９５．３０ｍｇ、９．８４ｍｍｏｌ、１．３７ｍＬ、３当量）及びトリホスゲン（４８６．４７ｍｇ、１．６４ｍｍｏｌ、０．５当量）を窒素雰囲気下０℃で加えた。得られた溶液を窒素雰囲気下２０℃で１時間撹拌した。反応物を減圧下で濃縮し、窒素雰囲気下に保った。ＮａＯＨ（９１７．９６ｍｇ、２２．９５ｍｍｏｌ、７当量）を窒素雰囲気下０℃の乾燥ＴＨＦ（２０ｍＬ）に溶解し、次いで３－［シクロプロピルメチル（メチル）アミノ］プロパン－１－チオール（２．６１ｇ、１６．３９ｍｍｏｌ、５当量）を窒素雰囲気下で加えた。この得られた溶液に、ＴＨＦ（１０ｍＬ）に溶解した塩化カルバモイルを、窒素雰囲気下０℃でゆっくりと加えた。この混合物を２０℃で１２時間撹拌した。反応混合物を飽和ＮＨ４Ｃ１水溶液（１００ｍＬ）でクエンチし、次いで酢酸エチル（１００ｍＬ）で希釈した。水相を酢酸エチル（１００ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相をブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮して残渣を得た。この残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（石油エーテル／酢酸エチル＝１０／１から１／１及びジクロロメタン／メタノール＝３０／１から１０／１）によって精製して、化合物ＣＡＴ５（１．０ｇ、１．２６ｍｍｏｌ、３８．３１％収率、９９．９％純度）を黄色の油状物として得た。
ＬＣＭＳ： ［Ｍ＋Ｈ］＋： ７９６．２；
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝ ４．８７ － ４．８５ （ｍ， ２Ｈ）， ３．４９－３．３５ （ｍ， ４Ｈ）， ２．９２ （ｔ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．４７ （ｔ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．４２－２．３０ （ｍ， ７Ｈ）， ２．２４ （ｄ， Ｊ ＝ ６．４ Ｈｚ， ２Ｈ）， １．９８－１．９４ （ｍ， ４Ｈ）， １．８０－１．７４ （ｍ， ２Ｈ）， １．５３－１．４８ （ｍ， ８Ｈ）， １．２８－１．２０ （ｍ， ４０Ｈ）， ０．９８－０．９０ （ｍ， １３Ｈ）， ０．５１ （ｄ， Ｊ ＝ ８．０ Ｈｚ， ２Ｈ）， ０．１１ － ．０１０ （ｍ， ２Ｈ）．
実施例１．９：ＣＡＴ９の合成
Figure 2024508047000122
ステップ１：（１－メチルピロリジン－３－イル）メタノール（９－２）
Figure 2024508047000123
１－ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニルピロリジン－３－カルボン酸（３０ｇ、１３９．３８ｍｍｏｌ、１当量）のＴＨＦ溶液（６００ｍＬ）に、ＬＡＨ（１５．８７ｇ、４１８．１３ｍｍｏｌ、３当量）を少量ずつＮ２下０℃で加えた。添加後、混合物を２０℃で３時間撹拌した。完了後、反応混合物をＴＨＦ（３５０ｍＬ）で希釈し、次いで、Ｈ２Ｏ（１６ｍＬ）、ＮａＯＨ水溶液（１６ｍＬ、４Ｍ）、Ｈ２Ｏ（２０ｍＬ）、及びＮａ２ＳＯ４（１００ｇ）を連続的にＮ２下０℃で加えた。反応混合物を濾過し、濾液を真空中で濃縮して、化合物９－２（１１．２ｇ、９７．２５ｍｍｏｌ、６９．８％収率）を黄色の油状物として得た。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝ ３．６７ － ３．６３ （ｍ， １Ｈ）， ３．５４ － ３．５０ （ｍ， １Ｈ）， ２．９５ － ２．６８ （ｍ， ２Ｈ）， ２．５８ － ２．５２ （ｍ， １Ｈ）， ２．５１ － ２．４４ （ｍ， １Ｈ）， ２．４０ － ２．３３ （ｍ， １Ｈ）， ２．３２ （ｓ， ３Ｈ）， ２．０２ － １．９７ （ｍ， １Ｈ）， １．６６ － １．６３ （ｍ， １Ｈ）．
ステップ２：（１－メチルピロリジン－３－イル）メチル４－メチルベンゼンスルホネート（９－３）
Figure 2024508047000124
（１－メチルピロリジン－３－イル）メタノール（１０ｇ、８６．８３ｍｍｏｌ、１当量）のＤＣＭ溶液（２００ｍＬ）に、ＴＥＡ（１７．５７ｇ、１７３．６５ｍｍｏｌ、２４．１７ｍＬ、２当量）、ＤＭＡＰ（１．０６ｇ、８．６８ｍｍｏｌ、０．１当量）、及びＴｏｓＣｌ（１９．８６ｇ、１０４．１９ｍｍｏｌ、１．２当量）をＮ２下０℃で加えた。この混合物を２０℃で１６時間撹拌した。完了後、反応混合物をＤＣＭ（１５０ｍＬ）で希釈し、ブライン（１００ｍＬ×２）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮して残渣を得た。この残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、メタノール：ジクロロメタン：０～１５％）によって精製して、化合物９－３（１０．８ｇ、４０．１０ｍｍｏｌ、４６．２％収率）を黄色の油状物として得た。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝ ７．７９ （ｄ， Ｊ ＝ ８．４ Ｈｚ， ２Ｈ）， ７．３５ （ｄ， Ｊ ＝ ８．０ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．９３ （ｄ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．６０ － ２．４６ （ｍ， ４Ｈ）， ２．４５ （ｓ， ３Ｈ）， ２．３１ （ｓ， ３Ｈ）， ２．３０ － ２．２８ （ｍ， １Ｈ）， １．９７ － １．９５ （ｍ， １Ｈ）， １．４５ － １．３１ （ｍ， １Ｈ）．
ステップ３：Ｓ－（（１－メチルピロリジン－３－イル）メチル）エタンチオエート（９－４）
Figure 2024508047000125
（１－メチルピロリジン－３－イル）メチル４－メチルベンゼンスルホネート（１０．７ｇ、３９．７２ｍｍｏｌ、１当量）のＤＭＦ溶液（１００ｍＬ）に、アセチルスルファニルカリウム（５．４４ｇ、４７．６７ｍｍｏｌ、１．２当量）をＮ２下で加えた。この混合物を２５℃で１６時間撹拌した。完了後、反応混合物を０℃に冷却し、Ｈ２Ｏ（１５０ｍＬ）を加えてクエンチした。次いで、反応物をＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）で希釈し、ＥｔＯＡｃ（１５０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相をブライン（１５０ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮した。この残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（４０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、ジクロロメタン：メタノール：０～１０％）によって精製して、化合物９－４（４．８ｇ、２７．７０ｍｍｏｌ、６９．７％収率）を黄色の油状物として得た。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝ ２．９７ － ２．９４ （ｍ， ２Ｈ）， ２．７２ － ２．７１ （ｍ， １Ｈ）， ２．５９ － ２．５１ （ｍ， ２Ｈ）， ２．４５ － ２．４１ （ｍ， １Ｈ）， ２．３４ － ２．３３ （ｍ， ６Ｈ）， ２．２４ － ２．２２ （ｍ， １Ｈ）， ２．２１ － ２．０３ （ｍ， １Ｈ）， １．５２ － １．４８ （ｍ， １Ｈ）．
ステップ４：（１－メチルピロリジン－３－イル）メタンチオール（９－５）
Figure 2024508047000126
Ｓ－［（１－メチルピロリジン－３－イル）メチル］エタンチオエート（１．７ｇ、９．８１ｍｍｏｌ、１当量）のＭｅＯＨ溶液（１０ｍＬ）に、ＮＨ３（ＭｅＯＨ中７Ｍ、４．２０ｍＬ、３当量）を加えた。この混合物を２０℃で３時間にわたってＮ２下で撹拌した。完了後、反応混合物を減圧下（空気浴、水ポンプ）で濃縮して溶媒を除去し、化合物９－５（１．２ｇ、粗製）を黄色の油状物として得た。この粗生成物をさらに精製することなく次のステップで使用した。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤ３ＯＤ） δ ＝ ２．８６ － ２．８１ （ｍ， １Ｈ）， ２．６９ － ２．６４ （ｍ， １Ｈ）， ２．５９ － ２．５６ （ｍ， ３Ｈ）， ２．４８ － ２．４１ （ｍ， １Ｈ）， ２．３８ （ｓ， ３Ｈ）， ２．３４ － ２．３２ （ｍ， １Ｈ）， ２．１１ － ２．０７ （ｍ， １Ｈ）， １．６０ － １．５７ （ｍ， １Ｈ）．
ステップ５：ジ（ペンタデカン－８－イル）４，４’－（（（（（１－メチルピロリジン－３－イル）メチル）チオ）カルボニル）アザンジイル）ジブタノエート（ＣＡＴ９）
Figure 2024508047000127
１－ヘプチルオクチル４－［［４－（１－ヘプチルオクトキシ）－４－オキソ－ブチル］アミノ］ブタノエート（１．５ｇ、２．４６ｍｍｏｌ、１当量）を乾燥ＤＣＭ（２５ｍＬ）に溶解した溶液に、ＴＥＡ（７４６．４８ｍｇ、７．３８ｍｍｏｌ、１．０３ｍＬ、３当量）及びトリホスゲン（４３７．８３ｍｇ、１．４８ｍｍｏｌ、０．６当量）をＮ２下０℃で加えた。得られた溶液を２０℃で１時間撹拌した。得られた反応物を減圧下で濃縮し、Ｎ２下に保った。（１－メチルピロリジン－３－イル）メタンチオール（１．１３ｇ、８．６１ｍｍｏｌ、３．５当量）を乾燥ＴＨＦ（３０ｍＬ）に溶解した溶液に、ＮａＯＨ（６８８．５２ｍｇ、１７．２１ｍｍｏｌ、７当量）をＮ２下０℃で加えた。この得られた溶液に、ＴＨＦ（２５ｍＬ）に溶解した塩化カルバモイルを、シリンジによってＮ２下０℃でゆっくりと加えた。得られた溶液を２０℃で２時間撹拌した。完了後、反応混合物を０℃のＮＨ４Ｃｌ（６０ｍＬ）によってクエンチし、次いでＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）で希釈した。水相をＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相をブライン（６０ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮して残渣を得た。この残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、酢酸エチル：石油エーテル：０～１３％、５％ＮＨ３・Ｈ２Ｏ／酢酸エチル）によって精製して６２０ｍｇの化合物を得て、次いでこの化合物を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗｅｌｃｈ Ｕｌｔｉｍａｔｅ ＸＢ－ＳｉＯＨ ２５０＊５０＊１０ｕｍ；移動相：［ヘキサン－ＥｔＯＨ］；Ｂ％：０％－３０％、１３分）によって精製して、化合物ＣＡＴ９（３２５ｍｇ、０．４２ｍｍｏｌ、１７．９％収率、９９．１％純度）を淡黄色の油状物として得た。
ＬＣＭＳ ［Ｍ＋１］ ＋： ７６７．９；
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝ ４．９１ － ４．８４ （ｍ， ２Ｈ）， ３．４１ － ３．３６ （ｍ， ４Ｈ）， ３．０５ － ２．９８ （ｍ， ２Ｈ）， ２．８１ －２．７７ （ｍ， １Ｈ）， ２．６３ － ２．５９ （ｍ， ２Ｈ）， ２．５１ － ２．４６ （ｍ， １Ｈ）， ２．３７ （ｓ， ３Ｈ）， ２．３４ － ２．２６ （ｍ， ４Ｈ）， ２．１３ － ２．０４ （ｍ， １Ｈ）， １．９５ － １．８６ （ｍ， ４Ｈ）， １．６１ － １．５８ （ｍ， ２Ｈ）， １．５５ － １．４６ （ｍ， ８Ｈ）， １．３２ － １．２６ （ｍ， ４０Ｈ）， ０．９０ － ０．８６ （ｍ， １２Ｈ）．
実施例１．１０：ＣＡＴ１０の合成
Figure 2024508047000128
ステップ１：３－クロロ－Ｎ－（シクロブチルメチル）－Ｎ－メチル－プロパン－１－アミン（１０－２）
Figure 2024508047000129
シクロブタンカルバルデヒド（２９．２０ｇ、３４７．１２ｍｍｏｌ、２当量）及び３－クロロ－Ｎ－メチル－プロパン－１－アミン；塩酸塩（２５ｇ、１７３．５６ｍｍｏｌ、１当量）を含むジクロロメタン（１００ｍＬ）及びＭｅＯＨ（１００ｍＬ）の溶液に、ＮａＢＨ３ＣＮ（１６．３６ｇ、２６０．３４ｍｍｏｌ、１．５当量）及びＫＯＡｃ（５１．１０ｇ、５２０．６８ｍｍｏｌ、３当量）を加えた。この混合物を３５℃で１２時間撹拌した。水（１００ｍＬ）を加えて反応混合物をクエンチし、次いで酢酸エチル（２００ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機層をブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。この残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（石油エーテル／酢酸エチル＝３０／１から１／１及びジクロロメタン／メタノール＝３０／１から５／１）によって精製して、化合物１０－２（２７ｇ、１５３．６７ｍｍｏｌ、８８．５４％収率）を黄色の油状物として得た。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝ ３．６７ （ｔ， Ｊ ＝ ６．０ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．２６－３．２０ （ｍ， ２Ｈ）， ３．１２ （ｄ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．７８－２．７０ （ｍ， ３Ｈ）， ２．２８－２．１８ （ｍ， ４Ｈ）， ２．１０－．２．０５ （ｍ， １Ｈ）， １．９０－１．８０ （ｍ， ４Ｈ）．
ステップ２：２－［３－［シクロブチルメチル（メチル）アミノ］プロピル］イソチオ尿素（１０－３）
Figure 2024508047000130
３－クロロ－Ｎ－（シクロブチルメチル）－Ｎ－メチル－プロパン－１－アミン（１０ｇ、５６．９２ｍｍｏｌ、１当量）及びチオ尿素（４．７７ｇ、６２．６１ｍｍｏｌ、１．１当量）のＥｔＯＨ溶液（１００ｍＬ）に、ＮａＩ（４．２７ｇ、２８．４６ｍｍｏｌ、０．５当量）を加えた。この混合物を９０℃で１２時間にわたってＮ２下で撹拌した。反応混合物を濾過し、減圧下で濃縮して、化合物１０－３（１２ｇ、４７．６５ｍｍｏｌ、８３．７３％収率、塩酸塩）を褐色の油状物として得た。
ステップ３：３－［シクロブチルメチル（メチル）アミノ］プロパン－１－チオール（１０－４）
Figure 2024508047000131
２－［３－［シクロブチルメチル（メチル）アミノ］プロピル］イソチオ尿素（６ｇ、２７．８６ｍｍｏｌ、１当量）を含むＥｔＯＨ（３０ｍＬ）及び水（５ｍＬ）の溶液に、ＮａＯＨ（６．６９ｇ、１６７．１６ｍｍｏｌ、６当量）を加えた。この混合物を９０℃で６時間撹拌した。反応混合物を濾過し、減圧下で濃縮して、化合物１０－４（２．８ｇ、１６．１６ｍｍｏｌ、５７．９９％収率）を黄色の油状物として得た。
ステップ４：１－ヘプチルオクチル４－［３－［シクロブチルメチル（メチル）アミノ］プロピルスルファニルカルボニル－［４－（１－ヘプチルオクトキシ）－４－オキソ－ブチル］アミノ］ブタノエート（ＣＡＴ１０）
Figure 2024508047000132
１－ヘプチルオクチル４－［［４－（１－ヘプチルオクトキシ）－４－オキソ－ブチル］アミノ］ブタノエート（１．８ｇ、２．９５ｍｍｏｌ、１当量）を乾燥ジクロロメタン（２０ｍＬ）に溶解した溶液に、ＴＥＡ（８９５．７７ｍｇ、８．８５ｍｍｏｌ、１．２３ｍＬ、３当量）及びトリホスゲン（４３７．８２ｍｇ、１．４８ｍｍｏｌ、０．５当量）を窒素雰囲気下０℃で加えた。得られた溶液を窒素雰囲気下２５℃で１時間撹拌した。反応物を減圧下で濃縮し、窒素雰囲気下に保った。ＮａＯＨ（８２６．１７ｍｇ、２０．６６ｍｍｏｌ、７当量）を窒素雰囲気下０℃の乾燥ＴＨＦ（６０ｍＬ）に溶解し、次いで３－［シクロブチルメチル（メチル）アミノ］プロパン－１－チオール（２．５６ｇ、１４．７５ｍｍｏｌ、５当量）を窒素雰囲気下で加えた。この得られた溶液に、ＴＨＦ（１０ｍＬ）に溶解した塩化カルバモイルを、窒素雰囲気下０℃でゆっくりと加えた。反応が完了するまで、混合物を２５℃で１２時間撹拌した。水（１００ｍＬ）を加えて反応混合物をクエンチし、次いで酢酸エチル（２００ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機層をブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮し、シリカゲルクロマトグラフィー（石油エーテル／酢酸エチル＝１０／１から１／１及びジクロロメタン／メタノール＝３０／１から５／１）及びＭＰＬＣ（Ｗｅｌｃｈ Ｕｌｔｉｍａｔｅ ＸＢ－ＳｉＯＨ ２５０＊５０＊１０ｕｍ；移動相：［ヘキサン－ＥｔＯＨ］；Ｂ％：０％－３０％、１３分）によって精製して、化合物ＣＡＴ１０（２３８ｍｇ、２９２．０２ｕｍｏｌ、１１．８２％収率、９９．３％純度）を黄色の油状物として得た。
ＬＣＭＳ： ［Ｍ＋Ｈ］＋： ８１０．０；
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝ ４．８５－４．７６ （ｍ， ２Ｈ）， ３．３０－３．２５ （ｍ， ４Ｈ）， ２．８４ （ｔ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．５２－２．３２ （ｍ， ４Ｈ）， ２．２８－２．１２ （ｍ， ７Ｈ）， ２．０５－１．９８ （ｍ， ２Ｈ）， １．８８－１．６０ （ｍ， ８Ｈ）， １．６０－１．５２ （ｍ， ３Ｈ）， １．４８－１．３２ （ｍ， ８Ｈ）， １．２５－１．１０ （ｍ， ４０Ｈ）， ０．８５－０．７８ （ｍ， １２Ｈ）．
実施例１．１１：ＣＡＴ１１の合成
Figure 2024508047000133
ステップ１：（１－メチル－３－ピペリジル）メチル４－メチルベンゼンスルホネート（１１－２）
Figure 2024508047000134
（１－メチル－３－ピペリジル）メタノール（１０ｇ、７７．４０ｍｍｏｌ、１当量）のジクロロメタン溶液（１００ｍＬ）に、ＴｏｓＣｌ（１４．７６ｇ、７７．４０ｍｍｏｌ、１当量）、ＤＭＡＰ（９４５．５８ｍｇ、７．７４ｍｍｏｌ、０．１当量）及びＴＥＡ（１５．６６ｇ、１５４．８０ｍｍｏｌ、２１．５５ｍＬ、２当量）を加えた。この混合物を２５℃で１２時間撹拌した。水（１００ｍＬ）を加えて反応混合物をクエンチし、次いで酢酸エチル（２００ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機層をブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮し、シリカゲルクロマトグラフィー（石油エーテル／酢酸エチル＝１０／１から１／１及びジクロロメタン／メタノール＝３０／１から１０／１）によって精製して、化合物１１－２を黄色の油状物として得た。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝ ７．７７ （ｄ， Ｊ ＝ ８．０ Ｈｚ， ２Ｈ）， ７．３５ （ｄ， Ｊ ＝ ８．０ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．９６－３．９０ （ｍ， ２Ｈ）， ２．７５－２．６５ （ｍ， ２Ｈ）， ２．４４ （ｓ， ３Ｈ）， ２．２１ （ｓ， ３Ｈ）， １．９８－１．９０ （ｍ， ２Ｈ）， １．７０－１．４８ （ｍ， ４Ｈ）， １．０３－０．９０ （ｍ， １Ｈ）．
ステップ２：１－メチル－３－（トリチルスルファニルメチル）ピペリジン（１１－３）
Figure 2024508047000135
（１－メチル－３－ピペリジル）メチル４－メチルベンゼンスルホネート（７．５ｇ、２６．４７ｍｍｏｌ、１当量）及びトリフェニルメタンチオール（８．７８ｇ、３１．７６ｍｍｏｌ、１．２当量）のＤＭＦ溶液（８０ｍＬ）に、Ｋ２ＣＯ３（１０．９７ｇ、７９．４０ｍｍｏｌ、３当量）を加えた。この混合物を８０℃で１２時間撹拌した。水（２００ｍＬ）を加えて反応混合物をクエンチし、次いで酢酸エチル（２００ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機層をブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮し、シリカゲルクロマトグラフィー（石油エーテル／酢酸エチル＝１０／１から１／１及びジクロロメタン／メタノール＝３０／１から１０／１）によって精製して、化合物１１－３（７．５ｇ、１９．３５ｍｍｏｌ、７３．１２％収率）を黄色の油状物として得た。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝ ７．４９－７．４５ （ｍ， ５Ｈ）， ７．３８－７．２５ （ｍ， １０Ｈ）， ２．８３－２．８０ （ｍ， ２Ｈ）， ２．３２－２．２８ （ｍ， ３Ｈ）， ２．１８－２．１１ （ｍ， ２Ｈ）， １．９３－１．９０ （ｍ， １Ｈ）， １．７７－１．６２ （ｍ， ５Ｈ）， ０．９５－０．８８ （ｍ， １Ｈ）．
ステップ３：（１－メチル－３－ピペリジル）メタンチオール（１１－４）
Figure 2024508047000136
１－メチル－３－（トリチルスルファニルメチル）ピペリジン（６．５ｇ、１６．７７ｍｍｏｌ、１当量）のジクロロメタン溶液（５０ｍＬ）に、ＴＦＡ（３７．０６ｇ、３２５．００ｍｍｏｌ、３０ｍＬ、１９．３８当量）及びトリイソプロピルシラン（５．３１ｇ、３３．５４ｍｍｏｌ、６．８９ｍＬ、２当量）を０℃で加えた。この混合物を２５℃で１２時間撹拌した。反応混合物を減圧下で濃縮してＴＦＡを除去し、これをＭｅＯＨ（１００ｍＬ）で希釈し、石油エーテル（５０ｍＬ×５）で抽出した。ＭｅＯＨ層を減圧下で濃縮して、化合物１１－４（２．２ｇ、１５．１４ｍｍｏｌ、９０．３０％収率）を黄色の油状物として得た。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝ ３．５８－３．５２ （ｍ， ２Ｈ）， ２．７９ （ｓ， ３Ｈ）， ２．６０－２．５１ （ｍ， ３Ｈ）， ２．２６－２．２４ （ｍ， １Ｈ）， ２．１０－１．７５ （ｍ， ４Ｈ）， １．４０－１．３７ （ｍ， １Ｈ）， １．２５－１．１５ （ｍ， １Ｈ）．
ステップ４：１－ヘプチルオクチル４－［［４－（１－ヘプチルオクトキシ）－４－オキソ－ブチル］－［（１－メチル－３－ピペリジル）メチルスルファニルカルボニル］アミノ］ブタノエート（ＣＡＴ１１）
Figure 2024508047000137
１－ヘプチルオクチル４－［［４－（１－ヘプチルオクトキシ）－４－オキソ－ブチル］アミノ］ブタノエート（１．８ｇ、２．９５ｍｍｏｌ、１当量）を乾燥ジクロロメタン（２０ｍＬ）に溶解した溶液に、ＴＥＡ（８９５．７７ｍｇ、８．８５ｍｍｏｌ、１．２３ｍＬ、３当量）及びトリホスゲン（４３７．８２ｍｇ、１．４８ｍｍｏｌ、０．５当量）を窒素雰囲気下０℃で加えた。得られた溶液を窒素雰囲気下２５℃で１時間撹拌した。反応物を減圧下で濃縮し、窒素雰囲気下に保った。ＮａＯＨ（８２６．１７ｍｇ、２０．６６ｍｍｏｌ、７当量）を窒素雰囲気下０℃の乾燥ＴＨＦ（３０ｍＬ）に溶解し、次いで（１－メチル－３－ピペリジル）メタンチオール（２．１４ｇ、１４．７５ｍｍｏｌ、５当量）を窒素雰囲気下で加えた。この得られた溶液に、ＴＨＦ（１０ｍＬ）に溶解した塩化カルバモイルを、窒素雰囲気下０℃でゆっくりと加えた。この混合物を２５℃で１２時間撹拌した。反応混合物を飽和ＮＨ４Ｃ１水溶液（１００ｍＬ）でクエンチし、次いで酢酸エチル（１００ｍＬ）で希釈した。水相を酢酸エチル（１００ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相をブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮して残渣を得た。この残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（石油エーテル／酢酸エチル＝１０／１から１／１及びジクロロメタン／メタノール＝３０／１から１０／１）によって精製し、カラムＷｅｌｃｈ Ｕｌｔｉｍａｔｅ ＸＢ－ＳｉＯＨ ２５０＊５０＊１０ｕｍ；移動相：［ヘキサン－ＥｔＯＨ］；Ｂ％：０％－２５％、２０分によって精製して、化合物ＣＡＴ１１（３００ｍｇ、３８３．６１ｕｍｏｌ、１６．６５％収率、９９．９％純度）を黄色の油状物として得た。
ＬＣＭＳ： ［Ｍ＋Ｈ］＋： ７８２．１；
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝ ４．９０－４．８５ （ｍ， ２Ｈ）， ３．４８－３．４０ （ｍ， ４Ｈ）， ３．１０－２．８２ （ｍ， ４Ｈ）， ２．４０－２．２８ （ｍ， ６Ｈ）， ２．１０－１．７０ （ｍ， ８Ｈ）， １．６０－１．４８ （ｍ， １２Ｈ）， １．３３－１．２０ （ｍ， ４０Ｈ）， ０．９０－ ０．８６ （ｍ， １２Ｈ）．
実施例１．１２：ＣＡＴ１２の合成
Figure 2024508047000138
ステップ１：３－（トリチルチオ）プロパナール（１２－２）
Figure 2024508047000139
トリフェニルメタンチオール（１０．０ｇ、３６．２ｍｍｏｌ、１当量）をＤＣＭ（１００ｍＬ）に含む混合物に、ＴＥＡ（５．１３ｇ、５０．７ｍｍｏｌ、７．０５ｍＬ、１．４当量）及びプロパ－２－エナール（２．８４ｇ、５０．７ｍｍｏｌ、３．３９ｍＬ、１．４当量）を連続的に加え、反応混合物を２０℃で１時間撹拌した。反応混合物を減圧下で濃縮すると、化合物１２－２（１２．４ｇ、粗製）がオフホワイトの固体として得られた。反応残渣を次のステップに直接使用した。
ステップ２：４－（３－（トリチルチオ）プロピル）チオモルホリン（１２－４）
Figure 2024508047000140
３－トリチルスルファニルプロパナール（７．４０ｇ、２２．３ｍｍｏｌ、１当量）及びチオモルホリン（２．５３ｇ、２４．５ｍｍｏｌ、２．３２ｍＬ、１．１当量）をＭｅＯＨ（４０ｍＬ）及びＤＣＥ（４０ｍＬ）に含む混合物に、ＡｃＯＨ（１３４ｍｇ、２．２３ｍｍｏｌ、０．１２７ｍＬ、０．１当量）及びＮａＢＨ３ＣＮ（２．８０ｇ、４４．５ｍｍｏｌ、２当量）を連続的に加え、反応混合物を２０℃で２時間撹拌した。飽和ＮＨ４Ｃｌ溶液（５０ｍＬ）を加えて反応混合物をクエンチし、ジクロロメタン（４０ｍＬ×３）によって抽出してから、合わせた有機相を無水硫酸ナトリウムによって乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。この粗生成物を２０℃の石油エーテル／酢酸エチル＝１０／１で１０分間粉砕して、化合物１２－４（９．００ｇ、２１．５ｍｍｏｌ、９６％収率）を白色の固体として得た。
ＬＣＭＳ： ［Ｍ＋Ｈ］＋： ４２０．０；
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ：７．４４ － ７．２８ （ｍ， １２Ｈ）， ７．２４ － ７．２０ （ｍ， ３Ｈ）， ２．６８ － ２．５３ （ｍ， ８Ｈ）， ２．３７ － ２．２５ （ｍ， ２Ｈ）， ２．１９ （ｔ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， ２Ｈ）， １．６０ － １．５１ （ｍ， ２Ｈ）．
ステップ３：３－チオモルホリノプロパン－１－チオール（１２－５）
Figure 2024508047000141
４－（３－トリチルスルファニルプロピル）チオモルホリン（８．００ｇ、１９．１ｍｍｏｌ、１当量）のＤＣＭ溶液（１０ｍＬ）に、ＴＦＡ（３０．８ｇ、２７０ｍｍｏｌ、２０．０ｍＬ、１４．２当量）及びトリイソプロピルシラン（６．０４ｇ、３８．１ｍｍｏｌ、７．８３ｍＬ、２当量）を０℃で加えた。この混合物を２５℃で２時間撹拌した。反応混合物を減圧下で濃縮して残渣を得た後、反応残渣をＭｅＯＨ（２０ｍＬ）に加え、石油エーテル（３×１０ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４によって乾燥させ、濾過し、真空下で濃縮すると、化合物１２－５が黄色の油状物として得られた。反応残渣を次のステップに直接使用した。
ステップ４：ジ（ペンタデカン－８－イル）４，４’－（（（（３－チオモルホリノプロピル）チオ）カルボニル）アザンジイル）ジブタノエート（ＣＡＴ１２）
Figure 2024508047000142
１－ヘプチルオクチル４－［［４－（１－ヘプチルオクトキシ）－４－オキソ－ブチル］アミノ］ブタノエート（２．００ｇ、３．２８ｍｍｏｌ、１当量）を乾燥ＤＣＭ（３０ｍＬ）に溶解した溶液に、ＴＥＡ（９９５ｍｇ、９．８４ｍｍｏｌ、１．３７ｍＬ、３当量）及び炭酸ビス（トリクロロメチル）（４８６ｍｇ、１．６４ｍｍｏｌ、０．５当量）をＮ２下０℃で加えた。得られた溶液を２０℃で１時間撹拌した。得られた反応物を減圧下で濃縮し、Ｎ２下に保った。３－チオモルホリノプロパン－１－チオール（２．３３ｇ、１３．１ｍｍｏｌ、４当量）の乾燥ＴＨＦ溶液（３０ｍＬ）に、ＮａＯＨ（９１８ｍｇ、２３．０ｍｍｏｌ、７当量）をＮ２下０℃で加えた。この得られた溶液に、塩化カルバモイルをシリンジによってＮ２下０℃でゆっくりと加えた。得られた溶液を２０℃で３時間撹拌した。反応混合物を飽和ＮＨ４Ｃ１水溶液（６０ｍＬ）でクエンチし、次いで酢酸エチル（５０ｍＬ）で希釈した。水相を酢酸エチル（５０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相をブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空下で濃縮して残渣を得た。この残渣をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、石油エーテル／酢酸エチル＝５０／１から３／１）によって精製した。化合物ＣＡＴ１２（１．５０ｇ、１．８４ｍｍｏｌ、５６％収率）が黄色の油状物として得られた。
ＬＣＭＳ： ［Ｍ＋Ｈ］＋： ８１３．６；
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ：４．８９ － ４．８６ （ｍ， ２Ｈ）， ３．４０ － ３．３６ （ｍ， ４Ｈ）， ２．９１ （ｔ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．７２ － ２．６８ （ｍ， ６Ｈ）， ２．４８ － ２．４４ （ｍ， ２Ｈ）， ２．３１ （ｍ， ４Ｈ）， １．９８ － １．７６ （ｍ， ６Ｈ）， １．６４ － １．４５ （ｍ， １０Ｈ）， １．３２ － １．２２ （ｍ， ４０Ｈ）， ０．９２ － ０．８３ （ｍ， １２Ｈ）．
実施例１．１３：ＣＡＴ１３の合成
Figure 2024508047000143
ステップ１：ウンデカ－１，１０－ジエン－６－オール（１３－２）
Figure 2024508047000144
Ｍｇ（２４．６１ｇ、１．０１ｍｏｌ、２．５当量）及びＩ２（２．０６ｇ、８．１０ｍｍｏｌ、１．６３ｍＬ、０．０２当量）の乾燥ＴＨＦ懸濁液（１５００ｍＬ）（２ｍＬ／ｍｍｏｌの臭化物）を窒素雰囲気下で調製した。この混合物に、５－ブロモペンタ－１－エン（１５０．８８ｇ、１．０１ｍｏｌ、２．５当量）を２０℃でゆっくりと加えた。添加中、反応混合物の温度の上昇により、Ｇｒｉｇｎａｒｄ形成の開始が確認された。臭化物の添加が完了したら、混合物を２０℃で１時間撹拌し、その後これを、ギ酸エチル（３０ｇ、４０４．９８ｍｍｏｌ、３２．６ｍＬ、１当量）をゆっくりと加えるために０℃に冷却した。添加後、冷浴を外し、混合物を２０℃で１５時間撹拌した。完了後、飽和ＮＨ４Ｃｌ溶液（１０００ｍＬ）を加えてクエンチするために反応物を０℃に冷却し、３０分間撹拌した。水相をＥｔＯＡｃ（８００ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相をブライン（４００ｍＬ×２）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮して残渣を得た。この残渣をＭＰＬＣ（ＥｔＯＡｃ：ＰＥ：０～５％）によって精製して、化合物１３－２（５３．２ｇ、３１６．１５ｍｍｏｌ、８１．９％収率）を黄色の液体として得た。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝ ５．８５ － ５．７７ （ｍ， ２Ｈ）， ５．０４ － ４．９５ （ｍ， ４Ｈ）， ３．６２ － ３．６０ （ｍ， １Ｈ）， ２．０８ － ２．０７ （ｍ， ４Ｈ）， １．５０ － １．４２ （ｍ， ８Ｈ）．
ステップ２：Ｎ－メチル－４－ニトロ－Ｎ－（ウンデカ－１，１０－ジエン－６－イル）ベンゼンスルホンアミド（１３－３）
Figure 2024508047000145
ウンデカ－１，１０－ジエン－６－オール（２０ｇ、１１８．８５ｍｍｏｌ、１当量）、Ｎ－メチル－４－ニトロ－ベンゼンスルホンアミド（２８．２７ｇ、１３０．７４ｍｍｏｌ、１．１当量）、及びＰＰｈ３（３７．４１ｇ、１４２．６２ｍｍｏｌ、１．２当量）の溶液を、Ｎ２下０℃の乾燥ＴＨＦ（２００ｍＬ）中で撹拌した。この混合物に、ＤＩＡＤ（３６．０５ｇ、１７８．２８ｍｍｏｌ、３４．７ｍＬ、１．５当量）を含むＴＨＦ（３０ｍＬ）を０．５時間にわたって滴加した。添加後、得られた混合物を２０℃で１５．５時間撹拌した。完了後、反応混合物をＨ２Ｏ（１５０ｍＬ）によってクエンチし、次いでＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）で希釈した。水相をＥｔＯＡｃ（１５０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相をブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮して残渣を得た。この残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（３３０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、ＥｔＯＡｃ：ＰＥ：０～１０％）によって精製して、化合物１３－３（３３．２ｇ、９０．５９ｍｍｏｌ、７６．２％収率）を黄色の油状物として得た。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝ ８．３６ － ８．３３ （ｍ， ２Ｈ）， ８．０１ － ７．９８ （ｍ， ２Ｈ）， ５．７４ － ５．６５ （ｍ， ２Ｈ）， ４．９７ － ４．９２ （ｍ， ４Ｈ）， ３．９２ － ３．８７ （ｍ， １Ｈ）， ２．７０ （ｓ， ３Ｈ）， ２．０１ － １．９７ （ｍ， ４Ｈ）， １．３０ － １．２８ （ｍ， ２Ｈ）， １．２７ － １．２３ （ｍ， ６Ｈ）．
ステップ３：５－（Ｎ－メチル－４－ニトロフェニルスルホンアミド）ノナン二酸（１３－４）
Figure 2024508047000146
Ｎ－メチル－４－ニトロ－Ｎ－（１－ペンタ－４－エニルヘキサ－５－エニル）ベンゼンスルホンアミド（１２．５ｇ、３４．１１ｍｍｏｌ、１当量）を含むＭｅＣＮ（１５０ｍＬ）及びＣＨ２Ｃｌ２（１５０ｍＬ）の溶液に、ＲｕＣｌ３（１．４２ｇ、６．８２ｍｍｏｌ、０．２当量）を２０℃で加えた。添加後、混合物をこの温度で０．５時間撹拌し、次いで、ＮａＩＯ４（３６．４８ｇ、１７０．５４ｍｍｏｌ、５当量）を含むＨ２Ｏ（２００ｍＬ）を０℃で滴加した。得られた混合物を２０℃で２．５時間撹拌した。完了後、反応混合物をＨＣｌ水溶液（４Ｍ）でｐＨ＝２～３に中和した。水相をＥｔＯＡｃ（６００ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を、飽和Ｎａ２Ｓ２Ｏ３水溶液（３５０ｍＬ×３）及び飽和ブライン（３５０ｍＬ×２）で連続的に洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮して残渣を得た。この残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、ＥｔＯＡｃ：ＰＥ：０～５０％、２％ＡｃＯＨ／ＥｔＯＡｃ）及び分取ＨＰＬＣ（カラム：ＹＭＣ Ｔｒｉａｒｔ Ｃ１８ ２５０＊５０ｍｍ＊７ｕｍ；移動相：［水（０．０５％ＨＣｌ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：２５％－５５％、１８分）によって精製して、化合物１３－４（５．２ｇ、１２．９２ｍｍｏｌ、２０．８％収率）を淡黄色の固体として得た。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ６） δ ＝ １１．９８ （ｓ， ２Ｈ）， ８．４１ － ８．３８ （ｍ， ２Ｈ）， ８．０７ － ８．０５ （ｍ， ２Ｈ）， ３．７６ － ３．７４ （ｍ， １Ｈ）， ２．６７ （ｓ， ３Ｈ）， ２．１６ － ２．１１ （ｍ， ４Ｈ）， １．３５ － １．２２ （ｍ， ８Ｈ）．
ステップ４：ジ（ペンタデカン－８－イル）５－（Ｎ－メチル－４－ニトロフェニルスルホンアミド）ノナンジオエート（１３－５）
Figure 2024508047000147
５－［メチル－（４－ニトロフェニル）スルホニル－アミノ］ノナン二酸（５ｇ、１２．４２ｍｍｏｌ、１当量）をＣＨ２Ｃｌ２（８０ｍＬ）に溶解した溶液に、ＥＤＣＩ（７．１５ｇ、３７．２７ｍｍｏｌ、３当量）、ＴＥＡ（３．７７ｇ、３７．２７ｍｍｏｌ、５．２ｍＬ、３当量）、及びＤＭＡＰ（１．５２ｇ、１２．４２ｍｍｏｌ、１当量）をＮ２下０℃で加えた。添加後、混合物を２５℃で１時間撹拌し、次いで、ペンタデカン－８－オール（５．９６ｇ、２６．０９ｍｍｏｌ、２．１当量）を含むＣＨ２Ｃｌ２（５０ｍＬ）を滴加した。得られた混合物を２５℃で１５時間撹拌した。完了後、反応混合物をＨ２Ｏ（１００ｍＬ）によってクエンチし、次いでＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）で希釈した。水相をＥｔＯＡｃ（８０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相をブライン（６０ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮して残渣を得た。この残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（４０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、ＥｔＯＡｃ：ＰＥ：０～１０％によって精製して、化合物１３－５（４．９ｇ、５．８９ｍｍｏｌ、４７．４％収率、９９％純度）を黄色の油状物として得た。
ＬＣＭＳ ［Ｍ＋Ｎａ］ ＋：８４５．５；
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝ ８．３６ （ｄ， Ｊ ＝ ８．８ Ｈｚ， ２Ｈ）， ８．０１ （ｄ， Ｊ ＝ ８．８ Ｈｚ， ２Ｈ）， ４．８６ － ４．８０ （ｍ， ２Ｈ）， ３．９６ － ３．９１ （ｍ， １Ｈ）， ２．７２ （ｓ， ３Ｈ）， ２．３１ － ２．１９ （ｍ， ４Ｈ）， １．５０ － １．４５ （ｍ， １４Ｈ）， １．２８ － １．２６ （ｍ， ４２Ｈ）， ０．９０ － ０．８７ （ｍ， １２Ｈ）．
ステップ５：ジ（ペンタデカン－８－イル）５－（メチルアミノ）ノナンジオエート（１３－６）
Figure 2024508047000148
ビス（１－ヘプチルオクチル）５－［メチル－（４－ニトロフェニル）スルホニル－アミノ］ノナンジオエート（４．９ｇ、５．９５ｍｍｏｌ、１当量）のＤＭＦ溶液（４０ｍＬ）に、Ｃｓ２ＣＯ３（３．８８ｇ、１１．９０ｍｍｏｌ、２当量）及びベンゼンチオール（１．９４ｇ、１７．６１ｍｍｏｌ、１．８ｍＬ、２．９６当量）を加えた。この混合物を２５℃で５時間撹拌した。完了後、水（８０ｍＬ）を加えて反応混合物をクエンチし、次いでＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機層をブライン（６０ｍＬ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。この残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、ＥｔＯＡｃ：ＰＥ：０～６０％）によって精製して、化合物１３－６（２．６ｇ、４．０７ｍｍｏｌ、６８．５％収率）を黄色の油状物として得た。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝ ４．９０ － ４．８４ （ｍ， ２Ｈ）， ２．４７ － ２．４５ （ｍ， １Ｈ）， ２．４０ （ｓ， ３Ｈ）， ２．３２ － ２．２９ （ｍ， ４Ｈ）， １．６７ － １．６３ （ｍ， ４Ｈ）， １．５１ － １．４５ （ｍ， １２Ｈ）， １．４３ － １．２７ （ｍ， ４０Ｈ）， ０．９０ － ０．８７ （ｍ， １２Ｈ）．
ステップ６：ジ（ペンタデカン－８－イル）５－（（（（３－（ジメチルアミノ）プロピル）チオ）カルボニル）（メチル）アミノ）ノナンジオエート（ＣＡＴ１３）
Figure 2024508047000149
 ビス（１－ヘプチルオクチル）５－（メチルアミノ）ノナンジオエート（１．５ｇ、２．３５ｍｍｏｌ、１当量）を乾燥ＣＨ２Ｃｌ２（３０ｍＬ）に溶解した溶液に、ＴＥＡ（７１３．７ｍｇ、７．０５ｍｍｏｌ、０．９８ｍＬ、３当量）及びトリホスゲン（４１８．６ｍｇ、１．４１ｍｍｏｌ、０．６当量）をＮ２下０℃で加えた。得られた溶液を２０℃で１時間撹拌した。得られた反応物を減圧下で濃縮し、Ｎ２下に保った。３－（ジメチルアミノ）プロパン－１－チオール（９８１．０ｍｇ、８．２３ｍｍｏｌ、３．５当量）を乾燥ＴＨＦ（３０ｍＬ）に溶解した溶液に、ＮａＯＨ（６５８．３ｍｇ、１６．４６ｍｍｏｌ、７当量）をＮ２下０℃で加えた。この得られた溶液に、ＴＨＦ（２０ｍＬ）に溶解した塩化カルバモイルを、シリンジによってＮ２下０℃でゆっくりと加えた。得られた溶液を２０℃で２時間撹拌した。完了後、反応混合物を０℃のＮＨ４Ｃｌ（６０ｍＬ）によってクエンチし、次いでＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）で希釈した。水相をＥｔＯＡｃ（６０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相をブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮して残渣を得た。この残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、ＥｔＯＡｃ：ＰＥ：０～１２％、５％ＮＨ３・Ｈ２Ｏ／酢酸エチル）によって精製して、化合物ＣＡＴ１３（１．０５ｇ、１．３２ｍｍｏｌ、５６．２％収率、９８．５％純度）を淡黄色の油状物として得た。
ＬＣＭＳ ［Ｍ＋Ｈ］ ＋： ７８３．６
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝ ４．８６ － ４．８２ （ｍ， ２Ｈ）， ４．５５ － ３．８４ （ｍ， １Ｈ）， ２．９３ － ２．９２ （ｍ， ２Ｈ）， ２．８０ － ２．７８ （ｍ， ３Ｈ）， ２．３６ － ２．３０ （ｍ， ６Ｈ）， ２．２３ （ｓ， ６Ｈ）， １．８１ － １．７７ （ｍ， ３Ｈ）， １．５０ － １．４５ （ｍ， １６Ｈ）， １．３２ － １．２６ （ｍ， ４０Ｈ）， ０．９０ － ０．８７ （ｍ， １２Ｈ）．
実施例１．１４：ＣＡＴ１４の合成
Figure 2024508047000150
ステップ１：Ｎ，Ｎ－ビス（ブタ－３－エニル）－４－ニトロ－ベンゼンスルホンアミド（１４－２）
Figure 2024508047000151
４－ニトロベンゼンスルホンアミド（２５ｇ、１２３．６５ｍｍｏｌ、１当量）及び４－ブロモブタ－１－エン（８３．４６ｇ、６１８．２４ｍｍｏｌ、６２．７５ｍＬ、５当量）のＡＣＮ溶液（５０ｍＬ）に、Ｃｓ２ＣＯ３（８０．５７ｇ、２４７．３０ｍｍｏｌ、２当量）、ＴＢＡＩ（４５６．７１ｍｇ、１．２４ｍｍｏｌ、０．０１当量）、及びＫＩ（１０．２６ｇ、６１．８２ｍｍｏｌ、０．５当量）を加えた。この混合物を９０℃で１２時間撹拌した。水（３００ｍＬ）を加えて反応混合物をクエンチし、次いでＥｔＯＡｃ（５００ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機層をブライン（２００ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮し、シリカゲルクロマトグラフィー（石油エーテル／酢酸エチル＝１０／１から１／１）によって精製して、化合物１４－２（３７ｇ、１１９．２１ｍｍｏｌ、９６．４％収率）を黄色の油状物として得た。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝ ８．３７－８．３４ （ｍ， ２Ｈ）， ８．０３－７．９９ （ｍ， ２Ｈ）， ５．７３－５．６４ （ｍ， ２Ｈ）， ５．１０－５．０４ （ｍ， ４Ｈ）， ３．３０－３．２５ （ｍ， ４Ｈ）， ２．３５－２．３０ （ｍ， ４Ｈ）
ステップ２：Ｎ－ブタ－３－エニルブタ－３－エン－１－アミン：（１４－３）
Figure 2024508047000152
Ｎ，Ｎ－ビス（ブタ－３－エニル）－４－ニトロ－ベンゼンスルホンアミド（７４ｇ、２３８．４３ｍｍｏｌ、１当量）及びベンゼンチオール（５２．５４ｇ、４７６．８５ｍｍｏｌ、４８．６５ｍＬ、２当量）のＤＭＦ溶液（２００ｍＬ）に、Ｃｓ２ＣＯ３（１５５．３７ｇ、４７６．８５ｍｍｏｌ、２当量）を加えた。この混合物を２５℃で１２時間にわたってＮ２下で撹拌した。水（１０００ｍＬ）を加えて反応混合物をクエンチし、次いでＥｔＯＡｃ（１０００ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機層をブライン（２０００ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮し、シリカゲルクロマトグラフィー（石油エーテル／酢酸エチル＝１０／１から１／１）によって精製して、化合物１４－３（４４ｇ、粗製）を黄色の油状物として得た。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝５．８１－５．７３ （ｍ， ２Ｈ）， ５．０８－４．９９ （ｍ， ４Ｈ）， ２．６６ （ｔ， Ｊ ＝ ６．８ Ｈｚ， ４Ｈ）， ２．２６－２．２０ （ｍ， ４Ｈ）， １．３９－１．３６ （ｍ， １Ｈ）
ステップ３：３－（トリチルチオ）プロパナール：（１４－４）
Figure 2024508047000153
トリフェニルメタンチオール（５０ｇ、１８０．９０ｍｍｏｌ、１当量）のＣＨ２Ｃｌ２溶液（３００ｍＬ）に、ＴＥＡ（２７．４６ｇ、２７１．３５ｍｍｏｌ、３７．７７ｍＬ、１．５当量）及びプロパ－２－エナール（１５．２１ｇ、２７１．３５ｍｍｏｌ、１８．０ｍＬ、１．５当量）を加えた。この混合物を２０℃で１２時間撹拌した。反応混合物を減圧下で濃縮して、化合物３－トリチルスルファニルプロパナール（６０ｇ、１８０．４７ｍｍｏｌ、９９．７６％収率）を黄色の固体として得た。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝ ９．４６ （ｓ， １Ｈ）， ７．４０－７．２０ （ｍ， １５Ｈ）， ２．４６－２．４１ （ｍ， ２Ｈ）， ２．３５－２．２９ （ｍ， ２Ｈ）
ステップ４：Ｎ－ブタ－３－エニル－Ｎ－（３－トリチルスルファニルプロピル）ブタ－３－エン－１－アミン：（１４－５）
Figure 2024508047000154
Ｎ－ブタ－３－エニルブタ－３－エン－１－アミン（３０ｇ、２３９．６０ｍｍｏｌ、１当量）及び３－トリチルスルファニルプロパナール（７９．６６ｇ、２３９．６０ｍｍｏｌ、１当量）を含むＣＨ２Ｃｌ２（１００ｍＬ）及びＭｅＯＨ（１００ｍＬ）の溶液に、ＮａＢＨ３ＣＮ（３０．１１ｇ、４７９．１９ｍｍｏｌ、２当量）及びＡｃＯＨ（１．４４ｇ、２３．９６ｍｍｏｌ、１．３７ｍＬ、０．１当量）を加えた。この混合物を２５℃で１２時間撹拌した。水（３００ｍＬ）を加えて反応混合物をクエンチし、次いでＥｔＯＡＣ（５００ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機層をブライン（２００ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮し、シリカゲルクロマトグラフィー（石油エーテル／酢酸エチル＝１０／１から１／１）によって精製して、化合物Ｎ－ブタ－３－エニル－Ｎ－（３－トリチルスルファニルプロピル）ブタ－３－エン－１－アミン（４６ｇ、１０４．１５ｍｍｏｌ、４３．４７％収率）を黄色の油状物として得た。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝ ７．５１－７．２９ （ｍ，１５Ｈ）， ５．８６－５．７９ （ｍ， ２Ｈ）， ５．１２－５．０３ （ｍ， ４Ｈ）， ２．５３－２．４５ （ｍ， ６Ｈ）， ２．２８－２．２０ （ｍ， ６Ｈ）， １．６３－１．５７ （ｍ， ２Ｈ）
ステップ５：Ｎ－ブタ－３－エニル－Ｎ－（３－トリチルスルファニルプロピル）ブタ－３－エン－１－アミン：（１４－６）
Figure 2024508047000155
Ｎ－ブタ－３－エニル－Ｎ－（３－トリチルスルファニルプロピル）ブタ－３－エン－１－アミン（３０ｇ、６７．９２ｍｍｏｌ、１当量）のＣＨ２Ｃｌ２溶液（１００ｍＬ）に、ＴＦＡ（２３１．００ｇ、２．０３ｍｏｌ、１５０．００ｍＬ、２９．８３当量）及びトリイソプロピルシラン（２１．５１ｇ、１３５．８５ｍｍｏｌ、２７．９０ｍＬ、２当量）を加えた。この混合物を２５℃で６時間撹拌した。反応混合物を減圧下で濃縮してＴＦＡを除去した。この残渣をＭｅＯＨ（１００ｍＬ）で希釈し、ＰＥ（５０ｍＬ×５）で抽出した。ＭｅＯＨ層を減圧下で濃縮して、粗生成物１４－６（９．８ｇ、４９．１６ｍｍｏｌ、７２．３７％収率）を黄色の油状物として得た。
ステップ６：１－ヘプチルオクチル４－［３－［ビス（ブタ－３－エニル）アミノ］プロピルスルファニルカルボニル－［４－（１－ヘプチルオクトキシ）－４－オキソ－ブチル］アミノ］ブタノエート：（ＣＡＴ１４）
Figure 2024508047000156
１－ヘプチルオクチル４－［［４－（１－ヘプチルオクトキシ）－４－オキソ－ブチル］アミノ］ブタノエート（６ｇ、９．８４ｍｍｏｌ、１当量）を乾燥ＣＨ２Ｃｌ２（５０ｍＬ）に溶解した溶液に、ＴＥＡ（２．９９ｇ、２９．５１ｍｍｏｌ、４．１１ｍＬ、３当量）及びトリホスゲン（１．４６ｇ、４．９２ｍｍｏｌ、０．５当量）を窒素雰囲気下０℃で加えた。得られた溶液を窒素雰囲気下２０℃で１時間撹拌した。反応物を減圧下で濃縮し、窒素雰囲気下に保った。ＮａＯＨ（２．７５ｇ、６８．８５ｍｍｏｌ、７当量）を窒素雰囲気下０℃の乾燥ＴＨＦ（１００ｍＬ）に溶解し、次いで３－［ビス（ブタ－３－エニル）アミノ］プロパン－１－チオール（９．８０ｇ、４９．１８ｍｍｏｌ、５当量）を窒素雰囲気下で加えた。この得られた溶液に、ＴＨＦ（５０ｍＬ）に溶解した塩化カルバモイルを、窒素雰囲気下０℃でゆっくりと加えた。この混合物を２５℃で１２時間撹拌した。反応混合物を飽和ＮＨ４Ｃ１水溶液（２００ｍＬ）でクエンチし、次いでＥｔＯＡＣ（３００ｍＬ）で希釈した。水相をＥｔＯＡＣ（２００ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相をブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮して残渣を得て、これをシリカゲルクロマトグラフィー（石油エーテル／酢酸エチル＝１０／１から１／１）及びＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｌｕｎａ Ｃ８ ２５０＊５０ｍｍ＊１０ｕｍ；移動相：［水（ＨＣｌ）－ＭｅＯＨ］；Ｂ％：８０％－１００％、１０分によって精製して、化合物ＣＡＴ１４（２４０ｍｇ、２８４．４６ｕｍｏｌ、２３．７６％収率、９９．０１％純度）を黄色の油状物として得た。
ＬＣＭＳ： ［Ｍ＋Ｈ］＋： ８３６．２；
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝ ５．８３－５．７６ （ｍ， ２Ｈ）， ５．０９－５．０２ （ｍ， ４Ｈ）， ４．９９－４．８６ （ｍ， ２Ｈ）， ３．４０－３．３８ （ｍ， ４Ｈ）， ２．９２ （ ｔ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．５３－２．３１ （ｍ， ６Ｈ）， ２．３０－２．２１ （ｍ， ６Ｈ）， １．９０－１．７８ （ｍ， ６Ｈ）， １．５８－１．５１ （ｍ， １０Ｈ）， １．３２－１．２７ （ｍ， ４０Ｈ）， ０．９０－０．８７ （ｍ， １２Ｈ）．
実施例１．１５：ＣＡＴ１５の合成
Figure 2024508047000157
ステップ１：１－ヘプチルオクチル４－［３－［ビス（３－ヒドロキシプロピル）アミノ］プロピルスルファニルカルボニル－［４－（１－ヘプチルオクトキシ）－４－オキソ－ブチル］アミノ］ブタノエート：（ＣＡＴ１５）
Figure 2024508047000158
１－ヘプチルオクチル４－［３－［ビス（ブタ－３－エニル）アミノ］プロピルスルファニルカルボニル－［４－（１－ヘプチルオクトキシ）－４－オキソ－ブチル］アミノ］ブタノエート（２．８ｇ、３．３５ｍｍｏｌ、１当量）を含むＣＨ２Ｃｌ２（５０ｍＬ）及びＭｅＯＨ（５０ｍＬ）の溶液を－７８℃に冷却し、薄青色が明らかになるまで、Ｏ３流（１５ｐｓｉ）を反応混合物中に通気した。次いで、青色が消えるまで反応混合物中に酸素を通気し、０．５時間後、ＮａＢＨ４（２５３．６０ｍｇ、６．７０ｍｍｏｌ、２当量）を０℃で加えた。次いで、この混合物を２５℃で２時間撹拌した。反応混合物を飽和ＮＨ４Ｃ１水溶液（１００ｍＬ）でクエンチし、次いでＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）で希釈した。水相をＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相をブライン（２０ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮して残渣を得て、これをシリカゲルクロマトグラフィー（石油エーテル／酢酸エチル＝１０／１から１／１）によって精製し、カラム：Ｗｅｌｃｈ Ｕｌｔｉｍａｔｅ ＸＢ－ＳｉＯＨ ２５０＊５０＊１０ｕｍ；移動相：［ヘキサン－ＥｔＯＨ］；Ｂ％：０％－２０％、２０分によって精製して、ＣＡＴ１５（１４１ｍｇ、１６６．１９ｕｍｏｌ、７７．８６％収率、９９．４％純度）を黄色の油状物として得た。
ＬＣＭＳ： ［Ｍ＋Ｈ］＋： ８４３．７；
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝ ４．９０－４．６５ （ｍ， ２Ｈ）， ３．８２－３．６５ （ｍ， ４Ｈ）， ３．４５－３．２５ （ｍ， ４Ｈ）， ３．００－２．９０ （ｍ， ６Ｈ）， ２．３８－２．２０ （ｍ， ４Ｈ）， ２．００－１．７５ （ｍ， １０Ｈ）， １．７０－１．５５ （ｍ， １０Ｈ）， １．３０－１．１５ （ｍ， ４０Ｈ）， ０．９６－０．８６ （ｍ， １２Ｈ）．
実施例１．１６：ＣＡＴ１６の合成
Figure 2024508047000159
ステップ１：メチル３－（トシルオキシ）シクロブタンカルボキシレート（１６－２）
Figure 2024508047000160
メチル３－ヒドロキシシクロブタンカルボキシレート（１５．０ｇ、１１５ｍｍｏｌ、１当量）のＤＣＭ溶液（２５０ｍＬ）に、ＴＥＡ（２３．３ｇ、２３１ｍｍｏｌ、３２．１ｍＬ、２当量）、ＤＭＡＰ（７０４ｍｇ、５．７６ｍｍｏｌ、０．０５当量）、及びＴｏｓＣｌ（２６．４ｇ、１３８ｍｍｏｌ、１．２当量）をＮ２下０℃で加えた。この混合物を２０℃で１６時間撹拌した。反応混合物をＤＣＭ（１００ｍＬ）で希釈し、ブライン（８０ｍＬ×３）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空下で濃縮して残渣を得た。この残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（８０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、酢酸エチル：石油エーテル：０～２５％）によって精製した。化合物１６－２（２２．３ｇ、７８．４ｍｍｏｌ、６８％収率）が淡黄色の油状物として得られた。
ステップ２：メチル３－（トリチルチオ）シクロブタンカルボキシレート（１６－３）
Figure 2024508047000161
メチル３－（ｐ－トリルスルホニルオキシ）シクロブタンカルボキシレート（２６．０ｇ、９１．４ｍｍｏｌ、１当量）のＤＭＦ溶液（３００ｍＬ）に、トリフェニルメタンチオール（３７．９ｇ、１３７ｍｍｏｌ、１．５当量）及びＣｓ２ＣＯ３（５９．６ｇ、１８３ｍｍｏｌ、２当量）を加えた。この混合物を２０℃で１２時間撹拌した。反応混合物をＨ２Ｏ（１００ｍＬ）によってクエンチし、次いで酢酸エチル（２００ｍＬ）で希釈した。水相を酢酸エチル（２００ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機相をブライン（２００ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空下で濃縮して粗生成物を得た。この残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（ＩＳＣＯ（登録商標）；２２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、４０ｍＬ／分で０～１５％酢酸エチル／石油エーテルグラジエントの溶離液）によって精製した。化合物１６－３（３５．０ｇ、９０．１ｍｍｏｌ、９８％収率）が黄色の油状物として得られた。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ：７．２８ － ７．１７ （ｍ， １５Ｈ）， ３．５９ （ｓ， ３Ｈ）， ３．３５ － ３．３０ （ｍ， １Ｈ）， ３．００ － ２．９３ （ｍ， １Ｈ）， ２．１９ － ２．１３ （ｍ， ２Ｈ）， ２．０４ － １．９９ （ｍ， ２Ｈ）．
ステップ３：３－（トリチルチオ）シクロブタンカルボン酸（１６－４）
Figure 2024508047000162
 メチル３－トリチルスルファニルシクロブタンカルボキシレート（２５．０ｇ、６４．４ｍｍｏｌ、１当量）をＴＨＦ（２００ｍＬ）に含む混合物に、ＬｉＯＨ・Ｈ２Ｏ（８．１０ｇ、１９３．１ｍｍｏｌ、３当量）を加え、反応混合物を４０℃で１２時間撹拌した。反応混合物を４Ｍ ＨＣｌでｐＨ５に調整し、次いで反応混合物を酢酸エチル（２００ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機層をブライン（２００ｍＬ×２）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して残渣を得た。この残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（ＩＳＣＯ（登録商標）；２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、４０ｍＬ／分で０～５０％酢酸エチル／石油エーテルグラジエントの溶離液）によって精製した。化合物１６－４（１７．８ｇ、４７．５ｍｍｏｌ、７４％収率）が黄色の固体として得られた。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ６） δ：１２．０７ （ｓ， １Ｈ）， ７．３８ － ７．２７ （ｍ， １２Ｈ）， ７．２６ － ７．１９ （ｍ， ３Ｈ）， ３．２１ － ３．１３ （ｍ， １Ｈ）， ２．８７ － ２．８０ （ｍ， １Ｈ）， ２．０２ － １．８１ （ｍ， ４Ｈ）．
ステップ４：１，３－ビス（３－（トリチルチオ）シクロブチル）尿素（１６－５）
Figure 2024508047000163
３－トリチルスルファニルシクロブタンカルボン酸（１０．０ｇ、２６．７ｍｍｏｌ、１当量）及びＴＥＡ（４．０５ｇ、４０．１ｍｍｏｌ、５．５７ｍＬ、１．５当量）をトルエン（１００ｍＬ）に含む混合物に、２０℃のＤＰＰＡ（８．８２ｇ、３２．０ｍｍｏｌ、６．９４ｍＬ、１．２当量）を加え、次いで反応混合物を１００℃に加熱し、４時間撹拌した。１０％ＮａＯＨ溶液を加えて反応混合物をクエンチし、次いで反応混合物を濾過し、ケークフィルターを真空下で濃縮して粗生成物を得た。反応残渣を次のステップに直接使用した。化合物１６－５（１４．０ｇ、粗製）が白色の固体として得られた。
ＬＣＭＳ： ［Ｍ＋Ｈ］＋： ７１７．３
ステップ５：３－（トリチルチオ）シクロブタンアミン（１６－６）
Figure 2024508047000164
１，３－ビス（３－トリチルスルファニルシクロブチル）尿素（２．００ｇ、２．７９ｍｍｏｌ、１当量）、ＫＯＨ（３１３ｍｇ、５．５８ｍｍｏｌ、２当量）を、マイクロ波チューブ内のエチレングリコール（１０ｍＬ）中に取った。密封したチューブを、マイクロ波下、１５０℃で１時間加熱した。反応混合物をＨ２Ｏ（３０ｍＬ）によってクエンチし、酢酸エチル（３０ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機相をブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空下で濃縮して粗生成物を得た。反応残渣を次のステップに直接使用した。化合物１６－６（１０．０ｇ、粗製）が褐色の油状物として得られた。
ＬＣＭＳ： ［Ｍ＋Ｈ］＋： ３４６．１
ステップ６：Ｎ，Ｎ－ジメチル－３－（トリチルチオ）シクロブタンアミン（１６－７）
Figure 2024508047000165
３－トリチルスルファニルシクロブタンアミン（１０．０ｇ、２８．９ｍｍｏｌ、１当量）をＭｅＯＨ（１０ｍＬ）に含む混合物に、（ＨＣＨＯ）ｎ（１０．０ｇ、１４５ｍｍｏｌ、５当量）、ＡｃＯＨ（３．４８ｇ、５７．９ｍｍｏｌ、３．３１ｍＬ、２当量）、ＮａＢＨ３ＣＮ（３．６４ｇ、５７．９ｍｍｏｌ、２当量）を連続的に０℃で加え、次いで反応混合物を２５℃で３時間撹拌した。飽和ＮＨ４Ｃｌ溶液（２０ｍＬ）を加えて反応混合物をクエンチし、酢酸エチル（３０ｍＬ×３）によって抽出してから、合わせた有機相を無水硫酸ナトリウムによって乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。反応残渣を次のステップに直接使用した。化合物１６－７（６．００ｇ、粗製）が黄色の油状物として得られた。
ＬＣＭＳ： ［Ｍ＋Ｈ］＋： ３７４．３
ステップ７：３－（ジメチルアミノ）シクロブタンチオール（１６－８）
Figure 2024508047000166
Ｎ，Ｎ－ジメチル－３－トリチルスルファニル－シクロブタンアミン（６．００ｇ、１６．１ｍｍｏｌ、１当量）のＤＣＭ溶液（２０ｍＬ）に、トリイソプロピルシラン（５．０９ｇ、３２．１ｍｍｏｌ、６．６０ｍＬ、２当量）及びＴＦＡ（４．６２ｇ、４０．５ｍｍｏｌ、３ｍＬ、２．５２当量）を０℃で加えた。この混合物を２５℃で１２時間撹拌した。反応混合物を減圧下で濃縮して残渣を得た後、反応残渣をＭｅＯＨ（２０ｍＬ）に加え、石油エーテル（３×１０ｍＬ）で洗浄し、真空下で濃縮した。反応残渣を次のステップに直接使用した。化合物１６－８（１．４０ｇ、粗製）が黄色の油状物として得られた。
ステップ８：ジ（ペンタデカン－８－イル）４，４’－（（（（３－（ジメチルアミノ）シクロブチル）チオ）カルボニル）アザンジイル）ジブタノエート（ＣＡＴ１６）
Figure 2024508047000167
１－ヘプチルオクチル４－［［４－（１－ヘプチルオクトキシ）－４－オキソ－ブチル］アミノ］ブタノエート（２．００ｇ、３．２８ｍｍｏｌ、１当量）を乾燥ＤＣＭ（３０ｍＬ）に溶解した溶液に、ＴＥＡ（９９５ｍｇ、９．８４ｍｍｏｌ、１．３７ｍＬ、３当量）及び炭酸ビス（トリクロロメチル）（４８６ｍｇ、１．６４ｍｍｏｌ、０．５当量）をＮ２下０℃で加えた。得られた溶液を２０℃で１時間撹拌した。得られた反応混合物を減圧下で濃縮し、Ｎ２下に保った。３－（ジメチルアミノ）シクロブタンチオール（１．７２ｇ、１３．１ｍｍｏｌ、４当量）の乾燥ＴＨＦ溶液（３０ｍＬ）に、ＮａＯＨ（９１８ｍｇ、２２．９ｍｍｏｌ、７当量）をＮ２下０℃で加えた。この得られた溶液に、塩化カルバモイルをシリンジによってＮ２下０℃でゆっくりと加えた。得られた溶液を２０℃で１時間撹拌した。反応混合物を飽和ＮＨ４Ｃ１水溶液（１００ｍＬ）でクエンチし、次いで酢酸エチル（１００ｍＬ）で希釈した。水相を酢酸エチル（１００ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相をブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空下で濃縮して残渣を得た。この残渣をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、石油エーテル／酢酸エチル＝５０／１から３／１）によって精製した。化合物ＣＡＴ１６（１．６０ｇ、２．０９ｍｍｏｌ、６４％収率）が黄色の油状物として得られた。
ＬＣＭＳ： ［Ｍ＋Ｈ］＋： ７６７．６
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ：４．９３ － ４．８３ （ｍ， ２Ｈ）， ３．８６ － ３．８２ （ｍ， １Ｈ）， ３．３４ － ３．３２ （ｍ， ４Ｈ）， ３．００ －２．９０ （ｍ， １Ｈ）， ２．５４ － ２．４２ （ｍ， ２Ｈ）， ２．３３ － ２．３０ （ｍ， ４Ｈ）， ２．１３ （ｓ， ６Ｈ）， １．９３ － １．８０ （ｍ， ６Ｈ）， １．６０ － １．４４ （ｍ， ８Ｈ）， １．３０ － １．２０ （ｍ， ４０Ｈ）， ０．９８ － ０．７８ （ｍ， １２Ｈ）．
実施例１．１７：ＣＡＴ１７の合成
Figure 2024508047000168
ステップ１：（１－メチルピロリジン－３－イル）４－メチルベンゼンスルホネート（１７－２）
Figure 2024508047000169
１－メチルピロリジン－３－オール（２０ｇ、１９７．７３ｍｍｏｌ、１当量）のＣＨ２Ｃｌ２溶液（３００ｍＬ）に、ＴｏｓＣｌ（４５．２４ｇ、２３７．２８ｍｍｏｌ、１．２当量）、ＴＥＡ（６０．０３ｇ、５９３．２０ｍｍｏｌ、８２．５７ｍＬ、３当量）、及びＤＭＡＰ（１２．０８ｇ、９８．８７ｍｍｏｌ、０．５当量）を加えた。この混合物を２５℃で１２時間撹拌した。反応混合物を飽和水（３００ｍＬ）でクエンチし、次いでＣＨ２Ｃｌ２（１００ｍＬ）で希釈した。水相をＣＨ２Ｃｌ２（１００ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相をブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮して残渣を得た。この残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（石油エーテル／酢酸エチル＝１０／１から１／１）によって精製して、化合物１７－２（３９ｇ、１５２．７４ｍｍｏｌ、７７．２５％収率）を黄色の油状物として得た。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝ ７．７９ （ｄ， Ｊ ＝ ８．０ Ｈｚ， ２Ｈ）， ７．３４ （ｄ， Ｊ ＝ ８．０ Ｈｚ， ２Ｈ）， ５．１０－４．９６ （ｍ， １Ｈ）， ２．７０－２．５８ （ｍ， ２Ｈ）， ２．４４ （ｓ， ３Ｈ）， ２．３８－２．３２ （ｍ， ２Ｈ）， ２．３１ （ｓ， ３Ｈ）， ２．１８－２．１２ （ｍ， １Ｈ）， １．９５－１．９０ （ｍ， １Ｈ）
ステップ２：１－メチル－３－トリチルスルファニル－ピロリジン：（１７－３）
Figure 2024508047000170
（１－メチルピロリジン－３－イル）４－メチルベンゼンスルホネート（１５ｇ、５８．７５ｍｍｏｌ、１当量）及びトリフェニルメタンチオール（１９．４８ｇ、７０．５０ｍｍｏｌ、１．２当量）のＤＭＦ溶液（１００ｍＬ）に、Ｋ２ＣＯ３（２４．３６ｇ、１７６．２４ｍｍｏｌ、３当量）を加えた。この混合物を８０℃で６時間撹拌した。反応混合物を飽和ＮＨ４Ｃ１水溶液（１００ｍＬ）でクエンチし、次いでＥｔＯＡｃ（３００ｍＬ）で希釈した。水相をＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相をブライン（２００ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮して残渣を得た。この残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（石油エーテル／酢酸エチル＝１０／１から０／１）によって精製して、化合物１７－３（２０ｇ、５５．６３ｍｍｏｌ、９４．６９％収率）を黄色の油状物として得た。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝ ７．６０－７．３０ （ｍ， １５Ｈ）， ２．６５－２．４８ （ｍ， ４Ｈ）， ２．４０－２．３５ （ｍ， ３Ｈ）， ２．２８－１．６０ （ｍ， ３Ｈ）
ステップ３：１－メチルピロリジン－３－チオール：（１７－４）
Figure 2024508047000171
１－メチル－３－トリチルスルファニル－ピロリジン（２０ｇ、５５．６３ｍｍｏｌ、１当量）のＣＨ２Ｃｌ２溶液（３００ｍＬ）に、ＴＦＡ（４６．２０ｇ、４０５．１８ｍｍｏｌ、３０．００ｍＬ、７．２８当量）及びトリイソプロピルシラン（２６．４３ｇ、１６６．８９ｍｍｏｌ、３４．２８ｍＬ、３当量）を加えた。この混合物を２５℃で１２時間撹拌した。反応混合物を減圧下で濃縮してＴＦＡを除去した。この残渣をＭｅＯＨ（１００ｍＬ）で希釈し、ＰＥ（５０ｍＬ×５）で抽出した。ＭｅＯＨ層を減圧下で濃縮して、化合物１７－４（５．４ｇ、４６．０７ｍｍｏｌ、８２．８２％収率）を黄色の油状物として得た。
ステップ４：１－ヘプチルオクチル４－［［４－（１－ヘプチルオクトキシ）－４－オキソ－ブチル］－（１－メチルピロリジン－３－イル）スルファニルカルボニル－アミノ］ブタノエート：（ＣＡＴ１７）
Figure 2024508047000172
１－ヘプチルオクチル４－［［４－（１－ヘプチルオクトキシ）－４－オキソ－ブチル］アミノ］ブタノエート（１．５ｇ、２．４６ｍｍｏｌ、１当量）を乾燥ＣＨ２Ｃｌ２（４０ｍＬ）に溶解した溶液に、ＴＥＡ（７４６．４７ｍｇ、７．３８ｍｍｏｌ、１．０３ｍＬ、３当量）及び炭酸ビス（トリクロロメチル）（３６４．８５ｍｇ、１．２３ｍｍｏｌ、０．５当量）を窒素雰囲気下０℃で加えた。得られた溶液を窒素雰囲気下２０℃で１時間撹拌した。反応物を減圧下で濃縮し、窒素雰囲気下に保った。ＮａＯＨ（６８８．４７ｍｇ、１７．２１ｍｍｏｌ、７当量）を窒素雰囲気下０℃のＴＨＦ（５０ｍＬ）に溶解し、次いで１－メチルピロリジン－３－チオール（１．４４ｇ、１２．３０ｍｍｏｌ、５当量）を窒素雰囲気下で加えた。この得られた溶液に、ＴＨＦ（１０ｍＬ）に溶解した塩化カルバモイルを、窒素雰囲気下０℃でゆっくりと加えた。この混合物を２５℃で０．５時間撹拌した。反応混合物を飽和ＮＨ４Ｃ１水溶液（１００ｍＬ）でクエンチし、次いでＥｔＯＡｃ（２００ｍＬ）で希釈した。水相をＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相をブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮して残渣を得た。この残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（石油エーテル／酢酸エチル＝１０／１から０／１によって精製し、カラム：Ｗｅｌｃｈ Ｕｌｔｉｍａｔｅ ＸＢ－ＳｉＯＨ ２５０＊５０＊１０μｍ；移動相：［ヘキサン－ＥｔＯＨ］；Ｂ％：０％－１３％、１０分によって精製して、ＣＡＴ１７（３９５ｍｇ、５１６．０３μｍｏｌ、６４．７８％収率、９８．４％純度）を黄色の油状物として得た。
ＬＣＭＳ： ［Ｍ＋Ｈ］＋： ７５３．８
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝ ４．９０－４．８０ （ｍ， ２Ｈ）， ４．００－３．９０ （ｍ， １Ｈ）， ３．５０－３．３８ （ｍ， ４Ｈ）， ３．０５－２．９０ （ｍ， １Ｈ）， ２．８２－２．７５ （ｍ， １Ｈ）， ２．６８－２．６０ （ｍ， １Ｈ）， ２．４８－２．４０ （ｍ， ２Ｈ）， ２．３７ （ｓ， ３Ｈ）， ２．３０ （ｔ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， ４Ｈ）， １．９８－１．７０ （ｍ， ５Ｈ）， １．５２－１．４８ （ｍ， ８Ｈ）， １．３２－１．２４ （ｍ， ４０Ｈ）， ０．９２－０．８６ （ｍ， １２Ｈ）
実施例１．１８：ＣＡＴ１８の合成
Figure 2024508047000173
ステップ１：４－（４－ニトロ－Ｎ－（４－オキソ－４－（ペンタデカン－８－イルオキシ）ブチル）フェニルスルホンアミド）ブタン酸（１８－２）
Figure 2024508047000174
４－［３－カルボキシプロピル－（４－ニトロフェニル）スルホニル－アミノ］ブタン酸（２５ｇ、６６．７８ｍｍｏｌ、１．０４当量）、ペンタデカン－８－オール（８．０９ｇ、３５．４０ｍｍｏｌ、０．５５当量）、ＥＤＣＩ（６．７９ｇ、３５．４０ｍｍｏｌ、０．５５当量）、ＤＭＡＰ（７８６．３８ｍｇ、６．４４ｍｍｏｌ、０．１当量）及びＤＩＰＥＡ（４．９９ｇ、３８．６２ｍｍｏｌ、６．７ｍＬ、０．６当量）をＣＨ２Ｃｌ２（２００ｍＬ）に含む混合物を脱気し、Ｎ２で３回パージしてから、混合物を２５℃で１６時間にわたってＮ２雰囲気下で撹拌した。完了後、反応混合物をＨ２Ｏ（１５０ｍＬ）によってクエンチし、次いでＥｔＯＡｃ（１５０ｍＬ）で希釈した。水相をＥｔＯＡｃ（１５０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相をブライン（２００ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮して残渣を得た。この残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（８０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、ＥｔＯＡｃ／ＰＥ：０～１０％）によって精製して、化合物１８－２（１２．８ｇ、２１．８９ｍｍｏｌ、３４．０％収率）を黄色の固体として得た。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝ ８．３７ － ８．３５ （ｍ， ２Ｈ）， ８．０２ － ７．９９ （ｍ， ２Ｈ）， ４．９０ － ４．８４ （ｍ， １Ｈ）， ３．２７ － ３．２３ （ｍ， ４Ｈ）， ２．４３ （ｔ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．３５ （ｔ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， ２Ｈ）， １．９１ － １．８６ （ｍ， ４Ｈ）， １．５２ － １．５０ （ｍ， ４Ｈ）， １．２７ － １．２５ （ｍ， ２０Ｈ）， ０．８９ － ０．８６ （ｍ， ６Ｈ）．
ステップ２：ｔｅｒｔ－ブチル４－（４－ニトロ－Ｎ－（４－オキソ－４－（ペンタデカン－８－イルオキシ）ブチル）フェニルスルホンアミド）ブタノエート（１８－３）
Figure 2024508047000175
４－［［４－（１－ヘプチルオクトキシ）－４－オキソ－ブチル］－（４－ニトロフェニル）スルホニル－アミノ］ブタン酸（１２．５ｇ、２１．３８ｍｍｏｌ、１当量）のＴＨＦ溶液（１５０ｍＬ）に、２－ｔｅｒｔ－ブチル－１，３－ジイソプロピル－イソ尿素（１２．８５ｇ、６４．１３ｍｍｏｌ、３当量）をＮ２下２５℃で滴加した。添加後、混合物を５０℃で１６時間撹拌した。添加後、反応混合物を減圧下で濃縮して溶媒を除去し、残渣を得た。この残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（８０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、ＥｔＯＡｃ／ＰＥ：０～１０％）によって精製して、化合物３（１１．６ｇ、１８．１０ｍｍｏｌ、８４．７％収率）を黄色の油状物として得た。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝ ８．３７ － ８．３４ （ｍ， ２Ｈ）， ８．０２ － ７．９９ （ｍ， ２Ｈ）， ４．８８ － ４．８５ （ｍ， １Ｈ）， ３．２６ － ３．２１ （ｍ， ４Ｈ）， ２．３２ （ｔ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．２６ （ｔ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， ２Ｈ）， １．９１ － １．７９ （ｍ， ４Ｈ）， １．５２ － １．５０ （ｍ， ４Ｈ）， １．４５ （ｓ， ９Ｈ）， １．３０ － １．２５ （ｍ， ２０Ｈ）， ０．９０ － ０．８６ （ｍ， ６Ｈ）．
ステップ３：ｔｅｒｔ－ブチル４－（（４－オキソ－４－（ペンタデカン－８－イルオキシ）ブチル）アミノ）ブタノエート（１８－４）
Figure 2024508047000176
１－ヘプチルオクチル４－［（４－ｔｅｒｔ－ブトキシ－４－オキソ－ブチル）－（４－ニトロフェニル）スルホニル－アミノ］ブタノエート（８ｇ、１２．４８ｍｍｏｌ、１当量）のＤＭＦ溶液（５０ｍＬ）に、Ｃｓ２ＣＯ３（８．１３ｇ、２４．９７ｍｍｏｌ、２当量）及びベンゼンチオール（３．７３ｇ、３３．８５ｍｍｏｌ、３．４５ｍＬ、２．７１当量）を加えた。この混合物を２５℃で１６時間にわたってＮ２下で撹拌した。完了後、Ｈ２Ｏ（１２０ｍＬ）を加えて反応混合物をクエンチし、次いでＥｔＯＡｃ（１５０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機層をブライン（６０ｍＬ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。この残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（４０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、ＥｔＯＡｃ／ＰＥ：０～３５％）によって精製して、化合物１８－４（４．１ｇ、９．００ｍｍｏｌ、７２．１％収率）を黄色の油状物として得た。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝ ４．９０ － ４．８４ （ｍ， １Ｈ）， ２．６５ － ２．６１ （ｍ， ４Ｈ）， ２．３５ （ｔ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．２７ （ｔ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， ２Ｈ）， １．８０ － １．７６ （ｍ， ４Ｈ）， １．５２ － １．４８ （ｍ， ４Ｈ）， １．４４ （ｓ， ９Ｈ）， １．３０ － １．２６ （ｍ， ２０Ｈ）， ０．９０ － ０．８６ （ｍ， ６Ｈ）．
ステップ４：ｔｅｒｔ－ブチル４－（（４－オキソ－４－（ペンタデカン－８－イルオキシ）ブチル）（（（３－（ピロリジン－１－イル）プロピル）チオ）カルボニル）アミノ）ブタノエート（１８－５）
Figure 2024508047000177
１－ヘプチルオクチル４－［（４－ｔｅｒｔ－ブトキシ－４－オキソ－ブチル）アミノ］ブタノエート（１．５ｇ、３．２９ｍｍｏｌ、１当量）を乾燥ＣＨ２Ｃｌ２（３０ｍＬ）に溶解した溶液に、ＴＥＡ（９９９．２ｍｇ、９．８７ｍｍｏｌ、１．４ｍＬ、３当量）及びトリホスゲン（５８６．１ｍｇ、１．９７ｍｍｏｌ、０．６当量）をＮ２下０℃で加えた。得られた溶液を２０℃で１時間撹拌した。得られた反応物を減圧下で濃縮し、Ｎ２下に保った。３－ピロリジン－１－イルプロパン－１－チオール（２．９９ｇ、１１．５２ｍｍｏｌ、３．５当量、ＴＦＡ）を乾燥ＴＨＦ（３０ｍＬ）に溶解した溶液に、ＮａＯＨ（９２１．６３ｍｇ、２３．０４ｍｍｏｌ、７当量）をＮ２下０℃で加えた。この得られた溶液に、ＴＨＦ（２０ｍＬ）に溶解した塩化カルバモイルを、シリンジによってＮ２下０℃でゆっくりと加えた。得られた溶液を２０℃で１５時間撹拌した。完了後、反応混合物を０℃のＮＨ４Ｃｌ（６０ｍＬ）によってクエンチし、次いでＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）で希釈した。水相をＥｔＯＡｃ（６０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相をブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮して残渣を得た。この残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、ＥｔＯＡｃ：ＰＥ：０～１３％、５％ＮＨ３・Ｈ２Ｏ／ＥｔＯＡｃ）によって精製して、化合物１８－５（１．０５ｇ、１．２６ｍｍｏｌ、４１．５％収率、７５％純度）を無色の油状物として得た。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝ ４．８９ － ４．８６ （ｍ， １Ｈ）， ２．９６ － ２．９２ （ｍ， ２Ｈ）， ２．５５ － ２．５１ （ｍ， ８Ｈ）， ２．３２ －２．３０ （ｍ， ２Ｈ）， ２．２６ － ２．２３ （ｍ， ２Ｈ）， １．８６ － １．８２ （ｍ， ６Ｈ）， １．８０ － １．７８ （ｍ， ４Ｈ）， １．５３ － １．５０ （ｍ， ４Ｈ）， １．４５ （ｓ， ９Ｈ）， １．３０ － １．２６ （ｍ， ２０Ｈ）， １．１８ － １．１６ （ｍ， ２Ｈ）， ０．９０ － ０．８６ （ｍ， ６Ｈ）．
ステップ５：４－（（４－オキソ－４－（ペンタデカン－８－イルオキシ）ブチル）（（（３－（ピロリジン－１－イル）プロピル）チオ）カルボニル）アミノ）ブタン酸（１８－６）
Figure 2024508047000178
１－ヘプチルオクチル４－［（４－ｔｅｒｔ－ブトキシ－４－オキソ－ブチル）－（３－ピロリジン－１－イルプロピルスルファニルカルボニル）アミノ］ブタノエート（９５０ｍｇ、１．５２ｍｍｏｌ、１当量）のＣＨ２Ｃｌ２溶液（１０ｍＬ）に、ＴＦＡ（３．４４ｇ、３０．１９ｍｍｏｌ、２．５ｍＬ）をＮ２下で加えた。この混合物を２５℃で１６時間撹拌した。完了後、反応混合物を減圧下で濃縮して溶媒を除去し、化合物１８－６（１．０２ｇ、粗製、ＴＦＡ）を黄色の油状物として得た。この粗生成物をさらに精製することなく次のステップで使用した。
ステップ６：（Ｚ）－ノナ－２－エン－１－イル４－（（４－オキソ－４－（ペンタデカン－８－イルオキシ）ブチル）（（（３－（ピロリジン－１－イル）プロピル）チオ）カルボニル）アミノ）ブタノエート（ＣＡＴ１８）
Figure 2024508047000179
４－［［４－（１－ヘプチルオクトキシ）－４－オキソ－ブチル］－（３－ピロリジン－１－イルプロピルスルファニルカルボニル）アミノ］ブタン酸（１．０ｇ、１．４６ｍｍｏｌ、１当量、ＴＦＡ）、（Ｚ）－ノナ－２－エン－１－オール（４１５．４ｍｇ、２．９２ｍｍｏｌ、２当量）、ＥＤＣＩ（４１９．９ｍｇ、２．１９ｍｍｏｌ、１．５当量）、ＤＭＡＰ（１７．８ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ、０．１当量）、及びＤＩＰＥＡ（５６６．１ｍｇ、４．３８ｍｍｏｌ、０．７６ｍＬ、３当量）をＣＨ２Ｃｌ２（２０ｍＬ）に含む混合物を脱気し、Ｎ２で３回パージしてから、混合物を２５℃で３時間にわたってＮ２雰囲気下で撹拌した。完了後、反応混合物をＨ２Ｏ（６０ｍＬ）でクエンチし、次いでＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）で希釈した。水相をＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相をブライン（６０ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮して残渣を得た。この残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、ＥｔＯＡｃ：ＰＥ：０～１３％、５％ＮＨ３・Ｈ２Ｏ／ＥｔＯＡｃ）によって精製すると、化合物ＣＡＴ１８（４１３ｍｇ、０．５８ｍｍｏｌ、４０．５％収率、９８．１％純度）が淡黄色の油状物として得られた。
ＬＣＭＳ ［Ｍ＋Ｈ］ ＋： ６９５．５
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝ ５．６８ － ５．６２ （ｍ， １Ｈ）， ５．５４ － ５．５１ （ｍ， １Ｈ）， ４．８９ － ４．８６ （ｍ， １Ｈ）， ４．６４ （ｄ， Ｊ ＝ ６．８ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．３９ － ３．３７ （ｍ， ４Ｈ）， ２．９４ （ｔ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．５２ － ２．５０ （ｍ， ６Ｈ）， ２．３６ － ２．３４ （ｍ， ４Ｈ）， ２．１２－ ２．０９ （ｍ， ２Ｈ）， １．８４ － １．７９ （ｍ， ６Ｈ）， １．７８ － １．７６ （ｍ， ４Ｈ）， １．５２ － １．５０ （ｍ， ４Ｈ）， １．４０ － １．３５ （ｍ， ２Ｈ）， １．３０ － １．２５ （ｍ， ２６Ｈ）， ０．９０ － ０．８７ （ｍ， ９Ｈ）．
実施例１．１９：ＣＡＴ１９の合成
Figure 2024508047000180
ステップ１：ｔｅｒｔ－ブチル４－ヒドロキシアゼパン－１－カルボキシレート（１９－２）
Figure 2024508047000181
ｔｅｒｔ－ブチル４－オキソアゼパン－１－カルボキシレート（３０．０ｇ、１４１ｍｍｏｌ、１当量）をＴＨＦ（３００ｍＬ）に含む混合物に、ＬｉＡｌＨ４（５．８７ｇ、１５５ｍｍｏｌ、１．１当量）を少量ずつ０℃で加え、次いで反応混合物を同じ温度で２時間撹拌した。この反応混合物を、Ｈ２Ｏ（５．８ｍＬ）、ＮａＯＨ水溶液（１７．４ｍＬ、４Ｍ）、Ｈ２Ｏ（５．８ｍＬ）で連続的に０℃でクエンチした。次いで、無水Ｎａ２ＳＯ４（２０．０ｇ）を混合物に加え、これを同じ温度で０．５時間撹拌した。反応混合物を濾過し、濾液を真空下で濃縮して粗生成物を得た。反応残渣を次のステップに直接使用した。化合物１９－２（３０．０ｇ、粗製）が黄色の油状物として得られた。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ６） δ：４．５０ （ｔ， Ｊ ＝ ４．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．６９ － ３．５５ （ｍ， １Ｈ）， ３．３１ － ３．０５ （ｍ， ４Ｈ）， １．８４ － １．７０ （ｍ， ２Ｈ）， １．７０ － １．４１ （ｍ， ２Ｈ）， １．３９ （ｓ， ９Ｈ）．
ステップ２：ｔｅｒｔ－ブチル４－（トシルオキシ）アゼパン－１－カルボキシレート（１９－３）
Figure 2024508047000182
ｔｅｒｔ－ブチル４－ヒドロキシアゼパン－１－カルボキシレート（３０．０ｇ、１３９ｍｍｏｌ、１当量）のＤＣＭ溶液（５００ｍＬ）に、ＴＥＡ（４２．３ｇ、４１８ｍｍｏｌ、５８．２ｍＬ、３当量）、ＤＭＡＰ（８．５１ｇ、６９．７ｍｍｏｌ、０．５当量）、及びＴｏｓＣｌ（３９．９ｇ、２０９ｍｍｏｌ、１．５当量）を連続的に加え、次いで混合物を２５℃で５時間撹拌した。水（１００ｍＬ）を加えて反応混合物をクエンチし、ＤＣＭ（１００ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相をブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空下で濃縮して残渣を得た。この残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（ＩＳＣＯ（登録商標）；２２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、１００ｍＬ／分で０～２０％酢酸エチル／石油エーテルグラジエントの溶離液）によって精製した。化合物１９－３（４３．０ｇ、１１６ｍｍｏｌ、８４％収率）が褐色の油状物として得られた。
ＬＣＭＳ： ［Ｍ－Ｂｏｃ］＋： ２７０．０；
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ：７．８０ － ７．７５ （ｍ， ２Ｈ）， ７．３５ － ７．３２ （ｍ， ２Ｈ）， ４．７５ － ４．５９ （ｍ， １Ｈ）， ３．６０ － ３．３６ （ｍ， ２Ｈ）， ３．３１ － ３．２３ （ｍ， ２Ｈ）， ２．４５ （ｓ， ３Ｈ）， １．９３ － １．８１ （ｍ， ４Ｈ）， １．７８ － １．６５ （ｍ， ２Ｈ）， １．４３ （ｓ， ９Ｈ）．
ステップ３：ｔｅｒｔ－ブチル４－（トリチルチオ）アゼパン－１－カルボキシレート（１９－４）
Figure 2024508047000183
ｔｅｒｔ－ブチル４－（ｐ－トリルスルホニルオキシ）アゼパン－１－カルボキシレート（２１．０ｇ、５６．８ｍｍｏｌ、１当量）及びトリフェニルメタンチオール（２０．４ｇ、７３．９ｍｍｏｌ、１．３当量）のＤＭＦ溶液（２００ｍＬ）に、Ｃｓ２ＣＯ３（３７．０ｇ、１１４ｍｍｏｌ、２当量）を加えた。この混合物を８０℃で６時間撹拌した。水（１００ｍＬ）を加えて反応混合物をクエンチし、酢酸エチル（１５０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相をブライン（２００ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空下で濃縮して残渣を得た。この残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（ＩＳＣＯ（登録商標）；３３０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、１００ｍＬ／分で０～３０％酢酸エチル／石油エーテルグラジエントの溶離液）によって精製した。化合物１９－４（２１．０ｇ、４４．３ｍｍｏｌ、３９％収率）が黄色の油状物として得られた。
ＬＣＭＳ： ［Ｍ＋Ｎａ］＋： ４９６．２
ステップ４：４－（トリチルチオ）アゼパン（１９－５）
Figure 2024508047000184
ｔｅｒｔ－ブチル４－トリチルスルファニルアゼパン－１－カルボキシレート（２０．０ｇ、４２．２ｍｍｏｌ、１当量）のＤＣＭ溶液（２００ｍＬ）に、ＴＦＡ（６１．６ｇ、５４０ｍｍｏｌ、４０．０ｍＬ、１２．８当量）を加え、反応混合物を２０℃で３時間撹拌した。反応混合物を真空下で濃縮して、褐色の油状物を得た。反応残渣を次のステップに直接使用した。化合物１９－５（２７．０ｇ、粗製、ＴＦＡ）が褐色の油状物として得られた。
ＬＣＭＳ： ［Ｍ＋Ｈ］＋： ３７４．１；
ステップ５：３－（トリチルチオ）シクロブタンアミン（１９－６）
Figure 2024508047000185
４－トリチルスルファニルアゼパン（１０．０ｇ、２０．５ｍｍｏｌ、１当量、ＴＦＡ）をＭｅＯＨ（６０ｍＬ）に含む混合物に、（ＨＣＨＯ）ｎ（１０．０ｇ、２０．５ｍｍｏｌ、１当量）、ＫＯＡｃ（３．０２ｇ、３０．８ｍｍｏｌ、１．５当量）、及びＮａＢＨ３ＣＮ（２．５８ｇ、４１．０ｍｍｏｌ、２当量）を０℃で連続的に加え、次いで反応物を２０℃で３時間撹拌した。飽和ＮＨ４Ｃｌ溶液（２０ｍＬ）を加えて反応混合物をクエンチし、酢酸エチル（３０ｍＬ×３）によって抽出してから、合わせた有機相を無水硫酸ナトリウムによって乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。この残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（ＩＳＣＯ（登録商標）；８０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、８０ｍＬ／分で０～２０％ジクロロメタン：メタノールグラジエントの溶離液）によって精製した。化合物１９－６（４．３０ｇ、１１．１ｍｍｏｌ、５４％収率）が黄色の油状物として得られた。
ＬＣＭＳ： ［Ｍ＋Ｈ］＋： ３８８．２；
ステップ６：１－メチルアゼパン－４－チオール（１９－７）
Figure 2024508047000186
１－メチル－４－トリチルスルファニル－アゼパン（４．３０ｇ、１１．１ｍｍｏｌ、１当量）のＤＣＭ溶液（４０ｍＬ）に、トリイソプロピルシラン（３．５１ｇ、２２．２ｍｍｏｌ、４．５６ｍＬ、２当量）及びＴＦＡ（９．９３ｇ、８７．１ｍｍｏｌ、６．４５ｍＬ、７．８５当量）を０℃で加えた。この混合物を２５℃で５時間撹拌した。反応混合物を減圧下で濃縮して残渣を得た後、反応残渣をＭｅＯＨ（２０ｍＬ）に加え、石油エーテルで３回洗浄し（３×１０ｍＬ）、真空下で濃縮した。反応残渣を次のステップに直接使用した。化合物１９－７（２．１０ｇ、粗製）が褐色の油状物として得られた。
ステップ７：ジ（ペンタデカン－８－イル）４，４’－（（（（１－メチルアゼパン－４－イル）チオ）カルボニル）アザンジイル）ジブタノエート（ＣＡＴ１９）
Figure 2024508047000187
１－ヘプチルオクチル４－［［４－（１－ヘプチルオクトキシ）－４－オキソ－ブチル］アミノ］ブタノエート（１．５０ｇ、２．４６ｍｍｏｌ、１当量）を乾燥ＤＣＭ（３０ｍＬ）に溶解した溶液に、ＴＥＡ（ａ７４６ｍｇ、７．３８ｍｍｏｌ、１．０３ｍＬ、３当量）及び炭酸ビス（トリクロロメチル）（３２０ｍｇ、１．０８ｍｍｏｌ、４．３９ｅ－１当量）をＮ２下０℃で加えた。得られた溶液を２０℃で１時間撹拌した。得られた反応物を減圧下で濃縮し、Ｎ２下に保った。１－メチルアゼパン－４－チオール（１．４３ｇ、９．８４ｍｍｏｌ、４当量）の乾燥ＴＨＦ溶液（３０ｍＬ）に、ＮａＯＨ（６８８ｍｇ、１７．２ｍｍｏｌ、７当量）をＮ２下０℃で加えた。この得られた溶液に、塩化カルバモイルをシリンジによってＮ２下０℃でゆっくりと加えた。得られた溶液を２０℃で１時間撹拌した。反応混合物を飽和ＮＨ４Ｃ１水溶液（１００ｍＬ）でクエンチし、次いで酢酸エチル（１００ｍＬ）で希釈した。水相を酢酸エチル（１００ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相をブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空下で濃縮して残渣を得た。この残渣をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、石油エーテル／酢酸エチル＝１０／１から２／１）によって精製した。化合物ＣＡＴ１９（７００ｍｇ、０．８９６ｍｍｏｌ、３６％収率）が黄色の油状物として得られた。
ＬＣＭＳ： ［Ｍ＋Ｈ］＋： ７８１．５；
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ：４．９０ － ４．８４ （ｍ， ２Ｈ）， ３．７９ － ３．６２ （ｍ， １Ｈ）， ３．４６ － ３．２７ （ｍ， ４Ｈ）， ２．７７ － ２．４８ （ｍ， ４Ｈ）， ２．３６ （ｓ， ３Ｈ）， ２．３３ － ２．２９ （ｍ， ４Ｈ）， ２．２０ － ２．０６ （ｍ， ２Ｈ）， １．９４ － １．８６ （ｍ， ４Ｈ）， １．８２ － １．７４ （ｍ， ２Ｈ）， １．６８ － １．６３ （ｍ， ２Ｈ）， １．５３ － １．５０ （ｍ， ８Ｈ）， １．３３ － １．２２ （ｍ， ４０Ｈ）， ０．９５ － ０．８６ （ｍ， １２Ｈ）．
実施例１．２０：ＣＡＴ２０の合成
Figure 2024508047000188
ステップ１：１－エチル－４－（トリチルチオ）アゼパン（２０－２）
Figure 2024508047000189
４－トリチルスルファニルアゼパン（１０．０ｇ、２０．５ｍｍｏｌ、１当量、ＴＦＡ）をＭｅＯＨ（１０ｍＬ）に含む混合物に、ＫＯＡｃ（３．０２ｇ、３０．８ｍｍｏｌ、１．５当量）、ＭｅＣＨＯ（４．５２ｇ、４１．０ｍｍｏｌ、５．７５ｍＬ、４０％純度、２当量）、及びＮａＢＨ３ＣＮ（２．５８ｇ、４１．０ｍｍｏｌ、２当量）を連続的に加え、次いで反応混合物を２０℃で３時間撹拌した。飽和ＮＨ４Ｃｌ溶液（２０ｍＬ）を加えて反応混合物をクエンチし、酢酸エチル（３０ｍＬ×３）によって抽出してから、合わせた有機相を無水硫酸ナトリウムによって乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。この残渣をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、石油エーテル／酢酸エチル＝１０／１から２／１）によって精製した。化合物２０－２（８．００ｇ、粗製）が黄色の油状物として得られた。
ＬＣＭＳ： ［Ｍ＋Ｈ］＋： ４０２．２
ステップ２：１－エチルアゼパン－４－チオール（２０－３）
Figure 2024508047000190
１－エチル－４－トリチルスルファニル－アゼパン（８．００ｇ、１９．９ｍｍｏｌ、１当量）のＤＣＭ溶液（４０ｍＬ）に、トリイソプロピルシラン（６．３１ｇ、３９．８ｍｍｏｌ、８．１８ｍＬ、２当量）及びＴＦＡ（１７．８ｇ、１５６ｍｍｏｌ、１１．６ｍＬ、７．８５当量）を０℃で加えた。この混合物を２５℃で１２時間撹拌した。反応混合物を減圧下で濃縮して残渣を得た後、反応残渣をＭｅＯＨ（２０ｍＬ）に加え、石油エーテルで３回洗浄し（３×１０ｍＬ）、真空下で濃縮した。反応残渣を次のステップに直接使用した。化合物２０－３（２．３０ｇ、粗製）が褐色の油状物として得られた。
ステップ３：ジ（ペンタデカン－８－イル）４，４’－（（（（１－エチルアゼパン－４－イル）チオ）カルボニル）アザンジイル）ジブタノエート（ＣＡＴ２０）
Figure 2024508047000191
１－ヘプチルオクチル４－［［４－（１－ヘプチルオクトキシ）－４－オキソ－ブチル］アミノ］ブタノエート（２．００ｇ、３．２８ｍｍｏｌ、１当量）を乾燥ＤＣＭ（３０ｍＬ）に溶解した溶液に、ＴＥＡ（９９５ｍｇ、９．８４ｍｍｏｌ、１．３７ｍＬ、３当量）及び炭酸ビス（トリクロロメチル）（３００ｍｇ、１．０１ｍｍｏｌ、３．０８ｅ－１当量）をＮ２下０℃で加えた。得られた溶液を２０℃で１時間撹拌した。得られた反応物を減圧下で濃縮し、Ｎ２下に保った。１－エチルアゼパン－４－チオール（２．０９ｇ、１３．１ｍｍｏｌ、４当量）の乾燥ＴＨＦ溶液（３０ｍＬ）に、ＮａＯＨ（９１８ｍｇ、２３．０ｍｍｏｌ、７当量）をＮ２下０℃で加えた。この得られた溶液に、塩化カルバモイルをシリンジによってＮ２下０℃でゆっくりと加えた。得られた溶液を２０℃で１時間撹拌した。反応混合物を飽和ＮＨ４Ｃ１水溶液（１００ｍＬ）でクエンチし、次いで酢酸エチル（１００ｍＬ）で希釈した。水相を酢酸エチル（１００ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相をブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空下で濃縮して残渣を得た。この残渣をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、石油エーテル／酢酸エチル＝１０／１から２／１）によって精製した。化合物ＣＡＴ２０（１．８０ｇ、２．２６ｍｍｏｌ、６９％収率）が黄色の油状物として得られた。
ＬＣＭＳ： ［Ｍ＋Ｈ］＋： ７９６．４；
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ：４．９０ － ４．８４ （ｍ， ２Ｈ）， ３．７０ － ３．６３ （ｍ， １Ｈ）， ３．４４ － ３．２９ （ｍ， ４Ｈ）， ２．８４ － ２．７０ （ｍ， ２Ｈ）， ２．６２ － ２．５２ （ｍ， ２Ｈ）， ２．３４ － ２．２７ （ｍ， ４Ｈ）， ２．１８ － ２．０７ （ｍ， ２Ｈ）， １．９６ － １．７３ （ｍ， １０Ｈ）， １．５３ － １．５０ （ｍ， ８Ｈ）， １．３２ － １．２５ （ｍ， ４０Ｈ）， １．０８ （ｔ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， ３Ｈ）， ０．９１ － ０．８６ （ｍ， １２Ｈ）．
実施例１．２１：ＣＡＴ２１の合成
Figure 2024508047000192
ステップ１：ｔｅｒｔ－ブチル４－（トシルオキシ）ピペリジン－１－カルボキシレート（２１－２）
Figure 2024508047000193
ｔｅｒｔ－ブチル４－ヒドロキシピペリジン－１－カルボキシレート（５０ｇ、２４８．４３ｍｍｏｌ、１当量）のＣＨ２Ｃｌ２溶液（５００ｍＬ）に、ＴＥＡ（５０．２８ｇ、４９６．８６ｍｍｏｌ、６９．２ｍＬ、２当量）、ＤＭＡＰ（１．５２ｇ、１２．４２ｍｍｏｌ、０．０５当量）、及びＴｏｓＣｌ（７１．０４ｇ、３７２．６５ｍｍｏｌ、１．５当量）をＮ２下０℃で加えた。この混合物を２０℃で１６時間撹拌した。完了後、反応混合物をＣＨ２Ｃｌ２（３００ｍＬ）で希釈し、ブライン（３００ｍＬ×３）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮して残渣を得た。この残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（２２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、ＥｔＯＡｃ：ＰＥ：０～２５％）によって精製して、化合物２１－２（８２．６ｇ、２３２．３８ｍｍｏｌ、９１．８％収率）を黄色の固体として得た。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝ ７．８０ （ｄ， Ｊ ＝ ８．４ Ｈｚ， ２Ｈ）， ７．３４ （ｄ， Ｊ ＝ ８．０ Ｈｚ， ２Ｈ）， ４．７０ － ４．６５ （ｍ， １Ｈ）， ３．５９ － ３．５７ （ｍ， ２Ｈ）， ３．２８ － ３．２３ （ｍ， ２Ｈ）， ２．４５ （ｓ， ３Ｈ）， １．７７ － １．７４ （ｍ， ２Ｈ）， １．７０ － １．６７ （ｍ， ２Ｈ）， １．４３ （ｓ， ９Ｈ）．
ステップ２：ｔｅｒｔ－ブチル４－（トリチルチオ）ピペリジン－１－カルボキシレート（２１－３）
Figure 2024508047000194
ｔｅｒｔ－ブチル４－（ｐ－トリルスルホニルオキシ）ピペリジン－１－カルボキシレート（４０ｇ、１１２．５３ｍｍｏｌ、１当量）、トリフェニルメタンチオール（３７．３２ｇ、１３５．０４ｍｍｏｌ、１．２当量）、ＮａＩ（８４３．３９ｍｇ、５．６３ｍｍｏｌ、０．０５当量）、Ｃｓ２ＣＯ３（５５．００ｇ、１６８．８０ｍｍｏｌ、１．５当量）をＤＭＦ（３００ｍＬ）に含む混合物を脱気し、Ｎ２で３回パージしてから、混合物を５０℃で３時間にわたってＮ２雰囲気下で撹拌した。添加後、反応混合物をＨ２Ｏ（６００ｍＬ）でクエンチし、次いでＥｔＯＡｃ（５００ｍＬ）で希釈した。水相をＥｔＯＡｃ（５００ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相をブライン（５００ｍＬ×３）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮して粗生成物を得た。この粗生成物をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（３３０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、ＥｔＯＡｃ：ＰＥ：０～５％）によって精製して、化合物２１－３（７５．８ｇ、１６４．９１ｍｍｏｌ、７５．１％収率）を黄色の油状物として得た。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤ３ＯＤ－ｄ４） δ ＝ ７．３３ － ７．３１ （ｍ， ５Ｈ）， ７．２９ － ７．２６ （ｍ， １０Ｈ）， ３．７０ － ３．６７ （ｍ， ２Ｈ）， ２．６９ － ２．６４ （ｍ， ２Ｈ）， ２．４０ － ２．３５ （ｍ， １Ｈ）， １．５７ － １．４８ （ｍ， ２Ｈ）， １．４５ （ｓ， ９Ｈ）， １．４２ －１．３４ （ｍ， ２Ｈ）．
ステップ３：４－（トリチルチオ）ピペリジン（２１－４）
Figure 2024508047000195
ｔｅｒｔ－ブチル４－トリチルスルファニルピペリジン－１－カルボキシレート（７５ｇ、１６３．１７ｍｍｏｌ、１当量）のＤＣＭ溶液（５００ｍＬ）に、ＴＦＡ（１５４．００ｇ、１．３５ｍｏｌ、１００ｍＬ、８．２８当量）をＮ２下２５℃で加えた。添加後、混合物を２５℃で５時間撹拌した。完了後、混合物を真空中で濃縮した。ＴＦＡのほとんどを回転蒸発によって除去し、残留ＴＦＡをＭｅＯＨと同時蒸発させた。残渣をＰＥ（５００ｍＬ）によって２５℃で０．５時間にわたって粉砕した。残渣混合物を濾過し、濾過ケークをＰＥ（１００ｍＬ×２）で洗浄した。濾過ケークを真空中で濃縮して、化合物２１－４（５６．８ｇ、粗製、ＴＦＡ）を白色の固体として得た。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝ ９．００ － ８．８５ （ｍ， １Ｈ）， ７．４１ － ７．３８ （ｍ， ６Ｈ）， ７．２３ － ７．２０ （ｍ， ６Ｈ）， ７．１９ － ７．１３ （ｍ， ３Ｈ）， ３．０５ － ３．０３ （ｍ， ２Ｈ）， ２．６４ － ２．６３ （ｍ， ２Ｈ）， ２．３６ － ２．３２ （ｍ， １Ｈ）， １．５４ － １．４２ （ｍ， ４Ｈ）．
ステップ４：１－イソプロピル－４－（トリチルチオ）ピペリジン（２１－５）
Figure 2024508047000196
４－トリチルスルファニルピペリジン（１５ｇ、３１．６８ｍｍｏｌ、１当量、ＴＦＡ）のＭｅＣＮ溶液（１５０ｍＬ）に、Ｋ２ＣＯ３（１３．１３ｇ、９５．０３ｍｍｏｌ、３当量）及び２－ヨードプロパン（５．９２ｇ、３４．８４ｍｍｏｌ、３．４８ｍＬ、１．１当量）を加えた。この混合物を６０℃で１６時間撹拌した。完了後、反応混合物を濾過し、濾液を真空中で濃縮して残渣を得た。この残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（８０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、ＭｅＯＨ／ＥｔＯＡｃ：０～５％）によって精製して、化合物２１－５（８．２ｇ、２０．４２ｍｍｏｌ、６４．４６％収率）を黄色の油状物として得た。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝ ７．５５ － ７．５０ （ｍ， ６Ｈ）， ７．３２ － ７．２７ （ｍ， ６Ｈ）， ７．２４ － ７．１８ （ｍ， ３Ｈ）， ２．６７ － ２．６１ （ｍ， ２Ｈ）， ２．６１ － ２．５３ （ｍ， １Ｈ）， ２．２５ － ２．１５ （ｍ， １Ｈ）， １．９４ （ｔ， Ｊ ＝ ９．０ Ｈｚ， ２Ｈ）， １．５０ － １．４０ （ｍ， ４Ｈ）， ０．９６ （ｄ， Ｊ ＝ ６．４ Ｈｚ， ６Ｈ）．
ステップ５：１－イソプロピルピペリジン－４－チオール（２１－６）
Figure 2024508047000197
１－イソプロピル－４－トリチルスルファニル－ピペリジン（８．１ｇ、２０．１７ｍｍｏｌ、１当量）のＣＨ２Ｃｌ２溶液（８０ｍＬ）に、ＴＦＡ（３０．８０ｇ、２７０．１３ｍｍｏｌ、２０ｍＬ、１３．３９当量）及びＴＩＰＳ（７．９１ｇ、４０．３４ｍｍｏｌ、２当量）をＮ２下０℃で加えた。添加後、得られた混合物を２０℃で１６時間撹拌した。完了後、反応混合物を減圧下で濃縮してＴＦＡを除去し、濾過した。濾液をＭｅＯＨ（１５０ｍＬ）で希釈し、ＰＥ（５０ｍＬ×５）で抽出した。ＭｅＯＨ層を減圧下で濃縮して、化合物２１－６（５．６ｇ、粗製、ＴＦＡ）を黄色の油状物として得た。この粗生成物をさらに精製することなく次のステップで使用した。
ステップ６：ｄジ（ペンタデカン－８－イル）４，４’－（（（（１－イソプロピルピペリジン－４－イル）チオ）カルボニル）アザンジイル）ジブタノエート（ＣＡＴ２１）
Figure 2024508047000198
１－ヘプチルオクチル４－［［４－（１－ヘプチルオクトキシ）－４－オキソ－ブチル］アミノ］ブタノエート（２ｇ、３．２８ｍｍｏｌ、１当量）を乾燥ＣＨ２Ｃｌ２（２５ｍＬ）に溶解した溶液に、ＴＥＡ（９９５．３１ｍｇ、９．８４ｍｍｏｌ、１．３７ｍＬ、３当量）及びトリホスゲン（５８３．８ｍｇ、１．９７ｍｍｏｌ、０．６当量）をＮ２下０℃で加えた。得られた溶液を２０℃で１時間撹拌した。得られた反応物を減圧下で濃縮した。１－イソプロピルピペリジン－４－チオール（３．１４ｇ、１１．４８ｍｍｏｌ、３．５当量、ＴＦＡ）を乾燥ＴＨＦ（３０ｍＬ）に溶解した溶液に、ＮａＯＨ（９１８．０３ｍｇ、２２．９５ｍｍｏｌ、７当量）をＮ２下０℃で加えた。この得られた溶液に、ＴＨＦ（２０ｍＬ）に溶解した塩化カルバモイルを、シリンジによってＮ２下０℃でゆっくりと加えた。得られた溶液を２０℃で１５時間撹拌した。完了後、反応混合物を０℃のＮＨ４Ｃｌ（６０ｍＬ）によってクエンチし、次いでＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）で希釈した。水相をＥｔＯＡｃ（６０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相をブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮して残渣を得た。この残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、ＥｔＯＡｃ：ＰＥ：０～１２％、５％ＮＨ３・Ｈ２Ｏ／酢酸エチル）によって精製し、ポジティブ分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗｅｌｃｈ Ｕｌｔｉｍａｔｅ ＸＢ－ＮＨ２ ２５０＊５０＊１０ｕｍ；移動相：［ヘキサン－ＥｔＯＨ］；Ｂ％：０％－２０％、１５分）によって精製して、ＣＡＴ２１（４２８ｍｇ、０．５２ｍｍｏｌ、５７．７％収率、９７％純度）を黄色の油状物として得た。
ＬＣＭＳ ［Ｍ＋Ｈ］ ＋：７９５．６；
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝ ４．９０ － ４．８４ （ｍ， ２Ｈ）， ３．４０ － ３．３７ （ｍ， ４Ｈ）， ２．８２ － ２．７９ （ｍ， ２Ｈ）， ２．７０ － ２．６７ （ｍ， １Ｈ）， ２．３５ － ２．３０ （ｍ， ６Ｈ）， ２．０４ － ２．０１ （ｍ， ２Ｈ）， １．９５ － １．８５ （ｍ， ４Ｈ）， １．７２ － １．６６ （ｍ， ３Ｈ）， １．５２－ １．５０ （ｍ， ８Ｈ）， １．３２ － １．２６ （ｍ， ４０Ｈ）， １．０３ （ｄ， Ｊ ＝ ６．４ Ｈｚ ６Ｈ）， ０．９０ － ０．８６ （ｍ， １２Ｈ）．
実施例１．２２：ＣＡＴ２２の合成
Figure 2024508047000199
ステップ１：１－エチル－４－（トリチルチオ）ピペリジン（２２－５）
Figure 2024508047000200
４－トリチルスルファニルピペリジン（１５．０ｇ、３１．９ｍｍｏｌ、１．００当量、ＴＦＡ）のＤＭＦ溶液（１００ｍＬ）に、Ｋ２ＣＯ３（１３．１ｇ、９５．０ｍｍｏｌ、３．００当量）及びヨードエタン（４．４５ｇ、２８．５ｍｍｏｌ、２．２８ｍＬ、０．９０当量）を加えた。この混合物を２５℃で１６時間撹拌した。反応混合物を水（１５０ｍＬ）によってクエンチし、次いで酢酸エチル（１００ｍＬ）で希釈した。水相を酢酸エチル（１５０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相をブライン（１００ｍＬ×３）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮して残渣を得た。この残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（８０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、酢酸エチル：石油エーテル：０～４０％）によって精製し、次いでこの残渣を逆相ＭＰＬＣ（ＭｅＣＮ：Ｈ２Ｏ：０～４０％）によって精製して、化合物２２－５（８．６０ｇ、２２．０ｍｍｏｌ、７８．８％収率、９９％純度）を黄色の油状物として得た。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＭｅＯＤ－ｄ４） δ ＝ ７．５３－７．５０ （ｍ， ６Ｈ）， ７．３５－７．３１ （ｍ， ６Ｈ）， ７．２８－７．２３ （ｍ， ３Ｈ）， ３．３９－３．３２ （ｍ， ２Ｈ）， ３．１６－３．００ （ｍ， ３Ｈ）， ２．７０－２．６３ （ｍ， ２Ｈ）， ２．４８－２．４０ （ｍ， １Ｈ）， １．８７－１．６３ （ｍ， ２Ｈ）， １．５７－１．４７ （ｍ， ２Ｈ）， １．３３－１．２４ （ｍ， ３Ｈ）．
ステップ２：１－エチルピペリジン－４－チオール（２２－６）
Figure 2024508047000201
１－エチル－４－トリチルスルファニル－ピペリジン（４．５０ｇ、１１．６ｍｍｏｌ、１．００当量）をＴＦＡ（１５．０ｍＬ）及びジクロロメタン（５０．０ｍＬ）に含む混合物である混合物を脱気し、窒素雰囲気で３回パージしてから、トリイソプロピルシラン（３．６８ｇ、２３．２ｍｍｏｌ、４．７７ｍＬ、２．００当量）を０℃でゆっくりと加え、次いでこの混合物を２０℃で３時間にわたって窒素雰囲気下で撹拌した。反応混合物を減圧下で濃縮してＴＦＡを除去し、濾過した。濾液をメチルアルコール（５０．０ｍＬ）で希釈し、石油エーテル（５０．０ｍＬ×５）で抽出した。メチルアルコール層を減圧下で濃縮して粗生成物を得て、化合物２２－６（３．０１ｇ、粗製、ＴＦＡ塩）を黄色の油状物として得た。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ６） δ ＝ ３．４３－３．４０ （ｍ， ２Ｈ）， ３．１８－３．１０ （ｍ， １Ｈ）， ３．０８－２．９７ （ｍ， ２Ｈ）， ２．９４－２．８７ （ｍ， ２Ｈ）， ２．０８ （ｄ， Ｊ ＝ １４ Ｈｚ， ２Ｈ）， １．８４－１．７３ （ｍ， ２Ｈ）， １．２４－１．１８ （ｍ， ３Ｈ）．
ステップ３：ジ（ペンタデカン－８－イル）４，４’－（（（（１－エチルピペリジン－４－イル）チオ）カルボニル）アザンジイル）ジブタノエート（ＣＡＴ２２）
Figure 2024508047000202
１－ヘプチルオクチル４－［［４－（１－ヘプチルオクトキシ）－４－オキソ－ブチル］アミノ］ブタノエート（２．００ｇ、３．３０ｍｍｏｌ、１．００当量）を乾燥ジクロロメタン（２５．０ｍＬ）に溶解した溶液に、ＴＥＡ（９９５ｍｇ、９．８０ｍｍｏｌ、１．３７ｍＬ、３．００当量）及びトリホスゲン（５４０ｍｇ、１．８０ｍｍｏｌ、０．５０当量）をＮ２下０℃で加えた。得られた溶液を２０℃で１時間撹拌した。得られた反応物を減圧下で濃縮した。１－エチルピペリジン－４－チオール（２．９８ｇ、１１．５ｍｍｏｌ、３．５０当量、ＴＦＡ塩）を溶解した乾燥ＴＨＦ（３０．０ｍＬ）に、ＮａＯＨ（９１８ｍｇ、２３．０ｍｍｏｌ、７．００当量）を窒素雰囲気下０℃で加えた。この得られた溶液に、ＴＨＦ（２５．０ｍＬ）に溶解した塩化カルバモイルを、シリンジによってＮ２下０℃でゆっくりと加えた。得られた溶液を２０℃で１５時間撹拌した。反応混合物を０℃のＮＨ４Ｃｌ（６０．０ｍＬ）によってクエンチし、次いで酢酸エチル（６０．０ｍＬ）で希釈した。水相を酢酸エチル（６０．０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相をブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮して残渣を得た。この残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（ＩＳＣＯ（登録商標）；１２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、１００ｍＬ／分で０～５０％酢酸エチル／石油エーテルグラジエントの溶離液）によって精製して、化合物ＣＡＴ２２（２６８ｍｇ、０．３４ｍｍｏｌ、１０．３％収率、９８．８％純度）を淡黄色の油状物として得た。
ＬＣＭＳ ［Ｍ＋１］ ＋ ：７８１．７；
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝ ４．９２－４．８６ （ｍ， ２Ｈ）， ３．４６－３．３２ （ｍ， ４Ｈ）， ２．８７－２．８４ （ｍ， ２Ｈ）， ２．４５－２．４０ （ｍ， ２Ｈ）， ２．３６－２．３１ （ｍ， ４Ｈ）， ２．１６ （ ｔ， Ｊ ＝ ９．６ Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．０７－２．０４ （ｍ， ２Ｈ）， １．９１ （ｓ， ４Ｈ）， １．７７－１．６８ （ｍ， ２Ｈ）， １．６３－１．６２ （ｍ， １Ｈ）， １．５４－１．５３ （ｍ， ８Ｈ）， １．３４－１．２８ （ｍ， ４０Ｈ）， １．１０ （ｔ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， ３Ｈ）， ０．９２－０．８８ （ｍ， １２Ｈ）．
実施例１．２２：ＣＡＴ２３の合成
Figure 2024508047000203
ステップ１：ｔｅｒｔ－ブチル４－（トシルオキシ）ピペリジン－１－カルボキシレート（２３－８）
Figure 2024508047000204
ｔｅｒｔ－ブチル４－ヒドロキシピペリジン－１－カルボキシレート（７０ｇ、３４７．８１ｍｍｏｌ、１当量）のＣＨ２Ｃｌ２溶液（７５０ｍＬ）に、ＴＥＡ（７０．３９ｇ、６９５．６１ｍｍｏｌ、９６．８２ｍＬ、２当量）及びＤＭＡＰ（２．１２ｇ、１７．３９ｍｍｏｌ、０．０５当量）をＮ２下２０℃で加えた。添加後、混合物を２０℃で０．５時間撹拌し、次いで、ＴｏｓＣｌ（７９．５７ｇ、４１７．３７ｍｍｏｌ、１．２当量）を少量ずつＮ２下０℃で加えた。得られた混合物を２０℃で１６時間撹拌した。完了後、反応混合物をＣＨ２Ｃｌ２（８００ｍＬ）で希釈し、Ｈ２Ｏ（５００ｍＬ×３）、ブライン（５００ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮して粗生成物を得た。この粗生成物を（ＰＥ／ＥｔＯＡｃ＝１０／１、５００ｍＬ×２）によって２５℃で１時間粉砕して、化合物２３－８（２３０．６ｇ、６４８．７６ｍｍｏｌ、９３．３％収率）を淡黄色の固体として得た。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝ ７．８２ （ｄ， Ｊ ＝ ８．０ Ｈｚ， ２Ｈ）， ７．３６ （ｄ， Ｊ ＝ ８．０ Ｈｚ， ２Ｈ）， ４．７２ － ４．６６ （ｍ， １Ｈ）， ３．６４ － ３．５７ （ｍ， ２Ｈ）， ３．３２ － ３．２４ （ｍ， ２Ｈ）， ２．４７ （ｓ， ３Ｈ）， １．８２ － １．７５ （ｍ， ２Ｈ）， １．７４ － １．６８ （ｍ， ２Ｈ）， １．４５ （ｓ， ９Ｈ）．
ステップ２：ｔｅｒｔ－ブチル４－（トリチルチオ）ピペリジン－１－カルボキシレート（２３－９）
Figure 2024508047000205
ｔｅｒｔ－ブチル４－（ｐ－トリルスルホニルオキシ）ピペリジン－１－カルボキシレート（１１５ｇ、３２３．５４ｍｍｏｌ、１当量）、トリフェニルメタンチオール（１０７．３１ｇ、３８８．２４ｍｍｏｌ、１．２当量）、ＮａＩ（２．４２ｇ、１６．１８ｍｍｏｌ、０．０５当量）、Ｃｓ２ＣＯ３（１５８．１２ｇ、４８５．３０ｍｍｏｌ、１．５当量）をＤＭＦ（７００ｍＬ）に含む混合物を脱気し、Ｎ２で３回パージしてから、混合物を５０℃で３時間にわたってＮ２雰囲気下で撹拌した。完了後、反応混合物をＨ２Ｏ（１０００ｍＬ）によってクエンチし、次いでＥｔＯＡｃ（８００ｍＬ）で希釈した。水相をＥｔＯＡｃ（８００ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相をブライン（６００ｍＬ×３）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮して残渣を得た。この残渣をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＰＥ／ＥｔＯＡｃ＝２０／１から５／１）によって精製して、化合物２３－９（１７８．８ｇ、３８９．００ｍｍｏｌ、６６．７％収率）を黄色の油状物として得た。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝ ７．４３ － ７．４０ （ｍ， ６Ｈ）， ７．２１ － ７．１７ （ｍ， ６Ｈ）， ７．１３ － ７．１１ （ｍ， ３Ｈ）， ３．６２ －３．６０ （ｍ， ２Ｈ）， ２．６０ － ２．５３ （ｍ， ２Ｈ）， ２．４２ － ２．３１ （ｍ， １Ｈ）， ２．２６ － ２．１４ （ｍ， １Ｈ）， ２．１０ － ２．０１ （ｍ， １Ｈ）， １．４８ － １．４３ （ｍ， ２Ｈ）， １．３２ （ｓ， ９Ｈ）．
ステップ３：１－メチル－４－（トリチルチオ）ピペリジン（２３－１０）
Figure 2024508047000206
ｔｅｒｔ－ブチル４－トリチルスルファニルピペリジン－１－カルボキシレート（７５ｇ、１６３．１７ｍｍｏｌ、１当量）のＴＨＦ溶液（１０００ｍＬ）に、ＬＡＨ（９．２９ｇ、２４４．７６ｍｍｏｌ、１．５当量）を少量ずつＮ２下０℃で加えた。添加後、混合物を７０℃で１６時間撹拌した。完了後、反応混合物をＴＨＦ（５００ｍＬ）で希釈し、次いで、Ｈ２Ｏ（９．３ｍＬ）、ＮａＯＨ水溶液（９．３ｍＬ、４Ｍ）、Ｈ２Ｏ（２８ｍＬ）、及びＮａ２ＳＯ４（１００ｇ）を連続的にＮ２下０℃で加えた。反応混合物を濾過し、濾液を真空中で濃縮して残渣を得た。この残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（３３０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２：０～５％、１％ＮＨ３／ＭｅＯＨ）によって精製して、化合物２３－１０（４７．８ｇ、１２０．２８ｍｍｏｌ、４４．１％収率、９４％純度）を黄色の油状物として得た。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝ ７．４３ － ７．４１ （ｍ， ６Ｈ）， ７．２１ － ７．１７ （ｍ， ６Ｈ）， ７．１３ － ７．０９ （ｍ， ３Ｈ）， ２．４９ － ２．４５ （ｍ， ２Ｈ）， ２．１２ － ２．０７ （ｍ， １Ｈ）， ２．０５ （ｓ， ３Ｈ）， １．７６ － １．７１ （ｍ， ２Ｈ）， １．４１ － １．３３ （ｍ， ４Ｈ）．
ステップ４：１－メチルピペリジン－４－チオール（２３－３）
Figure 2024508047000207
１－メチル－４－トリチルスルファニル－ピペリジン（７ｇ、１８．７４ｍｍｏｌ、１当量）のＣＨ２Ｃｌ２溶液（６０ｍＬ）に、ＴＦＡ（３０．８０ｇ、２７０．１３ｍｍｏｌ、２０ｍＬ、１４．４２当量）及びＴＩＰＳ（７．３４ｇ、３７．４８ｍｍｏｌ、２当量）をＮ２下０℃で加えた。添加後、得られた混合物を２０℃で１６時間撹拌した。完了後、反応混合物を減圧下で濃縮してＴＦＡを除去し、濾過した。濾液をＭｅＯＨ（１００ｍＬ）で希釈し、ＰＥ（５０ｍＬ×５）で抽出した。ＭｅＯＨ層を減圧下で濃縮して、化合物２３－３（４．５ｇ、粗製、ＴＦＡ）を黄色の油状物として得た。この粗生成物をさらに精製することなく次のステップで使用した。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝ ３．７４ － ３．７１ （ｍ， ２Ｈ）， ３．５１ － ３．４８ （ｍ， １Ｈ）， ３．３３ － ３．２７ （ｍ， １Ｈ）， ２．８９ － ２．８５ （ｍ， ３Ｈ）， ２．０１ － ２．７６ （ｍ， １Ｈ）， ２．５１ － ２．３９ （ｍ， １Ｈ）， ２．２８ － ２．２５ （ｍ， １Ｈ）， ２．０８ － １．９６ （ｍ， １Ｈ）， １．９１ － １．８７ （ｍ， １Ｈ）．
ステップ５：ｔｅｒｔ－ブチル４－（（４－オキソ－４－（ペンタデカン－８－イルオキシ）ブチル）アミノ）ブタノエート（２３－２）
Figure 2024508047000208
１－ヘプチルオクチル４－［（４－ｔｅｒｔ－ブトキシ－４－オキソ－ブチル）－（４－ニトロフェニル）スルホニル－アミノ］ブタノエート（１５．６ｇ、２４．３４ｍｍｏｌ、１当量）のＤＭＦ溶液（１００ｍＬ）に、Ｃｓ２ＣＯ３（１５．８６ｇ、４８．６８ｍｍｏｌ、２当量）及びベンゼンチオール（６．１８ｇ、５６．０９ｍｍｏｌ、５．７２ｍＬ、２．３０当量）を加えた。この混合物を２５℃で１６時間にわたってＮ２下で撹拌した。完了後、ＮａＯＨの溶液（１５０ｍＬ、１Ｍ）を加えて反応混合物をクエンチし、次いでＥｔＯＡｃ（１５０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機層をブライン（６０ｍＬ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。この残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（４０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、ＥｔＯＡｃ：ＰＥ：０～３５％）によって精製して、化合物２３－２（８．７ｇ、１９．０９ｍｍｏｌ、７８．４％収率）を黄色の油状物として得た。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝ ４．９０ － ４．８４ （ｍ， １Ｈ）， ２．６４ － ２．６１ （ｍ， ４Ｈ）， ２．３３ （ｔ， Ｊ ＝ ７．６ Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．２５ （ｔ， Ｊ ＝ ７．６ Ｈｚ， ２Ｈ）， １．８０ － １．７６ （ｍ， ４Ｈ）， １．５３ － １．４８ （ｍ， ４Ｈ）， １．４５ （ｓ， ９Ｈ）， １．３０ － １．２６ （ｍ， ２０Ｈ）， ０．９０ － ０．８６ （ｍ， ６Ｈ）．
ステップ６：ｔｅｒｔ－ブチル４－（（（（１－メチルピペリジン－４－イル）チオ）カルボニル）（４－オキソ－４－（ペンタデカン－８－イルオキシ）ブチル）アミノ）ブタノエート（２３－４）
Figure 2024508047000209
１－ヘプチルオクチル４－［（４－ｔｅｒｔ－ブトキシ－４－オキソ－ブチル）アミノ］ブタノエート（２ｇ、４．３９ｍｍｏｌ、１当量）を乾燥ＣＨ２Ｃｌ２（３０ｍＬ）に溶解した溶液に、Ｅｔ３Ｎ（１．３３ｇ、１３．１７ｍｍｏｌ、１．８ｍＬ、３当量）及びトリホスゲン（７８１．４１ｍｇ、２．６３ｍｍｏｌ、０．６当量）をＮ２下０℃で加えた。得られた溶液を２０℃で１時間撹拌した。得られた反応物を減圧下で濃縮し、Ｎ２下に保った。１－メチルピペリジン－４－チオール（３．７７ｇ、１５．３６ｍｍｏｌ、３．５当量、ＴＦＡ）を乾燥ＴＨＦ（４０ｍＬ）に溶解した溶液に、ＮａＯＨ（１．２３ｇ、３０．７２ｍｍｏｌ、７当量）をＮ２下０℃で加えた。この得られた溶液に、ＴＨＦ（２０ｍＬ）に溶解した塩化カルバモイルを、シリンジによってＮ２下０℃でゆっくりと加えた。得られた溶液を２０℃で１５時間撹拌した。完了後、反応混合物を０℃のＮＨ４Ｃｌ（６０ｍＬ）によってクエンチし、次いでＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）で希釈した。水相をＥｔＯＡｃ（６０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相をブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮して残渣を得た。この残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（４０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、ＥｔＯＡｃ：ＰＥ：０～２５％）によって精製して、化合物２３－４（１．５ｇ、１．８１ｍｍｏｌ、４２．７％収率、７４％純度）を黄色の油状物として得た。
ＬＣＭＳ ［Ｍ＋Ｈ］ ＋： ６１３．３
ステップ７：４－（（（（１－メチルピペリジン－４－イル）チオ）カルボニル）（４－オキソ－４－（テトラデカン－７－イルオキシ）ブチル）アミノ）ブタン酸（２３－５）
Figure 2024508047000210
１－ヘプチルオクチル４－［（４－ｔｅｒｔ－ブトキシ－４－オキソ－ブチル）－［（１－メチル－４－ピペリジル）スルファニルカルボニル］アミノ］ブタノエート（１．５ｇ、２．４５ｍｍｏｌ、１当量）のＣＨ２Ｃｌ２溶液（１５ｍＬ）に、ＴＦＡ（７．７０ｇ、６７．５３ｍｍｏｌ、５ｍＬ）をＮ２下で加えた。この混合物を２５℃で３時間撹拌した。完了後、反応混合物を減圧下で濃縮して溶媒を除去し、化合物２３－５（１．６ｇ、粗製、ＴＦＡ）を黄色の油状物として得た。この粗生成物をさらに精製することなく次のステップで直接使用した。
ステップ８：（Ｚ）－ノナ－２－エン－１－イル４－（（（（１－メチルピペリジン－４－イル）チオ）カルボニル）（４－オキソ－４－（ペンタデカン－８－イルオキシ）ブチル）アミノ）ブタノエート（ＣＡＴ２３）
Figure 2024508047000211
４－［［４－（１－ヘプチルオクトキシ）－４－オキソ－ブチル］－［（１－メチル－４－ピペリジル）スルファニルカルボニル］アミノ］ブタン酸（１．４ｇ、２．０９ｍｍｏｌ、１当量、ＴＦＡ）のＣＨ２Ｃｌ２溶液（２０ｍＬ）に、ＥＤＣＩ（１．２０ｇ、６．２６ｍｍｏｌ、３当量）、ＨＯＢｔ（８４５．９ｍｇ、６．２６ｍｍｏｌ、３当量）、及びＤＩＰＥＡ（８０９．１ｍｇ、６．２６ｍｍｏｌ、１．１ｍＬ、３当量）をＮ２下０℃で加えた。添加後、混合物をこの温度で０．５時間撹拌し、次いで、（Ｚ）－ノナ－２－エン－１－オール（８９０．５ｍｇ、６．２６ｍｍｏｌ、３当量）を滴加した。得られた混合物を２０℃で１５．５時間撹拌した。完了後、反応混合物をＨ２Ｏ（６０ｍＬ）によってクエンチし、次いでＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）で希釈した。水相をＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相をブライン（６０ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮して残渣を得た。この残渣をポジティブ分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗｅｌｃｈ Ｕｌｔｉｍａｔｅ ＸＢ－ＣＮ ２５０＊５０＊１０ｕｍ；移動相：［ヘキサン－ＥｔＯＨ］；Ｂ％：０％－１５％、８分）によって精製して、ＣＡＴ２３（６８２ｍｇ、０．９８ｍｍｏｌ、４７．７％収率、９８％純度）を淡黄色の油状物として得た。
ＬＣＭＳ ［Ｍ＋Ｈ］ ＋ ： ６８２．３
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝ ５．６６ － ５．６１ （ｍ， １Ｈ）， ５．５５ － ５．５０ （ｍ， １Ｈ）， ４．８８ － ４．８５ （ｍ， １Ｈ）， ４．６３ （ｂｒ ｄ， Ｊ ＝ ６．４ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．４５ － ３．３２ （ｍ， ５Ｈ）， ２．７８ －２．７２ （ｍ， ２Ｈ）， ２．３３ － ２．３０ （ｍ， ４Ｈ）， ２．２６ （ｓ， ３Ｈ）， ２．１６ － ２．０８ （ｍ， ４Ｈ）， ２．０３ － １．９９ （ｍ， ２Ｈ）， １．９２ － １．８５ （ｍ， ４Ｈ）， １．７３ － １．６５ （ｍ， ２Ｈ）， １．５５ － １．４８ （ｍ， ４Ｈ）， １．３７ － １．３４ （ｍ， ２Ｈ）， １．３０ － １．２２ （ｍ， ２６Ｈ）， ０．８９ － ０．８６ （ｍ， ９Ｈ）．
実施例１．２４：ＣＡＴ２４の合成
Figure 2024508047000212
ステップ１：１－（２－クロロエチル）ピペリジン（２）：（ＥＣ２０９８－１９）
Figure 2024508047000213
２－（１－ピペリジル）エタノール（５．００ｇ、３８．７ｍｍｏｌ、５．１４ｍＬ、１当量）のジクロロメタン溶液（５０．０ｍＬ）に、ＳＯＣｌ２（１３．８ｇ、１１６ｍｍｏｌ、８．４２ｍＬ、３．００当量）を０℃でゆっくりと滴加した。次いで、この混合物を４０℃で２時間撹拌した。反応混合物を減圧下で濃縮して、化合物２４－２（７．１７ｇ、粗製、ＨＣｌ塩）を白色の固体として得た。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ６） δ ＝ １１．０ （ｓ， １Ｈ）， ４．０６ （ｔ， Ｊ ＝ ６．８ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．４２－３．４０ （ｍ， ４Ｈ）， ２．９５ －２．８９ （ｍ， ２Ｈ）， １．８６ － １．７８ （ｍ， ４Ｈ）， １．７０ － １．６７ （ｍ， １Ｈ）， １．４１－１．３１ （ｍ， １Ｈ）．
ステップ２：１－（２－（トリチルチオ）エチル）ピペリジン（２４－３）
Figure 2024508047000214
１－（２－クロロエチル）ピペリジン（５．００ｇ、３３．９ｍｍｏｌ、１．００当量）、トリフェニルメタンチオール（１１．２ｇ、４０．６ｍｍｏｌ、１．２０当量）、炭酸カリウム（１８．７ｇ、１３５ｍｍｏｌ、４．００当量）、ヨウ化カリウム（５６２ｍｇ、３．３９ｍｍｏｌ、０．１０当量）をＤＭＦ（５０．０ｍＬ）に含む混合物を脱気し、Ｎ２で３回パージしてから、混合物を５０℃で３時間にわたってＮ２雰囲気下で撹拌した。反応混合物を酢酸エチル（１００ｍＬ）と水（１００ｍＬ）とに分配した。有機相を分離し、ブライン（６０．０ｍＬ×３）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して残渣を得た。この残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（ＩＳＣＯ（登録商標）、８０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、１００ｍＬ／分で０～１０％酢酸エチル／石油エーテルグラジエントの溶離液）によって精製して、化合物２４－３（５．７０ｇ、１３．７ｍｍｏｌ、４０．６％収率、９３．４％純度）及び（２．２０ｇ、４．９２ｍｍｏｌ、１４．５％収率、８６．７％純度）を白色の固体として得た。
ＬＣＭＳ ［Ｍ＋１］ ＋ ： ３８８．２
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３－ｄ） δ ＝ ７．４４ － ７．４２ （ｍ， ６Ｈ）， ７．３１ － ７．２７ （ｍ， ６Ｈ）， ７．２５ － ７．２０ （ｍ， ３Ｈ）， ２．３９ － ２．３４ （ｍ， ２Ｈ）， ２．３１ － ２．２６ （ｍ， ２Ｈ）， ２．２２ （ｓ， ４Ｈ）， １．５４ － １．４９ （ｍ， ４Ｈ）， １．４０ － １．３７ （ｍ， ２Ｈ）．
ステップ３：２－（ピペリジン－１－イル）エタンチオール（２４－４）
Figure 2024508047000215
１－（２－トリチルスルファニルエチル）ピペリジン（６．５０ｇ、１６．８ｍｍｏｌ、１．００当量）をＴＦＡ（２０．０ｍＬ）及びジクロロメタン（６０．０ｍＬ）に含む混合物である混合物を脱気し、Ｎ２で３回パージしてから、トリイソプロピルシラン（５．３１ｇ、３３．５ｍｍｏｌ、６．８９ｍＬ、２当量）を０℃でゆっくりと加え、次いでこの混合物を２０℃で３時間にわたってＮ２雰囲気下で撹拌した。反応混合物を減圧下で濃縮してＴＦＡを除去し、濾過した。濾液をメタノール（１５０ｍＬ）で希釈し、石油エーテル（５０．０ｍＬ×５）で抽出した。メタノール層を減圧下で濃縮して粗生成物を得て、化合物２４－４（４．３０ｇ、１６．６ｍｍｏｌ、９８．９％収率、ＴＦＡ塩）を淡黄色の油状物として得た。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ６） δ ＝ ３．４５－３．４２ （ｍ， ２Ｈ）， ３．１９ － ３．１２ （ｍ， ２Ｈ）， ２．８９ － ２．８０ （ｍ， ５Ｈ）， １．８０ － １．７７ （ｍ， ２Ｈ）， １．６６ － １．６３ （ｍ， ３Ｈ）， １．３８ － １．３５ （ｍ， １Ｈ）．
ステップ４：２－（ピペリジン－１－イル）エタンチオール（ＣＡＴ２４）
Figure 2024508047000216
１－ヘプチルオクチル４－［［４－（１－ヘプチルオクトキシ）－４－オキソ－ブチル］アミノ］ブタノエート（２．００ｇ、３．２８ｍｍｏｌ、１．００当量）を乾燥ジクロロメタン（２０．０ｍＬ）に溶解した溶液に、ＴＥＡ（９９５ｍｇ、９．８４ｍｍｏｌ、１．３７ｍＬ、３．００当量）及びトリホスゲン（８７６ｍｇ、２．９５ｍｍｏｌ、０．９０当量）をＮ２下０℃で加えた。得られた溶液を２０℃で１時間撹拌した。得られた反応物を減圧下で濃縮した。２－（１－ピペリジル）エタンチオール（２．９８ｇ、１１．５ｍｍｏｌ、３．５０当量、ＴＦＡ塩）を溶解した乾燥ＴＨＦ（２５．０ｍＬ）に、ＮａＯＨ（１．９７ｇ、４９．２ｍｍｏｌ、１５．０当量）を窒素雰囲気下０℃で加えた。この得られた溶液に、ＴＨＦ（２０．０ｍＬ）に溶解した塩化カルバモイルを、シリンジによってＮ２下０℃でゆっくりと加えた。得られた溶液を２０℃で１５時間撹拌した。反応混合物を０℃の塩化アンモニウム（２０．０ｍＬ）によってクエンチし、次いで酢酸エチル（６０．０ｍＬ）で希釈した。水相を酢酸エチル（５０．０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相をブライン（６０．０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮して残渣を得た。この残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（ＩＳＣＯ（登録商標）；１２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、１００ｍＬ／分で０～５０％酢酸エチル／石油エーテルグラジエントの溶離液）によって精製して、化合物ＣＡＴ２４（１．０９ｇ、１．３８ｍｍｏｌ、４３．３％収率、９９．２％純度）を淡黄色の油状物として得た。
ＬＣＭＳ ［Ｍ＋１］ ＋ ： ７８２．４
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３－ｄ） δ ＝ ４．９０ － ４．８４ （ｍ， ２Ｈ）， ３．３８ （ｓ， ４Ｈ）， ３．０５ － ３．０１ （ｍ， ２Ｈ）， ２．５７ － ２．５３ （ｍ， ２Ｈ）， ２．４６ （ｓ， ４Ｈ）， ２．３１ （ｓ， ４Ｈ）， １．９０ （ｓ， ４Ｈ）， １．６１ － １．５６ （ｍ， ４Ｈ）， １．５２ － １．５１ （ｍ， ８Ｈ）， １．４６ － １．４３ （ｍ， ２Ｈ）， １．３２ － １．２７ （ｍ， ４０Ｈ）， ０．９０ － ０．８７ （ｍ， １２Ｈ）．
実施例１．２５：ＣＡＴ２５の合成
Figure 2024508047000217
ステップ１：ｔｅｒｔ－ブチル４－（トシルオキシ）ピペリジン－１－カルボキシレート（２５－２）
Figure 2024508047000218
ｔｅｒｔ－ブチル４－ヒドロキシピペリジン－１－カルボキシレート（５０．０ｇ、２４８ｍｍｏｌ、１当量）のＣＨ２Ｃｌ２溶液（１０００ｍＬ）に、ＴＥＡ（５０．３ｇ、４９７ｍｍｏｌ、６９．２ｍＬ、２当量）、ＤＭＡＰ（１．５２ｇ、１２．４ｍｍｏｌ、０．０５当量）、及び４－メチルベンゼンスルホニルクロリド（７１．０ｇ、３７３ｍｍｏｌ、１．５当量）をＮ２下０℃で加えた。この混合物を２５℃で１２時間撹拌した。反応混合物をＣＨ２Ｃｌ２（５００ｍＬ）で希釈し、水（５００ｍＬ×３）及びブライン（５００ｍＬ）で抽出し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して残渣を得た。この粗生成物を２５℃の石油エーテル：酢酸エチル（１０：１、５００ｍＬ）で１０分間粉砕して、化合物２５－２（３２０ｇ、９００ｍｍｏｌ、９１％収率）を白色の固体として得た。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝ ７．７９ （ｄ， Ｊ ＝ ８．４ Ｈｚ， ２Ｈ）， ７．３４ （ｄ， Ｊ ＝ ８．０ Ｈｚ， ２Ｈ）， ４．７５ － ４．６０ （ｍ， １Ｈ）， ３．６５ － ３．５２ （ｍ， ２Ｈ）， ３．３２ － ３．１９ （ｍ， ２Ｈ）， ２．４５ （ｓ， ３Ｈ）， １．８３ － １．７２ （ｍ， ２Ｈ）， １．７１ － １．６２ （ｍ， ２Ｈ）， １．４３ （ｓ， ９Ｈ）
ステップ２：ｔｅｒｔ－ブチル４－（トリチルチオ）ピペリジン－１－カルボキシレート（２５－３）
Figure 2024508047000219
ｔｅｒｔ－ブチル４－（トシルオキシ）ピペリジン－１－カルボキシレート（１６０ｇ、４５０ｍｍｏｌ、１当量）、トリフェニルメタンチオール（１４９ｇ、５４０ｍｍｏｌ、１．２当量）、ＮａＩ（３．３７ｇ、２２．５ｍｍｏｌ、０．０５当量）、Ｃｓ２ＣＯ３（２１９ｇ、６７５ｍｍｏｌ、１．５当量）をＤＭＦ（１６００ｍＬ）に含む混合物を脱気し、Ｎ２で３回パージしてから、混合物を５０℃で１２時間にわたってＮ２雰囲気下で撹拌した。反応混合物を濾過し、濾液を酢酸エチル（１０００ｍＬ×３）及び水（１０００ｍＬ）で抽出し、合わせた有機層をブライン（１０００ｍＬ×３）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、化合物２５－３（４１０ｇ、粗製）を黄色の固体として得た。
ステップ３：４－（トリチルチオ）ピペリジン（２５－４）
Figure 2024508047000220
ｔｅｒｔ－ブチル４－（トリチルチオ）ピペリジン－１－カルボキシレート（１００ｇ、２１８ｍｍｏｌ、１当量）のＣＨ２Ｃｌ２溶液（１０００ｍＬ）に、ＴＦＡ（３０８ｇ、２．７０ｍｏｌ、２００ｍＬ、１２．４当量）を加えた。この混合物を２５℃で３時間撹拌した。反応物を洗浄し、ＣＨ２Ｃｌ２（５００ｍＬ）で４回濃縮した。この残渣を２５℃のＭＴＢＥで１時間粉砕して、化合物２５－４（７５．０ｇ、１２１ｍｍｏｌ、４８．２％収率、５７．８％純度）を白色の固体として得た。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝ ９．０６ － ８．９３ （ｍ， １Ｈ）， ７．４５ － ７．３４ （ｍ， ６Ｈ）， ７．２６ － ７．１７ （ｍ， ７Ｈ）， ７．１６ －７．０９ （ｍ， ２Ｈ）， ３．０５ （ｓ， ２Ｈ）， ２．６３ （ｓ， ２Ｈ）， ２．５１ － ２．３９ （ｍ， １Ｈ）， ２．３８ － ２．２８ （ｍ， １Ｈ）， １．７１ － １．６１ （ｍ， １Ｈ）， １．４９ － １．３３ （ｍ， ２Ｈ）．
ステップ４：１－プロピル－４－（トリチルチオ）ピペリジン（２５－５）
Figure 2024508047000221
４－（トリチルチオ）ピペリジン（１５ｇ、４１．７ｍｍｏｌ、１当量）及び１－ブロモプロパン（４．６２ｇ、３７．６ｍｍｏｌ、３．４２ｍＬ、０．９当量）のＤＭＦ溶液（１５０ｍＬ）に、Ｋ２ＣＯ３（２８．８３ｇ、２０９ｍｍｏｌ、５当量）及びＫＩ（６９３ｍｇ、４．１７ｍｍｏｌ、０．１当量）を加えた。この混合物を２５℃で１０時間撹拌した。２５℃の３００ｍＬを加えて反応混合物をクエンチし、酢酸エチル（１００ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して残渣を得た。この残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（ＩＳＣＯ（登録商標）；３３０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、１００ｍＬ／分で０～３０％酢酸エチル／石油エーテルグラジエントの溶離液）によって精製した。この残渣をＭＰＬＣ（カラムＩ．Ｄ．１００ｍｍ＊Ｈ３００ｍｍ Ｗｅｌｃｈ Ｕｌｔｉｍａｔｅ ＸＢ＿Ｃ１８ ２０～４０μｍ；１２０Ａ；流量２００ｍｌ／分；移動相Ｈ２Ｏ＋ＡＣＮ；グラジエントＢ％ １０－４５％ ２０分；４５％ ５分）によって精製して、化合物２５－５（６．５８ｇ、１２．５ｍｍｏｌ、２９．９％収率、９８％純度、ＴＦＡ）を白色の固体として得た。
ＬＣＭＳ ［Ｍ＋１］ ＋ ： ４０２．３
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝ １２．６９ － １１．８５ （ｍ， １Ｈ）， ７．６０ － ７．３５ （ｍ， ６Ｈ）， ７．２７ － ７．１８ （ｍ， ６Ｈ）， ７．１６ － ７．０３ （ｍ， ３Ｈ）， ３．４１ － ３．１３ （ｍ， ２Ｈ）， ２．８８ － ２．６０ （ｍ， ４Ｈ）， ２．２４ － １．８２ （ｍ， ３Ｈ）， １．７７ － １．５３ （ｍ， ２Ｈ）， １．４２ － １．１４ （ｍ， ２Ｈ）， ０．９４ － ０．７４ （ｍ， ３Ｈ）．
ステップ５：１－プロピルピペリジン－４－チオール（２５－６）
Figure 2024508047000222
１－プロピル－４－（トリチルチオ）ピペリジン（６．５０ｇ、１６．２ｍｍｏｌ、１当量）を含むＴＦＡ（２０．０ｍＬ）及びＣＨ２Ｃｌ２（６０．０ｍＬ）の溶液に、トリイソプロピルシラン（５．１３ｇ、３２．４ｍｍｏｌ、６．６５ｍＬ、２当量）を加えた。この混合物を２５℃で３時間撹拌した。反応混合物を減圧下で濃縮して残渣を得た。この残渣をメタノール（１０．０ｍＬ）に溶解し、石油エーテル（１０．０ｍＬ×５）で抽出し、合わせたメタノール層を減圧下で濃縮して、１－プロピルピペリジン－４－チオール（４．４２ｇ、粗製、ＴＦＡ）を黄色の油状物として得た。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ６） δ ＝ ３．５０ － ３．１３ （ｍ， ３Ｈ）， ３．１０ － ２．８３ （ｍ， ５Ｈ）， ２．２０ － ２．０３ （ｍ， ２Ｈ）， １．８６ － １．５５ （ｍ， ４Ｈ）， ０．９５ － ０．８５ （ｍ， ３Ｈ）．
ステップ６：ジ（ペンタデカン－８－イル）４，４’－（（（（１－プロピルピペリジン－４－イル）チオ）カルボニル）アザンジイル）ジブタノエート（ＣＡＴ２５）
Figure 2024508047000223
ジ（ペンタデカン－８－イル）４，４’－アザンジイルジブタノエート（２．８０ｇ、４．５９ｍｍｏｌ、１当量）を乾燥ＣＨ２Ｃｌ２（４０．０ｍＬ）に溶解した溶液に、ＴＥＡ（１．３９ｇ、１３．８ｍｍｏｌ、１．９２ｍＬ、３当量）及びトリホスゲン（１．２４ｇ、４．１８ｍｍｏｌ、０．９１当量）をＮ２下０℃で加えた。得られた溶液を２０℃で１時間撹拌した。窒素雰囲気下で０℃の、１－プロピルピペリジン－４－チオール（４．３９ｇ、１６．１ｍｍｏｌ、３．５０当量、ＴＦＡ）を溶解した乾燥ＴＨＦ（４０．０ｍＬ）に、ＮａＯＨ（１．８４ｇ、４５．９ｍｍｏｌ、１０．０当量）を窒素雰囲気下で加えた。この得られた溶液に、ＴＨＦ（１０．０ｍＬ）に溶解した塩化カルバモイルを、シリンジによってＮ２下０℃でゆっくりと加えた。得られた溶液を２０℃で１１時間撹拌した。反応混合物を０℃のＮＨ４Ｃｌ（５０．０ｍＬ）によってクエンチし、次いで酢酸エチル（５０．０ｍＬ）で希釈した。水相を酢酸エチル（５０．０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相をブライン（３０．０ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮して残渣を得た。この残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（ＩＳＣＯ（登録商標）；２２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、１００ｍＬ／分で０～３５％酢酸エチル／石油エーテルグラジエントの溶離液）によって精製して、ＣＡＴ２５（０．８５ｇ、１．０６ｍｍｏｌ、２３．１％収率、９９．１％純度）を黄色の油状物として得た。
ＬＣＭＳ ［Ｍ＋１］ ＋ ： ７９６．４
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝ ４．９０ － ４．８０ （ｍ， ２Ｈ）， ３．３７ （ｓ， ５Ｈ）， ２．８３ （ｄ， Ｊ ＝ ９．２， ２Ｈ）， ２．４０ － ２．２３ （ｍ， ６Ｈ）， ２．２１ － ２．０８ （ｍ， ２Ｈ）， ２．０６ － １．９７ （ｍ， ２Ｈ）， １．９０ （ｓ， ４Ｈ）， １．７６ － １．６７ （ｍ， ２Ｈ）， １．５２ （ｓ， １０Ｈ）， １．２７ （ｓ， ４０Ｈ）， ０．９８ － ０．７６ （ｍ， １５Ｈ）．
実施例１．２６：ＣＡＴ２６の合成
Figure 2024508047000224
ステップ１：ｔｅｒｔ－ブチル２－（２－ヒドロキシエチル）ピロリジン－１－カルボキシレート（２６－２）
Figure 2024508047000225
２－（１－ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニルピロリジン－２－イル）酢酸（５０．０ｇ、２１８ｍｍｏｌ、１．００当量）のＴＨＦ溶液（６００ｍＬ）に、０℃のＢＨ３－Ｍｅ２Ｓ（１０．０Ｍ、３２．７ｍＬ、１．５０当量）をシリンジによって窒素雰囲気下で３０分かけて滴加し、次いでこの混合物を２０℃で９．５時間にわたって窒素雰囲気下で撹拌した。反応物をメタノール（１００ｍＬ）によってクエンチし、濃縮し、次いでこの残渣を酢酸エチル（３００ｍＬ）及びＨ２Ｏ（３５０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（２００ｍＬ×３）で抽出し、ブライン（５００ｍＬ）によって洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して残渣を得た。水相を次亜塩素酸ナトリウム溶液によってクエンチし、廃棄した。この残渣をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、石油エーテル／酢酸エチル＝５０／１から３／１）によって精製して、化合物２（３０．０ｇ、１３２ｍｍｏｌ、６０．７％収率、９５．０％純度）を無色の油状物として得た。
ＬＣＭＳ ［Ｍ＋２３］ ＋ ： ２３８．１
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ６） δ ＝ ４．３７ （ｔ， Ｊ ＝ ５．２ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．７３ （ｓ， １Ｈ）， ３．４２ － ３．３８ （ｍ， ２Ｈ）， ３．２３ － ３．１９ （ｍ， ２Ｈ）， １．８３ － １．６６ （ｍ， ６Ｈ）， １．３９ （ｓ， ９Ｈ）．
ステップ２：ｔｅｒｔ－ブチル２－［２－（ｐ－トリルスルホニルオキシ）エチル］ピロリジン－１－カルボキシレート（２６－３）
Figure 2024508047000226
ｔｅｒｔ－ブチル２－（２－ヒドロキシエチル）ピロリジン－１－カルボキシレート（２７．０ｇ、１２５ｍｍｏｌ、１．００当量）、ＴＥＡ（２５．４ｇ、２５１ｍｍｏｌ、３４．９ｍＬ、２．００当量）、及びＤＭＡＰ（７６６ｍｇ、６．２７ｍｍｏｌ、０．０５当量）をジクロロメタン（４５０ｍＬ）に含む混合物を脱気し、Ｎ２で３回パージしてから、ＴｏｓＣｌ（３５．９ｇ、１８８ｍｍｏｌ、１．５０当量）を０℃でゆっくりと加え、次いでこの混合物を２５℃で３時間にわたってＮ２雰囲気下で撹拌した。この残渣をジクロロメタン（２００ｍＬ）で希釈し、合わせた有機層をＨ２Ｏ（４５０ｍＬ）及びブライン（４５０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して残渣を得た。この残渣をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、石油エーテル／酢酸エチル＝５０／１から３／１）によって精製して、化合物２６－３（２３．２ｇ、４９．５ｍｍｏｌ、３９．５％収率、７８．９％純度）を黄色の油状物として得た。
ＬＣＭＳ ［Ｍ－１００＋１］ ＋： ２７０．１
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＭｅＯＤ－ｄ４） δ ＝ ７．８０ （ｄ， Ｊ ＝ ２．０ Ｈｚ， １Ｈ） ７．８１ － ７．７９ （ｍ， １Ｈ）， ７．７２ （ｓ， １Ｈ）， ７．４６ （ｓ， １Ｈ）， ７．２５ （ｓ， １Ｈ）， ４．０９ － ４．０３ （ｍ， ２Ｈ）， ３．７９ － ３．７７ （ｍ， １Ｈ）， ３．４９－３．４３ （ｍ， ２Ｈ）， ２．３７ （ｓ， ３Ｈ）， ２．００ － １．９５ （ｍ， ２Ｈ）， １．６６ － １．４９ （ｍ， ４Ｈ）， １．４２ （ｓ， ９Ｈ）．
ステップ３：ｔｅｒｔ－ブチル２－（２－トリチルスルファニルエチル）ピロリジン－１－カルボキシレート（２６－４）
Figure 2024508047000227
ｔｅｒｔ－ブチル２－［２－（ｐ－トリルスルホニルオキシ）エチル］ピロリジン－１－カルボキシレート（２３．０ｇ、６２．３ｍｍｏｌ、１当量）、トリフェニルメタンチオール（２０．７ｇ、７４．７ｍｍｏｌ、１．２０当量）、Ｃｓ２ＣＯ３（３０．４ｇ、９３．４ｍｍｏｌ、１．５当量）、ＮａＩ（９３３ｍｇ、６．２３ｍｍｏｌ、０．１０当量）をＤＭＦ（２００ｍＬ）に含む混合物を脱気し、Ｎ２で３回パージしてから、混合物を５０℃で３時間にわたってＮ２雰囲気下で撹拌した。反応混合物を酢酸エチル（１５００ｍＬ）とＨ２Ｏ（１０００ｍＬ）とに分配した。有機相を分離し、ブライン（３００ｍＬ×２）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して残渣を得た。この残渣をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、石油エーテル／酢酸エチル＝１／０から５／１）によって精製して、化合物２６－４（２０．６ｇ、３９．３ｍｍｏｌ、６３．２％収率、９０．６％純度）を黄色の油状物として得た。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３－ｄ） δ ＝ ７．４６ － ７．４１ （ｍ， ６Ｈ）， ７．３３ － ７．２７ （ｍ， ６Ｈ）， ７．２５ － ７．２０ （ｍ， ３Ｈ）， ３．６８ （ｓ， １Ｈ）， ３．３１ （ｓ， １Ｈ）， ３．２０ （ｓ， １Ｈ）， ２．１５ （ｓ， ２Ｈ）， １．７６ － １．６５ （ｍ， ４Ｈ）， １．４３ （ｓ， ９Ｈ）， １．３９ － １．３４ （ｍ， ２Ｈ）
ステップ４：２－（２－トリチルスルファニルエチル）ピロリジン（２６－５）
Figure 2024508047000228
ｔｅｒｔ－ブチル２－（２－トリチルスルファニルエチル）ピロリジン－１－カルボキシレート（２０．６ｇ、４３．４ｍｍｏｌ、１当量）のジクロロメタン溶液（２００ｍＬ）に、ＴＦＡ（６１．６ｇ、５４０ｍｍｏｌ、４０．０ｍＬ、１２．５当量）を加えた。この混合物を２５℃で１０時間撹拌した。反応混合物を減圧下で濃縮してジクロロメタン及びＴＦＡを除去した。この残渣を分取ＭＰＬＣ（ＭｅＣＮ：Ｈ２Ｏ：０～４５％）によって精製して、化合物２６－５（１６．２ｇ、３２．２ｍｍｏｌ、７４．３％収率、９７．０％純度、ＴＦＡ塩）を黄色の固体として得た。
ＬＣＭＳ ［Ｍ＋１］ ＋ ： ３７４．１
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３－ｄ） δ ＝ ７．３２ － ７．３０ （ｍ， ６Ｈ）， ７．２１ － ７．１７ （ｍ， ６Ｈ）， ７．１４ － ７．１３ （ｍ， ３Ｈ）， ３．３１ （ｓ， １Ｈ）， ３．１１ （ｓ， ２Ｈ）， ２．２０ － ２．１２ （ｍ， ２Ｈ）， １．８４ － １．７９ （ｍ， ３Ｈ）， １．５０ － １．４３ （ｍ， １Ｈ）， １．３３ － １．３１ （ｍ， １Ｈ）， １．２０ － １．１６ （ｍ， １Ｈ）．
ステップ５：１－イソプロピル－２－（２－トリチルスルファニルエチル）ピロリジン（２６－６）
Figure 2024508047000229
２－（２－トリチルスルファニルエチル）ピロリジン（８．００ｇ、１６．４ｍｍｏｌ、１．００当量、ＴＦＡ）及び２－ヨードプロパン（３．０７ｇ、１８．１ｍｍｏｌ、１．８０ｍＬ、１．１０当量）のＭｅＣＮ溶液（８０．０ｍＬ）に、Ｋ２ＣＯ３（６．８０ｇ、４９．２ｍｍｏｌ、３．００当量）を加えた。この混合物を７０℃で１０時間撹拌した。反応混合物を濾過し、減圧下で濃縮して残渣を得た。この残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（ＩＳＣＯ（登録商標）；２２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、１００ｍＬ／分で０～１０％メタノール／ジクロロメタングラジエントの溶離液）によって精製して、化合物２６－６（４．６０ｇ、１１．１ｍｍｏｌ、６７．７％収率）を赤褐色の固体として得た。
ＬＣＭＳ ［Ｍ＋１］ ＋ ： ４１６．５
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３－ｄ） δ ＝ ７．４０ － ７．３７ （ｍ， ６Ｈ）， ７．２７ － ７．２２ （ｍ， ６Ｈ）， ７．２０ － ７．１６ （ｍ， ３Ｈ）， ３．０１ － ２．９２ （ｍ， ２Ｈ）， ２．７９ － ２．７５ （ｍ， １Ｈ）， ２．５３ － ２．４７ （ｍ， １Ｈ）， ２．２９ － ２．２３ （ｍ， １Ｈ）， ２．１２ － ２．０５ （ｍ， １Ｈ）， １．７５ － １．６１ （ｍ， ４Ｈ）， １．５６ － １．４９ （ｍ， １Ｈ）， １．３８ － １．３０ （ｍ， １Ｈ）， １．１４ （ｄ， Ｊ ＝ ６．４ Ｈｚ， ３Ｈ）， ０．９７ （ｄ， Ｊ ＝ ６．４ Ｈｚ， ３Ｈ）
ステップ６：２－（１－イソプロピルピロリジン－２－イル）エタンチオール（２６－９）
Figure 2024508047000230
１－イソプロピル－２－（２－トリチルスルファニルエチル）ピロリジン（４．１０ｇ、９．８６ｍｍｏｌ、１．００当量）をＴＦＡ（１４．０ｍＬ）及びジクロロメタン（４２．０ｍＬ）に含む混合物である混合物を脱気し、Ｎ２で３回パージしてから、トリイソプロピルシラン（３．１２ｇ、１９．７ｍｍｏｌ、４．０５ｍＬ、２．００当量）を０℃でゆっくりと加え、次いでこの混合物を２０℃で３時間にわたってＮ２雰囲気下で撹拌した。反応混合物を減圧下で濃縮してＴＦＡを除去し、濾過した。濾液をメタノール（７０．０ｍＬ）で希釈し、石油エーテル（５０．０ｍＬ×５）で抽出した。メタノール層を減圧下で濃縮して、化合物２６－９（２．６９ｇ、粗製、ＴＦＡ）を黄色の油状物として得た。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３－ｄ） δ ＝ ３．７６ － ３．６９ （ｍ， ３Ｈ）， ３．０９ － ３．００ （ｍ， １Ｈ）， ２．９２ － ２．８４ （ｍ， １Ｈ）， ２．４６ － ２．４１ （ｍ， １Ｈ）， ２．２７ － ２．１２ （ｍ， ５Ｈ）， ２．０４ － １．８８ （ｍ， ２Ｈ）， １．４７ （ｄ， Ｊ ＝ ６．４ Ｈｚ， ３Ｈ）， １．３６ （ｄ， Ｊ ＝ ６．８ Ｈｚ， ３Ｈ）
ステップ７：１－ヘプチルオクチル４－［［４－（１－ヘプチルオクトキシ）－４－オキソ－ブチル］－［２－（１－イソプロピルピロリジン－２－イル）エチルスルファニルカルボニル］アミノ］ブタノエート（ＯＮＣ－ＳＭ－０２７－ＮＸ－１）：（ＥＣ１０９２－３３／３４）
Figure 2024508047000231
１－ヘプチルオクチル４－［［４－（１－ヘプチルオクトキシ）－４－オキソ－ブチル］アミノ］ブタノエート（１．９０ｇ、３．１１ｍｍｏｌ、１．００当量）を乾燥ジクロロメタン（２０．０ｍＬ）に溶解した溶液に、ＴＥＡ（９４６ｍｇ、９．３４ｍｍｏｌ、１．３０ｍＬ、３．００当量）及びトリホスゲン（７６０ｍｇ、２．５６ｍｍｏｌ、０．８２当量）をＮ２下０℃で加えた。得られた溶液を２０℃で１時間撹拌した。得られた反応物を減圧下で濃縮した。２－（１－イソプロピルピロリジン－２－イル）エタンチオール（２．６８ｇ、９．３４ｍｍｏｌ、３．００当量、ＴＦＡ）を溶解した乾燥ＴＨＦ（２５．０ｍＬ）に、ＮａＯＨ（１．８７ｇ、４６．７ｍｍｏｌ、１５．０当量）を窒素雰囲気下０℃で加えた。この得られた溶液に、ＴＨＦ（２０．０ｍＬ）に溶解した塩化カルバモイルを、シリンジによってＮ２下０℃でゆっくりと加えた。得られた溶液を２０℃で１５時間撹拌した。反応混合物を０℃のＮＨ４Ｃｌ（５０．０ｍＬ）によってクエンチし、次いで酢酸エチル（６０．０ｍＬ）で希釈した。水相を酢酸エチル（６０．０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相をブライン（５０．０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮して残渣を得た。この残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（ＩＳＣＯ（登録商標）；１２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、１００ｍＬ／分で０～５０％酢酸エチル／石油エーテルグラジエントの溶離液）によって精製して、化合物ＣＡＴ２６（６１０ｍｇ、０．７４２ｍｍｏｌ、２１．３％収率、９８．４％純度）を黄色の油状物として得た。
ＬＣＭＳ ［Ｍ＋１］ ＋ ： ８１０．６
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３－ｄ） δ ＝ ４．９０ － ４．８４ （ｍ， ２Ｈ）， ３．３８ （ｓ， ４Ｈ）， ２．９９ － ２．９２ （ｍ， ２Ｈ）， ２．９０ － ２．８０ （ｍ， ２Ｈ）， ２．７９ － ２．７５ （ｍ， １Ｈ）， ２．５２ － ２．４６ （ｍ， １Ｈ）， ２．３１ （ｓ， ４Ｈ）， １．８９ （ｄ， Ｊ ＝ ４．８ Ｈｚ， ６Ｈ）， １．７９ － １．６７ （ｍ， ４Ｈ）， １．５２ （ｄ， Ｊ ＝ ５．２ Ｈｚ， ８Ｈ）， １．２７ （ｓ， ４０Ｈ）， １．１２ （ｄ， Ｊ ＝ ６．８ Ｈｚ， ３Ｈ）， ０．９７ （ｄ， Ｊ ＝ ６．４ Ｈｚ， ３Ｈ）， ０．８８ （ｔ， Ｊ ＝ ６．８ Ｈｚ， １２Ｈ）．
実施例１．２７：ＣＡＴ２７の合成
Figure 2024508047000232
ステップ１：１－（ブタ－３－エン－１－イル）－４－（トリチルチオ）ピペリジン（２７－２）
Figure 2024508047000233
４－トリチルスルファニルピペリジン（２０ｇ、４２．２３ｍｍｏｌ、１当量、ＴＦＡ）のＤＭＦ溶液（１２０ｍＬ）に、Ｋ２ＣＯ３（１７．５１ｇ、１２６．７０ｍｍｏｌ、３当量）及び４－ブロモブタ－１－エン（５．１３ｇ、３８．０１ｍｍｏｌ、３．８６ｍＬ、０．９当量）を加えた。この混合物を２５℃で１６時間撹拌した。完了後、反応混合物をＨ２Ｏ（１５０ｍＬ）によってクエンチし、次いでＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）で希釈した。水相をＥｔＯＡｃ（１５０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相をブライン（１００ｍＬ×３）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮して残渣を得た。この残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（８０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、ＥｔＯＡｃ：ＰＥ：０～２０％、１％ＮＨ３・Ｈ２Ｏ／ＥｔＯＡｃ）及び逆相ＭＰＬＣ（ＭｅＣＮ：Ｈ２Ｏ：０～４５％）によって精製して、化合物２７－２（９．６ｇ、２２．５１ｍｍｏｌ、６５．６％収率、９７％純度）を黄色の固体として得た。
ＬＣＭＳ ［Ｍ＋Ｈ］ ＋ ： ４１４．６
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝ １２．２７ － １２．２１ （ｍ， １Ｈ）， ７．４２ － ７．３６ （ｍ， ６Ｈ）， ７．２３ － ７．１８ （ｍ， ６Ｈ）， ７．１６ － ７．１０ （ｍ， ３Ｈ）， ５．６４ － ５．５５ （ｍ， １Ｈ）， ５．０９ － ５．００ （ｍ， ２Ｈ）， ３．４０ － ３．２５ （ｍ， ３Ｈ）， ２．８７ － ２．７９ （ｍ， ４Ｈ）， ２．４２ － ２．３６ （ｍ， ２Ｈ）， ２．２１ － ２．１６ （ｍ， １Ｈ）， ２．０７ － １．９９ （ｍ， ２Ｈ）， １．２５ － １．１８ （ｍ， １Ｈ）．
ステップ２：１－（ブタ－３－エン－１－イル）ピペリジン－４－チオール（２７－３）
Figure 2024508047000234
１－ブタ－３－エニル－４－トリチルスルファニル－ピペリジン（９．５ｇ、２２．９７ｍｍｏｌ、１当量）のＣＨ２Ｃｌ２溶液（８０ｍＬ）に、ＴＦＡ（３６．５８ｇ、３２０．７８ｍｍｏｌ、２３．８ｍＬ、１３．９７当量）及びＴＩＰＳ（９．００ｇ、４５．９４ｍｍｏｌ、２当量）をＮ２下０℃で加えた。添加後、得られた混合物を２０℃で４時間撹拌した。完了後、反応混合物を減圧下で濃縮してＴＦＡを除去し、濾過した。濾液をＭｅＯＨ（１５０ｍＬ）で希釈し、ＰＥ（５０ｍＬ×５）で抽出した。ＭｅＯＨ層を減圧下で濃縮して、化合物２７－３（６．４ｇ、粗製、ＴＦＡ）を黄色の油状物として得た。この粗生成物をさらに精製することなく次のステップで使用した。
ステップ６：ジ（ペンタデカン－８－イル）４，４’－（（（（１－（ブタ－３－エン－１－イル）ピペリジン－４－イル）チオ）カルボニル）アザンジイル）ジブタノエート（ＣＡＴ２７）
Figure 2024508047000235
１－ヘプチルオクチル４－［［４－（１－ヘプチルオクトキシ）－４－オキソ－ブチル］アミノ］ブタノエート（４．５ｇ、７．３８ｍｍｏｌ、１当量）を乾燥ＣＨ２Ｃｌ２（５０ｍＬ）に溶解した溶液に、ＴＥＡ（２．２４ｇ、２２．１３ｍｍｏｌ、３．１ｍＬ、３当量）及びトリホスゲン（１．３１ｇ、４．４３ｍｍｏｌ、０．６当量）をＮ２下０℃で加えた。得られた溶液を２０℃で１時間撹拌した。得られた反応物を減圧下で濃縮した。１－ブタ－３－エニルピペリジン－４－チオール（６．３１ｇ、２２．１３ｍｍｏｌ、３当量、ＴＦＡ）を乾燥ＴＨＦ（３５ｍＬ）に溶解した溶液に、ＮａＯＨ（２．０７ｇ、５１．６４ｍｍｏｌ、７当量）をＮ２下０℃で加えた。この得られた溶液に、ＴＨＦ（３０ｍＬ）に溶解した塩化カルバモイルを、シリンジによってＮ２下０℃でゆっくりと加えた。得られた溶液を２０℃で１５時間撹拌した。完了後、反応混合物を０℃のＮＨ４Ｃｌ（１００ｍＬ）によってクエンチし、次いでＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）で希釈した。水相をＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相をブライン（１２０ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮して残渣を得た。この残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（４０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、ＥｔＯＡｃ：ＰＥ：０～４０％）及びポジティブ分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗｅｌｃｈ Ｕｌｔｉｍａｔｅ ＸＢ－ＣＮ ２５０＊５０＊１０ｕｍ；移動相：［Ｎｅｕ－ＥＴＯＨ］；Ｂ％：０％－１０％、８分）によって精製して、ＣＡＴ２７（４８８ｍｇ、０．５９ｍｍｏｌ、５９．９％収率、９８．２％純度）を淡黄色の油状物として得た。
ＬＣＭＳ ［Ｍ＋Ｈ］ ＋ ： ８０８．３
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤ３ＯＤ－ｄ４） δ ＝ ５．８６ － ５．７９ （ｍ， １Ｈ）， ５．１３ － ５．０１（ｍ， ２Ｈ）， ４．９３ － ４．８９ （ｍ， ２Ｈ）， ３．４８ － ３．３８ （ｍ， ５Ｈ）， ２．８９ －２．８６ （ｍ， ２Ｈ）， ２．４８ － ２．４３ （ｍ， ２Ｈ）， ２．３５ － ２．２３ （ｍ， ８Ｈ）， ２．０８ － ２．０３ （ｍ， ２Ｈ）， １．９３ － １．８８ （ｍ， ４Ｈ）， １．７６ － １．６７ （ｍ， ２Ｈ）， １．６１ － １．５６ （ｍ， ８Ｈ）， １．３５ － １．２５ （ｍ， ４０Ｈ）， ０．９４ － ０．９０ （ｍ， １２Ｈ）．
実施例１．２８：ＣＡＴ２８の合成
Figure 2024508047000236
ステップ１：４－（（ビス（４－オキソ－４－（ペンタデカン－８－イルオキシ）ブチル）カルバモイル）チオ）－１－（３－ヒドロキシプロピル）ピペリジン１－オキシド（２８－２）
Figure 2024508047000237
１－ヘプチルオクチル４－［（１－ブタ－３－エニル－４－ピペリジル）スルファニルカルボニル－［４－（１－ヘプチルオクトキシ）－４－オキソ－ブチル］アミノ］ブタノエート（１．２ｇ、１．４９ｍｍｏｌ、１当量）を含むＣＨ２Ｃｌ２（２０ｍＬ）及びＭｅＯＨ（１０ｍＬ）の溶液を－７８℃に冷却し、薄青色が明らかになるまでオゾン流（７１．３５ｍｇ、１．４９ｍｍｏｌ、１当量）（１５Ｐｓｉ）を反応混合物中に通気した。次いで、青色が消えるまで反応混合物中にＯ２を通気し、次いで、ＮａＢＨ４（１１２．４７ｍｇ、２．９７ｍｍｏｌ、２当量）を加えた。この反応混合物を２０℃で２時間撹拌した。完了後、反応混合物から黄色の液体である化合物２８－２（１．２３ｇ、粗製）が生じた。この反応混合物をさらに精製することなく次のステップで直接使用した。
ステップ２：ジ（ペンタデカン－８－イル）４，４’－（（（（１－（３－ヒドロキシプロピル）ピペリジン－４－イル）チオ）カルボニル）アザンジイル）ジブタノエート（ＣＡＴ２８）
Figure 2024508047000238
１－ヘプチルオクチル４－［［４－（１－ヘプチルオクトキシ）－４－オキソ－ブチル］－［１－（３－ヒドロキシプロピル）－１－オキシド－ピペリジン－１－イウム－４－イル］スルファニルカルボニル－アミノ］ブタノエート（１．２３ｇ、１．４９ｍｍｏｌ、１当量）のＣＨ２Ｃｌ２溶液（１０ｍＬ）に、ＢＰＤ（７５５．１１ｍｇ、２．９７ｍｍｏｌ、２当量）を加えた。この混合物を２５℃で１時間撹拌した。完了後、反応混合物をＨ２Ｏ（６０ｍＬ）によってクエンチし、次いでＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）で希釈した。水相をＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相をブライン（６０ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮して残渣を得た。この残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（４０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、酢酸エチル：石油エーテル：０～２０％）及びポジティブ分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗｅｌｃｈ Ｕｌｔｉｍａｔｅ ＸＢ－ＣＮ ２５０＊５０＊１０ｕｍ；移動相：［ヘキサン－ＥｔＯＨ］；Ｂ％：０％－３０％、１０分）によって精製して、ＣＡＴ２８（２４８ｍｇ、２９６．８２ｕｍｏｌ、２０．０７％収率、９７．１％純度）を黄色の油状物として得た。
ＬＣＭＳ ［Ｍ＋Ｈ］ ＋ ： ８１１．６
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝ ４．９０ － ４．８４ ｍ， ２Ｈ）， ３．８０ （ｔ， Ｊ ＝ ５．２ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．３８ － ３．３４ （ｍ， ５Ｈ）， ２．９５ － ２．９０ （ｍ， ２Ｈ）， ２．６０ （ｔ， Ｊ ＝ ５．６ Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．３３ － ２．２７ （ｍ， ４Ｈ）， ２．２３ － ２．１６ （ｍ， ２Ｈ）， ２．０８ － ２．０１ （ｍ， ２Ｈ）， １．９３ － １．８５ （ｍ， ４Ｈ）， １．７４ － １．６２ （ｍ， ４Ｈ）， １．５５ － １．４８ （ｂｒ ｓ， ８Ｈ）， １．３３ － １．２５ （ｍ， ４０Ｈ）， ０．９１ － ０．８６ （ｍ， １２Ｈ）．
実施例１．２９：ＣＡＴ２９の合成
Figure 2024508047000239
ステップ１：ウンデカ－１，１０－ジエン－６－オール（２９－２）
Figure 2024508047000240
Ｉ２（３．４３ｇ、１３．５０ｍｍｏｌ、２．７２ｍＬ、０．０２当量）及びＭｇ（４１．８３ｇ、１．７２ｍｏｌ、２．５５当量）の乾燥ＴＨＦ懸濁液（１５００ｍＬ）を窒素雰囲気下で調製した。この混合物に、５－ブロモペンタ－１－エン（２５１．４７ｇ、１．６９ｍｏｌ、２．５当量）を２５℃でゆっくりと加えた。添加中、反応混合物の温度の上昇により、Ｇｒｉｇｎａｒｄ形成の開始が確認された。臭化物の添加が完了したら、混合物を２５℃で１時間撹拌し、その後これを、ギ酸エチル（５０ｇ、６７４．９６ｍｍｏｌ、５４．２９ｍＬ、１当量）をゆっくりと加えるために０℃に冷却した。添加後、冷浴を外し、混合物を２５℃で１５時間撹拌した。飽和ＮＨ４Ｃｌ溶液（１０００ｍＬ）を加えてクエンチするために反応物を０℃に冷却し、３０分間撹拌した。水相をＥｔＯＡｃ（１０００ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相をブライン（４００×２ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮して粗生成物を得た。この粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィー（石油エーテル／酢酸エチル＝３０／１から５／１）によって精製して、化合物２９－２（１０５ｇ、６２３．９８ｍｍｏｌ、９２．４５％収率）を黄色の油状物として得た。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝ ５．８２－５．７６ （ｍ， ２Ｈ）， ５．０１－４．９２ （ｍ， ４Ｈ）， ３．５８ － ３．５７ （ｍ， １Ｈ）， ２．０６－２．０２ （ｍ， ４Ｈ）， １．５３－１．５０ （ｍ， １Ｈ）， １．４８－１．４１ （ｍ， ８Ｈ）．
ステップ２：２－（１－ペンタ－４－エニルヘキサ－５－エニル）イソインドリン－１，３－ジオン（２９－３）
Figure 2024508047000241
ウンデカ－１，１０－ジエン－６－オール（６６ｇ、３９２．２１ｍｍｏｌ、１当量）及びイソインドリン－１，３－ジオン（６９．２５ｇ、４７０．６６ｍｍｏｌ、１．２当量）のＴＨＦ溶液（８００ｍＬ）に、ＰＰｈ３（１５４．３１ｇ、５８８．３２ｍｍｏｌ、１．５当量）を加え、次いでＤＩＡＤ（２３７．９３ｇ、１．１８ｍｏｌ、２２８．７８ｍＬ、３当量）を０℃で滴加した。この混合物を２５℃で１２時間撹拌した。飽和ＮＨ４Ｃｌ溶液（１０００ｍＬ）を加えて反応物をクエンチし、水相をＥｔＯＡｃ（１０００ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相をブライン（５００×２ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮して粗生成物を得た。この粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィー（石油エーテル／酢酸エチル＝３０／１から５／１）によって精製して、化合物２９－３（１００ｇ、３３６．２６ｍｍｏｌ、８５．７３％収率）を黄色の油状物として得た。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝ ７．８４－７．８２ （ｍ， ２Ｈ）， ７．７３－７．７１ （ｍ， ２Ｈ）， ５．７８－５．７１ （ｍ， ２Ｈ）， ５．３１－５．２３ （ｍ， ４Ｈ）， ４．２４－４．１４ （ｍ， １Ｈ）， ２．１５－２．０５ （ｍ， ４Ｈ）， １．７６－１．７０ （ｍ， ２Ｈ）， １．３３－１．２８ （ｍ， ６Ｈ）．
ステップ３：ウンデカ－１，１０－ジエン－６－アミン（２９－４）
Figure 2024508047000242
２－（１－ペンタ－４－エニルヘキサ－５－エニル）イソインドリン－１，３－ジオン（２５０ｇ、８４０．６５ｍｍｏｌ、１当量）のＥｔＯＨ溶液（１０００ｍＬ）に、Ｎ２Ｈ４・Ｈ２Ｏ（８５．８８ｇ、１．６８ｍｏｌ、８３．３８ｍＬ、９８％純度、２当量）を加えた。この混合物を９５℃で２時間撹拌した。反応混合物を３回濾過し、濾液を濃縮した。粗製物をＥｔＯＡｃ（５００ｍＬ）に溶解し、有機相を水（５００ｍＬ×３）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮して、化合物２９－４（１３０ｇ、７７７．０９ｍｍｏｌ、９２．４４％収率）を黄色の油状物として得た。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝ ５．８３－５．７６ （ｍ， ２Ｈ）， ５．０１－４．９２ （ｍ， ４Ｈ）， ２．７１－２．６８ （ｍ， １Ｈ）， ２．０５－２．０２ （ｍ， ４Ｈ）， １．４５－１．２７ （ｍ， ８Ｈ）．
ステップ４：４－ニトロ－Ｎ－（１－ペンタ－４－エニルヘキサ－５－エニル）ベンゼンスルホンアミド（２９－５）
Figure 2024508047000243
ウンデカ－１，１０－ジエン－６－アミン（６０ｇ、３５８．６６ｍｍｏｌ、１当量）及び４－ニトロベンゼンスルホニルクロリド（８７．４３ｇ、３９４．５２ｍｍｏｌ、１．１当量）のＣＨ２Ｃｌ２溶液（５００ｍＬ）に、ＴＥＡ（７２．５８ｇ、７１７．３２ｍｍｏｌ、９９．８４ｍＬ、２当量）を加えた。この混合物を２５℃で１２時間撹拌した。水（５００ｍＬ）を加えて反応混合物をクエンチし、次いでＣＨ２Ｃｌ２（１０００ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機層をブライン（５００ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。この残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（石油エーテル／酢酸エチル＝２０／１から３／１）によって精製して、化合物２９－５（６０ｇ、１７０．２４ｍｍｏｌ、４７．４７％収率）を黄色の油状物として得た。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝ ８．３７ （ｄ， Ｊ ＝ ８．８ Ｈｚ， ２Ｈ）， ８．０８ （ｄ， Ｊ ＝ ８．８ Ｈｚ， ２Ｈ）， ５．７１－５．６２ （ｍ， ２Ｈ）， ４．９３－４．８９ （ｍ， ４Ｈ）， ３．３５－３．３０ （ｍ， １Ｈ）， １．９７－１．９１ （ｍ， ４Ｈ）， １．３３－１．２５ （ｍ， ８Ｈ）．
ステップ５：５－［（４－ニトロフェニル）スルホニルアミノ］ノナン二酸（２９－６）
Figure 2024508047000244
まず、４－ニトロ－Ｎ－（１－ペンタ－４－エニルヘキサ－５－エニル）ベンゼンスルホンアミド（２０ｇ、５６．７５ｍｍｏｌ、１当量）を含むＣＨ２Ｃｌ２（２００ｍＬ）及びＭｅＯＨ（２００ｍＬ）の溶液を－７０℃に冷却し、薄青色が明らかになるまでオゾン（１３６．１９ｍｇ、２．８４ｍｍｏｌ）を反応混合物中に通気した。次いで、青色が消えるまで反応混合物中にＮ２を通気した。次いでＰＰｈ３（４４．６５ｇ、１７０．２４ｍｍｏｌ、３当量）を加え、反応物を２０℃で１２時間撹拌した。反応混合物を真空中で濃縮して残渣を得た。この残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（石油エーテル／酢酸エチル＝２０／１から１／１）によって精製して、化合物４－ニトロ－Ｎ－［５－オキソ－１－（４－オキソブチル）ペンチル］ベンゼンスルホンアミド（１２．６ｇ、３５．３５ｍｍｏｌ、６２．３０％収率）を黄色の油状物として得た。次に、４－ニトロ－Ｎ－［５－オキソ－１－（４－オキソブチル）ペンチル］ベンゼンスルホンアミド（１２ｇ、３３．６７ｍｍｏｌ、１当量）のＡＣＮ溶液（１５０ｍＬ）に、ベンゼン－１，３－ジオール（１８．５４ｇ、１６８．３５ｍｍｏｌ、２８．０９ｍＬ、５当量）及びリン酸二水素ナトリウム（１Ｍ、１０１．０１ｍＬ、３当量）を加え、次いで亜塩素酸ナトリウム（１Ｍ、１６８．３５ｍＬ、５当量）の水溶液（１５０ｍＬ）を０℃で滴加した。この混合物を２５℃で１２時間撹拌した。反応混合物をＨＣｌ水溶液（４Ｍ）でｐＨ＝２～３に中和した。水相をＥｔＯＡｃ（５００ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を、飽和Ｎａ２ＳＯ３水溶液（２００ｍＬ×３）及びブライン（１００ｍＬ×２）で連続的に洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮して残渣を得た。この残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（石油エーテル／酢酸エチル＝２０／１から０／１）によって精製して、化合物２９－６（５．８ｇ、１４．９３ｍｍｏｌ、４４．３５％収率）を黄色の固体として得た。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ６） δ ＝ １１．９４ （ｓ， ２Ｈ）， ８．３９ （ｄ， Ｊ ＝ ８．８ Ｈｚ， ２Ｈ）， ８．０４ （ｄ， Ｊ ＝ ８．８ Ｈｚ， ２Ｈ）， ７．９５ （ｄ， Ｊ ＝ ８．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．１５ － ３．１４ （ｍ， １Ｈ）， ２．０３ （ｔ， Ｊ ＝ ５．６ Ｈｚ， ４Ｈ）， １．３３－１．２３ （ｍ， ８Ｈ）．
ステップ６：ビス（１－ヘプチルオクチル）５－［（４－ニトロフェニル）スルホニルアミノ］ノナンジオエート（２９－７）
Figure 2024508047000245
まず、５－［（４－ニトロフェニル）スルホニルアミノ］ノナン二酸（２ｇ、５．１５ｍｍｏｌ、１当量）のＣＨ２Ｃｌ２溶液（２０ｍＬ）に、二塩化オキサリル（１．９６ｇ、１５．４５ｍｍｏｌ、１．３５ｍＬ、３当量）及びＤＭＦ（３．７６ｍｇ、５１．４９ｕｍｏｌ、３．９６ｕＬ、０．０１当量）を加えた。この混合物を０℃で２時間撹拌した。反応混合物を減圧下で濃縮して、化合物５－［（４－ニトロフェニル）スルホニルアミノ］ノナンジオイルジクロリド（２ｇ、４．７０ｍｍｏｌ、９１．３３％収率）を黄色の油状物として得た。次に、ペンタデカン－８－オール（２．１５ｇ、９．４１ｍｍｏｌ、２当量）のＣＨ２Ｃｌ２溶液（３０ｍＬ）に、５－［（４－ニトロフェニル）スルホニルアミノ］ノナンジオイルジクロリド（２ｇ、４．７０ｍｍｏｌ、１当量）を加えた。この混合物を２５℃で１２時間撹拌した。反応混合物を減圧下で濃縮して残渣を得た。この残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（石油エーテル／酢酸エチル＝２０／１から１／１）によって精製して、化合物２９－７（２．５ｇ、３．０９ｍｍｏｌ、６５．７０％収率）を黄色の油状物として得た。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝ ８．３６ （ｄ， Ｊ ＝ ８．８ Ｈｚ， ２Ｈ）， ８．０８ （ｄ， Ｊ ＝ ８．８ Ｈｚ， ２Ｈ）， ４．８７－４．８２ （ｍ， ２Ｈ）， ３．３１ － ３．３０ （ｍ， １Ｈ）， ２．２１ （ｔ， Ｊ ＝ ６．０ Ｈｚ， ４Ｈ）， １．５０－１．４１ （ｍ， １６Ｈ）， １．３２－１．２６ （ｍ， ４０Ｈ）， ０．９０－０．８７（ｍ， １２Ｈ）．
ステップ７：ビス（１－ヘプチルオクチル）５－［（４－ニトロフェニル）スルホニル－プロピル－アミノ］ノナンジオエート（２９－８）
Figure 2024508047000246
ビス（１－ヘプチルオクチル）５－［（４－ニトロフェニル）スルホニルアミノ］ノナンジオエート（５ｇ、６．１８ｍｍｏｌ、１当量）及び１－ヨードプロパン（３．１５ｇ、１８．５４ｍｍｏｌ、１．８１ｍＬ、３当量）のＤＭＦ溶液（８０ｍＬ）に、Ｃｓ２ＣＯ３（６．０４ｇ、１８．５４ｍｍｏｌ、３当量）、ＫＩ（５１２．８６ｍｇ、３．０９ｍｍｏｌ、０．５当量）、及びＴＢＡＩ（１．１４ｇ、３．０９ｍｍｏｌ、０．５当量）を加えた。この混合物を１２０℃で１２時間撹拌した。反応混合物を飽和水（２００ｍＬ）でクエンチし、次いでＥｔＯＡＣ（２００ｍＬ）で希釈した。水相をＥｔＯＡＣ（２００ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相をブライン（３００ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮して残渣を得た。この残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（石油エーテル／酢酸エチル＝４０／１から５／１）によって精製して、化合物２９－８（５ｇ、５．８７ｍｍｏｌ、９５．０６％収率）を黄色の油状物として得た。
ＬＣＭＳ： ［Ｍ＋Ｎａ］＋： ８７３．６；
ステップ８：ビス（１－ヘプチルオクチル）５－（プロピルアミノ）ノナンジオエート（２９－９）
Figure 2024508047000247
ビス（１－ヘプチルオクチル）５－［（４－ニトロフェニル）スルホニル－プロピル－アミノ］ノナンジオエート（５ｇ、５．８７ｍｍｏｌ、１当量）のＤＭＦ溶液（１００ｍＬ）に、Ｃｓ２ＣＯ３（３．８３ｇ、１１．７４ｍｍｏｌ、２当量）を加え、次いでベンゼンチオール（１．８６ｇ、１６．８８ｍｍｏｌ、１．７２ｍＬ、２．８８当量）を滴加した。この混合物を２５℃で１２時間にわたってＮ２下で撹拌した。水（４００ｍＬ）を加えて反応混合物をクエンチし、次いでＥｔＯＡＣ（５００ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機層をブライン（３００ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。この残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（石油エーテル／酢酸エチル＝１０／１から０／１）によって精製して、化合物２９－９（１．７ｇ、２．５５ｍｍｏｌ、４３．４８％収率）を黄色の油状物として得た。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝ ４．９１－４．８４ （ｍ， ２Ｈ）， ２．５６－２．５４ （ｍ， ２Ｈ）， ２．３０ （ｔ， Ｊ ＝ ７．６ Ｈｚ， ４Ｈ）， １．６６－１．５１ （ｍ， ４Ｈ）， １．４８－１．４６ （ｍ， １６Ｈ）， １．３０－１．２６ （ｍ， ４０Ｈ）， ０．９４－０．８７ （ｍ， １５Ｈ）．
ステップ９：ビス（１－ヘプチルオクチル）５－［２－（１－メチルピロリジン－２－イル）エチルスルファニルカルボニル－プロピル－アミノ］ノナンジオエート（ＣＡＴ２９）
Figure 2024508047000248
ビス（１－ヘプチルオクチル）５－（プロピルアミノ）ノナンジオエート（１．５ｇ、２．２５ｍｍｏｌ、１当量）の乾燥ＣＨ２Ｃｌ２溶液（２０ｍＬ）に、ＴＥＡ（６８３．６０ｍｇ、６．７６ｍｍｏｌ、９４０．３０ｕＬ、３当量）及び炭酸ビス（トリクロロメチル）（３３４．１２ｍｇ、１．１３ｍｍｏｌ、０．５当量）をＮ２雰囲気下０℃で加えた。得られた溶液を２０℃で１時間撹拌した。反応物を減圧下で濃縮し、Ｎ２雰囲気下に保った。ＮａＯＨ（６３０．４８ｍｇ、１５．７６ｍｍｏｌ、７当量）を０℃の乾燥ＴＨＦ（５０ｍＬ）に溶解し、次いで２－（１－メチルピロリジン－２－イル）エタンチオール（１．６４ｇ、１１．２６ｍｍｏｌ、５当量）をＮ２雰囲気下で加えた。この得られた溶液に、ＴＨＦ（５０ｍＬ）中の塩化カルバモイルを０℃でゆっくりと加えた。この混合物を２５℃で２時間撹拌した。反応混合物を飽和ＮＨ４Ｃ１水溶液（１００ｍＬ）でクエンチし、次いでＥｔＯＡＣ（１００ｍＬ）で希釈した。水相をＥｔＯＡＣ（１００ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相をブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮して残渣を得た。この残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（石油エーテル／酢酸エチル＝１０／１から１／２）によって精製して、化合物ＣＡＴ２９（５３０ｍｇ、６３０．４０ｕｍｏｌ、３５．１９％収率、９９．６％純度）を黄色の油状物として得た。
ＬＣＭＳ： ［Ｍ＋Ｈ］＋： ８３８．３；
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝ ４．８８－４．８３ （ｍ， ２Ｈ）， ４．２５－３．８１ （ｍ， １Ｈ）， ３．１１－２．８６ （ｍ， ５Ｈ）， ２．３３－２．３０ （ｍ， ６Ｈ）， ２．１０－１．９７ （ｍ， ４Ｈ）， １．５８－１．５０ （ｍ， ２３Ｈ）， １．３２－１．２２ （ｍ， ４０ Ｈ）， ０．９０－０．８７ （ｍ， １５Ｈ）．
実施例１．３０：ＣＡＴ３０の合成
Figure 2024508047000249
ステップ１：１－（シクロプロピルメチル）－４－（トリチルチオ）ピペリジン（３０－２）
Figure 2024508047000250
 ４－トリチルスルファニルピペリジン（１５ｇ、３１．６８ｍｍｏｌ、１当量、ＴＦＡ）、シクロプロパンカルバルデヒド（１６．６５ｇ、９５．０３ｍｍｏｌ、１７．８ｍＬ、４０％純度、３当量）、ＨＯＡｃ（３．８０ｇ、６３．３５ｍｍｏｌ、３．６ｍＬ、２当量）、ＫＯＡｃ（６．２２ｇ、６３．３５ｍｍｏｌ、２当量）をＭｅＯＨ（５０ｍＬ）に含む混合物を脱気し、Ｎ２で３回パージし、混合物を２０℃で２時間にわたってＮ２雰囲気下で撹拌した。次いで、ＮａＢＨ（ＯＡｃ）３（１３．４３ｇ、６３．３５ｍｍｏｌ、２当量）を加えた。得られた混合物を２０℃で１４時間撹拌した。完了後、氷水（５０ｍＬ）を加え、飽和ＮａＨＣＯ３溶液で混合物をｐＨ８～９に中和した。水相をＥｔＯＡｃ（１５０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相をブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮して粗生成物を得た。この残渣を逆相ＭＰＬＣ（ＭｅＣＮ：Ｈ２Ｏ：０～４５％）によって精製して、化合物２９－２（７．２ｇ、１５．６７ｍｍｏｌ、５０．１％収率、９０％純度）を黄色の固体として得た。
ＬＣＭＳ ［Ｍ＋Ｈ］ ＋ ： ４１４．５
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝ ７．５６ － ７．３９ （ｍ， ６Ｈ）， ７．３８ － ７．３０ （ｍ， ９Ｈ）， ３．６５ － ３．４８ （ｍ， ２Ｈ）， ３．０２ － ２．７９ （ｍ， ４Ｈ）， ２．４７ － ２．３１ （ｍ， ３Ｈ）， ２．２８ － ２．１７ （ｍ， ２Ｈ）， １．４３ － １．３７ （ｍ， １Ｈ）， １．２５ － １．０１ （ｍ， １Ｈ）， ０．８３ － ０．７６ （ｍ， ２Ｈ）， ０．４５ － ０．３５ （ｍ， ２Ｈ）．
ステップ２：１－（シクロプロピルメチル）ピペリジン－４－チオール（２９－３）
Figure 2024508047000251
１－（シクロプロピルメチル）－４－トリチルスルファニル－ピペリジン（６ｇ、１４．５１ｍｍｏｌ、１当量）のＤＣＭ溶液（８０ｍＬ）に、ＴＦＡ（３０．８０ｇ、２７０．１３ｍｍｏｌ、２０ｍＬ、１８．６２当量）及びＴＩＰＳ（５．６９ｇ、２９．０１ｍｍｏｌ、２当量）をＮ２下０℃で加えた。添加後、得られた混合物を２０℃で４時間撹拌した。完了後、反応混合物を減圧下で濃縮してＴＦＡを除去し、濾過した。濾液をＭｅＯＨ（１５０ｍＬ）で希釈し、ＰＥ（５０ｍＬ×５）で抽出した。ＭｅＯＨ層を減圧下で濃縮して、化合物３０－３（４．１ｇ、粗製、ＴＦＡ）を黄色の油状物として得た。この粗生成物をさらに精製することなく次のステップで使用した。
ステップ３：ジ（ペンタデカン－８－イル）４，４’－（（（（１－（シクロプロピルメチル）ピペリジン－４－イル）チオ）カルボニル）アザンジイル）ジブタノエート（ＣＡＴ３０）
Figure 2024508047000252
１－ヘプチルオクチル４－［［４－（１－ヘプチルオクトキシ）－４－オキソ－ブチル］アミノ］ブタノエート（１．８ｇ、２．９５ｍｍｏｌ、１当量）を乾燥ＣＨ２Ｃｌ２（３０ｍＬ）に溶解した溶液に、ＴＥＡ（８９５．７８ｍｇ、８．８５ｍｍｏｌ、１．２３ｍＬ、３当量）及びトリホスゲン（５２５．３９ｍｇ、１．７７ｍｍｏｌ、０．６当量）をＮ２下０℃で加えた。得られた溶液を２０℃で１時間撹拌した。得られた反応物を減圧下で濃縮した。１－（シクロプロピルメチル）ピペリジン－４－チオール（２．５３ｇ、８．８５ｍｍｏｌ、３当量、ＴＦＡ）を乾燥ＴＨＦ（２５ｍＬ）に溶解した溶液に、ＮａＯＨ（８２６．２２ｍｇ、２０．６６ｍｍｏｌ、７当量）をＮ２下０℃で加えた。この得られた溶液に、ＴＨＦ（２０ｍＬ）に溶解した塩化カルバモイルを、シリンジによってＮ２下０℃でゆっくりと加えた。得られた溶液を２０℃で１５時間撹拌した。完了後、反応混合物を０℃のＮＨ４Ｃｌ（８０ｍＬ）によってクエンチし、次いでＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）で希釈した。水相をＥｔＯＡｃ（６０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相をブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮して残渣を得た。この残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、ＥｔＯＡｃ：ＰＥ：０～２０％）及びポジティブ分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗｅｌｃｈ Ｕｌｔｉｍａｔｅ ＸＢ－ＳｉＯＨ ２５０＊５０＊１０ｕｍ；移動相：［ヘキサン－ＥｔＯＨ］；Ｂ％：０％－２０％、１０分）によって精製すると、ＣＡＴ３０（２３５ｍｇ、０．２８ｍｍｏｌ、４４．３％収率、９８％純度）が淡黄色の油状物として得られた。
ＬＣＭＳ ［Ｍ＋Ｈ］ ＋ ： ８０８．４
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝ ４．８９ － ４．８５ （ｍ， ２Ｈ）， ３．４８ － ３．３１ （ｍ， ５Ｈ）， ２．９７ － ２．９３ （ｍ， ２Ｈ）， ２．３３ － ２．２８ （ｍ， ４Ｈ）， ２．２５ － ２．１８ （ｍ， ４Ｈ）， ２．０８ － ２．０１ （ｍ， ２Ｈ）， １．９１ － １．８７ （ｍ， ４Ｈ）， １．７７ － １．６８ （ｍ， ３Ｈ）， １．５５ － １．１８ （ｍ， ８Ｈ）， １．３２ － １．２６ （ｍ， ４０Ｈ）， ０．９１ － ０．８６ （ｍ， １２Ｈ）， ０．５３ － ０．５０ （ｍ， ２Ｈ）， ０．１１ － ０．０８ （ｍ， ２Ｈ）．
実施例１．３１：ＣＡＴ３１の合成
Figure 2024508047000253
ステップ１：４－クロロ－１－（ピロリジン－１－イル）ブタン－１－オン（３１－３）
Figure 2024508047000254
ピロリジン（５．００ｇ、７０．３ｍｍｏｌ、５．８７ｍＬ、１．００当量）のＴＨＦ溶液（１２０ｍＬ）に、ＴＥＡ（１４．２ｇ、１４１ｍｍｏｌ、１９．６ｍＬ、２．００当量）を加え、次いで４－クロロブタノイルクロリド（１１．９ｇ、８４．４ｍｍｏｌ、９．４４ｍＬ、１．２０当量）をゆっくりと加えた。この混合物を２５℃で５時間撹拌した。２５℃の水（１００ｍＬ）を加えて反応混合物をクエンチし、次いでＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機層をブライン（１００ｍＬ×２）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して残渣を得た。この残渣をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、石油エーテル／ＥｔＯＡｃ＝１／０から３／１）によって精製した。化合物３１－３（５．６０ｇ、２８．３ｍｍｏｌ、４０．２％収率、８８．８％純度）が黄色の油状物として得られた。
ＬＣＭＳ ［Ｍ＋１］ ＋ ： １７５．９．
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝ ３．６４ （ｔ， Ｊ ＝ ６．０ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．４６ －３．４０ （ｍ， ４Ｈ）， ２．４３ （ｔ， Ｊ ＝ ６．８ Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．１１５ －２．０９ （ｍ， ２Ｈ）， １．９８ － １．９１ （ｍ， ２Ｈ）， １．８８ － １．８１ （ｍ， ２Ｈ）．
ステップ２：１－（ピロリジン－１－イル）－４－（トリチルチオ）ブタン－１－オン（３１－４）
Figure 2024508047000255
４－クロロ－１－ピロリジン－１－イル－ブタン－１－オン（５．００ｇ、２８．５ｍｍｏｌ、１．００当量）、トリフェニルメタンチオール（９．４４ｇ、３４．２ｍｍｏｌ、１．２０当量）、Ｋ２ＣＯ３（１５．７ｇ、１１４ｍｍｏｌ、４．００当量）、ＫＩ（４７３ｍｇ、２．８５ｍｍｏｌ、０．１０当量）をＤＭＦ（５０ｍＬ）に含む混合物を脱気し、Ｎ２で３回パージしてから、混合物を５０℃で１０時間にわたってＮ２雰囲気下で撹拌した。反応混合物をＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）とＨ２Ｏ（１００ｍＬ）とに分配した。有機相を分離し、ブライン（６０ｍＬ×３）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して残渣を得た。この残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（ＩＳＣＯ（登録商標）；８０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、１００ｍＬ／分で０～１０％ＥｔＯＡｃ／石油エーテルグラジエントの溶離液）によって精製した。化合物３１－４（９．３２ｇ、１７．７ｍｍｏｌ、６２．２％収率、７９．０％純度）が白色の固体として得られた。
ＬＣＭＳ ［２Ｍ＋１］ ＋ ： ８３１．４．
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝ ７．３７ － ７．３２ （ｍ， ６Ｈ）， ７．２３ － ７．１８ （ｍ， ６Ｈ）， ７．１６ － ７．１１ （ｍ， ３Ｈ）， ３．３３ （ｔ， Ｊ ＝ ６．８ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．２５ （ｔ， Ｊ ＝ ６．８ Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．１８ （ｔ， Ｊ ＝ ６．８ Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．１３ （ｔ， Ｊ ＝ ７．６ Ｈｚ， ２Ｈ）， １．８７ － １．８１ （ｍ， ２Ｈ）， １．７８ － １．７３ （ｍ， ２Ｈ）， １．６７ （ｔ， Ｊ ＝ ７．６ Ｈｚ， ２Ｈ）．
ステップ３：１－（４－（トリチルチオ）ブチル）ピロリジン（３１－５）
Figure 2024508047000256
１－ピロリジン－１－イル－４－トリチルスルファニル－ブタン－１－オン（９．００ｇ、２１．７ｍｍｏｌ、１．００当量）のＴＨＦ溶液（１２０ｍＬ）に、０℃のＢＨ３－Ｍｅ２Ｓ（１０．０Ｍ、１０．８ｍＬ、５．００当量）をシリンジによってＮ２雰囲気下で滴加し、次いでこの混合物を２０℃で１０時間にわたってＮ２雰囲気下で撹拌した。反応物をメタノール（１００ｍＬ）によってクエンチし、濃縮した。次いでこの残渣をＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）及びＨ２Ｏ（１００ｍＬ）で希釈し、ＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ×３）で抽出し、ブライン（２００ｍＬ）によって洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して残渣を得た。水相を次亜塩素酸ナトリウム溶液によってクエンチし、廃棄した。化合物３１－５（７．６０ｇ、１２．５ｍｍｏｌ、５７．７％収率、６６．０％純度）が黄色の固体として得られた。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝ ７．３９ － ７．３７ （ｍ， ６Ｈ）， ７．２７ － ７．２３ （ｍ， ６Ｈ）， ７．２０ － ７．１６ （ｍ， ３Ｈ）， ３．１３－ ３．０８ （ｍ， ２Ｈ）， ２．６３ － ２．５１ （ｍ， ４Ｈ）， ２．１７ － ２．１０ （ｍ， ４Ｈ）， １．８２ － １．７９ （ｍ， ２Ｈ）， １．７５ － １．６９ （ｍ， ２Ｈ）， １．３３ － １．２５ （ｍ， ２Ｈ）．
ステップ４：４－（ピロリジン－１－イル）ブタン－１－チオール（３１－６）
Figure 2024508047000257
１－（４－トリチルスルファニルブチル）ピロリジン（５．００ｇ、１２．５ｍｍｏｌ、１．００当量）をＴＦＡ（１６．０ｍＬ）及びＤＣＭ（５２．０ｍＬ）に含む混合物を脱気し、Ｎ２で３回パージしてから、トリイソプロピルシラン（３．９４ｇ、２４．９ｍｍｏｌ、５．１１ｍＬ、２．００当量）を０℃でゆっくりと加えた。この混合物を２０℃で３時間にわたってＮ２雰囲気下で撹拌した。反応混合物を減圧下で濃縮した。この混合物をメタノール（５０ｍＬ）で希釈し、石油エーテル（６０ｍＬ×５）で洗浄した。メタノール層を減圧下で濃縮して、化合物３１－６（３．４０ｇ、粗製、ＴＦＡ塩）を黄色の油状物として得た。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝ ３．３４ － ３．２８ （ｍ， １Ｈ）， ３．１５ － ３．１０ （ｍ， １Ｈ）， ２．９５ － ２．８２ （ｍ， ４Ｈ）， ２．６０ － ２．５４ （ｍ， ２Ｈ）， ２．１３ － ２．０８ （ｍ， ２Ｈ）， １．９４ － １．７８ （ｍ， ３Ｈ）， １．７２ － １．６２ （ｍ， ２Ｈ）， １．４１ － １．３５ （ｍ， １Ｈ）．
ステップ５：ジ（ペンタデカン－８－イル）４，４’－（（（（４－（ピロリジン－１－イル）ブチル）チオ）カルボニル）アザンジイル）ジブタノエート（ＣＡＴ３１）
Figure 2024508047000258
１－ヘプチルオクチル４－［［４－（１－ヘプチルオクトキシ）－４－オキソ－ブチル］アミノ］ブタノエート（２．００ｇ、３．２８ｍｍｏｌ、１．００当量）の乾燥ジクロロメタン溶液（２５．０ｍＬ）に、ＴＥＡ（９９５ｍｇ、９．８４ｍｍｏｌ、１．３７ｍＬ、３．００当量）及びトリホスゲン（９２０ｍｇ、３．１０ｍｍｏｌ、０．９０当量）をＮ２雰囲気下０℃で加えた。得られた溶液を２０℃で１時間撹拌した。得られた反応物を減圧下で濃縮した。４－ピロリジン－１－イルブタン－１－チオール（３．１４ｇ、１１．５ｍｍｏｌ、３．５０当量、ＴＦＡ塩）の乾燥ＴＨＦ溶液（２５．０ｍＬ）に、ＮａＯＨ（１．３１ｇ、３２．８ｍｍｏｌ、１０．０当量）をＮ２雰囲気下０℃で加えた。この得られた溶液に、ＴＨＦ（１５．０ｍＬ）中の塩化カルバモイルをＮ２雰囲気下０℃で加えた。得られた溶液を２０℃で１５時間撹拌した。反応混合物を０℃のＮＨ４Ｃｌ（６０．０ｍＬ）によってクエンチし、次いでＥｔＯＡｃ（６０．０ｍＬ）で希釈した。水相をＥｔＯＡｃ（６０．０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相をブライン（７０．０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮して残渣を得た。この残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（ＩＳＣＯ（登録商標）；１２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、１００ｍＬ／分で０～５０％ＥｔＯＡｃ／石油エーテルグラジエントの溶離液）によって精製し、次いでポジティブ分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗｅｌｃｈ Ｕｌｔｉｍａｔｅ ＸＢ－ＣＮ ２５０＊５０＊１０ｕｍ；移動相：［ヘキサン－ＥｔＯＨ］；Ｂ％：０％－３５％、２０分）によって精製した。化合物ＣＡＴ３１（２６０ｍｇ、０．３２２ｍｍｏｌ、１０．２％収率、９８．５％純度）が黄色の油状物として得られた。
ＬＣＭＳ ［Ｍ＋１］ ＋ ： ７９６．１．
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝ ４．９０ － ４．８４ （ｍ， ２Ｈ）， ３．５８ － ３．５３ （ｍ， １Ｈ）， ３．３８ － ３．３４ （ｍ， ４Ｈ）， ３．２６ － ３．２０ （ｍ， １Ｈ）， ２．９５ － ２．８９ （ｍ， ２Ｈ）， ２．５３ － ２．５２ （ｍ， ２Ｈ）， ２．４９ － ２．４６ （ｍ， ２Ｈ）， ２．３３ － ２．２９ （ｍ， ４Ｈ）， ２．１４ － ２．０７ （ｍ， １Ｈ）， ２．００ － １．９７ （ｍ， １Ｈ）， １．８９ － １．８７ （ｍ， ４Ｈ）， １．８０ － １．７７ （ｍ， ２Ｈ）， １．６５ － １．６３ （ｍ， ２Ｈ）， １．５２ － １．５１ （ｍ， ８Ｈ）， １．３２ － １．２７ （ｍ， ４２Ｈ）， ０．８８ （ｔ， Ｊ ＝ ６．４ Ｈｚ， １２Ｈ）．
実施例１．３２：ＣＡＴ３２の合成
Figure 2024508047000259
ステップ１：ジ（ペンタデカン－８－イル）５－（Ｎ－エチル－４－ニトロフェニルスルホンアミド）ノナンジオエート（３２－１０）
Figure 2024508047000260
ジ（ペンタデカン－８－イル）５－（４－ニトロフェニルスルホンアミド）ノナンジオエート（５．００ｇ、６．１８ｍｍｏｌ、１当量）及びヨードエタン（１．１６ｇ、７．４１ｍｍｏｌ、０．５９３ｍＬ、１．２当量）のＭｅＣＮ溶液（５０ｍＬ）に、Ｃｓ２ＣＯ３（６．０４ｇ、１８．５ｍｍｏｌ、３当量）、ＴＢＡＩ（２２．８ｍｇ、６１．８ｕｍｏｌ、０．０１当量）、及びＫＩ（５１３ｍｇ、３．０９ｍｍｏｌ、０．５当量）を加えた。この混合物を９０℃で１０時間撹拌した。反応混合物を濾過した。濾液を水（５０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（３０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機層をブライン（３０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して残渣を得た。この残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（ＩＳＣＯ（登録商標）；１２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、１００ｍＬ／分で０～１０％酢酸エチル／石油エーテルグラジエントの溶離液）によって精製して、ジ（ペンタデカン－８－イル）５－（Ｎ－エチル－４－ニトロフェニルスルホンアミド）ノナンジオエート（４．２０ｇ、４．６７ｍｍｏｌ、７５．５％収率、９３％純度）を黄色の油状物として得た。
ＬＣＭＳ ［Ｍ＋２３］ ＋ ： ８５９．５
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝ ８．３５ （ｄ， Ｊ ＝ ８．８ Ｈｚ， ２Ｈ）， ８．０３ （ｄ， Ｊ ＝ ８．８ Ｈｚ， ２Ｈ）， ４．８６ － ４．８０ （ｍ， ２Ｈ）， ３．２３ － ３．１８ （ｍ， ２Ｈ）， ２．２８ － ２．１９ （ｍ， ４Ｈ）， １．５４ － １．４４ （ｍ， １７Ｈ）， １．２６ － １．２３ （ｓ， ４０Ｈ）， ０．９０ － ０．８７ （ｍ， １５Ｈ）．
ステップ２：ジ（ペンタデカン－８－イル）５－（エチルアミノ）ノナンジオエート（３１－１１）
Figure 2024508047000261
ジ（ペンタデカン－８－イル）５－（Ｎ－エチル－４－ニトロフェニルスルホンアミド）ノナンジオエート（４．２０ｇ、５．０２ｍｍｏｌ、１当量）及びＣｓ２ＣＯ３（３．２７ｇ、１０．０ｍｍｏｌ、２当量）のＤＭＦ溶液（５０ｍＬ）に、ベンゼンチオール（１．６７ｇ、１５．２ｍｍｏｌ、１．５５ｍＬ、３．０２当量）を加え、次いでこの混合物を２５℃で３時間にわたってＮ２雰囲気下で撹拌した。水（１００ｍＬ）を加えて反応混合物をクエンチし、次いで酢酸エチル（２００ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機層をブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。この残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（ＩＳＣＯ（登録商標）；１２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、１００ｍＬ／分で０～５０％酢酸エチル／石油エーテルグラジエントの溶離液）によって精製して、ジ（ペンタデカン－８－イル）５－（エチルアミノ）ノナンジオエート（２．５０ｇ、３．８３ｍｍｏｌ、７６．４％収率）を黄色の油状物として得た。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝ ４．９０ － ４．８４ （ｍ， ２Ｈ）， ２．６５ － ２．６０ （ｍ， ２Ｈ）， ２．５４ － ２．５２ （ｍ， １Ｈ）， ２．３０ （ｔ， Ｊ ＝ ７．６ Ｈｚ， ４Ｈ）， １．６１ － １．４０ （ｍ， １６Ｈ）， １．２７ － １．２４ （ｍ， ４０Ｈ）， １．１１ （ｔ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， ３Ｈ）， ０．９５ － ０．８７ （ｍ， １２Ｈ）．
ステップ３：２－（２－クロロエチル）－１－メチルピロリジン（３２－２Ａ）
Figure 2024508047000262
２－（１－メチルピロリジン－２－イル）エタノール（４５．０ｇ、３４８ｍｍｏｌ、４７．３ｍＬ、１当量）のＣＨ２Ｃｌ２溶液（５００ｍＬ）に、ＳＯＣｌ２（１２４ｇ、１．０４ｍｏｌ、７５．８ｍＬ、３当量）を０℃でゆっくりと滴加した。次いで、この混合物を４０℃で２時間撹拌した。反応混合物を濾過し、減圧下で濃縮して、化合物３２－２Ａ（５３．０ｇ、粗製、ＨＣｌ）を褐色の固体として得た。この化合物を次のステップに直接使用した。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ６） δ ＝ １１．１３ （ｓ， １Ｈ）， ３．８４ － ３．８０ （ｍ， １Ｈ）， ３．７１ － ３．６４ （ｍ， １Ｈ）， ３．５２ － ３．４８ （ｍ， １Ｈ）， ３．３９ － ３．３０ （ｍ， １Ｈ）， ３．０６ － ２．９７ （ｍ， １Ｈ）， ２．７５ （ｄ， Ｊ ＝ ４．８ Ｈｚ， ３Ｈ）， ２．３７ － ２．３３ （ｍ， １Ｈ）， ２．２４ － ２．１１ （ｍ， ２Ｈ）， １．９９ － １．８４ （ｍ， ２Ｈ）， １．７４ － １．６４ （ｍ， １Ｈ）．
ステップ４：１－メチル－２－（２－（トリチルチオ）エチル）ピロリジン（３２－３Ａ）
Figure 2024508047000263
２－（２－クロロエチル）－１－メチルピロリジン（５３．０ｇ、３５９ｍｍｏｌ、１当量）及びトリフェニルメタンチオール（１１９ｇ、４３１ｍｍｏｌ、１．２当量）のＤＭＦ溶液（５００ｍＬ）に、Ｋ２ＣＯ３（１９８ｇ、１．４４ｍｏｌ、４当量）及びＫＩ（５．９６ｇ、３５．９ｍｍｏｌ、０．１当量）を加えた。この混合物を８０℃で２時間撹拌した。反応混合物を濾過し、水（１０００ｍＬ）及びＥｔＯＡｃ（３００×３ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して残渣を得た。この残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（ＩＳＣＯ（登録商標）；３３０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、１００ｍＬ／分で０～５０％酢酸エチル／石油エーテルグラジエントの溶離液）によって精製して、化合物３２－３Ａ（１２．０ｇ、３０．７ｍｍｏｌ、１８．３％収率、９９％純度）を黄色の油状物として得た。
ＬＣＭＳ ［Ｍ＋１］ ＋ ： ３８８．２．
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝ ７．４４ － ７．４１ （ｍ， ６Ｈ）， ７．３１ － ７．２７ （ｍ， ６Ｈ）， ７．２３ － ７．２０ （ｍ， ３Ｈ）， ２．２０ （ｓ， ３Ｈ）， ２．１８ － ２．０８ （ｍ， ２Ｈ）， １．９８ － １．９２ （ｍ， １Ｈ）， １．７８ － １．７１ （ｍ， ３Ｈ）， １．６５ － １．５６ （ｍ， ２Ｈ）， １．３５ － １．３０ （Ｍ， ， １Ｈ）， １．２３ － １．１５ （ｍ， １Ｈ）．
ステップ５：２－（１－メチルピロリジン－２－イル）エタンチオール（３２－４Ａ）
Figure 2024508047000264
１－メチル－２－（２－（トリチルチオ）エチル）ピロリジン（５．５０ｇ、１４．２ｍｍｏｌ、１当量）を含むＴＦＡ（１０ｍＬ）及びＣＨ２Ｃｌ２（３０ｍＬ）の溶液に、トリイソプロピルシラン（４．４９ｇ、２８．４ｍｍｏｌ、５．８３ｍＬ、２当量）を０℃で加えた。この混合物を２５℃で３時間撹拌した。反応混合物を減圧下で濃縮して残渣を得て、この残渣をメタノール（１０ｍＬ）に溶解し、石油エーテル（１０ｍＬ×５）で抽出した。合わせたメタノール層を減圧下で濃縮して、化合物３２－４Ａ（３．６８ｇ、粗製、ＴＦＡ）を黄色の油状物として得た。この化合物を次のステップに直接使用した。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ６） δ ＝ ３．５７ （ｍ， １Ｈ）， ３．３３ （ｍ， １Ｈ）， ３．０６ （ｍ， １Ｈ）， ２．８２ （ｓ， ３Ｈ）， ２．６４ （ｄ， Ｊ ＝ １５．８ Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．２４ （ｍ， １Ｈ）， ２．１６ － ２．０４ （ｍ， １Ｈ）， １．９８ （ｍ， １Ｈ）， １．９３ － １．７１ （ｍ， ２Ｈ）， １．６２ （ｍ， １Ｈ）．
ステップ６：ジ（ペンタデカン－８－イル）５－（エチル（（（２－（１－メチルピロリジン－２－イル）エチル）チオ）カルボニル）アミノ）ノナンジオエート（ＣＡＴ３２）
Figure 2024508047000265
ジ（ペンタデカン－８－イル）５－（エチルアミノ）ノナンジオエート（２．５０ｇ、３．８３ｍｍｏｌ、１当量）を乾燥ＣＨ２Ｃｌ２（２０ｍＬ）に溶解した溶液に、ＴＥＡ（１．１６ｇ、１１．５ｍｍｏｌ、１．６０ｍＬ、３当量）及びトリホスゲン（１．０７ｇ、３．６１ｍｍｏｌ、０．９４当量）をＮ２下０℃で加えた。得られた溶液を２０℃で１時間撹拌した。得られた反応物を減圧下で濃縮した。２－（１－メチルピロリジン－２－イル）エタンチオール（３．４８ｇ、１３．４ｍｍｏｌ、３．５当量、ＴＦＡ）を含む０℃の乾燥ＴＨＦ（３０ｍＬ）に、ＮａＯＨ（１．５３ｇ、３８．３４ｍｍｏｌ、１０当量）を窒素雰囲気下で加えた。この得られた溶液に、ＴＨＦ（１０ｍＬ）中の塩化カルバモイルを、シリンジによってＮ２下０℃で加えた。得られた溶液を２０℃で２時間撹拌した。反応混合物を０℃のＮＨ４Ｃｌ（５０ｍＬ）によってクエンチし、次いで酢酸エチル（５０ｍＬ）で希釈した。水相を酢酸エチル（５０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相をブライン（３０ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮して残渣を得た。この残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（ＩＳＣＯ（登録商標）；１２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、１００ｍＬ／分で０～５０％酢酸エチル／石油エーテルグラジエントの溶離液）及び分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗｅｌｃｈ Ｕｌｔｉｍａｔｅ Ｃ１８ １５０＊２５ｍｍ＊５ｕｍ；移動相：［水（ＨＣｌ）－ＭｅＯＨ］；Ｂ％：７０％－１００％、１０分）によって精製して、ＣＡＴ３２（４００ｍｇ、４８０．４８ｕｍｏｌ、７３．２６％収率、９８．９％純度）を黄色の油状物として得た。
ＬＣＭＳ ［Ｍ＋１］ ＋ ： ８２４．４．
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝ ４．８８－４．８５ （ｍ， ２Ｈ）， ４．３０ － ３．８２ （ｍ， １Ｈ）， ３．２７ － ３．２６ （ｍ， ２Ｈ）， ３．０５ － ３．０３ （ｍ， １Ｈ）， ２．８９－３．００ （ｍ， １Ｈ）， ２．７８－２．８９ （ｍ， １Ｈ）， ２．３２ （ｓ， ３Ｈ）， ２．３１－２．２５ （ｍ， ３Ｈ）， ２．１６－２．１２ （ｍ， ２Ｈ）， ２．００－１．９７ （ｍ， ２Ｈ）， １．５９－１．５０ （ｍ， ２１Ｈ）， １．２７ － １．２５ （ｍ， ４３Ｈ）， ０．９０ － ０．８７ （ｍ， １２Ｈ）．
実施例１．３３：ＣＡＴ３３の合成
Figure 2024508047000266
ステップ１：４－（クロロメチル）－１－メチル－ピペリジン（３３－２）
Figure 2024508047000267
（１－メチル－４－ピペリジル）メタノール（２０ｇ、１５４．８０ｍｍｏｌ、１当量）のＣＨ２Ｃｌ２溶液（２００ｍＬ）に、ＳＯＣｌ２（２２．１０ｇ、１８５．７６ｍｍｏｌ、１３．４８ｍＬ、１．２当量）を０℃で加えた。この混合物を４０℃で１２時間撹拌した。反応混合物を減圧下で濃縮して、化合物３３－２（２０ｇ、１０８．６３ｍｍｏｌ、７０．１８％収率）を褐色の固体として得た。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ６） δ ＝ １０．９６ （ｓ， １Ｈ）， ３．５６ （ｄ， Ｊ ＝ ５．６ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．６７－３．３３ （ｍ， ２Ｈ）， ２．９７－２．９４ （ｍ， ２Ｈ）， ２．６８ （ｓ， ３Ｈ）， １．９７－１．６２ （ｍ， ５Ｈ）．
ステップ２：１－メチル－４－（トリチルスルファニルメチル）ピペリジン（３３－３）
Figure 2024508047000268
４－（クロロメチル）－１－メチル－ピペリジン（２０ｇ、１０８．６３ｍｍｏｌ、１当量）及びトリフェニルメタンチオール（４５．０４ｇ、１６２．９５ｍｍｏｌ、１．５当量）のＤＭＦ溶液（２００ｍＬ）に、Ｃｓ２ＣＯ３（７０．７９ｇ、２１７．２７ｍｍｏｌ、２当量）及びＫＩ（９．０２ｇ、５４．３２ｍｍｏｌ、０．５当量）を加えた。この混合物を６０℃で１２時間撹拌した。反応混合物を水（３００ｍＬ×３）で希釈し、ＥｔＯＡＣ（４００ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。この残渣をカラムクロマトグラフィー（ＰＥ／ＥｔＯＡｃ＝２０／１から０／１）によって精製して、化合物３３－３（１７ｇ、４３．８６ｍｍｏｌ、４０．３８％収率）を褐色の油状物として得た。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝７．５０ － ７．４７ （ｍ， ６Ｈ）， ７．３３ － ７．２７ （ｍ， ９Ｈ）， ２．６４ － ２．５８ （ｍ， ２Ｈ）， ２．３２ （ｓ， ３Ｈ）， １．９１ － １．８８ （ｍ， ２Ｈ）， １．６６ － １．６１ （ｍ， ３Ｈ）， １．４４－１．２８ （ｍ， ４Ｈ）．
ステップ３：（１－メチル－４－ピペリジル）メタンチオール：（３３－４）
Figure 2024508047000269
１－メチル－４－（トリチルスルファニルメチル）ピペリジン（１７ｇ、４３．８６ｍｍｏｌ、１当量）及びトリイソプロピルシラン（２０．８４ｇ、１３１．５９ｍｍｏｌ、２７．０３ｍＬ、３当量）のＣＨ２Ｃｌ２溶液（２００ｍＬ）に、次いでＴＦＡ（３２．７３ｇ、２８７．００ｍｍｏｌ、２１．２５ｍＬ、６．５４当量）を０℃で加えた。この混合物を２５℃で１２時間撹拌した。反応混合物を減圧下で濃縮してＴＦＡを除去し、これをメタノール（３００ｍＬ×３）で希釈し、ＰＥ（２００ｍＬ×３）で洗浄した。合わせた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、メタノール層を減圧下で濃縮して、化合物３３－４（４ｇ、２７．５４ｍｍｏｌ、６２．７８％収率）を褐色の油状物として得た。
ステップ４：１－ヘプチルオクチル４－［［４－（１－ヘプチルオクトキシ）－４－オキソ－ブチル］－［（１－メチル－４－ピペリジル）メチルスルファニルカルボニル］アミノ］ブタノエート：（ＣＡＴ３３）
Figure 2024508047000270
１－ヘプチルオクチル４－［［４－（１－ヘプチルオクトキシ）－４－オキソ－ブチル］アミノ］ブタノエート（３ｇ、４．９２ｍｍｏｌ、１当量）を乾燥ＣＨ２Ｃｌ２（３０ｍＬ）に溶解した溶液に、ＴＥＡ（１．４９ｇ、１４．７５ｍｍｏｌ、２．０５ｍＬ、３当量）及びトリホスゲン（７２９．７０ｍｇ、２．４６ｍｍｏｌ、０．５当量）をＮ２雰囲気下０℃で加えた。得られた溶液をＮ２下２０℃で１時間撹拌した。反応物を減圧下で濃縮し、Ｎ２下に保った。ＮａＯＨ（１．３８ｇ、３４．４３ｍｍｏｌ、７当量）をＮ２下０℃の乾燥ＴＨＦ（５０ｍＬ）に溶解し、次いで（１－メチル－４－ピペリジル）メタンチオール（３．５７ｇ、２４．５９ｍｍｏｌ、５当量）を加えた。この得られた溶液に、ＴＨＦ（５０ｍＬ）に溶解した塩化カルバモイルを、Ｎ２下０℃でゆっくりと加えた。この混合物を２５℃で２時間撹拌した。反応混合物を飽和ＮＨ４Ｃ１水溶液（１００ｍＬ）でクエンチし、次いでＥｔＯＡＣ（１００ｍＬ）で希釈した。水相をＥｔＯＡＣ（１００ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相をブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮して残渣を得た。この残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ＰＥ／ＥｔＯＡｃ＝１０／１から１／２）によって精製し、分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗｅｌｃｈ Ｕｌｔｉｍａｔｅ Ｃ１８ １５０＊２５ｍｍ＊５ｕｍ；移動相：［水（ＨＣｌ）－ＭｅＯＨ］；Ｂ％：７０％－１００％、１０分）によって精製して、化合物ＣＡＴ３３（１３７．８ｍｇ、１８４．３９ｕｍｏｌ、６２．６３％収率、９８％純度）を黄色の油状物として得た。
ＬＣＭＳ： ［Ｍ＋Ｈ］＋： ７８１．６
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝ ４．８８ － ４．８６ （ｍ， ２Ｈ）， ３．５４ － ３．５１ （ｍ， ２Ｈ）， ３．４６－３．３８ （ｍ， ５Ｈ）， ２．８３ － ２．８５ （ｍ， ２Ｈ）， ２．７５ （ｓ， ３Ｈ）， ２．６７ － ２．６２ （ｍ， ２Ｈ）， ２．４０－２．３２ （ｍ， ４Ｈ）， ２．０１ － １．８９ （ｍ， ８Ｈ）， １．５５－１．５１ （ｍ， ８Ｈ）， １．３５－１．２７ （ｍ， ４０Ｈ）， ０．９０－０．８４ （ｍ， １２Ｈ）．
実施例１．３４：ＣＡＴ３４の合成
Figure 2024508047000271
ステップ１：（１－メチルピロリジン－３－イル）メタノール（３４－２）
Figure 2024508047000272
Ｏ１－ｔｅｒｔ－ブチルＯ３－メチルピロリジン－１，３－ジカルボキシレート（２０．０ｇ、８７．２ｍｍｏｌ、１．００当量）のＴＨＦ溶液に（３５０ｍＬ）、ＬｉＡｌＨ４（８．２８ｇ、２１８ｍｍｏｌ、２．５０当量）を少量ずつＮ２下０℃で加えた。この混合物を６０℃で５時間にわたってＮ２下で撹拌した。０℃の水（８ｍＬ）及び１５％のＮａＯＨ溶液（８ｍＬ）を加えて反応混合物をクエンチし、次いで水（２４ｍＬ）をゆっくりと加え、混合物を３０分間撹拌し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過ケークをＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ×３）で洗浄し、濾液を減圧下で濃縮して、化合物３４－２（１８．３ｇ、粗製）を黄色の油状物として得た。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ６） δ ＝ ４．５１ （ｓ， １Ｈ）， ３．３０ － ３．２２ （ｍ， ２Ｈ）， ２．４４ － ２．２９ （ｍ， ３Ｈ）， ２．２５ － ２．２１ （ｍ， １Ｈ）， ２．１９ （ｓ， ３Ｈ）， ２．１７ － ２．１０ （ｍ， １Ｈ）， １．８２ － １．７３ （ｍ， １Ｈ）， １．３７ － １．２９ （ｍ， １Ｈ）．
ステップ２：（１－メチルピロリジン－３－イル）メチル４－メチルベンゼンスルホネート（３４－７）
Figure 2024508047000273
（１－メチルピロリジン－３－イル）メタノール（１８．０ｇ、１５６ｍｍｏｌ、１．００当量）、ＴＥＡ（３１．６ｇ、３１３ｍｍｏｌ、４３．５ｍＬ、２．００当量）、及びＤＭＡＰ（１．９１ｇ、１５．６ｍｍｏｌ、０．１０当量）をＣＨ２Ｃｌ２（２５０ｍＬ）に含む混合物を脱気し、Ｎ２で３回パージし、ＴｏｓＣｌ（４４．７ｇ、２３４ｍｍｏｌ、１．５０当量）を０℃でゆっくりと加え、次いでこの混合物をＮ２下２５℃で１２時間撹拌した。この残渣をＣＨ２Ｃｌ２（１００ｍＬ）で希釈した。合わせた有機層を水（３５０ｍＬ）及びブライン（２５０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して残渣を得た。この残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（ＩＳＣＯ（登録商標）；３３０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、１００ｍＬ／分で０～１００％ＥｔＯＡｃ／ＰＥグラジエントの溶離液）によって精製して、化合物３４－７（１２．７ｇ、４７．２ｍｍｏｌ、３０．２％収率）を黄色の油状物として得た。
ＬＣＭＳ ［Ｍ＋１］ ＋ ： ２７０．１．
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝ ７．７９ － ７．７７ （ｍ， ２Ｈ）， ７．３４ （ｄ， Ｊ ＝ ８．０ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．９３ （ｄ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．５５ － ２．４７ （ｍ， ４Ｈ）， ２．４５ （ｓ， ３Ｈ）， ２．４２ － ２．３８ （ｍ， １Ｈ）， ２．２８ （ｓ， ３Ｈ）， １．９８ － １．８９ （ｍ， １Ｈ）， １．４４ － １．３５ （ｍ， １Ｈ）．
ステップ３：１－メチル－３－（（トリチルチオ）メチル）ピロリジン（３４－５）
Figure 2024508047000274
（１－メチルピロリジン－３－イル）メチル４－メチルベンゼンスルホネート（１２．７ｇ、４７．２ｍｍｏｌ、１．００当量）、トリフェニルメタンチオール（１５．６ｇ、５６．６ｍｍｏｌ、１．２０当量）、Ｃｓ２ＣＯ３（２３．０ｇ、７０．７ｍｍｏｌ、１．５０当量）、ＮａＩ（７０７ｍｇ、４．７１ｍｍｏｌ、０．１０当量）をＤＭＦ（９０ｍＬ）に含む混合物を脱気し、Ｎ２で３回パージしてから、混合物を５０℃で３時間にわたってＮ２下で撹拌した。反応混合物をＥｔＯＡｃ（５００ｍＬ×２）と水（５００ｍＬ×３）とに分配した。有機相を分離し、ブライン（５００ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して残渣を得た。この残渣をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＰＥ／ＥｔＯＡｃ＝３／１からＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ＝１０／１）によって精製して、化合物３４－５（１６．９ｇ、３７．１ｍｍｏｌ、８１．５％収率、８２．０％純度）を黄色の油状物として得た。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝ ７．４０ － ７．３７ （ｍ， ６Ｈ）， ７．２７ － ７．２２ （ｍ， ６Ｈ）， ７．２１ － ７．１６ （ｍ， ３Ｈ）， ２．６８ － ２．６４ （ｍ， １Ｈ）， ２．５４ － ２．４８ （ｍ， １Ｈ）， ２．３９ － ２．３３ （ｍ， １Ｈ）， ２．２６ （ｓ， ３Ｈ）， ２．２２ － ２．１２ （ｍ， ３Ｈ）， ２．０８ － ２．０４ （ｍ， １Ｈ）， １．９７ － １．８９ （ｍ， １Ｈ）， １．３９ － １．３１ （ｍ， １Ｈ）．
ステップ４：（１－メチルピロリジン－３－イル）メタンチオール（３４－６）
Figure 2024508047000275
１－メチル－３－（トリチルスルファニルメチル）ピロリジン（８．００ｇ、２１．４ｍｍｏｌ、１．００当量）をＴＦＡ（２７ｍＬ）及びＣＨ２Ｃｌ２（８０ｍＬ）に含む混合物である混合物を脱気し、Ｎ２で３回パージしてから、トリイソプロピルシラン（６．７８ｇ、４２．８ｍｍｏｌ、８．８０ｍＬ、２．００当量）を０℃でゆっくりと加え、次いでこの混合物を２０℃で３時間にわたってＮ２下で撹拌した。反応混合物を減圧下で濃縮した。濾液をＭｅＯＨ（２０ｍＬ）で希釈し、ＰＥ（３０ｍＬ×５）で抽出した。ＭｅＯＨ層を減圧下で濃縮して、化合物３４－６（５．００ｇ、粗製、ＴＦＡ塩）を淡黄色の油状物として得た。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝ ３．９５ － ３．９１ （ｍ， １Ｈ）， ３．８２ － ３．６９ （ｍ， １Ｈ）， ３．１５ － ２．９９ （ｍ， ２Ｈ）， ２．９３ （ｓ， ３Ｈ）， ２．７６ － ２．６４ （ｍ， ４Ｈ）， ２．３９ － ２．３１ （ｍ， １Ｈ）， １．９７ － １．８８ （ｍ， １Ｈ）
ステップ５：ジ（ペンタデカン－８－イル）４，４’－（（（（（１－メチルピロリジン－３－イル）メチル）チオ）カルボニル）アザンジイル）ジブタノエート（ＣＡＴ３４）
Figure 2024508047000276
１－ヘプチルオクチル４－［［４－（１－ヘプチルオクトキシ）－４－オキソ－ブチル］アミノ］ブタノエート（２．５０ｇ、４．１０ｍｍｏｌ、１．００当量）を乾燥ＣＨ２Ｃｌ２（３０ｍＬ）に溶解した溶液に、ＴＥＡ（１．２４ｇ、１２．３ｍｍｏｌ、１．７１ｍＬ、３．００当量）及びトリホスゲン（１．０９ｇ、３．６９ｍｍｏｌ、０．９０当量）をＮ２下０℃で加えた。得られた溶液を２０℃で１時間撹拌した。得られた反応物を減圧下で濃縮した。（１－メチルピロリジン－３－イル）メタンチオール（３．０２ｇ、１２．３０ｍｍｏｌ、３当量、ＴＦＡ塩）の乾燥ＴＨＦ溶液（３５ｍＬ）に、ＮａＯＨ（２．４６ｇ、６１．４８ｍｍｏｌ、１５当量）をＮ２下０℃で加えた。この得られた溶液に、ＴＨＦ（３５．０ｍＬ）中の塩化カルバモイルをＮ２下０℃で加えた。得られた溶液を２０℃で１５時間撹拌した。反応混合物を０℃のＮＨ４Ｃｌ（１００ｍＬ）によってクエンチし、次いでＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）で希釈した。水相をＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相をブライン（２００ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮して残渣を得た。この残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（ＩＳＣＯ（登録商標）；１２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈ（登録商標）シリカフラッシュカラム、１００ｍＬ／分で０～３７％ＥｔＯＡｃ／ＰＥグラジエントの溶離液）によって精製し、次いで分取ＨＰＬＣ（ＨＣｌ条件；カラム：Ｗｅｌｃｈ Ｕｌｔｉｍａｔｅ Ｃ１８ １５０＊２５ｍｍ＊５ｕｍ；移動相：［水（ＨＣｌ）－ＭｅＯＨ］；Ｂ％：７０％－１００％、１０分）によって精製して、化合物ＣＡＴ３４（１７９ｍｇ、０．２２７ｍｍｏｌ、５．８％収率、９７．２％純度）を黄色の油状物として得た。
ＬＣＭＳ ［Ｍ＋１］ ＋ ： ７６７．６
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝ ４．９０ － ４．８４ （ｍ， ２Ｈ）， ３．２６ － ３．４８ （ｍ， ４Ｈ）， ３．０３ － ２．９２ （ｍ， ２Ｈ）， ２．７８ － ２．７４ （ｍ， １Ｈ）， ２．６０ － ２．５１ （ｍ， ２Ｈ）， ２．５０ － ２．４４ （ｍ， １Ｈ）， ２．３５ （ｓ， ３Ｈ）， ２．３２ － ２．２５ （ｍ， ４Ｈ）， ２．１２ － ２．０３ （ｍ， １Ｈ）， １．９６ － １．８４ （ｍ， ４Ｈ）， １．７８ － １．６７ （ｍ， ２Ｈ）， １．４８ － １．５５ （ｍ， ８Ｈ）， １．３２ － １．２２ （ｍ， ４０Ｈ）， ０．８８ （ｔ， Ｊ ＝ ６．８ Ｈｚ， １２Ｈ）．
実施例１．３５：ＣＡＴ３５の合成
Figure 2024508047000277
ステップ１：中間体２（Ｎ－ヘプチルヘプタン－１－アミン）（３５－２）の合成
Figure 2024508047000278
ヘプタン－１－アミン（３０ｇ、２６０．３８ｍｍｏｌ、３８．８１ｍＬ、１当量）及び１－ブロモヘプタン（４６．６３ｇ、２６０．３８ｍｍｏｌ、４０．９１ｍＬ、１当量）のＤＭＦ溶液（１００ｍＬ）に、Ｋ２ＣＯ３（３５．９９ｇ、２６０．３８ｍｍｏｌ、１当量）を加えた。この混合物を８０℃で１２時間にわたってＮ２下で撹拌した。水（５００ｍＬ）を加えて反応混合物をクエンチし、次いで酢酸エチル（５００ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機層をブライン（２００ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。この残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（石油エーテル／酢酸エチル＝１０／１から１／１）によって精製して、化合物３５－２（１５ｇ、７０．２９ｍｍｏｌ、２７．００％収率）を黄色の油状物として得た。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝ ２．３８－２．３４ （ｍ， ４Ｈ）， １．４８－１．４２ （ｍ， ４Ｈ）， １．３８－１．２２ （ｍ， １６Ｈ）， ０．９０－０．８４ （ｍ， ６Ｈ）．
ステップ２：４－［［４－（ジヘプチルアミノ）－４－オキソ－ブチル］－（４－ニトロフェニル）スルホニル－アミノ］－Ｎ，Ｎ－ジヘプチル－ブタンアミド（３５－４）
Figure 2024508047000279
４－［３－カルボキシプロピル－（４－ニトロフェニル）スルホニル－アミノ］ブタン酸（３ｇ、８．０１ｍｍｏｌ、１当量）のジクロロメタン溶液（３０ｍＬ）に、ＥＤＣＩ（４．６１ｇ、２４．０４ｍｍｏｌ、３当量）を加え、次いでＤＭＡＰ（４８９．５０ｍｇ、４．０１ｍｍｏｌ、０．５当量）及びＴＥＡ（２．４３ｇ、２４．０４ｍｍｏｌ、３．３５ｍＬ、３当量）を加えた。３０分後、Ｎ－ヘプチルヘプタン－１－アミン（３．５９ｇ、１６．８３ｍｍｏｌ、２．１当量）を加えた。次いで、この混合物を２５℃で１２時間撹拌した。水（１００ｍＬ）を加えて反応混合物をクエンチし、次いで酢酸エチル（２００ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機層をブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。この残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（石油エーテル／酢酸エチル＝３０／１から１／１）によって精製して、化合物３５－４（２．４ｇ、３．１４ｍｍｏｌ、３９．１４％収率）を黄色の油状物として得た。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝ ８．２７ － ８．２４ （ｍ， ２Ｈ）， ８．０８－７．８０ （ｍ， ２Ｈ）， ３．２３－３．１７ （ｍ， ４Ｈ）， ３．１２ －３．０６ （ｍ， ３Ｈ）， ２．５８－２．５２ （ｍ， １Ｈ）， ２．２７－２．１８ （ｍ， ３Ｈ）， １．８４－１．４８ （ｍ， ４Ｈ）， １．５３－１．２８ （ｍ， ８Ｈ）， １．２０－１．０５ （ｍ， ３２Ｈ）， ０．８８－０．７５ （ｍ， １２Ｈ）．
ステップ３：４－［［４－（ジヘプチルアミノ）－４－オキソ－ブチル］アミノ］－Ｎ，Ｎ－ジヘプチル－ブタンアミド（３５－５）
Figure 2024508047000280
４－［［４－（ジヘプチルアミノ）－４－オキソ－ブチル］－（４－ニトロフェニル）スルホニル－アミノ］－Ｎ，Ｎ－ジヘプチル－ブタンアミド（１．８ｇ、２．３５ｍｍｏｌ、１当量）及びベンゼンチオール（５１８．３８ｍｇ、４．７１ｍｍｏｌ、４７９．９９ｕＬ、２当量）のＤＭＦ溶液（２０ｍＬ）に、Ｃｓ２ＣＯ３（１．５３ｇ、４．７１ｍｍｏｌ、２当量）を加えた。この混合物を２５℃で１２時間にわたってＮ２下で撹拌した。水（１００ｍＬ）を加えて反応混合物をクエンチし、次いで酢酸エチル（３００ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機層をブライン（５００ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。この残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（石油エーテル／酢酸エチル＝１０／１から１／１及びジクロロメタン／メタノール＝３０／１から５／１）によって精製して、化合物３５－５（１ｇ、１．７２ｍｍｏｌ、７３．２９％収率）を黄色の油状物として得た。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝ ３．３２－３．２１ （ｍ， ８Ｈ）， ２．８０－２．６８ （ｍ， ４Ｈ）， ２．４８－２．２５ （ｍ， ４Ｈ）， １．９６－１．８１ （ｍ， ４Ｈ）， １．５６－１．４６ （ｍ， ８Ｈ）， １．２８－１．１０ （ｍ， ３２Ｈ）， ０．９３－０．８５ （ｍ， １２Ｈ）．
ステップ４：Ｓ－［３－（ジメチルアミノ）プロピル］Ｎ，Ｎ－ビス［４－（ジヘプチルアミノ）－４－オキソ－ブチル］カルバモチオエート（ＣＡＴ３５）
Figure 2024508047000281
４－［［４－（ジヘプチルアミノ）－４－オキソ－ブチル］アミノ］－Ｎ，Ｎ－ジヘプチル－ブタンアミド（１．５ｇ、２．５９ｍｍｏｌ、１当量）を乾燥ジクロロメタン（２０ｍＬ）に溶解した溶液に、ＴＥＡ（７８５．１１ｍｇ、７．７６ｍｍｏｌ、１．０８ｍＬ、３当量）及びトリホスゲン（３８３．７４ｍｇ、１．２９ｍｍｏｌ、０．５当量）を窒素雰囲気下０℃で加えた。得られた溶液を窒素雰囲気下２５℃で１時間撹拌した。反応物を減圧下で濃縮し、窒素雰囲気下に保った。ＮａＯＨ（７２４．１１ｍｇ、１８．１０ｍｍｏｌ、７当量）を窒素雰囲気下０℃の乾燥ＴＨＦ（５０ｍＬ）に溶解し、次いで３－（ジメチルアミノ）プロパン－１－チオール（１．５４ｇ、１２．９３ｍｍｏｌ、５当量）を窒素雰囲気下で加えた。この得られた溶液に、ＴＨＦ（１０ｍＬ）に溶解した塩化カルバモイルを、窒素雰囲気下０℃でゆっくりと加えた。この混合物を３５℃で１２時間撹拌した。水（１００ｍＬ）を加えて反応混合物をクエンチし、次いで酢酸エチル（２００ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機層をブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。この残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（石油エーテル／酢酸エチル＝１０／１から１／１及びジクロロメタン／メタノール＝３０／１から５／１）及びＭＰＬＣ（カラム：Ｗｅｌｃｈ Ｕｌｔｉｍａｔｅ ＸＢ－ＳｉＯＨ ２５０＊５０＊１０ｕｍ；移動相：［ヘキサン－ＥｔＯＨ］；Ｂ％：０％－２８％、１５分）によって精製して、化合物ＣＡＴ３５（１８１ｍｇ、２４７．８４ｕｍｏｌ、１７．９７％収率、９９．３％純度）を黄色の油状物として得た。
ＬＣＭＳ： ［Ｍ＋Ｈ］＋： ７２５．６
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝ ３．４８－３．４１ （ｍ， ４Ｈ）， ３．２８－３．２０ （ｍ， ４Ｈ）， ３．１８－３．１０ （ｍ， ４Ｈ）， ２．５０－２．１０ （ｍ ， ４Ｈ）， １．９６－１．６０ （ｍ， ６Ｈ）， １．５３－１．４６ （ｍ， ８Ｈ）， １．２６－１．１０ （ｍ， ３２Ｈ）， ０．９５－０．８１ （ｍ， １２Ｈ）．
実施例１．３６：ＣＡＴ２の合成
Figure 2024508047000282
ステップ１：２－［３－（ジメチルアミノ）プロピル］イソチオ尿素塩酸塩（３６－２）：
Figure 2024508047000283
３－クロロ－Ｎ，Ｎ－ジメチル－プロパン－１－アミン（２５ｇ、１５８．１６ｍｍｏｌ、１当量、ＨＣｌ）のＥｔＯＨ溶液（５００ｍＬ）に、ＮａＩ（４７４．１３ｍｇ、３．１６ｍｍｏｌ、０．０２当量）及びチオ尿素（１３．２４ｇ、１７３．９７ｍｍｏｌ、１．１当量）を加えた。この混合物を８０℃で１６時間撹拌した。ＴＬＣ（ジクロロメタン：メタノール＝１０：１、ＰＭＡ）は、出発材料が完全に消費され、１つの新しい主スポットが生じたことを示した。反応混合物を１０℃に冷却すると、結晶が沈殿した。反応混合物を濾過し、濾過ケークを酢酸エチル（１００ｍＬ×２）で洗浄した。濾過ケークを真空中で濃縮して、化合物３６－２（２９．１ｇ、１４７．１７ｍｍｏｌ、ＨＣｌ）を白色の固体として得た。この粗生成物をさらに精製することなく次のステップに使用した。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ：９．４０ － ９．３７ （ｍ， ４Ｈ）， ３．３５ （ｔ， Ｊ ＝ ７．６ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．１２ （ｔ， Ｊ ＝ ７．６ Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．７２ （ｓ， ６Ｈ）， ２．０８ － ２．０１ （ｍ， ２Ｈ）．
ステップ２：３－（ジメチルアミノ）プロパン－１－チオール（３６－３）：
Figure 2024508047000284
２－［３－（ジメチルアミノ）プロピル］イソチオ尿素（１０．０ｇ、６２．０ｍｍｏｌ、１当量）を含むＨ２Ｏ（１０ｍＬ）及びＥｔＯＨ（４０ｍＬ）の溶液に、ＮａＯＨ（１４．９ｇ、３７２ｍｍｏｌ、６当量）を加えた。この混合物を９０℃で３時間撹拌した。反応混合物を２５℃に冷却し、水（２０ｍＬ）を加えてクエンチし、次いで酢酸エチル（２０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機層をブライン（２０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、化合物３６－３（２．１０ｇ、粗製）を黄色の油状物として得た。反応残渣を次のステップに直接使用した。
ステップ３：１－ヘプチルオクチル４－［３－（ジメチルアミノ）プロピルスルファニルカルボニル－［４－（１－ヘプチルオクトキシ）－４－オキソ－ブチル］アミノ］ブタノエート（ＣＡＴ２）
Figure 2024508047000285
１－ヘプチルオクチル４－［［４－（１－ヘプチルオクトキシ）－４－オキソ－ブチル］アミノ］ブタノエート（２．００ｇ、３．２８ｍｍｏｌ、１当量）のＤＣＭ溶液（２０ｍＬ）に、炭酸ビス（トリクロロメチル）（４８６ｍｇ、１．６４ｍｍｏｌ、０．５当量）及びＴＥＡ（９９５ｍｇ、９．８４ｍｍｏｌ、１．３７ｍＬ、３当量）を加えた。添加後、得られた溶液を２０℃で１時間撹拌した。得られた反応物を減圧下で濃縮した。３－（ジメチルアミノ）プロパン－１－チオール（１．９５ｇ、１６．４ｍｍｏｌ、５当量）の乾燥ＴＨＦ溶液（２０ｍＬ）に、ＮａＯＨ（９１８ｍｇ、２３．０ｍｍｏｌ、７当量）をＮ２下０℃で加えた。ＴＨＦ（５ｍＬ）に溶解した塩化カルバモイルをＮ２下０℃で加えた。得られた溶液を２０℃で１５時間撹拌した。反応混合物を飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液（１００ｍＬ）でクエンチし、次いで酢酸エチル（１００ｍＬ）で希釈した。水相を酢酸エチル（１００ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相をブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮して残渣を得た。この残渣をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、石油エーテル：酢酸エチル＝１０：１から１：１）によって精製して、ＣＡＴ２（２６０ｍｇ、０．３４０ｍｍｏｌ、６５％収率、９９％純度）を黄色の油状物として得た。
ＬＣＭＳ： ［Ｍ＋Ｈ］＋： ７５６．１；
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ：４．８２ － ４．７７ （ｍ， ２Ｈ）， ３．３９ － ３．２９ （ｍ， ４Ｈ）， ２．８４ （ｔ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．３１ － ２．２２ （ｍ， ６Ｈ）， ２．１７ － ２．１５ （ｍ， ６Ｈ）， １．８５ － １．７０ （ｍ， ６Ｈ）， １．４６－１．４２ （ｍ， ８Ｈ）， １．２５ － １．１０ （ｍ， ４０Ｈ）， ０．８６ － ０．７２ （ｍ， １２Ｈ）．
実施例２：ＰＥＧ脂質の合成
実施例２．１：ＣＨＭ－００１の合成
Figure 2024508047000286
ステップ１：ベンジル－ポリ（エチレングリコール）２０００（１．１－２）の合成
Figure 2024508047000287
０℃のＰＥＧ２０００（２０ｇ、１０．００ｍｍｏｌ、１当量）のＴＨＦ溶液（１００ｍＬ）に、ＮａＨ（５９９．８３ｍｇ、１５．００ｍｍｏｌ、６０％純度、１．５当量）を加え、０℃で４０分間撹拌した。反応混合物をブロモメチルベンゼン（２．５７ｇ、１５．００ｍｍｏｌ、１．７８ｍＬ、１．５当量）で処理した。次いでこの反応混合物を２５℃で１８時間撹拌した。反応混合物を飽和ＮＨ４Ｃｌ溶液（１００ｍＬ）でクエンチし、ＤＣＭ（１５０ｍＬ）で希釈した。有機層をＨ２Ｏ（７０ｍＬ×２）及びブライン（７０ｍＬ×２）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させた。得られた溶液を低圧で濃縮して、粗生成物を白色の固体として得た。この粗生成物をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（０～５％、ＭｅＯＨ／ＤＣＭ）によって精製して、化合物１．１－２（２．８０ｇ、１．３４ｍｍｏｌ、１３．４％収率）を白色の固体として得た。
１Ｈ－ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， クロロホルム－ｄ） δ ７．３４－７．２９ （ｍ， ５Ｈ， ＰｈＣＨ２－）， ４．５７ （ｓ， ２Ｈ， ＰｈＣＨ２－）， ３．８２－３．４６ （ｍ， １８０Ｈ， ポリ（エチレングリコール）２０００）．
ステップ２：ｔｅｒｔ－ブチル２－（ベンジル－ポリ（エチレングリコール）２０００）－アセテート（１．１－３）の合成
Figure 2024508047000288
ベンジル－ポリ（エチレングリコール）２０００（１．１－２、２．８ｇ、５４４．６μｍｏｌ、１当量）をＴＨＦ（２５ｍＬ）に含む混合物に、ＮａＨ（５３５．８ｍｇ、１３．３９ｍｍｏｌ、６０％純度、１０当量）を少量ずつＮ２下０℃で加えた。反応混合物を０℃で３０分間撹拌し、ｔｅｒｔ－ブチル２－ブロモアセテート（１．８３ｇ、９．３８ｍｍｏｌ、１．３９ｍＬ、７当量）を上記混合物に加えた。反応混合物を２６℃で１８時間撹拌した。この混合物をＨ２Ｏ（２０ｍＬ）でクエンチし、ＤＣＭ（５０ｍＬ）で希釈した。有機層を分離し、水相をＤＣＭ（２０ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機相をブライン（２０ｍＬ×２）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮して、粗生成物を白色の固体として得た。この粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（０－５％、ＤＣＭ／ＭｅＯＨ）によって精製して、化合物１．１－３（３．９４ｇ、１．７９ｍｍｏｌ、７４．７％収率）を白色のワックス状固体として得た。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ＭＨｚ， クロロホルム－ｄ） δ ７．４３－７．３０， ５Ｈ， ＰｈＣＨ２－）， ４．５８（ｓ， ２Ｈ， ＰｈＣＨ２－）， ４．０３， ２Ｈ， －Ｏ－ＣＨ２－ＣＯ２－）， ３．８２－３．４６ （ｍ， １８０Ｈ， ポリ（エチレングリコール）２０００）， １．４９ （ｓ， ９Ｈ， ｔＢｕ）．
ステップ３． ２－（ベンジル－ポリ（エチレングリコール）２０００）－酢酸（１．１－４）の合成
Figure 2024508047000289
ｔｅｒｔ－ブチル－２－（ベンジル－ポリ（エチレングリコール）２０００）－アセテート（１．２０ｇ、１．７９ｍｍｏｌ、１当量）のＤＣＭ溶液（１０ｍＬ）に、ＴＦＡ（７．７０ｇ、６７．５３ｍｍｏｌ、５ｍＬ、３７．７９当量）を少量ずつ２６℃で加えた。この混合物を２６℃で１８時間撹拌した。この混合物を真空中で濃縮して、粗生成物１．１－４（１．５ｇ、粗製）を黄色の油状物として得て、これをさらに精製することなく次のステップで直接使用した。
ステップ４． オクタデシル２－（ベンジル－ポリ（エチレングリコール）２０００）－アセテート（１．１－５）の合成
Figure 2024508047000290
２－（ベンジル－ポリ（エチレングリコール）２０００）－酢酸（１．１７ｇ、粗製）、オクタデカン－１－オール（２．９５ｇ、１０．８９ｍｍｏｌ、３．６３ｍＬ、２０当量）、及びＤＭＡＰ（１３３．０６ｍｇ、１．０９ｍｍｏｌ、２当量）のＤＣＭ溶液（１０ｍＬ）に、ＥＤＣＩ（２．０９ｇ、１０．８９ｍｍｏｌ、２０当量）をＮ２下２６℃で一度に加えた。この混合物を２６℃で１８時間撹拌した。ＴＬＣ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝１０：１）は、わずかに低い極性を有する新しいスポットが見られたことを示した。この混合物をＨ２Ｏ（２０ｍＬ）でクエンチし、ＤＣＭ（５０ｍＬ）で希釈した。有機層を分離し、水相をＤＣＭ（３０ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機相をブライン（３０ｍＬ×２）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮して、粗生成物を白色の固体として得た。この残渣をフラッシュクロマトグラフィー（０－５％、ＤＣＭ／ＭｅＯＨ）によって精製して、所望の生成物であるオクタデシル２－（ベンジル－ポリ（エチレングリコール）２０００）－アセテート（１．０１ｇ、約７６％収率）を白色のワックス状固体として得た。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， クロロホルム－ｄ） δ ７．３４－７．２５ （ｍ， ５Ｈ， ＰｈＣＨ２－）， ４．５４ （ｓ， ２Ｈ， ＰｈＣＨ２－）， ４．１４－４．０９ （４Ｈ， －Ｏ－ＣＨ２－ＣＯ２－ＣＨ２－）， ３．８２－３．４６ （ｍ， １８０Ｈ， ポリ（エチレングリコール）２０００）， １．６６ － １．５５ （ｍ， ２Ｈ， Ｍｅ（ＣＨ２）１５－ＣＨ２－）， １．２３ （ｓ， ２２Ｈ， Ｍｅ（ＣＨ２）１５－）， ０．８５ （ｔ， Ｊ＝６．８ Ｈｚ， ３Ｈ， Ｍｅ（ＣＨ２）１５－）．
ステップ５． オクタデシル２－（ポリ（エチレングリコール）２０００）－アセテート（ＣＨＭ－００１）の合成
Figure 2024508047000291
オクタデシル２－（ベンジル－ポリ（エチレングリコール）２０００）－アセテート（１．０１ｇ、４２０．６６μｍｏｌ、１当量）のＥｔＯＨ溶液（６０ｍＬ）に、Ｐｄ（ＯＨ）２／Ｃ（３．０１ｇ、１０％純度）をＨ２（１５ｐｓｉ）雰囲気下２６℃で加えた。この混合物を２６℃で１８時間撹拌した。反応混合物を濾過し、濾液を低圧で濃縮して、粗生成物を白色の固体として得た。この粗生成物をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（０～６％、ＭｅＯＨ／ＤＣＭ）によって精製して、所望の生成物であるＣＨＭ－００１（０．２９ｇ、１２３．６０μｍｏｌ、２９．３８％収率）を白色のワックス状固体として得た。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， クロロホルム－ｄ） δ ４．１８－４．１２ （ｍ， ４Ｈ， －ＣＨ２－（ＣＯ）Ｏ－ＣＨ２－）， ３．７５－３．５６ （ｍ， １８０Ｈ， ポリエチレングリコール２０００）， １．６９－１．６０ （ｍ， ２Ｈ， －（ＣＯ）Ｏ－ＣＨ２－ＣＨ２－）， １．２７ （ｓ， ３０Ｈ， Ｍｅ－（ＣＨ２）１５－）， ０．８９ （ｔ， Ｊ＝６．８ Ｈｚ， ３Ｈ， Ｍｅ－）． １３Ｃ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， クロロホルム－ｄ） δ １７０．５９， ７２．７５， ７０．８９， ７０．５５， ７０．２１， ６８．６６， ６５．００， ６１．６７， ３１．９３， ２９．７０， ２９．６６， ２９．５２， ２９．３７， ２５．８５， ２２．６９， １４．１３．ＨＰＬＣ （ＥＬＳＤ）， ＲＴ＝３．３６分， ９８．４９％純度． ＩＲ（υｍａｘ／ｃｍ－１）， ３４９１， ２８８７， １９６８， １７５２， １４６７， １３６０， １３４３， １２８０， １１４９， １１１２， ９６３， ８４２， ７２０． 融解範囲， ５０．７－５１．７℃．
実施例２．２：ＣＨＭ－００４の合成
Figure 2024508047000292
１．４－１（５００ｍｇ、２４１．２６μｍｏｌ、１当量）を乾燥ＤＣＭ（１０ｍＬ）に溶解した。次いで、ＤＭＡＰ（５８．９５ｍｇ、４８２．５２μｍｏｌ、２当量）及びＥＤＣＩ（２７７．５０ｍｇ、１．４５ｍｍｏｌ、６当量）を連続的に加え、続いてオクタデカン－１－オール（３９１．５６ｍｇ、１．４５ｍｍｏｌ、４８２．２１μＬ、６当量）を加えた。次いでこの反応混合物を２５℃で１８時間撹拌した。次いで、反応混合物を真空中で濃縮して、粗生成物を白色の固体として得た。この粗生成物をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（０～５％ＭｅＯＨ／ＤＣＭ）によって精製して、所望の生成物であるオクタデシル２－（メチル－ポリ（エチレングリコール）２０００）－アセテートをワックス状固体として得た（ＣＨＭ－００４、４３０ｍｇ、７６．６％収率）。
１Ｈ－ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， クロロホルム－ｄ） δ ４．１９ － ４．０９ （ｍ， ４Ｈ， －Ｏ－ＣＨ２－ＣＯ２－ＣＨ２－）， ３．７４ － ３．６０ （ｍ， １８０Ｈ， ポリ（エチレングリコール）２０００）， ３．３８ （ｓ， ３Ｈ， ＭｅＯ－），１．６８ － １．５８ （ｍ， ２Ｈ， Ｍｅ（ＣＨ２）１５－ＣＨ２－）， １．２５ （ｓ， ３０Ｈ， Ｍｅ（ＣＨ２）１５－）， ０．８８ （ｔ， Ｊ＝６．８ Ｈｚ， ３Ｈ， Ｍｅ（ＣＨ２）１５－）． １ＨＰＬＣ （ＥＬＳＤ）， ＲＴ＝７．８８， ９９．９３％純度． ＩＲ （νｍａｘ／ｃｍ－１）， ３４７９， ２８８７， １７５０， １４６７， １３６０， １３４３， １１４８， １１１２， ９６３， ８４２． 融解範囲， ５０．６－５１．３℃．
実施例２．３：ＣＨＭ－００５の合成
Figure 2024508047000293
ステップ１：ヘキサデシル２－（ベンジル－ポリ（エチレングリコール）２０００）－アセテート（１．５－２）の合成
Figure 2024508047000294
２－（ベンジル－ポリ（エチレングリコール）２０００）－酢酸（１．５－１、８００ｍｇ、３７２．３５μｍｏｌ、１．００当量）をＤＣＭ（１０ｍＬ）に溶解し、ＤＭＡＰ（９０．９８ｍｇ、７４４．６９μｍｏｌ、２．００当量）及びＥＤＣＩ（７１３．８０ｍｇ、３．７２ｍｍｏｌ、１０当量）を加え、続いてヘキサデカン－１－オール（９０２．７２ｍｇ、３．７２ｍｍｏｌ、１０当量）を加えた。反応混合物を２５℃で１８時間撹拌した。反応混合物を真空中で濃縮して、粗生成物を白色の固体として得た。この粗生成物をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（０～８％、ＭｅＯＨ／ＤＣＭ）によって精製して、化合物１．５－２（１１０ｍｇ、３８．０１μｍｏｌ、１０．２１％収率、８２％純度）を白色の固体として得た。
ステップ２．ヘキサデシル２－（ポリ（エチレングリコール）２０００）－アセテート（ＣＨＭ－００５）の合成
Figure 2024508047000295
ヘキサデシル２－（ベンジル－ポリ（エチレングリコール）２０００）－アセテート（１．５－２、１００ｍｇ、４２．１４μｍｏｌ、１当量）をＥｔＯＨ（５ｍＬ）に溶解し、Ｐｄ（ＯＨ）２（５０ｍｇ、７１．２１μｍｏｌ、２０％純度）を加えた。反応混合物をＨ２雰囲気下２０℃で１８時間撹拌した。次いでこの反応混合物を濾過し、濾液を低圧で濃縮して、粗生成物を白色の固体として得た。粗生成物を２０℃のｎ－ヘキサンで３０分間粉砕し、濾過し、濾過ケークを収集し、減圧下で乾燥させて、化合物ＣＨＭ－００５（６０ｍｇ、２６．１３μｍｏｌ、６１．９９％収率、９９．４％純度）を白色の固体として得た。
１Ｈ－ＮＭＲ （４００ＭＨｚ， クロロホルム－ｄ） δ ４．１９－４．１０ （ｍ， ４Ｈ， － ＣＨ２－（ＣＯ）Ｏ－ＣＨ２－）， ３．７７－３．５７ （ｍ， １８０Ｈ， ポリエチレングリコール２０００）， １．７０－１．５９ （ｍ， ２Ｈ， －（ＣＯ）Ｏ－ＣＨ２－ＣＨ２－）， １．２６ （ｓ， ２６Ｈ， Ｍｅ－（ＣＨ２）１３－）， ０．９３－０．８１ （ｍ， ３Ｈ， Ｍｅ－）． ＨＰＬＣ （ＥＬＳＤ）， ＲＴ＝５．９３分， ９９．４４％純度． ＩＲ（υｍａｘ／ｃｍ－１）， ３４７４， ２８８７， １７４９， １７４０， １４６７， １３５９， １３４３， １１４８， １１１４， ９６３， ８４２． 融解範囲， ５０．６－５１．１℃．
実施例２．４：ＣＨＭ－００６の合成
Figure 2024508047000296
ステップ１：テトラデシル２－（ベンジル－ポリ（エチレングリコール）２０００）－アセテート（１．６－２）の合成
Figure 2024508047000297
２－（ベンジル－ポリ（エチレングリコール）２０００）－酢酸（１．６－１）（８００ｍｇ、３７２．３５μｍｏｌ、１．００当量）をＤＣＭ（１０ｍＬ）に溶解し、次いでＤＭＡＰ（９０．９８ｍｇ、７４４．７０μｍｏｌ、２当量）及びＥＤＣＩ（７１３．８０ｍｇ、３．７２ｍｍｏｌ、１０当量）を加え、続いてテトラデカン－１－オール（７９８．２６ｍｇ、３．７２ｍｍｏｌ、１０当量）を加えた。反応混合物を２０℃で１８時間撹拌した。次いで、反応混合物を真空中で濃縮して、粗生成物を白色の固体として得た。この粗生成物をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（０～５％、ＭｅＯＨ／ＤＣＭ）によって精製して、化合物１．６－２（１３０ｍｇ、２３．２８μｍｏｌ、１４．９％収率）を白色の固体として得た。
ステップ２．テトラデシル２－（ポリ（エチレングリコール）２０００）－アセテート（ＣＨＭ－００６）の合成
Figure 2024508047000298
テトラデシル２－（ベンジル－ポリ（エチレングリコール）２０００）－アセテート（１．６－２）（１２０ｍｇ、５１．２μｍｏｌ、１．００当量）をＥｔＯＨ（５ｍＬ）に溶解し、次いでＰｄ（ＯＨ）２（１００ｍｇ、１０％純度）を加えた。次いでこの反応混合物をＨ２雰囲気下２０℃で１８時間撹拌した。次いでこの反応混合物を濾過し、濾液を低圧で濃縮して、粗生成物を白色の固体として得た。粗生成物を２０℃のｎ－ヘキサンで３０分間粉砕した。固体を収集し、真空下で乾燥させて、化合物ＣＨＭ－００６（１０２ｍｇ、４４．６９μｍｏｌ、８７．３３％収率、９８．７９％純度）を白色の固体として得た。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， クロロホルム－ｄ） δ ４．２０－４．０９ （ｍ， ４Ｈ， －ＣＨ２－（ＣＯ）Ｏ－ＣＨ２－）， ３．７１－３．５７ （ｍ， １８０Ｈ， ポリエチレングリコール２０００）， １．６４ （ｑ， Ｊ＝６．８ Ｈｚ， ２Ｈ， －（ＣＯ）Ｏ－ＣＨ２－ＣＨ２－）， １．２６ （ｓ， ２２Ｈ， Ｍｅ－（ＣＨ２）１１－）， ０．９２－０．８１ （ｍ， ３Ｈ， Ｍｅ－）． ＨＰＬＣ （ＥＬＳＤ）， ＲＴ＝４．２０分， ９８．７９％純度． ＩＲ（υｍａｘ／ｃｍ－１）， ３４４７， ２８８９， １７４９， １７４０， １６５３， １４６６， １３５８， １３４３， １１４８， １１１３， ９６３， ８４３． 融解範囲， ４９．７－５０．１℃．
実施例２．５：ＣＨＭ－０１２の合成
Figure 2024508047000299
ステップ１：（ベンジルポリ（エチレングリコール）２０００）Ｎ－オクタデシルカルバメート（１．１０－２）
Figure 2024508047000300
ベンジル－ポリ（エチレングリコール）２０００（ＢｎＰＥＧ２０００、１．００ｇ、６８５．２６μｍｏｌ、１．００当量）をピリジン（１０ｍＬ）に溶解し、次いで１－イソシアナトヘプタデカン（１．９３ｇ、６．８５ｍｍｏｌ、１０．０当量）を加えた。次いでこの反応混合物を８０℃で１８時間還流させた。次いで、反応混合物を真空中で濃縮して、粗生成物を白色の固体として得た。この粗生成物をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（０～５％、ＭｅＯＨ／ＤＣＭ）によって精製して、化合物１．１０－２（８５０ｍｇ、３２６．９４μｍｏｌ、４７．７１％収率、８９％純度）を白色の固体として得た。１Ｈ－ＮＭＲ （４００ＭＨｚ， クロロホルム－ｄ） δ ７．３４ （ｄ， Ｊ＝４．３ Ｈｚ， ５Ｈ， ＰｈＣＨ２－）， ４．５７ （ｓ， ２Ｈ， ＰｈＣＨ２－）， ４．２１ （ｂｒ ｓ， ２Ｈ，－ＣＨ２－Ｏ（ＣＯ）－）， ３．６５ （ｓ， １６７Ｈ， ポリ（エチレングリコール）２０００）， ３．１５ （ｂｒ ｄ， Ｊ＝５．７ Ｈｚ， ２Ｈ，－ＣＨ２－Ｏ（ＣＯ）ＮＨ－ＣＨ２－）， １．４８ （ｂｒ ｓ， ２Ｈ， －Ｏ（ＣＯ）ＮＨ－ＣＨ２－ＣＨ２－）， １．２６ （ｓ， ３０Ｈ，Ｍｅ（ＣＨ２）１５－）， ０．８８ （ｂｒ ｓ， ３Ｈ，Ｍｅ（ＣＨ２）１５－）．
ステップ２． ポリ（エチレングリコール）２０００ Ｎ－オクタデシルカルバメート（ＣＨＭ－０１２）
（ベンジル－ポリ（エチレングリコール）２０００）Ｎ－オクタデシルカルバメート（４９０ｍｇ、２０６．６μｍｏｌ、１．００当量）をＥｔＯＨ（１０ｍＬ）に溶解し、次いでＰｄ（ＯＨ）２／Ｃ（２０ｍｇ、１０％純度）を加えた。次いでこの反応混合物をＨ２雰囲気下２０℃で１８時間撹拌した。反応混合物を濾過し、濾液を真空中で濃縮して、粗生成物を白色の固体として得た。この粗生成物を逆相ＨＰＬＣ（カラム：Ｂｏｓｔｏｎ Ｐｒｉｍｅ Ｃ１８ １５０＊３０ｍｍ＊５ｕｍ；移動相：［Ｈ２Ｏ－ＭｅＯＨ］；Ｂ％：６０％－９５％、９分）によって精製して、化合物ＣＨＭ－０１２（１４４ｍｇ、６２．６１μｍｏｌ、３０．３１％収率、９９．８２％純度）を白色の固体として得た。
１Ｈ－ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， クロロホルム－ｄ） δ ４．２２ （ｂｒ ｓ， ２Ｈ， －ＣＨ２－Ｏ（ＣＯ）－）， ３．６５ （ｓ， １８０Ｈ， ポリ（エチレングリコール）２０００）， ３．１６ （ｑ， Ｊ＝６．５ Ｈｚ， ２Ｈ， －ＣＨ２－Ｏ（ＣＯ）ＮＨ－ＣＨ２－）， ２．７７ （ｂｒ ｓ， １Ｈ， ＨＯ－または－ＮＨ－）， １．４８ （ｂｒ ｓ， ２Ｈ， －Ｏ（ＣＯ）ＮＨ－ＣＨ２－ＣＨ２－）， １．２６ （ｓ， ３０Ｈ， Ｍｅ（ＣＨ２）１５－）， ０．９０－０．８７ （ｍ， ３Ｈ， Ｍｅ（ＣＨ２）１５－）． ＨＰＬＣ （ＥＬＳＤ）， ＲＴ＝６．４０， ９９．８２ ％純度． ＩＲ （υｍａｘ／ｃｍ－１）：３３０７， ２９１６， ２８８７， １９６３， １６９４， １５４８， １４６７， １３６０， １３４４， １１４９， １１１３， ９６３， ８４２． 融解範囲， ４５．５－４６．３℃．
実施例３：ＢＲＩＪ（商標）Ｓ１００は、－２０℃での凍結／融解サイクル後の脂質ナノ粒子のサイズ及びカプセル化の両方を安定化する
この実施例のＬＮＰは、４９：２８．５：２２：０．５ｍｏｌ％のＳＳ－ＯＣ：Ｃｈｏｌ：ＤＳＰＣ：ＰＥＧ２ｋ－ＤＰＧの脂質組成物を含み、１４の脂質窒素対リン酸比（Ｎ：Ｐ）で野生型セネカバレーウイルス（ＳＶＶ）をコードするＲＮＡ分子をカプセル化する。総脂質濃度は４０ｍＭに設定した。ＲＮＡ酸性化緩衝液はリンゴ酸ｐＨ３であった。ＬＮＰを適切な緩衝液（２５ｍＭ Ｔｒｉｓ、５０ｍＭショ糖、１１３ｍＭ ＮａＣｌ、ｐＨ７．４）中に一晩透析し、透析後に０．２μｍフィルターに通した。凍結保護剤（プロピレングリコール（ＰＧ）、ＢＲＩＪ（商標）Ｓ１００（ポリエチレングリコール）、Ｔｗｅｅｎ ８０（Ｔ８０））の各々を、様々な濃度への希釈中にＬＮＰ中にスパイクした。賦形剤なしの対照と比較して、３つの濃度の各凍結保護剤を調べた。
凍結／融解実験では、２ｍＬガラスバイアル中で０．５ｍｇ／ｍＬのＲＮＡ濃度のＬＮＰを０．５ｍＬバイアルに充填した。バイアルを－２０℃で一晩の凍結に供してから、２５℃の水浴中ですみやかに融解させた。０時間の特性解析をすべての試料に対して実行した。０．５ｍＬ量の試料を－２０℃で少なくとも１８時間凍結させ、その後２５℃の水浴中で３０分間融解させた。完全に融解させたら、バイアルを逆さにして混合し、１回の凍結／融解（Ｆ／Ｔ）後の特性解析を実行した。動的光散乱（ＤＬＳ）によってサイズを測定し（図１Ａ）、ＲｉｂｏＧｒｅｅｎ ＲＮＡ定量化試薬を使用した蛍光ベースの溶液アッセイによってカプセル化効率を測定した（図１Ｂ）。
これらの条件の中では、０．２５ｍＭのＢｒｉｊ Ｓ１００を緩衝液（２５ｍＭ Ｔｒｉｓ、５０ｍＭショ糖、１１３ｍＭ ＮａＣｌ、ｐＨ７．４）に加えた場合に、－２０℃で１回の凍結／融解サイクル後の粒径及びカプセル化の両方の維持において最良の効果があった。
実施例４：ＬＮＰ製剤中のＰＥＧ脂質成分としてのＰＥＧ２ｋ－ＤＰＧ、ＰＥＧ２ｋ－ＤＭＧ、及びＢＲＩＪ（商標）Ｓ１００の比較
実施例１と同様の手順に従い、非複製ＳＶＶ ＲＮＡ（ＳＶＶ－ｎｅｇ）をカプセル化したＳＳ－ＯＣ：コレステロール：ＤＳＰＣ：ＰＥＧ脂質（４９：２８．５：２２：０．５ｍｏｌ％）のＬＮＰを調製した。ＰＥＧ脂質はＰＥＧ２ｋ－ＤＰＧ、ＰＥＧ２ｋ－ＤＭＧまたはＢｒｉｊ Ｓ１００であった。Ｎ：Ｐ比は１４に設定した。総脂質濃度は４０ｍＭに設定した。製剤は、３：１の水性：有機体積比で、６０℃の熱を有機相シリンジに適用しながら１２ｍＬ／分で混合した。製剤を１×ＰＢＳ ｐＨ７．２に対して少なくとも１８時間透析した。透析後に特性解析を実行した。１００ｋＤ Ａｍｉｃｏｎ遠心濾過ユニットを使用して製剤を濃縮した。濃縮後に特性解析を実行し、透析後の特性解析と比較した。サイズを動的光散乱によって測定し（図２Ａ）、カプセル化効率をＲｉｂｏＧｒｅｅｎによって測定した（図２Ｂ）。
結果は、Ｂｒｉｊ Ｓ１００がＬＮＰ製剤のためにＰＥＧ２ｋ－ＤＰＧまたはＰＥＧ２ｋ－ＤＭＧの代わりに使用され得ることを示した。この特定の実施例では、Ｂｒｉｊ Ｓ１００を含むＬＮＰの粒径がより大きかった。
実施例５：Ｂｒｉｊを含むＬＮＰは、繰り返し投薬した際に改変されたｉｎ ｖｉｖｏの薬物動態特徴を示した
以下の表４のように、ＳＶＶ－ｎｅｇ／ＳＳ－ＯＣ：コレステロール：ＤＳＰＣ：ＰＥＧ脂質（４９：２８．５：２２：０．５ｍｏｌ％）のＬＮＰを調製した。ＰＥＧ脂質はＰＥＧ２ｋ－ＤＰＧまたはＢｒｉｊ Ｓ１００のいずれかであった。
Figure 2024508047000301
繰り返し投薬（２週間の週１回投薬スケジュール、Ｑ７ｘ２）の静脈内（ＩＶ）マウスＰＫ研究で製剤を使用した。投薬後の血清中のＲＮＡのコピー数を各時点で測定した。その結果を図３Ａ（ＰＥＧ２ｋ－ＤＰＧについて）及び図３Ｂ（Ｂｒｉｊ Ｓ１００について）に示す。
ＰＥＧ２ｋ－ＤＰＧを含むＬＮＰは、１回目の用量後の長期にわたる循環と、２回目の用量後４時間以内の急速なクリアランスを呈した。Ｂｒｉｊ Ｓ１００を含むＬＮＰは、１回目の用量後の曝露における中程度の変化を呈したが、２回目の用量の際には同様の循環特徴及び排除勾配を維持した。
実施例６：より低い脂質濃度及びＲＮＡ緩衝液の変更により、Ｂｒｉｊ分子を配合したＬＮＰのサイズが低減し、カプセル化効率が増加する
ＳＶＶ－ｎｅｇ／ＳＳ－ＯＣ：コレステロール：ＤＳＰＣ：Ｂｒｉｊを含むＬＮＰを、４つの異なる脂質ｍｏｌ％比：４９：２８．５：２２：０．５、４９：２７．５：２２：１．５、４９：３９．５：１１：０．５、及び４９：３８．５：１１：１．５で調製した。Ｂｒｉｊ分子は、Ｂｒｉｊ Ｃ２０、Ｂｒｉｊ Ｏ２０、Ｂｒｉｊ Ｓ２０、またはＢｒｉｊ Ｓ１００であった。Ｎ：Ｐ比は、ＳＳ－ＯＣ中の２つのイオン化可能なアミンに留意して１４に設定した。ＬＮＰの調製は、以前の実施例におけるものと同様の手順に従った。ただし、総脂質濃度は４０ｍＭから２０ｍＭに変更し、ＲＮＡ酸性化緩衝液は２０ｍＭリンゴ酸ｐＨ３から２５ｍＭ酢酸ｐＨ５に変更した。製剤は、３：１の水性：有機体積比で１２ｍＬ／分にて混合し、混合中に熱は加えなかった。製剤を１×ＰＢＳ ｐＨ７．２に対して少なくとも１８時間透析した。１００ｋＤ Ａｍｉｃｏｎ遠心濾過ユニットを使用して製剤を濃縮した。特性解析を実行した。サイズを動的光散乱によって測定し（図４Ａ）、カプセル化効率をＲｉｂｏＧｒｅｅｎによって測定した（図４Ｂ）。各固有の組成物は、再現性を確実にするために別々の日に少なくとも２回製剤化した。
その結果が示すところによれば、脂質濃度の低下及びＲＮＡ酸性化緩衝液の変更は、集合的に、すべてのＢｒｉｊ分子で、かつ各モル組成で、繰り返し投薬マウスＰＫ研究のために実施例３で使用された以前のＯＣ／Ｂｒｉｊ Ｓ１００製剤（４０ｍＭ総脂質、２０ｍＭリンゴ酸ｐＨ３）と比較して、より小さな粒径及びより高いカプセル化をもたらした。
実施例７：Ｂｒｉｊ及び腫瘍溶解性ウイルスＲＮＡを含むＬＮＰは、動物モデルにおいて高い抗腫瘍有効性を示す
以下の表５のように、ＳＶＶ－ｗｔ／ＳＳ－ＯＣ：コレステロール：ＤＳＰＣ：ＰＥＧ脂質ＬＮＰを調製し、特性解析した。ＰＥＧ脂質は、ＰＥＧ２ｋ－ＤＰＧ、Ｂｒｉｊ Ｓ１００、Ｂｒｉｊ Ｃ２０、またはＢｒｉｊ Ｓ２０であった。ＰＤＩ：多分散指数；％ＥＥ：カプセル化効率；ＺＰ：ゼータ電位。
Figure 2024508047000302
製剤をＨ４４６腫瘍モデルでの繰り返し投薬ＩＶマウス有効性スクリーンに使用した。腫瘍体積（図５Ａ）及び体重（図５Ｂ）を各時点で測定した。結果は、すべての製剤が高い抗腫瘍有効性を示し、良好に忍容されたことを示した。ＳＳ－ＯＣ／Ｂｒｉｊ ＬＮＰは、ＳＳ－ＯＣ／ＰＥＧ２ｋ－ＤＰＧと比較して、有効性及び忍容性が同様であった。
別の研究では、以下の表６のように、ＳＶＶ－ｗｔ／イオン化可能な脂質：コレステロール：ＤＳＰＣ：Ｂｒｉｊ Ｓ１００（４９：２８．５：２２：０．５または４９：３８．５：１１：１．５ｍｏｌ％）のＬＮＰを調製した。イオン化可能な脂質は、ＣＯＡＴＳＯＭＥ（登録商標）ＳＳ－ＯＣまたはＣＯＡＴＳＯＭＥ（登録商標）ＳＳ－ＯＰであった。
Figure 2024508047000303
製剤をＨ４４６腫瘍モデルでの繰り返し投薬ＩＶマウス有効性スクリーンに使用した。腫瘍体積（図６Ａ）及び体重（図６Ｂ）を各時点で測定した。結果は、すべての製剤が高い抗腫瘍有効性を示し、良好に忍容されたことを示した。ＳＳ－ＯＣ／Ｂｒｉｊ及びＳＳ－ＯＰ／Ｂｒｉｊ ＬＮＰは、有効性及び忍容性が同様であった。
実施例８：Ｍｙｒｊを含むＬＮＰの特性解析
ＳＶＶ－ｎｅｇ／ＯＣ：コレステロール：ＤＳＰＣ：Ｍｙｒｊ Ｓ４０（４９：２８．５：２２：０．５、または４９：２７．５：２２：１．５、または４９：３９．５：１１：０．５、または４９：３８．５：１１：１．５ｍｏｌ％）のＬＮＰを調製した。Ｂｒｉｊ Ｓ１００対照も含めた（４９：２８．５：２２：０．５ｍｏｌ％のＯＣ：Ｃｈｏｌ：ＤＳＰＣ：Ｂｒｉｊ Ｓ１００）。Ｎ：Ｐ比は、ＳＳ－ＯＣ中の２つのイオン化可能なアミンに留意して１４とした。総脂質濃度は２０ｍＭとし、ＲＮＡ酸性化緩衝液は２５ｍＭ酢酸ｐＨ５であった。製剤は、３：１の水性：有機体積比で１２ｍＬ／分にて混合し、混合中に熱は加えなかった。製剤は、１×ＰＢＳ ｐＨ７．２、または２５ｍＭ ｔｒｉｓ、５０ｍＭショ糖、１１３ｍＭ ＮａＣｌ、ｐＨ７．４の緩衝液に対して、少なくとも１８時間透析した。１００ｋＤ Ａｍｉｃｏｎ遠心濾過ユニットを使用して製剤を濃縮した。ＬＮＰサイズを動的光散乱によって測定し（図７Ａ）、カプセル化効率をＲｉｂｏＧｒｅｅｎによって測定した（図７Ｂ）。各固有の組成物は、再現性を確実にするために別々の日に少なくとも３回製剤化した。
結果は、ＰＥＧ脂質としてＭｙｒｊ Ｓ４０を使用して製剤化されたＬＮＰが、試験した４つのモル組成すべてで、ＰＥＧ脂質としてのＢｒｉｊ Ｓ１００と比較して同様のサイズ及びカプセル化効率をもたらしたことを示した。
実施例９：ＣＶＡ２１をコードするＲＮＡの静脈内送達のための脂質ナノ粒子の製剤
ｉｎ ｖｉｖｏでのＲＮＡの送達のために、ＣＶＡ２１ゲノムを含む組換えＲＮＡ分子を脂質ナノ粒子に配合した。
脂質ナノ粒子の産生：脂質ナノ粒子の製剤に使用される脂質（例えば、カチオン性脂質、ＰＥＧ脂質、ヘルパー脂質）は、以下から選択される：
Ｄ－Ｌｉｎ－ＭＣ３－ＤＭＡ（ＭＣ３）、
Ｎ－（２，３－ジオレオイルオキシ）プロピル）－Ｎ，Ｎ，Ｎ－トリメチルアンモニウムクロリド（ＤＯＴＡＰ）
ＣＯＡＴＳＯＭＥ（登録商標）ＳＳ－ＬＣ（旧名：ＳＳ－１８／４ＰＥ－１３）、
ＣＯＡＴＳＯＭＥ（登録商標）ＳＳ－ＥＣ（旧名：ＳＳ－３３／４ＰＥ－１５）、
ＣＯＡＴＳＯＭＥ（登録商標）ＳＳ－ＯＣ、
ＣＯＡＴＳＯＭＥ（登録商標）ＳＳ－ＯＰ、
ジ（（Ｚ）－ノナ－２－エン－１－イル）９－（（４－ジメチルアミノ）ブタノイル）オキシ）ヘプタデカンジオエート（Ｌ－３１９）
コレステロール；
１，２－ジステアロイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン（ＤＳＰＣ）、
１，２－ジラウロイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホエタノールアミン（ＤＬＰＥ）、
１，２－ジオレオイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン（ＤＯＰＣ）、
１，２－ジオレオイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホエタノールアミン（ＤＯＰＥ）、
１，２－ジステアロイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホエタノールアミン－Ｎ－［アミノ（ポリエチレングリコール）－５０００］（ＤＳＰＥ－ＰＥＧ５Ｋ）、
１，２－ジパルミトイル－ｒａｃ－グリセロールメトキシポリエチレングリコール－２０００（ＰＥＧ２ｋ－ＤＰＧ）、
１，２－ジステアロイル－ｒａｃ－グリセロ－３－メチルポリオキシエチレン－２０００（ＤＳＧ－ＰＥＧ２Ｋ）、
１，２－ジミリストイル－ｒａｃ－グリセロ－３－メチルポリオキシエチレン－２０００（ＤＭＧ－ＰＥＧ２Ｋ）
ポリオキシエチレン（１００）ステアリルエーテル（ＢＲＩＪ Ｓ１００、ＣＡＳ番号：９００５－００－９）、
ポリオキシエチレン（２０）ステアリルエーテル（ＢＲＩＪ Ｓ２０、ＣＡＳ番号： ９００５－００－９）、
ポリオキシエチレン（２０）オレイルエーテル（ＢＲＩＪ Ｏ２０、ＣＡＳ番号：９００４－９８－２）、
ポリオキシエチレン（２０）セチルエーテル（ＢＲＩＪ Ｃ２０、ＣＡＳ番号：９００４－９５－９）、
ポリオキシエチレン（４０）ステアレート（ＭＹＲＪ Ｓ４０、ＣＡＳ番号：９００４－９９－３）。
エタノール中、様々な比で脂質を調製した。次いで、マイクロ流体マイクロ混合物（Ｐｒｅｃｉｓｉｏｎ ＮａｎｏＳｙｓｔｅｍｓ，Ｖａｎｃｏｕｖｅｒ，ＢＣ）を使用して、２ｍＬ／分の合計流量（エタノール、脂質混合物については０．５ｍＬ／分、水性緩衝液、ＲＮＡについては１．５ｍＬ／分）でＲＮＡ脂質ナノ粒子を生成した。得られた粒子を、Ｃａ及びＭｇを含むＰＢＳを用いたタンジェンシャルフロー濾過によって洗浄した。
脂質ナノ粒子の物理的特徴の分析：脂質ナノ粒子の物理的特徴をタンジェンシャルフロー濾過の前後に評価した。粒径分布及びゼータ電位の測定値を、Ｍａｌｖｅｒｎ Ｎａｎｏ－ＺＳ Ｚｅｔａｓｉｚｅｒ（Ｍａｌｖｅｒｎ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ Ｌｔｄ，Ｗｏｒｃｅｓｔｅｒｓｈｉｒｅ，ＵＫ）を使用した光散乱によって決定した。サイズ測定をｐＨ７．４のＨＢＳで行い、ゼータ電位測定をｐＨ７．４の０．０１Ｍ ＨＢＳで行った。ＲＮＡ封入のパーセンテージはＲｉｂｏｇｒｅｅｎアッセイによって測定した。８０パーセントを超えるＲＮＡ封入を示した脂質ナノ粒子をｉｎ ｖｉｖｏで試験した。
実施例１０：ＣＶＡ２１－ＲＮＡを含むＬＮＰのＩｎ Ｖｉｖｏ研究
マウスＳＫ－ＭＥＬ－２８メラノーマモデルを使用して、ＬＮＰにカプセル化されたコクサッキーウイルスＡ２１（ＣＶＡ２１）－ＲＮＡの抗腫瘍有効性をｉｎ ｖｉｖｏで評価した。これらの実験では、４９：２２：２８．５：０．５ｍｏｌ％のモル比のＳＳ－ＯＣ：ＤＳＰＣ：Ｃｈｏｌ：ＢＲＩＪ Ｓ１００を含むＬＮＰに、ＣＶＡ２１－ＲＮＡウイルスゲノムをカプセル化した。いくつかの実施形態では、ＬＮＰのサイズは９４ｎｍであり、ＰＤＩは０．１９であり、％ＥＥは９１％であった。
簡単に説明すると、胸腺欠損ヌードマウスの皮下にＳＫ－ＭＥＬ－２８ヒトメラノーマ腫瘍を移植し、１日目及び８日目に、ＣＶＡ２１－ＲＮＡを含むＬＮＰの２用量（０．２ｍｇ／ｋｇまたは０．０５ｍｇ／ｋｇ）のうちの１つのＩＶ投与で処置した。腫瘍成長（図８Ａ及び図８Ｃ）及び体重変化（図８Ｂ及び図８Ｄ）をモニターした。ＰＢＳ緩衝液を対照として使用した。
０．０５ｍｇ／ｋｇの低さの用量レベルで完全な腫瘍退縮が観察された（図８Ｂ）。安定な体重（図８Ｂ及び図８Ｄ）及び有害な臨床徴候の欠如によって示されたように、両方の用量が良好に忍容された。ＣＶＡ２１マイナス鎖のＲＴ－ｑＰＣＲ、ならびに注射２日後の脾臓、肝臓、肺、心臓、及び腎臓におけるプラーク力価アッセイによって、低レベルのＣＶＡ２１複製が検出された。しかしながら、これは７日目には検出できず（図８Ｅ）、マウスから感染が排除されたことが示された。結果は、Ｂｒｉｊ Ｓ１００を含むＬＮＰにカプセル化されたＣＶＡ２１が高い抗腫瘍有効性を示し、良好に忍容されたことを示した。
実施例１１：異なるイオン化可能な脂質を含むＬＮＰの製剤
この実施例は、ＬＮＰ製剤中の非複製セネカバレーウイルス（ＳＶＶ）ＲＮＡ（ＳＶＶ－Ｎｅｇ）のカプセル化について説明する。この実施例でのＬＮＰは、５０：７：４０：３ｍｏｌ％のイオン化可能な脂質（ＣＡＴ）：ＤＳＰＣ：コレステロール：ＰＥＧ２ｋ－ＤＭＧの脂質組成物を含む。マイクロ流体デバイス（Ｐｒｅｃｉｓｉｏｎ ＮａｎｏＳｙｓｔｅｍｓ Ｉｎｃ．）を使用して、エタノール中の脂質混合物を、ＲＮＡ酸性化緩衝液（５０ｍＭクエン酸、ｐＨ４）中のＳＶＶ－Ｎｅｇと、９の脂質窒素対リン酸比（Ｎ：Ｐ）で混合した。総脂質濃度は２０ｍＭに設定した。
ＬＮＰを５０ｍＭリン酸、ｐＨ６．０に対して１２～１６時間透析し、二次透析を５０ｍＭ ＨＥＰＥＳ、５０ｍＭ ＮａＣｌ、２６３ｍＭショ糖、ｐＨ７．３に対して室温で４～２４時間行った。透析後のＬＮＰを１００ｋＤａ ＡＭＩＣＯＮ（登録商標）ＵＬＴＲＡ ＣＥＮＴＲＩＦＵＧＡＬフィルター（ＭｉｌｌｉｐｏｒｅＳｉｇｍａ）を使用して濃縮し、０．２μｍシリンジフィルターを使用して滅菌濾過した。次いで、試料を特性解析し、必要に応じて希釈した。希釈の際、試料をその後－２０℃で貯蔵する場合には５ｗ／ｖ％グリセロールスパイクを加えた。
動的光散乱（ＤＬＳ）による粒径（図１０Ａ）及び多分散指数（ＰＤＩ）（図１０Ｂ）についてＬＮＰの特性解析を行った。蛍光ベースのＲｉｂｏＧｒｅｅｎアッセイを使用してカプセル化効率を測定した（図１０Ｃ）。簡単に説明すると、適切なＲＮＡを使用して標準曲線を生成した。試験ＬＮＰ試料をＴＥ緩衝液で４０倍に希釈し、これを評価してカプセル化されていないＲＮＡの量（Ｒｆ）を求め、Ｔｒｉｔｏｎ－Ｘで希釈して全ＲＮＡの量（Ｒｔ）を生成した。ＲｔとＲｆの差を全ＲＮＡ（Ｒｔ）で割ったものがカプセル化効率（％ＥＥ）である：
％ＥＥ＝（Ｒｔ－Ｒｆ）／Ｒｔ×１００％。
Figure 2024508047000304
実施例１２：精製されたＲＮＡはＬＮＰの生物物理学的特性を改善する
ＳＶＶ－Ｎｅｇ ＲＮＡをカプセル化するＬＮＰ製剤を実施例１１に記載のように調製し、特性解析した。タンジェンシャルフロー濾過（ＴＦＦ）によって、またはオリゴ－ｄＴクロマトグラフィー及び逆相クロマトグラフィーを使用して、ＳＶＶ－Ｎｅｇ ＲＮＡを精製した。オリゴ－ｄＴ及び逆相クロマトグラフィーで精製されたＳＶＶ－Ｎｅｇ ＲＮＡをカプセル化した被験ＬＮＰ製剤は、低減した粒径及びＰＤＩ（図１１Ａ及び１１Ｂ）と、比較的高いまたはさらに改善されたカプセル化効率（図１１Ｃ）を有していた。
実施例１３：ＲＮＡ酸性化緩衝液の改変はＬＮＰの生物物理学的特性を改善する
クエン酸濃度及びｐＨの変化がＬＮＰの生物物理学的特性に及ぼす効果を決定するために、実施例１１に記載のように、ただしＲＮＡ酸性化緩衝液を変更して、ＳＶＶ－Ｎｅｇ ＲＮＡをカプセル化するＬＮＰ製剤を調製し、特性解析した。
ＲＮＡ酸性化緩衝液：（１）５０ｎＭクエン酸ｐＨ４、（２）５ｍＭクエン酸ｐＨ３．５、（３）１５ｍＭクエン酸ｐＨ３．５、（４）３０ｍＭクエン酸ｐＨ３．５、及び（５）５０ｍＭクエン酸ｐＨ３．５を用い、ＣＡＴ４及びＣＡＴ５製剤を試験した。図１２Ａ、１２Ｂ、及び１３Ｃは、ＬＮＰの粒径、ＰＤＩ、及びカプセル化効率を示す。さらに、５ｍＭクエン酸ｐＨ３．５緩衝液を用い、ＣＡＴ１～ＣＡＴ３、ＣＡＴ６～ＣＡＴ１０、及びＣＡＴ３５のＬＮＰ製剤を作製した（図１３Ａ、１３Ｂ、及び１３Ｃ）。
結果は、ＲＮＡ酸性化緩衝液の変更（例えば、塩濃度の低下）が、より小さな粒径及びＰＤＩをもたらすことを示唆した。
実施例１４：ＬＮＰ製剤は－２０℃と－８０℃の両方で安定である
実施例１１と同様の手順に従い、ＳＶＶ－ｎｅｇ ＲＮＡをカプセル化するＣＡＴ：ＤＳＰＣ：コレステロール：ＰＥＧ２ｋ－ＤＭＧ（５０：７：４０：３ｍｏｌ％）のＬＮＰを調製した。試験したイオン化可能な脂質は、ＣＡＴ３、ＣＡＴ４、及びＣＡＴ５であった。使用したＲＮＡ酸性化緩衝液は、５ｍＭクエン酸、ｐＨ３．５であった。凍結保護剤（５ｗ／ｖ％グリセロール）をＬＮＰ希釈物中にスパイクした。次いで、ＬＮＰ製剤を－２０℃または－８０℃で１週間または１か月貯蔵し、その後、生物物理学的パラメータを測定した。
結果を図１４Ａ（－２０℃）及び図１４Ｂ（－８０℃）に示す。－２０℃では、試験した時点で、すべての製剤の粒径及びカプセル化効率が同じ状態のままであった。－８０℃では、試験した時点で、すべての製剤の粒径が減少し、カプセル化効率は同じ状態のままであった。
実施例１５：異なるイオン化可能な脂質を含むＬＮＰのＩｎ Ｖｉｖｏ研究
ＬＮＰにカプセル化されたセネカバレーウイルス（ＳＶＶ）－ＲＮＡのｉｎ ｖｉｖｏ薬物動力及び抗腫瘍有効性を小細胞肺癌（ＳＣＬＣ）のマウスモデルで評価した。
この実施例では、ＳＶＶウイルスゲノムをコードするＲＮＡ分子及びＮａｎｏＬｕｃルシフェラーゼ（ＮＬｕｃ）を、以下の表８に記載のように調製したＬＮＰにカプセル化した。ＮＬｕｃは、基質のフリマジンを供給されると発光シグナルを生成するルシフェラーゼ酵素である。ＬＮＰを、１００ｍＭ ｔｒｉｓ、３００ｍＭショ糖、１１３ｍＭ ＮａＣｌ、ｐＨ７．４で、５℃にて一晩透析した。あるいは、ＬＮＰを５０ｍＭリン酸、ｐＨ６．０に対して１２～１６時間透析し、二次透析を５０ｍＭ ＨＥＰＥＳ、５０ｍＭ ＮａＣｌ、２６３ｍＭショ糖、ｐＨ７．３に対して室温で４～２４時間行った。透析後のＬＮＰ製剤を濃縮し、濾過し、特性解析し、任意で希釈した。
Figure 2024508047000305
Figure 2024508047000306
ＮＣＩ－Ｈ４４６ヒトＳＣＬＣ細胞（無血清ＰＢＳ及びＭａｔｒｉｇｅｌ（登録商標）の１：１混合物中、５×１０６細胞／０．１ｍＬ）を、８週齢の雌の胸腺欠損ヌードマウス（Ｃｈａｒｌｅｓ Ｒｉｖｅｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）の右側腹部に皮下接種した。腫瘍サイズ中央値がおよそ１５０ｍｍ３（１２０～１８０ｍｍ３の範囲）に達したとき、マウスの静脈内に、０．２ｍｇ／ｋｇのＰＢＳまたはＳＶＶ－ＲＮＡを含むＬＮＰを、１日目または１日目及び８日目に投与した。投薬９６時間後に光学イメージングＩＶＩＳ Ｌｕｍｉｎａ（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ）を利用して生物発光（ＢＬＩ）を評価し、分子イメージングソフトウェアを使用してシグナルを数量化した（図１６Ａ～１６Ｆ）。腫瘍体積及び体重は週に３回評価した（図１７Ａ～１７Ｅ）。
ＣＡＴ１～ＣＡＴ５製剤については２回の０．２ｍｇ／ｋｇ用量後に腫瘍退縮が観察され（図１７Ａ、左）、すべての製剤が良好に忍容された（図１７Ａ、右）。ＣＡＴ６～ＣＡＴ９、ＣＡＴ１１、ＣＡＴ１６～ＣＡＴ１７、ＣＡＴ１９～ＣＡＴ２４、ＣＡＴ２６、ＣＡＴ２９、ＣＡＴ３２、及びＣＡＴ３４製剤については、単回の０．２ｍｇ／ｋｇ用量での腫瘍退縮が観察され（図１７Ｂ～１７Ｅ、左）、すべての製剤が良好に忍容された（図１７Ｂ～１７Ｅ、右）。ＣＡＴ１２～ＣＡＴ１３、ＣＡＴ１５、ＣＡＴ１８、及びＣＡＴ２８製剤については腫瘍成長阻害が観察され（図１７Ｂ～１７Ｅ、左）、すべての製剤が良好に忍容された（図１７Ｂ～１７Ｅ、右）。
実施例１６：ＣＡＴ７及び異なるＰＥＧ脂質を含むＬＮＰのＩｎ ｖｉｖｏ研究
様々な脂質組成のＬＮＰにカプセル化されたＳＶＶ－ＲＮＡのｉｎ ｖｉｖｏ薬物動力及び抗腫瘍有効性を小細胞肺癌（ＳＣＬＣ）のマウスモデルで評価した。実施例１１に記載の同様の手順に従い、ＳＶＶウイルスゲノムをコードするＲＮＡ分子及びＮＬｕｃを、以下の表９に従って調製したＬＮＰにカプセル化した。総脂質濃度は２０ｍＭに設定し、脂質窒素対リン酸比（Ｎ：Ｐ）は９であった。
Figure 2024508047000307
ＳＶＶ－ＮａｎｏＬｕｃカプセル化ＬＮＰの薬物動力（生物発光アッセイにより評価）及び腫瘍成長阻害能力を、実施例１５に記載のように評価した。
ナノルシフェラーゼは注射７２時間後に検出可能であり、持続的なＳＶＶを示している（図１８Ａ）。すべての被験製剤について単回の０．２ｍｇ／ｋｇ用量で完全な腫瘍退縮が観察され、すべての製剤が良好に忍容された（図１８Ｂ）。
実施例１７：ＬＮＰ製剤の薬物動態評価
コクサッキーウイルスＡ２１（ＣＶＡ２１）－ＲＮＡカプセル化ＬＮＰ製剤の薬物動態（ＰＫ）をラットで評価した。
この実施例では、実施例１１に記載のものと同様の手順に従い、ＣＶＡ－２１ウイルスゲノムをコードするＲＮＡ分子を、以下の表１０に従って調製したＬＮＰにカプセル化した。
Figure 2024508047000308
Figure 2024508047000309
Figure 2024508047000310
１日目及び１５日目（Ｑ２Ｗ２）または１日目及び８日目（Ｑ１Ｗ２）に、ナイーブな雌スプラーグドーリーＪＶＣラット（１２週齢）の静脈内に、ＬＮＰに含まれた１または０．３ｍｇ／ｋｇのウイルスゲノムを投与した。血漿試料を所定の時点で収集した。ＬＮＰに含まれるイオン化可能な脂質（ＳＳ－ＯＣ、ＣＡＴ７、またはＣＡＴ１１）の血漿中濃度をＬＣ－ＭＳによって測定し（図１９Ａ～１９Ｅ、２０Ａ～２０Ｄ、２１Ａ～２１Ｆ、及び２２Ａ～２２Ｅ）、薬物動態パラメータを計算し、表１１にまとめた。ＩｇＭ及びＩｇＧのレベルを酵素結合免疫アッセイ（ＥＬＩＳＡ）によって分析した（図２３Ａ～２３Ｂ及び図２４Ａ～２４Ｂ）。
Figure 2024508047000311
Figure 2024508047000312
異なる比率及び／または種類のＰＥＧ脂質を含むＬＮＰ製剤は、複数用量後に様々なＴ１／２、曝露、及びクリアランスを示す。これらのデータは、長い曝露から短い曝露のための様々な治療用ペイロードの必要を満たすようにＬＮＰ組成物を適合させることができることを示す。
ＬＮＰ製剤の投薬後の抗ＰＥＧ ＩｇＭレベルは低く、７日目から２１日目にかけて低下した（図２３Ａ及び図２３Ｂ）。抗ＰＥＧ ＩｇＧも低く、複数用量で有意に上昇せず、免疫原性の可能性が低いことを示している（図２４Ａ及び図２４Ｂ）。被験製剤の中で、イオン化可能な脂質としてのＣＡＴ７及びＰＥＧ脂質としてのＣＨＭ－００６を含むＬＮＰは、ＩｇＭ及びＩｇＧのレベルが最も低いことが観察された。
実施例１８：ｍＲＮＡをカプセル化するＬＮＰの製剤
Ｎ：Ｐ比が約８：１～２０：１のｍＲＮＡをカプセル化するＳＳ－ＯＣ：コレステロール：ＤＳＰＣ：ＰＥＧ脂質ＬＮＰを調製する。ＰＥＧ脂質は、ＰＥＧ２ｋ－ＤＰＧ、ＰＥＧ２ｋ－ＤＭＧ、またはＢｒｉｊ Ｓ１００である。総脂質濃度は約１０～約６０ｍＭである。製剤を混合し、透析し、濃縮する。サイズを動的光散乱によって測定し、カプセル化効率をＲｉｂｏＧｒｅｅｎによって測定する。結果は、Ｂｒｉｊ Ｓ１００がｍＲＮＡ ＬＮＰ製剤のためにＰＥＧ２ｋ－ＤＰＧまたはＰＥＧ２ｋ－ＤＭＧの代わりに使用され得ることを示す。
この実施例のｍＲＮＡ ＬＮＰ製剤を、マウスでの静脈内投与による繰り返し投薬時の薬物動態特徴について試験する。投薬後の血清中のＲＮＡのコピー数を所定の時点で測定する。結果は、Ｂｒｉｊ Ｓ１００を使用して製剤化されたＬＮＰが、２回目の投薬時に、ＰＥＧ－２ｋ ＤＰＧまたはＰＥＧ２ｋ－ＤＭＧを使用して製剤化されたＬＮＰと比較して低減したクリアランス速度を呈することを示す。
実施例１９：ｍＲＮＡをカプセル化するＬＮＰの製剤
この実施例は、脂質ナノ粒子（ＬＮＰ）製剤中のｍＲＮＡのカプセル化について説明する。この実施例のＬＮＰは、５４．５：２０：２５：０．５ｍｏｌ％のＣＡＴ７：ＤＳＰＣ：コレステロール：ＣＨＭ－００６の脂質組成物を含む。エタノール中の脂質混合物を、ＲＮＡ酸性化緩衝液（５ｍＭクエン酸、ｐＨ３．５）中で、ヒトエリスロポエチン（ｈＥＰＯ）ｍＲＮＡまたは二重特異性Ｔ細胞エンゲージャー（ＢｉＴＥ）をコードするｍＲＮＡと混合した。総脂質濃度は２０ｍＭに設定し、脂質窒素対リン酸比（Ｎ：Ｐ）は９であった。
ＬＮＰを５０ｍＭリン酸、ｐＨ６．０に対して１２～１６時間透析し、二次透析を５０ｍＭ ＨＥＰＥＳ、５０ｍＭ ＮａＣｌ、２６３ｍＭショ糖、ｐＨ７．３に対して室温で４～２４時間行った。透析後のＬＮＰを１００ｋＤａ ＡＭＩＣＯＮ（登録商標）ＵＬＴＲＡ ＣＥＮＴＲＩＦＵＧＡＬフィルター（ＭｉｌｌｉｐｏｒｅＳｉｇｍａ）を使用して濃縮し、次いで、０．２μｍシリンジフィルターを使用して滅菌濃縮した。次いで、試料を特性解析し、必要に応じて希釈した。希釈の際、試料を－２０℃で貯蔵する場合には５ｗ／ｖ％グリセロールスパイクを加えた。
ＤＬＳによってＬＮＰサイズを測定し、蛍光ベースのＲｉｂｏＧｒｅｅｎアッセイを使用してカプセル化有効性を測定した（表１２）。
Figure 2024508047000313
実施例２０：ＬＮＰに配合されたｍＲＮＡの薬物動態
ｍＲＮＡカプセル化ＬＮＰ製剤（表１２）のＰＫをマウスで評価した。
ナイーブ雌Ｂａｌｂ／ｃマウスに１ｍｇ／ｋｇのＬＮＰを投薬した。３匹のマウスから所定の各時点で採血し、血漿を後の分析のために－８０℃で凍結した。ｈＥＰＯ及びＢｉＴＥの血漿レベルをＭｅｓｏ Ｓｃａｌｅ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ（ＭＳＡ）電気化学発光（ＥＣＬ）アッセイによって測定した（図２５Ａ及び図２５Ｂ）。高レベルのタンパク質発現及び長期にわたる曝露が観察された。
実施例２１：様々な長さでＬＮＰに配合されたＲＮＡ
実施例１１に記載のものと同様の手順に従い、以下の表１３に従って、様々な長さのＲＮＡをカプセル化したＬＮＰ製剤を調製した。
Figure 2024508047000314
このデータは、カプセル化されたＲＮＡの長さが様々であるにもかかわらず、ＬＮＰが良好な生物物理学的特性（例えば、小さいサイズ及びＰＤＩ、高い％ＥＥ）を維持したことを示す。
実施例２２：ＣＡＴ７を含むＬＮＰの製剤研究及びモデル化
Ａ最適（Ａ－ｏｐｔｉｍａｌ）基準（Ｊｏｎｅｓ ｅｔ ａｌ．２０２１）を使用して、ＣＡＴ７を含むＬＮＰの製剤研究を設計し（図２６）、２０の実験設計（ＤＯＥ）ランを得た（表１４）。総脂質濃度は２０ｍＭ、Ｎ：Ｐ比は９に設定した。設計空間は、４０～６０ｍｏｌ％のイオン化可能な脂質であるＣＡＴ７、５～２０ｍｏｌ％のヘルパー脂質であるＤＳＰＣ、２５～５０ｍｏｌ％の構造脂質であるコレステロール、及び０．２５～３％のＰＥＧ脂質であるＤＭＧ－ＰＥＧ２０００またはＣＨＭ－００１を含むＬＮＰを試験した。
Figure 2024508047000315
信頼できる設計空間のパラメータ内で、ＤＯＥ最適組成物は、５４．５：２０：２５：０．５のｍｏｌ％比のＣＡＴ７：ＤＳＰＣ：コレステロール：ＰＥＧ脂質であると決定された。
様々な組成のＬＮＰの生物物理学的特徴を予測し、様々な所望の結果のためにＬＮＰシステムを識別及び微調整するためのモデルを策定するために、ＳＶＥＭ（Ｓｅｌｆ－Ｖａｌｉｄａｔｅｄ Ｅｎｓｅｍｂｌｅ Ｍｏｄｅｌｉｎｇ）法（Ｌｅｍｋｕｓ ｅｔ ａｌ．２０２１）を使用した。モデルの開発における目標は、ＰＤＩ（１の重みが付けられる）及びサイズ（０．１の重みが付けられる）を最小化することであった。
得られた予測プロファイラーを図２７に示す。ＣＡＴ７、ＤＳＰＣ、及びコレステロールについて、二次（屈曲または非線形）関係が見られる。ＣＡＴ７組成物はＰＤＩに大きく影響するように見受けられ、増加傾向が最初に４０ｍｏｌ％から開始し、その後に約５５ｍｏｌ％で安定化した下降傾向が続いた。より高いＤＳＰＣは、ＰＤＩ及びサイズの両方の低下に有利であるように見受けられる。コレステロールは、ＰＤＩ及びサイズの両方についてＣＡＴ７に酷似するパターンに従うが、このモデルはより低いモル組成を選ぶ。ＰＥＧ脂質組成の増加は、観察されたＰＤＩにおける急激な増加に関連している。
均等物及び範囲
特許請求の範囲において、「１つの（ａ）」、「１つの（ａｎ）」、及び「その（ｔｈｅ）」などの冠詞は、１つまたは２つ以上を意味し得るが、その反対が示されているか、または文脈上明らかである場合はこの限りではない。ある群の１つ以上の要素間に「または」を含む請求項または説明は、その群の要素の１つ、２つ以上、またはすべてが所与の生成物またはプロセスに存在する、用いられる、または別様に関連している場合に満たされるとみなされるが、その反対が示されているか、または文脈上明らかである場合はこの限りではない。本開示には、群の要素の１つだけが所与の生成物またはプロセスに存在する、用いられる、または別様に関連している実施形態が含まれる。本開示には、群の要素の２つ以上またはすべてが所与の生成物またはプロセスに存在する、用いられる、または別様に関連している実施形態が含まれる。
さらに、本開示は、列挙された請求項のうちの１つ以上から１つ以上の制限事項、要素、節、及び記述用語が別の請求項に導入されるすべてのバリエーション、組み合わせ、及び並べ替え形態を包含する。例えば、別の請求項に従属する任意の請求項は、同じ基本請求項に従属する任意の他の請求項に見られる１つ以上の制限事項を含むように修飾され得る。例えばＭａｒｋｕｓｈ群形式のリストとして要素が提示される場合、要素の各亜群も開示され、いずれの要素（複数可）もこの群から削除され得る。概して、本開示または本開示の態様が特定の要素及び／または特徴を含むものとして言及される場合、本開示の特定の実施形態または本開示の態様は、そのような要素及び／または特徴からなる、またはそれらから本質的になると理解されたい。簡潔にするために、これらの実施形態は、本明細書では一語一語具体的に記載されていない。「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」及び「含む（ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ）」という用語は、開放的であるように意図され、追加の要素またはステップの包含を許容することにも留意されたい。範囲が与えられている場合、端点が含まれる。さらに、別途記載されている場合、または文脈及び当業者の理解から別の意味が明らかである場合を除き、範囲として表される値は、文脈に別途明記されていない限り、範囲の下限の単位の１０分の１まで、本開示の異なる実施形態において規定された範囲内の任意の特定の値または部分範囲をとることができる。
本出願は、様々な交付済み特許、公開特許出願、学術雑誌記事、及び他の公表文献に言及し、これらはすべて、参照により本明細書に組み込まれる。組み込まれた参考文献のいずれかと本明細書との間に矛盾がある場合、本明細書が優先するものとする。さらに、先行技術の範囲内にある本開示の特定の実施形態はいずれも、請求項のうちのいずれか１つ以上から明確に除外され得る。そのような実施形態は当業者にとって既知であるとみなされるので、除外が本明細書に明記されていなくとも除外され得る。本開示の特定の実施形態はいずれも、先行技術の存在に関連するか否かにかかわらず、あらゆる理由により、任意の請求項から除外され得る。
当業者は、定型的な実験を使用するだけで、本明細書に記載される特定の実施形態に対する多くの均等物を認識するか、または確認できるであろう。本明細書に記載される本件実施形態の範囲は、上記説明に限定されるように意図されるものではなく、むしろ添付の特許請求の範囲に記載されるとおりである。当業者には、以下の特許請求の範囲において定義される本開示の趣旨または範囲から逸脱することなく、この説明に対する様々な変更及び改変が行われ得ることが理解されよう。

Claims (175)

  1. 式（Ｉ）の化合物：
    Figure 2024508047000316
     またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物［式中、
    Ａは、－Ｎ（ＣＨ２ＲＮ１）（ＣＨ２ＲＮ２）、または少なくとも１つのＮを含む４～７員ヘテロシクリル環であり、前記４～７員ヘテロシクリル環は、０～６つのＲ３で置換されていてもよく、
    各Ｘは、独立的に、－Ｏ－、－Ｎ（Ｒ１）－、または－Ｎ（Ｒ２）－であり、
    Ｒ１は、置換されていてもよいＣ１－Ｃ３１脂肪族及びステロイジルからなる群から選択され、
    Ｒ２は、置換されていてもよいＣ１－Ｃ３１脂肪族及びステロイジルからなる群から選択され、
    Ｒ３は、置換されていてもよいＣ１－Ｃ６脂肪族であり、
    ＲＮ１及びＲＮ２は、各々独立的に、水素、ヒドロキシ－Ｃ１－Ｃ６アルキル、Ｃ２－Ｃ６アルケニル、またはＣ３－Ｃ７シクロアルキルであり、
    Ｌ１は、置換されていてもよいＣ１－Ｃ２０アルキレン鎖、及び置換されていてもよい二価Ｃ２－Ｃ２０アルケニレン鎖からなる群から選択され、
    Ｌ２は、置換されていてもよいＣ１－Ｃ２０アルキレン鎖、及び置換されていてもよい二価Ｃ２－Ｃ２０アルケニレン鎖からなる群から選択され、
    Ｌ３は結合、置換されていてもよいＣ１－Ｃ６アルキレン鎖、または置換されていてもよい二価Ｃ３－Ｃ７シクロアルキレンであり、
    ただし、Ａが－Ｎ（ＣＨ３）（ＣＨ３）であり、ＸがＯであるとき、Ｌ３はＣ１－Ｃ６アルキレン鎖ではないことを条件とする］。
  2. Ｒ１及びＲ２が、各々独立的に、置換されていてもよいＣ１－Ｃ３１アルキルまたは置換されていてもよいＣ２－Ｃ３１アルケニルである、請求項１に記載の化合物。
  3. Ｒ１及びＲ２が同じである、請求項１または２に記載の化合物。
  4. Ｒ１及びＲ２が、各々独立的に、置換されていてもよいＣ１０－Ｃ２０アルキルである、請求項１～３のいずれか１項に記載の化合物。
  5. Ｒ１及びＲ２が、各々独立的に、分岐状Ｃ１０－Ｃ２０アルキルである、請求項１～４のいずれか１項に記載の化合物。
  6. Ｒ１及びＲ２が異なる、請求項１または２に記載の化合物。
  7. Ｒ１が、置換されていてもよいＣ６－Ｃ２０アルケニルであり、Ｒ２が、置換されていてもよいＣ１０－Ｃ２０アルキルである、請求項１、２、及び６のいずれか１項に記載の化合物。
  8. Ｒ１が、Ｃ６－Ｃ２０アルケニルであり、Ｒ２が、分岐状Ｃ１０－Ｃ２０アルキルである、請求項１、２、６、及び７のいずれか１項に記載の化合物。
  9. Ｌ１が、置換されていてもよいＣ１－Ｃ１０アルキレン鎖であり、Ｌ２が、置換されていてもよいＣ１－Ｃ１０アルキレン鎖である、請求項１～８のいずれか１項に記載の化合物。
  10. Ｌ１が、置換されていてもよいＣ１－Ｃ５アルキレン鎖であり、Ｌ２が、置換されていてもよいＣ１－Ｃ５アルキレン鎖である、請求項１～９のいずれか１項に記載の化合物。
  11. Ｌ１が、置換されていてもよいＣ１－Ｃ３アルキレン鎖であり、Ｌ２が、置換されていてもよいＣ１－Ｃ３アルキレン鎖である、請求項１～１０のいずれか１項に記載の化合物。
  12. Ｌ１及びＬ２が各々、－ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２－である、請求項１～１１のいずれか１項に記載の化合物。
  13. Ｌ３が、Ｃ１－Ｃ３アルキレン鎖である、請求項１～１２のいずれか１項に記載の化合物。
  14. Ｌ３が結合である、請求項１～１２のいずれか１項に記載の化合物。
  15. Ｌ３が、二価Ｃ３－Ｃ７シクロアルキレンである、請求項１～１２のいずれか１項に記載の化合物。
  16. チオレートのＳと、Ａに含まれる最も近いＮとの間の炭素原子の数が、２～１０である、請求項１～１５のいずれか１項に記載の化合物。
  17. チオレートのＳと、Ａに含まれる最も近いＮとの間の炭素原子の数が、２～８である、請求項１～１６のいずれか１項に記載の化合物。
  18. チオレートのＳと、Ａに含まれる最も近いＮとの間の炭素原子の数が、２～５である、請求項１～１７のいずれか１項に記載の化合物。
  19. チオレートのＳと、Ａに含まれる最も近いＮとの間の炭素原子の数が、２～４である、請求項１～１８のいずれか１項に記載の化合物。
  20. チオレートのＳと、Ａに含まれる最も近いＮとの間の炭素原子の数が、３である、請求項１～１９のいずれか１項に記載の化合物。
  21. 式（Ｉ－ａ）の化合物：
    Figure 2024508047000317
     またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物であり、式中、
    ｍは０、１、２、３、４、５、または６である、
    請求項１～２０のいずれか１項に記載の化合物。
  22. Ａが、１つ以上のＳを含む、請求項２１に記載の化合物。
  23. Ａが、Ｎを１つだけ含む、置換されていてもよい４～７員ヘテロシクリル環である、請求項２１または２２に記載の化合物。
  24. Ａが、置換されていてもよい５～６員ヘテロシクリル環である、請求項２１～２３のいずれか１項に記載の化合物。
  25. Ａが、Ｎを１つだけ含む、置換されていてもよい６員ヘテロシクリル環である、請求項２１～２４のいずれか１項に記載の化合物。
  26. 式（Ｉ－ｂ）の化合物：
    Figure 2024508047000318
     またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物であり、式中、
    ｎは０、１、２、または３であり、
    ｍは０、１、２、３、４、５、または６である、
    請求項２１～２５のいずれか１項に記載の化合物。
  27. Ａが第三級アミンである、請求項２１～２６のいずれか１項に記載の化合物。
  28. 式（Ｉ－ｂｉｉ）の化合物：
    Figure 2024508047000319
     またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物であり、式中、
    ｍは０、１、２、または３であり、
    ｐ及びｑは、各々独立的に、０、１、２、または３であり、ｑ＋ｐは３以下である、
    請求項２１～２７のいずれか１項に記載の化合物。
  29. Ｌ３が結合である、請求項２１～２８のいずれか１項に記載の化合物。
  30. Ｌ３が、－ＣＨ２－である、請求項２１～２８のいずれか１項に記載の化合物。
  31. ｎが１である、請求項２１～３０のいずれか１項に記載の化合物。
  32. ｎが２である、請求項２１～３０のいずれか１項に記載の化合物。
  33. ｎが３である、請求項２１～３０のいずれか１項に記載の化合物。
  34. ｍが０または１である、請求項２１～３３のいずれか１項に記載の化合物。
  35. Ｒ３が、Ｃ１－Ｃ６アルキルまたはＣ１－Ｃ６アルケニルであり、各Ｃ１－Ｃ６アルキルまたはＣ１－Ｃ６アルケニルが、１～３つのＣ３－Ｃ６シクロアルキルまたは－ＯＨで置換されていてもよい、請求項２１～３４のいずれか１項に記載の化合物。
  36. Ｒ３が、Ｃ１－Ｃ３アルキルである、請求項２１～３５のいずれか１項に記載の化合物。
  37. Ｒ３が、－ＣＨ３である、請求項２１～３６のいずれか１項に記載の化合物。
  38. 式（Ｉ－ｃ）の化合物：
    Figure 2024508047000320
     またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物である、請求項１～２０のいずれか１項に記載の化合物。
  39. ＸがＯである、請求項３８に記載の化合物。
  40. ＸがＮＲ１またはＮＲ２である、請求項３８に記載の化合物。
  41. ＲＮ１及びＲＮ２が、各々独立的に、水素、ヒドロキシ－Ｃ１－Ｃ３アルキル、Ｃ２－Ｃ４アルケニル、またはＣ３－Ｃ４シクロアルキルから選択される、請求項３８～４０のいずれか１項に記載の化合物。
  42. ＲＮ１及びＲＮ２が、各々独立的に、水素、－ＣＨ２ＣＨ＝ＣＨ２、－ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、
    Figure 2024508047000321
     から選択される、請求項３８～４１のいずれか１項に記載の化合物。
  43. ＲＮ１及びＲＮ２が同じである、請求項３８～４２のいずれか１項に記載の化合物。
  44. ＲＮ１及びＲＮ２が異なる、請求項３８～４２のいずれか１項に記載の化合物。
  45. ＲＮ１及びＲＮ２の一方が水素であり、他方が
    Figure 2024508047000322
     である、請求項３８～４２のいずれか１項に記載の化合物。
  46. Figure 2024508047000323
    Figure 2024508047000324
     からなる群から選択される化合物、またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物。
  47. Figure 2024508047000325
     またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物である、請求項４６に記載の化合物。
  48. Figure 2024508047000326
     またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物である、請求項４６に記載の化合物。
  49. Figure 2024508047000327
     またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物である、請求項４６に記載の化合物。
  50. Figure 2024508047000328
     からなる群から選択される化合物、またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物。
  51. 式（Ａ）の化合物：
    Figure 2024508047000329
     またはその薬学的に許容される塩［式中、
    ｎは、すべての端点を含む１０～２００の整数であり、
    ＬＰ１は、－［（ＣＨ２）０－３－Ｃ（Ｏ）Ｏ］１－３－、－（ＣＨ２）０－３－Ｃ（Ｏ）Ｏ－（ＣＨ２）１－３－ＯＣ（Ｏ）－、または－Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｈ）－であり、
    ＲＰ１は、Ｃ５－Ｃ２５アルキルまたはＣ５－Ｃ２５アルケニルであり、
    ＲＰ２は、水素または－ＣＨ３であり、
    ただし、式（Ａ）は、ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｈ）－（ＣＨ２）１７ＣＨ３ではないことを条件とする］。
  52. ＬＰ１が、－ＣＨ２Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－ＣＨ２ＣＨ２Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－ＣＨ２Ｃ（Ｏ）ＯＣＨ２Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－ＣＨ２Ｃ（Ｏ）ＯＣＨ２ＣＨ２ＯＣ（Ｏ）－、または－Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｈ）－である、請求項５１に記載の化合物。
  53. 式（Ａ－ａ）、式（Ａ－ｂ）、式（Ａ－ｃ）、式（Ａ－ｄ）、もしくは式（Ａ－ｅ）の化合物：
    Figure 2024508047000330
     またはその薬学的に許容される塩である、請求項５１または５２に記載の化合物。
  54. ＲＰ１が、Ｃ１４－Ｃ１８アルキルまたはＣ１４－Ｃ１８アルケニルである、請求項５１～５３のいずれか１項に記載の化合物。
  55. ＲＰ１が、Ｃ１４アルキル、Ｃ１６アルキル、またはＣ１８アルキルである、請求項５１～５４のいずれか１項に記載の化合物。
  56. ｎが、平均で約２０、約４０、約４５、約５０、約６８、約７５、または約１００である、請求項５１～５５のいずれか１項に記載の化合物。
  57. ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－ＣＨ２Ｃ（Ｏ）Ｏ－（ＣＨ２）１７ＣＨ３［ｎは、平均で約４５である］、
    Ｈ３ＣＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－ＣＨ２Ｃ（Ｏ）Ｏ－（ＣＨ２）１７ＣＨ３［ｎは、平均で約４５である］、
    ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－ＣＨ２Ｃ（Ｏ）Ｏ－（ＣＨ２）１５ＣＨ３［ｎは、平均で約４５である］、
    ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－ＣＨ２Ｃ（Ｏ）Ｏ－（ＣＨ２）１３ＣＨ３［ｎは、平均で約４５である］、及び
    ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｈ）－（ＣＨ２）１７ＣＨ３［ｎは、平均で約４５である］
    からなる群から選択される化合物、またはその薬学的に許容される塩である、請求項４６～５６のいずれか１項に記載の化合物。
  58. 請求項１～５０のいずれか１項に記載の化合物を含む、脂質ナノ粒子（ＬＮＰ）。
  59. ヘルパー脂質、構造脂質、及びポリエチレングリコール（ＰＥＧ）脂質をさらに含む、請求項５８に記載のＬＮＰ。
  60. 前記ＰＥＧ脂質が、式（Ａ’）の化合物：
    Figure 2024508047000331
     またはその薬学的に許容される塩であり、式中、
    ｎは、すべての端点を含む１０～２００の整数であり、
    ＬＰ１’は結合、－Ｃ（Ｏ）－、－［（ＣＨ２）０－３－Ｃ（Ｏ）Ｏ］１－３－、－（ＣＨ２）０－３－Ｃ（Ｏ）Ｏ－（ＣＨ２）１－３－ＯＣ（Ｏ）－、または－Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｈ）－であり、
    ＲＰ１’は、Ｃ５－Ｃ２５アルキルまたはＣ５－Ｃ２５アルケニルであり、
    ＲＰ２’は、水素または－ＣＨ３である、
    請求項５９に記載のＬＮＰ。
  61. 前記ＰＥＧ脂質が、請求項５１～５７のいずれか１項に記載の化合物である、請求項５９に記載のＬＮＰ。
  62. 前記ＰＥＧ脂質が、
    ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－ＣＨ２Ｃ（Ｏ）Ｏ－（ＣＨ２）１７ＣＨ３［ｎは、平均で約４５である］、
    Ｈ３ＣＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－ＣＨ２Ｃ（Ｏ）Ｏ－（ＣＨ２）１７ＣＨ３［ｎは、平均で約４５である］、
    ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－ＣＨ２Ｃ（Ｏ）Ｏ－（ＣＨ２）１５ＣＨ３［ｎは、平均で約４５である］、
    ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－ＣＨ２Ｃ（Ｏ）Ｏ－（ＣＨ２）１３ＣＨ３［ｎは、平均で約４５である］、及び
    ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｈ）－（ＣＨ２）１７ＣＨ３［ｎは、平均で約４５である］
    からなる群から選択される化合物、またはその薬学的に許容される塩である、請求項５９～６１のいずれか１項に記載のＬＮＰ。
  63. 前記ＰＥＧ脂質が、
    ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－（ＣＨ２）１７ＣＨ３［ｎは、平均で約１００である］、
    ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－（ＣＨ２）１７ＣＨ３［ｎは、平均で約２０である］、
    ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－（ＣＨ２）１５ＣＨ３［ｎは、平均で約２０である］、及び
    ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－Ｃ１８Ｈ３５［ｎは、平均で約２０である］
    からなる群から選択される化合物、またはその薬学的に許容される塩である、請求項５９または６０に記載のＬＮＰ。
  64. 前記ＰＥＧ脂質が、
    ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－Ｃ（Ｏ）－（ＣＨ２）１４ＣＨ３［ｎは、平均で約１００である］、
    ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－Ｃ（Ｏ）－（ＣＨ２）１４ＣＨ３［ｎは、平均で約５０である］、
    ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－Ｃ（Ｏ）－（ＣＨ２）１４ＣＨ３［ｎは、平均で約４０である］、
    ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－Ｃ（Ｏ）－（ＣＨ２）１６ＣＨ３［ｎは、平均で約１００である］、
    ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－Ｃ（Ｏ）－（ＣＨ２）１６ＣＨ３［ｎは、平均で約５０である］、及び
    ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－Ｃ（Ｏ）－（ＣＨ２）１６ＣＨ３［ｎは、平均で約４０である］
    からなる群から選択される化合物、またはその薬学的に許容される塩である、請求項５９または６０に記載のＬＮＰ。
  65. 前記ＰＥＧ脂質が、ＤＭＧ－ＰＥＧ（２０００）またはＤＰＧ－ＰＥＧ（２０００）である、請求項５９に記載のＬＮＰ。
  66. ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）脂質、イオン化可能な脂質、ヘルパー脂質、及び構造脂質を含む脂質ナノ粒子（ＬＮＰ）であって、前記ＬＮＰが、約０．００１％～約５％のＰＥＧ脂質のモル比を有し、前記ＰＥＧ脂質が、式（Ａ”）の化合物：
    Figure 2024508047000332
     またはその薬学的に許容される塩であり、式中、
    ｎは、すべての端点を含む１０～２００の整数であり、
    ＬＰ１”は結合、－［（ＣＨ２）０－３－Ｃ（Ｏ）Ｏ］１－３－、－（ＣＨ２）０－３－Ｃ（Ｏ）Ｏ－（ＣＨ２）１－３－ＯＣ（Ｏ）－、または－Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｈ）－であり、
    ＲＰ１”は、Ｃ５－Ｃ２５アルキルまたはＣ５－Ｃ２５アルケニルであり、
    ＲＰ２”は、水素または－ＣＨ３である、
    前記脂質ナノ粒子（ＬＮＰ）。
  67. ＬＰ１”が、結合、－ＣＨ２Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－ＣＨ２ＣＨ２Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－ＣＨ２Ｃ（Ｏ）ＯＣＨ２Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－ＣＨ２Ｃ（Ｏ）ＯＣＨ２ＣＨ２ＯＣ（Ｏ）－、または－Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｈ）－である、請求項６６に記載のＬＮＰ。
  68. 前記ＰＥＧ脂質が、式（Ａ”－ａ）、式（Ａ”－ｂ）、式（Ａ”－ｃ）、式（Ａ”－ｃｄ）、式（Ａ”－ｅ）、もしくは式（Ａ”－ｆ）の化合物：
    Figure 2024508047000333
     またはその薬学的に許容される塩である、請求項６６または６７に記載のＬＮＰ。
  69. ＲＰ１”が、Ｃ１４－Ｃ１８アルキルまたはＣ１４－Ｃ１８アルケニルである、請求項６６～６８のいずれか１項に記載のＬＮＰ。
  70. ＲＰ１”が、Ｃ１４アルキル、Ｃ１６アルキル、またはＣ１８アルキルである、請求項６６～６９のいずれか１項に記載のＬＮＰ。
  71. 前記ＰＥＧ脂質が、式（Ａ”－ｆ１）、式（Ａ”－ｆ２）、もしくは式（Ａ”－ｆ３）の化合物：
    Figure 2024508047000334
     またはその薬学的に許容される塩である、請求項６６～６８のいずれか１項に記載のＬＮＰ。
  72. ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）脂質、イオン化可能な脂質、ヘルパー脂質、構造脂質、及びウイルスゲノムをコードする核酸分子を含む脂質ナノ粒子（ＬＮＰ）であって、前記ＬＮＰが、約０．００１％～約５％のＰＥＧ脂質のモル比を有し、前記ＰＥＧ脂質が、式（Ｂ）の化合物：
    Figure 2024508047000335
     またはその薬学的に許容される塩であり、式中、
    ｎは、すべての端点を含む１０～２００の整数であり、
    ＲＢ１は、Ｃ５－Ｃ２５アルキルまたはＣ５－Ｃ２５アルケニルである、
    前記脂質ナノ粒子（ＬＮＰ）。
  73. ＲＢ１が、Ｃ１５－Ｃ１７アルキルまたはＣ１５－Ｃ１７アルケニルである、請求項７２に記載のＬＮＰ。
  74. 前記ＰＥＧ脂質が、式（Ｂ－ａ）もしくは式（Ｂ－ｂ）の化合物：
    Figure 2024508047000336
     またはその薬学的に許容される塩である、請求項７２または７３に記載のＬＮＰ。
  75. ｎが、平均で約２０、約４０、約４５、約５０、約６８、約７５、または約１００である、請求項６６～７４のいずれか１項に記載のＬＮＰ。
  76. 前記ＰＥＧ脂質が、約２００ダルトン～約１０，０００ダルトン、約５００ダルトン～約７，０００ダルトン、約８００ダルトン～約６，０００ダルトン、約１，０００ダルトン～約５，０００ダルトン、または約１，５００～約３，５００ダルトンの平均分子量を有するＰＥＧ部分を含む、請求項６６～７５のいずれか１項に記載のＬＮＰ。
  77. 前記ＰＥＧ脂質が、約８００、約９００、約１，０００、約１，５００、約１，７５０、約２，０００、約２，２５０、約２，５００、約２，７５０、約３，０００、約３，２５０、約３，５００、約３，７５０、約４，０００、約４，５００、または約５，０００ダルトンの平均分子量を有するＰＥＧ部分を含む、請求項６６～７６のいずれか１項に記載のＬＮＰ。
  78. 前記ＰＥＧ脂質が、約８００、約９００、約１，０００ダルトン、約１，５００、約２，０００、約２，５００、約３，０００、約３，５００、約４，０００、約４，５００、または約５，０００ダルトンの平均分子量を有するＰＥＧ部分を含む、請求項６６～７７のいずれか１項に記載のＬＮＰ。
  79. 前記ＰＥＧ脂質が、
    ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－（ＣＨ２）１７ＣＨ３［ｎは、平均で約１００である］、
    ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－（ＣＨ２）１７ＣＨ３［ｎは、平均で約２０である］、
    ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－（ＣＨ２）１５ＣＨ３［ｎは、平均で約２０である］、及び
    ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－Ｃ１８Ｈ３５［ｎは、平均で約２０である］
    からなる群から選択される、請求項６６～７１及び７５～７８のいずれか１項に記載のＬＮＰ。
  80. 前記ＰＥＧ脂質が、
    ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－ＣＨ２Ｃ（Ｏ）Ｏ－（ＣＨ２）１７ＣＨ３［ｎは、平均で約４５である］、
    Ｈ３ＣＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－ＣＨ２Ｃ（Ｏ）Ｏ－（ＣＨ２）１７ＣＨ３［ｎは、平均で約４５である］、
    ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－ＣＨ２Ｃ（Ｏ）Ｏ－（ＣＨ２）１５ＣＨ３［ｎは、平均で約４５である］、
    ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－ＣＨ２Ｃ（Ｏ）Ｏ－（ＣＨ２）１３ＣＨ３［ｎは、平均で約４５である］、及び
    ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｈ）－（ＣＨ２）１７ＣＨ３［ｎは、平均で約４５である］
    からなる群から選択される化合物である、請求項６６～７１及び７５～７８のいずれか１項に記載のＬＮＰ。
  81. 前記ＰＥＧ脂質が、
    ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－Ｃ（Ｏ）－（ＣＨ２）１４ＣＨ３［ｎは、平均で約１００である］、
    ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－Ｃ（Ｏ）－（ＣＨ２）１４ＣＨ３［ｎは、平均で約５０である］、
    ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－Ｃ（Ｏ）－（ＣＨ２）１４ＣＨ３［ｎは、平均で約４０である］、
    ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－Ｃ（Ｏ）－（ＣＨ２）１６ＣＨ３［ｎは、平均で約１００である］、
    ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－Ｃ（Ｏ）－（ＣＨ２）１６ＣＨ３［ｎは、平均で約５０である］、及び
    ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－Ｃ（Ｏ）－（ＣＨ２）１６ＣＨ３［ｎは、平均で約４０である］
    からなる群から選択される、請求項７２～７８のいずれか１項に記載のＬＮＰ。
  82. 前記イオン化可能な脂質が、ＤＬｉｎＤＭＡ、ＤＬｉｎ－ＫＣ２－ＤＭＡ、ＤＬｉｎ－ＭＣ３－ＤＭＡ（ＭＣ３）、ＣＯＡＴＳＯＭＥ（登録商標）ＳＳ－ＬＣ（旧名：ＳＳ－１８／４ＰＥ－１３）、ＣＯＡＴＳＯＭＥ（登録商標）ＳＳ－ＥＣ（旧名：ＳＳ－３３／４ＰＥ－１５）、ＣＯＡＴＳＯＭＥ（登録商標）ＳＳ－ＯＣ、ＣＯＡＴＳＯＭＥ（登録商標）ＳＳ－ＯＰ、ジ（（Ｚ）－ノナ－２－エン－１－イル）９－（（４－ジメチルアミノ）ブタノイル）オキシ）ヘプタデカンジオエート（Ｌ－３１９）、Ｎ－（２，３－ジオレオイルオキシ）プロピル）－Ｎ，Ｎ，Ｎ－トリメチルアンモニウムクロリド（ＤＯＴＡＰ）、またはそれらの混合物から選択される、請求項６６～８１のいずれか１項に記載のＬＮＰ。
  83. 前記イオン化可能な脂質が、式（ＩＩ－１）の化合物：
    Figure 2024508047000337
     またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物であり、式中、
    Ｒ１ａ及びＲ１ｂは、各々独立的に、Ｃ１－Ｃ８脂肪族または－Ｏ（Ｃ１－Ｃ８脂肪族）－であり、ここで、Ｏ原子は、存在する場合、ピペリジン環に結合しており、
    Ｘａ及びＸｂは、各々独立的に、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－＊、－ＯＣ（Ｏ）－＊、－Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒｘ １）－＊、－Ｎ（Ｒｘ １）Ｃ（Ｏ）－＊、－Ｏ（Ｃ＝Ｏ）Ｎ（Ｒｘ １）－＊、－Ｎ（Ｒｘ １）（Ｃ＝Ｏ）Ｏ－＊、または－Ｏ－であり、ここで、－＊は、それぞれＲ２ａまたはＲ２ｂへの結合点を示し、Ｒｘ １の各存在は、水素及び置換されていてもよいＣ１－Ｃ４アルキルから独立的に選択され、
    Ｒ２ａ及びＲ２ｂは、各々独立的に、ステロール残基、脂溶性ビタミン残基、またはＣ１３－Ｃ２３脂肪族である、請求項６６～８１のいずれか１項に記載のＬＮＰ。
  84. 前記イオン化可能な脂質が、式（ＩＩ－２）の化合物：
    Figure 2024508047000338
     またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物であり、式中、
    Ｒ１ａ’及びＲ１ｂ’は、各々独立的に、Ｃ１－Ｃ８アルキレンまたは－Ｏ（Ｃ１－Ｃ８アルキレン）であり、ここで、Ｏ原子は、存在する場合、ピペリジン環に結合しており、
    Ｙａ’及びＹｂ’は、各々独立的に、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－＊、－ＯＣ（Ｏ）－＊、－Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒｘ １）－＊、－Ｎ（Ｒｘ １）Ｃ（Ｏ）－＊、－Ｏ（Ｃ＝Ｏ）Ｎ（Ｒｘ １）－＊、－Ｎ（Ｒｘ １）（Ｃ＝Ｏ）Ｏ－＊、－Ｎ（Ｒｘ １）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒｘ １）－、または－Ｏ－であり、ここで、－＊は、Ｒ２ａまたはＲ２ｂへの結合点を示し、Ｒｘ １の各存在は、水素及び置換されていてもよいＣ１－Ｃ４アルキルから独立的に選択され、
    Ｚａ’及びＺｂ’は、各々独立的に、置換されていてもよいアリーレン－Ｃ０－Ｃ８アルキレンまたは置換されていてもよいアリーレン－Ｃ０－Ｃ８ヘテロアルキレンであり、ここで、前記アルキレンまたはヘテロアルキレン基は、それぞれＹａ’及びＹｂ’に結合しており、
    Ｒ２ａ’及びＲ２ｂ’は、各々独立的に、ステロール残基、脂溶性ビタミン残基、またはＣ１２－Ｃ２２脂肪族である、請求項６６～８１のいずれか１項に記載のＬＮＰ。
  85. 前記イオン化可能な脂質が、式（ＩＩ－１ａ）の化合物：
    Figure 2024508047000339
     である、請求項８３に記載のＬＮＰ。
  86. 前記イオン化可能な脂質が、式（ＩＩ－２ａ）の化合物：
    Figure 2024508047000340
     である、請求項８４に記載のＬＮＰ。
  87. 前記イオン化可能な脂質が、請求項１～５０のいずれか１項に記載の化合物である、請求項６６～８１のいずれか１項に記載のＬＮＰ。
  88. 前記ヘルパー脂質が、ジステアロイル－ｓｎ－グリセロ－ホスホエタノールアミン、ジステアロイルホスファチジルコリン（ＤＳＰＣ）、ジオレオイルホスファチジルコリン（ＤＯＰＣ）、ジパルミトイルホスファチジルコリン（ＤＰＰＣ）、ジオレオイルホスファチジルグリセロール（ＤＯＰＧ）、ジパルミトイルホスファチジルグリセロール（ＤＰＰＧ）、ジオレオイル－ホスファチジルエタノールアミン（ＤＯＰＥ）、パルミトイルオレオイルホスファチジルコリン（ＰＯＰＣ）、パルミトイルオレオイルホスファチジルエタノールアミン（ＰＯＰＥ）、ジオレオイルホスファチジルエタノールアミン４－（Ｎ－マレイミドメチル）－シクロヘキサン－ｌ－カルボキシレート（ＤＯＰＥ－ｍａｌ）、ジパルミトイルホスファチジルエタノールアミン（ＤＰＰＥ）、ジミリストイルホスホエタノールアミン（ＤＭＰＥ）、ジステアロイル－ホスファチジル－エタノールアミン（ＤＳＰＥ）、モノメチル－ホスファチジルエタノールアミン、ジメチルホスファチジルエタノールアミン、１８－１－ｔｒａｎｓ ＰＥ、ｌ－ステアロイル－２－オレオイルホスファチジエタノールアミン（ＳＯＰＥ）、水素添加大豆ホスファチジルコリン（ＨＳＰＣ）、卵ホスファチジルコリン（ＥＰＣ）、ジオレオイルホスファチジルセリン（ＤＯＰＳ）、スフィンゴミエリン（ＳＭ）、ジミリストイルホスファチジルコリン（ＤＭＰＣ）、ジミリストイルホスファチジルグリセロール（ＤＭＰＧ）、ジステアロイルホスファチジルグリセロール（ＤＳＰＧ）、ジエルコイルホスファチジルコリン（ＤＥＰＣ）、パルミトイルオレイオルホスファチジルグリセロール（ＰＯＰＧ）、ジエライドイル－ホスファチジルエタノールアミン（ＤＥＰＥ）、レシチン、ホスファチジルエタノールアミン、リゾレシチン、リゾホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルセリン、ホスファチジルイノシトール、スフィンゴミエリン、卵スフィンゴミエリン（ＥＳＭ）、セファリン、カルジオリピン、ホスファチジン酸、セレブロシド、ジセチルホスフェート、リゾホスファチジルコリン、ジリノレオイルホスファチジルコリン、またはそれらの混合物から選択される、請求項５９～８７のいずれか１項に記載のＬＮＰ。
  89. 前記ヘルパー脂質がＤＳＰＣである、請求項５９～８８のいずれか１項に記載のＬＮＰ。
  90. 前記構造脂質がステロイドである、請求項５９～８９のいずれか１項に記載のＬＮＰ。
  91. 前記構造脂質がコレステロールである、請求項５９～９０のいずれか１項に記載のＬＮＰ。
  92. 式（Ａ”）のＰＥＧ脂質または請求項１～５０のいずれか１項に記載のイオン化可能な脂質を欠いている対照ＬＮＰと比較して低減した免疫応答をｉｎ ｖｉｖｏで誘導する、請求項５８～９１のいずれか１項に記載のＬＮＰ。
  93. 前記免疫応答が、前記ＬＮＰの加速血液クリアランス（ＡＢＣ）である、請求項９２に記載のＬＮＰ。
  94. 前記免疫応答が、ＩｇＭ応答である、請求項９２または９３に記載のＬＮＰ。
  95. 式（Ｉ）の化合物と、コレステロールである構造脂質と、ＤＳＰＣであるヘルパー脂質と、式（Ａ”）の化合物であるＰＥＧ脂質とをさらに含む、請求項６６～７１及び７５～９４のいずれか１項に記載のＬＮＰ。
  96. 前記式（Ｉ）の化合物が、
    Figure 2024508047000341
     からなる群から選択されるか、またはその薬学的に許容される塩である、請求項９５に記載のＬＮＰ。
  97. 前記ＰＥＧ脂質が、
    ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－（ＣＨ２）１７ＣＨ３［ｎは、平均で約１００である］、
    ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－ＣＨ２Ｃ（Ｏ）Ｏ－（ＣＨ２）１３ＣＨ３［ｎは、平均で約４５である］、及び
    ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－ＣＨ２Ｃ（Ｏ）Ｏ－（ＣＨ２）１７ＣＨ３［ｎは、平均で約４５である］
    からなる群から選択される化合物である、請求項９５または９６に記載のＬＮＰ。
  98. 式（ＩＩ－１ａ）の化合物と、コレステロールである構造脂質と、ＤＳＰＣであるヘルパー脂質と、式（Ａ”）の化合物であるＰＥＧ脂質とを含む、請求項６６～７１及び７５～９４のいずれか１項に記載のＬＮＰ。
  99. 前記ＰＥＧ脂質が、
    ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－ＣＨ２Ｃ（Ｏ）Ｏ－（ＣＨ２）１７ＣＨ３［ｎは、平均で約４５である］、
    Ｈ３ＣＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－ＣＨ２Ｃ（Ｏ）Ｏ－（ＣＨ２）１７ＣＨ３［ｎは、平均で約４５である］、
    ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－ＣＨ２Ｃ（Ｏ）Ｏ－（ＣＨ２）１５ＣＨ３［ｎは、平均で約４５である］、
    ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－ＣＨ２Ｃ（Ｏ）Ｏ－（ＣＨ２）１３ＣＨ３［ｎは、平均で約４５である］、及び
    ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｈ）－（ＣＨ２）１７ＣＨ３［ｎは、平均で約４５である］
    からなる群から選択される、請求項９９に記載のＬＮＰ。
  100. 前記ＰＥＧ脂質が、ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－（ＣＨ２）１７ＣＨ３［ｎは、平均で約１００である］である、請求項９９に記載のＬＮＰ。
  101. 式（ＩＩ－１ａ）の化合物と、コレステロールである構造脂質と、ＤＳＰＣであるヘルパー脂質と、式（Ｂ）の化合物であるＰＥＧ脂質とを含む、請求項７２～９４のいずれか１項に記載のＬＮＰ。
  102. 前記ＰＥＧ脂質が、
    ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－Ｃ（Ｏ）－（ＣＨ２）１６ＣＨ３［ｎは、平均で約１００である］、
    ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－Ｃ（Ｏ）－（ＣＨ２）１６ＣＨ３［ｎは、平均で約５０である］、及び
    ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－Ｃ（Ｏ）－（ＣＨ２）１６ＣＨ３［ｎは、平均で約４０である］
    からなる群から選択される、請求項１０１に記載のＬＮＰ。
  103. 約４０％～約７０％、例えば約４５％～約５５％、または約４９％～約６４％のモル比の請求項１～５０のいずれか１項に記載の化合物を含む、請求項５８～８１及び８８～９７のいずれか１項に記載のＬＮＰ。
  104. 約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約５８％、または約６０％のモル比の請求項１～５０のいずれか１項に記載の化合物を含む、請求項５８～８１、８８～９７、及び１０３のいずれか１項に記載のＬＮＰ。
  105. 約４０％～約７０％、例えば約４５％～約５５％、または約４９％～約６４％のモル比のイオン化可能な脂質を含む、請求項５８～１０４のいずれか１項に記載のＬＮＰ。
  106. 約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約５８％、または約６０％のモル比のイオン化可能な脂質を含む、請求項５８～１０５のいずれか１項に記載のＬＮＰ。
  107. 約０．１％～約４％、例えば約０．２％～約０．８ｍｏｌ％、約０．４％～約０．６ｍｏｌ％、約０．７％～約１．３％、約１．２％～約１．８％、または約１％～約３．５ｍｏｌ％のモル比のＰＥＧ脂質を含む、請求項５８～１０６のいずれか１項に記載のＬＮＰ。
  108. 約０．２５％、約０．５％、約１．５％、または約３％のモル比のＰＥＧ脂質を含む、請求項５８～１０７のいずれか１項に記載のＬＮＰ。
  109. 約５％～約５０％、例えば約５％～約１０％、約２５％～約３５％、または約３５％～約５０％のモル比の構造脂質を含む、請求項５８～１０８のいずれか１項に記載のＬＮＰ。
  110. 約２０％、約２２．５％、約２５％、約２７．５％、約３０％、約３２．５％、約３５％、約３７．５％、約４０％、約４２．５％、約４５％、または約５０％のモル比の構造脂質を含む、請求項５８～１０９のいずれか１項に記載のＬＮＰ。
  111. 約５％～約５０％、例えば約５％～約１０％、約１０％～約２５％、または約２５％～約５０％のモル比のヘルパー脂質を含む、請求項５８～１１０のいずれか１項に記載のＬＮＰ。
  112. 約５％、約７％、約９％、約１２％、約１５％、約２０％、約２５％、または約３０％のモル比のヘルパー脂質を含む、請求項５８～１１１のいずれか１項に記載のＬＮＰ。
  113. 約４５％～約５５％のモル比のイオン化可能な脂質と、約５％～約９％のモル比のヘルパー脂質と、約３６％～約４４％のモル比の構造脂質と、約２．５％～約３．５％のモル比のＰＥＧ脂質とを含む、請求項５８～１１２のいずれか１項に記載のＬＮＰ。
  114. 約４５％～約５５％のモル比の請求項１～５０のいずれか１項に記載の化合物と、約５％～約９％のモル比のＤＳＰＣと、約３６％～約４４％のモル比のコレステロールと、約２．５％～約３．５％のモル比のＤＭＧ－ＰＥＧ（２０００）とを含む、請求項１１３に記載のＬＮＰ。
  115. 約４９％～約６０％のモル比のイオン化可能な脂質と、約１８％～約２２％のモル比のヘルパー脂質と、約２２％～約２８％のモル比の構造脂質と、約０．２％～約０．８％のモル比のＰＥＧ脂質とを含む、請求項５８～１１２のいずれか１項に記載のＬＮＰ。
  116. 約４９％～約６０％のモル比の請求項１～５０のいずれか１項に記載の化合物と、約１８％～約２２％のモル比のヘルパー脂質と、約２２％～約２８％のモル比の構造脂質と、約０．２％～約０．８％のモル比のＰＥＧ脂質とを含み、前記ＰＥＧ脂質が、
    ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－ＣＨ２Ｃ（Ｏ）Ｏ－（ＣＨ２）１７ＣＨ３［ｎは、平均で約４５である］、
    Ｈ３ＣＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－ＣＨ２Ｃ（Ｏ）Ｏ－（ＣＨ２）１７ＣＨ３［ｎは、平均で約４５である］、
    ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－ＣＨ２Ｃ（Ｏ）Ｏ－（ＣＨ２）１５ＣＨ３［ｎは、平均で約４５である］、
    ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－ＣＨ２Ｃ（Ｏ）Ｏ－（ＣＨ２）１３ＣＨ３［ｎは、平均で約４５である］、及び
    ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｈ）－（ＣＨ２）１７ＣＨ３［ｎは、平均で約４５である］
    からなる群から選択される、請求項１１５に記載のＬＮＰ。
  117. 約４４％～約５４％のモル比のイオン化可能な脂質と、約１９％～約２５％のモル比のヘルパー脂質と、約２５％～約３３％のモル比の構造脂質と、約０．２％～約０．８％のモル比のＰＥＧ脂質とを含む、請求項５８～１１２のいずれか１項に記載のＬＮＰ。
  118. 約４４％～約５４％のモル比の式（ＩＩ－１ａ）の化合物と、約１９％～約２５％のモル比のＤＳＰＣと、約２５％～約３３％のモル比のコレステロールと、約０．２％～約０．８％のモル比のＰＥＧ脂質とを含み、前記ＰＥＧ脂質が、
    ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－（ＣＨ２）１７ＣＨ３［ｎは、平均で約１００である］、
    ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－（ＣＨ２）１７ＣＨ３［ｎは、平均で約２０である］、
    ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－（ＣＨ２）１５ＣＨ３［ｎは、平均で約２０である］、
    ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－Ｃ１８Ｈ３５［ｎは、平均で約２０である］、
    ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－Ｃ（Ｏ）－（ＣＨ２）１４ＣＨ３［ｎは、平均で約１００である］、
    ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－Ｃ（Ｏ）－（ＣＨ２）１４ＣＨ３［ｎは、平均で約５０である］、
    ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－Ｃ（Ｏ）－（ＣＨ２）１４ＣＨ３［ｎは、平均で約４０である］、
    ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－Ｃ（Ｏ）－（ＣＨ２）１６ＣＨ３［ｎは、平均で約１００である］、
    ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－Ｃ（Ｏ）－（ＣＨ２）１６ＣＨ３［ｎは、平均で約５０である］、及び
    ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－Ｃ（Ｏ）－（ＣＨ２）１６ＣＨ３［ｎは、平均で約４０である］
    からなる群から選択される、請求項１１７に記載のＬＮＰ。
  119. 約４４％～約５４％のモル比のイオン化可能な脂質と、約１９％～約２５％のモル比のヘルパー脂質と、約２４％～約３２％のモル比の構造脂質と、約１．２％～約１．８％のモル比のＰＥＧ脂質とを含む、請求項５８～１１２のいずれか１項に記載のＬＮＰ。
  120. 約４４％～約５４％のモル比の式（ＩＩ－１ａ）の化合物と、約１９％～約２５％のモル比のＤＳＰＣと、約２４％～約３２％のモル比のコレステロールと、約１．２％～約１．８％のモル比のＰＥＧ脂質とを含み、前記ＰＥＧ脂質が、
    ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－（ＣＨ２）１７ＣＨ３［ｎは、平均で約１００である］、
    ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－（ＣＨ２）１７ＣＨ３［ｎは、平均で約２０である］、
    ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－（ＣＨ２）１５ＣＨ３［ｎは、平均で約２０である］、
    ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－Ｃ１８Ｈ３５［ｎは、平均で約２０である］、
    ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－Ｃ（Ｏ）－（ＣＨ２）１４ＣＨ３［ｎは、平均で約１００である］、
    ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－Ｃ（Ｏ）－（ＣＨ２）１４ＣＨ３［ｎは、平均で約５０である］、
    ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－Ｃ（Ｏ）－（ＣＨ２）１４ＣＨ３［ｎは、平均で約４０である］、
    ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－Ｃ（Ｏ）－（ＣＨ２）１６ＣＨ３［ｎは、平均で約１００である］、
    ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－Ｃ（Ｏ）－（ＣＨ２）１６ＣＨ３［ｎは、平均で約５０である］、及び
    ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－Ｃ（Ｏ）－（ＣＨ２）１６ＣＨ３［ｎは、平均で約４０である］
    からなる群から選択される、請求項１１９に記載のＬＮＰ。
  121. 約４４％～約５４％のモル比のイオン化可能な脂質と、約８％～約１４％のモル比のヘルパー脂質と、約３５％～約４３％のモル比の構造脂質と、約１．２％～約１．８％のモル比のＰＥＧ脂質とを含む、請求項５８～１１２のいずれか１項に記載のＬＮＰ。
  122. 約４４％～約５４％のモル比の式（ＩＩ－１ａ）の化合物と、約８％～約１４％のモル比のＤＳＰＣと、約３５％～約４３％のモル比のコレステロールと、約１．２％～約１．８％のモル比のＰＥＧ脂質とを含み、前記ＰＥＧ脂質が、
    ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－（ＣＨ２）１７ＣＨ３［ｎは、平均で約１００である］、
    ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－（ＣＨ２）１７ＣＨ３［ｎは、平均で約２０である］、
    ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－（ＣＨ２）１５ＣＨ３［ｎは、平均で約２０である］、
    ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－Ｃ１８Ｈ３５［ｎは、平均で約２０である］、
    ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－Ｃ（Ｏ）－（ＣＨ２）１４ＣＨ３［ｎは、平均で約１００である］、
    ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－Ｃ（Ｏ）－（ＣＨ２）１４ＣＨ３［ｎは、平均で約５０である］、
    ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－Ｃ（Ｏ）－（ＣＨ２）１４ＣＨ３［ｎは、平均で約４０である］、
    ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－Ｃ（Ｏ）－（ＣＨ２）１６ＣＨ３［ｎは、平均で約１００である］、
    ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－Ｃ（Ｏ）－（ＣＨ２）１６ＣＨ３［ｎは、平均で約５０である］、及び
    ＨＯ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－Ｃ（Ｏ）－（ＣＨ２）１６ＣＨ３［ｎは、平均で約４０である］
    からなる群から選択される、請求項１２１に記載のＬＮＰ。
  123. ペイロード分子をカプセル化する、請求項５８～７１及び７５～１２２のいずれか１項に記載のＬＮＰ。
  124. 前記ペイロード分子が、核酸、アニオン性タンパク質、アニオン性ペプチド、またはそれらの組み合わせのうちの１つ以上を含む、請求項１２３に記載のＬＮＰ。
  125. 前記ペイロード分子が核酸分子を含む、請求項１２４に記載のＬＮＰ。
  126. 前記核酸分子が、一本鎖ＲＮＡ（ｓｓＲＮＡ）、ｓｉＲＮＡ、マイクロＲＮＡ、ｍＲＮＡ、環状ＲＮＡ、低分子活性化ＲＮＡ、ＣＲＩＳＰＲ用ガイドＲＮＡ、自己増幅ＲＮＡ、ウイルスＲＮＡ（ｖＲＮＡ）、一本鎖ＤＮＡ（ｓｓＤＮＡ）、二本鎖ＤＮＡ（ｄｓＤＮＡ）、相補的ＤＮＡ（ｃＤＮＡ）、閉鎖環状ＤＮＡ（ｃｃＤＮＡ）、レプリコン、またはそれらの組み合わせを含む、請求項１２５に記載のＬＮＰ。
  127. 前記核酸分子が、１つ以上の治療用タンパク質をコードするヌクレオチド配列を含む、請求項１２５または１２６に記載のＬＮＰ。
  128. 前記治療用タンパク質が、サイトカイン（例えば、エリスロポエチン）、凝固因子、抗体、二重特異的Ｔ細胞エンゲージャー、またはそれらの組み合わせである、請求項１２７に記載のＬＮＰ。
  129. 前記核酸分子が、ウイルスゲノムに由来するヌクレオチド配列を含む、請求項１２５～１２８のいずれか１項に記載のＬＮＰ。
  130. 前記ウイルスゲノムが、プラス一本鎖ＲＮＡウイルスゲノムプラス一本鎖ＲＮＡウイルスゲノムである、請求項１２９に記載のＬＮＰ。
  131. 前記ウイルスゲノムが、腫瘍溶解性ウイルス（例えば、コクサッキーウイルスＡ２１（ＣＶＡ２１）、セネカバレーウイルス（ＳＶＶ）、トガウイルス科、またはアルファウイルス（例えば、シンドビスウイルス、セムリキ森林ウイルス、ロスリバーウイルス、またはチクングニアウイルス））をコードする、請求項１２９に記載のＬＮＰ。
  132. 前記ペイロード分子が、コクサッキーウイルスをコードする合成ＲＮＡウイルスゲノムを含み、任意で、前記コクサッキーウイルスがＣＶＡ２１株である、請求項１２４に記載のＬＮＰ。
  133. 前記ペイロード分子が、ＳＶＶをコードする合成ＲＮＡウイルスゲノムを含む、請求項１２４に記載のＬＮＰ。
  134. 前記ペイロード分子が、外因性タンパク質をさらにコードし、前記外因性タンパク質が、蛍光タンパク質、酵素タンパク質、サイトカイン、ケモカイン、細胞表面受容体に結合することができる抗原結合分子、または細胞表面受容体のリガンドである、請求項１３２または１３３に記載のＬＮＰ。
  135. 前記ウイルスゲノムが、プラス一本鎖ＲＮＡウイルスゲノムである、請求項７２～１２２のいずれか１項に記載のＬＮＰ。
  136. 前記ウイルスゲノムが、腫瘍溶解性ウイルス（例えば、コクサッキーウイルスＡ２１（ＣＶＡ２１）またはセネカバレーウイルス（ＳＶＶ）、トガウイルス科、またはアルファウイルス（例えば、シンドビスウイルス、セムリキ森林ウイルス、ロスリバーウイルス、またはチクングニアウイルス））をコードする、請求項１３５に記載のＬＮＰ。
  137. 前記ウイルスゲノムが、コクサッキーウイルスをコードする合成ＲＮＡウイルスゲノムであり、任意で、前記コクサッキーウイルスがＣＶＡ２１株である、請求項１３５に記載のＬＮＰ。
  138. 前記ウイルスゲノムが、ＳＶＶをコードする合成ＲＮＡウイルスゲノムである、請求項１３５に記載のＬＮＰ。
  139. 前記ウイルスゲノムが、外因性タンパク質をさらに含み、前記外因性タンパク質が、蛍光タンパク質、酵素タンパク質、サイトカイン、ケモカイン、細胞表面受容体に結合することができる抗原結合分子、または細胞表面受容体のリガンドである、請求項７２～１２２及び１３５～１３８のいずれか１項に記載のＬＮＰ。
  140. 約１～約２５の脂質窒素対リン酸（Ｎ：Ｐ）比を有する、請求項７２～１２２及び１２５～１３９のいずれか１項に記載のＬＮＰ。
  141. 約１４のＮ：Ｐ比を有する、請求項７２～１２２及び１２５～１４０のいずれか１項に記載のＬＮＰ。
  142. 約９のＮ：Ｐ比を有する、請求項７２～１２２及び１２５～１４０のいずれか１項に記載のＬＮＰ。
  143. 請求項１～５７のいずれか１項に記載の化合物または請求項５８～１４２のいずれか１項に記載のＬＮＰ、及び薬学的に許容される賦形剤、担体、または希釈剤を含む、医薬組成物。
  144. （１）ペイロード分子、ならびに（２）請求項６６～７１及び７５～１４２のいずれか１項に記載のＬＮＰを含む、医薬組成物。
  145. 所定の閾値のものに匹敵するｉｎ ｖｉｖｏの半減期を有する、請求項１４３または１４４に記載の医薬組成物。
  146. 所定の閾値のものよりも長いｉｎ ｖｉｖｏの半減期を有する、請求項１４３または１４４に記載の医薬組成物。
  147. 所定の閾値のものよりも短いｉｎ ｖｉｖｏの半減期を有する、請求項１４３または１４４に記載の医薬組成物。
  148. 所定の閾値のものに匹敵するｉｎ ｖｉｖｏのＡＵＣを有する、請求項１４３または１４４に記載の医薬組成物。
  149. 所定の閾値のものよりも大きいｉｎ ｖｉｖｏのＡＵＣを有する、請求項１４３または１４４に記載の医薬組成物。
  150. 所定の閾値のものよりも小さいｉｎ ｖｉｖｏのＡＵＣを有する、請求項１４３または１４４に記載の医薬組成物。
  151. 前記所定の閾値が、ＬＮＰが式（Ａ’）のＰＥＧ脂質または請求項１～５０のいずれか１項に記載のイオン化可能な脂質を欠いていることを除いては同じペイロード分子及びＬＮＰを含む対照組成物において決定される、請求項１４５～１５０のいずれか１項に記載の医薬組成物。
  152. 前記ＬＮＰが、約５０ｎｍ、約６０ｎｍ、約７０ｎｍ、約８０ｎｍ、約９０ｎｍ、約１００ｎｍ、約１１０ｎｍ、約１２０ｎｍ、または約１２５ｎｍの平均直径を有する、請求項１４３～１５１のいずれか１項に記載の医薬組成物。
  153. 前記ＬＮＰによる前記ペイロード分子のカプセル化効率が、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９１％、約９２％、約９３％、約９４％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％、約９９％、または１００％である、請求項１４３～１５２のいずれか１項に記載の医薬組成物。
  154. 約１０ｍＭ、約２０ｍＭ、約３０ｍＭ、約４０ｍＭ、または約５０ｍＭの総脂質濃度を有する、請求項１４３～１５３のいずれか１項に記載の医薬組成物。
  155. 約２．５、約３、約３．５、約４、約４．５、約５、約５．５、または約６のｐＨで製剤化されている、請求項１４３～１５４のいずれか１項に記載の医薬組成物。
  156. 複数投与用に製剤化されている、請求項１４３～１５５のいずれか１項に記載の医薬組成物。
  157. 後続投与が、１回目の投与の少なくとも３日後、少なくとも５日後、少なくとも７日後、少なくとも９日後、少なくとも１１日後、少なくとも１４日後、または少なくとも２１日後に投与される、請求項１５６に記載の医薬組成物。
  158. 前記ペイロード分子が核酸分子を含む、請求項１４４～１５７のいずれか１項に記載の医薬組成物。
  159. 前記ペイロード分子が、コクサッキーウイルスまたはＳＶＶをコードする合成ＲＮＡウイルスゲノムを含む、請求項１４４～１５８のいずれか１項に記載の医薬組成物。
  160. 前記ＬＮＰに含まれる前記ウイルスゲノムが、コクサッキーウイルスまたはＳＶＶをコードする合成ＲＮＡウイルスゲノムである、請求項１４４～１５７のいずれか１項に記載の医薬組成物。
  161. 薬学的に許容される担体をさらに含む、請求項１４４～１６０のいずれか１項に記載の医薬組成物。
  162. 疾患または障害を処置する方法であって、それを必要とする患者に、請求項５８～１４２のいずれか１項に記載の脂質ナノ粒子または請求項１４３～１６１のいずれか１項に記載の医薬組成物を投与することを含む、前記方法。
  163. 前記疾患または障害が、がんである、請求項１６２に記載の方法。
  164. 前記がんが、肺癌、乳癌、卵巣癌、子宮頸癌、前立腺癌、精巣癌、大腸癌、結腸癌、膵臓癌、肝臓癌、腎細胞癌、胃癌、頭頸部癌、甲状腺癌、悪性神経膠腫、膠芽腫、メラノーマ、Ｂ細胞慢性リンパ球性白血病、多発性骨髄腫、意義不明の単クローン性高ガンマグロブリン血症（ＭＧＵＳ）、メルケル細胞癌、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、肉腫、神経芽細胞腫、神経内分泌癌、横紋筋肉腫、髄芽腫、膀胱癌、及び辺縁帯リンパ腫（ＭＺＬ）からなる群から選択される、請求項１６３に記載の方法。
  165. 前記がんが、肺癌、乳癌、結腸癌、膵臓癌、膀胱癌、腎細胞癌、卵巣癌、胃癌、及び肝臓癌からなる群から選択される、請求項１６３に記載の方法。
  166. 前記がんが、腎細胞癌、肺癌、または肝臓癌である、請求項１６３に記載の方法。
  167. 前記肺癌が、小細胞肺癌または非小細胞肺癌（例えば、肺扁平上皮癌または肺腺癌）である、請求項１６４～１６６のいずれか１項に記載の方法。
  168. 前記肝臓癌が、肝細胞癌（ＨＣＣ）（例えば、Ｂ型肝炎ウイルス関連ＨＣＣ）である、請求項１６４～１６６のいずれか１項に記載の方法。
  169. 前記前立腺癌が、処置下で発現した神経内分泌前立腺癌である、請求項１６４に記載の方法。
  170. 前記がんが、肺癌、肝臓癌、前立腺癌（例えば、ＣＲＰＣ－ＮＥ）、膀胱癌、膵臓癌、結腸癌、胃癌、乳癌、神経芽細胞腫、腎細胞癌、卵巣癌、横紋筋肉腫、髄芽腫、神経内分泌癌、メルケル細胞癌、またはメラノーマである、請求項１６３に記載の方法。
  171. 前記がんが、小細胞肺癌（ＳＣＬＣ）または神経芽細胞腫である、請求項１６３に記載の方法。
  172. 前記医薬組成物の前記投与により、ペイロードが腫瘍細胞中に送達される、請求項１６３～１７１のいずれか１項に記載の方法。
  173. 前記医薬組成物の前記投与により、腫瘍成長が阻害される、請求項１６３～１７２のいずれか１項に記載の方法。
  174. 前記ＬＮＰまたは前記医薬組成物が、非経口投与される、請求項１６２～１７３のいずれか１項に記載の方法。
  175. 前記ＬＮＰまたは前記医薬組成物が、腫瘍内及び／または静脈内に投与される、請求項１６２～１７４のいずれか１項に記載の方法。
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