JP2023549962A - Ｐｕ．１阻害剤としての化合物 - Google Patents

Ｐｕ．１阻害剤としての化合物 Download PDF

Info

Publication number
JP2023549962A
JP2023549962A JP2023530787A JP2023530787A JP2023549962A JP 2023549962 A JP2023549962 A JP 2023549962A JP 2023530787 A JP2023530787 A JP 2023530787A JP 2023530787 A JP2023530787 A JP 2023530787A JP 2023549962 A JP2023549962 A JP 2023549962A
Authority
JP
Japan
Prior art keywords
compound
pharmaceutically acceptable
stereoisomer
acceptable salt
formula
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
JP2023530787A
Other languages
English (en)
Inventor
雷暁光
呉虹
王▲金▼
姚寧寧
郭富生
Original Assignee
エス－インフィニティー ファーマシューティカルズ
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by エス－インフィニティー ファーマシューティカルズ filed Critical エス－インフィニティー ファーマシューティカルズ
Publication of JP2023549962A publication Critical patent/JP2023549962A/ja
Pending legal-status Critical Current

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/4164—1,3-Diazoles
    • A61K31/4184—1,3-Diazoles condensed with carbocyclic rings, e.g. benzimidazoles
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D207/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D207/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D207/30—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having two double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D207/34—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having two double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D519/00—Heterocyclic compounds containing more than one system of two or more relevant hetero rings condensed among themselves or condensed with a common carbocyclic ring system not provided for in groups C07D453/00 or C07D455/00

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)

Abstract

本願は、ＰＵ．１阻害剤としての式（Ｉ）の化合物を開示する。本願はまた、これらの化合物の製造方法を提供する。【化１】JPEG2023549962000076.jpg16128【選択図】なし

Description

関連出願の相互参照
本願は、２０２０年１１月２０日に提出された、ＰＣＴ国際出願番号ＰＣＴ／ＣＮ２０２０／１３０５１２の優先権を主張しており、その開示内容は全体として引用により本願に組み込まれている。
本開示は、転写因子ＰＵ．１の新規阻害剤、これらの化学合成、及び白血病及び線維症などの障害の治療におけるそれらの使用に関する。
Ｔ細胞急性リンパ性白血病（Ｔ－ＡＬＬ）は、Ｔ細胞前駆細胞の異常増殖によって生じる造血系の癌の１種である。小児科患者では１５％、成人では２５％を占めている。Ｔ－ＡＬＬは生物学的過程と遺伝的レベルの両方で異質性疾患である（Belver, L. & Ferrando, A. Nat. Rev. Cancer 16, 494-507, doi:10.1038/nrc.2016.63(2016)）。Ｔ－ＡＬＬには異質な特徴があるが、主要な遺伝病変には、特定のがん遺伝子の発現に影響を及ぼす染色体転座、シグナル伝達経路や細胞周期に関連する特定の遺伝子の突然変異や欠失などがある（Teachey, E. A. R. a. D. T. Hematology, 8(2016)）。ＮＯＴＣＨ１の異常活性化はＴ－ＡＬＬ患者の約６０％を占めており（Tosello, V. & Ferrando, A. A. Therapeutic advances inhematology4, 199-210, doi:10.1177/2040620712471368(2013)）、よく知られている癌阻害遺伝子ＰＴＥＮの欠失又は突然変異はＴ－ＡＬＬ患者の約２０％を占めていると報告されている（Ｇuan, W., Jing, Y. & Yu, L. Zhongguo shi yan xue ye xueza zhi 25, 587-591, doi:10.7534/j.issn.1009-2137.2017.02.050(2017)）。強化された高用量の化学療法はＴ－ＡＬＬ患者の転帰（ｏｕｔｃｏｍｅ）を改善するが、再発後に再び化学療法を受けた患者の中にはこの疾患で死亡する者もいる（Pui, C. H., Sailan, S., Relling,M. V.,Masera, G. & Evans, W. E. Leukemia 15, 707-715, doi:10.1038/sj.leu.2402111(2001);Nguyen, K. et al. Leukemia 22, 2142-2150, doi:10.1038/leu.2008.251(2008);Reismueller, B. et al. Journal of Pediatric Hematology Oncology 35, E200-E204, doi:10.1097/MPH.0b013e318290c3d6(2013)）。薬剤耐性の最も重要な要素は、白血病開始細胞（ＬＩＣ）の存在である。ＬＩＣは白血病芽球に自己更新して分化する能力を持つ。以前の研究では、ＬＩＣではなく白血病芽球を標的化された活性化経路によって除去できることが報告されている。ＬＩＣはＴ－ＡＬＬ標的治療における厄介な集団である。
白血病の発症とメカニズムを研究するために、Ｐｔｅｎ－ｎｕｌｌＴ－ＡＬＬモデルを構築した。このモデルでは、マウスの胎児肝臓造血幹細胞においてＰｔｅｎが４０％欠如し、その後ＰＩ３Ｋ－ＡＫＴ経路が活性化され、ｃ－Ｍｙｃ癌遺伝子が過剰発現し、造血系が破壊された。生後約２カ月以内に、マウスは攻撃的なＴ－ＡＬＬを発達させる（Guo, W. et al., Nature 453, 529-533, doi:10.1038/nature06933(2008））。幹細胞に類似した状態のマーカーであるｃ－ｋｉｔを用いて、Ｔ－ＡＬＬ細胞を芽球とＬＩＣに分離することができる。実験室では、ＴＩＭ－３が重要な表面マーカーであり、ＬＩＣの膜では高発現するが、芽球と正常細胞では発現しないことが確認された。ＰＵ．１はＥＴＳファミリー転写因子であり、ＴＩＭ－３プロモーターに結合し、ＴＩＭ－３の発現を調節し、ＬＩＣの「乾細胞性」を維持することができる。ＬＩＣでは、ＴＩＭ－３とＰＵ．１の発現レベルに高い相関があった。一連のＬＩＣシグネチャ遺伝子は潜在的なＰＵ．１標的である（Zhu, H. et al., eLife 7, doi:10.7554/eLife.38314(2018)）。
ＰＵ．１はＥＴＳファミリーに属する転写因子であり、造血過程に重要な役割を果たす。様々な造血前駆細胞及びその子孫で発現レベルが異なる。長期ＨＳＣ（ＬＴ－ＨＳＣ）では、ＰＵ．１の発現レベルは低いが、ＣＭＰやＣＬＰなどの前駆細胞に分化すると、ＰＵ．１は高度に発現する。ＰＵ．１は様々な成熟系統での発現も異なり、マクロファージではＢ細胞より発現が高く、Ｔ細胞、赤血球及び巨核球では発現レベルが低い。ＧＭＰ集団では、その子孫の好中球及び単球におけるＰＵ．１の発現が非常に必要である。いくつかのマウスモデルにより、骨髄細胞生成におけるＰＵ．１の役割が証明されている。ＰＵ．１の欠如はＣＭＰの欠乏、成熟したマクロファージの欠乏を引き起こす。さらに、ＰＵ．１は、ＧＭ－ＣＳＦＲａ、Ｇ－ＣＳＦＲ、Ｍ－ＣＳＦＲ、及びＩＬ－７Ｒを含むいくつかの骨髄特異的遺伝子の発現を調節することができるため、コミットされた骨髄細胞に重要である。骨髄系統の主要な調節因子とする以外に、ＰＵ．１はリンパ系統分化の調節及びＢとＴ系統の産生と系統選択の過程にも重要な役割を果たしている。ＧＦＰレポーター遺伝子を持つマウスを用いた研究では、ＰＵ．１発現レベルはＢ細胞が成熟するにつれて上昇するが、成熟Ｔ細胞ではサイレンシングすることが確認されている。ＰＵ．１－ｎｕｌｌ ＣＬＰはＢ細胞を産生することができる。Ｂ細胞と同様に、ＰＵ．１はＴ前駆細胞の段階で必要であるが、成熟Ｔ細胞では減少する。成熟Ｔ細胞でＰＵ．１が過剰発現すると、細胞は幹細胞様の状態を示し、成長が停滞し、成熟が阻害される可能性がある（Mak, K. S. et al., International Journal of Cell Biology 2011, 808524, doi:10.1155/2011/808524(2011)）。最近では、ＰＵ．１が線維芽細胞分極化と組織線維症を制御できることが示されており、ＰＵ．１阻害は広範な線維症疾患を治療する有望な治療法である可能性がある（Wohlfahrt, T. et al., Nature 566, 344-349, doi:10.1038/s41586-019-0896-x(2019)）。さらに、ＰＵ．１阻害剤は、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）細胞の細胞増殖及びクローン形成能を低下させ、ＡＭＬ細胞のアポトーシスを増加させることができ、ＰＵ．１阻害はＡＭＬに対する治療戦略としての可能性を有する（Antony-Debre, I. et al., J Clin Invest 127, 4297-4313, doi:10.1172/JCI92504(2017)）。
線維症は回復性又は反応性のプロセスであり、過剰な線維性結合組織及び細胞外マトリックスの形成及び沈着によって特徴付けられ、進行性の構造リモデリング及び肺、皮膚、肝臓、腎臓、心臓などのほぼすべての組織及び器官のさらなる機能不全を引き起こす（Rockey, D. C. et al., N Engl JMed 373, 96, doi:10.1056/NEJMc1504848(2015)）。そのため、線維症は発症と死亡を誘発する深刻な要因であり、米国では４５％以上の死亡をもたらしていると推定されている（Wynn, T. A., Nat Rev Immunol 4, 583-594, doi:10.1038/nri1412(2004)）。刺激（例えば、創傷治癒や炎症反応）では、線維芽細胞はマトリックスを産生する表現型に分化し、線維症疾患の開始スイッチとなる細胞外マトリックスの蓄積を促進する（Palumbo-Zerr, K. et al., NatMed 21, 150-158, doi:10.1038/nm.3777(2015);Ramming, A. et al., Pharmacol Res 100, 93-100, doi:10.1016/j.phrs.2015.06.012(2015);Chakraborty, D. et al., Nat Commun 8, 1130, doi:10.1038/s41467-017-01236-6(2017)）。そして、それに伴う炎症反応は免疫細胞（主に組織マクロファージ）の活性化を引き起こし、線維症媒介の恒常性バランス調節に関与する。現在、臓器線維症を治療する方法は比較的に少なく、治療効果は限られている。
非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）は、過度の飲酒を伴わずに肝臓に異常かつ大量の脂肪が蓄積（脂肪変性）することで発症し、その後脂肪性肝炎（非アルコール性脂肪性肝炎、ＮＡＳＨ）や炎症反応やコラーゲン沈着を伴う線維症に進行し、肝硬変やがんに進行することがある（Adams, L. A. et al., J Hepatol 62, 1002-1004, doi:10.1016/j.jhep.2015.02.005(2015); Ratziu, V., Lancet 385, 922-924, doi:10.1016/S0140-6736(14)62010-9(2015)）。先進国では３分の１つ以上の人が肝脂肪変性症を患い、若年化傾向にあるだけでなく、ＮＡＳＨを介する肝不全は肝移植の主要な問題である（Cohen, J. C. et al., Science 332, 1519-1523, doi:10.1126/science.1204265(2011); Stine, J. G. et al., Liver Transpl 21, 1016-1021, doi:10.1002/lt.24134(2015)）。残念ながらＮＡＳＨへの薬物介入は悪く、ＰＰＡＲ α／γアゴニストのサログリタザル（Ｓａｒｏｇｌｉｔａｚａｒ）のみがインド医薬品管理総局の承認を得ている。したがって、医薬開発の新たな標的を発見し、ＮＡＳＨ及び器官線維症に対する潜在的な治療法を特定するために、線維症がどのように発生し、どのように進行するかを理解することが急務となっている。
これまでの研究では、ＥＴＳファミリー転写因子ＰＵ．１はＬＩＣシグネチャ遺伝子の主要な調節因子であり、ＰＵ．１はＬＩＣの「乾細胞性」とＴ－ＡＬＬの発生に極めて重要であることが示されている（Zhu, H. et al., eLife 7, doi:10.7554/eLife.38314(2018)）。さらに、ＰＵ．１は線維症線維芽細胞で高発現するが、マトリックスを分解する線維芽細胞ではサイレンシングすることが報告されており、ＰＵ．１阻害剤ＤＢ１９７６による治療は皮膚、肝、肺線維症を緩和することができる（Wohlfahrt, T. et al., Nature 566, 344-349, doi:10.1038/s41586-019-0896-x(2019)）。我々と共同研究者はまた、ＤＢ１９７６又はｓｈＲＮＡの応用を介したＰＵ．１阻害が、肝脂肪変性、炎症、線維症の減少、インビボでのグルコースホメオスタシスの改善を含むＮＡＳＨの進行に有益な影響を示したことを確認した（Liu, Q. et al. J Hepatol 73, 361-370, doi:10.1016/j.jhep.2020.02.025(2020)）。これらの作業は、ＰＵ．１が白血病、肝疾患や多臓器線維症の薬物の研究開発及び開発のための潜在的に有効な標的であることを示している。しかし、ＤＢ１９７６のような既存のＰＵ．１阻害剤は効力が限られており、他のＥＴＳファミリーメンバーに対して阻害活性を有しており、さらなる創薬に潜在的なリスクをもたらす。
血液性Ｔ－ＡＬＬ、並びにＮＡＳＨ及び器官線維症のようなＰＵ．１機能障害に関連する他の病態を治療するために、新しい強力かつ選択的なＰＵ．１阻害剤を使用する改良方法が必要であり、ここでは、前記ＰＵ．１阻害剤は、科学的に重要であり、潜在的な薬効性を有する。本開示は、このような必要性に対処する。
本開示は、ＥＴＳファミリー転写因子ＰＵ．１と標的ＤＮＡとの相互作用を遮断し、ＴＩＭ－３発現をダウンレギュレートし、白血病細胞を効果的に殺し、器官線維症を緩和できる化合物を提供する。これらの化合物は白血病や線維症などの障害の治療に広く利用できる。
一態様では、式（Ｉ）の化合物、その立体異性体又はその薬学的に許容される塩を提供する。
（式中、Ｘ、Ｘ’、ｘ、ｘ’、ｙ、ｙ’、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ａ、Ｚ、Ｂ、Ｃ、及びｎは本願で開示した通りである。）
別の態様では、式（Ｉ）の化合物、その立体異性体又はその薬学的に許容される塩の製造方法であって、式（ＩＩ）の化合物、その立体異性体又はその薬学的に許容される塩を式（Ｉ）の化合物、その立体異性体又はその薬学的に許容される塩に変換するステップを含む、製造方法を提供する。
（式中、Ｘ、Ｘ’、ｘ、ｘ’、ｙ、ｙ’、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ａ、Ｚ、Ｂ、Ｃ、及びｎは本願で開示した通りである。）
別の態様では、本願に記載の化合物、その立体異性体又はその薬学的に許容される塩の有効量を個体に投与することを含む、必要とする前記個体におけるＰＵ．１媒介性疾患の治療方法を提供する。いくつかの実施形態では、ＰＵ．１媒介性疾患の治療における本願に記載の化合物、その立体異性体又はその薬学的に許容される塩の使用を提供する。いくつかの実施形態では、ＰＵ．１媒介性疾患を治療する薬物の製造における、本願に記載の化合物、その立体異性体又はその薬学的に許容される塩を提供する。いくつかの実施形態では、ＰＵ．１媒介性疾患は白血病又は線維症である。いくつかの実施形態では、ＰＵ．１媒介性疾患又は障害は急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、皮膚線維症、肺線維症、腎線維症、肝線維症、又は心臓線維症である。いくつかの実施形態では、ＰＵ．１媒介性疾患はＮＡＳＨである。
別の態様では、本願に記載の化合物、その立体異性体又はその薬学的に許容される塩と、薬学的に許容される担体又は賦形剤と、を含む、組成物、例えば、医薬組成物を提供する。また、本願に記載の化合物、その立体異性体又はその薬学的に許容される塩を含むキットを提供する。
ＤＮＡに対するＰＵ．１の結合を解消した新規小分子ＰＵ．１阻害剤の合理的な設計及びＰＵ．１阻害剤の効力の生物学的評価を示す。（ａ）即座に開示したＰＵ．１阻害剤例えば化合物Ｉ－１とＤＢ２１１５との間の区別（剛性又はＡＴ選択性リンカーで可撓性リンカーを置き換える。）、及び（ｂ）Ｂｌａｓｔ－ＰＵ．１細胞中のＬＩＣのシグネチャ遺伝子ＴＩＭ－３の活性に対する化合物阻害のｑ－ＰＣＲ分析（２４ｈ処理）である。 化合物Ｉ－１とラパマイシンとの併用による処理がＰｔｅｎ－ｎｕｌｌ Ｔ－ＡＬＬマウス白血病負荷に与える影響を示す。（ａ）化合物Ｉ－１、ラパマイシン又はこれらの併用により処理した後のマウスの骨髄中のＢｌａｓｔ（芽球）及びＴｉｍ－３ ｈｉｇｈＬＩＣ（高ＴＩＭ－３のＬＩＣ）割合である。（ｂ）化合物Ｉ－１、ラパマイシン又はこれらの併用によりマウス器官を処理したときのヘマトキシリン－エオシン（Ｈ＆Ｅ）染色である。縮尺は３００μｍである。（ｃ）化合物Ｉ－１、ラパマイシン又はこれらの併用によりマウスＢ２２０（ＣＤ４５Ｒ）を処理したときのマウスの脾臓免疫組織化学（ＩＨＣ）分析である。縮尺は１００μｍである。（ｄ）化合物Ｉ－１（左）又はＤＢ１９７６（右）、ラパマイシン及びこれらの併用によりＰｔｅｎ－ｎｕｌｌ Ｔ－ＡＬＬマウスを処理したときの生存曲線である。 化合物Ｉ－１による皮膚線維症疾患の予防及び治療効果（化合物Ｉ－１、５ｍｐｋ；ＤＢ１９７６、５ｍｐｋ；ビヒクル、生理食塩水。）を示す。（ａ～ｅ）化合物Ｉ－１はブレオマイシン誘発皮膚線維症を予防する（ｎ＝６）。（ｆ～ｊ）化合物Ｉ－１はブレオマイシン誘発皮膚線維症を緩和して逆転する（ｎ＝６）。（ａ及びｆ）ブレオマイシン誘発皮膚線維症の予防及び治療モデルの実験設計である。（ｂ及びｇ）さまざまな群の皮膚の病理切片及び染色である。上段は、Ｈ＆Ｅ染色、中間はシリウスレッド染色、下段はマッソン染色である。縮尺は５００μｍである。（ｃ及びｈ）量化した表皮皮膚の厚さである。（ｄ～ｅ及びｉ～ｊ） Ｃｏｌ１ａ１及びＣｏｌ１ａ２レベルの相対ｍＲＮＡのレベルであり、ＧＡＰＤＨで正規化したものである。データはそれぞれのｎ個の生物学的独立サンプルの平均値±ｓ．ｅ．ｍ．として表される。データはそれぞれのｎ個の生物学的独立サンプルの平均値±ｓ．ｅ．ｍ．として表される。Ｐ値は一元配置分散分析及びＴｕｋｅｙ多重比較事後検定により決定される。ブレオマイシン／ビヒクル群と比べて、＊Ｐ＜０．０５、＊＊Ｐ＜０．０１、及び＊＊＊Ｐ＜０．００１である。 化合物Ｉ－１による肺線維症疾患の予防及び治療効果（化合物Ｉ－１、５ｍｐｋ；ＤＢ１９７６、５ｍｐｋ；ビヒクル、生理食塩水。）を示す。（ａ～ｇ）化合物Ｉ－１はブレオマイシン誘発肺線維症を予防する（ｎ＝５）。（ｈ～ｎ）化合物Ｉ－１はブレオマイシン誘発肺線維症を緩和して逆転する（ｎ＝５）。（ａ及びｈ）ブレオマイシン誘発肺線維症の予防及び治療モデルの実験設計である。（ｂ及びｉ）上記の処理後の肺部写真である。（ｃ及びｊ）様々な群の肺のＨ＆Ｅ染色である。左図は、低い拡大倍数であり、縮尺は５００μｍであり、右図はより高い拡大倍数であり、１００μｍである。（ｄ及びｋ） Ａｓｈｃｒｏｆｔスコアである。（ｅ及びｌ）さまざまな群の肺のシリウスレッド染色である。左図は、低い拡大倍数であり、縮尺は５００μｍであり、右図は、より高い拡大倍数であり、１００μｍである。（ｆ～ｇ及びｍ～ｎ）Ｃｏｌ１ａ１及びＣｏｌ１ａ２レベルの相対ｍＲＮＡのレベルであり、ＧＡＰＤＨで正規化したものである。データはそれぞれのｎ個の生物学的独立サンプルの平均値±ｓ．ｅ．ｍ．として表される。Ｐ値は一元配置分散分析及びＴｕｋｅｙ多重比較事後検定により決定される。ブレオマイシン／ビヒクル群と比べて、＊Ｐ＜０．０５、＊＊Ｐ＜０．０１、及び＊＊＊Ｐ＜０．００１である。 化合物Ｉ－１が肝臓脂質蓄積及びＮＡＳＨの治療に与える影響を示す。（ａ） ＮＡＳＨ食事誘発モデル及び化合物処理計画の実験設計であり、ｎ＝８である。（ｂ～ｃ）最後の時間点でのさまざまな群の体重及び肝臓／体比（ｌｉｖｅｒ／ｂｏｄｙ ｗｅｉｇｈｔ ｒａｄｉｏ）である。（ｄ）組織を採取した後の肝組織のＨ＆Ｅ染色である。縮尺は、２５０μｍである。（ｅ）組織を採取した後の肝組織のオイルレッドＯ染色である。上段は、低い拡大倍数であり、縮尺は２５０μｍであり、下段は、より高い拡大倍数であり、縮尺は５０μｍである。（ｆ） ＮＡＦＬＤ活性スコアが基準を満たす。（ｇ～ｉ）さまざまな群の血清中のＡＬＴ、ＬＤＬ－Ｃ、及び総コレステロールのレベルである。（ｊ～ｋ）炎症関連遺伝子、ＩＬ－６、及びＩＬ－１βｍＲＮＡのレベルである。（ｌ～ｍ）線維症関連遺伝子、Ｃｏｌ１ａ１、Ｃｏｌ１ａ２ｍＲＮＡのレベルである。ＧＡＰＤＨで正規化したものである。データは、それぞれのｎ個の生物学的独立サンプルの平均値±ｓ．ｅ．ｍ．として表される。データは、それぞれのｎ個の生物学的独立サンプルの平均値±ｓ．ｅ．ｍ．として表される。Ｐ値は、一元配置分散分析及びＴｕｋｅｙ多重比較事後検定により決定される。ビヒクル／ＮＡＳＨ食事群と比べて、＊Ｐ＜０．０５、＊＊Ｐ＜０．０１、及び＊＊＊Ｐ＜０．００１である。 化合物Ｉ－１がマウスにおけるＨＦＤ／ＣＣＬ４誘発ＮＡＳＨ及び肝線維症に与える影響を示す。（ａ） ＨＦＤ／ＣＣＬ４誘発ＮＡＳＨ及び肝線維症モデル、並びに化合物処理計画の実験設計である（ｎ＝６－８）。（ｂ）最後の時間点でのさまざまな群の体重である。（ｃ～ｄ）さまざまな群における白色脂肪組織（鼠径部の白色脂肪、ｉＷＡＴ；性腺の白色脂肪、ｇＷＡＴ）の重量割合である。（ｅ～ｆ）媒介群の空腹時血清中のトリグリセリド（ＴＧ）及び総コレステロール（ＴＣ）のレベルである。（ｇ）組織を採取した後の肝組織のＨ＆Ｅ及びシリウスレッド染色である。Ｈ＆Ｅ染色では、上段は低い拡大倍数であり、縮尺は２５０μｍであり、下段は、より高い拡大倍数であり、縮尺は５０μｍである。シリウスレッド染色では、縮尺は５００μｍである。（ｈ～ｉ）Ｈ＆Ｅ染色による肝臓脂肪変性及び炎症のスコアである。（ｊ～ｋ）肝臓における炎症関連遺伝子、ＩＬ－６、及びＩＬ－１βｍＲＮＡのレベルである。ＧＡＰＤＨで正規化したものである。（ｌ）シリウスレッド染色に基づくシリウスレッド陽性領域の定量データである。（ｍ～ｎ）肝臓中の線維症関連遺伝子、Ｃｏｌ１ａ１、Ｃｏｌ１ａ２ｍＲＮＡのレベルである。ＧＡＰＤＨで正規化したものである。（ｏ）さまざまな群の空腹時血清ＡＬＴレベルである。データは、それぞれのｎ個の生物学的独立サンプルの平均値±ｓ．ｅ．ｍとして表される。Ｐ値は一元配置分散分析及びＴｕｋｅｙ多重比較事後検定により決定される。ビヒクル（生理食塩水）／ＨＦＤ＋ＣＣＬ４群と比べて、＊Ｐ＜０．０５、＊＊Ｐ＜０．０１、及び＊＊＊Ｐ＜０．００１である。 化合物Ｉ－１がＣＣＬ誘発肝線維症に与える影響を示す。（ａ）ＣＣＬ４誘発肝線維症モデル及び化合物処理計画の実験設計である（ｎ＝６）。（ｂ～ｃ）組織を采集した後の肝組織のシリウスレッド染色及びシリウスレッド陽性領域の定量データである。縮尺は５００μｍである。（ｄ～ｅ）線維症関連遺伝子、Ｃｏｌ１ａ１、Ｃｏｌ１ａ２ｍＲＮＡ のレベルである。ＧＡＰＤＨで正規化したものである。（ｆ）組織を採取した後の肝組織のＨ＆Ｅ染色である。上段は低い拡大倍数であり、縮尺は２５０μｍであり、下段はより高い拡大倍数であり、縮尺は５０μｍである。（ｇ～ｈ）炎症関連遺伝子、ＩＬ－６、及びＩＬ－１βｍＲＮＡのレベルである。ＧＡＰＤＨで正規化したものである。（ｉ）さまざまな群の血清中のＡＳＴレベルである。データは、それぞれのｎ個の生物学的独立サンプルの平均値±ｓ．ｅ．ｍ．として表される。Ｐ値は一元配置分散分析及びＴｕｋｅｙ多重比較事後検定により決定される。ＣＣＬ４／ビヒクルと比べて、＊Ｐ＜０．０５、＊＊Ｐ＜０．０１、及び＊＊＊Ｐ＜０．００１である。
以下の説明は、本開示の例示的な実施形態を示す。しかしながら、そのような説明は、本開示の範囲を限定することを意図するものではなく、例示的な実施形態の説明として提供されることが認識されるべきである。
定義
本明細書で使用されるように、以下の単語、語句、及び記号は、それらが使用される文脈において別段の記載がない限り、通常、以下で説明されるような意味を有することを意図している。
「約」という用語は、指定された値の±１％、±３％、±５％、又は±１０％の変化を意味する。例えば、いくつかの実施形態では、「約５０」は、４５から５５までの範囲を含むことができる。整数範囲の場合、「約」という用語は、この範囲の各端に列挙された整数よりも大きい、及び／又は小さい１つ又は２つの整数を含んでもよい。本明細書で別段に示されない限り、「約」という用語は、例示する範囲に近い値、例えば重量パーセントを含むことが意図されており、この重量パーセントは、個々の成分、組成物、又は実施形態の機能の点で同等である。本明細書では、「約」の値又はパラメータが記載される場合、その値又はパラメータ自体に対する実施形態を含む（及び説明する）。例えば、「約Ｘ」という記載には、「Ｘ」の記載が含まれる。
単数形の「１種」及び「前記」には、文脈上特に明示的に規定されていない限り、複数の参照が含まれる。したがって、例えば、「前記化合物」が記載される場合、そのような複数の化合物を含み、かつ１つ又は複数の化合物及びその当業者に知られている同等物への言及を含む。
「アルキル」とは、直鎖又は分岐鎖の飽和炭化水素鎖を意味する。本明細書で使用されるように、アルキルは１～１０個の炭素原子（すなわち、Ｃ１～１０アルキル、又はＣ１～Ｃ１０アルキル）、１～８個の炭素原子（すなわち、Ｃ１～８アルキル、又はＣ１～Ｃ８アルキル）、１～６個の炭素原子（すなわち、Ｃ１～６アルキル、又はＣ１～Ｃ６アルキル）、又は１～４個の炭素原子（すなわち、Ｃ１～４アルキル、又はＣ１～Ｃ４アルキル）を有する。アルキルの例としては、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ｎ－ブチル、２級ブチル、イソブチル、ｔ－ブチル、ペンチル、２－ペンチル、イソアミル、ネオペンチル、ヘキシル、２－ヘキシル、３－ヘキシル、及び３－メチルペンチルが含まれるが、これらに限定されない。特定の炭素数を有するアルキル残基が化学的名称で命名されたとき又は分子式で決定されたときは、その炭素数を有するすべての位置異性体を含むことができる。したがって、例えば、「ブチル」はｎ－ブチル（すなわち、－（ＣＨ２）３ＣＨ３）、２級ブチル（すなわち－ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ３）、イソブチル（すなわち－ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）２）及びｔ－ブチル（すなわち－Ｃ（ＣＨ３）３）を含み、「プロピル」はｎ－プロピル（すなわち－（ＣＨ２）２ＣＨ３）とイソプロピル（すなわち－ＣＨ（ＣＨ３）２）を含む。なお、「アルキル」という用語は、２価部分も考慮する。
「ハロアルキル」とは、上記定義された直鎖状又は分岐状のアルキルにおける水素原子の１つ又は複数がハロゲンで置換されたものを意味する。例えば、残基が１つ又は複数のハロゲンで置換されている場合、連結されているハロゲン部分の数に対応するプレフィックスを用いて記載され得る。ジハロアルキル及びトリハロアルキルとは、２つ（「２」）又は３つ（「３」）のハロゲン基で置換されたアルキルをいい、これらは同一のハロゲンであってもよいが必ずしも同じではない。ハロアルキルの例としては、ジフルオロメチル（－ＣＨＦ２）とトリフルオロメチル（－ＣＦ３）が含まれる。
「アルコキシ」とは、「－Ｏ－アルキル」を意味する。アルコキシの例としては、メトキシ、エトキシ、ｎ－プロポキシ、イソプロポキシ、ｎ－ブトキシ、ｔ－ブトキシ、２級ブトキシ、ｎ－ペントキシ、ｎ－ヘキシル、及び１,２－ジメチルブトキシが含まれるが、これらに限定されない。
「アリール」とは、単環（例えば、モノサイクリックリング）又は縮合系を含む多環（例えば、二環又は三環）を有する芳香族炭素環基を意味する。本明細書で使用されるように、アリールは６～２０個の環式炭素原子（すなわち、Ｃ６～２０アリール、又はＣ６～Ｃ２０アリール）、６～１２個の炭素環原子（すなわち、Ｃ６～１２アリール、又はＣ６～Ｃ１２アリール）又は６～１０個の炭素環原子（すなわち、Ｃ６～１０アリール、又はＣ６～Ｃ１０アリール）を有する。アリールの例としては、フェニル、ナフチル、フルオレニル及びアントラセニルが含まれるが、これらに限定されない。ただし、アリールは、以下に定義されるヘテロアリールを含まないか、又はいずれかの方法でこれらのヘテロアリールと重複しない。１つ又は複数のアリールがヘテロアリールと縮合している場合、得られる環系はヘテロアリールである。１つ又は複数のアリールがヘテロシクリルに縮合している場合、得られる環系はヘテロシクリルである。「アリール」という用語は、２価部分も考慮することが理解されるべきである。
「シクロアルキル」とは、単環又は多環（縮合環、架橋環及びスピロ環系を含む）を有する飽和又は部分不飽和の環状アルキルを意味する。「シクロアルキル」という用語は、シクロアルケニル（すなわち、少なくとも１つの二重結合を有する環状基）と、少なくとも１つのｓｐ３炭素原子を有する炭素環縮合環系（すなわち、少なくとも１つの非芳香環）とを含む。本明細書で使用されるように、シクロアルキルは、３～２０個の環式炭素原子（すなわち、Ｃ３～２０シクロアルキル、又はＣ３～Ｃ２０シクロアルキル）、３～１２個の環式炭素原子（すなわち、Ｃ３～１２シクロアルキル、又はＣ３～Ｃ１２シクロアルキル）、３～１０個の環式炭素原子（すなわち、Ｃ３～１０シクロアルキル、又はＣ３～Ｃ１０シクロアルキル）、３～８個の環式炭素原子（すなわち、Ｃ３～８シクロアルキル、又はＣ３～Ｃ８シクロアルキル）、又は３～６個の環式炭素原子（すなわち、Ｃ３～６シクロアルキル、又はＣ３～Ｃ６シクロアルキル）を有する。単環基は、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル及びシクロオクチルを含むが、これらに限定されない。さらに、シクロアルキルという用語は、分子の残りの部分との結合にかかわらず、アリール環に縮合することができる非芳香族環を包含することを意図している。さらに、シクロアルキルは、同じ炭素原子上に２つの置換位置がある場合には、「スピロシクロアルキル」も含む。「シクロアルキル」という用語は、２価部分も考慮することが理解されるべきである。
「ヘテロアリール」とは、窒素、酸素及び硫黄から独立して選択される１つ又は複数の環ヘテロ原子を有する単環、多環又は多縮環を有する芳香族基を意味する。本明細書で使用されるように、ヘテロアリールは、１～２０個の環式炭素原子（すなわち、Ｃ１～２０ヘテロアリール）、３～１２個の環式炭素原子（すなわち、Ｃ３～１２ヘテロアリール）又は３～８個の炭素環原子（すなわち、Ｃ３～８ヘテロアリール）と、窒素、酸素及び硫黄から独立して選択される環ヘテロ原子１～５個、環ヘテロ原子１～４個、環ヘテロ原子１～３個、環ヘテロ原子１～２個又は環ヘテロ原子１個と、を含む。いくつかの場合、ヘテロアリールは、それぞれ独立して、窒素、酸素及び硫黄から独立して選択される環ヘテロ原子１～４個、環ヘテロ原子１～３個、環ヘテロ原子１～２個、又は環ヘテロ原子１個を有する、５～１２員環系、５～１０員環系、５～７員環系又は５～６員環系を含む。単一又は複数の縮合環を有し、少なくとも１つのヘテロ原子を含む任意の芳香族環は、分子の残りの部分への連結（すなわち、いずれかの縮合環を介して）にかかわらず、ヘテロアリールであるとみなされる。ヘテロアリールは、上記で定義されたアリールを含まないか、又はそれと重なっていない。ヘテロアリールの例としては、ピリジル、ピリミジル、チエニル、フリル、チアゾリル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、チエニル、ピロリル、ピラゾリル、１,３,４－オキサジアゾリル、イミダゾリル、イソチアゾリル、トリアゾリル、１,３,４－チアジアゾリル、テトラゾリル、ベンゾフリル、ベンゾチエニル、ピラゾロピリジル、インダゾリル、ベンゾチアゾリル、ベンゾオキサゾリル、及びベンズイミダゾリルなどが含まれるが、これらに限定されない。「ヘテロアリール」という用語は２価部分も考慮することが理解されるべきである。
「ヘテロシクリル」とは、窒素、酸素及び硫黄から独立して選択される１つ又は複数の環ヘテロ原子を有する飽和又は部分不飽和のシクロアルキルを意味する。「ヘテロシクリル」という用語は、ヘテロシクロアルケニル（すなわち、少なくとも１つの二重結合を有するヘテロシクリル）、架橋ヘテロシクリル、縮合ヘテロシクリル、及びスピロヘテロシクリルを含む。ヘテロシクリルは、単環又は多環であってもよく、多環は、縮合、架橋又はスピロ環であってもよく、１つ又は複数（例えば、１～３個）のオキソ（＝Ｏ）又はＮ－オキシド（Ｎ＋－Ｏ－オキシド）部分を含んでいてもよい。少なくとも１つのヘテロ原子を含む任意の非芳香族環は、その連結方法にかかわらず（すなわち、炭素原子又はヘテロ原子を介して連結することができる）、ヘテロシクリルとみなされる。さらに、ヘテロシクリルという用語は、少なくとも１つのヘテロ原子を含む任意の非芳香族環を含むことを意図しており、この環は、分子の残りの部分との連結にかかわらず、アリール、又はヘテロアリール環と縮合することができる。本明細書で使用されるように、ヘテロシクリルは、２～２０個の環式炭素原子（すなわち、Ｃ２～２０又はＣ２～Ｃ２０ヘテロシクリル）、２～１２個の環式炭素原子（すなわち、Ｃ２～１２、又はＣ２～Ｃ１２ヘテロシクリル）、２～１０個の環式炭素原子（すなわち、Ｃ２～１０又はＣ２～Ｃ１０ヘテロシクリル）、２～８個の環式炭素原子（すなわち、Ｃ２～８又はＣ２～Ｃ８ヘテロシクリル）、３～１２個の環式炭素原子（すなわち、Ｃ３～１２、又はＣ３～Ｃ１２ヘテロシクリル）、３～８個の環式炭素原子（すなわち、Ｃ３～８又はＣ３～Ｃ８ヘテロシクリル）、又は３～６個の環式炭素原子（Ｃ３～６又はＣ３～Ｃ６ヘテロシクリル）と、窒素、硫黄又は酸素から独立して選択される環ヘテロ原子１～５個、環ヘテロ原子１～４個、環ヘテロ原子１～３個、環ヘテロ原子１～２個、又は環ヘテロ原子１個と、を有する。いくつかの場合、ヘテロシクリルは、窒素、酸素及び硫黄から独立して選択される環ヘテロ原子１～４個、環ヘテロ原子１～３個、環ヘテロ原子１～２個、又は環ヘテロ原子１個をそれぞれ独立して有する３～１２員環系、５～１０員環系、５～７員環系又は５～６員環系を含む。同じ炭素原子上に２つの置換位置がある場合、「ヘテロシクリル」という用語は「スピロヘテロシクリル」も含む。ヘテロシクリルの例としては、テトラヒドロピラニル、ジヒドロピラニル、ピペリジニル、ピペラジニル、ピロリジニル、チアゾリニル、チアゾリジニル、テトラヒドロフラニル、テトラヒドロチオフェニルなどが含まれるが、これらに限定されない。「ヘテロシクリル」という用語は、２価部分も考慮することが理解されるべきである。
「オキソ」は＝Ｏを意味する。
「ハロゲン」又は「ハロ」は、フッ素、塩素、臭素及びヨウ素を含む。
「任意」又は「任意に」という用語は、後に説明されるイベント又は状況が発生する可能性があるか、又は発生しない可能性があることを意味する。
本明細書で使用されるように、「置換された」とは、１つ又は複数（例えば１～８、１～６、１～５、１～４、１～３、１～２、２～５、２～４、２～３、３～５、又は３～４）の基の水素原子が、その基についてリストされた置換基によって置換されることを意味し、置換基は同一でも異なっていてもよい。「任意に置換される」とは、基が置換されていないか、又はその基についてリストされた１つ又は複数の置換基（例えば、１～８、１～６、１～５、１～４、１～３、１～２、２～５、２～４、２～３、３～５、又は３～４）によって置換されていてもよく、置換基は同一であっても異なっていてもよいことを意味する。
本明細書に記載の化合物の立体異性体、立体異性体の混合物、互変異性体、水和物、溶媒和物、同位体富化類似体、及び薬学的に許容される塩をさらに提供する。
本明細書に開示された化合物又はその薬学的に許容される塩は、不斉中心を含んでいてもよく、したがって、絶対立体化学的に（Ｒ）－又は（Ｓ）－、又は（Ｄ）－又は（Ｌ）－としてアミノ酸に対して定義され得るエナンチオマー、ジアステレオマー、及び他の立体異性体を生成し得る。本開示は、これらの可能なすべての異性体、及びそれらのラセミ体及び光学的に純粋な形態を含むことを意図している。光学活性な（＋）及び（－）、（Ｒ）－及び（Ｓ）－、又は（Ｄ）－及び（Ｌ）－異性体は、キラルシンセトン又はキラル試薬を使用して、又はクロマトグラフィー及び分別結晶化分割のような従来技術を使用して製造することができる。単一のエナンチオマーを製造／分離するための従来技術は、適切な光学的に純粋な前駆体からのキラル合成、又はラセミ体（又は塩又は誘導体のラセミ体）のキラル高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）のような使用による分割を含む。本明細書に記載された化合物がオレフィン二重結合又は他の幾何学的非対称中心を含む場合、特に別段の記載がない限り、この化合物は、Ｅ－及びＺ－幾何異性体を含むことが意図される。
「立体異性体」とは、同じ原子が同じ結合で連結されたものであるが、異なる３次元構造を持ち、互換性のない化合物をいう。本開示は、２つの立体異性体の分子が互いに重ならない鏡像であることを意味する「エナンチオマー」と、少なくとも２つの非対称原子を有するが互いに鏡像でない立体異性体を意味する「ジアステレオマー」とを含む、様々な立体異性体及びその混合物をカバーする。したがって、種々の置換基上の不斉炭素に起因して存在する可能性のあるものなど、化合物（化合物の塩、溶媒和物、及び水和物を含むもの）の立体異性体（例えば、幾何異性体、光学異性体など）の全てが考慮され、これらには、エナンチオマー形態（不斉炭素が存在しなくても存在する可能性がある）、回転異性体形態、アトロプ異性体形態、ジアステレオマー形態が含まれる。
ジアステレオマー混合物は、それらの物理化学的差異に基づいて、例えば、クロマトグラフィー及び／又は分別結晶化などの当業者によく知られた方法によって、それらの個々のジアステレオマーに分離することができる。エナンチオマーは、適切な光学活性化合物（例えば、キラルアルコール、又はモッシャー酸クロリド（Ｍｏｓｈｅｒ’ｓ ａｃｉｄ ｃｈｌｏｒｉｄｅ）などのキラル補助剤）と反応させて、エナンチオマー混合物をジアステレオマー混合物に変換し、ジアステレオマーを分離し、個々のジアステレオマーを対応する純粋なエナンチオマーに変換（例えば、加水分解）することによって分離することができる。さらに、本明細書で開示される化合物の一部は、アトロプ異性体であってもよく、本明細書の一部であると考えられる。立体異性体は、キラルＨＰＬＣを使用して分離することもできる。
いくつかの化合物は互変異性体の形態で存在する。互変異性体は互いに平衡している。例えば、アミド含有化合物は、イミド酸互変異性体と平衡して存在することができる。示されている互変異性体の種類にかかわらず、また互変異性体間の平衡の性質にかかわらず、化合物にはアミド及びイミド酸互変異性体が含まれることが当業者には理解される。したがって、アミド含有化合物は、それらを含むイミド酸互変異性体として理解される。同様に、イミド酸含有化合物は、それらを含むアミド互変異性体として理解される。
本明細書に記載されたいずれの化合物又は構造も、同位体標識の形態だけでなく、化合物の標識されていない形態を表すことも意図されている。これらの形態の化合物は、「同位体富化類似体」とも呼ばれる。同位体標識化合物は、１つ又は複数の原子が選択された原子質量又は質量数を有する原子で置換されていることを除いて、本明細書に記載された構造を有する。開示された化合物に組み込むことができる同位体の例としては、例えば、水素、炭素、窒素、酸素、リン、フッ素、塩素及びヨウ素の各同位体、例えば、２Ｈ、３Ｈ、１１Ｃ、１３Ｃ、１４Ｃ、１３Ｎ、１５Ｎ、１５Ｏ、１７Ｏ、１８Ｏ、３１Ｐ、３２Ｐ、３５Ｓ、１８Ｆ、３６Ｃｌ、１２３Ｉ及び１２５Ｉが含まれる。本開示の種々の同位体標識化合物は、例えば３Ｈ及び１４Ｃのような放射性同位体が組み込まれている化合物である。このような同位体標識化合物は、薬物又は基質組織分布測定又は放射線治療を含む、陽電子放出断層撮影（ＰＥＴ）又は単一光子放出コンピュータ断層撮影（ＳＰＥＣＴ）のような、代謝研究、反応動力学研究、検出又はイメージング技術において有用である。このような化合物は、代謝に対する増加抵抗性を示すことができ、したがって、哺乳動物、特にヒトへの投与において、任意の化合物の半減期を増加させるのに有用である。このような化合物は、例えば、１つ又は複数の水素が重水素に置換された原料を使用することなど、当業者によく知られた方法により合成される。
「阻害（ｉｎｈｉｂｉｔ／ｉｎｈｉｂｉｔｉｎｇ／ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ）」という用語は、疾患、感染症、病態、又は細胞集団の成長又は進行を遅らせる、停止させる、又は回復させることを意味する。治療又は接触なしで発生する成長又は進行と比較して、例えば約２０％、４０％、６０％、８０％、９０％、９５％又は９９％以上の阻害が可能である。
本明細書で使用されるように、「個体」とは、ヒトを含む哺乳動物である。いくつかの実施形態では、個体は、ブタ、ウシ、ネコ科動物、イヌ科動物、霊長類、げっ歯類、又はヒトを含む。いくつかの実施形態では、個体はヒトである。
本明細書で使用されるように、「治療（ｔｒｅａｔｍｅｎｔ／ｔｒｅａｔｉｎｇ）」は、有益な又は望ましい結果（臨床的結果を含む）を得るための方法である。本開示の目的のために、有益又は望ましい結果には、疾患又は障害によって引き起こされる１つ又は複数の症状を低減させること、疾患又は障害の程度を低減させること、疾患又は障害の安定化（例えば、疾患又は障害の悪化を予防又は遅延すること）、疾患又は障害の発生又は再発を遅延すること、疾患又は障害の進行を遅延させる又は遅らせること、疾患又は障害の状態を改善すること、疾患又は障害の寛解（一部又は全部を問わない）を提供すること、疾患又は障害の治療に必要な１つ又は複数の他の薬物の投与量を低減すること、疾患又は障害の治療に使用される他の薬物の作用を増強すること、疾患又は障害の進行を遅延すること、生活の質を向上させること、及び／又は患者の生存期間を延長することの１つ又は複数が含まれるが、これら「治療」とは、疾患又は状態を軽減させる病理学的結果も含む。本開示の方法は、これらの治療的側面のうちのいずれか１つ又は複数を考慮する。
本明細書で使用される「有効量」という用語は、特定の障害、病態又は疾患を治療するのに十分な量、例えば、１つ又は複数の症状を改善、緩和、低減及び／又は遅延させる化合物又は組成物を意味する。いくつかの実施形態では、有効量は、発育を遅延させるのに十分な量である。いくつかの実施形態では、有効量は、発生を遅延させ、及び／又は再発を防止するのに十分な量である。有効量は、１回又は複数回の投与で投与することができる。
本明細書で使用されるように、「担体」という用語は、細胞又は組織への化合物の組込みを促進する無毒な化合物又は試薬を意味する。
本明細書で使用されるように、「薬学的に許容される」又は「薬理学的に許容される」とは、生物学的又は他の点で望ましくないものではない材料を意味し、例えば、当該材料は、有意な望ましくない生物学的効果を引き起こすことなく、又はそれを含む組成物の他の成分と有害に相互作用することなく、患者に投与される医薬組成物に組み込むことができる。薬学的に許容される担体又は賦形剤は、好ましくは、毒性試験及び製造試験の要件基準を満たし、及び／又は米国食品医薬品局によって定められた不活性成分ガイドラインに含まれる。
「薬学的に許容される塩」とは、遊離（非塩）化合物の生物学的活性の少なくとも一部を保持し、薬物又は薬剤として個体に投与することができる塩である。これらの塩には、例えば、（１）塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸などの無機酸と形成される酸付加塩；又は、酢酸、シュウ酸、プロピオン酸、コハク酸、マレイン酸、酒石酸などの有機酸と形成される酸付加塩；（２）母体化合物中に存在する酸性プロトンが金属イオン（例えば、アルカリ金属イオン、アルカリ土類金属イオン、アルミニウムイオン）で置換されたときに形成される塩；又は、有機塩基に配位するものが含まれる。許容される有機塩基としては、エタノールアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミンなどが含まれる。許容される無機塩基としては、水酸化アルミニウム、水酸化カルシウム、水酸化カリウム、炭酸ナトリウム、水酸化ナトリウムなどが含まれる。薬学的に許容される塩の他の例としては、Berge et al., Pharmaceutical Salts, J. Pharm. Sci. 1977 Jan;66(1):1-19に記載されるものが含まれる。薬学的に許容される塩は、製造プロセス中にその場で製造することができ、又は遊離の酸又は塩基の形態の精製された本開示の化合物を、それぞれ適切な有機若しくは無機塩基又は酸と反応させ、その後の精製プロセス中に、生成された塩を単離することによって製造することができる。
本明細書で使用されるように、「賦形剤」という用語は、本開示の化合物を有効成分として含む錠剤のような薬物又は薬剤の製造に有用な不活性又は非活性物質を意味する。賦形剤という用語は、結合剤、崩壊剤、コーティング、圧縮／カプセル化助剤、クリーム又はローション、滑沢剤、非経口投与用溶液、チュアブル錠用材料、甘味料又は矯味剤、懸濁剤／ゲル化剤、又は湿式造粒剤を含むが、これらに限定されない、様々な物質を包含することができる。結合剤としては、例えば、カルボマー、ポビドン、キサンタンガムなどが含まれる。コーティングとしては、例えば、酢酸フタル酸セルロース、エチルセルロース、ジェランガム、マルトデキストリン、腸溶性コーティングなどが含まれる。圧縮／カプセル化助剤としては、例えば、炭酸カルシウム、グルコース、フルクトースｄｃ（ｄｃ＝「直接圧縮可能」）、蜂蜜ｄｃ、ラクトース（無水又は一水和物、場合によってはアスパルテーム、セルロース又は微結晶セルロースと組み合わせて）、デンプンｄｃ、スクロースなどが含まれる。崩壊剤としては、例えば、架橋カルボキシメチルセルロースナトリウム、ジェランガム、デンプングリコール酸ナトリウムなどが含まれる。クリーム又はローションとしては、例えば、マルトデキストリン、カラギーナンなどが含まれる。滑沢剤としては、例えば、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸、ステアロイルフマル酸ナトリウムなどが含まれる。チュアブル錠用材料としては、例えば、グルコース、フルクトースｄｃ、ラクトース（一水和物、場合によってはアスパルテーム又はセルロースと組み合わせて）などが含まれる。懸濁剤・ゲル化剤としては、例えば、カラギーナン、デンプングリコール酸ナトリウム、キサンタンガムなどが含まれる。甘味料としては、例えば、アスパルテーム、グルコース、フルクトースｄｃ、ソルビトール、スクロースｄｃなどが含まれる。湿式造粒剤としては、例えば、炭酸カルシウム、マルトデキストリン、微結晶セルロースなどが含まれる。
化合物
一態様では、式（Ｉ）の化合物、その立体異性体又はその薬学的に許容される塩を提供する。
（式中、
ｘ及びｘ’は、それぞれ独立して、０、１、２、３又は４であり；
Ｒ１及びＲ２は、それぞれ独立して、－Ｒａ、－Ｎ（Ｒａ）２、－ＯＲａ、－Ｃ（Ｏ）ＯＲａ、－ＯＣ（Ｏ）Ｒａ、－ＮＨＣ（Ｏ）Ｒａ、－Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒａ）２、－ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒａ）２、－ＮＨＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒａ）２、－Ｓ（Ｏ）２Ｒａ、－Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒａ）２、－Ｃ（Ｏ）Ｒａ、－ＮＨＳ（Ｏ）２Ｒａ、－ＮＨＳ（Ｏ）２Ｎ（Ｒａ）２、ニトロ、シアノ、又はハロゲンであり、ここで、Ｒａは、それぞれ独立して、水素、Ｃ１～６アルキル、Ｃ３～８シクロアルキル、３～１２員ヘテロシクリル、Ｃ６～１２アリール、又は５～１２員ヘテロアリールであり、かつ、ここで、Ｒ１のうちのいずれか２つ又はＲ２のうちのいずれか２つは、これらが連結する原子とともにＣ３～８シクロアルキル、３～１２員ヘテロシクリル、Ｃ６～１２アリール、又は５～１２員ヘテロアリールを形成することができ、ここで、Ｃ３～８シクロアルキル、３～１２員ヘテロシクリル、Ｃ６～１２アリール及び５～１２員ヘテロアリールは、それぞれ独立して、任意にＲ９で置換され；
ｙ及びｙ’は、それぞれ独立して、０、１、２、３又は４であり；
Ｒ３は
であり、ここで、
Ｒ５はＯ、Ｓ又はＮＨであり、かつ
Ｒ６及びＲ７は、それぞれ独立して、水素、Ｃ１～６アルキル、Ｃ３～８シクロアルキル、３～１２員ヘテロシクリル、Ｃ６～１２アリール、５～１２員ヘテロアリール、－Ｃ（Ｏ）ＯＲｄ又は－Ｓ（Ｏ）２Ｒｄであり、ここで、Ｒは、それぞれ独立して、水素、Ｃ１～１２アルキル、Ｃ３～８シクロアルキル、３～１２員ヘテロシクリル、Ｃ６～１２アリール、又は５～１２員ヘテロアリールであり、かつ、ここで、Ｒ６及びＲ７は、それらが連結する窒素原子とともに３～１２員ヘテロシクリル、又は５～１２員ヘテロアリールを形成することができ、又は
ｙが２、３又は４である場合、２つのＲ３は、これらが連結する原子とともにＣ３～８シクロアルキル、３～１２員ヘテロシクリル、Ｃ６～１２アリール、又は５～１２員ヘテロアリールを形成することができ、ここで、Ｃ３～８シクロアルキル、３～１２員ヘテロシクリル、Ｃ６～１２アリール、及び５～１２員ヘテロアリールは、それぞれ独立して、任意にＲ９で置換され；
Ｒ４は
であり、ここで、
Ｒ’５はＯ、Ｓ又はＮＨであり、かつ
Ｒ’６及びＲ’７は、それぞれ独立して、水素、Ｃ１～６アルキル、Ｃ３～８シクロアルキル、３～１２員ヘテロシクリル、Ｃ６～１２アリール、５～１２員ヘテロアリール、－Ｃ（Ｏ）ＯＲｄ又は－Ｓ（Ｏ）２Ｒｄであり、ここで、Ｒｄは、それぞれ独立して、水素、Ｃ１～１２アルキル、Ｃ３～８シクロアルキル、３～１２員ヘテロシクリル、Ｃ６～１２アリール、又は５～１２員ヘテロアリールであり、かつ、ここで、Ｒ’６及びＲ’７は、それらが連結する窒素原子とともに３～１２員ヘテロシクリル、又は５～１２員ヘテロアリールを形成することができ、又は
ｙ’が２、３又は４である場合、２つのＲ４は、これらが連結する原子とともにＣ３～８シクロアルキル、３～１２員ヘテロシクリル、Ｃ６～１２アリール、又は５～１２員ヘテロアリールを形成することができ、ここで、Ｃ３～８シクロアルキル、３～１２員ヘテロシクリル、Ｃ６～１２アリール、及び５～１２員ヘテロアリールは、それぞれ独立して、任意にＲ９で置換され；
ＸはＯ、Ｓ、ＮＨ又はＮＲ８であり、かつ、Ｘ’はＯ、Ｓ、ＮＨ又はＮＲ’８であり、ここで、
Ｒ８及びＲ’８は、それぞれ独立して、Ｃ１～６アルキル、Ｃ３～８シクロアルキル、３～１２員ヘテロシクリル、Ｃ６～１２アリール、又は５～１２員ヘテロアリールであり；
Ａ及びＢは、それぞれ独立して、－Ｃ（Ｏ）－、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ－、－ＮＨＣ（Ｏ）－、－Ｓ（Ｏ）２－、－Ｓ（Ｏ）２ＮＨ－、又は－ＮＨＳ（Ｏ）２－であり；
Ｃは化学結合又は－ＮＨ－であり、その前提として、
Ｂが－Ｃ（Ｏ）－、又は－Ｓ（Ｏ）２－である場合、Ｃは－ＮＨ－であり、かつ
Ｂが－Ｃ（Ｏ）ＮＨ－、－ＮＨＣ（Ｏ）－、－Ｓ（Ｏ）２ＮＨ－、又は－ＮＨＳ（Ｏ）２－である場合、Ｃは化学結合であり；
ｎは１～６から選択される整数であり；
Ｚは、それぞれ独立して、Ｃ１～６アルキル、Ｃ３～８シクロアルキル、３～１２員ヘテロシクリル、Ｃ６～１２アリール、又は５～１２員ヘテロアリールであり、それぞれ独立して任意にＲｃで置換され、ここで、Ｒｃは、それぞれ独立して、Ｃ１～６アルキル、Ｃ１～６アルコキシ、Ｃ３～８シクロアルキル、３～１２員ヘテロシクリル、Ｃ６～１２アリール、５～１２員ヘテロアリール、アミノ、ヒドロキシ、カルボキシ、ニトロ、シアノ、又はハロゲンであり、
その前提として、少なくとも１つのＺは、それぞれ独立して任意にＲｃで置換される、Ｃ３～８シクロアルキル、３～１２員ヘテロシクリル、Ｃ６～１２アリール、又は５～１２員ヘテロアリールであり；かつ
Ｒ９は、それぞれ独立して、－Ｒｂ、－Ｎ（Ｒｂ）２、－ＯＲｂ、－Ｃ（Ｏ）ＯＲｂ、－ＯＣ（Ｏ）Ｒｂ、－ＮＨＣ（Ｏ）Ｒｂ、－Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒｂ）２、－ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒｂ）２、－ＮＨＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒｂ）２、－Ｓ（Ｏ）２Ｒｂ、－Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒｂ）２、－Ｃ（Ｏ）Ｒｂ、－ＮＨＳ（Ｏ）２Ｒｂ、－ＮＨＳ（Ｏ）２Ｎ（Ｒｂ）２、ニトロ、シアノ、又はハロゲンであり、ここで、Ｒｂは、それぞれ独立して、水素、Ｃ１～６アルキル、Ｃ３～８シクロアルキル、３～１２員ヘテロシクリル、Ｃ６～１２アリール、又は５～１２員ヘテロアリールである。）
式（Ｉ）又は式に関連する任意の化合物のいくつかの実施形態では、ｘは０、１、２、又は３である。いくつかの実施形態では、ｘは０、１又は２である。いくつかの実施形態では、ｘは０又は１である。いくつかの実施形態では、ｘは１、２、又は３である。いくつかの実施形態では、ｘは１又は２である。いくつかの実施形態では、ｘは２、又は３である。いくつかの実施形態では、ｘは０である。いくつかの実施形態では、ｘは１である。いくつかの実施形態では、ｘは２である。いくつかの実施形態では、ｘは３である。いくつかの実施形態では、ｘは４である。
式（Ｉ）又は式に関連する任意の化合物のいくつかの実施形態では、ｘ’は０、１、２、又は３である。いくつかの実施形態では、ｘ’は０、１又は２である。いくつかの実施形態では、ｘ’は０又は１である。いくつかの実施形態では、ｘ’は１、２、又は３である。いくつかの実施形態では、ｘ’は１又は２である。いくつかの実施形態では、ｘ’は２、又は３である。いくつかの実施形態では、ｘ’は０である。いくつかの実施形態では、ｘ’は１である。いくつかの実施形態では、ｘ’は２である。いくつかの実施形態では、ｘ’は３である。いくつかの実施形態では、ｘ’は４である。
式（Ｉ）又は式に関連する任意の化合物のいくつかの実施形態では、ｘはｘ’に等しい。いくつかの実施形態では、ｘはｘ’に等しく、かつ０である。いくつかの実施形態では、ｘはｘ’に等しく、かつ１である。いくつかの実施形態では、ｘはｘ’に等しく、かつ２である。いくつかの実施形態では、ｘはｘ’に等しく、かつ３である。いくつかの実施形態では、ｘはｘ’に等しく、かつ４である。いくつかの実施形態では、ｘ及びｘ’は、それぞれ独立して、２、又は３である。いくつかの実施形態では、ｘはｘ’に等しく、かつ２、又は３である。
式（Ｉ）又は式に関連する任意の化合物のいくつかの実施形態では、Ｒ１は、それぞれ独立して、－Ｒａ、－ＯＲａ又はハロゲンである。いくつかの実施形態では、Ｒ１は、それぞれ独立して、－Ｒａ、－ＯＲａ又はハロゲンであり、ここで、Ｒ１は、それぞれ独立して、水素又はＣ１～６アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒ１は、それぞれ独立して、水素、メチル、メトキシ、又はフッ素である。いくつかの実施形態では、Ｒ１は水素である。いくつかの実施形態では、Ｒ１はＣ１～６アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒ１はメチルである。いくつかの実施形態では、Ｒ１は－Ｏ－Ｃ１～６アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒ１はメトキシである。いくつかの実施形態では、Ｒ１はハロゲンである。いくつかの実施形態では、Ｒ１はフッ素である。いくつかの実施形態では、２つのＲ１は、これらが連結する原子とともに、Ｃ３～８シクロアルキル、３～１２員ヘテロシクリル、Ｃ６～１２アリール、又は５～１２員ヘテロアリールを形成し、それぞれ独立して任意にＲ９で置換される。いくつかの実施形態では、２つのＲ１は、これらが連結する原子とともに、Ｃ３～８シクロアルキルを形成する。いくつかの実施形態では、２つのＲ１は、これらが連結する原子とともに、任意にＲ９で置換された３～１２員ヘテロシクリルを形成し、任意にＲ９で置換される。いくつかの実施形態では、２つのＲ１は、これらが連結する原子とともに、Ｒ９で置換されていてもよいＣ６～１２アリールを形成する。いくつかの実施形態では、２つのＲ１は、これらが連結する原子とともに、Ｒ９で置換されていてもよい５～１２員ヘテロアリールを形成する。
式（Ｉ）又は式に関連する任意の化合物のいくつかの実施形態では、Ｒ２は、それぞれ独立して、－Ｒａ、－ＯＲａ又はハロゲンである。いくつかの実施形態では、Ｒ２は、それぞれ独立して、－Ｒａ、－ＯＲａ又はハロゲンであり、ここで、Ｒａは、それぞれ独立して、水素又はＣ１～６アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒ２は、それぞれ独立して、水素、メチル、メトキシ、又はフッ素である。いくつかの実施形態では、Ｒ２は水素である。いくつかの実施形態では、Ｒ２はＣ１～６アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒ２はメチルである。いくつかの実施形態では、Ｒ２は－Ｏ－Ｃ１～６アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒ２はメトキシである。いくつかの実施形態では、Ｒ２はハロゲンである。いくつかの実施形態では、Ｒ２はフッ素である。いくつかの実施形態では、２つのＲ２は、これらが連結する原子とともに、Ｒ９で置換されていてもよいＣ３～８シクロアルキルを形成する。いくつかの実施形態では、２つのＲ２は、これらが連結する原子とともに、Ｒ９で置換されていてもよい３～１２員ヘテロシクリルを形成する。いくつかの実施形態では、２つのＲ２は、これらが連結する原子とともに、Ｒ９で置換されていてもよいＣ６～１２アリールを形成する。いくつかの実施形態では、２つのＲ２は、これらが連結する原子とともに、Ｒ９で置換されていてもよい５～１２員ヘテロアリールを形成する。
式（Ｉ）又は式に関連する任意の化合物のいくつかの実施形態では、Ｒ１及びＲ２は、それぞれ独立して、－Ｒａ、－ＯＲａ又はハロゲンである。いくつかの実施形態では、Ｒ１及びＲ２は、それぞれ独立して、－Ｒａ、－ＯＲａ又はハロゲンであり、ここで、Ｒａは、それぞれ独立して、水素又はＣ１～６アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒ１及びＲ２は、それぞれ独立して、水素、メチル、メトキシ、又はフッ素である。いくつかの実施形態では、Ｒ１及びＲ２は、いずれも水素である。いくつかの実施形態では、２つのＲ１及び／又は２つのＲ２は、これらが連結する原子とともに、それぞれ独立してＲ９で置換されていてもよい、Ｃ３～８シクロアルキル、３～１２員ヘテロシクリル、Ｃ６～１２アリール、又は５～１２員ヘテロアリールを形成する。
式（Ｉ）又は式に関連する任意の化合物のいくつかの実施形態では、ｙは０、１、２、又は３である。いくつかの実施形態では、ｙは０、１又は２である。いくつかの実施形態では、ｙは０又は１である。いくつかの実施形態では、ｙは１、２、又は３である。いくつかの実施形態では、ｙは１又は２である。いくつかの実施形態では、ｙは２、又は３である。いくつかの実施形態では、ｙは０である。いくつかの実施形態では、ｙは１である。いくつかの実施形態では、ｙは２である。いくつかの実施形態では、ｙは３である。いくつかの実施形態では、ｙは４である。
式（Ｉ）又は式に関連する任意の化合物のいくつかの実施形態では、ｙ’は０、１、２、又は３である。いくつかの実施形態では、ｙ’は０、１又は２である。いくつかの実施形態では、ｙ’は０又は１である。いくつかの実施形態では、ｙ’は１、２、又は３である。いくつかの実施形態では、ｙ’は１又は２である。いくつかの実施形態では、ｙ’は２、又は３である。いくつかの実施形態では、ｙ’は０である。いくつかの実施形態では、ｙ’は１である。いくつかの実施形態では、ｙ’は２である。いくつかの実施形態では、ｙ’は３である。いくつかの実施形態では、ｙ’は４である。
式（Ｉ）又は式に関連する任意の化合物のいくつかの実施形態では、ｙはｙ’に等しい。いくつかの実施形態では、ｙはｙ’に等しく、かつ０である。いくつかの実施形態では、ｙはｙ’に等しく、かつ１である。いくつかの実施形態では、ｙはｙ’に等しく、かつ２である。いくつかの実施形態では、ｙはｙ’に等しく、かつ３である。いくつかの実施形態では、ｙはｙ’に等しく、かつ４である。いくつかの実施形態では、ｙ及びｙ’は、それぞれ独立して、１又は２である。いくつかの実施形態では、ｙはｙ’に等しく、かつ１又は２である。いくつかの実施形態では、ｘ＋ｙ及びｘ’＋ｙ’は４に等しい。
式（Ｉ）又は式に関連する任意の化合物のいくつかの実施形態では、Ｒ５はＯである。いくつかの実施形態では、Ｒ５はＳである。いくつかの実施形態では、Ｒ５はＮＨである。いくつかの実施形態では、Ｒ５はＯ又はＮＨである。
式（Ｉ）又は式に関連する任意の化合物のいくつかの実施形態では、Ｒ６及びＲ７は、それぞれ独立して、水素又は－Ｃ（Ｏ）ＯＲｄである。いくつかの実施形態では、Ｒ６及びＲ７は、それぞれ独立して、水素又は－Ｃ（Ｏ）ＯＲｄであり、ここで、ＲｄはＣ１～１２アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒ６及びＲ７は、いずれも水素である。いくつかの実施形態では、Ｒ６及びＲ７は、それらが連結する窒素原子とともに、３～１２員ヘテロシクリル、又は５～１２員ヘテロアリールを形成する。
式（Ｉ）又は式に関連する任意の化合物のいくつかの実施形態では、Ｒ５はＯであり、Ｒ６及びＲ７は、それぞれ独立して、水素又は－Ｃ（Ｏ）ＯＲｄであり、ここで、ＲｄはＣ１～１２アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒ５はＳであり、Ｒ６及びＲ７は、それぞれ独立して、水素又は－Ｃ（Ｏ）ＯＲｄであり、ここで、ＲｄはＣ１～１２アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒ５はＮＨであり、Ｒ６及びＲ７は、それぞれ独立して、水素又は－Ｃ（Ｏ）ＯＲｄであり、ここで、ＲｄはＣ１～１２アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒ５はＯ又はＮＨであり、Ｒ６及びＲ７は、それぞれ独立して、水素又は－Ｃ（Ｏ）ＯＲｄであり、ここで、ＲｄはＣ１～１２アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒ５はＯであり、Ｒ６及びＲ７は、いずれも水素である。いくつかの実施形態では、Ｒ５はＮＨであり、Ｒ６及びＲ７は、いずれも水素である。いくつかの実施形態では、Ｒ５はＳであり、Ｒ６及びＲ７は、いずれも水素である。
式（Ｉ）又は式に関連する任意の化合物のいくつかの実施形態では、Ｒ’５はＯである。いくつかの実施形態では、Ｒ’５はＳである。いくつかの実施形態では、Ｒ’５はＮＨである。いくつかの実施形態では、Ｒ’５はＯ又はＮＨである。
式（Ｉ）又は式に関連する任意の化合物のいくつかの実施形態では、Ｒ’６及びＲ’７は、それぞれ独立して、水素又は－Ｃ（Ｏ）ＯＲｄである。いくつかの実施形態では、Ｒ’６及びＲ’７は、それぞれ独立して、水素又は－Ｃ（Ｏ）ＯＲｄであり、ここで、ＲｄはＣ１～１２アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒ’６及びＲ’７は、いずれも水素である。いくつかの実施形態では、Ｒ’６及びＲ’７は、これらが連結する窒素原子とともに、３～１２員ヘテロシクリル、又は５～１２員ヘテロアリールを形成することができる。
式（Ｉ）又は式に関連する任意の化合物のいくつかの実施形態では、Ｒ’５はＯであり、Ｒ’６及びＲ’７は、それぞれ独立して、水素又は－Ｃ（Ｏ）ＯＲｄであり、ここで、ＲｄはＣ１～１２アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒ’５はＳであり、Ｒ’６及びＲ’７は、それぞれ独立して、水素又は－Ｃ（Ｏ）ＯＲｄであり、ここで、ＲｄはＣ１～１２アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒ’５はＮＨであり、Ｒ’６及びＲ’７は、それぞれ独立して、水素又は－Ｃ（Ｏ）ＯＲｄであり、ここで、ＲｄはＣ１～１２アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒ’５はＯ又はＮＨであり、Ｒ’６及びＲ’７は、それぞれ独立して、水素又は－Ｃ（Ｏ）ＯＲｄであり、ここで、ＲｄはＣ１～１２アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒ’５はＯであり、Ｒ’６及びＲ’７は、いずれも水素である。いくつかの実施形態では、Ｒ’５はＮＨであり、Ｒ’６及びＲ’７は、いずれも水素である。いくつかの実施形態では、Ｒ’５はＳであり、Ｒ’６及びＲ’７は、いずれも水素である。
式（Ｉ）又は式に関連する任意の化合物のいくつかの実施形態では、２つのＲ３は、これらが連結する原子とともに、Ｃ３～８シクロアルキル、３～１２員ヘテロシクリル、Ｃ６～１２アリール、又は５～１２員ヘテロアリールを形成し、それぞれ独立して、任意にＲ９で置換される。いくつかの実施形態では、２つのＲ３は、これらが連結する原子とともに、任意にＲ９で置換されるＣ３～８シクロアルキルを形成する。いくつかの実施形態では、２つのＲ３は、これらが連結する原子とともに、任意にＲ９で置換される３～１２員ヘテロシクリルを形成する。いくつかの実施形態では、２つのＲ３は、これらが連結する原子とともに、任意にＲ９で置換されるＣ６～１２アリールを形成する。いくつかの実施形態では、２つのＲ３は、これらが連結する原子とともに、任意にＲ９で置換される５～１２員ヘテロアリールを形成する。いくつかの実施形態では、２つのＲ３は、これらが連結する原子とともに、任意にＲ９で置換される５又は６員ヘテロアリールを形成する。いくつかの実施形態では、２つのＲ３は、これらが連結する原子とともに、
を形成する。いくつかの実施形態では、２つのＲ３は、これらが連結する原子とともに、
を形成する。
式（Ｉ）又は式に関連する任意の化合物のいくつかの実施形態では、２つのＲ４は、これらが連結する原子とともに、Ｃ３～８シクロアルキル、３～１２員ヘテロシクリル、Ｃ６～１２アリール、又は５～１２員ヘテロアリールを形成し、それぞれ独立して、任意にＲ９で置換される。いくつかの実施形態では、２つのＲ４は、これらが連結する原子とともに、任意にＲ９で置換されるＣ３～８シクロアルキルを形成する。いくつかの実施形態では、２つのＲ４は、これらが連結する原子とともに、任意にＲ９で置換される３～１２員ヘテロシクリルを形成する。いくつかの実施形態では、２つのＲ４は、これらが連結する原子とともに、任意にＲ９で置換されるＣ６～１２アリールを形成する。いくつかの実施形態では、２つのＲ４は、これらが連結する原子とともに、任意にＲ９で置換される５～１２員ヘテロアリールを形成する。いくつかの実施形態では、２つのＲ４は、これらが連結する原子とともに、任意にＲ９で置換される５又は６員ヘテロアリールを形成する。いくつかの実施形態では、２つのＲ４は、これらが連結する原子とともに、
を形成する。いくつかの実施形態では、２つのＲ４は、これらが連結する原子とともに、
を形成する。
式（Ｉ）又は式に関連する任意の化合物のいくつかの実施形態では、２つのＲ３及び／又は２つのＲ４は、これらが連結する原子とともに、Ｃ３～８シクロアルキル、３～１２員ヘテロシクリル、Ｃ６～１２アリール、又は５～１２員ヘテロアリールを形成し、それぞれ独立して、任意にＲ９で置換される。いくつかの実施形態では、２つのＲ３及び／又は２つのＲ４は、これらが連結する原子とともに、任意にＲ９で置換される５～１２員ヘテロアリールを形成する。いくつかの実施形態では、２つのＲ３及び／又は２つのＲ４は、これらが連結する原子とともに、それぞれ任意にＲ９で置換される５又は６員ヘテロアリールを形成する。いくつかの実施形態では、２つのＲ３及び／又は２つのＲ４は、これらが連結する原子とともに、
を形成する。いくつかの実施形態では、２つのＲ３及び／又は２つのＲ４は、これらが連結する原子とともに、
を形成する。
式（Ｉ）又は式に関連する任意の化合物のいくつかの実施形態では、ＸはＯである。いくつかの実施形態では、ＸはＳである。いくつかの実施形態では、ＸはＮＨである。いくつかの実施形態では、ＸはＮＲ８である。いくつかの実施形態では、ＸはＮＨ又はＮＲ８である。いくつかの実施形態では、Ｒ８はＣ１～６アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒ８はメチルである。
式（Ｉ）又は式に関連する任意の化合物のいくつかの実施形態では、Ｘ’はＯである。いくつかの実施形態では、Ｘ’はＳである。いくつかの実施形態では、Ｘ’はＮＨである。いくつかの実施形態では、Ｘ’はＮＲ’８である。いくつかの実施形態では、Ｘ’はＮＨ又はＮＲ’８である。いくつかの実施形態では、Ｒ’８はＣ１～６アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒ’８はメチルである。
式（Ｉ）又は式に関連する任意の化合物のいくつかの実施形態では、ＸはＮＨ又はＮＲ８であり、かつＸ’はＮＨ又はＮＲ’８であり、ここで、Ｒ８及びＲ’８は、それぞれ独立して、Ｃ１～６アルキルである。いくつかの実施形態では、ＸはＮＨ又はＮＲ８であり、かつＸ’はＮＨ又はＮＲ’８であり、ここで、Ｒ８及びＲ’８は、いずれもメチルである。いくつかの実施形態では、Ｘ及びＸ’はいずれもＮＨである。
式（Ｉ）又は式に関連する任意の化合物のいくつかの実施形態では、Ａは－Ｃ（Ｏ）－、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ－、－ＮＨＣ（Ｏ）－、－Ｓ（Ｏ）２－、－Ｓ（Ｏ）２ＮＨ－、又は－ＮＨＳ（Ｏ）２－である。いくつかの実施形態では、Ａは－Ｃ（Ｏ）－、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ－、又は－ＮＨＣ（Ｏ）－である。いくつかの実施形態では、Ａは－Ｃ（Ｏ）－である。いくつかの実施形態では、Ａは－Ｃ（Ｏ）ＮＨ－である。いくつかの実施形態では、Ａは－ＮＨＣ（Ｏ）－である。いくつかの実施形態では、Ａは－Ｓ（Ｏ）２－である。いくつかの実施形態では、Ａは－Ｓ（Ｏ）２ＮＨ－である。いくつかの実施形態では、Ａは－ＮＨＳ（Ｏ）２－である。
式（Ｉ）又は式に関連する任意の化合物のいくつかの実施形態では、Ｂは－Ｃ（Ｏ）－、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ－、－ＮＨＣ（Ｏ）－、－Ｓ（Ｏ）２－、－Ｓ（Ｏ）２ＮＨ－、又は－ＮＨＳ（Ｏ）２－である。いくつかの実施形態では、Ｂは－Ｃ（Ｏ）－、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ－、又は－ＮＨＣ（Ｏ）－である。いくつかの実施形態では、Ｂは－Ｃ（Ｏ）－である。いくつかの実施形態では、Ｂは－Ｃ（Ｏ）ＮＨ－である。いくつかの実施形態では、Ｂは－ＮＨＣ（Ｏ）－である。いくつかの実施形態では、Ｂは－Ｓ（Ｏ）２－である。いくつかの実施形態では、Ｂは－Ｓ（Ｏ）２ＮＨ－である。いくつかの実施形態では、Ｂは－ＮＨＳ（Ｏ）２－である。
式（Ｉ）又は式に関連する任意の化合物のいくつかの実施形態では、Ａ及びＢは、それぞれ独立して、－Ｃ（Ｏ）－、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ－、又は－ＮＨＣ（Ｏ）－である。いくつかの実施形態では、各Ａ及びＢは－Ｃ（Ｏ）－である。
式（Ｉ）又は式に関連する任意の化合物のいくつかの実施形態では、ｎは１である。いくつかの実施形態では、ｎは２である。いくつかの実施形態では、ｎは３である。いくつかの実施形態では、ｎは４である。いくつかの実施形態では、ｎは５である。いくつかの実施形態では、ｎは６である。いくつかの実施形態では、ｎは２～６である。いくつかの実施形態では、ｎは２～５である。いくつかの実施形態では、ｎは２～４である。いくつかの実施形態では、ｎは２～３である。いくつかの実施形態では、ｎは３～６である。いくつかの実施形態では、ｎは３～５である。いくつかの実施形態では、ｎは３～４である。いくつかの実施形態では、ｎは４～６である。いくつかの実施形態では、ｎは４～５である。
式（Ｉ）又は式に関連する任意の化合物のいくつかの実施形態では、Ｚは、それぞれ独立して、Ｃ１～６アルキル、３～１２員ヘテロシクリル、又は５～１２員ヘテロアリールであり、それぞれ独立して、任意にＲｃで置換される。いくつかの実施形態では、Ｚは、それぞれ独立して、任意にＲｃで置換される３～１２員ヘテロシクリルである。いくつかの実施形態では、Ｚは、それぞれ独立して、任意にＲｃで置換されるＣ３～８シクロアルキルである。いくつかの実施形態では、Ｚは、それぞれ独立して、任意にＲｃで置換されるＣ６～１２アリールである。いくつかの実施形態では、Ｚは、それぞれ独立して、任意にＲｃで置換される５～１２員ヘテロアリールである。いくつかの実施形態では、Ｚは、それぞれ独立して、－ＣＨ２－、－ＣＨ２ＣＨ２－、
であり、それぞれ独立して、任意にＲｃで置換される。なお、各波線は分子の残りの部分との連結点を表し、かつ、連結点は原子価によって許可される任意の原子上にあってもよい。例えば、
としては、
が想定されるが、これらに限定されない。いくつかの実施形態では、Ｚは、それぞれ独立して、メチル、
であり、それぞれ独立して、任意にＲｃで置換される。いくつかの実施形態では、Ｚは、それぞれ独立して、任意にＲｃで置換される
である。いくつかの実施形態では、Ｚはそれぞれ
である。いくつかの実施形態では、Ｚは、それぞれ独立して、任意にＲｃで置換される
である。いくつかの実施形態では、Ｚは、それぞれ独立して、
である。
本明細書に記載された具体的な値は、式（Ｉ）の化合物の値であること、又は、任意の関連式（例えば、式（ＩＩ））の化合物の値であることが理解されるべきである。２つまたはそれ以上の値を組み合わせることができる。したがって、式（Ｉ）又は関連式の化合物のいずれかの変数は、式（Ｉ）又は関連式の化合物のいずれかの他の変数と組み合わされてもよく、変数のそれぞれの組合せが具体的かつ個別に列挙されていると同等であることが理解されるべきである。例えば、いくつかの実施形態では、式（Ｉ）の化合物、その立体異性体又はその薬学的に許容される塩を提供し、ここで、ｘ及びｘ’は、それぞれ２、又は３であり、Ｒ１及びＲ２は、いずれも水素であり、ｙ及びｙ’は、それぞれ独立して、１又は２であり、ここで、２つのＲ３及び／又は２つのＲ４は、これらが連結する原子とともに、
を形成することができ、Ｒ５はＯ又はＮＨであり、Ｒ６及びＲ７は、それぞれ独立して、水素又は－Ｃ（Ｏ）ＯＲｄであり、Ｒ’５はＯ又はＮＨであり、Ｒ’６及びＲ’７は、それぞれ独立して、水素又は－Ｃ（Ｏ）ＯＲｄであり、ＸはＮＨ又はＮＲ８であり、Ｘ’はＮＨ又はＮＲ’８であり、ここで、Ｒ８及びＲ’８は、それぞれ独立して、Ｃ１～６アルキルであり、Ａ及びＢは、それぞれ独立して、－Ｃ（Ｏ）－、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ－、又は－ＮＨＣ（Ｏ）－であり、ｎは２であり、Ｚは、それぞれ独立して、Ｃ１～６アルキル、３～１２員ヘテロシクリル、又は５～１２員ヘテロアリールであり、それぞれ独立して、任意にＲｃで置換される。
本開示による例示的な化合物は、表１に示される化合物又はその立体異性体、互変異性体、水和物、溶媒和物、同位体標識形態又は薬学的に許容される塩を含むが、これらに限定されない。いくつかの実施形態では、表１に示される化合物、その立体異性体又はその薬学的に許容される塩を提供する。いくつかの実施形態では、表１に示される化合物又はその薬学的に許容される塩を提供する。
治療方法
別の態様では、本願に記載の化合物、その立体異性体又はその薬学的に許容される塩の有効量を個体に投与することを含む、必要とする個体におけるＰＵ．１媒介性疾患の治療方法を提供する。ＰＵ．１媒介性疾患を治療するための、本願に記載の化合物、その立体異性体又はその薬学的に許容される塩を提供する。いくつかの実施形態では、ＰＵ．１媒介性疾患を治療する薬物の製造における、本願に記載の化合物、その立体異性体又はその薬学的に許容される塩の使用を提供する。いくつかの実施形態では、ＰＵ．１媒介性疾患は、白血病又は線維症である。いくつかの実施形態では、ＰＵ．１媒介性疾患は、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、皮膚線維症、肺線維症、腎線維症、肝線維症、又は心臓線維症である。いくつかの実施形態では、ＰＵ．１媒介性疾患はＮＡＳＨである。
いくつかの実施形態では、細胞を本願で開示される化合物、その立体異性体又はその薬学的に許容される塩の有効量と接触させるステップを含む、ＰＵ．１阻害方法を提供する。
組成物
別の態様では、本願に記載の化合物、その立体異性体又はその薬学的に許容される塩と、薬学的に許容される担体又は賦形剤と、を含む、組成物、例えば医薬組成物を提供する。本願による医薬組成物は、経口、頬側、非経口（例えば、静脈内、筋肉内、輸注もしくは皮下注射）、経鼻、局所もしくは直腸投与に適した形態、又は吸入による投与に適した形態であり得る。
いくつかの実施形態では、本願に記載の化合物は精製形態であってもよい。いくつかの実施形態では、本願に記載の化合物、その立体異性体又はその薬学的に許容される塩を含む組成物は実質的に純粋な形態である。特に断らない限り、「実質的に純粋」とは、不純物を３５％、３０％、２５％、２０％、１５％、１０％、５％、１％、０．５％又は０．１％以下含有する組成物を指し、ここで、不純物は、所望の化合物とは異なる化合物又はその薬学的に許容される塩を示す。
キット
本願はまた、本願で開示された化合物、その立体異性体又はその薬学的に許容される塩又は本願で開示された組成物を含むキットを提供する。いくつかの実施形態では、キットは、単位用量の本願に記載の化合物又は組成物及び／又はこれらを投与するための明細書を含む。
製造方法
別の態様では、本願で開示された化合物、その立体異性体又はその薬学的に許容される塩の製造方法であって、式（ＩＩ）の化合物、その立体異性体又はその薬学的に許容される塩を式（Ｉ）の化合物、その立体異性体又はその薬学的に許容される塩に変換するステップを含む、製造方法を提供する。
（式中、Ｘ、Ｘ’、ｘ、ｘ’、ｙ、ｙ’、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ａ、Ｚ、Ｂ、Ｃ、及びｎは本願で開示した通りである。）
いくつかの実施形態では、式（ＩＩ）の化合物は、式（１３′）の化合物、その立体異性体又はその薬学的に許容される塩であり、
前記方法は、
（ａ）式（１１′）の化合物、その立体異性体又はその薬学的に許容される塩を式（５′）の化合物、その立体異性体又はその薬学的に許容される塩と反応させるステップ、
（ｂ）式（６）の化合物、その立体異性体又はその薬学的に許容される塩を式（１１′）の化合物、その立体異性体又はその薬学的に許容される塩に変換するステップ、及び／又は
（ｃ）式（１）の化合物、その立体異性体又はその薬学的に許容される塩を式（５′）の化合物、その立体異性体又はその薬学的に許容される塩に変換するステップをさらに含む。
いくつかの実施形態では、式（ＩＩ）の化合物は、式（５０）化合物、その立体異性体又はその薬学的に許容される塩であり、
前記方法は、
（ａ）式（４５）の化合物、その立体異性体又はその薬学的に許容される塩を式（４１）の化合物、その立体異性体又はその薬学的に許容される塩と反応させるステップ、
（ｂ）式（４２）の化合物、その立体異性体又はその薬学的に許容される塩を式（４５）の化合物、その立体異性体又はその薬学的に許容される塩に変換するステップ、及び／又は
（ｃ）式（６）の化合物、その立体異性体又はその薬学的に許容される塩を式（４１）の化合物、その立体異性体又はその薬学的に許容される塩に変換するステップをさらに含む。
いくつかの実施形態では、式（ＩＩ）の化合物は、式（５４）の化合物、その立体異性体又はその薬学的に許容される塩であり、
前記方法は、
（ａ）式（５３）の化合物、その立体異性体又はその薬学的に許容される塩を式（５４）の化合物、その立体異性体又はその薬学的に許容される塩に変換するステップ、
（ｂ）式（４７）の化合物、その立体異性体又はその薬学的に許容される塩を式（５３）の化合物、その立体異性体又はその薬学的に許容される塩に変換するステップ、及び／又は
（ｃ）式（４５）の化合物、その立体異性体又はその薬学的に許容される塩を式（４７）の化合物、その立体異性体又はその薬学的に許容される塩に変換するステップをさらに含む。
いくつかの実施形態では、本願で開示された製造方法の１つ又は複数のステップは、アシル化、縮合、還元、保護及び／又は脱保護を含む。
以下では、本願で開示された化合物を製造するための代表的なスキームを提供する。
スキーム１
スキーム２
スキーム３
スキーム４
スキーム５
本願の前記式（Ｉ）又は任意の関連式の化合物は当業者に知られている標準的な合成技術により合成することができる。本開示の化合物は、以上で提供されたスキーム及び以下で提供される実施例に記載の一般的な合成工程に従って合成することができる。
化合物の特定のエナンチオマーを得ることが望ましい場合、エナンチオマーを分離又は分割するための任意の適切な通常の工程を使用して、対応するエナンチオマー混合物からエナンチオマーを得ることができる。したがって、例えば、ジアステレオマー誘導体は、エナンチオマー（例えば、ラセミ体及び好適なキラル化合物）の混合物を反応させることによって製造することができる。その後、ジアステレオマーを結晶化などの任意の便利な方法で分離し、所望のエナンチオマーを回収することができる。別の分割工程では、キラル高速液体クロマトグラフィーを用いてラセミ体を分離することができる。あるいは、必要に応じて、記載された工程の１つにおいて、適切なキラル中間体を使用して、特定のエナンチオマーを得ることができる。
実施例
合成実施例
本開示に係る化合物は、市販の原料及び本明細書に記載された製造方法により製造することができる。以下の実施例は、本明細書に開示される化合物及びその製造方法を説明するために使用される。以下に説明されるこれらの実施例及び製造工程は、本開示の範囲を限定するものとみなされるべきではない。
本開示に係る化合物の構造は、１Ｈ ＮＭＲによって確認された。別段の記載がない限り、合成ステップにおけるすべての化合物又は中間体は、カラムクロマトグラフィー又は分取型逆相ＨＰＬＣによって精製される。反応過程は薄層クロマトグラフィーで測定することができ、精製段階でよく使用される溶出系は石油エーテル／酢酸エチルとジクロロメタン／メタノールである。
実施例Ｓ１：（Ｓ）－１－（（４－（６－カルバミイミドイル－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－２－イル）ベンゾイル）－Ｌ－プロリル）－Ｎ－（４－（６－カルバミイミドイル－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－２－イル）フェニル）ピロリジン－２－カルボキサミド（化合物Ｉ－１）の合成
ステップ１：４－ホルミルベンゾイルクロリド（化合物２）の合成
４－ホルミル安息香酸１（４ｇ、２６．６４ｍｍｏｌ）をトルエン（６４ｍＬ）とＳＯＣｌ２（８ｍＬ）の混合物に懸濁させ、混合物を１１０℃で一晩還流させた。得た清澄溶液を室温に冷却して、真空濃縮した。トルエンと共蒸発することで、過量のＳＯＣｌ２を除去して、真空下で乾燥させ、白色固体として目的の生成物２（４．４０ｇ、９８％）を得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 10.15 (s, 1H), 8.29 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 8.03 (d, J = 8.6 Hz, 2H)。
ステップ２：（４－ホルミルベンゾイル）－Ｌ－プロリンｔ－ブチルエステル（化合物４）の合成
０℃で、Ｌ－プロリンｔ－ブチルエステル３（２．０１ｇ、１１．７４ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（１８ｍＬ）とＴＥＡ（２ｍＬ）の溶液に化合物２（１．９８ｇ、１１．７４ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（１８ｍＬ）中の溶液をゆっくりと加えた。その後、混合物を室温に昇温して、３ｈ撹拌した。反応混合物をＨＣｌ水溶液（１Ｍ、３×６０ｍＬ）で洗浄した。併せた水性部分をＤＣＭで抽出し、併せた有機部分をさらに飽和ＮａＨＣＯ３水溶液で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、ろ過して真空濃縮し、淡黄色油状物４（１．８７ｇ）を得て、さらなる精製をせずに次のステップに用いた。
ステップ３：（４－ホルミルベンゾイル）－Ｌ－プロリン（化合物５）の合成
化合物４（１．８７ｇ、６．１６ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（１８ｍＬ）とＴＦＡ（１８ｍＬ）中の溶液を室温で１２ｈ撹拌した。反応完了後、溶媒を除去した。残留物を飽和ＮａＨＣＯ３水溶液に溶解して、ＥｔＯＡｃで洗浄した。有機部分を飽和ＮａＨＣＯ３水溶液で抽出した。２Ｍ ＨＣｌを添加することで水性部分をｐＨ＝２まで酸性化し、その後、併せた水性部分をＥｔＯＡｃで抽出した。併せた有機層を水で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、ろ過して真空濃縮した。粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィー法（ＤＣＭ中の２％ＭｅＯＨ）により精製し、白色固体として目的の生成物５を得た（８５０ｍｇ、２つのステップで２９％）。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 10.07 (s, 1H), 7.96 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 7.72 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 4.78 (dd, J = 8.3, 5.0 Hz, 1H), 3.58 - 3.51 (m, 2H), 3.34 (s, 1H), 2.41 - 2.35 (m, 1H), 2.31 - 2.25 (m, 1H), 2.12 - 2.02 (m, 1H), 2.00 - 1.90 (m, 1H)。
ステップ４：２－（４－ニトロフェニル）－１,３－ジチオラン（化合物８）の合成
４－ニトロベンズアルデヒド６（６．９２ｇ、４５．７９ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（１８０ｍＬ）中の溶液にエタン－１,２－ジチオール７（２０ｍＬ、０．２４ｍｏｌ）を加え、その後、三フッ化ホウ素ジエチルエーテル（１．２ｍＬ）を加えた。室温で６ｈ撹拌した後、溶液を１０％ ＮａＯＨ、水及び食塩水で洗浄した。得た明るい黄色の溶液を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、ろ過して真空濃縮し、黄色固体として目的の生成物８（９．７８ｇ、９４％）を得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.17 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.67 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 5.65 (s, 1H), 3.56 - 3.48 (m, 2H), 3.45 - 3.37 (m, 2H)。
ステップ５：４－（１,３－ジチオラン－２－イル）アニリン（化合物９）の合成
化合物８（５．０ｇ、２２．００ｍｍｏｌ）及び二塩化スズ二水和物（２４．８２ｇ、０．１１ｍｏｌ）の無水ＥｔＯＨ（４４ｍＬ）中の溶液を７０℃で０．５ｈ加熱した。室温に冷却した後、オレンジ色溶液を大型ビーカー内の氷上に注入し、その後、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液でｐＨ値が７～８となるまで処理した。約２００ｍＬのＥｔＯＡｃを加えて、混合物をガラス漏斗で真空ろ過した。ろ液を食塩水で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、ろ過して真空濃縮し、明るい黄色固体として目的の生成物９（３．５２ｇ、８１％）を得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.32 (d, J = 7.8 Hz, 2H), 6.62 (d, J = 7.7 Hz, 2H), 5.61 (s, 1H), 3.69 (s, 2H), 3.53 -3.45 (m, 2H), 3.37 - 3.29 (m, 2H)。
ステップ６：（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メチル （Ｓ）－２－（（４－（１,３－ジチオラン－２－イル）フェニル）カルバモイル）ピロリジン－１－カルボキシレート（化合物１０）の合成
新しく製造された化合物９（３．０８ｇ、１５．６１ｍｍｏｌ）及びＦｍｏｃ－Ｌ－プロリン（５．２６ｇ、１５．５９ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１５ｍＬ）中の溶液にＨＯＢＴのＤＭＦ（１Ｍ、１５ｍＬ）中の溶液及びＤＣＣのＤＣＭ（１Ｍ、１５ｍＬ）中の溶液を加え、反応混合物を室温で２４ｈ撹拌した。その後、ＥｔＯＡｃ ７５ｍＬを加え、ガラス漏斗で混合物をろ過した。溶媒を除去した後、残留物をＣＨＣｌ３／ｉ－ＰｒＯＨ（３：１）で希釈し、その後、水、０．１Ｍ ＨＣｌ、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液及び食塩水で洗浄した。有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、ろ過して真空濃縮した。シリカゲルクロマトグラフィー法（ＤＣＭ中の０－０．５％ＭｅＯＨ）により粗生成物を精製し、薄黄色固体として目的の生成物１０（５．８９ｇ、７３％）を得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9.18 (s, 1H), 7.82 - 7.28 (m, 12H), 5.62 (s, 1H), 4.56 - 4.40 (m, 3H), 4.26 (s, 1H), 3.57 - 3.30 (m, 6H), 2.56 (s, 1H), 1.96 (s, 3H)。
ステップ７：（Ｓ）－Ｎ－（４－（１,３－ジチオラン－２－イル）フェニル）ピロリジン－２－カルボキサミド（化合物１１）の合成
化合物１０（３．１６ｇ、６．１２ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２４ｍＬ）中の溶液にピペリジン（６ｍＬ）を加え、反応混合物を室温で１ｈ撹拌した。溶媒を除去した後、残留物をＥｔＯＡｃ中に溶解して、食塩水で洗浄した。有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、ろ過して真空濃縮した。粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィー法（ＤＣＭ中の０－２％ＭｅＯＨ）により精製し、白色固体として目的の生成物１１（１．３７ｇ、７６％）を得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9.75 (s, 1H), 7.55 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 7.48 (d, J = 7.5 Hz, 2H), 5.63 (s, 1H), 3.85 (dd, J = 9.0, 5.2 Hz, 1H), 3.53 - 3.46 (m, 2H), 3.38 - 3.31 (m, 2H), 3.11 - 3.05 (m, 1H), 3.00 - 2.94 (m, 1H), 2.26 - 2.16 (m, 1H), 2.07 - 1.99 (m, 1H), 1.79 - 1.70 (m, 2H)。
ステップ８：（Ｓ）－Ｎ－（４－（１,３－ジチオラン－２－イル）フェニル）－１－（（４－ホルミルベンゾイル）－Ｌ－プロリル）ピロリジン－２－カルボキサミド（化合物１２）の合成
化合物１１（８８０ｍｇ、２．９９ｍｍｏｌ）及び化合物５（７４０ｍｇ、２．９９ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（２０ｍＬ）中の溶液にＥＤＣＩ（６８８ｍｇ、３．５９ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を室温で１６ｈ撹拌した。その後、溶液を真空濃縮し、白色固体１２（９００ｍｇ）を得て、更なる精製をせずに次のステップに用いた。
ステップ９：（Ｓ）－１－（（４－ホルミルベンゾイル）－Ｌ－プロリル）－Ｎ－（４－ホルミルフェニル）ピロリジン－２－カルボキサミド（化合物１３）の合成
化合物１２（９００ｍｇ、１．７２ｍｍｏｌ）のＡｃＯＨ（３５ｍＬ）中の溶液にＳｅＯ２（９５４ｍｇ、８．６０ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を室温で３６ｈ撹拌した。混合物をろ過し、ろ液を減圧蒸発させた。残留物をＤＣＭ中に溶解し、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、ろ過して真空濃縮した。粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィー法（純ＥｔＯＡｃ）により精製し、白色固体として目的の生成物１３（７１０．１ｍｇ、２ステップで５３％）を得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 10.07 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 9.93 (dd, J = 26.6, 22.2 Hz, 2H), 8.13 (d, J = 8.6 Hz, 0.5H), 7.95 (dd, J = 13.0, 8.0 Hz, 2H), 7.85 (d, J = 8.7 Hz, 0.5H), 7.79 - 7.67 (m, 5H), 4.87 - 4.81 (m, 1.5H), 4.55 (dd, J = 17.1, 7.7 Hz, 0.5H), 3.97 (dd, J = 16.8, 9.1 Hz, 1H), 3.76 - 3.62 (m, 2H), 3.57 - 3.52 (m, 1H), 2.49 - 1.95 (m, 8H)。
ステップ１０：（Ｓ）－１－（（４－（６－カルバミイミドイル－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－２－イル）ベンゾイル）－Ｌ－プロリル）－Ｎ－（４－（６－カルバミイミドイル－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－２－イル）フェニル）ピロリジン－２－カルボキサミド（化合物Ｉ－１）の合成
化合物１３（１４３．４ｍｇ、０．３２ｍｍｏｌ）、３,４－ジアミノベンズアミジン塩酸塩１４（１２０ｍｇ、０．６４ｍｍｏｌ）及びｐ－ベンゾキノン（７０．０ｍｇ、０．６４ｍｍｏｌ）の無水ＥｔＯＨ（１３ｍＬ）中の溶液を１２ｈ還流して加熱した。反応混合物を室温に冷却して、アセトン（８０ｍＬ）中で０．５ｈ撹拌した。混合物をろ過し、無水エチルエーテルで洗浄して乾燥させ、茶色固体を得た。その後、熱いＭｅＯＨ（３０ｍＬ）とＥｔＯＨ（３０ｍＬ）の１：１混合物に固体を溶解し、ろ過し、体積を２０ｍＬに減少させて、飽和ＨＣｌ－ＥｔＯＨ（飽和塩酸のエタノール溶液）（２ｍＬ）で酸性化した。室温で一晩撹拌した後、混合物をエチルエーテルで希釈し、ろ過して沈殿物を得て、エチルエーテルで洗浄し、真空乾燥させた。粗生成物を分取型逆相ＨＰＬＣ（０．０５％ ＨＣｌを含むＨ２Ｏ中の５～１００％アセトニトリル）により精製し、茶色固体として目的の生成物Ｉ－１（１０１．７ｍｇ、３７％）を得た。
1H NMR (400 MHz, メタノール-d4) δ 8.27 - 8.23 (m, 4H), 8.15 (d, J = 8.6 Hz, 2H), 7.94 (d, J = 8.8 Hz, 4H), 7.90 - 7.82 (m, 4H), 4.77 - 4.72 (m, 1H), 4.06 - 3.99 (m, 1H), 3.86 - 3.60 (m, 4H), 2.59 - 2.50 (m, 1H), 2.45 - 2.36 (m, 1H), 2.24 - 1.99 (m, 6H)。
実施例Ｓ２：（Ｒ）－１－（（４－（６－カルバミイミドイル－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－２－イル）ベンゾイル）－Ｄ－プロリル）－Ｎ－（４－（６－カルバミイミドイル－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－２－イル）フェニル）ピロリジン－２－カルボキサミド（化合物Ｉ－２）の合成
ステップ１：（４－ホルミルベンゾイル）－Ｄ－プロリンｔ－ブチルエステル（化合物１６）の合成
０℃で、Ｄ－プロリンｔ－ブチルエステル１５（１ｇ、５．８４ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（１０ｍＬ）及びＴＥＡ（１ｍＬ）中の溶液に化合物２（９８４ｍｇ、１１．７４ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（１０ｍＬ）中の溶液をゆっくりと加えた。その後、混合物を室温に昇温して、３ｈ撹拌した。反応混合物をＨＣｌ水溶液（１Ｍ、３×３０ｍＬ）で洗浄した。併せた水性部分をＤＣＭで抽出し、併せた有機部分を飽和ＮａＨＣＯ３水溶液でさらに洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、ろ過して、真空濃縮し、薄黄色油状物１６（７９８．１ｍｇ）を得て、更なる精製をせずに次のステップに用いた。
ステップ２：（４－ホルミルベンゾイル）－Ｄ－プロリン（化合物１７）の合成
化合物１６（７９８．１ｍｇ、２．６３ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（９ｍＬ）及びＴＦＡ（９ｍＬ）中の溶液を室温で１２ｈ撹拌した。反応完了後、溶媒を除去した。残留物を飽和ＮａＨＣＯ３水溶液に溶解し、ＥｔＯＡｃで洗浄した。有機部分を飽和ＮａＨＣＯ３水溶液で抽出した。２Ｍ ＨＣｌを加えることで水性部分をｐＨ＝２まで酸性化し、その後、ＥｔＯＡｃで抽出した。併せた有機層を水で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、ろ過して真空濃縮した。粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィー法（ＤＣＭ中の２％ＭｅＯＨ）により精製し、白色固体として目的の生成物１７（４４４ｍｇ、２ステップで３１％）を得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 10.07 (s, 1H), 8.58 (s, 1H), 7.96 (d, J = 7.9 Hz, 2H), 7.72 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 4.76 (t, J = 6.7 Hz, 1H), 3.62 - 3.50 (m, 2H), 2.32 (dd, J = 13.5, 6.7 Hz, 2H), 2.12 - 2.02 (m, 1H), 2.00 - 1.90 (m, 1H)。
ステップ３：（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メチル （Ｒ）－２－（（４－（１,３－ジチオラン－２－イル）フェニル）カルバモイル）ピロリジン－１－カルボキシレート（化合物１８）の合成
新しく製造された化合物９（１．９０ｇ, ９．６３ｍｍｏｌ）及びＦｍｏｃ－Ｄ－プロリン（３．２５ｇ、９．６３ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（９．５ｍＬ）中の溶液にＨＯＢＴのＤＭＦ（１Ｍ、９．６ｍＬ）中の溶液及びＤＣＣのＤＣＭ（１Ｍ、９．６ｍＬ）中の溶液を加え、反応混合物を室温で２４ｈ撹拌した。その後、ＥｔＯＡｃ ５０ｍＬを加えて、ガラス漏斗で混合物をろ過した。溶媒を除去した後、残留物をＣＨＣｌ３／ｉ－ＰｒＯＨ（３：１）で希釈し、その後、水、０．１Ｍ ＨＣｌ、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液及び食塩水で洗浄した。有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、ろ過して真空濃縮した。シリカゲルクロマトグラフィー法（ＤＣＭ中の０～０．５％ＭｅＯＨ）により粗生成物を精製し、薄黄色固体として目的の生成物１８（３．１３ｇ、６３％）を得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9.18 (s, 1H), 7.81 - 7.30 (m, 12H), 5.62 (s, 1H), 4.56 - 4.41 (m, 3H), 4.26 (s, 1H), 3.56 - 3.31 (m, 6H), 2.57 (s, 1H), 1.98 (s, 3H)。
ステップ４：（Ｒ）－Ｎ－（４－（１,３－ジチオラン－２－イル）フェニル）ピロリジン－２－カルボキサミド（化合物１９）の合成
化合物１８（１．５１ｇ、２．９２ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１０ｍＬ）中の溶液にピペリジン（２．６ｍＬ）を加え、反応混合物を室温で１ｈ撹拌した。溶媒を除去した後、残留物をＥｔＯＡｃ中に溶解して、食塩水で洗浄した。有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、ろ過して真空濃縮した。シリカゲルクロマトグラフィー法（ＤＣＭ中の０－２％ＭｅＯＨ）により粗生成物を精製し、白色固体として目的の生成物１９（７９０ｍｇ、９２％）を得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9.74 (s, 1H), 7.55 (d, J = 8.6 Hz, 2H), 7.48 (d, J = 8.6 Hz, 2H), 5.63 (s, 1H), 3.85 (dd, J = 9.3, 5.2 Hz, 1H), 3.54 - 3.46 (m, 2H), 3.38 - 3.31 (m, 2H), 3.10 - 3.04 (m, 1H), 3.00 - 2.94 (m, 1H), 2.25 - 2.17 (m, 1H), 2.07 - 1.99 (m, 1H), 1.79 -1.71 (m, 2H)。
ステップ５：（Ｒ）－Ｎ－（４－（１,３－ジチオラン－２－イル）フェニル）－１－（（４－ホルミルベンゾイル）－Ｄ－プロリル）ピロリジン－２－カルボキサミド（化合物２０）の合成
化合物１９（２１０ｍｇ、０．７１ｍｍｏｌ）及び化合物１７（１７６ｍｇ、０．７１ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（５ｍＬ）中の溶液にＥＤＣＩ（１６４ｍｇ、０．８５ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を室温で１６ｈ撹拌した。その後、溶液を真空濃縮し、白色固体２０（３１９．３ｍｇ）を得て、更なる精製をせずに次のステップに用いた。
ステップ６：（Ｒ）－１－（（４－ホルミルベンゾイル）－Ｄ－プロリル）－Ｎ－（４－ホルミルフェニル）ピロリジン－２－カルボキサミド（化合物２１）の合成
化合物２０（３１９．３ｍｇ、０．６１ｍｍｏｌ）のＡｃＯＨ（１２ｍＬ）中の溶液にＳｅＯ２（３３８ｍｇ、３．０５ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を室温で３６ｈ撹拌した。混合物をろ過し、ろ液を減圧蒸発させた。残留物をＤＣＭ中に溶解し、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、ろ過して真空濃縮した。粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィー法（純ＥｔＯＡｃ）により精製し、白色固体として目的の生成物２１（２００．６ｍｇ、２ステップで６３％）を得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 10.07 (d, J = 9.4 Hz, 1H), 9.93 (dd, J = 32.9, 28.7 Hz, 2H), 8.13 (d, J = 8.6 Hz, 0.5H), 7.94 (dd, J = 15.5, 8.1 Hz, 2H), 7.85 (d, J = 8.7 Hz, 0.5H), 7.79 - 7.65 (m, 5H), 4.86 - 4.80 (m, 1.5H), 4.55 (dd, J = 17.1, 7.7 Hz, 0.5H), 3.96 (dd, J = 16.7, 9.0 Hz, 1H), 3.76 - 3.63 (m, 2H), 3.57 - 3.51 (m, 1H), 2.45 - 1.90 (m, 8H)。
ステップ７：（Ｒ）－１－（（４－（６－カルバミイミドイル－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－２－イル）ベンゾイル）－Ｄ－プロリル）－Ｎ－（４－（６－カルバミイミドイル－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－２－イル）フェニル）ピロリジン－２－カルボキサミド（化合物Ｉ－２）の合成
化合物２１（８７．６ｍｇ、０．２０ｍｍｏｌ）、３,４－ジアミノベンズアミジン塩酸塩１４（７３ｍｇ、０．３９ｍｍｏｌ）及びｐ－ベンゾキノン（４２．６ｍｇ、０．３９ｍｍｏｌ）の無水ＥｔＯＨ（８ｍＬ）中の溶液を８ｈ還流して加熱した。反応混合物を室温に冷却して、アセトン（５０ｍＬ）中で０．５ｈ撹拌した。混合物をろ過し、無水エチルエーテルで洗浄して乾燥させ、茶色固体を得た。その後、熱いＭｅＯＨ（１８ｍＬ）とＥｔＯＨ（１８ｍＬ）の１：１混合物に固体を溶解し、ろ過し、体積を１２ｍＬに減少させ、飽和ＨＣｌ－ＥｔＯＨ（１．２ｍＬ）で酸性化した。室温で一晩撹拌した後、混合物をエチルエーテルで希釈し、ろ過して沈殿物を得て、エチルエーテルで洗浄し、真空乾燥させた。粗生成物を分取型逆相ＨＰＬＣ（０．０５％ ＨＣｌを含むＨ２Ｏ中の５～１００％アセトニトリル）により精製し、茶色固体として目的の生成物Ｉ－２（４０．４ｍｇ、２４％）を得た。
1H NMR (400 MHz, メタノール-d4) δ 8.27 - 8.23 (m, 4H), 8.16 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.97 - 7.93 (m, 4H), 7.91 - 7.82 (m, 4H), 4.75 - 4.70 (m, 1H), 4.06 - 3.98 (m, 1H), 3.87 - 3.59 (m, 4H), 2.58 - 2.50 (m, 1H), 2.44 - 2.36 (m, 1H), 2.26 - 1.95 (m, 6H)。
実施例Ｓ３：（Ｓ）－１－（（４－（６－カルバミイミドイル－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－２－イル）ベンゾイル）－Ｄ－プロリル）－Ｎ－（４－（６－カルバミイミドイル－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－２－イル）フェニル）ピロリジン－２－カルボキサミド（化合物Ｉ－３）の合成
ステップ１：（Ｓ）－Ｎ－（４－（１,３－ジチオラン－２－イル）フェニル）－１－（（４－ホルミルベンゾイル）－Ｄ－プロリル）ピロリジン－２－カルボキサミド（化合物２２）の合成
化合物１１（２１３ｍｇ、０．７２ｍｍｏｌ）及び化合物１７（１７９ｍｇ、０．７２ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（５ｍＬ）中の溶液にＥＤＣＩ（１６６ｍｇ、０．８６ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を室温で２０ｈ撹拌した。その後、溶液を真空濃縮し、白色固体２２（２５５ｍｇ）を得て、更なる精製をせずに次のステップに用いた。
ステップ２：（Ｓ）－１－（（４－ホルミルベンゾイル）－Ｄ－プロリル）－Ｎ－（４－ホルミルフェニル）ピロリジン－２－カルボキサミド（化合物２３）の合成
化合物２２（２５５ｍｇ、０．４９ｍｍｏｌ）のＡｃＯＨ（１０ｍＬ）中の溶液にＳｅＯ２（２７０ｍｇ、２．４３ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を室温で３６ｈ撹拌した。混合物をろ過し、ろ液を減圧蒸発させた。残留物をＤＣＭ中に溶解し、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、ろ過して真空濃縮した。シリカゲルクロマトグラフィー法（純ＥｔＯＡｃ）により粗生成物を精製し、白色固体として目的の生成物２３（２１０．５ｍｇ、２ステップで６５％）を得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 10.08 (s, 1H), 9.84 (s, 1H), 9.13 (s, 1H), 7.95 (d, J = 7.8 Hz, 4H), 7.69 (dd, J = 10.5, 8.4 Hz, 4H), 4.82 - 4.76 (m, 2H), 4.25 - 4.19 (m, 1H), 3.73 - 3.59 (m, 3H), 2.51 - 2.46 (m, 1H), 2.32 - 2.10 (m, 6H), 2.01 - 1.94 (m, 1H)。
ステップ３：（Ｓ）－１－（（４－（６－カルバミイミドイル－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－２－イル）ベンゾイル）－Ｄ－プロリル）－Ｎ－（４－（６－カルバミイミドイル－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－２－イル）フェニル）ピロリジン－２－カルボキサミド（化合物Ｉ－３）の合成
化合物２３（７５ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）、３,４－ジアミノベンズアミジン塩酸塩１４（６２．５ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ）及びｐ－ベンゾキノン（３６．５ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ）の無水ＥｔＯＨ（８ｍＬ）中の溶液を８ｈ還流して加熱した。反応混合物を室温に冷却して、アセトン（５０ｍＬ）中で０．５ｈ撹拌した。混合物をろ過し、無水エチルエーテルで洗浄して乾燥させ、茶色固体を得た。その後、熱いＭｅＯＨ（１８ｍＬ）とＥｔＯＨ（１８ｍＬ）の１：１混合物に固体を溶解し、ろ過し、体積を１２ｍＬに減少させ、飽和ＨＣｌ－ＥｔＯＨ（１．２ｍＬ）で酸性化した。室温で一晩撹拌した後、混合物をエチルエーテルで希釈し、ろ過して沈殿物を得て、エチルエーテルで洗浄し、真空乾燥させた。粗生成物を分取型逆相ＨＰＬＣ（０．０５％ ＨＣｌを含むＨ２Ｏ中の５～１００％アセトニトリル）により精製し、茶色固体として目的の生成物Ｉ－３（４４．６ｍｇ、３１％）を得た。
1H NMR (400 MHz, メタノール-d4) δ 8.41 - 8.29 (m, 4H), 8.27 - 8.24 (m, 2H), 8.11 (s, 4H), 8.01 - 7.93 (m, 4H), 5.00 (t, J = 7.1 Hz, 1H), 4.73 - 4.66 (m, 1H), 4.25 - 4.18 (m, 1H), 3.88 - 3.81 (m, 1H), 3.78 - 3.68 (m, 2H), 2.53 - 2.45 (m, 1H), 2.42 - 2.34 (m, 1H), 2.31 - 2.24 (m, 1H), 2.20 - 2.00 (m, 5H)。
実施例Ｓ４：２－（４－（（Ｓ）－１－（（４－（６－カルバモイル－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－２－イル）ベンゾイル）－Ｌ－プロリル）ピロリジン－２－カルボキサミド基）フェニル）－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－６－カルボキサミド（化合物Ｉ－４）の合成
ステップ１：４－アミノ－３－ニトロベンズアミド（化合物２５）の合成
撹拌中の４－アミノ－３－ニトロ安息香酸２４（１ｇ、５．４９ｍｍｏｌ）、ＨＯＢＴ（８１６ｍｇ、６．０４ｍｍｏｌ）及びＥＤＣＩ（１．１６ｇ、６．０５ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（５０ｍｌ）中の懸濁液にＤＩＰＥＡ（１ｍＬ、６．０６ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を室温で１０ｍｉｎ撹拌した。その後、（ＮＨ４）２ＣＯ３（１．５８ｇ、１６．４４ｍｍｏｌ）を一括して加え、得られた懸濁液をさらに２４ｈ撹拌した。反応混合物を真空濃縮し、その後、１：１のＮａＨＣＯ３／Ｈ２Ｏ混合物（４０ｍＬ）を加え、さらに２ｈ撹拌した。懸濁液をろ過して、固体（４０℃、２４ｈ）を真空乾燥させ、茶色固体として目的の生成物２５（８７８．７ｍｇ、８８％）を得た。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.57 (s, 1H), 7.94 (s, 1H), 7.86 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.76 (s, 2H), 7.25 (s, 1H), 7.01 (d, J = 8.9 Hz, 1H)。
ステップ２：３,４－ジアミノベンズアミド（化合物２６）の合成
化合物２５（４００ｍｇ、２．２１ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２ｍＬ）及びＥｔＯＨ（３ｍＬ）中の溶液にＰｄ／Ｃ（７８ｍｇ、１０％）を加えた。その後、フラスコを真空吸引して、Ｈ２で３回パージし、Ｈ２で満たして、室温で２４ｈ撹拌した。反応混合物を珪藻土パッドでろ過し、ＥｔＯＨで洗浄した。ろ液を減圧して濃縮し、粗生成物を得て、シリカゲルクロマトグラフィー法（ＤＣＭ中の０．５％ＭｅＯＨ）により精製し、茶色固体として目的の生成物２６（２８９．２ｍｇ、８７％）を得た。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.39 (s, 1H), 7.05 (s, 1H), 6.97 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.71 (s, 1H), 6.45 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.94 (s, 2H), 4.50 (s, 2H)。
ステップ３：２－（４－（（Ｓ）－１－（（４－（６－カルバモイル－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－２－イル）ベンゾイル）－Ｌ－プロリル）ピロリジン－２－カルボキサミド基）フェニル）－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－６－カルボキサミド（化合物Ｉ－４）の合成
化合物１３（９９．８ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）、３,４－ジアミノベンズアミド２６（６７．７ｍｇ、０．４５ｍｍｏｌ）及びｐ－ベンゾキノン（４８．６ｍｇ、０．４５ｍｍｏｌ）の無水ＥｔＯＨ（９ｍＬ）中の溶液を８ｈ還流して加熱した。反応混合物を室温に冷却して、真空濃縮して茶色固体を得た。その後、熱いＭｅＯＨ（２０ｍＬ）とＥｔＯＨ（２０ｍＬ）の１：１混合物に固体を溶解し、ろ過し、体積を１３．５ｍＬに減少させ、飽和ＨＣｌ－ＥｔＯＨ（３ｍＬ）で酸性化した。室温で一晩撹拌した後、混合物をエチルエーテルで希釈し、ろ過して沈殿物を得て、エチルエーテルで洗浄し、真空乾燥させた。粗生成物を分取型逆相ＨＰＬＣ（０．０５％ ＨＣｌを含むＨ２Ｏ中の５～１００％アセトニトリル）により精製し、濃緑色固体として目的の生成物Ｉ－４（６７ｍｇ、３５％）を得た。
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 10.82 (s, 1H), 10.72 (s, 0.5H), 8.52 - 8.21 (m, 14H), 8.08 -7.76 (m, 12H), 7.66 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.52 (d, J = 14.2 Hz, 3H), 4.83 (dd, J = 8.3, 4.5 Hz, 1H), 4.75 (dd, J = 8.4, 3.5 Hz, 0.5H), 4.60 (dd, J = 8.3, 4.8 Hz, 1H), 4.17 (dd, J = 8.1, 4.5 Hz, 0.5H), 3.87 - 3.79 (m, 1H), 3.71 - 3.48 (m, 4H), 3.40 - 3.32 (m, 0.5H), 3.08 - 3.00 (m, 0.5H), 2.39 - 2.33 (m, 1H), 2.30 - 2.21 (m, 1H), 2.10 - 1.76 (m, 9H), 1.74 - 1.63 (m, 1H)。
実施例Ｓ５：（Ｓ）－１－（（４－（１,７－ジヒドロイミダゾ［４,５－ｆ］インダゾール－６－イル）ベンゾイル）－Ｌ－プロリル）－Ｎ－（４－（１,７－ジヒドロイミダゾ［４,５－ｆ］インダゾール－６－イル）フェニル）ピロリジン－２－カルボキサミド（化合物Ｉ－５）の合成
ステップ１：５,６－ジニトロ－１Ｈ－インダゾール（化合物２８）の合成
６－ニトロ－１Ｈ－インダゾール２７（１ｇ、６．１３ｍｍｏｌ）の濃Ｈ２ＳＯ４（１４ｍＬ）中の混合物を０℃に冷却し、０℃で撹拌中の濃ＨＮＯ３（０．４２ｍＬ）の濃Ｈ２ＳＯ４（６ｍＬ）中の溶液にゆっくりと加えた。反応混合物を室温で１６ｈ撹拌し、その後、氷上に注入した。固体を濾取して、水で洗浄し、ＣＨＣｌ３／ｉ－ＰｒＯＨ（３：１）に溶解した。その後、混合物を食塩水、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、ろ過して真空濃縮し、黄色固体として目的の生成物２８（５９５ｍｇ、４７％）を得た。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 14.35 (s, 1H), 8.85 (s, 1H), 8.54 (s, 1H), 8.45 (s, 1H)。
ステップ２：１Ｈ－インダゾール－５,６－ジアミン（化合物２９）の合成
化合物２８（３００ｍｇ、１．４４ｍｍｏｌ）及びＰｄ／Ｃ（３０ｍｇ、１０％）のＭｅＯＨ（９ｍＬ）中の混合物にギ酸アンモニウム（９００ｍｇ、１４．２７ｍｍｏｌ）を加え、混合物を４ｈ還流した。その後、珪藻土パッドでろ過して触媒を除去し、ＭｅＯＨで洗浄した。ろ液を減圧して濃縮し、粗生成物を得て、シリカゲルクロマトグラフィー（ＤＣＭ中の２～１０％ＭｅＯＨ）により精製し、茶色固体として目的の生成物２９（１２１．４ｍｇ、５７％）を得た。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 12.02 (s, 1H), 7.52 (s, 1H), 6.71 (s, 1H), 6.56 (s, 1H), 4.80 (s, 2H), 4.29 (s, 2H)。
ステップ３：（Ｓ）－１－（（４－（１,７－ジヒドロイミダゾ［４,５－ｆ］インダゾール－６－イル）ベンゾイル）－Ｌ－プロリル）－Ｎ－（４－（１,７－ジヒドロイミダゾ［４,５－ｆ］インダゾール－６－イル）フェニル）ピロリジン－２－カルボキサミド（化合物Ｉ－５）の合成
化合物１３（７７．４ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）、１Ｈ－インダゾール－５,６－ジアミン２９（５１．２ｍｇ、０．３４ｍｍｏｌ）及びｐ－ベンゾキノン（３７．７ｍｇ、０．３４ｍｍｏｌ）の無水ＥｔＯＨ（７ｍＬ）中の溶液を８ｈ還流して加熱した。反応混合物を室温に冷却して、真空濃縮して茶色固体を得た。その後、熱いＭｅＯＨ（１５ｍＬ）とＥｔＯＨ（１５ｍＬ）の１：１混合物に固体を溶解し、ろ過し、体積を１０．５ｍＬに減少させ、飽和ＨＣｌ－ＥｔＯＨ（２．１ｍＬ）で酸性化した。室温で一晩撹拌した後、混合物をエチルエーテルで希釈し、ろ過して沈殿物を得て、エチルエーテルで洗浄し、真空乾燥させた。粗生成物を分取型逆相ＨＰＬＣ（０．０５％ ＨＣｌを含むＨ２Ｏ中の５～１００％アセトニトリル）により精製し、茶色固体として目的の生成物Ｉ－５（１６．８ｍｇ、１２％）を得た。
1H NMR (600 MHz, DMSO-d6) δ 10.85 (s, 1H), 10.76 (s, 0.5H), 8.55 - 8.08 (m, 16H), 7.97 (d, J = 8.6 Hz, 2H), 7.93 - 7.80 (m, 8H), 7.70 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 4.84 (dd, J = 8.3, 4.5 Hz, 1H), 4.77 (dd, J = 8.0, 3.7 Hz, 0.5H), 4.59 (dd, J = 8.4, 4.7 Hz, 1H), 4.16 (dd, J = 8.2, 4.3 Hz, 0.5H), 3.86 - 3.81 (m, 1H), 3.70 - 3.57 (m, 4H), 3.40 - 3.36 (m, 0.5H), 3.10 - 3.05 (m, 0.5H), 2.40 - 2.34 (m, 1H), 2.30 - 2.23 (m, 1H), 2.11 - 2.05 (m, 1H), 2.04 - 1.99 (m, 1H), 1.98 - 1.84 (m, 7H), 1.74 - 1.66 (m, 1H)。
実施例Ｓ６：（Ｓ）－１－（（４－（６－カルバミイミドイル－５－メチル－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－２－イル）ベンゾイル）－Ｌ－プロリル）－Ｎ－（４－（６－カルバミイミドイル－５－メチル－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－２－イル）フェニル）ピロリジン－２－カルボキサミド（化合物Ｉ－６）の合成
ステップ１：Ｎ－（４－シアノ－３－メチルフェニル）アセトアミド（化合物３１）の合成
４－アミノ－２－メチルベンゾニトリル３０（４．６８ｇ、３５．４１ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（１４５ｍＬ）中の溶液にＡｃ２Ｏ（４．３２ｍＬ、４２．４９ｍｍｏｌ）を滴下し、反応混合物を室温で１８ｈ撹拌した。反応完了後、溶媒を減圧除去して、粗生成物を得て、シリカゲルクロマトグラフィー（純ＤＣＭ）により精製し、白色固体として目的の生成物３１（５．９８ｇ、９７％）を得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.56 (s, 1H), 7.54 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.40 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.32 (s, 1H), 2.52 (s, 3H), 2.21 (s, 3H)。
ステップ２：Ｎ－（４－シアノ－５－メチル－２－ニトロフェニル）アセトアミド（化合物３２）の合成
０℃で、ＫＮＯ３（３ｇ、２９．６７ｍｍｏｌ）の濃Ｈ２ＳＯ４（５０ｍＬ）中の溶液に化合物３１（２．６ｇ、１４．９２ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を０℃で３ｈ撹拌し、その後、氷上に注入した。得た沈殿をＭｅＯＨから再結晶化し、黄色固体として目的の生成物３２（２．３９ｇ、７３％）を得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 10.53 (s, 1H), 8.86 (s, 1H), 8.48 (s, 1H), 2.61 (s, 3H), 2.32 (s, 3H)。
ステップ３：４－アミノ－２－メチル－５－ニトロベンゾニトリル（化合物３３）の合成
化合物３２（１．１７ｇ、５．３４ｍｍｏｌ）のＨ２ＳＯ４（７０ｍＬ、１０％）中の混合物を３ｈ還流して加熱した。室温に冷却した後、混合物をＣＨＣｌ３／ｉ－ＰｒＯＨ（３：１）で抽出し、併せた有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、ろ過して真空濃縮した。粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィー（純ＤＣＭ）により精製し、黄色固体として目的の生成物３３（９２０ｍｇ、９７％）を得た。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.38 (s, 1H), 7.98 (s, 2H), 6.93 (s, 1H), 2.35 (s, 3H)。
ステップ４：エチル ４－アミノ－２－メチル－５－ニトロベンズイミダート 塩酸塩（化合物３４）の合成
乾燥ＨＣｌガスを氷塩浴中で冷却した化合物３３（３５４ｍｇ、２．００ｍｍｏｌ）のＥｔＯＨ（２０ｍＬ）の撹拌中の懸濁液に通し、反応混合物をＨＣｌで飽和にした後、混合物を室温で４ｄ撹拌した。その後、減圧下反応混合物を濃縮して、黄色の３３と３４の混合物（４８２．９ｍｇ）を生成し、更なる精製をせずに次のステップに用いた。
ステップ５：４－アミノ－２－メチル－５－ニトロベンズイミダミド塩酸塩（化合物３５）の合成
化合物３３と化合物３４（４８２．９ｍｇ、１．８６ｍｍｏｌ）のＥｔＯＨ（４ｍＬ）中の混合物にＮＨ３（ＭｅＯＨ中の７Ｍ、６ｍＬ）を加え、反応混合物を一晩還流した。その後、混合物を真空濃縮して粗生成物を得て、シリカゲルクロマトグラフィーにより精製し（ＤＣＭ中の１０～２０％ＭｅＯＨ）、未反応の化合物３３を除去し、化合物３５を含有するオレンジ色残留物（３０６．３ｍｇ、２ステップで６６％）を得た。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.18 (s, 2H), 9.04 (s, 1H), 8.14 (s, 1H), 7.85 (s, 2H), 6.94 (s, 1H), 2.31 (s, 3H)。
ステップ６：４,５－ジアミノ－２－メチルベンズイミダミド塩酸塩（化合物３６）の合成
化合物３５（３０４ｍｇ、１．３２ｍｍｏｌ）のＥｔＯＨ（３０ｍＬ）中の溶液にＰｄ／Ｃ（６０．８ｍｇ、１０％）を加えた。その後、フラスコを真空吸引して、Ｈ２で３回パージし、Ｈ２で満たし、室温で２４ｈ撹拌した。反応混合物を珪藻土パッドでろ過し、ＭｅＯＨで洗浄した。ろ液を減圧濃縮し、黄色固体３６（２８０ｍｇ、定量）を得た。
1H NMR (400 MHz, メタノール-d4) δ 6.81 (s, 1H), 6.60 (s, 1H), 2.29 (s, 3H)。
ステップ７：（Ｓ）－１－（（４－（６－カルバミイミドイル－５－メチル－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－２－イル）ベンゾイル）－Ｌ－プロリル）－Ｎ－（４－（６－カルバミイミドイル－５－メチル－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－２－イル）フェニル）ピロリジン－カルボキサミド（化合物Ｉ－６）の合成
化合物１３（６１．４ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ）、４,５－ジアミノ－２－メチルベンズイミダミド塩酸塩３６（５５．１ｍｇ、０．２７ｍｍｏｌ）及びｐ－ベンゾキノン（２９．９ｍｇ、０．２７ｍｍｏｌ）の無水ＥｔＯＨ（６ｍＬ）中の溶液を１２ｈ還流して加熱した。反応混合物を室温に冷却して、アセトン（５０ｍＬ）中で０．５ｈ撹拌した。混合物をろ過し、無水エチルエーテルで洗浄して乾燥させ、茶色固体を得た。その後、熱いＭｅＯＨ（１３ｍＬ）とＥｔＯＨ（１３ｍＬ）の１：１混合物に固体を溶解し、ろ過し、体積を９ｍＬに減少させ、飽和ＨＣｌ－ＥｔＯＨ（０．９ｍＬ）で酸性化した。室温で一晩撹拌した後、混合物をエチルエーテルで希釈し、ろ過して沈殿物を得て、エチルエーテルで洗浄し、真空乾燥させた。粗生成物を分取型逆相ＨＰＬＣ（０．０５％ ＨＣｌを含むＨ２Ｏ中の５～１００％アセトニトリル）により精製し、茶色固体として目的の生成物Ｉ－６（２６．０ｍｇ、２１％）を得た。
1H NMR (400 MHz, メタノール-d4) δ 9.53 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 9.21 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 8.30 - 8.27 (m, 2H), 8.20 - 8.16 (m, 2H), 8.07 - 8.00 (m, 3H), 7.97 - 7.84 (m, 3H), 4.97 (dd, J = 8.2, 5.6 Hz, 1H), 4.69 (dd, J = 8.2, 4.8 Hz, 1H), 4.05 - 3.98 (m, 1H), 3.86 - 3.77 (m, 1H), 3.71 - 3.56 (m, 2H), 2.67 (d, J = 4.6 Hz, 6H), 2.56 - 2.47 (m, 1H), 2.44 - 2.36 (m, 1H), 2.28 - 1.94 (m, 6H)。
実施例Ｓ７：ヘキシル （（２－（４－（（Ｓ）－１－（（４－（６－（Ｎ－（（ヘキシルオキシ）カルボニル）カルバミイミドイル）－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－２－イル）ベンゾイル）－Ｌ－プロリル）ピロリジン－２－カルボキサミド）フェニル）－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－６－イル）（イミノ）メチル）カルバメート（化合物Ｉ－７）の合成
ステップ１：ヘキシル （（３,４－ジアミノフェニル）（イミノ）メチル）カルバメート（化合物３８）の合成
化合物１４（１．２５ｇ、６．７０ｍｍｏｌ）のアセトン（５ｍＬ）中の溶液を氷／水浴で０℃に冷却し、その後、ＮａＯＨ溶液（５ｍＬ、１６ｗｔ％）及び化合物３７（１．１ｍＬ、６．７０ｍｍｏｌ）をゆっくりと加え、反応混合物を０℃でさらに１ｈ撹拌した。室温に冷却した後、混合物を減圧濃縮し、ＣＨＣｌ３／ｉ－ＰｒＯＨ（３：１）で希釈し、その後、水で洗浄した。有機層を分離して、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、ろ過して真空濃縮した。粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィー（ＤＣＭ中の２％ＭｅＯＨ）により精製し、薄黄色固体として目的の生成物３８（９２６．３ｍｇ、５０％）を得た。
1H NMR (400 MHz, メタノール-d4) δ 7.23 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 7.19 (dd, J = 8.2, 2.1 Hz, 1H), 6.69 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 4.10 (t, J = 6.7 Hz, 2H), 1.72 - 1.65 (m, 2H), 1.47 - 1.39 (m, 2H), 1.37 - 1.32 (m, 4H), 0.92 (t, J = 6.9 Hz, 3H)。
ステップ２：ヘキシル （（２－（４－（（Ｓ）－１－（（４－（６－（Ｎ－（（ヘキシルオキシ）カルボニル）カルバミイミドイル）－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－２－イル）ベンゾイル）－Ｌ－プロリル）ピロリジン－２－カルボキサミド）フェニル）－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－６－イル）（イミノ）メチル）カルバメート（化合物Ｉ－７）の合成
化合物１３（３７．８ｍｇ、０．０８ｍｍｏｌ）、ヘキシル （（３,４－ジアミノフェニル）（イミノ）メチル）カルバメート３８（４７．０ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ）及びｐ－ベンゾキノン（１８．４ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ）の無水ＥｔＯＨ（１０ｍＬ）中の溶液を１２ｈ還流して加熱した。反応混合物を室温に冷却して、真空濃縮して茶色固体を得た。その後、熱いＭｅＯＨ（７．５ｍＬ）とＥｔＯＨ（７．５ｍＬ）の１：１混合物に固体を溶解し、ろ過し、体積を５ｍＬに減少させ、飽和ＨＣｌ－ＥｔＯＨ（１ｍＬ）で酸性化した。室温で一晩撹拌した後、混合物をエチルエーテルで希釈し、ろ過して沈殿物を得て、エチルエーテルで洗浄し、真空乾燥させた。粗生成物を分取型逆相ＨＰＬＣ（０．０５％ ＨＣｌを含むＨ２Ｏ中の５～１００％アセトニトリル）により精製し、茶色固体として目的の生成物Ｉ－７（１９．３ｍｇ、２４％）を得た。
1H NMR (400 MHz, メタノール-d4) δ 8.29 - 8.13 (m, 6H), 7.98 - 7.76 (m, 8H), 4.99 - 4.94 (m, 1H), 4.68 (dd, J = 8.3, 4.7 Hz, 1H), 4.41 (td, J = 6.7, 2.5 Hz, 4H), 4.07 - 3.98 (m, 1H), 3.86 - 3.77 (m, 1H), 3.74 - 3.59 (m, 2H), 2.55 - 2.33 (m, 2H), 2.27 - 1.93 (m, 6H), 1.81 (p, J = 6.8 Hz, 4H), 1.47 (p, J = 6.8 Hz, 4H), 1.38 (h, J = 3.5 Hz, 8H), 0.96 - 0.91 (t, J = 6.9 Hz, 6H)。
実施例Ｓ８：４－（４－（６－カルバミイミドイル－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－２－イル）ベンズアミド）－Ｎ－（（４－（６－カルバミイミドイル－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－２－イル）フェニル）カルバモイル）－１－メチル－１Ｈ－ピロール－３－イル）－１－メチル－１Ｈ－ピロール－２－カルボキサミド（化合物Ｉ－８）の合成
ステップ１：２－（４－ニトロフェニル）－１,３－ジオキソラン（化合物４０）の合成
４－ニトロベンズアルデヒド６（３．４６ｇ、２２．９０ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（９０ｍＬ）中の溶液にエタン－１,２－ジオール３９（６．６ｍＬ、０．１２ｍｏｌ）を加え、次に、三フッ化ホウ素ジエチルエーテル（０．６ｍＬ）を加えた。室温で９ｈ撹拌した後、溶液を１０％ ＮａＯＨ、水及び食塩水で洗浄した。得た明るい黄色の溶液を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、ろ過して真空濃縮し、黄色固体として目的の生成物４０（４．１４ｇ、９３％）を得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.24 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.66 (d, J = 8.6 Hz, 2H), 5.90 (s, 1H), 4.14 - 4.05 (m, 4H)。
ステップ２：４－（１,３－ジオキソラン－２－イル）アニリン（化合物４１）の合成
ＰｔＯ２（５６５ｍｇ、２．４９ｍｍｏｌ）とＮａＨＣＯ３（１．０５ｇ、１２．５０ｍｍｏｌ）の混合物に４０（２．４５ｇ、１２．５５ｍｍｏｌ）の無水ＥｔＯＨ（１５０ｍＬ）中の溶液を加えた。その後、フラスコを真空吸引して、Ｈ２で３回パージし、Ｈ２で満たし、室温で２ｈ撹拌した。その後、反応混合物を珪藻土パッドでろ過し、ＭｅＯＨで洗浄した。ろ液を減圧して濃縮し、粗生成物を得て、ＤＣＭに溶解して、水で洗浄した。有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、ろ過し、真空濃縮し、薄黄色油状物として目的の生成物４１（２．０３ｇ、９８％）を得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.28 -7.26 (m, 2H), 6.70 - 6.66 (m, 2H), 5.70 (s, 1H), 4.15 - 4.10 (m, 2H), 4.03 - 3.98 (m, 2H), 3.72 (s, 2H)。
ステップ３：２,２,２－トリクロロ－１－（１－メチル－１Ｈ－ピロール－２－イル）乙－１－オン（化合物４３）の合成
２,２,２－トリクロロアセチルクロリド（１６．４５ｇ、９０．４７ｍｍｏｌ）の無水エチルエーテル（２５ｍＬ）中の溶液に１－メチル－１Ｈ－ピロール４２（７．３４ｇ、９０．４８ｍｍｏｌ）の無水エチルエーテル（２５ｍＬ）中の溶液を１滴ずつ加えた。反応混合物を室温で１．５ｈ撹拌した。その後、混合物にＫ２ＣＯ３溶液（２０ｍＬ、２０ｍｍｏｌ）を滴下してクエンチングし、ＥｔＯＡｃで抽出し、併せた有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、ろ過し、真空濃縮し、粗生成物を得て、ヘキサンで洗浄し、真空下で乾燥させ、白色固体として目的の生成物４３（１３．２４ｇ、６５％）を得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.51 (dd, J = 4.4, 1.5 Hz, 1H), 6.97 (s, 1H), 6.23 (dd, J = 4.4, 2.4 Hz, 1H), 3.98 (s, 3H)。
ステップ４：２,２,２－トリクロロ－１－（１－メチル－４－ニトロ－１Ｈ－ピロール－２－イル）エタン－１－オン（化合物４４）の合成
発煙硝酸（４ｍＬ）を撹拌中の化合物４３（１０．６７ｇ、４７．１１ｍｍｏｌ）のＡｃ２Ｏ（５０ｍＬ）中の溶液に滴下し、該溶液を氷／ＮａＣｌ浴で－５℃に保持した。添加完了後、温度を室温に徐々に上昇し、さらに３ｈ撹拌した。その後、反応混合物を氷水（２００ｍＬ）に注入して、ＥｔＯＡｃで抽出した。併せた有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、ろ過して真空濃縮した。シリカゲルクロマトグラフィー（石油エーテル中の１０～５０％ ＥｔＯＡｃ）により粗生成物を精製し、淡い黄色固体として目的の生成物４４、（９．４６ｇ、７４％）を得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.94 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 7.75 (d, J = 1.3 Hz, 1H), 4.05 (s, 3H)。
ステップ５：１－メチル－４－ニトロ－１Ｈ－ピロール－２－カルボン酸（化合物４５）の合成
ＮａＯＨ（１．３７ｇ、３４．２５ｍｍｏｌ）の水（６０ｍＬ）中の溶液に化合物４４（３．１０ｇ、１１．４２ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温で１２ｈ撹拌した。反応完了後、反応混合物をＥｔＯＡｃで抽出した、水層を２Ｍ ＨＣｌでｐＨ＝３に酸性化した。得られた固体をろ過して、真空下で乾燥させ、白色固体として目的の生成物４５（１．６０ｇ、８２％）を得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.65 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.57 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 4.01 (s, 3H)。
ステップ６：Ｎ－（４－（１,３－ジオキソラン－２－イル）フェニル）－１－メチル－４－ニトロ－１Ｈ－ピロール－２－カルボキサミド（化合物４６）の合成
撹拌中の化合物４５（７６１ｍｇ、４．４７ｍｍｏｌ）及びＨＢＴＵ（２．０４ｇ、５．３８ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２０ｍＬ）中の溶液にＤＩＰＥＡ（１．５ｍＬ、９．０８ｍｍｏｌ）を加えた。室温で１０ｍｉｎ撹拌した後、化合物４１（７３９ｍｇ、４．４７ｍｍｏｌ）を加え、混合物をさらに１８ｈ撹拌した。溶媒を除去した後、残留物をＣＨＣｌ３／ｉ－ＰｒＯＨ（３：１）に溶解し、水で洗浄した。その後、有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、ろ過して真空濃縮し、黄色固体４６（１．４２ｇ）を得て、更なる精製をせずに次のステップに用いた。
ステップ７：Ｎ－（４－（１,３－ジオキソラン－２－イル）フェニル）－４－アミノ－１－メチル－１Ｈ－ピロール－２－カルボキサミド（化合物４７）の合成
化合物４６（１．４２ｇ、４．４７ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５０ｍＬ）中の溶液にＰｄ／Ｃ（１．４２ｇ、１０％）を加えた。その後、フラスコを真空吸引して、Ｈ２で３回パージし、Ｈ２で満たし、室温で１８ｈ撹拌した。反応混合物を珪藻土パッドでろ過し、ＭｅＯＨで洗浄した。ろ液を減圧して濃縮し、粗生成物を得て、シリカゲルクロマトグラフィー（ＤＣＭ中の０．５－１％ＭｅＯＨ）により精製し、淡黄色固体として目的の生成物４７（７４１．３ｍｇ、２ステップで５８％）を得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.56 (dd, J = 5.2, 3.2 Hz, 3H), 7.44 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 6.34 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 6.24 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 5.78 (s, 1H), 4.14 - 4.09 (m, 2H), 4.05 - 4.00 (m, 2H), 3.85 (s, 3H), 2.93 (s, 2H)。
ステップ８：Ｎ－（４－（１,３－ジオキソラン－２－イル）フェニル）－１－メチル－４－（１－メチル－４－ニトロ－１Ｈ－ピロール－２－カルボキサミド）－１Ｈ－ピロール－２－カルボキサミド（化合物４８）の合成
撹拌中の化合物４５（２０７ｍｇ、１．２２ｍｍｏｌ）及びＨＢＴＵ（５５５ｍｇ、１．４６ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１５ｍＬ）中の溶液にＤＩＰＥＡ（０．５ｍＬ、３．０３ｍｍｏｌ）を加えた。室温で１０ｍｉｎ撹拌した後、化合物４７（３５０ｍｇ、１．２２ｍｍｏｌ）を加え、混合物をさらに１８ｈ撹拌した。溶媒を除去した後、残留物をＣＨＣｌ３／ｉ－ＰｒＯＨ（３：１）に溶解し、そして水で洗浄した。その後、有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、ろ過して真空濃縮し、黄色固体４８（５３０ｍｇ）を得て、更なる精製をせずに次のステップに用いた。
ステップ９：Ｎ－（４－（１,３－ジオキソラン－２－イル）フェニル）－４－（４－アミノ－１－メチル－１Ｈ－ピロール－２－カルボキサミド）－１－メチル－１Ｈ－ピロール－２－カルボキサミド（化合物４９）の合成
化合物４８（５３０ｍｇ、１．２１ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５０ｍＬ）中の溶液にＰｄ／Ｃ（８００ｍｇ、１０％）を加えた。その後、フラスコを真空吸引して、Ｈ２で３回パージし、Ｈ２で満たして、室温で２４ｈ撹拌した。反応混合物を珪藻土パッドでろ過し、ＭｅＯＨで洗浄した。減圧下ろ液を濃縮し、粗生成物を得て、シリカゲルクロマトグラフィー（ＤＣＭ中の２－５％ＭｅＯＨ）により精製し、黄色固体として目的の生成物４９（２９８．２ｍｇ、２ステップで６０％）を得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.62 (s, 1H), 7.58 (d, J = 8.6 Hz, 2H), 7.46 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.34 (s, 1H), 7.14 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 6.76 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 6.35 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 6.18 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 5.80 (s, 1H), 4.15 - 4.12 (m, 2H), 4.07 - 4.01 (m, 2H), 3.94 (s, 3H), 3.87 (s, 3H), 2.97 (s, 2H)。
ステップ１０：４－（４－ホルミルベンズアミド）－Ｎ－（５－（（４－ホルミルフェニル）カルバモイル）－１－メチル－１Ｈ－ピロール－３－イル）－１－メチル－１Ｈ－ピロール－２－カルボキサミド（化合物５０）の合成
０℃で、化合物４９（１００ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（６ｍＬ）及びＴＥＡ（６０ μＬ）中の溶液に化合物２（４１ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（６ｍＬ）中の溶液をゆっくりと加えた。その後、混合物を室温に昇温して、１２ｈ撹拌した。溶媒を除去した後、残留物をＥｔＯＡｃに溶解し、ＨＣｌ水溶液（１Ｍ、３×２０ｍＬ）及び飽和ＮａＨＣＯ３水溶液で洗浄した。その後、有機部分を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、ろ過して真空濃縮した。粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィー（ＤＣＭ中の２－５％ＭｅＯＨ）により精製し、薄黄色固体として目的の生成物５０（７２．８ｍｇ、２ステップで６０％）を得た。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.60 (s, 1H), 10.27 (s, 1H), 10.11 (s, 1H), 10.08 (s, 1H), 9.89 (s, 1H), 8.13 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 8.05 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 7.99 (d, J = 8.6 Hz, 2H), 7.87 (d, J = 8.6 Hz, 2H), 7.39 - 7.36 (m, 2H), 7.27 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 7.15 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 3.90 (s, 3H), 3.88 (s, 3H)。
ステップ１１：４－（４－（６－カルバミイミドイル－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－２－イル）ベンズアミド）－Ｎ－（５－（（４－（６－カルバミイミドイル－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－２－イル）フェニル）カルバモイル）－１－メチル－１Ｈ－ピロール－３－イル）－１－メチル－１Ｈ－ピロール－２－カルボキサミド（化合物Ｉ－８）の合成
化合物５０（３３．４ｍｇ、０．０６７ｍｍｏｌ）、３,４－ジアミノベンズイミダミド塩酸塩１４（２５ｍｇ、０．１３ｍｍｏｌ）及びｐ－ベンゾキノン（１４．６ｍｇ、０．１３ｍｍｏｌ）の無水ＥｔＯＨ（６ｍＬ）中の溶液を１２ｈ還流して加熱した。反応混合物を室温に冷却して、アセトン（３０ｍＬ）中で０．５ｈ撹拌した。混合物をろ過し、無水エチルエーテルで洗浄して乾燥させ、茶色固体を得た。その後、熱いＭｅＯＨ（５ｍＬ）とＥｔＯＨ（５ｍＬ）の１：１混合物に固体を溶解し、ろ過し、体積を４ｍＬに減少させ、飽和ＨＣｌ－ＥｔＯＨ（０．６ｍＬ）で酸性化した。室温で一晩撹拌した後、混合物をエチルエーテルで希釈し、ろ過して沈殿物を得て、エチルエーテルで洗浄し、真空乾燥させた。粗生成物を分取型逆相ＨＰＬＣ（０．０５％ ＨＣｌを含むＨ２Ｏ中の５～１００％アセトニトリル）により精製し、茶色固体として目的の生成物Ｉ－８（２１．９ｍｇ、３６％）を得た。
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 10.68 (s, 1H), 10.38 (s, 1H), 10.11 (s, 1H), 9.63 (s, 2H), 9.54 (s, 2H), 9.35 (s, 2H), 9.28 (s, 2H), 8.56 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 8.50 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 8.29 (d, J = 5.4 Hz, 2H), 8.24 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 8.10 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.99 - 7.89 (m, 3H), 7.84 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.45 - 7.31 (m, 3H), 7.23 (d, J = 10.2 Hz, 1H), 3.90 (d, J = 4.5 Hz, 6H)。
実施例Ｓ９：４－（３－（４－（６－カルバミイミドイル－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－２－イル）ベンズアミド）プロピオンアミド）－Ｎ－（４－（６－カルバミイミドイル－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－２－イル）フェニル）－１－メチル－１Ｈ－ピロール－２－カルボキサミド（化合物Ｉ－９）の合成
ステップ１：（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メチル （３－（（５－（（４－（１,３－ジオキソラン－２－イル）フェニル）カルバモイル）－１－メチル－１Ｈ－ピロール－３－イル）アミノ）３－オキソプロピル）カルバメート（化合物５２）の合成
撹拌中のＦｍｏｃ－β－アラニン５１（１１５ｍｇ、０．３７ｍｍｏｌ）及びＨＢＴＵ（１６７ｍｇ、０．４４ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２０ｍＬ）中の溶液にＤＩＰＥＡ（０．２ｍＬ、１．２１ｍｍｏｌ）を加えた。室温で１０分間撹拌した後、化合物４７（１０５ｍｇ、０．３７ｍｍｏｌ）を加え、混合物をさらに１４ｈ撹拌した。溶媒を除去した後、残留物をＣＨＣｌ３／ｉ－ＰｒＯＨ（３：１）に溶解し、そして水で洗浄した。その後、有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、ろ過して真空濃縮し、オレンジ色固体５２（２１２ｍｇ）を得て、更なる精製をせずに次のステップに用いた。
ステップ２：Ｎ－（４－（１,３－ジオキソラン－２－イル）フェニル）－４－（３－アミノプロピオンアミド）－１－メチル－１Ｈ－ピロール－２－カルボキサミド（化合物５３）の合成
化合物５２（２１２ｍｇ、０．３６ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１０ｍＬ）中の溶液にピペリジン（０．３４ｍＬ）を加え、反応混合物を室温で１ｈ撹拌した。溶媒を除去した後、粗残留物５３（１３０ｍｇ）をさらに精製せずに、次のステップに用いた。
ステップ３：４－（３－（４－ホルミルベンズアミド）プロピオンアミド）－Ｎ－（４－ホルミルフェニル）－１－メチル－１Ｈ－ピロール－２－カルボキサミド（化合物５４）の合成
０℃で、化合物５３（１３０ｍｇ、０．３６ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（９ｍＬ）及びＴＥＡ（９０μＬ）中の溶液に化合物２（６２ｍｇ、０．３７ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（９ｍＬ）中の溶液をゆっくりと加えた。その後、混合物を室温に昇温して、さらに２４ｈ撹拌した。溶媒を除去した後、残留物をＥｔＯＡｃに溶解し、ＨＣｌ水溶液（１Ｍ、３×２０ｍＬ）及び飽和ＮａＨＣＯ３水溶液で洗浄した。その後、有機部分を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、ろ過して真空濃縮した。シリカゲルクロマトグラフィー（ＤＣＭ中の０－２％ＭｅＯＨ）により粗生成物を精製し、白色固体として目的の生成物５４（５４．８ｍｇ、３ステップで３４％）を得た。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.21 (s, 1H), 10.07 (s, 1H), 10.00 (s, 1H), 9.88 (s, 1H), 8.83 (t, J = 5.4 Hz, 1H), 8.04 -7.95 (m, 6H), 7.86 (d, J = 8.7 Hz, 2H), 7.29 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 7.06 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 3.85 (s, 3H), 3.57 (dd, J = 12.7, 6.8 Hz, 2H), 2.59 (t, J = 7.0 Hz, 2H)。
ステップ４：４－（３－（４－（６－カルバミイミドイル－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－２－イル）ベンズアミド）プロピオンアミド）－Ｎ－（４－（６－カルバミイミドイル－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－２－イル）フェニル）－１－メチル－１Ｈ－ピロール－２－カルボキサミド（化合物Ｉ－９）の合成
化合物５４（８０ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ）、３,４－ジアミノベンズイミダミド塩酸塩１４（６７ｍｇ、０．３６ｍｍｏｌ）及びｐ－ベンゾキノン（３９ｍｇ、０．３６ｍｍｏｌ）の無水ＥｔＯＨ（７ｍＬ）中の溶液を１０ｈ還流して加熱した。反応混合物を室温に冷却して、アセトン（４０ｍＬ）中で０．５ｈ撹拌した。混合物をろ過し、無水エチルエーテルで洗浄して乾燥させ、茶色固体を得た。その後、熱いＭｅＯＨ（１５ｍＬ）とＥｔＯＨ（１５ｍＬ）の１：１混合物に固体を溶解し、ろ過し、体積を１０ｍＬに減少させ、飽和ＨＣｌ－ＥｔＯＨ（１ｍＬ）で酸性化した。室温で一晩撹拌した後、混合物をエチルエーテルで希釈し、ろ過して沈殿物を得て、エチルエーテルで洗浄し、真空乾燥させた。粗生成物を分取型逆相ＨＰＬＣ（０．０５％ ＨＣｌを含むＨ２Ｏ中の５～１００％アセトニトリル）により精製し、茶色固体として目的の生成物Ｉ－９（６８ｍｇ、４４％）を得た。
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 10.34 (s, 1H), 10.17 (s, 1H), 9.64 (s, 2H), 9.54 (s, 2H), 9.34 (s, 2H), 9.26 (s, 2H), 8.89 (t, J = 5.5 Hz, 1H), 8.46 (dd, J = 11.2, 8.4 Hz, 4H), 8.27 (s, 2H), 8.11 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 8.07 (d, J = 8.6 Hz, 2H), 7.94 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.89 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.82 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.31 (s, 1H), 7.16 (s, 1H), 3.86 (s, 3H), 3.60 (q, J = 6.7 Hz, 2H), 2.65 (t, J = 7.2 Hz, 2H)。
実施例Ｓ１０：（Ｓ）－１－（（４－（６－カルバミイミドイル－５－メトキシ－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－２－イル）ベンゾイル）－Ｌ－プロリル）－Ｎ－（４－（６－カルバミイミドイル－５－メトキシ－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－２－イル）フェニル）ピロリジン－２－カルボキサミド（化合物Ｉ－１０）の合成
ステップ１：４－アミノ－２－フルオロ－５－ニトロベンゾニトリル（化合物５６）の合成
０℃で、２,４－ジフルオロ－５－ニトロベンゾニトリル５５（２．２ｇ、１１．９５ｍｍｏｌ）のＥｔＯＨ（１．５ｍＬ）中の溶液にＮＨ４ＯＨ（６．５ｍＬ）を加え、得られた混合物を室温で６ｈ撹拌した。その後、得られた沈殿物をろ過して、真空下で乾燥させ、黄色固体として目的の生成物５６（２．２１ｇ、９８％）を得た。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.60 (d, J = 7.0 Hz, 1H), 8.24 (s, 2H), 6.88 (d, J = 11.9 Hz, 1H)。
ステップ２：４－アミノ－２－フルオロ－５－ニトロエチルベンズイミダート塩酸塩（化合物５７）の合成
乾燥ＨＣｌガスを撹拌中の化合物５６（１．４５ｇ、８．００ｍｍｏｌ）のＥｔＯＨ（４０ｍＬ）の懸濁液に通し、反応混合物をＨＣｌで飽和させ、混合物を室温で３６ｈ撹拌した。その後、無水エチルエーテルで反応混合物を希釈した。オレンジ色の固体のイミデート沈殿をろ過し、エチルエーテルで洗浄し、真空乾燥させ、オレンジ色固体５７（１．８８ｇ）を得て、更なる精製をせずに次のステップに用いた。
ステップ３：４－アミノ－２－メトキシ－５－ニトロベンズイミダミド塩酸塩（化合物５８）の合成
撹拌中の化合物５７（２７８ｍｇ、１．０５ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（３ｍＬ）中の懸濁液にＮＨ３（ＭｅＯＨ中の７Ｍ、３ｍＬ）を加え、反応混合物を一晩還流した。その後、反応混合物を真空濃縮し、エチルエーテルで希釈した。ろ過して沈殿物を得て、エチルエーテルで洗浄し、真空乾燥させ、黄色固体５８（３０６．９ｍｇ）を得て、更なる精製をせずに次のステップに用いた。
ステップ４：４,５－ジアミノ－２－メトキシベンズイミダミド塩酸塩（化合物５９）の合成
化合物５８（１７０ｍｇ、１．３２ｍｍｏｌ）のＥｔＯＨ（１０ｍＬ）中の溶液にＰｄ／Ｃ（２０ｍｇ、１０％）を加えた。その後、フラスコを真空吸引して、Ｈ２で３回パージし、Ｈ２で満たし、室温で１８ｈ撹拌した。反応混合物を珪藻土パッドでろ過し、ＭｅＯＨで洗浄した。ろ液を減圧濃縮し、黄色固体として目的の生成物５９（１３０．２ｍｇ、３ステップで９２％）を得た。
1H NMR (400 MHz, Methanol-d4) δ 7.02 (s, 1H), 6.48 (s, 1H), 3.87 (s, 3H)。
ステップ５：（Ｓ）－１－（（４－（６－カルバミイミドイル－５－メトキシ－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－２－イル）ベンゾイル）－Ｌ－プロリル）－Ｎ－（４－（６－カルバミイミドイル－５－メトキシ－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－２－イル）フェニル）ピロリジン－２－カルボキサミド（化合物Ｉ－１０）の合成
化合物１３（５２ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）、４,５－ジアミノ－２－メトキシベンズイミダミド塩酸塩５９（５０ｍｇ、０．２３ｍｍｏｌ）及びｐ－ベンゾキノン（２５ｍｇ、０．２３ｍｍｏｌ）の無水ＥｔＯＨ（５ｍＬ）中の溶液を１２ｈ還流して加熱した。反応混合物を室温に冷却して、アセトン（５０ｍＬ）中で０．５ｈ撹拌した。混合物をろ過し、無水エチルエーテルで洗浄して乾燥させ、茶色固体を得た。その後、熱いＭｅＯＨ（１０ｍＬ）とＥｔＯＨ（１０ｍＬ）の１：１混合物に固体を溶解し、ろ過し、体積を７ｍＬに減少させ、飽和ＨＣｌ－ＥｔＯＨ（０．７ｍＬ）で酸性化した。室温で一晩撹拌した後、混合物をエチルエーテルで希釈し、ろ過して沈殿物を得て、エチルエーテルで洗浄し、真空乾燥させた。粗生成物を分取型逆相ＨＰＬＣ（０．０５％ ＨＣｌを含むＨ２Ｏ中の５～１００％アセトニトリル）により精製し、茶色固体として目的の生成物Ｉ－１０（２９．８ｍｇ、２８％）を得た。
1H NMR (400 MHz, メタノール-d4) δ 8.23 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 8.15 (d, J = 8.9 Hz, 2H), 8.03 - 7.97 (m, 4H), 7.88 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 7.49 (d, J = 15.1 Hz, 2H), 4.96 (dd, J = 8.3, 5.8 Hz, 1H), 4.68 (dd, J = 8.3, 4.7 Hz, 1H), 4.06 (s, 3H), 4.05 (s, 3H), 4.04 - 3.98 (m, 1H), 3.86 - 3.76 (m, 1H), 3.72 - 3.58 (m, 2H), 2.56 - 2.45 (m, 1H), 2.44 - 2.35 (m, 1H), 2.27 - 1.92 (m, 6H)。
実施例Ｓ１１：（Ｓ）－１－（（４－（６－カルバミイミドイル－５－フルオロ－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－２－イル）ベンゾイル）－Ｌ－プロリル）－Ｎ－（４－（６－カルバミイミドイル－５－フルオロ－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－２－イル）フェニル）ピロリジン－２－カルボキサミド（化合物Ｉ－１１）の合成
ステップ１：エチル ４,５－ジアミノ－２－フルオロベンズイミデート塩酸塩（化合物６０）の合成
化合物５７（３５０ｍｇ、１．３３ｍｍｏｌ）のＥｔＯＨ（３０ｍＬ）中の溶液にＰｄ／Ｃ（４０ｍｇ、１０％）を加えた。その後、フラスコを真空吸引して、Ｈ２で３回パージし、Ｈ２で満たして、室温で２４ｈ撹拌した。反応混合物を珪藻土パッドでろ過し、ＭｅＯＨで洗浄した。ろ液を減圧濃縮し、オレンジ色固体６０（３２３．４ｍｇ）を得て、更なる精製をせずに次のステップに用いた。
ステップ２：４,５－ジアミノ－２－フルオロベンズイミダミド塩酸塩（化合物６１）の合成
化合物６０（３２０ｍｇ、１．３７ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（１５ｍＬ）中の懸濁液にＮＨ３（ＭｅＯＨ中の７Ｍ、２ｍＬ）を加え、反応混合物を一晩還流した。その後、反応混合物を真空濃縮し、エチルエーテルで希釈した。ろ過して沈殿物を得て、エチルエーテルで洗浄し、真空乾燥させ、赤茶色固体として目的の生成物６１（２４８．１ｍｇ、２ステップで９１％）を得た。
1H NMR (400 MHz, メタノール-d4) δ 6.91 (d, J = 7.1 Hz, 1H), 6.50 (d, J = 13.5 Hz, 1H)。
ステップ３：（Ｓ）－１－（（４－（６－カルバミイミドイル－５－フルオロ－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－２－イル）ベンゾイル）－Ｌ－プロリル）－Ｎ－（４－（６－カルバミイミドイル－５－フルオロ－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－２－イル）フェニル）ピロリジン－２－カルボキサミド（化合物Ｉ－１１）の合成
化合物１３（６７．１ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）、４,５－ジアミノ－２－フルオロベンズイミダミド塩酸塩６１（６１．４ｍｇ、０．３０ｍｍｏｌ）及びｐ－ベンゾキノン（３２．７ｍｇ、０．３０ｍｍｏｌ）の無水ＥｔＯＨ（１２ｍＬ）中の溶液を１６ｈ還流して加熱した。反応混合物を室温に冷却して、アセトン（８０ｍＬ）中で０．５ｈ撹拌した。混合物をろ過し、無水エチルエーテルで洗浄して乾燥させ、茶色固体を得た。その後、熱いＭｅＯＨ（１３．２ｍＬ）とＥｔＯＨ（１３．２ｍＬ）の１：１混合物に固体を溶解し、ろ過し、体積を９ｍＬに減少させ、飽和ＨＣｌ－ＥｔＯＨ（１．８ｍＬ）で酸性化した。室温で一晩撹拌した後、混合物をエチルエーテルで希釈し、ろ過して沈殿物を得て、エチルエーテルで洗浄し、真空乾燥させた。粗生成物を分取型逆相ＨＰＬＣ（０．０５％ ＨＣｌを含むＨ２Ｏ中の５～１００％アセトニトリル）により精製し、茶色固体として目的の生成物Ｉ－１１（１７．４ｍｇ、１３％）を得た。
1H NMR (400 MHz, メタノール-d4) δ 8.31 - 8.18 (m, 6H), 8.06 - 7.85 (m, 6H), 5.00 - 4.95 (m, 1H), 4.69 (dd, J = 8.3, 4.7 Hz, 1H), 4.05 - 3.98 (m, 1H), 3.87 - 3.76 (m, 1H), 3.71 - 3.56 (m, 2H), 2.57 - 2.47 (m, 1H), 2.46 - 2.35 (m, 1H), 2.29 - 1.93 (m, 6H)。
実施例Ｓ１２：（Ｓ）－１－（（４－（６－カルバミイミドイル－１－メチル－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－２－イル）ベンゾイル）－Ｌ－プロリル）－Ｎ－（４－（６－カルバミイミドイル－１－メチル－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－２－イル）フェニル）ピロリジン－２－カルボキサミド（化合物Ｉ－１２）の合成
ステップ１：４－（メチルアミノ）－３－ニトロベンゾニトリル（化合物６３）の合成
４－クロロ－３－ニトロベンゾニトリル６２（１．５ｇ、８．２２ｍｍｏｌ）のＥｔＯＨ（６ｍＬ）中の懸濁溶液にＣＨ３ＮＨ２（ＥｔＯＨ中の２７～３２％、１．５ｍＬ）を加え、反応混合物を室温で１ｈ撹拌し、その後、一晩還流した。反応混合物を冷却して真空濃縮した。残留物をエチルエーテルに懸濁させ、ろ過して粗生成物を得て、シリカゲルクロマトグラフィー（純ＤＣＭ）により精製し、黄色固体として目的の生成物６３（９３６．３ｍｇ、６４％）を得た。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.64 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 8.50 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.84 (ddd, J = 9.0, 2.1, 0.8 Hz, 1H), 7.11 (d, J = 9.1 Hz, 1H), 3.00 (d, J = 5.0 Hz, 3H)。
ステップ２：４－（メチルアミノ）－３－ニトロエチルベンズイミダート塩酸塩（化合物６４）の合成
乾燥ＨＣｌガスを氷塩浴で冷却した化合物６３（７１０ｍｇ、８．００ｍｍｏｌ）のＥｔＯＨ（２０ｍＬ）の撹拌された懸濁液に通し、反応混合物をＨＣｌで飽和させ、混合物を室温で４８ｈ撹拌した。その後、無水エチルエーテルで反応混合物を希釈した。オレンジ色の固体としてのイミデート沈殿をろ過し、エチルエーテルで洗浄し、真空乾燥させ、オレンジ色固体６４（１．０８ｇ）を得て、更なる精製をせずに次のステップに用いた。
ステップ３：４－（メチルアミノ）－３－ニトロベンズイミダミド塩酸塩（化合物６５）の合成
化合物６４（１．０８ｇ、４．１６ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（２０ｍＬ）中の懸濁液にＮＨ３（ＭｅＯＨ中の７Ｍ、３ｍＬ）を加え、反応混合物を室温で一晩撹拌した。その後、反応混合物を真空濃縮し、エチルエーテルで希釈した。ろ過して沈殿物を得て、エチルエーテルで洗浄し、真空乾燥させ、黄色固体として目的の生成物６５（９４５．８ｍｇ、２ステップ定量）を得た。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.30 (s, 2H), 8.98 (s, 2H), 8.70 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 8.68 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 7.98 (dd, J = 9.2, 2.4 Hz, 1H), 7.17 (d, J = 9.3 Hz, 1H), 3.03 (d, J = 5.0 Hz, 3H)。
ステップ４：３－アミノ－４－（メチルアミノ）ベンズイミダミド塩酸塩（化合物６６）の合成
化合物６５（６８６．８ｍｇ、３．００ｍｍｏｌ）のＥｔＯＨ（３０ｍＬ）中の溶液にＰｄ／Ｃ（７０ｍｇ、１０％）を加えた。その後、フラスコを真空吸引して、Ｈ２で３回パージし、Ｈ２で満たして、室温で２４ｈ撹拌した。反応混合物を珪藻土パッドでろ過し、ＭｅＯＨで洗浄した。ろ液を減圧濃縮し、黄色固体として目的の生成物６６（５５６．２ｍｇ、９３％）を得た。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.74 (s, 2H), 8.42 (s, 2H), 7.12 (dd, J = 8.3, 2.3 Hz, 1H), 6.92 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 6.47 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 5.76 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 4.88 (s, 2H), 2.80 (d, J = 4.7 Hz, 3H)。
ステップ５：（Ｓ）－１－（（４－（６－カルバミイミドイル－１－メチル－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－２－イル）ベンゾイル）－Ｌ－プロリル）－Ｎ－（４－（６－カルバミイミドイル－１－メチル－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－２－イル）フェニル）ピロリジン－２－カルボキサミド（化合物Ｉ－１２）の合成
化合物１３（１３５．４ｍｇ、０．３０ｍｍｏｌ）、３－アミノ－４－（メチルアミノ）ベンズイミダミド塩酸塩６６（１２１．４ｍｇ、０．６０ｍｍｏｌ）及びｐ－ベンゾキノン（６５．９ｍｇ、０．６０ｍｍｏｌ）の無水ＥｔＯＨ（１２ｍＬ）中の溶液を６ｈ還流して加熱した。反応混合物を室温に冷却して、アセトン（１００ｍＬ）中で０．５ｈ撹拌した。混合物をろ過し、無水エチルエーテルで洗浄して乾燥させ、塩酸塩を得た。その後、熱いＭｅＯＨ（２６ｍＬ）とＥｔＯＨ（２６ｍＬ）の１：１混合物に固体を溶解し、ろ過し、体積を１８ｍＬに減少させ、飽和ＨＣｌ－ＥｔＯＨ（１．８ｍＬ）で酸性化した。室温で一晩撹拌した後、混合物をエチルエーテルで希釈し、ろ過して沈殿物を得て、エチルエーテルで洗浄し、真空乾燥させた。粗生成物を分取型逆相ＨＰＬＣ（０．０５％ ＨＣｌを含むＨ２Ｏ中の５～１００％アセトニトリル）により精製し、ピンクの固体として目的の生成物Ｉ－１２（１４１．６ｍｇ、５３％）を得た。
1H NMR (400 MHz, メタノール-d4) δ 8.30 (dd, J = 6.9, 1.3 Hz, 2H), 8.14 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 8.06 - 7.99 (m, 6H), 7.98 - 7.89 (m, 5H), 4.98 (dd, J = 8.2, 5.7 Hz, 1H), 4.70 (dd, J = 8.2, 4.8 Hz, 1H), 4.16 (s, 3H), 4.10 (s, 3H), 4.07 - 3.99 (m, 1H), 3.87 - 3.78 (m, 1H), 3.74 - 3.60 (m, 2H), 2.57 - 2.47 (m, 1H), 2.46 - 2.36 (m, 1H), 2.30 - 1.96 (m, 6H)。
生物学的実施例
実施例Ｂ１：ＰＵ．１阻害剤の効力の生物学的評価
急性Ｔ細胞リンパ性白血病（Ｔ－ＡＬＬ）疾患モデルを用いて、ＰＵ．１に対する新規合成化合物の影響を評価した。腫瘍・がん阻害遺伝子として有名なＰｔｅｎは、マウスの造血幹細胞とその分化した子孫において４０％が欠如しており、その結果として、生後約２カ月に進行性Ｔ－ＡＬＬを引き起こす。免疫チェックポイントＴ細胞免疫グロブリンムチン３（ＴＩＭ－３、純粋白血病開始細胞（ＬＩＣ）を単離するための表面マーカー）は、Ｐｔｅｎ－ｎｕｌｌＴ－ＡＬＬモデルにおいて転写因子ＰＵ．１によって転写制御されると考えられている。したがって、ＴＩＭ－３の発現レベルを検出し、定量化して、勾配濃度の化合物で２４時間処理した後の化合物の阻害効果を特徴付ける。ＰＵ．１－ＥＧＦＰ－ベクター又はＥＧＦＰ－ベクターを用いて芽球をトランスフェクションし、それぞれ安定な細胞株ｂｌａｓｔ－ＰＵ．１及びｂｌａｓｔ－ＥＧＦＰを産生した。これらの細胞株は、インビトロ化合物試験に用いられる。化合物ＤＢ１９７６とＤＢ２１１５も比較のために試験された。ｂｌａｓｔ－ＰＵ．１及びｂｌａｓｔ－ＥＧＦＰは、ＴＩＭ－３及びＰＵ．１の発現レベルが低いＴ－ＡＬＬ芽球であるため、インビトロ試験化合物にとって理想的な細胞株である。
化合物Ｉ－１ではＤＢ２１１５のフレキシブルなアルキルリンカーを剛性Ｌ－プロリンに置換すると、効力が大幅に向上し、化合物Ｉ－１は、Ｂｌａｓｔ－ＰＵ．１細胞株において１０ｎＭでＴＩＭ－３の発現レベルを４０％ダウンレギュレーションさせ（図１ｂ）、ＴＩＭ－３レベルはＤＭＳＯ及び化合物処理群では検出できないほど低すぎるためである（データは示されていない）。一方、そのＤ,Ｄ－プロリンアナログの化合物Ｉ－２とＤ,Ｌ－プロリンアナログの化合物Ｉ－３は、１０μＭで有意な阻害作用が認められなかったが、化合物Ｉ－１には及ばなかった（図１ｂ）。要するに、化合物Ｉ－１はＰＵ．１媒介性ＴＩＭ－３阻害において最も優れた活性を示し、このことから、化合物Ｉ－１が今後の生物学的機能の研究に有用であることを結論付けた。
実施例Ｂ２：化合物Ｉ－１とラパマイシンとの併用による白血病の進行を遅らせる効果
Ｐｔｅｎ－ｎｕｌｌＴ－ＡＬＬマウスモデルを生成するために、マウス胎児肝臓造血幹細胞（ＨＳＣ）においてＰｔｅｎを４０％欠如させ、その後ＰＩ３Ｋ－ＡＫＴ経路の活性化、造血障害、及びＴ－ＡＬＬの発育が生じた。Ｔ－ＡＬＬ発症期（危機段階）では、Ｔ－ＡＬＬ芽球とＬＩＣがマウスの造血器官と非造血器官に浸潤する。
ラパマイシン（Ｔ－ＡＬＬ芽球を標的とする面で有望な効果を示す、十分に検討されたＰＩ３Ｋ－ＡＫＴ経路阻害剤）と化合物Ｉ－１とを併用してＴ－ＡＬＬマウスを処理した。芽球の発症期に治療を開始し、生後６２日後に治療を中止し、芽球及び高ＴＩＭ－３のＬＩＣを阻害する化合物の直接的な効果を観察した。
２日間の処理では、化合物Ｉ－１単独では、芽球と生きたリンパ球の割合は低下していなかったが、ラパマイシンは芽球を標的化するのに高い効率を示し、芽球は９６．４％から１３．２％に減少した（図２ａ）。併用処理は、骨髄（図２ａ）、脾臓及び胸腺における芽球の割合をより顕著に減少させた。高ＴＩＭ－３のＬＩＣ群では、化合物Ｉ－１単独での処理は、ラパマイシン処理群（２２．２％）と比較して、ＬＩＣ割合を３３．５％から６．１５％に有意に低下させた。重要なことに、他の３群と比較して、併用処理は芽球及びＬＩＣの減少に有意な効果を示した。
これまでに、ＤＢ１９７６とＰＩ３Ｋ阻害剤を用いたＴ－ＡＬＬマウスモデルにおいて、芽球とＬＩＣを共通に標的化することで腫瘍負荷が軽減されることが示されている。化合物Ｉ－１がこれを達成するかどうかを試験するために、芽球の発症期で化合物Ｉ－１及び／又はラパマイシンでＴ－ＡＬＬマウスを１か月間処理した。処理後、ヘマトキシリン－エオシン（Ｈ＆Ｅ）染色を用いてマウスの造血器官と非造血器官の形態を分析した。化合物Ｉ－１単独処理群では、臓器形態はＴ－ＡＬＬ群と比較して有意な変化を示さず、ＬＩＣのみを標的とすることで腫瘍負荷が低下しなかったのに対し、ラパマイシン群では、治療効果の改善を示し、これは芽球が白血病細胞の主要集団であるからである。併用処理群では、胸腺と脾臓の形態が回復し、白血病細胞の肺、腎臓、肝臓への浸潤が著しく減少した（図２ｂ）。
研究により、Ｐｔｅｎ欠如後、Ｂ細胞の発生はプロｐｒｏ－Ｂ段階で阻害されることが明らかになった。図２ｃに示すように、Ｔ－ＡＬＬマウスの脾臓に少量のＢ２２０陽性細胞が観察された。しかし、マウス脾臓Ｂ２２０免疫組織化学スライドガラスでは、化合物Ｉ－１とラパマイシンの併用処理後にＢ細胞集団が救われた（図２ｃ）。Ｂ系統細胞において、ＰＵ．１は系統コミットメントを制御する主要な調節因子であり、ＰＵ．１の発現はｐｒｏ－Ｂ細胞からＢ細胞へと徐々に増加した。併用処理群のＰＵ．１及び／又はその下流遺伝子の発現レベルは正常に回復し、リンパ系統のコミットメント及び細胞分化が正常に進行する可能性がある。さらに、化合物Ｉ－１とラパマイシンとの併用は、化合物Ｉ－１単独又はラパマイシン単独又はＤＢ１９７６とラパマイシンとの併用よりもマウス生存を延長させた（図２ｄ）。
実施例Ｂ３：化合物Ｉ－１による皮膚線維症の予防及び治療効果
方法：化合物Ｉ－１による皮膚線維症への予防及び治療効果を評価するために、ブレオマイシンを用いて２種類の異なる薬物干渉の皮膚線維症動物モデル（６～８週齢、Ｃ５７ＢＬ／６、雄）を作成した。１日おきに背中上部のうち脱毛しておいた皮膚限定ゾーン（約１ｃｍ２）にブレオマイシン（０．５ｍｇ／ｍＬ、０．１ｍｌ／匹）を局所注射して皮膚線維症を誘発した。対照として生理食塩水を皮下注射した。（Ｉ）ブレオマイシン誘発皮膚線維症の予防モデル：化合物Ｉ－１、陽性対照ＤＢ１９７６又はビヒクル（生理食塩水）をブレオマイシンと同時に４週間腹腔内注射した（図３ａ）。（ＩＩ）ブレオマイシン誘発皮膚線維症の治療モデル：マウスにブレオマイシンを３週間プリチャージして皮膚線維症を誘発した後、化合物Ｉ－１、陽性対照ＤＢ１９７６又はビヒクル（生理食塩水）でさらに３週間処理し、合計時間を１回目のブレオマイシン処理後６週間とした（図３ｆ）。両モデルの処理の最終日の後、マウスを断食して夜を過ごし、安楽死させた。皮膚の一部を箔の上で完全に平らにした後にパラホルムアルデヒドで固定化し、パラフィンで包埋した後、スライスしてＨ＆Ｅ、シリウスレッド、マソン（Ｍａｓｓｏｎ）染色を行い、病理的特徴を調べた。各サンプルの表皮厚さをｉｍａｇｅ Ｊを用いて定量的に算出した。皮膚の他の部分を採取し、液体窒素で急速凍結して－８０℃で保管し、ＲＮＡ分離（Ｃｏｄｅ．Ｒ６９３４、ＯＭＥＧＡ、米国）、第１鎖ｃＤＮＡ逆転写（ｆｉｒｓｔ ｃＤＮＡ ｒｅｖｅｒｓｅ、Ｃｏｄｅ．ＡＴ３４１、ＴｒａｎｓＧｅｎ、中国）、ＳＹＢＲ混合（Ｃｏｄｅ．ＡＱ６０１、ＴｒａｎｓＧｅｎ、中国）を行い、いくつかの線維症関連遺伝子（Ｃｏｌ１ａ１、Ｃｏｌ１ａ２など）のｍＲＮＡのレベルを検証するためにＱ－ＰＣＲ（ＬｉｇｈｔＣｙｃｌｅｒ(R)９６、Ｒｏｃｈｅ）を行った。
その結果、ブレオマイシン誘発皮膚線維症の予防モデルにおいて、生理食塩水／ビヒクル群と比較して、ブレオマイシンの処理４週間の場合、皮膚表皮の厚さの増加、コラーゲンの沈着、Ｃｏｌ１ａ１とＣｏｌ１ａ２ ｍＲＮＡのレベルの増加を含む皮膚線維症の病理的特徴を顕著に誘発し、これは、ブレオマイシン誘発皮膚線維症モデルが成功に構築されたことを示唆した。化合物Ｉ－１又はＤＢ１９７６による処理は、ブレオマイシン／ビヒクル群と比較して、皮膚線維症の進行を著しく阻止し、表皮の厚さ及びコラーゲン沈着を減少させ、Ｃｏｌ１ａ１及びＣｏｌ１ａ２のｍＲＮＡのレベルを低下させた（図３ａ～３ｅ）。ブレオマイシン誘発皮膚線維症の治療モデルにおいて、ブレオマイシン６週間の処理は、生理食塩水／ビヒクル群と比較して、皮膚線維症の病理的特徴を顕著に誘発し、より厚い表皮、より多くのコラーゲン沈着、及びより高いＣｏｌ１ａ１及びＣｏｌ１ａ２ｍ ＲＮＡのレベルを産生し、これは、ブレオマイシン刺激による皮膚線維症モデルの構築に成功したことをさらに示唆している。化合物Ｉ－１又はＤＢ１９７６で３週間処理すると、ブレオマイシン誘発皮膚線維症を有意に寛解し、かつ回復させた（図３ｆ～３ｊ）。これらのデータは、化合物Ｉ－１がブレオマイシン誘発皮膚線維症に対して予防及び治療効果を有することを示唆している。
実施例Ｂ４：化合物Ｉ－１による肺線維症の予防及び治療効果
方法：化合物Ｉ－１による肺線維症の予防及び治療効果を評価するために、ブレオマイシンを用いて２種類の異なる薬物干渉の肺線維症動物モデル（６～８週齢、Ｃ５７ＢＬ／６、雄）を構築した。ブレオマイシン（０．０２５Ｕ、Ｃｏｄｅ．Ｄ１１０６３、ＯＫＡ、中国）は単回気管内投与で注射した。等体積の無菌生理食塩水を対照とした。（Ｉ）ブレオマイシン誘発肺線維症の予防モデル：ブレオマイシン１回注射の直後に化合物Ｉ－１、陽性対照ＤＢ１９７６、又はビヒクル（生理食塩水）で４週間処理（腹膜内注射、ｉ．ｐ．）した（図４ａ）。（ＩＩ）ブレオマイシン誘発肺線維症の治療モデル：マウスをブレオマイシンで１１日間プレチャージして、肺線維症を誘発し、その後、化合物Ｉ－１、陽性対照ＤＢ１９７６、又はビヒクル（生理食塩水）で１７日間処理し、合計時間をブレオマイシン処理後４週間とした（図４ｈ）。両モデルの処理の最終日の後、マウスを断食して夜を過ごし、安楽死させた。肺の一部をパラホルムアルデヒドで固定化し、パラフィンで包埋した後、スライスしてＨ＆Ｅ染色及びシリウスレッド染色を行い、病理学的特徴とＡｓｈｃｒｏｆｔスコアを調べた（Hubner, R. H. et al. Biotechniques 44, 507-511, 514-507, doi:10.2144/000112729 (2008)）。肺の他の部分を採取し、液体窒素で急速凍結して－８０℃で保管し、ＲＮＡ分離（Ｃｏｄｅ．Ｒ６９３４、ＯＭＥＧＡ、米国）、第１鎖ｃＤＮＡ逆転写（Ｃｏｄｅ．ＡＴ３４１、ＴｒａｎｓＧｅｎ、中国）、ＳＹＢＲ混合（Ｃｏｄｅ．ＡＱ６０１、ＴｒａｎｓＧｅｎ、中国）を行い、いくつかの線維症関連遺伝子（Ｃｏｌ１ａ１、Ｃｏｌ１ａ２など）のｍＲＮＡのレベルを検証するために、Ｑ－ＰＣＲ（ＬｉｇｈｔＣｙｃｌｅｒ(R)９６、Ｒｏｃｈｅ）を行った。
その結果、図４に示すように、食塩水／ビヒクル群と比較して、ブレオマイシンによる４週間の処理は、肺部の悪化、コラーゲン沈着、肺胞壁の肥厚化及び肺胞構造の破壊を含む肺線維症の病理的特徴を顕著に誘発し、これは、ブレオマイシン誘発肺線維症モデルが成功に構築されたことを示唆している。化合物Ｉ－１及びＤＢ１９７６の処理は、染色及びＡｓｈｃｒｏｆｔスコアに基づく病理変化、シリウスレッド染色によって示されるコラーゲン沈着、及びＣｏｌ１ａ１及びＣｏｌ１ａ２ ｍＲＮＡのレベルについて測定した通り、ブレオマイシン／ビヒクル群と比較して、肺線維症の進行を有意に阻止した（図４ａ～４ｇ）。治療モデルでは、化合物Ｉ－１を用いて処理することで、上記の病理的特徴を含むブレオマイシン誘発肺線維症を回復及び阻止した（図４ｈ～４ｎ）。これらのデータは、化合物Ｉ－１がブレオマイシン誘発肺線維症に対して予防及び治療効果を有することを示唆している。
実施例Ｂ５：化合物Ｉ－１によるＮＡＳＨ及び肝線維症の処理の作用
方法：化合物Ｉ－１による肝疾患（肝臓脂肪変性と蓄積、非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、非アルコール性脂肪変性肝炎（ＮＡＳＨ）、肝線維症を含む）に対する潜在的な治療効果を評価するために、３種類のマウスモデル（Ｃ５７ＢＬ／６、雄、８週齢）を用いた。（Ｉ）ＮＡＳＨ食事誘発ＮＡＳＨモデル（Ｃｏｄｅ．ＴＤ．１６０７８５、ＥＮＶＩＧＯ、米国）：すべてのマウスにＮＡＳＨ食事を１０週間与えた。その後、マウスをランダムに３群に分け、各群には、ＮＡＳＨ食事を続けながら、毎日、ビヒクル、化合物Ｉ－１（２．５ｍｐｋ又は５ｍｐｋ、ｉ．ｐ．）又はＤＢ１９７６（２．５ｍｐｋ、ｉ．ｐ、陽性対照）を６週間投与するようにした。通常の食事をとった群は、健康対照としてビヒクルで処理した。（ＩＩ）高脂肪食（ＨＦＤ）とＣＣｌ４の組み合わせ（低用量）により誘発されたＮＡＳＨモデル：マウスに通常の食事又はＨＦＤ（ｋｃａｌ脂肪６０％－Ｄ１２４９２、研究用食事）で１０週間与えた後、最小体重差の規則にしたがってＨＦＤマウスをランダムに２群に分けた。各群には、ＣＣｌ４（オリーブ油中２５％ｖ／ｖ、０．５ｍＬ／ｋｇ体重）又はピュアオリーブ油（ｉ．ｐ．）を週２回、４週間持続して注射した。連続ＨＦＤを与えたままで化合物Ｉ－１又はビヒクルー（生理食塩水）を１日に１回（ｉ．ｐ．）、４週間持続して注射するとともに、ＣＣｌ４を注射した。（ＩＩＩ）ＣＣｌ４（高用量）誘発肝線維症モデル：肝線維症を誘発するために、ＣＣｌ４（オリーブオイル中２０％ｖ／ｖ、１０ｍＬ／ｋｇ体重）を週２回、６週間注射し、ＣＣｌ４投与と同時に、化合物Ｉ－１又はビヒクルを１日１回（ｉ．ｐ．）、６週間注射した。上記３種類のモデルのマウスを毎日観察した。すべてのモデルを処理した最終日の後、マウスを断食して夜を過ごし、安楽死させた。全血を４℃で遠心分離した後、血清を採取し、自動生化学分析装置（ＢＳ－２４０ＶＥＴ、Ｍｉｎｄｒａｙ）で血液の生化学的パラメータを検出した。一部の肝組織をパラホルムアルデヒドで固定化し、パラフィンで包埋し、スライスしてＨ＆Ｅ染色又はシリウスレッド染色で病理特徴及びＮＡＦＬＤスコアを調べた（Kleiner, D. E. et al. Hepatology 41, 1313-1321, doi:10.1002/hep.20701 (2005)）。新鮮な部分の肝組織を取り、ＯＣＴ包埋剤に包埋し、スライスした。切片を４％パラホルムアルデヒドのＰＢＳ溶液で固定化した後、標準手順にしたがって０．５％オイルレッドＯで染色した。肝臓組織の他の部分を採取し、液体窒素で急速凍結して－８０℃で保存し、ＲＮＡ分離（Ｃｏｄｅ．Ｒ６９３４、ＯＭＥＧＡ、米国）、第１鎖ｃＤＮＡ逆転写（Ｃｏｄｅ．ＡＴ３４１、ＴｒａｎｓＧｅｎ、中国）、ＳＹＢＲ混合（Ｃｏｄｅ．ＡＱ６０１、ＴｒａｎｓＧｅｎ、中国）を行い、線維症関連遺伝子、Ｃｏｌ１ａ１、Ｃｏｌ１ａ２などの遺伝子、炎症関連遺伝子、ＩＬ－６及びＩＬ－１βのｍＲＮＡのレベルを検証するために、Ｑ－ＰＣＲ（ＬｉｇｈｔＣｙｃｌｅｒ(R)９６、Ｒｏｃｈｅ）を行った。
結果１：ＮＡＳＨ食事誘発ＮＡＳＨモデルでは、図５に示すように、１６週間のＮＡＳＨ食事は体重と肝臓／体比を有意に増加させた（図５ｂ～５ｃ）。病理染色に基づくより大きな、より多くの脂肪滴を含む肝臓内の大量の脂肪蓄積が誘導され（図５ｄ～５ｆ）、さらにＮＡＳＨ食事の適用は、ＡＬＴ、ＬＤＬ－Ｃ、総コレステロール（ＴＣ）などの血清パラメータだけでなく（図５ｇ～５ｉ）、炎症及び線維症関連遺伝子、ＩＬ－６、ＩＬ－１β、及びＣｏｌ１ａ１、Ｃｏｌ１ａ２（図５ｊ～５ｍ）も上昇した。化合物Ｉ－１（５ｍｐｋ）及びＤＢ１９７６（２．５ｍｐｋ）で６週間処理することにより、ＮＡＳＨ食事に起因する上記の代謝障害を緩和することができる。 化合物Ｉ－１（２．ｍｐｋ）は、ＤＢ１９７６（２．５ｍｐｋ）と比較して低い治療効果を示したが、肝臓での脂肪蓄積の減少、ＩＬ－６、ＩＬ－１β、Ｃｏｌ１ａ１、Ｃｏｌ１ａ２のｍＲＮＡのレベルの低下など、代謝障害を緩和する傾向も示した。これらのデータは、化合物Ｉ－１が肝臓の脂肪蓄積、炎症及びＮＡＳＨを治療する潜在力を有することを示唆している。
結果２：高脂肪食（ＨＦＤ）とＣＣｌ４の組み合わせ（低用量）により誘発されたＮＡＳＨモデルでは、図６に示すように、ＨＦＤ前処理と６週間ＣＣＬ４処理後、体重、性腺白色脂肪組織（ｇＷＡＴ）及び鼠径部白色脂肪組織（ｉＷＡＴ）の重量は有意に増加したが、ＤＢ１９７６及びＩ－１で処理することでこれらを逆転させた（図６ｂ～６ｄ）。ＨＦＤ／ＣＣＬ４処理はマウスの脂質異常を誘発し、ＤＢ１９７６とＩ－１の適用は血清トリグリセリド（ＴＧ）と総コレステロール（ＴＣ）を低下させた（図６ｅ～６ｆ）。さらに、Ｈ＆Ｅ染色の組織学的検出では、Ｉ－１は脂肪蓄積を効果的に減少させることはできず（図６ｇ）、肝脂肪変性スコア（図６ｈ）と一致したが、炎症反応を効果的に減少させることが示され、炎症浸潤（図６ｇ）、炎症スコア（図６ｉ）、ＩＬ－１β（図６ｊ）、ＩＬ－６（図６ｋ）の肝臓ｍＲＮＡのレベルの減少として示された。なお、ＤＢ１９７６とＩ－１の投与がＨＦＤ／ＣＣＬ４の適用により誘発された肝線維症を有意に緩和し、シリウスレッド染色で示されるコラーゲン沈着（図６ｇ及び６ｌ）、及びＣｏｌ１ａ１（図６ｍ）とＣｏｌ１ａ２（図６ｎ）の肝臓ｍＲＮＡのレベルを低下させた。一方、Ｉ－１処理は血清ＡＬＴレベルを低下させる傾向を示し（図６ｏ）、Ｉ－１の有効濃度では肝毒性がないことが示された。これらのデータは、化合物Ｉ－１がＨＦＤ／ＣＣＬ４誘発ＮＡＳＨ及び肝線維症マウスにおいて抗炎症及び抗線維症の潜在力を示すことを示唆している。
結果３：ＣＣｌ４（高用量）誘発肝線維症では、図７に示すように、シリウスレッド染色とＨ＆Ｅ染色により、ＣＣｌ４による６週間の処理は、大量のコラーゲン沈着、線維化の高い程度（図７ｂ～７ｃ及び７ｆ）、炎症反応など、堅牢なＣＣｌ４誘発肝線維症のパラメータを顕著に誘発した。ＣＣｌ４の使用はまた、炎症性及び線維症関連遺伝子、ＩＬ－６、ＩＬ－１β（図７ｇ～７ｈ）及びＣｏｌ１ａ１、Ｃｏｌ１ａ２（図７ｄ～７ｅ）も有意に増加させたが、血清中のＡＳＴレベル（図７ｉ）を除いた。化合物Ｉ－１（５ｍｐｋ又は１０ｍｐｋ）での処理は、ＣＣｌ４誘発肝線維症を緩和し、コラーゲン沈着とシリウスレッド陽性領域を有意に減少させ、ＣＣｌ４の使用により誘発された異常ｍＲＮＡのレベル及び血液生化学を改善した。これらのデータは、化合物Ｉ－１が肝線維症に対して予防及び治療の潜在力を有することを示唆している。
本明細書に記載されている特許、特許出願及び科学論文を含むすべての出版物は、特許、特許出願又は科学論文を含む個々の出版物が、引用によって組み込まれることを具体的かつ個別に示していると同程度に、すべての目的のために全体として引用によって本明細書に組み込まれる。

Claims (31)

  1. 式（Ｉ）の化合物、その立体異性体又はその薬学的に許容される塩。

    （式中、
    ｘ及びｘ’は、それぞれ独立して、０、１、２、３又は４であり；
    Ｒ１及びＲ２は、それぞれ独立して、－Ｒａ、－Ｎ（Ｒａ）２、－ＯＲａ、－Ｃ（Ｏ）ＯＲａ、－ＯＣ（Ｏ）Ｒａ、－ＮＨＣ（Ｏ）Ｒａ、－Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒａ）２、－ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒａ）２、－ＮＨＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒａ）２、－Ｓ（Ｏ）２Ｒａ、－Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒａ）２、－Ｃ（Ｏ）Ｒａ、－ＮＨＳ（Ｏ）２Ｒａ、－ＮＨＳ（Ｏ）２Ｎ（Ｒａ）２、ニトロ、シアノ、又はハロゲンであり、ここで、Ｒａは、それぞれ独立して、水素、Ｃ１～６アルキル、Ｃ３～８シクロアルキル、３～１２員ヘテロシクリル、Ｃ６～１２アリール、又は５～１２員ヘテロアリールであり、Ｒ１のうちのいずれか２つ又はＲ２のうちのいずれか２つは、これらが連結する原子とともにＣ３～８シクロアルキル、３～１２員ヘテロシクリル、Ｃ６～１２アリール、又は５～１２員ヘテロアリールを形成することができ、Ｃ３～８シクロアルキル、３～１２員ヘテロシクリル、Ｃ６～１２アリール及び５～１２員ヘテロアリールは、それぞれ独立して、任意にＲ９で置換され；
    ｙ及びｙ’は、それぞれ独立して、０、１、２、３又は４であり；
    Ｒ３は
    であり、ここで、
    Ｒ５はＯ、Ｓ又はＮＨであり、かつ
    Ｒ６及びＲ７は、それぞれ独立して、水素、Ｃ１～６アルキル、Ｃ３～８シクロアルキル、３～１２員ヘテロシクリル、Ｃ６～１２アリール、５～１２員ヘテロアリール、－Ｃ（Ｏ）ＯＲｄ又は－Ｓ（Ｏ）２Ｒｄであり、ここで、Ｒｄは、それぞれ独立して、水素、Ｃ１～１２アルキル、Ｃ３～８シクロアルキル、３～１２員ヘテロシクリル、Ｃ６～１２アリール、又は５～１２員ヘテロアリールであり、かつ、ここで、Ｒ６及びＲ７は、それらが連結する窒素原子とともに３～１２員ヘテロシクリル、又は５～１２員ヘテロアリールを形成することができ、又は
    ｙが２、３又は４である場合、２つのＲ３は、これらが連結する原子とともにＣ３～８シクロアルキル、３～１２員ヘテロシクリル、Ｃ６～１２アリール、又は５～１２員ヘテロアリールを形成することができ、ここで、Ｃ３～８シクロアルキル、３～１２員ヘテロシクリル、Ｃ６～１２アリール及び５～１２員ヘテロアリールは、それぞれ独立して、任意にＲ９で置換され；
    Ｒ４は
    であり、ここで、
    Ｒ’５はＯ、Ｓ又はＮＨであり、かつ
    Ｒ’６及びＲ’７は、それぞれ独立して、水素、Ｃ１～６アルキル、Ｃ３～８シクロアルキル、３～１２員ヘテロシクリル、Ｃ６～１２アリール、５～１２員ヘテロアリール、－Ｃ（Ｏ）ＯＲｄ又は－Ｓ（Ｏ）２Ｒｄであり、ここで、Ｒｄは、それぞれ独立して、水素、Ｃ１～１２アルキル、Ｃ３～８シクロアルキル、３～１２員ヘテロシクリル、Ｃ６～１２アリール、又は５～１２員ヘテロアリールであり、かつ、ここで、Ｒ’６及びＲ’７は、それらが連結する窒素原子とともに３～１２員ヘテロシクリル、又は５～１２員ヘテロアリールを形成することができ、又は
    ｙ’が２、３又は４である場合、２つのＲ４は、これらが連結する原子とともにＣ３～８シクロアルキル、３～１２員ヘテロシクリル、Ｃ６～１２アリール、又は５～１２員ヘテロアリールを形成することができ、ここで、Ｃ３～８シクロアルキル、３～１２員ヘテロシクリル、Ｃ６～１２アリール及び５～１２員ヘテロアリールは、それぞれ独立して、任意にＲ９で置換され；
    ＸはＯ、Ｓ、ＮＨ又はＮＲ８であり、かつＸ’はＯ、Ｓ、ＮＨ又はＮＲ’８であり、ここで、
    Ｒ８及びＲ’８は、それぞれ独立して、Ｃ１～６アルキル、Ｃ３～８シクロアルキル、３～１２員ヘテロシクリル、Ｃ６～１２アリール、又は５～１２員ヘテロアリールであり；
    Ａ及びＢは、それぞれ独立して、－Ｃ（Ｏ）－、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ－、－ＮＨＣ（Ｏ）－、－Ｓ（Ｏ）２－、－Ｓ（Ｏ）２ＮＨ－、又は－ＮＨＳ（Ｏ）２－であり；
    Ｃは化学結合又は－ＮＨ－であり、その前提として、
    Ｂが－Ｃ（Ｏ）－、又は－Ｓ（Ｏ）２－である場合、Ｃは－ＮＨ－であり、かつ
    Ｂが－Ｃ（Ｏ）ＮＨ－、－ＮＨＣ（Ｏ）－、－Ｓ（Ｏ）２ＮＨ－、又は－ＮＨＳ（Ｏ）２－である場合、Ｃは化学結合であり；
    ｎは１～６から選択される整数であり；
    Ｚは、それぞれ独立して、Ｃ１～６アルキル、Ｃ３～８シクロアルキル、３～１２員ヘテロシクリル、Ｃ６～１２アリール、又は５～１２員ヘテロアリールであり、それぞれ独立して任意にＲｃで置換され、ここで、Ｒｃは、それぞれ独立して、Ｃ１～６アルキル、Ｃ１～６アルコキシ、Ｃ３～８シクロアルキル、３～１２員ヘテロシクリル、Ｃ６～１２アリール、５～１２員ヘテロアリール、アミノ、ヒドロキシ、カルボキシ、ニトロ、シアノ、又はハロゲンであり、
    その前提として、少なくとも１つのＺは、Ｃ３～８シクロアルキル、３～１２員ヘテロシクリル、Ｃ６～１２アリール、又は５～１２員ヘテロアリールであり、それぞれ独立して任意にＲｃで置換され；かつ
    Ｒ９は、それぞれ独立して、－Ｒｂ、－Ｎ（Ｒｂ）２、－ＯＲｂ、－Ｃ（Ｏ）ＯＲｂ、－ＯＣ（Ｏ）Ｒｂ、－ＮＨＣ（Ｏ）Ｒｂ、－Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒｂ）２、－ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒｂ）２、－ＮＨＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒｂ）２、－Ｓ（Ｏ）２Ｒｂ、－Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒｂ）２、－Ｃ（Ｏ）Ｒｂ、－ＮＨＳ（Ｏ）２Ｒｂ、－ＮＨＳ（Ｏ）２Ｎ（Ｒｂ）２、ニトロ、シアノ、又はハロゲンであり、ここで、Ｒｂは、それぞれ独立して、水素、Ｃ１～６アルキル、Ｃ３～８シクロアルキル、３～１２員ヘテロシクリル、Ｃ６～１２アリール、又は５～１２員ヘテロアリールである。）
  2. ｘ及びｘ’は、それぞれ独立して、２、又は３である、請求項１前記の化合物、その立体異性体又はその薬学的に許容される塩。
  3. Ｒ１及びＲ２は、それぞれ独立して、水素、メチル、メトキシ、又はフッ素である、請求項１又は２に記載の化合物、その立体異性体又はその薬学的に許容される塩。
  4. Ｒ１及びＲ２は、いずれも水素である、請求項１～３のいずれか１項に記載の化合物、その立体異性体又はその薬学的に許容される塩。
  5. ｙ及びｙ’は、それぞれ独立して、１又は２である、請求項１～４のいずれか１項に記載の化合物、その立体異性体又はその薬学的に許容される塩。
  6. Ｒ５はＯ又はＮＨであり、かつＲ６及びＲ７は、それぞれ独立して、水素又は－Ｃ（Ｏ）ＯＲｄである、請求項１～５のいずれか１項に記載の化合物、その立体異性体又はその薬学的に許容される塩。
  7. Ｒ５はＮＨであり、かつＲ６及びＲ７は、いずれも水素である、請求項１～６のいずれか１項に記載の化合物、その立体異性体又はその薬学的に許容される塩。
  8. Ｒ’５はＯ又はＮＨであり、かつＲ’６及びＲ’７は、それぞれ独立して、水素又は－Ｃ（Ｏ）ＯＲｄである、請求項１～７のいずれか１項に記載の化合物、その立体異性体又はその薬学的に許容される塩。
  9. Ｒ’５はＮＨであり、かつＲ’６及びＲ’７は、いずれも水素である、請求項１～８のいずれか１項に記載の化合物、その立体異性体又はその薬学的に許容される塩。
  10. ２つのＲ３及び／又は２つのＲ４は、これらが連結する原子とともに、５～１２員ヘテロアリールを形成し、前記５～１２員ヘテロアリールは任意にＲ９で置換される、請求項１～５のいずれか１項に記載の化合物、その立体異性体又はその薬学的に許容される塩。
  11. ２つのＲ３及び／又は２つのＲ４は、これらが連結する原子とともに、
    を形成する、請求項１０に記載の化合物、その立体異性体又はその薬学的に許容される塩。
  12. ２つのＲ３及び／又は２つのＲ４は、これらが連結する原子とともに、
    を形成する、請求項１１に記載の化合物、その立体異性体又はその薬学的に許容される塩。
  13. ＸはＮＨ又はＮＲ８であり、かつＸ’はＮＨ又はＮＲ’８であり、ここで、Ｒ８及びＲ’８は、それぞれ独立して、Ｃ１～６アルキルである、請求項１～１２のいずれか１項に記載の化合物、その立体異性体又はその薬学的に許容される塩。
  14. Ｘ及びＸ’はいずれもＮＨである、請求項１３に記載の化合物、その立体異性体又はその薬学的に許容される塩。
  15. Ａ及びＢは、それぞれ独立して、－Ｃ（Ｏ）－、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ－、又は－ＮＨＣ（Ｏ）－である、請求項１～１４のいずれか１項に記載の化合物、その立体異性体又はその薬学的に許容される塩。
  16. 各Ａ及びＢは－Ｃ（Ｏ）－である、請求項１５に記載の化合物、その立体異性体又はその薬学的に許容される塩。
  17. ｎは２である、請求項１～１６のいずれか１項に記載の化合物、その立体異性体又はその薬学的に許容される塩。
  18. Ｚは、それぞれ独立して、Ｃ１～６アルキル、３～１２員ヘテロシクリル、又は５～１２員ヘテロアリールであり、それぞれ独立して任意にＲｃで置換される、請求項１～１７のいずれか１項に記載の化合物、その立体異性体又はその薬学的に許容される塩。
  19. Ｚは、それぞれ独立して、－ＣＨ２－、－ＣＨ２ＣＨ２－、
    であり、それぞれ独立して任意にＲｃで置換される、請求項１～１７のいずれか１項に記載の化合物、その立体異性体又はその薬学的に許容される塩。
  20. Ｚは

    である、請求項１～１９のいずれか１項に記載の化合物、その立体異性体又はその薬学的に許容される塩。
  21. 前記化合物は下記群から選択される、請求項１に記載の化合物又はその薬学的に許容される塩。
  22. 請求項１～２０のいずれか１項に記載の化合物、その立体異性体又はその薬学的に許容される塩の製造方法であって、式（ＩＩ）の化合物、その立体異性体又はその薬学的に許容される塩を前記式（Ｉ）の化合物、その立体異性体又はその薬学的に許容される塩に変換するステップを含む、製造方法。
  23. 前記式（ＩＩ）の化合物は、式（１３’）の化合物、その立体異性体又はその薬学的に許容される塩であり、
    （ａ）式（１１’）の化合物、その立体異性体又はその薬学的に許容される塩を式（５’）の化合物、その立体異性体又はその薬学的に許容される塩と反応させるステップ、

    （ｂ）式（６）の化合物、その立体異性体又はその薬学的に許容される塩を式（１１’）の化合物、その立体異性体又はその薬学的に許容される塩に変換するステップ、及び／又は
    （ｃ）式（１）の化合物、その立体異性体又はその薬学的に許容される塩を前記式（５’）の化合物、その立体異性体又はその薬学的に許容される塩に変換するステップをさらに含む。請求項２２に記載の方法。
  24. 前記式（ＩＩ）の化合物は、式（５０）化合物、その立体異性体又はその薬学的に許容される塩であり、
    （ａ）式（４５）の化合物、その立体異性体又はその薬学的に許容される塩を与式（４１）の化合物、その立体異性体又はその薬学的に許容される塩と反応させるステップ、
    （ｂ）式（４２）の化合物、その立体異性体又はその薬学的に許容される塩を式（４５）の化合物、その立体異性体又はその薬学的に許容される塩に変換するステップ、及び／又は
    （ｃ）式（６）の化合物、その立体異性体又はその薬学的に許容される塩を前記式（４１）の化合物、その立体異性体又はその薬学的に許容される塩に変換するステップをさらに含む、請求項２２に記載の方法。
  25. 前記式（ＩＩ）の化合物は式（５４）化合物、その立体異性体又はその薬学的に許容される塩であり、
    （ａ）式（５３）の化合物、その立体異性体又はその薬学的に許容される塩を前記式（５４）の化合物、その立体異性体又はその薬学的に許容される塩に変換するステップ、
    （ｂ）式（４７）の化合物、その立体異性体又はその薬学的に許容される塩を前記式（５３）の化合物、その立体異性体又はその薬学的に許容される塩に変換するステップ、及び／又は

    （ｃ）式（４５）の化合物、その立体異性体又はその薬学的に許容される塩を前記式（４７）の化合物、その立体異性体又はその薬学的に許容される塩に変換するステップをさらに含む、請求項２２に記載の方法。
  26. 請求項１～２１のいずれか１項に記載の化合物、その立体異性体又はその薬学的に許容される塩と、薬学的に許容される担体又は賦形剤と、を含む医薬組成物。
  27. 請求項１～２１のいずれか１項に記載の化合物、その立体異性体又はその薬学的に許容される塩を含む、キット。
  28. 請求項１～２１のいずれか１項に記載の化合物、その立体異性体又はその薬学的に許容される塩の有効量を個体に投与するステップを含む、必要とする前記個体のＰＵ．１媒介性疾患の治療方法。
  29. ＰＵ．１媒介性疾患の治療方法に用いられる、請求項１～２１のいずれか１項に記載の化合物又はその立体異性体又は薬学的に許容される塩。
  30. 前記ＰＵ．１媒介性疾患は白血病又は線維症である、請求項２８又は２９に記載の方法。
  31. 前記ＰＵ．１媒介性疾患は、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、皮膚線維症、肺線維症、腎線維症、肝線維症、又は心臓線維症である、請求項２８又は２９に記載の方法。
JP2023530787A 2020-11-20 2021-11-18 Ｐｕ．１阻害剤としての化合物 Pending JP2023549962A (ja)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN2020130512 2020-11-20
CNPCT/CN2020/130512 2020-11-20
PCT/CN2021/131434 WO2022105825A1 (en) 2020-11-20 2021-11-18 Compounds as pu. 1 inhibitors

Publications (1)

Publication Number Publication Date
JP2023549962A true JP2023549962A (ja) 2023-11-29

Family

ID=81708378

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP2023530787A Pending JP2023549962A (ja) 2020-11-20 2021-11-18 Ｐｕ．１阻害剤としての化合物

Country Status (5)

Country Link
US (1) US20240018129A1 (ja)
EP (1) EP4247805A4 (ja)
JP (1) JP2023549962A (ja)
CN (1) CN117203198A (ja)
WO (1) WO2022105825A1 (ja)

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2007521237A (ja) * 2003-09-05 2007-08-02 ユニバーシティ オブ ノース カロライナ アット チャペル ヒル 微生物感染症処置用の新規アミジン化合物
WO2017223260A1 (en) * 2016-06-23 2017-12-28 Albert Einstein College Of Medicine, Inc. Pu.1 inhibitors
EP3381906A1 (en) * 2017-03-27 2018-10-03 Leadiant Biosciences SA Compounds for use as heparanase inhibitors
US20220096441A1 (en) * 2018-10-17 2022-03-31 Georgia State University Research Foundation, Inc. Treatment of acanthamoeba or balamuthia trophozoites and/or cysts

Also Published As

Publication number Publication date
EP4247805A4 (en) 2024-07-10
WO2022105825A1 (en) 2022-05-27
EP4247805A1 (en) 2023-09-27
CN117203198A (zh) 2023-12-08
US20240018129A1 (en) 2024-01-18

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP6805220B2 (ja) 治療上活性な化合物およびそれらの使用方法
AU2009331179B2 (en) Novel bicyclic heterocyclic compound
KR20210143803A (ko) Tead 전사인자의 신규한 소분자 저해제
CN110724174A (zh) 吡咯并三嗪类化合物、组合物及其应用
JP2978850B2 (ja) ２−アミノベンズアゼピン誘導体
EP3816163A1 (en) Cell necrosis inhibitor, preparation method therefor and use thereof
WO2012070015A1 (en) Inhibitors of the activity of complex iii of the mitochondrial electron transport chain and use thereof for treating diseases
KR20150028971A (ko) 항바이러스성 화합물의 고체 형태
JP7187575B2 (ja) Ｒｈｏキナーゼ阻害剤としてのベンゾピラゾール系化合物
KR20020073589A (ko) 축합 이미다졸륨 유도체
JPH10182583A (ja) 新規ヒドロキサム酸誘導体
WO2017105881A1 (en) Deuterated compounds for treating pain
JP3162523B2 (ja) ピペリジルメチル−置換クロマン誘導体
CN112341377A (zh) 一种杂环类化合物及其应用
KR102640385B1 (ko) 고혈압 및/또는 폐 섬유증 치료용 조성물
JP2023549962A (ja) Ｐｕ．１阻害剤としての化合物
CN113214097B (zh) 治疗阿尔茨海默病的化合物
WO2022166923A1 (zh) 苯基二氢嘧啶类化合物及其应用
JP2023520819A (ja) 抗ウイルス１，３－ジ－オキソ－インデン化合物
AU2020289909A1 (en) Antihypertensive polyol compound and derivative thereof
CN115003650A (zh) 二取代金刚烷基衍生物、其药学上可接受的盐及包含其作为有效成分的用于抑制癌生长的药物组合物
CN114072381A (zh) 氨基硫醇类化合物作为脑神经或心脏保护剂的用途
CN111356677A (zh) 四氢异喹啉类衍生物及其制备方法和用途
CN113149894B (zh) (e)-3-芳杂环基丙-2-烯酸衍生物的制药用途
CN114149423B (zh) 四氢吡啶并嘧啶二酮类衍生物、其制备方法及其在医药上的应用

Legal Events

Date Code Title Description
A521 Request for written amendment filed

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523

Effective date: 20230719

A621 Written request for application examination

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621

Effective date: 20230719

RD01 Notification of change of attorney

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A7426

Effective date: 20231116

A521 Request for written amendment filed

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A821

Effective date: 20231116