JP2023542283A - 抗ｐｖｒｉｇタンパク質抗体又は抗体断片及びその使用 - Google Patents

抗ｐｖｒｉｇタンパク質抗体又は抗体断片及びその使用 Download PDF

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Abstract

抗体又は抗体断片を提供する。ＧＹＴＦＳＳＦＳ、ＧＹＴＦＳＴＦＡ又はＧＹＳＦＴＡＹＴから選ばれるＨＣＤＲ１、ＩＬＰＧＳＮＳＴ、ＩＬＰＧＩＮＮＴ、ＩＬＰＧＧＮＮＴ又はＩＮＰＹＮＧＧＴから選ばれるＨＣＤＲ２、及びＳＳＹＷＦＡＹ、ＳＴＹＷＦＡＹ又はＡＲＥＧＮＹＹＧＳＲＧＤＦＤＹから選ばれるＨＣＤＲ３、ＱＳＬＬＮＳＧＮＱＫＮＹ又はＱＴＩＶＴＮから選ばれるＬＣＤＲ１、ＧＡＳ又はＹＡＳから選ばれるＬＣＤＲ２、ＱＮＡＨＳＹＰＰＴ、ＱＮＡＨＳＹＰＰＡ又はＱＱＳＨＳＷＰＦＴから選ばれるＬＣＤＲ３を含む。提供された抗体は癌を治療することに用いられることができる。

Description

本発明は医薬分野に関し、より具体的に、本発明は抗ＰＶＲＩＧタンパク質抗体又は抗体断片及び癌治療における使用に関する。
腫瘍細胞は様々なメカニズムを通じて免疫系の監視を回避する。免疫チェックポイント経路は自己耐性の維持及び活性化のリンパ球効果機能の制御に使用されるが、癌細胞はこの経路を利用して破壊を回避することができる。最近の報道によると、ＰＶＲＩＧは非常に重要な免疫検査点である。ＰＶＲＩＧは、主に活性化されたＴ細胞とＮＫ細胞に発現し、標的細胞又はＤＣ細胞に発現されたリガンドＣＤ１１２と相互作用することによって、Ｔ細胞とＮＫ細胞の効果機能を抑制する。多種の腫瘍細胞表面はＣＤ１１２を高発現し、これによって、ＰＶＲＩＧ信号通路を通じて免疫系の機能を抑制し、免疫の脱出を実現する。
研究によると、ＰＶＲＩＧの欠損はＣＤ８＋Ｔ細胞の効果機能の強化につながることが分かる。なお、ＰＶＲＩＧとそのリガンドＣＤ１１２との結合を遮断する抗体を使用することによっても、腫瘍が浸潤したＣＤ８＋Ｔ細胞の機能を効果的に回復して、腫瘍の成長を抑制することができる。ヒトＰＶＲＩＧを標的とする抗体が臨床実験を行っており、良好な治療効果を示している。
ＰＶＲＩＧを標的とする抗体はさらに改善する必要がある。
本発明は、抗腫瘍機能を促進できる抗体又は抗体断片及びその使用を提供する目的とする。提供された抗体又は抗体断片は、ＰＶＲＩＧに効果的に結合することができ、そして、ＰＶＲＩＧとそのリガンドＣＤ１１２の結合を遮断することができる。提供された抗体又は抗体断片は、ヒトＰＶＲＩＧと高い親和性を有することが検証された。且つ、ヒトＰＶＲＩＧとＣＤ１１２との相互作用を効果的に遮断することができる。
本発明の第１の態様では、本発明は、抗体又は抗体断片を提供し、前記抗体又は抗体断片は重鎖相補決定領域ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３、及び軽鎖相補決定領域ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３を含み、
ＨＣＤＲ１はＧＹＴＦＳＳＦＳ、ＧＹＴＦＳＴＦＡ又はＧＹＳＦＴＡＹＴで示される配列から選ばれ、
ＨＣＤＲ２はＩＬＰＧＳＮＳＴ、ＩＬＰＧＩＮＮＴ、ＩＬＰＧＧＮＮＴ又はＩＮＰＹＮＧＧＴで示される配列から選ばれ、
ＨＣＤＲ３はＳＳＹＷＦＡＹ、ＳＴＹＷＦＡＹ又はＡＲＥＧＮＹＹＧＳＲＧＤＦＤＹで示される配列から選ばれ、
前記軽鎖は軽鎖相補決定領域ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３を含み、
ＬＣＤＲ１はＱＳＬＬＮＳＧＮＱＫＮＹ又はＱＴＩＶＴＮで示される配列から選ばれ、
ＬＣＤＲ２はＧＡＳ又はＹＡＳで示される配列から選ばれ、
ＬＣＤＲ３はＱＮＡＨＳＹＰＰＴ、ＱＮＡＨＳＹＰＰＡ又はＱＱＳＨＳＷＰＦＴで示される配列から選ばれる。
本発明の第２の態様では、本発明は抗体又は抗体断片を提供し、前記抗体又は抗体断片はそれぞれ、
（１）重鎖相補決定領域と軽鎖相補決定領域を含む前記抗体又は抗体断片であって、前記重鎖相補決定領域はＧＹＴＦＳＳＦＳ、ＩＬＰＧＳＮＳＴ及びＳＳＹＷＦＡＹを含み、前記軽鎖相補決定領域はＱＳＬＬＮＳＧＮＱＫＮＹ、ＧＡＳ及びＱＮＡＨＳＹＰＰＴを含む前記抗体又は抗体断片、
（２）重鎖相補決定領域と軽鎖相補決定領域を含む前記抗体又は抗体断片であって、前記重鎖相補決定領域はＧＹＴＦＳＴＦＡ、ＩＬＰＧＩＮＮＴ及びＳＴＹＷＦＡＹを含み、前記軽鎖相補決定領域はＱＳＬＬＮＳＧＮＱＫＮＹ、ＧＡＳ及びＱＮＡＨＳＹＰＰＴを含む前記抗体又は抗体断片、
（３）重鎖相補決定領域と軽鎖相補決定領域を含む前記抗体又は抗体断片であって、前記重鎖相補決定領域はＧＹＴＦＳＴＦＡ、ＩＬＰＧＧＮＮＴ及びＳＴＹＷＦＡＹを含み、前記軽鎖相補決定領域はＱＳＬＬＮＳＧＮＱＫＮＹ、ＧＡＳ及びＱＮＡＨＳＹＰＰＡを含む前記抗体又は抗体断片、及び
（４）重鎖相補決定領域と軽鎖相補決定領域を含む前記抗体又は抗体断片であって、前記重鎖相補決定領域はＧＹＳＦＴＡＹＴ、ＩＮＰＹＮＧＧＴ及びＡＲＥＧＮＹＹＧＳＲＧＤＦＤＹを含み、前記軽鎖相補決定領域はＱＴＩＶＴＮ、ＹＡＳ及びＱＱＳＨＳＷＰＦＴを含む前記抗体又は抗体断片、から選ばれる１種である。
本発明の第３の態様では、本発明は抗体又は抗体断片を提供し、前記抗体又は抗体断片は、
（１）重鎖可変領域と軽鎖可変領域を含む前記抗体又は抗体断片であって、前記重鎖可変領域はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１で示される配列又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１で示される配列に比べて少なくとも１つのアミノ酸置換を有する配列であり、前記軽鎖可変領域はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２で示される配列又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２で示される配列に比べて少なくとも１つのアミノ酸置換を有する配列である前記抗体又は抗体断片、
（２）重鎖可変領域と軽鎖可変領域を含む前記抗体又は抗体断片であって、前記重鎖可変領域は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２４、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３で示される配列又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２４、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３で示される配列に比べて少なくとも１つのアミノ酸置換を有する配列から選ばれ、前記軽鎖可変領域はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６で示される配列又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６で示される配列に比べて少なくとも１つのアミノ酸置換を有する配列である前記抗体又は抗体断片、
（３）重鎖可変領域と軽鎖可変領域を含む前記抗体又は抗体断片であって、前記重鎖可変領域はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９で示される配列又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ： ３９で示される配列に比べて少なくとも１つのアミノ酸置換を有する配列であり、前記軽鎖可変領域はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０で示される配列又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０で示される配列に比べて少なくとも１つのアミノ酸置換を有する配列である前記抗体又は抗体断片、
（４）重鎖可変領域と軽鎖可変領域を含む前記抗体又は抗体断片であって、前記重鎖可変領域はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１で示される配列又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ： ４１で示される配列に比べて少なくとも１つのアミノ酸置換を有する配列であり、前記軽鎖可変領域はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２で示される配列又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２で示される配列に比べて少なくとも１つのアミノ酸置換を有する配列である前記抗体又は抗体断片、及び
（５）重鎖可変領域と軽鎖可変領域を含む前記抗体又は抗体断片であって、前記重鎖可変領域はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４３で示される配列又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４３で示される配列に比べて少なくとも１つのアミノ酸置換を有する配列であり、前記軽鎖可変領域はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４４で示される配列又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４４で示される配列に比べて少なくとも１つのアミノ酸置換を有する配列である前記抗体又は抗体断片、から選ばれる少なくとも１つである。
本発明の第４の態様では、本発明は、上記に記載のいずれかの抗体又は抗体断片をコードする分離可能な核酸を提供する。
本発明の第５の態様では、本発明は、上記に記載の核酸を含む発現ベクターを提供する。
本発明の第６の態様では、本発明は、上記に記載のいずれかの抗体又は抗体断片を発現する組換え細胞を提供する。
本発明の第７の態様では、本発明は、上記に記載の抗体又は抗体断片と薬学的に許容されるベクターを含む薬物組成物を提供する。
本発明の第８の態様では、本発明は、癌を治療する薬物の調製における上記に記載の抗体又は抗体断片又は上記に記載の薬物組成物の使用を提供する。
本発明の第９の態様では、本発明は、（１）上記に記載の抗体又は抗体断片、又は上記に記載の薬物組成物、及び（２）癌を治療するための（１）と異なる抗体を含む薬物併用を提供する。
本発明の第１０の態様では、本発明は、被験者に有効量の上記に記載の抗体又は抗体断片又は上記に記載の薬物組成物を投与するステップを含む、癌を予防又は治療するための方法を提供する。
本発明の第１１の態様では、本発明は、前記サンプルを上記に記載のいずれかの抗体又は抗体断片、又は上記に記載の薬物組成物と接触するステップを含む、体外でサンプル中のＰＶＲＩＧタンパク質活性を抑制する方法を提供する。本発明の実施例によれば、前記サンプルは細胞サンプルであってもよい。
本発明によって提供される抗体又は抗体断片はＰＶＲＩＧ抗原に特異的に結合することができ、且つヒトＰＢＭＣの殺傷効果を大幅に向上させることができ、且つマウスモデルにおいて良好な抗腫瘍効果を示す。本発明の他の特徴及び利点について、続いた具体的な実施形態部分において詳細的に説明する。
本発明の一実施形態におけるヒトＰＶＲＩＧに対するマウス由来抗体の結合のＥＬＩＳＡ分析結果図である。 本発明の一実施形態における細胞膜表面のヒトＰＶＲＩＧに対するマウス由来抗体の結合の分析結果図である。 本発明の一実施形態におけるマウス由来抗体によるヒトＰＶＲＩＧとヒトＣＤ１１２との結合遮断の分析結果図である。 本発明の一実施形態における細胞膜表面のヒトＰＶＲＩＧに対するマウス由来抗体の競合的結合の分析結果図である。 本発明の一実施形態における細胞膜表面のカニクイザルＰＶＲＩＧ及びマウスＰＶＲＩＧに対するマウス由来抗体の結合の活性結果図である。 本発明の一実施形態におけるカニクイザルＰＶＲＩＧに対するマウス由来抗体の結合のＥＬＩＳＡ分析結果図である。 本発明の一実施形態におけるＮＫＧ細胞系膜表面ＰＶＲＩＧに対するマウス由来抗体の検出の活性結果図である。 本発明の一実施形態におけるリンパ球表面ＰＶＲＩＧに対するマウス由来抗体の検出の活性結果図である。 本発明の一実施形態におけるヒト類腫瘍細胞系表面ＣＤ１１２の発現の結果図である。 本発明の一実施形態におけるＮＫ細胞の細胞毒性効果に対するマウス由来抗体の促進の結果図である。 本発明の一実施形態におけるヒトＰＢＭＣの細胞毒性効果に対するマウス由来抗体の促進の結果図である。 本発明の一実施形態におけるＮＫ細胞のエフェクター分子発現に対するマウス由来抗体の促進の結果図である。 本発明の一実施形態におけるＮＫ細胞分泌ＩＦＮ－γに対するマウス由来抗体の促進のＥＬＩＳＡ分析結果図である。 本発明の一実施形態における腫瘍体内成長に対するマウス由来抗体の抑制の分析結果図である。 本発明の一実施形態におけるヒトＰＶＲＩＧに対するヒト化抗体の結合のＥＬＩＳＡ分析結果図である。 本発明の一実施形態における細胞膜表面のヒトＰＶＲＩＧに対するヒト化抗体の結合の分析結果図である。 本発明の一実施形態における細胞膜表面のカニクイザルＰＶＲＩＧに対するヒト化抗体の結合の分析結果図である。 本発明の一実施形態におけるヒト化抗体によるヒトＰＶＲＩＧとヒトＣＤ１１２との結合遮断の分析結果図である。 本発明の一実施形態におけるヒトＰＢＭＣの細胞毒性効果に対するヒト化抗体の促進の結果図である。
以下、本発明の実施例を詳細に説明し、実施例は本発明を解釈するためのもので、本発明を限定するためのものではない。また、本明細書における幾つかの用語を説明して解釈し、これらの説明及び解釈は当業者によって理解されやすいためのものであり、本発明の保護範囲を限定するものと見なすことができない。
本明細書において、用語「抗体」とは、抗原と相互作用することができる（例えば、結合、立体障害、空間分布安定化）、ジスルフィド結合で接続された２つの重鎖及び２つの軽鎖を含むタンパク質である。各重鎖は重鎖可変領域（ＶＨと略称）及び重鎖定常領域を含む。重鎖定常領域は、ＣＨ１、ＣＨ２及びＣＨ３という３つの構造ドメインを含む。各軽鎖は軽鎖可変領域（常にＶＬと略称）及び軽鎖定常領域を含む。軽鎖定常領域は１つの構造ドメインＣＬを含む。重鎖可変領域と軽鎖可変領域はそれぞれ相補的な決定領域（ＣＤＲ）にさらに分割されてもよい。各重鎖可変領域と各軽鎖可変領域はそれぞれアミノ基端からカルボキシル基端まで、ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３という３つのＣＤＲ領域が配列される。区別するために、本明細書において、重鎖の３つのＣＤＲ領域は、ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３と呼ばれ、軽鎖の３つのＣＤＲ領域はＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３と呼ばれる。
本明細書に言及された抗体又は抗体断片における抗体はモノクローナル抗体、ヒト抗体、ヒト化抗体、ラクダ化（ｃａｍｅｌｉｓｅｄ）抗体及びキメラ抗体を含むが、これらに限定されない。抗体は任意の同種であり得、例えば、ＩｇＧ、ＩｇＥ、ＩｇＭ、ＩｇＤ、ＩｇＡ及びＩｇＹ等が挙げられる。
用語「抗体断片」とは、抗体が抗原と特異的に相互作用（例えば、結合、立体障害、空間分布安定化）する能力を保持する１つ又は複数の部分である。抗体断片の例はＦａｂ断片、ＶＬ、ＶＨ、ＣＬ及びＣＨ１構造ドメインからなる単価断片、Ｆ（ａｂ）２断片、ヒンジ領域でジスルフィドブリッジを介して接続された２つのＦａｂ断片を含む二価断片、ＶＨ及びＣＨ１構造ドメインからなるＦｄ断片、抗体片腕のＶＬ及びＶＨ構造ドメインからなるＦｖ断片、及び分離された相補的な決定領域（ＣＤＲ）などを含むが、これらに限定されない。そして、Ｆｖ断片の２つの構造ドメインＶＬ及びＶＨは別々の遺伝子でコードされるが、それらは組換え方法を用いて単一のタンパク質鎖にすることができる合成接続部分によって結合され、ＶＬ及びＶＨ領域はペアで単価分子を形成する（一本鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）と呼ばれ、例えば、Ｂｉｒｄなどによる（１９８８）Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４２：４２３－４２６、及びＨｕｓｔｏｎなどによる（１９８８）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．８５：５８７９－５８８３を参照）。これらの一本鎖抗体も用語「抗体断片」内に含まれる。これらの抗体断片は、当業者に公知の常法を用いて得られるものであり、完全抗体と同様に実用的な断片をスクリーニングする。
「ヒト化抗体」とは、（ｉ）非ヒト由来（例えば、異種免疫系付きのトランスジェニックマウス）のもので、ヒト種系配列に基づくものである、又は（ｉｉ）ＣＤＲ－グラフトによるものであり、可変構造ドメインのＣＤＲは非ヒト由来のものであるが、可変構造ドメインの１つ又は複数のフレームワークはヒト由来のもので、且つ定常構造ドメインが存在すると、ヒト由来のものである。
用語「キメラ抗体」とは、ある種に発見された配列に由来する、または対応する定常抗体領域と別の種に由来する可変抗体領域を有するものである。好ましくは、定常抗体領域は、ヒトにおいて、例えば、ヒト種系細胞又は体細胞に発見された配列に由来する、または対応し、可変抗体領域（例えば、ＶＨ、ＶＬ、ＣＤＲ又はＦＲ領域）は非ヒト動物、例えば、マウス、ラット、ウサギ又はハムスターに発見された配列に由来する。
本明細書に用いられた用語「組換え抗体」は、組換え方式によって調製、発現、生成又は分離されたすべての抗体、例えば、ヒト免疫グロブリン遺伝子トランスジェニック又はトランス染色体動物（例えば、マウス）又はそれによって調製されたハイブリドーマから分離する抗体、抗体を形質転換して発現する宿主細胞から分離する抗体、組換え、組み合わせヒト抗体ライブラリーから選択、分離された抗体、及びヒト免疫グロブリン遺伝子配列の一部または全部を他のＤＮＡ配列に切断することを含む他の任意の方法で調製、発現、生成または単離された抗体を含む。好ましくは、これらの組換え抗体は可変領域を有し、フレームワーク領域及びＣＤＲ領域はヒト種系免疫グロブリン配列に由来する。
本明細書において、用語「モノクローナル抗体」とは、単一分子からなる抗体分子製剤である。モノクローナル抗体は、特定のエピトープに対するユニークな結合特異性及び親和性を有するユニークな結合部位を示す。
このため、本発明の１つの態様は、抗体又は抗体断片を提供し、前記抗体又は抗体断片は、重鎖相補決定領域ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３、及び軽鎖相補決定領域ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３を含み、ＨＣＤＲ１はＧＹＴＦＳＳＦＳ、ＧＹＴＦＳＴＦＡ又はＧＹＳＦＴＡＹＴで示される配列から選ばれ、ＨＣＤＲ２は、ＩＬＰＧＳＮＳＴ、ＩＬＰＧＩＮＮＴ、ＩＬＰＧＧＮＮＴ又はＩＮＰＹＮＧＧＴで示される配列から選ばれ、ＨＣＤＲ３は、ＳＳＹＷＦＡＹ、ＳＴＹＷＦＡＹ又はＡＲＥＧＮＹＹＧＳＲＧＤＦＤＹで示される配列から選ばれ、ＬＣＤＲ１は、ＱＳＬＬＮＳＧＮＱＫＮＹ又はＱＴＩＶＴＮで示される配列から選ばれ、ＬＣＤＲ２はＧＡＳ又はＹＡＳで示される配列から選ばれ、ＬＣＤＲ３はＱＮＡＨＳＹＰＰＴ、ＱＮＡＨＳＹＰＰＡ又はＱＱＳＨＳＷＰＦＴで示される配列から選ばれる。本発明によって提供される抗体又は抗体断片は、高い親和性でＰＶＲＩＧタンパク質に結合することができる。
少なくともいくつかの実施形態において、本発明は抗体又は抗体断片を提供し、前記抗体又は抗体断片は重鎖相補決定領域と軽鎖相補決定領域を含み、前記重鎖相補決定領域はＧＹＴＦＳＳＦＳ、ＩＬＰＧＳＮＳＴ及びＳＳＹＷＦＡＹを含み、前記軽鎖相補決定領域はＱＳＬＬＮＳＧＮＱＫＮＹ、ＧＡＳ及びＱＮＡＨＳＹＰＰＴを含む。
少なくともいくつかの実施形態において、本発明は抗体又は抗体断片を提供し、前記抗体又は抗体断片は重鎖可変領域と軽鎖可変領域を含み、前記重鎖可変領域はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１で示される配列又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１で示される配列に比べて少なくとも１つのアミノ酸置換を有する配列であり、前記軽鎖可変領域はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２で示される配列又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２で示される配列に比べて少なくとも１つのアミノ酸置換を有する配列である。
重鎖可変領域ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１で示される配列を以下のように示す。
ＱＶＱＬＱＱＳＧＡＥＬＶＫＰＧＡＳＶＫＩＳＣＫＡＴＧＹＴＦＳＳＦＳＩＥＷＶＫＱＲＰＧＨＧＬＡＷＩＧＥＩＬＰＧＳＮＳＴＮＹＮＥＫＦＫＧＫＡＴＦＴＡＤＴＳＳＮＴＡＹＭＱＬＳＳＬＴＳＥＤＳＡＶＹＹＣＳＳＹＷＦＡＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＡ （ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ： １）。
軽鎖可変領域ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２で示される配列を以下のように示す。
ＤＩＶＭＴＱＳＰＳＳＬＳＶＳＡＧＥＫＶＴＭＳＣＫＳＳＱＳＬＬＮＳＧＮＱＫＮＹＬＡＷＹＱＱＫＰＧＱＰＰＫＬＬＩＹＧＡＳＴＲＥＳＧＶＰＤＲＦＴＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＶＱＡＥＤＬＡＶＹＹＣＱＮＡＨＳＹＰＰＴＦＡＡＧＴＫＬＥＬＫ （ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２）。
提供された抗体又は抗体断片配列はヒト化改変され、ヒト化改変された抗体又は抗体断片を以下のように示す。
少なくともいくつかの実施形態において、前記抗体又は抗体断片は重鎖可変領域と軽鎖可変領域を含み、前記重鎖可変領域はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３で示される配列又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３で示される配列に比べて少なくとも１つのアミノ酸置換を有する配列であり、前記軽鎖可変領域はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６で示される配列又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６で示される配列に比べて少なくとも１つのアミノ酸置換を有する配列である。
少なくともいくつかの実施形態において、前記抗体は抗体４－ｈｕ１であり、前記抗体４－ｈｕ１の重鎖可変領域はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３で示される配列であり、軽鎖可変領域はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６で示される配列である。少なくともいくつかの好ましい実施形態において、抗体４－ｈｕ１の重鎖アミノ酸配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４であり、それに応じて、該重鎖アミノ酸配列をコードするヌクレオチド配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５に示され、抗体４－ｈｕ１の軽鎖アミノ酸配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７に示され、それに応じて、該軽鎖アミノ酸配列をコードするヌクレオチド配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８に示される。
少なくともいくつかの実施形態において、前記抗体又は抗体断片は重鎖可変領域と軽鎖可変領域を含み、前記重鎖可変領域はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６で示される配列又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６で示される配列に比べて少なくとも１つのアミノ酸置換を有する配列であり、前記軽鎖可変領域はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６で示される配列又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６で示される配列に比べて少なくとも１つのアミノ酸置換を有する配列である。
少なくともいくつかの好ましい実施形態において、前記抗体は抗体４－ｈｕ２であり、前記抗体４－ｈｕ２の重鎖可変領域はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６で示される配列であり、軽鎖可変領域はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６で示される配列である。少なくともいくつかの好ましい実施形態において、抗体４－ｈｕ２の重鎖アミノ酸配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７に示され、それに応じて、該重鎖アミノ酸配列をコードするヌクレオチド配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８に示され、抗体４－ｈｕ２の軽鎖アミノ酸配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７に示され、それに応じて、該軽鎖アミノ酸配列をコードするヌクレオチド配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８に示される。
少なくともいくつかの実施形態において、前記抗体又は抗体断片は重鎖可変領域と軽鎖可変領域を含み、前記重鎖可変領域はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９で示される配列又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９で示される配列に比べて少なくとも１つのアミノ酸置換を有する配列であり、前記軽鎖可変領域はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６で示される配列又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６で示される配列に比べて少なくとも１つのアミノ酸置換を有する配列である。
少なくともいくつかの好ましい実施形態において、前記抗体は抗体４－ｈｕ３であり、前記抗体４－ｈｕ３の重鎖可変領域はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９で示される配列であり、軽鎖可変領域はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６で示される配列である。少なくともいくつかの好ましい実施形態において、抗体４－ｈｕ３の重鎖アミノ酸配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０に示され、それに応じて、該重鎖アミノ酸配列をコードするヌクレオチド配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１１に示され、抗体４－ｈｕ３の軽鎖アミノ酸配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７に示され、それに応じて、該軽鎖アミノ酸配列をコードするヌクレオチド配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８に示される。
少なくともいくつかの実施形態において、前記抗体又は抗体断片は重鎖可変領域と軽鎖可変領域を含み、前記重鎖可変領域はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２で示される配列又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２で示される配列に比べて少なくとも１つのアミノ酸置換を有する配列であり、前記軽鎖可変領域はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６で示される配列又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６で示される配列に比べて少なくとも１つのアミノ酸置換を有する配列である。
少なくともいくつかの好ましい実施形態において、前記抗体は抗体４－ｈｕ４であり、前記抗体４－ｈｕ４の重鎖可変領域はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２で示される配列であり、軽鎖可変領域はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６で示される配列である。少なくともいくつかの好ましい実施形態において、抗体４－ｈｕ４の重鎖アミノ酸配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３に示され、それに応じて、該重鎖アミノ酸配列をコードするヌクレオチド配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４に示され、抗体４－ｈｕ４の軽鎖アミノ酸配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７に示され、それに応じて、該軽鎖アミノ酸配列をコードするヌクレオチド配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８に示される。
少なくともいくつかの実施形態において、前記抗体又は抗体断片は重鎖可変領域と軽鎖可変領域を含み、前記重鎖可変領域はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５で示される配列又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５で示される配列に比べて少なくとも１つのアミノ酸置換を有する配列であり、前記軽鎖可変領域はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６で示される配列又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６で示される配列に比べて少なくとも１つのアミノ酸置換を有する配列である。
少なくともいくつかの好ましい実施形態において、前記抗体は抗体４－ｈｕ５であり、前記抗体４－ｈｕ５の重鎖可変領域はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５で示される配列であり、軽鎖可変領域はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６で示される配列である。少なくともいくつかの好ましい実施形態において、抗体４－ｈｕ５の重鎖アミノ酸配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１６に示され、それに応じて、該重鎖アミノ酸配列をコードするヌクレオチド配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１７に示され、抗体４－ｈｕ５の軽鎖アミノ酸配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７に示され、それに応じて、該軽鎖アミノ酸配列をコードするヌクレオチド配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８に示される。
少なくともいくつかの実施形態において、前記抗体又は抗体断片は重鎖可変領域と軽鎖可変領域を含み、前記重鎖可変領域はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８で示される配列又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８で示される配列に比べて少なくとも１つのアミノ酸置換を有する配列であり、前記軽鎖可変領域はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６で示される配列又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６で示される配列に比べて少なくとも１つのアミノ酸置換を有する配列である。
少なくともいくつかの好ましい実施形態において、前記抗体は抗体４－ｈｕ６であり、前記抗体４－ｈｕ６の重鎖可変領域はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８で示される配列であり、軽鎖可変領域はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６で示される配列である。少なくともいくつかの好ましい実施形態において、抗体４－ｈｕ６の重鎖アミノ酸配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１９に示され、それに応じて、該重鎖アミノ酸配列をコードするヌクレオチド配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２０に示され、抗体４－ｈｕ６の軽鎖アミノ酸配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７に示され、それに応じて、該軽鎖アミノ酸配列をコードするヌクレオチド配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８に示される。
少なくともいくつかの実施形態において、前記抗体又は抗体断片は重鎖可変領域と軽鎖可変領域を含み、前記重鎖可変領域はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２１で示される配列又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２１で示される配列に比べて少なくとも１つのアミノ酸置換を有する配列であり、前記軽鎖可変領域はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６で示される配列又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６で示される配列に比べて少なくとも１つのアミノ酸置換を有する配列である。
少なくともいくつかの好ましい実施形態において、前記抗体は抗体４－ｈｕ７であり、前記抗体４－ｈｕ７の重鎖可変領域はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２１で示される配列であり、軽鎖可変領域はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６で示される配列である。少なくともいくつかの好ましい実施形態において、抗体４－ｈｕ７の重鎖アミノ酸配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２２に示され、それに応じて、該重鎖アミノ酸配列をコードするヌクレオチド配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３に示され、抗体４－ｈｕ７の軽鎖アミノ酸配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７に示され、それに応じて、該軽鎖アミノ酸配列をコードするヌクレオチド配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８に示される。
少なくともいくつかの実施形態において、前記抗体又は抗体断片は重鎖可変領域と軽鎖可変領域を含み、前記重鎖可変領域はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２４で示される配列又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２４で示される配列に比べて少なくとも１つのアミノ酸置換を有する配列であり、前記軽鎖可変領域はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６で示される配列又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６で示される配列に比べて少なくとも１つのアミノ酸置換を有する配列である。
少なくともいくつかの好ましい実施形態において、前記抗体又は抗体断片は抗体４－ｈｕ８であり、前記抗体４－ｈｕ８の重鎖可変領域はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２４で示される配列であり、軽鎖可変領域はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６で示される配列である。少なくともいくつかの好ましい実施形態において、抗体４－ｈｕ８の重鎖アミノ酸配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２５に示され、それに応じて、該重鎖アミノ酸配列をコードするヌクレオチド配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２６に示され、抗体４－ｈｕ８の軽鎖アミノ酸配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７に示され、それに応じて、該軽鎖アミノ酸配列をコードするヌクレオチド配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８に示される。
少なくともいくつかの実施形態において、前記抗体又は抗体断片は重鎖可変領域と軽鎖可変領域を含み、前記重鎖可変領域はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７で示される配列又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７で示される配列に比べて少なくとも１つのアミノ酸置換を有する配列であり、前記軽鎖可変領域はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６で示される配列又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６で示される配列に比べて少なくとも１つのアミノ酸置換を有する配列である。
少なくともいくつかの好ましい実施形態において、前記抗体は抗体４－ｈｕ９であり、前記抗体４－ｈｕ９の重鎖可変領域はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７で示される配列であり、軽鎖可変領域はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６で示される配列である。少なくともいくつかの好ましい実施形態において、抗体４－ｈｕ９の重鎖アミノ酸配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８に示され、それに応じて、該重鎖アミノ酸配列をコードするヌクレオチド配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９に示され、抗体４－ｈｕ９の軽鎖アミノ酸配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７に示され、それに応じて、該軽鎖アミノ酸配列をコードするヌクレオチド配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８に示される。
少なくともいくつかの実施形態において、前記抗体又は抗体断片は重鎖可変領域と軽鎖可変領域を含み、前記重鎖可変領域はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０で示される配列又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０で示される配列に比べて少なくとも１つのアミノ酸置換を有する配列であり、前記軽鎖可変領域はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６で示される配列又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６で示される配列に比べて少なくとも１つのアミノ酸置換を有する配列である。
少なくともいくつかの好ましい実施形態において、前記抗体は抗体４－ｈｕ１０であり、前記抗体４－ｈｕ１０の重鎖可変領域はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０で示される配列であり、軽鎖可変領域はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６で示される配列である。少なくともいくつかの好ましい実施形態において、抗体４－ｈｕ１０の重鎖アミノ酸配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１に示され、それに応じて、該重鎖アミノ酸配列をコードするヌクレオチド配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２に示され、抗体４－ｈｕ１０の軽鎖アミノ酸配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７に示され、それに応じて、該軽鎖アミノ酸配列をコードするヌクレオチド配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８に示される。
少なくともいくつかの実施形態において、前記抗体又は抗体断片は重鎖可変領域と軽鎖可変領域を含み、前記重鎖可変領域はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３で示される配列又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３で示される配列に比べて少なくとも１つのアミノ酸置換を有する配列であり、前記軽鎖可変領域はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６で示される配列又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６で示される配列に比べて少なくとも１つのアミノ酸置換を有する配列である。
少なくともいくつかの好ましい実施形態において、前記抗体は抗体４－ｈｕ１１であり、前記抗体４－ｈｕ１１の重鎖可変領域はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３で示される配列であり、軽鎖可変領域はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６で示される配列である。少なくともいくつかの好ましい実施形態において、抗体４－ｈｕ１１の重鎖アミノ酸配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４に示され、それに応じて、該重鎖アミノ酸配列をコードするヌクレオチド配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５に示され、抗体４－ｈｕ１１の軽鎖アミノ酸配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７に示され、それに応じて、該軽鎖アミノ酸配列をコードするヌクレオチド配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８に示される。
抗体４－ｈｕ１の重鎖可変領域ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３で示される配列は以下のとおりである。
ＥＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＳＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＧＴＦＳＳＦＳＩＥＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧＥＩＬＰＧＳＮＳＴＮＹＮＥＫＦＫＧＲＶＴＩＴＡＤＥＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＹＷＦＡＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ （ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３）。
抗体４－ｈｕ１の重鎖アミノ酸配列ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４で示される配列は以下のとおりである（ＩｇＧ４ Ｓ２２８Ｐ突然変異）：
ＥＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＳＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＧＴＦＳＳＦＳＩＥＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧＥＩＬＰＧＳＮＳＴＮＹＮＥＫＦＫＧＲＶＴＩＴＡＤＥＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＹＷＦＡＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＣＳＲＳＴＳＥＳＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＫＴＹＴＣＮＶＤＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＲＶＥＳＫＹＧＰＰＣＰＰＣＰＡＰＥＦＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＱＥＤＰＥＶＱＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＦＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＧＬＰＳＳＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＱＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＲＬＴＶＤＫＳＲＷＱＥＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＬＧＫ （ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４）。Ｓ２２８Ｐ突然変異はヒンジ領域に発生した突然変異であり、該突然変異は半抗体の形成を防止することができる（半抗体とは、ＩｇＧ４抗体で半分子が動的に交換される現象である）。
抗体４－ｈｕ１の重鎖アミノ酸配列でコードされた核酸配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５に示される。
ＧＡＧＧＴＧＣＡＧＣＴＧＧＴＧＣＡＧＴＣＣＧＧＣＧＣＴＧＡＧＧＴＧＡＡＧＡＡＧＣＣＣＧＧＣＴＣＣＴＣＣＧＴＧＡＡＧＧＴＧＡＧＣＴＧＣＡＡＧＧＣＴＴＣＣＧＧＣＧＧＣＡＣＣＴＴＴＴＣＣＡＧＣＴＴＣＴＣＣＡＴＣＧＡＧＴＧＧＧＴＧＡＧＧＣＡＧＧＣＣＣＣＣＧＧＣＣＡＧＧＧＡＴＴＧＧＡＧＴＧＧＡＴＧＧＧＣＧＡＧＡＴＣＣＴＧＣＣＴＧＧＣＴＣＣＡＡＣＡＧＣＡＣＣＡＡＣＴＡＣＡＡＴＧＡＧＡＡＧＴＴＴＡＡＧＧＧＣＡＧＧＧＴＧＡＣＣＡＴＣＡＣＣＧＣＴＧＡＣＧＡＧＴＣＣＡＣＣＴＣＣＡＣＣＧＣＣＴＡＣＡＴＧＧＡＧＣＴＧＴＣＣＴＣＣＣＴＧＣＧＧＴＣＣＧＡＧＧＡＴＡＣＣＧＣＴＧＴＧＴＡＣＴＡＴＴＧＴＧＣＣＡＧＧＴＡＴＴＧＧＴＴＣＧＣＴＴＡＴＴＧＧＧＧＣＣＡＧＧＧＣＡＣＣＣＴＧＧＴＧＡＣＣＧＴＧＴＣＣＴＣＣＧＣＣＴＣＣＡＣＣＡＡＧＧＧＣＣＣＣＴＣＣＧＴＧＴＴＣＣＣＣＣＴＧＧＣＴＣＣＣＴＧＴＡＧＣＣＧＧＴＣＣＡＣＣＡＧＣＧＡＧＴＣＣＡＣＣＧＣＴＧＣＣＣＴＧＧＧＣＴＧＴＣＴＧＧＴＧＡＡＧＧＡＣＴＡＴＴＴＣＣＣＣＧＡＧＣＣＣＧＴＧＡＣＣＧＴＧＡＧＣＴＧＧＡＡＴＡＧＣＧＧＣＧＣＣＣＴＧＡＣＣＴＣＣＧＧＣＧＴＧＣＡＣＡＣＡＴＴＣＣＣＴＧＣＴＧＴＧＣＴＧＣＡＧＡＧＣＴＣＣＧＧＣＣＴＧＴＡＴＡＧＣＣＴＧＴＣＣＴＣＣＧＴＧＧＴＧＡＣＣＧＴＧＣＣＣＴＣＣＴＣＣＴＣＣＣＴＧＧＧＣＡＣＣＡＡＧＡＣＣＴＡＴＡＣＣＴＧＣＡＡＴＧＴＧＧＡＣＣＡＣＡＡＧＣＣＣＡＧＣＡＡＣＡＣＣＡＡＧＧＴＧＧＡＣＡＡＧＡＧＧＧＴＧＧＡＧＡＧＣＡＡＧＴＡＣＧＧＣＣＣＴＣＣＴＴＧＣＣＣＴＣＣＴＴＧＣＣＣＣＧＣＴＣＣＡＧＡＧＴＴＣＣＴＧＧＧＣＧＧＣＣＣＡＡＧＣＧＴＧＴＴＴＣＴＧＴＴＴＣＣＴＣＣＣＡＡＧＣＣＴＡＡＧＧＡＣＡＣＣＣＴＧＡＴＧＡＴＣＴＣＣＡＧＧＡＣＣＣＣＴＧＡＧＧＴＧＡＣＣＴＧＣＧＴＧＧＴＧＧＴＧＧＡＴＧＴＧＴＣＣＣＡＧＧＡＧＧＡＣＣＣＴＧＡＧＧＴＧＣＡＧＴＴＣＡＡＣＴＧＧＴＡＣＧＴＧＧＡＴＧＧＣＧＴＧＧＡＧＧＴＧＣＡＣＡＡＣＧＣＣＡＡＧＡＣＣＡＡＧＣＣＣＣＧＧＧＡＧＧＡＧＣＡＧＴＴＣＡＡＣＡＧＣＡＣＣＴＡＣＣＧＧＧＴＧＧＴＧＡＧＣＧＴＧＣＴＧＡＣＣＧＴＧＣＴＧＣＡＣＣＡＧＧＡＴＴＧＧＣＴＧＡＡＴＧＧＣＡＡＧＧＡＧＴＡＣＡＡＧＴＧＣＡＡＧＧＴＧＴＣＣＡＡＣＡＡＧＧＧＣＣＴＧＣＣＴＡＧＣＡＧＣＡＴＣＧＡＧＡＡＧＡＣＣＡＴＣＴＣＣＡＡＧＧＣＣＡＡＧＧＧＣＣＡＧＣＣＣＡＧＧＧＡＧＣＣＴＣＡＧＧＴＧＴＡＴＡＣＣＣＴＧＣＣＣＣＣＴＡＧＣＣＡＧＧＡＧＧＡＧＡＴＧＡＣＣＡＡＧＡＡＣＣＡＧＧＴＧＡＧＣＣＴＧＡＣＣＴＧＣＣＴＧＧＴＧＡＡＧＧＧＣＴＴＴＴＡＴＣＣＴＡＧＣＧＡＴＡＴＣＧＣＴＧＴＧＧＡＧＴＧＧＧＡＧＴＣＣＡＡＣＧＧＣＣＡＧＣＣＣＧＡＧＡＡＣＡＡＣＴＡＣＡＡＧＡＣＣＡＣＣＣＣＴＣＣＣＧＴＧＣＴＧＧＡＴＡＧＣＧＡＣＧＧＣＴＣＣＴＴＣＴＴＴＣＴＧＴＡＣＴＣＣＣＧＧＣＴＧＡＣＣＧＴＧＧＡＴＡＡＧＴＣＣＡＧＧＴＧＧＣＡＧＧＡＧＧＧＣＡＡＴＧＴＧＴＴＣＡＧＣＴＧＣＴＣＣＧＴＧＡＴＧＣＡＣＧＡＧＧＣＣＣＴＧＣＡＣＡＡＴＣＡＣＴＡＴＡＣＣＣＡＧＡＡＧＴＣＣＣＴＧＴＣＣＣＴＧＴＣＣＣＴＣＧＧＣＡＡＧ （ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５）
抗体４－ｈｕ２の重鎖可変領域アミノ酸配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６に示される。
ＥＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＳＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＧＴＦＳＳＦＳＩＥＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧＥＩＬＰＧＳＮＳＴＮＹＮＥＫＦＫＧＲＶＴＩＴＡＤＥＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＳＳＹＷＦＡＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ （ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６）
抗体４－ｈｕ２の重鎖アミノ酸配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７に示される（ＩｇＧ４ Ｓ２２８Ｐ突然変異）。
ＥＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＳＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＧＴＦＳＳＦＳＩＥＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧＥＩＬＰＧＳＮＳＴＮＹＮＥＫＦＫＧＲＶＴＩＴＡＤＥＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＳＳＹＷＦＡＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＣＳＲＳＴＳＥＳＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＫＴＹＴＣＮＶＤＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＲＶＥＳＫＹＧＰＰＣＰＰＣＰＡＰＥＦＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＱＥＤＰＥＶＱＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＦＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＧＬＰＳＳＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＱＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＲＬＴＶＤＫＳＲＷＱＥＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＬＧＫ （ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７）
抗体４－ｈｕ２の重鎖アミノ酸配列でコードされた核酸配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８に示される。
ＧＡＧＧＴＧＣＡＧＣＴＧＧＴＧＣＡＧＡＧＣＧＧＣＧＣＴＧＡＧＧＴＧＡＡＧＡＡＧＣＣＴＧＧＣＡＧＣＴＣＣＧＴＧＡＡＧＧＴＧＡＧＣＴＧＣＡＡＧＧＣＣＴＣＣＧＧＣＧＧＣＡＣＣＴＴＣＴＣＣＡＧＣＴＴＴＴＣＣＡＴＣＧＡＧＴＧＧＧＴＧＡＧＧＣＡＧＧＣＣＣＣＴＧＧＣＣＡＧＧＧＡＣＴＧＧＡＧＴＧＧＡＴＧＧＧＣＧＡＧＡＴＣＣＴＧＣＣＴＧＧＣＡＧＣＡＡＴＴＣＣＡＣＣＡＡＣＴＡＴＡＡＴＧＡＧＡＡＧＴＴＣＡＡＧＧＧＣＣＧＧＧＴＧＡＣＣＡＴＣＡＣＣＧＣＴＧＡＣＧＡＧＡＧＣＡＣＣＴＣＣＡＣＣＧＣＴＴＡＣＡＴＧＧＡＧＣＴＧＴＣＣＡＧＣＣＴＧＡＧＧＴＣＣＧＡＧＧＡＣＡＣＣＧＣＴＧＴＧＴＡＣＴＡＣＴＧＴＡＧＣＴＣＣＴＡＴＴＧＧＴＴＣＧＣＴＴＡＣＴＧＧＧＧＣＣＡＧＧＧＣＡＣＣＣＴＧＧＴＧＡＣＣＧＴＧＴＣＣＴＣＣＧＣＣＡＧＣＡＣＣＡＡＧＧＧＣＣＣＴＡＧＣＧＴＧＴＴＣＣＣＣＣＴＧＧＣＴＣＣＣＴＧＣＡＧＣＣＧＧＡＧＣＡＣＣＴＣＴＧＡＧＴＣＣＡＣＣＧＣＣＧＣＣＣＴＧＧＧＣＴＧＴＣＴＧＧＴＧＡＡＧＧＡＴＴＡＣＴＴＴＣＣＴＧＡＧＣＣＣＧＴＧＡＣＣＧＴＧＡＧＣＴＧＧＡＡＴＡＧＣＧＧＣＧＣＴＣＴＧＡＣＣＡＧＣＧＧＣＧＴＧＣＡＣＡＣＣＴＴＴＣＣＴＧＣＣＧＴＧＣＴＧＣＡＧＡＧＣＡＧＣＧＧＣＣＴＧＴＡＣＡＧＣＣＴＧＴＣＣＴＣＣＧＴＧＧＴＧＡＣＣＧＴＧＣＣＴＡＧＣＴＣＣＡＧＣＣＴＧＧＧＣＡＣＣＡＡＧＡＣＣＴＡＴＡＣＣＴＧＴＡＡＴＧＴＧＧＡＴＣＡＣＡＡＧＣＣＴＡＧＣＡＡＴＡＣＣＡＡＧＧＴＧＧＡＣＡＡＧＣＧＧＧＴＧＧＡＧＴＣＣＡＡＧＴＡＣＧＧＣＣＣＣＣＣＣＴＧＣＣＣＴＣＣＣＴＧＣＣＣＡＧＣＴＣＣＴＧＡＡＴＴＴＣＴＧＧＧＣＧＧＣＣＣＣＡＧＣＧＴＧＴＴＴＣＴＧＴＴＴＣＣＴＣＣＣＡＡＧＣＣＴＡＡＧＧＡＴＡＣＣＣＴＧＡＴＧＡＴＣＴＣＣＡＧＧＡＣＣＣＣＣＧＡＧＧＴＧＡＣＣＴＧＴＧＴＧＧＴＧＧＴＧＧＡＣＧＴＧＴＣＣＣＡＧＧＡＧＧＡＴＣＣＣＧＡＧＧＴＧＣＡＧＴＴＴＡＡＣＴＧＧＴＡＣＧＴＧＧＡＣＧＧＣＧＴＧＧＡＧＧＴＧＣＡＣＡＡＴＧＣＣＡＡＧＡＣＣＡＡＧＣＣＴＡＧＧＧＡＧＧＡＧＣＡＧＴＴＣＡＡＴＡＧＣＡＣＣＴＡＣＡＧＧＧＴＧＧＴＧＡＧＣＧＴＧＣＴＧＡＣＣＧＴＧＣＴＧＣＡＣＣＡＧＧＡＴＴＧＧＣＴＧＡＡＴＧＧＣＡＡＧＧＡＧＴＡＴＡＡＧＴＧＣＡＡＧＧＴＧＴＣＣＡＡＣＡＡＧＧＧＣＣＴＧＣＣＣＴＣＣＡＧＣＡＴＣＧＡＧＡＡＧＡＣＣＡＴＣＡＧＣＡＡＧＧＣＣＡＡＧＧＧＣＣＡＧＣＣＣＣＧＧＧＡＧＣＣＴＣＡＧＧＴＴＴＡＴＡＣＣＣＴＧＣＣＣＣＣＴＡＧＣＣＡＧＧＡＧＧＡＧＡＴＧＡＣＣＡＡＧＡＡＣＣＡＧＧＴＧＴＣＣＣＴＧＡＣＣＴＧＴＣＴＧＧＴＧＡＡＡＧＧＣＴＴＣＴＡＴＣＣＴＴＣＣＧＡＴＡＴＣＧＣＣＧＴＧＧＡＧＴＧＧＧＡＧＴＣＣＡＡＴＧＧＣＣＡＧＣＣＣＧＡＧＡＡＣＡＡＴＴＡＴＡＡＧＡＣＣＡＣＣＣＣＴＣＣＣＧＴＧＣＴＧＧＡＴＴＣＣＧＡＣＧＧＣＡＧＣＴＴＴＴＴＣＣＴＧＴＡＣＴＣＣＣＧＧＣＴＧＡＣＣＧＴＧＧＡＴＡＡＧＡＧＣＣＧＧＴＧＧＣＡＧＧＡＧＧＧＣＡＡＴＧＴＧＴＴＴＡＧＣＴＧＣＡＧＣＧＴＧＡＴＧＣＡＣＧＡＧＧＣＴＣＴＧＣＡＣＡＡＣＣＡＣＴＡＣＡＣＣＣＡＧＡＡＧＴＣＣＣＴＧＡＧＣＣＴＧＴＣＣＣＴＧＧＧＣＡＡＧ （ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８）
抗体４－ｈｕ３の重鎖可変領域アミノ酸配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９に示される。
ＥＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＳＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＧＴＦＳＳＦＳＩＥＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧＥＩＬＰＧＳＮＳＴＮＹＮＥＫＦＫＧＲＶＴＦＴＡＤＥＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＳＳＹＷＦＡＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ （ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９）
抗体４－ｈｕ３の重鎖アミノ酸配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０に示される（ＩｇＧ４ Ｓ２２８Ｐ突然変異）。
ＥＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＳＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＧＴＦＳＳＦＳＩＥＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧＥＩＬＰＧＳＮＳＴＮＹＮＥＫＦＫＧＲＶＴＦＴＡＤＥＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＳＳＹＷＦＡＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＣＳＲＳＴＳＥＳＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＫＴＹＴＣＮＶＤＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＲＶＥＳＫＹＧＰＰＣＰＰＣＰＡＰＥＦＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＱＥＤＰＥＶＱＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＦＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＧＬＰＳＳＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＱＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＲＬＴＶＤＫＳＲＷＱＥＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＬＧＫ （ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０）
抗体４－ｈｕ３の重鎖アミノ酸配列でコードされた核酸配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１１に示される。
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抗体４－ｈｕ４の重鎖可変領域アミノ酸配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２に示される。
ＥＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＳＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＧＴＦＳＳＦＳＩＥＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＩＧＥＩＬＰＧＳＮＳＴＮＹＮＥＫＦＫＧＲＶＴＦＴＡＤＥＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＳＳＹＷＦＡＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ （ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２）
抗体４－ｈｕ４の重鎖アミノ酸配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３に示される（ＩｇＧ４ Ｓ２２８Ｐ突然変異）。
ＥＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＳＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＧＴＦＳＳＦＳＩＥＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＩＧＥＩＬＰＧＳＮＳＴＮＹＮＥＫＦＫＧＲＶＴＦＴＡＤＥＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＳＳＹＷＦＡＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＣＳＲＳＴＳＥＳＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＫＴＹＴＣＮＶＤＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＲＶＥＳＫＹＧＰＰＣＰＰＣＰＡＰＥＦＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＱＥＤＰＥＶＱＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＦＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＧＬＰＳＳＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＱＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＲＬＴＶＤＫＳＲＷＱＥＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＬＧＫ （ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３）
抗体４－ｈｕ４の重鎖アミノ酸配列でコードされた核酸配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４に示される。
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抗体４－ｈｕ５の重鎖可変領域アミノ酸配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５に示される。
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抗体４－ｈｕ５の重鎖アミノ酸配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１６に示される（ＩｇＧ４ Ｓ２２８Ｐ突然変異）。
ＥＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＳＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＧＴＦＳＳＦＳＩＥＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＩＧＥＩＬＰＧＳＮＳＴＮＹＮＥＫＦＫＧＲＶＴＦＴＡＤＴＳＴＮＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＳＳＹＷＦＡＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＣＳＲＳＴＳＥＳＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＫＴＹＴＣＮＶＤＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＲＶＥＳＫＹＧＰＰＣＰＰＣＰＡＰＥＦＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＱＥＤＰＥＶＱＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＦＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＧＬＰＳＳＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＱＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＲＬＴＶＤＫＳＲＷＱＥＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＬＧＫ （ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１６）
抗体４－ｈｕ５の重鎖アミノ酸配列でコードされた核酸配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１７に示される。
ＧＡＧＧＴＧＣＡＧＣＴＧＧＴＧＣＡＧＴＣＣＧＧＣＧＣＴＧＡＧＧＴＧＡＡＧＡＡＧＣＣＴＧＧＣＴＣＣＴＣＣＧＴＧＡＡＧＧＴＧＡＧＣＴＧＣＡＡＧＧＣＴＴＣＣＧＧＣＧＧＣＡＣＣＴＴＴＴＣＣＡＧＣＴＴＴＡＧＣＡＴＣＧＡＧＴＧＧＧＴＧＡＧＧＣＡＧＧＣＴＣＣＴＧＧＣＣＡＧＧＧＣＣＴＧＧＡＧＴＧＧＡＴＣＧＧＣＧＡＧＡＴＣＣＴＧＣＣＴＧＧＣＴＣＣＡＡＣＡＧＣＡＣＣＡＡＣＴＡＣＡＡＴＧＡＧＡＡＧＴＴＴＡＡＧＧＧＣＣＧＧＧＴＧＡＣＣＴＴＣＡＣＣＧＣＴＧＡＣＡＣＣＴＣＣＡＣＣＡＡＣＡＣＣＧＣＴＴＡＴＡＴＧＧＡＧＣＴＧＡＧＣＴＣＣＣＴＧＣＧＧＡＧＣＧＡＧＧＡＴＡＣＣＧＣＴＧＴＧＴＡＣＴＡＴＴＧＣＡＧＣＡＧＣＴＡＴＴＧＧＴＴＣＧＣＴＴＡＣＴＧＧＧＧＣＣＡＧＧＧＣＡＣＣＣＴＧＧＴＧＡＣＣＧＴＧＴＣＣＴＣＣＧＣＣＡＧＣＡＣＣＡＡＧＧＧＣＣＣＣＴＣＣＧＴＧＴＴＣＣＣＣＣＴＧＧＣＣＣＣＴＴＧＴＡＧＣＣＧＧＴＣＣＡＣＣＴＣＣＧＡＧＡＧＣＡＣＣＧＣＣＧＣＴＣＴＧＧＧＣＴＧＴＣＴＧＧＴＧＡＡＧＧＡＴＴＡＣＴＴＣＣＣＣＧＡＧＣＣＴＧＴＧＡＣＣＧＴＧＴＣＴＴＧＧＡＡＣＴＣＣＧＧＣＧＣＣＣＴＧＡＣＣＴＣＣＧＧＣＧＴＧＣＡＣＡＣＡＴＴＣＣＣＴＧＣＴＧＴＧＣＴＧＣＡＧＡＧＣＴＣＣＧＧＣＣＴＧＴＡＣＴＣＣＣＴＧＡＧＣＡＧＣＧＴＧＧＴＧＡＣＣＧＴＧＣＣＣＴＣＣＴＣＣＡＧＣＣＴＧＧＧＣＡＣＣＡＡＧＡＣＣＴＡＣＡＣＣＴＧＴＡＡＴＧＴＧＧＡＣＣＡＣＡＡＧＣＣＣＴＣＣＡＡＴＡＣＣＡＡＧＧＴＧＧＡＣＡＡＧＡＧＧＧＴＧＧＡＧＴＣＣＡＡＧＴＡＣＧＧＣＣＣＴＣＣＣＴＧＴＣＣＴＣＣＴＴＧＣＣＣＴＧＣＣＣＣＴＧＡＧＴＴＴＣＴＧＧＧＣＧＧＣＣＣＴＡＧＣＧＴＧＴＴＣＣＴＧＴＴＣＣＣＴＣＣＴＡＡＧＣＣＴＡＡＧＧＡＣＡＣＣＣＴＧＡＴＧＡＴＣＡＧＣＣＧＧＡＣＣＣＣＣＧＡＧＧＴＧＡＣＣＴＧＴＧＴＧＧＴＧＧＴＧＧＡＴＧＴＧＴＣＣＣＡＧＧＡＧＧＡＴＣＣＣＧＡＧＧＴＧＣＡＧＴＴＣＡＡＴＴＧＧＴＡＣＧＴＧＧＡＴＧＧＣＧＴＧＧＡＧＧＴＧＣＡＣＡＡＣＧＣＣＡＡＧＡＣＣＡＡＧＣＣＴＡＧＧＧＡＧＧＡＧＣＡＧＴＴＴＡＡＣＴＣＣＡＣＣＴＡＣＡＧＧＧＴＧＧＴＧＴＣＣＧＴＧＣＴＧＡＣＣＧＴＧＣＴＧＣＡＣＣＡＧＧＡＣＴＧＧＣＴＧＡＡＴＧＧＣＡＡＧＧＡＧＴＡＣＡＡＧＴＧＴＡＡＧＧＴＧＡＧＣＡＡＣＡＡＧＧＧＣＣＴＧＣＣＴＴＣＣＡＧＣＡＴＣＧＡＧＡＡＧＡＣＣＡＴＣＴＣＣＡＡＧＧＣＴＡＡＧＧＧＣＣＡＧＣＣＴＣＧＧＧＡＧＣＣＴＣＡＧＧＴＧＴＡＣＡＣＣＣＴＧＣＣＣＣＣＴＡＧＣＣＡＧＧＡＧＧＡＧＡＴＧＡＣＣＡＡＧＡＡＣＣＡＧＧＴＧＴＣＣＣＴＧＡＣＣＴＧＣＣＴＧＧＴＧＡＡＧＧＧＣＴＴＴＴＡＴＣＣＣＴＣＣＧＡＣＡＴＣＧＣＣＧＴＧＧＡＧＴＧＧＧＡＧＡＧＣＡＡＴＧＧＣＣＡＧＣＣＴＧＡＧＡＡＣＡＡＴＴＡＴＡＡＧＡＣＣＡＣＣＣＣＴＣＣＴＧＴＧＣＴＧＧＡＣＡＧＣＧＡＴＧＧＣＴＣＣＴＴＣＴＴＴＣＴＧＴＡＣＴＣＣＣＧＧＣＴＧＡＣＣＧＴＧＧＡＣＡＡＧＡＧＣＡＧＧＴＧＧＣＡＧＧＡＧＧＧＣＡＡＴＧＴＧＴＴＣＴＣＣＴＧＴＡＧＣＧＴＧＡＴＧＣＡＣＧＡＧＧＣＣＣＴＧＣＡＣＡＡＣＣＡＣＴＡＣＡＣＣＣＡＧＡＡＧＴＣＣＣＴＧＴＣＣＣＴＧＴＣＣＣＴＣＧＧＣＡＡＧ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１７）
抗体４－ｈｕ６の重鎖可変領域アミノ酸配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８に示される。
ＥＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＳＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＧＴＦＳＳＦＳＩＥＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＩＧＥＩＬＰＧＳＮＳＴＮＹＮＥＫＦＫＧＫＡＴＦＴＡＤＴＳＴＮＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＳＳＹＷＦＡＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ （ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８）
抗体４－ｈｕ６の重鎖アミノ酸配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１９に示される（ＩｇＧ４ Ｓ２２８Ｐ突然変異）。
ＥＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＳＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＧＴＦＳＳＦＳＩＥＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＩＧＥＩＬＰＧＳＮＳＴＮＹＮＥＫＦＫＧＫＡＴＦＴＡＤＴＳＴＮＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＳＳＹＷＦＡＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＣＳＲＳＴＳＥＳＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＫＴＹＴＣＮＶＤＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＲＶＥＳＫＹＧＰＰＣＰＰＣＰＡＰＥＦＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＱＥＤＰＥＶＱＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＦＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＧＬＰＳＳＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＱＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＲＬＴＶＤＫＳＲＷＱＥＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＬＧＫ （ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１９）
抗体４－ｈｕ６の重鎖アミノ酸配列でコードされた核酸配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２０に示される。
ＧＡＧＧＴＧＣＡＧＣＴＧＧＴＧＣＡＧＴＣＣＧＧＣＧＣＣＧＡＧＧＴＧＡＡＧＡＡＧＣＣＴＧＧＣＡＧＣＴＣＣＧＴＧＡＡＧＧＴＧＴＣＣＴＧＴＡＡＧＧＣＴＴＣＣＧＧＣＧＧＣＡＣＣＴＴＣＴＣＣＴＣＣＴＴＴＴＣＣＡＴＣＧＡＧＴＧＧＧＴＧＡＧＧＣＡＧＧＣＣＣＣＣＧＧＣＣＡＧＧＧＡＴＴＧＧＡＧＴＧＧＡＴＣＧＧＣＧＡＧＡＴＣＣＴＧＣＣＴＧＧＣＡＧＣＡＡＣＴＣＣＡＣＣＡＡＴＴＡＴＡＡＴＧＡＧＡＡＧＴＴＴＡＡＧＧＧＣＡＡＧＧＣＴＡＣＣＴＴＣＡＣＣＧＣＴＧＡＣＡＣＣＡＧＣＡＣＣＡＡＴＡＣＣＧＣＣＴＡＴＡＴＧＧＡＧＣＴＧＴＣＣＴＣＣＣＴＧＣＧＧＡＧＣＧＡＧＧＡＣＡＣＣＧＣＣＧＴＧＴＡＴＴＡＴＴＧＴＡＧＣＡＧＣＴＡＴＴＧＧＴＴＣＧＣＣＴＡＣＴＧＧＧＧＣＣＡＧＧＧＣＡＣＣＣＴＧＧＴＧＡＣＣＧＴＧＡＧＣＡＧＣＧＣＴＡＧＣＡＣＣＡＡＧＧＧＣＣＣＴＡＧＣＧＴＧＴＴＴＣＣＴＣＴＧＧＣＴＣＣＴＴＧＴＴＣＣＡＧＧＴＣＣＡＣＣＡＧＣＧＡＧＡＧＣＡＣＣＧＣＴＧＣＣＣＴＧＧＧＣＴＧＣＣＴＧＧＴＧＡＡＧＧＡＴＴＡＣＴＴＴＣＣＴＧＡＧＣＣＴＧＴＧＡＣＣＧＴＧＴＣＴＴＧＧＡＡＣＡＧＣＧＧＣＧＣＴＣＴＧＡＣＣＡＧＣＧＧＣＧＴＧＣＡＣＡＣＣＴＴＴＣＣＣＧＣＴＧＴＧＣＴＧＣＡＧＴＣＣＡＧＣＧＧＣＣＴＧＴＡＴＴＣＣＣＴＧＴＣＣＡＧＣＧＴＧＧＴＧＡＣＣＧＴＧＣＣＣＡＧＣＴＣＣＴＣＣＣＴＧＧＧＣＡＣＣＡＡＧＡＣＣＴＡＴＡＣＣＴＧＣＡＡＣＧＴＧＧＡＴＣＡＣＡＡＧＣＣＣＴＣＣＡＡＴＡＣＣＡＡＧＧＴＧＧＡＣＡＡＧＡＧＧＧＴＧＧＡＧＡＧＣＡＡＧＴＡＣＧＧＣＣＣＴＣＣＴＴＧＣＣＣＴＣＣＣＴＧＴＣＣＴＧＣＴＣＣＴＧＡＧＴＴＣＣＴＧＧＧＣＧＧＣＣＣＴＴＣＣＧＴＧＴＴＴＣＴＧＴＴＴＣＣＣＣＣＴＡＡＧＣＣＣＡＡＧＧＡＴＡＣＣＣＴＧＡＴＧＡＴＣＡＧＣＣＧＧＡＣＣＣＣＣＧＡＧＧＴＧＡＣＣＴＧＣＧＴＧＧＴＧＧＴＧＧＡＴＧＴＧＴＣＣＣＡＧＧＡＧＧＡＣＣＣＣＧＡＧＧＴＧＣＡＧＴＴＴＡＡＴＴＧＧＴＡＴＧＴＧＧＡＴＧＧＣＧＴＧＧＡＧＧＴＧＣＡＣＡＡＣＧＣＴＡＡＧＡＣＣＡＡＧＣＣＴＡＧＧＧＡＧＧＡＧＣＡＧＴＴＴＡＡＣＡＧＣＡＣＣＴＡＴＣＧＧＧＴＧＧＴＧＡＧＣＧＴＧＣＴＧＡＣＣＧＴＧＣＴＧＣＡＣＣＡＧＧＡＣＴＧＧＣＴＧＡＡＣＧＧＣＡＡＧＧＡＧＴＡＣＡＡＧＴＧＣＡＡＧＧＴＧＴＣＣＡＡＴＡＡＧＧＧＣＣＴＧＣＣＴＡＧＣＴＣＣＡＴＣＧＡＧＡＡＧＡＣＣＡＴＣＡＧＣＡＡＧＧＣＣＡＡＧＧＧＣＣＡＧＣＣＴＡＧＧＧＡＧＣＣＣＣＡＧＧＴＧＴＡＴＡＣＣＣＴＧＣＣＣＣＣＴＴＣＣＣＡＧＧＡＧＧＡＧＡＴＧＡＣＣＡＡＧＡＡＴＣＡＧＧＴＧＡＧＣＣＴＧＡＣＣＴＧＴＣＴＧＧＴＧＡＡＧＧＧＣＴＴＴＴＡＴＣＣＴＡＧＣＧＡＣＡＴＣＧＣＴＧＴＧＧＡＧＴＧＧＧＡＧＡＧＣＡＡＴＧＧＣＣＡＧＣＣＴＧＡＧＡＡＴＡＡＴＴＡＣＡＡＧＡＣＣＡＣＣＣＣＣＣＣＴＧＴＧＣＴＧＧＡＴＴＣＣＧＡＴＧＧＣＡＧＣＴＴＴＴＴＣＣＴＧＴＡＴＴＣＣＣＧＧＣＴＧＡＣＣＧＴＧＧＡＴＡＡＧＴＣＣＣＧＧＴＧＧＣＡＧＧＡＧＧＧＣＡＡＣＧＴＧＴＴＴＡＧＣＴＧＣＴＣＣＧＴＧＡＴＧＣＡＣＧＡＧＧＣＴＣＴＧＣＡＣＡＡＴＣＡＣＴＡＣＡＣＣＣＡＧＡＡＧＴＣＣＣＴＧＡＧＣＣＴＧＴＣＣＣＴＧＧＧＣＡＡＧ （ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２０）
抗体４－ｈｕ７の重鎖可変領域アミノ酸配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２１に示される。
ＥＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＳＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＴＦＳＳＦＳＩＥＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧＥＩＬＰＧＳＮＳＴＮＹＮＥＫＦＫＧＲＶＴＩＴＡＤＥＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＳＳＹＷＦＡＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ （ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２１）
抗体４－ｈｕ７の重鎖アミノ酸配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２２に示される（ＩｇＧ４ Ｓ２２８Ｐ突然変異）。
ＥＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＳＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＴＦＳＳＦＳＩＥＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧＥＩＬＰＧＳＮＳＴＮＹＮＥＫＦＫＧＲＶＴＩＴＡＤＥＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＳＳＹＷＦＡＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＣＳＲＳＴＳＥＳＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＫＴＹＴＣＮＶＤＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＲＶＥＳＫＹＧＰＰＣＰＰＣＰＡＰＥＦＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＱＥＤＰＥＶＱＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＦＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＧＬＰＳＳＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＱＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＲＬＴＶＤＫＳＲＷＱＥＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＬＧＫ （ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２２）
抗体４－ｈｕ７の重鎖アミノ酸配列でコードされた核酸配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３に示される。
ＧＡＧＧＴＧＣＡＧＣＴＧＧＴＧＣＡＧＴＣＣＧＧＣＧＣＴＧＡＧＧＴＧＡＡＧＡＡＧＣＣＴＧＧＣＡＧＣＡＧＣＧＴＧＡＡＧＧＴＧＡＧＣＴＧＣＡＡＧＧＣＴＴＣＣＧＧＣＴＡＣＡＣＣＴＴＴＴＣＣＡＧＣＴＴＣＡＧＣＡＴＣＧＡＧＴＧＧＧＴＧＣＧＧＣＡＧＧＣＴＣＣＣＧＧＣＣＡＧＧＧＡＴＴＧＧＡＧＴＧＧＡＴＧＧＧＣＧＡＧＡＴＣＣＴＧＣＣＴＧＧＣＡＧＣＡＡＣＴＣＣＡＣＣＡＡＴＴＡＣＡＡＴＧＡＧＡＡＧＴＴＣＡＡＧＧＧＣＡＧＧＧＴＧＡＣＣＡＴＣＡＣＣＧＣＴＧＡＣＧＡＧＡＧＣＡＣＣＴＣＣＡＣＣＧＣＴＴＡＣＡＴＧＧＡＧＣＴＧＡＧＣＡＧＣＣＴＧＡＧＧＴＣＣＧＡＧＧＡＴＡＣＣＧＣＣＧＴＧＴＡＴＴＡＣＴＧＣＡＧＣＡＧＣＴＡＴＴＧＧＴＴＴＧＣＣＴＡＣＴＧＧＧＧＣＣＡＧＧＧＣＡＣＣＣＴＧＧＴＧＡＣＣＧＴＧＡＧＣＴＣＣＧＣＣＡＧＣＡＣＣＡＡＧＧＧＣＣＣＣＡＧＣＧＴＧＴＴＴＣＣＣＣＴＧＧＣＴＣＣＴＴＧＣＡＧＣＡＧＧＴＣＣＡＣＣＡＧＣＧＡＧＡＧＣＡＣＣＧＣＣＧＣＴＣＴＧＧＧＣＴＧＴＣＴＧＧＴＧＡＡＧＧＡＣＴＡＣＴＴＣＣＣＣＧＡＧＣＣＴＧＴＧＡＣＣＧＴＧＴＣＴＴＧＧＡＡＴＡＧＣＧＧＣＧＣＴＣＴＧＡＣＣＡＧＣＧＧＣＧＴＧＣＡＣＡＣＣＴＴＴＣＣＴＧＣＴＧＴＧＣＴＧＣＡＧＴＣＣＴＣＣＧＧＣＣＴＧＴＡＣＴＣＣＣＴＧＴＣＣＡＧＣＧＴＧＧＴＧＡＣＣＧＴＧＣＣＣＴＣＣＴＣＣＴＣＣＣＴＧＧＧＣＡＣＣＡＡＧＡＣＣＴＡＴＡＣＣＴＧＣＡＡＴＧＴＧＧＡＴＣＡＣＡＡＧＣＣＴＡＧＣＡＡＴＡＣＣＡＡＧＧＴＧＧＡＣＡＡＧＡＧＧＧＴＧＧＡＧＡＧＣＡＡＧＴＡＣＧＧＣＣＣＣＣＣＴＴＧＣＣＣＴＣＣＴＴＧＣＣＣＣＧＣＴＣＣＴＧＡＧＴＴＣＣＴＧＧＧＣＧＧＣＣＣＴＴＣＣＧＴＧＴＴＣＣＴＧＴＴＴＣＣＣＣＣＴＡＡＧＣＣＣＡＡＧＧＡＣＡＣＣＣＴＧＡＴＧＡＴＣＴＣＣＣＧＧＡＣＣＣＣＣＧＡＧＧＴＧＡＣＣＴＧＴＧＴＧＧＴＧＧＴＧＧＡＴＧＴＧＡＧＣＣＡＧＧＡＧＧＡＣＣＣＴＧＡＧＧＴＧＣＡＧＴＴＣＡＡＴＴＧＧＴＡＣＧＴＧＧＡＴＧＧＣＧＴＧＧＡＧＧＴＧＣＡＣＡＡＣＧＣＣＡＡＧＡＣＣＡＡＧＣＣＴＡＧＧＧＡＧＧＡＧＣＡＧＴＴＣＡＡＣＡＧＣＡＣＣＴＡＣＣＧＧＧＴＧＧＴＧＴＣＣＧＴＧＣＴＧＡＣＣＧＴＧＣＴＧＣＡＣＣＡＧＧＡＣＴＧＧＣＴＧＡＡＴＧＧＣＡＡＧＧＡＧＴＡＣＡＡＧＴＧＣＡＡＧＧＴＧＴＣＣＡＡＴＡＡＧＧＧＣＣＴＧＣＣＴＴＣＣＴＣＣＡＴＣＧＡＧＡＡＧＡＣＣＡＴＣＡＧＣＡＡＧＧＣＣＡＡＧＧＧＣＣＡＧＣＣＴＣＧＧＧＡＧＣＣＴＣＡＧＧＴＧＴＡＴＡＣＣＣＴＧＣＣＴＣＣＣＡＧＣＣＡＧＧＡＧＧＡＧＡＴＧＡＣＣＡＡＧＡＡＣＣＡＧＧＴＧＴＣＣＣＴＧＡＣＣＴＧＣＣＴＧＧＴＧＡＡＧＧＧＣＴＴＴＴＡＣＣＣＴＴＣＣＧＡＴＡＴＣＧＣＣＧＴＧＧＡＧＴＧＧＧＡＧＡＧＣＡＡＴＧＧＣＣＡＧＣＣＴＧＡＧＡＡＴＡＡＴＴＡＣＡＡＧＡＣＣＡＣＣＣＣＴＣＣＴＧＴＧＣＴＧＧＡＴＡＧＣＧＡＣＧＧＣＡＧＣＴＴＴＴＴＣＣＴＧＴＡＣＡＧＣＣＧＧＣＴＧＡＣＣＧＴＧＧＡＴＡＡＧＡＧＣＣＧＧＴＧＧＣＡＧＧＡＧＧＧＣＡＡＣＧＴＧＴＴＣＡＧＣＴＧＣＡＧＣＧＴＧＡＴＧＣＡＣＧＡＧＧＣＴＣＴＧＣＡＣＡＡＣＣＡＣＴＡＴＡＣＣＣＡＧＡＡＧＡＧＣＣＴＧＴＣＣＣＴＧＡＧＣＣＴＧＧＧＣＡＡＧ （ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３）
抗体４－ｈｕ８の重鎖可変領域アミノ酸配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２４に示される。
ＥＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＳＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＴＦＳＳＦＳＩＥＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧＥＩＬＰＧＳＮＳＴＮＹＮＥＫＦＫＧＲＶＴＦＴＡＤＥＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＳＳＹＷＦＡＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ （ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２４）
抗体４－ｈｕ８の重鎖アミノ酸配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２５に示される（ＩｇＧ４ Ｓ２２８Ｐ突然変異）。
ＥＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＳＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＴＦＳＳＦＳＩＥＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧＥＩＬＰＧＳＮＳＴＮＹＮＥＫＦＫＧＲＶＴＦＴＡＤＥＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＳＳＹＷＦＡＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＣＳＲＳＴＳＥＳＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＫＴＹＴＣＮＶＤＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＲＶＥＳＫＹＧＰＰＣＰＰＣＰＡＰＥＦＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＱＥＤＰＥＶＱＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＦＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＧＬＰＳＳＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＱＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＲＬＴＶＤＫＳＲＷＱＥＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＬＧＫ （ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２５）
抗体４－ｈｕ８の重鎖アミノ酸配列でコードされた核酸配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２６に示される。
ＧＡＧＧＴＧＣＡＧＣＴＧＧＴＧＣＡＧＡＧＣＧＧＣＧＣＴＧＡＧＧＴＧＡＡＧＡＡＧＣＣＣＧＧＣＴＣＣＡＧＣＧＴＧＡＡＧＧＴＧＴＣＣＴＧＣＡＡＧＧＣＴＴＣＣＧＧＣＴＡＴＡＣＣＴＴＣＴＣＣＡＧＣＴＴＴＡＧＣＡＴＣＧＡＧＴＧＧＧＴＧＡＧＧＣＡＧＧＣＴＣＣＴＧＧＣＣＡＧＧＧＣＣＴＧＧＡＧＴＧＧＡＴＧＧＧＣＧＡＧＡＴＣＣＴＧＣＣＴＧＧＣＡＧＣＡＡＴＴＣＣＡＣＣＡＡＣＴＡＴＡＡＣＧＡＧＡＡＧＴＴＣＡＡＧＧＧＣＣＧＧＧＴＧＡＣＣＴＴＣＡＣＣＧＣＣＧＡＴＧＡＧＴＣＣＡＣＣＴＣＣＡＣＣＧＣＣＴＡＣＡＴＧＧＡＧＣＴＧＡＧＣＴＣＣＣＴＧＣＧＧＴＣＣＧＡＧＧＡＴＡＣＣＧＣＣＧＴＧＴＡＣＴＡＴＴＧＣＡＧＣＡＧＣＴＡＴＴＧＧＴＴＣＧＣＴＴＡＴＴＧＧＧＧＣＣＡＧＧＧＣＡＣＣＣＴＧＧＴＧＡＣＣＧＴＧＡＧＣＴＣＣＧＣＴＴＣＣＡＣＣＡＡＧＧＧＣＣＣＴＴＣＣＧＴＧＴＴＴＣＣＣＣＴＧＧＣＣＣＣＣＴＧＣＴＣＣＣＧＧＴＣＣＡＣＣＴＣＣＧＡＡＴＣＣＡＣＣＧＣＣＧＣＣＣＴＧＧＧＣＴＧＣＣＴＧＧＴＧＡＡＧＧＡＣＴＡＣＴＴＣＣＣＴＧＡＧＣＣＣＧＴＧＡＣＣＧＴＧＴＣＣＴＧＧＡＡＣＴＣＣＧＧＣＧＣＣＣＴＧＡＣＣＡＧＣＧＧＣＧＴＧＣＡＣＡＣＡＴＴＴＣＣＣＧＣＴＧＴＧＣＴＧＣＡＧＴＣＣＴＣＣＧＧＣＣＴＧＴＡＴＡＧＣＣＴＧＴＣＣＡＧＣＧＴＧＧＴＧＡＣＣＧＴＧＣＣＴＡＧＣＴＣＣＡＧＣＣＴＧＧＧＣＡＣＣＡＡＧＡＣＣＴＡＣＡＣＣＴＧＴＡＡＴＧＴＧＧＡＴＣＡＣＡＡＧＣＣＣＡＧＣＡＡＴＡＣＣＡＡＧＧＴＧＧＡＴＡＡＧＡＧＧＧＴＧＧＡＧＴＣＣＡＡＧＴＡＣＧＧＣＣＣＣＣＣＴＴＧＴＣＣＴＣＣＴＴＧＴＣＣＣＧＣＣＣＣＡＧＡＧＴＴＣＣＴＧＧＧＣＧＧＣＣＣＡＴＣＴＧＴＧＴＴＴＣＴＧＴＴＴＣＣＣＣＣＣＡＡＧＣＣＴＡＡＧＧＡＣＡＣＣＣＴＧＡＴＧＡＴＣＴＣＣＣＧＧＡＣＣＣＣＴＧＡＧＧＴＧＡＣＣＴＧＴＧＴＧＧＴＧＧＴＧＧＡＣＧＴＧＴＣＣＣＡＧＧＡＧＧＡＴＣＣＴＧＡＧＧＴＧＣＡＧＴＴＣＡＡＴＴＧＧＴＡＴＧＴＧＧＡＣＧＧＣＧＴＧＧＡＧＧＴＧＣＡＣＡＡＣＧＣＣＡＡＧＡＣＣＡＡＧＣＣＣＡＧＧＧＡＧＧＡＧＣＡＧＴＴＴＡＡＣＡＧＣＡＣＣＴＡＴＣＧＧＧＴＧＧＴＧＴＣＣＧＴＧＣＴＧＡＣＣＧＴＧＣＴＧＣＡＣＣＡＧＧＡＣＴＧＧＣＴＧＡＡＴＧＧＣＡＡＧＧＡＧＴＡＴＡＡＧＴＧＣＡＡＧＧＴＧＡＧＣＡＡＴＡＡＧＧＧＣＣＴＧＣＣＣＴＣＣＡＧＣＡＴＣＧＡＧＡＡＧＡＣＣＡＴＣＴＣＣＡＡＧＧＣＴＡＡＧＧＧＣＣＡＧＣＣＣＣＧＧＧＡＧＣＣＴＣＡＧＧＴＧＴＡＣＡＣＣＣＴＧＣＣＴＣＣＣＡＧＣＣＡＧＧＡＧＧＡＧＡＴＧＡＣＣＡＡＧＡＡＣＣＡＧＧＴＧＴＣＣＣＴＧＡＣＣＴＧＴＣＴＧＧＴＧＡＡＧＧＧＣＴＴＴＴＡＴＣＣＣＡＧＣＧＡＣＡＴＣＧＣＣＧＴＧＧＡＧＴＧＧＧＡＧＴＣＣＡＡＣＧＧＣＣＡＧＣＣＴＧＡＧＡＡＣＡＡＣＴＡＣＡＡＧＡＣＣＡＣＣＣＣＴＣＣＣＧＴＧＣＴＧＧＡＣＴＣＣＧＡＴＧＧＣＴＣＣＴＴＴＴＴＣＣＴＧＴＡＴＴＣＣＡＧＧＣＴＧＡＣＣＧＴＧＧＡＴＡＡＧＡＧＣＡＧＧＴＧＧＣＡＧＧＡＧＧＧＣＡＡＣＧＴＧＴＴＴＡＧＣＴＧＣＴＣＣＧＴＧＡＴＧＣＡＣＧＡＧＧＣＣＣＴＧＣＡＣＡＡＴＣＡＣＴＡＴＡＣＣＣＡＧＡＡＧＴＣＣＣＴＧＡＧＣＣＴＧＡＧＣＣＴＧＧＧＣＡＡＧ （ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２６）
抗体４－ｈｕ９の重鎖可変領域アミノ酸配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７に示される。
ＥＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＳＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＴＦＳＳＦＳＩＥＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＩＧＥＩＬＰＧＳＮＳＴＮＹＮＥＫＦＫＧＲＶＴＦＴＡＤＥＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＳＳＹＷＦＡＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ （ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５０）
抗体４－ｈｕ９の重鎖アミノ酸配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８に示される（ＩｇＧ４ Ｓ２２８Ｐ突然変異）。
ＥＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＳＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＴＦＳＳＦＳＩＥＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＩＧＥＩＬＰＧＳＮＳＴＮＹＮＥＫＦＫＧＲＶＴＦＴＡＤＥＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＳＳＹＷＦＡＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＣＳＲＳＴＳＥＳＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＫＴＹＴＣＮＶＤＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＲＶＥＳＫＹＧＰＰＣＰＰＣＰＡＰＥＦＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＱＥＤＰＥＶＱＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＦＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＧＬＰＳＳＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＱＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＲＬＴＶＤＫＳＲＷＱＥＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＬＧＫ （ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８）
抗体４－ｈｕ９の重鎖アミノ酸配列でコードされた核酸配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９に示される。
ＧＡＧＧＴＧＣＡＧＣＴＧＧＴＧＣＡＧＡＧＣＧＧＣＧＣＣＧＡＧＧＴＧＡＡＧＡＡＧＣＣＣＧＧＣＴＣＣＡＧＣＧＴＧＡＡＧＧＴＧＴＣＣＴＧＣＡＡＧＧＣＴＴＣＣＧＧＣＴＡＴＡＣＣＴＴＣＴＣＣＡＧＣＴＴＣＡＧＣＡＴＣＧＡＧＴＧＧＧＴＧＡＧＧＣＡＧＧＣＣＣＣＣＧＧＣＣＡＧＧＧＡＴＴＧＧＡＧＴＧＧＡＴＣＧＧＣＧＡＧＡＴＣＣＴＧＣＣＴＧＧＣＡＧＣＡＡＴＡＧＣＡＣＣＡＡＣＴＡＴＡＡＴＧＡＧＡＡＧＴＴＣＡＡＧＧＧＣＡＧＧＧＴＧＡＣＣＴＴＣＡＣＣＧＣＣＧＡＴＧＡＧＡＧＣＡＣＣＴＣＣＡＣＣＧＣＴＴＡＣＡＴＧＧＡＧＣＴＧＡＧＣＡＧＣＣＴＧＡＧＧＡＧＣＧＡＧＧＡＴＡＣＣＧＣＴＧＴＧＴＡＴＴＡＴＴＧＴＡＧＣＡＧＣＴＡＴＴＧＧＴＴＴＧＣＣＴＡＣＴＧＧＧＧＣＣＡＧＧＧＣＡＣＣＣＴＧＧＴＧＡＣＣＧＴＧＴＣＣＡＧＣＧＣＣＡＧＣＡＣＣＡＡＧＧＧＣＣＣＣＡＧＣＧＴＧＴＴＣＣＣＴＣＴＧＧＣＣＣＣＴＴＧＴＴＣＣＣＧＧＴＣＣＡＣＣＴＣＣＧＡＧＡＧＣＡＣＣＧＣＣＧＣＴＣＴＧＧＧＣＴＧＣＣＴＧＧＴＧＡＡＧＧＡＣＴＡＴＴＴＣＣＣＴＧＡＧＣＣＣＧＴＧＡＣＣＧＴＧＡＧＣＴＧＧＡＡＣＴＣＣＧＧＣＧＣＴＣＴＧＡＣＣＡＧＣＧＧＣＧＴＧＣＡＣＡＣＣＴＴＣＣＣＴＧＣＣＧＴＧＣＴＧＣＡＧＴＣＣＡＧＣＧＧＣＣＴＧＴＡＣＴＣＣＣＴＧＴＣＣＡＧＣＧＴＧＧＴＧＡＣＣＧＴＧＣＣＣＡＧＣＴＣＣＡＧＣＣＴＧＧＧＣＡＣＣＡＡＧＡＣＣＴＡＣＡＣＣＴＧＣＡＡＣＧＴＧＧＡＴＣＡＣＡＡＧＣＣＣＴＣＣＡＡＴＡＣＣＡＡＧＧＴＧＧＡＣＡＡＧＡＧＧＧＴＧＧＡＧＡＧＣＡＡＧＴＡＴＧＧＣＣＣＴＣＣＣＴＧＴＣＣＣＣＣＣＴＧＣＣＣＴＧＣＣＣＣＴＧＡＡＴＴＴＣＴＧＧＧＣＧＧＣＣＣＣＴＣＣＧＴＧＴＴＴＣＴＧＴＴＴＣＣＴＣＣＴＡＡＧＣＣＴＡＡＧＧＡＴＡＣＣＣＴＧＡＴＧＡＴＣＴＣＣＣＧＧＡＣＣＣＣＴＧＡＧＧＴＧＡＣＣＴＧＴＧＴＧＧＴＧＧＴＧＧＡＴＧＴＧＡＧＣＣＡＧＧＡＧＧＡＣＣＣＣＧＡＧＧＴＧＣＡＧＴＴＴＡＡＣＴＧＧＴＡＣＧＴＧＧＡＣＧＧＣＧＴＧＧＡＧＧＴＧＣＡＣＡＡＴＧＣＴＡＡＧＡＣＣＡＡＧＣＣＣＣＧＧＧＡＧＧＡＧＣＡＧＴＴＣＡＡＴＡＧＣＡＣＣＴＡＴＡＧＧＧＴＧＧＴＧＡＧＣＧＴＧＣＴＧＡＣＣＧＴＧＣＴＧＣＡＣＣＡＧＧＡＣＴＧＧＣＴＧＡＡＣＧＧＣＡＡＧＧＡＧＴＡＴＡＡＧＴＧＣＡＡＧＧＴＧＡＧＣＡＡＴＡＡＧＧＧＣＣＴＧＣＣＣＴＣＣＴＣＣＡＴＣＧＡＧＡＡＧＡＣＣＡＴＣＴＣＣＡＡＧＧＣＴＡＡＧＧＧＣＣＡＧＣＣＣＣＧＧＧＡＧＣＣＴＣＡＧＧＴＧＴＡＣＡＣＣＣＴＧＣＣＣＣＣＴＡＧＣＣＡＧＧＡＧＧＡＧＡＴＧＡＣＣＡＡＧＡＡＴＣＡＧＧＴＧＴＣＣＣＴＧＡＣＣＴＧＣＣＴＧＧＴＧＡＡＡＧＧＣＴＴＴＴＡＣＣＣＣＴＣＣＧＡＴＡＴＣＧＣＣＧＴＧＧＡＧＴＧＧＧＡＧＴＣＣＡＡＴＧＧＣＣＡＧＣＣＴＧＡＧＡＡＣＡＡＴＴＡＣＡＡＧＡＣＣＡＣＣＣＣＴＣＣＣＧＴＧＣＴＧＧＡＴＴＣＣＧＡＣＧＧＣＡＧＣＴＴＣＴＴＴＣＴＧＴＡＴＴＣＣＡＧＧＣＴＧＡＣＣＧＴＧＧＡＴＡＡＧＴＣＣＣＧＧＴＧＧＣＡＧＧＡＧＧＧＣＡＡＣＧＴＧＴＴＴＡＧＣＴＧＣＡＧＣＧＴＧＡＴＧＣＡＣＧＡＧＧＣＣＣＴＧＣＡＣＡＡＴＣＡＣＴＡＣＡＣＣＣＡＧＡＡＧＴＣＣＣＴＧＡＧＣＣＴＧＴＣＣＣＴＧＧＧＣＡＡＧ （ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９）
抗体４－ｈｕ１０の重鎖可変領域アミノ酸配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０に示される。
ＥＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＳＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＴＦＳＳＦＳＩＥＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＩＧＥＩＬＰＧＳＮＳＴＮＹＮＥＫＦＫＧＲＶＴＦＴＡＤＴＳＴＮＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＳＳＹＷＦＡＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ （ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０）
抗体４－ｈｕ１０の重鎖アミノ酸配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１に示される（ＩｇＧ４ Ｓ２２８Ｐ突然変異）。
ＥＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＳＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＴＦＳＳＦＳＩＥＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＩＧＥＩＬＰＧＳＮＳＴＮＹＮＥＫＦＫＧＲＶＴＦＴＡＤＴＳＴＮＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＳＳＹＷＦＡＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＣＳＲＳＴＳＥＳＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＫＴＹＴＣＮＶＤＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＲＶＥＳＫＹＧＰＰＣＰＰＣＰＡＰＥＦＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＱＥＤＰＥＶＱＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＦＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＧＬＰＳＳＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＱＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＲＬＴＶＤＫＳＲＷＱＥＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＬＧＫ （ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１）
抗体４－ｈｕ１０の重鎖アミノ酸配列でコードされた核酸配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２に示される。
ＧＡＧＧＴＧＣＡＧＣＴＧＧＴＧＣＡＧＡＧＣＧＧＣＧＣＴＧＡＧＧＴＧＡＡＧＡＡＧＣＣＴＧＧＣＡＧＣＡＧＣＧＴＧＡＡＧＧＴＧＡＧＣＴＧＣＡＡＧＧＣＴＴＣＣＧＧＣＴＡＣＡＣＣＴＴＴＴＣＣＡＧＣＴＴＣＡＧＣＡＴＣＧＡＧＴＧＧＧＴＧＡＧＧＣＡＧＧＣＣＣＣＴＧＧＣＣＡＧＧＧＡＣＴＧＧＡＧＴＧＧＡＴＣＧＧＣＧＡＧＡＴＣＣＴＧＣＣＴＧＧＣＡＧＣＡＡＴＡＧＣＡＣＣＡＡＴＴＡＣＡＡＣＧＡＧＡＡＧＴＴＣＡＡＧＧＧＣＣＧＧＧＴＧＡＣＣＴＴＣＡＣＣＧＣＣＧＡＣＡＣＣＡＧＣＡＣＣＡＡＴＡＣＣＧＣＣＴＡＴＡＴＧＧＡＧＣＴＧＡＧＣＴＣＣＣＴＧＡＧＧＴＣＣＧＡＧＧＡＣＡＣＣＧＣＴＧＴＧＴＡＴＴＡＴＴＧＣＴＣＣＡＧＣＴＡＴＴＧＧＴＴＣＧＣＣＴＡＣＴＧＧＧＧＣＣＡＧＧＧＣＡＣＣＣＴＧＧＴＧＡＣＣＧＴＧＴＣＣＴＣＣＧＣＣＡＧＣＡＣＣＡＡＧＧＧＣＣＣＣＡＧＣＧＴＧＴＴＴＣＣＴＣＴＧＧＣＣＣＣＴＴＧＣＡＧＣＡＧＧＴＣＣＡＣＣＡＧＣＧＡＧＡＧＣＡＣＣＧＣＣＧＣＴＣＴＧＧＧＣＴＧＣＣＴＧＧＴＧＡＡＧＧＡＴＴＡＣＴＴＣＣＣＴＧＡＧＣＣＴＧＴＧＡＣＣＧＴＧＴＣＴＴＧＧＡＡＣＡＧＣＧＧＣＧＣＣＣＴＧＡＣＣＴＣＣＧＧＣＧＴＧＣＡＣＡＣＡＴＴＴＣＣＴＧＣＴＧＴＧＣＴＧＣＡＧＡＧＣＡＧＣＧＧＣＣＴＧＴＡＴＡＧＣＣＴＧＡＧＣＡＧＣＧＴＧＧＴＧＡＣＣＧＴＧＣＣＴＡＧＣＡＧＣＡＧＣＣＴＧＧＧＣＡＣＣＡＡＧＡＣＣＴＡＣＡＣＣＴＧＣＡＡＴＧＴＧＧＡＴＣＡＣＡＡＧＣＣＣＴＣＣＡＡＣＡＣＣＡＡＧＧＴＧＧＡＣＡＡＧＣＧＧＧＴＧＧＡＧＡＧＣＡＡＧＴＡＣＧＧＣＣＣＴＣＣＣＴＧＣＣＣＣＣＣＣＴＧＴＣＣＴＧＣＴＣＣＴＧＡＧＴＴＴＣＴＧＧＧＣＧＧＣＣＣＴＡＧＣＧＴＧＴＴＣＣＴＧＴＴＣＣＣＴＣＣＴＡＡＧＣＣＣＡＡＧＧＡＣＡＣＣＣＴＧＡＴＧＡＴＣＡＧＣＡＧＧＡＣＣＣＣＴＧＡＧＧＴＧＡＣＣＴＧＣＧＴＧＧＴＧＧＴＧＧＡＣＧＴＧＴＣＣＣＡＧＧＡＧＧＡＴＣＣＣＧＡＧＧＴＧＣＡＧＴＴＣＡＡＣＴＧＧＴＡＣＧＴＧＧＡＣＧＧＣＧＴＧＧＡＧＧＴＧＣＡＣＡＡＴＧＣＣＡＡＧＡＣＣＡＡＧＣＣＴＡＧＧＧＡＧＧＡＧＣＡＧＴＴＴＡＡＣＡＧＣＡＣＣＴＡＴＡＧＧＧＴＧＧＴＧＡＧＣＧＴＧＣＴＧＡＣＣＧＴＧＣＴＧＣＡＣＣＡＧＧＡＣＴＧＧＣＴＧＡＡＣＧＧＣＡＡＧＧＡＧＴＡＴＡＡＧＴＧＴＡＡＧＧＴＧＴＣＣＡＡＣＡＡＧＧＧＣＣＴＧＣＣＴＴＣＣＴＣＣＡＴＣＧＡＧＡＡＧＡＣＣＡＴＣＴＣＣＡＡＧＧＣＴＡＡＧＧＧＣＣＡＧＣＣＴＡＧＧＧＡＧＣＣＴＣＡＧＧＴＧＴＡＴＡＣＣＣＴＧＣＣＴＣＣＣＴＣＣＣＡＧＧＡＧＧＡＧＡＴＧＡＣＣＡＡＧＡＡＴＣＡＧＧＴＧＴＣＣＣＴＧＡＣＣＴＧＣＣＴＧＧＴＧＡＡＡＧＧＣＴＴＴＴＡＣＣＣＣＡＧＣＧＡＣＡＴＣＧＣＴＧＴＧＧＡＧＴＧＧＧＡＧＡＧＣＡＡＣＧＧＣＣＡＧＣＣＣＧＡＧＡＡＴＡＡＴＴＡＣＡＡＧＡＣＣＡＣＣＣＣＣＣＣＴＧＴＧＣＴＧＧＡＴＴＣＣＧＡＣＧＧＣＡＧＣＴＴＣＴＴＴＣＴＧＴＡＣＴＣＣＡＧＧＣＴＧＡＣＣＧＴＧＧＡＣＡＡＧＴＣＣＡＧＧＴＧＧＣＡＧＧＡＧＧＧＣＡＡＣＧＴＧＴＴＣＡＧＣＴＧＣＡＧＣＧＴＧＡＴＧＣＡＣＧＡＧＧＣＴＣＴＧＣＡＣＡＡＣＣＡＣＴＡＣＡＣＣＣＡＧＡＡＧＴＣＣＣＴＧＴＣＣＣＴＧＡＧＣＣＴＣＧＧＣＡＡＧ （ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２）
抗体４－ｈｕ１１の重鎖可変領域アミノ酸配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３に示される。
ＥＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＳＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＴＦＳＳＦＳＩＥＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＩＧＥＩＬＰＧＳＮＳＴＮＹＮＥＫＦＫＧＫＡＴＦＴＡＤＴＳＴＮＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＳＳＹＷＦＡＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ （ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３）
抗体４－ｈｕ１１の重鎖アミノ酸配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４に示される（ＩｇＧ４ Ｓ２２８Ｐ突然変異）。
ＥＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＳＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＴＦＳＳＦＳＩＥＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＩＧＥＩＬＰＧＳＮＳＴＮＹＮＥＫＦＫＧＫＡＴＦＴＡＤＴＳＴＮＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＳＳＹＷＦＡＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＣＳＲＳＴＳＥＳＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＫＴＹＴＣＮＶＤＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＲＶＥＳＫＹＧＰＰＣＰＰＣＰＡＰＥＦＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＱＥＤＰＥＶＱＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＦＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＧＬＰＳＳＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＱＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＲＬＴＶＤＫＳＲＷＱＥＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＬＧＫ （ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４）
抗体４－ｈｕ１１の重鎖アミノ酸配列でコードされた核酸配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５に示される。
ＧＡＧＧＴＧＣＡＧＣＴＧＧＴＧＣＡＧＴＣＣＧＧＣＧＣＣＧＡＧＧＴＧＡＡＧＡＡＧＣＣＣＧＧＣＡＧＣＡＧＣＧＴＧＡＡＧＧＴＧＡＧＣＴＧＣＡＡＧＧＣＴＴＣＣＧＧＣＴＡＴＡＣＣＴＴＣＡＧＣＴＣＣＴＴＣＡＧＣＡＴＣＧＡＧＴＧＧＧＴＧＣＧＧＣＡＧＧＣＴＣＣＴＧＧＣＣＡＧＧＧＡＣＴＧＧＡＧＴＧＧＡＴＣＧＧＣＧＡＧＡＴＣＣＴＧＣＣＣＧＧＣＡＧＣＡＡＴＴＣＣＡＣＣＡＡＣＴＡＴＡＡＴＧＡＧＡＡＧＴＴＣＡＡＧＧＧＣＡＡＧＧＣＴＡＣＣＴＴＣＡＣＣＧＣＣＧＡＣＡＣＣＴＣＣＡＣＣＡＡＴＡＣＣＧＣＣＴＡＴＡＴＧＧＡＧＣＴＧＴＣＣＡＧＣＣＴＧＡＧＧＡＧＣＧＡＧＧＡＣＡＣＣＧＣＴＧＴＧＴＡＣＴＡＣＴＧＣＴＣＣＡＧＣＴＡＣＴＧＧＴＴＴＧＣＣＴＡＴＴＧＧＧＧＣＣＡＧＧＧＣＡＣＣＣＴＧＧＴＧＡＣＣＧＴＧＡＧＣＡＧＣＧＣＴＴＣＣＡＣＣＡＡＧＧＧＣＣＣＣＴＣＣＧＴＧＴＴＣＣＣＴＣＴＧＧＣＣＣＣＣＴＧＴＡＧＣＡＧＧＡＧＣＡＣＣＴＣＣＧＡＧＴＣＣＡＣＣＧＣＴＧＣＣＣＴＧＧＧＣＴＧＣＣＴＧＧＴＧＡＡＧＧＡＣＴＡＴＴＴＣＣＣＴＧＡＧＣＣＴＧＴＧＡＣＣＧＴＧＴＣＣＴＧＧＡＡＣＡＧＣＧＧＣＧＣＴＣＴＧＡＣＣＴＣＣＧＧＣＧＴＧＣＡＣＡＣＣＴＴＣＣＣＣＧＣＴＧＴＧＣＴＧＣＡＧＴＣＣＴＣＣＧＧＣＣＴＧＴＡＣＡＧＣＣＴＧＡＧＣＴＣＣＧＴＧＧＴＧＡＣＣＧＴＧＣＣＴＡＧＣＡＧＣＡＧＣＣＴＧＧＧＣＡＣＣＡＡＧＡＣＣＴＡＴＡＣＣＴＧＣＡＡＣＧＴＧＧＡＴＣＡＣＡＡＧＣＣＴＡＧＣＡＡＣＡＣＣＡＡＧＧＴＧＧＡＣＡＡＧＣＧＧＧＴＧＧＡＧＴＣＣＡＡＧＴＡＣＧＧＣＣＣＴＣＣＣＴＧＴＣＣＣＣＣＴＴＧＣＣＣＣＧＣＴＣＣＴＧＡＧＴＴＴＣＴＧＧＧＣＧＧＣＣＣＴＴＣＣＧＴＧＴＴＴＣＴＧＴＴＣＣＣＣＣＣＴＡＡＧＣＣＣＡＡＧＧＡＴＡＣＣＣＴＧＡＴＧＡＴＣＡＧＣＣＧＧＡＣＣＣＣＣＧＡＧＧＴＧＡＣＣＴＧＣＧＴＧＧＴＧＧＴＧＧＡＴＧＴＧＴＣＣＣＡＧＧＡＧＧＡＣＣＣＣＧＡＧＧＴＧＣＡＧＴＴＣＡＡＣＴＧＧＴＡＣＧＴＧＧＡＣＧＧＣＧＴＧＧＡＧＧＴＧＣＡＣＡＡＴＧＣＣＡＡＧＡＣＣＡＡＧＣＣＴＣＧＧＧＡＧＧＡＧＣＡＧＴＴＴＡＡＣＡＧＣＡＣＣＴＡＴＣＧＧＧＴＧＧＴＧＡＧＣＧＴＧＣＴＧＡＣＣＧＴＧＣＴＧＣＡＣＣＡＧＧＡＴＴＧＧＣＴＧＡＡＣＧＧＣＡＡＧＧＡＧＴＡＴＡＡＧＴＧＣＡＡＧＧＴＧＴＣＣＡＡＴＡＡＧＧＧＣＣＴＧＣＣＴＡＧＣＡＧＣＡＴＣＧＡＧＡＡＧＡＣＣＡＴＣＡＧＣＡＡＧＧＣＴＡＡＧＧＧＣＣＡＧＣＣＣＣＧＧＧＡＧＣＣＣＣＡＧＧＴＴＴＡＣＡＣＣＣＴＧＣＣＣＣＣＴＡＧＣＣＡＧＧＡＧＧＡＧＡＴＧＡＣＣＡＡＧＡＡＴＣＡＧＧＴＧＴＣＣＣＴＧＡＣＣＴＧＣＣＴＧＧＴＧＡＡＡＧＧＣＴＴＣＴＡＴＣＣＣＴＣＣＧＡＣＡＴＣＧＣＴＧＴＧＧＡＧＴＧＧＧＡＧＴＣＣＡＡＴＧＧＣＣＡＧＣＣＣＧＡＧＡＡＣＡＡＣＴＡＣＡＡＧＡＣＣＡＣＣＣＣＴＣＣＣＧＴＧＣＴＧＧＡＴＡＧＣＧＡＣＧＧＣＡＧＣＴＴＣＴＴＴＣＴＧＴＡＣＴＣＣＡＧＧＣＴＧＡＣＣＧＴＧＧＡＣＡＡＧＡＧＣＣＧＧＴＧＧＣＡＧＧＡＧＧＧＣＡＡＴＧＴＧＴＴＣＴＣＣＴＧＴＴＣＣＧＴＧＡＴＧＣＡＣＧＡＧＧＣＣＣＴＧＣＡＣＡＡＴＣＡＣＴＡＣＡＣＣＣＡＧＡＡＧＴＣＣＣＴＧＴＣＣＣＴＧＡＧＣＣＴＣＧＧＣＡＡＧ （ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５）
抗体４のヒト化抗体の軽鎖可変領域アミノ酸配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６に示される。
ＤＩＶＭＴＱＳＰＤＳＬＡＶＳＬＧＥＲＡＴＩＮＣＫＳＳＱＳＬＬＮＳＧＮＱＫＮＹＬＡＷＹＱＱＫＰＧＱＰＰＫＬＬＩＹＧＡＳＴＲＥＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＡＥＤＶＡＶＹＹＣＱＮＡＨＳＹＰＰＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫ （ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６）
抗体４のヒト化抗体の軽鎖アミノ酸配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７に示される。
ＤＩＶＭＴＱＳＰＤＳＬＡＶＳＬＧＥＲＡＴＩＮＣＫＳＳＱＳＬＬＮＳＧＮＱＫＮＹＬＡＷＹＱＱＫＰＧＱＰＰＫＬＬＩＹＧＡＳＴＲＥＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＡＥＤＶＡＶＹＹＣＱＮＡＨＳＹＰＰＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ （ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７）
抗体４のヒト化抗体の軽鎖アミノ酸配列でコードされた核酸配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８に示される。
ＧＡＣＡＴＣＧＴＧＡＴＧＡＣＣＣＡＧＡＧＣＣＣＣＧＡＴＴＣＣＣＴＧＧＣＣＧＴＧＴＣＣＣＴＧＧＧＣＧＡＧＡＧＧＧＣＴＡＣＣＡＴＣＡＡＴＴＧＣＡＡＧＴＣＣＴＣＣＣＡＧＡＧＣＣＴＧＣＴＧＡＡＴＡＧＣＧＧＣＡＡＣＣＡＧＡＡＧＡＡＣＴＡＣＣＴＧＧＣＣＴＧＧＴＡＣＣＡＧＣＡＧＡＡＧＣＣＣＧＧＣＣＡＧＣＣＴＣＣＴＡＡＧＣＴＧＣＴＧＡＴＣＴＡＣＧＧＣＧＣＣＴＣＣＡＣＣＣＧＧＧＡＧＡＧＣＧＧＣＧＴＴＣＣＴＧＡＣＡＧＧＴＴＴＡＧＣＧＧＣＴＣＣＧＧＣＡＧＣＧＧＣＡＣＣＧＡＴＴＴＣＡＣＣＣＴＧＡＣＣＡＴＣＴＣＣＡＧＣＣＴＧＣＡＧＧＣＣＧＡＧＧＡＣＧＴＧＧＣＣＧＴＧＴＡＴＴＡＴＴＧＣＣＡＧＡＡＴＧＣＣＣＡＣＴＣＣＴＡＴＣＣＣＣＣＣＡＣＣＴＴＴＧＧＣＣＡＧＧＧＣＡＣＣＡＡＧＣＴＧＧＡＧＡＴＣＡＡＧＣＧＧＡＣＣＧＴＧＧＣＣＧＣＣＣＣＴＴＣＣＧＴＧＴＴＴＡＴＣＴＴＣＣＣＣＣＣＣＴＣＣＧＡＣＧＡＧＣＡＧＣＴＧＡＡＧＴＣＣＧＧＣＡＣＣＧＣＣＡＧＣＧＴＧＧＴＧＴＧＴＣＴＧＣＴＧＡＡＣＡＡＣＴＴＣＴＡＣＣＣＣＡＧＧＧＡＧＧＣＴＡＡＧＧＴＧＣＡＧＴＧＧＡＡＧＧＴＧＧＡＴＡＡＣＧＣＣＣＴＧＣＡＧＴＣＣＧＧＣＡＡＣＡＧＣＣＡＧＧＡＧＡＧＣＧＴＧＡＣＣＧＡＧＣＡＧＧＡＣＴＣＣＡＡＧＧＡＣＴＣＣＡＣＣＴＡＣＴＣＣＣＴＧＴＣＣＴＣＣＡＣＣＣＴＧＡＣＣＣＴＧＴＣＣＡＡＧＧＣＣＧＡＴＴＡＴＧＡＧＡＡＧＣＡＣＡＡＧＧＴＧＴＡＣＧＣＣＴＧＣＧＡＧＧＴＧＡＣＣＣＡＣＣＡＧＧＧＣＣＴＧＡＧＣＴＣＣＣＣＣＧＴＧＡＣＣＡＡＧＴＣＣＴＴＣＡＡＴＡＧＧＧＧＣＧＡＧＴＧＣ （ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８）
少なくともいくつかの実施形態において、本発明は抗体又は抗体断片を提供し、前記抗体又は抗体断片は重鎖相補決定領域と軽鎖相補決定領域を含み、前記重鎖相補決定領域はＧＹＴＦＳＴＦＡ、ＩＬＰＧＩＮＮＴ及びＳＴＹＷＦＡＹを含み、前記軽鎖相補決定領域はＱＳＬＬＮＳＧＮＱＫＮＹ、ＧＡＳ及びＱＮＡＨＳＹＰＰＴを含む。
少なくともいくつかの実施形態において、本発明は抗体又は抗体断片を提供し、前記抗体又は抗体断片は重鎖可変領域と軽鎖可変領域を含み、前記重鎖可変領域はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９で示される配列又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９で示される配列に比べて少なくとも１つのアミノ酸置換を有する配列であり、前記軽鎖可変領域はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０で示される配列又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０で示される配列に比べて少なくとも１つのアミノ酸置換を有する配列である。
重鎖可変領域ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９で示される配列を以下のように示す。
ＱＶＱＬＱＱＳＧＡＥＬＭＫＰＧＡＳＶＫＩＳＣＫＡＴＧＹＴＦＳＴＦＡＩＤＷＩＫＱＲＰＧＰＧＬＡＷＩＧＥＩＬＰＧＩＮＮＴＮＹＮＥＫＦＫＧＫＡＴＦＴＡＤＴＳＳＮＴＡＹＭＨＬＳＳＬＴＳＥＤＳＡＶＹＹＣＳＴＹＷＦＡＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＡ
（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９）。
軽鎖可変領域ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０で示される配列を以下のように示す。
ＤＩＶＭＴＱＳＰＳＳＬＳＶＳＡＧＥＫＶＴＭＴＣＫＳＳＱＳＬＬＮＳＧＮＱＫＮＹＬＡＷＹＱＱＫＰＧＱＰＰＫＬＬＭＹＧＡＳＴＲＥＳＧＶＰＤＲＦＴＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＶＱＡＥＤＬＡＶＹＹＣＱＮＡＨＳＹＰＰＴＦＧＡＧＴＫＬＥＬＫ （ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０）。
少なくとも他のいくつかの実施形態において、本発明は抗体又は抗体断片を提供し、前記抗体又は抗体断片は重鎖相補決定領域と軽鎖相補決定領域を含み、前記重鎖相補決定領域はＧＹＴＦＳＴＦＡ、ＩＬＰＧＧＮＮＴ及びＳＴＹＷＦＡＹを含み、前記軽鎖相補決定領域はＱＳＬＬＮＳＧＮＱＫＮＹ、ＧＡＳ及びＱＮＡＨＳＹＰＰＡを含む。
少なくともいくつかの実施形態において、本発明は抗体又は抗体断片を提供し、前記抗体又は抗体断片は重鎖可変領域と軽鎖可変領域を含み、前記重鎖可変領域はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１で示される配列又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１で示される配列に比べて少なくとも１つのアミノ酸置換を有する配列であり、前記軽鎖可変領域はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２で示される配列又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２で示される配列に比べて少なくとも１つのアミノ酸置換を有する配列である。
重鎖可変領域ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１で示される配列を以下のように示す。
ＱＶＱＬＱＱＳＧＡＥＬＴＫＰＧＡＳＶＫＩＳＣＫＡＴＧＹＴＦＳＴＦＡＩＤＷＩＫＱＲＰＧＨＧＬＡＷＩＧＥＩＬＰＧＧＮＮＴＮＹＮＥＫＦＫＧＫＡＴＦＴＡＤＴＳＳＮＴＡＹＭＨＬＳＳＬＴＳＥＤＳＡＶＹＹＣＳＴＹＷＦＡＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＡ （ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１）。
軽鎖可変領域ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２で示される配列を以下のように示す。
ＤＩＶＭＴＱＳＰＳＳＬＳＶＳＡＧＥＫＶＴＭＳＣＫＳＳＱＳＬＬＮＳＧＮＱＫＮＹＬＡＷＹＱＱＫＰＧＱＰＰＫＬＬＭＹＧＡＳＴＲＥＳＧＶＰＤＲＦＴＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＶＱＡＥＤＬＡＶＹＹＣＱＮＡＨＳＹＰＰＡＦＧＡＧＴＫＬＥＬＫ （ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２）。
少なくともいくつかの実施形態において、本発明は抗体又は抗体断片を提供し、前記抗体又は抗体断片は重鎖相補決定領域と軽鎖相補決定領域を含み、前記重鎖相補決定領域はＧＹＳＦＴＡＹＴ、ＩＮＰＹＮＧＧＴ及びＡＲＥＧＮＹＹＧＳＲＧＤＦＤＹを含み、前記軽鎖相補決定領域はＱＴＩＶＴＮ、ＹＡＳ及びＱＱＳＨＳＷＰＦＴを含む。
少なくともいくつかの実施形態において、本発明は抗体又は抗体断片を提供し、前記抗体又は抗体断片は重鎖可変領域と軽鎖可変領域を含み、前記重鎖可変領域はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４３で示される配列又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４３で示される配列に比べて少なくとも１つのアミノ酸置換を有する配列であり、前記軽鎖可変領域はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４４で示される配列又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４４で示される配列に比べて少なくとも１つのアミノ酸置換を有する配列である。
重鎖可変領域ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４３で示される配列を以下のように示す。
ＥＶＱＬＱＱＳＧＰＥＬＶＫＰＧＡＳＭＫＩＳＣＫＡＳＧＹＳＦＴＡＹＴＭＮＷＶＫＱＳＨＧＫＮＬＥＷＩＧＬＩＮＰＹＮＧＧＴＳＹＮＱＫＦＫＧＫＡＴＬＴＧＤＫＳＳＳＴＡＹＭＥＬＬＳＶＴＳＥＤＳＡＶＹＦＣＡＲＥＧＮＹＹＧＳＲＧＤＦＤＹＷＧＱＧＴＴＬＴＶＳＳ （ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４３）
軽鎖可変領域ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４４で示される配列を以下のように示す。
ＤＩＬＬＴＱＳＰＡＩＬＳＶＳＰＧＥＲＶＳＦＳＣＲＡＳＱＴＩＶＴＮＩＬＷＹＱＱＲＴＮＧＳＰＲＬＬＩＲＹＡＳＥＳＩＳＧＩＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＳＩＮＳＶＥＳＥＤＩＡＨＹＹＣＱＱＳＨＳＷＰＦＴＦＧＳＧＴＫＬＥＩＫ （ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４４）
上記に言及された抗体又は抗体断片は分離可能なものである。用語「分離可能な」とは、提供された抗体を除いて、異なる抗原特異性を有する他の抗体又は抗体断片を基本的に含有しない。そして、分離可能な抗体又は抗体断片は、他の細胞材料及び／又は化学物質を基本的に含有しなくてもよい。このため、幾つかの態様において、提供された抗体は分離された抗体であり、それは既に異なる特異性を有する抗体と分離する。分離された抗体はモノクローナル抗体であってもよい。分離された抗体は組換えのモノクローナル抗体であってもよい。しかし、標的エピトープ、同種型または変異体に特異的に結合する単離された抗体は、他の種（例えば、種ホモログ）に由来する他の関連抗原と交差反応性を有し得る。
本明細書において、言及された少なくとも１つのアミノ酸置換は、１つのアミノ酸置換、２つのアミノ酸置換、３つのアミノ酸置換、４つのアミノ酸置換又は５つのアミノ酸置換、ひいてはより多いアミノ酸置換であってもよい。本発明の好ましい実施例によれば、前記アミノ酸置換は好ましくは保存的アミノ酸置換である。本明細書において、保存的アミノ酸置換は抗体とＰＶＲＩＧ抗原との結合のアミノ酸置換を損害しない。
保存的アミノ酸置換は、１つのクラスのアミノ酸が同じクラスのアミノ酸で置換されることを含み、前記クラスは、共通のアミノ酸側鎖の物理化学的性質と自然に発見された相同タンパク質中の高い置換頻度によって定義され、例えば、標準Ｄａｙｈｏｆｆ周波数交換マトリックス又はＢＬＯＳＵＭマトリックスによって確定される。既にアミノ酸側鎖を６つの大きなクラスに分類し、Ｉ類（Ｃｙｓ）、ＩＩ類（Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｐｒｏ、Ａｌａ、Ｇｌｙ）、ＩＩＩ類（Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ）、ＩＶ類（Ｈｉｓ、Ａｒｇ、Ｌｙｓ）、Ｖ類（Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｖａｌ、Ｍｅｔ）及びＶＩ類（Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ）を含む。例を挙げると、Ａｓｐを別のＩＩＩ類残基、例えばＡｓｎ、Ｇｌｎ又はＧｌｕで置換することは保存的置換である。このため、抗ＥＧＦＲ抗体において予想される非必須アミノ酸残基は、同じクラスからの別のアミノ酸残基で置換されることが好ましい。抗原結合を排除しないヌクレオチド及びアミノ酸の保存的置換を同定する方法は、当該技術分野において周知である。
本発明はさらに分離可能な核酸を提供し、前記核酸で上記に言及された抗体又は抗体断片をコードする。言及された分離可能な核酸とは、核酸が基本的に他の物質から分離し、材料又は化学物質を基本的に含有しない。核酸が完全な細胞、細胞溶解産物に存在してもよいし、又は部分的に精製された、または基本的に純粋な形態で存在してもよい。アルカリ性／ＳＤＳ処理、ＣｓＣｌバンド、カラムクロマトグラフィー、アガロースゲル電気泳動及びその他のこの分野でよく知られている技術を含む標準技術により他の細胞成分又はその他の不純物、例えば、他の細胞核酸又はタンパク質から精製されたとき、核酸は「分離された」又は「基本的に純粋な」ものである。
本発明は発現ベクターをさらに提供し、前記発現ベクターは前記の核酸を含有する。多種の発現ベクターを使用して本明細書に言及された抗体又は結合断片のポリヌクレオチドをコードして発現することができる。ウイルス及び非ウイルスに基づく発現ベクターを使用して哺乳動物宿主細胞に抗体を生成することができる。非ウイルスベクター及びシステムはプラスミド、付加型ベクターを含み、常にタンパク質又はＲＮＡを発現した発現コンポーネント、及びヒトの人工染色体（例えば、Ｈａｒｒｉｎｇｔｏｎなどによる（１９９７）Ｎａｔ Ｇｅｎｅｔ １５：３４５を参照）を有する。例えば、哺乳動物（例えば、ヒト）細胞にポリヌクレオチド及びポリペプチドを発現するための非ウイルスベクターは、ｐＴｈｉｏＨｉｓ Ａ，Ｂ＆Ｃ、ｐｃＤＮＡ３．１／Ｈｉｓ、ｐＥＢＶＨｉｓ Ａ，Ｂ＆Ｃ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ，Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ）、ＭＰＳＶベクター及び本技術分野において公知である大量の他のタンパク質を発現するための他のベクターを含む。使用可能なウイルスベクターはレトロウイルスウイルス、アデノウイルス、アデノ随伴ウイルス、ヘルペスウイルスに基づくベクター、ＳＶ４０、パピローマウイルス、ＨＢＰ Ｅｐｓｔｅｉｎ Ｂａｒｒウイルス、牛ポックスウイルスベクター及びセムリキ森林ウイルス（ＳＦＶ）に基づくベクターを含む。Ｂｒｅｎｔなどによる、（１９９５）Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．４９：８０７、及びＲｏｓｅｎｆｅｌｄなどによる（１９９２）Ｃｅｌｌ ６８：１４３を参照する。
発現ベクターは抗体又は抗体断片をコードするポリヌクレオチドと作動可能に連結されたプロモーター及び他の調節配列（例えば、エンハンサー）を含有する。幾つかの実施形態において、誘導型プロモーターを使用することにより、誘導条件の以外に挿入された配列を発現することを防止することができる。誘導型プロモーターは、アラビア砂糖、ｌａｃＺ、金属硫黄タンパク質プロモーター又はホットショックプロモーターを含むが、これらに限定されない。プロモーターに加えて、抗体または抗体断片を効率的に発現させる他の調節要素が要求または必要とされてもよい。これらの元件は、通常、ＡＴＧ開始コドン及び隣接するリボソーム結合部位または他の配列を含む。なお、利用された細胞システムに適用されたエンハンサーを含み、例えば、ＳＶ４０エンハンサー又はＣＭＶエンハンサーを使用することにより、哺乳動物宿主細胞における発現を増加する。
本発明は宿主細胞をさらに提供し、前記宿主細胞は上記に記載の抗体又は抗体断片を発現する。本発明の実施例によれば、前記宿主細胞は本願に言及された抗体を発現することができる上記に記載の発現ベクターを含有する。発現ベクターは宿主細胞のゲノムに組み込まれることができる。前記宿主細胞は哺乳動物細胞であってもよい。ＣＨＯ又はＨＥＫ２９３細胞を含むが、これらに限定されない。
抗体または抗体断片を有し、発現するために使用される宿主細胞は、原核細胞または真核細胞であり得る。例えば、原核宿主細胞である大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）が挙げられる。他の使用に適用される微生物宿主は、枯草バチルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ）などのバチルス属細菌、及びサルモネラ（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ）、サルモネラ（Ｓｅｒｒａｔｉａ）、様々な偽単胞菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）種などの他の腸内細菌科を含む。これらの原核宿主においても、通常、宿主細胞と相溶する発現制御配列を含む発現ベクターを生成しても良い。なお、これらの宿主細胞においては、プロモーター、例えば、ラクトースプロモーター系、トリプトファン（ｔｒｐ）プロモーター系、β－ラクタムプロモーター系、またはファージλ由来のプロモーター系をさらに含んでも良い。プロモーターは、通常、必要に合わせて操作子配列とともに発現を制御し、転写及び翻訳を誘発し、完成させるためのリボソーム結合部位配列等を有する。酵母などの他の微生物を用いて本開示内容のポリペプチドを発現させることもできる。また、棒状ウイルスベクターと組み合わせて昆虫細胞を用いることもできる。
幾つかの好ましい実施形態にいて、哺乳動物宿主細胞を使用して本開示内容の抗ＰＶＲＩＧ抗体又は抗体断片を発現して生成する。例えば、これらは内因性免疫グロブリン遺伝子を発現するハイブリドーマ細胞系であってもよい。好ましくは、ＳＰ２／０骨髄腫細胞、ＣＨＯ細胞、ＨｅＬａ細胞、ＰＥＲ．Ｃ６細胞、ＣＯＳ細胞、ＨＫＢ１１細胞、ＮＳ０細胞などの正常な致死性または正常または異常な永遠の命を持つ動物またはヒト細胞を含む外来性発現ベクター付きの哺乳動物細胞系を使用する。例えば、ＣＨＯ細胞系、各種Ｃｏｓ細胞系、ＨｅＬａ細胞、骨髄腫細胞系、形質転換されたＢ－細胞、ハイブリドーマなど、完全な免疫グロブリンを分泌できる適切な宿主細胞系が多数開発されている。宿主細胞に含まれる適切なプロモーターは、組成型、細胞型特異性、段階特異性及び／または制御可能または調節可能であってもよい。使用可能なプロモーターは、金属チオタンパク質プロモーター、構成型アデノウイルスの主要な後期プロモーター、デキサメタゾン誘導型ＭＭＴＶプロモーター、ＳＶ４０プロモーター、ＭＲＰ ｐｏｌｌｌｌプロモーター、構成型ＭＰＳＶプロモーター、構成型ＣＭＶプロモーター、及び当該技術分野で公知のプロモーター－エンハンサーの組み合わせを含むが、これらに限定されない。
公知の方法によって標的ポリヌクレオチド配列（例えば、抗体ポリペプチドをコードする核酸及び発現制御配列）を含むベクターを宿主細胞に転写することができ、その方法は細胞宿主の種類に応じて変化する。例えば、原核細胞に対して塩化カルシウムトランスフェクションが多く使用され、他の細胞宿主に対してリン酸カルシウム処理またはエレクトロポレーションが使用される。その他の方法として、例えば、エレクトロポレーション、リン酸カルシウム処理、リポソーム媒介形質転換、注射及びマイクロインジェクション、ウイルス、免疫リポソーム、ポリカチオン性核酸コンジュゲート、裸ＤＮＡ、人工ウイルスなどが挙げられる。
本発明はさらに薬物組成物を提供し、前記薬物組成物は、上記に記載の抗体及び薬学的に許容されるベクターを含む。
薬学的に許容されるベクターは、任意及びすべての生理学的相溶性の溶媒、分散媒、コーティング剤、抗細菌剤、抗真菌剤、等張化及び吸収遅延剤などを含む。好ましくは、該ベクターは、静脈内、筋肉内、皮下、胃腸外、脊髄または表皮の投与（例えば、注射又は注入によって投与される）に適している。異なる投与経路に応じて、活性化合物、即ち抗体は、酸作用及び化合物を不活性化する可能性のある他の自然条件から化合物を保護するために、特定の材料で包まれることができる。
提供された薬物組成物は本技術分野において公知である多種の方法によって投与されることができる。抗体は、適当なベクター、例えば、インプラント、経皮パッチ、マイクロカプセル化送達システムを含む放出制御製剤とともに調製されることができる。生分解性、生体適合性ポリマー、例えば、エチレン酢酸ビニル、ポリ無水物、ポリグリコール酸、コラーゲン、ポリプロトゲン酸エステル、ポリ乳酸を用いることができる。このような製剤の調製に使用される多くの方法は、特許を取得している、または当業者に広く知られている。
本発明の実施例によれば、提供される抗体は、特定の材料で包まれたり、組成物を特定の材料と共投与されたりして、その不活性化を防ぐために使用されることができる。例えば、組成物を、適切なベクター、例えば、リポソームまたは希釈剤で被験者に投与することができる。許容希釈剤には、生理食塩水及び水性緩衝液が含まれる。リポソームは、水中油中水ＣＧＦ乳液及び従来のリポソームを含む。
本発明の実施例によれば、薬学的に許容されるベクターは、無菌注射溶液又は無菌粉末として調製された無菌水溶液又は分散体を含む。本明細書に提供される医薬組成物は、当業者の公知の常法により薬学的に許容される剤形に製剤化されることができる。
本発明は、癌を治療する薬物の調製における上記に記載の抗体又は上記に記載の薬物組成物の使用をさらに提供する。
本発明は、被験者に有効量の上記に記載の抗体又は上記に記載の薬物組成物を投与することを含む、癌を予防又は治療する方法をさらに提供する。
「治療有効量」又は「有効量」とは、所望の生体応答を引き起こするために必要なＰＶＲＩＧ抗体の量を意味する。本発明によれば、治療有効量は、疾患の治療及び／又は予防に必要なＰＶＲＩＧ抗体の量である。
本明細書に提供される抗体の治療有効量は、抗体及び組み合わせの相対活性（例えば、細胞増殖を阻害する活性）、及び治療を受ける被験者及び疾患状態、被験者の体重及び年齢、疾患状態の重症度、投与方法等によって異なるが、当業者は容易に治療有効量を決定することができる。投与に使用される用量は、以下の範囲であり得る。例えば、約１ｎｇ～約６０００ｍｇ、約５ｎｇ～約５５００ｍｇ、約１０ｎｇ～約５０００ｍｇ、約２０ｎｇ～約４５００ｍｇ、約３０ｎｇ～約５０００ｍｇ、約３００ｎｇ～約４，５００ｍｇ、約５００ｎｇ～約４，０００ｍｇ、約１μｇ～約３，５００ｍｇ、約５μｇ～約３，０００ｍｇ、約１０μｇ～約２，６００ｍｇ、約２０μｇ～約２，５７５ｍｇ、約３０μｇ～約２，５５０ｍｇ、約４０μｇ～約２，５００ｍｇ、約５０μｇ～約２，４７５ｍｇ、約１００μｇ～約２，４５０ｍｇ、約２００μｇ～約２，４２５ｍｇ、約３００μｇ～約２，０００、約４００μｇ～約１，１７５ｍｇ、約５００μｇ～約１，１５０ｍｇ、約０．５ｍｇ～約１，１２５ｍｇ、約１ｍｇ～約１，１００ｍｇ、約１．２５ｍｇ～約１，０７５ｍｇ、約１．５ｍｇ～約１，０５０ｍｇ、約２．０ｍｇ～約１，０２５ｍｇ、約２．５ｍｇ～約１，０００ｍｇ、約３．０ｍｇ～約９７５ｍｇ、約３．５ｍｇ～約９５０ｍｇ、約４．０ｍｇ～約９２５ｍｇ、約４．５ｍｇ～約９００ｍｇ、約５ｍｇ～約８７５ｍｇ、約１０ｍｇ～約８５０ｍｇ、約２０ｍｇ～約８２５ｍｇ、約３０ｍｇ～約８００ｍｇ、約４０ｍｇ～約７７５ｍｇ、約５０ｍｇ～約７５０ｍｇ、約１００ｍｇ～約７２５ｍｇ、約２００ｍｇ～約７００ｍｇ、約３００ｍｇ～約６７５ｍｇ、約４００ｍｇ～約６５０ｍｇ、約５００ｍｇ又は約５２５ｍｇ～約６２５ｍｇの抗体が挙げられる。
本明細書において、「被験者」とは、マウス又はラットなどのげっ歯類動物、カニクイザル（Ｍａｃａｃａ ｆａｓｃｉｃｕｌａｒｉｓ）、アカゲザル（Ｍａｃａｃａ ｍｕｌａｔｔａ）又はヒト（Ｈｏｍｏ ｓａｐｉｅｎｓ）などの霊長類動物を含む任意の動物である。好ましくは、被験者は霊長類動物であり、より好ましくはヒトである。本明細書において、「予防」とは、病気の発症を防止するか、又は病気の発症を遅延させる方法を意味する。
本明細書において、癌の例は、癌、リンパ腫、胚細胞腫、肉腫及び白血病を含むが、これらに限定されない。より具体的な例としては、扁平上皮癌、小細胞肺癌、非小細胞肺癌、胃癌、膵臓癌、グリオーマおよび神経線維腫症などのグリア細胞腫瘍、子宮頸癌、卵巣癌、肝癌、膀胱癌、肝細胞腫、乳癌、結腸癌、メラノーマ、結腸直腸癌、子宮内膜癌、唾液腺癌、腎癌、腎臓癌、前立腺癌、外陰癌、甲状腺癌、肝癌及び様々なタイプの頭頸癌が挙げられる。具体的な実施形態では、本明細書に開示される方法を用いて治療または診断される癌は、メラノーマ、乳癌、卵巣癌、腎癌、胃腸／結腸癌、肺癌および前立腺癌から選択される。本発明の好ましい実施例によれば、前記癌は、黒色腫、肺癌、頭頸部癌、結腸直腸癌、膵臓癌、胃癌、腎臓癌、膀胱癌、前立腺癌、乳癌、卵巣癌又は肝癌を含むが、これらに限定されない。
本発明は、さらに、薬物併用を提供し、上記言及された抗体又は抗体断片以外、癌を治療するための他の薬物を含んでも良い。組成物は、単独投与で、または併用投与、すなわち、他の薬剤と併用して投与することができる。例えば、併用治療は本明細書に提供された組成物及び少なくとも１種又は多種の他の治療剤、例えば本明細書に記載の抗癌剤を含んでもよい。該組成物は放射線治療及び／又は手術と併用投与することもできる。抗ＥＧＦＲ抗体の特定の組み合わせは、他の治療剤とは別に投与しても、あるいは順次投与してもよい。
例えば、提供される他の癌治療薬は抗体であってもよく、例えば、抗ＣＴＬＡ－４抗体、抗ＰＤ－Ｌ１抗体、抗ＬＡＧ－３抗体、抗ＴＩＭ－３抗体、抗ＢＴＬＡ抗体であるか、または他の抗腫瘍抗体と組み合わせて使用することができる。
本発明によって提供される例示的な抗体は、マウス由来抗体またはヒト化抗体のいずれであっても、ヒトＰＶＲＩＧタンパク質を高い親和性で結合させることができ、かつ、ヒトＰＢＭＣによる腫瘍細胞の殺傷を促進することができる。なお、提供される抗体はまた、体内の腫瘍の成長を阻害する活性を示す。
当業者は、以下の実施例は本発明を説明するためのものであり、本発明の範囲を限定するものとみなされるべきではないことを理解することができる。実施例に具体的な技術や条件が明記されていない場合は、当該分野内の文献に記載されている技術や条件に従って、または製品説明書に従って行う。使用する試薬または機器にメーカーが明記されていないものは、市で購入できる通常の製品である。
実施例１
（Ｉ）抗ヒトＰＶＲＩＧモノクローナル抗体の調製
通常のハイブリドーマ細胞融合技術を参照して少し調整した後、抗ＰＶＲＩＧのモノクローナル抗体を調製する。具体的には、以下のとおりである。
（１）組換え融合タンパク質の調製
ヒトＰＶＲＩＧタンパク質（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４５に示す）をコードする全長遺伝子を人工的に合成し、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４６に示すタンパク質断片をＰＣＲで増幅し、且つ目的配列のＣ末端にはヒトＩｇＧ１定常領域（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４７に示す）のタンパク質断片を導入し、且つｐＬＶＸ－ＩＲＥＳ－ｚｓＧｒｅｅｎベクターにクローンし、レンチウイルスを包装することにより、ＨＥＫ２９３Ｔ細胞株に感染し、ヒトＰＶＲＩＧ－ヒトＩｇＧ１ Ｆｃを発現する融合タンパク質を取得し、続いて、通常の細胞培養により、細胞培養上清を採取し、Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｇアフィニティークロマトグラフィー法（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）により精製して純度９０％を超える組換えヒトＰＶＲＩＧ－ヒトＩｇＧ１Ｆｃ融合タンパク質を得た。質量分析により、目的蛋白のペプチドセグメントとＰＶＲＩＧ配列が一致し、この組換え蛋白が組換えヒトＰＶＲＩＧ－ヒトＩｇＧ１ Ｆｃ融合蛋白であることが証明された。
ヒトＰＶＲＩＧ全長アミノ酸配列：
ＭＲＴＥＡＱＶＰＡＬＱＰＰＥＰＧＬＥＧＡＭＧＨＲＴＬＶＬＰＷＶＬＬＴＬＣＶＴＡＧＴＰＥＶＷＶＱＶＲＭＥＡＴＥＬＳＳＦＴＩＲＣＧＦＬＧＳＧＳＩＳＬＶＴＶＳＷＧＧＰＮＧＡＧＧＴＴＬＡＶＬＨＰＥＲＧＩＲＱＷＡＰＡＲＱＡＲＷＥＴＱＳＳＩＳＬＩＬＥＧＳＧＡＳＳＰＣＡＮＴＴＦＣＣＫＦＡＳＦＰＥＧＳＷＥＡＣＧＳＬＰＰＳＳＤＰＧＬＳＡＰＰＴＰＡＰＩＬＲＡＤＬＡＧＩＬＧＶＳＧＶＬＬＦＧＣＶＹＬＬＨＬＬＲＲＨＫＨＲＰＡＰＲＬＱＰＳＲＴＳＰＱＡＰＲＡＲＡＷＡＰＳＱＡＳＱＡＡＬＨＶＰＹＡＴＩＮＴＳＣＲＰＡＴＬＤＴＡＨＰＨＧＧＰＳＷＷＡＳＬＰＴＨＡＡＨＲＰＱＧＰＡＡＷＡＳＴＰＩＰＡＲＧＳＦＶＳＶＥＮＧＬＹＡＱＡＧＥＲＰＰＨＴＧＰＧＬＴＬＦＰＤＰＲＧＰＲＡＭＥＧＰＬＧＶＲ （ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４５）
ヒトＰＶＲＩＧ細胞外セグメントアミノ酸配列：（４１－１７２）
ＴＰＥＶＷＶＱＶＲＭＥＡＴＥＬＳＳＦＴＩＲＣＧＦＬＧＳＧＳＩＳＬＶＴＶＳＷＧＧＰＮＧＡＧＧＴＴＬＡＶＬＨＰＥＲＧＩＲＱＷＡＰＡＲＱＡＲＷＥＴＱＳＳＩＳＬＩＬＥＧＳＧＡＳＳＰＣＡＮＴＴＦＣＣＫＦＡＳＦＰＥＧＳＷＥＡＣＧＳＬＰＰＳＳＤＰＧＬＳＡＰＰＴＰＡＰＩＬＲＡＤＬ （ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４６）
ヒトＩｇＧ１定常領域アミノ酸配列：
ＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＫＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＬＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＤＥＬＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫ （ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４７）
同様の方法で、組換えヒトＣＤ１１２－ヒトＩｇＧ１ Ｆｃ融合タンパク質を調製した。ヒトＣＤ１１２全長アミノ酸配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４８に示され、ヒトＣＤ１１２細胞外セグメントアミノ酸配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４９に示される。
ヒトＣＤ１１２全長アミノ酸配列：
ＭＡＲＡＡＡＬＬＰＳＲＳＰＰＴＰＬＬＷＰＬＬＬＬＬＬＬＥＴＧＡＱＤＶＲＶＱＶＬＰＥＶＲＧＱＬＧＧＴＶＥＬＰＣＨＬＬＰＰＶＰＧＬＹＩＳＬＶＴＷＱＲＰＤＡＰＡＮＨＱＮＶＡＡＦＨＰＫＭＧＰＳＦＰＳＰＫＰＧＳＥＲＬＳＦＶＳＡＫＱＳＴＧＱＤＴＥＡＥＬＱＤＡＴＬＡＬＨＧＬＴＶＥＤＥＧＮＹＴＣＥＦＡＴＦＰＫＧＳＶＲＧＭＴＷＬＲＶＩＡＫＰＫＮＱＡＥＡＱＫＶＴＦＳＱＤＰＴＴＶＡＬＣＩＳＫＥＧＲＰＰＡＲＩＳＷＬＳＳＬＤＷＥＡＫＥＴＱＶＳＧＴＬＡＧＴＶＴＶＴＳＲＦＴＬＶＰＳＧＲＡＤＧＶＴＶＴＣＫＶＥＨＥＳＦＥＥＰＡＬＩＰＶＴＬＳＶＲＹＰＰＥＶＳＩＳＧＹＤＤＮＷＹＬＧＲＴＤＡＴＬＳＣＤＶＲＳＮＰＥＰＴＧＹＤＷＳＴＴＳＧＴＦＰＴＳＡＶＡＱＧＳＱＬＶＩＨＡＶＤＳＬＦＮＴＴＦＶＣＴＶＴＮＡＶＧＭＧＲＡＥＱＶＩＦＶＲＥＴＰＮＴＡＧＡＧＡＴＧＧＩＩＧＧＩＩＡＡＩＩＡＴＡＶＡＡＴＧＩＬＩＣＲＱＱＲＫＥＱＴＬＱＧＡＥＥＤＥＤＬＥＧＰＰＳＹＫＰＰＴＰＫＡＫＬＥＡＱＥＭＰＳＱＬＦＴＬＧＡＳＥＨＳＰＬＫＴＰＹＦＤＡＧＡＳＣＴＥＱＥＭＰＲＹＨＥＬＰＴＬＥＥＲＳＧＰＬＨＰＧＡＴＳＬＧＳＰＩＰＶＰＰＧＰＰＡＶＥＤＶＳＬＤＬＥＤＥＥＧＥＥＥＥＥＹＬＤＫＩＮＰＩＹＤＡＬＳＹＳＳＰＳＤＳＹＱＧＫＧＦＶＭＳＲＡＭＹＶ （ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４８）
ヒトＣＤ１１２細胞外セグメントアミノ酸配列：（３２－３６０）
ＱＤＶＲＶＱＶＬＰＥＶＲＧＱＬＧＧＴＶＥＬＰＣＨＬＬＰＰＶＰＧＬＹＩＳＬＶＴＷＱＲＰＤＡＰＡＮＨＱＮＶＡＡＦＨＰＫＭＧＰＳＦＰＳＰＫＰＧＳＥＲＬＳＦＶＳＡＫＱＳＴＧＱＤＴＥＡＥＬＱＤＡＴＬＡＬＨＧＬＴＶＥＤＥＧＮＹＴＣＥＦＡＴＦＰＫＧＳＶＲＧＭＴＷＬＲＶＩＡＫＰＫＮＱＡＥＡＱＫＶＴＦＳＱＤＰＴＴＶＡＬＣＩＳＫＥＧＲＰＰＡＲＩＳＷＬＳＳＬＤＷＥＡＫＥＴＱＶＳＧＴＬＡＧＴＶＴＶＴＳＲＦＴＬＶＰＳＧＲＡＤＧＶＴＶＴＣＫＶＥＨＥＳＦＥＥＰＡＬＩＰＶＴＬＳＶＲＹＰＰＥＶＳＩＳＧＹＤＤＮＷＹＬＧＲＴＤＡＴＬＳＣＤＶＲＳＮＰＥＰＴＧＹＤＷＳＴＴＳＧＴＦＰＴＳＡＶＡＱＧＳＱＬＶＩＨＡＶＤＳＬＦＮＴＴＦＶＣＴＶＴＮＡＶＧＭＧＲＡＥＱＶＩＦＶＲＥＴＰＮＴＡＧＡＧＡＴＧＧ （ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４９）
同様の方法で、カニクイザルＰＶＲＩＧ－ヒトＩｇＧ１ Ｆｃ融合タンパク質を調製した。カニクイザルＰＶＲＩＧアミノ酸配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５０に示され、カニクイザルＰＶＲＩＧ細胞外セグメント配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５１に示される。
カニクイザルＰＶＲＩＧアミノ酸配列：
ＭＲＴＥＡＱＶＬＡＬＱＳＰＥＰＧＬＥＧＡＭＧＲＲＴＬＡＬＰＷＶＬＬＴＬＣＶＴＡＧＴＰＥＶＷＶＱＶＱＭＥＡＴＥＬＳＳＦＴＶＨＣＧＦＬＧＰＧＳＩＳＬＶＴＶＳＷＧＧＰＤＧＡＧＧＴＫＬＡＶＬＨＰＥＬＧＴＲＱＷＡＰＡＲＱＡＲＷＥＴＱＳＳＩＳＬＡＬＥＤＳＧＡＳＳＰＦＡＮＴＴＦＣＣＫＦＡＳＦＰＥＧＳＷＥＳＣＧＳＬＰＰＳＳＤＰＧＬＳＡＰＰＴＰＶＰＩＬＲＡＤＬＡＧＩＬＧＬＳＧＶＬＬＦＧＣＧＹＬＬＨＬＬＲＲＱＫＨＲＰＴＰＲＬＱＰＳＨＴＮＳＱＡＬＴＡＱＡＷＡＰＳＱＡＳＱＡＡＬＨＤＰＹＡＴＩＮＴＳＦＣＰＡＴＬＤＴＡＨＰＮＧＷＡＳＬＰＴＨＡＡＨＱＰＱＧＰＡＡＳＡＳＴＰＩＬＡＲＧＳＦＶＳＶＥＮＧＬＹＴＱＡＧＥＲＰＰＨＴＧＰＧＬＴＬＦＰＤＣＲＧＰＲＡＬＥＧＲＦＧＶＲ （ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５０）
カニクイザルＰＶＲＩＧ細胞外セグメント配列：（３９－１７１）
ＡＧＴＰＥＶＷＶＱＶＱＭＥＡＴＥＬＳＳＦＴＶＨＣＧＦＬＧＰＧＳＩＳＬＶＴＶＳＷＧＧＰＤＧＡＧＧＴＫＬＡＶＬＨＰＥＬＧＴＲＱＷＡＰＡＲＱＡＲＷＥＴＱＳＳＩＳＬＡＬＥＤＳＧＡＳＳＰＦＡＮＴＴＦＣＣＫＦＡＳＦＰＥＧＳＷＥＳＣＧＳＬＰＰＳＳＤＰＧＬＳＡＰＰＴＰＶＰＩＬＲＡＤ （ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５１）
（２）動物免疫、ハイブリドーマ細胞融合及びクローンスクリーニング
以上に取得した組換えヒトＰＶＲＩＧ－ヒトＩｇＧ１ Ｆｃ融合タンパク質を等体積の完全フロイントアジュバント（ＣＦＡ）と十分に混合し、８－１０週齢のＢＡＬＢ／ｃ雌マウス（上海レスクから購入、体重２０ｇ程度）を初回免疫し、マウス１匹あたり４０－６０μｇの組換えヒトＰＶＲＩＧ－ヒトＩｇＧ１ Ｆｃ融合タンパク質を腹腔内注射し、今後２週間ごとに免疫し、同量の組換えヒトＰＶＲＩＧ－ヒトＩｇＧ１ Ｆｃ融合タンパク質と等体積不完全フロイントアジュバントを混合し、合計５回の免疫後、ＥＬＩＳＡ検査でマウスの血清力価が１：１０５以上の場合、最後に４０－６０μｇの組換えヒトＰＶＲＩＧ－ヒトＩｇＧ１ Ｆｃ融合タンパク質を注射して強化する。強化後３日目に、標準技術を用いて脾細胞を分離し、マウス骨髄腫瘍細胞ＳＰ２／０細胞（ＡＴＣＣ番号ＣＲＬ－１５８１）と融合する。
ＥＬＩＳＡとフローサイトメトリーの両方で陽性シグナルを示すハイブリドーマ細胞を同定し、サブクローン・スクリーニングを行い、４株のハイブリドーマ細胞を得る。
（３）モノクローナル抗体の発現及び精製
モノクローナル抗体の調製はマウス腹腔内接種法を利用し、まず無菌の流動パラフィン５００μｌを腹腔内により８－１０週齢のＢＡＬＢ／ｃ雌マウスを免疫し、一週間後にハイブリドーマ細胞１×１０６を腹腔内注射し、７－１０日程度で腹水を集め、高速遠心分離で上清を集める。上記方法により得られた上清を、プロテインＧアフィニティークロマトグラフィー法で精製し、純度９５％以上のモノクローナル抗体を得た。
（ＩＩ）抗ＰＶＲＩＧモノクローナル抗体の可変領域配列
選択対象であるハイブリドーマ細胞の総数を１０６まで培養し、８００ｒｐｍで１０分間遠心分離して細胞を収集し、Ｔｒｉｚｏｌキット（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）で全ＲＮＡを抽出し、全ＲＮＡを鋳型とし、ｃＤＮＡライブラリー（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を逆転写合成し、さらに、ｃＤＮＡを鋳型としてハイブリドーマ細胞の対応する可変領域核酸配列をＰＣＲで増幅する。その後、ハイブリドーマ細胞の重鎖及び軽鎖可変領域アミノ酸配列（ＣＤＲ配列を含む）をシーケンシングによって取得する。
アミノ酸配列を同定し、各抗体配列はそれぞれ以下の通りである。
番号が抗体４の重鎖可変領域配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１に示され、軽鎖可変領域配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２に示され、番号が抗体１の重鎖可変領域配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９に示され、軽鎖可変領域配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０に示され、番号が抗体２の重鎖可変領域配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１に示され、軽鎖可変領域配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２に示され、番号が抗体３の重鎖可変領域配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４３に示され、軽鎖可変領域配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４４に示される。
上記番号が抗体１、抗体２、抗体３及び抗体４の抗体はいずれもマウス由来抗体である。
（ＩＩＩ）ヒト化抗体の発現及び精製：
上記ような異なる抗体はヒト化されてもよい。抗体４を例として、ヒト化を行う。得られたヒト化抗体は、抗体４－ｈｕ１～抗体４－ｈｕ１１を含むが、これらに限定されない。以下の方法によりほぼ調製して精製することができる。人工遺伝子合成により、ヒト化抗体をコードするＨＣおよびＬＣ核酸配列を含むベクターを得、適切な宿主細胞を取得し、例えば、ＨＥＫ２９３またはＣＨＯは、最適なプリセットＨＣ：ＬＣベクター比（例えば、１：１または１：２）を分泌可能な抗体の発現系として瞬間的または安定にトランスフェクションする。続いて、細胞培養上清を採取し、Ｐｒｏｔｅｉｎ Ａアフィニティークロマトグラフィーで精製することにより、純度９５％を超えるヒト化抗体を得ることができる。
実施例２
実施例２は、上記実施例１で調製された異なる抗体の活性及び抗原結合の特異性を評価した。使用した同型対照はマウスＩｇＧ１，κ（Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄから購入）である。
ヒトＰＶＲＩＧ－Ｆｃ融合タンパク質に対する異なるクローンされたマウス由来抗体の結合の活性をＥＬＩＳＡで評価した。実験の過程は以下の通りである。
組換えヒトＰＶＲＩＧ－ヒトＩｇＧ１ Ｆｃ融合タンパク質を１×ＰＢＳ（リン酸塩緩衝液）で１．０μｇ／ｍｌに希釈し、１００μｌ／ウェルで９６ウェルのＥＬＩＳＡプレートを包み、４℃で一晩静置し、ＰＢＳＴ（０．０５％のＴｗｅｅｎ２０－ＰＢＳ）で３回洗浄し、１％のＢＳＡを閉鎖し、３７℃で２時間インキュベートした。ＰＢＳＴで３回洗浄し、それぞれ、倍比希釈されたマウス由来抗体（抗体１、抗体２、抗体３又は抗体４）を添加し、８個の濃度を設定し、マウスＩｇＧ１（Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄから購入）を陰性対照とし、１００μｌ／ウェルで、３７℃で１時間インキュベートした。ＰＢＳＴで３回洗浄し、各ウェルに１００μｌ西洋ワサビペルオキシダーゼ（ＨＲＰ）で標識されたヤギ抗マウスＩｇＧ抗体（博士徳生物から購入、１：１００００で希釈）を添加し、３７℃で１時間インキュベートした。洗浄後各ウェルに１００μｌのＴＭＢプライマー液を添加し、１０～１５分間発色を避け、停止液（２ＭのＨ２ＳＯ４）を１００μｌ／ウェルで添加し、終了直後に酵素マーカーで検出し、波長４５０ｎｍの吸光値（ＯＤ４５０）を読み取り、その結果を図１に示す。
図１から分かるように、異なるクローンされたマウス由来抗体はいずれもヒトＰＶＲＩＧ－Ｆｃ融合タンパク質に特異的に結合することができる。
フローサイトメトリーを用いて細胞膜表面のヒトＰＶＲＩＧタンパク質に対する異なるクローンされたマウス由来抗体の結合の活性を評価した。実験の過程は以下の通りである。
２９３Ｔ－ヒトＰＶＲＩＧ細胞系を収集し、１×ＰＢＳで洗浄して再懸濁した後、細胞計数を行った。その後、各１．５ｍｌのＥＰチューブに２×１０５個の細胞を添加し、それぞれ異なる濃度の各マウス由来抗体（抗体１、抗体２、抗体３又は抗体４）を添加し、４℃で３０分間インキュベートし、その後、１×ＰＢＳを添加して洗浄し、３５００ｒｐｍで５分間遠心分離し、細胞を収集する。１００μｌの１×ＰＢＳで細胞沈殿を再懸濁し、そして、ＡＦ６４７で標識されたヤギ抗マウスＩｇＧ抗体（Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄから購入）を添加し、４℃避光で３０分間インキュベートし、その後、１×ＰＢＳを添加して２回洗浄し、３５００ｒｐｍで５分間遠心分離し、細胞を収集する。２００μｌの１×ＰＢＳで細胞沈殿を再懸濁し、フローサイトメトリー（ＢＤ ＬＳＲ ＩＩ）を用いて検出する。
図２の結果から分かるように、異なるクローンされたマウス由来抗体はいずれも細胞膜表面のヒトＰＶＲＩＧタンパク質に特異的に結合することができる。
フローサイトメトリーを用いて異なるクローンされたマウス由来抗体によるヒトＰＶＲＩＧとそのリガンドＣＤ１１２との結合遮断の活性を評価した。実験の過程は以下の通りである。
２９３Ｔ－ヒトＣＤ１１２細胞系を収集し、１×ＰＢＳで洗浄して再懸濁した後、細胞計数を行った。その後、各１．５ｍｌのＥＰチューブに２×１０５個の細胞を添加し、それぞれ異なる濃度の各マウス由来抗体（抗体１、抗体２、抗体３又は抗体４）及び１０μｇ／ｍｌのヒトＣＤ１１２－ヒトＩｇＧ１ Ｆｃ融合タンパク質を添加し、４℃で３０分間インキュベートし、その後、１×ＰＢＳを添加して洗浄し、３５００ｒｐｍで５分間遠心分離し、細胞を収集する。１００μｌの１×ＰＢＳで細胞沈殿を再懸濁し、そして、ＡＦ６４７で標識されたマウス抗ヒトＩｇＧ－Ｆｃ抗体（Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄから購入）を添加し、４℃避光で３０分間インキュベートし、その後、１×ＰＢＳを添加して２回洗浄し、３５００ｒｐｍで５分間遠心分離し、細胞を収集する。２００μｌの１×ＰＢＳで細胞沈殿を再懸濁し、フローサイトメトリー（ＢＤ ＬＳＲ ＩＩ）を用いて検出する。
図３の結果から分かるように、異なるクローンされたマウス由来抗体はいずれもヒトＰＶＲＩＧとそのリガンドＣＤ１１２との結合を効果的に遮断することができる。
フローサイトメトリーを用いてヒトＰＶＲＩＧタンパク質に対する異なるクローンされたマウス由来抗体の競合的結合の活性を評価した。実験の過程は以下の通りである。
２９３Ｔ－ｈｕｍａｎ ＰＶＲＩＧ細胞系を収集し、１×ＰＢＳで洗浄して再懸濁した後、細胞計数を行った。その後、各１．５ｍｌのＥＰチューブに２×１０５個の細胞を添加し、それぞれ１０μｇ／ｍｌの対照抗体マウスＩｇＧ１及び異なるクローンされた各マウス由来抗体（抗体１、抗体２、抗体３又は抗体４）を添加し、４℃で３０分間インキュベートし、その後、１×ＰＢＳを添加して洗浄し、３５００ｒｐｍで５分間遠心分離し、細胞を収集する。１００μｌの１×ＰＢＳで細胞沈殿を再懸濁し、そして、ＡＦ６４７で標識された抗体４の抗体を添加し、４℃避光で３０分間インキュベートし、その後、１×ＰＢＳを添加して２回洗浄し、３５００ｒｐｍで５分間遠心分離し、細胞を収集する。２００μｌの１×ＰＢＳで細胞沈殿を再懸濁し、フローサイトメトリー（ＢＤ ＬＳＲ ＩＩ）を用いて検出し、解析統計の結果を図４に示す。
図４から分かるように、抗体１、抗体２及び抗体４はヒトＰＶＲＩＧに競合的に結合する関係を有し、抗体３と抗体４は異なるヒトＰＶＲＩＧエピトープに結合される。
フローサイトメトリーを用いてカニクイザル及びマウスＰＶＲＩＧに対するマウス由来抗体の結合の活性を評価した。実験の過程は以下の通りである。
２９３Ｔ－カニクイザルＰＶＲＩＧ及び２９３Ｔ－マウスＰＶＲＩＧ細胞系を収集し、１×ＰＢＳで洗浄して再懸濁した後、細胞計数を行った。その後、各１．５ｍｌのＥＰチューブに２×１０５個の細胞を添加し、そして、ＡＦ６４７で標識された抗体４マウス由来抗体を添加し、４℃避光で３０分間インキュベートし、その後、１×ＰＢＳを添加して２回洗浄し、３５００ｒｐｍで５分間遠心分離し、細胞を収集する。２００μｌの１×ＰＢＳで細胞沈殿を再懸濁し、フローサイトメトリー（ＢＤ ＬＳＲ ＩＩ）を用いて検出し、解析統計の結果を図５に示す。
図５から分かるように、抗体４マウス由来抗体は、カニクイザルのＰＶＲＩＧタンパク質に結合することができるが、マウスのＰＶＲＩＧタンパク質に結合することができない。
ＥＬＩＳＡの方法でカニクイザルＰＶＲＩＧに対するマウス由来抗体の結合の活性を評価した。実験の過程は以下の通りである。
１×ＰＢＳ（リン酸塩緩衝液）で組換えカニクイザルＰＶＲＩＧ－ヒトＩｇＧ１ Ｆｃ融合タンパク質を１．０μｇ／ｍｌに希釈し、１００μｌ／ウェルで、９６ウェルのＥＬＩＳＡプレートを包み、４℃で一晩静置し、ＰＢＳＴ（０．０５％のＴｗｅｅｎ２０－ＰＢＳ）で３回洗浄し、１％のＢＳＡで閉鎖し、３７℃で２時間インキュベートする。ＰＢＳＴで３回洗浄し、それぞれ倍比希釈されたマウス由来抗体（抗体４）を添加し、１１個の濃度を設定し、マウスＩｇＧ１を陰性対照とし、１００μｌ／ウェルで、３７℃で１時間インキュベートした。ＰＢＳＴで３回洗浄し、各ウェルに１００μｌの西洋ワサビペルオキシダーゼ（ＨＲＰ）で標識されたヤギ抗マウスＩｇＧ抗体（博士徳生物から購入、１：１００００で希釈）を添加し、３７℃で１時間インキュベートした。洗浄後各ウェル１００μｌのＴＭＢプライマー液を添加し、１０～１５分間発色を避け、停止液（２ＭのＨ２ＳＯ４）を１００μｌ／ウェルで添加し、終了直後に酵素マーカーで検出し、波長４５０ｎｍの吸光値（ＯＤ４５０）を読み取り、その結果を図６に示す。抗体４マウス由来抗体がカニクイザルのＰＶＲＩＧタンパク質に結合することができることが分かる。
フローサイトメトリーを用いてＮＫＧ細胞系膜表面ＰＶＲＩＧに対するマウス由来抗体結合の活性を評価した。実験の過程は以下の通りである。
ＮＫＧ細胞系を収集し、１×ＰＢＳで洗浄して再懸濁した後、細胞計数を行った。その後、各１．５ｍｌのＥＰチューブに２×１０５個の細胞を添加し、そして、１０μｌのマウス血清を添加し、４℃で３０分間閉鎖し、その後、１×ＰＢＳを添加して洗浄し、３５００ｒｐｍで５分間遠心分離し、細胞を収集する。１００μｌの１×ＰＢＳで細胞沈殿を再懸濁し、そして、ＡＦ６４７で標識された抗体４を添加し、４℃避光で３０分間インキュベートし、その後、１×ＰＢＳを添加して２回洗浄し、３５００ｒｐｍで５分間遠心分離し、細胞を収集する。２００μｌの１×ＰＢＳで細胞沈殿を再懸濁し、フローサイトメトリー（ＢＤ ＬＳＲ ＩＩ）を用いて検出し、検出の結果を図７に示す。
図７から分かるように、マウス由来抗体４はＮＫＧ細胞系表面のヒトＰＶＲＩＧタンパク質に結合することができる。
フローサイトメトリーを用いてリンパ球膜表面ＰＶＲＩＧに対するマウス由来抗体の結合の活性を評価した。実験の過程は以下の通りである。
Ｆｉｃｏｌｌ（末梢血リンパ球分離液、ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）遠心分離法を使用することにより、４００ｇ、３０分間で、正常なヒト末梢血からリンパ球を分離し、１×ＰＢＳで再懸濁し、細胞計数を行った。その後、各１．５ｍｌのＥＰチューブに１×１０６個の細胞を添加し、そして、１０μｌのマウス血清を添加し、４℃で３０分間閉鎖し、その後、１×ＰＢＳを添加して洗浄し、３５００ｒｐｍで５分間遠心分離し、細胞を収集する。１００μｌの１×ＰＢＳで細胞沈殿を再懸濁し、そして、ＡＦ６４７で標識された抗体４、ＰｅｒｃＰ－Ｃｙ５．５で標識されたマウス抗ヒトＣＤ３抗体（Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄから購入）、ＰＥ－Ｃｙ７で標識されたマウス抗ヒトＣＤ８抗体（ＢＤから購入）、ＢＶ４２１で標識されたマウス抗ヒトＣＤ４抗体（ＢＤから購入）及びＢＶ６０５で標識されたマウス抗ヒトＣＤ５６抗体（Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄから購入）を添加し、４℃避光で３０分間インキュベートし、その後、１×ＰＢＳを添加して２回洗浄し、３５００ｒｐｍで５分間遠心分離し、細胞を収集する。２００μｌの１×ＰＢＳで細胞沈殿を再懸濁し、フローサイトメトリー（ＢＤ ＬＳＲ ＩＩ）を用いて検出し、検出の結果を図８に示す。
図８から分かるように、マウス由来抗体４はヒトリンパ球膜表面のＰＶＲＩＧタンパク質に結合することができる。
フローサイトメトリーを用いて腫瘍細胞系表面ＣＤ１１２の発現を評価した。実験の過程は以下の通りである。
ＳＷ６２０大腸癌細胞系（中国科学院上海細胞バンク）、Ａ３７５メラノーマ細胞系（中国科学院上海細胞バンク）及びＳＫ－ＯＶ－３卵巣癌細胞系（中国科学院上海細胞バンク）を収集し、１×ＰＢＳで洗浄して再懸濁した後、細胞計数を行った。その後、各１．５ｍｌのＥＰチューブに２×１０５個の細胞を添加し、そして、１０μｌのマウス血清を添加し、４℃で３０分間閉鎖し、その後、１×ＰＢＳを添加して洗浄し、３５００ｒｐｍで５分間遠心分離し、細胞を収集する。１００μｌの１×ＰＢＳで細胞沈殿を再懸濁し、そして、ＡＰＣで標識されたマウス抗ヒトＣＤ１１２抗体（Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄから購入）を添加し、４℃避光で３０分間インキュベートし、その後、１×ＰＢＳを添加して２回洗浄し、３５００ｒｐｍで５分間遠心分離し、細胞を収集する。２００μｌの１×ＰＢＳで細胞沈殿を再懸濁し、フローサイトメトリー（ＢＤ ＬＳＲ ＩＩ）を用いて検出し、検出の結果を図９に示す。
図９から分かるように、多種の腫瘍細胞系の表面でＰＶＲＩＧのリガンドＣＤ１１２を高く発現する。
実験によりＮＫ細胞の細胞毒性効果に対するマウス由来抗体の促進を続いて評価した。実験の過程は以下の通りである。
Ｆｉｃｏｌｌ（末梢血リンパ球分離液、ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）遠心分離法を使用することにより、４００ｇ、３０分間で、正常なヒト末梢血からリンパ球を分離し、１×ＰＢＳで再懸濁し、その後、ＮＫ細胞選別キット（メティニ、Ｈｕｍａｎ ＮＫセルアイソニックキット）を用いてＮＫ細胞を精製した。その後、精製されたＮＫ細胞をエフェクター細胞とし、ＣＦＳＥ（Ｔｈｅｒｍｏ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃから購入）で標識されたＳＷ６２０大腸癌細胞系を標的細胞とし、１．２５：１、２．５：１及び５：１の有効ターゲット比に従って、９６ウェルの円形底板に入れ、培養系においてそれぞれ１０μｇ／ｍｌのマウスＩｇＧ１を添加して対照抗体及びマウス由来抗体（抗体４）とし、２５０ｇで、４分間遠心分離し、そして、３７℃で４時間インキュベートした。７ＡＡＤで殺傷された腫瘍細胞を標識し、フローサイトメトリー（ＢＤ ＬＳＲ ＩＩ）を用いて検出し、解析統計の結果を図１０に示す。
図１０から分かるように、異なる有効ターゲット比の条件下で、マウス由来抗体（抗体４）はすべて腫瘍細胞に対するＮＫ細胞の殺傷を大幅に促進することができる。
実験により、ヒトＰＢＭＣの細胞毒性効果に対するマウス由来抗体の促進をさらに評価した。実験の過程は以下の通りである。
Ｆｉｃｏｌｌ（末梢血リンパ球分離液、ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）遠心分離法を使用することにより、４００ｇ、３０分間で、正常なヒト末梢血からリンパ球を分離し、１×ＰＢＳで再懸濁し、その後、ヒトＰＢＭＣ細胞をエフェクター細胞とし、ＣＦＳＥ（Ｔｈｅｒｍｏ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃから購入）で標識されたＳＷ６２０大腸癌細胞系又はＡ３７５メラノーマ細胞又はＳＫ－ＯＶ－３卵巣癌細胞を標的細胞とし、１２．５：１、２５：１及び５０：１の有効ターゲット比に従って、９６ウェルの円形底板に入れ、培養系においてそれぞれ１０μｇ／ｍｌのマウスＩｇＧ１を添加して対照抗体及びマウス由来抗体（抗体４）とし、２５０ｇで、４分間遠心分離し、そして、３７℃で４時間インキュベートした。７ＡＡＤで殺傷された腫瘍細胞を標識し、フローサイトメトリー（ＢＤ ＬＳＲ ＩＩ）を用いて検出し、解析統計の結果を図１１に示す。
図１１から分かるように、異なる有効ターゲット比の条件下で、マウス由来抗体Ａｎｔｉｂｏｄｙ ４はすべて多種の腫瘍細胞に対するヒトＰＢＭＣ細胞の殺傷を大幅に促進することができる。
実験により、フローサイトメトリーを用いてＮＫ細胞のエフェクター分子発現効果に対するマウス由来抗体の促進をさらに評価した。実験の過程は以下の通りである。
Ｆｉｃｏｌｌ（末梢血リンパ球分離液、ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）遠心分離法を使用することにより、４００ｇ、３０分間で、正常なヒト末梢血からリンパ球を分離し、１×ＰＢＳで再懸濁し、そして、ヒトＰＢＭＣ細胞をエフェクター細胞とし、ＳＷ６２０大腸癌細胞系を標的細胞とし、２５：１の有効ターゲット比に従って、９６ウェルの円形底板に入れ、培養系においてそれぞれ１０μｇ／ｍｌのマウスＩｇＧ１を添加して対照抗体及びマウス由来抗体（抗体４）とし、２５０ｇで、４分間遠心分離し、そして、３７℃で２４時間インキュベートする。最後の４時間のインキュベートのとき、２．５μｇ／ｍｌのモネンシン（Ｓｉｇｍａから購入）及びＢＶ５１０で標識されたマウス抗ヒトＣＤ１０７ａ抗体（Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄから購入）を添加する。インキュベート終了後、細胞を収集し、そして１×ＰＢＳで洗浄し、１００μｌの１×ＰＢＳで細胞を再懸濁し、１０μｌのマウス血清を添加し、４℃で３０分間閉鎖する。１×ＰＢＳで洗浄し、１００μｌの１×ＰＢＳで細胞を再懸濁し、それぞれＰｅｒｃＰ－Ｃｙ５．５で標識されたマウス抗ヒトＣＤ３抗体（Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄから購入）、ＰＥ－Ｃｙ７で標識されたマウス抗ヒトＣＤ８抗体（ＢＤから購入）、ＢＶ４２１で標識されたマウス抗ヒトＣＤ４抗体（ＢＤから購入）及びＢＶ６０５で標識されたマウス抗ヒトＣＤ５６抗体（Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄから購入）を添加し、４℃避光で３０分間インキュベートし、その後、１×ＰＢＳを添加して２回洗浄し、３５０ｇで５分間遠心分離し、細胞を収集する。Ｆｏｘｐ３ ／ Ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ Ｆａｃｔｏｒ Ｓｔａｉｎｉｎｇ Ｂｕｆｆｅｒ（ｅＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅから購入）で細胞を再懸濁し、そして、ＦＩＴＣで標識されたマウス抗ヒトＩＦＮ－γ（Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄから購入）及びＰＥで標識されたマウス抗ヒトＴＮＦ－α（Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄから購入）を添加し、４℃で１時間インキュベートした。そして１×ＰＢＳを添加して２回洗浄し、５００ｇで５分間遠心分離し、細胞を収集する。２００μｌの１×ＰＢＳで細胞を再懸濁し、そして、フローサイトメトリー（ＢＤ ＦＡＣＳ Ｃｅｌｅｓｔａ）を用いて検出し、解析統計の結果を図１２に示す。
図１２から分かるように、マウス由来抗体（抗体４）は、ＮＫ細胞の脱顆粒能を高め、サイトカインの分泌を促進することができる。
実験によりＥＬＩＳＡの方法でＮＫ細胞のサイトカインの分泌効果に対するマウス由来抗体の促進を評価した。実験の過程は以下の通りである。Ｆｉｃｏｌｌ（末梢血リンパ球分離液、ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）遠心分離法を使用することにより、４００ｇ、３０分間で、正常なヒト末梢血からリンパ球を分離し、１×ＰＢＳで再懸濁し、その後、ＮＫ細胞選別キット（メティニ、Ｈｕｍａｎ ＮＫ Ｃｅｌｌ Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ Ｋｉｔ）を利用してＮＫ細胞を精製する。そして、精製されたＮＫ細胞をエフェクター細胞とし、ＳＷ６２０大腸癌細胞系を標的細胞とし、２．５：１の有効ターゲット比に従って、９６ウェルの円形底板に入れ、培養系においてそれぞれ１０μｇ／ｍｌのマウスＩｇＧ１を添加して対照抗体及びマウス由来抗体（抗体４）とし、２５０ｇで、４分間遠心分離し、その後、３７℃で１８時間インキュベートする。その後、細胞培養上清を収集し、ＥＬＩＳＡキット（ダコから購入）により培養上清中のＩＦＮ－γの含有量を検出した。ＥＬＩＳＡ解析統計の結果を図１３に示す。マウス由来抗体（抗体４）はＮＫ細胞によるＩＦＮ－γの分泌を促進することができることが分かる。
実験により腫瘍成長に対するマウス由来抗体の抑制の活性を評価した。実験の過程は以下の通りである。
体外でＳＷ６２０大腸癌細胞（中国科学院上海細胞バンク）を増幅し、細胞を収集し、１×ＰＢＳで２回洗浄し、８００ｒｐｍで５分間遠心分離し、細胞を収集し、無菌生理食塩水で細胞を再懸濁し、細胞計数を行った。細胞濃度を１×１０７個／ｍｌに調整し、６～８週齢のＢ－ＮＤＧマウスの右側脇皮下に１００μｌの細胞を接種し、７日目に、ホルママウスをランダムにグループ分けし、Ｆｉｃｏｌｌ分離により得られたヒトＰＢＭＣ細胞を尾静脈転送し、各マウスに１×１０７個の細胞を接種する。翌日からＰＢＳまたはマウスＩｇＧ対照抗体またはマウス由来抗体ａｎｔｉｂｏｄｙ４（２５０μｇ／匹））の腹腔内注射を行い、３日に１回投与し、合計５回治療する。３日ごとにマウス皮下腫瘍の長辺と短辺を測定し、マウスを重量測定する。経験式（腫瘍サイズ＝長辺×短辺×短辺／２）に従って算出できる腫瘍サイズの結果を図１４に示す。その結果、マウス由来抗体（抗体４）は体内で皮下腫瘍の成長を抑制できることが判明した。
実験によりＥＬＩＳＡの方法でヒトＰＶＲＩＧに対するヒト化抗体の結合の活性をさらに評価した。実験の過程は以下の通りである。
１×ＰＢＳ（リン酸塩緩衝液）で組換えヒトＰＶＲＩＧ－ヒトＩｇＧ１ Ｆｃ融合タンパク質を１．０μｇ／ｍｌに希釈し、１００μｌ／ウェルで、９６ウェルのＥＬＩＳＡプレートを包み、４℃で一晩静置し、ＰＢＳＴ（０．０５％のＴｗｅｅｎ２０－ＰＢＳ）で３回洗浄し、１％のＢＳＡで閉鎖し、３７℃で２時間インキュベートする。ＰＢＳＴで３回洗浄し、それぞれ倍比希釈されたヒト化抗体を添加し、８個の濃度を設定し、ヒトＩｇＧ４（Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄから購入）を陰性対照とし、１００μｌ／ウェルで、３７℃で１時間インキュベートした。ＰＢＳＴで３回洗浄し、各ウェルに１００μｌの西洋ワサビペルオキシダーゼ（ＨＲＰ）で標識されたマウス抗ヒトＩｇＧ４－Ｆｃ抗体（Ｓｏｕｔｈｅｒｎ Ｂｉｏｔｅｃｈから購入、１：５０００で希釈）を添加し、３７℃で１時間インキュベートした。洗浄後各ウェルに１００μｌのＴＭＢプライマー液を添加し、１０～１５分間発色を避け、１００μｌ／ウェルで、停止液（２ＭのＨ２ＳＯ４）を添加し、終了直後に酵素マーカーで検出し、波長４５０ｎｍの吸光値（ＯＤ４５０）を読み取り、その結果を図１５に示す。
図１５から分かるように、ヒト化抗体はすべてヒトＰＶＲＩＧタンパク質に特異的に結合することができる。
実験によりフローサイトメトリーでヒトＰＶＲＩＧに対するヒト化抗体の結合の活性を評価した。
２９３Ｔ－ｈｕｍａｎ ＰＶＲＩＧ細胞系を収集して、１×ＰＢＳで洗浄して再懸濁した後、細胞計数を行った。その後、各１．５ｍｌのＥＰチューブに２×１０５個の細胞を添加し、それぞれ異なる濃度の各ヒト化抗体を添加し、４℃で３０分間インキュベートし、その後、１×ＰＢＳを添加して洗浄し、３５００ｒｐｍで５分間遠心分離し、細胞を収集する。１００μｌの１×ＰＢＳで細胞沈殿を再懸濁し、そして、ＡＦ６４７で標識されたマウス抗ヒトＩｇＧ－Ｆｃ抗体（Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄから購入）を添加し、４℃避光で３０分間インキュベートし、その後、１×ＰＢＳを添加して２回洗浄し、３５００ｒｐｍで５分間遠心分離し、細胞を収集する。２００μｌの１×ＰＢＳで細胞沈殿を再懸濁し、フローサイトメトリー（ＢＤ ＬＳＲ ＩＩ）を用いて検出し、解析統計の結果を図１６に示す。各ヒト化抗体はいずれも細胞膜表面のヒトＰＶＲＩＧタンパク質に特異的に結合することができることが分かる。
実験によりフローサイトメトリーでカニクイザルＰＶＲＩＧに対するヒト化抗体の結合の活性を評価した。実験の過程は以下の通りである。
２９３Ｔ－カニクイザルＰＶＲＩＧ細胞系を収集し、１×ＰＢＳで洗浄して再懸濁した後、細胞計数を行った。その後、各１．５ｍｌのＥＰチューブに２×１０５個の細胞を添加し、それぞれ異なる濃度の各ヒト化抗体を添加し、４℃で３０分間インキュベートし、その後、１×ＰＢＳを添加して洗浄し、３５００ｒｐｍで５分間遠心分離し、細胞を収集する。１００μｌの１×ＰＢＳで細胞沈殿を再懸濁し、そして、ＡＦ６４７で標識されたマウス抗ヒトＩｇＧ－Ｆｃ抗体（Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄから購入）を添加し、４℃避光で３０分間インキュベートし、その後、１×ＰＢＳを添加して２回洗浄し、３５００ｒｐｍで５分間遠心分離し、細胞を収集する。２００μｌの１×ＰＢＳで細胞沈殿を再懸濁し、フローサイトメトリー（ＢＤ ＬＳＲ ＩＩ）を用いて検出し、解析統計の結果を図１７に示す。
図１７から分かるように、各ヒト化抗体はいずれも細胞膜表面のカニクイザルＰＶＲＩＧタンパク質に特異的に結合することができる。
実験によりフローサイトメトリーを用いてヒト化抗体によるヒトＰＶＲＩＧとリガンドとの結合遮断の活性を評価した。実験の過程は以下の通りである。
２９３Ｔ－ヒトＣＤ１１２細胞系を収集し、１×ＰＢＳで洗浄して再懸濁した後、細胞計数を行った。その後、各１．５ｍｌのＥＰチューブに２×１０５個の細胞を添加し、それぞれヒト化抗体及び１０μｇ／ｍｌのヒトＰＶＲＩＧ－ヒトＩｇＧ１ Ｆｃ融合タンパク質を添加し、４℃で３０分間インキュベートし、その後、１×ＰＢＳを添加して洗浄し、３５００ｒｐｍで５分間遠心分離し、細胞を収集する。１００μｌの１×ＰＢＳで細胞沈殿を再懸濁し、そして、ＡＦ６４７で標識されたマウス抗ヒトＩｇＧ－Ｆｃ抗体（Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄから購入）を添加し、４℃避光で３０分間インキュベートし、その後、１×ＰＢＳを添加して２回洗浄し、３５００ｒｐｍで５分間遠心分離し、細胞を収集する。２００μｌの１×ＰＢＳで細胞沈殿を再懸濁し、フローサイトメトリー（ＢＤ ＬＳＲ ＩＩ）を用いて検出する。解析統計の結果を図１８に示し、ヒト化抗体はいずれもヒトＰＶＲＩＧとそのリガンドＣＤ１１２との結合を効果的に遮断することができる。
実験によりヒトＰＢＭＣの細胞毒性効果に対するヒト化抗体の促進をさらに評価した。実験の過程は以下の通りである。
Ｆｉｃｏｌｌ（末梢血リンパ球分離液、ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）遠心分離法を使用することにより、４００ｇ、３０分間で、正常なヒト末梢血からリンパ球を分離し、１×ＰＢＳで再懸濁し、その後、ヒトＰＢＭＣ細胞をエフェクター細胞とし、ＣＦＳＥ（Ｔｈｅｒｍｏ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃから購入）で標識されたＳＷ６２０大腸癌細胞系を標的細胞とし、２５：１の有効ターゲット比に従って、９６ウェルの円形底板に入れ、培養系においてそれぞれ１０μｇ／ｍｌのヒトＩｇＧ４を添加して対照抗体、マウス由来抗体（抗体４）及びヒト化抗体とし、２５０ｇで、４分間遠心分離し、そして、３７℃で４時間インキュベートした。７ＡＡＤで殺傷された腫瘍細胞を標識し、フローサイトメトリー（ＢＤ ＬＳＲ ＩＩ）を用いて検出し、解析統計の結果を図１９に示す。ヒト化抗体はいずれも腫瘍細胞に対するヒトＰＢＭＣ細胞の殺傷を大幅に促進することができることが分かる。
表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）による親和性定数の測定：
表面プラズモン共鳴（Ｂｉａｃｏｒｅ）測定方法で本発明の抗体のヒトＰＶＲＩＧに対する結合ダイナミクス及び解離平衡定数（ＫＤ）を測定する。簡単に言えば、ヒトＰＶＲＩＧ－ヒトＩｇＧ１ Ｆｃ融合タンパク質をＣＭ５チップ上に包み、封入した後、ＣＭ５チップを介して異なる濃度の抗体溶液を固定流速で２分間結合させ、その後、解離バッファーに移し、６分間後、解離率の測定を行う。１：１結合モデルを用いてそのダイナミクスを解析する。
上記のような実験では、測定して得られたマウス由来抗体の親和性は表１に示され、及び各ヒト化抗体の親和性は表２に示される。
上記内容から分かるように、得られた抗体１～４及び対応する抗体４のヒト化抗体はいずれも優れたＰＶＲＩＧの親和性を表現し、且つ優れた抗腫瘍効果を表現することができる。
本明細書の記載において、用語「１つの実施例」、「幾つかの実施例」、「例示」、「具体的な例示」、又は「幾つかの例示」などの記載は、該実施例又は例示に記載の具体的な特徴、構造、材料又は特性が本発明の少なくとも１つの実施例又は例示に含まれることを意味する。本明細書において、上記の用語の例示的な表現は、同じ実施形態または例示を対象とする必要はない。また、記載された特定の特徴、構造、材料、または特性を、任意の複数の実施例または例示において適切な方法で組み合わせることができる。また、当業者は、矛盾することなく、本明細書に記載される異なる実施例または例示、ならびに異なる実施例または例示の特徴を結合して組み合わせることができる。
以上、本発明の実施例を示し、説明したが、上記実施例は例示であり、本発明の限定とは理解できず、当業者は本発明の範囲内で上記実施例を変更、修正、置換、変形することができる。
本願は、出願番号が２０２１１０２５０３４２．９、出願日が２０２１年０３月０８日の中国特許出願の優先権を主張し、そのすべての内容は援用により本願に組み込まれている。

Claims (13)

  1. 抗体又は抗体断片であって、前記抗体又は抗体断片は、重鎖相補決定領域ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３、及び軽鎖相補決定領域ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３を含み、
    ＨＣＤＲ１は、ＧＹＴＦＳＳＦＳ、ＧＹＴＦＳＴＦＡ又はＧＹＳＦＴＡＹＴで示される配列から選ばれ、
    ＨＣＤＲ２は、ＩＬＰＧＳＮＳＴ、ＩＬＰＧＩＮＮＴ、ＩＬＰＧＧＮＮＴ又はＩＮＰＹＮＧＧＴで示される配列から選ばれ、
    ＨＣＤＲ３は、ＳＳＹＷＦＡＹ、ＳＴＹＷＦＡＹ又はＡＲＥＧＮＹＹＧＳＲＧＤＦＤＹで示される配列から選ばれ、
    ＬＣＤＲ１は、ＱＳＬＬＮＳＧＮＱＫＮＹ又はＱＴＩＶＴＮで示される配列から選ばれ、
    ＬＣＤＲ２は、ＧＡＳ又はＹＡＳで示される配列から選ばれ、
    ＬＣＤＲ３は、ＱＮＡＨＳＹＰＰＴ、ＱＮＡＨＳＹＰＰＡ又はＱＱＳＨＳＷＰＦＴで示される配列から選ばれることを特徴とする抗体又は抗体断片。
  2. 抗体又は抗体断片であって、前記抗体又は抗体断片は、それぞれ、
    （１）重鎖相補決定領域と軽鎖相補決定領域を含む前記抗体又は抗体断片であって、前記重鎖相補決定領域はＧＹＴＦＳＳＦＳ、ＩＬＰＧＳＮＳＴ及びＳＳＹＷＦＡＹを含み、前記軽鎖相補決定領域はＱＳＬＬＮＳＧＮＱＫＮＹ、ＧＡＳ及びＱＮＡＨＳＹＰＰＴを含む前記抗体又は抗体断片、
    （２）重鎖相補決定領域と軽鎖相補決定領域を含む前記抗体又は抗体断片であって、前記重鎖相補決定領域はＧＹＴＦＳＴＦＡ、ＩＬＰＧＩＮＮＴ及びＳＴＹＷＦＡＹを含み、前記軽鎖相補決定領域はＱＳＬＬＮＳＧＮＱＫＮＹ、ＧＡＳ及びＱＮＡＨＳＹＰＰＴを含む前記抗体又は抗体断片、
    （３）重鎖相補決定領域と軽鎖相補決定領域を含む前記抗体又は抗体断片であって、前記重鎖相補決定領域はＧＹＴＦＳＴＦＡ、ＩＬＰＧＧＮＮＴ及びＳＴＹＷＦＡＹを含み、前記軽鎖相補決定領域はＱＳＬＬＮＳＧＮＱＫＮＹ、ＧＡＳ及びＱＮＡＨＳＹＰＰＡを含む前記抗体又は抗体断片、及び
    （４）重鎖相補決定領域と軽鎖相補決定領域を含む前記抗体又は抗体断片であって、前記重鎖相補決定領域はＧＹＳＦＴＡＹＴ、ＩＮＰＹＮＧＧＴ及びＡＲＥＧＮＹＹＧＳＲＧＤＦＤＹを含み、前記軽鎖相補決定領域はＱＴＩＶＴＮ、ＹＡＳ及びＱＱＳＨＳＷＰＦＴを含む前記抗体又は抗体断片、から選ばれる１種であることを特徴とする抗体又は抗体断片。
  3. 抗体又は抗体断片であって、前記抗体又は抗体断片は、
    （１）重鎖可変領域と軽鎖可変領域を含む前記抗体又は抗体断片であって、前記重鎖可変領域はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１で示される配列又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１で示される配列に比べて少なくとも１つのアミノ酸置換を有する配列であり、前記軽鎖可変領域はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２で示される配列又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２で示される配列に比べて少なくとも１つのアミノ酸置換を有する配列である前記抗体又は抗体断片、
    （２）重鎖可変領域と軽鎖可変領域を含む前記抗体又は抗体断片であって、前記重鎖可変領域は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２４、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３で示される配列又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２４、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３で示される配列に比べて少なくとも１つのアミノ酸置換を有する配列から選ばれ、前記軽鎖可変領域はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６で示される配列又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６で示される配列に比べて少なくとも１つのアミノ酸置換を有する配列である前記抗体又は抗体断片、
    （３）重鎖可変領域と軽鎖可変領域を含む前記抗体又は抗体断片であって、前記重鎖可変領域はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９で示される配列又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ： ３９で示される配列に比べて少なくとも１つのアミノ酸置換を有する配列であり、前記軽鎖可変領域はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０で示される配列又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０で示される配列に比べて少なくとも１つのアミノ酸置換を有する配列である前記抗体又は抗体断片、
    （４）重鎖可変領域と軽鎖可変領域を含む前記抗体又は抗体断片であって、前記重鎖可変領域はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１で示される配列又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ： ４１で示される配列に比べて少なくとも１つのアミノ酸置換を有する配列であり、前記軽鎖可変領域はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２で示される配列又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２で示される配列に比べて少なくとも１つのアミノ酸置換を有する配列である前記抗体又は抗体断片、及び
    （５）重鎖可変領域と軽鎖可変領域を含む前記抗体又は抗体断片であって、前記重鎖可変領域はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４３で示される配列又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４３で示される配列に比べて少なくとも１つのアミノ酸置換を有する配列であり、前記軽鎖可変領域はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４４で示される配列又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４４で示される配列に比べて少なくとも１つのアミノ酸置換を有する配列である前記抗体又は抗体断片、から選ばれる少なくとも１つであることを特徴とする抗体又は抗体断片。
  4. 重鎖及び軽鎖を含み、前記重鎖アミノ酸配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１６、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１９、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２２、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２５、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４で示される配列、又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１６、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１９、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２２、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２５、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４で示される配列に比べて少なくとも１つのアミノ酸置換を有する配列であり、
    前記軽鎖アミノ酸配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７で示される配列又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７で示される配列に比べて少なくとも１つのアミノ酸置換を有する配列であることを特徴とする請求項３に記載の抗体又は抗体断片。
  5. 分離可能な核酸であって、前記核酸は請求項１～４のいずれか１項に記載の抗体又は抗体断片をコードすることを特徴とする分離可能な核酸。
  6. 発現ベクターであって、前記発現ベクターは請求項５に記載の核酸を含むことを特徴とする発現ベクター。
  7. 宿主細胞であって、前記宿主細胞は請求項１～４のいずれか１項に記載の抗体又は抗体断片を発現することを特徴とする宿主細胞。
  8. 前記宿主細胞には請求項６に記載の発現ベクターが含まれることを特徴とする請求項７に記載の宿主細胞。
  9. 薬物組成物であって、前記薬物組成物は請求項１～４のいずれか１項に記載の抗体又は抗体断片及び薬学的に許容されるベクターを含むことを特徴とする薬物組成物。
  10. 癌を治療する薬物の調製における、請求項１～４のいずれか１項に記載の抗体又は抗体断片又は請求項９に記載の薬物組成物の使用。
  11. 薬物併用であって、
    （１）請求項１～４のいずれか１項に記載の抗体又は抗体断片、又は請求項９に記載の薬物組成物、及び
    （２）癌を治療するための（１）と異なる抗体、を含むことを特徴とする薬物併用。
  12. 体外でサンプル中のＰＶＲＩＧタンパク質の活性を抑制する方法であって、前記サンプルを請求項１～４のいずれか１項に記載の抗体又は抗体断片、又は請求項９に記載の薬物組成物と接触させることを含むことを特徴とする体外でサンプル中のＰＶＲＩＧタンパク質の活性を抑制する方法。
  13. 癌を予防又は治療する方法であって、被験者に有効量の請求項１～４のいずれか１項に記載の抗体又は抗体断片又は請求項９に記載の薬物組成物を投与することを含むことを特徴とする癌を予防又は治療する方法。

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