JP2023529255A

JP2023529255A - 呼吸障害の治療

Info

Publication number: JP2023529255A
Application number: JP2022558295A
Authority: JP
Inventors: フェノー，マルテイン; ティジョーンズ，クリストファー; ケイクワーク，エリン
Original assignee: Terns Inc
Current assignee: Terns Inc
Priority date: 2020-03-25
Filing date: 2021-03-25
Publication date: 2023-07-10
Also published as: EP4125968A1; WO2021195435A1; CN115666577A; BR112022019168A2; AU2021241646A1; KR20220158022A; EP4125968A4; CA3176881A1; PE20230997A1; IL296816A; CL2022002589A1; MX2022011888A; US20230127498A1

Abstract

本明細書では、呼吸障害の治療に使用するための化合物が提供される。【選択図】図１Ａ

Description

（関連出願の相互参照）
本出願は、２０２０年３月２５日に出願された米国仮特許出願第６２／９９４，６１７号の優先権および利益を主張し、その内容全体は参照により本明細書に組み込まれる。

（発明の分野）
本発明は、呼吸器疾患を有する個体を治療するための方法および組成物に関する。

急性呼吸窮迫症候群（ＡＲＤＳ）は、急性肺損傷の最も重篤な形態であり、両側性肺浸潤物および重度の低酸素血症を特徴とする。炎症は、部分的には局所上皮細胞によるサイトカインおよび他の炎症性メディエーターの分泌によって媒介される疾患の主要な要因であり、炎症を起こした肺組織および肺胞腔への好中球、Ｔ細胞、および活性化マクロファージの動員を誘発する。ＧｏｎｚａｌｅｓＪＮ．ＡｕｓｔｉｎＪＶａｓｃ．Ｍｅｄ．２０１５Ｊｕｎｅ４；２（１）。ＡＲＤＳは、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ、ＭＥＲＳ－ＣｏＶ、インフルエンザウイルス、メタニューモウイルス、水痘帯状疱疹ウイルス、肺炎連鎖球菌、インフルエンザ菌、結核菌、およびマラリアを含む、ウイルス感染、細菌感染、および寄生虫感染を含む、様々な損傷によって引き起こされ得る。Ｋｙｕｎｇ－ＹｉｌＬ．Ｉｎｔ．Ｊ．Ｍｏｌ．Ｓｃｉ．２０１７，１８，３８８；ｄｏｉ：１０．３３９０／ｉｊｍｓ１８０２０３８８。ＡＲＤＳはまた、高濃度の煙または化学煙、嘔吐物の吸引、または溺水エピソードによっても引き起こされ得る。ＡＲＤＳ患者の多くは生存せず、生存者でも長期にわたる肺損傷（肺線維症など）を負う可能性がある。ＡｌｂｅｒｔｓＷ．Ｍ．ＡｍｅｒｉｃａｎＣｏｌｌｅｇｅｏｆＣｈｅｓｔＰｈｙｓｉｃｉａｎｓ．１９８３．８４（３）ｐ．２７２－４。

ＶＡＰ－１／ＡＯＣ３としても知られるセミカルバジド感受性アミンオキシダーゼ（ＳＳＡＯ）は、肝臓、脂肪、および肺を含む様々な組織に広く発現し、一級アミン（例えばメチルアミン）を過酸化水素（Ｈ_２Ｏ_２）およびアルデヒドに分解するための外酵素として機能する。さらに、膜結合型ＳＳＡＯは接着分子として機能し、血管系から炎症部位への白血球の結合および遊走を促進する。様々な炎症性疾患でＳＳＡＯ発現の増加がみられ、ＳＳＡＯの阻害剤が臨床的利益を提供する可能性が示唆される。ＡＲＤＳ患者におけるＳＳＡＯ発現の有意な増加が測定されてきた。肺組織および肺胞腔、特に好中球中の炎症促進性細胞の過剰蓄積は、ＡＲＤＳの免疫病理学的機序の推進要因である。（ＴｓｕｉＰ．Ｔ．ＥｍｅｒｇｉｎｇＩｎｆｅｃｔｉｏｕｓＤｉｓｅａｓｅｓ）２００３．Ｖｏｌ．９，Ｎｏ．９，ＦｒａｎｋｓＴ．Ｊ．ＨｕｍａｎＰａｔｈｏｌｏｇｙ．２００３．Ｖｏｌｕｍｅ３４，Ｎｏ．８，ＬｉａｏＭ．（印刷前に電子公開）ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１１０１／２０２０．０２．２３．２００２６６９０，ＴｉａｎＳ．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＴｈｏｒａｃｉｃＯｎｃｏｌｏｇｙ（印刷前に電子公開）ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１０１６／ｊ．ｊｔｈｏ．２０２０．０２．０１０。

急性肺疾患のモデルでは、強力なＳＳＡＯ阻害剤ＢＩ－１４６７３３５（旧称ＰＸ－４７２８Ａ）を用いた治療は、白血球のローリングと付着を減少させることによって、ＬＰＳ誘導性好中球肺遊走およびサイトカイン誘導性細胞遊走を減少させた。Ｓｃｈｉｌｔｅｒ，Ｈ．Ｃ．Ｒｅｓｐｉｒ．Ｒｅｓ．２０１５、１６、４２。関連するＳＳＡＯ阻害剤ＰＸＳ－４６８１Ａもまた、肺炎症のＬＰＳ誘導性マウスモデルおよびカラゲナン誘導性マウスモデルの両方で、白血球輸送およびサイトカイン産生を減少させた。Ｆｏｏｔ，Ｊ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｅｘｐ．Ｔｈｅｒ．２０１３３４７（２）３６５－３７４。これらの研究では、ＰＸＳ－４６８１Ａの効果は、抗炎症性グルココルチコイドであるデキサメタゾンを用いた治療と同等であった。慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）および急性タバコ煙誘発性肺疾患のモデルにおいて、ＢＩ－１４６７３３５による治療は、炎症性免疫細胞の気道浸潤を抑制し、肺線維症を減少させ、肺機能を改善する。Ｊａｒｎｉｃｋｉ、Ａ．Ｇ．Ｂｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．２０１６，１７３，３１６１－３１７５。最後に、喘息反応のウイルス性悪化を模倣するモデルにおいて、ＢＩ－１４６７３３５治療は、イエダニ（ＨＤＭ）で感作され、その後に、ＨＤＭとライノウイルス感染により抗原曝露されたマウスにおいて、炎症性細胞浸潤物と気道過敏性を減少させた。Ｓｃｈｉｌｔｅｒ，Ｈ．Ｃ．Ｒｅｓｐｉｒ．Ｒｅｓ．２０１５、１６、４２。しかしながら、ＢＩ－１４６７３３５はＭＡＯ－Ｂに対するオフターゲット活性を保持し、これが特定の患者に対する安全性の懸念を示す場合がある。

したがって、ＭＡＯ－Ａ／Ｂよりも、選択的ＳＳＡＯ阻害剤などのＳＳＡＯ阻害剤を使用した、呼吸障害（ＡＲＤＳなど）の治療の改善に対するニーズがある。

本明細書では、ＡＲＤＳなどの呼吸障害の治療のための組成物および方法が提供される。

図１Ａは、健康なボランティアのベースラインと比較して、プラセボ、または式５の化合物１ｍｇ、３ｍｇ、６ｍｇ、または１０ｍｇを単回投与した場合の、投与後４時間および１６８時間での血漿ＳＳＡＯ活性を示す。図１Ｂは、健康なボランティアのベースラインと比較して、プラセボ、または式５の化合物１ｍｇ、３ｍｇ、６ｍｇ、または１０ｍｇを単回投与した場合の、ＳＳＡＯ活性の時間的経過を示す。図１Ｃは、健康なボランティアにおける、プラセボ、または１ｍｇ、３ｍｇ、６ｍｇ、または１０ｍｇの単回投与後の、式５の化合物の濃度の時間的経過を示す。図１Ｄは、健康なボランティアにおける、プラセボ、または式５の化合物１ｍｇ、３ｍｇ、６ｍｇ、または１０ｍｇの単回投与後の、血漿メチルアミン濃度の時間的経過を示す。図２Ａは、致死インフルエンザチャレンジモデルにおいて、健康対照および溶媒対照と比較して、予防または治療として式５の化合物、オセルタミビル、または式５の化合物とオセルタミビルの併用療法、を投与されたマウスの体重変化を示す。図２Ｂは、致死インフルエンザチャレンジモデルにおいて、健康対照および媒体対照と比較して、予防または治療として式５の化合物、オセルタミビル、または式５の化合物とオセルタミビルの併用療法、を投与されたマウスの６日目の肺ウイルス価を示す。図２Ｃは、致死インフルエンザチャレンジモデルにおいて、健康対照および媒体対照と比較して、予防または治療として式５の化合物、オセルタミビル、または式５の化合物およびオセルタミビルの併用療法、を投与されたマウスの１４日目の気管支肺胞洗浄液（ＢＡＬＦ）中のサイトカイン濃度を示す。図２Ｄは、致死インフルエンザチャレンジモデルにおいて、健康対照および媒体対照と比較して、予防または治療として式５の化合物、オセルタミビル、または式５の化合物およびオセルタミビルの併用療法、を投与されたマウスの１４日目の気管支肺胞洗浄液（ＢＡＬＦ）中のサイトカイン濃度を示す。図２Ｅは、致死インフルエンザチャレンジモデルにおいて、健康対照および媒体対照と比較して、予防または治療として式５の化合物、オセルタミビル、または式５の化合物およびオセルタミビルの併用療法、を投与されたマウスの１４日目の気管支肺胞洗浄液（ＢＡＬＦ）中のサイトカイン濃度を示す。図２Ｆは、致死インフルエンザチャレンジモデルにおいて、健康対照および媒体対照と比較して、予防または治療として式５の化合物、オセルタミビル、または式５の化合物およびオセルタミビルの併用療法、を投与されたマウスの１４日目の気管支肺胞洗浄液（ＢＡＬＦ）中のサイトカイン濃度を示す。図２Ｇは、致死インフルエンザチャレンジモデルにおいて、健康対照および媒体対照と比較して、予防または治療として式５の化合物、オセルタミビル、または式５の化合物およびオセルタミビルの併用療法、を投与されたマウスの１４日目の気管支肺胞洗浄液（ＢＡＬＦ）中のサイトカイン濃度を示す。図２Ｈは、致死インフルエンザチャレンジモデルにおいて、健康対照および媒体対照と比較して、予防または治療として式５の化合物、オセルタミビル、または式５の化合物およびオセルタミビルの併用療法、を投与されたマウスの１４日目の気管支肺胞洗浄液（ＢＡＬＦ）中のサイトカイン濃度を示す。図２Ｉは、致死インフルエンザチャレンジモデルにおいて、健康対照および媒体対照と比較して、予防または治療として式５の化合物、オセルタミビル、または式５の化合物およびオセルタミビルの併用療法、を投与されたマウスの１４日目の気管支肺胞洗浄液（ＢＡＬＦ）中のサイトカイン濃度を示す。図２Ｊは、致死インフルエンザチャレンジモデルにおいて、健康対照および媒体対照と比較して、予防または治療として式５の化合物、オセルタミビル、または式５の化合物およびオセルタミビルの併用療法、を投与されたマウスの１４日目の気管支肺胞洗浄液（ＢＡＬＦ）中のサイトカイン濃度を示す。図２Ｋは、致死インフルエンザチャレンジモデルにおいて、健康対照および媒体対照と比較して、予防または治療として式５の化合物、オセルタミビル、または式５の化合物およびオセルタミビルの併用療法、を投与されたマウスの１４日目の気管支肺胞洗浄液（ＢＡＬＦ）中のサイトカイン濃度を示す。図２Ｌは、致死インフルエンザチャレンジモデルにおいて、健康対照および媒体対照と比較して、予防または治療として式５の化合物、オセルタミビル、または式５の化合物およびオセルタミビルの併用療法、を投与されたマウスの１４日目の気管支肺胞洗浄液（ＢＡＬＦ）中のサイトカイン濃度を示す。図２Ｍは、致死インフルエンザチャレンジモデルにおいて、健康対照および媒体対照と比較して、予防または治療として式５の化合物、オセルタミビル、または式５の化合物およびオセルタミビルの併用療法、を投与されたマウスの１４日目の気管支肺胞洗浄液（ＢＡＬＦ）中のサイトカイン濃度を示す。図２Ｎは、致死インフルエンザチャレンジモデルにおいて、健康対照および媒体対照と比較して、予防または治療として式５の化合物、オセルタミビル、または式５の化合物とオセルタミビルの併用療法、を投与されたマウスの１４日目のＢＡＬＦ中の細胞浸潤物を示す。図２Ｏは、致死インフルエンザチャレンジモデルにおいて、健康対照および媒体対照と比較して、予防または治療として式５の化合物、オセルタミビル、または式５の化合物とオセルタミビルの併用療法、を投与されたマウスの１４日目の肺組織病理学的スコアリングを示す。図２Ｐは、致死インフルエンザチャレンジモデルにおいて、健康対照および媒体対照と比較して、予防または治療としてオセルタミビル、または式５の化合物とオセルタミビルの併用療法、を投与されたマウスの１４日目の肺繊維症スコアリングを示す。

（発明の詳細な説明）
本明細書では、抗炎症剤を投与することを含む、急性呼吸窮迫症候群（ＡＲＤＳ）などの呼吸器疾患を治療する方法が提供される。一部の実施形態では、方法は、ＳＳＡＯ阻害剤を投与することを含む。一部の実施形態では、ＳＳＡＯ阻害剤は、選択的ＳＳＡＯ阻害剤である。一部の実施形態では、方法は、本明細書に記載の化合物を投与することを含む。

定義
本明細書で使用される場合は、別段の示唆がない限り、以下の定義が適用されるものとする。さらに、本明細書で使用される任意の用語または記号が以下に記載する通り定義されていない場合、当該用語または記号は、当技術分野でのその通常の意味を有するものとする。

「含む」とは、組成物および方法は列挙された要素を含むが、他のものを排除しないことを意味することが意図される。組成物および方法を定義するために使用される場合、「から本質的に成る」とは、本質的な重要性を持つその他の要素を組み合わせから除外することを意味するものとする。例えば、本明細書に定義される要素から本質的に成る組成物は、特許請求対象の発明の基本特性および新規特性（複数可）に実質的に影響を与えないその他の要素を排除しない。「から成る」とは、例えば、他の成分の微量および列挙された実質的な方法ステップを排除することを意味するものとする。これらの転換語の各々によって定義される実施形態は、本発明の範囲内である。

「併用療法」「併用治療」とは、治療における二つ以上の薬物または薬剤の使用を指し、例えば、式１の化合物またはその薬学的に許容可能な塩を、呼吸障害（ＡＲＤＳなど）を治療するために有用な第二の薬剤と併用し、それらの各症状および兆候が併用療法である。「併用」投与とは、二つの薬剤（例えば、式１の化合物および第二の薬剤）を、その両方の薬理作用が同時に個体に現れる任意の方法で投与することを指す。したがって、併用投与は、単一の医薬組成物、同じ剤形、または同じ投与経路を両剤の投与について使用すること、または二つの薬剤を正確に同時に投与することを必要としない。両剤は、単一の薬学的に許容可能な組成物中で製剤化することもできる。こうした単一の組成物の非限定的な例は、経口組成物または経口剤形である。例えば、限定されるものではないが、式５の化合物などの式１の化合物は、本開示に従って、第二の薬剤との併用療法で投与され得ることが企図される。

本明細書で使用される場合、「第二の薬剤」は、式１の化合物またはその薬学的に許容可能な塩以外であり、かつ本明細書に記載される方法で有用である薬剤を指す。「第二の薬剤」という用語に関連して、「第二の」とは、式５の化合物またはその薬学的に許容可能な塩もしくはエナンチオマーと薬剤を区別するための用語として意図され、投与の順序を示すことを意図していない。

本明細書で使用される場合、「賦形剤」という用語は、本発明の化合物を活性成分として含有する錠剤など、薬物または医薬品の製造に使用され得る不活性または不活性物質を意味する。結合剤、崩壊剤、コーティング、圧縮助剤／カプセル助剤、クリームまたはローション、潤滑剤、非経口投与用溶液、チュアブル錠剤用材料、甘味剤または香味料、懸濁／ゲル化剤、または湿式造粒剤として使用される任意の物質を含むがこれらに限定されない、賦形剤という用語によって様々な物質を包含することができる。結合剤としては、例えば、カルボマー、ポビドン、キサンタンガムなどが挙げられる。コーティングとしては、例えば、酢酸フタル酸セルロース、エチルセルロース、ジェランガム、マルトデキストリン、腸溶性コーティングなどが挙げられる。圧縮助剤／カプセル化助剤としては、例えば、炭酸カルシウム、デキストロース、フルクトースＤＣ（ＤＣ＝直接圧縮可能）、ハチミツＤＣ、ラクトース（無水物または一水和物、任意選択でアスパルテーム、セルロース、または微結晶セルロースとの組み合わせ）、デンプンＤＣ、スクロースなどが挙げられる。崩壊剤としては、例えば、クロスカルメロースナトリウム、ジェランガム、グリコール酸デンプンナトリウムなどが挙げられる。クリームまたはローションには、例えば、マルトデキストリン、カラゲナンなどが挙げられる。潤滑剤には、例えば、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸、フマル酸ステアリルナトリウムなどが挙げられる。チュアブル錠剤の材料には、例えば、デキストロース、フルクトースＤＣ、ラクトース（一水和物、任意選択でアスパルテームまたはセルロースとの組み合わせ）などが含まれる。懸濁剤／ゲル化剤としては、例えば、カラゲナン、グリコール酸デンプンナトリウム、キサンタンガムなどが挙げられる。甘味剤としては、例えば、アスパルテーム、デキストロース、フルクトースＤＣ、ソルビトール、スクロースＤＣなどが挙げられる。および湿式造粒剤には、例えば、炭酸カルシウム、マルトデキストリン、微結晶セルロースなどが挙げられる。

「個体」とは、哺乳類を指し、ヒトおよびヒト以外の哺乳類を含む。患者の例としては、マウス、ラット、ハムスター、モルモット、ブタ、ウサギ、ネコ、イヌ、ヤギ、ヒツジ、雌ウシ、およびヒトが挙げられるが、これらに限定されない。一部の実施形態では、個体はヒトを指す。

「薬学的に許容可能な」とは、安全で非毒性であり、好ましくはインビボで、より好ましくはヒト投与を意味する。

「薬学的に許容可能な塩」とは、薬学的に許容可能な塩を指す。本明細書に記載される化合物は、薬学的に許容可能な塩として投与されてもよい。

「塩」は、酸と塩基との間に形成されるイオン化合物を指す。本明細書に提供される化合物が酸性官能基を含有する場合、そのような塩は、アルカリ金属塩、アルカリ土類金属塩、およびアンモニウム塩を含むが、これらに限定されない。本明細書で使用される場合、アンモニウム塩は、プロトン化窒素塩基およびアルキル化窒素塩基を含有する塩を含む。薬学的に許容可能な塩に有用な例示的および非限定的なカチオンとしては、Ｎａ、Ｋ、Ｒｂ、Ｃｓ、ＮＨ４、Ｃａ、Ｂａ、イミダゾリウム、および天然に存在するアミノ酸に基づくアンモニウムカチオンが挙げられる。本明細書で利用される化合物が塩基性官能性を含有する場合、そのような塩は、カルボン酸およびスルホン酸などの有機酸、ならびにハロゲン化水素、硫酸、リン酸などのミネラル酸、およびこれに類するものの塩を含むが、これらに限定されない。薬学的に許容可能な塩に有用な例示的および非限定的なアニオンには、シュウ酸塩、マレイン酸塩、酢酸塩、プロピオン酸塩、コハク酸塩、酒石酸塩、塩化物、硫酸塩、重硫酸塩、一塩基リン酸塩、二塩基リン酸塩、および三塩基リン酸塩、メシル酸塩、トシラート、およびこれに類するものを含む。

化合物または組成物の「治療有効量」または用量は、患者における症状の低減もしくは阻害または生存の延長を結果としてもたらす化合物または組成物のその量を指す。結果には、化合物または組成物の複数回用量を必要とする場合がある。

本明細書で使用される場合、「治療」または「治療する」とは、臨床結果を含む有益または望ましい結果を得るためのアプローチである。本発明の目的上、有益または望ましい結果には、疾患または障害から生じる一つ以上の症状を減少させること、疾患または障害の程度を減少すること、疾患または障害を安定化させること（例えば、疾患または障害の悪化を防止または遅延させること）、疾患または障害の発生または再発を遅延させること、疾患または障害の進行を遅延または鈍化させること、疾患または障害状態を改善すること、疾患または障害の（部分的または完全）寛解を提供すること、疾患または障害を治療するために必要な一つ以上の他の薬剤の用量を減量すること、疾患または障害を治療するために使用される別の薬剤の効果を強化すること、疾患または障害の進行を遅延させること、生活の質を向上させること、および／または患者の生存を延長させることのうちの一つ以上を含むが、これらに限定されない。また、疾患または障害の病理的帰結の減少も「治療」に包含される。本発明の方法は、治療のこれらの態様のうちの一つ以上を企図する。

本明細書で使用される場合、「約」パラメータまたは値とは、そのパラメータまたは値自体を含み、記述する。例えば、「約Ｘ」は、Ｘ自体を含み、記述する。

本明細書全体を通して使用される場合、「任意選択の」または「任意選択で」という用語は、その後に記述される事象または状況は発生し得るが発生する必要はないことを意味し、また、記述は、事象または状況が発生する場合および事象または状況が発生しない場合を含む。例えば、「窒素原子が任意選択で酸化されてＮ－オキシド（Ｎ→Ｏ）部分を提供する」とは、窒素原子が酸化され得るが酸化される必要はないことを意味し、記述には、窒素原子が酸化されない状況および窒素原子が酸化される状況を含む。

化合物
本発明は、式１の化合物であって、

１
式中、ｎは１または２であり、Ｒ１は、Ｈまたは－ＣＨ_３である化合物、またはその薬学的に許容可能な塩を提供する。

式：

として図示されるフッ素への結合は、フッ素原子およびメトキシピリミジン基が、互いに対して、Ｚ（ｚｕｓａｍｍｅｎ、同じ側）またはＥ（ｅｎｔｇｅｇｅｎ、反対側）のいずれかであり得ることを示す（Ｂｒｅｃｈｅｒ，Ｊ．，ｅｔａｌ．， “ＧｒａｐｈｉｃａｌＲｅｐｒｅｓｅｎｔａｔｉｏｎｏｆＳｔｅｒｅｏｃｈｅｍｉｃａｌＣｏｎｆｉｇｕｒａｔｉｏｎ”，ＰｕｒｅａｎｄＡｐｐｌ．Ｃｈｅｍ，２００６，７８（１０）１８９７，ａｔ１９５９）。式１によって図示される構造は、Ｚ立体化学的配置、Ｅ立体化学的配置、またはＺ立体化学的配置もしくはＥ立体化学的配置中の化合物の混合物を有する化合物を含む。本発明の好ましい化合物は、Ｅ立体化学的配置を有する。

一つの形態では、本発明は、遊離塩基として式１の化合物を提供する。他の形態では、本発明は、一塩酸付加塩または二塩酸付加塩またはスルホン酸塩などの酸付加塩として、好ましくは４－メチルベンゼンスルホン酸塩（トシル酸塩）として、式１の化合物を提供する。

一つの形態では、本発明は、式２の化合物であって、

２
式中、ｎは１または２であり、Ｒ１は、Ｈまたは－ＣＨ_３である化合物、またはその薬学的に許容可能な塩を提供する。

別の形態では、本発明は、式３の化合物であって、

３
式中、ｎは１または２であり、Ｒ１は、Ｈまたは－ＣＨ_３である化合物、またはその薬学的に許容可能な塩を提供する。

一実施形態では、本発明は、式１、２、および３のうちの一つによる化合物を提供し、式中、ｎは１、またはその薬学的に許容可能な塩である。別の実施形態では、本発明は、式１、２、および３のうちの一つによる化合物を提供し、式中、ｎは２、またはその薬学的に許容可能な塩である。

別の実施形態では、本発明は、式１、２、および３のうちの一つによる化合物を提供し、式中、Ｒ１はＨ、またはその薬学的に許容可能な塩である。なおも別の実施形態では、本発明は、式１、２、および３のうちの一つによる化合物を提供し、式中、Ｒ１は－ＣＨ_３、またはその薬学的に許容可能な塩である。

別の形態では、本発明は、式４の化合物であって、

４
式中、Ｒ１はＨもしくは－ＣＨ_３である化合物、またはその薬学的に許容可能な塩を提供する。

別の形態では、本発明は、式５による化合物、

５
またはその薬学的に許容可能な塩を提供する。一実施形態では、式５の化合物は、酸付加塩として提供される。好ましくは、酸付加塩は、一塩酸付加塩または二塩酸付加塩、またはメタンスルホン酸もしくは４－メチルベンゼンスルホン酸の付加塩などのスルホン酸塩であり、メシル酸塩または４－メチルベンゼンスルホン酸塩（トシル酸塩）を提供する。一実施形態では、式５の化合物は、トシル酸塩として提供される。

別の形態では、本発明は、式１～５のいずれか一つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、および薬学的に許容可能な担体、希釈剤、または賦形剤を含む医薬組成物を提供する。一実施形態では、医薬組成物は、式５による化合物またはその薬学的に許容可能な塩を含む。塩の薬学的に許容可能なアニオン（複数可）は、一塩化物、二塩化物、メシル酸塩、または４－メチルベンゼンスルホン酸塩（トシル酸塩）であることが好ましい。一実施形態では、式５の化合物は、トシル酸塩として提供される。

方法
呼吸障害の治療
有効量の抗炎症剤を投与することを含む、急性呼吸窮迫症候群（ＡＲＤＳ）などの呼吸器疾患を治療する方法が、本明細書に提供される。一部の実施形態では、方法は、ＳＳＡＯ阻害剤を投与することを含む。一部の実施形態では、化合物は、ＭＡＯ－ＡおよびＭＡＯ－ＢよりもＳＳＡＯに対して選択的なＳＳＡＯ阻害剤である。一部の実施形態では、化合物は、ＭＡＯ－ＡおよびＭＡＯ－Ｂを阻害しない選択的ＳＳＡＯ阻害剤である。一部の実施形態では、方法は、本明細書に記載の化合物を投与することを含む。一部の実施形態では、方法は、有効量の式５の化合物またはそのトシル酸塩を投与することを含む。

一部の実施形態では、本明細書に提供される化合物の有効量を個体に投与することを含む、呼吸器疾患または障害を治療する方法が提供される。一部の実施形態では、方法は、ＡＲＤＳのある個体を治療することを含む。一部の実施形態では、方法は、肺炎のある個体を治療することを含む。一部の実施形態では、方法は、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）のある個体を治療することを含む。一部の実施形態では、方法は、肺がんのある個体を治療することを含む。一部の実施形態では、方法は、喘息のある個体を治療することを含む。一部の実施形態では、方法は、急性肺臓炎のある個体を治療することを含む。一部の実施形態では、方法は、個体における煙吸入を治療することを含む。一部の実施形態では、方法は、肺線維症のある個体を治療することを含む。一部の実施形態では、方法は、肺機能低下のある個体を治療することを含む。

急性呼吸窮迫症候群（ＡＲＤＳ）は、肺の中の小さい弾性な空気嚢（肺胞）に体液が蓄積するときに起こる。体液により肺が十分な空気を吸い込むことが妨げられ、血流に到達する酸素の量が少なくなる。これにより、機能する上で必要な酸素が器官から奪われる。ＡＲＤＳは、身体検査に基づいて診断することができる。胸部Ｘ線から、肺のどの部分で、どの程度の量の体液が肺の中にあり、心臓肥大の有無が明らかになる。コンピュータ断層撮影（ＣＴ）スキャンは、多くの異なる方向から撮影されたＸ線画像を内臓器官の断面図へと組み合わせる。ＣＴスキャンは、心臓および肺内の構造に関する詳細情報を提供することができる。血液を用いた検査は、酸素濃度を測定することができる。他の種類の血液検査で、感染や貧血の徴候を調べることができる。心電図を使用して、心臓の電気活性を測定することによって、ＡＲＤＳを検出することもできる。心エコー図は、心臓の構造および機能の問題を明らかにすることによってＡＲＤＳの診断にも使用される。ＡＲＤＳの症状には、息切れ、呼吸困難および異常に速い呼吸、低血圧、精神錯乱および極度の疲労が含まれる。

したがって、一部の実施形態では、本発明の化合物またはその薬学的に許容可能な塩を、それを必要とする個体に投与することを含む、個体におけるＡＲＤＳを治療する方法が、本明細書に提供される。一部の実施形態では、方法は、有効量の式５の化合物またはその薬学的に許容可能な塩を投与することを含む。

一部の実施形態では、方法は、ＡＲＤＳから生じる一つ以上の合併症を低減することを含む。一部の実施形態では、血栓、肺の虚脱（気胸）、感染、および／または肺線維症が低減される。一部の実施形態では、記憶喪失および理路整然とした思考などの認知的問題が低減される。一部の実施形態では、疲労および脱力感が低減される。

一部の実施形態では、方法は、本発明の化合物を投与することを含むウイルス感染を治療することを含む。一部の実施形態では、方法は、細菌感染を治療することを含む。一部の実施形態では、本方法は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ、ＭＥＲＳ－ＣｏＶ、インフルエンザウイルス、メタニューモウイルス、水痘帯状疱疹ウイルス、肺炎連鎖球菌、インフルエンザ菌、結核菌、またはマラリアを治療することを含む。

一部の実施形態では、治療される呼吸障害は、病原体によって引き起こされる。一部の実施形態では、呼吸障害はウイルスによって引き起こされる。一部の実施形態では、呼吸障害は、寄生虫によって引き起こされる。一部の実施形態では、呼吸障害は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ、ＭＥＲＳ－ＣｏＶ、インフルエンザウイルス、メタニューモウイルス、水痘帯状疱疹ウイルス、肺炎連鎖球菌、インフルエンザ菌、結核菌、またはマラリアにより引き起こされる。一部の実施形態では、呼吸障害は、ＣＯＶＩＤ－１９によって引き起こされる。

一部の実施形態では、治療される呼吸障害は、環境要因によって引き起こされる。一部の実施形態では、呼吸障害は、高濃度の煙または化学煙、嘔吐物の吸引、または溺水エピソードによって引き起こされる。

一部の実施形態では、治療される呼吸障害は、基礎疾患によって引き起こされる。一部の実施形態では、呼吸障害は敗血症によって引き起こされる。一部の実施形態では、呼吸障害は、頭部損傷、胸部損傷、またはその他の大きな損傷によって引き起こされる。一部の実施形態では、呼吸障害は、膵炎によって引き起こされる。一部の実施形態では、呼吸障害は輸血によって引き起こされる。一部の実施形態では、呼吸障害は火傷によって引き起こされる。

一部の実施形態では、本明細書に提供される有効量の化合物を投与することを含む、呼吸器疾患の一つ以上の症状を低減する方法が本明細書に提供される。一部の実施形態では、呼吸困難が低減される。一部の実施形態では、咳が低減される。一部の実施形態では、胸痛が低減される。一部の実施形態では、粘液濃度が低減される。一部の実施形態では、喀血の頻度または重症度が低減される。一部の実施形態では、喘鳴の頻度レベルが低減される。一部の実施形態では、肺線維症が低減される。一部の実施形態では、肺機能が改善される。一部の実施形態では、本明細書に提供される方法は、呼吸器疾患を有する個体の生存期間を増加させる。一部の実施形態では、方法は、有効量の式５の化合物またはその薬学的に許容可能な塩を投与することを含む。

また、本明細書では、有効量の本明細書に提供される化合物を個体に投与することを含む、個体の肺内炎症を低減する方法が提供される。一部の実施形態では、肺炎症の一つ以上のマーカーが低減される。一部の実施形態では、炎症性免疫細胞の気道浸潤は、治療により低減される。一部の実施形態では、骨髄細胞の濃度が減少する。一部の実施形態では、個体の肺中の一つ以上の免疫細胞またはリンパ球の濃度が減少する。一部の実施形態では、肺中の好中球およびマクロファージを含むがこれに限定されない、白血球濃度が減少する。

一部の実施形態では、肺内の好中球濃度は、本明細書に提供される化合物による治療後、少なくとも５％、少なくとも１０％、少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％またはそれ以上低減される。一部の実施形態では、肺中の好中球濃度は５％～５０％、５％～４０％、または５％～２０％低減される。

一部の実施形態では、本明細書に提供される方法は、非経口的、静脈内、動脈内、腹腔内、肺内、経口、吸入、筋肉内、気管内、皮下、眼内、くも膜下腔内、または経皮などの様々な経路を介して、本発明の化合物を個体（ヒトなど）に投与することを含む。例えば、化合物は、気道の症状を治療するために吸入によって投与されてもよい。一部の実施形態では、化合物は鼻腔内投与される。

一部の実施形態では、本明細書に提供される化合物を投与することによってＳＳＡＯを選択的に阻害することを含む、疾患を治療する方法が本明細書に提供される。したがって、一部の実施形態では、ＭＡＯ－Ａ（モノアミン酸化酵素Ａ）は阻害されない。一部の実施形態では、ＭＡＯ－Ｂ（モノアミン酸化酵素Ｂ）は阻害されない。一部の実施形態では、ＭＡＯ－ＡおよびＭＡＯ－Ｂは阻害されない。

一部の実施形態では、化合物のＩＣ_５０は、ＳＳＡＯではＭＡＯ－Ａおよび／またはＭＡＯ－Ｂよりも少なくとも１００倍低い。一部の実施形態では、化合物のＩＣ_５０は、ＳＳＡＯではＭＡＯ－Ａおよび／またはＭＡＯ－Ｂよりも少なくとも１，０００倍低い。一部の実施形態では、化合物のＩＣ_５０は、ＳＳＡＯではＭＡＯ－Ａおよび／またはＭＡＯ－Ｂよりも少なくとも１０，０００倍低い。一部の実施形態では、化合物のＩＣ_５０は、ＳＳＡＯではＭＡＯ－Ａおよび／またはＭＡＯ－Ｂよりも１００倍～１０，０００倍低い。一部の実施形態では、化合物のＩＣ_５０は、ＳＳＡＯではＭＡＯ－ＡまたはＭＡＯ－Ｂよりも１００倍～１，０００倍低い。一部の実施形態では、化合物のＩＣ_５０は、ＳＳＡＯではＭＡＯ－ＡおよびＭＡＯ－Ｂよりも少なくとも１００倍、または少なくとも１，０００倍、または少なくとも１０，０００倍、または１００～１０，０００倍、または１００～１，０００倍低い。

本明細書に記載する化合物（式５の化合物など）の１日１回の投与を第一の期間にわたり個体に投与して、その後に化合物の投与が中止される第二の期間を含む、ある期間にわたって個体におけるＳＳＡＯ活性を阻害する方法も提供され、ここでＳＳＡＯ阻害活性は、第一の期間および第二の期間の両方の間にわたり維持される。一部の実施形態では、第一および第二の期間は、それぞれ１週間である。例えば、本明細書に記載する化合物（式５の化合物など）の１日１回の投与を最初の７日間にわたり個体に投与して、その後の７日間にわたり化合物の投与の中止を含む、１４日間にわたり個体におけるＳＳＡＯ活性を阻害する方法が本明細書に提供されており、ここでＳＳＡＯ阻害活性は１４日間全体にわたり維持される。

また、本明細書に記載される化合物（式５の化合物など）を、それを必要とする個体に投与するための投与レジメンが本明細書に提供される。一部の実施形態では、化合物は、個体に１日１回投与される。一部の実施形態では、化合物は、隔日で個体に投与される。一部の実施形態では、化合物は、２日ごと、３日ごと、４日ごと、５日ごと、または６日ごとに個体に投与される。一部の実施形態では、化合物は、少なくとも７日間、個体に１日１回投与される。一部の実施形態では、化合物は、少なくとも１４日間、個体に１日１回投与される。一部の実施形態では、化合物は、１～４週間、個体に１日１回投与される。

一部の実施形態では、約１ｍｇ～約１０ｍｇの本明細書に記載の化合物（式５の化合物など）が個体に投与される。本明細書に記載の化合物の投与量は、式５の化合物の遊離塩基などの化合物の遊離塩基に基づいて決定される。一部の実施形態では、約１ｍｇ～約５ｍｇの化合物が、個体に投与される。一部の実施形態では、約１ｍｇ～約３ｍｇの化合物が、個体に投与される。一部の実施形態では、約５ｍｇ～約１０ｍｇの化合物が、個体に投与される。一部の実施形態では、約１ｍｇの化合物が、個体に投与される。一部の実施形態では、約２ｍｇの化合物が、個体に投与される。一部の実施形態では、約３ｍｇの化合物が、個体に投与される。一部の実施形態では、約４ｍｇの化合物が、個体に投与される。一部の実施形態では、約５ｍｇの化合物が、個体に投与される。一部の実施形態では、約６ｍｇの化合物が、個体に投与される。一部の実施形態では、約７ｍｇの化合物が、個体に投与される。一部の実施形態では、約８ｍｇの化合物が、個体に投与される一部の実施形態では、約９ｍｇの化合物が、個体に投与される。一部の実施形態では、約１０ｍｇの化合物が、個体に投与される。一部の実施形態では、化合物は、例えば１日１回などで、毎日個体に投与される。一部の実施形態では、化合物は、毎週個体に投与される。一実施形態では、化合物は、式５の化合物、またはトシル酸塩などのその薬学的に許容可能な塩である。

一部の実施形態では、化合物は、約１ｍｇ～約１０ｍｇ、または約１ｍｇ～約５ｍｇ、または約１ｍｇ～約３ｍｇ、または約１ｍｇ、２ｍｇ、３ｍｇ、４ｍｇ、５ｍｇ、６ｍｇ、７ｍｇ、８ｍｇ、９ｍｇ、または１０ｍｇのいずれかの１日量で少なくとも７日間、個体に１日１回投与される。一部の実施形態では、化合物は、約１ｍｇ～約１０ｍｇ、または約１ｍｇ～約５ｍｇ、または約１ｍｇ～約３ｍｇ、または約１ｍｇ、２ｍｇ、３ｍｇ、４ｍｇ、５ｍｇ、６ｍｇ、７ｍｇ、８ｍｇ、９ｍｇ、または１０ｍｇのいずれかの１日量で少なくとも１４日間、個体に１日１回投与される。一部の実施形態では、化合物は、約１ｍｇ～約１０ｍｇ、または約１ｍｇ～約５ｍｇ、または約１ｍｇ～約３ｍｇ、または約１ｍｇ、２ｍｇ、３ｍｇ、４ｍｇ、５ｍｇ、６ｍｇ、７ｍｇ、８ｍｇ、９ｍｇ、または１０ｍｇのいずれかの１日量で１～４週間、個体に１日１回投与される。こうした任意の実施形態では、一実施形態における毎日の投与は、吸入によるものである。こうした任意の実施形態では、一実施形態における毎日の投与は、経口投与によるものである。こうした任意の実施形態では、一実施形態の化合物は、式５の化合物またはそのトシル酸塩である。

また、本明細書に提供される有効量の化合物を第二の薬剤と組み合わせて投与することを含む、呼吸器疾患を治療する方法も本明細書に提供される。一部の実施形態では、第二の薬剤は抗ウイルス剤である。一部の実施形態では、第二の薬剤は抗菌剤である。一部の実施形態では、第二の薬剤は、ＴＡＭＩＦＬＵというブランド名で販売されるオセルタミビル（ＯＴＶ）などのインフルエンザウイルス阻害剤である。一部の実施形態では、第二の薬剤は、レムデシビルなどのヌクレオチド類似体である。一部の実施形態では、第二の薬剤は、ＤｅＣｌｅｒｃｑ，Ｅ．＆Ｌｉ，Ｇ．Ａｐｐｒｏｖｅｄａｎｔｉｖｉｒａｌｄｒｕｇｓｏｖｅｒｔｈｅｐａｓｔ５０ｙｅａｒｓ．Ｃｌｉｎ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．Ｒｅｖ．２９，６９５-７４７（２０１６）に記載される抗ウイルス化合物であり、当該文献は、その全体が、特にその中で開示された抗ウイルス化合物に関して、参照により本明細書に組み込まれる。一部の実施形態では、本明細書に提供される化合物は、第二の薬剤と同時に投与される。一部の実施形態では、本明細書に提供される化合物および第二の薬剤は、順次送達される。

製造品およびキット
本開示はさらに、本明細書に記載の化合物、またはその塩、本明細書に記載の組成物、または本明細書に記載の一つ以上の単位用量を適切な包装で含む、製造品を提供する。特定の実施形態では、製造品は、本明細書に記載される方法のいずれかで使用するためのものである。好適な包装は、当技術分野で公知であり、例えば、バイアル、容器、アンプル、ボトル、瓶、軟包装、これに類するものを含む。製造品はさらに、滅菌および／または密封されてもよい。

本開示は、本明細書に記載の一つ以上の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、または本明細書に記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩を含む組成物を含む、本開示の方法を実施するためのキットをさらに提供する。キットは、本明細書に開示される化合物またはその薬学的に許容可能な塩のいずれかを使用してもよい。一つの変形では、キットは、本明細書に記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩を使用する。キットは、本明細書に記載の用途のうちの任意の一つ以上に使用されてもよく、したがって、例えば、ＡＲＤＳなどの呼吸障害の治療のためなど、本明細書に記載の任意の疾患の治療のための指示説明を含んでもよい。

キットは通常、好適な包装を含む。キットは、本明細書に記載の任意の化合物またはその薬学的に許容可能な塩を含む、一つ以上の容器を含んでもよい。各構成要素（複数の構成要素がある場合）は、別個の容器に包装されてもよく、または一部の構成要素は、交差反応性および貯蔵寿命により許容される場合は一つの容器に組み合わせられてもよい。

キットは、単位剤形、バルク包装（例えば、多用量包装）、またはサブユニット用量であってもよい。例えば、本明細書に開示される化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、および／または本明細書に詳述する疾患にとって有益な追加の薬学的に活性な化合物の十分な用量を含有し、長期間にわたって、例えば、１週間、２週間、３週間、４週間、６週間、８週間、３ヶ月、４ヶ月、５ヶ月、７ヶ月、８ヶ月、９ヶ月、またはそれ以上など、個体の効果的な治療を提供するキットが提供されてもよい。キットは、複数回用量の化合物および使用に関する指示説明を含んでもよく、薬剤部（例えば、病院薬局および配合薬局）での保存および使用に十分な量で包装されてもよい。

キットには、一連の指示説明、概して書面による指示説明を任意選択で含んでもよいが、本開示の方法の構成要素（複数可）の使用に関連して、指示説明を含む電子記憶媒体（例えば、磁気ディスケットまたは光ディスク）も許容される。キットに含まれる指示説明には、概して、構成要素および個体へのそれらの投与に関する情報が含まれる。

［実施例１］
背景
セミカルバジド感受性アミンオキシダーゼ（ＳＳＡＯ）は、一級アミン（例えばメチルアミン、ＭＭＡ）のアルデヒド、アンモニウム、およびＨ_２Ｏ_２への脱アミノ化によって酸化ストレスを増加させることによって、ならびに肝臓への炎症細胞の動員によって、肝炎症および損傷を悪化させることによって、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）に寄与する。ＳＳＡＯレベルはＮＡＳＨで上昇し、これは線維症の病期と相関する。式５の化合物は、ＮＡＳＨのラットモデルにおいて肝臓の炎症および線維症を減少させる選択的共有結合性ＳＳＡＯ阻害剤である。式５の化合物の単回漸増用量臨床試験を実施した。

本明細書に記載される化合物は、国際特許出願第２０１８／０２８５１７号に記載される方法によって取得されてもよく、同出願は、その全体が、特に本明細書に詳述される化合物を作製する方法に関して、参照により本明細書に組み込まれる。

方法
健康な参加者８名から成る４つの群を、式５の化合物のカプセルまたは対応するプラセボを３：１の比率で受け取るように無作為化した。式５の化合物およびＰＤバイオマーカーの血漿濃度を、投与前および投与後の様々な時点で決定した。ＳＳＡＯ阻害を、外因性基質（ベンジルアミン）添加後の血漿Ｈ_２Ｏ_２生成の相対的減少を測定することによって決定した。ＳＳＡＯ阻害に伴い増加すると予測される内因性メチルアミン（ＭＭＡ）レベルを、血漿中で測定した。安全性を、投与後７（±３）日間にわたって評価した。

式５の化合物の濃度およびＳＳＡＯ活性決定のための血漿試料を、治験薬（プラセボまたは化合物）の単回投与から０．２５、０．５、１、２、３、４、６、８、１０、１２、２４、４８（ＳＳＡＯ活性のみ）、および１６８（ＳＳＡＯ活性のみ）時間後に採取した。血漿ＰＫパラメータを、ノンコンパートメント解析によって決定した。ＳＳＡＯ活性を、プラセボおよび活性式５の化合物のレシピエントからの血漿試料中の過酸化水素（Ｈ_２Ｏ_２）生成レベルを測定することによって評価した。総アミンオキシダーゼ活性の変化率を、対応する投与前（ベースライン）試料と比較して決定した。

血漿中のＳＳＡＯ特異的アミンオキシダーゼのレベルを、本質的に前述したように（Ｓｃｈｉｌｔｅｒｅｔａｌ）、運動ベースのアッセイを使用して決定した。内因性モノアミン酸化酵素ＡおよびＢは、プラセボおよび活性レシピエントにおけるＨ_２Ｏ_２生成レベルを測定する前に血漿試料にパージリンを添加することによって阻害された。最大阻害は、高用量の式５の化合物によって追加的に処置された投与前（ベースライン）試料によって定義され、ベースライン試料と比較してＳＳＡＯ特異的活性の変化率を計算した。

結果
健康なヒト参加者３２名（男性１００％、黒人６３％、アジア人１９％、白人１３％）を登録し、式５の化合物（１ｍｇ、３ｍｇ、６ｍｇ、１０ｍｇ、それぞれｎ＝６）またはプラセボ（ｎ＝２）の単回経口投与を行った。式５の化合物の血漿ＰＫ曝露は、３～１０ｍｇの用量レベルで、用量に比例した増加よりも大きく増加した。式５の化合物の平均半減期は１～３時間の範囲であった。投与後４時間で、血漿ＳＳＡＯ活性のほぼ完全な阻害が全用量コホートで観察され、式５の化合物の単回投与後、最大１週間にわたり継続的な抑制が検出された。最大血漿ＭＭＡ濃度は、式５の化合物と共に増加した。臨床的に意義のある有害事象または検査所見の異常は報告されなかった。

表１に示すように、式５の化合物１ｍｇ、３ｍｇ、６ｍｇ、１０ｍｇはすべて耐容性が良好であった。
［表１］
治療関連有害事象

式５の化合物のトシル酸塩の単回投与は、血漿から急速に除去され、３～１０ｍｇでは、用量に比例した血漿ＰＫよりも大きな量を示した。

式５の化合物の単回投与は、図１Ａおよび図１Ｂに示すように、すべての被験者において血漿アミンオキシダーゼ活性を急速かつ強力に減少させた。ＳＳＡＯ特異的活性のほぼ完全な阻害は、投与後４時間で観察された（図１Ａおよび図１Ｂ）。血漿ＳＳＡＯアミンオキシダーゼ活性の阻害および血漿ＭＭＡ中での用量依存的な増加は、式５の化合物の単回投与後も１週間まで持続したことから、強力な共有標的結合が示唆され、短い血漿半減期にもかかわらず、１日１回投与が裏付けられた（図１Ａおよび図１Ｂ）。

式５の化合物の濃度（Ｃｍａｘ）は、すべての用量レベルで、ＭＡＯ－ＡおよびＭＡＯ－ＢのＩＣ_５０濃度よりも８００倍超低かった。
［表２］
生化学的活性（ＩＣ_５０ μｍ）

メチルアミンの用量依存的な増加が観察され、用量範囲にわたって強力な血漿ＳＳＡＯ標的結合を示した（図１Ｄ）。

結論
式５の化合物は、１ｍｇ～１０ｍｇの範囲の単回経口用量を投与された健康な被験者において、安全かつ耐容性が良好であった。式５の化合物は、単回投与後、７日間までＳＳＡＯ活性を阻害した。これは、式５の化合物が、ＳＳＡＯの選択的に阻害により呼吸器疾患などの疾患または障害を治療するのに有効であり得ることを示唆している。また、単回投与だけでその後も７日間にわたりＳＳＡＯ活性を示し得ることから、２週間の期間でも１週間毎日投与することで治療効果を発揮し得ることが示唆される。

［実施例２］
重度肺機能障害のあるＣＯＶＩＤ－１９患者に対する式５の化合物について、第２ａ相概念実証試験を実施した。前臨床および臨床薬理学およびバイオマーカーについて同時試験を実施した。急性肺損傷および慢性肺損傷、ＡＲＤＳ、およびウイルス誘導性肺損傷モデルにおける式５の化合物の効果を試験するために、実験を実施した。

［実施例３］
式５の化合物が、Ｓｃｈｌｉｔｅｒｅｔａｌ．ＲｅｓｐｉｒａｔｏｒｙＲｅｓｅａｒｃｈ１６：４２（２０１５）に示すように肺内の炎症細胞の浸潤を抑制できるかどうかを試験するために、実験を実施した。簡潔に述べると、ＢＡＬＢｃマウスを麻酔し、リポ多糖、肺炎桿菌（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）、チリダニ（Ｄｅｒｍａｔｏｐｈａｇｏｉｄｅｓｐｔｅｒｎｙｓｓｉｎｕｓ）、ｒＣＸＣＬ１などの免疫原性組成物を与えた。敗血症を誘発するために、盲腸結紮および穿刺も実施した。

マウスに、式５の化合物を投与した。時点で、式５の化合物のＰＫ／ＰＤおよび肺内の炎症に対する化合物の効果を評価するために測定を行った。

ＭＡＯ－Ａ、ＭＡＯ－Ｂ、ＤＡＯ、ＬＯＸＬ２、およびＬＯＸのレベルを、蛍光アッセイを使用して測定した。肺内の総細胞数と好中球数を測定した。細胞接着およびローリングを測定した。生存についても測定した。

［実施例４］
コロナウイルスに感染した老齢マウスを、Ｃｈｅｎｅｔａｌ．，Ｊ．Ｖｉｒｏｌｏｇｙ８４（３）１２９８－１３０１（２０１０）のように、ウイルス誘導性ＡＲＤＳのモデルとして使用した。簡潔に述べると、マウス適応ＳＡＲＳ－ＣｏＶを、５０％組織培養感染量（ＴＣＩＤ５０）１０６．５の力価で、ベロ細胞内で増殖した。ベロ細胞を、ＯｐｔｉＰｒｏＳＦＭ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、カリフォルニア州）中で維持した。月齢１２～１４ヵ月の雌ＢＡＬＢ／ｃマウスに、ＴＣＩＤ５０が１０^５のマウス適応ＳＡＲＳ－ＣｏＶを鼻腔内（ｉ．ｎ．）投与した。

マウスに、式５の化合物を投与した。肺を、一連の時点で採取した。病理組織、罹患率、および死亡率を評価した。

［実施例５］
マウス適応ＳＡＲＳコロナウイルスチャレンジモデルを使用して、式５の化合物の有効性を評価した。

Ｓｈｅａｈａｎｅｔａｌ，Ｓｃｉ．Ｔｒａｎｓｌ．Ｍｅｄ．９（２０１７年６月２８日）の方法を使用した。簡潔に述べると、マウスを、１０ｅ４ＰＦＵ／５０ｍＬ（予防試験）または１０ｅ３ＰＦＵ／５０ｍＬ（治療試験）のマウス適応ＳＡＲＳ－ＣｏＶＭＡ１５に感染させた。Ｒｏｂｅｒｔｓｅｔａｌ．ＰｌｏｓＰａｔｈｏｇｅｎｓ（２００７）Ｊａｎ；３（１）：ｅ５。動物を毎日計量し、ウイルス関連の体重減少を監視した。

マウスに、式５の化合物を投与した。

時点で、マウスを犠牲にし、ウイルスプラークアッセイまたはウイルスＲＮＡ定量的方法を使用して、ウイルスのレベルを検出した。

［実施例６］
インフルエンザＡウイルス感染のマウス致死チャレンジモデルを使用して、式５の化合物の有効性を評価した。

機器：本試験で使用された主な機器には、電子天秤、バイオセーフティキャビネットＩＩおよび遠心分離器（Ｔｈｅｒｍｏ＆Ｆｉｓｈｅｒ社）、ＣＯ_２インキュベーター（Ｔｈｅｒｍｏ社）、細胞計数装置（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ社）、組織破砕機ＩＩ（Ｑｉａｇｅｎ社）、Ｎａｎｏｄｒｏｐ１０００（ＴｈｅｒｍｏＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃ社）、マイクロプレートリーダーＳｐｅｃｔｒａＭａｘ（ＭｏｌｅｃｕｌａｒＤｅｖｉｃｅｓ社）、Ｌｕｍｉｎｅｘ社（ＢＩＯ－ＲＡＤ社）、血液アナライザー（Ｓｉｅｍｅｎｓ社）が含まれた。

試薬：本試験で使用された主な試薬は、ＭＤＣＫ細胞、ＤＭＥ培地、ＵｌｔｒａＭＤＣＫ無血清培地、パラホルムアルデヒド、クリスタルバイオレット、マウスサイトカイン検出キット（Ｔｈ１／Ｔｈ２Ｃｙｔｏｋｉｎｅ１１－ＰｌｅｘＭｏｕｓｅＰｒｏｃａｒｔａＰｌｅｘ（商標）パネル）、およびヒドロキシプロリン定量キットであった。オセルタミビルリン酸塩を陽性対照として使用した。ＰＢＳを、式５の化合物およびオセルタミビルリン酸塩の媒体および溶媒として使用した。

製剤：オセルタミビルを、０．５ｍｇ／ｍＬおよび１．０ｍｇ／ｍＬの濃度でＰＢＳ中に溶解した。式５の化合物を、２．０ｍｇ／ｍＬおよび４．０ｍｇ／ｍＬの濃度で、上記の溶媒に溶解した。超超音波処理および攪拌によって透明な溶液を得た。使用前に毎日調製し、４℃で保存した。

ウイルス：インフルエンザＡウイルス、Ｈ１Ｎ１のＷＳＮ／３３株、３．０×１０^６ｐ．ｆ．ｕ．／ｍＬ

生存中の試験方法
６～８週齢の病原体のないＢＡＬＢ／ｃ雌マウス１４４匹を、健康な対照（１群）、媒体（１群）、オセルタミビル単剤療法（陽性対照、２群）、式５の化合物の単剤療法（２群）、および式５の化合物の併用療法（２群）を表す１６群に分け、各群につき８匹または１０匹のマウスを用いた。６日目の試料採取には１０匹マウスコホートを使用し、体重および死亡率のモニタリングには８匹マウスコホートを使用した。マウスを、０日目または１日目から５日目または６日目のＰＯのレジメン後に媒体または試験化合物で処置し、一回目投与を、全身麻酔下で鼻腔内経路を介して、接種用量１５，０００ｐ．ｆ．ｕ．／マウス／５０μＬでのインフルエンザＡウイルスＷＳＮ／３３株による致死性抗原曝露で、接種から２時間前（予防群）または接種から３６時間後（治療群）に行った。すべてのマウスを、体重減少（ＢＷＬ）、健康状態、および死亡率について毎日モニタリングした。

試料採取群のマウスを、肺ウイルス滴定および組織学評価のために６日目に犠牲にした。サイトカイン検出および免疫細胞計数のために、気管支肺胞洗浄液（ＢＡＬＦ）試料を採取した。血液を、血漿採取のために顎下静脈穿刺から採取した。

モニタリング群のマウスを、試験終了までモニタリングした。生存マウスを１４日目に犠牲にし、インビボ有効性の尺度としてヒドロキシプロリン定量および肺線維症分析のために、肺試料を採取した。腎臓および血漿も採取した。血漿試料を、７，０００×ｇ、４℃で１０分間遠心分離することによって、Ｋ２ＥＤＴＡ抗凝固血液試料から取得した。血漿試料を、さらなるアッセイのために輸送するまで－８０℃で保存した。
［表３］
試験設計およびスケジュール

死後の試験方法
ウイルス滴定：肺ウイルス価を、以下の手順でプラークアッセイによって決定した。
ａ）細胞の播種：ＭＤＣＫ細胞を、１．６７×１０^５／ｍＬ、３ｍＬ／ウェルの６ウェルプレートに播種した。プレートをＣＯ_２インキュベーター内で一晩培養して単層細胞を得た。
ｂ）試料処理：肺試料を組織破砕機で均質化した。肺ホモジネートの上清を遠心分離によって取得し、次いで培地で１０倍連続希釈した。
ｃ）接種：上清０．１ｍＬおよび連続希釈物を、播種された６ウェルプレートにピペットで移し、４時間吸収させた。
ｄ）培養：液体培地を除去し、低溶融アガロース培地で置換した。アガロースが固化された後、プレートをＣＯ_２インキュベーターに３日間入れた。
ｅ）固定および染色：細胞を４％パラホルムアルデヒドで固定し、０．５％クリスタルバイオレットで染色して計数した。
ｆ）プラーク計数：写真中のプラークを視覚的に計数してウイルス力価を計算し、これをＬｏｇ_１０（プラーク／ｇ肺組織）＝Ｌｏｇ_１０（プラーク／ウェル＊１０００＊希釈因子）として表した。

サイトカイン検出：ＢＡＬＦ中のＧＭ－ＣＳＦ、ＩＦＮγ、ＩＬ－１β、ＩＬ－１２ｐ７０、ＩＬ１３、ＩＬ－１８、ＩＬ－２、ＩＬ－４、ＩＬ－５、ＩＬ－６、およびＴＮＦαのレベルを、製造業者が提供したプロトコルや操作マニュアルに従うことで、上記のキットと併用してＬｕｍｉｎｅｘによって検出した。

ＢＡＬＦ中の細胞計数：ＢＡＬＦ試料中の白血球、好中球、リンパ球、および単球を、操作マニュアルに従うことで、血液分析器によって試験した。

肺組織学検出：肺組織学および線維症を、ＨＥ／マッソン染色およびスコアリングによって分析した。
ａ）組織の脱水：１０％中性緩衝液ホルマリン（ＮＢＦ）で２４～４８時間固定したすべての組織試料を、約３～５ｍｍの厚さでトリミングし、包埋箱に入れ、組織処理装置内で脱水した。
ｂ）パラフィン包埋および組織切片：組織包埋機を使用してすべての脱水組織をパラフィン包埋し、切片するまで終了したパラフィンブロックを室温で保存した。
ｃ）Ｈ＆Ｅ染色手順：染色前に、すべての組織切片を６０℃で少なくとも４５分間加温した。その後、試料を自動染色装置に入れ、予め設定された手順を進めた。
ｄ）病理組織評価：切片を病理学者が検査し、肺損傷についてスコア付けした。

ヒドロキシプロリン定量：製造業者が提供したプロトコルおよび操作マニュアルに従い、市販キットによりヒドロキシプロリンを決定した。

データ解析
データを統計分析し、媒体と被験物質の間の結果の違いを、ｐ＞０．０５：有意差なし、ｐ＜０．０５：有意差あり、ｐ＜０．０１：極めて有意差ありとして示した。ＢＷＬを、二元配置分散分析法により分析した。生存解析を、ログランク検定により実施した。肺ウイルス価、ＢＡＬＦサイトカインレベル、ヒドロキシプロリンレベル、および肺病理解析を、一元配置分散分析法により実施した。

被験物質のインビボ有効性を、ＢＬＷ、生存率、ならびに肺ウイルス価によって決定した。免疫細胞計数およびサイトカイン濃度を使用して、抗炎症に対する効果を評価した。肺病理評価にＨＥ染色を使用した。肺線維症の評価にマッソン染色およびヒドロキシプロリン検出を使用した。

結果
生存中試験の全期間中、マウスの体重を毎日モニタリングした。体重減少（ＢＷＬ）は、０日目の体重で正規化した（図２Ａ）。
［表４］
生存状態

肺ウイルス価検出：すべてのマウスを指示通りに処理し、肺ウイルス滴定のために６日目に犠牲にした。滴定をプラークアッセイによって行った。データは平均±ＳＥＭとして示し、プラークアッセイによって分析した（図２Ｂ）。特に指定のない限り、Ｎ＝５であった（溶媒群についてはＮ＝６）。データは、一元配置分散分析法により分析し、ダネットの多重比較検定によって補正した。ＮＳ：有意ではない（ｐ＞０．０５）、＊＊＊溶媒群と比較してｐ＜０．００１。

ＢＡＬＦサイトカインプロファイリング：ＩＡＶ感染マウスモデルにおける式５の化合物による治療の免疫調節効果を評価するために、ＢＡＬＦサイトカイン濃度（顆粒球マクロファージコロニー刺激因子、ＧＭ－ＣＳＦ、ＩＦＮ－γ、ＩＬ－１β、ＩＬ－１２ｐ７０、ＩＬ１３、ＩＬ－１８、ＩＬ－２、ＩＬ－４、ＩＬ－５、ＩＬ－６、ＴＮＦα）を検出した（図２Ｃ～２Ｍ）。

ＢＡＬＦ中の細胞計数（図２Ｎ。ＷＢＣ：白血球、ＮＥＵＴ：好中球、ＬＹＭ：リンパ球、ＭＯＮＯ：単球）。

病理評価：表５で識別された各カテゴリーについて、ＨＥ染色により、６日目に肺組織病理学的スコアリングをスコア付けした。カテゴリーにわたるスコアの合計を図２Ｏに示す。
［表５］
肺組織学のスコアリング

線維症評価。マッソン染色を実施した。スコアリング：０＝正常肺、１＝肺胞壁または細気管支壁の肥厚内にある膠原繊維が軽微、２／３＝肺構造への明確な傷害を伴わない、軽度または中等度の壁肥厚化、４／５＝肺構造への明確な傷害と線維帯または小さな線維性腫瘤の形成を伴う線維症の増加、６／７＝構造の高度の歪みおよび大きな線維領域、８＝視野の完全な線維化閉塞。＊＊Ｐ＜０．０１、＊＊＊健常対照群と比較してｐ＜０．００１。エラーバーはＳＥＭを表す（図２Ｐ）。

ヒドロキシプロリン検出：１４日目に採取したＢＡＬＦ試料中のヒドロキシプロリン濃度を測定したところ、定量下限（０．２ｕｇ／ｕＬ）未満であった。

併用療法予防群のマウスの１００％が試験終了まで生存し、併用療法治療群では８７．５％であった（表４）。併用療法での治療および予防的治療は、肺ウイルス価の有意な減少を示した（図２Ｂ）。併用療法での治療および予防的治療は、ＢＡＬＦ試料中のＩＬ－１２ｐ７０レベル（図２Ｆ）、ＩＬ－６（図２Ｌ）、およびＴＮＦα（図２Ｍ）レベルを低下させた。併用療法での予防的治療は、より低いＮＥＵＴ数の計数を示した（図２Ｎ）。併用療法での予防的治療は、ＨＥ染色による病理損傷の有意な減少を示し、併用療法での治療群では中等度の改善が見出された（図２Ｏ）。併用療法での予防治療群は、マッソン染色による肺組織の組織学評価によって測定した場合に肺線維症の中等度の減少を示した（図２Ｐ）。

まとめると、これらのデータは、式５の化合物と組み合わせたオセルタミビル療法が、インフルエンザＡウイルス感染のマウス致死チャレンジモデルにおいて、罹患率および死亡率の減少に効果があることを示唆している。単剤療法として、またはオセルタミビルとの併用療法のいずれかでの式５の化合物による治療は、このモデルではウイルス複製または病理を悪化させるようには見えなかった。

本明細書で言及される特許、特許出願、および科学論文を含むすべての刊行物は、その全体が、特許、特許出願、または科学論文を含む個々の刊行物が参照により組み込まれるよう具体的かつ個別に示されているかのように、すべての目的について、参照により本明細書に組み込まれる。

前述の発明は、理解の明瞭さを目的として、例示および実施例によって多少の詳細を説明してきたが、上記の教示に照らして特定の軽微な変更および修正が実施されることが、当業者には明らかである。したがって、説明および実施例は、本発明の範囲を限定するものと解釈されるべきではない。

Claims

有効量の式５の化合物またはその薬学的に許容可能な塩を、それを必要とする個体に投与することを含む、呼吸器疾患を治療する方法。
前記呼吸器疾患が、急性呼吸窮迫症候群（ＡＲＤＳ）である、請求項１に記載の方法。
前記個体の肺内の炎症が低減される、請求項１または２に記載の方法。
前記個体中の好中球のレベルが低減される、請求項１～３のいずれか一項に記載の方法。
前記個体が、病原体によって引き起こされる急性呼吸窮迫症候群を有する、請求項２～４のいずれか一項に記載の方法。
前記病原体がウイルスまたは細菌である、請求項５に記載の方法。
前記病原体が、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ、ＭＥＲＳ－ＣｏＶ、インフルエンザウイルス、メタニューモウイルス、水痘帯状疱疹ウイルス、肺炎連鎖球菌、インフルエンザ菌、結核菌、ＣＯＶＩＤ－１９およびマラリアから成る群から選択される、請求項５に記載の方法。
前記化合物が、前記個体に１日１回投与される、請求項１～７のいずれか一項に記載の方法。
前記化合物が、約１ｍｇ～約１０ｍｇの用量で投与される、請求項１～８のいずれか一項に記載の方法。
ＭＡＯ－ＡおよびＭＡＯ－Ｂが阻害されない、請求項１～９のいずれか一項に記載の方法。
前記化合物が、鼻腔内または吸入を介して送達される、請求項１～１０のいずれか一項に記載の方法。