JP2023505316A - ナノマテリアル - Google Patents

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バルワンクマール クハブラ，ミロニ
ローレンス ハミルトン，グレゴリー
デーン サゴ，コリー
ファウジー ガバーラ シェハタ，ミーナ
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ガイド セラピューティクス，エルエルシー
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Abstract

核酸の送達用の脂質ナノ粒子組成物が記載されている。脂質ナノ粒子は、組成物の一部として、コンホメーションが制約されたイオン化可能な脂質を含有することができる。これらの組成物によって、ターゲティングリガンドを必要とせずにカーゴの送達が可能となり得る。

Description

関連出願に関する情報
本出願は、全内容が参照により本明細書に組み込まれる、２０１９年１２月６日出願の、米国仮特許出願第６２／９４４，７３５号の権利を主張するものである。
分野
本出願は、化学、生物学、および医学の分野に関するものである。本明細書に開示されるのは、薬物送達システムおよびそれらの使用の方法である。より詳細には、本明細書に開示されるのは、細胞への核酸の送達のためのナノ粒子組成物である。
説明
Ｔ細胞、Ｂ細胞、マクロファージ、およびその他の免疫細胞は、恒常性および免疫を調節する一助となり、このことによって、それらがＲＮＡ療法の重要な標的となっている。ＲＮＡを運搬するナノ粒子は、タンパク質ベースおよびアプタマーベースのターゲティングリガンドを使用して、ｉｎ ｖｉｖｏで免疫細胞に向けられてきたが、ターゲティングリガンドなしでの免疫細胞への全身送達は依然として難しい課題である。
本明細書に記載の一部の実施形態は、式（Ｉ）：
Figure 2023505316000002
 の化合物に関する
（式中：
Ｒ１は、Ｃ９～Ｃ２０アルキルまた１～３単位の不飽和を有するＣ９～Ｃ２０アルケニルであり；
Ｘ１およびＸ２は、それぞれ独立して不在であるか、または－Ｏ－、ＮＲ２、および
Figure 2023505316000003
 から選択され、ここで、Ｒ２はＣ１～Ｃ６アルキルであり、
かつＸ１およびＸ２は両方ともに－Ｏ－またはＮＲ２であることはなく；
ａは１～６の間の整数であり；
Ｘ３およびＸ４はそれぞれ独立して不在であるか、または、１もしくは２個のＣ１～Ｃ６アルキル基で必要に応じて置換された４～７員のヘテロシクリル、１もしくは２個のＣ１～Ｃ６アルキル基で必要に応じて置換された５～６員のヘテロアリール、および－ＮＲ３－からなる群から選択され、ここで、各Ｒ３は水素原子またはＣ１～Ｃ６アルキルであり；
Ｘ５は－（ＣＨ２）ｂ－であり、ここで、ｂは０～６の間の整数であり；
Ｘ６は、水素、Ｃ１～Ｃ６アルキル、１もしくは２個のＣ１～Ｃ６アルキル基で必要に応じて置換された５～６員のヘテロアリール、または－ＮＲ４Ｒ５であり、ここで、Ｒ４およびＲ５はそれぞれ独立して水素またはＣ１～Ｃ６アルキルであり；あるいは代替的に、Ｒ４およびＲ５は、これらが結合している窒素と一緒になって、１または２個のＣ１～Ｃ６アルキル基で必要に応じて置換された４～７員のヘテロシクリルを形成し、ここで、ヘテロシクリルは酸素、硫黄および窒素から選択されるさらなるヘテロ原子を必要に応じて含み；
Ｘ７は、水素または－ＮＲ６Ｒ７であり、ここで、Ｒ６およびＲ７はそれぞれ独立して水素またはＣ１～Ｃ６アルキルであり；あるいは代替的に、Ｒ６およびＲ７は、これらが結合している窒素と一緒になって、１または２個のＣ１～Ｃ６アルキル基で必要に応じて置換された４～７員のヘテロシクリルを形成し、ここで、ヘテロシクリルは酸素、硫黄および窒素から選択されるさらなるヘテロ原子を必要に応じて含み；
Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘ４、およびＸ５のうちの少なくとも１つは存在している；ただし、
Ｘ１またはＸ２のいずれかが－Ｏ－である場合は、Ｘ３もＸ４もどちらも
Figure 2023505316000004
 であることはなく、かつＸ１またはＸ２のいずれかが－Ｏ－である場合は、Ｒ４およびＲ５は両方ともにエチルであることはないことを条件とする）。
さらなる実施形態は、式（ＩＩ）：
Figure 2023505316000005
 の化合物を特徴とする
（式中：
Ｒ８は水素またはＣ１～Ｃ６アルキルであり；
Ｒ９は、１～４個のＣ３～Ｃ６シクロアルキル基と必要に応じて縮合しているＣ９～Ｃ２０アルキル、１～３単位の不飽和を有するＣ９～Ｃ２０アルケニル、または－（ＣＨ２）ｇ－Ｘ１７であり、ここで、Ｘ１７は、必要に応じて置換されたＣ４～Ｃ１２シクロアルキルであり；
Ｘ８およびＸ９は、それぞれ独立して不在であるか、または－Ｏ－、ＮＲ１０、および
Figure 2023505316000006
 から選択され、ここで、Ｒ１０はＣ１～Ｃ６アルキルであり、
かつＸ８およびＸ９は両方ともに－Ｏ－またはＮＲ１０であることはなく；
Ｘ１０およびＸ１１は、それぞれ独立して不在であるか、または、１もしくは２個のＣ１～Ｃ６アルキル基で必要に応じて置換された４～７員のヘテロシクリル、１もしくは２個のＣ１～Ｃ６アルキル基で必要に応じて置換された５～６員のヘテロアリール、および－ＮＲ１１－からなる群から選択され、ここで、Ｒ１１は水素原子またはＣ１～Ｃ６アルキルであり；
Ｘ１２は－（ＣＨ２）ｉ－であり；
Ｘ１３は、水素、Ｃ１～Ｃ６アルキル、１もしくは２個のＣ１～Ｃ６アルキル基で必要に応じて置換された５～６員のヘテロアリール、または－ＮＲ１２Ｒ１３であり、ここで、Ｒ１２およびＲ１３はそれぞれ独立して水素またはＣ１～Ｃ６アルキルであり；あるいは代替的に、Ｒ１２およびＲ１３は、これらが結合している窒素と一緒になって、１または２個のＣ１～Ｃ６アルキル基で必要に応じて置換された４～７員のヘテロシクリルを形成し、ここで、ヘテロシクリルは酸素、硫黄および窒素から選択されるさらなるヘテロ原子を必要に応じて含み；
Ｘ１４は、水素または－ＮＲ１４Ｒ１５であり、ここで、Ｒ１４およびＲ１５はそれぞれ独立して水素またはＣ１～Ｃ６アルキルであり；あるいは代替的に、Ｒ１４およびＲ１５は、これらが結合している窒素と一緒になって、１または２個のＣ１～Ｃ６アルキル基で必要に応じて置換された４～７員のヘテロシクリルを形成し、ここで、ヘテロシクリルは酸素、硫黄および窒素から選択されるさらなるヘテロ原子を必要に応じて含み；
ｃ、ｄ、ｅ、ｆ、ｇ、ｈ、およびｉのそれぞれは独立して０～６からの整数であり；
Ｘ８、Ｘ９、Ｘ１０、Ｘ１１、およびＸ１２のうちの少なくとも１つは存在しており；
Ｒ１６は水素または必要に応じて置換されたＣ５～Ｃ６アリールであり；
Ｘ１５は、必要に応じて置換されたＣ４～Ｃ１２シクロアルキルまたは必要に応じて置換されたＣ５～Ｃ１０アリールであり；
Ｘ１６は水素または必要に応じて置換されたＣ４～Ｃ１２シクロアルキルである；ただし、
ｆが１でありかつＲ９が
Figure 2023505316000007
 である場合、Ｘ１５は
Figure 2023505316000008
 ではない）。
一部の実施形態は：コンホメーションが制約されたイオン化可能な脂質：リン脂質；ポリエチレングリコール－脂質；コレステロール；および必要に応じて核酸を含む脂質ナノ粒子組成物を特徴とする。さらなる実施形態は、それを必要とする対象に核酸を送達する方法であって、脂質ナノ粒子組成物を必要とする対象に投与するステップを含む方法を対象とする。
これらおよびその他の実施形態について、下でより詳しく説明する。
ＬＮＰ製剤および特性評価に関連する情報を示す表である。 ＬＮＰ製剤および特性評価に関連する情報を示す表である。 ＬＮＰ製剤および特性評価に関連する情報を示す表である。 ＬＮＰ製剤および特性評価に関連する情報を示す表である。 ＬＮＰ製剤および特性評価に関連する情報を示す表である。 ＬＮＰ製剤および特性評価に関連する情報を示す表である。 ＬＮＰ製剤および特性評価に関連する情報を示す表である。 ＬＮＰ製剤および特性評価に関連する情報を示す表である。 ＬＮＰ製剤および特性評価に関連する情報を示す表である。 ＬＮＰ製剤および特性評価に関連する情報を示す表である。 ＬＮＰ製剤および特性評価に関連する情報を示す表である。 ＬＮＰ製剤および特性評価に関連する情報を示す表である。 ＬＮＰ製剤および特性評価に関連する情報を示す表である。 ＬＮＰ製剤および特性評価に関連する情報を示す表である。 ＬＮＰ製剤および特性評価に関連する情報を示す表である。 ＬＮＰ製剤および特性評価に関連する情報を示す表である。 ＬＮＰ製剤および特性評価に関連する情報を示す表である。 ＬＮＰ製剤および特性評価に関連する情報を示す表である。 脾臓ＣＤ３細胞で試験された、選択されたＬＮＰについて注射されたインプットの頻度と比較した、ＦＡＣＳ単離試料における正規化された頻度ＤＮＡバーコードカウントを示すグラフである。 脾臓ＣＤ１１ｂ細胞で試験された、選択されたＬＮＰについて注射されたインプットの頻度と比較した、ＦＡＣＳ単離試料における正規化された頻度ＤＮＡバーコードカウントを示すグラフである。 脾臓ＣＤ１９細胞で試験された、選択されたＬＮＰについて注射されたインプットの頻度と比較した、ＦＡＣＳ単離試料における正規化された頻度ＤＮＡバーコードカウントを示すグラフである。 肝臓内皮細胞で試験された、選択されたＬＮＰについて注射されたインプットの頻度と比較した、ＦＡＣＳ単離試料における正規化された頻度ＤＮＡバーコードカウントを示すグラフである。 表１に記載のＬＮＰ製剤について、マウス脾臓から単離されたＣＤ３陽性細胞におけるＣＤ４５タンパク質発現を示すグラフである。
定義
特に定義がない限り、本明細書で使用されるすべての技術的および科学的用語は、当業者が通常理解しているものと同じ意味を有する。本明細書で参照されるすべての特許、出願、公開出願、およびその他の公開物は、特に指示がない限り、それらの全体が参照により本明細書に組み込まれる。本明細書の用語について複数の定義がある場合には、特に指示がない限り、本節における定義が優先する。
本明細書で使用される場合、任意の「Ｒ」基または「Ｘ」基、例えば、限定されないが、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘ４、Ｘ５、Ｘ６、Ｘ７、Ｘ８、Ｘ９、Ｘ１０、Ｘ１１、Ｘ１２、Ｘ１３、Ｘ１４、Ｘ１５、Ｘ１６およびＸ１７は、指示された原子に付着することができる置換基を表す。かかるＲ基およびＸ基は、本明細書では全体としては「Ｒ」基と呼ぶことができる。Ｒ基は、置換されていても非置換であってもよい。２つの「Ｒ」基が、「一緒になって」と記載されている場合、Ｒ基、およびこれらが付着している原子は、シクロアルキル、シクロアルケニル、アリール、ヘテロアリールまたはヘテロ環を形成することができる。例えば、限定されないが、ＮＲａＲｂ基のＲａおよびＲｂが、「一緒になって」と指示されている場合、それらが互いに共有結合して、環：
Figure 2023505316000009
 を形成することを意味する。加えて、２個の「Ｒ」基が、これらが付着している原子と「一緒になって」、代替として環を形成すると記載されている場合、Ｒ基は、先に定義された可変基または置換基に限定されない。
ある基が「必要に応じて置換されている」と記載される場合は常に、当該基は非置換であってもよく、指示された置換基のうちの１個または複数で置換されていてもよい。同様に、ある基が、「非置換であるまたは置換されている」と記載されている場合で、基が置換されている場合、置換基は、指示された置換基のうちの１個または複数から選択することができる。置換基が指示されていない場合、指示された「必要に応じて置換された」または「置換された」基は、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、アシルアルキル、ヒドロキシ、アルコキシ、アルコキシアルキル、アミノアルキル、アミノ酸、アリール、ヘテロアリール、ヘテロシクリル、アリール（アルキル）、ヘテロアリール（アルキル）、ヘテロシクリル（アルキル）、ヒドロキシアルキル、アシル、シアノ、ハロゲン、チオカルボニル、Ｏ－カルバミル、Ｎ－カルバミル、Ｏ－チオカルバミル、Ｎ－チオカルバミル、Ｃ－アミド、Ｎ－アミド、Ｓ－スルホンアミド、Ｎ－スルホンアミド、Ｃ－カルボキシ、Ｏ－カルボキシ、イソシアネート、チオシアネート、イソチオシアネート、アジド、ニトロ、シリル、スルフェニル、スルフィニル、スルホニル、ハロアルキル、ハロアルコキシ、トリハロメタンスルホニル、トリハロメタンスルホンアミド、アミノ、一置換アミノ基および二置換アミノ基、から個別におよび独立して選択される１個または複数の基で置換されていてもよいことを意味する。
本明細書で使用される場合、「ａ」および「ｂ」が整数である「Ｃａ～Ｃｂ」とは、アルキル、アルケニルもしくはアルキニルの各基内の炭素原子数、またはシクロアルキル、シクロアルケニル、アリール、ヘテロアリールもしくはヘテロアリシクリルの各基の環内の炭素原子数を指す。すなわち、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキルの環、シクロアルケニルの環、アリールの環、ヘテロアリールの環、またはヘテロアリシクリルの環は、「ａ」から「ｂ」を包含した、炭素原子を含有することができる。したがって、例えば、「Ｃ１～Ｃ４アルキル」基とは、１～４個の炭素を有するすべてのアルキル基、すなわち、ＣＨ３－、ＣＨ３ＣＨ２－、ＣＨ３ＣＨ２ＣＨ２－、（ＣＨ３）２ＣＨ－、ＣＨ３ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２－、ＣＨ３ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）－および（ＣＨ３）３Ｃ－を指す。アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、アリール、ヘテロアリールまたはヘテロアリシクリルの各基に関して「ａ」および「ｂ」が指定されていない場合、これらの定義に記載される最も広い範囲が想定されるものとする。
本明細書で使用される場合、「アルキル」とは、完全飽和の（二重結合も三重結合も有さない）炭化水素基を含む直鎖状または分岐状炭化水素鎖を指す。アルキル基は、１～２０個の炭素原子を有することができる（本明細書に出現する場合は常に、「１～２０」などの数値範囲は、所与の範囲内の各整数を指す；例えば、「１～２０個の炭素原子」とは、アルキル基が１個の炭素原子、２個の炭素原子、３個の炭素原子など、２０個を含むそれ以下の炭素原子からなり得ることを意味するが、本定義はまた数値範囲が指定されていない場合の「アルキル」という用語の存在もカバーする）。アルキル基はまた、１～１０個の炭素原子を有する中型アルキルとすることができる。アルキル基はまた、１～６個の炭素原子を有する低級アルキルである可能性もある。化合物のアルキル基は「Ｃ１～Ｃ４アルキル」または同様の記号と指定することができる。単なる例示のみとして、「Ｃ１～Ｃ４アルキル」とは、アルキル鎖に１～４個の炭素原子があることを指示する、すなわち、アルキル鎖は、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ｎ－ブチル、イソブチル、ｓｅｃ－ブチルおよびｔ－ブチルから選択される。典型的なアルキル基には、それらにいかようにも限定されないが、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、第三級ブチル、ペンチルおよびヘキシルが含まれる。アルキル基は、置換されていても非置換であってもよい。
本明細書で使用される場合、「アルケニル」とは、直鎖状または分岐状炭化水素鎖に１つまたは複数の二重結合を含有するアルキル基を指す。アルケニル基の例には、アレニル、ビニルメチルおよびエテニルが含まれる。アルケニル基は、非置換であっても置換されていてもよい。
本明細書で使用される場合、「アルキニル」とは、直鎖状または分岐状炭化水素鎖に１つまたは複数の三重結合を含有するアルキル基を指す。アルキニルの例には、エチニルおよびプロピニルが含まれる。アルキニル基は、非置換であっても置換されていてもよい。
本明細書で使用される場合、「シクロアルキル」とは、完全飽和の（二重結合も三重結合も有さない）単環式または多環式炭化水素環系を指す。２つ以上の環で構成されている場合、環は縮合、架橋、またはスピロの各方式で一緒になることができる。本明細書で使用される場合、「縮合」という用語は、共通に２つの原子および１つの結合を有する２つの環を指す。本明細書で使用される場合、「架橋シクロアルキル」という用語は、シクロアルキルが非隣接原子を接続する１個または複数の原子のリンケージを含有する、化合物を指す。本明細書で使用される場合、「スピロ」という用語は、共通の１個の原子を有する２つの環を指すが、当該２つの環は架橋によって連結されていない。シクロアルキル基は、環内に３～３０個の原子、環内に３～２０個の原子、環内に３～１０個の原子、環内に３～８個の原子または環内に３～６個の原子を含有することができる。シクロアルキル基は、非置換であっても置換されていてもよい。典型的なモノシクロアルキル基には、それらにいかようにも限定されないが、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、およびシクロオクチルが含まれる。縮合シクロアルキル基の例は、デカヒドロナフタレニル、ドデカヒドロ－１Ｈ－フェナレニルおよびテトラデカヒドロアントラセニルである；架橋シクロアルキル基の例は、ビシクロ［１．１．１］ペンチル、ビシクロ［２．１．１］ヘプタン、アダマンタニル、およびノルボルナニルである；スピロシクロアルキル基の例には、スピロ［３．３］ヘプタンおよびスピロ［４．５］デカンが含まれる。
本明細書で使用される場合、「シクロアルケニル」とは、少なくとも１つの環内に１つまたは複数の二重結合を含有する単環式または多環式炭化水素環系を指す；だが、２つ以上である場合は、二重結合は、すべての環全体にわたって完全に非局在化したπ電子系を形成することはできない（そうでない場合、基は本明細書で定義の「アリール」である）。シクロアルケニル基は、環内に３～１０個の原子、または環内に３～８個の原子を含有することができる。２つ以上の環から構成されている場合、これらの環が縮合様式で一緒に接続することができる。シクロアルケニル基は、非置換であっても置換されていてもよい。
本明細書で使用される場合、「アリール」とは、すべての環全体にわたって完全に非局在化したπ電子系を有する、炭素環式（すべてが炭素の）の単環式のまたは多環式の芳香族環系（２つの炭素環式の環が化学結合を共有している縮合環系を含めて）を指す。アリール基内の炭素原子数は様々であり得る。例えば、アリール基は、Ｃ６～Ｃ１４アリール基であっても、Ｃ６～Ｃ１０アリール基であっても、Ｃ６アリール基であってもよい。アリール基の例には、それらに限定されないが、ベンゼン、ナフタレン、およびアズレンが含まれる。アリール基は、置換されていても非置換であってもよい。
本明細書で使用される場合、「ヘテロアリール」とは、１個、２個、３個以上のヘテロ原子、すなわち、それらに限定されないが、窒素、酸素および硫黄を含めて、炭素以外の元素を含有する単環式または多環式芳香族環系（完全に非局在化したπ電子系を有する環系）を指す。ヘテロアリール基の環内の原子数は様々であり得る。例えば、ヘテロアリール基は、環内に４～１４個の原子、環内に５～１０個の原子、または環内に５～６個の原子を含有することができる。さらに、「ヘテロアリール」という用語には、縮合環系が含まれるが、この場合、２つの環が、例えば、少なくとも１つのアリール環および少なくとも１つのヘテロアリール環が、または少なくとも２つのヘテロアリール環が、少なくとも１つの化学結合を共有する。ヘテロアリール環の例には、それらに限定されないが、本明細書に記載のものおよび以下が含まれる：フラン、フラザン、チオフェン、ベンゾチオフェン、フタラジン、ピロール、オキサゾール、ベンゾオキサゾール、１，２，３－オキサジアゾール、１，２，４－オキサジアゾール、チアゾール、１，２，３－チアジアゾール、１，２，４－チアジアゾール、ベンゾチアゾール、イミダゾール、ベンズイミダゾール、インドール、インダゾール、ピラゾール、ベンゾピラゾール、イソオキサゾール、ベンゾイソオキサゾール、イソチアゾール、トリアゾール、ベンゾトリアゾール、チアジアゾール、テトラゾール、ピリジン、ピリダジン、ピリミジン、ピラジン、プリン、プテリジン、キノリン、イソキノリン、キナゾリン、キノキサリン、シンノリン、およびトリアジン。ヘテロアリール基は、置換されていても非置換であってもよい。
本明細書で使用される場合、「ヘテロシクリル」または「ヘテロアリシクリル」とは、３員、４員、５員、６員、７員、８員、９員、１０員、最大１８員の単環式、二環式、および三環式の環系を指し、この場合、１～５個のヘテロ原子と一緒に炭素原子が前記環系を構成する。ヘテロ環は、１つまたは複数の不飽和結合を必要に応じて含有することができるが、この不和結合は、完全に非局在化したπ電子系がすべての環全体にわたって存在しないような位置にある。ヘテロ原子は、それらに限定されないが、酸素、硫黄、および窒素を含めて炭素以外の元素である。ヘテロ環は、１個または複数のカルボニル官能基またはチオカルボニル官能基をさらに含有することができ、その結果、その定義には、ラクタム、ラクトン、環状イミド、環状チオイミドおよび環状カルバメート（carbamate）などのオキソ系およびチオ系が含まれることになる。２つ以上の環から構成される場合、これらの環は、「シクロアルキル」に関して本明細書に記載のように、縮合様式またはスピロ様式で一緒になることができる。付加的に、ヘテロシクリル内の任意の窒素が四級化されている場合もある。ヘテロシクリル基またはヘテロアリシクリル基は、非置換であっても置換されていてもよい。かかる「ヘテロシクリル」基または「ヘテロアリシクリル」基の例には、それらに限定されないが、本明細書に記載のものおよび以下が含まれる：１，３－ジオキシン、１，３－ジオキサン、１，４－ジオキサン、１，２－ジオキソラン、１，３－ジオキソラン、１，４－ジオキソラン、１，３－オキサチアン、１，４－オキサチイン、１，３，４－オキサジアゾール－２（３Ｈ）－オン、１，２，３－オキサジアゾール－５（２Ｈ）－オン、１，３－オキサチオラン、１，３－ジチオール、１，３－ジチオラン、１，４－オキサチアン、テトラヒドロ－１，４－チアジン、１，３－チアジナン、２Ｈ－１，２－オキサジン、マレイミド、スクシンイミド、バルビツール酸、チオバルビツール酸、ジオキソピペラジン、ヒダントイン、ジヒドロウラシル、トリオキサン、ヘキサヒドロ－１，３，５－トリアジン、イミダゾリン、イミダゾリジン、イソキサゾリン、イソキサゾリジン、オキサゾリン、オキサゾリジン、オキサゾリジノン、チアゾリン、チアゾリジン、モルホリン、オキシラン、ピペリジンＮ－オキシド、ピペリジン、ピペラジン、ピロリジン、ピロリドン、ピロリジオン、４－ピペリドン、ピラゾリン、ピラゾリジン、２－オキソピロリジン、テトラヒドロピラン、４Ｈ－ピラン、テトラヒドロチオピラン、チアモルホリン、チアモルホリンスルホキシド、チアモルホリンスルホン、およびそれらのベンゾ縮環アナログ（例えば、ベンズイミダゾリジノン、テトラヒドロキノリン、および３，４－メチレンジオキシフェニル）。
本明細書で使用される場合、「アラルキル」および「アリール（アルキル）」とは、低級アルキレン基を介して、置換基として接続されたアリール基を指す。アラルキルの低級アルキレン基およびアリール基は、置換されていても非置換であってもよい。例には、それらに限定されないが、ベンジル、２－フェニルアルキル、３－フェニルアルキルおよびナフチルアルキルが含まれる。
本明細書で使用される場合、「ヘテロアラルキル」および「ヘテロアリール（アルキル）」とは、低級アルキレン基を介して、置換基として接続されたヘテロアリール基を指す。ヘテロアラルキルの低級アルキレン基およびヘテロアリール基は、置換されていても非置換であってもよい。例には、それらに限定されないが、２－チエニルアルキル、３－チエニルアルキル、フリルアルキル、チエニルアルキル、ピロリルアルキル、ピリジルアルキル、イソキサゾリルアルキル、イミダゾリルアルキルおよびそれらのベンゾ縮環アナログが含まれる。
「ヘテロアリシクリル（アルキル）」および「ヘテロシクリル（アルキル）」とは、低級アルキレン基を介して、置換基として接続されたヘテロシクリル基またはヘテロアリシクリル基を指す。ヘテロアリシクリル（アルキル）の低級アルキレンおよびヘテロシクリルは、置換されていても非置換であってもよい。例には、それらに限定されないが、テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－４－イル（メチル）、ピペリジン－４－イル（エチル）、ピペリジン－４－イル（プロピル）、テトラヒドロ－２Ｈ－チオピラン－４－イル（メチル）、および１，３－チアジナン－４－イル（メチル）が含まれる。
「低級アルキレン基」は直鎖状－ＣＨ２－繋留基であり、その末端炭素原子を介して分子断片を接続する結合を形成する。例には、それらに限定されないが、メチレン（－ＣＨ２－）、エチレン（－ＣＨ２ＣＨ２－）、プロピレン（－ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２－）、およびブチレン（－ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２－）が含まれる。低級アルキレン基は、低級アルキレン基の１個または複数の水素を、「置換された」の定義の下に列挙される置換基で置き換えることによって、置換することができる。
本明細書で使用される場合、「アルコキシ」とは、式－ＯＲを指す（式中、Ｒは、本明細書で定義の、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロシクリル、シクロアルキル（アルキル）、アリール（アルキル）、ヘテロアリール（アルキル）またはヘテロシクリル（アルキル）である）。アルコキシの非限定的なリストは、メトキシ、エトキシ、ｎ－プロポキシ、１－メチルエトキシ（イソプロポキシ）、シクロプロポキシ、ｎ－ブトキシ、イソブトキシ、ｓｅｃ－ブトキシ、ｔｅｒｔ－ブトキシ、シクロブトキシ、フェノキシおよびベンゾキシである。アルコキシは置換されていても非置換であってもよい。
本明細書で使用される場合、「アシル」とは、カルボニル基を介して、置換基として接続された、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロシクリル、シクロアルキル（アルキル）、アリール（アルキル）、ヘテロアリール（アルキル）またはヘテロシクリル（アルキル）を指す。例には、ホルミル、アセチル、プロパノイル、ベンゾイルおよびアクリルが含まれる。アシルは置換されていても非置換であってもよい。
本明細書で使用される場合、「アシルアルキル」とは、低級アルキレン基を介して、置換基として接続されたアシルを指す。例には、アリール－Ｃ（＝Ｏ）－（ＣＨ２）ｎ－およびヘテロアリール－Ｃ（＝Ｏ）－（ＣＨ２）ｎ－が含まれる（式中、ｎは１～６の範囲の整数である）。
本明細書で使用される場合、「アルコキシアルキル」とは、低級アルキレン基を介して置換基として接続されたアルコキシ基を指す。例には、Ｃ１～４アルキル－Ｏ－（ＣＨ２）ｎ－が含まれる（式中、ｎは１～６の範囲の整数である）。
本明細書で使用される場合、「アミノアルキル」とは、低級アルキレン基を介して置換基として接続された必要に応じて置換されたアミノ基を指す。例には、Ｈ２Ｎ（ＣＨ２）ｎ－が含まれる（式中、ｎは１～６の範囲の整数である）。
本明細書で使用される場合、「ヒドロキシアルキル」とは、水素原子のうちの１個または複数がヒドロキシ基によって置き換えられているアルキル基を指す。例示的なヒドロキシアルキル基には、それらに限定されないが、２－ヒドロキシエチル、３－ヒドロキシプロピル、２－ヒドロキシプロピル、および２，２－ジヒドロキシエチルが含まれる。ヒドロキシアルキルは、置換されていても非置換であってもよい。
本明細書で使用される場合、「ハロアルキル」とは、水素原子のうちの１個または複数がハロゲンによって置き換えられているアルキル基（例えば、モノハロアルキル、ジハロアルキルおよびトリハロアルキル）を指す。かかる基には、それらに限定されないが、クロロメチル、フルオロメチル、ジフルオロメチル、トリフルオロメチル、クロロ－フルオロアルキル、クロロ－ジフルオロアルキルおよび２－フルオロイソブチルが含まれる。ハロアルキルは、置換されていても非置換であってもよい。
本明細書で使用される場合、「ハロアルコキシ」とは、水素原子のうちの１個または複数がハロゲンによって置き換えられているアルコキシ基（例えば、モノハロアルコキシ、ジハロアルコキシおよびトリハロアルコキシ）を指す。かかる基には、それらに限定されないが、クロロメトキシ、フルオロメトキシ、ジフルオロメトキシ、トリフルオロメトキシ、クロロ－フルオロアルキル、クロロ－ジフルオロアルコキシおよび２－フルオロイソブトキシが含まれる。ハロアルコキシは置換されていても非置換であってもよい。
「スルフェニル」基とは、「－ＳＲ」基を指す（式中、Ｒは、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロシクリル、シクロアルキル（アルキル）、アリール（アルキル）、ヘテロアリール（アルキル）またはヘテロシクリル（アルキル）とすることができる）。スルフェニルは置換されていても非置換であってもよい。
「スルフィニル」基とは、「－Ｓ（＝Ｏ）－Ｒ」基を指す（式中、Ｒは、スルフェニルに関して定義されたものと同一とすることができる）。スルフィニルは置換されていても非置換であってもよい。
「スルホニル」基とは、「ＳＯ２Ｒ」基を指す（式中、Ｒは、スルフェニルに関して定義されたものと同一とすることができる）。スルホニルは置換されていても非置換であってもよい。
「Ｏ－カルボキシ」基とは、「ＲＣ（＝Ｏ）Ｏ－」基を指す（式中、Ｒは、本明細書で定義の、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロシクリル、シクロアルキル（アルキル）、アリール（アルキル）、ヘテロアリール（アルキル）またはヘテロシクリル（アルキル）とすることができる）。Ｏ－カルボキシは置換されていても非置換であってもよい。
「エステル」および「Ｃ－カルボキシ」という用語は、「－Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ」基を指す（式中、Ｒは、Ｏ－カルボキシに関して定義されたものと同一とすることができる）。エステルおよびＣ－カルボキシは置換されていても非置換であってもよい。
「チオカルボニル」基とは、「－Ｃ（＝Ｓ）Ｒ」基を指す（式中、Ｒは、Ｏ－カルボキシに関して定義されたものと同一とすることができる）。チオカルボニルは置換されていても非置換であってもよい。
「トリハロメタンスルホニル」基とは、「Ｘ３ＣＳＯ２－」基を指す（式中、各Ｘはハロゲンである）。
「トリハロメタンスルホンアミド」基とは、「Ｘ３ＣＳ（Ｏ）２Ｎ（ＲＡ）－」基を指す（式中、各Ｘはハロゲンであり、ＲＡは、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロシクリル、シクロアルキル（アルキル）、アリール（アルキル）、ヘテロアリール（アルキル）またはヘテロシクリル（アルキル）である）。
本明細書で使用される「アミノ」という用語は、－ＮＨ２基を指す。
本明細書で使用される場合、「ヒドロキシ」という用語は、－ＯＨ基を指す。
「シアノ」基とは「－ＣＮ」基を指す。
本明細書で使用される「アジド」という用語は、－Ｎ３基を指す。
「イソシアネート」基とは、「－ＮＣＯ」基を指す。
「チオシアネート」基とは、「－ＣＮＳ」基を指す。
イソチオシアネート」基とは、「－ＮＣＳ」基を指す。
「カルボニル」基とは、Ｃ＝Ｏ基を指す。
「Ｓ－スルホンアミド」基とは、「－ＳＯ２Ｎ（ＲＡＲＢ）」基を指す（式中、ＲＡおよびＲＢは独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロシクリル、シクロアルキル（アルキル）、アリール（アルキル）、ヘテロアリール（アルキル）またはヘテロシクリル（アルキル）とすることができる）。Ｓ－スルホンアミドは、置換されていても非置換であってもよい。
「Ｎ－スルホンアミド」基とは、「ＲＳＯ２Ｎ（ＲＡ）－」基を指す（式中、ＲおよびＲＡは独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロシクリル、シクロアルキル（アルキル）、アリール（アルキル）、ヘテロアリール（アルキル）またはヘテロシクリル（アルキル）とすることができる）。Ｎ－スルホンアミドは、置換されていても非置換であってもよい。
「Ｏ－カルバミル」基とは、「－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＲＡＲＢ）」基を指す（式中、ＲＡおよびＲＢは独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロシクリル、シクロアルキル（アルキル）、アリール（アルキル）、ヘテロアリール（アルキル）またはヘテロシクリル（アルキル）とすることができる）。Ｏ－カルバミルは、置換されていても非置換であってもよい。
「Ｎ－カルバミル」基とは、「ＲＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＲＡ）－」基を指す（式中、ＲおよびＲＡは独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロシクリル、シクロアルキル（アルキル）、アリール（アルキル）、ヘテロアリール（アルキル）またはヘテロシクリル（アルキル）とすることができる）。Ｎ－カルバミルは、置換されていても非置換であってもよい。
「Ｏ－チオカルバミル」基とは、「－ＯＣ（＝Ｓ）－Ｎ（ＲＡＲＢ）」基を指す（式中、ＲＡおよびＲＢは独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロシクリル、シクロアルキル（アルキル）、アリール（アルキル）、ヘテロアリール（アルキル）またはヘテロシクリル（アルキル）とすることができる）。Ｏ－チオカルバミルは、置換されていても非置換であってもよい。
「Ｎ－チオカルバミル」基とは、「ＲＯＣ（＝Ｓ）Ｎ（ＲＡ）－」基を指す（式中、ＲおよびＲＡは独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロシクリル、シクロアルキル（アルキル）、アリール（アルキル）、ヘテロアリール（アルキル）またはヘテロシクリル（アルキル）とすることができる）。Ｎ－チオカルバミルは、置換されていても非置換であってもよい。
「Ｃ－アミド」基とは、「－Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（ＲＡＲＢ）」基を指す（式中、ＲＡおよびＲＢは独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロシクリル、シクロアルキル（アルキル）、アリール（アルキル）、ヘテロアリール（アルキル）またはヘテロシクリル（アルキル）とすることができる）。Ｃ－アミドは、置換されていても非置換であってもよい。
「Ｎ－アミド」基とは、「ＲＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＲＡ）－」基を指す（式中、ＲおよびＲＡは独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロシクリル、シクロアルキル（アルキル）、アリール（アルキル）、ヘテロアリール（アルキル）またはヘテロシクリル（アルキル）とすることができる）。Ｎ－アミドは、置換されていても非置換であってもよい。
「尿素」基とは、「Ｎ（Ｒ）－Ｃ（＝Ｏ）－ＮＲＡＲＢ」基を指す（式中、Ｒは水素またはアルキルとすることができ、ＲＡおよびＲＢは独立して水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロシクリル、シクロアルキル（アルキル）、アリール（アルキル）、ヘテロアリール（アルキル）またはヘテロシクリル（アルキル）とすることができる）。尿素は、置換されていても非置換であってもよい。
「オキシム」基とは、「－Ｃ（＝Ｎ－ＯＨ）ＲＡ」を指す（式中、ＲＡは独立して、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロシクリル、シクロアルキル（アルキル）、アリール（アルキル）、ヘテロアリール（アルキル）またはヘテロシクリル（アルキル）とすることができる）。オキシムは、置換されていても非置換であってもよい。
「アシルヒドロゾン」とは、「－Ｃ（＝Ｎ－ＮＨ－アシル）－ＲＡ．」を指す（式中、アシル部分は、「アシル」について本明細書で提供された構造を有し、ＲＡは独立して、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロシクリル、シクロアルキル（アルキル）、アリール（アルキル）、ヘテロアリール（アルキル）またはヘテロシクリル（アルキル）とすることができる）。アシルヒドロゾンは、置換されていても非置換であってもよい。
「ヒドラジン」とは、「－ＮＨＮＲＡＲＢ」を指す（式中、ＲＡおよびＲＢは独立して水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロシクリル、シクロアルキル（アルキル）、アリール（アルキル）、ヘテロアリール（アルキル）またはヘテロシクリル（アルキル）とすることができる）。ヒドラジンは、置換されていても非置換であってもよい。
本明細書で使用される「ハロゲン原子」または「ハロゲン」という用語は、フッ素、塩素、臭素およびヨウ素などの元素周期表の列７の放射線安定原子のいずれか１つを意味する。
本明細書で使用される場合、
Figure 2023505316000010
 とは、特に指示がない限り、単結合または二重結合を指示する。
置換基の数が指定されていない場合（例えば、ハロアルキル）、１個または複数の置換基が存在することができる。例えば、「ハロアルキル」は、同じまたは異なるハロゲンのうちの１個または複数を含むことができる。別の例として、「Ｃ１～Ｃ３アルコキシフェニル」は、１個、２個、または３個の原子を含有する、同じまたは異なるアルコキシ基のうちの１個または複数を含むことができる。
本明細書で使用される場合、あらゆる保護基、アミノ酸およびその他の化合物の略語は、他に示されない限り、それらの一般的な使用法、認められた略語、または生化学的命名法に関するＩＵＰＡＣ－ＩＵＢ委員会（Biochem. 11:942-944 (1972)を参照されたい）に従う。
本明細書で使用される「保護基」および「保護基（複数）」（および略称「ＰＧ」）という用語は、分子における現存の基が、望ましくない化学反応を受けることを防止するために当該分子に付加される、任意の原子または原子団を指す。保護基部分の例は、T. W. Greene and P. G. M. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, 3. Ed. John Wiley & Sons, 1999に、および in J.F.W. McOmie, Protective Groups in Organic Chemistry Plenum Press, 1973に記載されており、その両方が、適切な保護基を開示するという限定された目的のために参照によって本明細書に組み込まれる。保護基部分は、保護基がある特定の反応条件に対して安定であるとともに当技術分野から知られている方法論を使用して好都合な段階で容易に取り除かれるように選択することができる。保護基の非限定的なリストには、以下が含まれる：ベンジル；置換ベンジル；アルキルカルボニルおよびアルコキシカルボニル（例えば、ｔ－ブトキシカルボニル（ＢＯＣ）、アセチル、またはイソブチリル）；アリールアルキルカルボニルおよびアリールアルコキシカルボニル（例えば、ベンジルオキシカルボニル）；置換メチルエーテル（例えばメトキシメチルエーテル）；置換エチルエーテル；置換ベンジルエーテル；テトラヒドロピラニルエーテル；シリル（例えば、トリメチルシリル、トリエチルシリル、トリイソプロピルシリル、ｔ－ブチルジメチルシリル、トリ－イソ－プロピルシリルオキシメチル、［２－（トリメチルシリル）エトキシ］メチルまたはｔ－ブチルジフェニルシリル）；エステル（例えば安息香酸エステル）；カーボネート（carbonate）（例えばメトキシメチルカーボネート（methoxymethylcarbonate））；スルホネート（sulfonate）（例えばトシレート（tosylate）またはメシレート（mesylate））；非環式ケタール（例えばジメチルアセタール）；環式ケタール（例えば、１，３－ジオキサン、１，３－ジオキソラン、および本明細書に記載のもの）；非環式アセタール；環式アセタール（例えば、本明細書に記載のもの）；非環式ヘミアセタール；環式ヘミアセタール；環式ジチオケタール（例えば、１，３－ジチアンまたは１，３－ジチオラン）；オルトエステル（例えば、本明細書に記載のもの）ならびにトリアリールメチル基（例えば、トリチル；モノメトキシトリチル（ＭＭＴｒ）；４，４’－ジメトキシトリチル（ＤＭＴｒ）；４，４’，４”－トリメトキシトリチル（ＴＭＴｒ）；および本明細書に記載のもの）。
本明細書で使用される「脱離基」（および略語「ＬＧ」）という用語は、化学反応において別の原子または部分によって置き換えられることができる任意の原子または部分を指す。より具体的には、一部の実施形態では、「脱離基」とは、求核置換反応において代えられる原子または部分を指す。一部の実施形態では、「脱離基」とは、強酸の共役塩基である任意の原子または部分である。適切な脱離基の例には、それらに限定されないが、トシレート（tosylate）、メシレート（mesylate）、トリフルオロアセテート（trifluoroacetate）およびハロゲン（例えば、Ｉ、Ｂｒ、およびＣｌ）が含まれる。脱離基の非限定的な特徴および例については、例えば、Organic Chemistry, 2d ed., Francis Carey (1992), pages 328-331；Introduction to Organic Chemistry, 2d ed., Andrew Streitwieser and Clayton Heathcock (1981), pages 169-171；およびOrganic Chemistry, 5th ed., John McMurry (2000), pages 398 and 408に見いだすことができる；これらのすべてが、脱離基の特徴および例を開示するという限定された目的のために参照によって本明細書に組み込まれる。
「医薬的に許容される塩」という用語は、これが投与される生物体に著しい刺激を引き起こさず、かつ化合物の生物学的活性および特性を無効にすることがない、当該化合物の塩を指す。一部の実施形態では、塩は、当該化合物の酸付加塩である。医薬用の塩は、化合物を、ハロゲン化水素酸（例えば、塩酸または臭化水素酸）、硫酸、硝酸およびリン酸などの無機酸と反応させることによって得ることができる。医薬用の塩は、化合物を脂肪族もしくは芳香族のカルボン酸またはスルホン酸などの有機酸、例えば、ギ酸、酢酸、コハク酸、乳酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、アスコルビン酸、ニコチン酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ｐ－トルエンスルホン酸、サリチル酸またはナフタレンスルホン酸と反応させることによっても得ることができる。医薬用の塩はまた、化合物を塩基と反応させて、アンモニウム塩などの塩、ナトリウム塩またはカリウム塩などのアルカリ金属塩、カルシウム塩またはマグネシウム塩などのアルカリ土類金属塩、ジシクロヘキシルアミン、Ｎ－メチル－Ｄ－グルカミン、トリス（ヒドロキシメチル）メチルアミン、Ｃ１～Ｃ７アルキルアミン、シクロヘキシルアミン、トリエタノールアミン、エチレンジアミンなどの有機塩基の塩、ならびにアルギニンやリジンなどのアミノ酸との塩、を形成することによっても得ることができる。
本出願において使用される用語および句ならびにそれらの変形形態は、特に添付の特許請求の範囲において、明確な記載がない限り、限定的であるとは対照的に、非限定的である（ｏｐｅｎ ｅｎｄｅｄ）と解釈されたい。上述の例として、「を含む（を含めて、が含まれ）（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）」という用語は、「限定されないが、・・・を含めて（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ，ｗｉｔｈｏｕｔ ｌｉｍｉｔａｔｉｏｎ）」、「それらに限定されないが、・・・を含めて（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ ｂｕｔ ｎｏｔ ｌｉｍｉｔｅｄ ｔｏ）」などを意味するように読まれるべきである；本明細書で使用される「を含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」という用語は、「を含む（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）」、「を含有する（ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ）」、または「によって特徴づけられる（ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚｅｄ ｂｙ）」と同義であり、包括的または非限定的（ｏｐｅｎ－ｅｎｄｅｄ）であり、さらなる未記載の要素または方法ステップを除外しない；「を有する（ｈａｖｉｎｇ）」という用語は、「を少なくとも有する（ｈａｖｉｎｇ ａｔ ｌｅａｓｔ）と解釈されるべきである；「を含む（が含まれる）（ｉｎｃｌｕｄｅｓ）」という用語は、「それらに限定されないが、・・・を含む（が含まれる）（ｉｎｃｌｕｄｅｓ ｂｕｔ ｉｓ ｎｏｔ ｌｉｍｉｔｅｄ ｔｏ）」と解釈されるべきである；「例」という用語は、その網羅的または限定的な列挙ではなく、論議の事項の例示的実例を提供するのに使用される；「好ましくは（ｐｒｅｆｅｒａｂｌｙ）」、「好ましい（ｐｒｅｆｅｒｒｅｄ）」、「所望の（ｄｅｓｉｒｅｄ）」、または「望ましい（ｄｅｓｉｒａｂｌｅ）」のような用語、および同様の意味の語の使用は、ある特定の特性が構造または機能にとって決定的であること、必須であること、さらには重要であることを含意すると理解されるべきではなく、それにかえて、特定の実施形態において利用されてもされなくてもよい代替的または更なる特性を強調することを単に意図するものであると理解されるべきである。加えて、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」という用語は、「を少なくとも有する（ｈａｖｉｎｇ ａｔ ｌｅａｓｔ）」または「少なくとも含む（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ ａｔ ｌｅａｓｔ）」という句と同義であると解釈されるべきである。方法の文脈において使用される場合、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」という用語は、当該方法は少なくとも記載されたステップを含むが、更なるステップを含むことができることを意味する。化合物、組成物またはデバイスの文脈において使用される場合、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」という用語は、当該化合物、組成物またはデバイスが少なくとも記載された特性または成分を含むが、また、更なる特性または成分も含むことができることを意味する。同様に、接続詞「および」でつながれた一群の事項は、そのような事項の１つ１つがその群分けに存在することを要求するように読み取られるべきはなく、それよりも、文脈上他に指示がない限りは「および／または」と読まれるべきである。同様に、接続詞「または」でつながれた一群の事項は、その群の内で相互的に排他的であることを要求するように読み取られるべきはなく、それよりも、文脈上他に指示がない限りは「および／または」と読まれるべきである。
本明細書における実質的にあらゆる複数形および／または単数形の用語の使用に関して、当業者であれば、文脈および／または適用にとって適当である場合、複数形から単数形に、および／または単数形から複数形に変えることができる。様々な単数形／複数形の入換えが明確化のために本明細書中では明示的に示されることがある。不定冠詞「ａ」または「ａｎ」は複数性を排除するものではない。ある特定の方策が相互に異なる従属クレームに列挙されているという単なる事実は、これらの方策の組合せを有利に使用することができないということを指示するものではない。特許請求の範囲の中のいかなる参照符号も、範囲を限定するように解釈されるべきではない。
１つまたは複数のキラル中心を有する本明細書に記載の任意の化合物において、絶対立体化学が明示的に指示されていない場合、それぞれの中心は独立して、Ｒ－立体配置またはＳ－立体配置またはそれらの混合とすることができることが理解される。したがって、本明細書に提供の化合物は、鏡像異性的に純粋であっても、鏡像異性的に濃縮されていても、ラセミ混合物であっても、ジアステレオ異性的に純粋であっても、ジアステレオ異性的に濃縮されていても、立体異性体の混合物であってもよい。加えて、ＥまたはＺとして定義することができる幾何異性体を生成する１つまたは複数の二重結合を有する、本明細書に記載の任意の化合物において、それぞれの二重結合は独立して、Ｅであっても、Ｚであっても、それらの混合であってもよいことが理解される。
同様に、記載の任意の化合物において、すべての互変異性型も含まれることが意図されていることが理解される。
本明細書で開示の化合物が空の結合価を有する場合、当該結合価は、水素またはその同位元素、例えば、水素－１（プロチウム）および水素－２（重水素）で満たされることになることを理解されたい
本明細書に記載の化合物は、同位体標識することができることが理解される。重水素などの同位体による置換は、例えば、ｉｎ ｖｉｖｏ半減期の向上または必要投薬量の減少などの、より大きな代謝安定性から生じるある特定の治療上の利点を与えることができる。化合物構造において表される各化学元素は、前記元素の任意の同位体を含むことができる。例えば、化合物構造において、水素原子が、当該化合物中に存在すると明示的に開示されている場合がありまたはそうであると理解され場合がある。水素原子が存在することができる、当該化合物の任意の位置で、当該水素原子は、それらに限定されないが、水素－１（プロチウム）および水素－２（重水素）を含めて、水素の任意の同位体であってもよい。したがって、本明細書での化合物への言及は、文脈上他に指示がない限りは、可能であるすべての同位体形態を包含する。
本明細書に記載の方法および組合せには、結晶形態（多形としても知られ、これは、同じ元素組成の化合物の異なる結晶充填配置を含む）、アモルファス相、塩、溶媒和物、および水和物が含まれることが理解される。一部の実施形態では、本明細書に記載の化合物は、水、エタノールなどなどの医薬的に許容される溶媒との溶媒和形態で存在する。他の実施形態では、本明細書に記載の化合物は、非溶媒和形態で存在する。溶媒和物は、化学量論的量または非化学量論的量のいずれかの溶媒を含有するとともに、水、エタノールなどなどの医薬的に許容される溶媒を用いる結晶化のプロセス過程で形成することができる。溶媒が水である場合に水和物が形成される、または、溶媒がアルコールである場合にアルコラートが形成される。加えて、本明細書で提供の化合物は、非溶媒和形態ならびに溶媒和形態で存在することができる。一般に、溶媒和形態は、本明細書で提供の化合物および方法の目的のために、非溶媒和形態と等価と見なされる。
値の範囲が提供される場合、上限および下限、ならびに範囲の上限と下限との間の介在値それぞれは、本実施形態内に包含されることが理解される。
本明細書で使用される場合、「ＲＮＡ」とは、天然に存在するまたは天然に存在しないリボ核酸を指す。例えば、ＲＮＡは、１つまたは複数の核酸塩基、ヌクレオシド、ヌクレオチド、またはリンカーなどの改変されたおよび／または天然に存在しない成分を含むことができる。ＲＮＡは、キャップ構造、鎖終止ヌクレオシド、ステムループ、ポリＡ配列、および／またはポリアデニル化シグナルを含むことができる。ＲＮＡは、目的のポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を有することができる。例えば、ＲＮＡは、メッセンジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ）とすることができる。特定のポリペプチドをコードするｍＲＮＡの翻訳、例えば、哺乳動物細胞内部でのｍＲＮＡのインビボ翻訳は、コードされたポリペプチドを産生することができる。ＲＮＡは、低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）、ｍｉｃｒｏＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ）、ダイサー基質ＲＮＡ（ｄｓＲＮＡ）、小ヘアピンＲＮＡ（ｓｈＲＮＡ）、ｍＲＮＡ、シングルガイドＲＮＡ（ｓｇＲＮＡ）、ｃａｓ９ ｍＲＮＡ、およびそれらの混合物からなる非限定的な群から選択することができる。
「ポリペプチド」、「ペプチド」、および「タンパク質」という用語は、ペプチド結合によって一緒に連結された少なくとも３個のアミノ酸のストリングを指して互換的に使用することができる。ペプチドは、個別のペプチドを指す場合もありペプチドの集合を指す場合もある。ペプチドは、天然アミノ酸、非天然アミノ酸（すなわち、自然界には存在しないが、ポリペプチド鎖に組み込むことができる化合物）、および／またはアミノ酸アナログを含有することができる。また、ペプチド中のアミノ酸のうちの１個または複数を、例えば、炭水化物基、リン酸基、ファルネシル基、イソファルネシル基、脂肪酸基、コンジュゲーション用のリンカー、官能化、またはその他の改変などなどの化学的実体の付加によって改変することができる。改変には、ペプチドの環化、Ｄ－アミノ酸の組込みなどが含まれ得る。
本明細書で使用される場合、「処置する」、「処置すること」、「処置」および「治療上の使用」という用語は、疾患または障害の１つまたは複数の症状の排除、軽減、または改善を指す。本明細書で使用される場合、「治療有効量」とは、かかる症状の臨床的意義のある排除、軽減または改善を媒介するのに十分な治療薬の量を指す。ある効果は、その大きさがレシピエント対象の健康または予後に影響を与えるのに十分である場合、臨床的意義がある。治療有効量とは、疾患の発症を遅延させるまたは最小限に抑える、例えば、がんの延展を遅延させるまたは最小限に抑えるのに十分な治療薬の量を指すことができる。治療有効量とはまた、疾患の処置または管理において治療効果を提供する治療薬の量を指すことができる。
本明細書に記載の組成物は、単位剤形で提供されるのが好ましい。本明細書で使用される場合、「単位剤形」とは、良好な医療行為に従って、動物、好ましくは哺乳動物対象への単回投与での投与に適している量の化合物または組成物を含有する組成物である。しかし、単一剤形または単位剤形の調製は、剤形が１日１回または治療のコースごとに１回投与されるということを暗に意味するものではない。単回投与が特に除外されることはないが、かかる剤形は、１日あたり１回、２回、３回またはそれ以上投与されることが企図されており、点滴としてある期間にわたり（例えば、３０分から約２～６時間まで）投与されてもよく、持続点滴として投与されてもよく、かつ、治療コースの過程で複数回与えられてもよい。当業者であれば、製剤とは治療の全コースを特に企図するものではなく、かかる決定は製剤よりも処置に関する当分野の技術者に委ねられるということを認識するであろう。本明細書で使用される場合、「予防薬」という用語は、障害または疾患に関する任意の症状を検出する前に、かかる障害または疾患を防止するうえで使用することができる薬剤を指す。「予防上有効な」量とは、かかる防止を媒介するのに十分な予防薬の量である。予防上有効な量とはまた、疾患の防止において予防的効果を提供する予防薬の量を指すこともできる。
上記の有用な組成物は、投与のための、例えば、経口、経鼻、直腸、局所（経皮を含む）、眼、脳内、頭蓋内、髄腔内、動脈内、静脈内、筋肉内、またはその他の親の（parental）経路の投与のための、様々な経路に適した様々な形態のいずれかとすることができる。当業者であれば、経口組成物および経鼻組成物には、吸入によって投与され、利用可能な方法論を使用して作製される組成物が含まれることを理解するであろう。所望される特定の投与経路に応じて、当技術分野においてよく知られる様々な医薬的に許容される担体を使用することができる。医薬的に許容される担体には、例えば、固形または液状の充填剤、希釈剤、ハイドロトロピー物質（hydrotropies）、界面活性剤、およびカプセル化物質が含まれる。化合物の抑制活性を実質的に妨害しない、必要に応じた医薬的に活性な材料を含めることができる。化合物と併せて用いられる担体の量は、化合物の単位用量あたりで、投与のための実用的な分量の物質を提供するのに十分なものである。本明細書に記載の方法に有用である剤形を製造するための技法および組成物は、以下の参考文献に記載されており、すべてが参照により本明細書に組み込まれる：Modern Pharmaceutics, 4th Ed., Chapters 9 and 10 (Banker & Rhodes, editors, 2002)；Lieberman et al., Pharmaceutical Dosage Forms: Tablets (1989)；およびAnsel, Introduction to Pharmaceutical Dosage Forms 8th Edition (2004)。
本明細書で使用される場合、「個体」、「宿主」、「対象」、および「患者」という用語は、本明細書で互換的に使用され、それらに限定されないが、ヒト、マウスやラットなどの齧歯動物、およびその他の実験動物を含む、哺乳動物を指す。
本明細書で使用される場合、「医薬的に許容される担体」という用語は、リン酸緩衝生理食塩水、水および油／水型または水／油型エマルジョンなどのエマルジョン、および種々のタイプの湿潤剤などの、標準的な医薬担体のいずれかを包含する。
本明細書で使用される場合、「コンホメーションが制約された脂質」という用語は、その分子構造が主に、その形状が「アームチェア」に似ているアダマンタンなどの一構築物にある、脂質を指す。
「ＰＥＧ－脂質」という用語は、ポリエチレングリコールで改変された脂質を指す。例示的なＰＥＧ－脂質には、それらに限定されないが、Ｃ１４ＰＥＧ３５０、Ｃ１４ＰＥＧ１０００、Ｃ１４ＰＥＧ２０００、Ｃ１４ＰＥＧ３０００、およびＣ１８ＰＥＧ２０００が含まれる。
「オリゴヌクレオチド」という用語は、比較的少数のヌクレオチドを含有する短いＤＮＡ、ＲＮＡ、またはＤＮＡ／ＲＮＡの分子またはオリゴマーを指す。
Ａ．脂質ナノ粒子
小分子薬物、タンパク質、および核酸などの生物活性物質の効果的標的化送達は、医学の分野において継続する課題である。核酸の送達は特に、核酸の相対的不安定性および細胞透過性が低いことによって困難となっている。制約された脂質を有する脂質ナノ粒子によって、核酸を体内の特定の組織により効果的に送達することができることが発見された。一実施形態では、脂質ナノ粒子は、核酸を、コンホメーションが制約されたイオン化可能な脂質、ＰＥＧ－脂質、リン脂質、コレステロール、および必要に応じて核酸と混合することによって製剤化することができる。一部の実施形態では、脂質ナノ粒子は、ターゲティングリガンドを含有しない。一部の実施形態では、開示された脂質ナノ粒子は、ターゲティングリガンドの非存在下で肝細胞を超えてＴ細胞を優先的に標的化する。
脂質ナノ粒子のサイズは変動する。一実施形態では、脂質ナノ粒子は、約３０～約１７０ｎｍの間からの平均流体力学的径を有することができる。脂質ナノ粒子は、約３０ｎｍ、３５ｎｍ、４０ｎｍ、４５ｎｍ、５０ｎｍ、５５ｎｍ、６０ｎｍ、６５ｎｍ、７０ｎｍ、７５ｎｍ、８０ｎｍ、８５ｎｍ、９０ｎｍ、９５ｎｍ、１００ｎｍ、１０５ｎｍ、１１０ｎｍ、１１５ｎｍ、１２０ｎｍ、１２５ｎｍ、１３０ｎｍ、１３５ｎｍ、１４０ｎｍ、１４５ｎｍ、１５０ｎｍ、１５５ｎｍ、１６０ｎｍ、１６５ｎｍ、１７０ｎｍ、または前述の値のいずれか２つによって定義されたエンドポイントを有する任意の範囲である、平均流体力学的径を有することができる。例えば、一実施形態では、ナノ粒子は、５０ｎｍ～１００ｎｍの間からの平均流体力学的径を有する。
１．化合物
一部の実施形態は、式（Ｉ）：
Figure 2023505316000011
 の化合物に関する
（式中：
Ｒ１は、Ｃ９～Ｃ２０アルキルまた１～３単位の不飽和を有するＣ９～Ｃ２０アルケニルであり；
Ｘ１およびＸ２は、それぞれ独立して不在であるか、または－Ｏ－、ＮＲ２、および
Figure 2023505316000012
 から選択され、ここで、Ｒ２はＣ１～Ｃ６アルキルであり、かつＸ１およびＸ２は両方ともに－Ｏ－またはＮＲ２であることはなく；
ａは１～６の間の整数であり；
Ｘ３およびＸ４はそれぞれ独立して不在であるか、または、１もしくは２個のＣ１～Ｃ６アルキル基で必要に応じて置換された４～７員のヘテロシクリル、１もしくは２個のＣ１～Ｃ６アルキル基で必要に応じて置換された５～６員のヘテロアリール、および－ＮＲ３－からなる群から選択され、ここで、各Ｒ３は水素原子またはＣ１～Ｃ６アルキルであり；
Ｘ５は－（ＣＨ２）ｂ－であり、ここで、ｂは０～６の間の整数であり；
Ｘ６は、水素、Ｃ１～Ｃ６アルキル、１もしくは２個のＣ１～Ｃ６アルキル基で必要に応じて置換された５～６員のヘテロアリール、または－ＮＲ４Ｒ５であり、ここで、Ｒ４およびＲ５はそれぞれ独立して水素またはＣ１～Ｃ６アルキルであり；あるいは代替的に、Ｒ４およびＲ５は、これらが結合している窒素と一緒になって、１または２個のＣ１～Ｃ６アルキル基で必要に応じて置換された４～７員のヘテロシクリルを形成し、ここで、ヘテロシクリルは酸素、硫黄および窒素から選択されるさらなるヘテロ原子を必要に応じて含み；
Ｘ７は、水素または－ＮＲ６Ｒ７であり、ここで、Ｒ６およびＲ７はそれぞれ独立して水素またはＣ１～Ｃ６アルキルであり；あるいは代替的に、Ｒ６およびＲ７は、これらが結合している窒素と一緒になって、１または２個のＣ１～Ｃ６アルキル基で必要に応じて置換された４～７員のヘテロシクリルを形成し、ここで、ヘテロシクリルは酸素、硫黄および窒素から選択されるさらなるヘテロ原子を必要に応じて含み；
Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘ４、およびＸ５のうちの少なくとも１つは存在している；ただし、
Ｘ１またはＸ２のいずれかが－Ｏ－である場合は、Ｘ３もＸ４もどちらも
Figure 2023505316000013
 であることはなく、かつＸ１またはＸ２のいずれかが－Ｏ－である場合は、Ｒ４およびＲ５は両方ともにエチルであることはないことを条件とする）。
他の実施形態では、
Figure 2023505316000014
 は、
Figure 2023505316000015
 からなる群から選択されない。一部の実施形態では、Ｒ１は、
Figure 2023505316000016
 である。さらなる実施形態は、式（Ｉａ）
Figure 2023505316000017
 の化合物に関する。
一部の実施形態では、式（Ｉ）の化合物は：
Figure 2023505316000018
Figure 2023505316000019
Figure 2023505316000020
Figure 2023505316000021
Figure 2023505316000022
Figure 2023505316000023
Figure 2023505316000024
Figure 2023505316000025
Figure 2023505316000026
 からなる群から選択される。
さらなる実施形態は、式（ＩＩ）：
Figure 2023505316000027
 の化合物に関する
（式中：
Ｒ８は水素またはＣ１～Ｃ６アルキルであり；
Ｒ９は、１～４個のＣ３～Ｃ６シクロアルキル基と必要に応じて縮合しているＣ９～Ｃ２０アルキル、１～３単位の不飽和を有するＣ９～Ｃ２０アルケニル、または－（ＣＨ２）ｇ－Ｘ１７であり、ここで、Ｘ１７は、必要に応じて置換されたＣ４～Ｃ１２シクロアルキルであり；
Ｘ８およびＸ９は、それぞれ独立して不在であるか、または－Ｏ－、ＮＲ１０、および
Figure 2023505316000028
 から選択され、ここで、Ｒ１０はＣ１～Ｃ６アルキルであり、
かつＸ８およびＸ９は両方ともに－Ｏ－またはＮＲ１０であることはなく；
Ｘ１０およびＸ１１は、それぞれ独立して不在であるか、または、１もしくは２個のＣ１～Ｃ６アルキル基で必要に応じて置換された４～７員のヘテロシクリル、１もしくは２個のＣ１～Ｃ６アルキル基で必要に応じて置換された５～６員のヘテロアリール、および－ＮＲ１１－からなる群から選択され、ここで、Ｒ１１は水素原子またはＣ１～Ｃ６アルキルであり；
Ｘ１２は－（ＣＨ２）ｉ－であり；
Ｘ１３は、水素、Ｃ１～Ｃ６アルキル、１もしくは２個のＣ１～Ｃ６アルキル基で必要に応じて置換された５～６員のヘテロアリール、または－ＮＲ１２Ｒ１３であり、ここで、Ｒ１２およびＲ１３はそれぞれ独立して水素またはＣ１～Ｃ６アルキルであり；あるいは代替的に、Ｒ１２およびＲ１３は、これらが結合している窒素と一緒になって、１または２個のＣ１～Ｃ６アルキル基で必要に応じて置換された４～７員のヘテロシクリルを形成し、ここで、ヘテロシクリルは酸素、硫黄および窒素から選択されるさらなるヘテロ原子を必要に応じて含み；

Ｘ１４は、水素または－ＮＲ１４Ｒ１５であり、ここで、Ｒ１４およびＲ１５はそれぞれ独立して水素またはＣ１～Ｃ６アルキルであり；あるいは代替的に、Ｒ１４およびＲ１５は、これらが結合している窒素と一緒になって、１または２個のＣ１～Ｃ６アルキル基で必要に応じて置換された４～７員のヘテロシクリルを形成し、ここで、ヘテロシクリルは酸素、硫黄および窒素から選択されるさらなるヘテロ原子を必要に応じて含み；
ｃ、ｄ、ｅ、ｆ、ｇ、ｈ、およびｉのそれぞれは独立して０～６からの整数であり；
Ｘ８、Ｘ９、Ｘ１０、Ｘ１１、およびＸ１２のうちの少なくとも１つは存在しており；
Ｒ１６は水素または必要に応じて置換されたＣ５～Ｃ６アリールであり；
Ｘ１５は、必要に応じて置換されたＣ４～Ｃ１２シクロアルキルまたは必要に応じて置換されたＣ５～Ｃ１０アリールであり；
Ｘ１６は水素または必要に応じて置換されたＣ４～Ｃ１２シクロアルキルである；ただし、
ｆが１でありかつＲ９が
Figure 2023505316000029
 である場合、Ｘ１５は
Figure 2023505316000030
 ではない）。
一部の実施形態では、Ｒ９は
Figure 2023505316000031
 である。一部の実施形態では、Ｒ９は
Figure 2023505316000032
 である。一部の実施形態では、ｉは３であり、Ｘ８、Ｘ９、Ｘ１０、およびＸ１１、は不在であり、Ｘ１３は－ＮＲ１２Ｒ１３であり、ならびにＲ１２およびＲ１３はそれぞれメチルである。一部の実施形態では、Ｘ８、Ｘ９およびＸ１１は不在であり、ｉは０であり、Ｘ１０は
Figure 2023505316000033
 であり、かつＸ１３は
Figure 2023505316000034
 である。一部の実施形態では、ｃ、ｄ、およびｅがそれぞれ１である。一部の実施形態では、Ｒ９が
Figure 2023505316000035
 である。一部の実施形態では、Ｒ８が水素である。一部の実施形態では、Ｒ９および
Figure 2023505316000036
 がそれぞれ
Figure 2023505316000037
 である。
さらなる実施形態は、式（ＩＩａ）、（ＩＩｂ）、または（ＩＩｃ）：
Figure 2023505316000038
 の化合物に関する。
一部の実施形態では、式（ＩＩ）の化合物は：
Figure 2023505316000039
Figure 2023505316000040
Figure 2023505316000041
Figure 2023505316000042
Figure 2023505316000043
Figure 2023505316000044
Figure 2023505316000045
Figure 2023505316000046
 からなる群から選択される。
２．イオン化可能な脂質
一実施形態では、開示された脂質ナノ粒子は、イオン化可能な脂質を含む。イオン化可能な脂質は典型的には、頭部基上にアミン含有基を含む。一実施形態では、イオン化可能な脂質は、本明細書の他の場所に記載のように、コンホメーションが制約されたイオン化可能な脂質である。一部の実施形態では、コンホメーションが制約された脂質は、脂質ナノ粒子の成分の総モルに対して、３５、４５、５０、または６５モルパーセントで脂質ナノ粒子中に存在する。別の実施形態では、コンホメーションが制約された脂質は、脂質ナノ粒子の成分の総モルに対して、約３３ｍｏｌ％～約３６ｍｏｌ％で存在する。さらに別の実施形態では、コンホメーションが制約された脂質は、脂質ナノ粒子の成分の総モルに対して、約３５ｍｏｌ％で存在する。
さらなる実施形態は、コンホメーションが制約されたイオン化可能な脂質；リン脂質；ポリエチレングリコール－脂質；コレステロール；必要に応じて核酸を含む脂質ナノ粒子組成物に関する。一部の実施形態では、コンホメーションが制約されたイオン化可能な脂質は、式（Ｉ）、（Ｉａ）、（ＩＩ）、（ＩＩａ）、（ＩＩｂ）、および（ＩＩｃ）のいずれか１つによる構造を含む。一部の実施形態では、コンホメーションが制約されたイオン化可能な脂質の量は、脂質ナノ粒子の成分の総モルに対して、約３５～６５モルパーセントの範囲で存在する。
３．ステロール
一部の実施形態では、開示された脂質ナノ粒子は、１個または複数のステロールを含む。一実施形態では、ステロールはコレステロール、またはそのバリアントもしくは誘導体である。一部の実施形態では、コレステロールは改変されている、例えば、酸化されている。未改変コレステロールは、酵素による作用を受けて、側鎖が酸化されたまたは環が酸化されたバリアントを形成することができる。コレステロールは、ベータ環構造上でまたは炭化水素尾部構造上で酸化されていてもよい。開示された脂質ナノ粒子での使用が考慮される例示的なコレステロールには、それらに限定されないが、２５－ヒドロキシコレステロール（２５－ＯＨ）、２０α－ヒドロキシコレステロール（２０α－ＯＨ）、２７－ヒドロキシコレステロール、６－ケト－５α－ヒドロキシコレステロール、７－ケトコレステロール、７β－ヒドロキシコレステロール、７α－ヒドロキシコレステロール、７β－２５－ジヒドロキシコレステロール、ベータ－シトステロール、スチグマステロール、ブラシカステロール、カンペステロール、またはそれらの組合せが含まれる。一実施形態では、側鎖酸化コレステロールが、他のコレステロールバリアントと比べてカーゴ送達を増強することができる。一実施形態では、コレステロールは未改変コレステロールである。
４．ＰＥＧ－脂質
一部の実施形態では、開示されたナノ粒子組成物はまた、１つまたは複数のＰＥＧまたはＰＥＧ－改変脂質を含む。かかる脂質は、代わりに、ＰＥＧ化脂質またはＰＥＧ－脂質と呼ぶことができる。ＰＥＧ化脂質の包含を使用して、ｉｎ ｖｉｔｒｏでの脂質ナノ粒子コロイドの安定性およびｉｎ ｖｉｖｏでの循環時間を増強することができる。一部の実施形態では、ＰＥＧ化は、ＰＥＧ部分が血液循環内において徐々に放出されるという点で可逆的である。例示的なＰＥＧ－脂質には、それらに限定されないが、Ｃ６～Ｃ２０の長さを有する飽和または不飽和のアルキル鎖にコンジュゲートされたＰＥＧが含まれる。ＰＥＧ－改変ホスファチジルエタノールアミン、ＰＥＧ－改変ホスファチジン酸、ＰＥＧ－改変セラミド（ＰＥＧ－ＣＥＲ）、ＰＥＧ－改変ジアルキルアミン、ＰＥＧ－改変ジアシルグリセロール（ＰＥＧ－ＤＡＧ）、ＰＥＧ－改変ジアルキルグリセロール、およびそれらの混合物。例えば、ＰＥＧ脂質は、ＰＥＧ－ｃ－ＤＯＭＧ、ＰＥＧ－ＤＭＧ、ＰＥＧ－ＤＬＰＥ、ＰＥＧ－ＤＭＰＥ、ＰＥＧ－ＤＰＰＥ、ＰＥＧ－ＤＳＧ、またはＰＥＧ－ＤＳＰＥの各脂質とすることができる。
５．リン脂質
ナノ粒子のリン脂質成分は、１つまたは複数の（ポリ）不飽和脂質などの１つまたは複数のリン脂質を含むことができる。リン脂質は、１つまたは複数の脂質二重層に組み立てることができる。一部の実施形態では、リン脂質は、リン脂質部分および１つまたは複数の脂肪酸部分を含むことができる。
一部の実施形態では、リン脂質部分には、それらに限定されないが、ホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルグリセロール、ホスファチジルセリン、ホスファチジン酸、２－リゾホスファチジルコリン、およびスフィンゴミエリンが含まれる。一部の実施形態では、脂肪酸部分には、それらに限定されないが、ラウリン酸、ミリスチン酸、ミリストレイン酸、パルミチン酸、パルミトレイン酸、ステアリン酸、オレイン酸、リノール酸、アルファ－リノレン酸、エルカ酸、フィタン酸、アラキジン酸、アラキドン酸、エイコサペンタエン酸、ベヘン酸、ドコサペンタエン酸、およびドコサヘキサエン酸が含まれる。分岐、酸化、環化、およびアルキンを始めとする改変および置換を有する、天然種を含む非天然種もまた企図される。例えば、リン脂質は、１つまたは複数のアルキン（例えば、１つまたは複数の二重結合が三重結合によって置き換えられているアルケニル基）で官能化することができまたはそれらに架橋することができる。適当な反応条件下では、アルキン基は、アジドに暴露されると銅触媒による環付加を起こす場合がある。かかる反応は、膜透過もしくは細胞認識を容易にするためのナノ粒子組成物の脂質二重層の機能化の上で、またはターゲティング部分もしくはイメージング部分（例えば、色素）などの有用な成分へとナノ粒子組成物をコンジュゲートする上で、有用とすることができる。
例示的なリン脂質には、それらに限定されないが、以下が含まれる：１，２－ジステアロイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン（ＤＳＰＣ）、１，２－ジオレオイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホエタノールアミン（ＤＯＰＥ）、１，２－ジリノレオイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン（ＤＬＰＣ）、１，２－ジミリストイル－ｓｎ－グリセロ－ホスホコリン（ＤＭＰＣ）、１，２－ジオレオイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン（ＤＯＰＣ）、１，２－ジパルミトイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン（ＤＰＰＣ）、１，２－ジウンデカノイル－ｓｎ－グリセロ－ホスホコリン（ＤＵＰＣ）、１－パルミトイル－２－オレオイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン（ＰＯＰＣ）、１，２－ジ－０－オクタデセニル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン（１８：０ジエーテルＰＣ）、１－オレオイル－２－コレステリルヘミスクシノイル（cholesterylhemisuccinoy l）－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン（ＯＣｈｅｍｓＰＣ）、１－ヘキサデシル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン（Ｃ１６ リゾＰＣ）、１，２－ジリノレノイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン、１，２－ジアラキドノイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン、１，２－ジドコサヘキサエノイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン、１，２－ジフィタノイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホエタノールアミン（ＭＥ １６．０ ＰＥ）、１，２－ジステアロイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホエタノールアミン、１，２－ジリノレオイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホエタノールアミン、１，２－ジリノレノイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホエタノールアミン、１，２－ジアラキドノイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホエタノールアミン、１，２－ジドコサヘキサエノイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホエタノールアミン、１，２－ジオレオイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホ－ｒａｃ－（１－グリセロール）ナトリウム塩（ＤＯＰＧ）、ジパルミトイルホスファチジルグリセロール（ＤＰＰＧ）、パルミトイルオレオイルホスファチジルエタノールアミン（ＰＯＰＥ）、ジステアロイル－ホスファチジル－エタノールアミン（ＤＳＰＥ）、ジパルミトイルホスファチジルエタノールアミン（ＤＰＰＥ）、ジミリストイルホスホエタノールアミン（ＤＭＰＥ）、１－ステアロイル－２－オレオイル－ホスファチジルエタノールアミン（ＳＯＰＥ）、１－ステアロイル－２－オレオイル－ホスファチジルコリン（ＳＯＰＣ）、スフィンゴミエリン、ホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルセリン、ホスファチジルイノシトール、ホスファチジン酸、パルミトイルオレオイルホスファチジルコリン、リゾホスファチジルコリン、リゾホスファチジルエタノールアミン（ＬＰＥ）。好ましい実施形態では、リン脂質はＤＳＰＣである。別の実施形態では、リン脂質はＤＭＰＣである。
Ｅ．カーゴ
一実施形態では、開示された脂質ナノ粒子組成物は、対象への治療薬または予防薬を含む。一部の実施形態では、治療薬または予防薬は、脂質ナノ粒子によってカプセル化される。一実施形態では、脂質ナノ粒子には１つまたは複数の核酸が担持されている。
代表的な核酸には、それらに限定されないが、デオキシリボ核酸（ＤＮＡ）、リボ核酸（ＲＮＡ）ＲＮＡ、ＤＮＡ、一本鎖ＲＮＡ、一本鎖ＤＮＡ、二本鎖ＲＮＡ、二本鎖ＤＮＡ、三本鎖ＤＮＡ、ｓｉＲＮＡ、ｓｈＲＮＡ、ｓｇＲＮＡ、ｍＲＮＡ、ｍｉＲＮＡ、およびアンチセンスＤＮＡが含まれる。
ＣＲＩＳＰＲ（クラスター化され規則的に間隔が空いた短い回文構造の反復）ベースの遺伝子編集には、２つの成分：ガイドＲＮＡおよびＣＲＩＳＰＲ関連エンドヌクレアーゼタンパク質（Ｃａｓ）、が必要である。ガイドＲＮＡはＣａｓヌクレアーゼを特定の標的ＤＮＡ配列に方向づける。次いで、Ｃａｓはその部位でＤＮＡ中に二本鎖切断を作り出す。一実施形態では、開示された脂質ナノ粒子を使用して、ＣＲＩＳＰＲベースの遺伝子編集に必要な成分を運搬することができる。一脂質ナノ粒子では、核酸カーゴはガイドＲＮＡである。かかる実施形態では、第２の脂質ナノ粒子は、ＲＮＡガイドエンドヌクレアーゼをコードする核酸カーゴを含有することができる。２種類の脂質ナノ粒子を一緒に投与することができる。例示的なＲＮＡガイドエンドヌクレアーゼには、それらに限定されないが、Ｃａｓ９、ＣａｓＸ、ＣａｓＹ、Ｃａｓ１３、またはＣｐｆ１が含まれる。
一実施形態では、カーゴはｓｉＲＮＡである。短い干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）とは、配列特異的な転写後の遺伝子サイレンシングを誘導し、それによって遺伝子発現を減少または抑制さえすることができる二本鎖ＲＮＡである。一例では、ｓｉＲＮＡは、ｓｉＲＮＡと標的ＲＮＡとの両方の間の配列同一性の領域内で、ｍＲＮＡなどの相同ＲＮＡ分子の特異的分解を誘発する。例えば、国際公開第０２／４４３２１号パンフレットは、３’突出末端と塩基対合する場合に標的ｍＲＮＡの配列特異的分解が可能なｓｉＲＮＡについて開示しており、これらのｓｉＲＮＡを作製する方法について参照により本明細書に組み込まれる。配列特異的遺伝子サイレンシングは、酵素ダイサーによって生成されたｓｉＲＮＡを模倣する、合成である、短い二本鎖ＲＮＡを使用して哺乳動物細胞で行うことができる（Elbashir, et al. (2001) Nature, 411:494 498）（Ui-Tei, et al. (2000) FEBS Lett 479:79-82）。
一実施形態では、脂質ナノ粒子は、抑制性核酸１．０ｍｇ／ｋｇ未満を含有する。ナノ粒子は、抑制性核酸１．０、０．９、０．８、０．７、０．６、または０．５ｍｇ／ｋｇを含有することができる。別の実施形態では、脂質ナノ粒子は、抑制性核酸０．５ｍｇ／ｋｇを含有する。このことは、現在の技術に勝る利点である。現在の技術では、ナノ粒子は、遺伝子サイレンシングを得るのに高用量の核酸（＞１ｍｇ／ｋｇ）を必要とし、その用量はヒトの送達用には承認されていない。開示された技術は、ターゲティングリガンドを含まない脂質ナノ粒子中の抑制性核酸０．５ｍｇ／ｋｇを使用して、遺伝子サイレンシングを達成することができる。
一部の実施形態では、核酸は、それに限定されないがオリゴヌクレオチドを含めて、安定性、半減期、およびヌクレアーゼ感受性を向上させるために改変されるか、またはもう１つの改変ヌクレオチドを含む。ヌクレアーゼ感受性を制限するために、天然のホスホジエステルオリゴデオキシリボヌクレオチド、天然のホスホジエステルオリゴリボヌクレオチド、リボヌクレオチドポリマー、およびデオキシリボヌクレオチドポリマーは、異なるもう１つの改変を含むことができる。例示的な改変には、それらに限定されないが、ホスホロチオエート（phosphorothioate）（ＰＳ）結合、２”－Ｏメチル（２’ＯＭｅ）、２’フルオロ塩基、反転ｄＴおよびｄｄＴ、オリゴヌクレオチドの３’末端のリン酸化、ロック核酸が含まれ、およびホスホルアミダイトＣ３スペーサーが含まれる。
ホスホロチオエート（phosphorothioate）結合は、オリゴヌクレオチドのリン酸骨格中の非架橋酸素の代わりに硫黄原子を用いる。およそ５０％の割合（形成することができる結果として生じる２つの立体異性体に起因する）で、ＰＳ改変により、ヌクレオチド間リンケージがヌクレアーゼ分解に対してより耐性となる。一部の実施形態では、核酸は、エキソヌクレアーゼ分解を抑制するように、１つまたは複数のＰＳ結合、例えば、５’および３’のオリゴヌクレオチド末端に少なくとも３つのＰＳ結合を含む。一部の核酸は、エンドヌクレアーゼによる攻撃を低減するのにも役立ように、オリゴヌクレオチド全体を通してＰＳ結合を含む。
ＲＮＡの天然に存在する転写後改変である２’ＯＭｅは、ｔＲＮＡおよび他の小ＲＮＡに見られる。一部の実施形態では、核酸またはオリゴヌクレオチドは、２’ＯＭｅを含有するように直接合成される。本改変により、ＲＮＡ：ＲＮＡ二重鎖のＴｍが向上するが、ＲＮＡ：ＤＮＡ安定性では小変化のみがもたらされる。本改変は、一本鎖エンドヌクレアーゼによる攻撃を防止するが、エキソヌクレアーゼ消化は防止しない。一部の実施形態では、こういった核酸またはオリゴヌクレオチドはまた、末端ブロックされている。本改変を含むＤＮＡオリゴヌクレオチドは通常、非改変のＤＮＡよりもＤＮａｓｅへの影響を５分の１～１０分の１受けにくい。２’ＯＭｅ改変は、安定性および標的転写物への結合親和性を向上させる手段として、アンチセンスオリゴヌクレオチドにおいてよく使用されている。
２’－フルオロ塩基はフッ素改変リボースを有するが、これは、結合親和性（Ｔｍ）を向上させるとともに、天然ＲＮＡと比較して、いくらかの相対的なヌクレアーゼ耐性も付与する。一部の実施形態では、核酸またはオリゴヌクレオチドは、ＰＳ改変結合と併せて２’フルオロ塩基を含む。
反転ｄＴは、オリゴヌクレオチドの３’末端に組み込むことができ、３’エキソヌクレアーゼによる分解およびＤＮＡポリメラーゼによる伸長を抑制することになる３’－３’リンケージをもたらす。加えて、オリゴヌクレオチドの５’末端に反転２’，３’ジデオキシ－ｄＴ塩基（５’反転ｄｄＴ）を配置することで、スプリアスライゲーションが防止され、かつ一部の形態の酵素分解を防御することができる。
一部の実施形態は、ホスホルアミダイトＣ３スペーサーを含む核酸またはオリゴヌクレオチドを提供する。ホスホルアミダイトＣ３スペーサーは、内部に組み込むこともでき、または、オリゴのいずれかの末端に組み込んで、フルオロフォアまたは他のペンダント基の付着向けに長い親水性スペーサーアームを導入することもできる。Ｃ３スペーサーを使用して、３’エキソヌクレアーゼによる分解を抑制することもできる。
一部の実施形態では、核酸またはオリゴヌクレオチドは、ロック核酸を含む。ロック核酸には、リボースの２’－Ｏ原子および４’－Ｃ原子がメチレン架橋を通して結合している改変ＲＮＡヌクレオチドが含まれる。このさらなる架橋は、通常は環に関連する可撓性を制限し、構造を剛性な立体構造に本質的にロックする。ＬＮＡは、ＲＮＡとＤＮＡとのオリゴヌクレオチドの両方に挿入することができる。
開示されたナノ粒子を介して送達することができる他のタイプのカーゴには、それらに限定されないが、化学療法剤、細胞傷害性薬物、放射性イオン、小分子、タンパク質、ポリヌクレオチド、および核酸が含まれる。
代表的な化学療法剤には、それらに限定されないが、以下が含まれる：アムサクリン、ブレオマイシン、ブスルファン、カペシタビン、カルボプラチン、カルムスチン、クロラムブシル、シスプラチン、クラドリビン、クロファラビン、クリサンタスパーゼ、シクロホスファミド、シタラビン、ダカルバジン、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、ドセタキセル、ドキソルビシン、エピルビシン、エトポシド、フルダラビン、フルオロウラシル、ゲムシタビン、ヒドロキシカルバミド、イダルビシン、イホスファミド、イリノテカン、ロイコボリン、リポソームドキソルビシン、リポソームダウノルビシン、ロムスチン、メルファラン、メルカプトプリン、メスナ、メトトレキサート、マイトマイシン、ミトキサントロン、オキサリプラチン、パクリタキセル、ペメトレキセド、ペントスタチン、プロカルバジン、ラルチトレキセド、サトラプラチン、ストレプトゾシン、テガフール－ウラシル、テモゾロミド、テニポシド、チオテパ、チオグアニン、トポテカン、トレオスルファン、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ビンデシン、ビノレルビン、またはこれらの組合せ。代表的なアポトーシス促進剤には、それらに限定されないが、フルダラビンタウロスポリン（fludarabinetaurosporine）、シクロヘキシミド、アクチノマイシンＤ、ラクトシルセラミド、１５ｄ－ＰＧＪ（２）、およびこれらの組合せが含まれる。
一部の実施形態は、それを必要とする対象に核酸を送達する方法であって、本明細書に記載の脂質ナノ粒子組成物を対象に投与するステップを含む方法に関する。一部の実施形態では、核酸は、ｓｉＲＮＡ、ｍｉＲＮＡ、アンチセンスオリゴヌクレオチド、または免疫刺激性オリゴヌクレオチドである。
Ｂ．例示的な脂質ナノ粒子製剤
一実施形態では、脂質ナノ粒子製剤は、コンホメーションが制約されたイオン化可能な脂質約３０ｍｏｌ％～約７０ｍｏｌ％、リン脂質約５ｍｏｌ％～約２５ｍｏｌ％、コレステロール約２５ｍｏｌ％～約４５ｍｏｌ％、およびＰＥＧ－脂質約０ｍｏｌ％～約５ｍｏｌ％を含む。別の実施形態では、脂質ナノ粒子製剤は、コンホメーションが制約されたイオン化可能な脂質約３５ｍｏｌ％、リン脂質約１６ｍｏｌ％、コレステロール約４６．５ｍｏｌ％、およびＰＥＧ－脂質約２．５ｍｏｌ％を含む。別の実施形態では、脂質ナノ粒子製剤は、コンホメーションが制約されたイオン化可能な脂質約５０ｍｏｌ％、リン脂質約１０ｍｏｌ％、コレステロール約３８．５ｍｏｌ％、およびＰＥＧ－脂質約１．５ｍｏｌ％を含む。
一実施形態は、以下の４成分の総モルに対して、アダマンタン尾部を備えるコンホメーションが制約されたイオン化可能な脂質約３３ｍｏｌ％～約３６ｍｏｌ％、１－２－ジステアロイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン約１５ｍｏｌ％～約１７ｍｏｌ％、Ｃ１４ＰＥＧ２０００約２ｍｏｌ％～約３ｍｏｌ％、およびコレステロール約４５ｍｏｌ％～約４７ｍｏｌ％、を含む脂質ナノ粒子製剤を提供する。
別の実施形態は、以下の４成分の総モルに対して、アダマンタン尾部を備えるコンホメーションが制約されたイオン化可能な脂質３５ｍｏｌ％、１－２－ジステアロイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン１６ｍｏｌ％、Ｃ１４ＰＥＧ２０００２．５ｍｏｌ％、およびコレステロール４６ｍｏｌ％、を含む脂質ナノ粒子製剤を提供する。
別の実施形態は、（イオン化可能な脂質、コレステロール、脂質－ＰＥＧ、およびリン脂質）：ｓｉＲＮＡの質量比が約２：１～５０：１の間である脂質ナノ粒子製剤を提供する。
さらに別の実施形態では、脂質ナノ粒子製剤は、３－［（１－アダマンタニル）アセトキシ］－２－｛［３－（ジエチルアミノ）プロポキシカルボニルオキシ］メチル｝プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－９，１２－オクタデカジエノエート、ＤＳＰＣ、ポリエチレングリコール－脂質、コレステロール、および抑制性核酸を含む。
一実施形態は、３－［（１－アダマンタニル）アセトキシ］－２－｛［３－（ジエチルアミノ）プロポキシカルボニルオキシ］メチル｝プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－９，１２－オクタデカジエノエート、ＤＳＰＣ、ポリエチレングリコール－脂質、コレステロール、および遺伝子に特異的なｓｇＲＮＡ、を含有する脂質ナノ粒子組成物を提供する。別の実施形態は、３－［（１－アダマンタニル）アセトキシ］－２－｛［３－（ジエチルアミノ）プロポキシカルボニルオキシ］メチル｝プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－９，１２－オクタデカジエノエート、ＤＳＰＣ、ポリエチレングリコール－脂質、コレステロール、およびＲＮＡガイドのＤＮＡエンドヌクレアーゼをコードするｍＲＮＡ、を含む脂質ナノ粒子を提供する。
Ｃ．医薬組成物
開示された脂質ナノ粒子を含む医薬組成物が提供される。脂質ナノ粒子組成物は、全体的または部分的に医薬組成物として製剤化することができる。医薬組成物は、１つまたは複数のナノ粒子組成物を含むことができる。例えば、医薬組成物は、それらに限定されないが、異なるタイプの１つまたは複数の核酸を含む１つもしくは複数の異なる治療薬および／または予防薬が含まれる１つまたは複数のナノ粒子組成物を含むことができる、または、異なる薬剤をコードすることができる。一部の実施形態では、医薬組成物は、それに限定されないが、医薬的に許容される担体を始めとして１つまたは複数の医薬的に許容される賦形剤または副成分を含む。
ナノ粒子を含有する医薬組成物は、非経口（筋肉内、腹腔内、静脈内（ＩＶ）または皮下の各注射）、経皮（受動的にまたはイオン導入もしくは電気穿孔を使用していずれか）、または経粘膜（経鼻、膣、直腸または舌下）の各投与経路による、あるいは生体侵食性挿入物を使用することによる投与向けに製剤化することができるとともに、各投与経路に適当な剤形で製剤化することができる。
一部のｉｎ ｖｉｖｏアプローチでは、本明細書に開示されたナノ粒子組成物は、治療有効量で対象に投与される。本明細書で使用される場合、「有効量」または「治療有効量」という用語は、処置される障害の１つまたは複数の症状を処置、抑制または緩和するのに、それとも所望の薬理学的効果および／または生理学的効果を提供するのに十分な投薬量を意味する。正確な投薬量は、対象に依存する可変要素（例えば、年齢、免疫系の健康など）、疾患、および行われている処置などの様々な因子に応じて変化するであろう。
開示されたナノ粒子について、さらなる研究を実施するにつれて、様々な患者の様々な状態を処置するための適当な投薬量レベルに関して情報が明らかとなり、そして当業者は、レシピエントの治療状況、年齢および健康全般を考慮して、適切な投薬を確認することができることになる。選択される投薬量は、所望の治療効果に、投与経路に、および所望の処置の持続時間に依存する。開示されたナノ粒子については、一般に、毎日、体重１ｋｇあたり核酸０．００１ｍｇ～５ｍｇの投薬レベルが哺乳動物に投与される。より具体的には、開示されたナノ粒子の優先的用量は、０．０１ｍｇ／ｋｇ～０．２５ｍｇ／ｋｇである。開示されたナノ粒子については、一般に、４成分（イオン化可能な脂質、コレステロール、ＰＥＧ－脂質、およびリン脂質）０．２ｍｇ～１００ｍｇ／体重１ｋｇの投薬レベルが哺乳動物に投与される。より具体的には、開示されたナノ粒子の優先的用量は、０．０５ｍｇ／ｋｇ～０．５ｍｇ／４成分１ｋｇ／体重１ｋｇである。
ある特定の実施形態では、脂質ナノ粒子組成物は、例えば、処置される部位へと直接注射によって、局所的に投与される。典型的には、注射によって、全身投与によって得ることができるものよりも大きい、脂質ナノ粒子組成物の局所濃度の上昇がもたらされる。脂質ナノ粒子組成物は、上記のマトリクスと組み合わされて、処置される部位から外へのポリペプチドの受動拡散を減少させることで、ポリペプチド組成物の局所濃度の上昇を生み出す上で役立つことができる。
１．非経口投与向けの製剤
一部の実施形態では、本明細書に開示されたナノ粒子組成物は、脂質ナノ粒子を含有するものを含めて、非経口注射によって水溶液で投与される。製剤はまた、懸濁液またはエマルジョンの形態とすることができる。一般に、医薬組成物は、有効量の脂質ナノ粒子を含む形で提供され、必要に応じて、医薬的に許容される希釈剤、防腐剤、可溶化剤、乳化剤、アジュバントおよび／または担体を含む。かかる組成物は必要に応じて、以下について１つまたは複数を含む：希釈剤、滅菌水、種々の緩衝剤内容物（例えば、トリス－ＨＣｌ、酢酸塩、リン酸塩）、ｐＨおよびイオン強度の緩衝生理食塩水；ならびに界面活性剤および可溶化剤（例えば、ＴＷＥＥＮ ２０（ポリソルベート－２０）、ＴＷＥＥＮ ８０（ポリソルベート－８０））、抗酸化剤（例えば、アスコルビン酸、メタ重亜硫酸ナトリウム）、および保存剤（例えば、チメロサール、ベンジルアルコール）、および嵩高物質（例えば、ラクトース、マンニトール）などの添加剤。非水性溶媒またはビヒクルの例は、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、オリーブ油およびコーン油などの植物油、ゼラチン、ならびにオレイン酸エチルなどの注射用有機エステルである。製剤は凍結乾燥され、使用直前に再溶解／再懸濁することができる。製剤は、例えば、細菌保持フィルターを通したろ過によって、滅菌剤を組成物に組み込むことによって、組成物を照射することによって、または組成物を加熱することによって、滅菌することができる。
２．制御送達ポリマーマトリクス
本明細書に開示された脂質ナノ粒子はまた、制御放出製剤で投与することができる。制御放出ポリマーデバイスを、ポリマーデバイス（ロッド、シリンダー、フィルム、ディスク）の埋込みまたは注射（マイクロ粒子）の後、全身的に長期放出するために作製することができる。マトリクスはミクロスフェアなどのマイクロ粒子の形態とすることができるが、この場合、薬剤が固体ポリマーマトリクスまたはマイクロカプセル内に分散しており、ここで、コアはポリマーシェルとは異なる材料でできており、ペプチドは、本質的に液体であっても固体であってもよいコアに分散または懸濁している。本明細書で特に定義がない限り、マイクロ粒子、ミクロスフェア、およびマイクロカプセルは互換的に使用される。あるいは、ポリマーは、数ナノメートルから４センチメートルに及ぶ薄スラブもしくはフィルム、粉砕もしくはその他の標準技法によって製造される粉末、またはさらにはヒドロゲルなどのゲルとしてキャストすることができる。
非生分解性または生分解性マトリクスのいずれかを脂質ナノ粒子の送達に使用することができるが、一部の実施形態では、生分解性マトリクスが好ましい。これらは天然のポリマーであっても合成ポリマーであってもよいが、分解および放出プロファイルに関して特性評価がより良好であることに起因して、一部の実施形態では合成ポリマーが好ましい。ポリマーは、放出が所望される期間に基づいて選択される。線形放出が最も有用であり得る場合もあり、パルス放出または「バルク放出」がより効果的な結果をもたらす場合もある。ポリマーは、ヒドロゲルの形態とすることができ（典型的には、最大約９０重量％の水を吸収する上で）、必要に応じて、多価イオンまたはポリマーと架橋することができる。
マトリクスは、溶媒蒸発、噴霧乾燥、溶媒抽出および当業者に知られているその他の方法によって形成することができる。生体侵食性ミクロスフェアは、例えば、Mathiowitz and Langer, J. Controlled Release, 5:13-22 (1987)；Mathiowitz, et al., Reactive Polymers, 6:275-283 (1987)；およびMathiowitz, et al., J. Appl. Polymer Sci., 35:755-774 (1988)によって記載の、薬物送達用のミクロスフェアを作製するために開発された方法のいずれかを使用して調製することができる。
デバイスは、埋込みまたは注射の領域を処置する局所放出用に － これは通常、全身の処置用の投薬量よりもはるかに少ない投薬量を送達することになる － または全身送達用に、製剤化することができる。これらは、筋肉、脂肪へと皮下に埋め込むかもしくは注射するか、または嚥下することができる。
Ｄ．脂質ナノ粒子を製造する方法
脂質ナノ粒子を製造する方法は、当技術分野で知られている。一実施形態では、開示された脂質ナノ粒子は、マイクロフルイディクスを使用して製造される。マイクロフルイディクスを使用して脂質ナノ粒子を形成する例示的な方法については、Leung, A.K.K, et al., J Phys Chem, 116:18440-18450 (2012)、Chen, D., et al., J Am Chem Soc, 134:6947-6951 (2012)、およびBelliveau, N.M., et al., Molecular Therapy- Nucleic Acids, 1: e37 (2012)を参照されたい。要約すると、オリゴヌクレオチドやｓｉＲＮＡなどのカーゴはある緩衝剤中で調製される。他の脂質ナノ粒子成分（イオン化可能な脂質、ＰＥＧ－脂質、コレステロール、およびＤＳＰＣ）は、別の緩衝剤中で調製される。シリンジポンプによって、２つの溶液をマイクロ流体デバイスに導入する。２つの溶液は、マイクロ流体デバイス内で接触して、カーゴをカプセル化する脂質ナノ粒子を形成する。
開示された脂質ナノ粒子をスクリーニングする方法は、国際特許出願ＰＣＴ／ＵＳ／２０１８／０５８１７１号において論議されており、参照によりその全体が組み込まれる。スクリーニング方法によって、ビヒクル型送達製剤（vehicle delivery formulation）が特徴付けられて、所望の向性を備え、かつ特定の細胞の細胞質へと機能的なカーゴを送達する製剤が特定される。スクリーニング方法では、細胞に送達される場合に検出することができる機能を有するレポーターを使用する。細胞内でレポーターの機能が検出されるということは、送達ビヒクルを製剤化することで、機能的なカーゴが細胞に送達されることになることを指示するものである。化学組成識別子を、異なる送達ビヒクルの製剤それぞれに含めて、異なる送達ビヒクルの製剤それぞれに固有の化学組成を絶えず追跡する。一実施形態では、化学組成識別子は核酸バーコードである。核酸バーコードの配列と、これがロードされている送達ビヒクルを製剤化するのに使用される化学成分とを対にすることで、核酸バーコードを配列決定した際に、バーコードを送達した送達ビヒクルの化学組成が特定される。代表的なレポーターには、それらに限定されないが、ｓｉＲＮＡ、ｍＲＮＡ、ヌクレアーゼタンパク質、ヌクレアーゼｍＲＮＡ、小分子、エピジェネティック改変因子、および表現型改変因子が含まれる。
Ｅ．使用の方法
特定の細胞または臓器にカーゴ、例えば核酸を送達するために開示された脂質ナノ粒子を使用する方法が本明細書に開示されている。一部の実施形態では、本ナノ粒子によって、ターゲティングリガンドの不在下で、それを必要とする対象における特定の細胞または臓器に治療薬または予防薬が送達される。別の実施形態では、開示された脂質ナノ粒子は、それを必要とする対象において疾患を処置または防止するのに有用である。
一部の実施形態では、開示されたナノ粒子は対象に直接送達される。他の実施形態では、脂質ナノ粒子はｅｘ ｖｉｖｏで細胞と接触され、処理された細胞が対象に投与される。細胞は、自家細胞、例えば、それらに限定されないが、Ｔ細胞またはＴ細胞に分化する細胞を含めて、免疫細胞とすることができる。一部の実施形態では、開示された脂質ナノ粒子は、養子細胞移入用のビヒクルとして使用することができる。
１．カーゴを細胞に送達する方法
治療用および／または予防用の核酸を、それを必要とする対象に送達する方法が本明細書に提供される。
一部の実施形態では、開示された脂質ナノ粒子組成物は、特定のタイプまたはクラスの細胞（例えば、特定の臓器またはその系の細胞）を標的とする。例えば、目的の治療薬および／または予防薬を含むナノ粒子組成物を、対象の免疫細胞に特異的に送達することができる。例示的な免疫細胞には、それらに限定されないが、ＣＤ８＋、ＣＤ４＋、またはＣＤ８＋ＣＤ４＋の各細胞が含まれる。他の実施形態では、脂質ナノ粒子を、ターゲティングリガンドの不在下で、哺乳動物の肝臓免疫細胞、脾臓Ｔ細胞、または肺内皮細胞に送達されるように製剤化することができる。特定のクラスまたはタイプの細胞への送達が特異的であることは、より高い割合の脂質ナノ粒子が標的タイプまたはクラスの細胞に送達されることを指示する。一部の実施形態では、送達が特異的であることによって、標的とする送付先の組織１ｇあたりで、治療薬および／または予防薬の量において２倍、５倍、１０倍、１５倍、または２０倍を超える上昇をもたらすことができる。
２．遺伝子調節の方法
遺伝子調節のために、開示された脂質ナノ粒子を使用する方法が本明細書に提供される。一実施形態では、脂質ナノ粒子は、それを必要とする対象の標的細胞における遺伝子発現を低減させるために使用することができる。脂質ナノ粒子は、ターゲティングリガンドなしで、対象の標的細胞に抑制性核酸を送達することができる。抑制性核酸はｓｉＲＮＡとすることができる。
別の実施形態は、それを必要とする対象の細胞において遺伝子を編集するために、開示された脂質ナノ粒子を使用する方法を提供する。
一実施形態では、遺伝子調節のために標的とされる細胞は免疫細胞である。免疫細胞は、ＣＤ８＋ Ｔ細胞、ＣＤ４＋ Ｔ細胞、または制御性Ｔ細胞などのＴ細胞とすることができる。遺伝子編集のための他の例示的な免疫細胞には、それらに限定されないが、マクロファージ、樹状細胞、Ｂ細胞またはナチュラルキラー細胞が含まれる。
標的化することができる例示的な遺伝子には、それらに限定されないが、以下が含まれる：Ｔ細胞受容体、Ｂ細胞受容体、ＣＴＬＡ４、ＰＤ１、ＦＯＸＯ１、ＦＯＸＯ３、ＡＫＴ、ＣＣＲ５、ＣＸＣＲ４、ＬＡＧ３、ＴＩＭ３、キラー免疫グロブリン様受容体、ＧＩＴＲ、ＢＴＬＡ、ＬＦＡ－４、Ｔ４、ＬＦＡ－１、Ｂｐ３５、ＣＤ２７Ｌ受容体、ＴＮＦＲＳＦ８、ＴＮＦＲＳＦ５、ＣＤ４７、ＣＤ５２、ＩＣＡＭ－１、ＬＦＡ－３、Ｌ－セレクチン、Ｋｉ－２４、ＭＢ１、Ｂ７、Ｂ７０、Ｍ－ＣＳＦＲ、ＴＮＦＲ－ＩＩ、ＩＬ－７Ｒ、ＯＸ－４０、ＣＤ１３７、ＣＤ１３７Ｌ、ＣＤ３０Ｌ、ＣＤ４０Ｌ、ＦａｓＬ、ＴＲＡＩＬ、ＣＤ２５７、ＬＩＧＨＴ、ＴＲＡＩＬ－Ｒ１、ＴＲＡＩＬＲ２、ＴＲＡＩＬ－Ｒ４、ＴＷＥＡＫ－Ｒ、ＴＮＦＲ、ＢＣＭＡ、Ｂ７ＤＣ、ＢＴＬＡ、Ｂ７－Ｈ１、Ｂ７－Ｈ２、Ｂ７－Ｈ３、ＩＣＯＳ、ＶＥＧＦＲ２、ＮＫＧ２Ｄ、ＪＡＧ１、ＧＩＴＲ、ＣＤ４、ＣＣＲ２、ＧＡＴＡ－３、ＭＴＯＲＣ１、ＭＴＯＲＣ２、ＲＡＰＴＯＲ、ＧＡＴＯＲ、ＦＯＸＰ３、ＮＦＡＴ、ＩＬ２Ｒ、およびＩＬ７。
Ｔ細胞が認識することができるとともにターゲティングが企図される例示的な腫瘍関連抗原には、それらに限定されないが、ＭＡＧＥ１、ＭＡＧＥ３、ＭＡＧＥ６、ＢＡＧＥ、ＧＡＧＥ、ＮＹＥＳＯ－１、ＭＡＲＴ１／Ｍｅｌａｎ Ａ、ＭＣ１Ｒ、ＧＰ１００、チロシナーゼ、ＴＲＰ－１、ＴＲＰ－２、ＰＳＡ、ＣＥＡ、Ｃｙｐ－Ｂ、Ｈｅｒ２／Ｎｅｕ、ｈＴＥＲＴ、ＭＵＣ１、ＰＲＡＭＥ、ＷＴ１、ＲＡＳ、ＣＤＫ－４、ＭＵＭ－１、ＫＲＡＳ、ＭＳＬＮおよびβ－カテニンが含まれる。
３．処置される対象
一部の実施形態では、処置される対象は、がん、自己免疫疾患、感染症、臓器移植、臓器不全、またはそれらの組合せを経験している哺乳動物である。一部の実施形態では、本明細書に記載の方法は、Ｔ細胞に、がんまたは自己免疫疾患の処置向けに特異的抗原を提示させることができる。一部の実施形態では、本明細書に記載の方法を、Ｔ細胞プライミングのために使用することができる。一部の実施形態では、本明細書に記載の方法を、Ｔ細胞にＭＨＣ－ペプチド複合体を提示させるＤＮＡまたはｍＲＮＡを送達するために使用することができる。一部の実施形態では、本明細書に記載の方法を、ＤＮＡ、ｓｉＲＮＡ、またはｍＲＮＡのうちの１つまたは複数をＴ細胞に送達してアネルギーを回避するために、使用することができる。
一般的注記事項：すべての反応は、特に断りのない限り、無水グレードの溶媒を使用して、窒素雰囲気下でフラスコまたはバイアル中で磁気撹拌しながら進行させた。無水溶媒はＳｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈから購入し、そのまま使用した。フラッシュカラムクロマトグラフィーを、プレパックされたＢｉｏｔａｇｅ Ｓｆａｒシリカゲルカートリッジを備えたＢｉｏｔａｇｅ ＳｅｌｅｋｔまたはＴｅｌｅｄｙｎｅ－Ｉｓｃｏ Ｃｏｍｂｉｆｌａｓｈ Ｎｅｘｔｇｅｎ３００＋を使用して実施した。Ｍｅｒｃｋシリカゲル６０プレートを使用して薄層クロマトグラフィーを実施し、ヨウ素を使用して化合物を可視化した。核磁気共鳴（ＮＭＲ）分光法を、Ｖａｒｉａｎ ＩＮＯＶＡ ５００ＭＨｚ分光計を使用して実施した；化学シフトは、δ＝７．２６ｐｐｍにてのＣＨＣｌ３の残留溶媒ピークを基準にしてテトラメチルシランの高磁場方向へδパーツパーミリオン（ｐｐｍ）で表示する。液体クロマトグラフィー－質量分析（ＬＣＭＳ）を、Ｗａｔｅｒｓ Ａｃｑｕｉｔｙ ＵＰＬＣ ＢＥＨ Ｃ１８カラム（１３０Å、１．７μＭ、２．１ｍｍ×５０ｍｍ）を装備したＱＤａ検出器（ＥＳＩ）を備えたＷａｔｅｒｓ Ａｃｑｕｉｔｙ ＵＰＬＣ Ｈ－ｃｌａｓｓ Ｐｌｕｓを使用して実施した。特に記載がない限り、化合物は以下の一般的なＬＣＭＳ法を使用して分析した。溶媒Ａ＝水＋０．１％ギ酸、溶媒Ｂ＝アセトニトリル；３分かけて９０％Ａ、１０％Ｂから５％Ａ、９５％Ｂへの勾配、次いで９５％Ｂで２分間保持し、次いで１分かけて１０％Ｂにランプバック；流量＝０．５ｍＬ／分。
略語のリスト
ＡＯＰ：（７－アザベンゾトリアゾール－１－イルオキシ）トリス（ジメチルアミノ）ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート
ＤＣＭ：ジクロロメタン
ＤＩＰＥＡ：Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン
ＤＭＡＰ：４－（ジメチルアミノ）ピリジン
ＤＭＰＣ：１，２－ジミリストイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン
ＤＳＰＣ：１，２－ジステアロイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン
ＥＤＣ：Ｎ－（３－ジメチルアミノプロピル）－Ｎ’－エチルカルボジイミド塩酸塩
Ｅｑ：当量
ＥＳＩ：エレクトロスプレーイオン化
ＬＣＭＳ：液体クロマトグラフィー－質量分析
ＬＮＰ：脂質ナノ粒子
ＮＭＲ：核磁気共鳴
ＲＴ：保持時間
[実施例１]
３－（２－（（３ｒ，５ｒ，７ｒ）－アダマンタン－１－イル）アセトキシ）－２－（（（（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノイル）オキシ）メチル）プロピル１’－エチル－［１，４’－ビピペリジン］－４－カルボキシレート（１）
Figure 2023505316000047
ステップ１：３－ヒドロキシ－２－（ヒドロキシメチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエート
Figure 2023505316000048
トリメチロールメタン（３．０ｇ、１Ｅｑ、２８ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（１００ｍＬ）に溶かした混合物に、リノール酸（７．９ｇ、１Ｅｑ、２８ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（５．５ｇ、７．４ｍＬ、１．５Ｅｑ、４２ｍｍｏｌ）、およびＤＭＡＰ（０．６９ｇ、０．２Ｅｑ、５．７ｍｍｏｌ）を添加した。最後にＥＤＣ（８．１ｇ、１．５Ｅｑ、４２ｍｍｏｌ）を添加し、２３℃で１８時間撹拌した。この時間の後、反応混合物を濃縮し、フラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ２００ｇ、２０分にわたりヘキサン中の０～９０％酢酸エチル）によって精製した。３－ヒドロキシ－２－（ヒドロキシメチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエート（２．６ｇ、２５％）を無色油状物として得た。1H NMR (500 MHz, クロロホルム-d) δ 5.43 - 5.27 (m, 5H), 4.24 (d, J = 6.3 Hz, 2H), 3.76 (ddt, J = 21.1, 11.1, 5.3 Hz, 4H), 2.77 (d, J = 6.8 Hz, 2H), 2.61 - 2.55 (m, 2H), 2.36 - 2.29 (m, 2H), 2.10 - 1.98 (m, 6H), 1.66 - 1.58 (m, 2H), 1.41 - 1.21 (m, 12H), 0.92 - 0.85 (m, 3H).
ステップ２：３－（２－（（３ｒ，５ｒ，７ｒ）－アダマンタン－１－イル）アセトキシ）－２－（ヒドロキシメチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエート
Figure 2023505316000049
３－ヒドロキシ－２－（ヒドロキシメチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエート（２．６ｇ、１Ｅｑ、７．１ｍｍｏｌ）を、ジクロロメタン（３０ｍＬ）に溶かした溶液に、２－（アダマンタン－１－イル）酢酸（１．４ｇ、１Ｅｑ、７．１ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（１．８ｇ、２Ｅｑ、１４ｍｍｏｌ）およびＤＭＡＰ（０．１７ｇ、０．２Ｅｑ、１．４ｍｍｏｌ）を添加した。最後にＥＤＣ（２．０ｇ、１．５Ｅｑ、１１ｍｍｏｌ）を添加し、２３℃で１８時間撹拌した。この時間の後、反応混合物を濃縮し、フラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ１００ｇ、２０分にわたりヘキサン中の０～４０％酢酸エチル）によって精製した。３－（２－（（３ｒ，５ｒ，７ｒ）－アダマンタン－１－イル）アセトキシ）－２－（ヒドロキシメチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエート（１．８６ｇ、４８％）を無色油状物として得た。1H NMR (500 MHz, クロロホルム-d) δ 5.41 - 5.28 (m, 4H), 4.23 - 4.10 (m, 5H), 3.62 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 2.76 (tt, J = 6.6, 0.9 Hz, 2H), 2.35 - 2.27 (m, 3H), 2.19 (七重線, J = 5.9 Hz, 1H), 2.10 - 1.99 (m, 6H), 1.97 (p, J = 2.9 Hz, 3H), 1.74 - 1.57 (m, 17H), 1.39 - 1.23 (m, 10H), 0.92 - 0.85 (m, 3H).
ステップ３：３－（２－（（３ｒ，５ｒ，７ｒ）－アダマンタン－１－イル）アセトキシ）－２－（（（（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノイル）オキシ）メチル）プロピル１’－エチル－［１，４’－ビピペリジン］－４－カルボキシレート
（１）
Figure 2023505316000050
３－（２－（（３ｒ，５ｒ，７ｒ）－アダマンタン－１－イル）アセトキシ）－２－（ヒドロキシメチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエート（５０ｍｇ、１Ｅｑ、９２μｍｏｌ）をジクロロメタン（３０ｍＬ）に溶かした溶液に、１’－エチル－［１，４’－ビピペリジン］－４－カルボン酸二塩酸塩（２９ｍｇ、１Ｅｑ、９２μｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（５３ｍｇ、７２μＬ、４．５Ｅｑ、０．４１ｍｍｏｌ）、およびＤＭＡＰ（２．２ｍｇ、０．２Ｅｑ、１８μｍｏｌ）を添加した。最後にＥＤＣ（３５ｍｇ、２Ｅｑ、０．１８ｍｍｏｌ）を添加し、２３℃で１８時間撹拌した。この時間の後、反応混合物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ１０ｇ、１２分にわたりジクロロメタン中の０～２５％メタノール）によって直接精製した。３－（２－（（３ｒ，５ｒ，７ｒ）－アダマンタン－１－イル）アセトキシ）－２－（（（（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノイル）オキシ）メチル）プロピル１’－エチル－［１，４’－ビピペリジン］－４－カルボキシレート（６１ｍｇ、８７％）を無色油状物として得た。1H NMR (500 MHz, クロロホルム-d) δ 5.41 - 5.28 (m, 4H), 4.19 - 4.06 (m, 7H), 3.72 - 3.54 (m, 6H), 3.17 - 3.04 (m, 4H), 2.80 - 2.73 (m, 2H), 2.10 - 2.00 (m, 6H), 1.65 - 1.51 (m, 24H), 1.51 - 1.42 (m, 11H), 1.38 - 1.24 (m, 11H), 0.92 - 0.86 (m, 3H). LCMS: 計算値m/z (M+H) = 767.6, 実測値767.7, RT = 3.15分.
以下の実施例２～２８は、実施例１と同様の手順を使用して調製したが、最終ステップで使用されるカルボン酸ビルディングブロックを変更した。
[実施例２]
３－（２－（（３ｒ，５ｒ，７ｒ）－アダマンタン－１－イル）アセトキシ）－２－（（（（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノイル）オキシ）メチル）プロピル１－メチルピペリジン－４－カルボキシレート（２）
Figure 2023505316000051
０．１８ｍｍｏｌスケールで１－メチルピペリジン－４－カルボン酸塩酸塩を使用して、３－（２－（（３ｒ，５ｒ，７ｒ）－アダマンタン－１－イル）アセトキシ）－２－（ヒドロキシメチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエートから調製した。生成物１０９ｍｇ（８９％の収率）を単離した。LCMS: 計算値m/z (M+H) = 670.5, 実測値670.5, RT = 3.75分.
[実施例３]
３－（２－（（３ｒ，５ｒ，７ｒ）－アダマンタン－１－イル）アセトキシ）－２－（（（３－（４－メチルピペラジン－１－イル）プロパノイル）オキシ）メチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエート（３）
Figure 2023505316000052
０．１８ｍｍｏｌスケールで３－（４－メチルピペラジン－１－イル）プロパン酸二塩酸塩を使用して、３－（２－（（３ｒ，５ｒ，７ｒ）－アダマンタン－１－イル）アセトキシ）－２－（ヒドロキシメチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエートから調製した。生成物５４ｍｇ（４２％の収率）を単離した。LCMS: 計算値m/z (M+H) = 699.5, 実測値699.5, RT = 3.63分.
[実施例４]
３－（２－（（３ｒ，５ｒ，７ｒ）－アダマンタン－１－イル）アセトキシ）－２－（（（４－（ジメチルアミノ）ブタノイル）オキシ）メチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエート（４）
Figure 2023505316000053
０．１８ｍｍｏｌスケールで４－（ジメチルアミノ）ブタン酸塩酸塩を使用して、３－（２－（（３ｒ，５ｒ，７ｒ）－アダマンタン－１－イル）アセトキシ）－２－（ヒドロキシメチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエートから調製した。生成物１０５ｍｇ（８７％の収率）を単離した。LCMS: 計算値m/z (M+H) = 658.5, 実測値658.3, RT = 3.60分.
[実施例５]
３－（２－（（３ｒ，５ｒ，７ｒ）－アダマンタン－１－イル）アセトキシ）－２－（（（ジメチルグリシル）オキシ）メチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエート（５）
Figure 2023505316000054
ジクロロメタンの代わりにＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミドを溶媒として使用して０．１８ｍｍｏｌスケールで２－（ジメチルアミノ）酢酸を使用して、３－（２－（（３ｒ，５ｒ，７ｒ）－アダマンタン－１－イル）アセトキシ）－２－（ヒドロキシメチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエートから調製した。生成物６．４ｍｇ（６％の収率）を単離した。LCMS: 計算値m/z (M+H) = 630.5, 実測値630.4, RT = 3.76分.
[実施例６]
３－（２－（（３ｒ，５ｒ，７ｒ）－アダマンタン－１－イル）アセトキシ）－２－（（（３－（エチル（メチル）アミノ）プロパノイル）オキシ）メチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエート（６）
Figure 2023505316000055
０．１８ｍｍｏｌスケールで３－［エチル（メチル）アミノ］プロパン酸塩酸塩を使用して、３－（２－（（３ｒ，５ｒ，７ｒ）－アダマンタン－１－イル）アセトキシ）－２－（ヒドロキシメチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエートから調製した。生成物３０ｍｇ（２５％の収率）を単離した。LCMS: 計算値m/z (M+H) = 658.5, 実測値658.7, RT = 3.68分.
[実施例７]
３－（２－（（３ｒ，５ｒ，７ｒ）－アダマンタン－１－イル）アセトキシ）－２－（（（３－（ピロリジン－１－イル）プロパノイル）オキシ）メチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエート（７）
Figure 2023505316000056
０．１８ｍｍｏｌスケールで３－（ピロリジン－１－イル）プロパン酸塩酸塩を使用して、３－（２－（（３ｒ，５ｒ，７ｒ）－アダマンタン－１－イル）アセトキシ）－２－（ヒドロキシメチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエートから調製した。生成物１８ｍｇ（１５％の収率）を単離した。LCMS: 計算値m/z (M+H) = 670.5, 実測値670.6, RT = 3.46分.
[実施例８]
３－（２－（（３ｒ，５ｒ，７ｒ）－アダマンタン－１－イル）アセトキシ）－２－（（（（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノイル）オキシ）メチル）プロピル１－イソプロピルピペリジン－４－カルボキシレート（８）
Figure 2023505316000057
０．１８ｍｍｏｌスケールで１－（プロパン－２－イル）ピペリジン－４－カルボン酸塩酸塩を使用して、３－（２－（（３ｒ，５ｒ，７ｒ）－アダマンタン－１－イル）アセトキシ）－２－（ヒドロキシメチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエートから調製した。生成物８８ｍｇ（６８％の収率）を単離した。LCMS: 計算値m/z (M+H) = 698.5, 実測値698.4, RT = 3.48分.
[実施例９]
３－（２－（（３ｒ，５ｒ，７ｒ）－アダマンタン－１－イル）アセトキシ）－２－（（（３－（ピペリジン－１－イル）プロパノイル）オキシ）メチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエート（９）
Figure 2023505316000058
０．１８ｍｍｏｌスケールで３－（ピペリジン－１－イル）プロパン酸塩酸塩を使用して、３－（２－（（３ｒ，５ｒ，７ｒ）－アダマンタン－１－イル）アセトキシ）－２－（ヒドロキシメチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエートから調製した。生成物９７ｍｇ（７７％の収率）を単離した。LCMS: 計算値m/z (M+H) = 684.5, 実測値684.3, RT = 3.46分.
[実施例１０]
３－（２－（（３ｒ，５ｒ，７ｒ）－アダマンタン－１－イル）アセトキシ）－２－（（（４－（ピペリジン－１－イル）ブタノイル）オキシ）メチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエート（１０）
Figure 2023505316000059
０．１８ｍｍｏｌスケールで４－（ピペリジン－１－イル）ブタン酸塩酸塩を使用して、３－（２－（（３ｒ，５ｒ，７ｒ）－アダマンタン－１－イル）アセトキシ）－２－（ヒドロキシメチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエートから調製した。生成物９７ｍｇ（７６％の収率）を単離した。LCMS: 計算値m/z (M+H) = 698.5, 実測値698.4, RT = 3.46分.
[実施例１１]
３－（２－（（３ｒ，５ｒ，７ｒ）－アダマンタン－１－イル）アセトキシ）－２－（（（（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノイル）オキシ）メチル）プロピル１－プロピルピペリジン－４－カルボキシレート（１１）
Figure 2023505316000060
０．１８ｍｍｏｌスケールで１－プロピルピペリジン－４－カルボン酸塩酸塩を使用して、３－（２－（（３ｒ，５ｒ，７ｒ）－アダマンタン－１－イル）アセトキシ）－２－（ヒドロキシメチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエートから調製した。生成物１１１ｍｇ（８７％の収率）を単離した。LCMS: 計算値m/z (M+H) = 698.5, 実測値698.4, RT = 3.48分.
[実施例１２]
３－（２－（（３ｒ，５ｒ，７ｒ）－アダマンタン－１－イル）アセトキシ）－２－（（（３－（ジメチルアミノ）プロパノイル）オキシ）メチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエート（１２）
Figure 2023505316000061
０．１８ｍｍｏｌスケールで３－（ジメチルアミノ）プロパン酸塩酸塩を使用して、３－（２－（（３ｒ，５ｒ，７ｒ）－アダマンタン－１－イル）アセトキシ）－２－（ヒドロキシメチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエートから調製した。生成物６３ｍｇ（５４％の収率）を単離した。LCMS: 計算値m/z (M+H) = 644.5, 実測値644.7, RT = 3.62分.
[実施例１３]
３－（２－（（３ｒ，５ｒ，７ｒ）－アダマンタン－１－イル）アセトキシ）－２－（（（Ｎ－メチル－Ｎ－プロピルグリシル）オキシ）メチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエート（１３）
Figure 2023505316000062
０．１８ｍｍｏｌスケールで２－［メチル（プロピル）アミノ］酢酸塩酸塩を使用して、３－（２－（（３ｒ，５ｒ，７ｒ）－アダマンタン－１－イル）アセトキシ）－２－（ヒドロキシメチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエートから調製した。生成物２５ｍｇ（２０％の収率）を単離した。LCMS: 計算値m/z (M+H) = 658.5, 実測値658.5, RT = 3.77分.
[実施例１４]
３－（２－（（３ｒ，５ｒ，７ｒ）－アダマンタン－１－イル）アセトキシ）－２－（（（ジエチルグリシル）オキシ）メチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエート（１４）
Figure 2023505316000063
０．１８ｍｍｏｌスケールで２－（ジエチルアミノ）酢酸を使用して、３－（２－（（３ｒ，５ｒ，７ｒ）－アダマンタン－１－イル）アセトキシ）－２－（ヒドロキシメチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエートから調製した。生成物３４ｍｇ（２８％の収率）を単離した。LCMS: 計算値m/z (M+H) = 658.5, 実測値658.8, RT = 3.82分.
[実施例１５]
３－（２－（（３ｒ，５ｒ，７ｒ）－アダマンタン－１－イル）アセトキシ）－２－（（（３－（ジエチルアミノ）プロパノイル）オキシ）メチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエート（１５）
Figure 2023505316000064
０．１８ｍｍｏｌスケールで３－（ジエチルアミノ）プロパン酸塩酸塩を使用して、３－（２－（（３ｒ，５ｒ，７ｒ）－アダマンタン－１－イル）アセトキシ）－２－（ヒドロキシメチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエートから調製した。生成物９６ｍｇ（７８％の収率）を単離した。LCMS: 計算値m/z (M+H) = 672.5, 実測値672.4, RT = 3.64分.
[実施例１６]
３－（２－（１Ｈ－イミダゾール－１－イル）アセトキシ）－２－（（２－（（３ｒ，５ｒ，７ｒ）－アダマンタン－１－イル）アセトキシ）メチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエート（１６）
Figure 2023505316000065
０．１８ｍｍｏｌスケールで１Ｈ－イミダゾール－１－酢酸を使用して、３－（２－（（３ｒ，５ｒ，７ｒ）－アダマンタン－１－イル）アセトキシ）－２－（ヒドロキシメチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエートから調製した。生成物１９ｍｇ（１６％の収率）を単離した。LCMS: 計算値m/z (M+H) = 653.5, 実測値653.5, RT = 3.92分.
[実施例１７]
３－（２－（（３ｒ，５ｒ，７ｒ）－アダマンタン－１－イル）アセトキシ）－２－（（２－（４－メチルピペラジン－１－イル）アセトキシ）メチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエート（１７）
Figure 2023505316000066
０．０９ｍｍｏｌスケールで２－（４－メチルピペラジン－１－イル）酢酸二塩酸塩を使用して、３－（２－（（３ｒ，５ｒ，７ｒ）－アダマンタン－１－イル）アセトキシ）－２－（ヒドロキシメチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエートから調製した。生成物４７ｍｇ（７５％の収率）を単離した。LCMS: 計算値m/z (M+H) = 685.5, 実測値685.6, RT = 3.90分.
[実施例１８]
３－（２－（（３ｒ，５ｒ，７ｒ）－アダマンタン－１－イル）アセトキシ）－２－（（（４－（ピロリジン－１－イル）ブタノイル）オキシ）メチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエート（１８）
Figure 2023505316000067
０．０９ｍｍｏｌスケールで４－（ピロリジン－１－イル）ブタン酸塩酸塩を使用して、３－（２－（（３ｒ，５ｒ，７ｒ）－アダマンタン－１－イル）アセトキシ）－２－（ヒドロキシメチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエートから調製した。生成物４０ｍｇ（６４％の収率）を単離した。LCMS: 計算値m/z (M+H) = 684.5, 実測値684.5, RT = 3.72分.
[実施例１９]
３－（２－（（３ｒ，５ｒ，７ｒ）－アダマンタン－１－イル）アセトキシ）－２－（（（４－（ジプロピルアミノ）ブタノイル）オキシ）メチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエート（１９）
Figure 2023505316000068
０．０９ｍｍｏｌスケールで４－（ジプロピルアミノ）ブタン酸塩酸塩を使用して、３－（２－（（３ｒ，５ｒ，７ｒ）－アダマンタン－１－イル）アセトキシ）－２－（ヒドロキシメチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエートから調製した。生成物５９ｍｇ（９０％の収率）を単離した。LCMS: 計算値m/z (M+H) = 714.6, 実測値714.6, RT = 3.66分.
[実施例２０]
３－（２－（（３ｒ，５ｒ，７ｒ）－アダマンタン－１－イル）アセトキシ）－２－（（（（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノイル）オキシ）メチル）プロピルキヌクリジン－４－カルボキシレート（２０）
Figure 2023505316000069
０．０９ｍｍｏｌスケールでキヌクリジン－４－カルボン酸塩酸塩を使用して、３－（２－（（３ｒ，５ｒ，７ｒ）－アダマンタン－１－イル）アセトキシ）－２－（ヒドロキシメチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエートから調製した。生成物８．０ｍｇ（１３％の収率）を単離した。LCMS: 計算値m/z (M+H) = 682.5, 実測値682.4, RT = 3.66分.
[実施例２１]
３－（２－（（３ｒ，５ｒ，７ｒ）－アダマンタン－１－イル）アセトキシ）－２－（（（（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノイル）オキシ）メチル）プロピル １－メチルピペリジン－３－カルボキシレート（２１）
Figure 2023505316000070
０．０９ｍｍｏｌスケールで１－メチルピペリジン－３－カルボン酸を使用して、３－（２－（（３ｒ，５ｒ，７ｒ）－アダマンタン－１－イル）アセトキシ）－２－（ヒドロキシメチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエートから調製した。生成物５５ｍｇ（８９％の収率）を単離した。LCMS: 計算値m/z (M+H) = 670.5, 実測値670.4, RT = 3.58分.
[実施例２２]
３－（２－（（３ｒ，５ｒ，７ｒ）－アダマンタン－１－イル）アセトキシ）－２－（（（（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノイル）オキシ）メチル）プロピル１，３－ジメチルピロリジン－３－カルボキシレート（２２）
Figure 2023505316000071
０．０９ｍｍｏｌスケールで１，３－ジメチルピロリジン－３－カルボン酸を使用して、３－（２－（（３ｒ，５ｒ，７ｒ）－アダマンタン－１－イル）アセトキシ）－２－（ヒドロキシメチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエートから調製した。生成物２１ｍｇ（３４％の収率）を単離した。LCMS: 計算値m/z (M+H) = 670.5, 実測値670.5, RT = 3.54分.
[実施例２３]
３－（２－（（３ｒ，５ｒ，７ｒ）－アダマンタン－１－イル）アセトキシ）－２－（（２－（１－メチルピペリジン－４－イル）アセトキシ）メチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエート（２３）
Figure 2023505316000072
０．０９ｍｍｏｌスケールで２－（１－メチルピペリジン－４－イル）酢酸を使用して、３－（２－（（３ｒ，５ｒ，７ｒ）－アダマンタン－１－イル）アセトキシ）－２－（ヒドロキシメチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエートから調製した。生成物３７ｍｇ（５９％の収率）を単離した。LCMS: 計算値m/z (M+H) = 684.5, 実測値684.5, RT = 3.53分.
[実施例２４]
３－（２－（（３Ｓ，５Ｓ，７Ｓ）－アダマンタン－１－イル）アセトキシ）－２－（（（Ｎα，Ｎα－ジメチル－Ｌ－ヒスチジル）オキシ）メチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエート（２４）
Figure 2023505316000073
０．０９ｍｍｏｌスケールでＮα，Ｎα－ジメチル－Ｌ－ヒスチジンを使用して、３－（２－（（３ｒ，５ｒ，７ｒ）－アダマンタン－１－イル）アセトキシ）－２－（ヒドロキシメチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエートから調製した。生成物２．７ｍｇ（４％の収率）を単離した。LCMS: 計算値m/z (M+H) = 710.5, 実測値710.4, RT = 3.70分.
[実施例２５]
３－（２－（（３ｒ，５ｒ，７ｒ）－アダマンタン－１－イル）アセトキシ）－２－（（（（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノイル）オキシ）メチル）プロピル１－（ピリジン－４－イル）ピペリジン－４－カルボキシレート（２５）
Figure 2023505316000074
０．０９ｍｍｏｌスケールで１－（ピリジン－４－イル）ピペリジン－４－カルボン酸を使用して、３－（２－（（３ｒ，５ｒ，７ｒ）－アダマンタン－１－イル）アセトキシ）－２－（ヒドロキシメチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエートから調製した。生成物３７ｍｇ（５５％の収率）を単離した。LCMS: 計算値m/z (M+H) = 733.5, 実測値733.4, RT = 3.76分.
[実施例２６]
３－（２－（（３ｒ，５ｒ，７ｒ）－アダマンタン－１－イル）アセトキシ）－２－（（（５－モルホリノペンタノイル）オキシ）メチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエート（２６）
Figure 2023505316000075
０．０９ｍｍｏｌスケールで５－モルホリノペンタン酸塩酸塩を使用して、３－（２－（（３ｒ，５ｒ，７ｒ）－アダマンタン－１－イル）アセトキシ）－２－（ヒドロキシメチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエートから調製した。生成物６４ｍｇ（９８％の収率）を単離した。LCMS: 計算値m/z (M+H) = 714.5, 実測値714.5, RT = 3.77分.
[実施例２７]
３－（２－（（３ｒ，５ｒ，７ｒ）－アダマンタン－１－イル）アセトキシ）－２－（（（５－（ジメチルアミノ）ペンタノイル）オキシ）メチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエート（２７）
Figure 2023505316000076
０．０９ｍｍｏｌスケールで５－（ジメチルアミノ）ペンタン酸を使用して、３－（２－（（３ｒ，５ｒ，７ｒ）－アダマンタン－１－イル）アセトキシ）－２－（ヒドロキシメチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエートから調製した。生成物３１ｍｇ（５０％の収率）を単離した。LCMS: 計算値m/z (M+H) = 672.5, 実測値672.5, RT = 3.61分.
[実施例２８]
３－（２－（（３ｒ，５ｒ，７ｒ）－アダマンタン－１－イル）アセトキシ）－２－（（２－（ピリジン－４－イルオキシ）アセトキシ）メチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエート（２８）
Figure 2023505316000077
０．０９ｍｍｏｌスケールで２－（ピリジン－４－イルオキシ）酢酸を使用して、３－（２－（（３ｒ，５ｒ，７ｒ）－アダマンタン－１－イル）アセトキシ）－２－（ヒドロキシメチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエートから調製した。生成物２．７ｍｇ（４％の収率）を単離した。LCMS: 計算値m/z (M+H) = 680.4, 実測値680.3, RT = 4.01分.
[実施例２９]
３－（（（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノイル）オキシ）－２－（（（（１ｒ，１’ｓ，４Ｒ，４’Ｒ）－４’－ペンチル－［１，１’－ビ（シクロヘキサン）］－４－カルボニル）オキシ）メチル）プロピル１’－エチル－［１，４’－ビピペリジン］－４－カルボキシレート（２９）
Figure 2023505316000078
ステップ１：３－ヒドロキシ－２－（（（（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノイル）オキシ）メチル）プロピル １’－エチル－［１，４’－ビピペリジン］－４－カルボキシレート
Figure 2023505316000079
３－ヒドロキシ－２－（ヒドロキシメチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエート（１．０ｇ、１Ｅｑ、２．７ｍｍｏｌ）を、ジクロロメタン（３０ｍＬ）に溶かした溶液に、１’－エチル－［１，４’－ビピペリジン］－４－カルボン酸二塩酸塩（０．８５ｇ、１Ｅｑ、２．７ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（１．２ｇ、１．７ｍＬ、３．５Ｅｑ、９．５ｍｍｏｌ）、およびＤＭＡＰ（６６ｍｇ、０．２Ｅｑ、０．５４ｍｍｏｌ）を添加した。最後にＥＤＣ（０．７８ｇ、１．５Ｅｑ、４．１ｍｍｏｌ）を添加し、２３℃で１８時間撹拌した。この時間の後、反応混合物を濃縮し、フラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ１００ｇ、３０分にわたるジクロロメタン中の０～４０％メタノール）によって精製した。３－ヒドロキシ－２－（（（（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノイル）オキシ）メチル）プロピル１’－エチル－［１，４’－ビピペリジン］－４－カルボキシレート（５４０ｍｇ、３４％）を無色油状物として得た。LCMS: 計算値m/z (M+H) = 591.5, 実測値591.6, RT = 2.67分.
ステップ２：３－（（（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノイル）オキシ）－２－（（（（１ｒ，１’ｓ，４Ｒ，４’Ｒ）－４’－ペンチル－［１，１’－ビ（シクロヘキサン）］－４－カルボニル）オキシ）メチル）プロピル１’－エチル－［１，４’－ビピペリジン］－４－カルボキシレート（２９）
Figure 2023505316000080
３－ヒドロキシ－２－（（（（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノイル）オキシ）メチル）プロピル１’－エチル－［１，４’－ビピペリジン］－４－カルボキシレート（５９ｍｇ、１Ｅｑ、０．１０ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（１ｍＬ）に溶かした溶液に、（１ｒ，１’ｓ，４Ｒ，４’Ｒ）－４’－ペンチル－［１，１’－ビ（シクロヘキサン）］－４－カルボン酸（２８ｍｇ、１Ｅｑ、０．１０ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（３９ｍｇ、３Ｅｑ、０．３０ｍｍｏｌ）、およびＤＭＡＰ（２．４ｍｇ、０．２Ｅｑ、２０μｍｏｌ）を添加した。最後にＥＤＣ（３８ｍｇ、２Ｅｑ、０．２０ｍｍｏｌ）を添加し、２３℃で１８時間撹拌した。フラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ１０ｇ、１２分かけてジクロロメタン中の０～３０％メタノール）で直接精製した。３－（（（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノイル）オキシ）－２－（（（（１ｒ，１’ｓ，４Ｒ，４’Ｒ）－４’－ペンチル－［１，１’－ビ（シクロヘキサン）］－４－カルボニル）オキシ）メチル）プロピル１’－エチル－［１，４’－ビピペリジン］－４－カルボキシレート（３１ｍｇ、３６％）を無色油状物として得た。1H NMR (500 MHz, クロロホルム-d) δ 5.42 - 5.29 (m, 4H), 4.16 - 4.09 (m, 6H), 3.85 (t, J = 6.9 Hz, 2H), 3.67 - 3.51 (m, 2H), 3.35 - 2.94 (m, 7H), 2.83 - 2.74 (m, 5H), 2.69 - 2.46 (m, 2H), 2.39 (p, J = 6.0 Hz, 1H), 2.31 (t, J = 7.6 Hz, 2H), 2.26 - 2.16 (m, 2H), 2.05 (q, J = 7.0 Hz, 4H), 1.97 (d, J = 13.0 Hz, 2H), 1.85 - 1.39 (m, 11H), 1.39 - 1.08 (m, 28H), 1.08 - 0.80 (m, 14H). LCMS: 計算値m/z (M+H) = 853.7, 実測値853.7, RT = 3.54分.
以下の実施例３０～３７は、実施例２９と同様の手順を使用して調製したが、最終ステップで使用されるカルボン酸ビルディングブロックを変更した。
[実施例３０]
３－（２－（（１ｒ，３ｒ）－アダマンタン－２－イル）アセトキシ）－２－（（（（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノイル）オキシ）メチル）プロピル１’－エチル－［１，４’－ビピペリジン］－４－カルボキシレート（３０）
Figure 2023505316000081
０．１０ｍｍｏｌスケールで２－（アダマンタン－２－イル）酢酸を使用して、３－ヒドロキシ－２－（（（（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノイル）オキシ）メチル）プロピル１’－エチル－［１，４’－ビピペリジン］－４－カルボキシレートから調製した。生成物３２ｍｇ（４２％の収率）を単離した。LCMS: 計算値m/z (M+H) = 767.6, 実測値767.6, RT = 3.17分.
[実施例３１]
３－（（３－（（３ｒ，５ｒ，７ｒ）－アダマンタン－１－イル）プロパノイル）オキシ）－２－（（（（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノイル）オキシ）メチル）プロピル１’－エチル－［１，４’－ビピペリジン］－４－カルボキシレート（３１）
Figure 2023505316000082
０．１０ｍｍｏｌスケールで３－（アダマンタン－１－イル）プロパン酸を使用して、３－ヒドロキシ－２－（（（（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノイル）オキシ）メチル）プロピル１’－エチル－［１，４’－ビピペリジン］－４－カルボキシレートから調製した。生成物３４ｍｇ（４４％の収率）を単離した。LCMS: 計算値m/z (M+H) = 781.6, 実測値781.7, RT = 3.24分.
[実施例３２]
３－（（３，５－ジ－ｔｅｒｔ－ブチルベンゾイル）オキシ）－２－（（（（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノイル）オキシ）メチル）プロピル１’－エチル－［１，４’－ビピペリジン］－４－カルボキシレート（３２）
Figure 2023505316000083
０．１０ｍｍｏｌスケールで３，５－ジ－ｔｅｒｔ－ブチル安息香酸を使用して、３－ヒドロキシ－２－（（（（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノイル）オキシ）メチル）プロピル１’－エチル－［１，４’－ビピペリジン］－４－カルボキシレートから調製した。生成物２１ｍｇ（２６％の収率）を単離した。LCMS: 計算値m/z (M+H) = 807.6, 実測値807.6, RT = 3.29分.
[実施例３３]
３－（（２，３－ジフェニルプロパノイル）オキシ）－２－（（（（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノイル）オキシ）メチル）プロピル１’－エチル－［１，４’－ビピペリジン］－４－カルボキシレート（３３）
Figure 2023505316000084
０．１０ｍｍｏｌスケールで２，３－ジフェニルプロパン酸を使用して、３－ヒドロキシ－２－（（（（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノイル）オキシ）メチル）プロピル１’－エチル－［１，４’－ビピペリジン］－４－カルボキシレートから調製した。生成物３９ｍｇ（４９％の収率）を単離した。LCMS: 計算値m/z (M+H) = 799.6, 実測値799.4, RT = 3.06分.
[実施例３４]
３－（（（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノイル）オキシ）－２－（（（（１Ｒ，２Ｓ，３ｓ，４Ｒ，５Ｓ）－トリシクロ［３．２．１．０，２，４］オクタン－３－カルボニル）オキシ）メチル）プロピル１’－エチル－［１，４’－ビピペリジン］－４－カルボキシレート（３４）
Figure 2023505316000085
０．１０ｍｍｏｌスケールでｒａｃ－（１Ｒ，２Ｓ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）－トリシクロ［３．２．１．０，２，４］オクタン－３－カルボン酸を使用して、３－ヒドロキシ－２－（（（（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノイル）オキシ）メチル）プロピル１’－エチル－［１，４’－ビピペリジン］－４－カルボキシレートから調製した。生成物２０ｍｇ（２８％の収率）を単離した。LCMS: 計算値m/z (M+H) = 725.5, 実測値725.4, RT = 3.04分.
[実施例３５]
３－（２－（（１ｒ，３Ｒ，５Ｓ，７ｒ）－３，５－ジメチルアダマンタン－１－イル）アセトキシ）－２－（（（（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノイル）オキシ）メチル）プロピル１’－エチル－［１，４’－ビピペリジン］－４－カルボキシレート（３５）
Figure 2023505316000086
０．１０ｍｍｏｌスケールで２－（３，５－ジメチルアダマンタン－１－イル）酢酸を使用して、３－ヒドロキシ－２－（（（（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノイル）オキシ）メチル）プロピル１’－エチル－［１，４’－ビピペリジン］－４－カルボキシレートから調製した。生成物４３ｍｇ（５４％の収率）を単離した。LCMS: 計算値m/z (M+H) = 795.6, 実測値795.8, RT = 3.32分.
[実施例３６]
３－（（ビシクロ［３．３．１］ノナン－３－カルボニル）オキシ）－２－（（（（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノイル）オキシ）メチル）プロピル１’－エチル－［１，４’－ビピペリジン］－４－カルボキシレート（３６）
Figure 2023505316000087
０．１０ｍｍｏｌスケールでビシクロ［３．３．１］ノナン－３－カルボン酸を使用して、３－ヒドロキシ－２－（（（（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノイル）オキシ）メチル）プロピル１’－エチル－［１，４’－ビピペリジン］－４－カルボキシレートから調製した。生成物３７ｍｇ（５０％の収率）を単離した。LCMS: 計算値m/z (M+H) = 741.6, 実測値741.5, RT = 3.12分.
[実施例３７]
３－（（（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノイル）オキシ）－２－（（（（３ａｓ，６ａｓ）－オクタヒドロ－２，５－メタノペンタレン－３ａ－カルボニル）オキシ）メチル）プロピル１’－エチル－［１，４’－ビピペリジン］－４－カルボキシレート（３７）
Figure 2023505316000088
０．１０ｍｍｏｌスケールで３－ノルアダマンタンカルボン酸を使用して、３－ヒドロキシ－２－（（（（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノイル）オキシ）メチル）プロピル１’－エチル－［１，４’－ビピペリジン］－４－カルボキシレートから調製した。生成物４５ｍｇ（６１％の収率）を単離した。LCMS: 計算値m/z (M+H) = 739.6, 実測値739.3, RT = 3.10分.
[実施例３８]
３－（（３－（（３ｒ，５ｒ，７ｒ）－アダマンタン－１－イル）プロパノイル）オキシ）－２－（（（４－（ジメチルアミノ）ブタノイル）オキシ）メチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエート（３８）
Figure 2023505316000089
ステップ１：３－（（４－（ジメチルアミノ）ブタノイル）オキシ）－２－（ヒドロキシメチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエート
Figure 2023505316000090
３－ヒドロキシ－２－（ヒドロキシメチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエート（１０００ｍｇ、１Ｅｑ、２．７１３ｍｍｏｌ）を、ジクロロメタン（２４ｍＬ）に溶かした溶液に、４－（ジメチルアミノ）ブタン酸（３５５．９ｍｇ、１Ｅｑ、２．７１３ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（１．７５３ｇ、２．３５ｍＬ、５Ｅｑ、１３．５７ｍｍｏｌ）、およびＤＭＡＰ（６６．３０ｍｇ、０．２Ｅｑ、５４２．７μｍｏｌ）を添加した。最後にＥＤＣ（１．０４０ｇ、２Ｅｑ、５．４２７ｍｍｏｌ）を添加し、２３℃で１８時間撹拌した。この時間の後、反応混合物を濃縮し、フラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ１００ｇ、２０分にわたりジクロロメタン中の０～３０％メタノール）によって精製した。３－（（４－（ジメチルアミノ）ブタノイル）オキシ）－２－（ヒドロキシメチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエート（０．４４７ｇ，３４％）を淡黄色油状物として得た。LCMS: 計算値m/z (M+H) = 482.4, 実測値482.4, RT = 3.15分.
ステップ２：３－（（３－（（３ｒ，５ｒ，７ｒ）－アダマンタン－１－イル）プロパノイル）オキシ）－２－（（（４－（ジメチルアミノ）ブタノイル）オキシ）メチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエート（３８）
Figure 2023505316000091
３－（（４－（ジメチルアミノ）ブタノイル）オキシ）－２－（ヒドロキシメチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエート（０．０５０ｇ、１Ｅｑ、０．１０ｍｍｏｌ）を、ジクロロメタン（１ｍＬ）に溶かした溶液に、３－（（３ｒ，５ｒ，７ｒ）－アダマンタン－１－イル）プロパン酸（２２ｍｇ、１Ｅｑ、０．１０ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（６７ｍｇ、９０μＬ、５Ｅｑ、０．５２ｍｍｏｌ）、およびＤＭＡＰ（２．５ｍｇ、０．２Ｅｑ、２１μｍｏｌ）を添加した。最後にＥＤＣ（４０ｍｇ、２Ｅｑ、０．２１ｍｍｏｌ）を添加し、２３℃で１８時間撹拌した。この時間の後、反応混合物を濃縮し、フラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ１０ｇ、１２分にわたりジクロロメタン中の０～２０％メタノール）によって精製した。３－（（３－（（３ｒ，５ｒ，７ｒ）－アダマンタン－１－イル）プロパノイル）オキシ）－２－（（（４－（ジメチルアミノ）ブタノイル）オキシ）メチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエート（２８ｍｇ、４１％）を淡黄色油状物として得た。1H NMR (500 MHz, クロロホルム-d) δ 5.43 - 5.29 (m, 4H), 4.24 - 4.12 (m, 4H), 3.62 (t, J = 5.6 Hz, 2H), 2.77 (t, J = 6.7 Hz, 2H), 2.36 - 2.25 (m, 4H), 2.24 - 2.16 (m, 3H), 2.05 (q, J = 6.8 Hz, 4H), 1.98 - 1.94 (m, 3H), 1.71 (d, J = 12.3 Hz, 3H), 1.64 - 1.59 (m, 6H), 1.57 (s, 3H), 1.48 - 1.40 (m, 12H), 1.38 - 1.26 (m, 16H), 0.89 (t, J = 6.9 Hz, 3H). LCMS: 計算値m/z (M+H) = 672.5, 実測値672.4, RT = 3.84分.
以下の実施例３９～４６は、実施例３８と同様の手順を使用して調製したが、最終ステップで使用されるカルボン酸ビルディングブロックを変更した。
[実施例３９]
３－（（４－（ジメチルアミノ）ブタノイル）オキシ）－２－（（（（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノイル）オキシ）メチル）プロピル（１ｒ，３Ｒ，５Ｓ）－アダマンタン－１－カルボキシレート（３９）
Figure 2023505316000092
０．１０ｍｍｏｌスケールで１－アダマンタンカルボン酸を使用して、３－（（４－（ジメチルアミノ）ブタノイル）オキシ）－２－（ヒドロキシメチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエートから調製した。生成物２２ｍｇ（３４％の収率）を単離した。LCMS: 計算値m/z (M+H) = 644.5, 実測値644.4, RT = 3.55分.
[実施例４０]
３－（２－（（１Ｒ，３Ｓ，５ｒ，７ｒ）－アダマンタン－２－イル）アセトキシ）－２－（（（４－（ジメチルアミノ）ブタノイル）オキシ）メチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエート（４０）
Figure 2023505316000093
０．１０ｍｍｏｌスケールで２－（アダマンタン－２－イル）酢酸を使用して、３－（（４－（ジメチルアミノ）ブタノイル）オキシ）－２－（ヒドロキシメチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエートから調製した。生成物２７ｍｇ（４０％の収率）を単離した。LCMS: 計算値m/z (M+H) = 658.5, 実測値658.5, RT = 3.60分.
[実施例４１]
３－（（４－（ジメチルアミノ）ブタノイル）オキシ）－２－（（（（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノイル）オキシ）メチル）プロピル３，５－ジ－ｔｅｒｔ－ブチルベンゾエート（４１）
Figure 2023505316000094
０．１０ｍｍｏｌスケールで３，５－ジ－ｔｅｒｔ－ブチル安息香酸を使用して、３－（（４－（ジメチルアミノ）ブタノイル）オキシ）－２－（ヒドロキシメチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエートから調製した。生成物３１ｍｇ（４３％の収率）を単離した。LCMS: 計算値m/z (M+H) = 698.5, 実測値698.6, RT = 3.47分.
[実施例４２]
３－（２－（（１ｒ，３Ｒ，５Ｓ，７ｒ）－３，５－ジメチルアダマンタン－１－イル）アセトキシ）－２－（（（４－（ジメチルアミノ）ブタノイル）オキシ）メチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエート（４２）
Figure 2023505316000095
０．１０ｍｍｏｌスケールで２－（３，５－ジメチルアダマンタン－１－イル）酢酸を使用して、３－（（４－（ジメチルアミノ）ブタノイル）オキシ）－２－（ヒドロキシメチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエートから調製した。生成物３３ｍｇ（４６％の収率）を単離した。LCMS: 計算値m/z (M+H) = 686.5, 実測値686.4, RT = 3.68分.
[実施例４３]
３－（（４－（ジメチルアミノ）ブタノイル）オキシ）－２－（（（（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノイル）オキシ）メチル）プロピル（２Ｒ，３ａｓ，５Ｓ，６ａｓ）－ヘキサヒドロ－２，５－メタノペンタレン－３ａ（１Ｈ）－カルボキシレート（４３）
Figure 2023505316000096
０．１０ｍｍｏｌスケールで３－ノルアダマンタンカルボン酸を使用して、３－（（４－（ジメチルアミノ）ブタノイル）オキシ）－２－（ヒドロキシメチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエートから調製した。生成物３０ｍｇ（４６％の収率）を単離した。LCMS: 計算値m/z (M+H) = 630.5, 実測値630.4, RT = 3.54分.
[実施例４４]
３－（（４－（ジメチルアミノ）ブタノイル）オキシ）－２－（（（（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノイル）オキシ）メチル）プロピルビシクロ［３．３．１］ノナン－３－カルボキシレート（４４）
Figure 2023505316000097
０．１０ｍｍｏｌスケールでビシクロ［３．３．１］ノナン－３－カルボン酸を使用して、３－（（４－（ジメチルアミノ）ブタノイル）オキシ）－２－（ヒドロキシメチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエートから調製した。生成物２７ｍｇ（４１％の収率）を単離した。LCMS: 計算値m/z (M+H) = 632.5, 実測値632.8, RT = 3.57分.
[実施例４５]
３－（（４－（ジメチルアミノ）ブタノイル）オキシ）－２－（（（（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノイル）オキシ）メチル）プロピル（１Ｒ，２Ｓ，３ｓ，４Ｒ，５Ｓ）－トリシクロ［３．２．１．０，２，４］オクタン－３－カルボキシレート（４５）
Figure 2023505316000098
０．１０ｍｍｏｌスケールでｒａｃ－（１Ｒ，２Ｓ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）－トリシクロ［３．２．１．０，２，４］オクタン－３－カルボン酸を使用して、３－（（４－（ジメチルアミノ）ブタノイル）オキシ）－２－（ヒドロキシメチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエートから調製した。生成物２８ｍｇ（４４％の収率）を単離した。LCMS: 計算値m/z (M+H) = 616.4, 実測値616.4, RT = 3.50分.
[実施例４６]
３－（（４－（ジメチルアミノ）ブタノイル）オキシ）－２－（（（（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノイル）オキシ）メチル）プロピル（１ｒ，１’ｓ，４Ｒ，４’Ｒ）－４’－ペンチル－［１，１’－ビ（シクロヘキサン）］－４－カルボキシレート（４６）
Figure 2023505316000099
０．１０ｍｍｏｌスケールでｔｒａｎｓ，ｔｒａｎｓ－４’－ペンチルビシクロヘキシル－４－カルボン酸を使用して、３－（（４－（ジメチルアミノ）ブタノイル）オキシ）－２－（ヒドロキシメチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエートから調製した。生成物４１ｍｇ（５４％の収率）を単離した。LCMS: 計算値m/z (M+H) = 744.6, 実測値744.8, RT = 3.75分.
[実施例４７]
３－（（（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノイル）オキシ）－２－（（（４－（ピロリジン－１－イル）ブタノイル）オキシ）メチル）プロピル３，５－ジ－ｔｅｒｔ－ブチルベンゾエート（４７）
Figure 2023505316000100
ステップ１：３－ヒドロキシ－２－（（（（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノイル）オキシ）メチル）プロピル３，５－ジ－ｔｅｒｔ－ブチルベンゾエート
Figure 2023505316000101
３－ヒドロキシ－２－（ヒドロキシメチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエート（８００ｍｇ、１Ｅｑ、２．１７ｍｍｏｌ）を、ジクロロメタン（５ｍＬ）に溶かした溶液に、３，５－ジ－ｔｅｒｔ－ブチル安息香酸（５０９ｍｇ、１Ｅｑ、２．１７ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（５６１ｍｇ、０．７６ｍＬ、２Ｅｑ、４．３４ｍｍｏｌ）、およびＤＭＡＰ（５３．０ｍｇ、０．２Ｅｑ、４３４μｍｏｌ）を添加した。最後にＥＤＣ（６２４ｍｇ、１．５Ｅｑ、３．２６ｍｍｏｌ）を添加し、２３℃で１８時間撹拌した。この時間の後、反応混合物を濃縮し、フラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ５０ｇ、２０分にわたりヘキサン中の０～３０％酢酸エチル）によって精製した。３－ヒドロキシ－２－（（（（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノイル）オキシ）メチル）プロピル３，５－ジ－ｔｅｒｔ－ブチルベンゾエート（６３０ｍｇ、４９．６％）を無色油状物として得た。1H NMR (500 MHz, クロロホルム-d) δ 7.88 (d, J = 1.9 Hz, 2H), 7.65 (t, J = 1.9 Hz, 1H), 5.43 - 5.30 (m, 4H), 4.45 (dd, J = 6.0, 1.5 Hz, 2H), 4.33 - 4.22 (m, 2H), 3.70 (d, J = 5.5 Hz, 2H), 2.80 - 2.74 (m, 2H), 2.49 (s, 1H), 2.39 - 2.30 (m, 3H), 2.08 - 2.01 (m, 5H), 1.62 (qd, J = 7.5, 3.1 Hz, 2H), 1.41 - 1.21 (m, 31H), 0.92 - 0.86 (m, 3H).
ステップ２：３－（（（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノイル）オキシ）－２－（（（４－（ピロリジン－１－イル）ブタノイル）オキシ）メチル）プロピル３，５－ジ－ｔｅｒｔ－ブチルベンゾエート（４７）
Figure 2023505316000102
３－ヒドロキシ－２－（（（（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノイル）オキシ）メチル）プロピル３，５－ジ－ｔｅｒｔ－ブチルベンゾエート（５０ｍｇ、１Ｅｑ、８５μｍｏｌ）を、ジクロロメタン（１ｍＬ）に溶かした溶液に、４－（ピロリジン－１－イル）ブタン酸塩酸塩（１７ｍｇ、１Ｅｑ、８５μｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（３３ｍｇ、４５μＬ、３Ｅｑ、０．２６ｍｍｏｌ）、およびＮ，Ｎ－ジメチルピリジン－４－アミン（２．１ｍｇ、０．２Ｅｑ、１７μｍｏｌ）を添加した。最後にＥＤＣ（３３ｍｇ、２Ｅｑ、０．１７ｍｍｏｌ）を添加し、２３℃で１８時間撹拌した。この時間の後、反応混合物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ１０ｇ、１２分にわたりジクロロメタン中の０～２５％メタノール）によって直接精製した。３－（（（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノイル）オキシ）－２－（（（４－（ピロリジン－１－イル）ブタノイル）オキシ）メチル）プロピル３，５－ジ－ｔｅｒｔ－ブチルベンゾエート（４４ｍｇ、７１％）を無色油状物として得た。1H NMR (500 MHz, クロロホルム-d) δ 7.90 - 7.84 (m, 2H), 7.65 (t, J = 1.9 Hz, 1H), 5.42 - 5.28 (m, 4H), 4.43 - 4.36 (m, 2H), 4.23 (dd, J = 6.0, 3.2 Hz, 4H), 2.86 (s, 4H), 2.77 (t, J = 6.7 Hz, 2H), 2.57 (七重線, J = 6.1 Hz, 1H), 2.46 (t, J = 6.9 Hz, 2H), 2.38 - 2.28 (m, 2H), 2.11 - 1.93 (m, 8H), 1.60 (q, J = 7.1 Hz, 4H), 1.40 - 1.22 (m, 34H), 0.89 (t, J = 6.9 Hz, 3H). LCMS: 計算値m/z (M+H) = 724.5, 実測値724.6, RT = 3.57分.
以下の実施例４８および４９は、実施例４７と同様の手順を使用して調製したが、最終ステップで使用されるカルボン酸ビルディングブロックを変更した。
[実施例４８]
３－（（３，５－ジ－ｔｅｒｔ－ブチルベンゾイル）オキシ）－２－（（（（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノイル）オキシ）メチル）プロピル１－（ピリジン－４－イル）ピペリジン－４－カルボキシレート（４８）
Figure 2023505316000103
０．０８５ｍｍｏｌスケールで１－（ピリジン－４－イル）ピペリジン－４－カルボン酸を使用して、３－ヒドロキシ－２－（（（（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノイル）オキシ）メチル）プロピル３，５－ジ－ｔｅｒｔ－ブチルベンゾエートから調製した。生成物１４ｍｇ（２１％の収率）を単離した。LCMS: 計算値m/z (M+H) = 773.5, 実測値773.7, RT = 3.61分.
[実施例４９]
３－（（Ｎα，Ｎα－ジメチル－Ｌ－ヒスチジル）オキシ）－２－（（（（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノイル）オキシ）メチル）プロピル３，５－ジ－ｔｅｒｔ－ブチルベンゾエート（４９）
Figure 2023505316000104
０．０８５ｍｍｏｌスケールでＮα，Ｎα－ジメチル－Ｌ－ヒスチジンを使用し、カップリング剤としてＥＤＣの代わりにＡＯＰおよび溶媒としてジクロロメタンの代わりにＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミドを使用して、３－ヒドロキシ－２－（（（（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノイル）オキシ）メチル）プロピル３，５－ジ－ｔｅｒｔ－ブチルベンゾエートから調製した。生成物１３ｍｇ（２０％の収率）を単離した。LCMS: 計算値m/z (M+H) = 750.5, 実測値750.6, RT = 3.59分.
[実施例５０]
３－（（（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノイル）オキシ）－２－（（（４－（ピロリジン－１－イル）ブタノイル）オキシ）メチル）プロピル（１ｒ，１’ｓ，４Ｒ，４’Ｒ）－４’－ペンチル－［１，１’－ビ（シクロヘキサン）］－４－カルボキシレート（５０）
Figure 2023505316000105
ステップ１：３－ヒドロキシ－２－（（（（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノイル）オキシ）メチル）プロピル（１ｒ，１’ｓ，４Ｒ，４’Ｒ）－４’－ペンチル－［１，１’－ビ（シクロヘキサン）］－４－カルボキシレート
Figure 2023505316000106
３－ヒドロキシ－２－（ヒドロキシメチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエート（８００ｍｇ、１Ｅｑ、２．１７ｍｍｏｌ）を、ジクロロメタン（６ｍＬ）に溶かした溶液に、（１ｒ，１’ｓ，４Ｒ，４’Ｒ）－４’－ペンチル－［１，１’－ビ（シクロヘキサン）］－４－カルボン酸（６０９ｍｇ、１Ｅｑ、２．１７ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（５６１ｍｇ、０．７６ｍＬ、２Ｅｑ、４．３４ｍｍｏｌ）、およびＤＭＡＰ（５３．０ｍｇ、０．２Ｅｑ、４３４μｍｏｌ）を添加した。最後にＥＤＣ（６２４ｍｇ、１．５Ｅｑ、３．２６ｍｍｏｌ）を添加し、２３℃で１８時間撹拌した。この時間の後、反応混合物を濃縮し、フラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ５０ｇ、２０分にわたりヘキサン中の０～３０％酢酸エチル）によって精製した。３－ヒドロキシ－２－（（（（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノイル）オキシ）メチル）プロピル（１ｒ，１’ｓ，４Ｒ，４’Ｒ）－４’－ペンチル－［１，１’－ビ（シクロヘキサン）］－４－カルボキシレート（６８６ｍｇ、５０．１％）を無色油状物として得た。1H NMR (500 MHz, クロロホルム-d) δ 5.42 - 5.27 (m, 4H), 4.22 - 4.08 (m, 5H), 3.63 - 3.56 (m, 2H), 2.77 (dddt, J = 7.8, 6.9, 1.4, 0.8 Hz, 2H), 2.35 - 2.28 (m, 2H), 2.27 - 2.14 (m, 2H), 2.08 - 2.01 (m, 4H), 2.01 - 1.94 (m, 2H), 1.81 - 1.56 (m, 8H), 1.44 - 1.16 (m, 27H), 1.16 - 0.92 (m, 6H), 0.92 - 0.80 (m, 6H).
ステップ２：３－（（（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノイル）オキシ）－２－（（（４－（ピロリジン－１－イル）ブタノイル）オキシ）メチル）プロピル（１ｒ，１’ｓ，４Ｒ，４’Ｒ）－４’－ペンチル－［１，１’－ビ（シクロヘキサン）］－４－カルボキシレート（５０）
Figure 2023505316000107
３－ヒドロキシ－２－（（（（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノイル）オキシ）メチル）プロピル（１ｒ，１’ｓ，４Ｒ，４’Ｒ）－４’－ペンチル－［１，１’－ビ（シクロヘキサン）］－４－カルボキシレート（５０ｍｇ、１Ｅｑ、７９μｍｏｌ）を、ジクロロメタン（１ｍＬ）に溶かした溶液に、４－（ピロリジン－１－イル）ブタン酸塩酸塩（１５ｍｇ、１Ｅｑ、７９μｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（３１ｍｇ、４１μＬ、３Ｅｑ、０．２４ｍｍｏｌ）、およびＤＭＡＰ（１．９ｍｇ、０．２Ｅｑ、１６μｍｏｌ）を添加した。最後にＥＤＣ（３０ｍｇ、２Ｅｑ、０．１６ｍｍｏｌ）を添加し、２３℃で１８時間撹拌した。この時間の後、反応混合物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ１０ｇ、１２分にわたりジクロロメタン中の０～２５％メタノール）によって直接精製した。３－（（（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノイル）オキシ）－２－（（（４－（ピロリジン－１－イル）ブタノイル）オキシ）メチル）プロピル（１ｒ，１’ｓ，４Ｒ，４’Ｒ）－４’－ペンチル－［１，１’－ビ（シクロヘキサン）］－４－カルボキシレート（４１ｍｇ、６７％）を無色油状物として得た。1H NMR (500 MHz, クロロホルム-d) δ 5.43 - 5.29 (m, 4H), 4.14 - 4.09 (m, 6H), 2.77 (t, J = 6.7 Hz, 7H), 2.45 - 2.36 (m, 2H), 2.31 (q, J = 7.5 Hz, 2H), 2.21 (tt, J = 11.9, 3.5 Hz, 1H), 2.05 (q, J = 6.9 Hz, 4H), 2.01 - 1.83 (m, 7H), 1.82 - 1.51 (m, 9H), 1.44 - 1.18 (m, 25H), 1.17 - 0.92 (m, 9H), 0.88 (q, J = 6.8 Hz, 7H). LCMS: 計算値m/z (M+H) = 770.6, 実測値770.7, RT = 4.08分.
以下の実施例５１および５２は、実施例５０と同様の手順を使用して調製したが、最終ステップで使用されるカルボン酸ビルディングブロックを変更した。
[実施例５１]
３－（（（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノイル）オキシ）－２－（（（（１ｒ，１’ｓ，４Ｒ，４’Ｒ）－４’－ペンチル－［１，１’－ビ（シクロヘキサン）］－４－カルボニル）オキシ）メチル）プロピル１－（ピリジン－４－イル）ピペリジン－４－カルボキシレート（５１）
Figure 2023505316000108
０．０７９ｍｍｏｌスケールで１－（ピリジン－４－イル）ピペリジン－４－カルボン酸を使用して、３－ヒドロキシ－２－（（（（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノイル）オキシ）メチル）プロピル（１ｒ，１’ｓ，４Ｒ，４’Ｒ）－４’－ペンチル－［１，１’－ビ（シクロヘキサン）］－４－カルボキシレートから調製した。生成物１０ｍｇ（１５％の収率）を単離した。LCMS: 計算値m/z (M+H) = 819.6, 実測値819.7, RT = 4.01分.
[実施例５２]
３－（（Ｎα，Ｎα－ジメチル－Ｌ－ヒスチジル）オキシ）－２－（（（（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノイル）オキシ）メチル）プロピル（１Ｓ，１’ｓ，４Ｒ，４’Ｓ）－４’－ペンチル－［１，１’－ビ（シクロヘキサン）］－４－カルボキシレート（５２）
Figure 2023505316000109
０．０７９ｍｍｏｌスケールでＮα，Ｎα－ジメチル－Ｌ－ヒスチジンを使用し、カップリング剤としてＥＤＣの代わりにＡＯＰおよび溶媒としてジクロロメタンの代わりにＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミドを使用して、３－ヒドロキシ－２－（（（（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノイル）オキシ）メチル）プロピル（１ｒ，１’ｓ，４Ｒ，４’Ｒ）－４’－ペンチル－［１，１’－ビ（シクロヘキサン）］－４－カルボキシレートから調製した。生成物２．７ｍｇ（４％の収率）を単離した。LCMS: 計算値m/z (M+H) = 796.6, 実測値796.6, RT = 4.30分.
[実施例５３]
３－（２－（（１Ｓ，２Ｒ，５Ｒ）－アダマンタン－２－イル）アセトキシ）－２－（（（４－（ピロリジン－１－イル）ブタノイル）オキシ）メチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエート（５３）
Figure 2023505316000110
ステップ１：３－（２－（（１Ｓ，２Ｒ，５Ｒ）－アダマンタン－２－イル）アセトキシ）－２－（ヒドロキシメチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエート
Figure 2023505316000111
２－（アダマンタン－２－イル）酢酸（２１３ｍｇ、１Ｅｑ、１．１０ｍｍｏｌ）を、ジクロロメタン（３５ｍＬ）に溶かした溶液に、３－ヒドロキシ－２－（ヒドロキシメチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエート（４０５ｍｇ、１Ｅｑ、１．１０ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（４２６ｍｇ、５７２μＬ、３Ｅｑ、３．３０ｍｍｏｌ）、およびＤＭＡＰ（１３．４ｍｇ、０．１Ｅｑ、１１０μｍｏｌ）を添加した。最後にＥＤＣ（３１６ｍｇ、１．５Ｅｑ、１．６５ｍｍｏｌ）を添加し、２３℃で１８時間撹拌した。この時間の後、反応混合物を濃縮し、フラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ１００ｇ、２０分にわたりヘキサン中の０～４０％酢酸エチル）によって精製した。３－（２－（（１ｒ，５Ｒ，７Ｓ）－アダマンタン－２－イル）アセトキシ）－２－（ヒドロキシメチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエート（２８７ｍｇ、４８．０％）を無色油状物として得た。1H NMR (500 MHz, クロロホルム-d) δ 5.43 - 5.28 (m, 4H), 4.23 - 4.12 (m, 4H), 3.64 - 3.58 (m, 2H), 2.77 (dddt, J = 8.4, 7.0, 1.5, 0.8 Hz, 2H), 2.48 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 2.36 - 2.29 (m, 2H), 2.26 - 2.15 (m, 3H), 2.09 - 2.01 (m, 4H), 1.91 - 1.75 (m, 8H), 1.75 - 1.66 (m, 5H), 1.65 - 1.50 (m, 4H), 1.40 - 1.24 (m, 13H), 0.92 - 0.86 (m, 3H).
ステップ２：３－（２－（（１Ｓ，２Ｒ，５Ｒ）－アダマンタン－２－イル）アセトキシ）－２－（（（４－（ピロリジン－１－イル）ブタノイル）オキシ）メチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエート（５３）
Figure 2023505316000112
４－（ピロリジン－１－イル）ブタン酸（１７ｍｇ、１Ｅｑ、０．１１ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（１ｍＬ）に溶かした混合物に、３－（２－（（１Ｒ，２ｒ，３Ｓ，５ｒ）－アダマンタン－２－イル）アセトキシ）－２－（ヒドロキシメチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエート（０．０６０ｇ、１Ｅｑ、０．１１ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（４３ｍｇ、５７μＬ、３Ｅｑ、０．３３ｍｍｏｌ）、およびＤＭＡＰ（２．７ｍｇ、０．２Ｅｑ、２２μｍｏｌ）を添加した。最後にＥＤＣ（３２ｍｇ、１．５Ｅｑ、０．１７ｍｍｏｌ）を添加し、２３℃で１８時間撹拌した。この時間の後、反応混合物を濃縮し、フラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ１０ｇ、１０分にわたりジクロロメタン中の０～１０％メタノール）によって精製した。３－（２－（（１Ｓ，２Ｒ，５Ｒ）－アダマンタン－２－イル）アセトキシ）－２－（（（４－（ピロリジン－１－イル）ブタノイル）オキシ）メチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエート（７５ｍｇ、９９％）を無色油状物として得た。1H NMR (500 MHz, クロロホルム-d) δ 5.43 - 5.29 (m, 4H), 4.25 - 4.09 (m, 6H), 3.61 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 2.77 (t, J = 6.7 Hz, 2H), 2.48 (t, J = 7.8 Hz, 3H), 2.43 - 2.36 (m, 2H), 2.32 (dt, J = 9.1, 7.5 Hz, 2H), 2.25 - 2.16 (m, 2H), 2.05 (q, J = 7.0 Hz, 4H), 1.92 - 1.75 (m, 12H), 1.75 - 1.51 (m, 11H), 1.40 - 1.22 (m, 17H), 0.89 (t, J = 6.9 Hz, 3H). LCMS: 計算値m/z (M+H) = 684.5, 実測値684.6, RT = 3.49分.
以下の実施例５４および５５は、実施例５３と同様の手順を使用して調製したが、最終ステップで使用されるカルボン酸ビルディングブロックを変更した。
[実施例５４]
３－（２－（（１Ｓ，２Ｒ，５Ｒ）－アダマンタン－２－イル）アセトキシ）－２－（（（（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノイル）オキシ）メチル）プロピル１－（ピリジン－４－イル）ピペリジン－４－カルボキシレート（５４）
Figure 2023505316000113
０．１１ｍｍｏｌスケールで１－（ピリジン－４－イル）ピペリジン－４－カルボン酸を使用して、３－（２－（（１Ｒ，２ｒ，３Ｓ，５ｒ）－アダマンタン－２－イル）アセトキシ）－２－（ヒドロキシメチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエートから調製した。生成物４０ｍｇ（４９％の収率）を単離した。LCMS: 計算値m/z (M+H) = 733.5, 実測値733.7, RT = 3.54分.
[実施例５５]
３－（２－（（１Ｓ，２Ｒ，５Ｒ）－アダマンタン－２－イル）アセトキシ）－２－（（（Ｎα，Ｎα－ジメチル－Ｌ－ヒスチジル）オキシ）メチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエート（５５）
Figure 2023505316000114
０．１１ｍｍｏｌスケールでＮα，Ｎα－ジメチル－Ｌ－ヒスチジンを使用し、カップリング剤としてＥＤＣの代わりにＡＯＰおよび溶媒としてジクロロメタンの代わりにＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミドを使用して、３－（２－（（１Ｒ，２ｒ，３Ｓ，５ｒ）－アダマンタン－２－イル）アセトキシ）－２－（ヒドロキシメチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエートから調製した。生成物６ｍｇ（８％の収率）を単離した。LCMS: 計算値m/z (M+H) = 710.5, 実測値710.6, RT = 3.48分.
[実施例５６]
３－（（３－（（３ｒ，５ｒ，７ｒ）－アダマンタン－１－イル）プロパノイル）オキシ）－２－（（（４－（ピロリジン－１－イル）ブタノイル）オキシ）メチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエート（５６）
Figure 2023505316000115
ステップ１：３－（（３－（（３ｒ，５ｒ，７ｒ）－アダマンタン－１－イル）プロパノイル）オキシ）－２－（ヒドロキシメチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエート
Figure 2023505316000116
３－（アダマンタン－１－イル）プロパン酸（３９６ｍｇ、１Ｅｑ、１．９０ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（２０ｍＬ）に溶かした混合物に、３－ヒドロキシ－２－（ヒドロキシメチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエート（７００ｍｇ、１Ｅｑ、１．９０ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（７３６ｍｇ、９８９μＬ、３Ｅｑ、５．７０ｍｍｏｌ）、およびＤＭＡＰ（２３ｍｇ、０．１Ｅｑ、１９０μｍｏｌ）を添加した。最後にＥＤＣ（５４６ｍｇ、１．５Ｅｑ、２．８５ｍｍｏｌ）を添加し、２３℃で１８時間撹拌した。この時間の後、反応混合物を濃縮し、フラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ５０ｇ、１６分かけてヘキサン中の０～４０％酢酸エチル）によって精製した。３－（（３－（（１ｓ、３Ｒ、５Ｓ）－アダマンタン－１－イル）プロパノイル）オキシ）－２－（ヒドロキシメチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエート（０．３０５ｇ、２８．７％）を無色油状物として得た。1H NMR (500 MHz, クロロホルム-d) δ 5.41 - 5.28 (m, 4H), 4.22 - 4.10 (m, 4H), 3.61 (t, J = 5.9 Hz, 2H), 2.76 (td, J = 6.8, 1.1 Hz, 2H), 2.35 - 2.24 (m, 6H), 2.23 - 2.14 (m, 1H), 2.04 (dt, J = 8.1, 6.2 Hz, 4H), 1.96 - 1.93 (m, 4H), 1.75 - 1.67 (m, 4H), 1.65 - 1.55 (m, 5H), 1.48 - 1.37 (m, 10H), 1.37 - 1.22 (m, 9H), 0.92 - 0.85 (m, 3H).
ステップ２：３－（（３－（（３ｒ，５ｒ，７ｒ）－アダマンタン－１－イル）プロパノイル）オキシ）－２－（（（４－（ピロリジン－１－イル）ブタノイル）オキシ）メチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエート（５６）
Figure 2023505316000117
４－（ピロリジン－１－イル）ブタン酸（１８ｍｇ、１Ｅｑ、０．１２ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（２０ｍＬ）に溶かした混合物に、３－（（３－（（３ｒ，５ｒ，７ｒ）－アダマンタン－１－イル）プロパノイル）オキシ）－２－（ヒドロキシメチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエート（０．０６５ｇ、１Ｅｑ、０．１２ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（４５ｍｇ、６１μＬ、３Ｅｑ、０．３５ｍｍｏｌ）、およびＤＭＡＰ（２．８ｍｇ、０．２Ｅｑ、２３μｍｏｌ）を添加した。最後にＥＤＣ（３３ｍｇ、１．５Ｅｑ、０．１７ｍｍｏｌ）を添加し、２３℃で１８時間撹拌した。この時間の後、反応混合物を濃縮し、フラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ１０ｇ、１０分にわたりジクロロメタン中の０～１０％メタノール）によって精製した。３－（（３－（（３ｒ，５ｒ，７ｒ）－アダマンタン－１－イル）プロパノイル）オキシ）－２－（（（４－（ピロリジン－１－イル）ブタノイル）オキシ）メチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエート（７０ｍｇ、８７％）を無色油状物として得た。1H NMR (500 MHz, クロロホルム-d) δ 5.43 - 5.29 (m, 4H), 4.24 - 4.08 (m, 6H), 2.77 (t, J = 6.7 Hz, 2H), 2.51 (d, J = 18.9 Hz, 5H), 2.43 - 2.24 (m, 7H), 2.09 - 2.01 (m, 4H), 1.97 - 1.94 (m, 3H), 1.90 - 1.75 (m, 4H), 1.75 - 1.54 (m, 12H), 1.50 - 1.22 (m, 21H), 0.89 (t, J = 6.9 Hz, 3H). LCMS: 計算値m/z (M+H) = 698.5, 実測値698.7, RT = 3.56分.
以下の実施例５７および５８は、実施例５６と同様の手順を使用して調製したが、最終ステップで使用されるカルボン酸ビルディングブロックを変更した。
[実施例５７]
３－（（３－（（３ｒ，５ｒ，７ｒ）－アダマンタン－１－イル）プロパノイル）オキシ）－２－（（（（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノイル）オキシ）メチル）プロピル １－（ピリジン－４－イル）ピペリジン－４－カルボキシレート（５７）
Figure 2023505316000118
０．１１ｍｍｏｌスケールで１－（ピリジン－４－イル）ピペリジン－４－カルボン酸を使用して、３－（（３－（（３ｒ，５ｒ，７ｒ）－アダマンタン－１－イル）プロパノイル）オキシ）－２－（ヒドロキシメチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエートから調製した。生成物４４ｍｇ（５０％の収率）を単離した。LCMS: 計算値m/z (M+H) = 747.5, 実測値747.7, RT = 3.61分.
[実施例５８]
３－（（３－（（３Ｓ，５Ｓ，７Ｓ）－アダマンタン－１－イル）プロパノイル）オキシ）－２－（（（（Ｎα，Ｎα－ジメチル－Ｌ－ヒスチジル））オキシ）メチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエート（５８）
Figure 2023505316000119
０．１１ｍｍｏｌスケールでＮα，Ｎα－ジメチル－Ｌ－ヒスチジンを使用し、カップリング剤としてＥＤＣの代わりにＡＯＰおよび溶媒としてジクロロメタンの代わりにＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミドを使用して、３－（（３－（（３ｒ，５ｒ，７ｒ）－アダマンタン－１－イル）プロパノイル）オキシ）－２－（ヒドロキシメチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエートから調製した。生成物１２ｍｇ（１４％の収率）を単離した。LCMS: 計算値m/z (M+H) = 724.5, 実測値724.6, RT = 3.56分.
[実施例５９]
３－（２－（（３ｒ，５ｒ，７ｒ）－アダマンタン－１－イル）アセトキシ）－２－（（（（２－（４－メチルピペラジン－１－イル）エトキシ）カルボニル）オキシ）メチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエート（５９）
Figure 2023505316000120
３－（２－（（３ｒ，５ｒ，７ｒ）－アダマンタン－１－イル）アセトキシ）－２－（ヒドロキシメチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエート（１００ｍｇ、１Ｅｑ、１８４μｍｏｌ）をジクロロメタン（１ｍＬ）に溶かした溶液に、ピリジン（２９．０ｍｇ、３０μＬ、２Ｅｑ、３６７μｍｏｌ）、ＤＭＡＰ（６．７３ｍｇ、０．３Ｅｑ、５５．１μｍｏｌ）、および４－ニトロフェニルクロロホルメート（７４．０ｍｇ、２Ｅｑ、３６７μｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を、２３℃で１時間撹拌した。この時間の後、それにＤＩＰＥＡ（９４．９ｍｇ、０．１３ｍＬ、４Ｅｑ、７３４μｍｏｌ）および２－（４－メチルピペラジン－１－イル）エタン－１－オール（１０６ｍｇ、４Ｅｑ、７３４μｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を２３℃でさらに１８時間撹拌した。この時間の後、反応混合物をジクロロメタン（１０ｍＬ）で希釈し、０．７５Ｍ炭酸ナトリウム水溶液（３×１０ｍＬ）、水（１０ｍＬ）、および水性飽和塩化ナトリウム（１０ｍＬ）で洗浄した。得られた有機層を硫酸ナトリウムで脱水し、濃縮し、残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ１０ｇ、１２分にわたりジクロロメタン中の０～２５％メタノール）によって精製した。３－（２－（（３ｒ，５ｒ，７ｒ）－アダマンタン－１－イル）アセトキシ）－２－（（（（２－（４－メチルピペラジン－１－イル）エトキシ）カルボニル）オキシ）メチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエート（５０ｍｇ、３８％）を淡黄色油状物として得た。1H NMR (500 MHz, クロロホルム-d) δ 5.42 - 5.29 (m, 4H), 4.25 (td, J = 5.9, 1.2 Hz, 2H), 4.21 (dd, J = 6.1, 1.1 Hz, 2H), 4.15 (dd, J = 6.1, 1.2 Hz, 2H), 4.13 (dd, J = 5.9, 1.2 Hz, 2H), 2.77 (t, J = 6.7 Hz, 2H), 2.67 (td, J = 5.9, 1.2 Hz, 2H), 2.48 - 2.38 (m, 1H), 2.33 - 2.28 (m, 5H), 2.10 - 2.02 (m, 6H), 1.97 (s, 4H), 1.70 (d, J = 12.5 Hz, 6H), 1.65 - 1.57 (m, 14H), 1.40 - 1.25 (m, 15H), 0.89 (t, J = 7.1 Hz, 3H). LCMS: 計算値m/z (M+H) = 715.5, 実測値715.5, RT = 3.62分.
以下の実施例６０～８２は、実施例５９と同様の手順を使用して調製したが、アルコール反応物（先の実施例の手順において記載された、または下に示すように調製されたすべての中間体）および最終ステップで使用されるアミノアルコールビルディングブロックを変更した。
[実施例６０]
３－（２－（（３ｒ，５ｒ，７ｒ）－アダマンタン－１－イル）アセトキシ）－２－（（（（（１－エチルピロリジン－３－イル）メトキシ）カルボニル）オキシ）メチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエート（６０）
Figure 2023505316000121
０．１８ｍｍｏｌスケールで（１－エチルピロリジン－３－イル）メタノールを使用して、３－（２－（（３ｒ，５ｒ，７ｒ）－アダマンタン－１－イル）アセトキシ）－２－（ヒドロキシメチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエートから調製した。生成物３０ｍｇ（２３％の収率）を単離した。LCMS: 計算値m/z (M+H) = 700.5, 実測値700.7, RT = 3.71分.
[実施例６１]
３－（２－（（３ｒ，５ｒ，７ｒ）－アダマンタン－１－イル）アセトキシ）－２－（（（（（１－イソプロピルピペリジン－４－イル）オキシ）カルボニル）オキシ）メチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエート（６１）
Figure 2023505316000122
０．１８ｍｍｏｌスケールで１－イソプロピルピペリジン－４－オールを使用して、３－（２－（（３ｒ，５ｒ，７ｒ）－アダマンタン－１－イル）アセトキシ）－２－（ヒドロキシメチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエートから調製した。生成物６７ｍｇ（５１％の収率）を単離した。LCMS: 計算値m/z (M+H) = 714.5, 実測値714.6, RT = 3.64分.
[実施例６２]
３－（２－（（３ｒ，５ｒ，７ｒ）－アダマンタン－１－イル）アセトキシ）－２－（（（（３－（４－メチルピペラジン－１－イル）プロポキシ）カルボニル）オキシ）メチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエート（６２）
Figure 2023505316000123
０．１８ｍｍｏｌスケールで３－（４－メチルピペラジン－１－イル）プロパン－１－オールを使用して、３－（２－（（３ｒ，５ｒ，７ｒ）－アダマンタン－１－イル）アセトキシ）－２－（ヒドロキシメチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエートから調製した。生成物５９ｍｇ（４４％の収率）を単離した。LCMS: 計算値m/z (M+H) = 729.5, 実測値729.4, RT = 3.69分.
[実施例６３]
３－（２－（（３ｒ，５ｒ，７ｒ）－アダマンタン－１－イル）アセトキシ）－２－（（（（（１－エチルピペリジン－３－イル）オキシ）カルボニル）オキシ）メチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエート（６３）
Figure 2023505316000124
０．１８ｍｍｏｌスケールで１－エチルピペリジン－３－オールを使用して、３－（２－（（３ｒ，５ｒ，７ｒ）－アダマンタン－１－イル）アセトキシ）－２－（ヒドロキシメチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエートから調製した。生成物５０ｍｇ（３９％の収率）を単離した。LCMS: 計算値m/z (M+H) = 700.5, 実測値700.8, RT = 3.58分.
[実施例６４]
３－（２－（（３ｒ，５ｒ，７ｒ）－アダマンタン－１－イル）アセトキシ）－２－（（（（２－（１－メチルピロリジン－２－イル）エトキシ）カルボニル）オキシ）メチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエート（６４）
Figure 2023505316000125
０．１８ｍｍｏｌスケールで２－（１－メチルピロリジン－２－イル）エタン－１－オールを使用して、３－（２－（（３ｒ，５ｒ，７ｒ）－アダマンタン－１－イル）アセトキシ）－２－（ヒドロキシメチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエートから調製した。生成物４４ｍｇ（３４％の収率）を単離した。LCMS: 計算値m/z (M+H) = 700.5, 実測値700.2, RT = 3.63分.
[実施例６５]
３－（２－（（３ｒ，５ｒ，７ｒ）－アダマンタン－１－イル）アセトキシ）－２－（（（（４－（ジメチルアミノ）ブトキシ）カルボニル）オキシ）メチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエート（６５）
Figure 2023505316000126
０．１８ｍｍｏｌスケールで４－（ジメチルアミノ）ブタン－１－オールを使用して、３－（２－（（３ｒ，５ｒ，７ｒ）－アダマンタン－１－イル）アセトキシ）－２－（ヒドロキシメチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエートから調製した。生成物３７ｍｇ（２９％の収率）を単離した。LCMS: 計算値m/z (M+H) = 688.5, 実測値688.3, RT = 3.62分.
[実施例６６]
１３－（（２－（（３ｒ，５ｒ，７ｒ）－アダマンタン－１－イル）アセトキシ）メチル）－２，５－ジメチル－１０－オキソ－９，１１－ジオキサ－２，５－ジアザテトラデカン－１４－イル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエート（６６）
Figure 2023505316000127
０．１８ｍｍｏｌスケールで３－（（２－（ジメチルアミノ）エチル）（メチル）アミノ）プロパン－１－オールを使用して、３－（２－（（３ｒ，５ｒ，７ｒ）－アダマンタン－１－イル）アセトキシ）－２－（ヒドロキシメチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエートから調製した。生成物３２ｍｇ（２４％の収率）を単離した。LCMS: 計算値m/z (M+H) = 731.5, 実測値731.5, RT = 3.59分.
[実施例６７]
３－（（（３－（ジエチルアミノ）プロポキシ）カルボニル）オキシ）－２－（（（（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノイル）オキシ）メチル）プロピル３，５－ジ－ｔｅｒｔ－ブチルベンゾエート（６７）
Figure 2023505316000128
０．１７ｍｍｏｌスケールで３－（ジエチルアミノ）－１－プロパノールを使用して、３－ヒドロキシ－２－（（（（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノイル）オキシ）メチル）プロピル３，５－ジ－ｔｅｒｔ－ブチルベンゾエートから調製した。生成物９５ｍｇ（７５％の収率）を単離した。LCMS: 計算値m/z (M+H) = 742.6, 実測値742.7, RT = 3.60分.
[実施例６８]
３－（（（３－（ジエチルアミノ）プロポキシ）カルボニル）オキシ）－２－（（（（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノイル）オキシ）メチル）プロピル（１ｒ，１’ｓ，４Ｒ，４’Ｒ）－４’－ペンチル－［１，１’－ビ（シクロヘキサン）］－４－カルボキシレート（６８）
Figure 2023505316000129
０．１６ｍｍｏｌスケールで３－（ジエチルアミノ）－１－プロパノールを使用して、３－ヒドロキシ－２－（（（（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノイル）オキシ）メチル）プロピル（１ｒ，１’ｓ，４Ｒ，４’Ｒ）－４’－ペンチル－［１，１’－ビ（シクロヘキサン）］－４－カルボキシレートから調製した。生成物９８ｍｇ（７８％の収率）を単離した。LCMS: 計算値m/z (M+H) = 788.6, 実測値788.7, RT = 4.05分.
[実施例６９]
３－（２－（（１ｒ，３ｒ）－アダマンタン－２－イル）アセトキシ）－２－（（（（３－（ジエチルアミノ）プロポキシ）カルボニル）オキシ）メチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエート（６９）
Figure 2023505316000130
０．０９ｍｍｏｌスケールで３－（ジエチルアミノ）－１－プロパノールを使用して、３－（２－（（１Ｓ，２Ｒ，５Ｒ）－アダマンタン－２－イル）アセトキシ）－２－（ヒドロキシメチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエートから調製した。生成物５３ｍｇ（８２％の収率）を単離した。LCMS: 計算値m/z (M+H) = 702.5, 実測値702.6, RT = 3.50分.
[実施例７０]
３－（（３－（（１ｒ、３ｓ）－アダマンタン－１－イル）プロパノイル）オキシ）－２－（（（（３－（ジエチルアミノ）プロポキシ）カルボニル）オキシ）メチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエート（７０）
Figure 2023505316000131
０．０９ｍｍｏｌスケールで３－（ジエチルアミノ）－１－プロパノールを使用して、３－（２－（（１Ｓ，２Ｒ，５Ｒ）－アダマンタン－２－イル）アセトキシ）－２－（ヒドロキシメチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエートから調製した。生成物５０ｍｇ（７８％の収率）を単離した。LCMS: 計算値m/z (M+H) = 716.5, 実測値716.6, RT = 3.59分.
[実施例７１]
３－（２－（（３ｒ，５ｒ，７ｒ）－アダマンタン－１－イル）アセトキシ）－２－（（（（（１－エチルピペリジン－３－イル）メトキシ）カルボニル）オキシ）メチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエート（７１）
Figure 2023505316000132
０．７０ｍｍｏｌスケールで（１－エチルピペリジン－３－イル）メタノールを使用して、３－（２－（（３ｒ，５ｒ，７ｒ）－アダマンタン－１－イル）アセトキシ）－２－（ヒドロキシメチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエートから調製した。生成物１６３ｍｇ（３３％の収率）を単離した。LCMS: 計算値m/z (M+H) = 714.5, 実測値714.5, RT = 3.50分.
[実施例７２]
３－（２－（（１ｒ，３ｒ）－アダマンタン－２－イル）アセトキシ）－２－（（（（（１－エチルピペリジン－３－イル）メトキシ）カルボニル）オキシ）メチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエート（７２）
Figure 2023505316000133
０．５９ｍｍｏｌスケールで（１－エチルピペリジン－３－イル）メタノールを使用して、３－（２－（（１Ｓ，２Ｒ，５Ｒ）－アダマンタン－２－イル）アセトキシ）－２－（ヒドロキシメチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエートから調製した。生成物２３８ｍｇ（５６％の収率）を単離した。LCMS: 計算値m/z (M+H) = 714.5, 実測値714.5, RT = 3.46分.
[実施例７３]
３－（（３－（（１ｒ、３ｓ）－アダマンタン－１－イル）プロパノイル）オキシ）－２－（（（（（１－エチルピペリジン－３－イル）メトキシ）カルボニル）オキシ）メチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエート（７３）
Figure 2023505316000134
０．３６ｍｍｏｌスケールで（１－エチルピペリジン－３－イル）メタノールを使用して、３－（２－（（１Ｓ，２Ｒ，５Ｒ）－アダマンタン－２－イル）アセトキシ）－２－（ヒドロキシメチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエートから調製した。生成物２０７ｍｇ（７９％の収率）を単離した。LCMS: 計算値m/z (M+H) = 728.5, 実測値728.7, RT = 3.52分.
[実施例７４]
３－（（（（１－エチルピペリジン－３－イル）メトキシ）カルボニル）オキシ）－２－（（（（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノイル）オキシ）メチル）プロピル（１ｒ，１’ｓ，４Ｒ，４’Ｒ）－４’－ペンチル－［１，１’－ビ（シクロヘキサン）］－４－カルボキシレート（７４）
Figure 2023505316000135
０．３２ｍｍｏｌスケールで（１－エチルピペリジン－３－イル）メタノールを使用して、３－ヒドロキシ－２－（（（（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノイル）オキシ）メチル）プロピル（１ｒ，１’ｓ，４Ｒ，４’Ｒ）－４’－ペンチル－［１，１’－ビ（シクロヘキサン）］－４－カルボキシレートから調製した。生成物１８６ｍｇ（７３％の収率）を単離した。LCMS: 計算値m/z (M+H) = 800.6, 実測値800.8, RT = 4.24分.
[実施例７５]
２－（（（（３－（ジエチルアミノ）プロポキシ）カルボニル）オキシ）メチル）プロパン－１，３－ジイルビス（２－（（３ｒ，５ｒ，７ｒ）－アダマンタン－１－イル）アセテート）（７５）
Figure 2023505316000136
ステップ１：２－（ヒドロキシメチル）プロパン－１，３－ジイルビス（２－（（３ｒ，５ｒ，７ｒ）－アダマンタン－１－イル）アセテート）
Figure 2023505316000137
トリメチロールメタン（５．００ｇ、１Ｅｑ、４７．１ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（１２５ｍＬ）およびテトラヒドロフラン（１２５ｍＬ）に溶かした溶液に、１－アダマンタン酢酸（９．１５ｇ、１Ｅｑ、４７．１ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（９．１３ｇ、１２．３ｍＬ、１．５Ｅｑ、７０．７ｍｍｏｌ）、およびＤＭＡＰ（５７６ｍｇ、０．１Ｅｑ、４．７１ｍｍｏｌ）を添加した。最後にＥＤＣ（９．９４ｇ、１．１Ｅｑ、５１．８ｍｍｏｌ）を添加し、２３℃で１８時間撹拌した。回転蒸発により濃縮し、次いで５％水性クエン酸（２５０ｍＬ）を添加し、酢酸エチル（２００ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機物を５％クエン酸、水、およびブラインで洗浄した。硫酸ナトリウムで脱水し、濃縮した。粗残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ２００ｇ、２５分かけてヘキサン中の０～９０％酢酸エチル）によって精製した。２－（ヒドロキシメチル）プロパン－１，３－ジイルビス（２－（（３ｒ，５ｒ，７ｒ）－アダマンタン－１－イル）アセテート）（５．１ｇ、２４％）を無色油状物として得た。
ステップ２：２－（（（（（１－エチルピペリジン－３－イル）メトキシ）カルボニル）オキシ）メチル）プロパン－１，３－ジイルビス（２－（（３ｒ，５ｒ，７ｒ）－アダマンタン－１－イル）アセテート）（７５）
０．１１ｍｍｏｌスケールで３－（ジエチルアミノ）－１－プロパノールを使用して、２－（ヒドロキシメチル）プロパン－１，３－ジイルビス（２－（（３ｒ，５ｒ，７ｒ）－アダマンタン－１－イル）アセテート）から調製した。生成物３１ｍｇ（４６％の収率）を単離した。LCMS: 計算値m/z (M+H) = 616.4, 実測値616.6, RT = 2.94分.
[実施例７６]
３－（（（３－（ジエチルアミノ）プロポキシ）カルボニル）オキシ）－２－（（（（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノイル）オキシ）メチル）プロピル（１ｒ，１’ｒ，４Ｒ，４’Ｒ）－４’－エチル－［１，１’－ビ（シクロヘキサン）］－４－カルボキシレート（７６）
Figure 2023505316000138
ステップ１：３－ヒドロキシ－２－（（（（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノイル）オキシ）メチル）プロピル（１ｒ，１’ｒ，４Ｒ，４’Ｒ）－４’－エチル－［１，１’－ビ（シクロヘキサン）］－４－カルボキシレート
Figure 2023505316000139
０．５３ｍｍｏｌスケールでｔｒａｎｓ，ｔｒａｎｓ－４’－エチル－［１，１’－ビ（シクロヘキサン）］－４－カルボン酸を使用して、３－ヒドロキシ－２－（ヒドロキシメチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエートから調製した。１６１ｍｇ（５１％の収率）を単離した。
ステップ２：３－（（（３－（ジエチルアミノ）プロポキシ）カルボニル）オキシ）－２－（（（（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノイル）オキシ）メチル）プロピル（１ｒ，１’ｒ，４Ｒ，４’Ｒ）－４’－エチル－［１，１’－ビ（シクロヘキサン）］－４－カルボキシレート（７６）
０．２７ｍｍｏｌスケールで３－（ジエチルアミノ）－１－プロパノールを使用して、３－ヒドロキシ－２－（（（（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノイル）オキシ）メチル）プロピル（１ｒ，１’ｒ，４Ｒ，４’Ｒ）－４’－エチル－［１，１’－ビ（シクロヘキサン）］－４－カルボキシレートから調製した。生成物１７８ｍｇ（８７％の収率）を単離した。LCMS: 計算値m/z (M+H) = 746.6, 実測値746.7, RT = 3.92分.
[実施例７７]
３－（（（３－（ジエチルアミノ）プロポキシ）カルボニル）オキシ）－２－（（（（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノイル）オキシ）メチル）プロピル（１ｒ，１’ｓ，４Ｒ，４’Ｒ）－４’－ブチル－［１，１’－ビ（シクロヘキサン）］－４－カルボキシレート（７７）
Figure 2023505316000140
ステップ１：３－ヒドロキシ－２－（（（（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノイル）オキシ）メチル）プロピル（１ｒ，１’ｓ，４Ｒ，４’Ｒ）－４’－ブチル－［１，１’－ビ（シクロヘキサン）］－４－カルボキシレート
Figure 2023505316000141
０．５４ｍｍｏｌスケールでｔｒａｎｓ，ｔｒａｎｓ－４’－ブチル－［１，１’－ビ（シクロヘキサン）］－４－カルボン酸を使用して、３－ヒドロキシ－２－（ヒドロキシメチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエートから調製した。１５９ｍｇ（４８％の収率）を単離した。
ステップ２：３－（（（３－（ジエチルアミノ）プロポキシ）カルボニル）オキシ）－２－（（（（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノイル）オキシ）メチル）プロピル（１ｒ，１’ｓ，４Ｒ，４’Ｒ）－４’－ブチル－［１，１’－ビ（シクロヘキサン）］－４－カルボキシレート（７７）
０．２６ｍｍｏｌスケールで３－（ジエチルアミノ）－１－プロパノールを使用して、３－ヒドロキシ－２－（（（（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノイル）オキシ）メチル）プロピル（１ｒ，１’ｓ，４Ｒ，４’Ｒ）－４’－ブチル－［１，１’－ビ（シクロヘキサン）］－４－カルボキシレートから調製した。生成物１５３ｍｇ（７７％の収率）を単離した。LCMS: 計算値m/z (M+H) = 774.6, 実測値774.7, RT = 4.02分.
[実施例７８]
３－（（５－シクロヘキシルペンタノイル）オキシ）－２－（（（（３－（ジエチルアミノ）プロポキシ）カルボニル）オキシ）メチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエート（７８）
Figure 2023505316000142
ステップ１：３－（（５－シクロヘキシルペンタノイル）オキシ）－２－（ヒドロキシメチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエート
Figure 2023505316000143
０．５４ｍｍｏｌスケールで５－シクロヘキシルペンタン酸を使用して、３－ヒドロキシ－２－（ヒドロキシメチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエートから調製した。１４０ｍｇ（４８％の収率）を単離した。
ステップ２：３－（（５－シクロヘキシルペンタノイル）オキシ）－２－（（（（３－（ジエチルアミノ）プロポキシ）カルボニル）オキシ）メチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエート（７８）
０．２６ｍｍｏｌスケールで３－（ジエチルアミノ）－１－プロパノールを使用して、３－（（５－シクロヘキシルペンタノイル）オキシ）－２－（ヒドロキシメチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエートから調製した。生成物１５５ｍｇ（８６％の収率）を単離した。LCMS: 計算値m/z (M+H) = 692.5, 実測値692.7, RT = 3.48分.
[実施例７９]
３－（（（３－（ジエチルアミノ）プロポキシ）カルボニル）オキシ）－２－（（（（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノイル）オキシ）メチル）プロピル４－プロピルシクロヘキサン－１－カルボキシレート（７９）
Figure 2023505316000144
ステップ１：３－ヒドロキシ－２－（（（（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノイル）オキシ）メチル）プロピル４－プロピルシクロヘキサン－１－カルボキシレート
Figure 2023505316000145
０．５４ｍｍｏｌスケールで４－プロピルシクロヘキサン－１－カルボン酸を使用して、３－ヒドロキシ－２－（ヒドロキシメチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエートから調製した。１４２ｍｇ（５０％の収率）を単離した。
ステップ２：３－（（（３－（ジエチルアミノ）プロポキシ）カルボニル）オキシ）－２－（（（（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノイル）オキシ）メチル）プロピル４－プロピルシクロヘキサン－１－カルボキシレート（７９）
０．２７ｍｍｏｌスケールで３－（ジエチルアミノ）－１－プロパノールを使用して、３－ヒドロキシ－２－（（（（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノイル）オキシ）メチル）プロピル４－プロピルシクロヘキサン－１－カルボキシレートから調製した。生成物１０８ｍｇ（５８％の収率）を単離した。LCMS: 計算値m/z (M+H) = 678.5, 実測値678.7, RT = 3.38分.
[実施例８０]
３－（（（３－（ジエチルアミノ）プロポキシ）カルボニル）オキシ）－２－（（（（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノイル）オキシ）メチル）プロピル４－ブチルシクロヘキサン－１－カルボキシレート（８０）
Figure 2023505316000146
ステップ１：３－ヒドロキシ－２－（（（（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノイル）オキシ）メチル）プロピル４－ブチルシクロヘキサン－１－カルボキシレート
Figure 2023505316000147
０．５４ｍｍｏｌスケールで４－ブチルシクロヘキサン－１－カルボン酸を使用して、３－ヒドロキシ－２－（ヒドロキシメチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエートから調製した。１４２ｍｇ（４９％の収率）を単離した。
ステップ２：３－（（（３－（ジエチルアミノ）プロポキシ）カルボニル）オキシ）－２－（（（（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノイル）オキシ）メチル）プロピル４－ブチルシクロヘキサン－１－カルボキシレート（８０）
０．２７ｍｍｏｌスケールで３－（ジエチルアミノ）－１－プロパノールを使用して、３－ヒドロキシ－２－（（（（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノイル）オキシ）メチル）プロピル４－ブチルシクロヘキサン－１－カルボキシレートから調製した。生成物１１１ｍｇ（６０％の収率）を単離した。LCMS: 計算値m/z (M+H) = 692.5, 実測値692.7, RT = 3.48分.
[実施例８１]
３－（（（３－（ジエチルアミノ）プロポキシ）カルボニル）オキシ）－２－（（（（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノイル）オキシ）メチル）プロピル４－（ｔｅｒｔ－ブチル）シクロヘキサン－１－カルボキシレート（８１）
Figure 2023505316000148
ステップ１：３－ヒドロキシ－２－（（（（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノイル）オキシ）メチル）プロピル４－（ｔｅｒｔ－ブチル）シクロヘキサン－１－カルボキシレート
０．５４ｍｍｏｌスケールで４－ｔｅｒｔ－ブチルシクロヘキサン－１－カルボン酸を使用して、３－ヒドロキシ－２－（ヒドロキシメチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエートから調製した。１５１ｍｇ（５２％の収率）を単離した。
ステップ２：３－（（（３－（ジエチルアミノ）プロポキシ）カルボニル）オキシ）－２－（（（（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノイル）オキシ）メチル）プロピル４－（ｔｅｒｔ－ブチル）シクロヘキサン－１－カルボキシレート（８１）
０．２８ｍｍｏｌスケールで３－（ジエチルアミノ）－１－プロパノールを使用して、３－ヒドロキシ－２－（（（（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノイル）オキシ）メチル）プロピル４－（ｔｅｒｔ－ブチル）シクロヘキサン－１－カルボキシレートから調製した。生成物１２３ｍｇ（６３％の収率）を単離した。LCMS: 計算値m/z (M+H) = 692.5, 実測値692.7, RT = 3.43分.
[実施例８２]
３－（（（３－（ジエチルアミノ）プロポキシ）カルボニル）オキシ）－２－（（（（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノイル）オキシ）メチル）プロピル４－ペンチルシクロヘキサン－１－カルボキシレート（８２）
Figure 2023505316000149
ステップ１：３－ヒドロキシ－２－（（（（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノイル）オキシ）メチル）プロピル４－ペンチルシクロヘキサン－１－カルボキシレート
Figure 2023505316000150
０．５４ｍｍｏｌスケールで４－ペンチルシクロヘキサン－１－カルボン酸を使用して、３－ヒドロキシ－２－（ヒドロキシメチル）プロピル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエートから調製した。１３９ｍｇ（４７％の収率）を単離した。
ステップ２：３－（（（３－（ジエチルアミノ）プロポキシ）カルボニル）オキシ）－２－（（（（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノイル）オキシ）メチル）プロピル４－ペンチルシクロヘキサン－１－カルボキシレート（８２）
０．２５ｍｍｏｌスケールで３－（ジエチルアミノ）－１－プロパノールを使用して、３－ヒドロキシ－２－（（（（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノイル）オキシ）メチル）プロピル４－ペンチルシクロヘキサン－１－カルボキシレートから調製した。生成物１０６ｍｇ（５９％の収率）を単離した。LCMS: 計算値m/z (M+H) = 706.6, 実測値706.72, RT = 3.55分.
[実施例８３]
２－（（２－（（３ｒ，５ｒ，７ｒ）－アダマンタン－１－イル）アセトキシ）メチル）－４－（（４－（ピロリジン－１－イル）ブタノイル）オキシ）ブチル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエート（８３）
Figure 2023505316000151
ステップ１：２－（ヒドロキシメチル）ブタン－１，４－ジオール
Figure 2023505316000152
トリエチルエタン－１，１，２－トリカルボキシレート（５ｇ、２０．３ｍｍｏｌ）をｔｅｒｔ－ブタノール（８０ｍＬ）に溶かした撹拌溶液に、２５℃でアルゴン雰囲気下でＮａＢＨ４（２．３ｇ、６０．９ｍｍｏｌ）を添加した。得られた懸濁液を加熱して還流し、メタノール（３ｍＬ）を３０分以内に３回に分けて滴下添加した。得られた溶液を別の３時間加熱して還流した。次いで、反応混合物を２５℃に冷却し、５Ｎ ＨＣｌ（２．５ｍＬ）で中和した。沈殿物をろ過し、ろ液を蒸発させて粗物質を得、これを、１０～１５％ＭｅＯＨのＤＣＭで溶出して、コンビフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製して、２－（ヒドロキシメチル）ブタン－１，４－ジオール（１．７ｇ、６９％）を黄色の液体として得た。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ1.34-1.46 (m, 2H), 1.49-1.63 (m, 1H), 3.27-3.48 (m, 6H), 4.34 (t, J = 5.2 Hz, 2H), 4.40 (t, J = 5.1 Hz, 1H).
ステップ２：２－（２，２－ジメチル－１，３－ジオキサン－５－イル）エタン－１－オール
Figure 2023505316000153
２－（ヒドロキシメチル）ブタン－１，４－ジオール（１．７ｇ、１４．１ｍｍｏｌ）および２，２－ジメトキシプロパン（４．３ｍＬ、３５．３ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（１０ｍＬ）に溶かした撹拌溶液に、アルゴン雰囲気下、２５℃でｐ－トルエンスルホン酸一水和物（０．３６ｇ、３．１ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を２５℃で１６時間撹拌した。この時間の後、反応物をトリエチルアミン（５ｍＬ）で中和した。溶媒を減圧下で除去して粗物質を得、これを１５％酢酸エチル－ヘキサンで溶出するコンビフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製して、２－（２，２－ジメチル－１，３－ジオキサン－５－イル）エタン－１－オール（１．２ｇ、５３％）を淡黄色の液体として得た。1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ1.41 (s, 6H), 1.50-1.60 (m, 2H), 1.88-1.98 (m, 1H), 3.63 (dd, J = 7.9, 11.8 Hz, 2H), 3.70 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 3.93 (dd, J = 4.5, 11.8 Hz, 2H).
ステップ３：２－（２，２－ジメチル－１，３－ジオキサン－５－イル）エチル４－（ピロリジン－１－イル）ブタノエート
Figure 2023505316000154
４－（ピロリジン－１－イル）ブタン酸（２５５ｍｇ、１．６ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（５ｍＬ）に溶かした撹拌溶液に、ＥＤＣ（３５５ｍｇ、１．８ｍｍｏｌ）およびＤＭＡＰ（３１ｍｇ、０．２ｍｍｏｌ）を２５℃で添加し、５分間撹拌した。この時間の後、トリエチルアミン（０．６ｍＬ、４．９６ｍｍｏｌ）および２－（２，２－ジメチル－１，３－ジオキサン－５－イル）エタン－１－オール（３０７ｍｇ、１．９２ｍｍｏｌ）を２５℃で添加した。反応塊を２５℃で１６時間撹拌した。反応混合物を水で希釈し、ＤＣＭ（３×１５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、ろ過し、減圧下で濃縮した。かくして得た粗物質を、２％ＭｅＯＨ－ＤＣＭで溶出するコンビフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製して、２－（２，２－ジメチル－１，３－ジオキサン－５－イル）エチル４－（ピロリジン－１－イル）ブタノエート（１４０ｍｇ、３８％）を淡黄色の液体として得た。ＬＣＭＳ：カラム－ＹＭＣ Ｔｒｉａｒｔ Ｃ１８（３３×２．１ｍｍ、３μ）、（移動相：９８％［０．０５％ＨＣＯＯＨの水］および２％［ＣＨ３ＣＮ］を０．７５分間保持し、次いで９０％［０．０５％ＨＣＯＯＨの水］および１０％［ＣＨ３ＣＮ］へと１．０分で、２％［０．０５％ＨＣＯＯＨの水］および９８％［ＣＨ３ＣＮ］へと２．０分で、この移動相組成を２．２５分まで保持し、最終的に３．０分で初期条件に戻した）。流速 =1.5 ml/分, 25℃ = 1.22分, 計算値m/z [M+H] = 300.2, 実測値300.5.
ステップ４：４－ヒドロキシ－３－（ヒドロキシメチル）ブチル４－（ピロリジン－１－イル）ブタノエート
Figure 2023505316000155
２－（２，２－ジメチル－１，３－ジオキサン－５－イル）エチル４－（ピロリジン－１－イル）ブタノエート（１４０ｍｇ、０．３ｍｍｏｌ）をＭｅＯＨ（１ｍＬ）に溶かした撹拌溶液に、２５℃で１Ｎ ＨＣｌ（０．９ｍＬ、０．９ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を４時間撹拌した。この時間の後、反応混合物を濃縮し、トルエンで２回共沸して、粗生成物（１２０ｍｇ）を得、これを精製せずに次のステップで直接使用した。ＬＣＭＳ：カラム－ＹＭＣ Ｔｒｉａｒｔ Ｃ１８（３３×２．１ｍｍ、３μ）、（移動相：９８％［０．０５％ＨＣＯＯＨの水］および２％［ＣＨ３ＣＮ］を０．７５分間保持し、次いで９０％［０．０５％ＨＣＯＯＨの水］および１０％［ＣＨ３ＣＮ］へと１．０分で、さらに２％［０．０５％ＨＣＯＯＨの水］および９８％［ＣＨ３ＣＮ］へと２．０分で、この移動相組成を２．２５分まで保持し、最終的に３．０分で初期条件に戻した）。流速 =1.5ml/分, 25℃ = 0.50分, 計算値m/z [M+H] = 260.2, 実測値260.2.
ステップ５：２－（ヒドロキシメチル）－４－（（４－（ピロリジン－１－イル）ブタノイル）オキシ）ブチル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエート
Figure 2023505316000156
リノール酸（０．３２ｍＬ、１．０ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（４ｍＬ）に溶かした撹拌溶液に、ＤＩＰＥＡ（０．５ｍＬ、２．８ｍｍｏｌ）、ＥＤＣ（３３３ｍｇ、１．８ｍｍｏｌ）およびＤＭＡＰ（１４ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ）を０℃で添加し、５分間撹拌した。この時間の後、４－ヒドロキシ－３－（ヒドロキシメチル）ブチル４－（ピロリジン－１－イル）ブタノエート（ステップ４からの粗製物、１１５ｍｇ）を０℃で添加した。反応混合物を２５℃で１６時間撹拌した。反応混合物を水で希釈し、ＤＣＭ（３×１５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、ろ過し、減圧下で濃縮した。粗物質を、２％ＭｅＯＨ－ＤＣＭで溶出して、コンビフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製して、２－（ヒドロキシメチル）－４－（（４－（ピロリジン－１－イル）ブタノイル）オキシ）ブチル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエート（１５０ｍｇ、２４％）を淡黄色の液体として得た。ＬＣＭＳ：カラム－ＹＭＣ Ｔｒｉａｒｔ Ｃ１８（３３×２．１ｍｍ、３μ）（移動相：９８％［０．０５％ＨＣＯＯＨの水］および２％［ＣＨ３ＣＮ］を０．７５分間保持し、次いで９０％［０．０５％ＨＣＯＯＨの水］および１０％［ＣＨ３ＣＮ］へと１．０分で、さらに２％［０．０５％ＨＣＯＯＨの水］および９８％［ＣＨ３ＣＮ］へと２．０分で、この移動相組成を２．２５分まで保持し、最終的に３．０分で初期条件に戻した）。流速 =1.5ml/分, 25℃ = 1.74分, 計算値m/z [M+H] = 522.41, 実測値522.7.
ステップ６：２－（（２－（（３ｒ，５ｒ，７ｒ）－アダマンタン－１－イル）アセトキシ）メチル）－４－（（４－（ピロリジン－１－イル）ブタノイル）オキシ）ブチル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエート（８３）
１－アダマンタン酢酸（８７．７４ｍｇ、０．４３ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（２ｍＬ）に溶かした撹拌溶液に、ＥＤＣ（１６５．３５ｍｇ、０．８６ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（０．１５ｍＬ、０．８６ｍｍｏｌ）およびＤＭＡＰ（３．５ｍｇ、０．０２ｍｍｏｌ）を、０℃で添加し、５分間撹拌した。次いで、２－（ヒドロキシメチル）－４－（（４－（ピロリジン－１－イル）ブタノイル）オキシ）ブチル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエート（２１０ｍｇ、０．４０ｍｍｏｌ）を０℃で添加した。反応混合物を２５℃で１６時間撹拌した。この時間の後、反応混合物を水で希釈し、ＤＣＭ（３×１５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、ろ過し、減圧下で濃縮した。粗物質をＰｒｅｐ－ＨＰＬＣによって精製して、２－（（２－（（３ｒ，５ｒ，７ｒ）－アダマンタン－１－イル）アセトキシ）メチル）－４－（（４－（ピロリジン－１－イル））ブタノイル）オキシ）ブチル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエート（２２ｍｇ、８％）を黄色の粘着性液体として得た。Ｐｒｅｐ－ＨＰＬＣ法：Ｗａｔｅｒｓ自動精製装置。カラム名：Ｘｔｅｒｒａ ＲＰ１８（５０×２０ｍｍ、５μ）、５０℃および流量１６ｍＬ／分で運転。移動相：Ａ＝０．１％ギ酸の水；Ｂ＝７０：３０：：アセトニトリル：ＴＨＦ＋０．１％ギ酸；グラジエントプロファイル：７０％Ａと３０％Ｂとの移動相の初期組成を、１４分で３０％Ａと７０％Ｂとに徐々に上昇させ、次いで１５分で１００％Ｂへと上昇させ、カラム洗浄のためにこの組成で１７分まで継続させ、次いで、１８分で初期組成に戻し、２０分まで保持した。ＬＣＭＳ：カラム－ＸＴＥＲＲＡ ＲＰ １８（４．６×５０ｍｍ）、５μ、（移動相：最初に８０％［０．１％ＨＣＯＯＨの水］および２０％［０．１％ＨＣＯＯＨの（７０：３０）ＡＣＮ：ＴＨＦ］；この初期条件を０．７５分間保持し、次いで６５％［０．１％ＨＣＯＯＨの水］および３５％［０．１％ＨＣＯＯＨの（７０：３０）ＡＣＮ：ＴＨＦ］へと３．０分で、次いで２％［０．１％ＨＣＯＯＨの水］および９８％［０．１％ＨＣＯＯＨの（７０：３０）ＡＣＮ：ＴＨＦ］へと６．０分で、この移動相組成を９．０分まで保持し、そして最終的に初期条件、すなわち；１１．００分で８０％［０．１％ＨＣＯＯＨの水］および２０％［０．１％ＨＣＯＯＨの（７０：３０）ＡＣＮ：ＴＨＦ］に戻し、この移動相組成を１２．１０分まで保持した。流速 =1.2 ml/分, RT = 5.19分, 計算値m/z [M+H] = 698.5, 実測値699.2.
[実施例８４]
２－（（２－（（３ｒ，５ｒ，７ｒ）－アダマンタン－１－イル）アセトキシ）メチル）－４－（（３－（４－メチルピペラジン－１－イル）プロパノイル）オキシ）ブチル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエート（８４）
Figure 2023505316000157
ステップ３における４－（ピロリジン－１－イル）ブタン酸を３－（４－メチルピペラジン－１－イル）プロパン酸に代えて、実施例８３に例示されるのと同様の手順により調製した。最終ステップの収量：３８ｍｇ、１４％。ＬＣＭＳ：カラム－ＸＴＥＲＲＡ ＲＰ １８（４．６×５０ｍｍ）、５μ、（移動相：最初に９５％［０．１％ＨＣＯＯＨの水］および５％［０．１％ＨＣＯＯＨの（７０：３０）ＡＣＮ：ＴＨＦ］；次いで７０％［０．１％ＨＣＯＯＨの水］および３０％［０．１％ＨＣＯＯＨの（７０：３０）ＡＣＮ：ＴＨＦ］へと０．７５分で、次いで２％［０．１％ＨＣＯＯＨの水］および９８％［０．１％ＨＣＯＯＨの（７０：３０）ＡＣＮ：ＴＨＦ］へと３．０分で、この移動相組成を４．９０分まで保持し、そして最終的に初期条件、すなわち；５．１０分で９５％［０．１％ＨＣＯＯＨの水］および５％［０．１％ＨＣＯＯＨの（７０：３０）ＡＣＮ：ＴＨＦ］へと戻した。流速 =1.2 mL/分, RT = 2.57分, 計算値m/z [M+H] = 713.5, MS実測値713.7.
[実施例８５]
２－（（２－（（３ｒ，５ｒ，７ｒ）－アダマンタン－１－イル）アセトキシ）メチル）－４－（（４－（ジプロピルアミノ）ブタノイル）オキシ）ブチル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエート
Figure 2023505316000158
ステップ３における４－（ピロリジン－１－イル）ブタン酸を４－（ジプロピルアミノ）ブタン酸に代えて、実施例８３に例示されるのと同様の手順により調製した。最終ステップの収量：２１ｍｇ、７％。ＬＣＭＳ：カラム－ＸＴＥＲＲＡ ＲＰ １８（４．６×５０ｍｍ）、５μ、（移動相：最初に８０％［０．１％ＨＣＯＯＨの水］および２０％［０．１％ＨＣＯＯＨの（７０：３０）ＡＣＮ：ＴＨＦ］；この初期条件を０．７５分間保持し、次いで６５％［０．１％ＨＣＯＯＨの水］および３５％［０．１％ＨＣＯＯＨの（７０：３０）ＡＣＮ：ＴＨＦ］へと３．０分で、次いで２％［０．１％ＨＣＯＯＨの水］および９８％［０．１％ＨＣＯＯＨの（７０：３０）ＡＣＮ：ＴＨＦ］へと６．０分で、この移動相組成を９．０分まで保持し、そして最終的に初期条件、すなわち；１１．００分で８０％［０．１％ＨＣＯＯＨの水］および２０％［０．１％ＨＣＯＯＨの（７０：３０）ＡＣＮ：ＴＨＦ］に戻し、この移動相組成を１２．１０分まで保持した。流速 =1.2 ml/分, RT = 5.18分, 計算値m/z [M+H] = 729.1, 実測値729.7.
[実施例８６]
２－（（２－（（３ｒ，５ｒ，７ｒ）－アダマンタン－１－イル）アセトキシ）メチル）－４－（２－（４－メチルピペラジン－１－イル）アセトキシ）ブチル（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノエート（８６）
Figure 2023505316000159
ステップ３における４－（ピロリジン－１－イル）ブタン酸を２－（４－メチルピペラジン－１－イル）酢酸に代えて、実施例８３に例示されるのと同様の手順により調製した。最終ステップの収量：１４ｍｇ、５％。ＬＣＭＳ：カラム－ＸＴＥＲＲＡ ＲＰ １８（４．６×５０ｍｍ）、５μ、（移動相：最初に８０％［０．１％ＨＣＯＯＨの水］および２０％［０．１％ＨＣＯＯＨの（７０：３０）ＡＣＮ：ＴＨＦ］；この初期条件を０．７５分間保持し、次いで６５％［０．１％ＨＣＯＯＨの水］および３５％［０．１％ＨＣＯＯＨの（７０：３０）ＡＣＮ：ＴＨＦ］へと３．０分で、次いで２％［０．１％ＨＣＯＯＨの水］および９８％［０．１％ＨＣＯＯＨの（７０：３０）ＡＣＮ：ＴＨＦ］へと６．０分、この移動相組成を９．０分まで保持し、そして最終的に初期条件、すなわち；１１．００分で８０％［０．１％ＨＣＯＯＨの水］および２０％［０．１％ＨＣＯＯＨの（７０：３０）ＡＣＮ：ＴＨＦ］に戻し、この移動相組成を１２．１０分まで保持した。流速 =1.2 ml/分, RT = 2.51分, 計算値m/z [M+H] = 699.5, 実測値: 699.3.
脂質ナノ粒子
スクリーニング
Ｆ．ＬＮＰ製剤
脂質ナノ粒子成分を、指定された脂質成分のモル比で１００％エタノールに溶解した。核酸（ＮＡ）カーゴを１０ｍＭクエン酸塩、１００ｍＭ ＮａＣｌ、ｐＨ４．０に溶解し、その結果、ＮＡカーゴの濃度およそ０．２２ｍｇ／ｍＬがもたらされた。一部の実施形態では、ＮＡカーゴは、１：１０～１０：１の、機能的ＮＡのバーコードに対する質量比で混合された機能的ＮＡ（例えば、ｓｉＲＮＡ、アンチセンス、発現ＤＮＡ、ｍＲＮＡ）と、リポーターＤＮＡバーコード（先に記載のSago, 2018 PNAS）との両方からなる。
ＬＮＰを、１１．７の、総脂質のＮＡに対する質量比で製剤化した。ＬＮＰを、製造業者のプロトコルに従って、Ｐｒｅｃｉｓｉｏｎ Ｎａｎｏｓｙｓｔｅｍｓ ＮａｎｏＡｓｓｅｍｂｌｒ ＳｐａｒｋまたはＢｅｎｃｈｔｏｐ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔを使用して、脂質とＮＡ溶液とのマイクロ流体混合によって形成した。差圧流量を使用して混合の間、水性溶媒の有機溶媒に対する２：１の比を維持した。混合の後、ＬＮＰを収集し、ＰＢＳ（およそ１：１ ｖ／ｖ）で希釈し、ＰＢＳにて４℃で８～２４時間、２０ｋＤａフィルターに対する透析を使用してさらなる緩衝剤交換を行った。この最初の透析の後、個々のＬＮＰ製剤それぞれについて、サイズおよび多分散度を測定するためにＤＬＳを介して特徴づけを行い、ＴＮＳアッセイを介してＬＮＰの亜集団のｐＫａを測定した。特定の径および多分散度の範囲に包含されるＬＮＰをプールし、１００ｋＤａ透析カセットに対して４℃で１～４時間ＰＢＳに対してさらに透析した。２回目の透析後、ＬＮＰを、０．２２μＭフィルターを使用してろ過滅菌し、さらなる使用向けに４℃で保存した。
Ｇ．ＬＮＰ特性評価
ＤＬＳ － ＬＮＰ流体力学的径および多分散度パーセント（ＰＤＩ％）を、ハイスループット動的光散乱（ＤＬＳ）（ＤｙｎａＰｒｏプレートリーダーＩＩ、Ｗｙａｔｔ）を使用して測定した。ＬＮＰを１×ＰＢＳで適当な濃度に希釈し、分析した。
濃度およびカプセル化効率 － ＮＡの濃度は、製造業者の取扱説明書のとおり、Ｑｕｂｉｔ ｍｉｃｒｏＲＮＡキット（ｓｉＲＮＡ用）またはＨＳ ＲＮＡキット（ｍＲＮＡ用）によって決定した。カプセル化効率は、非溶解ＬＮＰと溶解ＬＮＰを測定することによって決定した。
ｐＫａ － １０ｍＭ ＨＥＰＥＳ（Ｓｉｇｍａ Ａｌｄｒｉｃｈ）、１０ｍＭ ＭＥＳ（Ｓｉｇｍａ Ａｌｄｒｉｃｈ）、１０ｍＭ酢酸ナトリウム（Ｓｉｇｍａ）、および１４０ｎＭ塩化ナトリウム（Ｓｉｇｍａ Ａｌｄｒｉｃｈ）のストック溶液を調製し、塩化水素および水酸化ナトリウムを使用してｐＨをｐＨ４～１０の範囲に調整した。各ｐＨについて４つの反復試料を使用して、ｐＨ調整緩衝剤１４０μＬを９６ウェルプレートに添加し、これに続いて２－（ｐ－トルイジノ）－６－ナフタレンスルホン酸（６０μｇ／ｍＬ）５μＬを添加した。ＬＮＰ５μＬを各ウェルに添加した。穏やかな振とうの下で５分のインキュベートの後、励起波長３２５ｎｍおよび発光波長４３５ｎｍ（ＢｉｏＴｅｋ Ｓｙｎｅｒｇｙ Ｈ４ Ｈｙｂｒｉｄ）を使用して蛍光を測定した。
ＬＮＰ投与 － すべての研究にあたって、およそ８～１２週齢の雄性および雌性マウスを使用した。各マウスを一時的に拘束し、プールしたＬＮＰを、実験ごとに最大５匹の動物で尾静脈注射を介してＩＶ投与した。同齢マウスを使用して、実験ごとに最大３匹の動物で尾静脈注射を介してビヒクル（１×ＰＢＳ）も投与した。投与７２時間後に、肝臓、脾臓、骨髄および血液を始めとした組織を分析のために採取した。
ＬＮＰ製剤、ならびにＬＮＰ特性評価に関連する情報については、図１に見ることができる。脂質の番号は、実施例の節の番号付けに対応する。
流れ － 肝臓組織を機械的に消化し、次いでプロテイナーゼの混合物を使用して酵素的に消化し、次いで７０μＭフィルターを通過させて単細胞懸濁液を生成した。脾臓組織を機械的に消化して、単細胞懸濁液を生成した。すべての組織をＡＣＫ緩衝剤で処理して赤血球を溶解し、次いで、フローサイトメトリーおよび蛍光活性化セルソーティング（ＦＡＣＳ）用に蛍光標識抗体で染色した。すべての抗体は市販の抗体であった。ＢＤ ＦＡＣＳＭｅｌｏｄｙ（Ｂｅｃｔｏｎ Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ）を使用して、すべての試料をフローサイトメトリーで取得して、ソーティング前にゲートを作製した。全体として、ゲーティング構造を、サイズ→単細胞→生細胞→目的の細胞とした。Ｔ細胞をＣＤ４５＋ＣＤ３＋として定義し、単球をＣＤ４５＋ＣＤ１１ｂ＋として定義し、Ｂ細胞をＣＤ４５＋ＣＤ１９＋として定義した。肝臓では、内皮細胞をＣＤ３１＋と、クッパー細胞をＣＤ４５＋ＣＤ１１ｂ＋と、および肝細胞をＣＤ３１－／ＣＤ４５－と定義した。ｓｉＲＮＡ研究の場合、標的遺伝子のダウンレギュレーションをゲーティングしたが、一方、ｍＲＮＡ研究の場合、標的遺伝子のアップレギュレーションをゲーティングした。ビヒクル投薬マウスからの組織を使用して、ソーティング用のゲートを設定した。正しい表現型を備える各細胞サブセットに関して最大２０，０００個の細胞をソーティングして１×ＰＢＳに加えた。ソーティング後、遠心分離を介して細胞をペレット化し、製造業者のプロトコルに従ってＱｕｉｃｋ Ｅｘｔｒａｃｔ ＤＮＡ Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ Ｓｏｌｕｔｉｏｎ（Ｌｕｃｉｇｅｎ）を使用してＤＮＡを抽出した。ＤＮＡを－２０℃で保存した。
バーコード配列決定 － ＤＮＡ（ゲノムおよびＤＮＡバーコード）を、ＱｕｉｃｋＥｘｔｒａｃｔ（Ｌｕｃｉｇｅｎ）を使用して単離し、以前に記載のようにＩｌｌｕｍｉｎａ ＭｉｎｉＳｅｑを使用して配列決定し（Sago et al. PNAS 2018、Sago et al. JACs 2018、Sago, Lokugamage et al. Nano Letters 2018）、ＦＡＣＳ単離試料中の頻度ＤＮＡバーコードカウントを注射されたインプットの頻度に正規化した。これらのデータは、「インプットに対する正規化倍率（Normalized Fold Above Input）」としてプロットされ、図２～５に見ることができる実験７１、７２、７３、および７４から選択されたｉｎ ｖｉｖｏデータである。
Ｈ．確認
ＬＮＰ製剤
脂質ナノ粒子成分を、指定された脂質成分のモル比で１００％エタノールに溶解した。核酸（ＮＡ）カーゴを１０ｍＭクエン酸塩、１００ｍＭ ＮａＣｌ、ｐＨ４．０に溶解し、その結果、ＮＡカーゴの濃度およそ０．２２ｍｇ／ｍＬがもたらされた。一部の実施形態では、ＮＡカーゴは、１：１０～１０：１の、機能的ＮＡのバーコードに対する質量比で混合された機能的ＮＡ（例えば、ｓｉＲＮＡ、アンチセンス、発現ＤＮＡ、ｍＲＮＡ）と、リポーターＤＮＡバーコード（先に記載のSago, 2018 PNAS）との両方からなる。ＬＮＰを、１１．７の、総脂質のＮＡに対する質量比で製剤化した。ＬＮＰを、製造業者のプロトコルに従って、Ｐｒｅｃｉｓｉｏｎ Ｎａｎｏｓｙｓｔｅｍｓ ＮａｎｏＡｓｓｅｍｂｌｒ ＳｐａｒｋまたはＢｅｎｃｈｔｏｐ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔを使用して、脂質とＮＡ溶液とのマイクロ流体混合によって形成した。差圧流量を使用して混合の間、水性溶媒の有機溶媒に対する３：１の比を維持した。混合の後、ＬＮＰを収集し、ＰＢＳ（およそ１：１ ｖ／ｖ）で希釈し、ＰＢＳで４℃で８～２４時間、２０ｋＤａフィルターに対する透析を使用してさらなる緩衝剤交換を行った。この最初の透析後、個々のＬＮＰ製剤それぞれについて、サイズおよび多分散度を測定するためにＤＬＳを介して特徴づけを行い、ＴＮＳアッセイを介してＬＮＰの亜集団のｐＫａを測定した。透析後、ＬＮＰを、０．２２ミクロン滅菌フィルターを使用してろ過滅菌し、さらなる使用向けに４℃で保存した。
ＬＮＰ特性評価
ＤＬＳ － ＬＮＰ流体力学的径および多分散度パーセント（ＰＤＩ％）を、ハイスループット動的光散乱（ＤＬＳ）（ＤｙｎａＰｒｏプレートリーダーＩＩ、Ｗｙａｔｔ）を使用して測定した。ＬＮＰを１×ＰＢＳで適当な濃度に希釈し、分析した。
濃度およびカプセル化効率 － ＮＡの濃度は、製造業者の取扱説明書のとおり、Ｑｕｂｉｔ ｍｉｃｒｏＲＮＡキット（ｓｉＲＮＡ用）またはＨＳ ＲＮＡキット（ｍＲＮＡ用）によって決定した。カプセル化効率は、非溶解ＬＮＰと溶解ＬＮＰを測定することによって決定した。
ｐＫａ － １０ｍＭ ＨＥＰＥＳ（Ｓｉｇｍａ Ａｌｄｒｉｃｈ）、１０ｍＭ ＭＥＳ（Ｓｉｇｍａ Ａｌｄｒｉｃｈ）、１０ｍＭ酢酸ナトリウム（Ｓｉｇｍａ）、および１４０ｎＭ塩化ナトリウム（Ｓｉｇｍａ Ａｌｄｒｉｃｈ）のストック溶液を調製し、塩化水素および水酸化ナトリウムを使用してｐＨをｐＨ４～１０の範囲に調整した。各ｐＨについて４つの反復試料を使用して、ｐＨ調整緩衝剤１４０μＬを９６ウェルプレートに添加し、これに続いて２－（ｐ－トルイジノ）－６－ナフタレンスルホン酸（６０μｇ／ｍＬ）５μＬを添加した。ＬＮＰ５μＬを各ウェルに添加した。穏やかな振とうの下で５分のインキュベートの後、励起波長３２５ｎｍおよび発光波長４３５ｎｍ（ＢｉｏＴｅｋ Ｓｙｎｅｒｇｙ Ｈ４ Ｈｙｂｒｉｄ）を使用して蛍光を測定した。
ＬＮＰ投与 － すべての研究にあたって、およそ８～１２週齢の雄性および雌性マウスを使用した。各マウスを一時的に拘束し、プールしたＬＮＰを、実験ごとに最大５匹の動物で尾静脈注射を介してＩＶ投与した。同齢マウスを使用して、実験ごとに最大３匹の動物で尾静脈注射を介してビヒクル（１×ＰＢＳ）も投与した。投与７２時間後に、肝臓、脾臓、骨髄および血液を始めとした組織を分析のために採取した。
流れ － 肝臓組織を機械的に消化し、次いでプロテイナーゼの混合物を使用して酵素的に消化し、次いで７０μＭフィルターを通過させて単細胞懸濁液を生成した。脾臓組織を機械的に消化して、単細胞懸濁液を生成した。すべての組織をＡＣＫ緩衝剤で処理して赤血球を溶解し、次いで、フローサイトメトリーおよびＦＡＣＳソーティング用に蛍光標識抗体で染色した。すべての抗体は市販の抗体であった。ＢＤ ＦＡＣＳＭｅｌｏｄｙ（Ｂｅｃｔｏｎ Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ）を使用して、すべての試料をフローサイトメトリーで取得して、ソーティング前にゲートを作製した。全体として、ゲーティング構造を、サイズ→単細胞→生細胞→目的の細胞とした。Ｔ細胞をＣＤ４５＋ＣＤ３＋として定義し、単球をＣＤ４５＋ＣＤ１１ｂ＋として定義し、Ｂ細胞をＣＤ４５＋ＣＤ１９＋として定義した。肝臓では、ＬＳＥＣをＣＤ３１＋と、クッパー細胞をＣＤ４５＋ＣＤ１１ｂ＋と、および肝細胞をＣＤ３１－／ＣＤ４５－と定義した。ｓｉＲＮＡ研究の場合、標的遺伝子のダウンレギュレーションをゲーティングしたが、一方、ｍＲＮＡ研究の場合、標的遺伝子のアップレギュレーションをゲーティングした。ビヒクル投薬マウスからの組織を使用して、ソーティング用のゲートを設定した。データはフローサイトメトリーによってＭＦＩとして記録される。表２に示す製剤に対応する、マウス脾臓から単離されたＣＤ３陽性細胞におけるＣＤ４５タンパク質発現について、選択されたｉｎ ｖｉｖｏデータを図３に示す。脂質の番号は、実施例の節の番号づけに対応する。図６では、群１はＰＢＳ処置動物であり、一方、群２～８はそれぞれＬＮＰ１～７である。ＬＮＰ１～７のそれぞれにおいて、使用されたコレステロールはコレステロールであり、使用されたＰＥＧはＤＭＧ－ＰＥＧ２０００であり、使用されたリン脂質はＤＳＰＣであり、脂質：コレステロール：ＰＥＧ：リン脂質の比は３５：４６．５：３．５：１６である。脂質の核酸に対する比は１１．７対１である。
Figure 2023505316000160
様々な態様および実施形態について本明細書において開示してきたが、その他の態様および実施形態が、当業者であれば明らかであろう。本明細書に開示された様々な態様および実施形態は、例示を目的とするものであり、限定することを意図するものではなく、真の範囲および精神は、以下の特許請求の範囲によって指示されるものである。

Claims (22)

  1. 式（Ｉ）の化合物：
    Figure 2023505316000161
     （式中：
    Ｒ１は、Ｃ９～Ｃ２０アルキルまた１～３単位の不飽和を有するＣ９～Ｃ２０アルケニルであり；
    Ｘ１およびＸ２は、それぞれ独立して不在であるか、または－Ｏ－、ＮＲ２、および
    Figure 2023505316000162
     から選択され、ここで、Ｒ２はＣ１～Ｃ６アルキルであり、かつＸ１およびＸ２は両方ともに－Ｏ－またはＮＲ２であることはなく；
    ａは１～６の間の整数であり；
    Ｘ３およびＸ４はそれぞれ独立して不在であるか、または、１もしくは２個のＣ１～Ｃ６アルキル基で必要に応じて置換された４～７員のヘテロシクリル、１もしくは２個のＣ１～Ｃ６アルキル基で必要に応じて置換された５～６員のヘテロアリール、および－ＮＲ３－からなる群から選択され、ここで、各Ｒ３は水素原子またはＣ１～Ｃ６アルキルであり；
    Ｘ５は－（ＣＨ２）ｂ－であり、ここで、ｂは０～６の間の整数であり；
    Ｘ６は、水素、Ｃ１～Ｃ６アルキル、１もしくは２個のＣ１～Ｃ６アルキル基で必要に応じて置換された５～６員のヘテロアリール、または－ＮＲ４Ｒ５であり、ここで、Ｒ４およびＲ５はそれぞれ独立して水素またはＣ１～Ｃ６アルキルであり；あるいは代替的に、Ｒ４およびＲ５は、これらが結合している窒素と一緒になって、１または２個のＣ１～Ｃ６アルキル基で必要に応じて置換された４～７員のヘテロシクリルを形成し、ここで、前記ヘテロシクリルは酸素、硫黄および窒素から選択されるさらなるヘテロ原子を必要に応じて含み；
    Ｘ７は、水素または－ＮＲ６Ｒ７であり、ここで、Ｒ６およびＲ７はそれぞれ独立して水素またはＣ１～Ｃ６アルキルであり；あるいは代替的に、Ｒ６およびＲ７は、これらが結合している窒素と一緒になって、１または２個のＣ１～Ｃ６アルキル基で必要に応じて置換された４～７員のヘテロシクリルを形成し、ここで、前記ヘテロシクリルは酸素、硫黄および窒素から選択されるさらなるヘテロ原子を必要に応じて含み；
    Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘ４、およびＸ５のうちの少なくとも１つは存在している；ただし、
    Ｘ１またはＸ２のいずれかが－Ｏ－である場合は、Ｘ３もＸ４もどちらも
    Figure 2023505316000163
     であることはなく、かつＸ１またはＸ２のいずれかが－Ｏ－である場合は、Ｒ４およびＲ５は両方ともにエチルであることはないことを条件とする）。
  2. Figure 2023505316000164
     は、
    Figure 2023505316000165
     からなる群から選択されないことを条件とする、請求項１に記載の化合物。
  3. Ｒ１は、
    Figure 2023505316000166
     である、請求項１に記載の化合物。
  4. 前記化合物は：
    Figure 2023505316000167
    Figure 2023505316000168
    Figure 2023505316000169
    Figure 2023505316000170
    Figure 2023505316000171
    Figure 2023505316000172
    Figure 2023505316000173
    Figure 2023505316000174
    Figure 2023505316000175
     からなる群から選択される、請求項１に記載の化合物。
  5. 式（ＩＩ）の化合物：
    Figure 2023505316000176
     （式中：
    Ｒ８は水素またはＣ１～Ｃ６アルキルであり；
    Ｒ９は、１～４個のＣ３～Ｃ６シクロアルキル基と必要に応じて縮合しているＣ９～Ｃ２０アルキル、１～３単位の不飽和を有するＣ９～Ｃ２０アルケニル、または－（ＣＨ２）ｇ－Ｘ１７であり、ここで、Ｘ１７は、必要に応じて置換されたＣ４～Ｃ１２シクロアルキルであり；
    Ｘ８およびＸ９は、それぞれ独立して不在であるか、または－Ｏ－、ＮＲ１０、および
    Figure 2023505316000177
     から選択され、ここで、Ｒ１０はＣ１～Ｃ６アルキルであり、
    かつＸ８およびＸ９は両方ともに－Ｏ－またはＮＲ１０であることはなく；
    Ｘ１０およびＸ１１は、それぞれ独立して不在であるか、または、１もしくは２個のＣ１～Ｃ６アルキル基で必要に応じて置換された４～７員のヘテロシクリル、１もしくは２個のＣ１～Ｃ６アルキル基で必要に応じて置換された５～６員のヘテロアリール、および－ＮＲ１１－からなる群から選択され、ここで、Ｒ１１は水素原子またはＣ１～Ｃ６アルキルであり；
    Ｘ１２は－（ＣＨ２）ｉ－であり；
    Ｘ１３は、水素、Ｃ１～Ｃ６アルキル、１もしくは２個のＣ１～Ｃ６アルキル基で必要に応じて置換された５～６員のヘテロアリール、または－ＮＲ１２Ｒ１３であり、ここで、Ｒ１２およびＲ１３はそれぞれ独立して水素またはＣ１～Ｃ６アルキルであり；あるいは代替的に、Ｒ１２およびＲ１３は、これらが結合している窒素と一緒になって、１または２個のＣ１～Ｃ６アルキル基で必要に応じて置換された４～７員のヘテロシクリルを形成し、ここで、前記ヘテロシクリルは酸素、硫黄および窒素から選択されるさらなるヘテロ原子を必要に応じて含み；
    Ｘ１４は、水素または－ＮＲ１４Ｒ１５であり、ここで、Ｒ１４およびＲ１５はそれぞれ独立して水素またはＣ１～Ｃ６アルキルであり；あるいは代替的に、Ｒ１４およびＲ１５は、これらが結合している窒素と一緒になって、１または２個のＣ１～Ｃ６アルキル基で必要に応じて置換された４～７員のヘテロシクリルを形成し、ここで、前記ヘテロシクリルは酸素、硫黄および窒素から選択されるさらなるヘテロ原子を必要に応じて含み；
    ｃ、ｄ、ｅ、ｆ、ｇ、ｈ、およびｉのそれぞれは独立して０～６からの整数であり；
    Ｘ８、Ｘ９、Ｘ１０、Ｘ１１、およびＸ１２のうちの少なくとも１つは存在しており；
    Ｒ１６は水素または必要に応じて置換されたＣ５～Ｃ６アリールであり；
    Ｘ１５は、必要に応じて置換されたＣ４～Ｃ１２シクロアルキルまたは必要に応じて置換されたＣ５～Ｃ１０アリールであり；
    Ｘ１６は水素または必要に応じて置換されたＣ４～Ｃ１２シクロアルキルである；ただし、
    ｆが１でありかつＲ９が
    Figure 2023505316000178
     である場合、Ｘ１５は
    Figure 2023505316000179
     ではない）。
  6. Ｒ９が
    Figure 2023505316000180
     である、請求項５に記載の化合物。
  7. Ｒ９が
    Figure 2023505316000181
     である、請求項５に記載の化合物。
  8. ｉは３であり、Ｘ８、Ｘ９、Ｘ１０、およびＸ１１は不在であり、Ｘ１３は－ＮＲ１２Ｒ１３であり、かつＲ１２およびＲ１３それぞれメチルである、請求項５に記載の化合物。
  9. Ｘ８、Ｘ９およびＸ１１は不在であり、ｉは０であり、Ｘ１０は
    Figure 2023505316000182
     であり、かつＸ１３は
    Figure 2023505316000183
     である、請求項５に記載の化合物。
  10. ｃ、ｄ、およびｅがそれぞれ１である、請求項５に記載の化合物。
  11. Ｒ９が
    Figure 2023505316000184
     である、請求項１０に記載の化合物。
  12. Ｒ８が水素である、請求項１１に記載の化合物。
  13. Ｒ９および
    Figure 2023505316000185
     がそれぞれ
    Figure 2023505316000186
     である、請求項５に記載の化合物。
  14. 前記化合物は：
    Figure 2023505316000187
    Figure 2023505316000188
    Figure 2023505316000189
    Figure 2023505316000190
    Figure 2023505316000191
    Figure 2023505316000192
    Figure 2023505316000193
    Figure 2023505316000194
     からなる群から選択される、請求項５に記載の化合物。
  15. コンホメーションが制約されたイオン化可能な脂質：
    リン脂質；
    ポリエチレングリコール－脂質；
    コレステロール；および必要に応じて
    核酸
    を含む脂質ナノ粒子組成物。
  16. 前記イオン化可能な脂質は、請求項１～１４のいずれか一項に記載の構造を含む、請求項１５に記載の脂質ナノ粒子組成物。
  17. イオン化可能な脂質の量が、総モルに対して約３５～６５モルパーセントの範囲で存在する、請求項１５または１６に記載の脂質ナノ粒子組成物。
  18. 前記リン脂質はＤＳＰＣである、請求項１５～１７のいずれか一項に記載の脂質ナノ粒子組成物。
  19. 前記リン脂質はＤＭＰＣである、請求項１５～１７のいずれか一項に記載の脂質ナノ粒子組成物。
  20. それを必要とする対象に核酸を送達する方法であって、請求項１５～１９のいずれか一項に記載の前記脂質ナノ粒子組成物を前記対象に投与するステップを含む方法。
  21. 前記核酸は、ｓｉＲＮＡ、ｍｉＲＮＡ、アンチセンスオリゴヌクレオチド、または免疫刺激性オリゴヌクレオチドである、請求項１５～１７のいずれか一項に記載の脂質ナノ粒子組成物。
  22. 前記化合物は：
    Figure 2023505316000195
    Figure 2023505316000196
    Figure 2023505316000197
    Figure 2023505316000198
     からなる群から選択される、請求項５に記載の化合物。
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Families Citing this family (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2023112939A1 (ja) * 2021-12-16 2023-06-22 Jsr株式会社 組成物の純化方法
CN114436994B (zh) * 2022-01-26 2024-02-27 中国药科大学 金刚烷尾链脂质及其在细胞转染中的应用
WO2023230601A1 (en) 2022-05-27 2023-11-30 Beam Therapeutics Inc. Identification of nanoparticles for preferential tissue or cell targeting
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Family Cites Families (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
NL257307A (ja) * 1959-10-28
US3686238A (en) * 1970-01-19 1972-08-22 Syntex Corp Glycerol esterified with 2-naphthyl-acetic acids and fatty acids
DE102007029471A1 (de) * 2007-06-20 2008-12-24 Novosom Ag Neue fakultativ kationische Sterole
ES2895651T3 (es) * 2013-12-19 2022-02-22 Novartis Ag Lípidos y composiciones lipídicas para la administración de agentes activos
EP3727362A4 (en) * 2017-12-19 2021-10-06 PureTech LYT, Inc. MYCOPHENOLIC ACID LIPID MEDICINAL PRODUCTS AND THEIR USES
US20210300962A1 (en) * 2018-08-02 2021-09-30 Puretech Lyt, Inc. Lipid prodrugs of pregnane neurosteroids and uses thereof
WO2020176868A1 (en) * 2019-02-28 2020-09-03 Puretech Lyt, Inc. Lipid prodrugs of btk inhibitors and uses thereof
WO2020176856A1 (en) * 2019-02-28 2020-09-03 Puretech Lyt, Inc. Lipid prodrugs of glucocorticoids and uses thereof
EP3930709A4 (en) * 2019-02-28 2022-11-09 PureTech LYT, Inc. LIPID PRODRUGS OF JAK INHIBITORS AND THEIR USES
CA3145913A1 (en) * 2019-07-29 2021-02-04 James Everett Dahlman Nanomaterials containing constrained lipids and uses thereof

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